UNIVERSIDAD CONTINENTAL

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL DE TECNOLOGÍA MÉDICA

LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA

SEMESTRE: III

INFORME: PROTEÍNA

CURSO: BIOLOGÍA MOLECULAR

DOCENTE: JESSIE OMARA DE LA CRUZ LAZO DE MARIN

ESTUDIANTES:
● ROBERT NELSON VILCATOMA GIRÓN
● NAYELI SARITA ALVARADO HUAMAN
● Kendzia Alexandra Valencia Rojas
● isleiden garcia garcia
Fecha de entrega: 26/05/ 2020
1. OBJETIVO
- Identificar y reconocer proteínas a través de la prueba de Biuret y desnaturalización.

2. FUNDAMENTO TEÓRICO DE LAS PROTEÍNAS

Las proteínas son componentes orgánicos, básicamente cuaternarios: C, H, O y N,

aunque a veces contienen átomos de P, S, Fe y Ca. Estos principios inmediatos
orgánicos son el producto de la organización de varias estructuras básicas,
denominadas aminoácidos, las cuáles se unen a través de enlaces peptídicos.
Todo aminoácidos químicamente es un amino carboxilo.
Las proteínas adoptan diferentes grados de configuración, es decir de estructura,
puede ser: primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria. Todas estas son solubles
en agua, a excepción de la primaria. Asimismo, cuando estas interaccionan con el
calor o algún agente orgánico pierden su configuración inicial y en consecuencia
sus propiedades inherentes.

Químicamente son polímeros de aminoácidos, unidos por enlaces covalentes

(enlaces peptídicos) y dispuestos de forma lineal. Las células producen proteínas
con propiedades muy diferentes a partir de 20 aminoácidos.

Las proteínas se pueden clasificar según su función estructural y por su origen:

- Según su origen se clasifica en dos grupos : Las proteínas globulares que son
solubles en el agua m soluciones ácidas y básicas o salinas . estos tipos de
proteínas son reguladores de metabólicos vitales. y son la insulina, hemoglobina,
albúmina y caseína, por lo tanto en el grupos están las proteínas fibrosas
insolubles al agua, forman estructuras de tejidos humanos y animal y estos son
la queratina, colágeno, miosina , fibrina y fibrina. Y por su origen tenemos las
proteínas simples y conjugadas
Las funciones que desempeñan las proteínas en un organismo son variadas,
entre ellos tenemos: estructural (queratina), de transporte (hemoglobina), de
contracción (actina y miosina), de protección (interferón), hormonal (insulina),
entre otros.
Conocer la secuencia de los aminoácidos es importante porque a partir de estas
y teniendo en cuenta el código genético, se puede conocer la secuencia de
nucleótidos que la genera, lo que generalmente corresponde a un gen.

Agentes desnaturalizantes:

2
 Al desnaturalizar se eliminan ciertos nucleótidos que ocasionan un daño en la
molécula del ADN .Los agentes desnaturalizantes son aquellos factores químicos
o físicos que producen la desnaturalización de las proteínas. Entre los más
comunes podemos citar:

- Temperatura - PH

- Polaridad del disolvente - Fuerza iónica

El ejemplo más famoso para ilustrar la desnaturalización de proteínas es la

cocción del huevo. La clara del huevo está compuesta en gran parte por agua y
albúminas, un tipo de proteínas. Al aumentar la temperatura las proteínas de la
clara del huevo se desnaturalizan, pierden su solubilidad y la clara del huevo deja
ser líquida y transparente y pasa a ser opaca de color blanco y sólida.

3. Equipos, Materiales y reactivos

A. Materiales:

Item Material Característica Cantidad

1 Tubos de ensayo 6 x 100 mL 1

2 Gradilla Metálico/Para 24 tubos 1

3 Pinza para tubos de madera o metal 1

4 Mechero de ron 1

5 Pipeta 5 mL 1

B. Reactivos

Item Reactivos Características Cantidad

1 Alcohol etílico 96° 1 mL

2 NaOH 10% 1 mL

3 CuSO4 5% 4 mL

4 Agua destilada 2 mL

5 Suero sanguíneo extraído de una persona 1 mL

3
 6 Huevo gallina/clara 7 mL

7 Leche evaporada 1 mL

8 Soya disuelto en agua 1 mL

5. Procedimientos
5.1. Prueba de Biuret

Es consecuencia de una reacción típica de enlaces peptídicos. Las proteínas

estando en un medio fuertemente alcalino (NaOH) y en presencia de sulfato
cúprico, reaccionan con el hidróxido cúprico, formado por el NaOH y el CuSO4,
para formar a su vez el complejo Biuret – cupro – sódico que se manifiesta con
una coloración rosa – violácea.

La prueba de Biuret se fundamenta en detectar los enlaces peptídicos. La

prueba se da en medio alcalino. La muestra debe contener al menos dos
enlaces peptídicos para que se pueda formar un complejo de color violeta-
púrpura. El complejo se forma por la unión de los enlaces y el ión de cobre.

Lo que
se
Tubo Nº Muestra Añadir Agregar indica Resultados
Albúmina de La clara de huevo se torna color
azul-celeste
huevo 1 mL
La albúmina se desnaturaliza(se
1 rompen los enlaces pH).

Albúmina de Cambios en las propiedades de

la proteína : aumenta la
soya 1 mL
viscosidad y los residuos
hidrofóbicos aparecen en la
superficies por lo tanto, perdida
2 en sus propiedades biológicas.

Suero La coloración del suero

sanguíneo presenta el color
sanguíneo 1
NaOH violeta lo que quiere decir que el
3 mL experimento fue correcto.
10% CuSO4
(0,5 1% Se tornan de color violeta lo que
4 Leche 1 mL nos indica que la reacción fue
mL) (1 mL) Agitar

4
 positiva.

5.2. Desnaturalización

La desnaturalización de las proteínas es la pérdida de las estructuras de orden

superior (secundaria, terciaria y cuaternaria), dando como resultado a una

cadena polipeptídica reducida a un polímero estadístico sin ninguna estructura

tridimensional fija y la pérdida de esta conformación espacial hace que la proteína

no pueda cumplir con su función biológica en el organismo Las proteínas son

filamentos largos de aminoácidos unidos en una secuencia específica. Son

creadas por los ribosomas que "leen" codones de los genes y ensamblan la

combinación requerida de aminoácidos por la instrucción genética. Las

proteínas se caracterizan por ser básicamente hidrofílicas (solubles en agua),

esto es notable en las estructuras secundaria y terciaria que poseen. Sin

embargo, cuando son sometidas a la acción del calor o cambios de pH, estas

proteínas pierden sus respectivas estructuras, pasando a adquirir una

naturaleza filamentosa, hidrofóbica (insoluble en agua), primaria.

Tubo Nº Lo que se
Muestra Agregar indica Resultados
Albúmina de huevo Agua destilada Es incoloro y soluble al agua en
1 1 mL 1 mL Agitar su estado natural
Albúmina de huevo las moléculas proteicas se
1 mL Calentar juntan, dando lugar a su forma
2 -- suavemente precipitada, o desnaturalizada
Albúmina de huevo NaOH Se observa la presencia de la
1 mL Concentrado proteína en un medio alcalino
(gotas) produciendo sales complejas de
3 -- color violeta
Albúmina de huevo Se ve cómo el huevo empieza a
1 mL tomar el aspecto de un huevo
frito: la clara empieza a tomar una
Alcohol etílico textura sólida de color blanco y la
4 (0,5 mL) Agitar yema permanece líquida

5
 Albúmina El agua traspasa de una solución
desnaturalizada hipotónica a otra hipertónica
conociendo este proceso como la
ósmosis para igualar la
concentraciones a través de un
Agua destilada tabique o membrana
5 (1 mL) Agitar semipermeable.

6. Resultados
Resultados de la tabla n° 1

Las cadenas de proteínas que hay en la clara de huevo se encuentran enrolladas

adoptando una forma esférica. Se denominan proteínas globulares. Al someterla a

NaOH al 10% y una solución de CuSO4. En este caso utilizamos Hidróxido de sodio,

este no participa en la reacción, pero proporciona el medio alcalino necesario para

que tenga lugar la reacción de biuret. El sulfato cúprico reacciona con la proteína

presente en la en la solución de albúmina de huevo, y esta se torna de color violeta.

Resultado de la tabla N° 2

Las cadenas de proteína se desenrollan y se formen enlaces que unen unas cadenas

con otras Este cambio de estructura da a la clara de huevo la consistencia y color

que se observa en las 3 muestras de las soluciones de la albúmina de huevo como

freir o batir claras de huevo y cocinando. La albúmina presente en la clara de huevo

6
es una proteína con diverso contenido de aminoácidos, por lo tanto, en todas las

reacciones de reconocimiento realizadas los resultados fueron positivos.

Resultado 2 de la tabla n2

La desnaturalización de las proteínas es la consecuencia de un cambio a

nivel molecular, es decir es un cambio en la forma como están dispuestas o

interconectadas la moléculas de estas sustancias.El alcohol lo va a

desnaturalizar a las proteínas de la clara y es así como llegamos a obtener,el

resultado de huevo parece frito.

+ =

7
7. Conclusiones

- La mayoría de las proteínas pierden su función biológica cuando están

desnaturalizadas, por ejemplo, las enzimas pierden su actividad catalítica,
porque los sustratos no pueden unirse más al centro activo, y porque los
residuos del aminoácido implicados en la estabilización de los sustratos no
están posicionados para hacerlo. Es decir la desnaturalización es irreversible.
- La desnaturalización de proteínas seda por cambios bruscos del medio
donde esta se encuentra. Los factores tales como temperatura, pH, sales,
ácidos minerales fuertes y metales pesados afectan las interacciones de la
estructura terciaria de la proteína de manera reversible o irreversible
disminuyendo así la solubilidad de la misma.
- De estos experimentos podemos concluir que las proteínas son precipitadas
al ser calentadas a altas temperaturas o al ser tratadas con soluciones
salinas, ácidos, alcohol, etc. Las proteínas al desnaturalizarse forman
coágulos, esto es un proceso irreversible el cual destruye y desordena sus
estructuras terciaria y secundaria. Como también concluimos que el reactivo
de Biuret sirve para identificar la presencia de proteínas el cual contiene
sulfato de cobre e hidróxido de sodio.

8. Cuestionario - Justifique sus respuestas.

1. ¿Cuál es el mecanismo de reacción química de la prueba de Biuret?

Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los

aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que
se destruye al liberarse los aminoácidos. El reactivo del Biuret lleva sulfato
de Cobre(II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina
con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret)
cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas.

2. ¿Por qué se dice que algunos aminoácidos son levógiros y otros dextrógiros?

Según la asimetría molecular de la vida los aminoácido tiene dos formas:

dextrógiros (D,diestros) y levógiros (L,siniestro). Y siendo ambas moléculas

son casi idénticas, ya que realmente son estereoisómeros posee la misma

fórmula empírica, pero difieren en su estructura espacial.

8
 LEVÓGIROS DEXTRÓGIROS

Los aminoácidos levógiros son los Los aminoácidos dextrógiros

que desvían la luz polimerasa hacia desvían la luz polarizada hacia la
la izquierda.Todos los 20 derecha ; ejemplo de estos son las
aminoácidos componentes de las azucar.Asimismo estos aminoácidos
proteínas son L-alfa-aminoácido. no puede engancharse en la cadena
Por lo tanto lo habitual es solo peptídica haciendo que el síntesis
encontrar en la naturaleza los de de la proteína se detiene.
aminoácidos levógiros.

3. Cierta proteína X, está formada por 600 aminoácidos ¿Qué pasará con esta

proteína al reaccionar con agua, sabiendo que su estructura es terciaria y

que pasaría con ella si fuera sometida a un campo magnético?

Existe una estabilidad de su estructura por presentar el agua puente de

hidrógeno con enlaces covalentes apolares pero no todas estas interacciones

contribuyen por igual al mantenimiento de la estructura terciaria.

Obviamente, el enlace que aporta más estabilidad es el de tipo covalente, y

entre los no covalentes, las interacciones más importantes son las de tipo

hidrofóbico, ya que exigen una gran proximidad entre los grupo apolares.

Las cadenas laterales con carácter apolar se orientan hacia el interior de la

molécula evitando las interacciones con el disolvente, y forman un núcleo

compacto con carácter hidrofóbico.

Al ser sometido a un campo magnético como la mayoría de los núcleos

atómicos poseen espín y al momento de introducir átomos con espín nuclear

9
 a un campo magnético externo, el núcleo se comporta como un pequeño

imán y tiende a orientarse, preferentemente, a favor del campo magnético. A

mayor frecuencia de observación, mayor será la separación de los niveles de

energía, en consecuencia la sensibilidad del núcleo observado también se

incrementa

Referencias bibliográficas consultadas y/o enlaces recomendados

● COX, M. M.; LEHNINGER, A. L.; NELSON, D. L. Princípios de bioquímica. São

Paulo, 2006.
● SEGUÍ, M. Estructura y propiedades de las proteínas. 2011.

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