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2 2012 2211 1115710
2 2012 2211 1115710
DEPARTAMENTO DE QUIMICA
CARRERA: MICROBIOLOGÍA
Cuerpo Docente:
Docente Responsables: Dra. M. Alicia Biasutti
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OBJETIVOS
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REGIMEN DE CURSADO
CONDICIONES DE REGULARIDAD:
El alumno logrará la condición de alumno regular en la asignatura habiendo
conseguido:
I.- De los Trabajos Prácticos de Laboratorio:
1. El alumno deberá asistir a los Laboratorios unido de guardapolvo, lentes y guantes
de látex para su protección.
2. Para realizar el Trabajo Práctico el alumno deberá poseer los conocimientos básicos
del mismo.
3. Se tomarán interrogatorios orales y/o escritos referentes a los temas de la Práctica.
En caso de no aprobarse dicho interrogatorio el alumno será considerado
ausente.
4. Al finalizar cada Trabajo Práctico el alumno deberá confeccionar un informe de lo
realizado según las indicaciones del Docente encargado del TP, en caso de que los
resultados obtenidos e informados sean satisfactorios el trabajo será aprobado.
5. A los fines de regularizar la Asignatura es obligatoria la aprobación del 100% de los
Trabajos Prácticos previstos.
6. En caso de ausencia o de reprobación de algún Trabajo Práctico, de dispondrá de
una fecha para su recuperación para lo cual el alumno deberá haber aprobado en
primera instancia el 80% de los Trabajos Prácticos previstos.
II.- De los Trabajos Prácticos de Aula o Seminarios:
1. Los Alumnos deberán llevar un Cuaderno o Carpeta en donde figurarán los
Problemas resueltos en detalle de cada una de las Guías de Problemas
correspondientes a los distintos Temas, a los fines de que pueda constatarse esta
actividad por el Docente Encargado.
2. A los fines de regularizar la Asignatura es obligatoria la asistencia al 80% de las
Clases de Prácticos de Aula.
III.- De los Exámenes Parciales y Regularización de la Materia:
PROPUESTA DE REGIMEN DE CURSADO
La asignatura se dicta bajo un sistema de evaluación sumativa asociado a un
régimen de promoción. Total de exámenes parciales: cuatro (4). Cada examen parcial
equivale a 100 puntos. Total: 400 puntos.
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CONDICIONES DE REGULARIDAD:
Los alumnos lograrán la condición de Alumno Regular de acuerdo a las siguientes
exigencias:
1) El Alumno deberá rendir cuatro exámenes parciales.
2) Un examen parcial se considera aprobado si el estudiante ha conseguido reunir 50
o más puntos sobre 100 posibles.
3) El alumno podrá reprobar hasta dos (de los cuatro) exámenes parciales y los podrá
recuperar en forma individual, con la condición de obtener 200 o más puntos entre
los cuatro parciales aprobados.
Si se reúnen estos requisitos los Alumnos alcanzaran la condición de Regulares. Para
lograr la aprobación final de la materia, los alumnos regulares serán posteriormente
evaluados con un examen final.
CONDICIONES DE PROMOCIÓN:
Los alumnos lograrán la condición de alumnos promovidos en la asignatura habiendo
conseguido:
1) Aprobar los cuatro exámenes parciales en primera instancia. Un examen parcial
se considera aprobado si el estudiante ha conseguido reunir más de 50 puntos
sobre 100 posibles.
2) Sumar por lo menos 280 puntos (70%) entre los cuatro exámenes parciales.
Los alumnos promovidos estarán exentos del examen final y la nota será el promedio
de las notas de los cuatro exámenes parciales.
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PROGRAMA ANALITICO
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Tema 5: Formación de complejos. Estabilidad de complejos. Constantes de estabilidad.
Agentes quelantes. EDTA. Estudios de los equilibrios. Constante de formación y
constante efectiva de formación. Titulaciones con EDTA. Curvas de titulación.
Indicadores más comunes. Factores que influyen en la formación de complejos.
Determinación de dureza de aguas.
BIBLIOGRAFIA
- R. A. Day, Jr. And A. L. Underwood, “Química Analítica Cuantitativa”, 5ta. Ed.,
Prentice-Hall Hispanoamericana S. A., México, 1989.
- D. A. Skoog, D. M. West and F. J. Holler, “Fundamentos de Química
Analítica”, Volúmenes 1 y 2, Ed. Reverté, 1997.
- D. C. Harris. “Análisis Químico Cuantitativo”, 2da. Edición. Editorial Reverté
S. A., 2001.
- D. A. Skoog, D. M. West, F. J. Holler, S. R. Crouch, “Química Analítica”, 7ma.
Edición, McGraw –Hill, 2003.
- James S. Fritz and George H. Schenk, “Quantitative Analytical Chemistry”,
3rd. Ed., Allyn and Bacon, Inc., 1976.
- J. N. Butler, "Ionic Equilibrium, a Mathematical Approach", Addison-Wesley
(1964).
- J. N. Butler, "Cálculos de pH y Solubilidad", Fondo Educativo Interamericano
(1968).
- I. M. Kolthoff and E. B. Sandell, "Análisis Químico Cuantitativo", Nigar
(1976).
- D. Skoog and D. West, "Introducción a la Química Analítica", Reverté (1969).
- D. Skoog and D. West, "Fundamentos de Química Analítica", Vol 1 y 2,
Reverté (1983).
- J. A. Hammerly, “Curso de Química Analítica”, Ateneo (1984).
- H. A. Laitinen, “Chemical Analysis”, Mc Graw-Hill (1975).
- V. N. Alexáiev, “Análisis Cuantitativo", Mir (1976).
- Skoog-Leary, “Análisis Instrumental” cuarta edición, Mc Graw-Hill (1996).
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QUIMICA ANALÍTICA E INSTRUMENTAL (2211)
CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES 2012
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TRABAJOS PRACTICOS DE LABORATORIO
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Trabajos Prácticos
de Problemas
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QUÍMICA ANALÍTICA E INSTRUMENTAL (2211)
SERIE DE PROBLEMAS Nº 1
5. Se tiene una solución que contiene 410,3 g de H 2SO4 por litro de solución a 20
ºC. Si la densidad es igual a 1,243 g/ml, calcule la molaridad, la molalidad y la
normalidad.
9. Se tienen 505 ml de HCl 0,125 M y se desean diluir a 0,1 M. ¿Que cantidad de agua
se debe agregar?
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QUIMICA ANALITICA E INSTRUMENTAL (2211)
SERIE DE PROBLEMAS N° 2
7. Calcule el pH y pOH de una solución acuosa de NH 4Cl 0.1 M (Kb =1,8 x10-5).
9. Calcular el pH que resulta cuando se mezclan 500 ml de HAc 0,1 M con 500 ml de
NaAc 0.1 M. Calcular la variación de pH que se produce si a esta solución se le
agrega:
a) 10 ml de Na(OH) 1 M
b) 10 ml de HCl 1,5 M
10. Qué indicadores se podrían usar, teniendo en cuenta el intervalo de viraje del
indicador, en las siguientes titulaciones con soluciones 0,1 M.
a) HCl con Na(OH)
b) HAc con Na(OH) pKa = 4,75,
c) NH3 con HCl pKb = 4,75
11. Cualquier titulación ácido-base puede estudiarse punto a punto construyendo las
curvas de titulación? Cómo se construye una curva? Se titula 20,00 ml de una solución
de HCl 0,1 M con solución de Na(OH) 0,1 M. Calcule el pH de la solución al 0%, 50%,
75%; 100%; 125% y 150% de la titulación.
Grafique la curva de titulación correspondiente.
12. Una disolución de HCl fué valorada contra 0,1750 g de Na 2CO3 puro. Exactamente
47,00 ml del ácido fueron añadidos sobre el carbonato y la disolución hervida para
separar el CO2. El exceso de ácido fue valorado por retroceso con 2,12 ml de Na(OH)
0,01740 M al punto final del Verde de Bromocresol. Cuál es la normalidad del ácido?
13. Una muestra de vinagre de 50,0 ml ( = 1,06 g/ml), fue diluida a 250 ml y una
alícuota de 25,0 ml valorada con Na(OH) 0,136 N a un punto final de Fenolftaleína? Si
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se requieren 28,1 ml de base, indique el % P/P y P/V de ácido acético en la muestra.
14. Una muestra de 100 ml de un agua natural valorada con el indicador Naranja de
Metilo (He), consume 31,2 ml de HCl 0,0136 N. Otra muestra similar consume 11,80 ml
del ácido para alcanzar el punto final de Fenolftaleína (Fe). Calcular en mg/l ó ppm, la
concentración de CO3= y HCO3- en el agua.
PROBLEMAS PROPUESTOS
1. Calcule el pH al 0; 50; 100 y 150% de la titulación de HAc 0,1 M con Na(OH) 0,1 M.
6. Se analiza una serie de muestras de agua que pueden contener uno o más de los
siguientes compuestos: Na2CO3 ; NaHCO3 ; Na(OH). Fueron valoradas alícuotas de
100 ml con HCl 0,100 M, gastándose los siguientes volúmenes de ácido en cada caso
para alcanzar los puntos finales de fenolftaleína y heliantina.
a) 27,3 ml y 30,7 ml.
b) 0 ml y 18,1 ml.
c) 4,60 ml y 12,2 ml.
d) 27,1 ml y 27,1 ml.
e) 15,1 ml y 30,2 ml.
I) A qué se debe la alcalinidad del agua en cada caso?
II) Esquematice la curva que espera obtener en cada caso.
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Algunos Indicadores ácido-base
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QUIMICA ANALITICA E INSTRUMENTAL (2211)
SERIE DE PROBLEMAS N°3
1. Calcule las constantes Kps de las siguientes sales a partir de sus solubilidades:
a) AgI 0.00235 mg/l.
b) Mg(OH)2 0.000793 g/100 ml.
c) Ag2C2O4 3.28 mg/100 ml.
d) Ag2CrO4 0.03 g/l.
2. A partir de las Kps calcular las solubilidades, despreciando los efectos de hidrólisis:
a) PbSO4 en mg/200 ml Kps = 2.00 x 10-8.
b) CaF2 en g/250 ml Kps = 4.0 x 10-11.
c) Cu(IO3)2 en mg/100 ml Kps = 1.00 x 10-7.
d) AgI en mg/l Kps = 1.5 x 10-16.
9. Calcule pCl- en función del volumen de AgNO 3 agregado cuando se titulan 50.0 ml de
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solución de NaCl 0.1 M con AgNO3 0.1 M.
Grafique la curva en papel milimetrado y marque el punto final de la titulación de Mohr.
10. Con 250 ml de agua corriente se obtiene un precipitado calcinado de óxido de
calcio que pesa 0.0476 g. Calcular el contenido de calcio en el agua en ppm
(miligramos por litro) de carbonato de calcio.
PROBLEMAS PROPUESTOS
1. a) Escriba el Kps para una sal general CnAm siendo C el catión y A el anión.
b) Calcule el Kps del TlBr a 25 oC. Dato: solubilidad 0,0523 g% de solución.
c) Calcule la solubilidad del AgCl en solución acuosa siendo su Kps=1x10 -10
d) El Kps del CaF2 es 4,0x10-11 a 25 oC. Calcule la solubilidad del CaF2 en moles/litro y
en g/litro a la misma temperatura.
e) Siendo la solubilidad del Ca3(PO4)2 en agua a 20 oC 1,15x10-7 M calcule el Kps
respectivo.
2. -Determine la solubilidad del AgCl en una solución de NaCl 1.0x10 -2 M. Dato Kps
AgCl =1x10-10.
4. Se mezcla 50 ml de una solución que contiene 3,0 x 10 -5 moles de BaCl2 por litro con
100 ml de otra solución que contiene 4,5 x 10 -3 moles de Na2SO4 por litro. Calcular la
fracción de bario que precipita como BaSO4. Kps (BaSO4) = 1,1 x 10-10.
5. Qué masa de Ba(IO3)2 permanece sin precipitar cuando se mezcla 100 ml de BaCl 2
0.10 M con 300 ml de KIO3 0.10 M?. Kps Ba(IO3)2 = 1,7x10-9
6. A una disolución que contiene Ag+ 0,05 M y Pb2+ 0,025 M se añade NaCl.
a)¿Cuál es el primer compuesto que precipita?
b) ¿Cuál es la concentración del catión que precipitó primero cuando comience a
hacerlo el segundo?
Kps PbCl2= 2,4x10-4 (25 oC), Kps AgCl= 1,5x10-10 (25 oC)
8. Se prepara una solución patrón de AgNO 3 diluyendo 4.875 g de la sal hasta 1 litro.
Se desea utilizar esta solución para la valoración de muestras solubles de Cl -. Expresar
su concentración en: a) Normalidad; b) Título, como mg Cl -/ml; c) Título, como mg
NaCl/ml.
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10. Cuantos gramos de BaCl 2 contienen 250mL de solución, si después de agregar a
25 mL de la misma 40 mL de solución de AgNO 3 0,1020N para la titilación por retroceso
se ha consumido 15mL de solución de NH4SCN 0,098N
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QUIMICA ANALITICA E INSTRUMENTAL (2211)
SERIE DE PROBLEMAS Nº 4
2. Agentes oxidantes. Ajuste por el método del ión-electrón las siguientes reacciones
redox:
a) MnO4K + Fe (OH)2 + H2O Û MnO2 + Fe(OH)3 + KOH
b) K2Cr2O7 + H2SO4 + Fe SO4 Û Cr2(SO4)3 + Fe2 (SO4)3 + K2SO4 + H2O
c) H2O2 + HI Û H2O + I2
d) HNO3 (dil) + Cu Û Cu (NO3)2 + NO + H2O
3. Agentes reductores. Ajuste por el método del ión-electrón las siguientes reacciones
de óxido-reducción:
a) KMnO4 + H2O2 + H2SO4 Û MnSO4 + K2SO4 + H2O + O2
b) H2S + FeCl3 Û S + FeCl2 + HCl
c) Na2S2O3 + I2 Û Na2S4O6 + NaI
d) SnCl2 + FeCl3 Û SnCl4 + FeCl2
6. Cuántos ml de KMnO4 0,5 N en medio ácido, son necesarios para reaccionar con 5
ml de solución 0,2 N de FeCl2.
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8. Aplique la ecuación de Nernst a los siguientes sistemas:
a) Zn+2 + 2e- Û Zn
b) Fe+3 + 1e- Û Fe+2
c) 2H+ + 2e- Û H2
d) Cr2O7= + 14H+ + 6e- Û 2 Cr+3 + 7H2O
e) AgCl + 1e- Û Ag + Cl-
12. a) Un volumen de 30 ml de FeCl 3 0.1 M se titula con CrCl 2 0.08 M siendo ambas
soluciones 0,1 M en HCl. Calcule el potencial de un electrodo indicador de Pt
después de agregar: 20, 30, 37, 37.5, 38, 45, 60 y 75 ml del titulante.
b) Grafique la curva de titulación.
Problemas Propuestos
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4 . El potencial normal del par:
MnO4- + 8H+ + 5e- Û Mn+2 + 4 OH2 Eº = +1,51 V.
Cuál es el valor de dicho potencial si las actividades de las sustancias son 0,1 ?.
A qué atribuye la variación del potencial?. Dicha variación puede generalizarse?
5 . Una muestra de 0,661 g que contiene BaCl 2.2H2O fué disuelta y el Ba +2 se precipita
como BaCrO4. Después de la filtración y el lavado, el precipitado fue disuelto en
ácido y el Cr2O7= formado en este proceso, es reducido por la adición de un exceso
de KI. El yodo (I2) liberado es reducido con 37,5 ml de Na 2S2O3 0.121 N. ¿Cuál es
el % de BaCl2.2H2O en la muestra?
6 . Una sal ferrosa, cuya concentración es 0,1 M y que está disuelta en medio ácido, se
titula con una solución 0,1 M de ión cérico (Ce +4). Calcular el potencial de un
electrodo inerte en la solución a diferentes intervalos durante la titulación.
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QUIMICA ANALITICA E INSTRUMENTAL (2211)
SERIE DE PROBLEMAS N° 5
Tema: Métodos analíticos basados en las reacciones de formación de complejos.
1. Nombre según IUPAC los siguientes complejos:
a) [Co(NH3)6] Cl3 b) [Ag(NH3)2]+
c) [Co(NH3)3(NO2)3] d) [PtCl6]-2
e) [Fe(CN)6] K3
2. Si M es el ión central y L un ligante, exprese con equilibrios la relación que existe
entre las constantes de formación intermedias, sucesivas o por etapas con las
constantes de formación absolutas globales.
Suponga un índice de coordinación igual a 3.
6. Las titulaciones de Ca+2 y/o Mg+2 con EDTA suelen realizarse con una solución
reguladora de NH3/NH4Cl a pH = 10 ± 0,1, que además contiene cantidades
equimolares de Mg+2 y EDTA (0,01 M). Porqué? Cómo prepararía 250 ml de este buffer
a partir de NH4Cl; NH4(OH); MgSO4.7 H2O y Na2H2C10H12O8N2. 2 H2O?
8. Una alícuota de 50,0 ml de agua dura requirió 19,80 ml de la disolución de EDTA del
problema anterior. Expresar la dureza del agua en partes por millón de CaCO 3.
9. Una muestra que pesa 0.9278 g contiene CaCO 3. Se disolvió en 250 ml HCl y se
calientó para eliminar el CO2. Una alícuota de 50 ml fue titulada con una solución de
EDTA 0.01 M a pH = 10, gastándose 15 ml en el punto final de NET. Calcule el
porcentaje de CaCO3 presente en la muestra.
11. Una muestra de 0,8682 g de un mineral que contiene Ca +2 y Mg+2 fue disuelta en
500 ml de agua.
Una alícuota de 50 ml fue titulada con EDTA 0,01 M a pH = 10 empleando NET como
indicador. El volumen gastado en la titulación fue de 12 ml.
Otra alícuota de 50 ml fue titulada con la misma solución de EDTA a pH = 11,5,
empleando CALCON como indicador y gastando en la titulación un volumen de 4 ml.
Calcule el % de Ca y Mg en la muestra, expresados como carbonato de calcio y
carbonato de magnesio.
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QUÍMICA ANALÍTICA E INSTRUMENTAL CODIGO: 2211
SERIE DE PROBLEMAS N° 6
Tema: Métodos espectrofotométricos de análisis: UV-Visible
(nm)
c) Qué entiende por curva de trabajo, cómo la obtiene y para qué sirve?
C (mol/l) -3 -3 -3 -3
0,20x10 1,23x10 2,40x10 3,1x10
6) La absortividad molar del ácido benzoico (PM =122,1 g/mol) en metanol a 275 nm es
1950 cm-1M-1. Si se desea usar una absorbancia que no exceda de 1,25, qué valor
máximo de concentración en g/l se puede emplear utilizando una celda de 2 cm?.
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1 1 2
eA x b = 2850 l/mol, eB x b = 1350 l/mol, eB x b = 2500 l/mol
A total(1) = 0,444, A total(2) = 0,400
Calcule la concentración molar de los compuestos A y B presentes en la mezcla.
Guía: Dibuje primero los espectros de A y B solapados en un gráfico tentativo de
Absorbancia en función de la longitud de onda. Luego plantee el sistema de
ecuaciones que corresponda.
Propuestos
11) El compuesto -caroteno fue extraído de 10 g de hojas verdes y diluido a un
volumen final de 250 ml. Una muestra del mismo presentó una absorbancia de 0.3 a
una = 490 nm empleando una celda de 1 cm. Calcular el porcentaje de -caroteno en
las hojas, conociendo que e490(-caroteno) = 100.000 M-1 cm-1 y el PM (-caroteno) =
537 g/mol.
HMR
H+ OH-
MR- +H+
e (430nm)
M-1 cm-1 e (520 nm)
M-1 cm-1
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13) Determinación espectrofotométrica de alcohol en sangre
El compuesto nicotinamida-adenin dinucleotido, abreviado NAD, es una coenzima
biologica importante que participa en muchas reacciones redox catalizadas por
enzimas en el metabolismo celular. Para la forma oxidada de dicho compuesto
utilizamos NAD+ y para la forma reducida NADH. A continuación se presenta una tabla
con las longitudes de onda donde absorbe cada compuesto y sus correspondientes
valores de coeficientes de extinción molar:
e (260 nm)
M-1 cm-1 e (340 nm)
M-1 cm-1
NAD+ 18000 0
Por lo general, las reacciones redox donde participa NAD son muy lentas, a menos que
esten catalizadas, y la enzima que las cataliza tiene una gran selectividad al permitir
que solo uno de los componentes de una mezcla compleja interaccione con el sistema
NAD a una velocidad apreciable. Por ejemplo la enzima alcohol deshidrogenasa
cataliza la siguiente reaccion:
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QUÍMICA ANALÍTICA E INSTRUMENTAL (2211)
SERIE DE PROBLEMAS Nº 7
Tema 7: IR y Fluorescencia
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5) Dado el espectro IR de un alcohol, identifique y discuta las bandas correspondientes
al:-OH Vibración de alargamiento, C-O Vibración de alargamiento C-OH Flexión en el
plano, C-OH Flexión fuera del plano. 2-octanol
Problemas Propuestos
7)
8)
29
9)
30
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Fluorescencia
14) La forma reducida del dinucleótido adenina nicotinamida (NADH) es una coenzima
altamente fluorescente. Tiene un máximo de absorción a 340 nm y un máximo de
emisión a 465 nm. Una serie de soluciones estándar de NADH dieron las siguientes
intensidades de fluorescencia:
Conc. De NADH If
mol/l
0.100 2.24
0.200 4,52
0.300 6,63
0.400 9,01
0.500 10.94
0.600 13.71
0.700 15.49
15) La quinina es una sustancia fluorescente que podemos encontrar presente en las
gaseosas, en particular en el agua tónica. Se desea determinar el contenido de quinina
en una gaseosa, para lo cual se procedió experimentalmente del siguiente modo:
Se preparo una curva de calibración de intensidad de fluorescencia, I f , a 450 nm vs.
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Concentración de Quinina con 5 soluciones de sulfato de quinina de concentración
conocida. Dichas soluciones se prepararon diluyendo distintos volúmenes (V x) de una
solución stock de sulfato de quinina que contiene 15 ppm hasta 10 ml; según se
muestra en la siguiente tabla:
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QUÍMICA ANALÍTICA E INSTRUMENTAL CODIGO: 2211
SERIE DE PROBLEMAS de REPASO
Tema: Espectrofotometría UV-Visible, IR Y FLUORESCENCIA
3) Los siguientes volúmenes: 0.00, 4.00, 8.00 y 12.00 ml de una solución que contenía
1.10 ppm de Zn+2 se pipetearon en embudos de decantación conteniendo cada uno
5.00 ml de una solución de Zn+2 desconocida. Cada uno de ellos fue extraído con tres
alícuotas de CCl4 que contenia un exceso de 8-hidroxiquinoleina. Los extractos se
diluyeron a 25 ml y se midió la fluorescencia con un fluorometro. Los resultados fueron:
ml de Zn+2 est If
0.00 6.12
4.00 11.16
8.00 15.68
12.00 20.64
a) Representar los datos
b) calcular la concentración de Zn +2 en la muestra
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QUÍMICA ANALÍTICA E INSTRUMENTAL (2211)
SERIE DE PROBLEMAS Nº 8
Cromatografía
1) a) Que entiende por Cromatografía?; Fase estacionaria y Fase móvil?
b) Que tipo de interacción o clases de equilibrios pueden estar involucrados en los
procesos cromatográficos?
c) mencione los dos tipos más importantes de cromatografía en columna y diga cual
es la fase móvil y cual la estacionaria en c/u de ellas.
5) A continuación se dan las áreas relativas para los cinco picos que corresponden al
cromatograma:
1 27,6 0,70
2 32,4 0,72
3 47,1 0,75
4 40,6 0,73
5 27,3 0,78
Luego de la inyección en el cromatógrafo GL de c/u de los patrones y de la muestra problema, se obtuvieron las
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áreas de los picos:
Patrón AreaCB AreaT AreaCB/ AreaT
1 1,14 1,89
2 2,38 0,83
3 8,94 0,85
4 12,67 0,83
Muestra 5,38
problema
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Trabajos Prácticos
de Laboratorios
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Errores de material volumétrico y balanzas
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ESTRUCTURA DEL INFORME
Título:
Se debe indicar en el encabezado la asignatura, el Nº y Nombre del práctico de laboratorio.
Fecha:
Se debe indicar la fecha de realización del práctico.
Autores:
Nombres de los integrantes del grupo o personas que realizaron el análisis.
Introducción
En esta sección se presentan los objetivos específicos y se describe el tema sobre el que trata la
investigación, así como también los conceptos principales que servirán de base en el desarrollo.
Por otra parte, el autor incluye todos los datos necesarios para sitiar al lector y hacer más comprensible
la lectura del texto; como por ejemplo, por qué se llevó a cabo la investigación y qué se intenta modificar
o explicar a través del trabajo. [Error: Reference source not found]
¡NOTA!: Como generalmente la introducción al tema se encuentra incluida en las clases teóricas o en las
guías de Trabajos Prácticos, el informe a presentar luego de cada laboratorio tendrá el titulo
OBJETIVOS.
Desarrollo
Esta sección suele dividirse en los siguientes Subtítulos:
1. Parte Experimental:
Se nombran las técnicas utilizadas y las condiciones experimentales. Se debe incluir también
tipo, marcas, y parámetros de de los equipos utilizados. Similar consideración debe tenerse con los
reactivos y muestras, indicando procedencia, pureza, etc.
Se debe informar todas las mediciones realizadas (pesos, volúmenes, presión, temperatura,
etc.), que se realizaron para realizar el experimento, indicando el error cada una.
Se presentan las ecuaciones utilizadas en los cálculos y las ecuaciones químicas involucradas
identificándolas con un número.
2. Resultados y Discusión:
Es aquí donde se exponen los datos obtenidos o recolectados. El investigador organizará la
información reunida relacionando la bibliografía, valores esperados o introduciendo aquellas referencias
que resulten importantes para el análisis [Error: Reference source not found]. Se describen las figuras,
gráficos y tablas. Es bueno agregar algún comentario o discusión sobre los resultados, en especial si el
práctico consta de varias partes o ítems. Siempre es importante, para el análisis, identificar si se han
cometido errores en los procedimientos y su relevancia sobre los resultados obtenidos.
Conclusiones
Aquí se resumen los datos más importantes que se desarrollaron en el cuerpo del trabajo, sin agregar
información nueva. En general, se trata de una sección breve en la que el autor incluye alguna valoración
personal del trabajo realizado o sobre el tema tratado, y permite al lector saber cuál es la postura del
investigador [Error: Reference source not found]. En esta sección se plantea si se han alcanzado los
objetivos y/o las dificultades encontradas.
TABLAS:
Cuando se tienen muchos datos que deben compararse, a veces es necesario incluir tablas para brindar
la información claramente. Las tablas deben identificarse con un título, (y numero si hay varias), para
poder ser referenciada en el texto. El titulo de la tabla debe indicar el tipo de información contenida. Las
tablas se dividen en columnas (verticales) y filas (horizontales) y se recomienda separar las distintas
categorías e indicar las unidades. En la parte inferior y separada de los datos, pueden incluirse algunas
referencias, o consideraciones especiales de un dato en particular.
Ejemplo
Tabla 1: Variación en la concentración de los compuestos NN y P en función de la temperatura.
Compuesto Temperatura (ºC) Volumen (mL) Concentración (M)
NN 20 22,5 55
42
NN 100 36 46
P 20 22,5 36
P 100 30 26
A1 20 15 25
1
Reportado por Simpson H.J.,Radiactive Research, 2000, 15, 65
FIGURAS o ESQUEMAS: Pueden tener un título o un epígrafe donde se explica el gráfico, como se
muestra en le siguiente ejemplo.
GRÁFICOS:
Al igual que las tablas y figuras deben llevar un título y número. A veces se los considera como figuras.
Como se ve más abajo, el gráfico debe tener la leyenda en cada uno de los ejes y las unidades
correspondientes. En la medida de lo posible se incluirá el error asociado con cada punto. Si se
representa más de un juego de datos, se debe incluir una leyenda que indique que puntos pertenecen a
cada medición. Alternativamente esta información puede ponerse en un epígrafe por debajo del gráfico.
Selección de escalas: Se debe tener cuidado de elegir una escala apropiada para los ejes de
forma que la información se muestre clara y no amontonada en una región del gráfico
2,0
Curvas de Calibración
NO 1,6
1,5
1,0 1,4
0,5 1,2
Nombre del Eje Y (unidades)
Absorbancia a =450 nm
0,0
1 2 3 4 5 6
1,0
0,8
0,6
0,5 0,6
0,4
0,4
0,3
0,2
NO 0,2
Compuesto NN
Compuesto P
0,1
0,0
0 5 10 15 20
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Conc. del compuesto NN (M)
MAL seleccionadas las escalas Nombre del Eje X (unides)
43
Extrapolar Interpolar
Extrapolación del
0,6
comportamiento lineal
0,5
experimentalmente
Zona de Medidas 0,3
Experimentales
0,2
0,1
1 2 3 4 5 6
INFORME MODELO
ASIGNATURA (2211)
TRABAJO PRÁCTICO Nº#: Titulaciones Ácido-Base.
Fecha: dd-mm-aaaa
Integrantes: Juan Pérez
OBJETIVOS
Conocer la técnica de titulación volumétrica y determinar la concentración de una base
conocida (NaOH).
INTRODUCCIÓN
Se usó el procedimiento indicado en la guía de trabajos prácticos [ i]. Una solución de
NaOH de concentración desconocida se tituló con una solución ácida de HCl 0,1M
considerando la reacción ácido base de la ecuación (1), que lleva ala formación de sal
y agua, dando una solución neutra al tener cantidades equivalentes de cada reactivo.
NaOH ( ac ) HCl ( ac) NaCl ( ac) H 2 O(l ) (1)
PARTE EXPERIMENTAL
Reactivos: Todos los reactivos usados se obtuvieron de Laboratorios Chicarelli.
Titulación de una solución de NaOH con HCl 0,1M
Se colocaron (25,0 ±0,1) mL de una solución de NaOH en una bureta. Por otro lado en
un erlenmeyer de 250 mL, se vertieron (25,0±0,1) mL de una solución de HCl
(0,10±0,01) M y se le agregaron 4 gotas de fenolftaleína como indicador Ambas
soluciones son incoloras y de apariencia límpida. La concentración de la solución
básica se obtendrá por medio de la ecuación (2). Donde M a y Mb son las
concentraciones del ácido y la base respectivamente. Así mismo que y V b representan
el los volúmenes usados de cada solución. En la ecuación (3), V a, Vb, Ma yMb
44
son los errores absolutos de cada medición.
Vb M b Va M a (2)
DM b DM a DVb DVa
(3)
Mb Ma Vb Va
RESULTADOS
Con el agregado de (12,5 ±0,1) mL de la solución de NaOH, a la solución ácida cambió
su aspecto incoloro a un tono o fucsia., indicando que se ha llegado al punto final de la
titulación. Por medio de las ecuaciones (2) y (3) se calculó la concentración de base.
Va M a DM a DVb DVa
Mb DM b Mb
Vb Ma Vb Va
0,1M 25mL 0,01M 0,1mL 0,1mL
Mb DM b 0,2000
12,5mL 0,1M 12,5mL 25,0mL
M b 0,2 DM b 0,0224 0,02
45
QUIMICA ANALITICA E INSTRUMENTAL (2211)
TRABAJO PRACTICO Nº 1
Cuestionario
1) Qué requisitos debe reunir una reacción química para ser empleada en
Volumetría con fines cuantitativos ? Cuál es el error relativo % máximo tolerado en
Volumetría ?
2) Qué entiende por neutralización?
3) En qué consiste la volumetría ácido-base?
4) Qué entiende por drogas patrones primarias y secundarias ó estándares
primarios o secundarios?
5) Dé algunos ejemplos de drogas patrones primarios para valorar ácidos y
bases.
6) Porqué se debe pesar los patrones sólidos por diferencia?
7) Qué entiende por punto equivalente y punto final de una titulación?
8) Qué entiende por error de titulación?
9) Qué condiciones debe reunir un indicador ácido-base, para que el error de
titulación sea mínimo?
TRABAJO PRACTICO
Experiencia I: Valoración de HCl 0,4 M con Na2CO3 patrón.
a) CALCULOS PREVIOS
1) Cuántos ml. de una solución de HCl de densidad, = 1,16 g/cm3 y
concentración 33 % P/P son necesarios para preparar 100 ml de solución 0,4 M.
2) Cuántos gramos de Na2CO3 anhidro se deben pesar para gastar
aproximadamente 20 ml. de solución de HCl 0,4 M, si se utiliza heliantina como
indicador.
b) INDICACIONES GENERALES:
1) Lavar cuidadosamente el material a utilizar. En el caso particular de que la
bureta tenga robinete de vidrio, secar la llave con papel de filtro, lubricarla con pequeña
cantidad de grasa, evitando que penetre en el orificio de desagote. Por lo general,
actualmente los robinetes son de TEFLON â (polímero inerte de politetrafluoretileno ).
2) Antes de emplear la bureta con una determinada solución, enjuagarla tres
veces con una pequeña porción de la misma, con lo que se evita el secado.
En el caso de una pipeta se la seca por fuera con papel de filtro y se aspira dos
o tres veces pequeñas porciones de la solución; se la hace rotar y se desechan esas
porciones.
3) Al enrasar la bureta, verificar la ausencia de burbujas de aire en
el pico.
4) Colocar una hoja de papel blanco debajo del erlenmeyer en que se efectúa
la titulación; se podrá observar así mas nítidamente el viraje del indicador.
c) PROCEDIMIENTO
1) Preparar 2 l de solución de HCl 0,4 N.
2) Pesar al 0,1 mg por diferencia y con el mínimo manipuleo la cantidad de
Na2CO3 calculada y colocarla en un erlenmeyer.
46
3) Se disuelve el Na2CO3 pesado, en aproximadamente 20 ml de agua
destilada y se agregan dos gotas de heliantina.
4) Colocar la solución de HCl en una bureta previamente enjuagada con la
solución y realizar la titulación.
Durante la titulación conviene agitar constantemente el erlenmeyer y,
especialmente, en las cercanías del punto final, para evitar la acumulación de CO 2 ;
cuidando además disminuir la velocidad de escurrimiento al aproximarse al punto final.
Antes de este punto conviene lavar las paredes del erlenmeyer con unos chorros de
agua (con la pipeta) para evitar que quede ácido en las mismas.
Recordar que el viraje del indicador se produce por el agregado de una o dos
gotas de ácido en exceso respecto al punto de neutralización, por lo tanto, esta etapa
de la titulación debe ser efectuada con sumo cuidado.
Se puede comparar el color del viraje con el alcanzado por el del ensayo en
blanco, obtenido con 40 ml. de agua e igual cantidad de indicador a la usada
anteriormente y adición de las gotas de solución ácida necesarias. Del volumen total,
se resta éste pequeño volumen.
INFORME:
TITULACION DE HCl
Masa de pesafiltro (g)
Masa de pesafiltro + Na2CO3 (g)
Masa del Na2CO3 (g)
Volumen de solución de HCl gastado (ml)
Concentración de la solución de HCl (molar)
Concentración de la solución de HCl (normal)
Concentración de la solución de HCl (g/l)
La alcalinidad se debe a los HCO 3-, CO3= y OH- que pueda contener el agua
natural o tratada. Se determina por titulación con una solución valorada de un ácido
mineral fuerte hasta los puntos sucesivos de equivalencia de HCO 3- y CO2 ; ya sea
electrométricamente (potenciometría) o mediante indicadores.
El indicador fenolftaleína ( viraje entre pH 8,0 y 9,6 ) permite determinar la
alcalinidad atribuible a los equivalentes de OH - y los equivalentes de CO3= (bases
fuertes en agua ), mientras que para determinar la alcalinidad total (HCO 3-, CO3=, OH-)
se deben elegir indicadores que viren en el rango de pH entre 4 y 5 (heliantina).
Las titulaciones de alcalinidad a la fenolftaleína y de alcalinidad total, son de
utilidad para calcular la dosis de productos químicos que se requieren en el tratamiento
de aguas naturales.
PROCEDIMIENTO
1) Alcalinidad a la fenoftaleína: agregue dos gotas de fenolftaleína a
50 ml de muestra y titule con ácido cloríhidrico estándar 0,4 N sobre fondo blanco hasta
el color correspondiente al de fenolftaleína a pH = 8,3.
2) Alcalinidad total con heliantina: Agregue dos gotas del indicador a 50 ml de
muestra y titule sobre fondo blanco con HCl estándar hasta el viraje de anaranjado (pH
= 4,6) a rosado (pH = 4,0).
47
3) Calcule la alcalinidad por OH- , alcalinidad por CO3= y alcalinidad por HCO3-.
Exprese todos los resultados en mg % de CaCO 3.
Fe = 0 0 0 He
2 Fe < He 0 2Fe [He - 2Fe]
2 Fe = He 0 2Fe 0
2 Fe > He [2 Fe - He] [2(He - Fe)] 0
Fe = He Fe ó He 0 0
c) 2 Fe = He : Na2CO3.
49
QUIMICA ANALITICA E INSTRUMENTAL (2211)
TRABAJO PRACTICO Nº 2
Cuestionario de orientación:
1) Comente el método de Mohr para la determinación de Cl -.
2)
a) Calcule la concentración de CrO 4= teórica necesaria para que este indicador
precipite en el punto equivalente de la titulación de Mohr.
Procedimiento
En un erlenmeyer de 250 ml., se introducen 10,00 ml de una solución de NaCl de
concentración desconocida. Se agrega 0,4 ml. de solución de K 2CrO4 al 5% y unos
miligramos de NaCO3H. Se titula lentamente contra fondo blanco con el standard de
AgNO3 0,025 M. agitando por rotación hasta obtener la primera variación permanente
del color amarillo.
Ensayo en blanco
En un volumen de H2O destilada similar al esperado en el punto final se introducen 0,40
ml del indicador, e igual cantidad de NaCO 3H que la usada en la titulación. Añadir gota
a gota AgNO3 hasta igualar el color del punto final. Anote el volumen gastado.
Calcule la concentración del NaCl en moles/l; equivalente/l; mg % p/v y g % p/v.
51
QUIMICA ANALITICA E INSTRUMENTAL(2211)
TRABAJO PRACTICO No 3
VOLUMETRIA REDOX
CUESTIONARIO DE ORIENTACION
1.- a) Qué entiende por Volumetría Redox.
b) Cuáles pueden ser los métodos para detectar el punto final.
c) Qué condiciones debe reunir un sistema redox para que tenga aplicabilidad
analítica.
2.- a) En cualquier punto de una titulación redox los valores de los potenciales de
hemicelda de las cuplas que participan son iguales. Porqué?
b) Cuál es la dificultad para calcular el potencial de hemicelda al principio de una
titulación redox?
3.- Compare cualitativamente una curva de titulación redox (con el mismo número de
electrones en las dos hemirreacciones) con las curvas de titulación de:
a) Un ácido monoprótico fuerte con una base fuerte.
b) Un ácido monoprótico débil con una base fuerte.
4.- Compárese cualitativamente la acción de un indicador A.B con uno Redox.
5.- De un ejemplo de algunas drogas patrones para valoraciones de oxidantes y
reductores.
6.- Qué precauciones hay que tener en la preparación de una solución de tiosulfato de
sodio?
7.- Las soluciones de tiosulfato de sodio conservan su título indefinidamente, o sólo en
forma temporaria?
8.- Utilizando una tabla de potenciales redox, indique cuáles serán los productos de las
siguientes reacciones.
a) IO3- + I- + H+ ---
b) I2 + S2O3= ----
c) I- + Cu++ -----
En casos afirmativos iguálelas por el método del ión electrón.
9.- Porqué es necesario agregar IK en exceso a la solución de KIO 3.
10.- Cómo se prepara una solución de almidón?
11.- Porqué se agrega el almidón a la solución de IO 3- - I- recién cuando ésta tiene un
color amarillento claro.
12.- Cómo se define peso equivalente para un sistema Redox, de algunos ejemplos.
PROBLEMAS
1.- 0,3032 gr de un mineral de hierro formado por Fe(II) y Fe(III) se disuelve en exceso
de H2SO4. La solución resultante se titula con 14,29 ml de solución de permanganato
de potasio 0,0280 M.
a) Cuántos milimoles de Fe++ hay en la muestra.
b) Cuántos milimoles de Fe+++ hay en la muestra.
2.- 0,237 gr de una muestra impura de dicromato de potasio se disuelve en H 2SO4 2M.
Se agrega un exceso de KI y el yodo liberado se titula con 29,3 ml de Na 2S2O3 0,139 M.
Calcular el porcentaje de pureza (P/P).
3.- Una muestra de 0,148 gr de KIO 3 se trata con exceso de KI y un ácido . El Iodo que
se libera se titula con tiosulfato de Sodio gastándose 30,55 ml. Cuál es la molaridad y
52
Normalidad redox del tiosulfato.
4.- Una muestra de material calcáreo de 2,160 gr se disuelve, el Ca se precipita como
Oxalato de Calcio. El oxalato de calcio se separa de la solución, se lava, se disuelve
en ácido sulfúrico y se titula con KMnO 4 0,01 M gastándose 22,00 ml. Calcule el % de
Ca como CaCO3 en la muestra..
PARTE EXPERIMENTAL
A) Cálculos previos
a-1) Escriba la reacción que tiene lugar e iguálela por el método del ión electrón.
a-2) Calcule cuántos gramos de dicromato de potasio son necesarios para preparar
100 ml de solución 0,1N.
B) Procedimiento experimental
b-1) A 0,550 gr de una sal ferrosa (FeSO 4.7 H2O) se le agregan 80 ml de agua, 2 ml. de
ácido sulfúrico concentrado, 5 ml. de ácido fosfórico al 85%, 3 gotas de difenilamina
como indicador.
b-2) Valorar con solución de dicromato de potasio hasta viraje del indicador. Informar el
% de Fe(II) en la muestra
54
QUIMICA ANALITICA E INSTRUMENTAL (2211)
TRABAJO PRACTICO No 4
DETERMINACIONES COMPLEJOMÉTRICAS: Método para la determinación de Ca y
Mg.
BIBLIOGRAFIA:
J.M.KOLTHOFF y E.B.SANDELL. Tratado de Química Analítica, General e Inorgánica.
SKOOG y WEST, Fundamentos de Química Analítica.
H.A. FLASCHKA, A.J.BARNARD y P.E. STURROCK. Química Analítica Cuantitativa.
DISCUSION GENERAL:
a. PRINCIPIOS
El EDTA (ácido etilendiaminotetraacético), cuya estructura es la siguiente
HOOC COOH
CH2 CH2
N CH2 CH2 N
H2C CH2
HOOC COOH
es un ácido débil, cuyas constantes de disociación son: pK 1 = 2,0; pK2 = 2,67; pK3 =
6,16 y pK4 = 10,26. Aparte de los grupos carboxilatos, este ácido posee dos nitrógenos,
cada uno con su par de electrones desapareados; por lo que en general esta molécula
puede actuar como ligante hexadentado de iones metálicos. Debido a la baja
solubilidad del ácido libre y a la extensa hidrólisis de la sal tetrasódica, la forma más
conveniente para el uso es la de la sal disódica (que simbolizaremos YH 2Na2), la cual
puede ser considerada patrón primario previa recristalización.
Los complejos de los cationes metálicos divalentes, presentan su máxima
estabilidad a pH mayores que 9 por lo que las determinaciones de Ca y Mg serán
llevadas a cabo en esos valores de pH.
Además el hecho de trabajar a pH mayor que 10 nos permite la determinación
de Ca solamente, debido a la formación de Mg(OH) 2 escasamente soluble;
permitiéndonos de ésta manera, las valoraciones de Ca más Mg y Ca solo.
Como indicador de punto final de este tipo de titulaciones es usado
frecuentemente el NEGRO DE ERICROMO T, que es un ácido débil, encontrándose
algo disociado a pH básico. Además forma quelatos coloreados con el Mg según la
reacción:
MgIn- + H+ Mg+2 + InH-2
rojo azul
por otro lado, el Mg forma con el EDTA un complejo mas estable según:
Mg+2 + YH2-2 MgY-2 + 2H+
De esta manera, al comenzar la titulación, todo el magnesio se encuentra
55
acomplejado por el indicador, dando a la solución una tonalidad rojiza. A medida que se
agrega titulante, el magnesio se libera de su complejo con el indicador para pasar a
formar parte de otro complejo con el titulante.
En el punto final de la titulación hay un brusco aumento del pMg y la solución
vira de color rojiza a azul.
b. INTERFERENCIAS
Bajo las condiciones de este Test, la siguientes concentraciones de iones no
causan interferencia con la determinación de Ca: Cu +2 2 mgr/lt, Fe+2 20 mgr/lt, Fe+3 20
mgr/lt, Mn+2 10 mgr/lt, Zn+2 5 mgr/lt, Pb+2 5mgr/lt y Al+3 5 mgr/lt. El ortofosfato puede
precipitar al Ca en las condiciones de este Test. El Sr y el Ba pueden causar
dificultades en la determinación del punto final de aguas duras.
PROCEDIMIENTO
NOTAS:
1: Las soluciones de NET se deterioran debido a la oxidación con el aire, por lo
tanto debe prepararse solución del indicador a medida que se necesita. Muchos
56
autores prefieren agregar una mezcla del indicador sólido diluido con un exceso de
varios cientos de veces de NaCl puro u otra sustancia inerte. La oxidación al aire del
indicador en la solución que se titula es catalizada por varios iones metálicos
incluyendo Cu+2 y Mn+2. Si se experimenta esta dificultad puede agregarse alrededor de
1 gr de ácido ascórbico a la solución antes de la titulación, para eliminar interferencias.
PROCEDIMIENTO
Seleccionar un tamaño adecuado de muestra (nota 1). Por cada 50 ml de
muestra agregar 5 ml de solución reguladora, algunas décimas de gramo de ácido
ascórbico y algunas gotas de trietanolamina al 20%. Titular con EDTA 0,02 M que
contenga Mg (nota 2) usando NET como indicador.
NOTAS:
1) La cantidad adecuada de muestra depende de la dureza. Se puede realizar
una titulación preliminar utilizando 50 ml de agua para determinar la cantidad
adecuada a usarse para la titulación real. Si la dureza es baja, puede diluirse la
solución valorada de EDTA.
2) El contenido de Mg en el agua puede ser muy bajo como para permitir el
funcionamiento adecuado del NET. Por consiguiente deberá usarse una solución de
EDTA que contenga Mg.
57
QUIMICA ANALITICA E INSTRUMENTAL (2211)
TRABAJO PRÁCTICO No 5:
ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN
PARTE 1
Objetivos:
a) Obtener el espectro de absorción del KMnO 4 (A vs ) y encontrar la de trabajo
óptima.
b) Realizar una curva de calibración (A vs c) y determinar la concentración de KMnO 4
de una muestra problema.
Conocimientos teóricos: Ley de Lambert-Beer. Aplicaciones de la espectrofotometría
de absorción.
Cuestionario de Orientación:
1) Discuta la elección de la longitud de onda () de trabajo.
2) Analice las causas de las desviaciones de la Ley de Beer.
3) Partiendo de la relación de Lambert-Beer: A = -log T; T = I/I o y A = log Io/I = e b c.
a) demuestre que [ A = 2 - log %T = -log T ].
b) Para que A sea adimensional, qué unidades debe tener e?
c) Cómo determinaría el coeficiente de extinción molar a una dada longitud de onda,
gráfica y analíticamente a partir de una serie de medidas experimentales de
absorbancia.
4) Cómo resolvería una mezcla, en la que uno de los componentes no absorbe a una
dada longitud de onda y el otro presenta un máximo de absorción y, en la otra longitud
de onda se cumple lo inverso.
5) Porqué elige en lo posible dos máximos del espectro para hacer las
determinaciones?
6) Porqué las lecturas en %T conviene que caigan entre 20 y 80% ?.
Desarrollo experimental
a) Preparación de soluciones.
1) Preparar 100 ml de solución de KMnO 4 1 x 10-2 M (solución A).
2) A partir de ella, preparar 50 ml de solución de las siguientes concentraciones:
6- Análisis de la mezcla.
Medir las absorbancias a 440nm y 545nm de mezclas preparadas por el docente y
calcular las concentraciones de cada compuesto en la mezcla.
59
QUIMICA ANALITICA E INSTRUMENTAL (2211)
TRABAJO PRACTICO Nº 6
Introducción:
El análisis fluorimétrico es extremadamente sensible y de uso corriente en
laboratorios de análisis químicos y bioquímicos.
Cuando una molécula absorbe radiación electromagnética, la energía es
usualmente perdida en forma de calor si la molécula se desactiva por procesos
colisionales. No obstante, parte de la energía puede degradarse por emisión de
radiación de longitud de onda mayor que la absorbida. A este proceso se lo denomina
fluorescencia.
Bajo ciertas condiciones, la intensidad de fluorescencia puede relacionarse con
la concentración de la especie fluorescente.
De la Ley de Lambert y Beer puede derivarse que la intensidad de fluorescencia
If esta dada por:
If : f I0 (1 – 10 -eCl) (1)
donde f es una constante de proporcionalidad que mide la fracción de luz que es
convertida en radiación fluorescente; Io es la intensidad de radiación incidente en la
celda de fluorescencia a la longitud de onda de trabajo; e, la abortividad molar; c, la
concentración molar de la especie fluorescente y l, la longitud de la celda en cm.
Es evidente que si el producto eCl es muy grande, el término 10 eCl es
despreciable frente a 1. Si por el contrario 10 -eCl (0.01) se puede demostrar que
una buena aproximación a la ecuación (1) es:
If : 2.303 f Io eCl (2)
Luego, para bajas concentraciones, la intensidad de fluorescencia es
directamente proporcional a la concentración molar de la especie fluorescente.
Por esta razón la fluorescencia constituye una valiosa técnica para el análisis
cuantitativo.
Parte experimental:
Se determinará la concentración de quinina de una bebida gaseosa, empleando
una curva de calibración que se construirá previamente.
Se preparán 50ml de Q2(SO4) (Sulfato de Quinina) de concentración 2x10 -4 M en
H2SO4 0.5 M.
Se preparán diluciones sucesivas de la solución anterior entre concentraciones
1x10-4 M y 1x10-5 M usando H2SO4 0.5 M como solvente.
Efectue un espectro de absorción y de emisión de fluorescencia de una solución
aproximadamente 5x10-5 M de Q2(SO4).
Seleccionar las longitudes de onda de excitación y de emisión, para realizar la
curva de calibración de Intensidad de fluorescencia (I f) en función de la concentración
molar de Q2(SO4).
Construída la curva, se mide la intensidad de fluorescencia de la gaseosa y se
determina la concentración de quinina en la misma.
Es importante tener en cuenta que esta última medida debe realizarse en la
60
misma celda y condiciones del aparato con que se realizaron las lecturas de la curva
de calibración.
Exprese los resultados como ppm de quinina.
Traer:
* Agua Tónica (Paso de los toros).
* Hojas de papel milimetrado.
61
QUIMICA ANALITICA E INSTRUMENTAL (2211)
TRABAJO PRACTICO Nº 7
ESPECTROSCOPÍA INFRAROJO
Objetivos:
Introducción:
PARTE EXPERIMENTAL
62
Preparación de la muestra:
Las muestras gaseosas requieren poca preparación más allá de su purificación, se usa
una celda de paso óptico grande (usualmente 5-10 cm) pues los gases muestran
absorbancias relativamente débiles.
Las muestras líquidas se disponen entre dos placas de una sal de alta pureza
(comúnmente cloruro de sodio, o sal común, aunque también se utilizan otras sales
tales como bromuro de potasio o fluoruro de calcio. Las placas son transparentes a la
luz infrarroja y no introducirán líneas en el espectro. Algunas placas de sal son
altamente higroscopicas, por lo que se deben usar muestras anhidro (sin agua). Las
muestras sólidas se preparan principalmente de dos maneras. La primera es moler la
muestra con un agente aglomerante para la suspensión (usualmente nujol) en un
mortero de mármol. Una fina película del agente aglomerante se aplica en las placas de
sal y se realiza la medición.
El segundo método es triturar una cantidad de la mezcla con una sal de alta pureza
(usualmente bromuro de potasio de cristales muy pequeños para remover efectos
dispersores de los cristales grandes) . Esta mezcla en polvo se comprime en una
prensa de troquel mecánica para formar un pellet translúcido a través del cual puede
pasar el rayo del espectrómetro.
MUESTRA LÍQUIDA
1. 1-Butanol
63
El espectro de IR del 1-butanol muestra una absorción de tensión O-H ancha e intensa
centrada alrededor de 3300 cm -1. La forma ancha se debe a la naturaleza diversa de
las interacciones de los enlaces de hidrógeno de las moléculas de alcohol.
El alcohol O-H absorbe alrededor de 3300 cm -1 y normalmente tiene una banda ancha
y fuerte. Esta banda se debe a los distintos reordenamientos del enlace de hidrógeno
que tienen lugar. Existe una banda de tensión C-O centrada próxima a 1050 cm -1.
Aunque una banda de tensión alrededor de esta región se puede deber a las mismas
tensiones C-O, la ausencia de esta banda alrededor de 1000 - 1200 cm -1 sugiere
encarecidamente la ausencia de un enlace C-O.
MUESTRA SÓLIDA
2. Ácido Benzoico
Los ácidos carboxílicos presentan una absorción O-H ancha entre 2500 y 3500 cm -1.
Esta absorción ancha ocupa por completo la región de tensión C-H, con más amplitud.
La tensión del doble enlace C=O será aguda e intensa a 1711 cm-1. Los dos picos
tienen que estar presentes para identificar al compuesto como un ácido carboxílico
64
MUESTRA DE UNA BOLSA DE POLIETILENO
3. Polietileno
100
80
Tansmitancia
60
PE libreria
Bolsa
40
20
0
4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500
PE libreria
Bandas a:
65
QUIMICA ANALITICA E INSTRUMENTAL (2211)
TRABAJO PRACTICO Nº 8
CROMATOGRAFÍA GASEOSA
OBJETIVO:
Identificar los componentes de una muestra problema por cromatografía gaseosa
INTRODUCCIÓN:
La cromatografía es uno de los métodos físicos que más se utiliza para separar
los componentes de una mezcla dada. La separación de los mismos se basa en las
diferentes afinidades que éstos presentan entre dos fases inmiscibles, una móvil y
otra estacionaria. Así, aquellos componentes que permanezcan preferencialmente
en la fase estacionaria son más retenidos en la columna mientras que en primera
instancia se eluyen aquellos que pasan más tiempo en la fase móvil.
Los métodos cromatográficos se clasifican según la naturaleza de la fase móvil
en cromatografía gaseosa y cromatografía líquida. Dentro de la cromatografía
gaseosa, se tiene de acuerdo al estado físico de la fase estacionaria (cromatografía
gas-sólida y cromatografía gas-líquida). Con respecto a la cromatografía líquida,
tenemos la cromatografía líquida-líquida y la cromatografía líquida de fase
químicamente enlazada, de exclusión y de intercambio iónico. También se clasifican
de acuerdo a los fenómenos que actúen en la separación (adsorción, partición e
intercambio iónico).
PARTE EXPERIMENTAL
Este análisis requiere la selección previa de las condiciones de trabajo: temperatura
66
de la columna, temperatura del inyector (en el equipo que usted utilizará no existe
tal control de temperatura), temperatura del detector, flujo óptimo, corriente de
puente (para un detector de conductividad térmica), velocidad de la carta y
atenuación. Por razones de tiempo estas condiciones serán dadas por el instructor.
El trabajo práctico consiste en determinar la concentración de clorobenceno
(ClB) en una muestra problema utilizando el método del estándar interno (EI). El
estándar interno a utilizar es el tolueno. El fin de utilizar el método del EI es el de
evitar los posibles errores de volumen inyectado de solución y de los distintos
patrones.
Se realizará una curva de calibración conteniendo el EI y distintas
concentraciones de ClB, utilizando como solvente acetona. Los patrones se
prepararán en matraces de 25 ml de la siguiente manera:
-0,6 ml de ClB + 0,6 ml de tolueno llevados a 25 ml con acetona
-0,8 ml de ClB + 0,6 ml de tolueno llevados a 25 ml con acetona
-1 ml de ClB + 0,6 ml de tolueno llevados a 25 ml con acetona
-1,2 ml de ClB + 0,6 ml de tolueno llevados a 25 ml con acetona
Previo a la medición de los patrones se realizará un ensayo para identificar los
picos. Para ello se prepararán dos soluciones, la primera llevará 0,6 ml de tolueno
enrazado a 25 ml con acetona, y la segunda tendrá 1 ml de ClB enrazado a 25 ml
con acetona.
Una vez reconocidos los picos se inyectarán los patrones, y determinando las
áreas de los picos de los correspondientes cromatogramas, construirán la curva de
calibración.
Por último inyectarán la muestra, determinarán su área, y de la curva de
calibración determinarán su concentración.
67
QUIMICA ANALITICA E INSTRUMENTAL (2211)
TRABAJO PRACTICO Nº 9
OBJETIVO:
Determinación del contenido de sacarina en edulcorantes.
INTRODUCCIÓN:
Un aditivo es una sustancia o mezcla de sustancias diferentes al alimento, que
se encuentran en el mismo, como resultado de producción, almacenamiento o
empacado, añadido intencionalmente para lograr ciertos beneficios, como mejorar el
nivel nutritivo, conservar la frescura, impedir el deterioro por microorganismos e
insectos, generar alguna propiedad sensorial deseable o bien como ayuda de
proceso (Fennema, 1976; Hodge, 1973). Su uso se debe limitar a las sustancias que
han demostrado un beneficio al consumidor y en caso de riesgo para la salud, ese
debe ser prácticamente no tóxico y debidamente evaluado en sus aspectos
toxicológicos.
Entre los diversos tipos de aditivos se pueden citar: conservadores, colorantes,
potenciadores, antioxidantes, saborizantes, edulcorantes nutritivos y no nutritivos,
vitaminas, aminoácidos, nucleótidos, carbohidratos (gomas, azúcares, etc.),
estabilizadores, espesantes, emulsificantes, enzimas, minerales, etc.
Edulcorantes
Los edulcorantes son compuestos que tienen gran importancia por el alto
consumo que representan, son útiles para diabéticos o personas que deseen
controlar su peso. Son sustancias dulces pero que generalmente carecen de valor
calórico.
Al principio se usó dulcina (p-fenetol carbamida o p-fenetil urea o 4-etoxifenil
urea o sucrol o valzin) y el “P-4000” (5-nitro propoxianilina) pero son
extremadamente tóxicos por los carcinomas hepáticos que causan, la dulcina
presenta un DL50 de 1,0 g/Kg en perros (oral), siendo descartado su uso. Estos
compuestos fueron sustituyéndose por ciclamatos, sacarina (Lindener, 1978) y por
aspartamo (Nutrasweet, 1981; Rodríguez et al, 1986).
La sacarina es el anhídrido del ácido sulfoaminobenzoico en forma de sal sódica
o cálcica. Es 550 veces más potente que el azúcar de caña, pero para fines
prácticos se considera como 300 veces. Se elimina sin modificaciones en orina, no
es calórica, tiene un resabio amargo después de ser ingerida (a concentraciones
altas 1:10000- se vuelve amarga). Tiene un efecto sinergista con el ciclamato,
además de que es termoestable. Actualmente persisten grandes dudas de si es o no
cancerígeno a los niveles recomendados de uso, ya que experimentos toxicológicos
en ratas, indican la ausencia de malformaciones en fetos, tumores o cáncer en la
vejiga de ratones (Graham, 1981; Jacobson, 1972).
Sacarina
68
PARTE EXPERIMENTAL
La determinación de sacarina en edulcorantes se realizará empleando la técnica
de HPLC. El término cromatografía se aplica a una variedad de técnicas de separación
basadas en la distribución selectiva de los solutos entre fase móvil (gas, líquido, fluído
supercrítico) y una fase estacionaria, que puede ser líquida o sólida.
En los últimos sesenta años la cromatografía ha sido objeto de constante
crecimiento respecto al número de analistas que la utilizan, la cantidad de trabajos
publicados y por la variedad y complejidad de las muestras analizadas. La diferencia
entre la moderna cromatografía líquida o HPLC y la cromatografía líquida tradicional
(cromatografía en columna en sus variantes de absorción, partición o intercambio
iónico, Cromatografía en capa fina o sobre papel) involucra el perfeccionamiento de
equipos, materiales, técnica y la aplicación de teoría. En términos de resultados HPLC
ofrece ventajas en cuanto a conveniencia, velocidad y habilidad para llevar a cabo
separaciones difíciles.
Instrumental
El sistema HPLC que se muestra en la figura consta de un sistema de suministro
de disolvente, una válvula de inyección de muestra, una columna de alta Presión, un
detector y una computadora para controlar el sistema y visualizar los resultados.
(A) (B)
La Figura B muestra los fenómenos que tienen lugar en una columna cromatográfica.
Si una solución de componentes A y B se inyectan en la cabeza de una columna
empaquetada con partículas sólidas (fase estacionaria) y se hace pasar a través de la
misma un eluyente (fase móvil) ambos componentes interaccionaran de manera
diferente, de acuerdo a su afinidad, con la fase estacionaria y el eluyente. Si el soluto B
se absorbe más fuertemente que el soluto A en la fase estacionaria, entonces está libre
en la solución una fracción menor de tiempo. El soluto B atraviesa más lentamente la
columna y llega al detector después que el soluto A, obteniéndose un gráfico con un
sistema de picos denominado cromatograma. En el mismo se puede observar que el
tiempo de retención del compuesto A es menor que el del compuesto B.
En el trabajo práctico se empleará un cromatógrafo HPLC con un detector Uv-
Visible. Las condiciones de trabajo que se emplearán son las siguientes:
- Columna: Varian ODS, 30 cm x 4,6 mm, 5 m.
- Fase Móvil: Solución de ácido acético al 20 % llevada a pH 3 con solución de
acetato de sodio.
- Detector: λ = 254 nm.
69
- Solución Patrón de Sacarina: pesar 0,025 gr de sacarina de sodio y llevar a 50
ml con fase móvil.
- Velocidad Flujo: 0,5 ml/min
- Tiempo de retención de la sacarina: 5,5 min
- Tiempo de retención de benzoato de sodio: 20 min.
- Presión: 81 (bar x 100).
Preparación muestra líquida: tomar 1 ml del edulcorante líquido y llevarlo a 50 ml con
fase móvil. Mezclar bien.
Se inyecta en el cromatógrafo por duplicado la muestra y el patrón.
Cálculos
Área pico patrón _______ [ ] patrón (mg%)
Área pico muestra_________ X mg
X mg_______ 100 ml
XA mg______50 ml
1 gr______1000 mg
XC gr________ XB mg
70
QUIMICA ANALITICA E INSTRUMENTAL (2211)
TRABAJO PRACTICO No 10
Tema: Radioinmunoanálisis
Cuestionario
125
1) Explicar los modos de desintegración de 53 I .
2) Indique los fenómenos que exitan un cristal de NaI(Tl).
3) Explique los componentes de un contador de centelleo sólido.
4) Describa las partes de un espectro , y por qué las lecturas se realizan en la
zona del “fotopico”.
5) Explicar el origen del pico “suma coincidencia” de impulsos.
6) Explicar el fundamento del método RIA. Por qué se fabrican los reactivos de
manera que el primer patrón tenga % B/T = 50 ?
7) Indicar las funciones linealizantes de la Señal vs. Concentración.
8) Calcular la dosis equivalente suponiendo que el trazador de un equipo de RIA
tiene una Actividad de 5 KBq
TRABAJO PRACTICO
125
Experiencia I: obtención del espectro de 53 I y selección del nivel de canal y
ancho de ventana para lecturas en el “fotopico”.
a) CONSIDERACIONES PREVIAS
Las Normas de Protección y Seguridad Radiológicas no permiten en éstas
cirscunstancias, manipular radioisótopos excepto si son “fuentes selladas”. Las
125
actividades autorizadas por la ARN para RIA son usualmente bajas (500 Ci para 53 I
), de manera que las tasas de exposición no representan un riesgo para la salud. El
personal instructor debe estar autorizado por ARN.
b) INDICACIONES GENERALES
129 241 125
1) Una mezcla de 53 I + 95 Am simula el espectro de 53 I . El espectro se
obtiene con el menor “ancho de ventana” posible. Los Discriminadores o analizadores
de la altura de pulsos son 2 : INFERIOR O NIVEL DE CANAL, que es un filtro
electrónico que deja pasar pulsos de cierta altura en adelante. Es variable entre 0 y
1000 unidades arbitrarias de tensión (uat). El SUPERIOR O ANCHO DE VENTANA, es
solidario con el INFERIOR, y deja pasar pulsos de h comprendidas entre el NC y 1-2-5-
10 % de 1000 uat.
3) la zona del “fotopico” se define bien, aunque puede aparecer a energías más
altas el pico “suma coincidencia”, muy sensible a la geometría de la medición.
c) PROCEDIMIENTO
Experiencia II: determinación de T4, una de las hormonas tiroideas, en suero humano
por RIA.
a) CONSIDERACIONES PREVIAS
El instructor dispondrá de tubos marcados con Ac anti-T 4, que ya han sido
empleados en algún centro asistencial en una determinación de la hormona, por la
técnica de fase sólida. De este modo, no se manipula material radioactivo disuelto en
soluciones, ni tampoco sueros.
b) INDICACIONES GENERALES
1) Si en verdad se realizara el análisis tal como está previsto en el protocolo, se
deben seguir estrictamente las normas de seguridad establecidas por la ARN o
equivalentes.
2) Lea atentamente los protocolos de Protección y Seguridad Radiológicas
anexados al final, que deben observarse en un Laboratorio de Radioisótopos.
c) PROCEDIMIENTO
Un Becquerell = 1 Bq = 1 des/s
Un Curie = 1 Ci = 3,7 1010 des/s = 2,22 1012 des/min
Un mCi = 3,7 107 des/s = 2,22 109 des/min
Un Ci = 3,7 104 des/s = 2,22 106 des/min
Características físicas: Vida media: 60.1 días. Emisiones: Las principales son rayos
gamma de 35 keV y rayos X de 27-32 keV. Semi-espesor: 0.02 mm en Pb; 2 cm en
tejidos. (Semi-espesor es la distancia lineal de material necesaria para reducir la
intensidad de la radiación un 50 %). Dosis y protección: La velocidad de dosis a 10
72
cm: 15 mrem/hour/mCi (para una fuente de punto no apantallada). Escudo: Pb en
láminas u hojas, cuando se usan centenares de microcuries o en el orden del
milicurie. No son necesariassi se usan cantidades bajas (microcurie) como en los
equipos de RIA. Límite Anual de Ingestión (LAI): 60 µCi vía la inhalación, y 40 µCi
vía oral. La ingesta de un LAI producirá una dosis de 5 rem. El órgano crítico para
protección es la glándula tiroidea. Detección: Un cristal de centelleo de ioduro de
sodio es el método preferido pora detectar Iodo-125. No es probable que los
detectores de G-M capten la presencia de Iodo-125 en cantidades menores a
100.000 dpm (0,05 µCi). Precauciones: Puede liberarse yodo volátil desde I-125 o
de compuestos iodados que contienen centenares de microcuries o más. Los
recipientes de Iodo-125, incluso los viales de muestras de compuestos iodados,
siempre deben abrirse en una campana extractora. El personal que usa I-125 en
centenares de microcuries o más, deben llevar los guantes dobles y cambiarlos
cuando se contaminen. Las marcaciones de moléculas deben realizarse bajo
estricto control de la autoridad regulatoria, porque se maneja I 2 radioactivo volátil
con Actividades de 500-2000 Ci. Después de una iodación, el personal debe
someterse a un bioensayo de contaje tiroideo. Depósitos y eliminación de Residuos:
Sólidos: almacenados en contenedores de Pb en un programa de decaimiento a
Teluro estable. Líquidos: sometidos a programas de eliminación cloacal. El límite
mensual de acumulación secundaria es 30 µCi.
1. abra el paquete exterior (direcciones de fabricante, etc) y quitar las ataduras del
embalaje.
2. abra el paquete interno y verificar que los contenidos están de acuerdo con lo
que se espera.
74
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