Food Chemistry 192 (2016) 965-971

listas de contenidos ofrecidos en ScienceDirect

Química de Alimentos

Diario página de inicio: www.elsevier .com / localizar / Foodchem

valor nutricional de los lípidos de las leguminosas: Evaluación de diferentes métodos de extracción y
determinación de la composición de ácido graso

Giovanni Caprioli un , Federica Giusti un , Roberto Ballini segundo , Gianni Sagratini un , Pilar Vila-Donat un , Sauro Vittori un ,
Dennis Fiorini segundo , ⇑
un Facultad de Farmacia, Universidad de Camerino, Via San Agustín 1, 62032 Camerino, Italia
segundo Escuela de Ciencia y Tecnología de la División de Química de la Universidad de Camerino, Via S. Agostino 1, 62032 Camerino, Italia

información del artículo abstracto

Historia del artículo: Este estudio trata de contribuir a la evaluación de las propiedades nutricionales de las leguminosas mediante la determinación de la composición de
Recibido el 10 de abril de el año 2015
ácidos grasos (FA) de 29 muestras de leguminosas después de la evaluación de nueve extractionmethods. El método de Folch y la extracción
Recibido en forma revisada 20 de julio de el año 2015: ha aceptado 21
líquido-sólido con hexano / isopropanol o con hexano / acetona se investigaron, así como el efecto de hidratación previa de las muestras. extracciones
de julio de el año 2015 Disponible en Internet el 23 de julio de el año
Soxhlet se evaluaron también con diferentes mezclas de disolventes. Resultados sobre la composición de FA utilizando el método de extracción de
2015
hexano / isopropanol eran los mismos en términos de FA composición del método de Folch, pero el rendimiento de la extracción fue sólo alrededor de
20-40% de la del método de Folch precedido por hidratación. Algunos tipos de legumbres mostraron valores particularmente interesantes para la
palabras clave:
relación de ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs) norte- 6 / norte- 3, tales como lentejas, con el valor de 4,0, y frijoles Azuki, a 3,2. En las lentejas, el
legumbres
PUFA% varió de 42,0% a 57,4%, mientras que en las habas de Azuki fue 57,5%.
Lentejas

Métodos de extracción de lípidos

ácidos grasos saturados ácidos grasos
insaturados 2015 Elsevier Ltd. Todos los derechos reservados.

1. Introducción
Las legumbres incluyen lentejas ( Lens culinaris L.), frijol ( Phaseolus vulgaris L.), guisantes ( Pisum
sativum L.), garbanzos ( Cicer arietinum L.), altramuces ( Lupinus albus spp.), habas ( Vicia faba o Faba
vulgaris),
habas de soja ( Glycine max) y otros. Cultivado durante miles de años ( Messina, 1997 ), Que han
jugado un papel importante en las dietas tradicionales de muchas regiones del mundo ( Caprioli et al.,
2010; Chung, Liu, Hoover, Warkentin, y Vandenberg, 2008 ). Entre los países europeos, el más alto
consumo de legumbres se observa alrededor de Mediterráneo, con un consumo diario entre 8 y 23 g
por persona ( Kalogeropoulos et al., 2010 ). Se ha informado de que la inclusión de leguminosas en la
dieta diaria tiene muchos efectos beneficiosos en el control y prevención de enfermedades
metabólicas crónicas, como la diabetes mellitus y las enfermedades coronarias ( Sagratini et al., 2009 ).
Por otra parte, las legumbres cocidas se consideran una fuente excelente de proteínas vegetales, y
son también ricos en almidón, fibra dietética, minerales y vitaminas ( Ruiz et al., 1996 ). Aunque
muchos grupos de investigación se han centrado sus estudios sobre los componentes bioactivos fi
cas tales como compuestos fenólicos ( Dueñas, Sol, Hernández, Estrella, y Spranger, 2003 ) O
soyasaponins reductores del colesterol ( Sagratini et al, 2013.; Vila-Donat et al., 2014 ), hay unos
pocos
estudios relativos a los contenidos lipófilos fitoquímicos o el ácido graso (FA) per fi l de legumbres ( Konopka,
Czaplicki, y Rotkiewicz, 2006; Zhang et al., 2014 ). Zhang et al. (2014) analizado la composición FA de
20 cultivares de lentejas canadienses después de la extracción de la fracción lipídica con hexano /
isopropanol ( yo- PrOH). Ryan, Galvin, O'Connor, Maguire, y O'Brien (2007) cálculo del factor fa per fi l
de los diversos tipos de alimentos, como las legumbres como los guisantes, habas y lentejas,
concluyendo que su per fi l de FA podría ser favorable desde el punto de vista de cardio-protector.
También utilizaron hexano / yo- PrOH como disolventes de extracción.
En otro estudio,
Kalogeropoulos et al. (2010) utilizado el método de Bligh y Dyer ( Bligh y Dyer, 1959 ) Para extraer
lípidos a partir de varios tipos de legumbres cocidas, en lugar de en bruto, con el fin de cuantificar el
contenido de FA en la forma en que las leguminosas son consumidos efectivamente en los países
mediterráneos. La determinación de la específico per fi l y el contenido de FA en los alimentos de
pulso es necesaria para comprender mejor los bene fi cios de salud que prestan. Por lo tanto, los
objetivos de nuestro trabajo fueron (a) para comparar los diferentes métodos de extracción para el
análisis de conjuntos combustibles en las legumbres y (b) aplicar la mejor metodología de extracción
para la evaluación de la composición de FA en 29 diferentes muestras de pulso. Folch, Bligh y Dyer,
y sus procedimientos de modi fi cados son los métodos más apropiados para frommost extracción de
lípidos de las matrices ( Bligh y Dyer, 1959; Dunstan, Volkman y Barrett, 1993; Erickson, 1993; Ewald,
Bremle, y Karlsson, 1998; Folch, Lees, y Stanley, 1957 ). Sin embargo, la toxicidad de cloroformo
(CHCl 3) y metanol (MeOH) ha llevado a los investigadores para evaluar los posibles sustitutos, tales

⇑ El primer autor en: Escuela de Ciencia y Tecnología de la División de Química de la Universidad de Camerino,

VS Agostino 1, 62032 Camerino, MC, Italia.

Dirección de correo electrónico: Dennis. orini@unicam.it fi (D. Fiorini).

http://dx.doi.org/10.1016/j.foodchem.2015.07.102
0308-8146 / 2015 Elsevier Ltd. Todos los derechos reservados.
966 G. Caprioli et al. / Food Chemistry 192 (2016) 965-971

como hexano y yo- PrOH ( Gunnlaugsdottir y Ackman, 1993; Hara y Radin, 1979; Molina Grima et al.,
1994; Smedes, 1999; Undeland, Harrod, y Lingnert, 1998 ), Sobre todo cuando los extractos son para
uso como suplementos dietéticos. Por lo tanto, hemos aplicado métodos convencionales tales como
los de Folch et al., Y Soxhlet, pero con algunas modificaciones, a saber, la hidratación previa de la
matriz y la combinación de disolventes, a fin de mejorar el rendimiento de extracción y obtener un
ácido graso más fiable per fi l. Después de la optimización, se analizaron 29 muestras de
leguminosas. A lo mejor de nuestro conocimiento, hasta la fecha, este es el primer estudio que
presenta integrales de datos de composición de FA en tantos tipos de legumbres, determinado
después de haber evaluado el mejor método de extracción.
nombres de las variedades y comerciales de estos materiales de leguminosas investigados se
enumeran en tabla 1 . El origen exacto era conocido por la mayoría de las muestras, mientras que para
algunos de ellos (muestras 21 y 26), sólo la ubicación de embalaje estaba disponible. Las legumbres
fueron comprados en los supermercados en Camerino (Italia) o fueron amablemente proporcionados
por una compañía de semillas locales (Col Fertitecnica fi Orito) con la excepción de las muestras
27-29, que fueron comprados en las tiendas de comestibles locales en Camerún.

2.3. Los procedimientos de extracción

Cada extracción se realizó por triplicado en una muestra seca suelo finamente 5 g fi, obtenido
usando un molinillo de cocina (Jolly licuadora, Johnson, spa Elettrodomestici, Italia). Los
2. Materiales y métodos
procedimientos de extracción se evaluaron con el 'lenticchia Col fi Orito Alta Qualità' muestra de
lentejas.
2.1. Productos químicos y materiales

HPLC grado MeOH, yo- PrOH, diclorometano (CH 2 Cl 2), y CHCl 3 se adquirieron de Sigma-Aldrich
(Milano, Italia), mientras que el ácido acético de grado HPLC 99-100% fue comprado de JT Baker BV
2.3.1. Hexano / extracción de isopropanol (Hexano / agitación i-PrOH)
(Deventer, Países Bajos). Acetona y hexano disolventes para el análisis de residuos fueron
El hexano / yo- PrOH 3: 2 (15 ml) la mezcla de disolventes se añadió a la muestra y se dejó en
suministrados por Fluka-Riedel-deHaën (Milano, Italia). De sodio anhidro sulfato, cloruro de sodio e
agitación magnética a temperatura ambiente durante 2 h ( Ryan et al., 2007 ). La suspensión se filtró y
hidróxido de sodio se adquirieron de Panreac Quimica SA (Barcelona, ​España). agua desionizada (>
el residuo se lavó dos veces con 10 ml de la mezcla de disolventes. Después de la adición de
18 M X cm resistividad) se obtuvo de un sistema Milli-Q SP Reactivo de agua (Millipore, Bedford, MA,
solución acuosa de 6,7% w / v de sulfato de sodio anhidro, el extracto lipídico se agitó vigorosamente
EE.UU.).
durante 30 s y se centrifugó a 5000 rpm durante 10 min. La fase líquida superior así recogido se
evaporó con un evaporador rotatorio hasta sequedad. El extracto lipídico se pesó y transmethylated.

2.2. muestras de leguminosas

Veintinueve legumbres crudas, incluyendo nueve muestras de lentejas ( L. culi-

narina), nueve muestras de frijol ( P. vulgaris), dos muestras de guisante ( P. sativum), tres muestras de
garbanzo ( C. arietinum), dos muestras de frijol fava (haba, V. faba), una muestra de almorta (hierba,
Lathyrus sativus), una muestra de frijol Azuki ( Vigna angularis), un frijol negro de ojos ( Vigna
unguiculata) y una muestra de soja ( G. max), fueron analizados.
2.3.2. extracciones Soxhlet (Soxhlet hexano / acetona y hexano Soxhlet / CH 2 Cl 2)
Las extracciones se realizaron utilizando 150 ml de acetona / hexano (1: 4) y CH 2 Cl 2 / hexano (1:
4) como disolventes ( Manirakiza, Covaci, y Schepens, 2001 ). Después de 5 h, la mezcla de
extracción se secó con un evaporador rotatorio, ponderado y luego transmethylated.

tabla 1
Tipo, nombres comerciales, origen y botánico clasificacion de las leguminosas analizados.

Número Tipo de legumbre Nombre comercial Origen Botanical clasificacion

1 Lenteja Lenticchie Fertitecnica Col fi Orito Alta Qualità Italia Lens culinaris
2 Lenteja Lenticchie Terra e Sole Italia Lens culinaris
3 Lenteja Lenticchie Fertitecnica Col fi Orito Italia Lens culinaris
4 Lenteja Lenticchie Azienda Agricola Monte Castello Italia Lens culinaris
5 Lenteja Lenticchie Casteluccio di Norcia Italia Lens culinaris
6 Lenteja Lenticchie degli Altipiani Umbri Italia Lens culinaris
7 Lenteja Lenticchie Col fi Orito Qualità Oro Italia Lens culinaris
8 Lenteja Lenticchie nera di Sicilia Bio Italia Lens culinaris
9 Casco de lentejas rojas Lenticchie Rosse decortique Fertitecnica Col fi Orito Turquía Lens culinaris
10 Polluelo (Almorta) Cicerchia Tenuta Mattioni Italia Lathyrus sativus
11 grano de guisante Piselli Secchi Fertitecnica Col fi Orito Canadá Pisum sativum
12 grano de guisante Bio Piselli Verdi Spezzati Italia Pisum sativum
13 Garbanzo Ceci Terra e Sole Italia Cicer arietinum
14 Garbanzo Ceci Fertitecnica Col fi Orito Italia Cicer arietinum
15 Garbanzo Ceci della Puglia Orti Italiani Italia Cicer arietinum
dieciséis Haba de soja Soia gialla Fertitecnica Col fi Orito Canadá Glycine max
17 bean Fava (haba) Simplemente intere favorito Italia Vicia faba
18 bean Fava (haba) spezzate favorito Fertitecnica Col fi Orito Egipto Vicia faba
19 Armada de frijoles Fagioli tondini Fertitecnica Col fi Orito Canadá Phaseolus vulgaris
20 frijol cannellini Fagioli cannellini Terra e Sole Italia Phaseolus vulgaris
21 frijol romana Simplemente Fagioli Borlotti - Phaseolus vulgaris
22 Frijol mantequilla Fagioli corona Fertitecnica Col fi Orito Polonia Phaseolus lunatus
23 frijol negro de ojos Fagioli Occhio Fertitecnica Col fi Orito Perú Vigna unguiculata
24 Frijol negro Fagioli Neri Fertitecnica Col fi Orito Méjico Phaseolus vulgaris
25 frijol romana Fagioli Borlotti Terra e Sole Italia Phaseolus vulgaris
26 azuki Azuchi Verdi Fertitecnica Col fi Orito - Vigna angularis
27 Poroto Fagioli rossi Camerún Phaseolus vulgaris
28 Frijol negro Neri Fagioli Camerún Phaseolus vulgaris
29 frijol blanco Bianchi Fagioli Camerún Phaseolus vulgaris
 G. Caprioli et al. / Food Chemistry 192 (2016) 965-971
2.3.3. extracción Folch
La combinación de disolventes de CHCl 3 / se añadió a la muestra y se extrajo durante 3 minutos
usando un homogeneizador (Ultraturrax, IKA);: MeOH (1, 86 ml 2) ( Folch et al., 1957 ). La solución se
filtra fi se recogió en un embudo de separación; el residuo sólido se lavó con 22 ml del disolvente de
extracción que también había sido recogidos en el embudo de separación, donde la fase orgánica se
lavó con
21,4 ml 0,73% w / v solución acuosa de NaCl. Después, la fase orgánica se sifón, se secó sobre
anhidro sulfato de sodio anhidro, se filtró, y se secó a presión reducida con un evaporador rotatorio.
El extracto lipídico se pesó y se sometió a transmetilación.
2.3.4. La extracción con hexano / acetona (hexano / acetona)
La extracción se llevó a cabo siguiendo el procedimiento Folch (reportado anteriormente)
mediante el uso de norte- hexano / acetona (4: 1) en lugar de CHCl 3 y MeOH como disolventes.
2.3.5. La extracción con hexano / i-PrOH (hexano / i-PrOH)
La extracción se llevó a cabo siguiendo el procedimiento Folch (reportado anteriormente)
mediante el uso de norte- hexano / yo- PrOH (3: 2) en lugar de CHCl 3
y MeOH como disolventes.
2.3.6. Extracciones precedidos por la hidratación de la muestra
muestra finamente molida (5 g) se hidrató con 10 ml de agua desionizada, la cantidad mínima de
agua requerida para humedecer la leguminosa harina, durante 1 h bajo agitación magnética a
temperatura ambiente. A continuación, 210 ml de CHCl 3 / MeOH 2: 1 (hidr Folch) o de hexano /
acetona (4: 1) (hidr hexano / acetona) o de hexano / yo- PrOH (3: 2) (hidr hexano / yo- PrOH) se
añadieron a la muestra, y después de 3 min de homogeneización (Ultraturrax, IKA) la suspensión se
filtra a través de papel de filtro en un embudo de separación. Después de lavados del residuo sólido
sobre el filtro de papel fi con los restantes 90 ml de CHCl 3 / MeOH (2: 1), 59,4 ml 0,73% de NaCl w / v
Se añadió una solución acuosa en el embudo para lavar la solución de extracto de lípidos.
Posteriormente, la fase orgánica se transfirió, se secó (como se informó anteriormente), ponderado y
se sometió a transmetilación.
2.4. análisis de transmetilación y cromatografía de gases
Transmetilación siguiente procedimiento de Ichihara ( Ichihara, Shibahara, Yamamoto, y
Nakayama, 1996 ) Se realizó en cada extracto de lípidos. Brevemente, una cantidad entre 10 y 15 mg
de extracto de lípidos, disueltos en 1 ml de hexano, se añadió a 0,1 ml de 2 M de KOH en MeOH y se
agitó con vórtex durante 2 min. Después de la adición de
1,5 ml 0,15 M de ácido acético acuosa, la solución se agitó con vórtex durante 1 min y se centrifugó a
5000 rpm durante 10 min. La fase superior se transfirió mientras que 1 ml de hexano se añadió a la
restante, que después se agitó y se centrifugó a 5000 rpm durante 5 min vigorosamente. Esta
operación se repitió tres veces. Trazas de agua en la fase de hexano total de se eliminaron con
sulfato de sodio anhidro. Por último, los ésteres metílicos de ácidos grasos que contienen solución de
hexano (FAMEs) se cerró herméticamente y se almacenaron a 20 C. Antes del análisis, las
soluciones de FAMEs se evaporaron a sequedad con una corriente de nitrógeno, se disolvió en 1 ml
de hexano y se analizaron por duplicado. El cromatógrafo de gases utilizado fue un Agilent
Technologies 6850 equipado con un detector de ionización de llama (FID). El capilar columna
cromatográfica era un DB-225 Agilent Technologies (longitud 30 m, ID, 0,32 mm; fi espesor lm,
0,25 mm) y el volumen inyectado fue de 1 l l. La relación de separación era 01:30 y la temperatura del
inyector fue de 260 C. El gas portador fue H 2 y su fl inicial owwas 3,7 ml / min en la columna.
Hidrógeno de alta pureza fue producido por un generador (PGH2-250 de DBS Analytical Instruments,
Vigonza, Italia). La temperatura del horno se mantuvo a 60 C durante 3 min, a continuación,
programado para aumentar a 220 C en 20 C / min, y se mantuvo a 220 C durante 8 min. El detector
FID
967
temperatura era 250 C (flujo de aire 400,0 ml / min, H 2 flujo
40,0 ml / min). Cada análisis se llevó 19 min. identificaciones se realizaron mediante el análisis de la
norma 'Supelco 37 Componente FAME Mix' comprado de Supelco (Bellefonte, PA, EE.UU.) y por
espectrometría de masa GC (MS). áreas de los picos obtenidos a partir de los ésteres metílicos de
ácido hexadecanoico (C16: 0),
ácido esteárico (C18: 0), 9- y
11- ( Z) - ácidos octadecenoicos (C18: 1, norte- 9 y norte- 7), 9,12-
( Z, Z) - ácido octadecadienoico (C18: 2, norte- 6) y 9,12,15- ( Z, Z, Z) -
ácido octadecatrienoico (C18: 3, norte- 3) fueron corregidas usando factores de respuesta teóricos ( Ackman
y Sipos, 1964 ).
2.5. análisis estadístico
Los datos fueron sometidos a análisis unidireccional de la varianza (ANOVA) con el fin de
evaluar las diferencias significativas ( P < 0,05) entre la extracción de eficiencias y entre las
composiciones de ácidos grasos obtenidos por los diferentes métodos evaluados. El software
utilizado fue pasado ( Martillo, Harper, y Ryan, 2001 ).
3. Resultados y discusión
3.1. Comparación de los diferentes métodos de extracción de lípidos
El objetivo final de este estudio fue evaluar la composición FA en diferentes tipos de legumbres. Con
el fin de obtener resultados fiables, los diferentes métodos de extracción de lípidos se evaluaron antes de
llevar a cabo el análisis FA. La deficiencia ef de diferentes métodos de extracción en términos de
rendimientos de extracto ponderados puede dar información útil sólo si emparejado con otro
determinaciones cuantitativas de uno o más componentes del extracto de lípidos tales como Fas específico
y. De hecho, las AF son típicamente los principales componentes de un extracto lipídico, en la que se
encuentran principalmente en forma unida (acilgliceroles, fosfolípidos, ceras, ésteres de esterol, y así
sucesivamente). La presencia de sustancias no lipídicos coextraidas tales como proteínas (lípido unido),
carbohidratos, o contaminantes no se puede excluir, teniendo en cuenta el peso de extracto solamente,
especialmente cuando disolventes altamente polares se utilizan para la extracción. Por lo tanto, en estos
casos, para evitar o limitar la presencia de sustancias polares no lipídicos, es necesario lavar los extractos
con agua o soluciones acuosas salados. Además, cuando la extracción de lípidos de una muestra más o
menos seca, si una etapa de hidratación preliminar no se logra, el rendimiento de la extracción puede ser
profundamente influenciado debido a la incapacidad del disolvente para penetrar en los tejidos secos.
Teniendo en cuenta todos estos puntos clave en la extracción de lípidos, se evaluó el método de Folch ( el
rendimiento de la extracción puede ser profundamente influenciado debido a la incapacidad del disolvente
para penetrar en los tejidos secos. Teniendo en cuenta todos estos puntos clave en la extracción de
lípidos, se evaluó el método de Folch ( el rendimiento de la extracción puede ser profundamente
influenciado debido a la incapacidad del disolvente para penetrar en los tejidos secos. Teniendo en cuenta
todos estos puntos clave en la extracción de lípidos, se evaluó el método de Folch ( Folch et al., 1957 ), Que
típicamente proporciona muy buenos resultados, pero también evaluó el rendimiento dado por disolventes
que tienen una toxicidad más baja, tales como hexano / yo- PrOH y hexano / acetona. Los mismos métodos
fueron también aplica después de hidrataron las muestras y se compararon los fi ciencias extracción ef
obtenidos. También extracciones Soxhlet se evaluaron con diferentes mezclas de disolventes, como
hexano / acetona y hexano / CH 2 Cl 2 ya que se han reportado para dar resultados interesantes ( Fiorini et al,
2013.; Manirakiza et al., 2001 ). Los resultados, publicados en Las tablas 2 y 3 , Se obtuvieron mediante la
aplicación de los diferentes métodos en una muestra de lentejas. De todos modos, un estudio preliminar
llevado a cabo en los diferentes tipos de legumbres investigados, mostró la misma tendencia de e fi ciencia
para los diferentes métodos independientemente del tipo de legumbre (datos no demostrados). En Tabla 2 las
clasificaciones de extracción e fi ciencia expresan en términos de peso% de extracto y en términos de
contenido de ácido graso relativa en el extracto son reportados asignando el valor arbitrario de 100 con el
método que da el mejor resultado (hidr Folch) en cada una de las clasificaciones, el cálculo de los valores
relativos de los otros métodos. Debe observarse que si sólo se consideró el rendimiento de extracto
ponderado, el ranking de e fi ciencia los métodos sería engañosa. De hecho, en esta clasificación, la
'hexano Soxhlet / CH 2 Cl 2 'Método es en cuarto
 G. Caprioli et al. / Food Chemistry 192 (2016) 965-971

Tabla 2
Extracto de porcentaje en peso y fi ciencias extracción ef obtenidos por los diferentes métodos investigados medido en términos de peso de extracto y en términos de contenido de ácidos grasos en el extracto, de una muestra de lenteja.

Extraer% en peso un , ( RSD%) contenido relativo FA en el extracto un , segundo , ( RSD%) Relativa extracción eficiencias En términos

de peso de extracto do
En términos de contenido FA do

hexano / yo- PrOH 0.70 un ( 0.5) 769 un ( 6.1) 29 19

Hexano / acetona 0,78 un ( 4.2) 983 a, b ( 8.3) 32 24
hexano / yo- PrOH (agitación) 0.90 b ( 2.4) 1814 c ( 3.4) 37 44
Hydr hexano / acetona 1.02 c ( 1.8) 1286 b ( 9.0) 42 31
Hydr hexano / yo- PrOH 1.08 c ( 2.2) 1798 c ( 1.5) 44 44
hexano Soxhlet / CH 2 Cl 2 1.29 d ( 0.9) 1227 c ( 2.2) 52 30
hexano Soxhlet / acetona 1.31 d ( 1.3) 1995 c ( 5.5) 53 49
Folch 1.89 e ( 3.3) 3168 d ( 7.6) 77 77
hidr Folch 2.47 f ( 3.7) 4109 e ( 4.2) 100 100

RSD: desviación estándar relativa ( n = 3).

un Letras diferentes indican diferencias significativas ( P < 0,05) dentro de cada columna.

segundo Calculado para cada método como porcentaje en peso de extracto multiplicado por el área total de los picos de ésteres metílicos de ácidos grasos obtenidos de los análisis GC.
do Extracto de peso obtenida por Hydr Folch (que dio el valor más alto) ha sido asignar el valor arbitrario de 100, y los otros se han calculado en proporción.

Tabla 3
Fatty composición porcentual de ácido obtenido de una muestra de lenteja por los diferentes métodos de extracción objeto de la investigación.

dentro de cada una de las clases de ácidos grasos:

C16:ácidos
0 grasos saturados
C18: 0(SFA), ácidos grasos
C18: 1,monoinsaturados
norte- 9 un (MUFA)
C18: 2, y ácidos
norte- 6 grasos poliinsaturados
C18: 3, norte- 3 (AGPI); en cada
SFA columna, letras diferentes
MUFAindican diferencias significativas.
PUFAs 968

(%) segundo (%) segundo

hexano / yo- PrOH 13,9 (9,8) 3,9 (9,0) 25,8 (10,6) 44,2 (0,9) 12,2 (12,0) 18.0 un ( 9.6) 26.2 a, b ( 10.6) 55.8 a, b ( 1.8)
Hexano / acetona 12,3 (0,1) 3,8 (0,8) 23,1 (0,3) 46,3 (0,3) 14,5 (1,0) 18.3 un ( 0.3) 22.7 un ( 0.3) 59.0 a, b ( 0.0)
hexano / yo- PrOH (agitación) 13,0 (1,7) 3,0 (0,8) 25,3 (0,7) 45,6 (0,8) 13,0 (0,2) 16.0 un ( 1.2) 25.3 a, b ( 0.7) 58.7 a, b ( 0.7)
Hydr hexano / acetona 18,1 (0,2) 3,9 (6,5) 27,9 (3,3) 40,0 (0,6) 10,0 (9,4) 22.2 b ( 1.0) 27.7 b ( 3.3) 50.1 un ( 1.4)
Hydr hexano / yo- PrOH 14,7 (3,3) 3,7 (4,4) 26,5 (0,5) 44,2 (1,7) 11,6 (0,1) 18.4 un ( 3.5) 25.8 a, b ( 0.5) 55.8 a, b ( 1.4)
hexano Soxhlet / CH 2 Cl 2 14,4 (2,9) 3,4 (2,9) 23,0 (0,2) 45,8 (0,9) 13,3 (1,2) 17.8 un ( 2.9) 23.0 un ( 0.2) 59.1 a, b ( 1.0)
hexano Soxhlet / acetona 13,7 (5,6) 3,1 (5,9) 22,7 (0,0) 46,4 (1,4) 14,1 (2,1) 16.8 un ( 5.6) 22.7 un ( 0.0) 60.5 a, c ( 1.6)
Folch 14,0 (1,7) 3,3 (1,4) 26,1 (3,0) 44,8 (0,5) 11,8 (2,4) 17.1 un ( 1.7) 26.3 a, b ( 3.0) 56.6 b, d ( 0.9)
hidr Folch 14,7 (0,2) 3,1 (0,8) 25,5 (0,1) 45,3 (0,1) 11,4 (0,0) 17.6 un ( 0.1) 25.7 a, b ( 0.1) 56.7 b ( 0.0)

un El valor informado también incluye el contenido de la C18 isómero: 1, norte- 7.

segundo Los porcentajes se calculan en valores de área de pico corregidas con factores de respuesta teóricos 26; valores de% de desviación estándar relativa ( n = 3) se presentan en los soportes. diferencias signi fi cativas ( P < 0.05) son especi fi

su lugar mientras se está en el séptimo lugar en el ranking de extracción e fi ciencia en términos de
contenido de ácido graso relativa en el extracto. Este comportamiento se puede atribuir a la alta
capacidad de disolvente de CH 2 Cl 2, que también puede extraer las sustancias no lipídicas (o en
cualquier lípidos no de acilo de casos), aumentando así el rendimiento de extracción ponderado. El
problema es menos importante para los métodos que incluyen una etapa de lavado con soluciones
acuosas salados, ya que en estos casos la mayoría de las sustancias no lipídicas se retiran después
de la extracción. En todos los casos, la etapa de hidratación aumenta la FA extracción e fi ciencia,
incluso si en el caso del método de 'hexano / acetona' la diferencia en la mejora no fue significativo ( P>
0.05, Tabla 2 ). El método de Folch precedido por hidratación dio los mejores resultados, seguido por
el método de Folch aplicado directamente a la muestra seca. Todos los otros métodos dieron mucho
menor eficiencias. Entre estos, 'hexano Soxhlet / acetona' dio buenos resultados en términos de
extracción e fi ciencia, como también obtenido en estudios anteriores ( Fiorini et al., 2013 ) Pero la
composición FA obtenido por este método es significativamente diferente de la obtenida por los
métodos Folch ( Tabla 3 ), Lo que demuestra que el método de 'Soxhlet hexano / acetona' da
resultados poco fiables. En cambio, el 'Hydr hexano / yo- PrOH' método, con una e fi ciencia
comparable a la del 'método de Soxhlet hexano / acetona'( Tabla 2 ), También proporciona una
composición FA fiable, no significativamente diferente de la obtenida por los métodos Folch ( Tabla 3 ).
rendimiento de extracción podría depender de varios parámetros tales como la naturaleza del soluto
y del disolvente, la selectividad del disolvente y el nivel de la convección en el medio. Sin embargo,
un factor que juega un papel importante en el proceso de extracción, como se informó en un artículo
interesante de Ranjan, Patil, y Moholkar (2010) , Es el mecanismo físico, que podría ser o bien la
difusión de los lípidos a través de la pared celular o la liberación directa de los lípidos en la masa con
una interrupción de la célula que se puede producir a través de cualquiera de las ondas de choque
emitidos por la cavitación
burbujas o por el microchorro generado por las burbujas de cavitación debido a un colapso asimétrico
( Kuppa y Moholkar de 2010 ). En nuestro estudio, el método de Folch precedido por hidratación dio
los mejores resultados, seguido por el método de Folch aplican directamente a la muestra seca y
luego por 'hexano Soxhlet / acetona'. La más alta e fi ciencia de ambos métodos Folch puede ser
debido a dos efectos: la naturaleza del disolvente y el efecto de la convección. Los disolventes
utilizados en el método de Folch, CHCl 3 y MeOH, tiene una capacidad mucho mayor para solubilizar
lípidos tanto neutros y polares en comparación con otras mezclas de disolventes menos polares
como por ejemplo, hexano y acetona o hexano y yo- PrOH ( Manirakiza et al., 2001; Molina Grima et
al., 1994 ). Además, el efecto de la convección, causado durante la extracción utilizando un
dispersador de acero, produce una cavitación transitoria, que puede afectar el tamaño y la estructura
(morfología) de la matriz celular aumentando así de extracción de lípidos.
En la extracción Soxhlet, la difusión es el único mecanismo de extracción de lípidos hipótesis ( Ranjan
et al., 2010 ), Mientras que en el método de Folch, tanto la difusión y la interrupción parcial de células
pueden contribuir a la extracción de lípidos superior. En este último, la interrupción de las células se
atribuye a la fricción de las semillas de leguminosas con la hoja de la dispersor. Por lo tanto, nuestros
resultados, según Ranjan et al., 2010 , Revelan que la selectividad del disolvente es el factor más
dominante en la extracción global de lípidos en lugar de la intensidad de la convección mayor en el
medio en estas condiciones de ensayo. De hecho, el 'Hydr hexano / yo- 'y 'Hydr hexano / métodos
PrOH acetona', llevada a cabo haciendo uso de un dispersador de acero, están en quinto y sexto
lugar en la clasificación de los métodos, aunque su mecanismo de extracción implica también la
interrupción de la pared celular.

Curiosamente, se puede observar que la extracción llevada a cabo por diferentes métodos
puede dar lugar a grandes diferencias no sólo en el lípido total extraído ( Tabla 2 ), Sino también en su
composición ( Tabla 3 ). En
 G. Caprioli et al. / Food Chemistry 192 (2016) 965-971 969

De hecho, teniendo en cuenta los porcentajes de ácidos grasos saturados (SFA), que varían de
16,0% a 22,2%, mientras que los ácidos grasos monoinsaturados (MUFA) varían de 22,7% a 27,7%
y poliinsaturados Fas (PUFAs) varían de 50,1% a 60,5%. Estos resultados destacan la importancia
de evaluar el método de extracción adecuado, tanto cuando es necesario extraer mayor cantidad
posible de FA, y cuando solamente composición de AG está bajo investigación. Así, en un
experimento posterior, todas las muestras se extrajeron usando el método de Folch precedido por
remojo de la muestra (hidr Folch). Así pues, el lípido total extractos obtenidos ( Tabla 4 ) Varió de
2,1% (sobre una base de peso seco) en una muestra del polluelo (n 10) a 19,8% en una muestra de
soja (n dieciséis). Los valores altos se encontraron en la muestra de frijol Azuki (13,6%) y en los
garbanzos muestras (6.1 a 6.8%); los últimos valores fueron intermedios entre los reportados por Ryan
et al. (2007)
muestra (n 10). Había particularmente altos niveles de ácido palmítico en los granos, que van desde
17,4% (muestra n 10) a 25,1% (muestra n
25), aunque los granos de Azuki ( V. angularis, muestra n 26) y frijoles observados negro ( V.
unguiculata, muestra n 23), que se muestra los niveles más altos (30,9% y 28,3%, respectivamente)
entre las 29 legumbres. Los porcentajes de ácido esteárico (ácido octadecanoico o C18: 0) eran más
heterogénea entre todas las muestras, aunque la muestra del polluelo (n 10) muestran el nivel más
alto. Los niveles del ácido graso monoinsaturado analizaron (ácido oleico o 9- ( Z) - octadecenoico o
C18: 1, norte- 9) varió de 5,1% de la muestra 26 (Azuki bean) a 39,6% de la muestra 9 (muestras de
lentejas mondados). El ácido oleico fue particularmente alta en garbanzos (31,4-34,8%), guisantes
(26,3-36,0%), habas (25.2-

32,4%), y las lentejas (23,5-39,6%), pero muy baja en los granos (5.1-
17,2%). Por el contrario, los ácidos grasos poliinsaturados (PUFAs) eran particularmente alta en
y por Kalogeropoulos et al. (2010) de garbanzos. granos (48,4-68,7%), aunque los granos de Azuki ( V. angularis, muestra n 26) muestran los niveles
más altos (71.2%). PUFAs tienen varios efectos benéfico sobre la enfermedad cardiovascular

3.2. Composición de ácidos grasos de las muestras de leguminosas incluyendo la mejora de los lípidos en sangre pro fi le ( Llaves y Parlin, 1966 ), Sensibilidad a la
insulina mejorada ( Lovejoy, 1999 ), Una menor incidencia de diabetes tipo 2 ( Hu et al., 1999 ) y

Después de haber fi identificado la mejor método de extracción entre los evaluados, es decir, anti-arrítmicos efectos ( Abeywardena, McLeannan, y Charnock, 1991 ). El ácido linoleico (9,12- ( Z, Z)

método de Folch precedido por remojo (hidr Folch), todas las muestras se extrajeron mediante el uso - ácido octadecadienoico o C18: 2, norte- 6) fue la más abundante PUFA en la mayoría de las

de este método y después se sometió a transmetilación para determinar la composición FA. En leguminosas bajo investigación aparte de algunos tipos de frijoles, en los cuales los más abundantes
de PUFA fue el ácido linolénico (9,12,15- ( Z, Z, Z) - ácido octadecatrienoico o C18: 3, norte- 3). El

Tabla 4 Se ha informado de la composición de ácidos grasos de las 29 muestras analizadas. La ácido linoleico fue muy alta en garbanzos (46,8-49,0%), soja (47,2%) y habas (42,9-47,1%). En

muestra del polluelo (n 10) y frijoles se encontró que tenían el mayor porcentaje de ácidos grasos cambio, en las nueve muestras de granos analizados, que osciló entre el 19,2% de la muestra 25

saturados totales (SFA%), como se informa en Tabla 4 . En la única muestra de polluelo analizado, se (judías romanas) a

encontró un nivel de 33,0% del total SFA, mientras que en los nueve muestras de frijol analizados,
los porcentajes variaron de 20,2% de la muestra 20 (frijoles 'Cannellini') a 37,2% de la muestra 25
(Roman frijoles). El nivel más alto de SFA% (37,4%) se encontró en la muestra n 26 (judías Azuki),
que pertenece a la V. angularis especies. Entre los AGS, ácido palmítico (ácido hexadecanoico o 33,0% de la muestra 22 (judías). Como se ha mencionado antes, los más abundantes de PUFA en

C16: 0) fue, como se esperaba, más alto que el ácido esteárico en todas las 29 muestras analizadas, algunas muestras de granos, tal como n 19, 20, 21, 25, 27,

aparte de un polluelo 28, 29 fue el ácido linolénico ácido graso esencial. En los nueve muestras de frijol analizados, se
varió de 29,3% de la muestra n 25 (frijoles romanos) a 44,6% de la muestra 28 (judías negras). El
nivel de linolénico

Tabla 4
Porcentaje composición de ácidos grasos, SFA, MUFA, PUFA, y norte- 6 / norte- relación de 3, en las muestras de leguminosas bajo investigación.

norte Tipo de legumbres Extraer% en peso C 16: 0 C 18: 0 C 18: 1 C 18: 2, norte- 6 C 18: 3, norte- 3 Los SFA% MUFA% PUFAs% norte- 6 / norte- 3

1 Lenteja 2.6 14.7 3.1 25.5 45.3 11.4 17.8 25.5 56.7 4.0
2 Lenteja 2.7 14.8 2.5 28.3 43.3 11.1 17.3 28.3 54.4 3.9
3 Lenteja 2.8 15.5 2.3 27.5 44.4 10.2 17.8 27.5 54.6 4.4
4 Lenteja 2.6 15.5 3.0 25.7 43.8 12.1 18.4 25.7 55.9 3.6
5 Lenteja 2.6 16.2 2.9 23.5 46.1 11.4 19.0 23.5 57.4 4.1
6 Lenteja 2.8 15.0 3.0 24.9 46.0 11.1 17.9 24.9 57.1 4.1
7 Lenteja 2.8 16.1 2.8 25.7 44.8 10.6 18.9 25.7 55.5 4.2
8 Lenteja 2.7 14.6 3.1 28.1 43.9 10.3 17.7 28.1 54.2 4.3
9 Casco de lentejas rojas 2.8 15.9 3.3 39.6 33.8 8.3 19.2 39.6 42.0 4.1
10 Polluelo (Almorta) 2.1 15.1 17.9 26.3 38.9 1.9 33.0 26.3 40.7 20.9
11 grano de guisante 2.8 11.7 5.1 36.0 40.7 6.4 16.8 36.0 47.2 6.3
12 grano de guisante 2.8 12.5 4.1 26.3 37.7 7.9 16.6 26.3 45.5 4.8
13 Garbanzo 6.2 11.3 5.9 31.8 49,0 2.1 17.2 31.8 51.2 23.1
14 Garbanzo 6.8 11.5 9.2 31.4 46.8 2.5 20.6 31.4 49.3 19.0
15 Garbanzo 6.1 11.9 4.1 34.8 46.9 2.4 15.9 34.8 49.3 19.7
dieciséis Haba de soja 19.8 11.1 5.6 22.6 47.2 5.7 16.7 22.6 52.9 8.3
17 de habas (Haba) 3.2 14.7 2.8 32.4 47.1 3.4 17.4 32.4 50.5 13.9
18 de habas (Haba) 3.1 14.0 2.9 25.2 42.9 2.8 16.9 25.2 45.7 15.3
19 Armada de frijoles 2.2 18.5 4.4 14.0 24.8 40.4 23.0 14.0 65.1 0.6
20 frijol cannellini 2.5 17.4 2.7 11.0 28.1 40.5 20.2 11.0 68.7 0.7
21 frijol romana 2.2 18.5 2.7 12.9 25.3 40.5 21.3 12.9 65.8 0.6
22 Frijol mantequilla 2.1 20.3 4.0 10.2 33.0 32.6 24.3 10.2 65.6 1.0
23 frijol negro de ojos 3.1 28.3 6.7 9.4 35.4 20.0 35.0 9.4 55.5 1.8
24 Frijol negro 2.7 17.5 4.5 17.2 31.5 29.4 22.0 17.2 60.9 1.1
25 frijol romana 1.9 25.1 12.1 14.4 19.2 29.3 37.2 14.4 48.4 0.7
26 azuki 13.6 30.9 6.5 5.1 43.8 13.7 37.4 5.1 57.5 3.2
27 Poroto 4.7 18.7 4.0 6.1 32.7 38.5 22.7 6.1 71.2 0.9
28 Frijol negro 6.4 19.4 3.6 9.6 22.7 44.6 23.0 9.6 67.3 0.5
29 de alubias blancas 6.1 18.1 3.7 8.8 23.4 43.6 21.7 8.8 67.0 0.5

Los resultados son la media de tres experimentos independientes, en base a peso seco. RSD% 6 12.2 en todos los casos. SFA: ácidos grasos monoinsaturados, PUFAs:: ácidos grasos poliinsaturados ácidos grasos, MUFA saturada.
970 G. Caprioli et al. / Food Chemistry 192 (2016) 965-971
ácido era en lugar bajo en la muestra de frijol Azuki (n 26) con un porcentaje de 13,7% y en el negro
de ojos muestra de frijol (n 23) con un porcentaje de 20,0%. el PUFA norte- 6 / norte- relación de 3, en el
3,2%, fue muy interesante para este tipo de muestra, especialmente teniendo en cuenta que el
contenido de extracto de lípido era relativamente alta (13,6% en base a peso seco). los norte- 6 / norte- relación Journal of Agricultural and Food Chemistry, 51, 7999-8004 .
de 3 ( Tabla 4 ) Es particularmente interesante también en lentejas, ya que es de alrededor de 4 en
todos los nueve muestras analizadas; un valor tal se ha asociado con una disminución de 70% en la
mortalidad total en la prevención secundaria de la enfermedad cardiovascular ( Simopoulos, 2004 )
Aunque en las lentejas el contenido de lípidos fue sólo
2.6 a 2.8% (sobre una base de peso seco). Estos datos están de acuerdo con lo señalado por Zhang
et al. (2014) , en el que la norte- 6 / norte- relación de 3 en los 20 lentejas de los diferentes cultivares
analizados varió de 3,4 a 4.9. Además, en el Ryan et al. estudio (2007) , el norte- 6 / norte- relación de 3
en la muestra de lentejas analizado era igual a 4, de acuerdo con nuestros resultados. En cambio, en
el Kalogeropoulos et al. estudio (2010) , el
norte- 6 / norte- relación de 3 en las dos muestras de lentejas analizó, a saber, grandes lentejas y
pequeñas lentejas, es de 3,0 y 2,9 respectivamente, ligeramente más bajos que los de nuestros
resultados ( Tabla 4 ). los norte- 6 / norte- 3 ratio también es interesante para guisantes y soja. En las
dos muestras de guisante analizadas (n 11 y 12), esta relación era de 6,3 y 4,8, respectivamente, un
poco más alto que el de lentejas. En lugar de ello, la muestra de soja analizada (n 16) que se muestra
una norte- 6 / norte- relación de 3 de 8,3. Estos datos están de acuerdo con las Ryan et al. (2007) , Que
encontró una norte- 6 / norte- relación de 3 de 5,1 en la muestra de guisante analizó, y con Kalogeropoulos Hara, A., y Radin, NS (1979). Extracción de lípidos de los tejidos con un disolvente de baja toxicidad.
et al. (2010) , Que encontró una proporción de 7,4 y 3,8 en arvejas amarillas y guisantes verdes,
respectivamente, y también con Grela y Gunter (1995) , Quienes encontraron una relación entre 4,8 y
6,5 en FL en guisantes y guisantes, respectivamente. En este último, una norte- 6 / norte- 3 ratio de 8,3
fue encontrado en la soja, perfectamente de acuerdo con nuestros resultados. Chicklings, garbanzos
y habas mostraron un alto norte- 6 / norte- relación de 3, de 20,9, 20,6 y 14,6 respectivamente ( Tabla 4 ),
Debido al alto nivel de ácido linoleico y, correspondientemente, bajos porcentajes de ácido linolénico.
Por el contrario, las muestras de granos muestran una baja norte- 6 / norte- relación de 3, a menudo por
debajo de la unidad, que varía de 0,5 a 1,8 debido a la alta presencia de ácido linolénico, que era a
menudo mayor que el de ácido linoleico.
En conclusión, entre los métodos evaluados para la extracción de lípidos de acilo, el método de
Folch precedido por la hidratación de la muestra proporcionado los mejores resultados y se aplicó a
extraer las muestras bajo investigación. También el método de extracción líquido-sólido con hexano / yo-
PrOH dio la misma composición de ácidos grasos como el método de Folch, incluso si el rendimiento
en términos de peso de extracto fue mucho menor. En cuanto a la composición de ácidos grasos, las
leguminosas más interesantes en términos de los PUFAs norte- 6 / norte- relación de 3 eran lentejas y
frijoles Azuki, con valores de 4,0 y 3,2 respectivamente, valores asociados a una perspectiva
favorable cardio-protectora.
Reconocimiento
Los autores desean agradecer a Sheila Beatty para su edición del uso del Inglés en el
manuscrito.
referencias
Abeywardena, MI, McLeannan, PL, y Charnock, JS (1991). Efectos diferenciales de
aceite de pescado en la dieta sobre el infarto de prostaglandina 12 y el tromboxano A2 producción. American
Journal of Physiology, 260, 379-385 .
Ackman, RG, y Sipos, JC (1964). La aplicación de los factores de respuesta específico Fi en el gas
análisis cromatográfico de los ésteres metílicos de ácidos grasos con detectores de ionización de AME fl. Revista de la
Sociedad Americana de Químicos del Aceite, 41, 377-378 .
Bligh, AC, y Dyer, WJ (1959). Un método rápido de extracción de lípidos totales y
purificación. Canadian Journal of Biochemistry and Physiology, 37, 911-917 .
Caprioli, G., Cristalli, G., Ragazzi, E., Molin, L., Ricciutelli, M., Sagratini, G., et al.
(2010). A desorción / ionización enfoque fl ight preliminar láser asistida por matriz-tiempo de- para la
caracterización de variedades de lentejas italianas. Rápido
Comunicaciones en espectrometría de masas, 24, 2843-2848 .
Chung, HJ, Liu, Q., Hoover, R., Warkentin, TD, y Vandenberg, B. (2008). In vitro
almidón digestibilidad, índice glucémico era de esperar, y térmica y pegar
propiedades de las harinas de guisantes, lentejas y garbanzos cultivares. Química de Alimentos,
111, 316-321 .
Duenas, M., Sun, B., Hernandez, T., Estrella, I., y Spranger, MI (2003).
composición de proantocianidina en la cubierta de la semilla de lentejas ( Lens culinaris L.).
Dunstan, GA, Volkman, JK, y Barrett, SM (1993). El efecto de la liofilización sobre
la extracción con disolvente de clases de lípidos, ácidos grasos y esteroles a partir de la ostra
Crassostrea gigas. Lípidos, 28, 937-944 .
Erickson, MC (1993). Extracción de lípidos de gato canal muscular fi sh: Comparación de
sistemas de disolventes. Journal of Food Science, 58, 84-89 .
Ewald, G., Bremle, G., y Karlsson, A. (1998). Las diferencias entre Bligh y Dyer y
extracciones Soxhlet de PCB y lípidos a partir de músculo de pescado grasa y magra. Boletín de Contaminación Marina,
36, 222-230 .
Fiorini, D., Gagliardi, R., Petrini, A., Pacetti, D., Zambuchini, B., Barboni, L., et al.
(2013). Comparación de once métodos de extracción para la evaluación cuantitativa de los lípidos totales y ácidos
grasos en la almeja inaequivalvis Anadara ( Bruguière). Revista de Investigación de Shell peces, 32, 285-290 .
Folch, J., Lees, M., y Stanley, GHS (1957). Un método simple para el aislamiento y
la purificación de los lípidos totales de los tejidos animales. El Journal of Biological Chemistry, 226, 497-509 .
Grela, ER, y Gunter, KD (1995). Composición de ácidos grasos y el contenido de tocoferol de
algunas semillas de leguminosas. Alimentación animal Ciencia y Tecnología, 52, 325-331 .
Gunnlaugsdottir, H., y Ackman, RG (1993). Tres métodos de extracción para
determinación de los lípidos en la harina de pescado: Evaluación del método de hexano / isopropanol como una alternativa
a los métodos basados ​en cloroformo. Revista de la Ciencia de la Alimentación y la Agricultura, de 61 años, 235-240 .
Hammer, Ø., Harper, DAT, y Ryan, PD (2001). PASADO: estadísticas paleontológicos
paquete de software para el análisis de la educación y de datos. Palaeontologia Electronica, 4,
1-9 .
Analytical Biochemistry, 90, 420-426 .
Hu, F., Salmeron, J., Manson, J., Stampfer, M., Colditz, G., Rimm, E., et al. (1999).
grasa de la dieta y el riesgo de diabetes tipo 2 en mujeres. American Journal of Epidemiology, 149, S1 .
Ichihara, K., Shibahara, A., Yamamoto, K., y Nakayama, T. (1996). una mejora
método para el análisis rápido de los ácidos grasos de glicerolípidos. Lípidos, 31, 535-539 .
Kalogeropoulos, N., Chiou, A., Ioannou, M., Karathanos, VT, Hassapidou, M., y
Andrikopoulos, NK (2010). Evaluación nutricional y bioactivo
microconstituyentes (fitosteroles, tocoferoles, polifenoles, ácidos triterpénicos) en legumbres secos cocidos
generalmente consumen en los países mediterráneos. Food Chemistry, 121, 682-690 .
Llaves, A., y Parlin, RW (1966). respuesta de colesterol sérico a los cambios en la dieta
lípidos. American Journal of Clinical Nutrition, 19, 175-181 .
Konopka, I., Czaplicki, S., y Rotkiewicz, D. (2006). Las diferencias en el contenido y
composición de los lípidos y carotenoides libres en la harina de trigo de primavera e invierno cultivado en
Polonia. Food Chemistry, 95, 290-300 .
Kuppa, R., y Moholkar, VS (2010). Las características físicas de los ultrasonidos mejorada
oxidación con permanganato heterogéneo. Ultrasonidos Sonochemistry, 17,
123-131 .
Lovejoy, JC (1999). ácidos grasos de la dieta y resistencia a la insulina. Informes actuales de aterosclerosis, 1, 215-220
.
Manirakiza, P., Covaci, A., y Schepens, P. (2001). Estudio comparativo sobre los lípidos totales
determinación utilizando Soxhlet, Roese-Gottlieb, Bligh y Dyer, y modificados con el Bligh y Dyer métodos de
extracción. Journal of Composición de los alimentos y Análisis, 14, 93-100 .
Messina, MJ (1997). Las legumbres y soja: Visión general de sus propiedades nutricionales per fi les
y efectos sobre la salud. American Journal of Clinical Nutrition, 70, 439-450 .
Molina Grima, E., Robles Medina, A., Giménez Giménez, A., Sánchez Pérez, JA,
García Camacho, F., y un Garcy' Sánchez, JL (1994). Comparación entre la extracción de lípidos y ácidos
grasos a partir de biomasa de microalgas. Revista de la Sociedad Americana de Químicos del Aceite, 71, 955-959 .
Ranjan, A., Patil, C., y Moholkar, VS (2010). evaluación mecanicista de microalgas
extracción de lípidos. Industrial & Engineering Chemistry Research, 49, 2979-2985 .
Ruiz, RG, Precio, KR, Arthur, AE, Rose, ME, Rodas, MJC, y Fenwick, RG
(1996). Efecto de remojo y cocinar en el contenido de saponina y la composición de garbanzos ( Cicer arietinum) y
las lentejas ( Lens culinaris). Journal of Agricultural and Food Chemistry, 44, 1526-1530 .
Ryan, E., Galvin, K., O'Connor, TP, Maguire, AR, y O'Brien, Nuevo México (2007).
De fitosterol, escualeno, contenido de tocoferoles y ácido graso per fi l de semillas seleccionadas, granos y legumbres. Los
alimentos vegetales para la Nutrición Humana, de 62 años, 85-91 .
Sagratini, G., Zuo, Y., Caprioli, G., Cristalli, G., Giardina, D., Maggi, F., et al. (2009).
Quanti fi cación de soyasaponins I y segundo g en las semillas de lentejas italianas por extracción en fase sólida
(SPE) y líquida de alto rendimiento de cromatografía-espectrometría de masas (HPLC-MS). Journal of
Agricultural and Food Chemistry, 57,
11226-11233 .
Sagratini, G., Caprioli, G., Maggi, F., Font, G., Giardina, D., Mañes, J., et al. (2013).
Determinación de soyasaponins I y segundo g en las legumbres crudas y cocinadas por extracción en fase sólida
(SPE) acoplada a cromatografía líquida (LC) -peso espectrometría (MS) y la evaluación de su bioaccesibilidad
por un modelo in vitro de la digestión en. Journal of Agricultural Food Chemistry, 61, 1702-1709 .
Simopoulos, AP (2004). Omega-6 / omega 3-relación de ácido graso esencial y crónica
enfermedades. Comentarios Food International, 20, 77-90 .
Smedes, F. (1999). Determinación de lípido total usando disolventes no clorados.
Analista, 124, 1711-1718 .
Undeland, I., Harrod, M., y Lingnert, H. (1998). Comparación entre los métodos que utilizan
disolventes de baja toxicidad para la extracción de lípidos a partir de arenque ( Clupea harengus). Food Chemistry,
61, 355-365 .
 G. Caprioli et al. / Food Chemistry 192 (2016) 965-971 971

Vila-Donat, P., Caprioli, G., Conti, P., Maggi, F., Ricciutelli, M., Torregiani, E., et al. Zhang, B., Deng, Z., Tang, Y., Chen, P., Liu, R., Ramdath, DD, et al. (2014). Ácido graso,
(2014). Rápido cuanti fi cación de soyasaponins I y segundo g en lentejas italianas por cromatografía líquida de composiciones de carotenoides y tocoferoles de 20 cultivares de lentejas canadienses y la contribución sinérgica
alta resolución (HPLC) -tandem espectrometría de masas (MS / MS). Métodos analíticos de alimentos, 7, 1024-1031 de las actividades antioxidantes. Food Chemistry, 161, 296-304 .
.