En cada una de las moléculas hijas se conserva una de las

cadenas originales, y por eso se dice que la replicación del

ADN es semi conservadora. Hasta que finalmente se pudo
demostrar que la replicación es semiconservadora, se
consideraron tres posibles modelos para el mecanismo de la
replicación:
Semiconservadora (modelo correcto). En cada una de las
moléculas hijas se conserva una de las cadenas originales.
Conservadora. Se sintetiza una molécula totalmente nueva,
copia de la original.
Dispersora, o dispersante. Las cadenas hijas constan de
fragmentos de la cadena antigua y fragmentos de la nueva.
Este tipo de duplicación de ADN se llama replicación
semiconservativa del ADN, porque cada una de las dos
moléculas hijas contiene la mitad de la molécula madre. Este
tipo de duplicación semiconservativa se puede realizar
porque la secuencia de las bases que la constituyen ha sido
conservada, de forma que la secuencia de cada molécula
madre sirve de molde para formar la secuencia de las dos
moléculas hijas.
LA DUPLICACION SEMICONSERVATIVA DEL ADN
Sueoka y Yoshikawa (1963) realizaron estudios genéticos de
complementación de mutaciones que permitieron determinar
que desde los orígenes la replicación avanza de forma
secuencial. Trabajaron con Bacillus subtilis porque era
posible obtener cultivos sincronizados de forma que todas las
células del cultivo estuvieran en la misma fase del ciclo
celular. El método consistía en la conjugación bacteriana de
cepas silvestres con cepas mutantes incapaces de sintetizar
determinados aminoácidos. Conociendo la localización de los
genes que codifican las proteínas implicadas en la síntesis de
los diferentes aminoácidos en el cromosoma bacteriano, y
haciendo crecer las bacterias receptoras en un "medio
mínimo" (donde sólo pudiesen crecer las que hubieran
recibido alguno de estos genes), al extraer ADN a diferentes
tiempos se observó que, tras la última extracción aparecía
con mayor frecuencia el gen implicado en la síntesis de uno
de los aminoácidos (el correspondiente a la "posición 1"), que
el gen adyacente implicado en la síntesis de otro aminoácido
("posición 2"). De la misma forma, el gen que ocupaba la
"posición 3" aparecía con menor frecuencia que el que
ocupaba la "posición 2", y así sucesivamente.
El proceso de replicación de ADN es el mecanismo que
permite al ADN duplicarse (es decir, sintetizar una copia
idéntica). De esta manera de una molécula de ADN única, se
obtienen dos o más "réplicas" de la primera. Esta duplicación
del material genético se produce de acuerdo con un
mecanismo semiconservador, lo que indica que las dos
cadenas complementarias del ADN original, al separarse,
sirven de molde cada una para la síntesis de una nueva
cadena complementaria de la cadena molde, de forma que
cada nueva doble hélice contiene una de las cadenas del
ADN original.
La vida de los seres vivos es muy variable , por tanto para
que esta no se extinga ha de haber un momento en se
reproduzcan, lo cual lleva implicito la formación de copias del
ADN del progenitor o progenitores .
Se dieron muchas hipótesis sobre como se dupllicaba el ADN
hasta que Watson y Crick propusieron la hipótesis
semiconservativa (posteriormente demostrada por Meselson
Y Stahl en 1957), según la cual, las nuevas moléculas de
ADN formadas a partir de otra antigua, tienen una hebra
antigua y otra nueva.
La molécula de ADN se abre como una cremallera por ruptura
de los puentes de hidrógeno entre las bases complementarias
puntos determinados: los orígenes de replicación. Las
proteínas iniciadoras reconocen secuencias de nucleótidos
específicas en esos puntos y facilitan la fijación de otras
proteínas que permitirán la separación de las dos hebras de
ADN formándose una horquilla de replicación. Un gran
número de enzimas y proteínas intervienen en el mecanismo
molecular de la replicación, formando el llamado complejo de
replicación o replisoma. Estas proteínas y enzimas son
homólogas en eucariotas y arqueas, pero difieren en
bacterias.
DUPLICACIÓN DEL ADN EN EUCARIONTES
Es similar a la de los procariontes, es decir, semiconservativa
y bidireccional. Existe una hebra conductora y una hebra
retardada con fragmentos de Okazaki. Se inicia en la
burbujas de replicación (puede haber unas 100 a la vez)
Gracias a la complementación entre las bases que forman la
secuencia de cada una de las cadenas, el ADN tiene la
importante propiedad de reproducirse idénticamente, lo que
permite que la información genética se transmita de una
célula madre a las células hijas y es la base de la herencia
del material genético.
En la primera generación (figura 2.b) se obtuvo una única
banda de ADN con densidad intermedia. En la segunda
generación (figura 2.c) se obtuvieron dos bandas, una con
densidad ligera y otra con densidad intermedia o híbrida. En
la tercera generación se obtuvieron dos bandas, una ligera
(con una abundancia del 75 %) y otra intermedia (con el 25 %
restante).
La banda intermedia o híbrida representa una molécula de
ADN que contiene una cadena pesada (original) y otra ligera
(recién sintetizada). Las cadenas ligeras representan una
molécula de ADN en la que las dos cadenas han sido
sintetizadas (no existían aún cuando las células se pusieron
en presencia de nitrógeno-15).
El experimento de Meselson y Stahl en 1958 permitió
demostrar que el mecanismo real se ajusta a la hipótesis de
replicación semiconservadora. Para ello se hicieron crecer
células de Escherichia coli en presencia de nitrógeno-15, un
isótopo del nitrógeno más pesado de lo habitual. En
consecuencia, el isótopo se incorporó a las cadenas de ADN
que se iban sintetizando, haciéndolas más pesadas.
Una vez conseguido el primer objetivo, las células fueron
transferidas a un medio que contenía nitrógeno-14, es decir,
un medio más ligero, donde continuaron su crecimiento
(división celular, que requiere la replicación del ADN). Se
purificó el ADN y se analizó mediante una centrifugación en
gradiente de cloruro de cesio, en donde hay más densidad en
el fondo del tubo que en la parte media del mismo.
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