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PRÁCTICA No.

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SIMULACIÓN POR COMPUTADORA DEL POTENCIAL DE
ACCIÓN

CUESTIONARIO:
1. Explique qué es excitabilidad.
2. Mencione ¿cuáles son las células excitables del organismo y a qué se debe que
tengan esta propiedad fisiológica?
3. ¿Qué clase de estímulo puede generar un potencial de acción en una célula
excitable? ¿Cómo se estimula normalmente un nervio o un receptor?
4. ¿Cuál de las diversas clases de estímulos de vías nerviosas es más práctico para
usarse en pruebas experimentales? ¿Por qué?
5. ¿Cuáles son las concentraciones externa e interna de los iones sodio y potasio de
una neurona de mamífero?
6. ¿Cuáles son las características del potencial de acción?
7. Explique detalladamente cómo se desarrolla el potencial de acción.
8. Explique que es cronaxia y reobase.

OBJETIVOS:
•   Manipular algunos parámetros como la intensidad y frecuencia de
estimulación para observar su efecto sobre el potencial de acción.
•   Observar el efecto que provocan algunas sustancias bloqueadoras de los
canales dependientes de voltaje sobre la naturaleza todo o nada del potencial
de acción.
•   Observar el efecto del cambio de la concentración de los iones involucrados
en la generación y forma del potencial de acción.

MATERIAL:
Programa de simulación por computadora, basado en el modelo propuesto por
Hodgkin y Huxley, para la generación del potencial de acción creado por Dave
Touretzky “HHsim”, Computadora PC.
DESARROLLO:
El dispositivo empleado para desarrollar este simulador es similar al que se
muestra en la figura 2. Al iniciar el programa “HHsim”, se observa una pantalla
principal en la que se localizan los controles y que se muestran en dicha figura (se
usarán en las actividades posteriores).

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Figura 2. Pantalla principal del programa HHsim. Los números 1 al 4 indican los controles que se
emplean durante esta práctica.

Establecer los parámetros iniciales de la siguiente forma:

-Asegúrese de que el control 1 marca “Voltage recording”


-En el control 2, seleccionar gNa (pS), gK (pS) y Blank, respectivamente.
-En el control 3, activar el comando “membrane”, esto despliega una ventana
donde debe establecer la temperatura en 200C. Ocultar la ventana con el boton
“hide”, que aparece en la misma ventana.

Ya establecidos dichos parámetros se comenzará a realizar las siguientes


actividades.
I. Potencial umbral
1. En el control 3, activar el comando “stimuli”. Esto despliega una ventana donde
se pueden cambiar los parámetros de dos estimuladores capaces de aplicar dos
estímulos cada uno. Para este caso solo se usará el primer estimulo del
“estimulador 1”.
2. Cada estímulo tiene tres parámetros: (Ti) tiempo de inicio (ms), (Int) intensidad
(nA) y (Dur) duración (ms). Establecer Ti = 0.0 ms, Int = 10 nA y Dur = 0.1 ms. El
segundo estímulo debe marcar cero en todos los parámetros.
3. Activar el estimulador usando el botón “Stim1” del control 4 (ubicado en la parte
inferior izquierda de la pantalla) y observar la respuesta en el potencial de
membrana.
4. Aplicar estimulos similares incrementando gradualmente la duración hasta
provocar un potencial de acción.
5. Encontrar la duración mínima para que estímulos con intensidades de 5, 10, 15,
20, 35, 40 y 66 nA puedan provocar un potenial de acción.

Nota: Antes de aplicar cada estímulo debe borrar la respuesta anterior usando el
botón “Clear” del control 4.

II. Suma temporal de estímulos subumbrales


1. Establecer el primer estímulo con Ti = 0 ms, Int = 15 nA y Dur = 0.4 ms. El
segundo estímulo debe ser similar pero con Ti = 15 ms.
2. Activar el estimulador (Stim1) y observar la respuesta.
3. Repetir la experiencia disminuyendo gradualmente el tiempo de inicio del
segundo estímulo (Ti = 8, 4, 2, 1 ms).

III. Periodo refractario


1. Establecer el primer estímulo con Ti = 0 ms, Int = 50 nA y Dur = 0.11 ms. El
segundo estímulo con Ti = 20 ms, Int = 40 nA y Dur = 0.11 ms. Activar el
estimulador y observar la respuesta.
2. Repetir la experiencia reduciendo el tiempo de inicio del segundo estímulo a 10
ms y obsevar la respuesta.
3. Repetir la experiencia con Ti = 5 ms para el segundo estímulo. Observe la
respuesta.
4. Encontrar el tiempo de inicio para el segundo estímulo al cual desaparece el
segundo potencial de acción.
5. Repita la experiencia con Ti = 2 ms para el segundo estímulo. Observe la
respuesta.
6. Incremente la intensidad del segundo estímulo a Int = 60 nA. Observe.
7. Incremente la intensidad del segundo estímulo a Int = 70 nA. Observe.
8. Reduzca el tiempo de inicio del segundo estímulo a Ti = 1.8 ms.
9. Incremente la intensidad del segundo estímulo a Int = 80 nA. Repita
incrementando a Int = 100 nA.

IV. Concentraciones iónicas


1. Establezca los parámetros del segundo estímulo a cero, para el primer estímulo
Ti= 0 ms, Int = 20 nA y Dur = 0.5 ms.
2. Aplique el estímulo.
3. Sin borrar la respuesta anterior active el comando “membrane” con el control 3.
Cambie la concentración extracelular de Na+ = 400 mM. Aplique el estímulo.
4. Sin borrar las respuestas anteriores, reduzca la concentración extracelular de
Na+, de 50 en 50 mM, aplicando un estímulo cada vez. Observe la respuesta.

Nota: Puede utilizar el botón “Zoom out” del control 4 y la barra de desplazamiento
de tiempo para visualizar toda la resie y compara las respuestas.

5. Borre las respuestas anteriores.


6. Restablezca la concentración original de Na+
7. Repita el experimento aumentando de 50 en 50 mM la concentración extracelular
de Na+. Si es necesario, detener el experimento usando el botón “Stop” del control
4.
8. Restablezca la concentración original. Borre las respuestas anteriores y aplique
un estímulo.
9. Reduzca ahora la concentración extracelular de K+ de 1 en 1 nM, aplicando
estímulos cada vez. Continúe reduciendo aún si no se provoca un potencial de
acción.
10. Restablezca la concentración. Borre las respuestas anteriores y estimule.
11. Incremente de 1 en 1 nM la concentración extracelular de K+, estimulando cada
vez. Si es necesario, detenga la respuesta usando el botón “Stop” del control 4.

V. Canales dependientes de voltaje


1. Restablezca las concentraciones originales. Borre las respuestas anteriores y
aplique un estímulo.
2. Sin borrar la respuesta anterior, active el comando “Drugs” del control 3. Cambie
el porcentaje de inhibición por Tetrodotoxina (TTX), incrementando de 5 en 5 %,
estimulando cada vez sin borrar.
3. Restablezca, borre las respuestas anteriores y repita la experiencia ahora
incrementando la inhibición por Tetraetilamonio (TEA).
4. Restablezca de nuevo, borre las respuestas anteriores y aplique pronasa. Aplique
un estimulo y observe la respuesta.

PRESENTACIÓN DE RESULTADOS
Colocar en el reporte, las imágenes de cada experiencia, indicando en cada
una, el valor máximo de despolarización e hiperpolarización (si fuera el caso).

REFERENCIAS

-Berne R. y Levy M., 2018. Fisiología. 7ª Ed. Elsevier, España, Madrid. pp. 65-83.

Darnell J., Lodish H. y Baltimore D. 2016. Biología Celular y Molecular. 7ª


Panamericana S.A. España.

Fox I.S., 2017. Fisiología Humana. 14ª Ed. McGrawHill/Interamericana de España,


S.A.U. Madrid, España.

Sherwood L., 2011. Fisiología Humana. De las células a los sistemas. 7ª Ed. Cengage
Learning. México. pp. 87 – 131.

 
 
 
 

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