LABORATORIO DE FUNDAMENTOS DE BIOLOGÍA

GUÍA PRÁCTICA N° 2

OBSERVACIÓN DE BIOMOLECULAS (CARBOHIDRATOS, LIPIDOS Y PROTEINAS)

DOCENTE: ORIANA HEREDIA GÓMEZ – e-mail: oheredia@est.uniatlantico.edu.co

INTRODUCCIÓN

Toda materia viva está compuesta por un grupo reducido de moléculas combinadas entre sí: el
agua y las sales minerales, los hidratos de carbono (carbohidratos), los lípidos, las proteínas, los
ácidos nucleicos, las enzimas, las vitaminas y las hormonas.

Los carbohidratos típicos son azucares, almidones y celulosa. Los almidones y azucares sirven de
combustible para la célula (proveedores de energía), y la celulosa es un compenentes estructural
de las plantas. Los carbohidratos se clasifican como: Monosacáridos o azucares simples (glucosa),
los disacáridos o azucares dobles (sacarosa), y los polisacáridos que forman largas cadenas de
monosacáridos (almidón).

Los lípidos son grupos heterogeneos de compuestos que poseen una consistencia grasosa o
aceitosa, siendo insolubles en agua y solubles en disolventes orgánicos (éter, cloroformo, benceno,
etc). Entre los lípidos de importancia biológica se encuentran las grasas neutras, fosfolipidos,
esteroides, carotenoides y ceras. Son combustibles importantes, son componentes estructurales de
las membranas celulares. Producen el doble de energía que los carbohidratos.

Las proteínas son moléculas complejas formadas por unidades simples llamadas aminoácidos, los
cuales están unidos por enlaces peptidicos. Estos son esenciales en la química de la vida y son
componentes estructurales de las células y tejidos. De estas sustancias dependen el crecimiento,
la restauración y el mantenimiento de los organismos. Las proteínas son específicas de cada
especie.

Los ácidos nucleicos participan en la transmisión de información génetica y en la determinación de

las proteínas que una célula debe producir. Estos son: ácido desoxirribunocleico (ADN) y el ácido
ribunocleico (ARN). El ADN es el material hereditario de las células y contienen instrucciones para
la producción de todas las proteínas que el organismos necesita. Los ácidos nucleicos son
polímeros de nucleótidos. Los nucleótidos son unidades moleculares que constan de un azúcar de
cinco carbonos (pentosa), ya sea ribosa o una desoxirribosa; un grupo fosfato; y una base
nitrogenada, que puede ser una purina de doble anillo o una pirimida de anillo simple.

OBJETIVOS:

1. Identificar las características químicas de las biomoleculas: carbohidratos, lípidos y

proteínas, como moléculas importantes en la estructura de los seres vivos a través de
pruebas colorimétricas.

MATERIALES:

1. Bata.
2. Guía de laboratorio.
3. Un huevo de gallina.
4. Una pera
5. Un rallador.
6. Un coladdor.
7. 30 ml de aceite de cocina.
8. Una papa.
 9. Una manzana.
10. 10 ml de leche liquida.
11. Kit solicitado al inicio de semestre.
12. Tubos de ensayo 19 de 15 ml por grupo (dotación universidad).
13. Pipetas Pasteur, 7 para todos (dotación universidad)
14. Gradilla para tubos de ensayo (dotación universidad).
15. Estufa (dotación universidad).
16. Beaker 500 ml (dotación universidad).
17. Reactivo de Biuret, 1 ml por grupo (dotación universidad).
18. Ácido nitrico concentrado, 1 ml por grupo (dotación universidad).
19. Reactivo Benedict, 5 ml por grupo (dotación universidad).
20. Solución de almidón al 1%, 1 ml por grupo (dotación universidad).
21. Lugol, 1 ml por grupo (dotación universidad).
22. Butanol, 2 ml por grupo (dotación universidad).
23. Reactivo Sudan IV, 1 porción por grupo (dotación universidad).

MÉTODO:

1. Observe los siguientes videos guías:

- https://www.youtube.com/watch?v=iHK9jkfdkdM
- https://www.youtube.com/watch?v=VmXQq67KpMs

2. Ensayos colorímetricos.
En esta práctica se realizarán ensayos colorímetros para identificar la presencia de
carbohidratos, lípidos y proteínas, escogiendo algunos reactivos específicos que permitirán
determinar la presencia de estos compuestos mediane cambios de color observables.

- Observa el siguiente video: https://www.youtube.com/watch?v=w11JvF3SPYA

2.1. Ensayos con sustancias conocidas:

a) Prueba con reactivo Benedict para cabohidratos (almidones y azucares):
 Raye un poco de pera y coloque una porción en un tubo de ensayo,
agreguele al tubo 10 gotas de agua y 1 ml de reactivo de Benedict.
Coloque el tubo en un vaso químico con agua hirviente (baño maría) por
30 segundos. Rotule el tubo, observe y describa, tomando evidnecias para
el informe.
 En un tubo de ensayo agregue 1 ml de solución de almidón al 1%
(MEZCLE BIEN ANTES DE TOMAR EL ALMIDON). Adicione unas gotas
de solución de Lugol. Rotule el tubo, observe y describa, tomando
evidnecias para el informe.

b) Prueba para lípidos:

 Coloque 10 ml de aceite en un tubo de ensayo, agregue 2 ml de butanol,
agite bien. Rotule el tubo, observe y describa, tomando evidnecias para el
informe.
 En un tubo de ensayo coloque 10 ml de eceite y trate de mezclarlo con 10
ml de agua. Rotule el tubo, observe y describa, tomando evidnecias para
el informe.
 En un tubo de ensayo coloque 5 ml de aceite y agregue una pequeña
cantidad de Sudan IV, más 5 ml de agua. Agite Rotule el tubo, observe y
describa, tomando evidnecias para el informe.

c) Prueba de Biuret y Xantoproteica (ácido nítrico concentrado) para proteínas:

 Coloque 1 ml de albúmina de huevo en un tubo de ensayo y agregue 3 a 5
gotas del Reactivo de Biuret, (PRECAUCION: El reactivo de Biuret
 contiene hidróxido de sodio al 10%, puede quemar la piel y ropa).
Conserve este tubo de ensayo en la gradilla. Rotule el tubo, observe y
describa, tomando evidnecias para el informe.
 En un tubo de ensayo agregue 1 ml de albúmina y 3 gotas de ácido nítrico
concentrado (PRECAUCION: El ácido nítrico puede producir fuertes
quemaduras). Conserve este tubo de ensayo en la gradilla. Rotule el tubo,
observe y describa, tomando evidnecias para el informe.

2.2. Observe los siguientes vídeos que orientan las actividades en el laboratorio.
- Glucidos y proteinas: https://www.youtube.com/watch?v=_GRBsQRlTuo
- Lípidos: https://www.youtube.com/watch?v=Dsx00q1voC4
- Ácidos nucleicos: https://www.youtube.com/watch?v=YZbJ38cPyfE

2.3. Ensayo con sustancias problema:

a) Una vez que se han hecho las pruebas preliminares y cuenta con cuatro tubos de
ensayo rotulados con los resultados de los ensayos preliminares, proceda a llenar la
siguiente tabla usando sustancias como leche, manzana y papa. Para esto prepare
extracto de papa y manzana en beakers separados. Pele la papa y la manzana,
macere con agua de grifo y filtre para contener el extracto.
Utilice la tabla adjunta para anotar sus resultados con cada sustancia. Se requieren
cuatro muestras para cada reactivo a probar. Anote sus resultados en términos de
positivo (+), si el color obtenido es igual a los del as pruebas preliminares, negativo (-)
si el color no es igual al obtenido en las pruebas preliminares o dudoso (?) si no tiene
certeza del parecido del color. observe y describa, tomando evidnecias para el informe

Guía para la reflexión:

1. ¿A qué se deben los cambios de color?

2. En el caso de la muestra sometida a calor ¿Por qué debe llevar el tubo de ensayo al calor?
3. ¿Qué sustancia problema de las utilizadas contiene todos las macromoléculas estudiados?
4. ¿Para qué son usados los reactivos de Millón, Sakaguchi, Molish y Sullivan?.

LITERATURA SUGERIDA COMO CONSULTA

1. Freeman, S. 2011. Biological Science. 4 th edition Person Editorial. New York. 1122 p
2. Información disponible en la web.