ESCUELA SUPERIOR POLITECNICA DE CHIMBORAZO

SEDE: ORELLANA
CARRERA: AGRONOMIA
PARALELO: A

1. DATOS GENERALES:

NOMBRE: CODIGO:
Nicolás Alarcón 2904
Naidelin García 2940
Francisco Ávila 2837
Nayeli Vuele 2921
FECHA DE REALIZACIÓN: FECHA DE ENTREGA:
10 – 12 – 2022 11 – 12 – 2022

1. TEMA: CARACTERIZACIÓN DE COLONIAS MICROBIANAS

2. NUMERO DE ESTUDIANTES: 4

3. GRUPOS: 1

4. OBJETIVOS

a. Elaborar medios de cultivos para bacterias y hongos.

b. Recolección de microorganismos del ambiente.

c. Caracterización del cultivo o población.

5. INTRODUCCIÓN

CLASIFICACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO

Los medios de cultivo son aquel que contiene agua y una serie de nutrientes, necesario para
su metabolismo, normalmente se utilizan placas de Petri con agar más nutrientes específicos
(según el microorganismo que se desea aislar), aunque también existen medios de cultivo
en tubo. La función de los medios de cultivo también desempeña un papel central. Los
medios de enriquecimiento, selectivos y diferenciales permiten ajustar las condiciones para
favorecer ciertos tipos de microorganismos, inhibir otros y facilitar la identificación de
características específicas (Cuevas, 2016).
Clasificación:

SEGÚN LA NATURALEZA DE SUS INGREDIENTES:

Proteicos: Contienen peptonas, hidrolizados o extractos, o sea, productos de la lisis o

hidrólisis parcial de las proteínas, cuya composición no se conoce con exactitud.

Sintéticos: No contienen en su formulación productos de naturaleza proteica.

Intermedios: Contienen compuestos nitrogenados de origen proteico, pero de composición

o estructura conocida, como los aminoácidos, en conjunto con otras sustancias orgánicas e
inorgánicas conocidas (Martínez & Zhurbenko, 2018).

SEGÚN LA PROMOCIÓN DEL CRECIMIENTO DE DETERMINADOS

MICROORGANISMOS:

De enriquecimiento: Por lo general son medios líquidos, pudiendo ser semisólidos en

algunos casos, que contienen sustancias que estimulan el crecimiento de los
microorganismos y permiten el desarrollo de la población microbiana a partir de un número
reducido de células de determinados gérmenes que pueden encontrarse en presencia de otros
que, hallándose en condiciones favorables, pudieran frenar el desarrollo de los primeros.

Selectivos: En su mayoría son sólidos, contienen sustancias que inhiben el crecimiento de

determinados microorganismos, o sea, previene el crecimiento de especies acompañantes
indeseables.

Electivos: Toleran el crecimiento de varias especies de microorganismos y a la vez facilitan

la identificación de colonias de interés, garantizándoles los nutrientes mínimos necesarios
para su desarrollo (Martínez & Zhurbenko, 2018).
SEGÚN SU FINALIDAD:

Comunes: Favorecen el desarrollo de la mayor parte de los microorganismos sin satisfacer

específicamente algún requerimiento nutricional de carácter poco habitual en la generalidad
de estos.

Especiales: Su composición cumple con los requerimientos nutricionales vitales de un

microorganismo determinado que sólo en ese medio encuentra condiciones óptimas para su
desarrollo.

Diferenciales: Posibilitan la diferenciación entre microorganismos.

Selectivos: Incluyen en su formulación ingredientes que inhiben el desarrollo de

determinados microorganismos y contienen otras sustancias que promueven el crecimiento
de otros (Martínez & Zhurbenko, 2018).

METODOLOGÍA
a. Elaboración de medios de cultivo
i. Materiales
1. Peptona
2. Extracto de carne
3. Agar
4. Agua destilada
5. Espátula
6. Balanza analítica
7. 1 probetas de 100mL
8. Papel aluminio para pesar.
9. 2 matraces de 250mL
10. Planchas calentadoras o mecheros para calentar el medio.
11. Cuaderno de apuntes.
ii. Procedimiento
1. Verificar que los materiales estén limpios.
Preparación de Agar Nutritivo
2. Realizar los cálculos para preparar 150mL de medio.

3. Con la ayuda de la balanza analítica pesar todos los ingredientes.

Agar Peptona Extracto de carne

4. Colocar cada sustancia pesada en un matraz Erlenmeyer de

250mL.

5. Con ayuda de una probeta de 100mL añadir la mitad del total del
volumen.
6. Disolver el medio hasta homogenizar el contenido.

7. Añada el resto del volumen de agua.

8. Calentar la preparación hasta que el agar se haya disuelto. (solo si

es necesario).

9. Esterilizar.

Preparación de Tryptic Soy Broth (TSB)

10. Realizar los cálculos para preparar 50mL de TSB.

11. Con la ayuda de la balanza analítica pesar el medio de cultivo.

Peptona Agar

12. Colocar el polvo del medio pesado en un matraz de 100mL.

13. Con ayuda de una probeta de 100mL aforar con agua destilada a
50 mL de medio de cultivo.
a. Dispensación del medio agar nutritivo a las cajas de Petri.

23. Una vez finalizada la esterilización dispensar el medio de cultivo

(Agar nutritivo) en cajas de Petri, aprox. 15mL en cada caja. Este
procedimiento realizarlo en la cámara de flujo laminar.

b. Cultivo de microorganismos del ambiente.

i. Materiales
1. Medios de cultivo: Agar nutritivo y TSB

ii. Procedimiento
24. Seleccionar un ambiente en el cual desee capturar
microorganismos. Ej: Sala de profesores, baños, oficinas, bar.
 25. En el ambiente seleccionado, dejar la caja de Petri destapada por
10min.

26. Incubar a 37°C por 24 horas.

27. Caracterizar las colonias bacterianas.

6. RESULTADOS
6.1 Elaboración de medios de cultivo
Cálculos para preparar 150mL de agar nutritivo:
1000mL 150mL
Extracto de carne 3,0 g 60ml
Peptona 5,0 g 60ml
Agar 15,0 g 60ml
Agua destilada 1000 mL
 Cálculo para preparar medio TSB
1000mL 50mL
TSB 30g 100ml

6.2 Caracterización de colonias (guía para caracterizar colonias bacterianas)

6.3. Coloque una foto de la toda la caja de Petri con las colonias después de 24
horas de incubación.
6.4. Realice un cuadro de resultados.

Cuadro 1. Caracterización de las colonias microbianas

Foto de las colonias con Características Resultados
características similares
Tamaño Grande
Forma Filamentosa
Color No pigmentada
Elevación Elevada
Textura Lisa
Aspecto (seco, húmedo) Húmedo
Consistencia Suave
Foto de las colonias con Características Resultados
características similares
Tamaño Grande
Forma Irregular
Color No Pigmentada
Elevación Umbilicada
Textura Lisa
Aspecto (seco, húmedo) Húmedo
Consistencia Mucoide
Cuadro 2. Caracterización de las colonias microbianas
Foto de las colonias con Características Resultados
características similares
Tamaño Pequeña
Forma Circular
Color No pigmentada
Elevación Umbilicada
Textura Lisa
Aspecto (seco, húmedo) Húmedo
Consistencia Mucoide
Foto de las colonias con Características Resultados
características similares
Tamaño Pequeña
Forma Circular
Color Pigmentada (color marrón)
Elevación Convexa
Textura Lisa
Aspecto (seco, húmedo) Húmedo
Consistencia Mucoide

Cuadro 3. Caracterización de las colonias microbianas

Foto de las colonias con Características Resultados
características similares
Tamaño Mediana
Forma Circular
Color No pigmentada
Elevación Pulvinada
Textura Lisa
Aspecto (seco, húmedo) Húmedo
Consistencia Mucoide
 7. CONCLUSIONES
• Se elaboró medios de cultivos mediante diferentes preparaciones en la cual se
desarrolló sustancias nutritivas que permitieron el crecimiento, reproducción de
microorganismos.
• La recolección fue exitosa ya que gracias al medio externo los diferentes tipos de
microorganismos se acumularon en la Caja de Petri y esto permitió que la colonizaran.
• Se caracterizó 5 tipos de poblaciones de microorganismos los cuales variaban en sus
tamaños, formas, color y otras características que las hacen únicas.

8. ANEXOS
Laboratorio 01/12/2023 Laboratorio 04/12/2023 Laboratorio 06/12/202

Caracterización de las Caracterización de las Caracterización de las

colonias microbianas colonias microbianas colonias microbianas
 Foto de asistencia

9. BIBLIOGRAFIA (normas APA)

Bibliografía
Cuevas, L. B. (2016). Microbiología Clínica. Madrid: SÍNTESIS, S. A.
Martínez, C., & Zhurbenko, R. (2018). MANUAL DE MEDIOS DE CULTIVO 2018. BIOCEN.
www.biocen.cu