REPORTE LABORATORIO

TOXICOLOGIA MICROBIANA DE ALIMENTOS

PRACTICA

Aislamiento e identificación de Staphylococcus aureus a partir de queso salado

INTEGRANTES
Guillen Angyelina, Cód.; 20168912. Lindarte Shirley, Cód.; 90062576510 .Romero Erika, Cód.; 92031009270.
Facultad de Ciencias Básicas
Departamento de Microbiología
Toxicología Microbiana de Alimentos
Pamplona
2012

RESUMEN
Staphylococcus aureus es un coco Gram positivo, inmóvil, no esporulado, coagulasa positivo, de pared gruesa, muy resistente al
calor y la desecación que puede crecer en medios con elevada salinidad. La patogenia de las infecciones producidas por S.
aureus es un fenómeno complejo debido principalmente al amplio armamento de factores de virulencia que puede expresar este
microrganismo, (2) la producción de varias toxinas contribuyen a su patogenicidad porque aumentan su capacidad de invadir el
cuerpo o dañar los tejidos.(3) Para el aislamiento de Staphylococcus aureus se tomaron 11 g de queso salado, los cuales se
diluyeron en 99 ml de ADE realizando a partir de esta dilución, dos diluciones mas de 10 -2 y 10-3 , las cuales se sembraron por
superficie en los medios agar salado manitol (S.M) y agar Baird-Parker (B.P) llevándolos a incubación a 37°C/ 48 horas. De
estos medios selectivos/diferenciales solo se tomo una colonia presuntiva del agar S.M pues en el agar B.P no hubo crecimiento,
esta colonia se sembró por agotamiento en medio agar nutritivo y se incubo a 37°C/24 horas; pasado el tiempo se realizo la
descripción macroscópica y microscópica (tinción de Gram) observándose cocos Gram (+) se procedió a realizar las pruebas
bioquímicas correspondientes a partir de las cuales se obtuvo un porcentaje de 100% de afinidad, lo que indica que el
microrganismo presente en el alimento es S. aureus y que en la elaboración del queso salado hubo una mala manipulación y
falta de higiene.

FICHA TECNICA PARAMETROS CLINICOS

MUESTRA Queso salado TIPO DE ENFERMEDAD Gastroenteritis
EMPAQUE Bolsa plástica DOSIS INFECTIVA 1-10 ug/kg
TEMPERATURA ambiente LIMITE PERMITIDO EN 103 UFC/g(1)
OLOR característico ALIMENTOS
COLOR blanco ALIMENTOS REACIONADOS Productos lácteos.
AROMA característico Jamón, embutidos,
TEXTURA blanda productos de carne
LUGAR DE Queso de finca de res y aves,
ADQUISICION rellenos con crema y
FECHA DE 23-04-2012 ensaladas.
ADQUISICION PERIODO DE INCUBACION 2- 4 horas
FECHA DE Desconocida SINTOMAS RELEVANTES Malestar general
ELABORACION Dolor abdominal
FECHA DE Desconocida Mareo
VENCIMIENTO Vomito
RESPONSABLE Shirley Lindarte Diarrea
Fiebre variable
DESCRIPCION MACROSCOPICA REPORTE FINAL.
MEDIOS SELECTIVOS-DIFERENCIALES Identificación y aislamiento de Staphylococcus aureus de
MEDIO SALADO MANITOL. (S.M) muestra de queso salado.
Forma: circular
Superficie: lisa
Borde: entero
Elevación: convexa
Color: amarillo brillante
Tamaño: mediana
Textura: blanda
Aspecto: opaca

MEDIOS BASICOS - NUTRITIVOS

MEDIO AGAR NUTRITIVO
Forma: circular
Superficie: Lisa
Borde: entero
Elevación: convexa
Color: crema
Tamaño: pequeña
Textura: blanda
Aspecto: opaca

DESCRIPCION MICROSCOPICA
TINCION Gram
OBJETIVO 100X
OBSERVACION Cocos Gram (+)

CARACTERIZACION BIOQUIMICA
PRUEBA REALIZADA RESULTADO RESULTADO
TEORICO PRACTICO
glucosa (+) (+)
lactosa (+) (+)
Sacarosa (+) (+)
H2S (-)4 (-)
Gas (V)4 (+)
Motilidad (-) (-)
Indol (-)4 (-)
Catalasa (+) (+)
Coagulasa (+) (+)
Almidón (-) (-)
DNasa (+)4 (+)
Gelatina (+) (+)
Manitol (+) (+)
4(koneman et all, 2008) 5(macFaddin, 2003)

PORCENTAJE DE AFINIDAD
RESULTADO 100%
INTERPRETACION Microrganismo identificado
como S. aureus
 ANALISIS DE DATOS

La identificación de Staphylococcus aureus en el queso salado se logro no solo porque los resultados de las pruebas bioquímicas
coincidieron con los resultados definidos en la literatura, sino porque las colonias en el medio agar salado manitol fueron colonias
referenciadas como típicas para este microrganismo. Una de las características que define el crecimiento de las colonias típicas
de S. aureus en el medio agar S.M es que estas adquieren una coloración amarilla debido a que S. aureus fermenta manitol con
producción de acido. La acidificación produce un cambio en el color del medio que vira de rosa pálido a amarillo. (2) En el medio
B.P no se pudo observar el crecimiento de colonias, tal vez porque el medio estaba mal preparado. En la caracterización
bioquímica la prueba de coagulasa fue positiva, pues se formo un coagulo grande de plasma (debido a la desnaturalización de la
fibrina del plasma por la enzima coagulasa), confirmando la presencia de S. aureus en el alimento pues produce esta enzima. (3)
La identificación de Staphylococcus aureus en el queso salado fue efectiva pues por ser un producto derivado lácteo, con
concentración de sal, es propicio para el microrganismo debido a que este es halotolerante.

CONCLUSIONES

 Es importante tener en cuenta varios factores al momento de escoger la muestra a analizar, como lo es conocer su
procedencia, ya que realizando los análisis del producto se puede determinar si el alimento ha tenido procesos
inadecuados de manipulación, y si sus materias primas son de una dudosa procedencia, en este caso el queso salado
que fue hecho de manera artesanal reporto 100% de afinidad identificando a S. aureus en el alimento, confirmando lo
dicho anteriormente.

 El aislamiento de S. aureus en agar S.M que por su alto contenido en sal inhibe el crecimiento de la mayoría de las
bacterias gramnegativas, permite realizar una identificación presuntiva basándose en la coloración amarilla característica
que toman las colonias, así que aunque no se pudieron observar las colonias de color grisáceo-negro en agar B.P típicas
de estafilococos coagulasa positivo, la confirmación de la prueba coagulasa como positiva nos permite afirmar que el
microrganismo presente en el alimento es S. aureus.

 El análisis de alimentos propicios para que un microrganismo se desarrolle en este, teniendo en cuenta las características
y condiciones de elaboración, facilitan su aislamiento e identificación.

BIBLIOGRAFIA.

1. ALIMENTOS. CRITERIOS MICROBIOLÓGICOS PARA LA INOCUIDAD DE ALIMENTOS. REGLAMENTO

TÉCNICO CENTROAMERICANO. NSO RTCA 67.04.50:08. Link:
http://www.puntofocal.gov.ar/notific_otros_miembros/nic89_t.pdf

2. PAHISSA ALBERT; MICROBIOLOGÍA Y PATOGENIA DE LAS INFECCIONES PRODUCIDAS POR

STAPHYLOCOCCUS AUREUS, 1ª edición. Editorial ISG MARGE, SL. BARCELONA, ESPAÑA; 2009. Pág. 18-23.

3. CUMMINGS, B; MICROBIOLOGY: an introduction. PARTE DOS; Estudio del mundo microbiano, 9ª edición.
Editorial MÉDICA PANAMERICANA S.A. MADRID, ESPAÑA; 2007. Pág. 332.

4. KONEMAN, E; ALLEN; S; DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO, Texto y Atlas en color; 6ª edición; Editorial

PANAMERICANA.S.A, MADRID. ESPAÑA; 2008. Pág. 622

5. MacFADDIN.J; PRUEBAS BIOQUIMICAS PARA LA IDENTIFICACION DE BACTERIAS DE IMPORTANCIA

CLINICA; 3ª Edición; editorial PANAMERICANA.S.A; Argentina; 2003. pág. 472.
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