PRODUCCION DE

ANTIBIOTICOS
 ANTIBIOTICO
Definición: moléculas con actividad antimicrobiana, incluyen
gran cantidad de compuestos pertenecientes a diferentes
familias químicas.
• Generalmente se aplica a fármacos usados en el tratamiento
de infecciones por bacterias, de ahí que se les conozca como
antibacterianos.
• Se utilizan en medicina humana, animal y horticultura.
• Presentan toxicidad selectiva, siendo muy superior para los
organismos invasores que para los animales que
los hospedan
 TIPOS DE ANTIBIOTICOS
1.- Betalactámicos. Poseen en su estructura el anillo betalactámico, compuesto por 3
átomos de carbono y 1 de nitrógeno. (penicilinas, cefalosporinas, etc)

2.- Macrólidos. Consiste en un anillo lactónico con azúcares aminados, como la eritromicina
producido por Streptomyces erythreus.

3.- Aminoglicósidos. Consisten en azúcares aminados y un anillo aminociclitol, como la

estreptomicina.

4.- Tetraciclinas. Que tienen en su estructura el grupo naftaleno (4 anillos), y son producidas
por el género Streptomyces.

5.- Polipeptídicos. Poseen una cadena de aminoácidos algunas veces circular, como
bacitracina, producida Bacillus subtilis.

6.- Polienos. Compuestos que contienen tres o más dobles enlaces, como; nistatina
(antifungico) y anfotericina B.

7.- Otros antibióticos. El Cloranfenicol posee una estructura simple (nitrobenceno). Lo

produce Streptomyces venezuelae aunque debido a su simplicidad resulta más económica
su síntesis química.
 ANTIBIOTICOS: MECANISMO DE ACCIÓN
•Capacidad de inhibir una reacción bioquímica específica y esencial,
para la célula procariota.
•Para que haga efecto es necesario que llegue al foco infeccioso,
penetre en la célula bacteriana y alcance intracelularmente la
concentración necesaria.
•Una vez dentro de la célula, el antibiótico puede ser:
• bacteriostático (macrólidos, tetraciclinas, cloranfenicol) si inhibe la
multiplicación de forma reversible,
• bactericida (betalactámicos, aminoglicósidos, polipeptídicos,
polienos) si tiene un efecto letal.
Pueden ejercer su acción en una de las siguientes formas:
•1.- Inhibición de la síntesis de la pared celular
•2.- Alteración de la membrana citoplasmática
•3.- Inhibición de la síntesis proteica
•4.- Bloqueo de la síntesis de los ácidos nucleicos
1.- Inhibición de la síntesis de la pared celular.
•Los antibióticos ß-lactámicos son inhibidores específicos de la síntesis de
peptidoglicano, componente de la pared celular bacteriana.

• Son análogos estructurales de la D-alanil-D-alanina y por ello se considera

que estos fármacos se unen a las transpeptidasas a las que inactivan
irreversiblemente.

•Las células en crecimiento, están continuamente sintetizando nuevo

peptidoglicano y transportándolo al sitio adecuado en la pared celular.

•Algunos antibióticos (Bacitracina, Betalactámicos) reaccionan con alguno

de los enzimas que se requieren para completar este proceso originando
que la célula desarrolle puntos frágiles en su pared celular.

•Estos antibióticos son bactericidas ya que la célula debilitada está sujeta a

lisis.
•La mayor parte de estos antibióticos son activos frente a células en
crecimiento.
2.- Alteración sobre la membrana citoplasmática
• Modifican la permeabilidad, permiten la salida de iones K y
macromoléculas como los ácidos nucleicos y causan un efecto lítico.

•Sin embargo, como la membrana celular en células microbianas y

animales tienen similitudes, la mayor parte de estos antibióticos son
tóxicos para los humanos.

•Polimixinas: Interaccionan con los fosfolípidos de las membranas

bacteriana.

•Polienos: (Nistatina, anfotericina B) son activos frente a hongos ya

que forman complejos con los esteroles de las membranas de las
células fúngicas.
3.- Inhibición de la síntesis proteica
• Estos compuestos (estreptomicina, gentamicina, tetraciclinas,
cloranfenicol, eritromicina) reaccionan con el complejo ribosoma-
mRNA.

• Aunque las células animales también tienen ribosomas, son

diferentes en tamaño y estructura de los ribosomas de los
procariotas (80S y 70S) por lo que estos antimicrobianos tienen una
acción selectiva frente a bacterias.
 PENICILINA
•Las penicilinas son del grupo de los β-lactamicos.
•Existe una gran diversidad de penicilinas. Algunos hongos del
género Penicillium sintetizan de forma natural penicilinas, como el primer tipo
aislado, la penicilina G.
•La estructura básica de las penicilinas es el ácido 6-aminopenicilánico (6-APA),
que consiste en un anillo tiazol con un anillo ß-lactámico condensado.
•El 6-APA lleva una parte variable acilada en la posición 6.
 PENICILINA

Debido a la aparición de resistencias, se han desarrollado otras

familias siguiendo básicamente dos estrategias:
• la adición de precursores para la cadena lateral en el medio de
cultivo del hongo productor, lo que se traduce en la producción
de penicilinas biosintéticas;
• la modificación química de la penicilina obtenida por
la fermentación biotecnológica, da lugar a las penicilinas
semisintéticas.
 PENICILINAS: Antibióticos β-lactámicos

● Penicilinas Naturales:

Actividad antibacteriana Mayormente Gram (+) Mayormente Gram (+)

Formas de administración IM, IV oral

Estabilidad frente a β-lactamasas baja baja

Estabilidad medio ácido mala buena

•Son lábiles en medio ácido y
pueden ser inactivadas por hidrólisis PENICILINA
del anillo ß-lactámico con
penicilinasas.
•Debido a su baja toxicidad pueden
ser utilizadas grandes dosis de
penicilina, solamente un pequeño
porcentaje de pacientes desarrollan
alergia (0,5-2%).
•Las penicilinas naturales son
efectivas contra numerosas
bacterias Gram +.
•Algunas penicilinas son menos Amoxicilina. Se trata de una amino
efectivas frente a Bacterias Gram - penicilina. Actúa contra un amplio
debido a que la membrana externa espectro de bacterias, tanto Gram
bloquea su paso al interior, aunque positivos como Gram-negativos.
las penicilinas sintéticas y Por esto se emplea a menudo como
cefalosporinas tienen efecto primer fármaco en infecciones de
también frente a Bacterias G -. diferente gravedad, tanto
en medicina humana como también
en veterinaria.
 PENICILINA : PROCESO PRODUCTIVO
•Si la fermentación de penicilina se lleva a cabo sin adición de
precursores de la cadena lateral se producen las penicilinas naturales.
•De estas sólo es útil terapéuticamente la bencilpenicilina (Penicilina
G); los otros compuestos deben ser eliminados durante la etapa de
recuperación del producto.

•La fermentación puede ser controlada mejor añadiendo un

precursor de la cadena lateral, de forma que solamente se produzca
una penicilina deseada.

•Utilizando el ácido fenoxiacético, como precursor de la cadena

lateral, se consiguió la obtención de penicilina V
(fenoximetilpenicilina), que es particularmente estable en medio
ácido y que puede, por tanto, suministrarse por vía oral al contrario
de lo que ocurre con la penicilina G ya que debido a su sensibilidad a
los ácidos no se puede administrar oralmente puesto que es
hidrolizada en el estómago.
 Antibióticos
PENICILINAS: Antibióticos β-lactámicos
β-lactámicos
● Penicilinas semisintéticas:

Síntesis de Penicilinas modificadas:

 Penicilinas Semisintéticas

● Penicilinas resistentes a β-lactamasas:

Los grupos metoxi evitan que la β-lactamasa ataque el

carbonilo β-lactámico

Meticilina:
● Baja estabilidad en medio ácido
● Actividad principalmente Gram (+)
 Penicilinas Semisintéticas

● Penicilinas de espectro extendido (aminopenicilinas)

● Mayor espectro de actividad antibiótica [Gram (+) y Gram (-)]

● Buena estabilidad en medio ácido
● Sensibles a β-lactamasas
● Vía de administración: IM-IV/oral
 Penicilinas Semisintéticas

● Penicilinas de espectro extendido (aminopenicilinas)

● Mayor espectro de actividad antibiótica [Gram (+) y Gram (-)]

● Buena estabilidad en medio ácido
● Sensibles a β-lactamasas
● Vía de administración: IM-IV/oral
 Penicilinas naturales, semisintéticas y sintéticas

•Actualmente la producción de penicilina utilizan cepas de P. chrysogenum es de 10-20 g/l.

•El P. chrysogenum es un honggo filamentoso ampliamente usado en la producción de
penicilinas y cefalosporinas a nivel industrial.

•El gran avance en la producción de penicilina se logro gracias a los métodos de mutación y
selección de cepas de P. chrysogenum productoras de penicilina, así como al desarrollo de
medios de cultivo específicos y al avance en las tecnologías de fermentación.
 BIOSINTESIS DE PENICILINA
•La biosíntesis se produce por medio de un
dipéptido compuesto de ácido L-a-
aminoadípico (L-a-AAA) y L-cisteína.
•Luego se une la L-valina mediante una
reacción de epimerización, dando lugar a la
formación del tripéptido d-(L-a-
aminoadipil)-L-cisteinil-D-valina.
•El primer producto de la ciclación del
tripéptido que puede ser aislado es la
isopenicilina N, pero no se conocen las
reacciones bioquímicas que conducen a
este intermediario.
•La bencilpenicilina se produce en el
intercambio de L-a-AAA (L-a-aminoadípico)
con ácido fenilacético activado.
•El 6-APA, que no es un producto
intermediario de biosíntesis, se excreta en
ausencia de un precursor de la cadena
lateral.
MECANISMOS REGULADORES EN LA BIOSÍNTESIS DE LA PENICILINA

•El aminoácido lisina es sintetizado a partir de la vía que origina el

ácido L-a-aminoadípico de forma que la penicilina y la lisina
comparten una ruta biosintética ramificada común.

•La lisina inhibe la síntesis de penicilina debido a que inhibe por

retroalimentación a la homocitrato sintasa, un enzima implicado en
la síntesis de L-a-AAA. Si el L-a-AAA es deficiente, no puede
sintetizarse penicilina.

•La retro regulación por lisina no parece ser una etapa limitante en la
biosíntesis de penicilina.

• La biosíntesis de penicilina se ve afectada por la concentración de

fosfato y también muestra una clara represión catabólica,
particularmente por glucosa.
•Ningún microorganismo es capaz de llevar a
cabo todas las reacciones del esquema, pero si
pueden realizar las reacciones hasta la
producción de penicilina N.
•La vía metabólica se divide en dos ramas,
•la rama izquierda es común en P chrysogenum
y otros hongos filamentosos que producen
penicilinas hidrofobicas, como la penicilina
benzoica o penicilina G.
•la rama derecha es propia de microorganismos
productores de antibioticos B-lactamicos
hidrofilicos, como la pencilina N y las
cefalosporinas (Ontiveros, 1996)

•El uso de glucosa y otros azucares, como

sustrato disminuye la biosíntesis de penicilina,
por que reprimen la formación de las enzimas
ACV sintetasa y la isopeniclina N sintetaza, no
sucede lo mismo con la lactosa. Por esta razón
se usa industrialmente como sustrato la lactosa
o mezclas glucosa-lactosa con concentraciones
de glucosa que no repriman la producción de
penicilina
 REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES.
Fuente de carbono.
•La fuente de carbono empleada industrialmente es la lactosa, y en la etapa final
se adiciona con glucosa o sacarosa, para inducir la B-galactosidasa

Fuente de nitrógeno.
•Hasta la década del 70 se usó "corn-steep liquor”, hoy se prefiere el uso de; la
harina de semilla de algodón, extractos y peptonas, y la harina de soja.
•El suministro de amonio y azufre se hace como (NH4)2.SO4, a niveles de 20 mM.
•El requerimiento de grandes cantidades de NH4+ puede deberse a su necesidad en
la síntesis de glutamato, requerido para producir valina y cisteína.
•El fósforo se adiciona como sales de fosfato a niveles entre 250 y 500 mg/L.

Precursores.
•Par obtener un determinado tipo de penicilina, se debe alimentar, una precursor.
•El requerimiento de fenilacetato sódico, es 0.47 g/L para penicilina G, y de
fenoxiacetato de sodio, 0.50 g/L para penicilina V.
 CARACTERÍSTICAS DEL PROCESO
•La producción de penicilina G o V, se hace por cultivo
aerobio en medios líquidos
•Reactores de 40,000 y 500,000 L, empleando una
relación de 0,5 - 1,0 volúmenes de aire/volumen de
líquido-min .
•En el proceso, la mayoría de la masa celular es
obtenida durante las primeras 40 horas, luego el
crecimiento continúa con valores mínimos de P, hasta
unas 200 horas.
•Los agitadores utilizados son en general de tipo
turbina, y durante el proceso se controla la temperatura,
caudal de aire, velocidad de agitación, pH y velocidad
de agregado de nutrientes.
•Es posible influir sobre la eficiencia del proceso, por
alteración del genotipo.
• Se han seleccionado cepas de P. chrysogenum, que
dan menor viscosidad en los caldos, incrementando la
transferencia de oxígeno.
•El empleo de técnicas de mejoramiento genético
posibilitó el aumento de rendimientos y la obtención de
nuevas cepas que no producen pigmentos, lo cual
facilita la purificación.
 PURIFICACION DE LA PENICILINA

Extracción.
•La extracción con solventes es la base para la separación y purificación
de la penicilina.

•El primer paso es separar el micelio del medio de cultivo, con un filtro
rotatorio a vacío.

•El filtrado rico en penicilina se envía a un intercambiador de calor a 0 - 4

°C, para detener la degradación enzimática y química durante la posterior
extracción.

•La extracción de penicilina se puede realizar en una o más etapas

sucesivas, con una acidificación del caldo filtrado con H2SO4 o H3PO4 al
10% P/V y con el agregado de un agente surfactante (0,003 - 0,1% P/P, en
el solvente), realizándose luego la concentración en extractores
centrífugos.

•El solvente conteniendo penicilina se puede tratar con carbón para

separar pigmentos y otras impurezas.
 PURIFICACION DE LA PENICILINA
Cristalización y secado.

•En caso de hacerse la cristalización a partir de un solvente

se requiere exceso de Na+ o K+, y los cristales formados se
recuperan en un filtro rotatorio a vacío.

•Estos cristales son lavados y pre secados con un solvente

volátil que también separa impurezas coloreadas.

•El secado definitivo se puede realizar con aire caliente, vacío

o calor radiante.

•La penicilina cristalina G o V así obtenida, puede ser

convertida a 6-APA (ácido 6-aminopenicilánico) para obtener
nuevas penicilinas semisintéticas
PRODUCCIÓN DE PENICILINA