Realizado por: Dr. Simon Bernard ILOKI ASSANGA, PhD.

Profesor –Investigador Titular C /S.N.I. Nivel 1

DIPA. UNIVERSIDAD DE SONORA

Alumno: Singh Rios Norberto. 217217500. Grupo Z03.

Ejercicios del Tema 9 Tolerancia y autoinmunes

1. Pregunta de enfoque clínico ¿Cuáles son algunas de las posibles razones de que
las mujeres sean más susceptibles a las enfermedades autoinmunitarias que
los varones?
Hay autores que le asumen esta situación a factores hormonales. . Por ejemplo, hay estudios
que indican que las hormonas femeninas, estrógeno y prolactina estimula el crecimiento de
células productoras de anticuerpos. Por otro lado, la comunidad científica también estima que
los cromosomas sexuales, específicamente el cromosoma X, pueden influir en la mayor
propensión de enfermedades autoinmunitarias.

2. Explique por qué no todos los linfocitos autorreactivos se eliminan en el timo o

la médula ósea. ¿Cómo se impide que aquellos sobrevivientes que reaccionan
a lo propio dañen al hospedador?
Mediante el proceso de eliminación o selección negativa de los linfocitos T, este proceso afecta
a los LT restringidos por las clases I y II del MHC y es, por tanto, importante para la tolerancia
en los linfocitos CD8+ y CD4+.
● Los dos hechos principales que determinan si un antígeno propio particular inducir la
selección negativa de los timocitos autorreactivos son:
○ La presencia de ese antígeno en el timo, por su expresión local o por su llegada
a través de la sangre.
○ La afinidad de los receptores del linfocito T (TCR) del timocito que reconocen
al antígeno.
3. ¿Por qué es crítica la tolerancia para el funcionamiento del sistema
inmunitario?
Tolerancia inmunológica es la adquisición de no reactivada hacia determinados Ag
(tolerogenos) ya sea propio o extraño, inducida por el contacto previo con dicho antígeno. Se
trata de un estado activo (no es una simple ausencia de respuesta), dotado de especificidad y de
memoria. Es por tanto un fenómeno inverso a la inmunidad.
La tolerancia del sistema inmune radica en el reconocimiento de un determinado Ag como
propio. Los antígenos que inducen este estado de tolerancia se denominan tolerógenos, para
distinguirlos de los que provocan respuesta inmune (inmunógenos).
El proceso de aprendizaje de lo propio se basa en la correcta selección de los repertorios
inmunomoleculares, así como en los procesos que llevan compartimentalización funcional de
los componentes celulares.
La tolerancia se induce más fácilmente en linfocitos inmaduros y cuando no hay señal
coestimulatoria. Además, se requiere que el antígeno persista para que dicho estado
permanezca.
Es una propiedad fundamental del sistema inmunitario normal, no tolerar lo propio da lugar a
reacciones inmunitarias contra antígenos propios, provocando así, enfermedades
autoinmunitarias.
4. ¿Cuál es la importancia de la edición de receptor para la tolerancia de células
B?
Es un mecanismo importante de eliminación de la autorreactividad a partir del repertorio de
linfocitos B maduros.
Si los linfocitos B inmaduros reconocen antígenos propios que están presentes en una
concentración alta en la médula ósea, y especialmente si el antígeno se muestra de una forma
multivalente (p. ej., en superficies celulares), se entrecruzan muchos receptores para el antígeno
en cada linfocito B, lo que envía señales intensas a las células, una consecuencia de tales
señales es que los linfocitos B reactivan sus genes RAG1 y RAG2 e inician una nueva ronda de
recombinación VJ en el locus de la cadena ligera k de inmunoglobulina (Ig). Un segmento VK
en sentido 5' a la unidad V,<JK ya reordenada se un ea un JK situado en sentido 3’. Como
resultado de ello, se elimina el exón Vy* reordenado antes en el linfocito B inmaduro
autorreactivo y se expresa una nueva cadena ligera de Ig, lo que crea un receptor del linfocito B
con una nueva especificidad.
5. Para cada una de las siguientes enfermedades autoinmunitarias (a-l),
seleccione la característica más apropiada (1-12).
Enfermedades
❖ Encefalitis autoinmunitaria experimental (EAE) ​6
❖ Síndrome de Goodpasture ​8
❖ Enfermedad de Graves ​10
❖ Lupus eritematoso sistémico (SLE) ​9
 ❖ Diabetes mellitus insulinodependiente (IDDM) ​12
❖ Artritis reumatoide ​7
❖ Tiroides de Hashimoto ​3
❖ Miastenia grave autoinmunitaria experimental(EAMG) ​11
❖ Miastenia grave ​2
❖ Anemia perniciosa ​1
❖ Esclerosis múltiple ​5
❖ Anemia hemolítica autoinmunitaria ​4
Características
1) Autoanticuerpos contra el factor intrínseco que bloquean la absorción de vitamina B​12
2) Autoanticuerpos contra el receptor de acetilcolina
3) Reacción de la célula T​H​1 a los antígenos tiroideos
4) Autoanticuerpos contra los antígenos eritrocitos
5) Reacción de la célula T a la mielina
6) Padecimiento inducido por inyección de proteína básica de mielina más coadyuvante de
Freund completo
7) Autoanticuerpos contra lgG
8) Autoanticuerpos contra la membrana basal
9) Autoanticuerpos contra el DNA y la proteína relacionada con este
10) Autoanticuerpos contra el receptor de la hormona estimulante del tiroides
11) Trastorno inducido por inyección de receptores de acetilcolina
12) Reacción de células T​H​1 a las células B pancreáticas

6. Las encefalitis autoinmunitaria experimental (EAE) proporciona un modelo

animal de utilidad de los trastornos autoinmunitarios​.
a.​ D
​ escriba cómo se elabora este modelo animal
La EAE es una aproximación a las características de la EM: inflamación,
desmielinización, pérdida axonal y gliosis. La principal diferencia entre la EM y la EAE
es que en esta última se requiere una inmunización externa para desarrollarse. Existen
diferentes protocolos para inducir la enfermedad pero los más utilizados reactivas (EAE
activa) o bien en la transferencia de células T autorreactivas a un animal naïve (EAE
pasiva). Para provocar la EAE de manera activa se necesita un adyuvante, siendo el más
utilizado el Complete Freund's Adjuvant, el cual produce una lenta liberación del
antígeno procedente del inóculo además de utilizar alguna especie de micobacteria,
normalmente Bordetella pertussis, la cual provoca una expansión clonal de linfocitos T
autorreactivos, potenciando de esta manera las manifestaciones típicas de EM al
favorecer la respuesta inmune humoral.
Aunque la EAE ha sido utilizada para estudiar los mecanismos relacionados con la
neuroinflamación y la respuesta inmune, también ha sido utilizada para el estudio de los
procesos de desmielinización y remielinización.
➢ ¿Qué es inusual respecto a los animales que se recuperan de la EAE?
Se debe en ocasiones como MS hay daño cortical junto con el daño WN
 ➢ ¿De qué manera este modelo animal indicó una función de las células T en el
desarrollo de autoinmunidad?
La causa de la respuesta inflamatoria en la EM todavía no se ha podido definir, pero los
hallazgos encontrados en EAE y en pacientes con EM han sugerido que la enfermedad
presenta una etiología autoinmune mediada por células T autorreactivas específicas para
antígenos de la membrana mielínica. Para la activación de dichas células se requieren al
menos dos señales durante el reconocimiento antigénico y, posteriormente, los linfocitos T
CD4+ se diferencian en dos subpoblaciones, Th1 o Th2, que difieren en el patrón de
secreción de citocinas que dependen del estadio de la enfermedad. La progresión de la EAE
y EM involucra cambios en las respuestas autorreactivas primaria y secundaria de las
células T durante la progresión de la enfermedad.
La inmunización pasiva con células T provenientes de un animal afectado, en un animal
normal, induce también a esta afección.

7. El mimetismo molecular es un mecanismo propuesto para explicar el

desarrollo de autoinmunidad ¿Cómo contribuye la inducción de EAE con
proteína básica de mielina a la comprensión del mimetismo molecular en las
enfermedades autoinmunitarias?
En condiciones ordinarias, sólo los linfocitos T y B intensamente autorreactivos son eliminados
o inactivados en los órganos linfoides correspondientes, y los que escapan a esta selección
negativa se mantienen bajo control mediante mecanismos reguladores mal comprendidos.
Cuando éstos fallan, tales linfocitos autorreactivos serían activados por complejos formados
por ciertas moléculas del sistema HLA y determinados péptidos propios o autoantígenos.
En lo concerniente al referido binomio infección -enfermedad autoinmune, la hipótesis del MM
plantea que durante una infección, los linfocitos T, que reconocen tanto al antígeno microbiano
como a un péptido propio relacionado y/o mimetizado se activarán y producirían reacción
autoinmune mediante Reactividad Cruzada Inmune (RCI).
Se ha mostrado que varios virus poseen proteínas que comparten secuencias con la proteína
básica de mielina (mbp).
Dado que se conocen los péptidos de la mbp que generan encefalitis, es posible hacer análisis
para estos péptidos a fin de ver si portan homología de secuencia con secuencias de proteína
viral conocidas.
El análisis por computadora ha revelado varios péptidos virales que portan homología de
secuencia a péptidos de mbp que generan encefalitis. Al inmunizar conejos con estas
secuencias virales, fue posible inducir eae.
Los estudios sobre los péptidos de la mbp que generan encefalitis también mostraron que
diferentes péptidos indujeron eae en diferentes cepas. Así, el haplotipo de mhc determinará
cuáles péptidos virales que muestran reacción cruzada serán presentados y, por ende, influyen
sobre el desarrollo de eae.
8. Describa cuando menos tres mecanismos diferentes por los que la infección
vírica localizada podría contribuir al desarrollo de una enfermedad
autoinmunitaria específica de órgano.
❖ Alteraciones anatómicas en los tejidos: causadas por la inflamación (posiblemente
secundaria a las infecciones), la lesión isquémica o el traumatismo, pueden provocar la
exposición de antígenos propios que normalmente están ocultos al sistema inmunitario.
Estos antígenos secuestrados pueden no haber inducido tolerancia frente a lo propio.
Por tanto, si se liberan antígenos propios que antes estaban ocultos, pueden interactuar
con linfocitos inmunocompetentes e inducir respuestas inmunitarias específicas
❖ Activación por vecindad: Las infecciones de tejidos particulares pueden inducir
respuestas inmunitarias innatas locales que reclutan leucocitos en los tejidos y dan lugar
a la activación de las APC tisulares. Estas APC comienzan a expresar coestimuladores y
secretan citocinas activadoras del linfocito T, lo que rompe la tolerancia del linfocito T.
De este modo, la infección provoca la activación de linfocitos T que no son específicos
❖ Mimetismo molecular: los microbios infecciosos pueden contener antígenos que
muestran reactividad cruzada con los antígenos propios, de manera que las respuestas
inmunitarias a los microbios pueden dar a reacciones contra los antígenos propios.

9. Los ratones transgénicos que expresan el transgén del IFN-​gamma En lazado con
el promotor de insulina desarrollaron diabetes.
a.​ ¿​ Por qué se empleó el promotor de insulina?
Porque este promotor va ayudar a dirigir la expresión de genes en forma específica a las
células Beta del páncreas y se ha demostrado la estricta relación que se conoce de la
expresión de insulina endógena por glucosa, aminoácidos o agentes hipoglucemiantes
como la tolbutamida se mantiene en el transgen
➢ ¿Cuál es la prueba de que la diabetes de estos ratones se debe a lesión
autoinmunitaria?
Principalmente la prueba sería la destrucción de las células betas el páncreas, aunque
esto podría variar.
➢ ¿Qué es lo raro respecto a la expresión de MHC en este sistema?
Que el transgen de IFN-gamma tuvo un efecto en las células beta pancreáticas, las
cuales expresan moléculas MHC II.
➢ ¿De qué manera imita este sistema sucesos que podrían deberse a una
infección vírica localizada en el páncreas?
En una infección viral localizada el pancréas podría inducir la producción del IFN-gamma
en las células T activadas, llevando a cabo la expresión de las moléculas de MHC II en las
células beta del páncreas y reduciendo citocinas como IL-1, la cual podría producir la señal
necesaria para que los linfocitos T ataquen a los propios péptidos del cuerpo.
10.Se administran anticuerpos monoclonales para el tratamiento en diversos
modelos animales de autoinmunidad. ¿Qué anticuerpos monoclonales se
emplean y cuál es el fundamento de este criterio?
❖ Anticuerpos humanos: estos anticuerpos son en su totalidad de origen humano,
reduciendo así el riesgo de producir una respuesta inmune. Actualmente existen dos
anticuerpos monoclonales terapéuticos de este tipo en el mercado.
❖ Anticuerpos quiméricos: ​en este tipo de anticuerpos las regiones variables proceden de
ratón y las regiones constantes son humanas. Están construidos gracias a técnicas de
ingeniería genética. Con esta estrategia se consiguió reducir la respuesta inmune que se
producía frente a los anticuerpos murinos. Actualmente existen cinco anticuerpos
monoclonales terapéuticos de este tipo en el mercado.
❖ Anticuerpos humanizados: en estos anticuerpos solamente las regiones CDR de las
partes variables de los anticuerpos proceden de ratón siendo el resto del anticuerpo de
origen humano. Actualmente existen diez anticuerpos monoclonales terapéuticos de
este tipo en el mercado.
❖ Anticuerpos murinos: el 100% del anticuerpo procede del ratón. Por este motivo las
aplicaciones terapéuticas de estos anticuerpos se han visto limitadas debido a la
respuesta inmune que producen en el ser humano. El sistema inmune humano reconoce
estos anticuerpos como extraños y genera sus propios anticuerpos frente a ellos.
Actualmente existen tres anticuerpos monoclonales terapéuticos en el mercado de este
tipo.

11.Indique si cada una de las afirmaciones que siguen es verdadera o falsa. Si cree
que es falsa, explique el motivo.
a. Las células T​H1 ​ erdadero
​ se relacionan con desarrollo de autoinmunidad. V
b. La inmunización de ratones con IL-12 previene la inducción de EAE por la
inyección de proteína básica de mielina más coadyuvante. ​Falso ​. Hay una
asociación con un polimorfismo en la región no codificadora del gen de la cadena del
receptor para la IL-2, el CD25. Este polimorfismo puede alterar la generación y el
mantenimiento de los linfocitos T efectores y/o reguladores.
c. La presencia del alelo HLA-B27 es diagnosticado de espondilitis anquilosante,
una enfermedad autoinmunitaria que afecta las vértebras. ​Verdadero
d. Los individuos con anemia perniciosa producen anticuerpos contra el factor
intrínseco. ​Verdadero
e. Un defecto en el gen que codifica la proteína Fas puede reducir la muerte
​ erdadero
celular programada (apoptosis). V
12.Para cada uno de los siguientes trastornos autoinmunitarios (a-d), indique cuál
de los enunciados (1-5) podría ser apropiado:

Enfermedad Tratamiento
Tiroiditis de Hashimoto ● Hormonas tiroideas

Lupus eritematoso sistémico ● Ciclosporina

● Plasmaferesis
● Trasplante renal
Enfermedad de Graves ● Timectomia
● Hormonas tiroideas
Miastenia Grave ● Ciclosporina
● Timectomia
● Plasmaferesis

13.Como las deficiencias en los componentes Clq, Clr, Cls, C4 o C2 del

complemento pueden contribuir al desarrollo de lupus eritematoso sistémico.
Sin embargo, los pacientes con SLE exhiben activación del complemento
excesiva. Explique cómo es que ambas observaciones pueden ser ciertas.
El lupus eritematoso sistémico (LES) es una enfermedad multisistémica poseedora de una gran
variedad de presentaciones clínicas. Se han descrito enfermedades monogénicas que
predisponen la aparición de LES. Como ejemplos tenemos a los defectos en los genes
reguladores de la expresión de interferón alfa o a nivel del complemento, que presentan
comportamientos clínicos particulares. Estos defectos presentan una presentación y severidad
distintas, por lo que se puede argumentar que el lupus no es una sola enfermedad sino varias. El
tratamiento se podría individualizar dependiendo del defecto subyacente que genere el subtipo
de lupus.
La mayoría de los estudios de daño tisular mediado por autoanticuerpos en pacientes con lupus
se han enfocado a los anticuerpos anti-DNA de doble cadena, esencialmente para nefritis
lúpica.
El DNA de doble cadena extracelular se encuentra principalmente en forma de nucleosomas,
mismos que son fragmentos de cromatina que se liberan de las células cuando se encuentran en
apoptosis. Berden et al. han propuesto que los anticuerpos anti-DNA de doble cadena en
pacientes con lupus, migran a nucleosomas para entrar al torrente sanguíneo, estos complejos
anticuerpo-nucleosoma se depositan en la membrana basal glomerular. Estos inmunocomplejo
activan el sistema del complemento, lo que da inicio a la glomerulonefritis. Esta serie de
 eventos han sido demostrados en modelos animales. Los anticuerpos IgG han sido observados
por métodos de microscopía electrónica, localizándolos por medio de cromatina extracelular en
modelos de nefritis lúpica en humanos y en ratones, también resulta relevante la detección de
anticuerpos antinucleosoma en sangre y en tejidos inflamados de pacientes.

14.¿Cuál o cuáles de los siguientes son ejemplos de mecanismos para el desarrollo

de autoinmunidad)? Para cada posibilidad de un ejemplo
a.​ ​Activación de células B policlonales
El ejemplo más conocido de este mecanismo lo constituye el desarrollo de la
enfermedad reumática, que acontece tras la infección por un Estreptococo
betahemolítico grupo A en donde el antígeno M y el antígeno carbohidrato del grupo A
presentan mimetismo molecular con la miosina presente en el tejido cardiaco. así como
también con otros autoantígenos del tejido sinovial. piel y sistema nervioso central,
originando las manifestaciones clínicas clásicas de Ia enfermedad reumática, lo cual
explica además la detección de autoanticuerpos contra estos antígenos en el suero de los
pacientes afectados.
b. Lesión tisular
Los genes predisponentes pueden romper los mecanismos de tolerancia frente a lo
propio, y la infección o la necrosis de los tejidos promueve la llegada de linfocitos
autorreactivos y la activación de estas células, provocando la lesión tisular
c. Infección vírica
En la mayoría de estos casos, el microorganismo infeccioso no está presente en las
lesiones y no es siquiera detectable en el sujeto cuando surge la autoinmunidad. Por
tanto, las lesiones de la autoinmunidad no se deben al propio microorganismo
infeccioso, sino a las respuestas inmunitarias del anfitrión que el microbio pueda inducir
o regular de forma anómala.
d. Mayor expresión de moléculas de TCR
La inducción de la tolerancia central tiene lugar en el timo para las células T inmaduras
y en la médula ósea para las células B. Durante la ontogenia de los linfocitos, aquellos
receptores de linfocitos T (TCR) que reconocen con elevada afinidad/avidez péptidos
propios expuestos en las moléculas del HLA son eliminados por deleción clonal, con el
objetivo de evitar los clones autorreactivos. Solo los clones cuyos TCR reconocen con
mediana afinidad/avidez péptidos propios, maduran en los órganos linfoides
secundarios. Lo anterior evidencia que las moléculas del HLA propias determinan el
repertorio de TCR. Los mecanismos de tolerancia periférica incluyen la anergia clonal
(ausencia de las moléculas coestimuladoras), la ignorancia y la supresión por la
activación de células T reguladoras CD4+ CD25+ FOXP3+. En el reconocimiento
antigénico están involucrados los segmentos α1 y β1 de las moléculas del HLA (ambos
polimórficos), el péptido procesado y el TCR. De hecho, algunos péptidos procesados
solo se exponen en determinadas moléculas del HLA. Por lo que las moléculas del HLA
propias también determinan qué péptido puede ser reconocido por el TCR de los
linfocitos T maduros. Las moléculas del HLA de un individuo determinan su respuesta
 inmune en dos niveles: durante la selección negativa en el timo y en la selección de los
péptidos en la periferia.
Las nuevas líneas de investigación de las EAs se enfocan hacia los genes que codifican
para moléculas implicadas en la inducción de la tolerancia central y periférica. Estos
genes se encuentran en cualquier cromosoma y codifican para proteínas implicadas en
la selección de los linfocitos y moléculas que actúan como receptores de muerte o
moléculas coestimuladoras. La mayoría de las EAs son poligénicas lo que dificulta el
conocimiento del agente desencadenante. Las EAs provocadas por una mutación en un
único gen (monogénicas), las cuales son poco comunes, proveen evidencias clínicas y
experimentales de la contribución de los diferentes mecanismos de control de la
autorreactividad.
e. Mayor expresión de moléculas MHC clase II
Existe una fuerte asociación genética entre ciertas enfermedades autoinmunes como la
artritis reumatoide, esclerosis múltiple y diabetes mellitus insulino-dependiente y
algunos alelos y/o haplotipos del complejo principal de histocompatibilidad. La
explicación actual para este tipo de asociaciones propone que las moléculas del
complejo principal de histocompatibilidad que se han encontrado asociadas, unen de
manera eficiente autoantígenos envueltos en la patofisiología de la enfermedad, lo cual
resulta en una respuesta inmune periférica mediada por células T contra autoantígenos y
las secuelas autoinmunes.

15.Dada la figura adjunta es un ensayo de doble inmunodifusión (método de

Ouchterlony) después de varios días de incubación, en el que se evaluó a un
paciente en busca de enfermedad autoinmunitaria. El recipiente del centro se
cargó con una solución que contenía una mezcla de antígenos nucleares
(nucleosomas y empalmosomas). El suero de ´pacientes se diluyó varias veces
y se colocó en los recipientes externos (se indican las diluciones).
Un testigo positivo (histonas antihumanas murinas) se colocó en un recipiente,
y un testigo relevante (suero humano normal) en otro.

​ on la base en el ensayo, ¿Cuál de los siguientes enunciados es verdadero

a. C
para este paciente?
1. El paciente es normal porque normal porque es normal expresar
anticuerpos contra proteínas nucleares del propio suero. ​Falso
2. Es probable que el paciente sea varón y presente síndrome de
Goodpasture ​Falso
3. El paciente sufre de alergias graves ​Falso
4. Es posible que el paciente sufra SLE, y es más probable que sea mujer
Verdadero
b. ¿Cuál fue el título del paciente? 1​ 00.

c. ¿Cuál de los siguientes es un experimento que el lector podría realizar para

verificar los resultados de la figura?
A. ELISA directo con placas recubiertas de antígenos nucleares
B. Ensayo de inmunofluorescencia con cortes de tejido o células
humanas permeabilizadas
C. Western blots con proteínas nucleares sobre gel, con suero como
Ab primario
El lector podría realizar los tres experimentos.