NORMA TÉCNICA NTC

COLOMBIANA 1076

1976-02-04

GLUCOSA. MÉTODOS DE ENSAYO

E: GLUCOSE. TEST METHOD.

CORRESPONDENCIA:

DESCRIPTORES: glucosa; glúcido; monosacárido;

contenido de hierro; identificación de
almidón; identificación de turbiedad;
ensayo.

I.C.S.: 67.180.20

Editada por el Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación (ICONTEC)

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Esta Norma está sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en
todo momento a las necesidades y exigencias actuales.

A continuación las empresas que colaboraron en el estudio de esta Norma a través de su

participación en el Comité Técnico.

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DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN
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GLUCOSA. MÉTODOS DE ENSAYO

1. OBJETO

Esta norma establece el método cuantitativo para determinar el contenido de hierro y los
métodos cualitativos para determinar la presencia de almidón y turbiedad, en la glucosa.

2. ENSAYOS

2.1 DETERMINACIÓN DE HIERRO

2.1.1 Principio del método

Consiste en llevar a solución el hierro presente en la muestra y luego reducirlo a ión ferroso
para formar posteriormente un complejo de color estable por reacción con acetato de sodio y o-
fenantrolina. La concentración del complejo se determina a 508 nm en un espectrofotómetro.

2.1.2 Aparatos

- Espectrofotómetro

- Mufla eléctrica con control de temperatura

- Cápsula

- Material usual de laboratorio.

2.1.3 Reactivos

- Solución patrón de hierro (1 cm3 = 0,1 mg Fe)

- Solución al 7,4 % de ácido clorhídrico

- Solución al 10 % de clorhidrato de hidroxilamina

- Solución al 10 % de acetato de sodio.

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- Solución al 0,1 % de o-fenantrolina.

2.1.4 Elaboración de la curva patrón

2.1.4.1 Se colocan 0,5 cm3; 1,0 cm3; 2,0 cm3; 3,0 cm3 y 4,0 cm3 de la solución patrón de hierro en
sendos matraces aforados de 100 cm3 y se adicionan a cada uno 5 cm3 del ácido clorhídrico, 2 cm3
del clorhidrato de hidroxilamina, 10 cm3 de solución de acetato de sodio y 10 cm3 de la o-fenantrolina.
Se llevan a volumen con agua, se mezclan, se calientan al baño de María durante 5 min y se enfrían
a temperatura ambiente. Se prepara un blanco en la misma forma, omitiendo la solución patrón
de hierro.

2.1.4.2 Se determina la absorbancia de las soluciones anteriores en el espectrofotómetro,

usando cubetas de 4 cm, a una longitud de onda de 508 nm. El blanco se toma como un valor
de transmitancia del 100 %. Se traza la curva patrón dibujando absorbancia de cada solución
contra contenido de hierro en miligramos.

2.1.5 Procedimiento

2.1.5.1 En una cápsula previamente lavada se pesan 10 g de la muestra o una cantidad tal
que no contenga más de 0,2 mg de hierro, se coloca en la mufla y se deja el tiempo suficiente
hasta obtener completa calcinación.

2.1.5.2 Se retira la cápsula de la mufla y se deja enfriar. El residuo seco se diluye con 5 cm3
del ácido clorhídrico, teniendo cuidado de verterlo por las paredes de la cápsula y se evapora a
sequedad en un baño de María. Se agregan 5 cm3 del ácido clorhídrico, se calienta
suavemente y se filtra a través de un filtro de papel cualitativo, recibiendo el filtrado en un
matraz aforado de 100 cm3. Se enjuaga la cápsula con agua y se vierte sobre el filtro.

2.1.5.3 Se prepara un blanco filtrando 5 cm3 de ácido clorhídrico, omitiendo la muestra.

2.1.5.4 A los filtrados (véase numeral 2.1.5.2 y 2.1.5.3) se adicionan 2 cm3 del clorhidrato de
hidroxilamina, 10 cm3 del acetato de sodio y 10 cm3 de la o-fenantrolina. Se lleva a volumen
con agua y se mezcla. Se calienta al baño María durante 5 min y se enfría a temperatura
ambiente.

2.1.5.5 Se determina la absorbancia de la solución que contiene la muestra, empleando el

blanco para fijar el 100 % de transmitancia en el espectrofotómetro, con la celda de 4 cm y a
una longitud de onda de 508 nm.

2.1.5.6 Se compara el valor leído con la gráfica obtenida para las soluciones patrón y se
calcula el equivalente en miligramos de Fe, para la solución que contiene la muestra.

2.1.6 Cálculos

El contenido de hierro en la muestra se calcula mediante la siguiente ecuación:

Fe (ppm) =
Fe (mg en la gráfica ) x 1 000
m

Donde:

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Fe (ppm) = contenido de hierro en la muestra, en partes por millón.

Fe (mg en la gráfica) = concentración de hierro leída de la gráfica, en miligramos.

m = masa de la muestra, en gramos.

2.2 IDENTIFICACIÓN DE ALMIDÓN

2.2.1 Principio del método

Consista en titular la muestra con solución 0,02 N de yodo, el cual, en presencia de almidón,
produce una coloración azul.

2.2.2 Aparatos

- Vaso de precipitados

- Bureta graduada

- Lámpara de tipo luz de día o fluorescente.

2.2.3 Reactivos

- Solución 0,02 N de yodo.

2.2.4 Procedimiento

Se mezclan 25 g de la muestra y 25 cm3 de agua en un vaso de precipitados, se calienta hasta

ebullición y luego se enfría entre 5 °C y 10 °C.

2.2.4.1 Con agitación constante se agrega solución de yodo, en incrementos de 0,25 cm3 y se
observa cualquier cambio de color, iluminando la muestra con una lámpara tipo luz de día o
fluorescente durante la edición de la solución. Se anota el volumen de yodo, en centímetros
cúbicos, gastado en el primer cambio permanente de color de la muestra.

2.2.4.2 Se adiciona 1 cm3 más de solución de yodo, en incremento de 0,25 cm3 y se observa el
desarrollo de color después de cada adición.

2.2.5 Interpretación de resultados

2.2.5.1 Si la muestra toma un color azul se comprueba la presencia de almidón en la solución

y el ensayo se toma como “positivo”.

2.2.5.2 Cuando la muestra no está presente el almidón, ésta puede cambiar a cualquier otro
color, como amarillo, verde, rojo, etc., y el ensayo será “negativo”.

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2.2.6 Observaciones

2.2.6.1 Una determinación positiva, hallada por el método descrito indica la presencia de
50 ppm, como mínimo, de almidón en la muestra.

2.2.6.2 La aparición de otra coloración en la muestra puede deberse a un exceso de solución

de yodo, a trazas de almidón o polímeros de dextrosa cuando estos están presentes en
cantidades normalmente consideradas no objetables.

2.2.6.3 La cantidad de solución de yodo adicionada para desarrollar el primer color

permanente en la muestra depende, primordialmente, del SO2 contenido en la muestra.

2.3 IDENTIFICACIÓN DE TURBIEDAD

2.3.1 Procedimiento

Se coloca cuidadosamente la muestra en un vaso de precipitados de 500 cm3 perfectamente

limpio y seco. Se coloca el vaso con la muestra, debajo de una lámpara, de tal modo que los
rayos luminosos incidan normalmente sobre la muestra. Observando la muestra de frente, se
coloca la mano o cualquier superficie no transparente por detrás del vaso y se observa si el
líquido presenta opacidad o una nube blancuzca.

2.3.2 Interpretación de resultados

2.3.2.1 En caso positivo se reporta la glucosa como turbia; si la muestra es transparente o

cristalina, la glucosa no presenta turbiedad.

2.3.2.2 Una coloración alta y presencia de almidón son causa de turbiedad en la glucosa.