BIOLOGÍA

INFORME DE LABORATORIO 05
Estudiante: Yesenia Oña

Curso/paralelo: 2do “C” Grupo: 5 Fecha: 16-06-2019

Tema: Actividad Enzimática: Actividad de la peroxidasa. Parte I Ensayo del

Efecto de la concentración de la Enzima

1. Introducción
Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica y estructural que catalizan reacciones
químicas, siempre que sean termodinámicamente posibles: una enzima hace que una
reacción química que es energéticamente posible, pero que transcurre a una velocidad
muy baja, sea cinéticamente favorable, es decir, transcurra a una mayor velocidad
respecto a la ausencia de la enzima.

En estas reacciones, las enzimas actúan sobre unas moléculas denominadas sustratos, las
cuales se convierten en moléculas diferentes denominadas productos. Casi todos los
procesos en las células necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A
las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimáticas. (Brix
Medical Science, 2014).

La actividad de una enzima se evalúa en función de la velocidad de la reacción. La

cinética enzimática estudia la velocidad de la reacción, los factores que la modifican y el
mecanismo de la misma. Los factores físico-químicos que modifican la actividad de la
enzima son:concentración del sustrato, concentración de la enzima, pH, temperatura,
fuerza iónica, inhibidores.(Jiménez, C. 2010)

a. Problema de investigación
¿Hasta qué punto la actividad de peroxidasa influencia en la actividad enzimática?
b. Objetivos
1.-Ampliar e incrementar nuestro conocimiento con respecto al funcionamiento de la
actividad enzimática y sus alteraciones ante la presencia de peróxido.
2. Aprender a utilizar el computador digital de Vernier ya que este es el que nos
permitirá medir el oxígeno durante la actividad enzimática.
3.Identificación y diferenciación de los valores de presión mediante el apoyo de gráficos
y la comparación de sus valores entre series , permitiendo la obtención de un mejor
resultado y verificación de hipótesis.

c. Establecimiento de las variables: dependiente, independiente y controladas.

(eje X, será la variable independiente) (eje Y, será la variable dependiente)
Variable independiente: Es la que se manipula o prepara para la práctica de lab. Y que
afecta la medición.
En este caso nuestra variable independiente fue la cantidad de enzima del almidon de la
papa que fue dispuesta y repartida en los tubos de muestra.
Variable dependiente: Es la que se mide, se determina experimentalmente y que es
afectada por la variable independiente.
Por otro lado, la variable dependiente fue la presión o la cantidad de oxígeno que se
encontraba presente en la muestra.
Variables controladas: Son las controladas por el experimentador para que no afecten a
la variable dependiente. Ejemplo: mantener o controlar los factores ambientales
(temperatura, presión luminosidad etc…) que pudieran afectar las mediciones.
 Temperatura ambiental
 Presión del ambiente
 Temperatura de ambos elementos tanto del reactivo como la del reaccionante
 La limpieza y calidad de los materiales
 El tiempo ( fue el mismo para la realización de cada prueba)
 La cantidad de peroxidasa puesto a que de igual manera se mantuvo con el
mismo valor para todas las muestras.

d. Hipótesis
La peroxidasa es un elemento importante dentro de la experimentación, mostrándose
presente durante la reacción con la enzima del almidón de la papa, permitiéndonos así
diferenciar y denotar los cambios producidos en la misma.
2. Metodología
a. Método
(Aquí el relato de lo que se hizo, escribir en tercera persona (se midió, se colocó…)
conjugando los verbos en tiempo pasado. Explicar cómo se hicieron las mediciones y
los cálculos)
Primero se cortó la papa en partes pequeñas para que de esta manera sea más fácil de
triturar y así poder extraer su zumo, después se colocó este zumo en un vaso de
precipitación para después ponerlo en los respectivos tubos de ensayo los cuales eran
cuatro y contenían agua destilada y agua oxigenada ya que se debía llegar a una
solución de concentración al 3%.
Posteriormente con ayuda de una gasa se extrajo del zumo de papa las gotas necesarias
para colocarlas en cada tubo de ensayo, en el primero colocamos una gota en el segundo
dos y así respectivamente con los demás hasta llegar al cuarto y cuando estos ya estaban
listos se conectó a un instrumento de medición y se midió la presión con este para poder
obtener los datos correspondientes.

b. Materiales
Materiales que se utilizaron durante la práctica. Si es necesario y según los equipos
utilizados incluir la siguiente tabla:
Tabla 1. Lista de materiales utilizados durante la experimentación.
Cantidad Material Descripción Tolerancia Precisión
1 Barómetro Digital Vernier -40 a 120 ±4k/Pa
˚C
4 Tubos de Es un pequeño tubo de
ensayo vidrio con una abertura en la
zona superior, y en la zona
inferior es cerrado y es
donde se colocó la muestra
1 Papa Especie de planta herbácea
de la cual se extrajo el zumo
1 Cuchillo Metal
Agua destilada Sustancia pura que solo
contiene un átomo de
oxígeno y dos de hidrógeno
(H2O) y ha sido limpiada
por medio de la destilación
1 Gasa Se utilizó para quitar el
exceso de zumo.
1 Vaso de Recipiente cilíndrico de
precipitación vidrio se utilizó para colocar
el zumo de papa.
1 Pipeta de vidrio Instrumento volumétrico de
laboratorio y se utilizó para
colocar las gotas.
1 Sensor de Digital Vernier
presión de Gas
(Lab Quest)

c. Reactivos
Reactivos que se utilizaron durante la experimentación:
Tabla 2. Lista de reactivos utilizados durante la experimentación.
 Cantidad Unidades Nombre Descripción
12 ml Peróxido/agua oxigenada Solución al 3%

3. Resultados (registro de datos)

a. Tabla de datos
Tabla 3. Volumen de agua oxigenada, agua destilada y enzima.
Volumen de agua Volumen de agua Enzima
oxigenada (ml) destilada (ml) (gotas)(m)
Serie 1 3,0 3,0 2 gotas (05ml)
Serie 2 3,0 3,0 3 gotas (1ml)
Serie 3 3,0 3,0 4 gotas (1,5ml)
Serie 4 3,0 3,0 6 gotas (2,5ml)
Observaciones Las soluciones de las cuatro series mostraron un color amarillento
sin importar la cantidad de enzima que se le agregara.

Tabla 4. Precisión de los instrumentos usados durante el experimento.

INSTRUMENTO PRECISIÓN

Probeta ±2,5 ml

Barómetro digital Vernier ±4k/Pa

Gotero ±0,05 ml

b. Cálculos
Con el fin de obtener una solución de agua oxigenada al 3% tuvimos que usar la
siguiente fórmula:
V1 x C1 = V2 x C2
V1= ?
C1= 10%
V2= 100ml
C2= 3%
V1= (V1 x C1) / C2
V1= (100ml x 3%) / 10%
V1= 30 ml
c. Tabla de resultados
Tabla 5. Presión del tubo de ensayo durante la reacción enzimática
Presión serie 1 Presión serie 2 Presión serie 3 Presión serie 4

5 74.58967299 73.87954421 74.91317609 75.29980176

10 74.58967299 74.32929244 74.97629865 75.94680797

15 74.65279554 75.10648893 75.16961148 77.36706552

20 74.65279554 75.88368541 75.68642742 79.04770361

25 74.65279554 76.65693674 76.33343364 72.3290964

30 74.65279554 77.43413323 77.11063013 72.3290964

35 74.71986326 78.08113945 77.95094917 72.3290964

40 74.78298582 78.98458105 78.79126822 72.3290964

45 74.78298582 79.69470982 79.8249001 72.39221895

50 74.78298582 80.53502887 81.05184481 -

55 74.91317609 81.31222536 82.1525444 -

60 75.04336637 82.08547669 83.31636656 -

65 75.10648893 82.66936034 84.48018871 -

70 75.2366792 83.31636656 85.77025598 -

75 75.42999203 83.89630505 87.06426841 -

80 75.62330487 84.48018871 88.35828084 -

85 75.75349514 85.12719493 89.71541582 -

90 75.94680797 85.57694315 90.87923798 -

d. Figuras (gráficas, fotografías etc…)

Figura 1. Gráfica con la actividad enzimática de las 4 series.
Figura 2. Gráfica con los cambios de presión de la serie 1.

Figura 3. Gráfica con los cambios de presión de la serie 2.

Figura 4. Gráfica con los cambios de presión de la serie 3.

Figura 5. Gráfica con los cambios de presión de la serie 4.

Figura 6. Imágenes del proceso de experimentación.

4. Discusión
Los resultados del experimento realizado fueron inesperados puesto que lo esperado era
que los valores vayan incrementando en proporcionalidad con el tiempo ya que se
pensaba que a mayor cantidad de enzima, mayor seria su actividad enzimática, sin
embargo esto no sucedió en la figura 4 ya que se muestra que la pendiente de
crecimiento en relación a la cantidad de oxígeno no es constante y existen descensos en
la actividad de enzima, no obstante pudieron haber alteraciones debido a diferentes
factores como una fuga o el movimiento de la muestra. A pesar de esto si se pudo notar
una diferencia de actividad enzimática en las demás gráficas como en la figura 1 la cual
va de 74.5 a 76 y lo mismo con la figura 1 la cual crece notablemente desde 74 a 84 y
por último la figura 3 la cual va de 80 a 90.

5. Conclusión y Evaluación (la evaluación se hará cuando se aplique pruebas

estadísticas)
a. Conclusión
En conclusión se pudo notar que la cantidad de enzima es un factor influyente en la
actividad enzimática y respondiendo a la pregunta previamente establecida se puede
decir que la actividad de peroxidasa si influye en la actividad enzimática y esto se puedo
evidenciar en las distintas pruebas con diferentes cantidades de enzima y la misma
cantidad de solución de reactivo que se realizaron al mismo tiempo, en la cual se nota
que hay una mayor diferencia enzimática en las muestras que contienen mayor cantidad
de jugo de papa, las cuales tenían 4 gotas, que en las que tenían una menor cantidad las
cuales tenían 1 gota.

b. Evaluación
Existieron algunas variaciones en los resultados, pero esto se debió a distintos factores
como los cambios de temperatura, el movimiento de la muestra, errores en la medición
de la solución de peróxido o la gota de zumo de papa ya que la pipeta de goteo no es
exacta y por último algunos errores en la preparación de peróxido de hidrógeno. Sin
embargo, gracias al aparato de Vernier se pudo tomar con mucha precisión los datos lo
cual nos ayudo a lograr estos resultados ya que todos los métodos se realizaron de
manera eficaz lo cual ayudo a obtener estos resultados tan representativos.

c. Limitaciones, efectos y mejoras (sólo si son pertinentes)

Tabla 6. Limitaciones, efectos y mejoras

Limitaciones Efectos Mejoras

Falta de tiempo.
Falta de organización
Al no realizar de manera
rápida las actividades que
le tocaba a cada integrante
se perdió mucho tiempo y
también al momento de
preparar los materiales
Al principio las
integrantes no sabían que
actividades debían realizar
debido a que no se les
daba una específica y
Tener preparado los
materiales previamente al
experimento.
Repartir de manera
igualitaria las actividades
del trabajo para que cada
una realice lo suyo.

Falta de comunicación con
el maestro entre los grupos
todas realizaban las
mismas o unas más que
otras.
La mayoría de grupos no Organización del maestro
trabajaban al mismo en cuanto al tiempo para
tiempo debido a que no que pueda hablar con cada
sabían los pasos que grupo y de esta manera
debían realizar ya sea por ninguno se atrasé.
no escuchar bien o porque
solo se explicaba a un
grupo y se demoraban en
avanzar a donde el
maestro indicaba.

Referencias
Allott, A., Mindorff, D., & Azcue, J. (2015). Biología. Oxford: Oxford.
Brix Medical Science. (2014). La actividad enzimática. Recuperado de:
http://www.brix-lab.com/index.php/es/investigacion-2/119-la-actividad-enzimatica
Jiménez, C. (2010). DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA DE
PEROXIDASAS (CATALASA). Recuperado de: https://www.uaq.mx › memorias-2010