GUA DE PRCTICAS

xX
LABORATORIO X TALLER SIMULACIN CAMPO
CARRERA: Ingeniera en Alimentos
ASIGNATURA: Microbiologa de los alimentos II
NIVEL: PARALELO: U
REA ACADMICA: DOCENTE: Linda Guamn
CICLO ACADMICO

PRCTICA N:

I. TEMA: Uso del hemocitmetro

II. OBJETIVOS:

Objetivo General
Adiestrar al estudiante en el uso del hemocitmetro

Objetivos Especficos
Comparar las concentraciones del hemocitmetro con siembras en difusin

III. INSTRUCCIONES:
Trabajar en condiciones de asepsia para todos los ensayos
Agitar las diluciones antes de tomar las muestras
IV. LISTADO DE EQUIPOS, MATERIALES Y RECURSOS:

Equipos
Hemocitmetro
Micropipeta
Vortex
Incubados a 30C
Microscopio
Mechero bunsen

Reactivos
Medio PDA
Saccharomyces cerevisiae liofilizado
V. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR:

Activacin del microorganismo

Pesar 4 gramos de levadura liofilizada

Preparar 50 ml de caldo YEPD
Incubar a 30C por toda la noche con agitacin
Conteo en hemocitmetro
Realizar la dilucin hasta 10-3
Colocar la muestra de la dilucin en los dos cuadrantes del hemocitmetro.
Dejar que se estabilice la muestra y colocar el cubreobjetos
Contar el nmero de esporas de forma diagonal en los dos cuadrantes.
 Se tendr un total de 26 datos
Se suman de la siguiente manera
Ejemplo:
2041 0100
01101 01000
2200 0001

Volumen del cuadrante 1 y 3

V= 0.1*0.25*0.25
V= 6.25*10-3 mm3
Volumen del segundo cuadrante
V= 0.1*0.2*0.2
V= 4*10-3 mm3
Concentracin
2+0+4+1+2+2+0+0+0+1+0+0++0+0+0+1
X1=
16
X1= 0.813 esp
X2= 0.4 esp
0.813 130 10003
X1= = = 1.3 105
6.25103 3 1
0.4 100 10003
X1= = = 1 105
4103 3 1
1.3105 +1105
X3=
2
X3=1.15*105*FD
X3=1.15*105*1*103
X3=1.15*108 esp/ml

Conteo en placas

Realizar diluciones seriadas hasta la 10-6

Sembrar por duplicado mediante difusin

VI. RESULTADOS OBTENIDOS:

Elabore las curvas de crecimiento para cada uno de los mtodos
Compare los resultados del hemocitmetro con los conteos en placas
VII. CONCLUSIONES:

VIII. RECOMENDACIONES: