Polarimetría

Universidad Santiago de Cali

Práctica 5

Laboratorio instrumental I.

14/10/19

Tabla 1. Línea de calibración estándar externo

Solución de glucosa %p/v Ángulo de rotación

0 0,85
5 3,45
10 8,95
15 14
20 18,35
25 22,90

Tabla 2. Línea de calibración adición estándar.

Solución de glucosa %p/v Ángulo de rotación

0 0,35
5 5,75
10 10,05
15 15,75
20 20,25
25 23,75

Línea de calibración estándar externo

25

f(x) = 0.91 x − 0.01

20 R² = 0.99
Ángulo de rotación

15

10

0
0 5 10 15 20 25 30
%p/V

Gráfica 1. Calibración estándar externo.

 Línea de calibración adición estándar
25
f(x) = 0.95 x + 0.78
R² = 1
20
Ángulo de rotación

15

10

0
0 5 10 15 20 25 30

%p/V

Gráfica 2. Calibración adición estándar.

Análisis de resultados.

En la practica se realizó el análisis cuantitativo de glucosa de una solución inyectable de

glucosa, dextrosa 10%, por medio de dos técnicas analíticas para determinar el ángulo de
rotación del analito en muestra, la primera técnica fue patrón externo en donde se utilizó para
la curva de calibración solamente el patrón estándar de glucosa y se midió, posteriormente el
ángulo de rotación de la muestra; la segunda técnica consistió en una curva de adición
estándar en donde se adicionó el estándar a la muestra. Teniendo en cuenta que “los
estándares externos se usan para calibrar instrumentos y procedimientos cuando no hay
efectos de interferencia de la matriz de componentes sobre la disolución del analito” 1 y que el
método de adición estándar es “particularmente útil para analizar muestras complejas en las
cuales la posibilidad de que se presenten efectos de matriz es importante” 1 se llevaron a cabo
pruebas de significación para determinar si existía diferencia significativa entre las
desviaciones estándar y así comprobar si existía interferencia de matriz en la técnica de
estándar externo, con el objetivo de calcular el ángulo de rotación con la línea de calibración
adecuada. Para ello se planteó en primera instancia una prueba de significación para la
comparación de desviaciones estándar, es decir, la comparación de la precisión del método A
con respecto al método B, se comparó mediante la siguiente ecuación.

S 12
F=
S 22

Ecuación 1.

Teniendo en cuenta que para ambos métodos el numero de grados de libertad fue 5, el valor
critico de F al 95% de confianza mediante una prueba de dos colas fue de 7,146, el F calculado
arrojó un valor de 1,659, menor que el valor de F crítico, lo cual indica que el método A
-Estándar externo- no difiere significativamente del método B -Adición estándar-.

Por lo tanto, el cálculo de la concentración de glucosa en solución inyectable se realizó

mediante el método de patrón externo, dando como resultado 8,76 % p/v.

Por otro lado, teniendo en cuenta que “la glucosa en sus formas cíclicas piranosas forman dos
anómeros por la ciclación de la glucosa. La molécula cuyo grupo OH recién formado en C1 es
cis al átomo de oxígeno en el centro quiral más bajo (C5) en una proyección de Fischer es el
anómero α . La molécula cuyo grupo OH recién formado es trans al átomo de oxígeno en el
centro quiral más bajo en una proyección de Fischer es el anómero beta”; Se calculó la
rotación especifica de la D-Glucosa con la siguiente ecuación

α
[α ] D =
I∗C
Ecuación 2.

8°
[α ] D =
dm∗0,0876 g
2
mL
[α ] D =45,66 °

El ángulo obtenido fue de +45,66° próximo al valor teórico de rotación especifica de transición
de alfa a beta de +52,5°, dicho fenómeno de transición se denomina mutarrotación el cual es
el cambio en la rotación óptica debida la conversión lenta de los anómeros puros en una
mezcla 37:63 en equilibrio.2

Figura 1. Mutarrotación de foma alfa D-glucosa a beta D-Glucosa.

Conclusiones.

Se determinó que no existió interferencia de matriz del analito en muestra mediante el uso
pruebas de significación, la primera prueba de comparación de desviaciones estándar, prueba
F en donde el método A no difiere del método B en precisión, por lo cual no fue necesario
implementar una prueba t con diferencias en las desviaciones estándar.

Se halló la concentración de glucosa en una muestra de solución inyectable de glucosa,

Dextrosa al 10 % p/v, el valor de la concentración fue de 8,76 % p/v con un error porcentual de
12,4 % atribuyéndose a errores sistemáticos que pudieron ser instrumentales y/o del analista.
Se calculó el ángulo de rotación especifico para la D-Glucosa arrojando un valor de +45,66°
cercano al valor teórico de transición -mutarrotación- +52,5° de la alfa glucosa a beta glucosa,
el porcentaje de error obtenido fue de 13 %