20.-FB5076 - Guia de BIOQUIMICA II

1
3B2
GUIA DE PRÁCTICAS
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA EAP DE FARMACIA Y BIOQUIMICA
ASIGNATURA: BIOQUÍMICA II
A u t o r : Mg . Q F . C a r m e n P e ñ a S u a s n a b a r
2020-0
F–CV3–3B-2 Rev.Junio 2007

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PROGRAMACION DE LAS PRACTICA BIOQUIMICA II
Semana Practica Contenido
Realiza experimentos de laboratorio que permiten determinar el

1 1 índice de saponificación de las grasas.
Elabora un mapa conceptual de la betaoxidación de ácidos grasos

2 2 insaturados y saturados de cadena par e impar. Cálculos
Efectua las determinaciones de colesterol en el suero de la sangre.

3 3
Explica el desequilibrio del metabolismo; obesidad juvenil Regulación

4 4 para alcanzar el equilibrio. Síndrome metabólico
Representa gráficamente del mecanismo de acción de

5 5 hormonas a nivel de núcleo y de membrana
Metabolismo del glutatión y su rol en el estrés oxidativo.

6 6
7 7 Mapa conceptual del metabolismo bioquímico de la vitamina C y

antioxidantes.
Examen
8 Primer examen ( E 1 )
Efectúa la determinación de las concentraciones séricas de

9 8 ácido úrico.
Regulación de la Biosintesis de los nucleótidos purinicos y de las

10 9 pirimidinicas.
Elabora un mapa conceptual de la replicación del ADN.

11 10
Elabora un mapa conceptual de la transcripción y

12 11
la traducción.
Determinación de bilirrubina y sus fracciones en suero. Discusión de

13 12
resultados.
Elabora un gráfico que describa que describa la transmisión de
14 13 impulso nervioso a través de una sinapsis colinérgica.
Integración metabólica y el metabolismo de tejido renal,

15 14 adiposo, muscular e hígado. Examen

3
16 Examen final ( E 2 )
INTRODUCCIÓN
La bioquímica es una rama de la ciencia, cuya actividad primordial se halla dirigida a desentrañar
las reacciones básicas que determinan la estructura y el funcionamiento de los seres vivos.
La enseñanza de la Bioquímica en las distintas áreas de Ciencias de la Salud requiere de una

metodología específica y profunda, en el caso de la Carrera de Farmacia y Bioquímica se ha
preparado el presente manual que permitirá a nuestros estudiantes contar con un instrumento
práctico y didáctico para coadyuvar en el proceso enseñanza-aprendizaje.
El manual, fruto del trabajo docente tanto teórico como práctico presenta en forma clara el
desarrollo de los laboratorios y los ejercicios que debe realizar cada estudiante para un mejor
resultado académico.

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I. PRACTICA N° 1
1. DETERMINACION DEL INDICE DE SAPONIFICACION

DE LAS GRASAS
1.1. Marco teórico.
Las grasas son los nutrientes que aportan una mayor cantidad de energía .Están formados
casi de forma exclusiva por triglicéridos en una cantidad mayor al 95%, que está formada
por una molécula de glicerol y tres ácidos grasos esterificados que pueden ser de muy diversa
longitud de cadena y grado de instauración.
Habitualmente se hace referencia con el termino de grasa, a los aceites que son sólidos a
temperatura ambiente (alrededor de 20C), mientras que los aceites hacen referencia a
aquellos grasas que son líquidos a temperatura ambiente. La diferencia básica que
determina que un aceite sea sólido o líquido a temperatura en torno a los 20ºC, radica en
la estructura de los ácidos grasos.
En la naturaleza no existe la configuración trans en los alimentos, pero existen procesos de

modificación de grasas como la hidrogenación (se utiliza en la elaboración de mantequillas,
margarinas, bollería, snacks. etc.) que generan doble enlaces trans por lo que el punto de
fusión de la grasa aumentará. Por otra parte, esta configuración provoca problemas de
digestibilidad en las grasas y son menos saludables.
Un análisis de las grasas encontradas en la naturaleza es un procedimiento bastante

dispendioso, pero hay un número de mediciones tales como el valor de la acidez, el índice
de saponificación da aproximadamente el contenido de triglicéridos que presenta una grasa.
1.2. Competencia.
Realiza un análisis cualitativo de grasa a través del indice de saponificación para conocer
la calidad de la grasa.
1.3. Materiales y equipos Equipos.

a. Refrigerante de reflujo.
b. Balón de reflujo x 250 mL.
c. Cocina eléctrica. Soporte universal.
d. Balanza.
e. Luna de reloj
f. Pinza de nueces
g. Beaker de 1000 mL.
h. Buretas x 50 mL
i. Pipetas de 10 Ml

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Reactivos.
a. Solución alcohólica de KOH al 0.5 N.

b. Solución de HCL 0,5N.
c. Indicador fenolftaleina al 1 %.
d. Grasa siliconada.
e. Muestra de grasa o aceite.
f. Alcohol etílico 95 ºC,
1.4. Procedimiento.
a. En una luna de reloj pesar 2 g. de grasa, luego transferirla cuantitativamente al balón de
reflujo, con 10 mL. de alcohol etílico.
b. Adicionar 25 mL. de de KOH alcohólica, luego conectar el refrigerante de reflujo. Colocar
el balón en un beaker con agua y luego llevar a ebullición durante 50 minutos.
c. Retirar, enfriar ligeramente, adicionar III gotas de la solución de fenolftaleina, y luego
titular con HCl 0,5 N
d. Simultáneamente corre una prueba en blanco ( sin muestra de grasa )
e. Establecer el gasto de HCl 0,5 N, restando los mL. de HCl 0,5N gastado blanco de los
gastados en la muestra de grasa.
IS =mg de KOH necesarios para saponificar 1 g de grasa
1.5. Resultados.
Los índices de saponificación de las grasas, obtenidos por los alumnos.
1.6. Cuestionario.
1. Mencione como prepara la solución de potasa alcohólica y, ¿ cuál es la función qué

cumple?.
2. ¿cuál es la importancia del IS y de una relación de los IS de las principales grasas utilizadas
en la alimentación?
3. Explique el mecanismo de reacción de la saponificación?
4. Diseñe un tabla de los índices de saponificación de la manteca de cacao, margarina, aceite
de mani, aceite de soya, aceite de maíz, aceite de coco, aceite
1.7. Fuentes de Información.
1. Claros MG, Avila C. Gallardo F. Madrid. ISBN. 2001.

2. Devlin, Thomás M. Bioquímica con Aplicaciones. Clínicas. Tomos I y II. Barcelona.
Reverté Colombiana.S 2012.
3. David L N, Cox M M . y Lehninger A. Principios de Bioquímica Barcelona. Omega. 2016

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.
II. PRACTICA Nº 2
ELABORA UN MAPA CONCEPTUAL DE LA BETA OXIDACIÓN DE ÁCIDOS GRASOS

INSATURADOS Y SATURADOS DE CADENA PAR
2.1 Marco teórico.
Proceso metabólico por el que los ácidos grasos se degradan en la mitocondria, mediante la
eliminación oxidativa de unidades sucesivas de dos átomos de carbono, en forma de acetilCoA,
a partir del extremo carboxilo de la cadena hidrocarbonada del ácido graso.
En esta fase se genera gran cantidad de poder reductor en forma de FADH2 y NADH, que
posteriormente donarán sus electrones a la cadena transportadora mitocondrial (fosforilación
oxidativa).
2.2 Competencia.
Conceptualiza la importancia biológica de la beta oxidación de los ácidos grasos.
2.3 Materiales.
a. Bibliografía del silabo de Bioquímica II. manuales, etc.
b. Retroproyector. D. Videos VHS, etc.
c. Libros y revistas. C D .Power point.
d. Bibliografía de carácter científico revistas,
2.4 Procedimiento.
Se realizará de acuerdo a la técnica para elaborar los mapas conceptuales, teniendo en cuenta
los aspectos fundamentales de la beta oxidación de los ácidos grasos insaturados.
2.5 Resultados.
Los alumnos presentarán un mapa conceptual de la beta oxidación de los ácidos grasos.
2.6 Cuestionario
1) Elabore un gráfico de la beta oxidación de un ácido graso insaturado.
2) Grafique la configuración cis y trans, indicando la importancia que tiene en la alimentación.
3) ¿Qué ocurre con el propil CoA producto final de la beta oxidación de los ácidos grasos de
cadena impar?
Fuentes de Información.
a. Stryer l , Berg JM. Bioquímica. 5ta ed. Barcelona. Reverte. 2003.
b. Devlin TM. Bioquímica . 6ª ed. Barcelona. Reverte. 2014.
c. Lehninger .Principios de Bioquímica. 7ª ed. Barcelona. Omega. 2016.
d. Mathews CK, Van Holde KE Bioquímica. 5a ed. Barcelona. Addison Wesley. 2016.

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III. PRACTICA Nº 3
DETERMINACION DE COLESTEROL EN SUERO SANGUINEO
3.1 Marco teórico.

El colesterol es el esteroide más abundante en el organismo humano. Es un componente
habitual de la dieta (carne, leche, huevos), pero fundamentalmente el, organismo lo sintetiza
en el hígado. Es importante mencionar que una de sus principales funciones biológicas es la de
regular la fluidez de las membranas celulares y la de constituirse como uno de los precursores
de hormonas esteroideas, gestágenos y corticoides, andrógenos, estrógenos, vitaminas y otros
compuestos biológicos. Se desplaza por la sangre en partículas denominadas lipoproteínas, que
contienen tanto lípidos como proteínas. El organismo cuenta con tres tipos de lipoproteinas:
Lipoproteinas de baja densidad (LDL): Contienen cerca del 70 por ciento del colesterol del
suero y favorecen los trastornos cardiovasculares
Lipoproteinas de baja densidad (HDL): Acumulan el 20 por ciento del colesterol total y tienen
un efecto protector
Lipoproteinas de muy baja intensidad (VLDL): Contienen en torno al 10 por ciento del
colesterol total del suero y la mayor parte de los triglicéridos
La principal consecuencia del exceso de colesterol en sangre es el desarrollo de enfermedades

coronarias (EC). Que son frecuentes en las poblaciones cuya alimentación es rica en grasas
saturadas.La hipercolesterolemia está estrechamente ligada a la arterosclerosis, una alteración
degenerativa que ataca a las arterias en las que se forman placas de ateroma, que
obstruyen total o parcialmente los vasos de las arterias ocasionando una falta de riego. Si la
falta de riego se localiza en las arterias coronarias que irrigan el corazón se puede originar una
angina de pecho o un infarto de miocardio. Si se produce en las arterias cerebrales son
frecuentes las hemorragias y trombosis cerebrales. Cuando la obstrucción se localiza en las
extremidades puede favorecer la gangrena de un miembro y, en el peor de los casos, su
amputación.
3.2 Competencia.
Determina colesterol en el suero sanguíneo. Concientiza el riesgo que genera concentraciones

elevadas de colesterol (ateroma ) o bajas (afección hepática o tiroidea).
3.3 Materiales y equipos.

Equipos y materiales.
a. Espectrofotámetro.
b. Centrifuga.
c. Baño María regulado a 37 ºC.
d. Jeringas descartables x 5mL. con aguja hipodérmica estéril.
e. Algodón, ligadura.
f. Tubos de prueba de 13 x 100mm.
g. Pipetas de 10 mL.
h. Micropipetas de 0 a 50 uL.
i. Punteras amarillas, gradillas y baguetas.
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Reactivos.
j. Set de reactivos para colesterol (enzimático).
k. Muestra biológica.
l. Alcohol medicinal.
3.4 Procedimiento.
a. En una gradilla disponer tres tubos de prueba de 13 x 100mm, rotularlos con P (problema), S
(Standard ) y B (blanco) luego proceder como se indica en la siguiente tabla:
REACTIVOS P S B
Suero del paciente 10 uL - -
Standard de colesterol 200mg/dl - 10uL -
Agua destilada - - 10 uL
Reactivo enzimático 1mL 1mL 1mL
b. Reposo x 20 minutos
c. Leer a 505 nm, llevando el espectrofotómetro a cero en absorbancia con el blanco de
reactivos.
d. Para obtener la concentración de colesterol de la muestra problema, se aplica la siguiente
fórmula.
mg de colesterol/ dL =
absorbancia del problema X 200
absorbancia del standard
3.5 Resultados.
Concentraciones de colesterol, en mg/dL, obtenidos por los alumnos en las muestras
analizadas.
3.6 Cuestionario.
a. Describa como se realiza la biosíntesis del colesterol.
b. ¿Qué ocurre cuando el LDL-colesterol no es fagocitado?
c. Mencione cuatro métodos para la determinación de colesterol en sangre, indicando ¿cuál?
de ellos es el más exacto y porque. y ¿Porqué?
d. Mencione lo requisitos indispensables que debe observar una persona, para que su
determinación de colesterol sea real.
e. Explicite la biosíntesis de colesterol a partir de la ingesta de carbohidratos.

b. Devlin TM. Bioquímica. 6ª ed. Barcelona. Reverte. 2014.
d. Mathews CK, Van Holde KE Bioquímica. 5a ed. Barcelona. Addison Wesley. 2016

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IV. PRACTICA Nº 4
EXPLICA EL DESEQUILIBRIO DEL METABOLISMO; OBESIDAD JUVENIL REGULACIÓN

PARA ALCANZAR EL EQUILIBRIO. SÍNDROME METABÓLICO
4.1 Marco teórico.
La obesidad es una enfermedad crónica que se encuentra presente en todos los grupos poblacionales
y con una tendencia a aumentar en función del tiempo. Las mayores prevalencias se dan en la
población adulta seguida por el grupo escolar, pre-escolar y adolescente. Los que viven en áreas
urbanas, las mujeres y los considerados no pobres son los más afectados. La obesidad ya está
presente en todo el mundo y ha sido declarada la epidemia del siglo XXI. Su presencia se relaciona
a enfermedades como la diabetes mellitus 2, la hipertensión arterial, las dislipidemias y algunos
tipos de cánceres. En los adolescentes ya se encuentra complicaciones como la resistencia a la
insulina y el síndrome metabólico. Los factores que condicionan los cambios en los estilos de vida
(patrones dietarios y sedentarismo) están cada vez más vigentes y con una tendencia a una mayor
presencia en el futuro, lo cual hace que el panorama de la obesidad se vea sombrío.
La lipogénesis en el tejido adiposo depende del metabolismo de carbohidratos y explica sus

alteraciones cuando existe algún deficit de acción insulinita. En los estados de resistencia a la
insulina, disminuye la glucolisis, principalmente en el músculo e hígado y en menor grado en el
tejido adiposo. Por esta razón es menor la síntesis de glicerolfosfato y con ello la resíntesis de
triacilglicéridos.
El síndrome metabólico está conformado por una serie de factores de riesgo, como la hipertensión
arterial, la dislipidemia, la intolerancia a la glucosa por la resistencia a la insulina y la obesidad
visceral, elevando la probabilidad de padecer enfermedad cardiovascular.
4.2 Competencia.
Explica el desequilibrio del metabolismo; obesidad, regulación y SM.
4.3 Materiales.
a. Bibliografía del silabo de Bioquímica II. manuales, etc.
b. Retroproyector. D. Videos VHS, etc.
c. Libros y revistas. C D .Power point.
d. Bibliografía de carácter científico revistas,
4.4 Procedimiento.
Se realizará de acuerdo a la técnica para elaborar los mapas conceptuales , teniendo en
cuenta los aspectos fundamentales de la obesidad y SM
4.5 Resultados.
Los alumnos presentarán un mapa conceptual de la obesidad. Regulación y SM
4.6 Cuestionario
a. Cómo se realiza la determinación del índice de masa corporal?
b. Cuáles son las hormonas que regulan el metabolismo de la obesidad?
c. Qué factores promueven síndrome metabólico?
d. Mencione seis factores que ocasionan un cuadro de síndrome metabólicoElabore un gráfico
de la regulación del metabolismo de lípidos.

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4.7 Fuentes de Información.

V. PRACTICA Nº 5
REPRESENTACION GRAFICA DEL MECANISMO DEACCION DE LAS HORMONAS A NIVEL

DE MEMBRANA Y MECANISMO DE ACCION DE LAS HORMONAS A NIVEL DE NUCLEO
5.1 Marco teórico.

Las hormonas son sustancias químicas que se caracterizan por ejercer su actividad en un lugar
diferente a donde se producen, se encuentran por lo general asociadas a una glándula endocrina,
esta libera a la hormona al torrente sanguíneo hasta que recibe la señal fisiológica adecuada. La
hormona viaja por el torrente circulatorio e interactúa con la las célula diana mediante la unión
inicial a un receptor macromolecular, situado en la membrana plasmática o en el interior de la
célula.
Para ejercer su acción, todas las hormonas deben unirse a su receptor específico, estas uniones
inician mecanismos intracelulares que conllevan las respuestas celulares. De acuerdo a su
mecanismo de acción las hormonas se dividen en dos grupos, unas de las que vamos a tratar en
esta práctica, se unen a los receptores celulares localizados en la membrana de las células diana.
Esta unión dispara uno o más de las vías de transducción que llevan a las respuestas celulares.
La interacción con el receptor de membrana es rápida y reversible. Debe existir alta afinidad y
especificidad, ya que las hormonas se encuentran en muy baja concentración a nivel sanguíneo.
Con la unión de la hormona al receptor y activación del segundo mensajero se producen señales
intracelulares que son específicas para cada receptor; son amplificadas y generan una variedad
de efectos secundarios y terciarios que modifican la función celular.
Los receptores de membrana en general presentan dominios específicos que: a.). Se unen al
ligando; b). Interactúan con sistemas efectores ya sea en forma indirecta a través de la proteína
G o directa por los canales del calcio; c). Tienen actividad enzimática inherente; d). Determinan
la localización en la membrana e internalización.
Las hormonas esteroideas y tiroideas actúan a nivel de núcleo, utilizando receptores

intracelulares.
Con respecto a las hormonas esteroídeas, estas se producen en células específicas de los
testículos, la corteza adrenal, ovarios y placenta. Los testículos son los encargados de secretar,
principalmente, testosterona (andrógenos), la corteza adrenal produce la aldosterona, cortisol
y la DHEA (dehidroepiandrosterona), los ovarios producen los estrógenos que engloban el
estradiol, 4-androsteno-3, 17-diona y la progesterona, y por último esta la placenta que
también secreta estradiol y progesterona, pero además produce otra sustancia, el estriol.
Gracias a su naturaleza lipídica las hormonas esteroídeas atraviesan facilmente las membranas
de las células diana o células blanco, y se unen a las moléculas receptoras de tipo proteico,
que se encuentran en el citoplasma. De esta manera llegan al núcleo, donde actúan sobre genes
del ADN, se produce la transcripción. Las moléculas de ARNm originadas se encargan de dirigir
en el citoplasma la síntesis de unidades proteicas, que son las que producirán los efectos
fisiológicos hormonales.

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0
Las hormonas tiroideas se liberan cuando el hipotálamo secreta la hormona
liberadora de tirotropina, que estimula la hipófisis anterior para liberar TSH, que a su vez
estimula la glándula tiroides para secretar: L-tiroxina (T4) y L-triyodotironina (T3). Pequeñas
cantidades de T4 y T3 estimulan el metabolismo energético, especialmente en el hígado y en el
músculo. Estas hormonas se unen a un receptor proteico intracelular específico; el complejo
hormona-receptor activa algunos genes que codifican enzimas que intervienen en la producción
de energía, incrementando su síntesis y, por tanto, incrementando la tasa metabólica basal del
animal.
5.2. Competencia.
Representa con gráficos el mecanismo de acción de las hormonas a nivel de membrana.
5.3. Materiales.
a. Bibliografía del silabo de Bioquímica I
b. Bibliografía de carácter científico (revistas, manuales, etc.)
c. Retroproyector.
d. Videos VHS, etc
e. Libros y revistas
f. C D .Power point.
5.4. Procedimiento.
Se realizará de acuerdo a la técnica para elaborar representaciones gráficas del mecanismo de
acción de las hormonas a nivel de membrana biológica.
5.5. Resultados.
Gráfico del mecanismo de acción del glucagón.
5.6. Cuestionario.
a. Elabora un gráfico sobre el mecanismo de acción de la adrenalina
b. ¿ Cuáles son las funciones del glucagón y de la adrenalina en el organismo?.
c. Elabore un mapa conceptual de los receptores de membrana.


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1
VI. PRACTICA Nº 6
METABOLISMO DEL GLUTATIÓN Y SU ROL EN EL ESTRÉS OXIDATIVO.
El GSH está sujeto a un constante recambio en el organismo; hígado, riñones, pulmones,

corazón, intestinos y músculos son los principales órganos responsables de su homeostasis. La
captación de cada órgano o tejido depende de la actividad de la enzima gamma glutamil
transpeptidasa (γ GT o GGT) localizada en la membrana celular.
Dentro de las células el GSH se encuentra principalmente en mitocondrias, retículo
endoplásmico y núcleo y es aquí donde se observa un aumento de su concentración en la
apoptosis o muerte celular programada.
6.2. Competencia.
Interpreta la acción del gutatión y la acción sobre el estrés oxidativo.
6.3. Materiales.
a. Bibliografía del silabo de Bioquímica II.
c. Retroproyector.
d. Videos VHS, etc
e. Libros y revistas
6.4. Procedimiento.
Se realizará de acuerdo a la técnica para elaborar representaciones gráficas del mecanismo
de acción de las hormonas a nivel de membrana biológica
6.5. Resultados.
Mapa conceptual del metabolismo del glutatión y su rol como antioxidante.
6.6. Cuestionario.
1. ¿Qué es el glutatión? diseñe su estructura.
2. ¿Cuál es su papel frente al metabolismo de los eritrocitos?
3. ¿Qué efectos ocurre debido a la deficiencia en las células?
4. Expliqué la relación entre el glutatión y la NADPH


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VII: PRACTICA Nº 7
MAPA CONCEPTUAL DEL METABOLISMO BIOQUÍMICO DE LA VITAMINA C . Y

ANTIOXIDANTES.
El radical libre es una molécula que en su estructura atómica presenta un electrón desapareado
en el orbital externo, dándole una configuración especial que genera un alta una lata
inestabilidad. Un radical libre para lograr un equilibrio químico sustrae un electrón a cualquier
molécula vecina (carbohidratos proteínas ácidos nucleicos lípidos o derivados de ellos) alterando
su estructura y convirtiéndola a la vez en otro radical libre con diversos grados de agresividad
oxidativa se genera una reacción en cadena (estrés oxidativo)
La vitamina C se encuentra en los leucocitos, glándulas adrenales compartimientos del ojo y en
la hipófisis. El ascorbato tiene la capacidad de reaccionar con metales de transición com Fe (III)
y Cu (II) generando como consecuencia de ello radical hidroxilo, también ejerce el efecto
prooxidante por su propiedad de reducir el Fe (III) a Fe (ii), elemento que puede reaccionar con
el peróxido de hidrógeno y generar radicales hidroxilo
7.2. Competencia.
Conceptualiza la clasificación de las vitaminas y lo esenciales que son para la vida del ser
humano
7.3. Materiales.
a. Revista o Journal of Bichemistry and Chemistry Biological
b. Bibliografía de carácter científico (revistas, manuales, etc.
c. Videos VHS, etc
d. Libros y revistas.
e. C D .Power point
7.4. Procedimiento.
Se realizará de acuerdo a las normas de aprendizaje establecidas por la Universidad, donde
los alumnos elaborarán de acuerdo a técnicas establecidas un mapa conceptual y tablas de
aprendizaje
7.5. Resultados.
Elaboración de tablas de la funciones de la vitamina C
Mapa conceptual de los flavonoides y su efecto antioxidante
7.6. Cuestionario.
1. Explique el mecanismo de generación de los radicales libres?
2. Porque el oxígeno es una molécula paramagnética?

1
3
3. Explique cómo se forma singulete?
4. Mencione 5 característica del radical hidroxilo
5. ¿Cuáles son las diferencias entre radical ascórbico y dehidroascórbico?

a. Borrego ros F. Propiedades de los flavonoides cítricos naranja y salud http://www.
ediho.es / horticom/mews
c. Lehninger .Principios de Bioquímica.7ª ed. Barcelona. Omega. 2016.
d. Posada M Pineda V, Agudelo. Los antioxidantes de los alimentos y su relación con las
enfermedades crónicas pdf, 12-15
e. Guija Poma Radicales libres y envejecimiento Boletín de la Sociedad química del Perú.
2000
http://www.geocities.com/tenisoat/vitaminas.htm
http://www.tuotromedico.com/temas/vitaminas.htm
http://www.uned.es/peanutricion-y-dietetica-I/guia/guianutr/compo40.htm

1
4
VIII. PRACTICA Nº 8
DETERMINACION ESPECTROFOTOMETRICA DE ACIDO URICO
El ácido úrico es el producto final del metabolismo de las purinas, se forma principalmente en
el hígado a partir de los núcleos celulares animales como la carne o el pescado, la mayor parte
del ácido úrico se excreta por el riñón, y algo por el sistema intestinal. Cuando se incrementa
la destrucción de los tejidos (como en diversos tipos de cáncer) el ácido úrico aparece elevado
en sangre, aunque la causa más común de su elevación es la gota, por lo general frente a una
ingesta excesiva de carne, no se llega a eliminar en su totalidad, y se acumula en las
inmediaciones del cartílago produciendo fuertes dolores.
8.2. Competencia.
Determina ácido úrico en el suero sanguíneo.
8.3. Material y equipos.
8.3.1. Equipos y materiales.

a. Espectrofotómetro
b. Centrifuga.
c. Baño de María regulado a 37 ºC.
d. Jeringas descartables x 5mL. con aguja hipodérmica estéril de 20 x 1“.
e. Algodón, ligaduras de jebe, baguetas.
f. Tubos de prueba de 13 x 100mm
g. Pipetas de 10 mL; micropipetas de 0 a 50 uL, punteras amarillas. h. Gradillas.
8.3.2. Reactivos.
a. Set completo de reactivos para determinar ácido úrico
b. Standard de ácido úrico.
c. Alcohol medicinal.
d. Agua destilada.
8.4. Procedimiento.
a. En una gradilla disponer 3 tubos de prueba de 13 x 100mm., rotularlos con ( S )

Standard; ( P ) problema y (B) blanco.
b. Luego proceder como sigue:
REACTIVO Y OTROS

1
5
Agua destilada mL. 0.25 - -
Standard de trabajo de Acido úrico mL. - - 0.25
Suero. mL. - 0.25 -
Reactivo de reacción 1 1 1
c. Mezclar y dejar 10 minutos en reposo.
d. Leer en el espectrofotómetro a 540 nm.

e. Para obtener la concentración de ácido úrico , se aplica la siguiente fórmula.
Ácido úrico mg /dl = lectura del problema x 10
Lectura del standard
Valores normales:
Hombres: 3 a 7 mg de ácido úrico/ dL.
Mujeres: 2 a 6 mg de ácido úrico /dL.
8.6. Cuestionario.
a. Explique a que se debe la coloración azul que se obtiene al final de la reacción, ocurrida
en la determinación de ácido úrico..
b. Enumere las causas de un incremento elevado de ácido úrico, no debidas a una patología.
c. ¿Cómo debe proceder para determinar ácido úrico en casos de sueros lipémicos.
d. ¿Por qué no utiliza la longitud de onda de 650nn para leer la reacción coloreada?
e. Cómo procedería para determinar ácido úrico utilizando UV.
8.7. Fuentes de Información


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IX. PRACTICA Nº 9
REGULACIÓN DE LA BIOSÍNTESIS DE LOS NUCLEÓTIDOS PURINICOS

Y DE LAS PIRIMIDINICAS
9.1 Marco teórico.
Las sintetasas y las transferasas son contoladas por retroalimentación por los nucleótidos
monofosfatos finales IMP, AMP Y GMP- es por ello importante revisar la:
• Regulación coordinada de la biosíntesis de los nucleótidos púricos

• Obtención de cantidades equimolares de nucleótidos de adenina y guanina
• Regulación de los niveles intracelulares (niveles de ATP & GTP)
• Importancia: los niveles ε intracelulares regulan muchos procesos metabólicos
• Inhibición competitiva por producto final la Importancia de evitar la acumulación
Crossestimulación de la síntesis de ATP y GTP
• Importancia: obtención de cantidades equimolares de ambos nucleótidos: Regulación
recíproca de sustratos y el GTP está implicado en la síntesis de ATP y viceversa
9.2 Competencia.
Diferencia mediante esquemas del metabolismo de las Pirimidinas y purinas Elabora
un mapa conceptual de las regulación de la biosíntesis delos nucleótidos de purina
y Pirimidinas.
9.3 Materiales.
• Bibliografía del silabo de Bioquímica.
• Bibliografía de carácter científico (revistas, manuales, etc.)
• Retroproyector
• Videos VHS, etc
• Libros y revistas.
• C D .Power point.
9.4 Procedimiento
Se realizará de acuerdo a la técnica para elaborar los mapas conceptuales, teniendo en
cuenta los requisitos conceptuales del metabolismo de purinicos y las pirimidinicos.
9.5 Resultados
Mapa conceptual del metabolismo de purinicos y las pirimidinicos elaborado y expuesto
por los alumnos.
9.6 Cuestionario.
1. ¿Cómo se lleva a cabo la regulación coordinada de la biosíntesis de los nucleótidos
púricos?
2. Obtención de cantidades equimolares de nucleótidos de adenina y guanina
9.7 Fuentes de Información.


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X. PRACTICA Nº 10
10. MAPA CONCEPTUAL DE LA REPLICACIÓN DEL ADN

Comprobado que el ADN era el material hereditario y, conocida su estructura, se procedió a
determinar como el ADN copiaba su información y, en que forma se expresaba en el fenotipo.
La replicación del ADN, se produce una sola vez en cada generación celular, requiere de muchos
enzimas, y gran cantidad de energía en forma de ATP. La replicación del ADN en el ser humano
se lleva a cabo a una velocidad de 50 nucleótidos por segundo, en procariotas a 500/segundo.
Los nucleótidos tienen que se armados y estar disponibles en el núcleo conjuntamente con la
energía para unirlos.
La iniciación de la replicación siempre ocurre en un cierto grupo de nucleótidos, el origen de
la replicación, necesita de aproximadamente 9 enzimas, entre las que se destacan las enzimas
helicasas que rompen los puentes hidrógeno,y las topoisomerasas que alivian la tensión y las
proteínas de unión a cadena simple que a mantienen separadas las cadenas abiertas.
Producida la apertura de la molécula, se origina la "burbuja de replicación" en donde se
encuentran las "horquillas de replicación" . La ADN polimerasa permite que los nuevos
nucleótidos entren en la horquilla y se enlazan con el nucleótido correspondiente de la cadena
de origen (A con T, C con G). Los procariotas presentan una sola burbuja de replicación,
mientras que los eucariotas tienen múltiples. El ADN se replica en toda su longitud por
confluencia de las "burbujas".
Como las cadenas del ADN son antiparalelas, la replicación procede solo en la dirección 5' to
3' en ambas cadenas, numerosos experimentos mostraron que, una cadena formará una copia
continua, mientras que en la otra se formarán una serie de fragmentos cortos conocidos como
fragmentos de Okazaki . La cadena que se sintetiza de manera continua se conoce como cadena
adelantada y, la que se sintetiza en fragmentos, cadena atrasada.
10.2. Competencia.
Conceptualiza como se realiza el mecanismo de replicación de la molécula de ADN.
10.3. Materiales.
a. Bibliografía del silabo de Bioquímica.
c. Retroproyector
d. Videos VHS, etc
e. Libros y revistas.
10.4. Procedimiento
Se realizará de acuerdo a la técnica para elaborar los mapas conceptuales, teniendo en cuenta
los elementos que intervienen en la elaboración de un mapa conceptual.
10.5. Resultados.

1
8
Mapa conceptual de la replicacióndel ADN, elaborado y expuesto por los
alumnos.
10.6. Cuestionario.
a. ¿ Qué es el ADN mitocondrial? Importancia del ADN mitocondrial
b. Mencione la diferencia entre la replicación delADN en eucariontes y procariontes.
c. Describa la función de la integrasa enel ciclo de la replicación del VIH


1
9
XI. PRACTICA Nº 11
11.ESQUEMATIZACION DE LA TRANSCRIPCION Y TRADUCCION

11.1. Marco teórico
El ADN tiene la información para producir las proteínas de la célula. Ya que muchas de estas
proteínas funcionan como enzimas en las reacciones químicas que tienen lugar en la célula,
todos los procesos celulares dependen, en última instancia, de la información codificada en
el ADN.
En la traducción hay una molécula de ARN que interviene como intermediaria, de tal manera
que en el proceso de expresión de la información que se encuentra en los genes se perciben
dos etapas. Cuando una parte de la información contenida en la molécula de ADN debe ser
utilizada en el citoplasma de la célula para la construcción de las proteínas, ella es transcrita
bajo la forma de una pequeña cadena de ácido ribonucléico: el ARN mensajero (ARNm)
utilizando las mismas correspondencias de base que el ADN visto anteriormente, pero con la
diferencia ya señalada de que la timina es reemplazada por el uracilo. Uno a uno se van
añadiendo los ribonucleótidos trifosfato en la dirección 5´a 3´, usando de molde sólo una de
las ramas de la cadena de ADN y a la ARN polimerasa como catalizador
La trascripción no puede tener lugar salvo que dos secuencias particulares estén presentes en
el ADN: la promotora al comienzo de la secuencia, que es distinta en las eucariotas y en los
procariotas, y la de corte propiamente dicha -conocida como cola de poli A (compuesto de
hasta 200 nucleótidos de adenina)-, que en las procariotas sólo existe al final de la secuencia.
Las eucariotes presentan en esta región una señal que induce la cópula de un precursor más
grande.
La información genética llevada por el ARNm deberá ser traducida en el citoplasma por una
fábrica de proteínas: el ribosoma (éste está compuesto por varios tipos de proteínas más una
forma de ARN, denominado ARN ribosómico). En el ribosoma no se podrá comenzar la lectura
de un mensajero mas que por una secuencia particular, distinta en las eucariotes y en las
procariotas. Asido el ARNm en el ribosoma, el tercer tipo de ARN -ARN de transferencia
(ARNt)- entra en acción.
11.2. Competencia.
Esquematiza la transcripción y la traducción, conceptualizando su importancia biológica .
11.3. Materiales.
a. Bibliografía del silabo de Bioquímica .
c. Retroproyector
d. Videos VHS, etc
11.4. Procedimiento.
Se realizará de acuerdo a la técnica para esquematizar la transcripción y traducción, para
luego proceder a la presentación del trabajo.

2
0
11.6.
Cuestionario.
a. Por qué se afirma qué el código genético es degenerado.
b. Fundamente porqué el código genético mitocondrial es diferente del nuclear y se
transmite de manera independiente.
c. Cuál es el primer proceso de la expresión génica.?
d. Describa en que concicte la activación de los aminoácidos.


2
1
XII. PRACTICA Nº 12
12. DETERMINACION DE BILIRRUBINA TOTAL

Y FRACCIONADA SERICA

La vida del hematíe es de 120 días, transcurridos los cuales las células del sistema retículo
endotelial, especialmente del bazo, hígado y médula fagocitan a éstos hematíes liberando
hemoglobina, la cual es catabolizada y convertida en biliverdina, la misma que al reducirse se
convierte en bilirrubina. La bilirrubina se une a la albúmina, y así es transportada desde las
fuentes extrahepáticas, a las sinusoides, el complejo bilirrubina- albúmina atraviesa las
microvellosidades sinusoidales pasando a la célula hepática. La albúmina se separa y la
bilirrubina por acción de los glucorónidos se convierte en diglucorónido de la bilirrubina. La
bilirrubina no conjugada y los glucorónidos de la bilirrubina son transportados a la sangre
La conjugación para la formación del glucorónido es un prerrequisito para la eliminación de la

bilirrubina en la bilis, y sea un factor limitante en el transporte la bilirrubina conjugada se
elimina más rápido que la no conjugada
12.2. Competencia.
Determina bilirrubina total y fraccionada en suero, conceptualizando su
importancia biológica.
12.3. Materiales y equipos.
12.3.1. Equipos y materiales.

a. Espectrofotómetro.
b. Centrifuga
c. Baño de María a 37ºC.
d. Jeringas descartables d x 5mL, con aguja hipodérmica descartable Nº 20 x 1 “.
e. Tubos de prueba de 13 x 100mm.
f. Micropipetas de 0a 50uL; punteras de color amarillo.
g. Pipetas de 1, 5 y 10 mL.
h. Gradillas; baguetas; ligaduras.
12.3.2. Reactivos.
a. Reactivo A: Acido sulfanilico al 0.5 % con 6 mL de HCL
b. Nitrito de sodio al 2%.
c. Reactivo B. Se prepara en el momento de usar mezclando 10 mL. de Reactivo
A con 0.3 mL. de nitrito de sodio.
d. Standard de bilirrubina de 5 mg/dL.
e. Metanol. G.R.
f. Alcohol medicinal.
g. Agua destilada.

2
2
a. En una gradilla disponer 4 tubos de prueba rotulados con las letras B ( blanco BD (
bilirrubina directa ) , BT ( bilirrubina total ) y S ( standard ) luego proceder como
sigue:
B S BD BT
Suero Ml 0.3 - 0.3 0.3
Std bilirrubina 5 mg /dL, mL. - 03 - -
Agua destilada ml. 4.5 - 4.5 -
Metanol - 4.5 - 4.5
Reactivo A mL 05 - - -
Reactivo B mL. - 0.5 0.5 0.5
b. Mezclar y dejar en reposo 5 minutos.
c. Leer en el espectrofotómetro a 525 nm.
d. Para obtener la concentración de la bilirrubina y fracciones se aplican las siguientes
fórmulas.
mg /dL de BT= lectura BT x 5 ; mg / dL de BD = lectura de BD x 5

Lectura S lectura de S
mg / dL de BI = BT - BD
12.6. Cuestionario.
a. Describa el fundamento y las reacciones que ocurren en la determinación de bilirrubina. Porqué se
utiliza metanol.
b. De qué otras fuentes que no sea los hematíes envejecidos , proviene la bilirrubina.
c. Qué concentraciones séricas de bilirrubina puede tener un neonato con Rh positivo, con el hecho
de que la madre tenga sangre Rh negativo.
d. Ud. Determinaría bilirrubina en un suero hemolizado. ¿ Por qué ?.


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3
XIII. PRACTICA Nº 13
REPRESENTAR GRAFICAMENTE LA TRANSMISION DE UN IMPULSO

NERVIOSO A TRAVES DE UNA SINAPSIS
Un neurotransmisor es una sustancia producida por una célula nerviosa capaz de alterar el
funcionamiento de otra célula en forma breve o durable, a través de la ocupación de
receptores específicos y , por la activación de ciertos mecanismos. La transmisión del impulso
de una neurona a otra o a una célula efectora no neuronal depende de la acción de
neurotransmisores (NT) específicos sobre receptores también específicos.
La transmisión del impulso nervioso tiene dos componentes: a). La transmisión de un potencial
de acción dentro de la neurona, a través de la polarización o despolarización continúa de la
membrana y, b). La transmisión del impulso a través de una unión sináptica, de una neurona
a otra o a una célula glandular o muscular.
La neurotransmisión implica generalmente la liberación de un mensajero químico el

neurotransmisor que desde la célula pre sináptica, y su unión a receptores de la célula pos
sináptica (músculo, nervio o glándula ). Las sinapsis que emplean como neurotransmisor la
acetilcolina (sinapsis colinérgica) son las más conocidas. La acetilcolina se sintetiza en los
bulbos terminales axónicos, una vez liberada y unida a los receptores, el neurotransmisor se
hidroliza por la acetilcolinesterasa, generando colina. La degradación de la colina restablece
el potencial en reposo en la membrana pos sináptica.
Para preparar la sinapsis para otro impulso las vesículas sinápticas vacías son devueltas al
bulbo terminal axónico donde se rellenan de acetilcolina. Está bien establecido que la
acetilcolina es el transmisor a nivel de la unión neuromuscular y en muchas áreas del SNA.
13.2. Competencia.
Conceptualiza la neurotransmisión de un impulso nervioso a través de la sinapsis colinérgica
13.3. Materiales.
a. Bibliografía del silabo de Bioquímica II.
b. Bibliografía de carácter científico (revistas, manuales, etc.).
c. Retroproyector.
d. Videos VHS, etc.
Para la realización de esta práctica al alumno se le tomara una prueba exploratoria, sobre el
mecanismo de acción de los neurotransmisores y de sus receptores. El docente debe de
reforzar los puntos clave de la neurotransmisión, luego el alumno procederá a graficar la
transmisión del impulso nervioso, utilizando la sinapsis colinérgica.
13.6. Cuestionario.
a. Describa cómo se produce la liberación del neurotransmisor.
b. En la periferia cómo se establece la sinapsis.
c. Cuáles son los aminoácidos que transforman a neurotranasmisores?
d. Expliqué como ocurre la derivación del ácido gamma aminobutirico principal NT
inhibitorio cerebral.
e.
2
4
http://www2.uah.es/tejedor_bio/bioquimica_ambiental/tema12/tema%2012-
toxicodinamia.htm
http://omega.ilce.edu.mx:3000/sites/ciencia/volumen3/ciencia3/130/
html/sec_10.html

2
5
XIV. PRACTICA Nº 14
REPRESENTAR GRÁFICAMENTE DE LA INTEGRACIÓN METABÓLICA

EL METABOLISMO DE TEJIDO ADIPOSO, MUSCULAR E HÍGADO.

La alteración de los valores normales de la concentración plasmática de la glucosa se asocia a
una serie de manifestaciones patológicas: la hipoglucemia puede motivar la pérdida de la
conciencia y, en situaciones críticas, la muerte —a causa de la dependencia del cerebro de la
glucosa como fuente energética—. Por el contrario, la hiperglucemia sostenida, como ocurre en
la diabetes, origina desequilibrios metabólicos e induce daños en los tejidos, a través de la
glucosilación de las proteínas, ocasionando insuficiencia renal, ceguera y lesiones
cardiovasculares, entre otras enfermedades. Para adaptarse a las distintas situaciones
fisiopatológicas que alteran la glucemia, el organismo ha desarrollado una serie de mecanismos
homeostáticos intrínsecos que le permiten mantener los valores de la concentración de glucosa
en la sangre en el margen fisiológico que asegura nuestra salud. Para la coordinación de esos
mecanismos, el metabolismo de cada órgano y tejido debe estar estrictamente regulado e
integrado con el del resto del organismo. En el ciclo alimentación-ayuno (estados: postabsortivo,
ayuno y realimentación) las hormonas pancreáticas insulina y glucagón son las principales señales
que alertan a las células del estado de la glucemia, para que, mediante un metabolismo
integrado, se mantengan disponibles las fuentes energéticas y los precursores biosintéticos que
el organismo necesita para sobrevivir.
14.2. Competencia.
Esquematiza gráficamente la integración metabólica y el metabolismo de tejido renal, adiposo,
muscular e hígado, conceptualizando su importancia biológica.
14.3. Materiales.
g. Bibliografía del silabo de Bioquímica II.
h. Bibliografía de carácter científico (revistas, manuales, etc.).
i. Retroproyector.
j. Videos VHS, etc.
k. Libros y revistas.
l. C D .Power point.
Para la realización de esta práctica al alumno se le tomara una prueba exploratoria, sobre el
metabolismo de tejido renal, adiposo, muscular e hígado, El docente debe de reforzar los puntos
claves de las rutas metabólicas que sufren el organismo.
14.5. Cuestionario
1. ¿Cómo explica que una dieta rica en glúcidos tenga como consecuencia un aumento TAG en
el tejido adiposo?
2. ¿Porque durante un ayuno se produce lipólisis en tejido adiposos y aumentan los Cuerpos
cetónicos en sangre?
3. Expliqué por qué el músculo esquelético en ejercicio anaeróbico no realiza Degradación de

ácidos grasos para la obtención de energía?
2
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4. ¿Por qué luego de un entrenamiento intenso es importante la reposición

alimentaria con abundante proteínas acompañadas de glúcidos?
14.6. Fuentes de Información


2
7

20.-FB5076 - Guia de BIOQUIMICA II

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