BIOTECNOLOGIA DE ENZIMAS

BIOCATALIZADOR

Conjunto de sustancias biolgicas capaces de transformar muchas molculas de sustrato en producto sin modificarse ellas mismas.

TIPOS DE CATALIZADORES:

enzimas aislados clulas vivas clulas muertas (orgnulos celulares)

PROPIEDADES DE INTERS DE LOS BIOCATALIZADORES

VENTAJAS:
1. 2.

3.
4. 5. 6. 7.

Eficacia. Catalizar muchos ms tipos de reacciones. Especficas en cuanto al tipo de reaccin. Son operativas en condiciones muy suaves. Requieren menores aportes energticos. Se pueden utilizar varias enzimas en combinacin. Ocupan un espacio pequeo.

PROPIEDADES DE INTERS DE LOS BIOCATALIZADORES

DESVENTAJAS:
1. 2. 3. 4.

Mecanismos de regulacin

Requerimiento de cofactores.
Falta de estabilidad en condiciones de operacin.

Son costosas de purificar.

ELECCIN DE BIOCATALIZADOR:

CLULAS O ENZIMAS?

Transformacin compleja con mltiples pasos y regeneracin de cofactores CLULAS

Transformacin con pocos (3) pasos ENZIMAS

VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LAS CLULAS FRENTE A LAS ENZIMAS AISLADAS EN LAS BIOTRANSFORMACIONES
Clulas Ventajas Baratas Desventajas Reacciones secundarias Enzimas aisladas Ventajas No reacciones secundarias Desventajas Caras

Capaces de reproducirse
Regeneran coenzimas

Problemas de transporte masivo

Rendimiento limitado en el espacio y el tiempo

No problemas de transporte masivo

Alto rendimiento en el espacio y el tiempo

No son capaces de reproducirse

Difcil regeneracin de coenzimas

Adecuadas para reacciones en cadena

Dificultad de proceso continuo (posibilidad de pirgenos)

Reproducibilidad limitada El sustrato puede ser consumido tambin en otras reacciones

Proceso continuo simple (ausencia de pirgenos)

Buena reproducibilidad Utilizacin estequiomtrica de los sustratos

Adecuadas solo para pocos pasos de reaccin

Aplicaciones de los biocatalizadores

Anlisis en los laboratorios bioqumicos Anlisis clnico Tratamientos mdicos Qumica orgnica

Extraccin de productos naturales

Sistemas de detoxificacin Produccin de detergentes Componentes de los productos de limpieza Industria del cuero Industria textil Manufactura del papel

Produccin de antibiticos (penicilinas, cefalosporinas)

Sntesis de aromatizantes y saborizantes

ENZIMAS
Son biomolculas cuya funcin es aumentar la velocidad de las reacciones bioqumicas, actan por lo tanto como catalizadores biolgicos.

ANTECEDENTES
1890. Christian Hansen: Renina 1960 adelante. Produccin de enzimas en hongos y bacterias. Antes el 70% se extraa de plantas

y rganos de animales.
En la actualidad: 75% son enzimas microbianas. 25% a partir de quimiosina , plantas y rganos de animales.

Produccin de enzimas por Biotecnologa tradicional Naturaleza

Seleccin al azar
Microorganismos

Energa
Fermentacin

Materias primas
Productos

Nueva Biotecnologa
Tecnologa del DNA rec Diseo humano

Microorganismos Menos energa Fermentacin ANTECEDENTES Productos Tecnologa enzimtica: Inmovil., Reutilizac., Prod. Contnua

Nuevos productos

BIOTECNOLOGA APLICADA A LA SALUD

Enzimas en el diagnstico clnico

Existe en el suero sanguneo una gran cantidad de actividades enzimticas. Se deduce que la medida en suero de la actividad enzimtica es una medida directa de la concentracin de enzima en dicho medio.

Aplicacin de enzimas en el sector salud

Alta especificidad y sensibilidad.

Cuantifica sustancias en baja concentracin Sustancia Producto Puede ser analizado
Absorcin de luz
Emisin de luz Generacin de calor

Problemas:
Estabilidad baja Costo elevado Elevado grado de manipulacin

Forma de aplicacin de las enzimas en anlisis

Cintas enzimticas.
Acoplamiento en lnea de un reactor enzimtico a un aparato analtico. Inclusin de la enzima como parte integral (electrodo enzimtico) Dib. Trazadores de diagnstico clnico.

Electrodo enzimtico
1.

1) Sensor electroqumico, 2) sello, 3) membrana interior selectiva, 4) enzima inmovilizada, 5) membrana exterior protectora.

Biosensores

Anodo Ctodo Membrana de Teflon

Esquema de un biosensor de glucosa

Producto

Membrana semipermeable

Substrato

Enzima inmovilizada

Aplicaciones de las enzimas en medicina.

Enzimoterapia: La mayora hidrolasas vegetales o animales. Requiere pureza, alta estabilidad (T, pH, antigenicidad, accesibilidad al sitio corporal) Eliminacin de metabolitos txicos.

Tratamiento de deficiencias metablicas

congnitas. Eliminacin selectiva de nutrientes especficos de

clulas malignas.

Uso en terapia convencional

Enzimoterapia extracorporea (ex vivo)

Sangre paciente
txicos

Reactor enzimtico

txicos

Sangre paciente

Enzimoterapia intracorporea (in vivo)

Problemas:
Condiciones: pH, T

Respuesta inmunitaria
Accin de proteasas endgenas

Se pueden usar: Eritrocitos Liposomas

Produccin de enzimas de tejidos

Reninas del cuajo o quimiosinas. Protenasas microbianos (Rhizomucor meihei) Amilasas

Vegetal

Sub producto actividad agrcola

Papana Bromelina

Problemas:
Produccin masiva poco factible Complejidad del sistema

Elevado costo en medios de cultivo

Produccin de enzimas microbianas

Alto grado de desarrollo. Aplicacin comercial: bacterias, hongos filamentosos, levaduras,

protozoos. Microbio
Transforma
Biomasa Metabolitos Productos extracelulares

nutrientes

 Control sobre sntesis enzimtica: inductores.

Diseo de medio de cultivo: optimizacin. Sistemas de cultivo: superficial y sumergida

Cultivo sumergido
Lotes
(batch)

Lote alimentado
(batch alimentado)

Continua

Instalaciones de una planta para producir enzimas

Enzimas en los alimentos

Produccin de enzimas con microorganismos manipulados genticamente

Logros:
Produccin de organismos superiores en sistemas microbianos

Capacidad fermentativa de los organismos: biorreactores

Aumento en la produccin y pureza: induccin y sobreexpresin La quimiosina bovina producida en Kluyveromyces lactis mediante ingeniera gentica en 1988. Se convirti en la primera protena recombinante aprobada para consumo humano.

FIN
ILLANES, A. y N, SOLOMON. 1994. Biotecnologa de enzimas. Ediciones Universitaria de Valparaso. LOPEZ, A. y R. QUINTERO. 1987. Tecnologa enzimtica: Aplicaciones en alimentos y medicina.Universidad Autnoma de Mxico. SMITH, J. 2004. Biotecnologa. 4ta ed. Edit. Acribia, S.A

GRACIAS