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4.3 Inoculación
7. METODOLOGÍA
EQUIPOS Y MATERIALES
Figura. 3 Medio de cultivo inicial
Uvas
2 Erlenmeyer de 1 litro ADECUACIÓN DEL MEDIO DE
Alcohol etílico al 92% de pureza FERMENTACIÓN ACÉTICA
Agua destilada
Refractómetro Una vez alcanzado la estabilidad de pH con
Peachímetro un valor de 3,72 del inoculo se procede a
Balanza analítica realizar el montaje para la fermentación
Probeta de 100 ml acética. Para ello es necesario contar con
Balón aforado de 1 litro 150 ml del cultivo y la preparación de un litro
Pipeta plástica de solución acuosa de alcohol etílico al 10%
Centrifuga de pie a partir de alcohol etílico al 92% en volumen
Vaso de precipitado 2 L para reforzar la cantidad de etanol usado
Dril súper 8 para filtrado posteriormente como sustrato.
Balón de 3 bocas para destilación
Condensador para destilación
Manta de calentamiento
Erlenmeyer de 500 ml
Erlenmeyer de 250 ml
Alcoholímetro
Algodón
Embudo
Equipo de aireación
PROCEDIMIENTO
cultivo mediante la utilización de una
centrifuga de pie, obteniendo un permeante
(liquido filtrado, ver fig. 7) el cual se lleva a
destilación con el fin de retirar agua y alcohol
etílico. Se usa para su transbordo un embudo
(fig.8).
CUANTIFICACIÓN DE SOLUCIÓN
CONCENTRADA DE ÁCIDO ACÉTICO
CARACTERIZACIÓN DE PRODUCTO
FINAL
8. EQUIPOS UTILIZADOS EN EL
LABOARATORIO
DENSÍMETRO
CENTRÍFUGA DE PIE
° Brix
1.5
pH GRADOS FECHA DE
BRIX TOMA DE 1
MUESTRA 0.5
5,5 2,6 18-03-14 0
5,26 1,6 18-03-14 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
5,1 1,1 19-03-14 Dias
4,94 0,8 19-03-14
4,43 0,5 20-03-14 Figura.16 Gráfica de variación de grados Brix
durante la fermentación acética
4,38 0,2 20-03-14
4,06 0,17 21-03-14
3,89 0,2 21-03-14
Cálculo de la cantidad de ácido
3,82 0,2 22-03-14
acético producido
3,74 0,2 22-03-14
3,80 0,2 25-03-14
3,84 0,15 25-03-14 -Durante la destilación se obtuvo un
3,94 0,05 26-03-14 condensado de 334 ml constituido en su
3,93 0,15 26-03-14
mayor parte de agua y alcohol etílico.
3,88 0,2 27-03-14
3,84 0,2 27-03-14 Adicionalmente se obtuvo un concentrado
Tabla 1 Seguimiento de las variables del constituido de ácido acético
proceso mayoritariamente.
4.5
Según la estequiometria de la reacción un
4 mol de ácido acético reacciona con un mol de
3.5 hidróxido de sodio, para producir un mol de
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 acetato de sodio y agua.
Dias
Normalidad = Molaridad/1 OH-
Figura.16 Gráfica de variación de pH durante la
fermentación acética De acuerdo a esta igualdad la molaridad y la
normalidad toman el mismo valor en el caso
del hidróxido de sodio.
=
0,0036 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠
= 0,144 𝑀. Ahora se procede a calcular la cantidad de
0,025 𝑙 alcohol en el condensado.
0,371 l * 0,144 M =0,0534 0,1 % v/v * 334 ml = 0,334 ml.
Moles de ácido acético en la solución Finalmente se halla la cantidad de alcohol
concentrada=0,0534 moles. consumido.
100,0032ml – 0,334 ml = 99,6692 ml. equivale a una perdida de 15 ml que
representa un 2,08 %.
A través de la reacción se observa que se La figura que nos muestra la variación del pH
deben obtener 1,707 moles par un nos indica que al inicio fue donde mas
rendimiento del 100%. cantidad de de acido se produjo debido a que
fue en este tiempo se presento el mayor
El rendimiento global del procedimiento fue descenso de pH, lo cual es logico ya que al
0,0804 moles
de ∗ 100 = 4,71 % inicio hay mayor cantidad de sustrato en la
1,707 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠
mezcla.
El rendimiento si solo se toma en cuenta la
solución concentrada es de
0,0534 moles
∗ El rendimiento global es bastante bajo y esto
1,707 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 es explicable debido a todas las perdidas
100 = 3,13 % presentadas, tambien es necesario tener en
cuenta que es un procedimiento biologico el
Calculo de las pérdidas
cual se afecta significativamente con las
producidas en el procedimiento.
condiciones en las que se realize, y
Al inicio de la practica en el día cero se tenía finalmente hay que recordar que el
un total de 1150 ml ya que como se microorganism usa parte del sustrato para
mencionó anteriormente se mezcló 1 l de mantenimiento. tambien hay otra serie de
solución de alcohol al 10 % v/v con 150 ml de errores que se mencionaran acontinuación.
inoculo.
Después de la fermentación anaeróbica, el
Al final de la práctica en el día 10 la cantidad jugo debe ser filtrado para eliminar la
total de la mezcla fue de 720 ml después de levadura, pulpa y sedimentos que interfieren
filtrarse lo que representa una pérdida de 430 con la fermentación acética, procedimiento
430 𝑚𝑙
ml lo que equivale a ∗ 100 = 37,39%. que no se llevaron a cabo ya que este jugo
1150 𝑚𝑙
se le adiciono directamente el cultivo de las
En el procedimiento de destilación se bacterias acéticas.
obtuvieron 334 ml en el destilado y 371 ml en
El jugo para la fermentación acética, debe
la solución concentrada lo que da un total de
estar cerrado herméticamente para evitar
705 ml pero se partio de 720 ml lo que
contaminaciones, y evitar que la producción
celular descienda, porque en vez de producir USOS Y APLICACIONES DEL ÁCIDO
ácido acético se tendrá agua con cierto grado ACÉTICO. En línea. Disponible en:
de alcohol. Este procedimiento no se hizo, [http://www.quiminet.com/articulos/acidoaceti
co-glacial-usos-y-aplicaciones-2587611.htm]
pues el erlenmeyer donde se llevó a cabo la
fermentación solo fue tapado por un algodón. DENSIMETRO. Página web. Fecha de
consulta [Marzo 31 de 2014]. Encontrado en:
No se conoció exactamente la concentración
http://es.scribd.com/doc
del etanol que iba a ser fermentado, ya que
en la fermentación anaeróbica se formó algo MATERIAL DE LABORATORIO. Página web.
de este y adicional se le agrego cierta
Fecha de consulta: [Marzo 31 de 2014]
cantidad a una concentración del 10%.
Según la literatura, este no puede sobrepasar Encontrado en:
un 12% en concentración ya que un exceso http://www.galeon.com/labquimica/sopacade
de alcohol dificulta la formación de una capa mico/reactivos/materiales.htm
gelatinosa de bacteria por lo que la
BALON DE DESTILACIÓN. Página web.
fermentación es incompleta.
Fecha de consulta [Marzo 31 de
La aireación es un factor clave para el éxito 2014].Encontrado en:
de esta fermentación ya que es una http://instrumentosdelaboratorio.org
fermentación aeróbica y además una
CENTRÍFUGA. Página web. Fecha de
reacción catabólica por lo que la temperatura
consulta [Marzo 31 de 2014]. Encontrado en:
puede aumentar y esta se debe mantener en
http://es.scribd.com/doc/
un rango de 26-28 OC y no se aseguró que
el flujo de oxigeno fuera el adecuado, ni se MANTAS CALEFACTORAS. Página web.
tuvo un control de temperatura. Encontrado en: http://www.grupo-
selecta.com/pdfs/es/cats/MANTAS%20Y%20
La concentración de ácido en la solución
PLACAS%20CALEFACTORAS.pdf
concentrada y en el condensado es bastante
baja debido a que el vinagre comercial está
en un orden de 3 – 5%
11. BIBLIOGRAFIA