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TOLUCA
Ingeniería en Biotecnología
Proyecto 1 Unidad 2:
Alumnos:
López Castillo Estefanía Montserrat
Télles MonGe Carlos Daniel
Urbina Cazares Alejandro
Profesor:
Rafael González García
Introducción:
Las pérdidas de alimentos están influenciadas por las elecciones tomadas en la producción de
cultivos y sus patrones como la infraestructura y capacidad interna, las cadenas comerciales y
los canales de distribución, así como por las compras de los consumidores y las prácticas de
uso de alimentos.
Estas pérdidas deben ser mínimas en cualquier país, independientemente de su nivel de
desarrollo económico y de la madurez de sus sistemas, ya que la pérdida y el desperdicio de
alimentos hacen referencia alas etapas sucesivas de la cadena de suministro, desde la
producción inicial hasta el consumo final de los hogares (FAO, 2010). Cuando los alimentos se
descomponen o estropean antes de llegar a su fase de producto final o a la venta, hablamos de
pérdida de alimentos esta disminución puede ser accidental o intencional, pero en última
instancia conduce a una menor disponibilidad de alimentos para todos. A nivel global, entre un
cuarto y un tercio de los alimentos producidos anualmente para consumo humano se pierde o
desperdicia.
En México se desperdicia el 37 % de los alimentos (frutas y hortalizas) que se producen. ,
dentro de los cuales los más desperdiciados son el mango, el plátano y la guayaba muchos de
estos son enviados al Banco de Alimentos donde también pasan por una selección antes de su
comercialización (SAGARPA, 2011).
La biomasa ligno celulósica y en especial los subproductos agroindustriales ha comenzado a
ser de mayor importancia y ha dado a paso a convertirse en materia prima potencial para
diversos procesos tanto de tipo agrícola como industrial, siendo la producción de alcohol uno
de los más destacados. Actualmente la generación de alternativas energéticas distintas a las
convencionales obtenidas principalmente de la explotación del petróleo, ha conllevado al uso
de materias primas naturales dando lugar a los llamados biocombustibles. El proyecto
establece el proceso para obtener bioetanol a partir de cáscaras de plátano (Musa sapientum)
por vía fermentativa con Saccharomyces cerevisiae.
Las cáscaras de plátano maduro se perfilan como una materia prima de bajo costo. La
producción de plátano en 2010 a nivel mundial es de poco más de 105 millones de toneladas,
en México se produjo 993,882 toneladas destacando el estado de Chiapas con 743, 293 mil
toneladas correspondiente al 35% de la producción nacional (SIAP-SAGARPA, 2010), de las
cuales cada año se desperdicia poco más del 50%.
La industrialización es buena opción para estos frutos a través de procesos como los que se
plantean en este estudio, para transformarlos en un producto de valor agregado. Por lo
anterior, darle uso a los derivados de los frutos perecederos (cáscaras), es una alternativa
viable pretendiendo establecer una metodología para la producción de bioetanol y medir el
rendimiento para ver la viabilidad de dicho proyecto.
MARCO TEÓRICO
Todas las especies de plátanos comestibles son originarias de Oriente, y las ordinariamente
cultivadas derivan de la región indomalaya, donde fueron conocidas desde tiempos muy
antiguos, pues Alejandro Magno encontró (año 327 a. de C.) plátanos cultivados en el valle del
Indo. Los portugueses llevaron el plátano a las islas canarias, probablemente del norte de
África donde pudo ser difundido por los árabes. En 1516 fue introducido en la Española (Santo
Domingo) por Fray Tomas de Berlanga procedente de las islas Canarias. Muchas variedades
han sido originarias en oriente pero conservadas por la facilidad de su propagación (Miranda,
2015).
Hay muchas especies de plátano, pero las cultivadas por sus frutos comestibles son Musa
paradisiaca L. o plátano macho y Musa sapientum L. o guineo. Existen en ambas diversas
variedades siendo sobre todo numerosas las de la segunda especie, las más comunes de las
cuales reciben en Chiapas tales como roatán, morado, manzano, etc., la variedad de plátano
cultivada para exportación de fruto es el roatán (Miranda, 2015).
El plátano no es un árbol, sino una megaforbia, una hierba perenne de gran tamaño. Como las
demás especies de Musa, carece de verdadero tronco. En su lugar, posee vainas foliares que se
desarrollan formando estructuras llamadas pseudotallos, similares a fustes verticales de hasta
30 cm de diámetro basal que no son leñosos, y alcanzan los 7 m de altura.
Los bananos y plátanos son plantas comprendidas dentro de las Monocotiledóneas. Pertenecen
a la familia botánica Musáceae y ésta al orden Scitamineae.
La familia Musáceas está constituida por los géneros Musa y Ensete. El género Ensete se
reproduce por semilla, es de uso ornamental y hábitat subtropical. El género Musa está
formado por cuatro secciones: Australimusa, Callimusa, Rhodochlamys y Eumusa.
La sección Eumusa es la de mayor importancia económica y difusión geográfica, ya que en ella
se incluyen los bananos y plátanos comestibles (Miranda, 2015).
Tabla 1. Taxonomia
Hojas
Las hojas de banana se cuentan entre las más grandes del reino vegetal. Son lisas, tiernas,
oblongas, con el ápice trunco y la base redonda o ligeramente cordiforme, verdes por el haz y
más claras y normalmente glaucas por el envés, con los márgenes lisos y las nervaduras
pinnadas, amarillentas o verdes (Dávila, 1983).
Flores
Unos 10 a 15 meses después del nacimiento del pseudotallo, cuando éste ya ha dado entre 26 y
32 hojas, nace directamente a partir del rizoma una inflorescencia que emerge del centro de los
pseudotallos en posición vertical; semeja un enorme capullo púrpura o violáceo que se afina
hacia el extremo distal, con el pedúnculo y el raquis glabros.
Al abrirse, revela una estructura en forma de espiga, sobre cuyo tallo axial se disponen en
espiral hileras dobles de flores, agrupadas en racimos de 10 a 20 que están protegidos por
brácteas gruesas y carnosas de color purpúreo. A medida que las flores se desarrollan, las
brácteas caen, un proceso que tarda entre 10 y 30 días para la primera hilera (CENTA, 2010).
Frutos
El fruto tarda entre 80 y 180 días en desarrollarse por completo. En condiciones ideales
fructifican todas las flores femeninas, adoptando una apariencia dactiliforme que lleva a que se
denomine mano a las hileras en las que se disponen. Puede haber entre 5 y 20 manos por
espiga, aunque normalmente se trunca la misma parcialmente para evitar el desarrollo de
frutos imperfectos y evitar que el capullo terminal insuma las energías de la planta. El punto de
corte se fija normalmente en la "falsa mano", una en la que aparecen frutos enanos. En total
puede producir unos 300 a 400 frutos por espiga, pesando más de 50 kg (Dávila, 1983).
ETAPAS DE VIDA
Etapa de desarrollo
Esta etapa inicia con la formación de la parte comestible, es decir, el engrandecimiento del
fruto y cesa con la terminación del crecimiento natural, incluye las etapas de pre maduración y
maduración (Bustillo, 2008).
Etapa de premaduración:
Es el periodo de máximo engrosamiento y tamaño de la fruta. El plátano no maduro es verde
oscuro y las primeras señales visibles del cambio se aprecian en el color de la cáscara (verde
claro) y en la consistencia del corazón se ablanda y cambia de un color blanco total a un color
blanco ligeramente alterado. El ablandamiento de la pulpa avanza hacia fuera, desde el
corazón, y desde la punta hasta el pedúnculo, y se puede percibir al tacto. El verde claro de la
cáscara pasa a un verde amarillento pálido, y en este estado toda la pulpa se ha ablandado
perceptiblemente. En este periodo el plátano se usa para consumo humano (Bustillo, 2008).
Etapa de maduración:
Es la etapa de máxima utilidad para el consumo. En donde la fruta es de color amarillo intenso,
habiendo desaparecido ya toda traza de verde, excepto en el ápice y en el pedúnculo.
El ápice verde persiste incluso cuando el fruto ha amarilleado totalmente; a medida que se
desaparece el color verde de las puntas, diciéndose de la fruta que está madura para comer, la
pulpa en ese estado, es de textura suave y color amarillento (Bustillo, 2008).
Etapa de sobre maduración:
Esta etapa se define como la secuencia de cambio de color, sabor y textura, que conlleva al
estado en el cual la fruta es aún aceptable para comer a pesar de que se hayan suscitado dichos
cambios.
En el caso del plátano, la pulpa pierde el jugo natural y sales del fruto por
estar muy impregnadas de agua, y en las cáscaras ocurren alteraciones degenerativas, en su
mayor parte causadas por infecciones fúngicas (Bustillo, 2008).
Etapa de senescencia:
En esta etapa el plátano pierde calidad, presenta desordenes fisiológicos y enfermedades
inducidas por hongos. En el plátano, las primeras señales de esos cambios consisten en
manchas pardas, que finalmente coleasen hasta que la cáscara se torna parda, estado en el cual
la pulpa todavía se puede comer. Por último la cáscara adquiere un color pardo (Bustillo,
2008).
BIOETANOL
Es un alcohol producido a partir de la fermentación de azúcares que se encuentran en las
plantas y desechos orgánicos ricas en azúcar (maíz, caña de azúcar, cebada, trigo, sorgo,
remolacha, etc.) que al ser mezclado con nafta produce un biocombustible de alto energético,
con características muy similares a la nafta pero con una importante reducción de las
emisiones de contaminantes en los motores tradicionales de combustión (Elicegui, 2006).
El bioetanol mezclado con la gasolina produce un biocombustible de alto poder energético con
características muy similares a la gasolina pero con una importante reducción de las emisiones
contaminantes en los motores tradicionales de combustión. El etanol se usa en mezclas con la
gasolina en concentraciones del 5 o el 10 % respectivamente, que no requieren modificaciones
en los motores actuales.
PROCESOS TECNOLÓGICOS PARA LA PRODUCCIÓN DE ETANOL
El proceso para la producción de etanol por vía fermentativa tiene dos etapas fundamentales:
la fermentación y la destilación.
Fermentación alcohólica
La fermentación es la etapa principal del proceso, no solo porque en ella se produce el etanol,
sino porque se reproduce la masa fundamental de levadura y además por formarse aquí los
productos secundarios. En la etapa fermentativa se emplean diferentes tipos de nutrientes, los
más utilizados actualmente son urea y sulfato de amonio, los cuales se utilizan como
suministradores de nitrógeno y el fosfato de amonio como donador de fósforo.
La ruta enzimática de la glucólisis (degradación de glucosa por vía aerobia) y de la
fermentación alcohólica fue aclarada en el transcurso de muchos años de investigación a
finales del siglo XIX y en la primera mitad del XX. Las observaciones fundamentales efectuadas
con los extractos de levadura y el descubrimiento posterior de que los extractos musculares
pueden catalizar la glucólisis hasta lactato, sirvieron para realizar investigaciones más
intensas. La secuencia de reacciones entre la glucosa y el piruvato se conoce por el nombre de
ruta de Embden-Meyerhof, o también de Embden-Meyerhof-Parnas, en honor a sus
descubridores. Los sustratos más comúnmente usados para la fermentación son los azúcares,
en especial la Dglucosa. Una clase de fermentación importante de la glucosa es la fermentación
alcohólica (Hernández, 2007).
Temperatura.
La selección de esta variable es influenciada tanto por factores fisiológicos como por
problemas físicos (pérdidas debidas a la evaporación de etanol al trabajar con temperatura
elevada). Se debe tener en cuenta que para cada levadura existe una temperatura óptima de
desarrollo, en la cual se muestra activa. Además, se tiene una zona independiente de la
temperatura óptima en la cual la levadura aún presenta actividad; a medida que se aleja de la
temperatura óptima su actividad disminuye notablemente. Por debajo de la temperatura
señalada como mínima y por encima de la máxima, las levaduras continúan viviendo en estado
latente, sin embargo, al exponer cualquier levadura a una temperatura de 55 ºC por un tiempo
de 5 minutos provoca su muerte (Garzón y Hernández, 2009).
El ph.
Este es un factor importante en la fermentación, debido a su importancia en el control de la
contaminación bacterial como también al efecto en el crecimiento de las levaduras, en la
velocidad de fermentación y en la formación de alcohol. Durante la fermentación la levadura
toma el nitrógeno de los aminoácidos orgánicos, perdiendo su carácter anfótero y pasando a
ácidos, lo cual origina una disminución del pH del medio. Cuanto más bajo el pH del medio,
tanto menor el peligro de infección, pero si se trabaja con pH muy bajos la fermentación es muy
lenta, ya que la levadura no se desarrolla de la forma conveniente. Según estudios se halló que
el pH más favorable para el crecimiento de la Saccharomyces Cerevisiae se encuentra entre 4.4
- 5.0, con un pH de 4.5 para su crecimiento óptimo (Bustillo, 2008).
Productividad.
La productividad se define como la producción de biomasa por unidad de volumen, por unidad
de tiempo de cultivo, dado en concentración de biomasa (g/L) en función de tiempo (Garzón y
Hernández, 2009).
Nutrientes.
Es el proceso que se utiliza para la obtención de bioetanol el alcohol producido por destilación
contiene una parte significativa de agua, que debe ser eliminada para su uso como combustible.
Para ello se utiliza un proceso de destilación dado que el etanol tiene un punto de ebullición
menor (78,3ºC) que el agua (100ºC), la mezcla se calienta hasta que el alcohol se evapore y se
pueda separar por condensación de éste (NOM-076-SSA1-2002).
El etanol se produce por fermentación de estas materias primas con levaduras u otros
microorganismos. Las de la primera clase fermentan directamente. El segundo tipo consta de
hidratos de carbono complejos, como el almidón, que primero se deben convertir en azúcares
fermentables mediante la acción de enzimas (Hernández, 2007).
LEVADURA
Las levaduras muestran una extendida distribución a través de los reinos vegetales y animal
también en los suelos, aunque son relativamente pocas las especies de importancia médica e
industrial. La levadura biológica es un hongo perteneciente al género Hemiascomicetos que
transforman los azucares en CO2, alcohol etílico y energía además de descomponer los
azucares complejos fermentables en otros más simples por medio de la enzima zymasa.
Muchas de la las levaduras son facultativas y la fermentación sólo tiene lugar cuando falta
oxígeno (anaerobia). Sin embargo, en los medios azucarados en presencia de aire pasa
espontáneamente al proceso anaerobio porque el consumo de oxígeno es muy alto, por lo que
se agota rápidamente (Sanchez, 2003).
Saccharomyces Cerevisiae
Es la especie de levadura utilizada por excelencia para la obtención de etanol a nivel industrial
puesto que es un microorganismo de fácil manipulación y recuperación, no es exigente en
cuanto a su cultivo, no presenta alto costo , tolera altas concentraciones de etanol , en la
fermentación produce bajos niveles de subproductos, capaz de utilizar altas concentraciones
de azúcares, presenta alta viabilidad celular para el reciclado y características de floculación y
sedimentación para el procesamiento posterior. Es una levadura cuya colonia es color crema o
blanco, apariencia húmeda y brillante de bordes irregulares. La temperatura óptima de
crecimiento es de 25 a 30 °C. (Garzón y Hernández, 2009). Las levaduras Saccharomyces
Cerevisiae han sido microorganismos muy utilizados tanto en microbiología industrial
(bebidas fermentadas y pan) como en todo el desarrollo de la bioquímica.
DIAGRAMA DE FLUJO
Figura 3. Diagrama de proceso para la producción de bioetanol
DESARROLLO DE LA INVESTIGACIÓN
Considerando los objetivos específicos planteados, la metodología se divide en 4 etapas:
Etapa I: Desarrolló de la curva patrón de glucosa en rangos de 0.05 a 1 mg/mL.
Etapa II: En esta etapa se somete a pretratamiento la cáscara para posteriormente realizar la
Hidrolisis química. Después de la hidrolisis la muestra se somete a filtración, neutralización
con
NaOH al 5 N y seguido de una centrifugación.
Etapa III: Durante esta etapa se determinó la cantidad de azúcares reductores mediante una
técnica de colorimetría denominada DNS usando el espectrofotómetro 540 nm basándose en
una curva de patrón seguida de la fermentación alcohólica anaeróbica esta se llevó acabo con la
levadura Saccharomyces cerevisa
Proceso de pretratamiento
Las cáscaras fueron reducidas a un tamaño entre 0.5 y 1 cm; con la finalidad de facilitar el
manejo del material. Posteriormente se pesaron 10 g para cada una de las 8 muestras y se
sumergieron en una solución de NaOH 0.1 N relación 1:5 para realizar la eliminación de lignina
durante 30 minutos a 270 rpm, por medio de filtración al vacío, la lignina se separó de las
muestras de cascara de plátano.
Proceso de neutralización
Pasadas las 24 horas de hidrolisis las muestras se filtraron con papel filtro (poro grueso) por
gravedad y se ajustó el pH entre 4 y 5 mediante agitación magnética adicionado una solución
de NaOH al 5 N. Posteriormente se centrifugo a 3,000 rpm en un lapso de 15 minutos con la
finalidad de obtener una separación y así mismo la sedimentación de grumos.