46 Capítulo 4 Receptores: estructura y función

región de unión Van

H-bond región de
der Waals región de unión iónica
unión

MARIDO
O
grupos de unión O 2 do

H
HAMPSHIRE 2 Me OH Sitio de unión
NUEVA

Receptor
neurotransmisor

FIGURA 4.6 Un receptor hipotética y neurotransmisor.

forma del sitio de unión se altera y un inducido fi cio ha tenido lugar.

e ilustración Th que se muestra aquí es un catión simplifi del proceso de t

D e hipotético sitio de unión contiene tres aglutinantes regiones en que
contienen grupos funcionales que son complementarios a los grupos de
unión de la ger mensajero. e mensajero fi cios Th en el sitio de unión de tal
manera que las interacciones intermoleculares tienen lugar entre grupos de
unión del mensajero y regiones de unión del receptor de la (Fig. 4.7). Sin
embargo, la fi cio no es perfecto. En el diagrama, hay buenas interacciones
de van der Waals e hidrógeno de bonos, pero la interacción iónica no es tan
fuerte como podría ser. región de unión iónica e Th es lo suficientemente
cerca para tener una interacción débil con el ger mensajero, pero no lo
suficientemente cerca para la interacción óptima. por lo tanto, la proteína del
receptor Th e altera la forma de llevar el grupo carboxilato más cerca del
nitrógeno cargado positivamente y para obtener una interacción más fuerte.
Como resultado, la
fi inducida y, en realidad, tanto el mensajero y el sitio de unión ocupan
conformaciones o formas Erent diff para maximizar las fuerzas de unión entre
ellos. Como con la unión enzima-sustrato, hay una Ance fi ne BAL- implicados
en la unión receptor-mensajero. Th e Bond- Ing fuerzas deben ser lo
suficientemente grande como para cambiar la forma del sitio de unión, pero
no tan fuerte que el mensajero es incapaz de salir. La mayoría de los
neurotransmisores se unen rápidamente a sus receptores a continuación,
'sacudirse floja' una vez que su mensaje ha sido recibido.
Ahora hemos visto cómo un mensajero químico puede causar un inducida
fi cio en el sitio de unión de una proteína receptora. Sin embargo, esto
inducidos fi cio tiene una reacción en cadena ef ect que altera la forma global
de la proteína. Es este cambio de forma general que es crucial para la
activación de un recep- tor y en su capacidad de desencadenar una increíble
"dominó ef ect ', que aff eja la química interna de la célula. Th es dominó ef
ect implica varias proteínas y enzimas Erent diff, y en última instancia
produce un observada ef ect biológica. E l proceso por el cual esto ocurre se
llama transducción de señales y está cubierto con más detalle en el
capítulo 5.

electrostáticas. grupos funcionales Th ESE son el mensajero de grupos de unión .

pueden participar en interacciones de enlace de hidrógeno, y un centro de nitrógeno cargado que puede participar en interacciones
MARIDO O 2 doiónicas o
O OH
O
O 2 do
NUEVA HAMPSHIRE 2 Yo NUEVA HAMPSHIRE 2 Yo

S.S S.S
la Fig. 4.6. D e neurotransmisor tiene un anillo aromático que puede participar en interacciones de Van der Waals, un grupo OH del alcohol que
Inducido
ajuste
Sitio de unión Sitio de unión

interacciones de unión resultan en un inducida fi t, consideremos un neurotransmisor hipotética y un sitio de unión hipotética como se muestra en
receptor de O Receptor

FIGURA 4.7 La unión de un neurotransmisor hipotético a un sitio de unión que resulta en un inducida fi t. Para ilustrar cómo las

Th ERE tres tipos Erent diff (o familias) de los receptores de membrana
de ruedas:
• receptores de canal iónico;
• G-receptores acoplados a la proteína;
• receptores quinasa ligada.
Consideraremos cada uno de estos a su vez en secciones
4,6-4,8.
PUNTOS CLAVE
• La mayoría de los receptores son proteínas unidas a la membrana que contienen un sitio de
unión externa de las hormonas o neurotransmisores. La unión da como resultado un
inducida fi cio que cambia la conformación del receptor. Esto desencadena una serie de
acontecimientos que finalmente resulta en un cambio en la química celular.
• Neurotransmisores y hormonas no se someten a una reacción cuando se unen
a los receptores. Ellos salen del sitio de unión sin cambios una vez que se han
transmitido su mensaje.
• Las interacciones que se unen a un mensajero químico para el sitio de unión deben ser lo
suficientemente fuerte para permitir que el mensaje químico a recibir, pero lo suficientemente
débil como para permitir que el mensajero a partir.
• grupos de unión son los grupos funcionales presentes en una molécula
mensajera que se utilizan para la unión al sitio de unión del receptor.
proceso por el que se activan y desencadenar el proceso de transducción de señales.
receptor, se produce un fi t inducida que hace que la proteína de cambiar de
• regiones de unión son las regiones del sitio de unión de receptor que contienen
grupos funcionales capaces de formar enlaces intermoleculares a los grupos de unión
de una molécula mensajera.
tener un dramático eff ect en la química interna de la célula. En este capítulo, nos centraremos en la estructura de los receptores Erent diff y el
es una característica importante de este proceso, ya que significa que un número relativamente pequeño de moléculas de neurotransmisor puede
Membrana
celular
FIGURA 4.8 estructura e Th de un canal iónico. D e las líneas de trazo grueso indican las partes hidrófilas de la canal. amplifi señal catión
receptores de los canales de iones 47
4.6 receptores de los canales de iones
4.6.1 Principios generales
Algunos neurotransmisores operan mediante el control de los canales de
iones. ¿Cuáles son estos canales iónicos y por qué son necesarias? Veamos
de nuevo en la estructura de la membrana celular.
Como se describe en la sección 1.2.1, la membrana se compone de una
bicapa de moléculas de fosfolípido por lo que el medio de la membrana de la
célula es "graso" y hidrófoba. una barrera de este tipo permite culto diffi para las
moléculas polares o iones se muevan dentro o fuera de la célula. Sin embargo, es
importante que estas especies deben cruzar. Por ejemplo, el movimiento de los
iones de sodio y potasio a través de la membrana es crucial para la función de los
nervios (Apéndice 4). Parece un problema insoluble, pero, una vez más, las
proteínas ubicuas proporcionan la respuesta mediante la formación de canales
iónicos.
Los canales iónicos son complejos de compuestos de cinco subunidades
de proteínas que atraviesan la membrana celular (Fig. 4.8). E l centro del
complejo es hueca y llena de aminoácidos polares para dar un túnel
hidrófilo, o poro.
Los iones pueden atravesar la barrera grasos de la membrana celular
moviendo a través de estos canales hidrofílicos o túneles. Pero tiene que haber
algún tipo de control. En otras palabras, tiene que haber una "compuerta de
esclusa 'que se puede abrir o cerrar según sea necesario. Tiene sentido que esta
puerta de bloqueo debe ser controlado por una proteína receptor sensible a un
mensajero químico externo, y esto es exactamente lo que sucede. De hecho, la
proteína receptor es una parte integral del complejo de canales de iones y es uno
o más de las subunidades de proteínas constituyentes. En el estado de reposo, el
canal iónico está cerrado (es decir, la puerta de bloqueo se cierra). Sin embargo,
cuando un mensajero químico se une al sitio de unión externa de la proteína del
forma. Th es, a su vez, hace que el complejo de proteínas en general de cambiar
de forma, la apertura de
hidrófila
túnel
48 Capítulo 4 Receptores: estructura y función

Mensajero

canal
unión al canal
iónico
receptor iónico
(cerrado)
sitio (abierta)
Mensajero
ajuste inducido y la
apertura del canal de
puerta de
iones
bloqueo

Membrana canal de canal de Membrana Membrana canal de canal de Membrana

celular iones iones celular celular iones iones celular

Celda Celda

FIGURA 4.9 mecanismo de bloqueo de puerta para la apertura de los canales iónicos.

la puerta de bloqueo y permitiendo que los iones pasen a través del canal de
iones (Fig. 4.9). Veremos esto con más detalle en la sección 4.6.3.
E l funcionamiento de un canal iónico explica por qué el número
relativamente pequeño de moléculas de neurotransmisor liberado por una
neurona es capaz de tener un peralte tales signifi biológica ef ect en la célula
diana. Al abrir unos canales iónicos, varios miles de iones se movilizan para
cada molécula de neurotransmisor implicado. Por otra parte, la unión de un
neurotransmisor a un canal iónico da como resultado una respuesta rápida,
medida en cuestión de milisegundos. Th es la razón por la transmisión
sináptica de las señales entre las neuronas por lo general implica canales
misor acetilcolina. La mayor parte del sitio de unión está en el
α- subunidad, pero hay cierta participación de subunidades vecinas. En
este caso, el complejo canal iónico como un todo podría considerarse
como el receptor.
Concentrémonos ahora en las unidades de la proteína individual sub.
Aunque hay varios tipos de estos, todos ellos se pliegan de una manera
similar tal que la cadena de proteína atraviesa la membrana celular cuatro
veces. Esto significa que
(un) canal de iones

iónicos.

α γ β
Los canales iónicos son específi ca para ciertos iones. Por ejemplo hay α
canales iónicos Erent catiónico diff de sodio (Na +), potasio (K +) y calcio
α
(Ca 2+ ) iones. Th ERE son también canales iónicos aniónicos para el ión β
α

cloruro (Cl - ). selectividad e ion Th de los canales iónicos Erent diff depende α

δ β
de los aminoácidos que alinean el canal de iones. Es interesante observar
que la mutación de un solo aminoácido en esta área es sufi ciente para
cambiar un canal iónico catiónico selectivo a una que es selectiva para yo II

aniones.
(segundo) γ

TM4

TM1
4.6.2 Estructura TM3
α
TM3 TM2 TM1
D e cinco subunidades proteicas que forman un canal iónico son en realidad (glicoproteínas
TM4 TM2 TM4
secciones 2.5 y 10.7.1), pero nos referiremos a ellos aquí como proteínas. e
α TM1 TM3
subunidades de la proteína Th en un canal iónico no son idénticos. Por ejemplo, TM2 TM2
el canal iónico controlado por el receptor colinérgico nicotínico se compone de
TM3 TM2 TM1
cinco subunidades de cuatro tipos Erent diff [ α (× 2)

TM4 TM1 TM3 TM4

β, γ, δ]; el canal iónico controlado por el receptor de glicina se compone de β
cinco subunidades de dos tipos Erent diff [ α (× 3),
δ
β (× 2)] (Fig. 4.10).
la proteína del receptor e Th en el canal iónico controlado por la glicina es FIGURA 4.10 ( un ) pentamérica estructura de los canales iónicos (vista transversal).

el α- subunidad. ree Th tales subunidades están presentes, todos los cuales I, canal iónico controlado por un receptor colinérgico nicotínico; II, canal iónico

son capaces de interactuar con glicina. Sin embargo, la situación es un poco controlado por un receptor de glicina. D e los círculos coloreados indican los sitios de

más compleja en el canal iónico nicotínico controlada por la neurotransmisión unión a ligando. ( segundo ) vista transversal de I, incluidas las regiones

transmembrana.
 receptores de los canales de iones 49

región de unión del haciendo que el canal iónico para abrir-un proceso llamado
neurotransmisor
gating ( Higo. 4,12).
Th unión de un neurotransmisor a su sitio de unión e provoca un cambio
H2N conformacional en el receptor, que con el tiempo se abre el poro central y
bucle extracelular
permite que los iones de flujo. Th es el cambio conformacional es bastante
CO2H
compleja, que afecta a varios knock-on ECTS eff del proceso de ING vinculante
inicial. Th es lo que debe ser, ya que el sitio de unión es bastante lejos de la
puerta de bloqueo. Los estudios han demostrado que el bloqueo de puerta se
compone de cinco doblada α- hélices, donde una hélice (la región 2-TM) es
aportado por cada una de las cinco subunidades proteicas. En el estado cerrado
TM1 TM2 TM3 TM4
las torceduras apuntan una hacia la otra. e cambio conformacional Th inducida
por causas de unión a ligando de cada uno de estas hélices para girar de
bucle intracelular
manera que el retorcimiento señala la otra manera, abriendo así el poro (Fig.
bucle intracelular
Variable 4.13).

FIGURA 4.11 Estructura de los cuatro transmembrana

(4-TM) subunidad del receptor.

4.6.4 canales iónicos dependientes de voltaje por

cada subunidad tiene cuatro regiones transmembrana (TM) que son de
naturaleza hidrófoba. ESE Th están etiquetados TM1-TM4. Th ERE es
también una larga norte - cadena extracelular terminal que (en el caso de la α- canales iónicos e Th que hemos discutido hasta ahora son llamados
subunidad) contiene el sitio de unión a ligando (Fig. 4.11).
e subunidades Th están dispuestos de tal manera que la segunda región
transmembrana de cada subunidad se enfrenta el poro central del canal de iones
(Fig. 4.10). Veremos el signifi - cado de esto cuando nos fijamos en la siguiente
sección.
ligando y
canales iónicos activados por ligando a medida que se controlan por medio
de mensajeros químicos ( ligandos ). Th ERE son otros tipos de canales de iones
que no son controlados por ligandos, sino que son sensibles al potencial rencia
diff que existe a través de una membrana celular del Potencial de membrana .
Th canales iónicos ESE están presentes en los axones de las células capaces excitantes

(es decir, neuronas) y se llaman canales iónicos dependientes de voltaje. Th ey son

cruciales para la transmisión de una señal a lo largo de las neuronas individuales y son
4.6.3 gating
importantes dianas farmacológicas para los anestésicos locales. Una descripción de estos

Cuando el receptor se une un ligando, que cambie la forma que tiene una canales iónicos se da en el Apéndice 4.

reacción en cadena ef ect en el complejo de proteínas,

Receptor Sitio de unión Mensajero

Celda Membrana
membrana celular

Cinco subunidades de proteínas

FIGURA 4.12 Apertura de un canal iónico (gating).

50 Capítulo 4 Receptores: estructura y función
TM2 TM2
Celda
membrana
TM2
TM2
TM2 TM2
vista transversal
TM2
Cerrado
FIGURA 4.13 Apertura de la "puerta de bloqueo 'en un canal iónico.
PUNTOS CLAVE
• Los receptores que controlan los canales de iones son una parte integral del canal
de iones. La unión de un mensajero induce un cambio en la forma, lo que resulta en
la rápida apertura del canal iónico.
• Los receptores que controlan los canales de iones se denominan receptores de los canales
iónicos activados por ligando. Se componen de cinco subunidades de proteínas con estar
presente en una o más de las subunidades del sitio de unión al receptor.
• La unión de un neurotransmisor a un receptor de canal de iones provoca un cambio
conformacional en las subunidades de la proteína de tal manera que el segundo
dominio transmembrana de cada subunidad gira para abrir el canal.
4.7 receptores G acoplados a proteínas
4.7.1 Principios generales
Los receptores G acoplados a proteínas son algunos de los objetivos de
medicamentos más importantes en la química médica. De hecho, alrededor del 30% de
todos los medicamentos en el mercado actúan mediante la unión a estos receptores.
En general, se activan por las hormonas y los neurotransmisores de acción lenta. Th ey
incluyen la
muscarínico receptor ( sección 22.11), los receptores adrenérgicos ( sección
23.2), y receptores opioides ( sección 24.4). Th e respuesta de la proteína G
acoplada receptores activados se mide en segundos. Th es es más lenta que la
respuesta de los canales iónicos, pero más rápido que la respuesta de los
receptores de quinasa vinculada (sección 4.8), que toma una cuestión de minutos.
Th ERE son un gran número de Erent diff receptores acoplados a la proteína G
interactuar con los neurotransmisores importantes,
flujo de iones
TM2 TM2
vista transversal
TM2 TM2
TM2
Abierto
tales como la acetilcolina, la dopamina, la histamina, la serotonina, el
glutamato, y la noradrenalina. Otros receptores G acoplados a proteínas se
activan mediante péptidos y proteínas hormonas, tales como las encefalinas y
endorfinas.
G-receptores acoplados a proteínas son proteínas de membrana que son
responsables de la activación de las proteínas llamadas
Las proteínas G ( Higo. 4,14). Th últimas proteínas actúan como ESE el
indicador de proteínas porque son capaces de activar o desac- tivating enzimas
unidas a la membrana (secciones 5.1-5.2). En consecuencia, la activación del
receptor por un mensajero químico infl uye las reacciones que tienen lugar
dentro de la célula.
la proteína del receptor e Th está incrustado dentro de la membrana,
con el sitio de unión para el mensajero químico expuesto en la superficie
exterior. En la superficie interna, hay otro sitio de unión que está
normalmente cerrada (Fig.
4.14, el cuadro 1). Cuando el mensajero químico se une a su sitio de unión, la
proteína del receptor cambia de forma, abertura hasta el sitio de unión en la
superficie interior. Th es nuevo sitio de unión es reconocida por la proteína G,
que a su vez se une (Fig. 4.14, el bastidor 2). Th e la proteína G se une a la
superficie interior de la membrana celular y se compone de tres subunidades de
la proteína, pero una vez que se une al receptor del complejo se desestabiliza y
fragmentos para un monómero y un dímero (Fig. 4.14, marco 3 ). ESE Th luego
interactúan con enzimas de membrana para continuar con la señal de
transmisión proceso de producción (secciones 5.1 a 5.3).
Th ERE son varios diff Erent proteínas G, que se reconocimos por tipos de
receptores Erent diff. Algunas de las subunidades vada dades de las proteínas
G que tienen un inhibidor ef ect sobre una enzima unida a la membrana,
mientras que otros tienen un estimulador ef ect. Sin embargo, el mecanismo
por el cual la proteína G se activa por la fragmentación es el mismo.
 receptores G acoplados a proteínas 51

1 2 3
Mensajero

mensajero mensajero

Membrana Receptor receptor de receptor de

celular

Celda Proteínas G Celda

Sitio de unión Celda
Sitio de unión
(Cerrado) (abierto)

FIGURA 4.14 La activación de un receptor acoplado a proteína G y G-proteína.

ERE Th es un amplifi cación sustancial de la señal en este
proceso, como un receptor activado activa varias proteínas G.
4.7.2 Estructura
receptores de Th e G acoplados a proteínas se pliegan dentro de la membrana
celular de tal manera que los vientos de la cadena de proteína de ida y vuelta a
través de la membrana celular siete veces (Fig. 4.15). Cada una de las secciones
de siete transmembrana es hydropho- BIC y de forma helicoidal, y es habitual
para asignar estas hélices con números romanos (I, II, etc.) a partir de la
hormona mensajero es en la porción extracelular de la proteína. Th e
posición exacta del sitio de unión varía de receptor a receptor. Por ejemplo,
el sitio de unión para el receptor adrenérgico está en un bolsillo de unión
profunda entre las hélices transmembrana, mientras que el sitio de unión
para el receptor de glutamato implica la norte - cadena terminal y está situado
por encima de la superficie de la membrana celular.
4.7.3 La familia rodopsina-como de los receptores G
acoplados a proteínas

norte - terminal de la proteína. Debido al número de regiones
transmembrana, las proteínas G también se denominan 7-TM
receptores . sitio de unión de Th e para la proteína G se encuentra en el
lado intracelular de la proteína y comprende parte de la do - cadena
terminal, así como parte del bucle intracelular variable (llaman así porque
la longitud de este bucle varía entre tipos Erent diff de receptor). Como
era de esperar, el sitio de unión para el neurotransmisor o
receptores d e G acoplados a proteínas incluyen los receptores para algunos
de los mensajeros químicos más conocidos de la química medicinales (por
ejemplo, ácido glutámico, el GABA, noradrenalina, dopamina, acetilcolina,
serotonina, prostaglandinas, adenosina, los opioides endógenos, angiotensina,
bradiquinina , y trombina). Teniendo en cuenta la variedad estructural de los
mensajeros químicos que intervienen, es notable que las estructuras generales
de los receptores de la proteína G acoplada

bucles
extracelulares NUEVA HAMPSHIRE 2

NORTE- terminal de la

cadena

Membrana =
VII V IV III II yo

Proteínas G
región de bucle intracelular
unión
HO 2 do
VI variable de
bucles
DO- terminal de la
intracelulares
cadena

FIGURA 4.15 Estructura de los receptores acoplados a la proteína G.

52 Capítulo 4 Receptores: estructura y función
son tan similares. Sin embargo, a pesar de su estructura general similar, las
secuencias de aminoácidos de los receptores varían significativamente
bastante signifi. Th es implica que estos receptores han evolucionado durante
millones de años a partir de una proteína ancestral común antigua. La
comparación de las secuencias de aminoácidos de los receptores nos permite
construir un árbol evolutivo y al grupo de los receptores de esta superfamilia en
varias sub-familias, que se defi ne en la categoría A (receptores de Rho-dopsin
similares), clase B (secretin- como receptores), y la clase C (receptores de
glutamato-como feromona y metabotrópicos). Th e más importante de éstos,
en lo que se refiere a la química medicinal, es la rodopsina-como de la
familia-así llamada porque el receptor primero de esta familia que se estudió
en detalle fue el propio receptor de la rodopsina, un receptor implicado en el
proceso visual . Un estudio del árbol evolutivo de los receptores de rodopsina
como vomita algunas observaciones interesantes (Fig. 4.16).
En primer lugar, el árbol evolutivo ilustra la similitud entre tipos diff Erent
de receptores en base a sus posiciones relativas en el árbol. Th nosotros,
el muscarínico, α- adrenérgico,
β- adrenérgicos, histamina y los receptores de dopamina han evolucionado a
partir de una rama común del árbol evolutivo y tienen mayor similitud entre sí
que a ningún receptor de derivados de una rama evolutiva anterior (por
ejemplo la receptor de la angiotensina ). Tal similitud receptor puede ser un conocido como
problema en la química médica. A pesar de que los receptores se distinguen
por diff Erent neurotransmisores u hormonas en el cuerpo, un medicamento
no puede llegar a hacer esa distinción. Th erefore, es importante asegurarse
de que cualquier nuevo fármaco dirigido a un tipo de receptor (por ejemplo,
el receptor de dopamina) no interactúa con el mismo tipo de receptor (por
ejemplo, el receptor muscarínico).
Los receptores han evolucionado a continuación para dar los receptores tipos
y subtipos que reconocen el mismo mensajero químico, pero son
estructuralmente Erent diff. Por ejemplo, hay
Ancestro común
muscarínico
La bradicinina,
endotelinas angiotensina, la taquiquininas
interleucina-8
2 4 3 15 H1
muscarínico La histamina
FIGURA 4.16 árbol de la evolución de los receptores acoplados a la proteína G.
son dos tipos de receptores adrenérgicos ( α y β), cada uno de los cuales
tiene varios subtipos ( α 1 , α 2A , α 2B , α 2C , β 1 , β 2 , β 3 ).
Th ERE dos tipos de receptor nicotínico colinérgico-(un receptor de canal
de iones) y muscarínicos (a tor recepción 7-TM). Cinco subtipos de
receptores muscarínicos colinérgicos han sido identifi cado.
Th e existencia de subtipos de receptores permite la posi- bilidad de diseño de
fármacos que son selectivos para un subtipo de receptor sobre el otro. Th es es
importante, porque un subtipo de receptor puede ser frecuente en una parte del cuerpo
(por ejemplo el intestino), mientras que un subtipo de receptor Erent diff es equiva-
lencia en otra parte (por ejemplo, el corazón). erefore Th, un fármaco que está diseñado
para interactuar selectivamente con el subtipo de receptor en el intestino es menos
probable que tenga ECTS eff secundarios sobre el corazón. Incluso si los subtipos de
receptores diff Erent están presentes en la misma parte del cuerpo, todavía es
importante para que los medicamentos tan selectiva como sea posible porque los
subtipos de receptores diff Erent frecuencia activan diff sistemas de señalización, lo que
lleva a los resultados biológicos diff Erent Erent.
Un estudio más detallado del árbol evolutivo revela algunos datos
curiosos sobre los orígenes de los subtipos de receptores. Como era de
esperar, varios subtipos de receptores han divergido de una rama evolutiva
común (por ejemplo, los subtipos de dopamina D2, D3, D4). Th se es
evolución divergente y debe existir una estrecha similitud estructural entre
estos subtipos. Sin embargo, los subtipos de los receptores de también se
encuentran en ramas separadas del árbol. Por ejemplo, los subtipos de
receptores de dopamina (D1 UN ,
D1 segundo , y D5) han desarrollado a partir de una Erent diff Evolución- rama aria.
En otras palabras, la capacidad de un receptor para unirse a la dopamina se ha
desarrollado en Erent diff ramas-un ejemplo de la evolución evolución
convergente .
En consecuencia, puede ser a veces mayores similitudes entre los
receptores que se unen ligandos Erent diff, pero que han evolucionado a
partir de la misma rama del árbol
monoaminas
α β
Opsinas, rhodopsins
tipos de
receptores
subtipos de
receptores
H2 1 2A 2B 2C D4 D3 D2 D1A D1B D5 321
α- adrenérgico dopaminérgica β- adrenérgico
 receptores quinasa vinculada 53

que hay entre los diferentes subtipos de receptores que se unen el mismo • La ubicación del sitio de unión difiere entre diferentes receptores acoplados a

ligando. Por ejemplo, la histamina H 1 receptor se parece a un receptor la proteína G.

muscarínico más estrechamente que lo hace la histamina H 2 receptor. De • La familia rodopsina-como de los receptores G acoplados a la proteína incluye muchos
nuevo, esto tiene consecuencias importantes en el diseño de fármacos porque receptores que son objetivos para los fármacos actualmente importantes.

hay una mayor posibilidad de que un fármaco dirigido a un receptor muscarínico

también puede interactuar con un histamina H 1 receptor y el plomo a ECTS eff
• tipos de receptores y subtipos de reconocer el mismo mensajero químico, pero
secundarios no deseados.
tienen diferencias estructurales, por lo que es posible el diseño de fármacos que

son selectivos para un tipo (o subtipo) de receptor sobre el otro.

Como estos receptores son unidos a la membrana, no es fácil para cristalizar

ellos para de rayos X estudios cristalográficos. Sin embargo, las estructuras

• subtipos de receptores pueden surgir de la evolución divergente o convergente.
cristalinas de rayos X de la β 2 y β 1
adrenoceptores ahora se han determinado.
• Es posible que algunos G-receptores acoplados a proteínas a existir como estructuras
diméricas.
4.7.4 La dimerización de los receptores G acoplados

Th ERE es una fuerte evidencia de que algunos receptores acoplados a G pueden

existir como estructuras diméricas que contienen tipos Erent idénticos o diff de los
receptores-homodímeros o meros heterodi- respectivamente. e Th presencia de
estos dímeros del receptor parece variar entre los tejidos Erent diff y esto tiene
consecuencias importantes para el diseño de fármacos. Un agente que es
selectivo para un tipo de receptor haría aff ect otros tipos no normalmente. Sin
embargo, si los heterodímeros de receptores están presentes, una "comunicación"
es posible entre los receptores de componente de manera que un agente de
interacción con una media del dímero puede aff ect la actividad de la otra mitad.
Th se se discute más adelante en la sección 24.9 con respecto a los receptores
opioides.
PUNTOS CLAVE
• G-receptores acoplados a proteínas activan el indicador de proteínas llamadas proteínas
G. La unión de un mensajero da como resultado la apertura de un sitio de unión para la
proteína de la señal. Este último se une y fragmentos, con una de las subunidades que
salen para activar una enzima unida a la membrana.
• Los receptores G acoplados a proteínas son proteínas de membrana con siete secciones
transmembrana. los do - cadena de terminal se encuentra dentro de la célula y el norte - cadena
4.8 receptores quinasa vinculada
4.8.1 Principios generales
receptores quinasa vinculada son una superfamilia de receptores que activan
enzimas directamente y no requieren una proteína G (Fig. 4.17). receptores
de tirosina quinasa son ejemplos importantes de la quinasa de receptores
ligados y están demostrando ser muy importantes para los objetivos de
nuevos fármacos anticancerosos (sección 21.6.2). En estas estructuras, la
proteína en cuestión juega el doble papel de los receptores y enzimas. la
proteína del receptor e Th está incrustado dentro de la membrana celular, con
parte de su estructura expuesta en la superficie exterior de la célula y parte
expuesta en la superficie interior. e superficie exterior Th contiene el sitio de
unión para el mensajero químico y la superficie interna tiene un sitio activo
que está cerrado en el estado de reposo. Cuando un mensajero químico se
une al receptor que hace que la proteína de cambiar de forma. Th es
resultado en el sitio activo están abriendo, permitiendo que la proteína de
actuar como una enzima dentro de la célula. reacción e Th que está
catalizada es una reacción de fosforilación en residuos de tirosina en

terminal es extracelular.

1 2 3
Mensajero

Mensajero Mensajero

Membrana
Membrana Receptor Membrana Membrana Membrana Membrana
celular Receptor Receptor
celular celular celular celular celular

Celda sitio activo Celda Sitio activo Celda

(cerrado) (abierto)
AB

FIGURA 4.17 activación de la enzima.

54 Capítulo 4 Receptores: estructura y función
un sustrato de proteínas son fosforilados. Una enzima que cataliza reacciones
de fosforilación se conoce como una enzima quinasa y por lo que la proteína
se conoce como un receptor de tirosina quinasa. ATP se requiere como
cofactor para proporcionar el grupo fosfato es necesario. Th e sitio activo
permanece abierta durante el tiempo que la molécula mensajera está unido al
receptor, y por lo tanto puede ocurrir varias reacciones de fosforilación, lo que
resulta en un amplifi cación de la señal. Una curiosidad de esta reacción
catalizada por enzimas es que el sustrato para la reacción es el propio
receptor. Th se explica con más detalle en la sección 4.8.3.
receptores de Th e quinasa ligada se activan por un gran número de
hormonas polipeptídicas, factores de crecimiento y citoquinas. La pérdida de
función de estos receptores puede dar lugar a defectos de desarrollo o
resistencia a la hormona. la sobreexpresión puede dar lugar a trastornos del
crecimiento maligno.
4.8.2 Estructura de los receptores de
tirosina quinasa
Th e estructura básica de un receptor de tirosina quinasa se compone de una
sola región extracelular (la norte - cadena terminal) que incluye el sitio de
unión para el mensajero químico, una sola región hidrófoba que atraviesa la
membrana como una α- hélice de siete vueltas (solo sufi ciente para
atravesar la membrana), y una do - cadena terminal en el interior de la
membrana de la célula (Fig. 4.18). Los do - región terminal contiene el sitio de de crecimiento ( GH) receptor es un ejemplo de este tipo de receptor y es
unión catalítica. Los ejemplos de receptores de tirosina quinasa incluyen el
receptor para insulina, y receptores para diversos citoquinas y factores de
crecimiento .
4.8.3 mecanismo de activación de los receptores de tirosina
quinasa
Un ejemplo específi de un receptor de tirosina quinasa es el receptor para una
hormona llamada factor de crecimiento epidérmico
(EGF). EGF es una ligando bivalente que pueden unirse a dos receptores al
mismo tiempo. Esto resulta en dimer- receptores
NUEVA HAMPSHIRE 2
de unión a ligando
la membrana de la célula región
región de unión catalítica
CO 2 MARIDO
FIGURA 4.18 Estructura de los receptores de tirosina quinasa.
zación , así como la activación de la actividad enzimática. proceso e
dimerización Th es importante porque el sitio activo en cada mitad del
dímero receptor cataliza la fosforilación de residuos de tirosina accesibles
en el otro medio (Fig. 4.19). Si no se produce la dimerización, sin la
fosforilación se llevaría a cabo. Tenga en cuenta que estas fosforilaciones
se producen en la porción intracelular de la cadena de la proteína del
receptor. D e importancia de estas reacciones de fosforilación se explica en
la sección 5.4.1. Th e punto importante a alcanzar en esta etapa es que un
mensajero químico externo ha logrado transmitir el mensaje al interior de la
célula sin que ella misma sean alteradas o tener que entrar en la célula.
Dimerización y autofosforilación se com- temas comunes para los
receptores de esta familia. Sin embargo, algunos de los receptores en
esta familia ya existen como dímeros o tetrámeros, y sólo requieren la
unión del ligando. Por ejemplo, el insulina receptor es un complejo
heterotetrameric (Fig. 4.20).
4.8.4 receptores de tirosina quinasa ligada
Algunos receptores quinasa unirse a ligandos y dimerizar de forma similar a
las descritas anteriormente, pero no tienen actividad catalítica inherente a
su do - cadena terminal. Sin embargo, una vez que han dimerizado, que
pueden unirse y activar una enzima tirosina quinasa del citoplasma. Los hormona
ed clasifi como una tirosina quinasa vinculada receptor (Fig. 4.21).
PUNTOS CLAVE
• quinasa de receptores ligados son receptores que están directamente vinculados a
enzimas quinasa. Mensajero resultados de unión en la apertura del sitio quinasa
activa, lo que permite una reacción catalítica tiene lugar.
• receptores de tirosina quinasa tienen un sitio de unión extracelular para un
mensajero químico y un enzimática intracelular
representación simplificada
 Los receptores intracelulares 55

EGF

ligando bivalente

La unión del ligando y La fosforilación

dimerización
Celda

membrana
PAG PAG

ATP ADP
monómeros inactivos La activación de la
PAG PPP
receptor de EGF tirosina quinasa
actividad

FIGURA 4.19 mecanismo de activación para el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGF).

Insulina

La fosforilación
Celda

membrana
PAG PAG PAG PAG

ATP ADP
PAG PAG

FIGURA 4.20 La unión del ligando y la activación del receptor de la insulina.

GH

Unión La activación y p hosphorylati

Dimerizatio norte de quinasa s en

ATP ADP
receptores de GH
PAG PAG
PPP
PAG
quinasas

FIGURA 4.21 La activación del receptor de la hormona de crecimiento (GH).

sitio activo que cataliza la fosforilación de residuos de tirosina en sustratos

4.9 Los receptores intracelulares
proteicos.

• la unión a los resultados del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGF) No todos los receptores están localizados en la membrana celular. Algunos receptores
en la dimerización y la apertura de los sitios activos del ligando. El sitio activo en se encuentran dentro de la célula y se defi ne como receptores intracelulares. Th ERE
un medio del dímero cataliza la fosforilación de residuos de tirosina presente en el son cerca de 50 miembros de este grupo y que son particularmente importantes en la
do - cadena terminal de la otra mitad. regulación de la transcripción de genes directamente. Como resultado, ellos son a

menudo en llamada receptores de hormonas nucleares o factores de

• El receptor de insulina es una estructura preformada heterotetrameric que actúa como transcripción nucleares. mensajeros químicos e Th para estos los receptores

un receptor de la tirosina quinasa. incluyen las hormonas esteroides, hormonas tiroideas, y los retinoides. En todos estos

casos, el mensajero tiene que pasar a través de la membrana celular con el fin de
• El receptor de la hormona de crecimiento dimeriza sobre la unión a su ligando, a
llegar a su receptor por lo que tiene que ser de naturaleza hidrófoba. tiempo de
continuación, se une y activa las enzimas de tirosina quinasa del citoplasma.
respuesta Th e
56 Capítulo 4 Receptores: estructura y función
resultante de la activación de los receptores intracelulares se mide en
horas o días, y es mucho más lento que los tiempos de respuesta de los
receptores unidos a la membrana.
e receptores intracelulares Th tienen estructuras generales similares. Th ey
consisten de una sola proteína que contiene un sitio de unión al ligando do - terminal
corta. Por ejemplo, el dímero de estrógeno ligando-receptor se une a una
y una región de unión de ADN cerca del centro (Fig. 4.22). región de unión a
DNA e Th contiene nueve residuos de cisteína, ocho de los cuales están
implicados en la unión de dos iones de zinc. iones zinc e Th juegan un papel
crucial en la estabilización y la determinación de la conformación de la región
de unión a ADN. Como resultado, los tramos de la proteína en cuestión se
denominan zinc dominios dedo. Th e región de unión para cada receptor
puede identificar secuencias de nucleótidos particulares en el ADN de ADN.
Por ejemplo, los dominios de zinc dedo de la estrógenos recep- tor reconocer
la secuencia 5 '- AGGTCA-3 ', en la que A, G,
C, y T son adenina, guanina, citosina y timina. E l mecanismo por el cual los
receptores intracelulares trabajo también es muy similar (Fig. 4.23). Una
vez que el mensajero químico (ligando) ha cruzado la membrana celular,
que busca a su receptor y se une a ella en el sitio de unión del ligando. Un
inducida fi cio se lleva a cabo lo que hace que el receptor de cambiar de
forma. Th es, a su vez, conduce a una dimerización del complejo
ligando-receptor. D e dímero se une a una
CO 2 MARIDO
región de
unión de
esteroides
ADN vinculante región (
"dedos de zinc ')
MARIDO 2 norte
FIGURA 4.22 Estructura de los receptores intracelulares.
Receptor
Mensajero
complejo
receptor-ligando
Membrana
celular
FIGURA 4.23 De mensajero para el control de la transcripción de genes.
proteína llamada co-activador y, finalmente, todo el compleja se une a una
región particular del ADN de la célula. Como hay dos receptores en el
complejo y dos regiones de unión al ADN, el complejo reconoce dos
secuencias idénticas de nucleótidos en el ADN separados por una distancia
secuencia de nucleótidos de 5 '- AGGTCANNNTGACCT-3 '
donde N puede ser cualquier base de ácido nucleico. Dependiendo de la compleja
involucrada, la unión del complejo con el ADN, ya sea desencadena o inhibe el
inicio de la transcripción, y ECTS aff la eventual síntesis de una proteína.
4.10 La regulación de la actividad del receptor
E l papel de los sitios de unión alostéricos en la regulación de la actividad
de las enzimas se trata en la sección 3.6. sitios de unión alostéricos
también juegan un papel en la regulación o modulación de la actividad de
diversos receptores. ESE Th incluyen canales iónicos activados por
ligando, como la nicotínico y la γ- receptores aminobutírico, y varios
receptores G acoplados a proteínas, tales como los receptores
muscarínicos, de adenosina, y la dopamina. Las estructuras que
interactúan con estos sitios se llaman res moduladores alostéricos y
puede aumentar o disminuir la ef ect del mensajero químico en el
receptor (secciones 8.2.7 y 8.3.2).
4.11 polimorfismo genético y
receptores
polimorfismo genético se discute en la sección 3.5.6 con respecto a las
enzimas. El polimorfismo también es responsable de los receptores que tienen
cias diff sutiles en la estructura y la actividad entre los individuos. En algunos
casos, esto puede conducir a enfermedades como el cáncer (sección 21.1.3).
Co-activador de la
proteína
ADN
dímero
 Otras lecturas 57

Notas clave • La unión de un ligando con un intracelulares receptor da como resultado la

dimerización y la formación de un complejo de factor de transcripción que se une
• Los receptores intracelulares se encuentran dentro de la célula y son importantes en el
a una secuencia de nucleótidos fi específica en el ADN.
control de la transcripción.

• Los mensajeros químicos para receptores intracelulares deben ser su fi cientemente

hidrófobo para pasar a través de la membrana celular.

PREGUNTAS

1. Explicar la diferencia entre un sitio de unión y una para la β- los receptores adrenérgicos. La adrenalina no muestra la selectividad y se

región de unión. une igual de bien tanto a la α- y β- adrenérgicos. Sugerir una explicación para estas

diferencias en la selectividad.
2. Tenga en cuenta las estructuras de los neurotransmisores que se muestran

en la Fig. 4.3 y sugerir qué tipo de interacciones de unión podrían estar OH HN CH 3

MARIDOOH H
involucrados en ellos la unión a un sitio de unión al receptor. Identificar los HO 2
NUEVA HAMPSHIRE

posibles aminoácidos en el sitio de unión que podría participar en cada una de

CH 3
estas interacciones de unión. HO HO

noradrenalina HO isoprenalina

3. Hay dos tipos principales de receptores adrenérgicos: la α y

4. Sugerir por qué las regiones transmembrana de muchos
β- adrenérgicos. Noradrenalina muestra una ligera selectividad para la α- receptor,
proteínas unidas a la membrana son α- hélices.
mientras que la isoprenalina muestra selectividad

OTRAS LECTURAS

Alexander, SPH, Mathie, A., y Peters, JA (2006) Guía de los receptores y Kobilka, B. y Schertler, GFX (2008) Nueva G-proteincoupled estructuras cristalinas de

canales. British Journal of Pharmacology los receptores: perspectivas y limitaciones.

147 ( Suppl. 3), S1-S126. Trends in Pharmacological Sciences 29, 79-83. Maehle, AH. , Prull, CR., Y
Bikker, JA, Trumpp-Kallmeyer, S., y Humblet, C. (1998) los receptores acoplados a Halliwell, RF (2002) La aparición de la teoría del receptor de la droga. Nature
la proteína G: modelos, mutagénesis, y el diseño de fármacos. Journal of Reviews Drug Discovery 1, 637-641.
Medicinal Chemistry 41 ,
2911-2927. Palczewski, K. (2010) formas oligoméricas de los receptores acoplados a proteínas G

Chalmers, DT y Behan, DP (2002) El uso de los GPCR constitutivamente (GCPRs) Trends in Biochemical Sciences 35,

activos en el descubrimiento de fármacos y la genómica funcional. Nature 595-600.

Reviews Drug Discovery 1,
599-608.
Christopoulis, A. (2002) en los sitios receptores de la superficie celular de unión alostérica: nuevos
objetivos para el descubrimiento de fármacos. Nature Reviews Drug Discovery 1, 198-210.
van Rijn, RM, Whistler, JL, y Waldhoer, M. (2010) receptores de
opioides-heteromer-específico la trata y la farmacología. Current Opinion in
Pharmacology 20, 73-79. Sansom, C. (2010), los receptores receptiva. Mundial
de la Química
Agosto de 52-55.

Cohen, P. (2002) - Las proteínas quinasas los objetivos de medicamentos importantes Tai, HJ, Grossmann, M., y Ji, I. (1998) receptores acoplados a la proteína G. Revista
del siglo xxi? Nature Reviews Drug Discovery 1, de Química Biológica 273, 17299-
309-315. 17302, 17979-17982.
Kenakin, T. (2002) E fi cacia a los receptores acoplados a la proteína G. Zhan-Guo, G. y Jacobson, KA (2006) alosterismo en los receptores de membrana. Drug Discovery

Nature Reviews Drug Discovery 1, 103-110. Today 11, 191-202.

 5
Receptores y transducción de
señales
En el capítulo 4, discutimos la estructura y función de los receptores. En este
capítulo, se considera lo que sucede una vez que un receptor se ha activado. e
interacción Th de un receptor con su mensajero químico es sólo el primer paso en
una cadena compleja de eventos que implican varias mensajeros secundarios,
proteínas y enzimas que en última instancia conduce a un cambio en la química de
la célula. Th eventos ESE se denominan transducción de señales . Por desgracia,
una cuenta completa y detallada de estos procesos podría llenar un libro de texto
en sí mismo, por lo que el siguiente relato se centra principalmente en los procesos
de transducción de señal que resultan de la activación de los receptores acoplados
a la proteína G y receptores quinasa. e vías de transducción de señales Th después
de la activación de los receptores G acoplados a la proteína son de particular
interés ya que el 30% de todos los medicamentos en el mercado de interactuar con
estos tipos de receptores. e vías de transducción de Th para los receptores quinasa
son también de gran interés, ya que fuera er emocionantes nuevas dianas para
nuevos fármacos, en particular en el ámbito de la terapia contra el cáncer anti-
(sección 21.6.2). La comprensión de las vías y los diversos componentes que
intervienen ayuda a identificar dianas farmacológicas adecuadas.
5.1 las vías de transducción de señales de los
receptores de la proteína G acoplada
receptores G acoplados a proteínas activan una proteína de señalización de
llamada una proteína G, que a continuación inicia una cascada de señalización
que implica una variedad de enzimas. secuencia de Th e de eventos que
conducen a la combinación de receptor y ligando (el mensajero químico) para la
activación final de un enzima diana es bastante largo, por lo que deberá buscar en
cada etapa del proceso a su vez.
5.1.1 La interacción del complejo receptor-ligando
con proteínas G
primera etapa d e fi en el proceso es la unión del mensajero Chemical
o ligando al receptor, seguido de la
unión de una proteína G al complejo receptor-ligando (Fig. 5.1).
Proteínas G son proteínas de membrana situados en la superficie
interna de la membrana celular y se componen de tres subunidades de
la proteína ( α, β, y γ). Los
α- subunidad tiene un bolsillo de unión que puede unirse nucleótidos guanilo (de
ahí el nombre de la proteína G) y los que se une
guanosina difosfato (GDP) cuando la proteína G está en el estado de reposo. Th
ERE varios tipos de proteína G (por ejemplo, Gs, Gi / Go, Gq / G 11 ) y varios
subtipos de estos. c proteínas G Las especificaciones son reconocidos por los
receptores específi cos. Por ejemplo, G s es reconocida por el β- adrenoceptor, pero
no el α- los receptores adrenérgicos. Sin embargo, en todos los casos, la proteína
G actúa como un "corredor relé 'molecular que lleva el mensaje recibido por el
receptor a la siguiente objetivo en la vía de señalización ling.
Ahora vamos a examinar lo que ocurre en detalle. En primer lugar, el
receptor se une a su neurotransmisor o la hormona (Fig. 5.1, el cuadro 1). Como
resultado, el receptor cambia de forma y expone un nuevo sitio de unión en su
superficie interior (Fig. 5.1, trama 2). e recién expuesta sitio de unión Th ahora
reconoce y se une a c proteína G específi. Tenga en cuenta que la estructura de
membrana celular es una estructura de líquido y por lo que es posible para las
proteínas diff Erent a 'fl avena' a través de él. Th unión e proceso entre el
receptor y la proteína G hace que el último de cambiar de forma, que, a su vez,
cambia la forma del sitio de unión de nucleótidos guanilo. Th es debilita las
fuerzas de enlace intermoleculares que sostienen el PIB y el PIB por lo que se
libera (Fig. 5.1, marco 3).
Sin embargo, el bolsillo de unión no se queda vacío por mucho tiempo, ya
que ahora es la forma correcta de unirse GTP
( trifosfato de guanosina ). Th erefore, GTP reemplaza PIB (Fig. 5.1, la
trama 4).
La unión de GTP resultados en otro cambio conformacional en la proteína
G (Fig. 5.1, marco 5), que ens debilidad de los vínculos entre las subunidades
de la proteína de manera que la
α- subunidad (con su GTP unido) se separa del β
y γ- subunidades (Fig. 5.1, bastidor 6). Ambos α- subunidad y la βγ- dímero
luego parten del receptor.
complejo receptor-ligando e Th es capaz de activar va- proteínas G rias
de esta manera antes de que salga el ligando y
 las vías de transducción de señales de los receptores de la proteína G acoplada 59

1 2 3
neurotransmisor

la célula PIB
receptores Receptor receptores

γ β γ β γ β

α α α

Proteína G

= Membrana de Sitio de unión PIB GTP

4 5 6

receptor de los Receptor receptor de los

γ β γ β γ β α
α α

βγ- dímero α- subunidad

FIGURA 5.1 La activación de los receptores G acoplados a la proteína y su interacción con las proteínas G.

7-TM receptores
α- subunidad α- subunidad
Las proteínas G
- α o- subunidad + α yo- subunidad
+O-
α s- subunidad
α q- subunidad
α yo- subunidad California 2+ los canales de
GMPc
Los canales iónicos K + Ion
fosfodiesterasa +O- +O-

La adenilato fosfolipasa C
ciclasa

acampar IP 3 TROZO DE CUERO

PKA PKC
Ca ++

FIGURA 5.2 Señalización de vías que surgen de la división de Erent diff proteínas G.

apaga el receptor. Th es conduce a un amplifi cación de la señal.
Ambos α- subunidad y la βγ- dímero ahora están listos para entrar en la
segunda etapa del mecanismo de señalización. Vamos a considerar primero lo
que ocurre con el α- subunidad.
5.1.2 las vías de transducción de señal que implican
la αα- subunidad
Sin embargo, las etapas posteriores dependen del tipo de G-proteína está
implicada, y que específi co α- subunidad se forma (Fig. 5.2). Erent Dif α- subunidades
hay por lo menos 20 de ellos-tienen objetivos Erent diff diff y Erent ECTS
Ef:
• α s estimula la adenilato ciclasa;
• α yo inhibe la adenilato ciclasa y también puede activar los canales iónicos
de potasio;
• α o activa los receptores que inhiben los canales iónicos de calcio neuronales;

Th e primera etapa de la transducción de señales (es decir, la división de una

proteína G) es común a todos los receptores 7-TM. • α q activa la fosfolipasa C.
60 Capítulo 5 Receptores y transducción de señales

No tenemos el espacio para estudiar todas estas vías en detalle. recombina con el βγ- dímero de reformar el G s - proteínas, mientras que la
En su lugar, nos centraremos en dos la activación de adenilato enzima vuelve a su conformación inactiva.
ciclasa y la activación de lipasa fosfo-C .

5.2.2 La activación de la proteína quinasa A

cAMP ahora procede a activar una enzima llamada pro- proteína

quinasa A (PKA) (Fig. 5.5). PKA pertenece a un grupo de enzimas
5.2 La transducción de señales que implica
llamadas la serina-treonina quinasas que catalizan la fosforilación de
proteínas G y adenilato ciclasa serina y treonina residuos en sustratos de proteína (Fig. 5.6).

5.2.1 La activación de la adenilato ciclasa por la α s - subunidad
Los α s - subunidad se une a una membrana determinada enzima
llamada adenilato ciclasa (o la adenilciclasa) y 'interruptores' it en (Fig.
5.3). Th es ahora enzima cataliza la síntesis de una molécula llamada
AMP cíclico (cAMP) (Fig. 5.4). cAMP es un ejemplo de una ger
mensajero secundario que se mueve en el citoplasma de la célula y
lleva la señal de la membrana celular en la célula misma. enzima e Th
continuará siendo activo mientras el α s -
subunidad se une, lo que resulta en la síntesis de varios cientos de
moléculas que representan AMP cíclico otro amplifi cación sustancial
de la señal. sin embargo, el α s -
subunidad tiene actividad GTP-asa intrínseca (es decir, puede catalizar la
hidrólisis de GTP unido a su PIB) y por lo que desac- tivates sí er popa de un
cierto período de tiempo y vuelve al estado de reposo. Los α s - subunidad
continuación, se aparta la enzima y
La proteína quinasa A cataliza la fosforilación y la activación de otras
enzimas con funciones específi c a la célula u órgano particular en
cuestión, por ejemplo las enzimas de lipasa en las células grasas son
activados para catalizar la descomposición de la grasa. e sitio activo Th de
una proteína quinasa tiene que ser capaz de unirse a la región de la
proteína Strate sub- que ha de ser fosforilada, así como la ATP tor cofactor
que proporciona el grupo fosfato es necesario.
ERE Th puede ser de varios más enzimas implicadas en la ruta de
señalización entre la activación de la PKA y la activación (o desactivación) de
la enzima diana. Por ejemplo, las enzimas implicadas en la degradación y la
síntesis de glucógeno en una célula del hígado están regulados como se
muestra en la Fig. 5.7.
La adrenalina es la hormona inicial involucrados en el proceso Regla- mento
de y se libera cuando el cuerpo requiere energía inmediata en forma de glucosa
. la hormona del Th e inicia una señal en el β- los receptores adrenérgicos que
conduce a la

= GTP = GTP = PIB = PIB

1 2 3 4

Membrana celular Membrana celular Membrana celular Membrana celular

La adenilato La adenilato La adenilato La adenilato

α ciclasa α ciclasa α ciclasa

α ciclasa

sitio activo sitio activo

(cerrado) Fosfato
ATP acampar ATP acampar (cerrado)

FIGURA 5.3 Interacción de α s - subunidad con la adenilato ciclasa y la activación de la enzima.

NH 2 NH 2

norte norte

NN La adenilato ciclasa NN OPO

OPO norte norte +

O O OO OOPO
OO OOPO O

ATP El AMP cíclico

OH HOPO
correosOHO
OH OH
O

FIGURA 5.4 Síntesis de AMP cíclico.

 La transducción de señales que implica proteínas G y adenilato ciclasa 61

O O
HN H La proteína HN

quinasa A
Membrana celular
La adenilato
α ciclasa ATP

OH OH

ATP cAMP correos

serina
OH
OH
Activación

O O
La proteína HN
HN
quinasa A
proteína quinasa A
PAG
(activo) de la ATP
Enzyme Enzyme
MARIDO 3 do OH H MARIDO 3 do OH
(inactivo)
treonina correos
OH
OH
Reacción
química
FIGURA 5.6 La fosforilación de serina y treonina
residuos en los sustratos de proteína.
FIGURA 5.5 La activación de la proteína quinasa A por AMP cíclico

( P = fosfato).

La adrenalina

αs
αs
La adenilato
β- los receptores adrenérgicos
ciclasa

ATP acampar

La glucógeno La proteína quinasa A

Inhibidor
sintasa (activo)
(inactivo)
subunidad
do
catalítica de
PKA

El glucógeno P Inhibidor Fosfatasa

synthase- P (activo) (inhibido)
(inactivo)

La fosforilasa quinasa Fosforilasa quinasa P

(inactivo) (activo)

fosforilasa segundo fosforilasa un

(inactivo) (activo)

El glucógeno La glucosa-1-fosfato

FIGURA 5.7 La regulación de la síntesis de glucógeno y el metabolismo en una célula de hígado.

62 Capítulo 5 Receptores y transducción de señales
síntesis de cAMP y la activación de PKA por el mecanismo ya
discutidos. Th e subunidad catalítica de PKA fosforila ahora tres
enzimas dentro de la célula, como sigue:
• una enzima llamada fosforilasa quinasa se fosfo rylated y activado.
Th es la enzima a continuación, cataliza la fosforilación de una enzima
inactiva llamada phorylase fosfato segundo que se convierte en su
forma activa,
fosforilasa un . fosforilasa un Ahora cataliza la degradación del
glucógeno escindiendo unidades Phate glucosa-1-fosfato;
• la glucógeno sintasa es fosforilado a una forma inactiva, evitando
así la síntesis de glucógeno;
• una molécula llamada inhibidor de la fosforilasa es fosforilado. Una vez
fosforilada, actúa como un inhibidor para la fosfatasa la enzima
responsable de la conversión de fosforilasa un de nuevo a la fosforilasa segundo
ciclasa y las quinasas nunca son completamente activos o inactivos. En un
. Th e curso de la vida de la fosforilasa un es por lo tanto prolongado.
resultado global e Th de estas fosforilaciones Erent diff es una inhibición de la
síntesis de glucógeno coordinada y mejora del metabolismo del glucógeno para
generar glucosa en las células hepáticas. Tenga en cuenta que el eff ect de
adrenalina en otros tipos de célula puede ser bastante Erent diff. Por ejemplo, la
adrenalina activa β- adrenoceptores en las células de grasa que conduce a la
activación de las proteínas quinasas, como antes. Th es el tiempo, sin embargo, la
fosforilación activa lipasa enzimas que catalizan entonces la descomposición de
la grasa para actuar como otra fuente de glucosa.
5.2.3 el G yo- proteína
Hemos visto cómo la enzima adenilato ciclasa se activa con el α s - subunidad
de la G s - proteína. La adenilato ciclasa también puede ser inhibida por un
Erent diff proteína G G yo- proteína. N d e yo - proteína interactúa con los
receptores Erent diff de aquellos que interactúan con el G s - proteína,
pero el mecanismo que conduce a la inhibición es la misma que conduce
a la activación. D e rencia única diff es que la
α yo - lanzado subunidad se une a la adenilato ciclasa y bidores su la
enzima en lugar de la activa.
Los receptores que se unen G yo - proteínas incluyen la mus- carinic M 2 receptorproteína G) y varias enzimas diferentes en la cascada de señalización.
del músculo cardíaco, α 2 - adrenoceptores
en el músculo liso, y receptores opioides en el sistema nervioso
central.
E l existencia de G yo- y G s - proteínas significa que la generación de
la cAMP mensajero secundario está bajo el control dual de un freno y
un acelerador, lo que explica el proceso por el cual dos
neurotransmisores Erent diff pueden tener opuestos ECTS eff en una
célula diana. Un neurotransmisor que estimula la producción de cAMP
forma un complejo receptor-ligando que activa un G s -
proteínas, mientras que un neurotransmisor que inhibe la producción de
cAMP forma un complejo receptor-ligando
que activa un G yo - proteína. Por ejemplo, noradrenalina interactúa con el β-
los receptores adrenérgicos para activar un G s - proteína, mientras acetilcolina
interactúa con el receptor muscarínico para activar un G yo - proteína.
Como hay varios tipos Erent diff de receptor para un
neurotransmisor particular, es realmente posible para que
neurotransmisor para activar cAMP en un tipo de célula pero inhibe en
otro. Por ejemplo, noradrenalina interactúa con el β- adrenoceptor para
activar la adenilato ade- nylate porque el β- adrenoceptor une el G s - proteína.
Sin embargo, la noradrenalina interactúa con el
α 2 - adrenoceptor para inhibir la adenilato ciclasa, porque este receptor
se une el G yo - proteína. Th es ejemplo ilustra que es el receptor que
determina que la proteína G se activa y no el neurotransmisor u
hormona,
También vale la pena señalar que las enzimas tales como la adenilato
momento dado, una cierta proporción de estas enzimas están activas y el
papel de la G s- y G yo -
proteínas es para aumentar o disminuir esa proporción. En otras
palabras, el control se clasifica en lugar de todo o nada.
5.2.4 Generalidades de la cascada de señalización que
implica AMP cíclico
Th cascada que implica la G de señalización e s - proteínas, AMPc y PKA
parece muy complejo y puede que se pregunte si un proceso de
señalización más simple sería más efi - ciente. Th ERE varios puntos
dignos de mención sobre el proceso tal y como está.
• En primer lugar, la acción de la proteína G y la generación de un
mensajero secundario explica cómo un mensaje entregado a la parte
exterior de la superficie de la célula puede ser transmitida a las enzimas
dentro de la célula-enzimas que no tienen relación directa con la célula
membrana o el receptor. Tal proceso de señalización evita las di fi cias
involucradas en una molécula mensajera (que es habitualmente hidrófilo)
que tienen que cruzar una membrana celular hidrofóbica.
• En segundo lugar, el proceso implica un "relé Run- ner 'molecular (la
En cada una de estas etapas, la acción de una proteína o enzima
resultados en la activación de un número mucho mayor de enzimas. Por
lo tanto, el efecto de un neurotransmisor interactuar con una molécula
de receptor resulta en un efecto final de varios factores más grande que
uno podría esperar. Por ejemplo, cada molécula de adrenalina se
piensa para generar 100 moléculas de AMPc y cada molécula cAMP
comienza a buscar un efecto de amplificación de su propia dentro de la
célula.
• Th irdly, hay una ventaja en tener el receptor, la proteína G, y la
adenilato ciclasa como entidades separadas.
 La transducción de señales que implica proteínas G y adenilato ciclasa 63
D e la proteína G puede unirse a varios tipos de diferencias Erent de
complejos ligando-receptor. Th es un medio que DIFF neurotransmisores y
hormonas ent ER- que interactúan con los receptores Erent diff puede
cambiar en la misma proteína G conduce a la activación de la guanilato
ciclasa. Th erefore, hay una economía de organización involucrada en la
química de la señalización celular, como la vía de señalización de la adenilato
ciclasa se puede utilizar en muchas células diff Erent y sin embargo,
responden a las señales Erent diff. Por otra parte, diff ER- ent ECTS eff
celulares se traducirá en función del tipo de célula implicada (es decir, células
en los tejidos Erent diff tendrá rentes tipos de receptores y subtipos ferente, y
el sistema de señalización se encenderá enzimas diana Erent diff). Por
ejemplo, glucagón G activa s - receptores unidos en el hígado que conduce a gluconeogénesis
como fuente para el grupo fosfato y se produce en el grupo fenólico de los
, adrenalina G activa s - vinculado β 2 - adrenoceptores en las células grasas que residuos de tirosina cuando catalizada por tirosina quinasas, y en los
conducen a lipol- analysis , y vasopresina interactúa con G s - vinculada
vasopresina (V 2 ) receptores en el riñón a aff ect sodio / reabsorción de agua.
La adrenalina actúa sobre G E / S - vinculado α 2 -
adrenoceptores que conducen a la contracción del músculo liso y CLE acetilcolina
actúa sobre G E / S - vinculada M 2 receptores que conduce a la relajación del
músculo del corazón. Todos estos ECTS eff están mediados por la vía de
señalización cAMP.
• Por último, el control dual de "freno / acelerador 'proporcionada por el G s - y G yo - proteínas
de control permite definir la actividad de la adenilato ylate aden-.
5.2.5 El papel de la βγ- dímero
Si usted ha logrado seguir la complejidad de la vía de señalización de la
proteína G hasta ahora, bien hecho. Por desgracia, hay más! Usted puede
recordar que cuando la proteína G se une a un complejo receptor-ligando, se
rompe para formar una
α- subunidad y una βγ- dímero. Hasta hace poco, la βγ- dímero fue visto como un
mero ancla para la α- subunidad para asegurarse de que se mantuvo unido a la
superficie interior de la membrana celular. Sin embargo, ahora se ha encontrado
que la βγ- dímeros tanto de la G yo - y el G s - Las proteínas pueden ellos mismos acti-
var o inhibir la adenilato ciclasa. Th ERE son en realidad seis tipos diff ER-tes (o
isoenzimas) de la adenilato ciclasa, y la activación o inhibición depende de la
isoenzima implicada. Por otra parte, la adenilato ciclasa no es la única enzima que
puede ser controlada por el βγ- dímero. Los βγ- dímero es más promiscuos que la α- subunidades
y puede aff ect varios objetivos diff Erent, dando lugar a una variedad de diff Erent
ECTS FEP. Th es que suena como una receta para la anarquía. Sin embargo, hay
una cierta ventaja en el dímero que tiene un papel de señalización, ya que añade
una sutileza extra para el proceso de señalización. Por ejemplo, se ha encontrado
que se requieren concentraciones más altas del dímero para dar lugar a cualquier
eff ect en comparación con el α- subunidad. Th erefore, la regulación por los
dímeros se hace más importante cuando se activan un mayor número de
receptores.
Por ahora debería estar claro que la activación de un proceso lular
bración es más complicada que la interacción de un tipo de
neurotransmisor interactuar con un tipo
de receptor. En realidad, la célula está recibiendo señales de una miríada de
mensajeros químicos Erent diff a través de varios los receptores y las
interacciones receptor-ligando. señal nal e fi Th depende del número y tipo de
proteínas G activadas en cualquier momento, así como las diversas vías de
transducción de señales que estas proteínas inician.
5.2.6 La fosforilación
Como hemos visto anteriormente, la fosforilación es una reacción clave en la
activación o desactivación de las enzimas. La fosforilación requiere ATP
grupos de alcohol de los residuos de serina y treonina cuando catalizada por
serina-treonina quinasas . Th ESE grupos funcionales son capaces de
participar en ing Bond- hidrógeno, pero si se añade un grupo fosfato
voluminoso para el grupo OH, se interrumpe el enlace de hidrógeno.
Además, el grupo fosfato es por lo general ionizado a pH fisiológico y por lo
tanto la fosforilación introduce dos oxígenos cargados negativamente. Th
grupos ESE cargadas ahora pueden formar fuertes enlaces iónicos con un
grupo cargado positivamente adecuadamente posicionado en la proteína que
causan la enzima para cambiar su estructura terciaria. Th es el cambio en
los resultados de forma en la exposición o el cierre del sitio activo (Fig. 5.8).
La fosforilación por las enzimas quinasa también es responsable de la desensibiliz
de los receptores de G-proteína ligada. La fosforilación de residuos de
serina y treonina se produce en el intracelular do - cadena terminal de popa
er ligando de unión prolongada. A medida que la do - cadena terminal está
implicado en G-proteína de unión, la fosforilación cambia la conformación
de la proteína en esa región y evita que la proteína G de unión. Th
nosotros, la compleja receptor-ligando ya no es capaz de activar la proteína
G.
PUNTOS CLAVE
• G-proteínas se componen de tres subunidades de proteínas, con el
α- subunidad unida a GDP. Hay varios tipos de G-proteína.
• unión al receptor-ligando se abre un sitio de unión para la proteína G. En la unión, el
PIB se intercambia por GTP, y los fragmentos de la proteína G en una α- subunidad
(GTP cojinete) y una βγ- dímero.
• Las proteínas G se unen y se dividió por el tiempo que el mensajero químico se une
al receptor, lo que resulta en una fi cación de la señal amplificada.
• Un α s - subunidad se une a la adenilato ciclasa y lo activa de manera que cataliza la
formación de AMPc a partir de ATP. La reacción continúa durante tanto tiempo
como la α s - subunidad se une, lo que representa otra señal de ampli fi cación. Un α yo - subunida
inhibe la adenilato ciclasa.
• los α- subunidades finalmente hidrolizan GTP unido al PIB y salen de la
adenilato ciclasa. Se combinan con sus respectivos
βγ- dímeros para reformar los originales G-proteínas.
64 Capítulo 5 Receptores y transducción de señales

• cAMP actúa como un mensajero secundario dentro de la célula y activa PKA.

PKA cataliza la fosforilación de serina y treonina residuos en otras enzimas 5.3 La transducción de señales que implica
que conducen a un efecto biológico determinado por el tipo de célula en proteínas G y la fosfolipasa C
cuestión.

• La cascada de señalización iniciada por resultados de unión receptor-ligando
en señal sustancial ampli fi cación y no requiere que el mensajero químico
original al entrar en la célula.
• La actividad global de la adenilato ciclasa se determina por las proporciones
pertinentes de G s y G yo- proteínas que se dividen, lo que, a su vez, depende de
los tipos de receptores que se hayan activado.
• los βγ- dímero de proteínas G tiene un papel moderador en la actividad de la
adenilato ciclasa y otras enzimas cuando está presente en concentración
relativamente alta.
5.3.1 efecto de la proteína G de la fosfolipasa C
Ciertos receptores se unen G s - o G yo - proteínas e iniciar una vía de
señalización que implica la adenilato ciclasa (sección
5.2). Otros receptores 7-TM se unen a la proteína G diff Erent llama GRAMO
q- proteína , que inicia una vía de señalización Erent diff. Th es vía implica la
activación o la desactivación de un enzima llamada fosfolipasa unida a la
membrana
C. Th e primera parte del mecanismo de señalización es la interacción de la
proteína G con un complejo receptor-ligando como se describe anteriormente
en la Fig. 5.1. Th es el tiempo, sin embargo, la proteína G es un G q- proteína en

• Las tirosina quinasas son enzimas que fosforilan el grupo fenol de residuos de lugar de una G s o G yo - proteínas, y por lo que una α q - subunidad se libera.

tirosina en sustratos de enzimas. treonina quinasas serina fosforilan los Dependiendo de la naturaleza de la lanzado α q - subunidad, la fosfolipasa C se

grupos alcohol de serina y treonina en sustratos de enzimas. En ambos casos, activa o desactiva. Si está activado, la fosfolipasa C cataliza la hidrólisis de difosfato

los resultados de fosforilación en los cambios conformacionales que afectan a de fosfatidilinositol ( PEPITA 2 )

la actividad de la enzima sustrato.

(Una parte integral de la estructura de la membrana celular) para ge- eRate los
dos mensajeros secundarios diacilglicerol ( DG) y trifosfato de inositol ( IP 3
• Las quinasas están involucradas en la desensibilización de los receptores.
)( Figuras 5.9 y 5.10).

NUEVA HAMPSHIRE 3
NUEVA HAMPSHIRE 3 NUEVA HAMPSHIRE 3

O PAG OO

O MARIDO O correos O

O
O O

sitio activo sitio activo

(cerrado) (abierto)

FIGURA 5.8 cambios conformacionales en una proteína, inducida por la fosforilación.

= GTP = GTP = PIB

1 2 3

Membrana celular Membrana celular Membrana celular

DG

PEPITA 2
SOCIEDAD ANÓNIMA SOCIEDAD ANÓNIMA SOCIEDAD ANÓNIMA
α α α

sitio activo sitio activo

(cerrado) IP 3 (cerrado)

FIGURA 5.9 Activación de la fosfolipasa C por una α q - subunidad.

 La transducción de señales que implica proteínas G y la fosfolipasa C sesenta y cinco

OCOR
ROCO

O
OH PAG
OCOR
HO OHO
O SOCIEDAD ANÓNIMA
PAG OH +
HO OCOR
HO OHO

HHHP
OH
HO OH
O
HHHP PAG

O IP 3 DG
PAG

PEPITA 2

FIGURA 5.10 La hidrólisis de PIP 2 en inositol trifosfato (IP 3) y diacilglicerol (DG) ( P = fosfato).

5.3.2 Acción del segundo mensajero:
diacilglicerol
Diacilglicerol es una molécula hidrófoba y permanece en la membrana de la
célula una vez que se forma (Fig. 5.11). Th ERE, se activa una enzima
llamada proteína quinasa C ( PKC) que se mueve desde el citoplasma a la
membrana celular y luego
cataliza la fosforilación de serina y treonina idues resinas de enzimas dentro
de la célula. Una vez fosforilada, estas enzimas se activan y catalizan
específi c reacciones dentro de la célula. Th ESE inducen ECTS eff como la
propagación del tumor, infl respuestas inflamatorias, contracción o relajación
del músculo liso, el aumento o disminución de la liberación de
neurotransmisores, el aumento o disminución de la excitabilidad neuronal, y
los receptores de desensitizations.

5.3.3 Acción del segundo mensajero: inositol

trifosfato
DG
Membrana celular
Inositol trifosfato es una molécula hidrofílica y se mueve en el citoplasma (Fig.

(cerrado) PKC
5.12). Th es obra de mensajería mediante la movilización de los iones de calcio
desde los depósitos de calcio en el retículo endoplásmico. Lo hace mediante la
Citoplasma
sitio activo unión a un receptor y la apertura de un canal iónico de calcio. Una vez que el
canal iónico está abierto, los iones de calcio fl ood la célula y activar las
proteínas quinasas dependientes de calcio que, a su vez, fosforilan y activan las
enzimas de células específi c. e iones de calcio liberado Th también se unen a
una proteína de unión de calcio llamada calmodulina , que a continuación activa
las proteínas quinasas dependientes de Dulin calmo- que fosforilan y activan
otras enzimas celulares. El calcio tiene ECTS eff sobre las proteínas contráctiles
y canales iónicos, pero no se puede cubrir estas ECTS eff en detalle en este
texto. ce Suffi con decir que la liberación de calcio es crucial para una gran
variedad de funciones celulares incluyendo el músculo liso y car- contracción
muscular diac, la secreción de las glándulas exocrinas, la liberación del
transmisor de los nervios, y la liberación de hormonas.
DG
Membrana celular

PKC

Citoplasma

Enzyme Enzyme
(inactivo) (activo) 5.3.4 Re-síntesis de difosfato de fosfatidilinositol

Reacción Una vez IP 3 y la DG de haber completado sus tareas, que se recombinan para
química
formar el difosfato de fosfatidilinositol (PIP 2 ). Por extraño que parezca, que no
FIGURA 5.11 La activación de la proteína quinasa C (PKC) por pueden ser vinculados directamente y ambas moléculas tienen que someterse a
diacilglicerol (DG). varias metabólica
66 Capítulo 5 Receptores y transducción de señales

Membrana celular

IP 3

Citoplasma

calmodulina

las reservas de
California 2+ calmodulina California 2+
calcio

Activación Activación

La proteína La proteína

quinasa quinasa

PAG
PAG PÁGINAS

Enzyme Enzyme Enzyme Enzyme

(inactivo) (activo) (inactivo) (activo)

Reacción Reacción
química química

FIGURA 5.12 La transducción de señales iniciada por el trifosfato de inositol (IP 3 ). (P = fosfato)

pasos antes de volver a la síntesis pueden ocurrir. Por ejemplo, IP 3 se

5.4 La transducción de señales que implica los
desfosforila en tres pasos a inositol que luego se utiliza como uno de los
bloques de construcción para la re-síntesis de PIP 2 ( Higo. 5,13). Se piensa receptores de quinasa vinculada
que sales de litio controlar los síntomas de la enfermedad maníaco
depresiva, interfiriendo con la síntesis de este complejo. Th ey lo hacen 5.4.1 La activación de proteínas y enzimas de
mediante la inhibición de la enzima responsable de la desfosforilación final
señalización
que conduce a la inositol monofosfatasa.
Hemos visto en la sección 4.8 que la unión de un mensajero químico a un
receptor quinasa ligada activa quinasa activi- dad tal que una reacción de

PUNTOS CLAVE
fosforilación se lleva a cabo en el propio receptor. En el caso de una
tirosina quinasa, esto implica la fosforilación de residuos de tirosina.
• GRAMO q - las proteínas se separaron en una manera similar a G s y G yo - proteínas.
Continuamos ahora esa historia.
los α q - subunidad afecta a la actividad de la fosfolipasa C que cataliza la hidrólisis de

PIP 2 para formar los mensajeros secundarios IP 3 y la DG.

Una vez que ha tenido lugar la fosforilación, los grupos de tirosina fosfolípidos
y las regiones alrededor de ellos actúan como sitios de unión para diversas
• DG permanece en la membrana celular y activa la PKC, que es una proteínas o enzimas de señalización. Cada región de la tirosina fosforilada se
serina-treonina quinasa. puede unir un específi co proteína o enzima de señalización. Algunas de estas

• IP 3 es una molécula polar que se mueve en el citoplasma y moviliza los iones de calcio. proteínas de señalización o enzimas convierten fosforilada a sí mismos una vez

Este último activan las proteínas quinasas, tanto directamente como a través de la que se unen y actúan como sitios de unión para las proteínas más aún mas de

unión de calcio calmodulina proteína. señalización (Fig. 5.14).

• IP 3 y la DG se combinan en una serie de medidas para reformar PIP 2 .

No toda la puede ser ocupado por las proteínas de señalización de una sola vez de
Las sales de litio se considera que interfieren con este proceso.
modo que el tipo de regiones de unión a fosfotirosina

PhosphataseIP 2 fosfatasa fosfatasa PI-4-quinasa PI-4-P 5-quinasa

IP 3 IP inositol synthasePI PEPITA PEPITA 2
CDP-DG PI

Las sales

de litio

Inhibición

FIGURA 5.13 Re-síntesis de PIP 2 de la propiedad intelectual 3( CDP-DG = citidina difosfato-diacilglicerol).

 La transducción de señales que implica los receptores de quinasa vinculada 67

ligando ligando ahora se activa y activa una serina-treonina quinasa llamada Raf , iniciando una
cascada de quinasa de serina-treonina que fi acabados con la activación de proteína
activada por mitógenos (MAP) quinasa . Th es fosforila proteínas y Vates dades

PAG
llamada factores de transcripción el que entra en el núcleo e iniciar la expresión
PAG

PAG PAG PAG PAG de genes que resulta en variabilidad respuestas rios, como la división celular.
PAG PAG PAG
PAG
Muchos cánceres pueden surgir de un mal funcionamiento de esta cascada de
PAG PÁGINAS PAG PÁGINAS
PÁGINAS PÁGINAS
señalización si las quinasas implicadas se activan de forma permanente, a pesar
de la ausencia de la señal inicial del receptor. Alternativamente, algunas células

FIGURA 5.14 La unión de proteínas (indicados por círculos oscuros) a los receptores de cancerosas sobre-expresan quinasas y, como resultado, la célula se convierte en

quinasa vinculada activados señalización. ( P = fosfato) super-sensible a las señales que estimulan el crecimiento y la división. En
consecuencia, la inhibición de los receptores quinasa o la orientación de la vía de
señalización está demostrando ser un método importante para el diseño de
nuevos fármacos para el tratamiento del cáncer (sección 21.6).
1-TM receptores

Activación

Las tirosina quinasa inherente o

guanilato ciclasa
asociado

Activación 5.4.2 Las proteínas G pequeñas

Señalización de proteínas GMPc

Th e proteína señal Ras se describe en la sección 5.4.1 es un ejemplo de una
clase de proteínas de señal de llamada pequeñas proteínas G , así llamados
porque son alrededor de dos tercios del tamaño de las proteínas G que se
IP3 γ
SOCIEDAD ANÓNIMA BRECHA Grb2 demás
quinasa describen en las secciones 5.1-5.3. Th ERE varias subfamilias de las pequeñas
proteínas G (Ras, Rho, Arf, Rab, y Ran) y que puedan ser vistos como algo

DG
similar a la α- subunidad de las grandes proteínas G. Como el
IP3
PIP 3

α- subunidades, que son capaces de unirse ya sea PIB en el estado ING resto- o
Ca 2+ PKC GTP en el estado activado. A diferencia de sus primos más grandes, las pequeñas

FIGURA 5.15 Vías de señalización de los receptores 1-TM. proteínas G no se activan mediante la interacción directa con un receptor, pero se
activan aguas abajo de la activación del receptor a través de proteínas
intermediarias, que se clasifican como de intercambio de nucleótidos guanina
de la señalización que resulta depende de que las proteínas de señalización hacer administrar
(factores GEF). Por ejemplo, la activación de Ras (como se muestra en la Fig.
al unirse a los receptores quinasa disponibles. Th ERE hay espacio en un texto 5.16) requiere la previa intervención de la proteína Grb2 después de la activación
introductorio a considerar lo que hace cada proteína de señalización, pero la del receptor. Como el α- subunidades, pequeñas proteínas G pueden autocatalyse
mayoría son el punto de partida para la fosforilación (quinasa) CAS- décadas a lo la hidrólisis del GTP unido para dar GDP unido, lo que resulta en un retorno al
largo de los mismos principios que las cascadas iniciadas por proteínas G (Fig. 5.15) estado de reposo. Sin embargo, este proceso puede ser acelerado por proteínas
de ayuda conocido como proteínas GTPasa activación
. Algunos factores de crecimiento activan un subtipo C del específi fosfolipasa C ( SOCIEDAD

ANÓNIMA γ), el cual catal- yses descomposición de fosfolípidos que conduce a la

generación de IP 3 y la posterior liberación de calcio por el mismo mecanismo como

se describe en la sección 5.3.3. Otras proteínas de señalización son '' adaptadores
químicos, que sirven para transferir una de señal desde el receptor a una amplia
variedad de otras proteínas, incluyendo muchos que participan en la división celular
y la erentia- diff. Por ejemplo, la acción principal de factores de crecimiento
es para estimular la transcripción de genes particulares a través de una
señalización de la quinasa en cascada (Fig. 5.16). Una proteína de señalización
llamada Grb2 se une a un sitio fosforilado c específi del complejo receptor-ligando
y se convierte en sí mismo phosphoryl- ciado. Una proteína de membrana
llamada Ras ( con una molécula unida de PIB ) interactúa con el complejo
receptor-ligando señal de proteínas y funciones de una manera similar a una
proteína G (es decir, el PIB se pierde y se gana GTP). Ras
(Brechas). Th es significa que el nivel de actividad de las pequeñas proteínas G
se encuentra bajo el control de freno y el acelerador simultánea implica GAP y
GEF, respectivamente.
D e las pequeñas proteínas G son responsables de estimular el crecimiento
celular y erentiation diff a través de vías de transducción de señales Erent diff.
Muchos cánceres están asociados con defectos en las pequeñas proteínas G,
tales como la proteína Ras.
Ras es el gen que codifica para la proteína Ras y es uno de los genes más
comúnmente mutado en tumores humanos. Th ERE son tres proteínas Ras en
células de mamífero: H-, K-, y N-Ras. Las mutaciones que dan como resultado la
incapacidad de estas proteínas para autocatalyse puede producirse la hidrólisis del
GTP unido. Como resultado, ellos permanecen activados de forma permanente, lo
que lleva, a su vez, con el crecimiento celular y la división permanente (véase
también la sección 21.6.1).
68 Capítulo 5 Receptores y transducción de señales

sitio de unión
Factor de
al receptor
crecimiento

(1) La unión de
el crecimiento de facto r Dimerizatio norte PAG hosphoryla ción

(2) Conformación

La tirosina cambio

quinasa sitio
OH HOOH
HO OH HOOH
HO OH HOOH
HO OH HOOH
HO
activo
(inactivo)

OH

Grb2
Unión
Ras Ras
OP OP

La unión y la
correos Grb2 correos
Grb2
fosforilación de Grb2
OPOP OP OPOP OP

correos correos
PIB
OPPOPO OPPOPO
GTP

PIB intercambiado
por GTP

Ras

Raf (inactivo) Raf (activo)

(inactivo) (activo)

MAP quinasa (inactivo) Mek Mapa quinasa (activo) Mek

Factor de transcripción factor de transcripción La transcripción de genes

(inactivo) (activo)

FIGURA 5.16 Desde el factor de crecimiento para la transcripción de genes. ( P = fosfato)

PUNTOS CLAVE
5.4.3 La activación de la guanilato ciclasa por los receptores

quinasa
Algunos receptores quinasa tienen la capacidad de catalizar la formación
de GMP cíclico de GTP . Th erefore, ambos son receptores y enzimas
(guanilato ciclasa). unida a la membrana del receptor d e / enzima se
extiende por la membrana celular y tiene un solo segmento
transmembrana. Tiene un sitio de unión al receptor extracelular y un
guanilato ciclasa sitio activo intracelular. Sus ligandos son α - Péptido
Natriurético Atrial y péptido natriurético cerebral .
• Los residuos de tirosina fosforilados en los receptores quinasa activada actúan
como sitios de unión para diversas proteínas de señalización y enzimas que se
activan a su vez.
• Las pequeñas proteínas G son de naturaleza similar a las proteínas G, la ligación de GDP
en el estado de reposo, y GTP en el estado activado. Son proteínas individuales activadas
por factores de intercambio de nucleótidos de guanina.
• Algunos receptores de quinasas tienen un sitio activo intracelular capaz de
catalizar la formación de GMP cíclico de GTP.

El GMP cíclico aparece para abrir los canales de iones de sodio en el riñón, la
promoción de la excreción de sodio.
 Otras lecturas 69

PREGUNTAS

HN

bolsillo O O

HN vacío
Thr766
MARIDO 2 NOC

Gln767 HN

OH
O
NH HN

O yo
MARIDO 3 do norte
Leu768 MARIDO MARIDO
MARIDO 3 do
O

norte norte 6
SH S.S 1
3 do
Met769 NNN OPO POO correosO
norte

O OO O O
O

S.S

MARIDO
OH OH H
interacción enlace de H

bolsillo 'ribosa'

1. Un modelo para el sitio de unión de ATP fue creado para endotelial 6. Una enzima fue producido por ingeniería genética, donde

factor de crecimiento (EGF) quinasa receptor, que muestra cómo se une ATP (véase varios de los residuos de serina se reemplazaron por residuos de glutamato. La

más arriba). Estructura I es conocida para inhibir la unión de ATP. Sugiero cómo la enzima mutada era permanentemente activa, mientras que la enzima natural era sólo

estructura que podría unirse. se activa en presencia de una proteína quinasa de serina-treonina. Dar una

explicación.
2. Las pequeñas proteínas G como Ras tienen una propiedad autocatalítico.

¿Qué significa esto y qué consecuencias podría haber (si los hay) se debe perder 7. Sugerir por qué las tirosina quinasas fosforilan tirosina

esa propiedad? residuos en sustratos de proteína, pero no residuos de serina o treonina.

3. farnesil transferasa es una enzima que cataliza la

unión de una cadena hidrófoba larga que la proteína Ras. ¿Qué le parece el 8. Los anticuerpos se han generado para reconocer el

propósito de esta cadena es y cuál sería el efecto si la enzima se inhibió? regiones extracelulares de los receptores de factor de crecimiento. La unión del

anticuerpo al receptor debería bloquear el factor de crecimiento de alcanzar su sitio de

unión y bloquear su señal. Sin embargo, se ha observado que los anticuerpos a veces
4. Tenga en cuenta las vías de transducción de señales que se muestran en
pueden desencadenar la misma señal que el factor de crecimiento. ¿Por qué ocurre
Higo. 5.16 e identificar dónde señal ampli fi cación se lleva a cabo.
esto? Consulte la sección 10.7.2 para ver la estructura de un anticuerpo.

5. La fosfodiesterasa cAMP enzima hidroliza cAMP a

AMPERIO. ¿Qué efecto tendría un inhibidor de esta enzima tener en la producción

de glucosa-1-fosfato (Fig. 5.7)?

OTRAS LECTURAS

Alexander, S, Mead, A., y Peters, J. (eds) (1998) Flor, D. (2000) Tratando de aclarar los GPCR. Química en

receptor de consejos y nomenclatura de los canales iónicos. Trends in Gran Bretaña Noviembre 25. Foreman, JC y Johansen, T. (eds) (1996) Libro de
Pharmacological Sciences 19 ( Suppl. 1), 1-98. Bikker, JA, Trumpp-Kallmeyer, S., y texto de
Humblet, C. (1998) Farmacología del receptor . CRC Press, Boca Raton, FL. George, SR, O'Dowd, BF, y

receptores acoplados a proteína G: modelos, mutagénesis, y el diseño de fármacos. Journal Lee, SP (2002) oligomerización del receptor de G-Proteincoupled y su potencial
of Medicinal Chemistry 41, 2911-2927. Cohen, P. (2002)-cinasas la proteína principales para el descubrimiento de fármacos. Nature Reviews Drug Discovery 1, 808-820.
objetivos de medicamentos de Kenakin, T. (2002) E fi cacia a los receptores acoplados a la proteína G.
el veinticinco del siglo primero? Nature Reviews Drug Discovery 1,

309-315. Nature Reviews Drug Discovery , 1, 103-110.

70 Capítulo 5 Receptores y transducción de señales

Neubig, RR y Siderovski, DP (2002) Los reguladores de la señalización de la proteína Takai, Y., Sasaki, T., y Matozaki, T. (2001) Pequeño proteínas GTPbinding. Physiological

G como nuevas dianas de medicamentos del sistema nervioso central. Nature Reviews 81, 153-208. Vlahos, CJ, McDowell, SA, y el Secretario, A. (2003) Las
Reviews Drug Discovery 1, 187-197. Schwarz, MK y Wells, TNC (2002) Nuevos quinasas como dianas terapéuticas para la insuficiencia cardíaca. Nature Reviews

productos terapéuticos que modulan las redes de quimioquinas. Nature Reviews Drug Discovery 2, 99-113.
Drug Discovery 1, 347-358.

Títulos para la lectura más general, se enumeran en p.763.

Tai, HJ, Grossmann, M., y Ji, I. (1998) receptores acoplados a la proteína G. Revista
de Química Biológica 273 , 17299-
17302, 17979-17982.
 6 Los ácidos nucleicos: estructura y

función

En este capítulo se discute la estructura y función de los ácidos nucleicos. La acción
del fármaco en los ácidos nucleicos se discute en el capítulo 9 y en otros capítulos
en todo el texto. Aunque la mayoría de los fármacos actúan en las estructuras de
proteínas, existen varios ejemplos de medicamentos importantes que actúan
directamente sobre los ácidos nucleicos. Th ERE dos tipos de ácido nucleico
DNA ( ácido desoxirribonucleico) y RNA ( ácido ribonucleico). Primero se
considera la estructura del ADN.
6.1 Estructura del DNA
Al igual que las proteínas, el ADN tiene una primaria, y ter- estructura terciaria
secundaria.
Erent diff. D e cuatro bases posibles son dos purinas (bicíclicos adenina y guanina
) y dos estructuras de pirimidina más pequeños ( citosina y timina ) ( Higo.
6.2).
D e bloques de construcción de nucleósidos se unen entre sí a través de
grupos fosfato que unen el 5 '- grupo hidroxilo de una unidad de nucleósido a la 3 '-
grupo hidroxilo de la siguiente (Fig. 6.3). Con sólo cuatro tipos de bloque de
construcción disponibles, la estructura primaria del ADN es mucho menos
variada que la estructura primaria de las proteínas. Como resultado, fue pensado
durante mucho tiempo que el ADN tenía sólo un papel menor que desempeñar
en la bioquímica celular, ya que era difícil ver cómo una molécula tan
aparentemente simple podría tener algo que ver con los misterios del código
genético. solución de e Th a este misterio radica en la estructura secundaria del
ADN.

6.1.1 La estructura primaria de DNA 6.1.2 La estructura secundaria de ADN

Th estructura e primaria del ADN es la forma en la que los bloques de Watson y Crick resolvieron la estructura secundaria del ADN mediante la
construcción de ADN están unidas entre sí. Mientras que las proteínas tienen construcción de un modelo que fi TTED todos los resultados experimentales
más de 20 bloques de construcción para elegir, el ADN tiene solamente cuatro conocidos. estructura e Th consiste en dos cadenas de ADN dispuestos juntos
de la nucleósidos desoxiadenosina , desoxiguanosina , desoxicitidina , y desoxitimidina
en una doble hélice de diámetro constante (Fig. 6.4). Th e doble hélice tiene un
surco mayor y un surco menor, que son de cierta importancia para la acción de
(Fig. 6.1). Cada nucleósido se construye a partir de dos com- ponentes-a desoxirribosa
varios agentes contra el cáncer que actúan como intercaladores (sección 9.1).
azúcar y una base. e azúcar Th es la misma en todos los cuatro nucleósidos
y sólo la base es

O NUEVA HAMPSHIRE 2

CH 3
norte NH 2 HN HN

NN MARIDO 2 norte norte

NNO O N O NN
norte

O O
O O
HO HO HO HO

HH HH
HH HH
OH HH
MARIDO OH HH
MARIDO
OH HH
MARIDO OH HH
MARIDO

desoxiadenosina desoxiguanosina desoxitimidina desoxicitidina

FIGURA 6.1 -Nucleósidos los componentes básicos del ADN.

72 Capítulo 6 Los ácidos nucleicos: estructura y función

NUEVA HAMPSHIRE 2 NUEVA HAMPSHIRE 2 O

7 7 4
1 CH 3
norte
1 norte HN NO norte 5 HN
5
56 8 8
56
23 6 234 6
2 NUEVA
9 HAMPSHIRE 2 NH 9
norte
4 MARIDO 2 norte norte
4 NH O O NUEVA HAMPSHIRE
1 1
3 3

adenina guanina citosina timina

Las purinas pirimidinas

FIGURA 6.2 e bases de ácido nucleico Th para el ADN.

NUEVA HAMPSHIRE 2

5 'Fin
norte
adenina (A)
Base
5
NNN O
O
1
NUEVA
2 HAMPSHIRE

3
HHO
OO
OHH MARIDO norte
Citosina (C)
O
O Base
norte O O
O

O
S.S
O
OHH MARIDO NH
guanina (G)
Base
NNN NUEVA HAMPSHIRE 2 OPOO O
OPOO O

O
HHO
Yo OO
OHH MARIDO NH
Timina (T)
OPO
OPO Base
norte O O
OPO
OPO O

3 S.S
O
OHH MARIDO

3 Fin

FIGURA 6.3 La unión de los nucleósidos a través de grupos fosfato.

E l estructura se basa fundamentalmente en el emparejamiento de bases de
ácidos nucleicos entre las dos cadenas. pares de adenina con timina mediante
dos enlaces de hidrógeno, mientras que los pares de guanina con la citosina
mediante tres puentes de hidrógeno. Th nosotros, una base de purina bicíclico
siempre está vinculada con una base de pirimidina monocíclico más pequeño
para permitir que el diámetro constante de la doble hélice. Th e doble hélice se
estabiliza aún más por el hecho de que los pares de bases se apilan una
encima de la otra, lo que permite interacciones hidrófobas entre las caras de los
anillos heterocíclicos. D e polar esqueleto de azúcar-fosfato se coloca a la
fuera de la estructura y puede formar interacciones polares favorables
con agua.
Th e hecho de que la adenina siempre se une a la timina y la citosina
siempre se une a la guanina significa que las cadenas son
complementarias entre sí. Ahora es posible ver cómo replicación ( la
copia de la información genética) es factible. Si la doble hélice se
desenreda, una nueva cadena se puede construir en cada una de las
cadenas originales (Fig. 6.5). En otras palabras, cada una de las cadenas
originales actúa como una plantilla para la construcción de una nueva e
idéntica doble hélice. e Th mecanismo por el cual esto
 Estructura del DNA 73

o
10 A

GCT

UN

C GA TA T
GRAMOdo
surco
CG
T UN
mayor TA POO
H2N O
ejército de reserva
O me
ejército de reserva 3
correos NN
OO NH norte
Surco deejército
reserva 5
norte norte
menor OO O
TA GC en C o 5 O
34 A OP

3 O
TA
TAG O NNO OO
correos N NH 2 HN 3
OO
O NH
norte
norte
O 5
5 O 2N
O
do GRAMO OPOO
3
O
Emparejamiento de bases
GGCCG
TC TC AA correos
G OO

ejército de reserva

ejército de reserva

ADN de doble hélice

FIGURA 6.4 e estructura secundaria Th de ADN.

Modelo

Modelo

replicación

ADN de

ADN de doble hélice Nueva cadenas de hélices de ADN hija

FIGURA 6.5 La replicación de las cadenas de ADN.

se lleva a cabo se muestra en las figuras 6.6 y 6.7. cadena de plantilla de correo
Th tiene bases expuestas que pueden pares de bases por hidro unión con Gen
individuo nucleótidos en forma de trifosfatos. Una vez que un nucleótido tiene
bases apareadas, una reacción catalizada por enzimas se lleva a cabo donde el
nuevo
de nucleótidos se empalma a la creciente cadena complementaria con la
pérdida de un grupo-difosfato actuando este último como un buen grupo
saliente. Tenga en cuenta que el proceso implica cada nuevo nucleótido
reaccionar con la 3 ' final de la cadena en crecimiento.
74 Capítulo 6 Los ácidos nucleicos: estructura y función

cadena de cadena de cadena de

5 x 5 5
plantilla plantilla plantilla
UN

ACTCG ACTCG ACTCG

x-
x
Trinucleótidas UN
3
GC GC GCA
3 3

3 5 3 5 3 5 cadena

La creciente cadena de cadena en

en crecimiento

crecimiento

Enfoque de trinucleótidos Emparejamiento de bases Catalizada por enzimas 'splicing'

FIGURA 6.6 apareamiento de bases de un trinucleótido y la extensión de la creciente cadena de ADN.

OO OO

O OH OH
OPO correos OPO
2 norte 2 norte

NND NND
NH norte OO NH norte OO
N norte O N norte O
O O
O O
correos
correos

OH OPO O
NUEVA HAMPSHIRE 2 NUEVA HAMPSHIRE 2O O
norte

OOPOO OOPOO
NNO HN NNO HN
norte O norte O
O me O me
O MARIDO 2 norte OO MARIDO 2 norte
ONO ONN

POO POO
OPOOOPOO OPOOOPOO

cadena en crecimiento cadena en crecimiento

Modelo Modelo

Figura 6.7 Mecanismo por el que un nucleótido está vinculada a la creciente cadena de ADN.

Ahora podemos ver cómo la información genética se transmite de una
generación a otra, pero es menos evidente cómo los códigos de ADN para las
proteínas. ¿Cómo puede sólo cuatro nucleósidos código de tabla de ácidos más de
20 aminoácidos? e Th respuesta radica en el código de tripletes . En otras
palabras, un aminoácido se codifica no por un nucleótido, sino por un conjunto de
tres. Th ERE son 64 (4 3 ) formas en las que cuatro nucleótidos se pueden organizar
en grupos de tres, más que suficiente para la tarea requerida. Apéndice 2 muestra
el código genético estándar para los trillizos sos variable. Veremos cómo se
interpreta el código para producir una proteína en la sección 6.2.
6.1.3 La estructura terciaria de la DNA
Th e estructura terciaria de ADN es a menudo en descuidado o ignorado, pero es
agentes antibacterianos (sección 9.2) y a varios agentes cer antican-
(secciones 9.1 y 9.2). El ADN es una molécula extremadamente larga: tanto
tiempo, de hecho, que no encajar en el núcleo de la célula si es que existía
como una molécula lineal. Tiene que ser enrollado en una forma
tridimensional más compacto que poder fi t en el núcleo, un proceso conocido
como
superenrollamiento . Th es proceso requiere la acción de un ily fa- de enzimas
llamadas topoisomerasas , que puede tejer relaciones acto aparentemente
imposible de pasar un tramo de la hélice del ADN a través de otro tramo. Th ey
hacer esto mediante temporariamente escindir uno, o ambos, hebras de la hélice
de ADN para crear un vacío temporal, a continuación, volver a sellar la hebra (s)
una vez que el cruce ha tenido lugar. Superenrollamiento permite el
almacenamiento efi ciente de ADN, pero el ADN tiene que ser desenrollado de
nuevo si la replicación y transcripción (sección

importante para la acción del grupo de las quinolonas de 6.2.2) van a tener lugar. Si desenrollar no tuvo lugar, el
 Estructura del DNA 75

proceso de devanado (catalizada por helicasa enzimas) que tiene lugar
durante la replicación y la transcripción daría lugar a aumento de la tensión
debido al aumento de superenrollamiento del ADN de doble hélice restante.
Se puede demostrar el principio de esta tirando de los extremos de la cuerda
o de sisal. D e mismas enzimas topoisomerasas son responsa- bles para
catalizar el proceso de desenrollado, por lo que la inhibición de estas
enzimas podría ef caz bloquear la transcripción y replicación.
topoisomerasa II es una enzima de mamífero que es crucial para la
replicación reflexivo eff de ADN. enzima e Th se une a las partes de ADN en el
que dos regiones de la doble hélice se encuentran en proximidad cercana (Fig.
6.8). enzima e Th se une a una de estas dobles hélices de ADN y los residuos
de tirosina se utilizan para nick ambas hebras del ADN (Fig. 6.9). Esta
resultado en un enlace covalente temporal entre la enzima y el 5 resultante ' final
de cada hebra, estabilizando así el ADN. e hilos Th están tirados en
direcciones opuestas para formar un hueco a través del cual se puede
pasar la región de ADN intacto. E l enzima entonces se vuelve a sellar las
hebras y se va.
La topoisomerasa I es similar a la topoisomerasa II en que alivia la
tensión torsional del ADN superenrollado du- rante la replicación,
transcripción, y la reparación del ADN. Th e rencia diff es que escinde
sólo una hebra de ADN, mientras que la topoisomerasa II escinde ambas
cadenas. enzima e Th cataliza un catión transesterifi reversible reacción
ción similar a la mostrada en la Fig. 6,9, pero en el que el residuo de
tirosina de la enzima está ligada a la 3 ' final de fosfato de la cadena de
ADN en lugar de los 5 ' fin. Esta

1 2
Topo II

Tyr Topo II

Tyr
ADN
5 3

3 5

Tyr

re N / A Topo II

3 4

Topo II
Topo II

Tyr
Tyr
5 3 5 3
3 5 3 5

Tyr

Topo II

FIGURA 6.8 Método por el cual la topoisomerasa II cataliza la de cruce de las cadenas de ADN. Tenga en cuenta que los mismos enlaces de enzimas

covalentemente a cada hebra de ADN.

O
Base

O MARIDO MARIDO
Base HHH
OH
Topo II
Topo II
MARIDO MARIDO
HHH HO Tyr
O Tyr
O

O5 O O5 O
Base Base
S.S S.S

HOPO MARIDO HOPO MARIDO

HO HO

3 3

FIGURA 6.9 Mecanismo por el que la topoisomerasa II divide una cadena de ADN.
76 Capítulo 6 Los ácidos nucleicos: estructura y función
crea un "complejo escindible 'con una pausa de una sola hebra. La relajación de la
tensión torsional se lleva a cabo ya sea por permitiendo ing la cadena intacta para
pasar a través de la muesca o por la rotación libre de la DNA alrededor de la
hebra no escindido. Una vez que la tensión torsional se ha aliviado, la enzima se
reincorpora a la hebra de ADN escindido y se va.
La topoisomerasa IV es una enzima bacteriana que lleva a cabo el
mismo proceso que la enzima de mamífero topo- isomerasa II y es un
objetivo importante para los agentes fl uoroqui- nolone antibacterianos
(sección 9.2).
6.1.4 cromatinas
Hasta ahora, nos hemos centrado en la estructura del ADN. Sin embargo, el
ADN no es una macromolécula aislado dentro del núcleo de la célula. Se
asocia con una variedad de proteínas, tales como histonas, en una estructura
llamada cromatina (Fig. 21.5). e histonas Th y el ADN asociado forman una
estructura llamada nucleosoma , que se produce regularmente a lo largo de
la longitud de la cromatina y juega un papel crucial en la regulación de la
transcripción del ADN (sección 21.7.3).
6.1.5 polimorfismo genético y la medicina
personalizada
Th proceso de correo de la replicación no es 100% perfecto y, a ve- ces, se
puede producir una mutación. Si la mutación no ser fatal, que se llevará de
generación en generación. Th es conduce a los individuos Erent diff que
tienen secuencias de genes Erent sutilmente diff. En promedio, hay una
refe- diff de un par de bases en cada mil pares de bases entre los
individuos. Th se es conocido como genético polimorfismo.
A medida que las bases de ácidos nucleicos actúan como el código de aminoácidos
de las proteínas, un refe- diff de este nivel da lugar a un ácido amino diff Erent que
se introduce en una proteína, que puede o no puede tener un eff ect sobre la
actividad de esa proteína o función ción (secciones 3.5.6 y 4.11). polimorfismo
genético tiene consecuencias importantes con respecto a la la susceptibilidad de los
individuos a la enfermedad y también a los tipos de terapias con fármacos que son
más adecuados para las personas. Un conocimiento detallado del genoma de un
paciente abre la posibilidad de predecir y la prevención de enfermedades, así como
la elección de la terapia de droga ideal para que debe ocurrir una enfermedad del
paciente. Th se es conocido como Medicina personalizada ( ver también secciones
15.1.4.4 y 21.1.11).
PUNTOS CLAVE
• La estructura primaria del ADN consiste en una cadena principal de fosfato de
azúcar con bases de ácidos nucleicos unidos a cada resto de azúcar. El azúcar
es desoxirribosa y las bases son adenina, timina, citosina y guanina.
• La estructura secundaria de ADN es una doble hélice, donde las bases de los
ácidos nucleicos se apilan en el centro y emparejados
tales que los pares de adenina con timina y guanina con citosina pares. El
enlace de hidrógeno es responsable de la basepairing y hay interacciones de
van der Waals entre las pilas de bases. polares se producen interacciones
entre el esqueleto de fosfato de azúcar y el agua circundante.
• La doble hélice de ADN está enroscada en una estructura terciaria. El bobinado
y desbobinado de la doble hélice requiere enzimas topoisomerasa.
• La copia de ADN de una generación a la siguiente es conocido como replicación.
Cada hebra de una molécula de ADN matriz actúa como plantilla para una nueva
molécula de ADN hija.
• El código genético se compone de bases de ácidos nucleicos, que se leen en grupos
de tres durante la síntesis de una proteína. Cada triplete de bases códigos para un
aminoácido específico.
• Conocer el genoma de un paciente abre la posibilidad de predicción de la enfermedad y
la identificación de las mejores terapias para ese individuo. Esto se conoce como la
medicina personalizada.
6.2 El ácido ribonucleico y la síntesis de proteínas
6.2.1 Estructura del RNA
Th estructura e primario de RNA es la misma que la de ADN, con dos
excepciones: ribosa ( Higo. 6,10) es el componente de azúcar en lugar
de desoxirribosa , y uracilo
(Fig. 6.10) sustituye a la timina como una de las bases.
Apareamiento de bases entre bases de ácido nucleico puede ocurrir en RNA,
con emparejamiento adenina en uracilo y citosina en parejas ing a la guanina. Sin
embargo, la vinculación se realiza entre las bases dentro de la misma cadena y que
no se produce en toda la longitud de la molécula (por ejemplo, la Fig. 6.11). Th
erefore, el ARN no es una doble hélice, pero tiene regiones de estructura
secundaria helicoidal.
Debido a que la estructura secundaria no es uniforme a lo largo de la longitud
de la cadena de ARN, más variedad está permitido en la estructura terciaria del
ARN. Th ERE son tres tipos principales de moléculas de ARN con funciones
celulares diff Erent: men- ARN Senger ( mRNA), ARN de transferencia ( tRNA), y
ARN Somal ribosoma ( rRNA). Th ESE tres moléculas son cruciales para el
proceso por el cual la síntesis de proteínas se lleva a cabo. Aunque el ADN
contiene el código genético para las proteínas, no puede producir estas proteínas
directamente. En lugar de ello, el ARN
NH
O OH HO
HN
S.S
S.S
O O
OH OH
ribosa uracilo
FIGURA 6.10 La ribosa y uracilo.
 El ácido ribonucleico y la síntesis de proteínas 77

3 fin

Aminoácidos

California

5 final do

GGUGG Aminoácidos

T UCC
T U
GRAMO CGC
do
UH 2 do GRAMO
do MGU
GRAMO
Georgia
CGG
T CG
California GG GC
GRAMO
do GRAMO
do do
AG TU ps
UH 2
UH
Georgia UH 2
m 2 GRAMO ACCA
GGAGGCCUC

CIG

representación
simplificada
GRAMO

CU ps

T mi
CIG

anticodón

FIGURA 6.11 Levadura alanina ARN de transferencia. líneas onduladas Th e indican el apareamiento de bases (IF = methylinosine, UH 2 = dihidrouridina, T

= ribotimidina, Sal = pseudouridine, Mg = methylguanosine, m 2 G = dimethylguanosine).

asume ese papel, que actúa como el "hombre medio" crucial entre el la síntesis de una proteína-proceso conocido como traducción. Th e ribosoma se

ADN y las proteínas. Th se ha denominado une a un extremo de la molécula de ARNm, entonces se desplaza a lo largo de ella

dogma central de la biología molecular. hasta el otro extremo, permitiendo que el código triplete para ser leído, y catalizar la

Th e bases adenina, citosina, guanina, uracilo y se encuentran en el construcción de la molécula de proteína un aminoácido a la vez (Fig. 6.13). Th ERE

ARNm y son predominantes en rRNA y tRNA. Sin embargo, tRNA también son dos segmentos a los ribosomas de mamíferos, conocido como las subunidades

contiene un número de nucleicos menos comunes ácidos véase, por 60S y 40S. ESE Th se combinan para formar un ribosoma 80S. En las células

ejemplo, Fig. 6.11. bacterianas, los ribosomas son más pequeños y se componen de subunidades 50S y

30S se combinan para formar un ribosoma 70S. Th términos e 50S, etc se refieren a

las propiedades de sedimentación de las diferentes estructuras. ESE Th se

6.2.2 Transcripción y traducción
relacionan cualitativamente al tamaño y masa, pero no cuantitativamente, es por eso

Una molécula de ARNm representa una copia de la información genética que una subunidad 60S y 40S una pueden combinar para formar un ribosoma 80S.

requerida para sintetizar una única proteína. Su función es llevar el

código requerido fuera del núcleo de un orgánulo celular llamado retículo
endoplásmico .
Th es donde está la producción de proteínas tiene lugar en los cuerpos
llamados ribosomas . E l segmento de ADN que es cobre IED se llama un
gen y el proceso en cuestión se llama
transcripción . e DNA Th dobles desenreda hélice y el tramo que está
expuesta actúa como una plantilla en la que el ARNm puede ser construido
(Fig. 6.12). Una vez completado, el ARNm sale del núcleo que buscar a un
ribosoma, mientras que el ADN vuelve a su forma de doble hélice.
Ribosomal RNA es el más abundante de los tres tipos de RNA y es
el componente principal de los ribosomas. Th ESE puede ser visto
como los lugares de producción de
rRNA es el componente principal de cada subunidad, Making hasta dos
terceras partes de la masa del ribosoma. e 40S Th subu- nit contiene una gran
molécula de ARNr junto con varias proteínas, mientras que la subunidad 60S
contiene tres diff ER- ent ARNr de tamaño; de nuevo, con las proteínas que
acompañan. D e la estructura secundaria del rRNA incluye amplias extensiones de
apareamiento de bases ( dúplex regiones ), lo que resulta en una estructura
terciaria Ned defi bien. Se pensó en un momento que ARNr sólo jugó un papel
estructural y que las proteínas estaban actuando como enzimas para catalizar la
traducción. moléculas de ARNr e Th tienen ciertamente un papel estructural
fundamental, pero
78 Capítulo 6 Los ácidos nucleicos: estructura y función

ARNm

ARNm

ADN de doble hélice ADN descifrado para Transcripción

revelar gen

FIGURA 6.12 Formación de mRNA.

Su

proteína en

crecimiento

Su OH Su
GUA

ribosoma transferencia de

60S péptidos

Un sitio
GCU GCUGUA GCUGUA
ARNm CGACAUGUC ARNm CGACAUGUC ARNm CGACAUGUC

40S

OH

val

ARNt

Su Su

CAG

translocación

Un sitio
P-sitio
GUA GUA

ARNm CGACAUGUC GCU ARNm CGACAUGUC

FIGURA 6.13 La síntesis en la traducción de proteínas.

 enfermedades genéticas 79

Ahora se sabe que, en lugar de las proteínas ribosomales, tienen la leer. Th nueva proteína E se libera entonces del ribosoma, que ya está
importante función catalizadora. De hecho, los sitios clave en el ribosoma, disponible para iniciar el proceso de nuevo. proceso general e Th de la
donde tiene lugar la traducción se componen casi en su totalidad de ARNr. transcripción y la traducción se resume en la Fig. 6.15.
e Th proteínas son estructuras alargadas, que serpentean a través tura del
ribosoma estructura y se cree que tienen un fi ne-tuning ef ect en el proceso
de traducción.
6.2.3 ARN nuclear pequeño

ARN de transferencia es la unidad fundamental adaptador que une el código
de tripletes de ARNm de un ácido amino c específi. Th se significa que tiene
que ser un tRNA diff Erent para cada aminoácido. Todos los tRNAs son de hoja
de trébol en forma, con dos regiones de unión diferentes en los extremos
opuestos de la molécula (ver Fig. 6.11). Una región de unión es para el
aminoácido, en donde un ácido c amino específi está unido covalentemente a
Popa er transcripción, moléculas de ARNm son con frecuencia ed modifi
antes de la traducción se lleva a cabo. Th se trata de una operación de
empalme, donde la sección media del mRNA (el intrón ) Se extraen y los
extremos de la molécula de ARNm (el exones ) se empalman juntos (Fig.
6.16).
Splicing requiere la ayuda de un complejo de ARN-proteína llamada spliceosoma

un residuo adenosil terminal. E l otro es un conjunto de tres bases de los ácidos . Las moléculas de ARN e Th participan en este complejo se denominan pequeños

nucleicos ( anticodón ) que aparearse con un triplete complementario en la ARN nucleares ( snARNs). Como su nombre indica, estos son pequeñas moléculas

molécula de ARNm. A tRNA que tiene un anticodón particular, siempre tendrá el de ARN con menos de 300 nucleótidos que se producen en el núcleo de la célula. Th

mismo aminoácido unido a él. función de correo de los snARNs en el spliceosome es aparearse con segmentos

particulares de ARNm de tal manera que el ARNm puede ser manipulado y se alinea

correctamente para el proceso de empalme. Los sitios de empalme son reconocidos

Veamos ahora la forma en que la traducción tiene lugar en más detalle. por sus secuencias de nucleótidos, pero, en ocasiones, una mutación en el ADN

Como rRNA viaja a lo largo de ARNm, que revela los códigos de triplete en puede introducir un nuevo sitio de empalme en otro lugar de ARNm. Th es resultados

mRNA uno por uno. Por ejemplo, en la Fig. 6.13 el código CAU triplete se en el empalme defectuoso, un ARNm alterado y una proteína defectuosa. Alrededor

revela junto con un sitio de unión asociado llamado un sitio. Th e A representa del 15% de las enfermedades genéticas se piensa que es debido a mutaciones que

aminoacilo y se refiere al aminoácido unido en el tRNA entrante. Cualquier resultan en el empalme defectuoso.

molécula de ARNt puede entrar en este sitio, pero se acepta sólo si tiene el
anticodón necesaria capaz de apareamiento de bases con el triplete expuesta
en el ARNm. En este caso, tRNA que tiene el anticodón GUA es aceptada y
trae consigo el aminoácido histidina. cadena de correo péptido Th que se ha
creado hasta ahora se une a una molécula de ARNt que se une al sitio de
unión P (que abarcan la peptidil). Un proceso de ING injerto tiene lugar 6.3 enfermedades genéticas
entonces, catálogos lisadas por ARNr, donde la cadena peptídica se
transfiere a histidina (Fig. 6.14). e ARNt Th que ocupan el sitio de unión P Un número de enfermedades genéticas se deben a anormalidades
ahora se aparta y el desplazamiento a lo largo de ARNm al ribosoma s para genéticas que dan lugar a la no expresión de las proteínas particular o la
revelar la siguiente triplete (un proceso llamado translocación ), expresión de proteínas defectuosas. Por ejemplo, albinismo es una
condición en la piel, cabello y ojos carecen de pigmento; se asocia con una
defi ciencia de una enzima llamada tirosinasa . Th es una enzima que
contiene cobre que cataliza las dos primeras etapas en la síntesis
y por lo que el proceso continúa hasta que toda la hebra se

proteína
NH

R
HORA 2N HORA HN HROH
proteína HN

La OH O
HO HO OH HO HO
MARIDO HO MARIDO HO MARIDO H MARIDO HO
+

OO OO OO OO
adenina adenina adenina adenina
correos correos correos correos

O ARNt O ARNt O ARNt O ARNt

FIGURA 6.14 Mecanismo por el cual una proteína de crecimiento, se transfiere a la siguiente aminoácido.
80 Capítulo 6 Los ácidos nucleicos: estructura y función
ADN
ARNm
Transcripción
Núcleo
Proteína
FIGURA 6.15 La transcripción y la traducción.
exón Intrón exón
empalme
ARNm
Transcripción
FIGURA 6.16 Empalme de ARN mensajero (ARNm).
del pigmento melanina . Más de 90 mutaciones del gen de la tirosinasa se han
identifi cado que conducen a la expresión de la enzima inactiva. Las
mutaciones en el resultado código de tripletes en uno o más aminoácidos
están alterados en la proteína resultante, y si estos aminoácidos son
importantes para la actividad de la enzima, se pierden actividad. Las
mutaciones que alteran los aminoácidos en el sitio activo son los más
propensos a resultar en la pérdida de actividad.
fenilcetonuria es una enfermedad genética causada por la ausencia o defi
ciencia de una enzima llamada fenilalanina hidroxilasa . Th es la enzima que
normalmente convierte la fenilalanina en tirosina. En su ausencia los niveles
en sangre de alanina fenil- elevan sustancialmente, junto con los productos
metabólicos alternativos, tales como fenilpiruvato. Si no se trata, esta
enfermedad da lugar a un retraso mental grave.
ARNm
ribosoma
Aminoácidos
ARNt
Traducción
segmento extirpado
+
ARNm procesado
Traducción
hemofilias se heredan las enfermedades genéticas en las que uno de los
factores de coagulación de la sangre es defi ciente. Th es resultado en una
hemorragia incontrolada er popa lesión. En el pasado, las personas con esta
enfermedad eran propensos a morir en su juventud. Hoy en día, con el
tratamiento adecuado, aff eja los individuos deben tener una expectativa de vida
Tancy normal. El tratamiento en casos severos implica la infusión intravenosa
regular con el factor de coagulación relevante. En los casos menos graves, las
transfusiones se pueden utilizar cuando una lesión ha tenido lugar. los factores de
coagulación e Th solían ser típicamente derivan de plasma de la sangre, pero
esto significa que las personas con hemofilia eran susceptibles a la infección a
partir de muestras de sangre infectadas. Por ejemplo, durante el período
1979-1985 más de 1200 personas en el Reino Unido se infectaron con el VIH
como resultado de recibir sangre infectada

productos. Por la misma razón, también eran propensos a las infecciones virales
causadas por la hepatitis B y C. Durante la década de 1990, la tecnología de
ADN recombinante (sección 6.4) éxito los factores de coagulación de la sangre
producidas cessfully y estos ahora son los agentes de elección, ya que eliminan
el riesgo de la infección. Desafortunadamente, algunos pacientes producen una
respuesta inmune al factor de infusión, que puede pre- cluir su uso. En la
actualidad, los ensayos clínicos en marcha para probar si la terapia génica
puede utilizarse como un tratamiento. Th se supone la introducción de un gen
que codifique para el factor de coagulación normal, de modo que puede ser
producido naturalmente en el cuerpo (sección 6.4).
Distrofia muscular es otra enfermedad genética que aff eja 1 de cada 3500
varones y que se caracteriza por la ausencia de una proteína llamada distrofina .
Th se tiene un importante papel estructural en las células y sus resultados de
ausencia en el deterioro muscular. La terapia génica también se está con-
considerarse para esta enfermedad.
Muchos cánceres están asociados con defectos genéticos que dan lugar a
defectos de señalización moleculares en la célula. Th se está cubierto con más
detalle en el capítulo 21.
6.4 La biología molecular y la ingeniería
genética
En los últimos años, los rápidos avances en biología molecular e ingeniería
genética han tenido repercusiones importantes para la química médica.
Ahora se que sea posible clonar genes específi cos e incluir estos genes
en el ADN de las células de crecimiento rápido tales que las proteínas
codificadas por estos genes se expresan en la célula modifi cado. Como
las células son de crecimiento rápido esto conduce a una cantidad no
puede NIFI señal de la proteína deseada, lo que permite su aislamiento,
purifi cación, y de determinación estructural. Antes de disponer de estas
técnicas, que era muy culto cultad para aislar y purificar muchas proteínas
'Extremos pegajosos
Enzima
restrictiva GRAMO
CAATAC G
T TAAG do T TAA
ADN
Enzima
restrictiva GRAMO
CAATAC G
T TAAG do T TAA
ADN
FIGURA 6.17 la tecnología del ADN recombinante.
La biología molecular y la ingeniería genética 81
a partir de sus células madre debido a las pequeñas cantidades pre- sentes.
Incluso si se ha realizado correctamente, los bajos rendimientos inherentes en el
proceso hicieron un análisis de tura y el mecanismo de acción de culto muy difí
estructura de la proteína. Los avances en biología molecular y técnicas de ADN
recombinante han cambiado todo eso.
tecnología de ADN recombinante permite a los científicos manipular
secuencias de ADN para producir ADN modifi carse o completamente nuevo
ADN. tecnología e Th hace uso de enzimas naturales llamados enzimas de
restricción y ligasas
(Fig. 6.17). enzimas de restricción e Th reconocer una secuencia particular de
bases en cada molécula de ADN y se separaron un enlace fosfato c azúcar
específi en cada hebra de la doble hélice. Con algunas enzimas de restricción,
la ruptura no es una limpia; hay una superposición entre las dos cadenas
resultantes en una cola de bases no apareadas en cada lado de la ruptura. e Th
bases de cada cola son complementarios y todavía pueden reconocerse entre
sí, por lo que se describen como "pegajoso" termina. proceso e mismo Th se
lleva a cabo sobre una molécula diferente de ADN y las moléculas de ambos
procesos se mezclan juntos. A medida que estas moléculas Erent diff tienen los
mismos extremos pegajosos, que se reconocen entre sí de tal manera que el
apareamiento de bases se lleva a cabo en un proceso llamado recocido . se
forma el tratamiento con la enzima ligasa entonces repara el esqueleto de
fosfato de azúcar y una nueva molécula de ADN.
Si la molécula de ADN de interés no tiene la secuencia requerida
reconocido por la enzima de restricción, un ADN sintético enlazador ese hace
contener la secuencia se puede añadir a cualquiera de los extremos de la
molécula usando una enzima ligasa. Th se se trata luego con la enzima de
restricción como antes (Fig. 6.18).
Th ERE muchas aplicaciones para esta tecnología, una de las cuales es la
capacidad de amplificar y expresar el gen para una proteína de humano en
particular en células bacterianas. Con el fin de hacer esto, es necesario
introducir el gen de la célula bacteriana. Th se se realiza mediante el uso de un
adecuado vector que llevará el gen en la célula. Th ERE son dos adecuados
AATAC AATAC
GRAMO T TAA G
Recocido
+
AATAC AATAC G
CG
GRAMO T TAA GC
enzima ADN
ligasa
AATAC
T TAA G
AATAC G
CG
T TAA GC
82 Capítulo 6 Los ácidos nucleicos: estructura y función
fragmento de ADN ligasa
CCGAAT TCGGC
o vector
CCGAAT TCGGC
CGAATTCCG
enlazador sintético
FIGURA 6.18 Colocación de secuencias reconocidas por enzimas de restricción.
Enzima Humano
ligasa
restrictiva
ADN
El ADN del vector
FIGURA 6.19 La inserción de un gen humano en un plásmido por
la tecnología del ADN recombinante.
vectors- plásmidos y bacteriófagos . Los plásmidos son segmentos de ADN
circular que se transfieren de forma natural entre las células bacterianas y
permitir el intercambio de información genética. Debido a que el ADN es
circular, el ADN repre- resentir un gen humano puede ser insertado en el ADN
del vector por los mismos métodos descritos anteriormente (Fig. 6.19). Los
bacteriófagos (fagos para abreviar) son virus que infectan a las células
bacterianas. Th ere una variedad de estos, pero las mismas técnicas de ADN
recombinante se pueden utilizar para insertar ADN humano en el ADN viral.
Sea cual sea el vector se utiliza, el ADN se modifi cada introdu- cido en la
célula bacteriana en el que se clonó y amplificación fi cado (Fig. 6.20). Por
ejemplo, una vez que un fago que contiene modifi ácido nucleico ed infecta una
célula bacteriana, el fago se hace cargo de la maquinaria bioquímica de la célula
para producir múltiples copias de sí mismo y su ácido nucleico.
Los genes humanos se pueden introducir en células bacterianas tales
que el gen se incorpora en el ADN bacteriano y se expresó como si fuera
propia las bacterias 's. Th se permite la producción de proteínas humanas
en mucho mayor canti- dad de lo que sería posible por cualquier otro
medio. Tal
fago
E coli
FIGURA 6.20 infectar Escherichia coli con un fago.
fragmento de ADN
CCGAAT TCGGC
CGAATTCCG o vector CGAATTCCG
Enzima
restrictiva
AAT TCGGC fragmento de ADN CCG
CG o vector AATTCCG
proteínas podrían utilizarse con fines medicinales, como se describe en las
siguientes secciones. modifi cada genes también pueden ser introducidos y
expresados ​para producir proteínas modifi carse para ver qué ef ect una
mutación tendría sobre la estructura y la función de una proteína.
e Th siguientes son algunas de las aplicaciones de la ingeniería genética
en el campo médico.
La recolección de las proteínas importantes e genes Th para hormonas
importantes o factores de crecimiento, tales como insulina y
factor de crecimiento humano , se han incluido en los organismos unicelulares
Ing-rápidas creciente. Th se permite la recolección de estas proteínas en
cantidades sufi ciente de que puedan ser comercializados y se administran a los
pacientes que son defi ciente en estas hormonas importantes. La ingeniería
genética también ha sido crucial en la producción de anticuerpos monoclonales
(sección 14.8.3).
La genómica y la identificación de dianas terapéuticas nuevas
proteínas Hoy en día, es relativamente fácil de aislar e identificar una gama
de proteínas, enzimas, y los receptores de señalización por clonación técnicas.
Esto ha llevado a la identificación de un número creciente de isoenzimas y
subtipos de receptores que ofrecen posibles dianas de medicamentos para
el futuro. los Proyecto Genoma Humano
involucrado el mapeo de ADN humano (terminado en
2000) y ha llevado al descubrimiento de nuevas proteínas previamente unsus-
esperadas. Estos también pueden ofrecer los posibles objetivos farmacológicos.
El estudio de la estructura y función de nuevas proteínas descubiertas a partir de
la genómica se llama
(proteómica la sección 2.6).
Estudio del mecanismo molecular de proteínas diana La
ingeniería genética permite que el controlado
E coli E coli
 preguntas 83

mutación de las proteínas tales que específi c aminoácidos son alteradas. Th se PUNTOS CLAVE

permite a los investigadores a identificar los aminoácidos que son importantes para • La estructura primaria de ARN es similar a la de ADN, pero que contiene ribosa en
la actividad enzimática o al receptor de ING vinculante. A su vez, esto conduce a vez de desoxirribosa. El uracilo se utiliza como una base en lugar de timina, y otras
una mayor comprensión de cómo las enzimas y receptores funcionan a nivel bases puede estar presente en cantidades más pequeñas.
molecular.

terapia génica somática implica el uso de un virus portador para el

• el apareamiento de bases y las secciones de estructura secundaria helicoidal son posibles
contrabando de un gen sano en las células en el cuerpo en el que el gen
dentro de la estructura del ARN.
correspondiente está defectuoso. Una vez que el virus ha infectado a la célula, el
• Hay tres tipos principales de ARN ARN mensajero, ARN de transferencia y
gen sano es insertado en el ADN del huésped donde se somete a transcripción y
ARN ribosomal.
traducción. Th es el enfoque tiene un gran potencial terapéutico para el cáncer, el
SIDA y las anomalías genéticas, como la fibrosis quística. Sin embargo, el • La transcripción es el proceso por el cual un segmento de ADN se copia
enfoque todavía está confi nida a los laboratorios de investigación y todavía hay como mRNA. mRNA lleva la información genética requerida para la síntesis
un largo camino por recorrer antes de que se utiliza clínicamente. Th ERE son de una proteína del núcleo al retículo endoplásmico.
varios los problemas que aún deben abordarse, como la forma de dirigirse a los
virus específi camente a las células defectuosas, cómo insertar el gen en el ADN • rRNA es el principal constituyente de los ribosomas, donde la síntesis de proteínas se lleva
de una manera controlada, la forma de regular la expresión de genes una vez que a cabo. Un ribosoma se mueve a lo largo de mRNA revelando cada triplete del código
está en el ADN, y la forma de evitar la respuesta inmune contra el virus portador. genético a su vez.
Los avances en este campo se retrasó signifi cativamente en 1999 como
• ARNt interpreta el mensaje codificado en el ARNm. Contiene un anticodón de tres
resultado de la muerte de un voluntario adolescente durante un ensayo clínico en
bases de ácido nucleico que se une a un triplete complementario sobre mRNA.
los EE.UU.. Th se fue atribuido a una respuesta inmune más reactivo al virus
Cada tRNA lleva un ácido amino fi específico, la naturaleza de la que se determina
portador utilizado en el ensayo. En consecuencia, en la actualidad hay estudios
por el anticodón.
que investigaban el uso de artifi cial virus que sería menos probable que cause
• El proceso de la síntesis de proteína se llama la traducción. La cadena de
una respuesta inmune. sistemas de liberación no virales también se están
proteína en crecimiento es transferido de un ARNt con el aminoácido en la
estudiando involv- ing moléculas enjaulados llamada ciclodextrinas . Además,
siguiente tRNA y sólo se libera una vez que la molécula de la proteína completa
lípidos, polyaminoesters, polímeros de glicina, y los fullerenos de carbono están
se ha sintetizado.
siendo investigados como portadores.
• La ingeniería genética ha sido utilizado en la producción de hormonas importantes
para fines medicinales, la identificación de nuevas dianas farmacológicas, el

estudio de la estructura y función de proteínas, y la terapia génica.

PREGUNTAS

1. Pro avine fl es un agente antibacteriano tópico que se intercala 3. La adenina es un componente importante de varias
ADN bacteriano y se utiliza para tratar a los soldados heridos en el Lejano Oriente bioquímicos importantes. Se ha propuesto que la adenina se sintetizó desde el

durante la Segunda Guerra Mundial. ¿Qué papel (si lo hay) es interpretado por el anillo principio en la evolución de la vida cuando la atmósfera de la Tierra consistía en

tricíclico y los grupos amino primarios? El fármaco no se puede utilizar sistémicamente. gases, tales como cianuro de hidrógeno y metano. También ha sido posible

Sugerir por qué este es el caso. sintetizar adenina de cianuro de hidrógeno. Tenga en cuenta la estructura de la

adenina e identificar cómo las moléculas de cianuro podrían actuar como los

bloques de construcción para esta molécula.

proflavina
MARIDO 2 norte norte NUEVA HAMPSHIRE 2

4. El código genético implica tres bases de ácido nucleico que codifican

2. Los siguientes compuestos son fármacos antivirales que imitan
por un único aminoácido (el código triplete). Por lo tanto, una mutación de un triplete
nucleósidos naturales. Lo que no nucleósidos que imitan?
particular, debe resultar en un aminoácido diferente. Sin embargo, este no es siempre

el caso. Para cualquier triplete representado por XYZ, que la mutación es menos
NUEVA HAMPSHIRE 2
CH 3 probable que resulte en un cambio en amino ácido-X, Y, o Z?
HN
HN NO

NN O NO
NO
MARIDO 2 norte norte

HO 5. El aminoácidos serina, glutamato, y fenilalanina

HO O
O O se encontró que eran grupos de unión importantes de un sitio de unión al
HO
receptor (véase el Apéndice 1 para estructuras). Los códigos de triplete para

norte 3 estos aminoácidos en la

84 Capítulo 6 Los ácidos nucleicos: estructura y función

mRNA para este receptor eran AGU, GAA, y UUU respectivamente. AGU a ACU; AGU a GGU; AGU a AGC GAAto GAU;
Explicar qué efecto tienen las siguientes mutaciones podrían tener, en su GAA a AAA; GAA a GUA UUU a UUC; UUU a UAU;
caso: UUU a AUU

OTRAS LECTURAS

Aldridge, S. La historia de ADN (2003). Química en Gran Bretaña Abril 28-30. Lewcock, A. (2010) Medicina hecha a medida. Mundial de la Química Julio de

56-61.

Breaker, RR (2004) naturales y artificiales ácidos nucleicos como herramientas para Lindpaintner, K. (2002) El impacto de la farmacogenética y la farmacogenómica en el

explorar la biología. Naturaleza 432, 838-845. Amplio, p. fábrica molécula Nobel (2009) descubrimiento de fármacos. Nature Reviews Drug Discovery 1, 463-469. Nicholl, el

horario de verano (2008) Una Introducción a la Ingeniería Genética,

de Biología. Mundial de la Química Noviembre 42-44. Burke, M. (2003) A la entrega. Química

en Gran Bretaña Febrero de 36-38.

3ª ed. Cambridge University Press, Cambridge. Opalinska, JB y
Gewirtz, AM (2002) terapéuticos de ácidos nucleicos: principios

Dorsett, Y. y Tuschl, T. (2004). siRNAs: Aplicaciones de la genómica funcional y básicos y aplicaciones recientes.

su potencial como agentes terapéuticos. Nature Reviews Drug Discovery 3, 318-329. Nature Reviews Drug Discovery 1, 503-514. Petricoin, EF, Zoon, KC, Kohn, CE,
Barrett, JC, y Liotta, LA (2002) La proteómica clínica. Nature Reviews Drug

Johnson, ES (2003) Las pruebas y tribulaciones de la producción de la primera Discovery 1 , 683-695. Stark, H., Dube, P., Lührmann, R., y Kastner, B. (2001)

ingeniería genética de drogas. Nature Reviews Drug Discovery 2, 747-751. Disposición de ARN y proteínas en el spliceosomal U1 pequeña partícula de

Judson, HF (1979) El octavo día de la Creación . Simon y Schuster, Nueva ribonucleoproteína nuclear. Naturaleza 409, 539-542. Invierno, PC, Hickey, GI, y

York. Fletcher, HL (1998) Instantánea Notas Genética. Bios Scientific Publishers, Oxford.

Langer, R. (2003) Cuando una pastilla no alcanzará. Scientific Americana De

abril de 32-39.
 PARTE
Farmacodinámica y
segundo
farmacocinética

El papel de la química médica es diseñar y sintetizar nuevos fármacos. Con el fin de involucrado no puede alcanzar su objetivo en el cuerpo una vez que se han

llevar a cabo esta función, es importante identificar el objetivo particular de un administrado. Hay varias formas en que se pueden administrar medicamentos,

medicamento específico y para establecer cómo la droga interactúa con ese objetivo de pero, en general, el objetivo es obtener el medicamento en el torrente sanguíneo

producir un efecto biológico. En los capítulos 2-6 de la Parte A nos fijamos en la de tal manera que se puede llevar a su diana particular. Después de la

estructura y función de los diversos objetivos de medicamentos que están presentes en administración de un fármaco, hay una amplia variedad de obstáculos y problemas

los sistemas vivos. En la parte B vamos a examinar los mecanismos generales por los que tienen que ser superados. Estos incluyen la e fi ciencia con la que un fármaco

que los fármacos pueden producir un efecto farmacológico o biológico. Esta es un área se absorbe en el torrente sanguíneo, la rapidez con que se metaboliza y excreta, y

de estudio conocido como farmacodinámica. en qué medida se distribuye alrededor del cuerpo. Esta es un área de estudio

conocido como farmacocinética y vamos a considerar esto en el capítulo 11.

Las drogas son normalmente pequeñas moléculas con un peso molecular de

menos de 500 unidades de masa atómica, y lo que son mucho más pequeños que

sus objetivos macromoleculares. Como resultado, que interactúan directamente con Como se trata de un libro de texto de química médica, la atención se centra

sólo una pequeña parte de la macromolécula. Esto se llama un sitio de unión. El sitio en gran medida en el diseño de fármacos para optimizar su propiedades

de unión por lo general tiene una forma de fi nido en el que un fármaco debe encajar farmacocinéticas y farmacodinámicas. Sin embargo, es importante apreciar que

si que es tener un efecto; Por lo tanto, es importante que el fármaco tiene el tamaño la formulación y la administración de fármacos es un área extremadamente

y la forma correcta. Sin embargo, hay más a la acción de los fármacos que una importante de la investigación en el desarrollo de nuevos y mejores

buena 'fi'. Una vez que un fármaco activo entra en un sitio de unión, una variedad de medicamentos (una breve descripción se da en las secciones 11.7.1, 11.9 y

interacciones de enlaces intermoleculares que se ocupen, mantenerlo allí y dar lugar 11.10). En efecto, la acción del fármaco se ha clasificado en tres fases, que se

a nuevos efectos, que culminó, con el tiempo, en un efecto biológico. Para que esto presentan en el siguiente orden: farmacéutica, farmacocinética,

ocurra, el fármaco debe tener los grupos funcionales correctos y el esqueleto farmacodinámica y. La fase farmacéutica incluye la desintegración de una

molecular capaces de participar en estas interacciones. píldora o cápsula en el tracto gastrointestinal, la liberación del fármaco contenido

dentro de, y su disolución. Esto es seguido por las fases farmacocinéticas y

farmacodinámicas como se describe anteriormente.

La optimización de las interacciones que tiene con una estructura su objetivo

es claramente importante si vamos a diseñar un fármaco eficaz. Una vez dicho Parte B incluye Estudio de caso 1, que es un estudio sobre las estatinas clínicamente

esto, hay ejemplos de compuestos que interaccionan muy bien con su objetivo, importantes que se utilizan a niveles más bajos de colesterol. Se ilustra algunos de los

pero no sirven para nada en un sentido clínico. Esto se debe a los compuestos principios de inhibidores de la enzima mencionados en el Capítulo 7.
Esta página se ha dejado intencionadamente en blanco
 7 Enzimas como dianas de medicamentos
Muchos fármacos importantes actúan como inhibidores de la enzima. En otras
palabras, que dificultan o impiden que las enzimas que actúan como catalizadores para
una reacción particular. Hemos cubierto la estructura y función de las enzimas en el
capítulo 3. En este capítulo, nos concentramos en cómo las drogas se dirigen a las
enzimas e inhiben su acción.
7.1 Inhibidores que actúan en el sitio activo de
una enzima
7.1.1 inhibidores reversibles
En el capítulo 3 hemos subrayado la importancia de las interacciones de unión
entre una enzima y su sustrato. Si no hay interacciones que sostienen un
sustrato al sitio activo, entonces el sustrato se deriva de y volver de nuevo
antes de que haya una oportunidad para que reaccione. Th erefore, las
interacciones ING más aglutinantes hay, más fuerte será el sustrato se unen, y
mayor será la probabilidad de reacción. Sin embargo, hay una trampa! ¿Qué
ocurre si un sustrato fuertemente ligado da un producto que también se une
fuertemente al sitio activo (Fig. 7.1)?
e respuesta Th es que la enzima se obstruye y es incapaz de
aceptar cualquier sustrato más. Th erefore, las interacciones de unión
que sostiene el sustrato o la
sustrato
sustrato
Unión Reacción
Enzima Enzima
FIGURA 7.1 Ejemplo de una enzima que se 'atascado' si el producto permanece unida.
producto a la enzima debe hacerse de manera armoniosa. ey Th debe ser de
manera suficiente fuerte como para mantener el sustrato en el sitio activo el
tiempo suficiente para que ocurra la reacción, pero lo suficientemente débil como
para permitir que el producto que se vaya. Th es Bond- acto de equilibrio ing se
puede dar vuelta a la gran ventaja si el químico farmacéutico desea para inhibir
una enzima particular o desactivarla completamente. Una molécula puede
diseñarse que es similar al sustrato natural o producto, y puede encajar el sitio
activo, pero que se une con más fuerza. Puede que no experimentan ninguna
reacción cuando está en el sitio activo, pero siempre y cuando se mantenga allí
se bloquea el acceso al sustrato natural y previene la reacción enzimática (Fig
7.2). Th se es conocido como inhibición competitiva , como el medicamento está
compitiendo con el sustrato natural por el sitio activo. Th e más largo es el
inhibidor está presente en el sitio activo, mayor es la inhibición. Th erefore, si un
medicamento no está en Chem conoce la posición y la naturaleza de Erent diff
regiones de unión dentro de un sitio activo, es posible diseñar moléculas que
quepan ese sitio activo, se unen fuertemente y actúan como inhibidores.
Los inhibidores competitivos se unen al sitio activo a través de enlaces
intermoleculares y por lo que la unión es reversibles de, lo que permite un
equilibrio que se produzca entre el fármaco unido y sin unir un fármaco tipo de
'yoyo' ef ect donde la droga se une al sitio activo, se libera , a continuación, se
une de nuevo. Th se significa que la inhibición causada por el fármaco
Obstruido
sustrato
Producto Producto
Enzima Enzima
88 Capítulo 7 Enzimas como dianas de medicamentos
sustrato
Droga Sin reacción
Droga
Enzima
ENZIMA Enzima
FIGURA 7.2 Inhibición competitiva.
es reversible. Si la concentración de sustrato aumenta, compite más ef caz
con el medicamento para el sitio activo, y por lo tanto la inhibición por el
fármaco será menos reflexivo eff (recuadro 7.1).
Th ERE muchos ejemplos de fármacos útiles que actúan como
inhibidores competitivos . Por ejemplo, el amidas sulphon
actuar como agentes antibacterianos mediante la inhibición de una enzima bacteriana de
esta manera (sección 19.4.1.5). Muchos diuréticos utilizados para controlar la presión
arterial son inhibidores competitivos, al igual que algunos antidepresivos (sección
23.12.5). Otros ejemplos incluyen las estatinas (Estudio de caso 1), la angiotensina
convertidores ing inhibidores de la enzima (ACE) (Estudio de caso 2), y inhibidores de la
proteasa (sección 20.7.4). De hecho, la mayoría de los inhibidores de la enzima útiles
clínicamente son de esta naturaleza.
Como se indicó anteriormente, los inhibidores competitivos con frecuencia
tienen cierta semejanza con el sustrato natural, lo que les permite ser
reconocidos por el sitio activo. Algunos de estos inhibidores pueden tener
características adicionales que les permiten formar interacciones de unión
adicional a las regiones del sitio activo que no están ocupadas por el substrato.
Esta
CAJA 7.1 Una cura para el envenenamiento del anticongelante
Los inhibidores competitivos generalmente pueden ser desplazados por el aumento del
nivel de sustrato natural. Esta característica ha sido útil en el tratamiento de la
intoxicación accidental por parte de anticongelante. El componente principal de
anticongelante es etilenglicol , que se oxida en una serie de reacciones enzimáticas
para ácido oxálico ,
que es tóxico. El bloqueo de la síntesis de ácido oxálico conduce a la recuperación.
El primer paso en este proceso enzimático es la oxidación de etilenglicol
por alcohol deshidrogenasa (ADH) . Etileno
HO
ADH
OH
Etilenglicol
les permite unen con más fuerza y ​ser inhibidores más eff CE- tiva. estatinas
e Th descritas en el Estudio de caso 1 son un buen ejemplo de esto.
Aunque los inhibidores competitivos oft baño tienen cierta semejanza con el
sustrato, esto no siempre es el caso. Mientras el medicamento tiene la forma
adecuada para encajar el sitio activo y tiene grupos funcionales que pueden
interactuar con las regiones de unión disponible, todavía puede unirse al sitio
activo e inhibir la enzima. Th erefore, es posible que los fármacos con un
esqueleto Erent totalmente diff al sustrato para actuar como inhibidores
competitivos. Dichos fármacos se pueden unir a una combinación de regiones
de unión dentro del sitio activo, algunos de los cuales son utilizados por el
sustrato y algunos de los cuales no lo son.
También hay que recordar que el producto de una reacción catalizada
por enzimas se une al sitio activo antes de que sea finalmente liberado, y por
lo que es posible tener inhibidores de la enzima que se asemejan a la
estructura del producto más estrechamente que el sustrato. Otros fármacos
están diseñados para imitar el estado de transición de la reacción catalizada
por enzimas (sección 7.4).
Por último, algunos inhibidores competitivos se unen al sitio activo, pero
no compiten con el sustrato. ¿Cómo puede ocurrir esto? e respuesta Th
radica en el hecho de que los sitios activos de varias enzimas se unen un
sustrato y una enzima tor cofactor. Th erefore, es posible tener los
inhibidores competitivos que ocupan la región de unión normalmente
ocupado por el cofactor, y así la competición es con el cofactor en lugar de
sustrato. e inhibidores de la quinasa Th descritas en el apartado 21.6.2 son
un buen ejemplo de esto. Muchos de estos agentes compiten con el ATP
cofactor para el sitio activo de las enzimas quinasa, y no el sustrato de
proteína. D e la naturaleza competitiva de la inhibición se ilustra en el
resistentes
glicol está actuando aquí como sustrato, pero podemos verlo como un
inhibidor competitivo, ya que está compitiendo con el sustrato natural de la
enzima. Si se incrementan los niveles de sustrato natural, que competirá
mucho mejor con etilenglicol y evitar que reaccionar. ya no se forma ácido
oxálico tóxico y el glicol de etileno que no ha reaccionado finalmente se
excreta del cuerpo. La cura, entonces, es la administración de dosis elevadas
de sustrato de alcohol natural!
HO
Las enzimas COOH
COOH
OH
Ácido oxálico

las células tumorales, donde una enzima mutada muestra una mayor afi nidad para el ATP
durante los inhibidores (Recuadro 21.11).
7.1.2 Los inhibidores irreversibles
inhibidores de la enzima irreversibles pueden formar un enlace covalente a un
aminoácido clave en el sitio activo y bloquear permanentemente la enzima
reflejada aff (Fig. 7.3). El mas efectivo
inhibidores irreversibles son aquellos que contienen un grupo funcional
trophilic elec- (X) capaz de reaccionar con un grupo nucleófilo presente en
una cadena lateral de aminoácido. Invariablemente, el aminoácido aff eja es
o bien serina o
cisteína , debido a que estos aminoácidos son a menudo en presente en los
sitios activos y contienen grupos nucleófilos (OH y SH respectivamente) que
están involucrados en el mecanismo de muchas reacciones catalizadas por
enzimas (sección 3.5.3). grupos funcionales electrófilos utilizados en inhibidores
irreversibles incluyen haluros de alquilo, epóxidos, α, β- cetonas insaturados, o
lactonas y lactamas tensas (Fig. 7.4). E l altamente tóxico
(agentes nerviosos sección 22.13.2.1) contiene grupos electrofílicos y fl
uorophosphonate son inhibidores irreversibles de las enzimas de mamíferos.
No todos los inhibidores irreversibles son altamente tóxicos, sin embargo, y
varios se utilizan clínicamente. Por ejemplo, penicilinas
(Sección 19.5.1) contener una β- lactámicos grupo que irreversiblemente inhibe
una enzima que es crucial para la síntesis de la pared celular bacteriana. ram
Disulfi ( Antabuse) (Recuadro 12.6) es un inhibidor irreversible de la enzima
alcohol deshidrogenasa y se utiliza para tratar el alcoholismo. Los inhibidores de
la bomba de protones se describe en la sección 25.3 son inhibidores irreversibles
diseñados para imitar este control natural de la enzima. Si el fármaco se une a
y se utilizan como agentes anti-ulcerosos. D e medicamento contra la obesidad orlistat
también es un inhibidor irreversible tor (recuadro 7.2). Una vez dicho esto, es
generalmente mejor
x inhibición irreversible
Droga
OH
sitio activo OH
FIGURA 7.3 inhibición irreversible de una enzima con un agente alquilante. (X = halógeno grupo saliente).
O
O
R-X
R R R
Los haluros de alquilo epóxidos α, β- cetonas insaturadas Fluorophosphonates
(X = Cl, Br, l)
FIGURA 7.4 Ejemplos de grupos funcionales electrófilos.
Los inhibidores que actúan en sitios de unión alostéricos 89
inhibir una enzima con un inhibidor reversible en lugar de un inhibidor
irreversible. Como inhibidores irreversibles tienen grupos funcionales reactivos,
hay un riesgo de que puedan reaccionar con otras proteínas o ácidos nucleicos
y causar ECTS eff secundarios tóxicos.
inhibidores de la enzima irreversibles no son inhibidores competitivos. El
aumento de la concentración de sustrato no revierta su inhibición como los
inhibidores no se pueden desplazar del sitio activo. Th se puede causar
problemas si la acumulación de un sustrato particular conduce a ECTS eff
secundarios tóxicos. Por ejemplo, el inhibidores de la monoaminooxidasa
(res Moais) bloquean el metabolismo de noradrenalina y tienen actividad
antidepresiva (sección 23.12.5). Desafortunadamente, también se inhibe el
metabolismo de sustratos distintos de noradrenalina, lo que lleva a una
acumulación de estos compuestos y ECTS graves eff lado. Más IMAO
modernos han sido diseñados para ser inhibidores reversibles con el fin de
evitar este problema.
7.2 Los inhibidores que actúan en sitios de unión
alostéricos
Sitios de unión alostérica fueron discutidos en la sección 3.6 y son un medio
por el cual la actividad enzimática puede ser controlada por los inhibidores
naturales. Cuando un tor inhibidor alostérico se une a su sitio de unión, la
resultante fi inducida t también deforma la forma del sitio activo de tal manera
que se hace irreconocible para el sustrato. Los medicamentos pueden ser
través de interacciones intermoleculares, la inhibición es reversible. Si el
fármaco contiene un grupo reactivo
x-
Droga Enlace Droga
covalente
Sitio activo sitio activo O
R R RR
PF
RO RO O
O RN OO
β- lactámicos lactonas
90 Capítulo 7 Enzimas como dianas de medicamentos

CAJA 7.2 inhibición irreversible para el tratamiento de la obesidad

La grasa en la dieta se compone principalmente de triglicéridos, que son digeridos intestino. En consecuencia, menos grasa se sintetiza en el cuerpo.

en el intestino delgado a los ácidos grasos y 2-monoglicéridos. Los productos de
la digestión son absorbidos y actúan como bloques de construcción para la
biosíntesis de grasa en el cuerpo. La enzima lipasa pancreática es responsable
de catalizar la digestión de las grasas, por lo que la inhibición de esta enzima se
reduce la absorción de glicéridos y ácidos grasos de la
orlistat es un fármaco anti-obesidad que actúa como un inhibidor irreversible de
la lipasa pancreática, como resultado de la presencia de un grupo lactona
electrofílica 4 eslabones. Este acila un residuo de serina en el sitio activo, que es
parte de una tríada catalítica de serina, histidina y ácido aspártico (comparar
sección
3.5.3).

orlistat
CH 3 ( CH 2) 5
(CH 2) 10 CH 3
(CH 2) 10 CH 3

O OH NHCHO
O O
O
MARIDO O
Yo
+H+
NHCHO CH 3 ( CH 2) 5
Yo OH me me

OH O O

Ser Ser
La lipasa pancreática La lipasa pancreática

complejo. Th erefore, inhibidores no competitivos son menos reflexivo ef a bajas

concentraciones de sustrato. Los inhibidores no competitivos no son muy
norte SH
comunes.
En teoría, un inhibidor no competitivo se une a un sitio de unión
NN
norte
alostérico e inhibe la reacción catalizada por enzimas sin aff ión de la
MARIDO
fuerza de sustrato vinculante ing. Th es ocurriría si el inducido fi t resultante
FIGURA 7.5 6-mercaptopurina.
de la unión del inhibidor alostérico distorsiona la cientemente sitio sufi
activo para evitar que el mecanismo catalítico, pero no tiene eff ect en el
lo que le permite formar un enlace covalente al sitio de unión alostérico, proceso de unión al sustrato. En la práctica, esta situación ideal es
la inhibición es irreversible. extremadamente raro, si es que se produce en absoluto. Es casi inevitable
La droga 6-mercaptopurina ( Higo. 7.5), que se utiliza en el tratamiento que cualquier distorsión sitio activo aff eja el proceso catalítico también la
de la leucemia, es un ejemplo de un inhibidor alostérico. Inhibe la enzima unión de sustrato aff ect. Th erefore, aquellos inhibidores que inhiben el
primer implicado en la síntesis de las purinas (sección 6.1.1) y bloques de proceso catalítico, al tiempo que permite a los sustratos se unen,
purina síntesis. A su vez, esto bloquea la síntesis de ADN. normalmente causan algo de inhibición de la unión del sustrato. Th se es
conocido como inhibición mixta ya que no es ni la inhibición competitiva
pura ni la inhibición no competitiva pura.

7.3 Los inhibidores no competitivos y

no competitivos

7.4 análogos del estado de transición:

inhibidores no competitivos son inhibidores que se unen hacer marcha
atrás, ibly a una enzima, cuando el sustrato está ya vinculado al sitio activo.
En otras palabras, el inhibidor se une al complejo enzima-sustrato. En esta
situación, el aumento de la concentración de sustrato no va a superar la
inhibición. De hecho, el nivel de inhibición es dependiente de sustrato sufi
ciente estar presente para formar la enzima-sustrato
inhibidores de la renina
La comprensión de un mecanismo enzima puede ayudar a diseñar
medicamentos químicos inhibidores más potentes. Por ejemplo, es posible
diseñar inhibidores que se unen tan fuertemente al sitio activo (mediante
fuerzas no covalentes)
 análogos del estado de transición: inhibidores de la renina 91

que están FEP caz irreversibles inhibidores-un poco como invitar a alguien
a cenar y hallazgo que se han movido en forma permanente. Una forma de
hacer esto es el diseño de un fármaco que se parece al estado de
transición para la reacción catalizada. un fármaco tal debe unirse más
fuertemente que ya sea el sustrato o el producto y ser un fuerte inhibidor
como resultado. Tales compuestos se conocen como análogos del
estado de transición o inhibidores .
E l uso de análogos de estado de transición ha sido par- caz ef
especial- en el desarrollo de inhibidores de la renina
(Fig. 7.6). La renina es una enzima proteasa que es responsa- ble de hidrólisis
de un enlace peptídico específi en la proteína
angiotensinógeno formar angiotensina I . La angiotensina I se convierte después estable a la hidrólisis. Th se puede hacer mediante la introducción de una
en angiotensina II ( véase el estudio de caso 2), que actúa para constreñir los
vasos sanguíneos y retener líquido en los riñones, los cuales conducen a un
aumento de la presión arterial. Th erefore, un inhibidor de la renina debe actuar
como un agente antihipertensivo (es decir, presión arterial baja) por pre- ventilar la
primera etapa en este proceso.
La renina contiene dos residuos de aspartilo y una molécula de agua
puente en el sitio activo que son cruciales para el mecanismo por el que un
enlace amida en el sustrato es hidrolizado (Fig. 7.7). En la primera etapa
de este mecanismo, se forma un intermedio tetraédrico. Para formar este
intermedio, el mecanismo de reacción tiene que pro- ceder a través de un
estado de transición de alta energía, y es este estado de transición que se
desea imitar con un análogo de estado de Transición. Sin embargo, no es
posible aislar tales
una especie de alta energía con el fin de estudiar su estructura; así que ¿cómo
se puede diseñar un medicamento para imitar ella? e respuesta Th es basar el
diseño del fármaco sobre la reacción inter- medio. Th e razón de esto es como
sigue. A medida que el inter- medio es menos estable que el sustrato, se
presume que es más estrecha en el carácter al estado de transición. Th es, a
su vez, implica que el estado de transición es más tetraédrica en carácter que
planar. erefore Th, fármacos basados ​en la estructura del intermedio
tetraédrico son más propensos a imitar el estado de transición.
D e intermedia en sí es reactivo y fácilmente escindido. Th erefore, un
análogo tiene que ser diseñado que se une con la misma fuerza, pero es
característica que imita la estructura DraI tetrahe- del intermedio, pero no
tiene grupo saliente, por la segunda parte del mecanismo de reacción.
Una variedad de imitadores han intentado y un resto lene hydroxyethy- ha
demostrado caz eff (por ejemplo, aliskiren; Higo. 7.8). Th e grupo hidroxi
de etileno tiene la geometría tetraédrica requerida y uno de los dos grupos
hidroxilo necesarios para una buena unión. También es estable a la
hidrólisis, porque no hay presente grupo saliente. Aliskiren fue aprobado
por el Food and Drug Administration
( FDA ) en 2007 para el tratamiento de la hipertensión.
Estrategias similares se han utilizado con éxito para diseñar agentes
antivirales que actúan como transición de estado analógica inhibidores para la
enzima proteasa del VIH ( sección
20.7.4). Los estatinas también se puede ver como la transición de estado

inhibidor

Enzima convertidora
de angiotensina
La renina (ACE)
angiotensinógeno La angiotensina I La angiotensina II

FIGURA 7.6 La inhibición de la renina para bloquear la síntesis de la angiotensina I y angiotensina II.

intermediario
tetraédrico

HN 1

HN sustrato R +

CO 2 S.S 2 NR 1
OOHH
O1 R2 R2 R2

HOH
MARIDO

O O OO O O HO O O O
O OH

Áspid Áspid Áspid Áspid

Áspid Áspid

FIGURA 7.7 Mecanismo de hidrólisis renina-catalizada.

92 Capítulo 7 Enzimas como dianas de medicamentos

MeO
CHMe 2

OH
MeO O NH O hidroxietileno
transición de
HN imitador del estado de
MARIDO 2 norte O NUEVA HAMPSHIRE 2 Intermedio de reacción
me me
OH CHMe 2 HO
OH
Hidroxietileno estado de
transición mimético

FIGURA 7.8 Aliskiren.

análogos (Estudio de caso 1), al igual que algunos inhibidores de la ECA
(Estudio de caso 2).
7.5 sustratos suicidas
análogos del estado de transición se pueden ver como De buena fe
visitantes al sitio activo de una enzima que se convierten en invasores obstinadas
una vez que han llegado. Otros, aparentemente inofensivos, los visitantes pueden
convertirse en asesinos letales una vez que se han unido a la enzima diana. Tales
agentes están diseñados para someterse a una transformación catalizada por
enzimas que los convierte en una especie altamente reactiva que forma un enlace
covalente con el sitio activo.
Un ejemplo de un sustrato suicida es ácido clavulanico ,
que se utiliza clínicamente en medicamentos antibacterianos (por ejemplo, Augmentin
selectivos para la enzima diana. Si el grupo de alquilación no se había
) para inhibir la bacteriana β- lactamasa
enzima (sección 19.5.4.1). Th es enzima es responsable de la
resistencia a la penicilina observado en varias cepas bacterianas, ya
que cataliza la hidrólisis de la penicilina
β- anillo de lactama. mecanismo e Th implica un residuo de serina en el sitio
activo actúa como un nucleófilo para formar un intermedio donde la serina
está ligada covalentemente a través de un grupo éster a la penicilina de anillo
El ácido clavulánico también fi ts el sitio activo de β- lactamasa, y la β- anillo
de lactama es abierto por el residuo de serina de la misma manera. Sin
embargo, la acil-enzima inter- medio reacciona entonces con otro grupo más
philic nucleósido enzimática (posiblemente NH 2 ) para unir el fármaco de forma
irreversible a la enzima (Fig. 7.10). mecanismo e Th requiere la pérdida o
ganancia de protones en diversas etapas, y un ácido amino, tales como
histidina, en el sitio activo sería capaz de actuar como un donador de protones
/ receptor (comparar secciones
3.5.2 y 22.12.3.2).
Los fármacos que actúan de esta manera son a menudo llamados en nismos
inhibidores basados ​en la me- o sustratos suicidas debido a que la enzima
está cometiendo suicidio por reacción con ellos (véase también el recuadro 7.3).
Th e gran ventaja de este enfoque es que el agente de alquilación se genera
en el sitio en el que está destinado a actuar y es, por lo tanto, altamente
disfrazado de esta manera, el fármaco tendría alquilada grupo nucleófilo primera
fi la que se reunió en el cuerpo y se habría mostrado poca, o ninguna, la
selectividad. D e utiliza de agentes alquilantes y los problemas asociados con
ellos se discuten en las secciones 9.3 y 21.2.3.
uso principal e Th para sustratos suicidas ha estado en enzimas c ling

abierto. grupo éster e Th es luego hidrolizado para liberar la penicilina especificaciones etiquetadoras. e sustratos Th pueden marcarse con isótopos

inactivado y liberar el sitio activo, de manera que el proceso catalítico se radiactivos y se hacen reaccionar con su enzima diana con el fin de localizar la

puede repetir (Fig. 7.9). enzima en las preparaciones de tejido. Sin embargo, algunos agentes clínicamente

útiles actúan como

O la penicilina Intermedio producto hidrolizado

O
HHHN RC O
RC HHHS
norte S Me
RC HHH
norte
S Me
me
β- lactamasa β- lactamasa O
O
NO me +H+ + H2 O Yo
HN Yo OH HN
O
CO 2 MARIDO CO 2 MARIDO
Ser CO 2 MARIDO Ser HO
Ser HO

FIGURA 7.9 Reacción catalizada por bacteriana β- enzimas lactamasa.

 usos medicinales de inhibidores de la enzima 93

1 2 3

NH2 NH2
NUEVA HAMPSHIRE

O
CH2OH
O
CH2OH O CH2OH
norte

O HN HN
Base H O
MARIDO
CO2H
OO O
OH CO2H CO2H

4 5 6
O
CH2OH

H2N

NUEVA HAMPSHIRE NUEVA HAMPSHIRE NUEVA HAMPSHIRE

CO2H

MARIDO CH
O CH2OH
HC

HN
O O O

MARIDO
O CO2H O O

irreversiblemente bloqueado

FIGURA 7.10 El ácido clavulánico que actúa como un sustrato suicida.

sustratos suicidas, tales como el ácido clavulánico (como se describió
anteriormente). Algunos inhibidores de la monoamino oxidasa también se cree
que son sustratos suicidas (recuadro 7.4). Otro ejemplo interesante de un
sustrato suicida es 5-fl uorodeoxy- monofosfato uracilo ( 5-FdUMP). agente
contra el cáncer d e 5-fluorouracilo se utiliza para tratar el cáncer de mama,
el hígado y la piel, y se convierte en 5-FdUMP en el cuerpo. Th es entonces
actúa como un sustrato suicida para la enzima sintasa thym- idylate (sección
21.3.2). En este caso, se forma el enlace prestado cova- entre el sustrato
suicida y el cofactor de la enzima, pero la eff general ect es el mismo.
7.6 Isoenzimas selectividad de los inhibidores
llevar a cabo las mismas reacciones, pero la COX-1 es la isoenzima que
está activo en condiciones normales y sanos. En la artritis reumatoide, la
normalmente inactiva de la COX-2 se activa y produce el exceso de infl
amatoria prostaglandinas. erefore Th, drogas tales como valdecoxib ,
rofecoxib ,
y celecoxib se han desarrollado para ser selectivos para la COX-2 de isoenzimas,
de modo que se reduce sólo la producción de prostaglandinas infl am- infla-. La
selectividad es posible, aprovechando el hecho de que un grupo de isoleucina
está presente en el sitio de unión de la COX-1, mientras que el grupo
correspondiente en la COX-2 es valina. El rofecoxib fue autorizada en 1999, pero
tuvo que ser retirado en 2004, ya que se relaciona con un mayor riesgo de ataque
cardíaco y accidente cerebrovascular cuando se toman durante un período de 18
meses o menos.

identifi cación de las isoenzimas que predominan en algunos teji- dos, pero no a
otros, permite la posibilidad de diseñar inhibidores de la enzima selectivos de
7.7 usos medicinales de inhibidores de la
tejidos (Recuadro 7.4).
enzima
Por ejemplo, el fármaco anti-inflamatorio no esteroideo infl (NSAID) indometacina
( Higo. 7.11) se usa para tratar enfermedades infla- infl am, tales como la
7.7.1 Los inhibidores enzimáticos utilizados contra los
artritis reumatoide, y funciona mediante la inhibición de la enzima ciclooxigenasa
. Th se enzima está implicada en la biosíntesis de prostaglandinas -agents
microorganismos
que son responsables por el dolor y la infl amación de la artritis reumatoide.
La inhibición de la enzima disminuye los niveles de prostaglandina y alivia Los inhibidores de enzimas han tenido un gran éxito en la guerra contra la
los síntomas de la enfermedad. Sin embargo, el fármaco también inhibe la infección. Si una enzima es crucial para un microorganismo, a continuación,
síntesis de prostaglandinas benefi ciales en el tracto gastrointestinal y el apagándolo matará claramente la célula o evitar que crezcan. Idealmente,
riñón. Se ha descubierto que la ciclooxigenasa tiene dos isoenzimas: la enzima elegido debe ser uno que no está presente en nuestros propios
COX-1 y COX-2. ambas isoenzimas cuerpos. Afortunadamente, existen tales enzimas debido a los signifi
cativas cias diff bioquímicas entre células bacterianas
94 Capítulo 7 Enzimas como dianas de medicamentos

CAJA 7.3 sustratos suicidas

sustratos suicidas son agentes que se convierten en especies altamente reactivas
cuando se someten a una reacción catalizada por enzimas. Ellos forman enlaces
covalentes con la enzima y la inhiben de forma irreversible. En algunos casos, esto
puede causar toxicidad. Por ejemplo, el agente diurético ácido tienilic tuvo que ser
retirado del mercado debido a que se ha encontrado para actuar como un sustrato
suicida para las enzimas del citocromo P450 involucradas en el metabolismo de
fármacos (sección 11.5.2). Desafortunadamente, el metabólica
reacción llevada a cabo por estas enzimas convierten el ácido tienilic a un
sulfóxido tiofeno, que resultaron altamente electrofílico. Esto animó a una
reacción de Michael que conduce a la alquilación de un grupo tiol en el sitio
activo de la enzima. La pérdida de agua del sulfóxido tiofeno restauró el anillo de
tiofeno y dio como resultado la formación de un enlace covalente a la enzima, lo
que inhibe la enzima irreversiblemente.

cyt P450 cyt P450

cl O
cl O
cl O
OH cl O
OH
Oxidación
S
ASI

SH O S QUE O
MARIDO sustrato suicida
ácido Tienilic

cyt P450 cyt P450 cyt P450

NADPH O 2

La alquilación MARIDO
+H
MARIDO MARIDO

Arkansas Arkansas Arkansas

P450
OSOS OSOS OSOS
MARIDO

cyt P450 Cit Cit P450

Enzima alquilada e
- H2 O
MARIDO inhibido

Arkansas
Arkansas
S S

OS
OS

inhibición irreversible del citocromo P450 por el ácido tienilic.

y la nuestra. Naturaleza, por supuesto, está muy por delante en este juego. Por
ejemplo, muchas cepas de hongos producir metabolitos que actúan como
inhibidores de enzimas bacterianas, pero no tienen eff ect sobre enzimas
fúngicas. Th es hongos da una ventaja sobre sus competidores microbiológicos
cuando compiten por los nutrientes. También ha proporcionado la medicina con
antibióticos importantes tales como penicilina y cefalosporina C .
Aunque es preferible dirigirse a las enzimas que son únicas para el
invasor extranjero, aún es posible orientar
enzimas que están presentes tanto en las células de Mali bacterianas y
mamíferos, siempre y cuando no son signifi cias no puede diff entre ellos. Tales
cias diff son perfectamente viables. Aunque las enzimas en ambas especies
pueden haber derivado de una proteína ancestral común, han evolucionado y
mutado por separado lo largo de varios millones de años. La identificación de
estos cias diff permite al químico farmacéutico para diseñar fármacos que se
unirán y actuar selectivamente contra la enzima bacteriana. Capítulo 19 trata de
agentes antibacterianos tales
 usos medicinales de inhibidores de la enzima 95

como el sulfonamidas , penicilinas, y cefalosporinas , y medicamentos tales como zidovudina y saquinavir para el VIH (véase el Capítulo

todos los cuales actúan mediante la inhibición de las enzimas. inhibidores de la enzima 20).

sintéticas, tales como la fluoroquinolonas, También se abarcaron en este capítulo.

7.7.3 inhibidores de la enzima utilizada contra las enzimas

propias del organismo

7.7.2 Los inhibidores enzimáticos utilizados contra los
Los fármacos que actúan sobre las enzimas propias del cuerpo son importantes en
virus
la medicina. Th ERE son muchos ejemplos discutidos en otra parte de este texto y

Los inhibidores enzimáticos son también extremadamente importante en la lucha contra las en la Tabla 7.1 indica varias de ellas, con una referencia cruzada a la sección

infecciones virales (por ejemplo, virus del herpes y VIH). El éxito de los fármacos antivirales correspondiente en este libro de texto.

incluyen aciclovir para el herpes,

MeO MARIDO 2 NO 2 S MeO 2 S MARIDO 2 NO 2 S

me CO 2 MARIDO
me
norte

NN
O O O CF 3
norte

cl Yo

indometacina valdecoxib rofecoxib celecoxib

FIGURA 7.11 inhibidores de la ciclooxigenasa.

CAJA 7.4 El diseño de fármacos que sea selectivo de isoenzimas

El diseño de fármacos para ser medios de isoenzimas selectivos que pueden ser como selegilina , se administran con levodopa para el tratamiento de la enfermedad

diseñadas para actuar sobre diferentes enfermedades, a pesar de que actúa sobre la de Parkinson (Fig. 2). inhibición de la MAO-B protege levodopa de metabolismo. Se

misma enzima. Esto se debe a isozimas difieren en sustrato especificidad y se cree que clorgilina y selegilina para actuar como sustratos suicidas donde son

distribuyen de forma diferente en el cuerpo. Monoamino oxidasa (MAO) es una de convertidos por la enzima a especies reactivas que reaccionan con la enzima y

las enzimas responsables del metabolismo de los neurotransmisores importantes, formar enlaces covalentes. Los grupos funcionales de amina y alquino presentes en

tales como dopamina, noradrenalina , y serotonina ( sección ambos fármacos son cruciales para este proceso.

4.2), y existe en dos formas isoenzimáticos (MAO-A y MAO-B). Estas isozimas difieren

en sustrato ciudad específica, distribución de tejido, y la estructura primaria, pero llevan

a cabo la misma reacción por el mismo mecanismo (Fig. 1). MAO-A es selectivo para la monoaminooxidasa
coenzima (MAO)
noradrenalina y la serotonina, mientras que MAO-B es selectivo para la dopamina. Los R CH 2 NUEVA HAMPSHIRE 2 R CHO
inhibidores de la MAO-A, como clorgilina , se utilizan clínicamente como Flavin

antidepresivos, mientras que los inhibidores de la MAO-B, tales

FIGURA 1 La reacción catalizada por la MAO.

cl MARIDO CH 3
MARIDO
O N CH 3 CC HO NUEVA HAMPSHIRE 2 norte CCH

CO 2 S.S CH 3
cl HO

clorgilina La levodopa La selegilina (deprenilo)

FIGURA 2 Clorgilina, levodopa y selegilina.