CUANTIFICACION POR ESPECTROSCOPIA VISIBLE

PRACTICA N° 2
UNIVERSIDAD SANTIAGO DE CALI
LABORATORIO DE INSTRUMENTAL
27-08-19

Tabla 1. Datos espectro visible de la tartrazina

Longitud
Absorbanci
de onda
a
(nm)
380 0,29
390 0,356
400 0,411
410 0,453
420 0,481
430 0,485
440 0,468
450 0,418
460 0,337
470 0,256
480 0,174
490 0,079
500 0,031
510 0,012
520 0,004

Tabla 2. Linea de calibración para la tartrazina

Solucion Absorbancia Absorbancia Absorbancia

Promedio
(ppm) 1 2 3
4 0,167 0,168 0,169 0,168
8 0,333 0,341 0,341 0,338
12 0,492 0,493 0,494 0,493
16 0,671 0,671 0,67 0,671
20 0,833 0,835 0,833 0,834
Tabla 3. Cuantificación de tartrazina en una muestra de jugo de naranja

Absorbancia Absorbancia
Solución Absorbancia 3
1 2
muestra problema 1 0,229 0,229 0,23

Analisis de resultados
Al incidir una luz monocromática (de una sola longitud de onda) sobre un medio
homogéneo, una parte de la luz incidente es absorbida por el medio y otra es transmitida.
Dependiendo del compuesto y el tipo de absorción a medir. En las regiones visibles y
ultravioleta del espectro electromagnético, la muestra es generalmente disuelta para formar
una solución. Cada sustancia tiene su respectivo espectro de absorción, el cual es una curva
que muestra la cantidad de energía radiante absorbida por la sustancia en cada longitud de
onda del espectro electromagnético, es decir, a una determinada longitud de onda de la
energía radiante, cada sustancia absorbe una cantidad de radiación que es distinta a la que
absorbe otro compuesto. [1]
Grafico 1. Espectro de absorbancia de tartrazina
0.6

0.5

0.4
Absorbancia

0.3

0.2

0.1

0
360 380 400 420 440 460 480 500 520 540
Longitud de onda (nm)

Durante el desarrollo de la práctica se llevó a cabo un análisis espectroscópico de una

solución de 12ppm de concentración a diferentes longitudes de onda en el rango del
espectro visible, dichos datos registrados en la Tabla 1. Obteniendo así la longitud de onda
de trabajo correspondiente a 430 nm, esta corresponde a la longitud de onda en la cual la
absorbancia del analito (sustancia a analizar) es máxima, y recibe la denominación de
Lambda máximo (λmax). [2] Las mediciones de absorbancia se hacen en la zona de
longitudes de onda donde se espera que absorba la sustancia problema. Si se trata de
sustancias coloreadas, las mediciones se realizan en la zona visible del espectro
electromagnético (380 a
800nm). [2]
Grafico 2. Curva de calibración de la tartrazina
0.9
0.8 f(x) = 0.04 x + 0
0.7 R² = 1
0.6
Absorbancia

0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
concentracion (ppm)

El grafico 2. Se realizó tomando los datos de la tabla 2. En la que se registraron las

absorbancias de las soluciones patrón a diferentes concentraciones (conocidas), analizadas
a una longitud de onda de 430 nm (λmax), esto con el fin de obtener una recta con la máxima
pendiente y así tener mayor sensibilidad y precisión al hacer las mediciones. Una vez obtenida la
gráfica se determinó la función matemática que presenta dicha recta a través del tratamiento
estadístico de regresión de los mínimos cuadrados, la cual relaciona la absorbancia y la
concentración de un analito. La siguiente ecuación matemática corresponde a dicha
función:

Y=0,0416x + 0,0016 (1)

Y los datos del análisis de la muestra problema (jugo de naranja) que se evidencian en la
tabla 3. Se reemplazó el valor promedio de las absorbancias obtenidas en la ecuación 1.
Dando como resultado la concentración de analito(tartrazina) en la muestra problema.
0,229−0,0016
X= = 5,466 ppm
0,0416
Según la resolución Colombiana 10593 de 1985, radicada por el ministerio de salud el 16
de julio en Bogotá, y el código Alimentario Argentino, los colorantes en bebidas no deben
exceder las siguientes cocentraciones: [3][4]
Tartrazina: 0,01g/100g => 100ppm
Amarillo ocaso: 0,01g/100g => 100ppm (ARG) 0,02g/100g => 200ppm (COL)
Rojo Altura: 0,01g/100g => 100ppm (ARG) 0,03g/100 => 300ppm (COL)
Azul Brillante: 0,01g/100g => 100ppm
Dado que la concentración de tartrazina calculada en la muestra problema dio resultado de
5,466 ppm, se cumple la normativa de ambas resoluciones, dado que no excede los 100
ppm.

REFERENCIAS
[1] Skooh, Holler, & Nieman. (2001). Principios de Analisis intrumental (5th ed.). mexico:
INTERAMERICANA.

[2] (2010). FUNDAMENTOS DE ESPECTROSCOPIA. In GUIA DE LABORATORIO

UNIVERSIDAD PABLO DE OLAVIDE.Sevilla.

[3 ] MINISTERIO DE SALUD. (1985). RESOLUCION 10593 DE 1985 (pp. 1-3). Bogotá: Rafael de

Zubiria Gomez.

[4] MINISTERIO DE SALUD Y DESARROLLO SOCIAL. (2012). CODIGO ALIMENTARIO

ARGENTINO-CAP XII (pp. 23-24). Buenos Aires.