Qu es el tiempo de retencin?

El tiempo de retencin es el tiempo que tarda el compuesto en atravesar la columna.

Si las condiciones de la columna y todas las condiciones de funcionamiento son constantes, un

compuesto determinado siempre tendr el mismo tiempo de retencin

El tiempo de retencin es el tiempo que tarda el soluto en atravesar la columna. El tiempo de

retencin se asigna al pico de soluto correspondiente y es una medicin de la cantidad de tiempo
que permanece el soluto en la columna. Es la suma del tiempo que permanecen todas las
molculas dentro de la fase estacionaria y la fase mvil.

Qu e la fase estacionaria?

La fase estacionaria es la encargada de separar los componentes de la muestra. Esta puede ser un
slido o un lquido, dispuestos sobre un slido que acta como soporte (columna). El slido de la
fase estacionaria puede ser de aluminio, slica gel, carbn o tierra de diatomeas. El limite superior
de temperatura de una fase estacionaria es la temperatura ms elevada a la que se puede
mantener sin que se produzcan descomposiciones o sangrados.

*Baja volatilidad a la temperatura de la columna. Se sugiere que su punto de ebullicin sea, al

menos, 100 C mayor que la mxima temperatura de trabajo.

* Estabilidad trmica a la temperatura de la columna.

* Inercia qumica, ya que, salvo casos especiales, no deber reaccionar qumicamente con los
componentes de la muestra

Qu es el sangrado?

Es la degradacin normal del polmero de la fase estacionaria. Esta degradacin se acelera a

mayores temperaturas, de aqu la deriva de la lnea de base al aumentar la temperatura de la
columna.

Cmo seleccionar la fase estacionaria?

Los lmites de temperatura del lquido elegido, considerando su viscosidad y volatilidad. Un

descenso en la temperatura de la columna aumenta el tiempo de retencin de los solutos y en
ocasiones puede mejorar las separaciones. La eleccin de la fase estacionaria depender no solo
de la presencia de polaridad dentro de los solutos, sino ms bien de una visin de conjunto de la
mezcla compleja que se desee separar.

Dependiendo del tipo de material es la temperatura mxima a la que se puede trabajar. Las fases
se pueden clasificar en:

No polares: para separar sustancias pocas o nada polares.

Con carcter ligeramente polar: utilizacin general, buena selectividad para mezclas mixtas.

De polaridad media o alta: no aptos para hidrocarburos no aromticos.

Para qu usar una rampa?

Cuando el tiempo de retencin se incrementa el ancho de pico aumenta y la altura disminuye,

hacindose difcil la determinacin de componentes que eluyen al final de un anlisis

Dado que la solubilidad de un gas en un lquido disminuye cuando se aumenta la temperatura, se

puede disminuir el tiempo de retencin aumentando la temperatura de la columna

Se usa rampa para que no se sobrepongan los picos

Recomendaciones:

En primer lugar, es necesario analizar una cantidad conocida de una muestra autntica pura del
compuesto para determinar el tiempo de retencin y el tamao de los picos.

Resumen columnas

Empacadas: contienen un soporte slido inerte con una cubierta delgada de la fase lquida. El
soporte slido es frecuentemente tierra de diatomeas. La fase lquida puede tener una viscosidad
baja y una alta solubilidad para la mezcla de componentes.

Las capilares: originalmente contenan una pelcula del lquido cubriendo la pared interna de la
columna de vidrio o metal. Las columnas de capilaridad ahora contienen una capa de
revestimiento slido dentro de ella con poro en el centro. Estas columnas son mejores porque se
les puede aplicar una velocidad ptima de flujo ms rpida (aprox. de 2- 5 ml por min en lugar de 1
ml por min). Debido a este tipo de columnas, los anlisis han podido ser ms sensibles.

Preguntas Examen

1.- Si tenemos fase estacionaria polar y analizamos algo polar no se analiza la muestra.

2 Compuestos orgnicos voltiles y gases con concentraciones menores a 1000 ppm

3.- cuando quieres los picos ms finos y si no quieres analizar toda la muestra

4.- Compuestos polares y no polares dependiendo de la muestra analizar, columnas, etc.

5.- W= el tiempo de que tarda en medirse de donde

W= el tiempo que empieza-el tiempo que termina

D=la cima del pico

r=2d/w1+w2

6.- Aumentando la temperatura

7.-

8.- La sonicacin se puede utilizar para eliminar los gases disueltos en lquidos(desgasificacin)
aplicando la energa sonora al lquido mientras est al vaco.
9.- eliminar impurezas

10.- absorbancia 71%, absorbancia en el infrarrojo, fluorescencia, ndice de refraccin,

electroqumicos y espectrometra de masas

11.- Fase normal, (fase estacionaria polar y fase mvil no polar), los disolventes ms polares
eluyen rpidamente a los solutos que tengan mayor tendencia a quedar retenidos.

En fase invertida, cuanto ms polar sea el disolvente, menor es su poder de elusin, porque
disuelve menos a los solutos no polares

12.- Instalacin Introduccin de muestras limpias Contaminacin por fase mvil o muestra
Almacenarla y guardarla de forma adecuada Lavarla despus de utilizarla con disoluciones
reguladoras de pH

Acero inoxidable 15-100 cm de 3 a 5 mm

Empaque-por partculas y la rea de contacto y separacin son funcionamiento del tamao de

partcula.

Una excepcin ocurre cuando sensibilidad o selectividad

Captura de electrones: sensibles a compuestos halogenados como 1,2 disetona, fumaratos,

pirobatos y algunos argometalicos.

Mejorar la eficiencia de una columna

Presiones

Temperaturas ms bajas incrementa la adsorcin

Dimetro interno

Tipo de fase liquida ( solvente de baja viscosidad, baja presin de vapor, etc.)

Gas acarreador

Dimetro de la partcula entre una malla de 80/100 de eficiencia

Muestras por GC

Columnas empacadas: se usa un detector de ionizacin de flama o trmica de 3 pies x 2 mm de

vidrio. Si el compuesto a analizar no eluye (excepto el solvente) se puede concluir que la muestra
no puede ser analizada por GC.

Columnas capilares: Se usa un detector de ionizacin de flama. Columnas entre 5, 10 o 15 m x 0.25

mm y helio como gas acarreador y la solucin debe de ser 1 micro litro y usar una relacin de
entrada Split y tener la temperatura a 60 C por 3 minutos y luego incrementar rpidamente a 350
. Si no hay picos no se debe de hacer por GC

La forma de los picos ayuda a evaluar el cromatograma: picos finos, simtricos, indican molculas
no polares y picos fuertemente asimtricos indican molculas ms polares.
Detectores:

Ionizacion de flama o FID:

Siempre son la primera eleccin. Muy buena sensibilidad y linealidad, proporcionan buenos
resultados y se usa en ambas columnas empacadas y capilares. Detecta solamente molculas
organicas.

Conductividad trmica TCD:

Es la segunda opcin para compuestos organicos, y ciertamente para compuestos inorgnicos

(agua, aire hidrogeno, dixido de carbono, etc) Son altamente recomendadas para altos flujos en
columnas empacadas

Captura de electrones ECD

Su selectividad para detectar compuestos que contienen halgenos, tal es el caso de los pesticidas
y de los bifenilos policlorados (PCBs). Incluso a concentraciones muy bajas (ppm y ppb) este
detector es efectivo. En ausencia de especies orgnicas, resulta una corriente constante entre un
par de electrodos. Sin embargo, la corriente disminuye significativamente en presencia de
molculas orgnicas que tienden a capturar electrones. El detector de captura de electrones es de
respuesta selectiva, siendo muy sensible a las molculas que contienen grupos funcionales
electronegativos tales como halgenos, perxidos, quinonas, y grupos nitro. Se necesita una
columna capilar.

Columnas datos:

Columnas mas largas generan mas platos y mas lentas. Por ejemplo 30 m se puede cortar oo se
emplea una velocidad de flujo mas alta.

Dimetros: columnas 530 micrometros (llamadas megaboro). Empezar con una 250 o 320 son
eficientes y rpidas.

Cual fase usar:

Siempre se empieza con una fase no polar, son las fases liquidas mas eficientes. Muchas fases
liquidas tienden a formar gotitas sobre la superficie de la silica fundida.

Inyectores:

Para empacadas:

Directo y on column. Son inyectores de vaporizacin calientes. Ambos son fciles y simples de
usar. La on column, la cual pasa dentro de las primeras pulgadas de la columna, es la tcnica mas
usada, para compuestos termolbiles. Son un pequeo tapon de fibra de vidrio para el deposito de
la muestra.

Para capilares:

Contienen pocos miligramos de la fase liquida, de las cuales las inyecciones deben ser muy chicas y
las cuales se usan varias tcnicas.
Split: la cual solo se inyecta un micro litro, la cual se vaporiza rpidamente y solo el 25 apsa la
columna y el resto al escape del inyector. La inyeccin puede hacerse sin diluir y no es el mas
exacto.

Splitless: El escape esta cerrado durante la inyeccin, se inyecta un volumen grande y a los 40 o 60
segundos la valvula Split se abre para purgar el inyector de la muestra y la temperatura de la
columna se propaga a niveles altos.

Tipo de gas a usar:

Depende del detector a usar, deben se rinertes, etc.

Tipo de cromatografas en hplc:

Particin, adsorcin, papel, capa fina, gel, intercambio ionico

Tipo de detectores:

Absorbancia, de fluorescencia, ndice de refraccin, dispersin de luz, electroqumicos.