PRACTICA

PRACTICA DE LABORATORIO N° 5
OBSERVAVCIONES MICROSCOPICAS DE LAS CELULAS PROCARIOTAS

FACULTAD DE CIENCAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE ODONTOLOGIA

DOCENTE: BRICEIDA BERGADO

AUTORES:
JUAN CARLOS BERONA
MARIANELA BURGOS RICO
DANIELA ZARETH CORREA DIAZ
DAYANA MADRID OSOSRIO
LORAINE SAEZ CARABALLO

UNIVERSIDAD DEL SINU “ELIAS BECHARA ZAINUM”

MONTERIA – CORDOBA

2020 - 2
 5
OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA DE CÉLULAS
PROCARIOTAS

OBJETIVOS

♦ Reconocer diferentes técnicas de tinción empleadas en la observación

de microorganismos procariotas.

♦ Reconocer las diferentes formas bacterianas de organismos

procariontes.

MATERIALES (por grupo)

- Mediante la observación del video; identifica los materiales y
procedimientos)

❑ Portaobjetos ❑ Solución salina ❑ Agua destilada

❑ Cubreobjetos ❑ Asa ❑ Azul de metileno

bacteriológica
❑ Microscopio ❑ Colorantes de
❑ Cultivo Gram.
❑ Papel de arroz bacteriano
❑ Aceite de ❑ Gotero
inmersión
 PROCEDIMIENTO:
Realización de frotis directo.

1. Desinfecte el área de trabajo.

2. Tome una gota de solución salina y colóquela sobre la lámina portaobjetos.

3. Con el asa bacteriológica y de manera estéril, tomo una muestra de la colonia

bacteriana a estudiar. Mezcle y homogenice la muestra tomada con el asa
con la solución salina que se encuentra sobre la lámina cubreobjetos.

4. Permita que se seque completamente a temperatura ambiente.

5. Fije el extendido por calor o mediante el uso de metanol.

Tinción Simple: AZUL DE METILENO

1. Luego de fijar la muestra, añadir azul de metileno y esperar 2 minutos.

2. Lavar con agua
3. Secar.
4. Observar primero con el objetivo de 40x; luego se añade aceite de inmersión
y se observa con el objetivo de 100x. Dibuje.
Teniendo en cuenta la práctica de microscopia y medidas del microscopio
(práctica 4), realiza los siguientes pasos:

1. Dibuja la célula observada y determina el objetivo, aumento y tamaño

aproximado de la misma

EJERCICIO 1
1. Células procariotas. Dibuja lo observado en el Video y responde las siguientes preguntas:

1.1Objetivo: 10X
1.2Aumento: 100X .
1.3Tamaño aproximado: .
1.4¿Qué forma bacteriana observas? Estreptococo, bacilos
1.5 ¿Cuál es la importancia clínica del género Klebsiella? Klebsiella pneumoniae es la especie de
mayor relevancia clínica dentro del género bacteriano Klebsiella, compuesto por bacterias Gram
negativas de la familia Enterobacteriaceae, que desempeñan un importante papel como causa de las
enfermedades infecciosas oportunistas.
Son bacterias gram negativas, la asimilación y la fermentación de la lactosa se puede observar en el
agar MacConkey donde las colonias son de color rosado y en el medio Kliger o TSI donde son
Ácido/Ácido, es decir fermentador de la lactosa más producción de gas; y en la fermentación acetónica
o prueba de Voges Proskauer son positivos. Por último, sus condiciones óptimas de cultivo son en agar nutritivo a 37 °C, pH de 7.0,
presión osmótica de 1 atm.
Tinción compuesta: COLORACIÓN DE GRAM

1. Coloque la lámina con la muestra sobre un soporte de coloración.

2. Cubra el extendido con cristal violeta y déjelo actuar por un minuto.

3. Lave con agua de chorro y escurra.

4. Agregue lugol y déjelo actuar por un minuto.

5. Lave con agua de chorro y escurra.

6. Agregue alcohol etílico o alcohol acetona por un minuto o hasta que se decolore
completamente la lámina.

7. Lave con agua de chorro y escurra.

8. Examine el frotis, si la muestra permanece coloreada use nuevamente el

decolorante por 30 seg.

9. Lave con agua de chorro y escurra.

10. Cubra el extendido con fucsina o Safranina y déjelo actuar por un minuto.

11. Lave con agua de chorro y escurra.

12. Permita que se seque completamente a temperatura ambiente.

13. Observe al microscopio en 100X, no olvide usar aceite de inmersión.

1. Dibuja las células observadas y determina el objetivo, aumento y tamaño

aproximado.

EJERCICIO 2
2. Células procariotas. Dibuja lo observado en el Video y responde las siguientes
preguntas:

2.1Objetivo: _10X___.
2.2Aumento: 100X .
2.3Tamaño aproximado: .
2.4¿Qué forma bacteriana observas? Bacilos, coco
2.5¿Se trata de una bacteria GRAM+ ó GRAM –?
GRAM -
EJERCICIO 3
CELULA PROCARIOTA
1. Coloca una foto de lo segunda tinción de GRAM observada en el video y responde las preguntas.

3.1 ¿Que formas morfológicas bacterianas observas?

Se observan bacilos, vibrios
3.2 ¿El genero Salmonella sp es GRAM + ó GRAM -?
ES GRAM –
3.3 ¿El genero Lactobacillus sp es GRAM + ó GRAM -?
ES GRAM +
3.4 ¿Cuáles son las principales
características de Salmonella sp? . 1.SON
BACILOS GRAM –
2.Móviles (flagelos perítricos) Excepto S.
Gallinarum y s 3.no forman esporas
4.la pared celular posee al antígeno (Ag)
somatico "o"

EJERCICIO 4
CELULA PROCARIOTA
4. Coloca una foto de la tercera tinción de GRAM observada en el video y responde las preguntas.

4.1 ¿Que formas morfológicas bacterianas observas?

Bacilos, cocos, estreptococo

4.2 ¿Clasifica las bacterias observadas según forma

morfológica y tinción de GRAM

GRAM + (coco, diplococo, estreptococos, bacilos,

estreptobacilios)

GRAM – (coco, diplococo, estafilococo, estreptococos

bacilos, diplobacilo, estreptobacilo)
CUESTIONARIO

1. Según la tinción de GRAM las bacterias se clasifican en dos tipos, GRAM positivas y
GRAM negativas, esta tinción diferencial se debe a las características de sus paredes celulares.
Dibuja estas paredes donde corresponda y coloca el color que toma en la tinción de GRAM

GRAM POSITIVAS GRAM NEGATIVAS

Color: Azul Color: rojo- rosado

Dibujo de la pared Dibujo de la pare

1. Teniendo en cuenta la clasificación de las células procariotas según su forma,
dibuja como se observan estas células al microscopio óptico.

FORMA DIBUJO EJEMPLO ENFERMEDAD QUE

PRODUCE

Coco Neisseria meningitidis La Meningitis

o meningococo meningocócica

Diplococos
Neisseria gonorrhoeae o La gonorrea
gonococo

Estreptococos Streptococcus A o
estreptococos del grupo A La escarlatina

Endocarditis u
Estafilococos Staphylococcus aureus osteomielitis
 Infecciones: ántrax
Bacilos Bacillus anthracis cutáneo y ántrax por
inhalación

Infecciones por
Streptobacillus mordedura de rata;
Estreptobacilos moniliformis La fiebre de
Haverhill

Espirilos Treponema Pallidum sífilis

Vibrio Gastroenteritis
Vibrios parahaemolyticus aguda