INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL ​

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS ​

Químico Farmacéutico Industrial

Departamento de Fisiología Celular​​

​
PRÁCTICA 4
Potencial de Difusión y Potencial de Lesión.

​
No. Equipo: 3

GARCÍA GARCÍA ALEJANDRA BERENICE

JIMÉNEZ BARRÓN CLARISA​
ROMERO BONILLA GUADALUPE​
TIXIDOR SANTILLÁN CAROLINA​
TREJO ROMERO DIANA BELEN

1°/Octubre/2018
Introducción
La membrana plasmática tiene entre sus principales funciones el transporte de materia, esta
es una propiedad en donde se implican la aparición de una distribución asimétrica de
moléculas a uno y otro lado de la membrana celular y por lo tanto una diferencia en la
composición del LEC (liquido extracelular) y LIC (líquido intracelular), esto genera
gradientes.

Los gradientes de concentración son en los que una sustancia se encuentra en mayor o
menor concentración en algún lado de la membrana, sin embargo, debido a que los átomos
y moléculas pueden formar iones y tener cargas eléctricas positivas o negativas, también
puede existir un gradiente eléctrico o diferencia de cargas a través de una membrana
plasmática.

Siempre que hay una separación neta de cargas en el espacio existe una diferencia de
potencial eléctrico. En el caso de una célula, las cargas positivas y negativas están
separadas por la barrera de la membrana celular, con una mayor cantidad de cargas
negativas al interior de la célula que al exterior de la misma.

Equilibrio Gibbs-Donnan es la distribución de partículas cargadas a través de membranas

semi permeables debido a la presencia de moléculas polares que no difunden.

Potencial de membrana en Reposo

En el reposo, la membrana se encuentra polarizada, es decir, tiene cargas positivas en la
parte externa de la célula y cargas negativas en su interior. Este es un valor constante y
específico para cada tipo de célula. El potencial de reposo se encuentra entre los -60 y -100
mV.

El potencial de membrana se debe a la tendencia que tienen dos soluciones separadas por
una membrana para llegar al equilibrio de sus potenciales químicos y energéticos, fluyendo
de las regiones de mayor potencial a las de menor.

Figura 1. Flujo de moléculas de acuerdo a su

gradiente de concentración (izquierda) y el
efecto de un gradiente eléctrico (derecha).

Potencial de difusión
Es la diferencia de potencial generada a través de una membrana cuando un soluto con
carga difunde debido al gradiente de concentración; es decir, se debe a la difusión de los
iones y solo puede generarse si la membrana es permeable a ese ion.
La diferencia de potencial eléctrico en la membrana celular que equilibra exactamente el
gradiente de concentración de un ion se conoce como ​potencial de equilibrio.

Para calcular el potencial en equilibrio de un ion a una determinada diferencia de

concentración a través de las membranas se utiliza la ​ecuación de Nerst​. ​E ​es el potencial
en equilibrio que se produce a través de la membrana debido a la distribución de un
determinado ion bajo dos condiciones, primeramente debe ser el único ion que contribuye al
potencial de membrana y además ésta tiene permeabilidad infinita a dicho ion.

Potencial de lesión
Carlo Matteucci descubrió que un músculo lesionado en reposo se comporta como una
fuente de corriente eléctrica, si se coloca un electrodo en la parte lesionada y otro en la no
lesionada se detecta una corriente eléctrica, mejor llamada corriente de lesión o potencial
de lesión​, el cual es la diferencia de potencial entre la región normal y la región que ha sido
lesionada, también llamada potencial de demarcación.

La ​ecuación de ​Goldman-Hodgkin-Katz (GHK) expresa la contribución de cada ion al

potencial de membrana, ésta es proporcional a su capacidad para atravesar la membrana
plasmática. A diferencia de la ecuación de Nernst, la permeabilidad relativa de cada ion es
considerada en la ecuación de Goldman. Para las membranas permeables a Na, Cl y K, la
ecuación es:

Músculo gastrocnemio de rana

El músculo esquelético forma aproximadamente el 40% del peso corporal, está estructurado
en fascículos compuestos de células musculares denominadas fibras por su aspecto
cilíndrico y alargado. Cada fibra muscular está rodeada por un número variable de capilares
sanguíneos que proporcionan a la fibra el oxígeno necesario para realizar sus funciones
metabólicas. Las fibras musculares son multinucleadas y poseen en su interior proteínas
contráctiles que reciben el nombre de miofibrillas, que como su nombre lo indica, permiten
la contracción muscular.

Figura 2. Componentes músculo

esquelético

Membrana testácea de huevo

La cáscara del huevo está formada principalmente por carbonato cálcico que protege y aísla
el contenido del huevo, tiene miles de poros que permiten el intercambio gaseoso y
adheridas a la cáscara se encuentran las membranas testáceas, que forman la cámara de
aire en el polo romo del huevo. ​Las membranas que recubren el interior de la cáscara son
dos: membrana testácea interna y externa. Ambas rodean el albumen y proporcionan
protección contra la penetración bacteriana. Las membranas testáceas se encuentran
fuertemente pegadas entre sí.

Objetivos:
● Determinar la diferencia de voltaje de la difusión de iones K en diferentes
concentraciones en membrana testácea interna de huevo y compararlo teóricamente
con ecuación de Nernst.
● Determinar la diferencia de voltaje de la lesión de musculo gastrocnemio de rana en
diferentes concentraciones y compararlo con los valores teóricos de la ecuación de
Nernst y Goldman

Fundamento
Se ocupó membrana testácea de huevo ya que es
muy porosa y muy permeable al ión K e impermeable
al ión Cl, esto nos lleva a un modelo que se aproxima
a las consideraciones de Nernst y así poder usar su
ecuación.
Usamos soluciones de KCl ya que se disocia en dos
iones (cloruro y potasio).

Se utilizó musculo gastronecmio de Rana, ya que la

rana es un animal ectotermo por lo que regula su
temperatura con el medio ambiente. Lo anterior
permitió llevar a cabo el experimento eliminando la
variable de temperatura. La rana se decapitó y
desmeduló para eliminar reflejos y así poder trabajar
con un animal vegetativo, asimismo la anatomía del
músculo gastrocnemio permitió que el voltaje
aplicado se distribuyo de forma homogénea, ya que las fibras musculares están
posicionadas de forma paralela, este fenómeno es explicado por la ley de Kirchhoff,
obteniendo así la misma lectura en todo el músculo. Finalmente se utilizó por ser un modelo
que se aproxima a las consideraciones de la ecuación de Goldman-​Hodgkin-Katz​.

La solución Ringer fue ocupada para la conservación el MEC del músculo. Mientras tanto, el
Sulfato de Potasio (K4SO4) se utilizó ya que al disociarse obtenemos iones K y SO4-, este
último es completamente impermeable a la membrana plasmática, por lo que nos permite
cuantificar la permeabilidad únicamente del ion K. En el potencial de difusión se usaron
diferentes concentraciones con el fin de generar gradientes.

Resultados

Figura 4.Equilibrio electroquímico en una membrana testácea de huevo respecto a la

relación de concentración del ion potasio cuando se encuentra fuera de la membrana a
diferentes concentraciones de KCl.

I
Figura 5. Potencial de lesión en un músculo gastrocnemio lesionado respecto a la relación
de concentración del ion potasio cuando se encuentra fuera del músculo en diferentes
concentraciones de K2SO4
Discusión de resultados
Potencial de difusión
Para comprobar el potencial de difusión en esta experiencia se utilizó la ecuación de Nernst,
donde se calculó el potencial de equilibrio para el ion potasio. La membrana testácea de
huevo, al ser completamente impermeable a iones cloruro e infinitamente permeable a iones
potasio, cumple con los supuestos de la ecuación antes mencionada. La figura 4 muestra
que los datos obtenidos de forma experimental se encuentran muy cercanos a los valores
calculados de forma teórica. Mediante la regresión lineal de los datos, nos podemos
percatar que el valor de la constante para nuestra ecuación es de 58.128, un valor que se
encuentra muy cercano a la constante utilizada a 23°C en la ecuación de Nernst.
Al igualar las concentraciones externas e internas de la membrana, se esperaba obtener un
voltaje 0, sin embargo, la presencia de proteínas de carga negativa al interior de la
membrana (albúmina) impiden que las lecturas sean 0, asimismo, al cambiar las
concentraciones de las soluciones se generan gradientes donde se observó una tendencia
directamente proporcional, es decir, al disminuir el gradiente, se disminuyó también el
potencial de equilibrio. Finalmente, la pendiente de la gráfica nos permite observar que, al
aumentar la concentración en un factor de 10, la diferencia de voltaje es aproximadamente
58 en todos los casos.

Potencial de lesión
El músculo gastrocnemio de rana tiene una alta permeabilidad al ion potasio, sin embargo,
no es el único ion permeable a estas células, pues tanto el ion cloruro como el ion sodio son
permeables, pero en una menor proporción. Es por lo anterior que no sólo se utilizó la
ecuación de Nernst (que nos permitió saber el potencial para el ion potasio debido a su alta
permeabilidad a la membrana) sino también se utilizó la ecuación de
Goldman-Hodgkin-Katz, que nos permitió calcular el potencial de membrana para varios
iones que son permeables a ella. Como se puede observar en la figura 5, los valores
obtenidos de forma práctica no coinciden exactamente con los calculados de forma teórica y
esto se debe a que el músculo estudiado sufrió una lesión; es por esto que en la gráfica no
pasa por el 0 ya que el potencial de membrana en reposo es de -60mV, dicha lesión fue
realizada con la finalidad de tener acceso al medio intracelular. Finalmente, al igual que en
el experimento anterior, se varió la concentración de sulfato de potasio para ir disminuyendo
el gradiente y observar la diferencia en el potencial de lesión. Al disminuir el gradiente de
concentración en las soluciones, se disminuyó también el potencial de lesión.

Conclusiones
● El gradiente de concentración es directamente proporcional al potencial de equilibrio.
● La permeabilidad del ión potasio es muy alta y tiene gran efecto en el potencial de
membrana en reposo.
● El potencial de lesion en músculo gastrocnemio de rana fue de -84mV.
● Se cumple la ecuación de Nernst para el cálculo de un solo ion.

Referencias
● Eventos Bioeléctricos (Biopotenciales)
http://132.248.9.195/ptd2005/41126/0341080/0341080_A8.pdf
● https://www.medicinaeutm.com/wp-content/uploads/2018/04/ventilacioìn-y-Mecanica-
Ventilatoria.pdf
● Gradiente electroquímico y potencial de membrana
http://sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/norm/membrana_potencial_clase.pdf
● El potencial de membrana
https://es.khanacademy.org/science/biology/human-biology/neuron-nervous-system/
a/the-membrane-potential
● Cuenca E. Fundamentos de Fisiología (2006) Editorial área universitaria. Madrid,
España. pp 49.
● Richard W. Hill, Gordon A. Wyse, Margaret Anderson. Fisiología Animal. (2004)
Editorial Médica Panamericana. pp. 345