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UNIVERSIDAD CIENTÍFICA DEL SUR

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA “FERNANDO CABIESES”


LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

CURSO: BIOQUÍMICA
PROFESOR: Dr. SALAZAR SANCHEZ, Juan Alberto

TÍTULO: DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS PLASMÁTICAS

INTEGRANTES:
● FERNANDEZ DAVILA LÁZARO, Noemi
● LEÓN YAURIMUCHA, Leonor
● CANO FLORES, Vanessa
● CASTILLO VILLALOBOS, Jimena Lucero

HORARIO DE CLASES
DIA: JUEVES
HORA: 7 a 9 AM
GRUPO: 3B

2019
“Año de la lucha contra la corrupción e impunidad”

Lima-Perú

INTRODUCCIÓN
La sangre es un tejido que circula dentro de un sistema virtualmente cerrado, el de los
vasos sanguíneos. La sangre compuesta por elementos sólidos, eritrocitos, leucocitos y
plaquetas, suspendidos en un medio líquido, el plasma. El plasma consiste en agua,
electrolitos, metabolitos, nutrientes, proteínas y hormonas. Una vez que la sangre se ha
coagulado, la fase líquida remanente se denomina suero, este carece de factores de la
coagulación, que normalmente están presentes en el plasma, pero que ha sido consumido
durante el proceso de coagulación.

El estudio de las proteínas se utiliza para el seguimiento de las enfermedades y no para


diagnóstico o muy rara vez. Por eso es importante tener el valor normal del paciente y ver
qué pasa cuando entra en estado de enfermedad.
En la actualidad se han aislado y caracterizado alrededor de 100 proteínas, sin embargo las
funciones de una gran parte de ella permanecen aún desconocida. Las proteínas
purificadas difieren en su movilidad electroforética y peso molecular, también son muy
diferentes por su composición química; algunas contienen lípidos (lipoproteínas), otras
metales (transferrina, ceruloplasmina). La mayoría son glicoproteínas, presentando en
algunos casos variaciones genéticas.

Hoy se acepta clasificar a las proteínas plasmáticas de acuerdo con sus funciones:
• Proteínas con función de transporte y asociados a sistemas buffer.
• Proteínas reactantes de fase aguda (se llaman así porque en situaciones de stress,
procesos inflamatorios o traumatismos aumentan su concentración para compensar esos
estados).
• Proteínas sintetizadas por el sistema inmunocompetente.

Un gran número de las proteínas conocidas tiene microheterogeneidad, esto es debido en


general a la cantidad variable de ácido siálico y en menor proporción a la sustitución de
aminoácidos en la cadena polipeptídica. Actualmente se conocen las variables genéticas o
polimorfismo genético de muchas proteínas. Estas se deben a las mutaciones en las
cadenas polipeptídicas de las proteínas. Por ejemplo el polimorfismo de la haptoglobina, así
como las numerosas variables de la Globulina G, también conocida como proteína unida a
vitamina D, la transferrina o el sistema PI de la alfa 1 antitripsina.

❖ HIPOPROTEINEMIA
Disminución de la concentración sérica de proteínas (<< 6,5 g/dl). Las causas más
frecuentes son la malnutrición, síndromes de malabsorción, pérdidas renales (síndrome
nefrótico, aminoacidurias), pérdidas intestinales (malabsorción, enfermedad celíaca, colitis
ulcerosa, pancreatitis crónica, etc.) o déficit de síntesis (hepatopatías tipo cirrosis).
Esta disminución se efectúa a expensas de la albúmina, fundamentalmente, y condiciona la
disminución de la presión oncótica, pasando y acumulándose el agua desde el espacio
intravascular al intersticial, con desarrollo de edema y ascitis a veces generalizado
(anasarca).

Enfermedades que producen hipoproteinemia

1.-Nefropatías con proteinuria crónica

La alteración crónica de la función del riñón produce aumento de la pérdida de proteínas,


con una disminución tanto de las albúminas como de las globulinas.
La aparición del síndrome nefrótico como resultado de los trastornos crónicos de la función
renal se caracteriza por la aparición de proteínas en la orina (proteinuria). La causa de la
pérdida de proteínas plasmáticas a través de la orina es debida al incremento de la
permeabilidad de la membrana glomerular.

2.-Enteropatías con pérdida proteica

La diarrea es la manifestación clínica más corriente de enfermedad intestinal. Se define


como el aumento anormal de la frecuencia, fluidez o volumen de las heces. La diarrea
puede ser el único signo clínico en pacientes con enteropatía o el signo saliente que
acompaña a otras anormalidades como anorexia, pérdida de peso, vómito y dolor
abdominal.
Las causas generales de diarrea aguda y crónica pueden ser muy variadas; la dieta,
inflamación gastrointestinal por causas parasitarias o infecciosas, consecuencia de
patologías pancreáticas, hepáticas, renales o el resultado de procesos sistémicos,
alteración general del organismo por drogas, hipoadrenocorticismo o hipertiroidismo.

3.-Enfermedades hepáticas

Aquellas hepatopatías con presencia de tejido hepático con atrofia o fibrosis producen
disminución de la concentración de proteínas plasmáticas, en especial hipoalbuminemia ya
que se afecta (disminuye) la síntesis de albúmina. Las alteraciones de la funcionalidad
hepática pueden darse con curso agudo o crónico.

Las patologías causantes de alteraciones en el metabolismo de las proteínas plasmáticas


son variadas y complejas. Los valores de proteínas totales pueden mantenerse dentro del
rango normal (normoproteinemia) aún cuando existan alteraciones de las distintas
fracciones proteicas del plasma (disproteinemia) ya que es posible que el descenso de una
fracción compense el aumento anormal de otra. Por todo ello es importante realizar la
determinación no solo de las proteínas totales sino también del proteinograma y la relación
Albúmina/Globulinas para adquirir una idea más completa del estado clínico del animal.

❖ HIPERPROTEINEMIA
La hiperproteinemia es la concentración elevada de alguna (albumina o globulina) de las
proteínas plasmáticas, mas no indica alteraciones de las cantidades absolutas de proteínas
sanguíneas. El aumento de las proteínas es relativo, cuando el incremento se debe a una
hemoconcentración (Aumento en el número de hematíes) provocada por una
deshidratación; o absoluto, si aumentan las proteínas totales por incremento de las síntesis
de globulinas. Esta elevación de las globulinas en general se observa, en estados de
defensa contra agentes infecciosos, en procesos inflamatorios crónicos, en patologías
imnunomediadas como la artritis reumatoidea o el Lupus eritematoso sistémico, o como
resultado de una vacunación.

❖ HIPERPROTEINURIA

El Proteinuria es una concentración anormal de proteína en la orina y puede resultar de


diversas causas, dependiendo de las condiciones económicas específicas.Los riñones
filtran contínuo la sangre para excretar los residuos en la orina mientras que conservan
componentes útiles tales como proteínas. Sin embargo, algunas condiciones pueden llevar
a una desorganización en este proceso y hacer más proteína estar presente en la orina que
usual.
Algunas situaciones pueden causar un aumento temporal en la concentración de proteína
en la orina que no es permanente y no es indicativa de daño a la función de los riñones.
Esto puede incluir:

● Temperaturas extremas (caliente o frío)


● Tensión emocional
● Esfuerzo físico
● Fiebre

Cada uno de estos factores tiene el potencial de alterar la función del riñón temporalmente y
puede resultar en presencia de la proteína en la orina. Sin embargo, la orina debe volver a
normal una vez que se quita la causa.

ALBÚMINA

La albúmina representa más del 50% de las proteínas plasmáticas totales en el cuerpo
humano. Algunas de sus funciones son regular la presión osmótica coloidal de la sangre,
ayudar en el movimiento de ácidos grasos, hormonas, bilirrubina, cationes y drogas en la
sangre, entre otras.Además, la albúmina evita que el líquido salga de la sangre hacia los
tejidos. Cuando la concentración de albúmina sérica es mayor que el intervalo normal, se
denomina hiperalbuminemia. Los niveles anormales de albúmina sérica podrían ser
indicativos de ciertas condiciones médicas.

Una de las principales razones detrás de altos niveles de albúmina en la sangre es la


deshidratación severa, y esta puede ocurrir debido a la ingesta inadecuada de agua, o
pérdida de líquidos debido a vómitos severos o diarrea. Así, los niveles de albúmina sérica
pudiesen elevarse en individuos afectados por enfermedades que causan deshidratación.
Aunque la deshidratación en realidad no hace que los niveles de proteína aumenten, la
pérdida de agua hace que la sangre se espese, lo que a su vez produce que los
componentes de la sangre se concentren.Entre las funciones de la albúmina se encuentran:

● Mantiene la presión oncótica.


● Transporta hormonas tiroideas.
● Transporta otras hormonas, en particular, aquellas que son liposolubles.
● Transporta los ácidos grasos (ácidos grasos «libres») al hígado y a los miocitos
para la utilización de la energía.
● Transporta la bilirrubina no conjugada.
● Transporta muchos fármacos (los niveles de albúmina sérica pueden afectar la
vida media de los fármacos).
● Se une competitivamente a los iones de calcio (Ca2 +).
● Regular el PH.
● Previene la fotodegradación del ácido fólico

HIPERALBUMINEMIA

La albúmina alta es medicamente conocida como hiperalbuminemia, y significa un exceso o


alta concentración de albúmina en la sangre. La concentración de albúmina sérica es
típicamente de 35 – 50 g / L (3,5 – 5,0 g / dl). Las proteínas son componentes básicos del
cuerpo humano, por lo que la albúmina y la globulina son proteínas esenciales para el
funcionamiento saludable del mismo.

HIPOALBUMINEMIA
La hipoalbuminemia es una condición clínica en la cual existe una disminución en los
niveles séricos de albúmina por debajo de 3,5 g/dL.Existen muchas causas de niveles bajos
de albúmina sérica. Estas causas pueden incluir:

● Estado nutricional deficiente: no ha estado ingiriendo la cantidad suficiente de


proteínas o puede estar perdiendo proteínas, por lo general durante un período de
enfermedad
● Aumento de la excreción (o pérdida) de albúmina de su cuerpo a causa de:
○ Disfunción renal (falla del riñón): es posible que sus riñones no trabajen bien
debido a distintas condiciones y puede estar perdiendo albúmina en la orina,
causando hipoalbuminemia
○ Es posible que tenga alguna forma de enfermedad hepática, como hepatitis o
cáncer en el hígado, que puede haberse expandido desde alguna otra parte
de su cuerpo y causar la pérdida de albúmina, conduciendo a una
hipoalbuminemia.
○ Ciertas condiciones cardíacas: como la insuficiencia cardíaca congestiva o
pericarditis pueden causar niveles bajos de albúmina en sangre
○ Problemas con el estómago: como la enfermedad inflamatoria intestinal o
linfoma, conduciendo a una hipoalbuminemia
○ Otras formas de cáncer o enfermedades: como sarcoma o amiloidosis,
pueden causar hipoalbuminemia
○ Los efectos secundarios de los medicamentos pueden provocar
hipoalbuminemia
○ Infecciones: como tuberculosis, pueden causar hipoalbuminemia
ALBUMINURIA

Es un proceso patológico manifestado por la presencia de la albúmina en la orina. Se trata


de entidades que generan inflamación en los glomérulos, que son las unidades funcionales
de los riñones. En ciertos casos, se trata de una condición temporal y reversible, como en el
primer trimestre del embarazo normal; o bien, ser progresiva y destruir los glomérulos, lo
que provoca fallo renal, es decir, el organismo es incapaz de filtrar la sangre (se diagnostica
insuficiencia renal crónica). Cuando el daño no tiene como causa la diabetes, puede
deberse a proceso infeccioso o el consumo de algunos medicamentos. En este sentido, se
sabe que las sustancias tóxicas producidas (secretadas) por microorganismos, o bien el
fármaco ingerido, circulan por la sangre y llegan a los riñones, donde por activación de las
defensas del organismo, nace una "lucha" entre glomérulos y elementos nocivos

Una notable pérdida de albúmina provoca retención de líquidos en el paciente, pues


normalmente esta proteína permite que el agua salga de los capilares, lave el exterior y
regrese limpia gracias a la presión oncótica (que suele meter agua en el sistema
circulatorio), proceso que traslada los productos de desecho del trabajo celular.

La pérdida excesiva de proteínas circulantes afecta la presión oncótica, por lo que el agua
queda fuera de los capilares; esta condición se manifiesta clínicamente como edema (el
afectado lo refiere como hinchazón en cara, ojos y piernas). Sin embargo, cuando el
problema apenas empieza sólo se detecta mediante examen general de orina, ya sea
rutinario o para otro fin.

1 .OBJETIVOS:

● Determinar el nivel de las proteínas plasmáticas total en el suero


● Determinar el nivel de albúmina en el suero sanguíneo

2. RESULTADOS:

- Determinación de proteínas
En el primer tubo de ensayo se puede apreciar un compuesto color azulado debido a
la reacción que se dio con el Biuret, ya que este está compuesto por iones cúpricos
que reaccionan con las proteínas dando el color ya mencionado. También es
importante resaltar que este compuesto reacciona en un medio alcalino. Después de
haber sido sometido al espectrofotómetro obtuvimos que la absorbancia de las
proteínas era de 0,619 y con ello pudimos hallar la cuantificación de las proteínas en
el plasma de la siguiente manera:

[ST] = 6,0 g/dl proporcionado en el laboratorio


AbsST = 0,280A proporcionado en el laboratorio
AbsPP= 0,619A

([ST]/AbsST)xAbsMP = (6,0g/dl / 0,280A)x0619A


= 13,26 g/dl
Debemos tomar en cuenta que los valores normales de las proteínas plasmáticas
oscila de 5,0 a 7,0 g/dl; con ello podemos decir que nuestro resultado está más
arriba de los parámetros.

- Determinación de albúmina
En el segundo tubo de ensayo se puede observar un color verdoso, esto es debido a
que la albúmina reaccionó con el bromocresol formando el compuesto coloreado ya
mencionado, esta reacción se da en un medio ácido.

[ST] = 3,0 g/dl proporcionado en el laboratorio


AbsST = 1,035A
AbsAlbúmina=1,309A

([ST]/AbsST)xAbsMP = (3,0 g/dl / 1,035A)x1,309A


= 4,06 g/dl

Tomando en cuenta los valores normales de la albúmina en el plasma el cual es de


3,0 a 5,0 g/dl, podemos decir que la cantidad de albúmina en el plasma está dentro
de los parámetros.

- Determinación de globulinas
A partir de los resultados obtenidos tanto de las proteínas plasmáticas como de la
albúmina podremos hallar la cantidad de las globulinas en el plasma de la siguiente
forma:

Proteínas plasmáticas - Albúmina = Globulinas


En este caso obtendremos: 13,26 g/dl - 4,06 g/dl = 9,2 g/dl; este resultado se
encuentra muy elevado, puesto que el parámetro de la globulina se encuentra entre
2,0 a 3,5 g/dl.

3. DISCUSIÓN:
Después de la realización de la práctica de laboratorio y la obtención de los resultados
pudimos lograr el estudio de las proteínas que componen el plasma , como lo son la
albúmina y las globulinas.
A ellas fuerzas iónicas , la solubilidad de las proteínas disminuye, este fenómeno se da
básicamente por la competencia que establece la sal , con al proteina por el agua logrando
sacar la capa de solvatación quedando las cargas de las proteínas libres, trayendo como
consecuencia que estas se atraigan y se aglomeran logrando la precipitación de las
globulinas , esto también , es debido a que la sal estaba en una concentración
saturada.culminada esta etapa se extrajo cierta cantidad de proteínas para determinar el
total que poseía la solución inicial, mientras que se tomaba otra cantidad para llevar al
centrifugado y absorber el componente de albúmina que poseía.
A través del método colorímetro de biuret se cuantifica las proteínas totales y de albúmina
presentes en la muestra , en el que mientras más oscura la coloración de la muestra mayor
la concentración de proteínas el baño maría sirve de catalizadores de la reacción.

4. CONCLUSIONES:
- Las proteínas plasmáticas son de suma importancia ya que cumplen funciones en
los diversos tejidos del organismos y mediante su cuantificación se puede
determinar patologías como desnutrición, deshidratación, cirrosis y entre otros.

- Es de suma importancia la determinación de proteínas plasmáticas puesto que los


niveles ya sean bajos o altos puede conllevar a patologías, si esta es alta se podría
tratar de una hiperproteinemia e hiperproteinuria entre otros más o si esta es baja
una hipoproteinemia. Asimismo los niveles de albúmina fuera de los valores
normales conllevan a patologías como hipoalbuminemia, hipoalbuminemia,
albuminuria entre otros.
- Durante el desarrollo de la práctica realizada se procedió a aplicar métodos que se
usan para precipitar y separar proteínas, así como los métodos para cuantificarlas,
en caso de las proteínas plasmáticas como es el método de Biuret y en caso de la
albúmina mediante la reacción con el bromo cresol.

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