INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
Químico Farmacéutico Industrial
Departamento de Fisiología Celular
PRACTICA 1
ASPECTOS GENERALES DEL MANEJO DE
ANIMALES DE LABORATORIO Y VÍAS DE
ADMINISTRACIÓN.
Introducción:
El uso de animales de laboratorio en estudios de investigación biomédica y
producción de reactivos biológicos en general, requiere que éstos sean los
apropiados para que proporcionen la seguridad en los resultados esperados, para
ello, es necesario saber manejar a los animales.
Existe un principio creado en la década de los 60 por Russel y Burch, en su libro
“The Principle of Humane Experimental Technique” el cual consiste en:
Las alternativas de reemplazo aluden a métodos que eviten o sustituyan el uso de
animales. Esto incluye tanto los reemplazos absolutos (es decir, sustituir animales
por modelos informáticos), como los reemplazos relativos (es decir, sustituir
vertebrados, por animales con una menor percepción del dolor, como algunos
invertebrados).
Las alternativas de reducción aluden a cualquier estrategia que tenga como
resultado el uso de un menor número de animales para obtener datos suficientes
que respondan a la cuestión investigada, o la maximización de la información
obtenida por animal, para así limitar o evitar potencialmente el uso posterior de otros
animales, sin comprometer el bienestar animal.
Las alternativas de refinamiento aluden a la modificación de la cría de animales o de
los procedimientos para minimizar el dolor y la angustia, así como para mejorar el
bienestar de los animales utilizados en la ciencia desde su nacimiento hasta su
muerte.
Manejo de ratas en laboratorios
1. El animal debe ser sujetado con confianza y firmemente (sin herirlo).
2. Se debe evitar hacer ruido excesivo durante el procedimiento ya que las
ratas se estresan y será más difícil controlarlas.
3. Se debe evitar el uso de fórceps y guantes de cuero ya que puede
perderse sensibilidad y lastimar o matar al animal.
4. Ningún procedimiento debe llevarse a cabo sin inmovilizar y tranquilizar
a la rata.
Imagen1. Forma correcta de sujetar ratas de laboratorio al transportarlas
Se administró por tres vías (intragástrica, intraperitoneal y subcutánea) pentobarbital
sódico el cual es un barbitúrico de acción corta (menor de 3 horas); pertenece al
grupo de los barbitúricos (ureidos cíclicos), compuestos eficaces pues presentan
poco efecto colateral, resultan de la condensación de la Urea y del ácido malónico.
Efecto depresor no selectivo del sistema nervioso central por disminución de la
excitabilidad pre y postsináptica e inhibición de la conducción ascendente a nivel de
la formación reticular. Como resultado: sedación, depresión respiratoria, actividad
anticonvulsivante y reducción de la fase REM del sueño; incluso puede ocasionar
coma o la muerte. Actualmente su uso es solamente experimental.
El pentobarbital sódico disminuye la transmisión de la acetilcolina y aumenta la
transmisión de neurotransmisores inhibidores. Actúa a nivel del sistema reticular
activador. Se absorbe fácilmente pasando a la sangre y combinándose con las
proteínas, llegando a los tejidos, principalmente al adiposo. El nivel sanguíneo del
producto se concentra en el hígado y en el riñón.
Objetivos:
1.-Manipular adecuadamente a los animales de laboratorio.
2.-Comparar la eficiencia del pentobarbital sódico al administrarlo a ratas por tres
diferentes vías (intraperitoneal, intragástrica y subcutánea).
3.-Analizar estadísticamente la diferencia de sus medias y errores estándar en los
resultados obtenidos.
Fundamento:
Se utilizó rata por que es un animal endotermo, es dócil, y fácil de mantener.
● Se repartieron aleatoriamente las ratas para poder trabajar con grupos
homogéneos y que los resultados sean representativos de dicha población.
● Se pesaron las ratas para calcular dosis
● El pentobarbital tiene un efecto colateral secundario con la Temperatura
central es por ello que tomamos la temperatura colonal.
● Se utilizaron las tres vías de administración por facilidad y por el fármaco que
se usó.
● Medimos el tiempo en un intervalo de 0 a 25 por la duración del fármaco.
● Se utilizó un modelo ANOVA bifactorial de medidas repetidas porque en este
experimento contábamos con más de un grupo, por consiguiente se obtienen
más de dos medias, así pudimos estudiar dos factores (tiempo y vía de
administración) que afectaron a la variable (temperatura)en los grupos de
sujetos.
Resultados:
En la gráfica 1 se observan los datos obtenidos con ANOVA bifactorial de medias
repetidas, en donde en cada una de las vías se tiene una diferencia entre el minuto
0 al 25 con una P<0.05.
Tabla [Link]ón de los resultados obtenidos de diferencia significativa entre
medias al administrar pentobarbital sódico a un grupo de ratas por diferentes vías.
(IG= Intragástrica; IP= Intraperitoneal; SC= Subcutánea)
En la tabla se observa que la vía Intraperitoneal a partir del minuto 15 muestra una
diferencia con las media de la vía intragástrica, y en el minuto 10 empieza a ser diferente a
la vía subcutánea. mientras que entre la vía intragástrica y subcutánea no se muestra
ninguna diferencia significativa.
En la gráfica 2 se muestra que a partir del minuto 5 la vía intragástrica y
intraperitoneal se empezaron a perder los reflejos de enderezamiento, pero solo en
la vía intraperitoneal se perdieron totalmente los reflejos.
En la vía subcutánea a partir del minuto 10 se empezó a perder el reflejo de
enderezamiento y al final solo se perdió el 50%.
En la gráfica 3 se muestra que a partir del minuto 5 en las tres vías se empezó a
perder el reflejo flexor pero en vía intragástrica al final solo se perdió el 50%, en la
vía subcutánea el 66% y en la vía intraperitoneal el 83.3%.
Discusión de Resultados:
La absorción vía intraperitoneal entra por la vascularización de la cavidad
intraperitoneal de donde pasa al hígado y posteriormente al sistema nervioso
central, se observó que la temperatura fue disminuyendo a partir del minuto 5 por lo
que indica que llega al Hipotálamo, en el minuto 5 se perdió el reflejo de
enderezamiento y flexor por lo que efectivamente el pentobarbital llega al Sistema
Nervioso Central ya que aquí se encuentran dos neuronas que mandan los impulsos
para que se efectúe el arco reflejo.
La vía subcutánea entra por el tejido graso, debido a que el pentobarbital es un
fármaco lipofílico, se mantiene en las capas de grasa y puede llegar a ser
almacenado, perdiéndose la dosis para llegar al sistema nervioso [Link] lo que
se observó que no hubo mucha disminución de temperatura ni en el reflejo flexor y
de enderezamiento.
La vía intragástrica entra en estómago, donde es absorbido posteriormente se
incorpora al circuito venoso menor, que pasa por el hígado donde cierta dosis se
metaboliza, pero otra parte se distribuye,por lo que en el minuto 5 se observó una
ligera disminución de temperatura, pero el reflejo flexor y de enderezamiento no se
perdieron totalmente.
Conclusión:
De acuerdo a los resultados obtenidos podemos concluir que la vía que nos resultó más
eficiente fue la intraperitoneal ya que a partir de los 5 min ya existía una diferencia
significativa lo que detectaba que atravesaba menos capas para llegar al Sistema Nervioso
Central, y así sucesivamente en todos sus intervalos, en cambio las otras dos vías no
tuvieron la misma diferencia significativa.
Bibliografía:
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Número 5B La habilidad para sujetar y manejar animales de laboratorio no
se adquiere fácilmente
[Link] 1 REDVET
Rev. electrón. vet. [Link] Vol. 12, Nº 5B
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● Fernandez Perez R,(2010), Farmacologia Veterinaria,Chile ,Talleres
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● Nicardo Mendoza P.(2008). Farmacologia medica, Mexico, Panamericana.
● Sol. Iny.. Penta-Hypnol. Anestésico general de tipo barbitúrico. Agosto 2018,
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