Obtención de componentes

Dra María Elena Alfonso

 Fraccionamiento de la Sangre

Industria
R
Plasma Albúmina
ST FVIII
Plaquetas

Eritrocitos Ig

Hemocomponentes Hemoderivados
Concentrado
de Hematíes
 Los componentes sanguíneos pueden
obtenerse mediante dos formas

• Por procesamiento de sangre obtenida

por donación de sangre convencional.

• Por tecnología de aféresis

Principios de la obtención de componentes

• Las células sanguíneas se sedimentan de

forma diferente en dependencia de su
tamaño y de la diferencia de densidad
entre éstas y el fluido que las rodea
 Principios de la obtención de componentes

Células Densidad (g/L)

Eritrocitos 1.100

Neutrófilos 1.082

Linfocitos 1.070

Monocitos 1.062

Plaquetas 1.058

Plasma 1.026 g/ml

.
 Principios de la obtención de componentes

Volumen medio (en 10-15 litros):

• Monocitos (740)

• Neutrófilos (270)

• Linfocitos (230)

• Eritrocitos (87)

• Plaquetas
• La velocidad y el tiempo de centrifugación
determinará la composición del
componente deseado, por tanto se deben
establecer para cada centrifugación las
condiciones óptimas para una buena
separación.
• Después de la centrifugación inicial: se
retira cuidadosamente de la centrífuga el
sistema de bolsas.

• La bolsa principal se coloca a un sistema

de extracción de plasma y las capas se
transfieren, una por una, a bolsas satélites
dentro del sistema cerrado.
 Bolsas para extracción sanguínea
Resina de PVC (Cloruro de Polivinilo) + Plastificantes +
Estabilizantes + Lubricantes
Bolsas Cuádruples
 Concentrado de eritrocitos sencillos
Concentrados de glóbulos rojos o
hematíes).

• Se obtienen a partir de la separación del plasma

de la unidad de sangre total mediante
centrifugación o sedimentación espontánea.

• La unidad contiene todos los eritrocitos de la

unidad de sangre original, gran cantidad de
leucocitos y de plaquetas, dependiendo del
método de centrifugación utilizado.
 Concentrado de eritrocitos sencillos
Concentrados de glóbulos rojos o
hematíes).

• Cada unidad de hematíes debe tener un

volumen de 280 50 ml, una fracción del
volumen eritrocitario (FVE) de 0.65 a 0.75
y una hemolisis menor del 0.8%.

• Conservación: 2-4 0 C durante 35 dias.

 Concentrados de eritrocitos en solución
aditiva

• Es una suspensión de eritrocitos en la que

se ha añadido una solución nutriente
adecuada para lograr una mejor
conservación.

• Se conservan de 2-4 0 C durante 35 dias.

 Concentrados de eritrocitos en solución
aditiva , sin capa leucocitaria
• Es la suspensión de hematíes obtenida de
la sangre total mediante centrifugación y
separación del plasma y de la capa
leucocitaria y subsiguiente adición de una
solución nutriente adecuada.

• Se conservan de 2-4 0 C durante 35 dias.

 Concentrados de eritrocitos lavados

• Es la suspensión de eritrocitos a la cual se

le ha retirado la mayor parte del plasma,
los leucocitos y las plaquetas y se ha
lavado en una solución de NaCl isotónica.

• Deben emplearse antes de las 6 horas del

proceso de lavado.
Concentrados de eritrocitos pobres
en leucocitos

• Se obtiene eliminando la mayoría

de los leucocitos de un concentrado de
eritrocitos por eliminación del buffycoat o
empleando filtros para leucocitos.

• Se conservan de 2-4 0 C durante 35 dias.

 Concentrados de eritrocitos congelados

• Componente derivado de la sangre total

en la que los hematíes son congelados
preferiblemente en un plazo máximo de 7
días desde su extracción, usando una
solución de sustancia crioprotectora
(glicerol), y conservados a -196ºC en
nitrógeno líquido
 Concentrados de eritrocitos congelados

• Variantes de este método permiten

conservar los concentrados a –80 0C.
Antes de su utilización los hematíes se
descongelan, se lavan y se suspenden en
solución salina isotónica.
 Concentrados de eritrocitos
congelados
• La ventaja principal de los glóbulos rojos
congelados es que se pueden mantener
por períodos de tiempo indefinidos, que
permitan la acumulación de sangre
procedente de grupos raros. Así los
pacientes con uno o más aloanticuerpos,
es posible que encuentren en el banco de
sangre congelada las cantidades
suficientes que necesitan.
 Concentrados de eritrocitos
congelados

• Los eritrocitos congelados (y lavados) se

encuentran virtualmente libres de plasma,
leucocitos y plaquetas. La congelación es
el método apropiado de conservación
para los glóbulos autólogos
 Concentrado de plaquetas

• Es un componente derivado de la sangre total

fresca que contiene la mayor parte del contenido
plaquetario original, de forma terapéuticamente
efectiva.

• El contenido de plaquetas por unidad variará

dependiendo del método de preparación de 0,4
a 0,8 x10 11 en 50 a 60 ml de plasma.

•
 Concentrado de plaquetas

• De forma similar el contenido de leucocitos variará de

0.05 a 1x 10 9 por cada unidad equivalente, a menos que
se tomen las medidas oportunas para reducir estas
cifras.

• Los leucocitos residuales antes de la depleción en el

caso de las plaquetas preparadas a partir de plasma rico
en plaquetas debe ser menor de 0.2x10 9 por cada
unidad simple, en el caso de las preparadas a partir de
la capa leucoplaquetaria la cifra de leucocitos debe ser
menor de 0.05x10 9 por unidad simple equivalente.
Preparación de concentrados de plaquetas
a partir de plasma rico en plaquetas (PRP)

• Se centrifuga una unidad de sangre total

de manera que un número óptimo de
plaquetas permanezca en el plasma y que
el número de leucocitos y glóbulos rojos
se reduzca a un nivel definido.

• Las plaquetas del PRP se sedimentan

mediante una centrifugación enérgica
Preparación de concentrados de plaquetas
a partir de plasma rico en plaquetas (PRP)

• El plasma sobrenadante se retira dejando

de 50 a 70 ml del mismo con las
plaquetas

• Finalmente las plaquetas se desagregan y

se resuspenden.
 Preparación de plaquetas a partir de buffy
coat.

• Se centrifuga una unidad de sangre total

de manera que las plaquetas, en primer
lugar se sedimenten (en la capa
leucocitaria) junto con los leucocitos.
 Preparación de plaquetas a partir de buffy
coat.

• La capa leucocoplaquetaria se separa y se suspende con el plasma

sobrenadante. Tras una mezcla cuidadosa, se centrifuga la bolsa
con la capa leucoplaquetaria, de forma que las plaquetas
permanezcan en el sobrenadante pero los glóbulos rojos y los
leucocitos se sedimenten al fondo de la bolsa.

• Las plaquetas pobres en leucocitos se pueden separar empleando

un desplasmatizador mediante filtrado se recomienda un
prealmacenamiento
( preferiblemente un plazo de 6 horas tras su recuperación).
Preparación de plaquetas a partir de buffy coat
por medios automatizados

• Equipos que emplean un sensor capaz de diferenciar los eritrocitos,

el plasma y el buffycoat.

• Despues de la centrifugación inicial, empleando un sistema de tres

bolsas, la bolsa con la sangre centrifugada se introduce en la
cámara del equipo y despues del funcionamiento del mismo se
obtendrá plasma en la bolsa superior, buffycoat en la bolsa primaria
y eritrocitos en la bolsa inferior.

• El empleo de estos sistemas denominados “top and bottom”

conllevan a una economía de recursos humanos al automatizar la
obtención de componentes
 Preparación de plaquetas a partir de buffy
coat por medios automatizados

• La bolsa con buffycoat obtenida se pulea de forma estéril

con una bolsa de plasma y otras 3 de buffycoat isogrupo

• La mezcla se centrifuga para obtener en el fondo los

eritrocitos y leucocitos y en el sobrenadante un
concentrado de plaquetas que contiene el equivalente a
4 unidades simples de plaquetas.

• .
 Preparación de plaquetas a partir de buffy
coat por medios automatizados

• Algunos grupos realizan pooles de 6

buffycoats. Los concentrados de
plaquetas obtenidos por este sistema
tienen una baja contaminación con
leucocitos y un menor daño y activación
plaquetarios.
 Plaquetas obtenidas por aféresis

• Es un preparado plaquetario obtenido utilizando un equipo

automatizado de separación celular.

• Dependiendo del método utilizado el contenido de

plaquetas por proceso variará de 2 a 8. 10 11.

• Este método permite recolectar plaquetas de donantes

seleccionados, para reducir el riesgo de aloinmunización
HLA y para el tratamiento efectivo de pacientes ya
aloinmunizados.

•
 Plaquetas obtenidas por aféresis

• Mediante la reducción del número de exposiciones a un

solo donante, el riesgo de transmisión viral puede ser
reducido.

• Una unidad estándar de plaquetas por aféresis debe ser

el equivalente a las plaquetas obtenidas en 5 unidades
de sangre total.

• Las unidades de plaquetas deben almacenarse por un

período de hasta 5 días tras la donación, a 22 0 C
durante 5 dias, en agitación.
 PLASMA FRESCO CONGELADO

• Plasma obtenido a partir de centrifugación

de una unidad de sangre total o por
aféresis, congelado de forma rápida antes
de las 6 horas de extraído y conservado a
una temperatura igual o inferior a los –30
0 C para mantener de forma funcional los

factores lábiles de la coagulación.

 PLASMA FRESCO CONGELADO

• Este componente contiene niveles normales de factores

de coagulación estables, albúmina e inmunoglobulinas.
Contiene un mínimo del Factor VIII original y por lo
menos, cantidades similares de los otros factores de
coagulación lábiles e inhibidores que se dan
naturalmente.

• Las células residuales deben ser: glóbulos rojos menor

que 6.0x109/l, leucocitos menor que 0.1x109/l, las
plaquetas menor que 50x109/L. El contenido de Factor
VIII debe ser mayor de 0.7 UI/ml.
 PLASMA FRESCO CONGELADO
• El plasma para transfusión debe ser ABO
compatible y debe utilizarse
inmediatamente despues de la
descongelación en el caso que se emplee
como fuente de factores lábiles de la
coagulación.

• Se conserva a –30º C o temperaturas

inferiores durante un año.
 CRIOPRECIPITADO
• Componente que contiene la fracción
crioglobulínica del plasma, obtenida de una
donación única y reciente mediante
centrifugación intensa y concentrado a un
volumen final de 10 a 20 ml, libre de células.

• Contiene una fracción importante de Factor VIII,

Factor Von Willebrand, fibrinógeno, Factor XIII y
fibronectina presentes en plasma recién extraído
y separado.
 CRIOPRECIPITADO
• Se deja que la bolsa de plasma congelado
se descongele a una temperatura de 2 a
6ºC mediante la técnica de sifón o
mediante la descongelación lenta.

• Despues se centrifuga y desplasmatiza,

dejando en la bolsa el crioprecipitado con
10-20 ml del plasma del sobrenadante
Concentrado
de Hematíes
Concentrado
de Hematíes
 CRIOPRECIPITADO

• El Factor VIII puede ser administrado

como crioprecipitado, como Factor VIII
concentrado, o como Factor VIII
recombinante.

• Su actividad se mantiene adecuada entre

–30 0 C y -40 ºC durante 1 año o en
productos liofilizados.
 CRIOPRECIPITADO

• La bolsa de crioprecipitado se descongela

en un medio adecuadamente controlado a
37ºC inmediatamente después de su
retirada del lugar de almacenamiento e
inmediatamente
 CRIOPRECIPITADO
• Antes de ser utilizado, la disolución del
precipitado debe facilitarse mediante una
cuidadosa manipulación durante el
proceso de descongelación.

• Preparados de pequeñas mezclas: se

agrupan de forma estéril varias bolsas de
crioprecipitado para su uso.
 Concentrado de granulocitos

• Es un componente compuesto
principalmente por granulocitos
suspendidos en plasma, obtenidos
mediante aféresis de un único donante.
 Concentrado de granulocitos

• Su principal función es la fagocitosis de

las bacterias.

• Se obtienen por leucoféresis mediante

máquinas separadoras de células de flujo
intermitentes o continuo.
 Concentrado de granulocitos

• El rendimiento se puede mejorar mediante

la adición de un agente sedimentador de
glóbulos rojos como el almidón de
hidroxietil dextrano (HES), de bajo peso
molecular o gelatina líquida modificada.
 Concentrado de granulocitos

• El volumen debe ser menor de 500 ml y

cada unidad debe tener más de 10x10 9
granulocitos.
 Concentrado de granulocitos

• Al haber una contaminación significativa

de glóbulos rojos, se recomienda realizar
pruebas de compatibilidad para su empleo
terapeutico.

• Se conservan de 2-4 0 C durante 48 horas

 Industria
POOL
Albúmina
DE
PLASMA FVIII

Ig

Hemoderivados