UNIDAD DE CIENCIAS BÁSICAS

ASIGNATURA DE BIOQUÍMICA

GUÍA DE PRÁCTICAS

SEGUNDO AÑO

PRACTICA 11. DETERMINACION DE LA

DEPURACION DE CREATININA
 DETERMINACION DE LA DEPURACION DE CREATININA

1. INTRODUCCION.

La creatinina es una molécula de desecho que se genera a partir del metabolismo

muscular. Proviene de la creatina, es muy importante para la producción de energía
muscular. Aproximadamente el 2% de la creatina del cuerpo se convierte en
creatinina cada día. La creatinina se transporta desde los músculos por medio de la
sangre hacia el riñón. Los riñones filtran la mayoría de la creatinina y la eliminan en
la orina.

Aunque es una sustancia de desecho, la creatinina es una prueba diagnóstica

esencial, ya que se ha observado que su concentración en sangre indica con
bastante fiabilidad el estado de la función renal. Si los riñones no funcionan bien, no
eliminan bien la creatinina y por lo tanto ésta se acumula en la sangre. Por esto la
creatinina puede avisar de una posible disfunción o insuficiencia renal, incluso antes
de que se presenten síntomas. Por eso la creatinina suele figurar en los análisis de
sangre que se realizan comúnmente.

La determinación de creatinina es un indicador útil para evaluar la función

glomerular renal, teniendo en cuenta el prerrequisito que la producción de creatinina
y su excreción sean iguales. Esto se cumple en individuos sanos con dieta normal.

En resumen, podemos decir que la eliminación de creatinina en un intervalo de 24

horas es un valor constante, dependiente principalmente de la masa muscular del
individuo, y que por otro lado el cálculo del aclaramiento de la creatinina será un
parámetro directo del funcionalismo renal.

La depuración o aclaramiento de la creatinina se define como la cantidad en plasma

que queda libre de creatinina filtrada por el riñón en un minuto.
2. OBJETIVO.

Determinar la concentración de creatinina en plasma y orina mediante un método

espectrofotométrico.

Determinar la depuración de creatinina con los valores en plasma y orina.

Comparar el valor obtenido de depuración de creatinina con los rangos de

referencia.

3. FUNDAMENTO DEL MÉTODO.

La depuración de creatinina se realiza midiendo sus concentraciones en orina o

plasma para determinar la velocidad con la que se eliminan.

La creatinina se determina reaccionando la muestra con el picrato en medio alcalino

originando un complejo coloreado (método de Jaffé). Se mide la velocidad de
formación de dicho complejo en periodos iniciales cortos, para reducir la
interferencia de otros compuestos.

4. EQUIPOS, MATERIALES, REACTIVOS Y MUESTRA.

4.1. EQUIPOS.

Espectrofotómetro Cronometro

4.2. MATERIALES.

Micropipetas Tips de micropipetas

Recipiente de bioseguridad Cubetas del espectrofotómetro

4.3. REACTIVOS.

Reactivo A: Hidróxido sódico.

Reactivo B: Acido pícrico.

Estándar: solución de creatinina 2.0 mg/dL.

4.4. MUESTRA.

Se debe obtener suero o plasma de la manera usual. Si se emplea plasma, se

recomienda como anticoagulantes heparina o EDTA.

La muestra de orina se recolecta de 24 horas en un recipiente limpio que se

mantendrá en el refrigerador durante el tiempo de la recolección. Medir el volumen
de orina total, tomar una alícuota y efectuar una dilución 1:50 con agua destilada.

5. PROCEDIMIENTOS.

5.1. Preparar el reactivo de trabajo mezclando volúmenes iguales de Reactivo A y

de Reactivo B.

5.2. En una cubeta colocar 1 ml del reactivo de trabajo y 20 ul del estándar.

5.3. Mezclar e insertar la cubeta en el espectrofotómetro. Poner el cronómetro en

marcha.

5.4. Leer la densidad óptica (DO) a 500 nm después de 30 segundos (DO1) y de 90

segundos (DO2). Anotar los resultados.

5.5. De igual manera se realizará el mismo procedimiento para las muestras de

suero y orina.
6. CÁLCULO DE LOS RESULTADOS.

Calcule la depuración de creatinina utilizando la siguiente formula:

Depuración de creatinina (ml/min) = Creatinina en orina x volumen orina (ml)

Creatinina en suero x 1440

Donde:

Creatinina en orina (mg/dL) = (DO2 orina – DO1 orina) x Factor x 50 (dilución)

Creatinina en suero (mg/dL) = (DO2 suero – DO1 suero) x Factor

Factor = Concentración estándar

DO2 estándar – DO1 estándar

Ejemplo:

Factor = 2.0 mg/dL = 5.0 mg/dL

0.5 – 0.1

Creatinina en orina (mg/dL) = (0.8 – 0.2) x 5 x 50 = 30.0

Creatinina en suero (mg/dL) = (0.6 – 0.4) x 5 = 1.0

Reemplazando:

Depuración de creatinina (ml/min) = 30.0 x 2500 = 50.6

1.0 x 1440
7. VALORES DE REFERENCIA.

Varones Mujeres
Creatinina en 0.7 – 1.3 0.6 – 1.1
suero (mg/dL)
Depuración de 94 - 140 72 - 110
creatinina
(ml/min)

8. BIBLIOGRAFIA.

Gonzales HA. Principios de bioquímica clínica y patología molecular. 3ª ed. Elsevier

España. 2019. Pág. 93-104. En:

https://www.clinicalkey.com/student/content/book/3-s2.0-B9788491133896000090

Baynes J. Bioquímica médica. 5ª ed. Elsevier España. 2019. Pág. 523-537. En:

https://www.clinicalkey.com/student/content/book/3-s2.0-
B9788491134060000356#hl0000640