MECANISMO DE ACCION DE LA ENOLASA

Otra enzima glucolitica, la enolasa, cataliza la deshidratación reversible del 2-fosfoglicerato a fosfoenolpiruvato:

La enolasa de levadura (Mr 93.316) es un dimero con 436 residuos de aminoácidos por subunidad, la reacción de la enolasa ilustra un
tipo de catálisis por ion metálico y también proporciona un ejemplo de catálisis acido base general y de estabilidad del estado de
transición, la reacción tiene lugar en dos etapas (Figura (a)). En primer lugar el residuo Lys345 actúa como un catalizador acido general,
cediendo un protón al grupo –OH saliente. El protón en el C-2 del 2-fosfoglicerato no es muy acídico, por lo que no se atre fácilmente, sin
embargo en el sitio activo de la enzima, el 2-fosfoglicerato experimenta interacciones ionicas fuertes con dos iones Mg2+ unidos (Figura
(b)), que convierten el protón de C-2 en mas acídico (disminuye su pKa) lo que hace más fácil su extracción. Enlaces de hidrogeno con
otros residuos aminoácidos del sitio activo también contribuyen al mecanismo global. Las diversas interacciones estabilizan
efectivamente tanto el intermedio enolato como el estado de transición que precede a su formación.

Lys345 capta un Glu211 facilita la

protón mediante eliminación del
catálisis básica grupo-OH mediante
general. Dos iones catálisis dada
estabilizan el general.
intermedio enolico
resultante.

(a) 2-Fosfoglicerato unido al enzima

Andrea Malo Guadarrama, IBT 4 “A” Biocatálisis

Reacción en dos pasos catalizada por la enolasa. (a) Mecanismo mediante el que se convierte el 2-
fosfoglicerato (2-PGA) en fosfoenolpiruvato por la enolasa. El grupo carboxilo del 2-PCA está coordinado por
dos iones magnesio en el sitio activo, (b) El sustrato, 2-PCA, en relación a los iones magnesio, Lys345 y Glu211
en el sitio activo de la enolasa.
El nitrógeno se muestra en azul y el fosforo en naranja; no se muestran los átomos de hidrogeno (PDB ID
lONE).

Andrea Malo Guadarrama, IBT 4 “A” Biocatálisis