4.

4 Análisis de procesos

a) Selección de la longitud de onda

Las medidas de absorbancia se llevan a cabo normalmente a la longitud de onda correspondiente

al máximo de absorción, ya que de esta forma se obtienen máximas sensibilidades. Por otra parte,
en esa zona, la curva espectral suele ser bastante plana, por lo que el cumplimiento de la ley de Beer
es normalmente satisfactorio.

A veces no es posible operar a la longitud de onda del máximo de absorbancia cuando a esa longitud
de onda absorbe apreciablemente alguna especie( distinta del analito) presente o incluso el propio
reactivo.

b) Preparación de las muestras para el análisis

Muchos compuestos orgánicos absorben en la región ultravioleta y el tratamiento de la muestra

sólo implica la separación de las posibles interferencias. Por otra parte, algunos elementos
inorgánicos absorben intensamente en la región visible, pero sólo en ciertos estados de oxidación.
En estos casos una etapa previa (además de la disolución si se trata de muestras sólidas) debe incluir
un proceso redox para llevar el elemento al estado oxidación adecuado.

La formación de especies absorbentes mediante el uso de reactivos adecuados hace que sea
necesario considerar toda una serie de factores, entre los que cabe mencionar:

pH. Esta variable suele jugar un papel muy importante en las reacciones de formaciones de
complejos. La importancia del pH y su influencia sobre los iones metálicos y los ligados se discute
detalladamente en las obras que tratan el tema correspondiente a equilibrios de disolución.

Concentración de los reactivos. Previamente a cualquier nueva determinación espectrofotométrica

es necesario establecer los márgenes de concentraciones adecuados de los reactivos, ya en
cantidades demasiado grandes o demasiado pequeñas pueden originar desviaciones de la ley de
Beer.

Tiempo adecuado para la medida. Cuando la especie absorbente es estable y su formación es rápida
no es necesario controlar el tiempo al que realizar las medidas, mientras que si se incumple algunas
de las premisas anteriores, está variable será necesario tomarla en consideración.

Orden de adición de los reactivos. A veces es importante añadir los reactivos según una
determinada secuencia.

Temperatura. Determinadas reacciones requieren operar a temperatura elevada para aumentar la

cinética de formación de un determinado complejo. Es estas ocasiones la temperatura de trabajo
deberá especificarse en el procedimiento.
Eliminación de interferencias. Existen muy pocas reacciones que sean totalmente específicas, por
lo que en muchas ocasiones es necesario eliminar interferencias de determinadas especies, lo cual
muy frecuentemente se consigue por enmascaramiento.

Extracción con disolventes orgánicos. La eliminación de sustancias interferentes pueden llevarse a

cabo en ocasiones mediante extracciones con algún disolvente orgánico inmiscible con el agua,
aunque también puede recurrirse a está técnica cuando la especie absorbente es poco soluble en
agua.

Concentración de sales. Altas concentraciones de electrones influyen frecuentemente sobre la

absorción de determinados compuestos, debido a la formación iónicas que originan
desplazamientos del máximo de absorbancia.

Los efectos de las variables mencionadas deben conocerse y, en consecuencia, escogerse un

conjunto de condiciones de trabajo de forma que la absorbancia no sea afectada apreciablemente
por pequeñas variaciones incontroladas en sus magnitudes.

c) Determinación de la relación de absorbancia-concentración. Una vez conocida la absorbancia de

una determinada especie, en principio, se podría obtener la concentración a partir de la ley de Beer:
A = ε b c. Sin embargo, como se comentó, no es prudente asumir el cumplimiento de dicha ley y
utilizar un solo patrón para determinar la absortividad molar, ε.

Si se cumplen la ley de Beer, los datos se representan como la figura 3.21, a partir de la cual se
obtiene el punto de la corte recta (obtenida, si es necesario, por ajustes por mínimos cuadrados)
con el eje horizontal y, a partir de ahí, la concentración de la muestra original.
Cuando la cantidad de muestra es limitada, las adiciones estándar pueden llevarse a cabo por
sucesivas adiciones de incrementos de una disolución patrón de concentración conocida a una
alícuota del problema. Las medidas de la absorbancia se hacen en el original y después de cada
adición.

La forma de proceder depende de los espectros de absorción de ambas especies, y pueden

presentarse los siguientes casos:

Espectros no superpuestos. En estas ocasiones, como se muestra en la figura 3.22, es posible

encontrar algunas longitudes de onda a las que se absorba sólo una de las especies; λ1 para
determinar M y λ2 para determinar N.

Espectros superpuestos parcialmente. Cuando la situación es como se muestra en la figura 3.23, la

especie N no interfiere en la medida de M a la longitud de onda λ1, por lo que la determinación
de esta especie puede hacerse directamente a λ1. A continuación se determina la
absorbancia de M a la longitud de onda λ2, a partir de la absortividad molar y finalmente se
resta esta contribución de la absorbancia medida a λ2. Con ello se obtiene la absorbancia
del componente N, cuya concentración se calcula posteriormente de a forma acostumbrada.
Espectros completamente superpuestos. Como se indica en la figura 3.24 , no es posible
encontrar una longitud de onda en la que M y N absorban de forma exclusiva.