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Departamento de Biología
Laboratorio de Microbiología Experimental
“Aislamiento de microorganismos”
Equipo 4. Rios Garcés Daniela. Serrano Ortiz Itzy Natalia
Resumen.
Los microorganismos no se encuentran asilados de manera natural, es por ello que para su
estudio se requieren de técnicas que permitan separarlos con el fin de obtener un cultivo axénico
o puro para su posterior caracterización y estudio.
Se realizó el aislamiento de microorganismos empleando la técnica de agotamiento por
cuadrantes, así como el uso de medios de cultivo selectivos que inhibieron todos aquellos
microorganismos incompatibles con el medio, dejando proliferar únicamente a los que se deseaba
aislar. Al finalizar el trabajo experimental, se determinó que en la muestra problema se
encontraban las bacterias Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa; y la levadura
Rhodotorula mucilaginosa.
Palabras clave: cultivo axénico, técnicas de aislamiento, selectivo, separación.
Resultados.
Se utilizaron los siguientes medios de cultivo
Primeramente, se realizó un frotis de la enumerados en la tabla, en los que por
muestra problema y se tiñó con tinción de medio de la técnica de siembra agotamiento
Gram para determinar las características por cuadrantes se inoculó la muestra
morfológicas que presentaban los problema y que tras 48 hrs de incubación se
microorganismos en ella obteniendo los obtuvieron los siguientes resultados:
siguientes resultados. Tabla 2. Medios de cultivo y condiciones de
Tabla 1. Morfología de la muestra problema mediante incubación.
microscopía. Medio de ¿Crecimiento Temperatura y
1° 𝜇o. 2° 𝜇o. 3° 𝜇o. Cultivo ? tiempo de
incubación.
Gram positiva negativo —
TSA Si 37°C/ 48hrs
Se Se observa Se distinguen
observan una gran figuras Sabouraud con Si 28°C/72hrs
Característ rosa de bengala
icas agrupacion agrupación ovoides
es de de bacilos desteñidas,
cocos color teñidos de características Mac Conkey Si 37°C/ 48hrs
violeta. color rojo de una
levadura EMB Si 37°C/ 48hrs
Anexos.
Figura 1. Agar Mac Conkey Figura 2. Agar Cetrimide Figura 3. Agar Manitol-Sal
( 48 hrs de incubación) (48 hrs de incubación). (48 hrs de incubación).
Fecha: 17/septiembre/2018
uestra problema
Muestra: M
Tinción: Tinción de Gram
Objetivo: 100x
Aumento total: 1000x
Descripción: En esta microscopía se
alcanzan a distinguir tres tipos diferentes
de microorganismos. Se observan unos
bacilos, unos cocos apenas visibles y
unas formas ovoides y de gran tamaño
correspondientes a las de una levadura
Figura 14. Microscopía de la muestra
Figura 13. Agar ENDO (tras 5 días de problema.
incubación)
Fecha: 17/septiembre/2018
omada de la placa de agar de
Muestra: T
Cetrimide.
Tinción: Tinción de Gram
Objetivo: 100x
Aumento total: 1000x
Descripción: Se observa una
microscopía que describe unos bacilos
color rosado por lo que se determina que
son gram negativos. La colonia parece no Figura 18. Placa de agar Cetrimide.
Figura 15. Microscopía de la muestra (resiembra de la original).
tener contaminación de algún otro
tomada de Agar Cetrimide
microorganismo.
Fecha: 17/septiembre/2018
omada de la placa de Agar
Muestra: T
manitol-sal.
Tinción: Tinción de Gram
Objetivo: 100x
Aumento total: 1000x
Descripción: Se observa un campo en
donde podemos identificar unos cocos
agrupados al parecer en forma de
estafilo, el campo se observa de igual
manera sin contaminación de algún
Figura 16. Microscopía de la muestra
microorganismo diferente.
tomada de Agar Manitol-sal. Figura 19. Placa de Agar Manitol-sal
(resiembra de la original).
Fecha: 17/septiembre/2018
uestra obtenida de la placa
Muestra: M
de agar de Saboraud con rosa de
Bengala.
Tinción: Tinción Simple
Objetivo:40x
Aumento total:400x
Descripción: Se observa una
microscopía donde podemos observar
cuerpos ovoides teñidos con Cristal
Figura 17. Microscopía de la muestra Figura 20. Placa de agar Sabouraud con
violeta. Es el único microorganismo rosa de bengala. (resiembra de la
tomada de Agar Sabouraud con rosa de original).
presente en el campo observado.
Bengala.
Fecha: 21/septiembre/2018
omada de la placa de Agar
Muestra: T
manitol-sal. (resiembra)
Tinción: Tinción de Gram
Objetivo: 100x
Aumento total: 1000x
Descripción: Se observa un campo en
donde podemos identificar unos cocos
agrupados al parecer en forma de
estafilo, el campo se observa sin
contaminación de algún microorganismo
Figura 21. Microscopía de la muestra diferente, y muy similar a la primera
tomada de Agar Manitol-sal (resiembra). microscopia.
Fecha: 21/septiembre/2018
omada de la placa de agar de
Muestra: T
Cetrimide. (resiembra)
Tinción: Tinción de Gram
Objetivo: 100x
Aumento total: 1000x
Descripción: En la microscopía se
observan unos bacilos color rosado gram
negativos, la colonia no tiene
contaminación de algún otro
microorganismo y se observa igual al de
la primera siembra.
Figura 22. Microscopía de la muestra
tomada de Agar Cetrimide (resiembra).
Fecha: 21/septiembre/2018
uestra obtenida de la placa
Muestra: M
de agar de Sabouraud con rosa de
Bengala. (resiembra)
Tinción: Tinción Simple
Objetivo:40x
Aumento total:400x
Descripción: En la microscopía se
pueden observar cuerpos ovoides teñidos
con Cristal violeta; idénticos a la primer