Agencia Nacional de Vigilancia Sanitaria

Fundacin Oswaldo Cruz

Farmacopea
Brasilea
Volumen 1

Esta traduo um produto de termo de cooperao entre a Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
(ANVISA) e a Organizao Pan-Americana de Sade (OPAS), e no substitui a verso em portugus.

This translation is a product of a cooperation agreement between Brazilian Health Surveillance Agency
(ANVISA) and Pan American Health Organization (PAHO), and does not replace the portuguese version.

Esta traduccin es un producto del acuerdo de cooperacin entre la Agencia Brasilea de Vigilancia Sanitaria
(ANVISA) y la Organizacin Panamericana de Salud (OPAS), y no sustituye la versin en portugus.

5 edicin

Brasilia
2010

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Copyright 2010 Agencia Nacional de Vigilancia Sanitaria y Fundacin Oswaldo Cruz/Editora
Todos los derechos reservados. Est permitida la reproduccin parcial o total de esta obra, siempre que sea citada la
fuente.

5 edicin

Presidente
Paulo Gadelha
Presidente de la Repblica
Luiz Incio Lula de la Silva Vicepresidente de Ensino, Informacin y Comunicao
Maria del Carmo Leal
Ministro de Estado de la Sade
Jos Gomes Tiemporo

Director-Presidente
Dirceu Raposo de Mello

Adjunto del Director-Presidente Directora

Pedro Ivo Sebba Ramalho Maria do Carmo Leal

Directores Editor Executivo

Dirceu Aparecido Brs Barbano Joo Carlos Canossa Mendes
Jos Agenor lvares da Silva
Maria Ceclia Martins Brito Editores Cientficos
Nsia Trindade Lima y Ricardo Ventura Santos
Adjunto de Directores
Luiz Roberto da Silva Klassmann Consejo Editorial
Neilton Araujo de Oliveira Ana Lcia Teles Rabello
Luiz Armando Erthal Armando de Oliveira Schubach
Carlos E. A. Coimbra Jr.
Chefe de Gabinete Gerson Oliveira Penna
Iliana Alves Canoff Gilberto Hochman
Joseli Lannes Vieira
Elaboracin y edicin: Lgia Vieira da Silva
AGNCIA NACIONAL DE VIGILNCIA SANITRIA Maria Ceclia de Souza Minayo
SIA Trecho 5, rea Especial 57, Lote 200
71205-050, Braslia DF
Tel.: (61) 3462-6000
Sitio web: www.anvisa.gov.br

Brasil. Farmacopea Brasilea, volumen 2 / Agencia Nacional de Vigilancia Sanitaria. Brasilia: Anvisa, 2010.
546p., 1v/il.

1. Sustancias farmacuticas qumicas, vegetales y biolgicas. 2. Medicamentos y relacionados. 3. Especificaciones y

mtodo de anlisis. I Ttulo.

ISBN 978-85-88233-41-6

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

RESOLUCIN DE LA DIRECCIN COLEGIADA - RDC N 49, DE 23 DE NOVIEMBRE DE 2010

Apruebala Farmacopea Brasilea, 5a edicin y da otras providencias.

La Direccin Colegiada de la Agencia Nacional de Vigilancia Sanitaria, en el uso de la atribucin que le otorga el inciso
IV del art. 11 del Reglamento aprobado por el Decreto n. 3.029, de 16 de abril de 1999, y teniendo en vista lo dispuesto
en el inciso II y 1 y 3 del art. 54 del Reglamento Interno aprobado en los trminos del Anexo I de la Ordenanza N
354 de la ANVISA, del 11 deagosto del 2006, reeditada en el DOU (Diario Oficial de la Unin) de 21 de agosto de 2006,
y adems lo que consta del art. 7 inciso XIX de la Ley n. 9.782,del 26 de enero de 1999, en reunin realizada el 11 de
noviembre del 2010, adopta la siguiente Resolucin de la DireccinColegiada y yo, DirectorPresidente, determino su
publicacin:

Art. 1 Queda aprobada la Farmacopea Brasilea, 5a edicin, constituida del Volumen 1 - Mtodos Generales y textos y
Volumen 2 - Monografas.

Art. 2 Los insumos farmacuticos, los medicamentos y otros productos sujetos a la vigilancia sanitaria deben atender a
las normas y especificaciones establecidas en la Farmacopea Brasilea.

Prrafo nico. En la ausencia de monografa oficial de materia prima, formas farmacuticas, relacionados y mtodos
generales en la quinta edicin de la Farmacopea Brasilea, para el control de insumos y productos farmacuticos se admi-
tirla adopcin de monografa oficial, en su ltima edicin, de cdigos farmacuticos extranjeros, en la forma dispuesta
en normas especficas.

Art. 3 Estprohibidala impresin, distribucin, reproduccin o venda de la Farmacopea Brasilea, 5a edicin sin la pre-
via y expresa anuencia de la ANVISA.

Prrafo nico. Sin perjuicio delo dispuesto en el encabezado de este artculo, la ANVISA dispondr gratuitamente en su
sitio web copia de la quinta edicin y de sus actualizaciones.

Art. 4 Queda autorizada la Fundacin Oswaldo Cruz, por medio de la Editora Fiocruz, para la comercializacin de los
ejemplares de la quinta edicin de la Farmacopea Brasilea

Art. 5 Quedan revocadas todas las monografas y mtodos generales de las ediciones anteriores de la Farmacopea Bra-
silea.

Art. 6 Esta Resolucin entrar en vigor noventa (90) das despus de a su publicacin.

Brasilia, 24 de noviembre del 2010

DIRCEU RAPOSO DE MELLO

DirectorPresidente de la Agencia Nacional de Vigilancia Sanitaria

Publicada en el DOU N 224, 24 de noviembre del 2010

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 NDICE

Volumen 1
1 PREFACIO
2 HISTRICO
3 FARMACOPEA BRASILEA
4 GENERALIDADES
5 MTODOS GENERALES
5.1 Mtodos generales aplicados a medicamentos
5.2 Mtodos fsicos y fsico qumicos
5.3 Mtodos qumicos
5.4 Mtodos de farmacognosia
5.5 Mtodos biolgicos, ensayos biolgicos y microbiolgicos
5.6 Mtodos inmunoqumicos
5.7 Mtodos fsicos aplicados a materiales quirrgicos y hospitalarios
6 RECIPIENTES PARA MEDICAMENTOS Y RELACIONADOS
6.1 Recipientes de vidrio
6.2 Recipientes plsticos
7 PREPARACIN DE PRODUCTOS ESTRILES
7.1 Esterilizacin y garanta de esterilidad
7.2 Indicadores biolgicos
7.3 Proceso asptico
7.4 Salas limpias y ambientes controlados asociados
7.5 Procedimientos de liberacin
8 PROCEDIMIENTOS ESTADSTICOS APLICABLES A LOS ENSAYOS BIOLGICOS
8.1 Glosario de smbolos
8.2 Fundamentos
8.3 Valores atpicos
8.4 Ensayos directos
8.5 Ensayos indirectoscuantitativos
8.6 Promediosmviles
8.7 Ensayos indirectos todo o nada
8.8 Combinacin de estimativas de potencia
8.9 Tablas estadsticas
8.10 Ejemplos de clculos estadsticos aplicados en ensayos biolgicos
9 RADIOFRMACOS

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

10 EQUIVALENCIA FARMACUTICA Y BIOEQUIVALENCIA DE MEDICAMENTOS
11 AGUA PARA USO FARMACUTICO
12 SUSTANCIAS QUMICAS DE REFERENCIA
13 SUSTANCIAS COLORANTES
14 REACTIVOS
14.1 Indicadores y soluciones indicadoras
14.2 Reactivos y soluciones reactivas
14.3 Soluciones volumtricas
14.4 Tampones
ANEXO A - TABLA PERIDICA DE LOS ELEMENTOS QUMICOS - NOMBRES,
SMBOLOS Y MASAS ATMICAS
ANEXO B - UNIDADES DEL SISTEMAINTERNACIONAL (SI) USADAS
NAFARMACOPEIAEAS EQUIVALENCIAS CON OTRAS UNIDADES
ANEXO C - SOLVENTES PARA CROMATOGRAFA
ANEXO D - ALCOHOLIMETRA

Volume 2
ESTRUCTURA GENERAL DE LAS MONOGRAFAS 555
MONOGRAFAS 557
NDICE ALFABTICO 1383

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

1 PREFACIO
Realizar el prefacio de una obra de la magnitud de una far-
macopea nacional no es tarea fcil. Al presentar un trabajo,
en que se tuvo participacin en todo el proceso construc-
tivo, debe tenerse cuidado para emitir una opinin con la
mayor exencin posible.
No obstante, es un enorme orgullo poder expresar, en
nombre de una Comisin y de diversos Comits, las im-
presiones finales de una obra de caractersticas tcnicas
y cientficas, que ser instrumento para acciones de salud
pblica que se destinan a proteger la poblacin de su pas
por medio de la prevencin del riesgo sanitario. No se debe
olvidar la fuerza poltica que la Farmacopea Brasilea, 5a
edicin (FB 5) trae para el Pas.
Fuimos convocados, por la Agncia Nacional de Vigiln-
cia Sanitria (Anvisa) para presidir los trabajos que iran a
dar forma a la quinta edicin de la Farmacopea Brasilea,
no titubeamos ni un minuto porque conocemos el nivel de
competencia, compromiso y responsabilidad de los inte-
grantes de la Comisin de la Farmacopea Brasilea (CFB).
Posteriormente, la CFB nombr a los coordinadores de los
Comits Tcnicos Temticos (CTT) y estos formaron sus
equipos utilizando el mismo criterio.
Tenemos, ahora, una obra que es un marco divisor de esta
y de las futuras ediciones, as como en las relaciones pro-
fesionales entre el cuerpo tcnico cientfico, el administra-
tivo y la sociedad.
Las ediciones anteriores de la Farmacopea Brasilea no
fueron, hasta entonces, revocadas y, por lo tanto, legalmen-
te estaban en vigor. Adems del perjuicio cientfico, por la
brecha de los mtodos descritos, haba un cierto obstculo
para las acciones sanitarias que se basan en las descrip-
ciones farmacopeicas tanto para el rea de registro, como
para el rea de control de calidad, as como tambin para
la fiscalizacin.
Por determinacin superior, la CFB realiz arduo trabajo
de revisin de las mil setecientas veintisiete monografas
insertadas en las cuatro ediciones anteriores y propuso ex-
clusiones, reevaluaciones textuales, reevaluaciones meto-
dolgicas, actualizaciones para procedimientos ms segu-
ros, inclusiones de nuevos textos, entre otros.
Se dio inicio a proyectos financiados por la Anvisa con
participacin de conceptuadas Instituciones de Enseanza
e Investigacin en una forma pionera de trabajo que envol-
vi dos centenas de profesionales del rea de la salud, entre
ellos una buena parte del medio acadmico, proveyendo al
pas mano de obra calificada para atencin al sector farma-
cutico brasileo.
El envolvimiento con la Academia, como era de esperar-
se, llev a la produccin de una centena de informaciones
tcnicas y cientficas por medio de publicaciones de art-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
7
a
1
Farmacopea Brasilea, 5 edicin
culos, presentacin de trabajos en congresos, discusiones
en mesas redondas, charlas en eventos nacionales e inter-
nacionales, elaboracin de tesis de doctorado, disertacio-
nes de maestra y monografas de conclusin de cursos de
especializacin.
La produccin cientfica emanada de la quinta edicin lle-
v a FB 5 a un grado de destaque tcnico cientfico con
reconocimiento por congneres internacionales.
Nada de eso habra sido realizado, si no fuese por la estruc-
tura construida por la Comisin Permanente de Revisin
de la Farmacopea Brasilea, responsable de la cuarta edi-
cin, que tiene el mrito de haber establecido la dinmica
necesaria para la elaboracin de un documento de tamaa
responsabilidad y, principalmente, haber consolidado la
mentalidad de la real importancia de ese compendio para
una sociedad en constante evolucin.
De esa forma, puede la CFB y sus Comits, en consonancia
con la Anvisa, traer a la sociedad brasilea un nuevo cdi-
go totalmente revitalizado, presentado en dos volmenes
divididos en Mtodos Generales y Monografas. Estn in-
cluidos ciento setenta y seis mtodos generales y quinien-
tas noventa y nueve monografas, de las cuales doscientas
setenta y siete de insumos farmacuticos, doscientas diez
de especialidades, cincuenta y siete de plantas medicinales,
seis de relacionados, treinta de productos biolgicos y die-
cinueve de hemocomponentes y hemoderivados.
En el captulo de Generalidades (4), fue realizada la ac-
tualizacin de las definiciones y la inclusin de numerosas
otras, atendiendo a las particularidades de cada Comit.
En Procedimientos tcnicos aplicados a medicamentos
(5.1) se destacan la completa revisin del mtodo de uni-
formidad de dosis unitarias (5.1.6), ahora armonizado con
nuevos mtodos publicados por las principales farmaco-
peas internacionales. Otro destaque es la inclusin de la
prueba de goteo (5.1.8), de gran importancia para los estu-
dios de equivalencia farmacutica de las formas farmacu-
ticas lquidas de uso oral.
En Mtodos fsicos y fsico qumicos (5.2), fue realizada
una revisin completa de los Mtodos de espectrometra
atmica (5.2.13), as como de los mtodos de cromato-
grafa (5.2.17) que fueron reescritos y se encuentran ms
completos. Fue incluido texto sobre mtodos de electrofo-
resis capilar (5.2.22.1) e inmeros otros que pasaron o por
revisin completa o por modificacin de texto.
Para los Mtodos qumicos (5.3), fue realizada revisin
completa de los ensayos lmite, con nfasis para la elimina-
cin del uso de cido sulfhdrico y la inclusin de la espec-
trometra atmica en el Ensayo lmite para metales pesados
(5.3.2.3). Se incluye el Ensayo yodomtrico de antibiticos
(5.3.3.10), cuyo procedimiento era, anteriormente, descrito
1 8 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
en cada monografa pasando, ahora, a contar con un mto-
do general propio.
Los Mtodos de farmacognosia (5.4) fueron revistos y am-
pliados, destacando los Mtodos de preparacin y anlisis
de extractos vegetales (5.4.3), con el aumento de seis nue-
vos mtodos generales.
Los Mtodos biolgicos, ensayos biolgicos y microbio-
lgicos (5.5) son presentados con la inclusin de una serie
de Mtodos biolgicos (5.5.1), tales como la determina-
cin de cantidades de factores de la coagulacin sangunea
humana, totalizando diecisis nuevos mtodos. Se realiz
el trabajo de reorganizacin; revisin y ampliacin de los
ensayos biolgicos (5.5.2) y microbiolgicos (5.5.3).
En Recipientes para medicamentos y relacionados (6), as
como en Mtodos de preparacin de productos estriles (7),
fueron realizadas revisiones completas con reorganizacin
y ampliacin de textos para medicamentos y relacionados.
Nuevos ejemplos de ensayos fueron incorporados y, aque-
llos constantes de la cuarta edicin de la Farmacopea Bra-
silea fueron revisados en Procedimientos estadsticos
aplicables a los ensayos biolgicos (8).
Tres nuevos captulos fueron incluidos: Equivalencia Far-
macutica y Bioequivalencia (10); Agua para uso farma-
cutico (11) y Sustancias qumicas de referencia (12). La
inclusin de nuevos captulos fue iniciativa de los referidos
Comits y trae a la luz informaciones de literatura aliada
a las experiencias profesionales de sus respectivos miem-
bros. El captulo de Sustancias colorantes (13) fue revisto
y ampliado.
Trabajo especial fue la consolidacin del captulo de Re-
activos (14). En ese captulo fueron congregados todos los
indicadores, soluciones indicadoras, reactivos, soluciones
reactivas, soluciones volumtricas y tampones descritos en
las monografas del volumen 2 de la FB 5. Con eso, se
elimin la descripcin del reactivo en la propia monografa
Gerson Antnio Pianetti
Presidente de la CFB
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
dando una lectura ms dinmica por medio de la utiliza-
cin del captulo especfico. Son descritos, actualmente,
mil cincuenta y un ttulos que representan un aumento de
cien por ciento con relacin a la edicin anterior.
Todos los anexos fueron revisados y fue incluido el Anexo
C, que trata de solventes comnmente empleados en anli-
sis cromatogrficos
No podemos tener la ingenuidad de pensar una farmaco-
pea sin errores. A pesar de que todos los textos hayan sido
sometidos a consulta pblica y a una revisin cuidadosa,
en el caso de que haya sido incluida alguna informacin
inadecuada, que pueda llevar a la dificultad de la compren-
sin final, habr en la Coordinacin de la Farmacopea Bra-
silea un procedimiento para aclarar las dudas y proveer
la sustitucin, se llegara a ser el caso, con rapidez. Nuevos
textos o correcciones estarn expuestos en el medio elec-
trnico de la farmacopea, novedad de la presente edicin.
No estaramos entregando la FB 5 no fuese por la dedi-
cacin extrema de todos los miembros de la CFB, de los
CTT, de la COFAR y de todos los colaboradores. Sin el
conocimiento tcnico cientfico de esas personas y sin la
conduccin firme de la Directora Maria Ceclia Brito Mar-
tins, nuestro camino hubiese sido ms difcil.
A pesar de insistir en los agradecimientos, entendemos que
esas personas, por identificarse con los problemas sanita-
rios del Pas, participaron de todo ese proceso imbuidos en
un espritu cvico ya que son, en su mayora, voluntarios.
Reiteramos que todo el proceso que culmin con la publi-
cacin de la FB 5 se perder se no es implementada una
real poltica de Estado que nos garantice la continuidad de
los trabajos de la Comisin de la Farmacopea Brasilea y
de los CTT responsables de los dems productos: Farma-
copea Homeoptica, Formulario Nacional, Denominacio-
nes Comunes Brasileas, Sustancias Qumicas de Referen-
cia y Formulario Fitoteraputico.

PREFACIO DE LA FARMACOPEA DE BRASIL, 1
EDICIN
Hasta la fecha de la independencia de Brasil 7 de Sep-
tiembre de 1822 predomin como cdigo farmacutico
oficial la Farmacopea General para el Reino y dominios
de Portugal, de autora del Dr. Francisco Tavares, profesor
de la Universidade de Coimbra, y publicada en 1794 por
orden de la reina fidelsima D. Maria I.
De esa fecha en adelante, a pesar de nuestra emancipacin
poltica, continu siendo adoptada no slo la misma farma-
copea, como tambin el Codex medicamentarius fran-
cs, despus de 1837.
El Reglamento de la Junta de Higiene Pblica, mandado
a ejecutar por el Decreto n. 828, del 29 de Septiembre de
1851, sin determinar explcitamente cual es la farmacopea
que debera ser seguida, estableci una lista de los libros
que las farmacias tendran que tener y que son los siguien-
tes: Codex francs, Conspecto de las farmacopeas, por
Jourdan; Materia mdica, formulario de Bouchardat; Far-
macopea General; Farmacopea de Foy; Cdigo Farmacu-
tico y Farmacografa del Agostinho Albano de la Silveira
Pinto (ltima edicin).
La primera mencin legal estableciendo obligatoriamente
el Codex francs como farmacopea oficial de Brasil es la
que consta del artculo 58 del Reglamento que vino con el
Decreto n. 8.387, del 19 de enero de 1882, que expresa lo
siguiente: para, la preparacin de los, remedios oficinales
se seguir la farmacopea francesa, hasta que est compues-
ta una farmacopea brasilea, para lo que el Gobierno nom-
brar una Comisin de personas competentes. Despus de
publicada por autorizacin del Gobierno la farmacopea
brasilea, los farmacuticos tendrn los preparados segn
las formulas de esta farmacopea, lo que no inhibir de te-
nerlos segn las formulas de otras para que cumplan las
prescripciones de los facultativos, los cuales pueden rece-
tar como lo entiendan.
Redactado, sin embargo, para un pas tan diferente del
nuestro, como es Francia, el Codex medicamentarius ga-
llicus no podra satisfacer nuestras necesidades, por lo que
todos estuvieron de acuerdo en proclamar, sin que nuestros
dirigentes, siempre sordos e indiferentes a los pedidos de la
clase farmacutica, tomaran cualquier iniciativa para darle
a Brasil un cdigo farmacutico.
En vista de tal desatencin del poder pblico las asociacio-
nes farmacuticas y mdicas buscaron llevar adelante la or-
ganizacin de nuestra farmacopea, habiendo, sin embargo,
fracasado en todos los intentos por falta de apoyo oficial y
debido a impedimentos de todo tipo.
Brasil, sin embargo, que siempre ha sabido igualarse con
las dems naciones civilizadas en todos los ramos de las
ciencias, de las artes, etc., no poda continuar a ser regido,
en cuanto al ejercicio de la Farmacia, por un cdigo extran-
jero, que, a pesar de que es ptimo para su pas, no satisfaca
en absoluto nuestras necesidades. Por eso, a pesar de que
reconociendo el arrojo de tal iniciativa, resolvimos asumir
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
9
a
1
Farmacopea Brasilea, 5 edicin
la ardua tarea y alta responsabilidad de redactar nuestro
futuro cdigo farmacutico, confiados que nuestro grande
amor a la profesin venciera todos los bices. Despus de
ms de dos lustros de paciente trabajo, tuvimos la ventura
de presentar nuestro proyecto de Farmacopea Brasilea al
Excmo. Sr. Dr. Carlos Chagas, entonces, director general
del Departamento Nacional de Salud Pblica, solicitando
de S. Ej. El nombramiento de una comisin para juzgarlo,
la cual qued as constituida: Profesores Drs. Antonio Pa-
checo Leo, Renato de Souza Lopes y Artidonio Pamplona
y Farmacuticos Alfredo da Silva Moreira, Malhado Filho
e Isaac Werneck, da Silva Santos.
Despus de examen minucioso de la obra, esa comisin re-
solvi aceptarla, solicitando del Gobierno su oficializacin
como Cdigo nacional farmacutico, con la supresin, sin
embargo, de los artculos siguientes, considerados de uso
muy restricto para ser oficializados: Pia Acetato bsi-
co de cobre Acetylarsanilato de sodio Acido chryso-
phanico -. Acido dipropylobarbiturico Acido yodhdrico
diluido Agrico del roble- Agua de Carlsbad artificial
Agua imperial Alcoholatura vulneraria Aloe liquefec-
to Amilo de arroz Apocynum Apozemas amargo, de
cusso, de romera, de semen-contra, estomachico, purgativo
y sudorfico Bromuro de estroncio Bromuro de litio
Caa fistula Carbonato de estroncio Cardo santo
Roble -. Cataplasma de harina de mandioca Cataplasma
de fcula de papa Custco de Viena Cerato de esper-
maceti Cerato de moscada Cereza negra Cereza roja
Cloral formamida Clorato de oro y de sodio Mercurio
cloroamiduro Citrato de cafeina efervescente Citrato de
hierro y quinina Clister de amilo Clister de manzanilla
Clister laxante Colodion cantaridado Colodion yodo-
formado Conserva de caa fistula Coto Electuarios
de caroba compuesto, de copaba compuesto y de senna
Elixir adyuvante Elixir de ans Elixir de antipyrina
Elixir de bucco Elixir de genciana Elixir de phosphato
frrico Elixir de sucupira Elixir dentifricio Emplastro
de jabn alcanforado Emplastro de jabn salicylado
Emplastro oxycrocco Emulsin de esencia de terebinthi-
na Espritu de zimbro compuesto Esencia de pimienta
Estaphisagria Ethylocarbonato de diquinina Ethylo-
salicylato de quinina Extracto de bistorta Extracto de
cardo santo Extracto de centaurea menor Extracto de
cicuta Extracto de cimicifuga Extracto de dulce-amarga
Extracto fluido de anglica Extracto fluido de calamo
aromtico Extracto fluido de canela de la China Extracto
fluido de cardo santo Extracto fluido de roble Extracto
fluido de coto Extracto fluido de estaphisagria Extracto
fluido de mercurial Mellito de mercurial Mercurial
Methylenocitrato de hexamethylenotetramina Mostaza
blanca Nitrato neutro de bismutho Paratoluolsulfonodi-
chloramida Pastillas de blsamo de Tol de bicarbona-
to de sodio, de borato de sodio, de carbn, de chlorato de
potasio, de chlorhydrato de cocaina, del codeina, de azufre,
de menta peperina, de ipecacuanha, de ipecacuanha opia-
das, de kermes, de kermes opiadas, de phenolphtaleina, de
santonina, de santonina compuestas y del tanino Pedilu-
vio sinapizado Phosphato de sodio efervescente Polvos
de apocynum, de dulce-amarga y de quebracho Pulpa
de caa fistula purificada Pomada del chloroamideto de
mercurio Pomada de tanino Purga de cayap Quebra-
1 10 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
cho Sal de Carlsbad artificial Soluto de acetotartarato
de aluminio, de creosoto, de cresol, de phosphato de sodio
compuesto y de sulfato basico de hierro Jugo de anan
Jugo de cereza Tintura de coto Valerianato de zinc
Vino aromtico Vino de cacao
Vinho de ipecacuanha Jarabe de abacaxi, de acido yod-
hdrico, de cereza, de cip azougue, de dulce-amarga, de
espelina, de gengibre, del manac, del mangerona, de mui-
rapuama y de poejo.
PREFACIO DE LA FARMACOPEA DE BRASIL, 2
EDICIN
Ya haca treinta aos que estaba en vigor la primera edicin
de la Farmacopea BRASILEA, editada en 1929. En ese
largo lapso de tiempo, el Cdigo Farmacutico Brasileo
se torn anticuado y desactualizado, por el inmenso pro-
greso que alcanzaron las ciencias mdicas y farmacuticas,
en todo el mundo.
Desde 1.950 la obra estaba completamente agotada, crean-
do, as, serias dificultades a las nuevas Farmacias y La-
boratorios Industriales Farmacuticos, que legalmente no
pueden funcionar sin la presencia de ese Cdigo Oficial.
Consecuentemente, de todas las localidades del Pas eran
enviadas a los poderes pblicos constantes advertencias re-
saltando la necesidad de ser elaborada una nueva edicin,
lo que solamente aument durante los nueve aos de su
agotamiento total.
Eran estas fuertes razones las que empujaban para que se
pusiera en marcha la elaboracin de una segunda edicin.
No obstante, dificultades de todo tipo fueron apareciendo,
impidiendo que la obra fuera realizada en tiempo y forma,
pese el empeo y la buena voluntad de nuestras autorida-
des sanitarias.
Era necesaria una completa revisin y actualizacin de
todo el contenido de la primera edicin, y esa tarea era, sin
duda, muy difcil y delicada, especialmente en un Pas de
larga extensin territorial, como es Brasil, cuando se preci-
sa de una colaboracin o contribucin de carcter nacional,
como es exigido en el caso.
Poco tiempo despus de la publicacin de la Farmacopea
y de su uso en los laboratorios farmacuticos, empezaron a
surgir crticas, observaciones, las cuales fueron siendo re-
copiladas y coordinadas por la ASOCIACIN BRASILE-
A DE FARMACUTICOS, con sede en la Capital de la
Repblica, antes no exista, y tambin la Comisin Oficial
para su estudio y revisin.
En El HISTRICO DE LA FARMACOPEA BRASILE-
A, incluido en la presente edicin, se encuentran noticias
detalladas de las actividades desarrolladas para la completa
revisin y actualizacin de esta segunda edicin del Cdi-
go Farmacutico Brasileo. Se agrega una Comisin pari-
taria, constituida de miembros de la Capital de la Repbli-
ca y de So Paulo, que tuvo a su cargo la revisin final de la
obra en impresin, con poderes para atender dudas y fallas
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
verificadas, as como el de darle uniformidad al lenguaje
farmacopeico adoptado por la Comisin Revisora Oficial.
En la elaboracin de la presente edicin, la COMISIN
DE REVISIN DE LA FARMACOPEA sigui, en princi-
pio, la misma orientacin adoptada por la FARMACOPEA
NORTEAMERICANA y, en parte, a la de la FARMACO-
PEA INTERNACIONAL, en lo que se refiere a la distri-
bucin de la materia y estudio de las monografas; en lo
referido a la ltima Farmacopea, hay que tener en cuenta
que fue Brasil uno de los primeros pases, que adoptaron
aquel Cdigo de carcter internacional.
Las monografas que constan en la primera edicin y que
van a continuar en la segunda sufrieron una completa re-
visin, para ser actualizadas, en cuanto a los procesos de
ensayo, de medicin de cantidades y otros requisitos, a fin
de cumplan con las exigencias de la tcnica moderna.
Fue mantenida la nomenclatura de los medicamentos en
portugus, en orden alfabtico, como en la edicin anterior,
as como los sinnimos y corregida la nomenclatura oficial
en latn.
Para los productos patentados o registrados, fueron adopta-
dos los nombres por los cuales son conocidos, sealndose
con el clsico asterisco (*).
En la 1a Edicin de la Farmacopea Brasilea, a pesar de
que Brasil no haba firmado los Protocolos de Bruselas de
1.906 y 1.929, relativos a la Unificacin de la Frmula de
los Medicamentos Heroicos fueron acogidas en casi su to-
talidad las prescripciones en ellos contenidos, conforme se
puede verificar en los cuadros comparativos incluidos en
la Farmacopea.
Por el nuevo Protocolo del 20 de Mayo de 1.952 fueron
derogados los anteriores, siendo adoptadas en cambio las
prescripciones correspondientes a las de la Farmacopea In-
ternacional, de la Organizacin Mundial de Salud. La Far-
macopea Internacional fue recibida con aplausos en Brasil,
como bien tradujo su delegacin en el 2 Congreso Pana-
mericano de Farmacia y Bioqumica, realizado en Per en
1951. La 2a edicin de la Farmacopea Brasilea atendi
tanto como fue posible a las referidas prescripciones.
La Comisin de Revisin, despus de un meticuloso estu-
dio, deliber que un gran nmero de drogas y preparacio-
nes galnicas oficinales diversas, de poco uso, fuese supri-
mido de la 2a edicin, siendo incluidas, en gran parte, en
el Formulario Nacional, que ser publicado a la brevedad,
como complemento de la Farmacopea.
La Comisin, teniendo en vista la nulidad de la accin te-
raputica de muchas drogas y medicamentos, as como el
completo desuso actualmente de numerosos otros, delibe-
r, despus de largos debates con todos los miembros de
la Comisin Oficial y de las Subcomisiones Estaduales, la
exclusin de monografas cuya relacin va ms adelante.
Tomando en consideracin el gran progreso alcanzado en
las tres ltimas dcadas en el campo de la Medicina y de la

Farmacia, fueron incluidas en la presente edicin numero-
sas monografas de valiosos medicamentos, que hoy en da
dominan la teraputica moderna tales como: antibiticos,
sulfas, hormonas, vitaminas, barbitricos, etc., conforme a
la relacin que se ver ms adelante.
Por fin va transcrita la relacin completa de todas las per-
sonalidades, que, con tanto empeo y entrega, dieron su
valiosa colaboracin, para que la nueva edicin se vuelva
una brillante realidad. En este punto, sera injusto se no
fuese destacada especialmente la COMISIN DE ESTAN-
DARIZACIN FARMACUTICA DE SO PAULO que,
patriticamente, dio preciosa y constante contribucin,
empleando su mximo esfuerzo para que la nueva edicin
llegase a su fin, al nivel de las ms avanzadas Farmacopeas
del Mundo.
La Comisin de Revisin de la Farmacopea se sentir
recompensada por el gran esfuerzo realizado, si la nueva
edicin puede corresponder, como es de esperar, a su gran
finalidad prctica, que es la perfecta seleccin de las ma-
terias primas de empleo medicinal y su estandarizacin,
condicin principal de la actividad y eficiencia de los me-
dicamentos, prestando as, un relevante servicio a la salud
pblica del Pas.
Rio de Janeiro, 22 de febrero de 1959
Luis Salgado Lima Filho
Presidente de la Comisin de Revisin de la Farmacopea
PRESENTACIN DE LA FARMACOPEA BRASILE-
A, 3a EDICIN
En el contexto de los numerosos eventos que vienen sea-
lando la ejecucin de los Planes Nacionales de Desarrollo,
como marcos histricos en el crecimiento global del pas,
no podra estar ausente el sector Salud y, entre sus realiza-
ciones bsicas, el lanzamiento de la Farmacopea Brasilea,
en edicin revista y actualizada, para los tiempos de hoy.
De ah vienen algunas providencias no fructificadas, a par-
tir de 1962, que slo se corporificaron y vinieron a tener
culminacin en la actual gestin del Ministro Paulo Al-
meida Machado, mediante nueva iniciativa, concretizada
a travs de la Secretara Nacional de Salud y de su rgano
especfico, el Servicio Nacional de Fiscalizacin de la Me-
dicina y Farmacia.
El Sr. Ministro design la nueva Comisin de Revisin de la
Farmacopea, mediante la Odenanza 276/75, colegiado que
cumpli su misin, en plazo satisfactorio, habiendo contado
con la valiosa cooperacin del Consejo Federal de Farmacia.
Aprobando esta 3a edicin de la Farmacopea, con la expe-
dicin del Decreto 78.840/76, refrendado por el Ministro
de la Salud, el Excmo. Sr. Presidente de la Repblica con-
templ el Ministerio de la Salud y la clase mdica y farma-
cutica del pas, con ese importante instrumento frmaco
tcnico y normativo de grande alcance, en la secuencia de
otras medidas de operacionalizacin que vienen siendo im-
plantadas en ese destacado Sector de la vida nacional.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
11
a
1
Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Al someter los originales de esta 3a edicin a la aproba-
cin del Presidente Ernesto Geisel, el Ministro no slo lo
obtuvo, como pudo, y era de su empeo, conmemorar el
cincuentenario de la 1a edicin, lanzada, exactamente, en
el da 25 de noviembre de 1927, da y mes coincidentes con
los de esta publicacin.
La revisin realizada sobre la edicin anterior fue laboriosa
y minuciosa, de modo que los medios interesados pudie-
sen, contar con un instrumento de normas y consultas de
mayor credibilidad y seguridad, lo que se dejar en eviden-
cia al examinar las grandes modificaciones aadidas en el
texto actual.
Se consider que la experiencia internacional gan ms
fuertes convicciones que los frmacos utilizados, y los
medios de su identificacin y control, se generalizan cada
vez ms. Por lo tanto es debido fortalecer los fundamentos
de los valores teraputicos regionalizados, sobresaliendo
evidentemente la uniformizacin de los controles. Adems
de los recursos teraputicos provenientes de la flora cada
vez con menos representacin- respondiendo a las distin-
ciones locales, crecen los quimioterpicos, en volumen y
en calidad, favoreciendo la uniformizacin de los mtodos
de identificacin y control. Se desarrollaron de ah las Far-
macopeas Europeas e Internacional, esta ltima ganando
fama de parmetro a ser respetado y seguido.
No fue otro el plan de la Comisin. Mientras fue posible,
prevalecieron las normas de la Organizacin Mundial de la
Salud. As, la nomenclatura latina precediendo a la nacio-
nal, el nombre qumico y la frmula molecular, y tambin
los mtodos generales de anlisis.
No se perdieron de vista los recursos laboratoriales dentro
de la realidad nacional Por eso mismo, y cuando fue posible
y necesario, se adoptaron mtodos diversos, simples y so-
fisticados, para un mismo examen. Por otro lado, teniendo
presente como necesidad esencial la debida identificacin de
los agentes teraputicos constantes de los fitofrmacos, slo
fueron incluidos en la Farmacopea aquellos para los cuales
ya disponemos de mtodos eficaces de identificacin y me-
dicin de dosis. Ediciones subsiguientes bajo la forma de
Suplementos, y el propio Formulario Nacional que cierta-
mente se editar vendrn a llenar lagunas existentes.
El amplio listado de nuevos agentes teraputicos obliga,
necesariamente, a considerar su efectiva necesidad a nivel
nacional.
La industria farmacutica fue invitada a manifestarse, ofre-
ciendo subsidios por va de las entidades representativas,
contribucin que mereci prudente clasificacin de la Co-
misin.
Adems, que a la par de esa relacin y de los subsidios, se
tom por legtimo, tambin, un levantamiento de los me-
dicamentos de mayor representatividad en el recetario y
consumo nacionales.
Se tiene, pues, que ese elenco y, las monografas revis-
tas, remanentes de la 2a edicin, constituyen, en el todo,
1 12 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
el acervo monogrfico de la 3a edicin de la Farmacopea
Brasilea.
Por cierto quedarn otras monografas para aadir, tanto
como algunas existentes, o persistentes, tal vez puedan ser
susceptibles a supresin. Esta evidencia slo habla a favor
de la propia Farmacopea, dinmica como la teraputica, y
pendiente de actualizaciones ms frecuentes, como suele
ser la propia Farmacologa.
Teniendo en cuenta que la 2a edicin de la Farmacopea
Brasilea se encuentra agotada, y que muchas monogra-
fas constantes de la misma, no revistas, representan ade-
ms fuente bibliogrfica de mrito y con fuerza legal, la
Comisin decidi que el 1 Suplemento de la 3a edicin
representar, en el todo y exclusivamente, la constante de
aquel acervo, a ser publicado en secuencia inmediata a esta
nueva edicin.
Crticas, correcciones y observaciones sern aceptados. Y
se ruega, desde ahora, que sean hechos de modo claro y
objetivo, para mayor facilidad de las ediciones venideras.
Todos ellos, cuando sean constructivos, representarn un
valioso subsidio para el perfeccionamiento de la Farmaco-
pea Brasilea, como este trabajo pretende ser, comparado
con la edicin anterior.
PREFACIO DE LA FARMACOPEA BRASILEA, 4
EDICIN
Cumpliendo las disposiciones del Decreto Federal n
78.840, del 25/11/1976, la nueva edicin de la Farmacopea
Brasilea viene al encuentro de los deseos de la comunidad
tcnico-cientfica brasilea, interesada en la revisin de la
edicin anterior.
La Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea
Brasilea, constituida por la Ordenanza n 151/82 del Exc-
mo. Ministro de Salud, slo puede realizar su trabajo gra-
cias al apoyo decisivo de la Secretara Nacional de Vigilan-
cia Sanitaria SNVS del Ministerio de Salud. Acuerdos
y convenios celebrados entre la SNVS, la Central de Me-
dicamentos CEME del Ministerio de la Previdencia y
Asistencia Social MPAS y el Consejo Nacional de De-
sarrollo Cientfico y Tecnolgico CNPq -, aseguraron a la
Comisin recursos financieros indispensables, incluyendo
becas de estudios para ejecucin de los trabajos.
La elaboracin de las monografas fue confiada a profesio-
nales con efectiva experiencia en el asunto; estas mono-
grafas fueron revisadas por otros profesionales del mismo
campo de actividad. A pesar de esto, eventuales imperfec-
ciones, errores u omisiones son de responsabilidad exclu-
siva de la Comisin Permanente de Revisin de la Farma-
copea Brasilea, a quien le corresponde la aprobacin del
texto final.
La 4a Edicin de la Farmacopea Brasilea marca el inicio
de una nueva era. Se trata de la edicin en la cual se adopta
un nuevo sistema de presentacin. El rpido avance de la
tecnologa y la creciente complejidad de las sustancias me-
dicinales determinan la necesidad de frecuentes revisiones
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
de la Farmacopea. Para facilitar estas revisiones y posi-
bilitar introduccin de nuevas monografas y mtodos de
anlisis necesarios, la Comisin adopt esta nueva forma
de presentacin.
El presente volumen constituye la Parte I de la Farmacopea
y comprende las generalidades, y los mtodos generales de
anlisis. La Parte II ser constituida de monografas de ma-
terias primas y especialidades farmacuticas, publicadas en
fascculos. Un ndice indicar el ttulo de las monografas,
sus nmeros de referencia y la fecha para su entrada en
vigor.
La Farmacopea Brasilea en su 4a edicin tiene vigencia
en todo el Territorio Nacional. La nomenclatura, los mto-
dos de identificacin y anlisis y todos los dems datos en
ella contenidos prevalecen sobre otros sealados en cdi-
gos farmacuticos diversos. En los casos omisos, pueden
ser utilizados la Farmacopea Internacional, la Farmacopea
Europea y otros cdigos farmacuticos en sus ltimas edi-
ciones.*
Las monografas de la Farmacopea Brasilea 4a edicin
establecen parmetros que el producto deber satisfacer en
cualquier momento durante su perodo de uso y no para ser
interpretados solamente como especificaciones para libera-
cin por parte del fabricante.
La no inclusin de un frmaco o adyuvante de fabricacin
en la 4a edicin de la Farmacopea Brasilea no dispensa
estas sustancias de anlisis segn otros cdigos oficiales;
as como la presencia de impureza no descrita especfica-
mente en la Farmacopea no significa que la sustancia pue-
de ser usada por el simple hecho de que la Farmacopea no
lo especifique. En estos casos, la decisin debe ser toma
con base en el buen sentido tcnico y en las buenas prcti-
cas de fabricacin.
La Farmacopea es obra para profesionales debidamente
preparados y entrenados. Por este motivo, no provee ex-
plicaciones didcticas, presentando las monografas con
redaccin clara, sucinta y desprovistas de explicaciones
juzgadas desnecesarias por la Comisin.
La Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea
Brasilea torna pblicos sus agradecimientos a todos aque-
llos que colaboraron en la preparacin de esta edicin y, en
especial, al Consejo Federal de Farmacia por el apoyo que
posibilit la publicacin oficial de la F. Bras. IV.
* Normas Nacionales extrafarmacopeicas debern obtener
previamente aprobacin de la Comisin Permanente de
Revisin de la Farmacopea Brasilea del Consejo Nacio-
nal de Salud.

2 HISTRICO
BREVE ACTUALIZACIN HISTRICA DE LA FAR-
MACOPEA BRASILEA, 5a EDICIN
La casi centenaria Farmacopea Brasilea ilustra un ciclo
de gran importancia para el pas. Partiendo de su primera
edicin, fruto de un arduo trabajo de un nico farmacuti-
co, atraves ocho dcadas buscando su espacio, de hecho
y de derecho, como instrumento fundamental de apoyo a
las polticas nacionales de salud emanadas de gobiernos
con proyectos serios de proteccin al ciudadano brasileo.
Si hubiesen sido respetadas las determinaciones de los de-
cretos y resoluciones que indicaban revisin cada periodo
quinquenal estara publicndose su dcima sptima edicin
lo que infelizmente no est ocurriendo, ciertamente por
problemas ocurridos pero sin ningn demrito al pasado,
dado que nuestro objetivo es siempre mirar hacia adelante.
Al inicio del siglo XX, las boticas son los principales lo-
cales de la prctica sanitaria y el pas experimenta la con-
vivencia con su joven repblica. Rodolpho Albino Das
da Silva se entrega a un trabajo hercleo de pasar para un
libro toda una vida de investigacin sobre las drogas ve-
getales y animales, descripcin de productos qumicos y
de preparaciones oficinales. Nace, as, la primera edicin
de la Farmacopea Brasilea, oficializada por el gobierno
federal por medio del decreto N 17.509 del 4 de noviem-
bre de 1926, sin embargo obligatorio a partir del 15 de
agosto de 1929.
Una gran guerra azota al planeta en los aos cuarenta y
enseguida un gran cambio mundial se hace sentir en todos
los pases desarrollados o en desarrollo, y nuestra primera
edicin ya no cumple ms su papel. Las boticas son susti-
tuidas, gradualmente, por farmacias que no realizan ms el
arte de la manipulacin magistral y es decretado el inicio
del fin del enorme servicio prestado por el profesional de
farmacia a la poblacin. El pas es invadido por industrias
multinacionales que, de a poco, consiguen eliminar todas
las pequeas empresas brasileas del ramo.
Paralelamente, inicia el acceso de medicamentos moder-
nos que exigen control de calidad diferenciado debido a la
produccin a gran escala y a la cantidad de frmacos sin-
tetizados y originarios de diversas fuentes. La Farmacopea
no escap del movimiento modernista impreso por el Pre-
sidente Juscelino Kubitschek que, en 1959 firma el Decreto
N 45.502 aprobando la segunda edicin de la Farmacopea
Brasilea.
Ya en otra realidad, aquella edicin se presenta orientada
para los insumos y especialidades farmacuticas buscando
estndares nacionales de calidad de los bienes de salud a
ser usados por la sociedad. Las formulaciones oficinales
fueron enviadas para una publicacin futura que se preten-
da publicar como Formulario Nacional lo que solamente
ocurri en los aos ochenta.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 13
La tercera edicin de la Farmacopea Brasilea esper 17
aos para ser publicada por medio del Decreto N 78.840
2
del 25 de noviembre de 1976 y refuerza la edicin anterior
ampliando y modernizando su contenido.
De la misma forma que las anteriores, la cuarta edicin de
la Farmacopea Brasilea fue elaborada a partir de iniciati-
va de profesionales de la salud. Los trabajos fueron inicia-
dos en 1982 con la creacin de la Comisin de Revisin de
la Farmacopea Brasilea (CPRFB) nombrada por el Direc-
tor de la Secretara Nacional de Vigilancia Sanitaria, Dr.
Antnio Carlos Zanini.
Solamente en 1988 fue posible el lanzamiento de la Parte
I de la cuarta edicin, conteniendo mtodos generales, y
se dio inicio a la elaboracin de la Parte II conteniendo
las monografas de frmacos y especialidades. La entrega
del primer fascculo se dio en 1996. La dedicacin, per-
sistencia e incansable trabajo del Dr. Celso F. Bittencourt,
entonces Presidente de la CPRFB, contribuyeron para la
creacin y mantenimiento de la infraestructura necesaria
al desarrollo de los fascculos de la cuarta edicin hasta su
conclusin reforzando las bases para la continuacin de los
trabajos hasta el presente. La participacin del medio aca-
dmico, por medio de universidades pblicas, fue y conti-
na siendo, intensa y imprescindible.
Con la creacin de la Anvisa, en 1999, la revisin perma-
nente de la Farmacopea Brasilea pasa a ser de responsa-
bilidad administrativa, tcnica y cientfica de la agencia. El
slido apoyo de la Direccin Colegiada, desde entonces,
especialmente por su primer Director Presidente Dr. Gon-
zalo Vecina Neto, llev a la Comisin Permanente de Re-
visin de la Farmacopea Brasilea a alcanzar la madurez
de sus trabajos.
Fueron construidas metodologas de trabajo basadas en
las ms modernas y actualizadas referencias mundiales en
comparacin con publicaciones de cdigos farmacuticos
realizados por congneres de farmacopeas internacionales
de gran respeto en la esfera farmacutica mundial.
Por medio de contratos y convenios se pudo financiar es-
tudios laboratoriales y es posible, as, que sean lanzados
los fascculos 2 (2000); 3 (2002); 4 (2003); 5 (2004) y 6
(2005) este ltimo ya en la gestin del Director-Presidente
Dr. Dirceu Raposo de Mello, completando as, la cuarta
edicin de la Farmacopea Brasilea.
Mientras tanto fueron adems publicados, el fascculo 1
de la Farmacopea Homeoptica Brasilea 2a edicin, y el
Formulario Nacional. Fueron certificados 67 lotes de sus-
tancias qumicas de referencia de la Farmacopea Brasilea
y monitoreados otros 58 lotes.
El hecho de que una nueva edicin de la Farmacopea Brasi-
lea, no revoque ediciones anteriores siempre fue un obst-
 14 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
culo para las acciones reguladoras de vigilancia sanitaria. Se
decidi, por lo tanto, trabajar la quinta edicin para realizar
un levantamiento profundo de todos los textos publicados en
las cuatro ediciones, evaluar necesidades de permanencia,
2 de sustitucin de textos y procedimientos con o sin evalua-
cin laboratorial, y de exclusin de monografas obsoletas.
De esa forma, la quinta edicin revoca todas las dems
ediciones y pretende servir de ncleo central de ediciones
futuras en un proceso continuo de revisin buscando siem-
pre la insercin en una realidad internacional colocndola
entre las mejores farmacopeas. Servir, tambin, para guiar
la propuesta de una farmacopea conjunta con pases del
Continente suramericano. Actualmente la Comisin de la
Farmacopea Brasilea posee asiento como observador de
las Farmacopeas Europea e Internacional y reconocimiento
mutuo con la Farmacopea Argentina.
La Comisin de la Farmacopea Brasilea y todos sus comi-
ts poseen hoy fuertes aliados dentro de la Agncia Nacional
de Vigilncia Sanitria con destaque especial para la Dra.
Maria Ceclia Martins Brito, incansable luchadora para que
se tornen realidad todas las acciones propuestas por el cole-
giado de la Comisin y de los Comits. No nos ha faltado
posicionamiento favorable, ya sea en la conduccin de los
procesos de aprobacin de proyectos inherentes las nuestras
actividades, as como en las numerosas necesidades logsti-
cas para facilitacin de los trabajos de la Comisin y de los
Comits compuestos por profesionales de alto nivel y que
ejercan la funcin por medio del voluntariado.
Tener una farmacopea es una cuestin de seguridad nacio-
nal, desarrollo tcnico y cientfico, insercin en un nivel de
reconocimiento mundial y no est ms en la esfera de una
simple poltica de Gobierno y si de Estado. Este hecho trae
a la CFB la tranquilidad de saber que ejecuta un proyecto
de inters nacional sin vuelta atrs y con una agenda a ser
cumplida dentro de la poltica sanitaria practicada por el
rgano regulador y por el Ministerio de la Salud.
No se puede ser ingenuo en no asumir que algunas fallas
en esta quinta edicin sern rpidamente identificadas, sin
embargo est en fase de creacin en la Coordinacin de la
Farmacopea Brasilea, estructura que espera atender rpi-
damente a los cuestionamientos de los usuarios dando res-
puestas rpidas y objetivas que puedan aclarar dudas sobre
los textos publicados. Se pretende, al final del 2011, lanzar
el primer suplemento trayendo las modificaciones, correc-
ciones e inclusiones.
Es necesario informar que todos los textos publicados en
la quinta edicin pasaron por consulta pblica para acceso
del ciudadano y libre manifestacin, por tanto es una obra
cuya construccin fue colectiva con la participacin de los
interesados en el tema. Todas las manifestaciones externas
fueron consideradas.
La historia de nuestra farmacopea viene siendo contada,
como primicia, por nuestros sucesores y contiene datos
muy importantes para la comprensin de toda su evolu-
cin. Optamos en reproducirlos, con excepcin del hist-
rico no contemplado en la 1a edicin, sin ningn retoque
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
para resguardar la autenticidad y suministrar al lector la
impresin de, tambin, estar participando de esa historia.
Como Presidente de la Comisin de la Farmacopea Brasi-
lea nos queda espacio para expresar los sinceros agrade-
cimientos a todos los que ayudaron a construir esta obra
y tener la certeza que continuaremos trabajando de forma
colaboradora para que finalmente consigamos mantener
actualizada y moderna la FARMACOPEA BRASILEA.
Gerson Antnio Pianetti
Presidente de la CFB
HISTRICO DE LA FARMACOPEA BRASILEA, 2
EDICIN
La primera mencin legal estableciendo obligatoriamen-
te el Codex francs como Farmacopea oficial de Brasil es
la que consta del Decreto n 828 del 29 de septiembre de
1.851, que en su artculo 45, expresa lo siguiente:
Prevaleci como cdigo farmacutico oficial la Farmacopea
General para el Reino y Dominios de Portugal, de autora del
Dr. Francisco Tavares, profesor de la Universidad de Coim-
bra, publicada en 1.794 por orden de la Reina D. Maria I.
De esa fecha en adelante, a pesar de nuestra emancipacin
poltica, continu siendo adoptada la misma Farmacopea,
y despus de 1.837 tambin el CodexMedicamentarius,
francs.
Para la composicin de los remedios oficinales se seguir
la Farmacopea Francesa, hasta que se haya organizado una
Farmacopea Brasilea, para lo que el Gobierno nombrar
una Comisin de personas competentes. Despus de publi-
cada la Farmacopea Brasilea, que lo ser por autorizacin
del Gobierno, los Boticarios debern, tener los remedios
preparados segn las frmulas de esa Farmacopea, lo que
no inhibe que los puedan tener segn las frmulas de otras
Farmacopeas para satisfacer a las prescripciones de los fa-
cultativos, los cuales pueden recetar como entiendan.
En el anexo al Reglamento, que contiene la Tabla de los
medicamentos, envases, instrumentos, utensilios y libros,
organizado para las boticas del Imperio, vino la lista de
los libros que deban tener las boticas: Cdigo Francs;
Observacin de las Farmacopeas, por Jourdan; Materia
mdica y Formulario de Bouchardat; Farmacopea Gene-
ral; Farmacopea de Foy; Cdigo Farmacutico y Farma-
cografa de Agostinho Albano da Silveira Pinto (ltima
edicin).
El artculo 58 del Decreto n 8.387, del 19 de enero de
1.882, reprodujo las determinaciones del artculo 45 del
Decreto n 828 de 1.851; apenas hubo la modificacin
de algunas palabras y de la lista de libros, de cuya ltima
edicin, el farmacutico deba siempre tener un ejemplar.
Adems del Codex francs, eran exigidos los formularios
de Dorvault, Bouchardat. Fosagrives, Jeannel, Rveil,
Gallois, Chernoviz, Langaard, Farmacia prctica de Des-
champs (dAvallon), Anuario de Mhu, Gua prctica de
Le Page y Patrouillaud, Tratado de Farmacia de Soubeiran,

Diccionario de alteraciones y falsificaciones de Chevalier
y Baudrimont, Vademecum de Ferrand.
Durante el largo perodo de 1.851 a 1.929 fue obligatorio el
Codex francs, para la confeccin de los preparados ofi-
cinales, hasta que estuviera organizado el Cdigo Farma-
cutico Brasileo. As determinaron todos los reglamentos
sanitarios, entre ellos los de los Decretos n 169 de 1.890; n
1.172, de 1.892; n 1.647, de 1.894; n 2.449, de 1.897, cuya
tabla de libros fue reducida al Codex francs y a los Formu-
larios de Dorvault, Bouchardat, Chernoviz y Langaard; n
2.458 de 1.897; 5.156 de 1.904; 14.189 y 14.354, de 1.920
(D. N. S. P.); 15.003, de 1.921 y 16.300, de 31-12-1923.
No obstante, el deseo de los farmacuticos brasileos tener
su propio Cdigo Nacional fue manifestado en muchas opor-
tunidades por los rganos cientficos de clase. Varias comi-
siones fueron nombradas para su elaboracin, sin resultado.
Fueron vanos los esfuerzos de Ezequiel Corra dos Santos,
de Silva Costa, de Corra Dutra, Oliveira Fausto, Almeida
Rego, Eugnio Marques de Hollanda, Eduardo Julio Jan-
vrot y otros.
Solamente en 1.887, atendiendo a las solicitudes de los
centros cientficos nacionales, el Gobierno Imperial pro-
cur resolver el problema, instituyendo una comisin, de
la cual formaban parte, entre otros, Ezequiel Corra dos
Santos Filho, Agostinho Jos de Souza Lima y Marques
de Hollanda.
De esa comisin, sin embargo, nada prctico dio resultado,
por suerte que, pasados diez aos, en 1.897, el Ministro
del Interior y Justicia, Amaro Cavalcanti, nombr otra co-
misin con la misma finalidad y de la cual formaban parte
los profesores Agostinho de Souza Lima, Csar Diogo y
Orlando Rangel. Fracas tambin la nueva tentativa.
Brasil, sin embargo, que siempre ha sabido tratar con las
dems naciones civilizadas en todos los ramos de las cien-
cias, de las artes, etc., no poda continuar siendo regido,
con respecto al ejercicio de la Farmacia, por un cdigo
extranjero, que, a pesar de que ptimo para su pas, no sa-
tisfaca en absoluto a las nuevas necesidades. Por eso, a
pesar de que reconociendo el arrojo de tal iniciativa, resol-
vimos llevar adelante la ardua tarea y alta responsabilidad
de redactar nuestro futuro cdigo farmacutico, confiados
en que nuestro gran amor a la profesin venciese todos los
bices, superase todos los obstculos. (*) El Farmacuti-
co, en la ocasin adems de nombre poco conocido, Ro-
dolpho Albino Das da Silva, en 1.924, despus de ms de
diez aos de paciente trabajo, pudo presentar su proyecto
de Farmacopea Brasilea al Dr. Carlos Chagas, Director
General del Departamento Nacional de Salud Pblica. Para
juzgar ese trabajo, nombr el Dr. Chagas una comisin,
constituida por los Profesores Doctores Antnio Pache-
co Leo, Renato de Souza Lopes y Artidnio Pamplona,
y Farmacuticos Alfredo da Silva Moreira, Jos Malhado
Filho y Isaac Werneck da Silva Santos.
Despus de examen minucioso de la obra, esa Comisin
resolvi aceptarla, solicitando del Gobierno su oficializa-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 15
cin, como Cdigo Nacional Farmacutico, con la supre-
sin, sin embargo, de ciertos artculos por ella considera-
dos de uso restricto para ser oficializados, los cuales vienen
enumerados en el prefacio de la primera edicin.
El 4 de noviembre de 1.926, por el Decreto n 17.509,
firmado por el Presidente de la Repblica, Dr. Arthur da
2
Silva Bernardes, y por el Ministro de Interior y Justicia,
Dr. Affonso Penna Junior, en los trminos del artculo 252
del Decreto n. 16.300, de 31 de diciembre de 1923, fue
aprobada y adoptada como Cdigo Farmacutico Brasi-
leo la Farmacopea Brasilea, elaborada por el Farma-
cutico Rodolpho Albino Das da Silva, con las enmien-
das de la comisin revisora. El Cdigo entrara en vigor
60 das despus de la publicacin de la primera edicin
oficial, quedando su ejecucin a cargo del Departamento
Nacional de Salud Pblica, por intermedio de la Insectora
de Fiscalizacin del Ejercicio de la Medicina. Ejecut la
obra, mediante competencia pblica, la Compaa Edito-
ra Nacional, de So Paulo, que termin su publicacin en
1.929. Pas a ser obligatoria la Farmacopea a partir del 15
de agosto de 1.929.
Al final, Brasil tena su Farmacopea, obra de un slo hom-
bre, obra que era, en opinin de eminentes farmaclogos
del mundo, uno de los ms avanzados y actualizados cdi-
gos farmacuticos de la poca.
Rodolpho Albino, natural del Estado del Rio de Janeiro,
nacido en la ciudad de Cantagalo, falleci prematuramente
en Rio de Janeiro, a los 42 aos de edad, el 7 de octubre
de 1931.
Todos los cdigos farmacuticos son revistos peridicamen-
te; y as, a fin de recopilar, coordinar y estudiar sugeren-
cias, para proporcionar facilidades para una futura revisin,
en 1.932, por propuesta hecha en una de las sesiones de la
Asociacin Brasilea de Farmacuticos, fue nombrada una
comisin para tal fin, con la presidencia del Prof. Joo Vi-
cente de Souza Martins, que elabor un reglamento interno,
creando varias secciones. Esta comisin trabaj hasta 1.938,
cuando el presidente de la Asociacin Brasilea de Farma-
cuticos, Prof. Virglio Lucas, dirigi al Ministro de Edu-
cacin y Salud el pedido de nombrar una comisin oficial
para proceder a la revisin del nuestro Cdigo, viendo ya
que haba bastante materia a estudiar y deliberar.
Esa Comisin, nombrada por la Ordenanza n 1.21-A, del
23 de junio de 1.938, por el Ministro Gustavo Capanema,
fue constituida por los siete miembros siguientes: Profs.
Renato Guimares de Souza Lopes, Oswaldo de Almeida
Costa, Virglio Lucas y Abel Elias de Oliveira; Farms. An-
tnio Caetano de Azevedo Coutinho y Oswaldo de Lazza-
rini Peckolt y mdico Sebastio Duarte de Barros. Por la
ordenanza n 141, del 22 de abril de 1.939, la comisin fue
aumentada con dos miembros, el Prof. Artidnio Pamplona
y el Farm. Jos Eduardo Alves Filho.
Esa Comisin, a pesar de las dificultades encontradas, rea-
liz alguna cosa til, proponiendo exclusiones de drogas
obsoletas e inclusiones de otras de mayor inters, confor-
me el informe presentado por el Farm. Oswaldo Peckolt al
 16 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Tercer Congreso Brasileo de Farmacia, reunido en Belo
Horizonte, del 14 al 21 de abril de 1.939.
El Decreto n 810, del 1 de julio de 1.942, que aprob el
2 Reglamento del Servicio Nacional de Fiscalizacin de la
Medicina, imprimiendo nueva funcin a ese rgano, consi-
der dedicadas al mismo, bajo la presidencia del respectivo
director, la Comisin de Biofarmacia y la de Revisin de la
Farmacopea; pas entonces esta a ser constituida de un
profesor de la Facultad Nacional de Farmacia o de otra a
ella equiparada, un mdico clnico, un bilogo del Instituto
Oswaldo Cruz, un qumico, un tcnico de la industria far-
macutica y un farmacutico del S.N.F.M.F.
En consecuencia, el Director General del Departamento
Nacional de Salud, por la Ordenanza n 136, del 11 de
julio del mismo ao, design para esas funciones el Prof.
Oswaldo de Almeida Costa, el mdico Dr. Sebastio Duar-
te de Barros, el bilogo Dr. Gilberto Guimares Vilela; el
qumico Farm. Oswaldo de Lazzarini Peckolt, el tcnico
Prof. Virgilio Lucas y el Farm. asistente Antnio Caeta-
no de Azevedo Coutinho, funcionando en la presidencia el
Director del Servicio, Dr. Roberval Cordeiro de Farias, y
como Coordinador de los trabajos el Dr. Sebastio de Ba-
rros; posteriormente, el Dr. Gilberto Vilela fue sustituido, a
pedido, por el tambin bilogo Dr. Tito Arcoverde de Albu-
querque Cavalcanti, y el Farm. Caetano Coutinho, que se
jubilaba del Servicio Pblico, tuvo como sustituto su cole-
ga, Farm. Flvio Frota, que pas a ejercer funciones de se-
cretario, de acuerdo con las disposiciones del reglamento.
La nueva Comisin, con la experiencia recogida de las co-
misiones anteriores y con la de su propia actividad, public
el Primer Suplemento de la Farmacopea, puesto en vigor
por la Ordenanza n 42, de 2 de marzo de 1.943.
Siguieron los estudios, bien coordinados y con buen ren-
dimiento, constituyendo el aparecimiento del Segundo Su-
plemento y del Tercer Suplemento, aprobados, respectiva-
mente, por las Resoluciones n 24, de 14 de abril de 1.945,
y n 39, de 13 de junio de 1.950.
Esas publicaciones se presentaron muy interesantes, bajo
varios aspectos, entre ellos la inclusin de drogas naciona-
les como sucedneas de similares importadas, el registro
de nuevas frmulas y la sustitucin, en otras, de sustancias
extranjeras por nacionales, todo eso sin compromiso de las
respectivas acciones teraputicas.
El Reglamento Interno expresado en el Decreto n 21.339,
del 20 de junio de 1.946, y modificado por el Decreto n
29.828, del 30 de julio de 1.951, teniendo por finalidad la
organizacin y la competencia de los diversos rganos de
salud pblica, no alter sustancialmente las disposiciones
que haban sido establecidas anteriormente, continuando la
Comisin a funcionar regularmente.
La Ordenanza n 147, del 6 de noviembre de 1.951, apro-
bando las Instrucciones sugeridas por el Servicio Nacional
de Fiscalizacin de la Medicina, de acuerdo con el Regla-
mento citado, y modificando la orientacin hasta entonces
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
seguida, determin el nombramiento, para la Comisin de
Revisin de la Farmacopea y sus subcomisiones, de cient-
ficos de todo el pas, especializados en las materias en es-
tudio e incumbiendo de reeditar decenalmente la Farmaco-
pea; transform adems el primitivo rgano en Comisin
Ejecutiva, coordinadora y principal responsable de todos
los trabajos.
As fueron confirmados en la calidad de miembros de la
Comisin Ejecutiva los antiguos componentes de la Co-
misin Revisora, ocurriendo posteriormente la sustitucin
del presidente, Dr. Roberval Cordeiro de Farias, por el Dr.
Vasco Barcelosf y despus por el Dr. Benoni Laurindo Ri-
bas, que lo haban sucedido tambin en la Direccin del
Servicio; asimismo, en los impedimentos ocasionales de
los respectivos titulares, ocup la presidencia el Dr. Luiz
Salgado Lima Filho, que posteriormente pas a ser su pre-
sidente efectivo.
Fueron entonces escogidos los miembros de las subcomi-
siones tcnicas, recayendo la preferencia en profesionales
de Rio y de los Estados, farmacuticos, mdicos, qumicos
y profesores, siendo despus aumentado el nmero, en vir-
tud de ulteriores designaciones.
Las subcomisiones, en nmero de 10, quedaron as organiza-
das: Inclusiones, Exclusiones y Posologa; Farmacognosia;
Qumica Orgnica; Qumica Inorgnica; Farmacia Galnica;
Ensayos Biolgicos, Hormonas y Vitaminas; Sueros, Vacu-
nas, Antibiticos y Esterilizacin; Generalidades, Ensayos,
Reactivos y Tablas; Planeamiento General; Redaccin;
teniendo como coordinadores, respectivamente, el Dr. Se-
bastio de Barros, de la primera, sptima, novena y dcima;
Prof. Oswaldo Costa, de la segunda y cuarta; Farm. Oswaldo
Peckolt, de la tercera y octava: Prof. Virgilio Lucas, de la
quinta, y Dr. Tito Cavalcanti, de la sexta.
En esa misma oportunidad fueron criadas Comisiones
Regionales en los Estados de Paran, Minas Gerais, Rio
Grande do Sul y So Paulo.
En este Estado los trabajos tuvieron gran impulso, por haber
sido en su Capital instalada, para fines idnticos, una Comi-
sin de Estandarizacin Farmacutica, por comn acuerdo
entre el Instituto Adolfo Lutz, la Universidad de S. Paulo,
la Fiscalizacin del Ejercicio Profesional y las asociaciones
estaduales representativas de la industria y del comercio de
la Farmacia, integrndola las figuras de mayor evidencia de
medios cientficos de aquella unidad de la Federacin, don-
de el Dr. Ariosto Bller Souto y el Farm. Jlio Sauerbronn
de Toledo son presidente y secretario, respectivamente.
Cuando se reuni, en la ciudad de So Paulo, el V Congreso
Brasileo de Farmacia, conjuntamente con el III Congreso
Farmacutico y Bioqumico Panamericano, del 1 al 8 de
diciembre de 1954, la contribucin paulista se concretiz
en un anteproyecto de la Farmacopea, presentado a aquel
certamen, siendo dados nuevos rumbos a los trabajos.
El Congreso, ratificando mocin aprobada en el III Con-
greso Brasileo de Farmacia, realizado en Belo Horizonte
del 14 al 21 de abril de 1.939, y el voto expreso en el II

Congreso Farmacutico y Bioqumico Panamericano, lle-
vado a cabo en Lima del 1 al 8 de diciembre de 1.951, reco-
mend la organizacin de un Formulario Nacional, como
unidad complementaria, del cual pasaran a constar las dro-
gas y los medicamentos de empleo usual que no constasen
de la Farmacopea.
De los debates realizados result la deliberacin de exa-
men en conjunto, por las comisiones de Rio y de So Pau-
lo, de todo el material de estudio hasta entonces reunido,
para posibilitar el trmino de la revisin en corto plazo.
Encerrado el V Congreso, fue organizada nueva subcomi-
sin tcnica de Planeamiento y Revisin, as constituida:
Antnio Caetano de Azeredo Coutinho, Flvio Frota, Mi-
litino Cesrio Rosa, Oswaldo de Almeida Costa, Oswal-
do de Lazzarini Peckolt, Tito Arcoverde de Albuquerque
Cavalcanti, Virglio Lucas y Sebastio Duarte de Barros,
de Rio; Ariosto Bller Souto, Cendy de Castro Guimares,
Germnio Nazrio, Henrique Tastaldi, Hrcules Vieira
de Campos, Quintino Mingoja, Richard Wasicky y Jlio
Sauerbronn de Toledo, de So Paulo, ejercendo las fun-
ciones de coordinador el Dr. Sebastio Duarte de Barros y
continuando en la presidencia el Dr. Benoni Ribas. Meses
despus, los Drs. Oswaldo de Almeida Costa y Tito Arco-
verde de Albuquerque Cavalcanti cedieron sus lugares a
los Profesores Jayme Pecegueiro Gomes de la Cruz y Ray-
mundo Moniz de Arago, temporariamente sustituido por
el Almirante Vicente de Paulo Castilho.
Con la vuelta del Dr. Moniz de Arago coincidi la in-
clusin en el rgano paritario de cuatro elementos ms:
el Prof. Carlos Henrique R. Liberalli y el Farm. Vicente
Ferreira Grecof, de So Paulo, y el Prof. Abel Elias de Oli-
veira y el Alm. Farm. Vicente de Paulo Castilho, de Rio.
En esa poca, el Dr. Sebastilio de Barros, que continu in-
tegrando el grupo del Rio, dej el cargo de coordinador,
siendo sucedido por el Farm. Oswaldo de Lazzarini Pec-
kolt y, por ltimo, por el Farm. Flvio Frota.
De los trabajos de esta subcomisin, realizados en Rio y en
So Paulo, result ser posible presentar, el 1 de septiem-
bre de 1.955, al Ministro de Salud, Dr. Aramis Athayde, la
2a edicin de la Farmacopea, en sus originales, siendo en la
misma fecha firmado por el Presidente de la Repblica, Dr.
Joo Caf Filho, el Decreto n 37.843 del 1 de septiembre
de 1.955 que la oficializ.
A travs del Dr. Luiz Salgado Lima Filho, el Ministro de la
Salud Mano Pinotti present al Presidente de la Repblica,
Dr. Juscelino Kubitschek, decreto con nuevas inclusiones
y modificaciones y que torn obligatoria la Farmacopea en
las farmacias, laboratorios industriales farmacuticos y es-
tablecimientos congneres. ste decreto tom el n 45.502
del 27 de febrero de 1959.
Aqu se encuentran la codificacin de los frmacos y
frmulas de actualidad, la normalizacin de las tcnicas
empleadas en las diversas prcticas farmacuticas, la es-
tandarizacin de los mtodos, ensayos, reactivos y tablas,
necesarios al ejercicio profesional.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 17
De la primera edicin mucho se aprovech, tan sabiamente
fue ella redactada; numerosas monografas de ella retiradas
pasarn a constar del Formulario Nacional, cuya realiza-
cin ya se encuentra en fase de conclusin, esperndose
su publicacin en corto plazo, como segundo volumen del
Cdigo Farmacutico Brasileo. 2
(*) Rodolpho Albino Das da Silva Farmacopea de Bra-
sil- Prefacio, pg. VIII, 1a edicin, 1.929.
Fallecido.
HISTRICO DE LA FARMACOPEA BRASILEA, 3a
EDICIN
La importancia de las farmacopeas as considerados los
cdigos oficiales, u oficialmente reconocidos, donde se
establecen la identificacin y los estndares de calidad de
las sustancias empleadas en farmacologa crece en la
proporcin del desarrollo cultural de la Farmacia y de la
Medicina.
Consignada su primera existencia en el siglo III de nuestra
Era, fue desde mediados del siglo pasado que las farma-
copeas ganaron ntidas caractersticas de necesidad nacio-
nal, manifestando el esfuerzo del ajuste de los recursos de
identificacin y control de las sustancias teraputicas a la
naturaleza regional de los propios frmacos, por lo que, en
su gran mayora, venan de la flora, usualmente nativa y
local, de rganos animales, y de los minerales admitidos
como propios para fines teraputicos.
Caudatario de Portugal en la ciencia y en la tcnica, nues-
tro Pas se sujet, al tiempo de la Colonia, a la Farmacopea
General para el Reino y Dominios, de Portugal, editada en
1.794.
Con la Independencia del Brasil, en 1.822, hubo aberturas
para otras influencias culturales, y con facilidad nuestro
Pas se perfil a la orientacin francesa, prevalente en la
poca para el mundo occidental. Tanto as que, en 1.851,
por Decreto, fue establecida la obligatoriedad de la Farma-
copea Francesa como cdigo oficial para Brasil.
De 1.851 a 1.929 toda la legislacin sanitaria brasilea
sustent la misma obligatoriedad para la confeccin de
los preparados oficinales, hasta que estuviera organizado el
Cdigo Farmacutico Brasileo.
Quince de agosto de 1.929 fue el marco de esa redencin,
por lo que a partir de aquella fecha entr en vigor la Far-
macopea de Brasil, en todo el territorio nacional, conquista
ampliamente festejada, adems porque se exaltaba tambin
el gran responsable de la misma, el extraordinario farma-
cutico Rodolfo Albino Das da Silva, que consumi doce
aos enteros, en una labor silenciosa y benedictino, en la
composicin de las pginas iluminadas de saber que tu-
vieron que erigirse en breviario para los de su grey, tan
harmonioso a punto de inclursele como uno de los mejores
entre los coetneos, a pesar de que debido a la competencia
de artfice nico, hecho difcil de ser repetido.
 18 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Cuanto ms de la historia de los cdigos farmacuticos, la
2a edicin de la Farmacopea Brasilea constituye reposito-
rio de mrito irrefutable, hasta el tiempo de aquella edicin,
motivo plausible para no entrar en detalles ya conocidos.
2 Es propio de las Farmacopeas, por mejor que sean elabo-
radas, su revisin peridica, natural caracterstica derivado
de la evolucin de la Farmacologa.
De ah porque el Decreto Federal n 45.502, del 27 de fe-
brero de 1959, al aprobar la Segunda Edicin de la Farma-
copea Brasilea, ya fijaba su revisin cada diez aos, inde-
pendiente de las ediciones intermediarias de Suplementos.
Tanto as que la 13 de Junio de 1962, mediante Ordenanza
n 82 del Departamento Nacional de Salud; una primera
comisin fue constituida para los trabajos de revisin, para
ella nombrados los Drs. Fernando Luz Filho, Lauro So-
llero, Maria Alzira Ferreira Nobrega, Laerte Manhes de
Andrade, Ansio Faria e Souza, Mrio Victor de Assis Pa-
checo, Nilson dos Reis Rodrigues, y EIza Magalhes P-
cego como Secretaria. Los trabajos de esa comisin que-
daron asignados a providencias preliminares, provocando
que en 16.4.68, por la Ordenanza n 28 del Departamento
Nacional de Salud, una nueva comisin fuese constituida,
de ella constando los Drs. Lcio Costa, Maria Alzira Fe-
rreira Nobrega, Lauro Sollero, Gobert de Arajo Costa,
Emlio Diniz da Silva, Joo Haikal Hel y Anbal de la Ro-
cha Nogueira Jnior, y Josepha Paul como Secretaria, con
desarrollo de trabajo semejante al de la comisin anterior.
La Ordenanza Ministerial n 112 de 20 de marzo de 1972
cre un grupo de trabajo, compuesto por los Drs. Evaldo
de Oliveira, Moacir Nogueira, Caio Romero Cavalcante y
Ten. Cel. Farm. Ej. Jlio Fernandes Silva, este grupo fij
algunas bases de trabajo, descontinuados hacia razones
aleatrias y contingentes.
Finalmente, la 25 de junio de 1975, por fuerza de la Orde-
nanza Ministerial n 266, fue constituida una nueva Comi-
sin de Revisin de la Farmacopea, de ella participando
los Drs. Fernando Ayres de la Cunha, Director del Servicio
Nacional de Fiscalizacin de la Medicina y Farmacia, y
Presidente de la Comisin, talo Suassuna, Maria Alzira
Ferreira Nobrega, Evaldo de Oliveira, Jos Aleixo Prates y
Silva, Lauro Sollero, Paulo Das da Costa y, como Secreta-
ria, Dora Alves Gonalves Cruz.
Dispuesta, desde el inicio de los trabajos, a concluir su mi-
sin en corto plazo, la Comisin, reunida por la primera
vez el 5 de agosto de 1975, decidi promover reuniones se-
manales en la sede del Servicio Nacional de Fiscalizacin
de la Medicina y Farmacia, Rio de Janeiro.
En principio, se abstuvo de constituir subcomisiones, op-
tando por la solicitud de colaboradores especiales para los
asuntos en que la propia Comisin se juzgaba incapaz o
insuficientemente segura para decidir.
Con esta orientacin, las etapas fueron superadas paulati-
namente, y ganando celeridad a la medida en que los pro-
blemas se delineaban ms claros.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
En la imposibilidad material y tcnica de resolver todos
los problemas, la Comisin se vali de la experiencia de
otras comisiones y rganos Tcnicos, y de Farmacopeas,
marcadamente en lo que respectaba a las orientaciones de
la Organizacin Mundial de la Salud. Acept, tambin,
oportunamente, el apoyo del Consejo Federal de Farma-
cia que, para una colaboracin ms integrada, mont todo
un dispositivo tcnico de servicio permanente, facilitando
las diversas etapas del trabajo. Desde la reevaluacin del
listado primitivo de las monografas, buscando actuali-
zarlas, al mximo esfuerzo de alcanzar unidad en la re-
daccin y tcnica a las colaboraciones provenientes de
relatores de todos los rincones del Pas, adems de las
traducciones.
Es de mucha pertinencia resaltar el significado de que la
colaboracin profesional para relatar: monografas repre-
sent un movimiento de sentido nacional, acudiendo a ad-
hesiones de todos los cuadrantes del Pas.
De ese esfuerzo conjunto Ministerio de Salud (por el
Servicio Nacional de Fiscalizacin de la Medicina y Far-
macia), Comisin de Revisin de la Farmacopea (por el
espritu de equipo presente en todos las etapas de trabajo),
Consejo Federal de Farmacia (que favoreci infraestructu-
ra material y humana para imprimir velocidad al trabajo) y
relatores fue posible vencer el desafo inicial de conquis-
tar aprobacin de los originales en el evento del cincuente-
nario de la 1a edicin de la Farmacopea Brasilea.
La fijacin de esa fecha, sobre ser justo homenaje, pas a
configurar un plazo imposible de ser prorrogado, otorgn-
dole a todo el trabajo, por consecuencia, clima favorable y
dinmico, exigente de objetividad.
Tenemos, al final, que de las 770 monografas constantes
de la 2a edicin subsistieron 280, mediante revisin de su
texto, siendo que para tanto de mucho valieron aos ob-
servaciones publicadas por el Prof. Dr. Joo Haikal Helou.
Fueron incorporadas 205 nuevas monografas, naturalmen-
te aquellas que representan nuevos agentes teraputicos,
atendidas las normativas fijadas por la Comisin y ya refe-
ridas en el Prefacio de esta edicin.
Se admite que tal vez pudiesen entrar otras monografas; se
admite, por igual, que algunas no entrasen ms. Pero ser
preciso tener; presente que la Comisin adopt criterios
propios, sujetos a la realidad nosolgica y a la teraputica
nacional. Estos criterios, y no las monografas podrn sus-
citar pertinencias o no. Naturalmente, la Comisin es nica
y exclusiva responsable de los mismos, sin compartir con
otros los mritos o desventajas de su orientacin.
De mxima relevancia, a tener en cuenta, es el hecho que,
de acuerdo con los trminos del acto que aprob la 3a edi-
cin, las monografas anteriores, no expresamente cancela-
das en esta Farmacopea, subsisten con validez para todos
los efectos legales.
Se admite, finalmente, que no se ignora la tendencia univer-
sal de integrar farmacopea y formulario en un slo texto.
Tentada desde luego a eso, la Comisin, decidi, no obs-

tante, optar por un trabajo dividido, dispuesta a elaborar,
a continuacin, el Formulario Nacional. Adems as, esta
segunda providencia nada ms representar el despliegue
de un trabajo que se busca unificar en la etapa subsiguiente
a la elaboracin del Formulario, y que se pretende, efecti-
vamente cumplir.
HISTRICO DE LA FARMACOPEA BRASILEA, 4
EDICIN
Son de naturaleza efmera los libros de esta orden, destina-
dos a mostrar uno de los lados de la farmacologa, ciencia
que va a recorrer actualmente la fase ms acelerada de su
evolucin. SOUZA MARTINS, in Informe de Introduc-
cin de la 3a edicin de la Farmacopea Portuguesa, 1876.
El vocablo Farmacopea proviene de la junta de dos trmi-
nos griegos, a saber, pkov = medicamento o veneno,
y oo = fabricante y fabricacin. Las Farmacopeas consti-
tuyen cdigos farmacuticos oficiales u oficialmente adop-
tados, en los cuales se establecen la identificacin, los estn-
dares de calidad y los mtodos de anlisis de los frmacos en
uso. Existentes desde el siglo III, los primeros compendios
eran de carcter regional, pues los frmacos de entonces
eran provenientes de rganos de animales, de minerales y,
sobretodo, de la flora local y nativa. Algunos llegaron a ser
oficializados, a pesar de que en carcter regional, como, por
ejemplo, el formulario de la Escuela de Salerno Rgimen
Sanitatis, de 1066, adoptado en 1240 por Frederico II, Rey
de las Dos Siclias. Los intentos iniciados individualmente
por diversos autores en el sentido de unificar la descripcin
e identificacin de los frmacos ms importantes datan del
final del siglo XVII, y del siglo XVIII. Entre otras obras,
merecen citacin la Farmacopea Internationalis de Lme-
ry (1690), las Farmacopeas de James (1747), de De Quincy
(1758), de Triller (1764) y, especialmente, la Farmacopea
Universalis, de Jourdan (1828), que juntaba datos de casi
50 Farmacopeas y compendios diferentes. Ninguno de estos
trabajos, no obstante, tena carcter oficial.
Las Farmacopeas nacionales, de carcter oficial y adopcin
obligatoria, comienzan a surgir al final del siglo XVIII e
inicio del siglo XIX. As, fueron publicadas las primeras
ediciones de las Farmacopeas, portuguesa (1794), holande-
sa (1805), francesa (1818) y americana (1820).
Brasil Colonia adoptaba la Pharmacopia General para el
Reino y Dominios de Portugal, de 1794, cuya autora es
atribuida a Francisco Tavares, profesor de la Universidad
de Coimbra.
Con la Independencia, Brasil se vuelca a la orientacin
cultural francesa y, en el campo de la Farmacia, el Codex
Medicamentarius francs adquiere fuerza legal. El Regla-
mento de la Junta de Higiene Pblica, mandado a ejecutar
por el Decreto 828 del 29/09/1851, sin especificar cual la
Farmacopea a ser cumplida, establece lista de libros que
las farmacias deban tener, constando en ella, entre otros,
la Farmacopea Portuguesa de 1794, el Codex Francs y el
Cdigo Farmacutico Lusitano, de la autora de Agostinho
Albano de la Silveira Pinto, cuya primera edicin fue pu-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 19
blicada en 1835 y hoy considerada como la 2a edicin de
la Farmacopea Portuguesa.
Ya el Decreto 8.387 del 19/01/1882 establece textualmen-
te: para la preparacin de los remedios oficiales se segui-
r la Farmacopea francesa, hasta que est compuesta una
Farmacopea brasilea..., situacin que ira perdurar hasta
2
1926, cuando el Decreto 17.509 del 04/11/1926 aprob la
primera Farmacopea Brasilea, de autora de Rodolpho Al-
bino Das da Silva, tornada obligatoria a partir del 15 de
agosto de 1929.
La primera edicin de la Farmacopea Brasilea se compa-
raba con las Farmacopeas de la poca, de los pases ms
desarrollados, revelndose notable por la precisin de las
monografas y, sobretodo, por el gran nmero de inclusio-
nes de frmacos obtenidos de la flora brasilea, no existen-
tes en ninguna otra Farmacopea.
La constante evolucin de la farmacologa, la introduccin
de nuevos frmacos en la teraputica, el surgimiento de
nuevos mtodos de anlisis, ms modernos y precisos, y
la necesidad de especificaciones actualizadas para el con-
trol de materia prima y productos farmacuticos son fac-
tores fundamentales determinantes de la obsolescencia de
los cdigos farmacuticos y de la necesidad de revisarlos
y actualizarlos peridicamente. El Decreto que aprob la
primera edicin de la Farmacopea Brasilea fue omiso en
cuanto a las revisiones; as, la segunda edicin vino casi 30
aos despus de la primera y represent cinco aos de tra-
bajo de diez subcomisiones especializadas. La 2a edicin
incorpor las adquisiciones derivadas de la propia actuali-
zacin de la farmacologa. No consigui, a pesar de ello,
ser ms rica y precisa que la primera edicin, fruto de un
slo autor. El Decreto Federal 45.502 del 27/02/1959, al
aprobar la 2a edicin de la Farmacopea Brasilea, fij su
revisin cada diez aos. Infelizmente, problemas diversos
no permitieron el cumplimiento de ese Decreto. Ms de
15 aos pasaron, hasta que se elaborara una nueva edicin.
As es que, el 25 de noviembre de 1976, fue oficializada,
por el Decreto 78.840, la tercera edicin de la Farmacopea
Brasilea. El mismo Decreto fij en cinco aos el plazo
para su revisin. Realizada en tiempo determinado y muy
corto, tarea posible de llevar a trmino solamente gracias
al apoyo del Consejo Federal de Farmacia, la obra despert
sensibles manifestaciones de la comunidad tcnico cient-
fica, que recomienden rpida revisin de su texto, indepen-
diente del dispositivo legal.
As, la 4a edicin surge con algn atraso. Se busca, en esta
edicin, sanar las deficiencias de la anterior. Se busc, tam-
bin, adoptar mtodos modernos de anlisis, compatibles,
sin embargo, con la realidad nacional. La publicacin de
esta parte y la adopcin de una nueva sistemtica de pre-
sentacin que posibilita su continua actualizacin a travs
de revisiones permanentes son las metas prioritarias que la
Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea Bra-
silea se propone alcanzar.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 21

3 FARMACOPEA BRASILEA

PRESIDENTES DE LAS EDICIONES ANTERIORES DE LA FARMACOPEA BRASILEA

RODOLPHO ALBINO DAS DA SILVA 1a edicin

LUIZ SALGADO LIMA FILHO 2a edicin

3
FERNANDO AYRES CUNHA 3a edicin
JOO GILVAN ROCHA 4a edicin Parte I
CELSO FIGUEIREDO BITTENCOURT 4a edicin Parte II

COMISIN DE LA FARMACOPEA BRASILEA CFB

PRESIDENTE
GERSON ANTNIO PIANETTI

VICEPRESIDENTE
MIRACY MUNIZ DE ALBUQUERQUE

MIEMBROS

ADRIANO ANTUNES DE SOUZA ARAJO

Universidade Federal de Sergipe UFS

ANTONIO CARLOS DA COSTA BEZERRA

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

CLVIA FERREIRA DUARTE GARROTE

Universidade Federal de Gois UFG

EDUARDO LLAVES LEAL

Instituto Nacional de Control de Calidad en Salud INCQS / FIOCRUZ

ELFRIDES EVA SCHERMAN SCHAPOVAL

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS

RICO MARLON DE MORAES FLORES

Universidade Federal de Santa Maria UFSM

GERSON ANTNIO PIANETTI

Universidade Federal de Minas Gerais UFMG

JOO CARLOS PALAZZO DE MELLO

Consejo Federal de Farmacia CFF

JOS CARLOS TAVARES

Universidade Federal do Amap UNIFAP

KTIA REGINA TORRES

Ministrio da Sade MS

LAURO DOMINGOS MORETTO

Sindicato de la Industria de Productos Farmacuticos en el Estado de So Paulo Sindusfarma

LEANDRO MACHADO ROCHA

Universidade Federal Fluminense UFF

LUIZ ALBERTO LIRA SOARES

Universidade Federal do Rio Grande do Norte UFRN

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 22 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

MIRACY MUNIZ DE ALBUQUERQUE

Universidade Federal de Pernambuco UFPE

ONSIMO ZARA PEREIRA

Asociacin Brasilea de la Industria Farmoqumica y de Insumos Farmacuticos ABIQUIFI

SILVANA TERESA LACERDA JALES

Asociacin de los Laboratorios Farmacuticos Oficiales del Brasil ALFOB

VLADI OLGA CONSIGLIERI

3
Universidade de So Paulo USP

COORDINACIN DE LA FARMACOPEA BRASILEA

AGNCIA NACIONAL DE VIGILNCIA SANITRIA Anvisa

ANTONIO CARLOS DA COSTA BEZERRA Coordinador

Especialistas en Regulacin y Vigilancia Sanitaria

ANDREA REZENDE DE OLIVEIRA
JAIMARA AZEVEDO OLIVEIRA
MARIA LCIA SILVEIRA MALTA DE ALENCAR
SILVNIA VAZ DE MELO MATTOS

COMITS TCNICOS TEMTICOS DE LA COMISIN

DE LA FARMACOPEA BRASILEA CTT

APOYO A LA POLTICA NACIONAL DE PLANTAS WAGNER LUIZ RAMOS BARBOSA

MEDICINALES Y FITOTERPICOS Universidade Federal del Par UFPA

JOS CARLOS TAVARES CARVALHO Coordinador RELACIONADOS A MEDICAMENTOS

Universidade Federal do Amap UNIFAP
TEREZINHA DE JESUS ANDREOLI PINTO
ANA CECLIA BEZERRA CARVALHO Coordinadora
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Universidade de So Paulo USP

ANA CLAUDIA FERNANDES AMARAL ADRIANA BUGNO

Instituto de Tecnologa de Frmacos Farmanguinhos / Instituto Adolfo Lutz IAL
FIOCRUZ
ALBA VALRIA DOS SANTOS
ANA MARIA SOARES PEREIRA Baxter Hospitalar Ltda
Universidade de Ribeiro Preto UNAERP
DHALIA GUTEMBERG
BERTA MARIA HEINZMANN Cmara Brasilea de Diagnstico Laboratorial CBDL
Universidade Federal de Santa Maria UFSM
IRENE SATIKO KIKUCHI Universidade de So Paulo
ELFRIEDE MARIANNE BACCHI USP
Universidade de So Paulo USP
MICHELE FEITOSA SILVA
EMIDIO VASCONCELOS LEITO DE LA CUNHA Instituto Nacional de Control de Calidad en Salud
Universidade Estadual de Campina Grande UECG INCQS / FIOCRUZ

LUIZ ANTNIO BATISTA DA COSTA RENATA ARACELLI PIRES

Centro de Excelencia en Salud Integral de Paran Baxter Hospitalar Ltda
CESIP
WALFREDO DA SILVA CALMON
NILTON LUZ NETTO JNIOR Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
Universidade Catlica de Brasilia UCB
DENOMINACIONES COMUNES BRASILEAS
ROSANE MARIA SILVA ALVES
Ministrio da Sade MS AULUS CONRADO BASILE Coordinador
Universidade de So Paulo USP

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 23

CARLOS CZAR FLORES VIDOTTI ANIL KUMAR SINGH

Consejo Federal de Farmacia CFF Universidade de So Paulo USP

ELFRIEDE MARIANNE BACCHI HRIDA REGINA NUNES SALGADO

Universidade de So Paulo USP Universidade Estadual Paulista Jlio de Mesquita Filho
UNESP
ONSIMO ZARA PEREIRA
Asociacin Brasilea de la Industria Farmoqumica y de JAIR CALIXTO
Insumos Farmacuticos ABIQUIFI Sindicato de la Industria de Productos Farmacuticos en
el Estado de So Paulo Sindusfarma

3
PAULO CHANEL DEODATO DE FREITAS
Universidade de So Paulo USP LUCIANE VARINI LAPORTA
Centro Universitario Franciscano UNIFRA
RICARDO CHIAPPA
Unin Educacional del Planalto Central UNIPLAC MNICA DA LUZ CARVALHO SOARES
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
ROSANA MIGUEL MESSIAS MASTELARO
Sindicato de la Industria de Productos Farmacuticos en NADIA MARIA VOLPATO
el Estado de So Paulo Sindusfarma Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS

SILVNIA VAZ DE MELO MATTOS Agncia Nacional RUTH RIESINGER STRATTMANN

de Vigilncia Sanitria Anvisa Universidade Federal de Pernambuco UFPE

EQUIVALENCIA FARMACUTICA Y EXCIPIENTES Y ADYUVANTES

BIOEQUIVALENCIA DE MEDICAMENTOS
PEDRO JOS ROLIM NETO Coordinador
SLVIA STORPIRTIS Coordinadora Universidade Federal de Pernambuco UFPE
Universidade de So Paulo USP
DLEY ANTONINI NEVES DE LIMA Universidade
CHANG CHIANN Federal del Amazonas UFAM
Universidade de So Paulo USP
FABIANA CREMASCHI PALMA
GERSON ANTNIO PIANETTI Asociacin Brasilea de los Distribuidores y Importadores
Universidade Federal Minas Gerais UFMG de Insumos Farmacuticos, Cosmticos, Veterinarios,
Alimenticios y Aditivos ABRIFAR
JACQUELINE DE SOUZA Universidade Federal de
Ouro Preto UFOP FABRICIO CARNEIRO DE OLIVEIRA
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
LEONARDO DE SOUZA TEIXEIRA
Instituto de Ciencias Farmacuticas de Estudios y GABRIELA GONALVES DA SILVA
Investigaciones ICF Asociacin Brasilea de los Distribuidores y Importadores
de Insumos Farmacuticos, Cosmticos, Veterinarios,
RAQUEL LIMA Y SILVA Alimenticios y Aditivos ABRIFAR
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
GEISIANE MARIA ALVES PRESMICH
RODRIGO CRISTOFOLETTI Laboratorio Industrial Farmacutico de Alagoas LIFAL
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
JOS LAMARTINE SOARES SOBRINHO
SOLANGE MARIA COUTINHO BRANDO Universidade Federal del Piau UFPI
Instituto Nacional de Control de Calidad en Salud
INCQS / FIOCRUZ ROSALI MARIA FERREIRA DA SILVA Universidade
Federal del Par UFPA
TERESA CRISTINA TAVARES DALLA COSTA
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS FARMACOGNOSIA

ESPECIALIDADES FARMACUTICAS AMLIA TERESINHA HENRIQUES Coordinadora

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
ELFRIDES EVA SCHERMAN SCHAPOVAL
Coordinadora CID AIMBIR DE MORAES SANTOS
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Universidade Federal de Paran UFPR

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 24 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

EVELIN ELFRIEDE BALBINO MARISA COELHO ADATI

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Instituto Nacional de Control de Calidad en Salud
INCQS / FIOCRUZ
JOS ANGELO SILVEIRA ZUANAZZI (Ad hoc)
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS MELNIA DE FTIMA CORDELINO
Baxter Hospitalar Ltda
LILIAN AULER MENTZ
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
NEEMIAS SILVA DE ANDRADE
LUIZ ALBERTO LIRA SOARES Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

3
Universidade Federal del Ro Grande del Norte UFRN
MARIA DE LAS GRAAS LINS BRANDO
Universidade Federal de Minas Gerais UFMG
RODNEY ALEXANDRE FERREIRA RODRIGUES
Universidade Estadual de Campinas UNICAMP
TATIANE PEREIRA DE SOUZA
Universidade Federal del Amazonas UFAM
GASES MEDICINAIS
ALADE ALINE XAVIER LEAL Coordinadora
Instituto de Tecnologa en Imunobiolgicos Bio
Manguinhos FIOCRUZ
CRISTIANE RODRIGUES AUGUSTO
Instituto Nacional de Metrologia, Normatizacin y
Calidad Industrial INMETRO
SEVERINO BARBOSA
Universidade Federal del Pernambuco UFPE
HOMEOPATIA
LEANDRO MACHADO ROCHA Coordinador
Universidade Federal Fluminense UFF
BIANCA RODRIGUES DE OLIVEIRA (Ad hoc)
Universidade del Vale del Itaja UNIVALI
CARLA HOLANDINO QUARESMA
Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ
EZEQUIEL PAULO VIRIATO
Laboratorio Homeoptico Almeida Prado Ltda
FRANCISCO JOS DE FREITAS
Universidade Federal de Ro de Janeiro UFRJ

DESIRE MICHELS CORTEZ MARCELO CAMILO MORERA

Linde Gases Ltda. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

HEITOR CONRADO MARIA DIANA CERQUEIRA SALES

Air Liquide del Brasil Ltda Facultad Brasilea UNIVIX

JOO PAULO SILVRIO PERFECTO RICARDO CHIAPPA

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Unin Educacional del Planalto Central UNIPLAC

KOICHI MIZUTA RINALDO FERREIRA

Instituto de Investigaciones Tecnolgicas del Estado de Universidade del Vale del Itaja UNIVALI
So Paulo IPTSP
INGREDIENTES FARMACUTICOS ACTIVOS
SLVIO FILGUEIRAS
Linde Gases Ltda. MIRACY MUNIZ DE ALBUQUERQUE Coordinadora
Universidade Federal de Pernambuco UFPE
HEMOCOMPONENTES Y HEMODERIVADOS
ADRIANO ANTUNES SOUZA DE ARAJO
JLIO CSAR CARESTIATO Coordinador Universidade Federal de Sergipe UFS
Universidade Federal Fluminense UFF
ANDR AUGUSTO GOMES FARACO
DENISE FERREIRA LEITE Universidade Federal de Minas Gerais UFMG
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
DANIEL KARL RESENDE
HELDER TEIXEIRA MELO Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
Ministrio da Sade MS
LCIA DE FTIMA FRANCELINO DA SILVA
JANANA DUQUE DE SOUZA Laboratorio Central de Salud Pblica de Pernambuco
Bio Manguinhos FIOCRUZ LACEN

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 25

SAID GONALVES DE LA CRUZ FONSECA TEREZINHA DE JESUS ANDREOLI PINTO

Universidade Federal del Cear UFC Universidade de So Paulo USP

SEVERINO GRANJEIRO JNIOR NORMATIZACIN DE TEXTOS Y IDENTIDAD

Laboratorio Farmacutico del Estado de Pernambuco
LAFEPE
TRCIO PASCHKE OPPE
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
VISUAL DE LA FARMACOPEA BRASILEA
ANTNIO BASLIO PEREIRA Coordinador
Universidade Federal de Minas Gerais UFMG
FERNANDO HENRIQUE ANDRADE NOGUEIRA

3
MARCADORES PARA FITOTERPICOS Universidade Federal de Minas Gerais UFMG

JOO CARLOS PALAZZO DE MELLO Coordinador ISABELA DA COSTA CSAR

Universidade Estadual de Maring UEM Instituto de Ciencias Farmacuticas de Estudios y
Investigaciones ICF
ALBERTO JOS CAVALHEIRO
Universidade Estadual Paulista Jlio de Mesquita Filho JOS ANTNIO DE AQUINO RIBEIRO
UNESP Empresa Brasilea de Investigacin Agropecuaria
EMBRAPA
CECLIA ELENA DE FIGUEIREDO OGNIBENE
Asociacin de los Laboratorios Farmacuticos Nacionales LAS SANTANA DANTAS
ALANAC Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

FERNO CASTRO BRAGA PAULA CRISTINA REZENDE ENAS

Universidade Federal de Minas Gerais UFMG Universidade Federal de Minas Gerais UFMG

MARIA DEL CARMO VASQUES GARCIA PRODUCTOS BIOLGICOS

Instituto Nacional de Control de Calidad en Salud
INCQS / FIOCRUZ
VALQUIRIA LINCK BASSANI
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
VALDIR FLORNCIO DE LA VEIGA JUNIOR
Universidade Federal Amazonas UFAM
SILVIA PAREDES FUENTES
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Manguinhos FIOCRUZ
EDUARDO LLAVES LEAL Coordinador
Instituto Nacional de Control de Calidad en Salud
INCQS / FIOCRUZ
DANIELA MARRECO CERQUEIRA
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
DARCY AKEMI HOKAMA
Instituto de Tecnologa en Inmunobiolgicos Bio

MICROBIOLOGIA HISAKO GONDO HIGASHI

Universidade Estadual Paulista Jlio de Mesquita Filho
CLVIA FERREIRA DUARTE GARROTE UNESP
Coordinadora
Universidade Federal de Gois UFG LILIA RIBEIRO SERDIO
Instituto Vital Brazil IVB
ANA CRISTINA REGIS DE BARROS CORREA
Universidade Federal de Pernambuco UFPE MARA EL-CORAB MOREIRA DE OLIVEIRA
Ministrio da Sade MS
CLAUDIO KIYOSHI HIRAI
Biolab Sanus Farmacutica Ltda MARCO ANTONIO STEPHANO
Universidade de So Paulo USP
MARTIN STEPPE
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS ORLANDO SILVA
Serono Productos Farmacuticos Ltda.
MIRION DE FTIMA VIANNA LEONEL
Universidade Federal de Minas Gerais UFMG PRODUCTOS MAGISTRALES Y OFICINAIS

ROSEMARIE APARECIDA DE ARAJO BONATTO VLADI OLGA CONSIGLIERI Coordinadora

Merck Sharp & Dohme Farmacutica Ltda Universidade de So Paulo USP

SILSIA DE SOUZA AMORIM ELISABETE PEREIRA DOS SANTOS

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 26 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

JOS ANTONIO DE OLIVEIRA BATISTUZZO MARIA ALICE BOCKELMANN

Facultades Oswaldo Cruz Cristlia Productos Qumicos Farmacuticos Ltda

LETCIA NORMA CARPENTIERI RODRIGUES MARIA DEL CARMO VASQUES GARCIA

Universidade Federal de So Paulo UNIFESP Instituto Nacional de Control de Calidad en Salud
INCQS / FIOCRUZ
GUILHERME DINIZ TAVARES
Universidade de So Paulo USP RENATA BARBOSA DE OLIVEIRA
Universidade Federal de Minas Gerais UFMG
MRCIA MACIEL ANTUNES

3
Farmacia de Manipulacin de Cosmticos Ltda FACIAL VALRIA PEREIRA DE SOUSA
Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ
PATRICIA HAUSCHILDT DE OLIVEIRA MENDES
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa COLABORADORES DE LA 5a EDICIN DE LA
FARMACOPEA BRASILEA
PAULA RENATA APARECIDA NIGRO RIVERA
CARAZZATTO ADILSON SARTORATTO
Asociacin Nacional de Farmacuticos Magistrales Universidade Estadual de Campinas UNICAMP
ANFARMAG
DLEY ANTONINI NEVES DE LIMA
ROBERTO PONTAROLO Universidade Federal del Amazonas UFAM
Universidade Federal de Paran UFPR
ADRIANA BUGNO
RADIOFRMACOS Instituto Adolfo Lutz IAL

ELOY JULIUS GARCIA Coordinador ADRIANA DA SILVA SANTOS DE OLIVEIRA

Universidade Estadual do Rio Grande do Sul UERGS Universidade Estadual de Campinas UNICAMP

ANA MARIA SILVEIRA BRAGHIROLLI ADRIANA PASSOS OLIVEIRA

Instituto de Ingeniera Nuclear IEN-CNEN Universidade Federal Fluminense UFF

ELAINE BORTOLETI DE ARAJO ADRIANO ANTUNES SOUZA DE ARAJO

Instituto de Investigaciones Energticas y Nucleares Universidade Federal de Sergipe UFS
IPEN
ALADE ALINE XAVIER LEAL
LUIZ CLUDIO MARTINS ALEIXO Instituto de Tecnologa en Inmunobiolgicos Bio-
Instituto de Ingeniera Nuclear IEN-CNEN Manguinhos / FIOCRUZ

MARYANGELA REZENDE MASCARENHAS ALBA VALRIA SANTOS

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Baxter Hospitalar Ltda

MARYCEL ROSA FELISA FIGOLS DE BARBOSA ALBERTO JOS CAVALHEIRO

Instituto de Investigaciones Energticas y Nucleares Universidade Estadual Paulista Jlio de Mesquita Filho
IPEN UNESP

NEUZA TAEKO OKASAKI FUKUMORI ALICE SIMON

Instituto de Investigaciones Energticas y Nucleares Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ
IPEN
ALINE LIMA HERMES MLLER
RALPH SANTOS OLIVEIRA Universidade Federal de Santa Maria UFSM
Instituto de Ingeniera Nuclear IEN-CNEN
ALLAN WEBERLING MATOS
SUSTANCIA QUMICA DE REFERENCIA Universidade Federal de Minas Gerais UFMG

PEDRO EDUARDO FROEHLICH Coordinador AMADEU CARDOSO JUNIOR

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Universidade Federal Fluminense UFF

RICO MARLON DE MORAES FLORES AMANDA THOMAS BARDEN

Universidade Federal de Santa Maria UFSM Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS

JAIMARA AZEVEDO OLIVEIRA AMARILIS SCREMIN PAULINO

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Universidade Federal de Santa Catarina UFSC

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 27

AMLIA TERESINHA HENRIQUES ANGELICA GARCIA COUTO

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Universidade del Vale del Itaja UNIVALI

ANA CAROLINA ZAVAREZI ANGELO JOS COLOMBO

Universidade Federal Fluminense UFF Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea
Brasilea 4a edicin
ANA CECLIA BEZERRA CARVALHO
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa ANIL KUMAR SINGH
Universidade de So Paulo USP
ANA CLAUDIA FERNANDES AMARAL

3
Instituto de Tecnologa de Frmacos Farmanguinhos / ANNA KAROLINA PASTOREK
FIOCRUZ Universidade Estadual de Campinas UNICAMP

ANA CRISTINA REGIS DE BARROS CORREA ANTNIA MARIA CAVALCANTI DE OLIVEIRA

Universidade Federal de Pernambuco UFPE Universidade Federal Fluminense UFF

ANA ELISA DE OLIVEIRA ANTNIO BASLIO PEREIRA

Universidade del Vale del Itaja UNIVALI Universidade Federal de Minas Gerais UFMG

ANA GABRIELA REIS SOLANO ANTNIO CARLOS DA COSTA BEZERRA

Universidade Federal de So Joo Del Rey UFSJ Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

ANA LAURA ESCARRONE ARMANDO DA SILVA CUNHA JNIOR

Universidade Federal de Santa Maria UFSM Universidade Federal de Minas Gerais UFMG

ANA LCIA ABOY ARTHUR LUIZ CORREA

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Universidade Federal Fluminense UFF

ANA MARIA BERGOLD ATANA MPALANTINOS DA SILVA

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Universidade Federal Fluminense UFF

ANA MARIA SILVEIRA BRAGHIROLLI AULUS CONRADO BASILE

Instituto de Ingeniera Nuclear IEN-CNEN Universidade de So Paulo USP

ANA MARIA SOARES PEREIRA UREA SILVEIRA CRUZ

Universidade de Ribeiro Preto UNAERP Instituto Adolfo Lutz IAL

ANDR AUGUSTO GOMES FARACO BERTA MARIA HEINZMANN

Universidade Federal de Minas Gerais UFMG Universidade Federal de Santa Maria UFSM

ANDR LIMA DE OLIVEIRA COSTA BEATRIZ PINHEIRO BEZERRA

Universidade Federal de Minas Gerais UFMG Universidade Federal del Cear UFC

ANDR LUIS GEMAL BIANCA FERNANDES GLAUSER

Instituto Nacional de Control de Calidad en Salud
INCQS / FIOCRUZ
ANDREA REZENDE DE OLIVEIRA
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
ANDREJUS KOROLKOVAS (In memoriam)
Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea
Brasilea 4a edicin
ANDRESSA BLAINSKI
Universidade Estadual de Maring UEM
ANDRESSA DALMAS NARVAEZ
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
ANGELA CRISTINA LEAL BADAR TRINDAD
Universidade Federal de Paran UFPR
Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ
BIANCA RODRIGUES DE OLIVEIRA
Universidade del Vale del Itaja UNIVALI
BRUNA TRINDAD DE CARVALHO
Universidade Federal de Minas Gerais UFMG
BRUNO VALENTE
Universidade Federal de Santa Catarina UFSC
CAIO PINHO FERNANDES
Universidade Federal Fluminense UFF
CAMILA ADOLFO GONALVES
Centro Universitario Franciscano UNIFRA

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 28 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

CARLA HOLANDINO QUARESMA CLAUDIO KIYOSHI HIRAI

Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ Biolab Sanus Farmacutica Ltda

CARLOS CZAR FLORES VIDOTTI CLSIO SOLDATELI PAIM

Consejo Federal de Farmacia CFF Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS

CARLOS EDUARDO DE OLIVEIRA PEREIRA CLVIA FERREIRA DUARTE GARROTE

Universidade Federal de Minas Gerais UFMG Universidade Federal de Gois UFG

CAROLINA DOS SANTOS PASSOS CRISTIANE DA SILVA

3
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Universidade del Vale del Itaja UNIVALI

CAROLINA LUPI DAS CRISTIANE DE BONA DA SILVA

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Universidade Federal de Santa Maria UFSM

CSSIA VIRGINIA GARCIA CRISTIANE RODRIGUES AUGUSTO

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
CECLIA ELENA DE FIGUEIREDO OGNIBENE
Asociacin de los Laboratorios Farmacuticos Nacionales
ALANAC
Instituto Nacional de Metrologia, Normatizacin y
Calidad Industrial INMETRO
CRISTIANNE DA SILVA GONALVES
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

CLIA DE FREITAS GUIMARES PRAA CRISTINA DUARTE VIANNA SOARES

Universidade Federal del Cear UFC Universidade Federal de Minas Gerais UFMG

CELINA ROCHA FILGUEIRAS CYPRIANO CARDOSO FILHO

Universidade Federal Fluminense UFF Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea
Brasilea 4a edicin
CELSO FIGUEIREDO BITTENCOURT
Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea DANIEL KARL RESENDE
Brasilea 4a edicin Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

CSAR ALEXANDRE JUNQUEIRA DANIELA MARRECO CERQUEIRA

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

CHANG CHIANN DANIELE DE SOUZA TEIXEIRA

Universidade de So Paulo USP Universidade Federal de Minas Gerais UFMG

CHARISE DALLAZEM BERTOL DANILE RUBERT PEREIRA

Universidade Federal de Santa Catarina UFSC Universidade Federal de Santa Maria UFSM

CHRISTIANE SOUTO MORAES DARCY AKEMI HOKAMA

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Instituto de Tecnologa en Inmunobiolgicos Bio
Manguinhos FIOCRUZ
CID AIMBIR DE MORAES SANTOS
Universidade Federal de Paran UFPR DEISE CRISTINA DA SILVA
Universidade del Vale del Itaja UNIVALI
CLARICE MITIE SANO YUI
Medley S.A. Industria Farmacutica DENILSON DA SILVA SANTOS
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
CLARISSA MARQUES MOREIRA DOS SANTOS
Universidade Federal de Santa Maria UFSM DENISE FERREIRA LEITE
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
CLARISSE MADALENA BUENO ROLIM
Universidade Federal de Santa Maria UFSM DESIRE MICHELS CORTEZ
Linde Gases Ltda.
CLUDIA MARIA OLIVEIRA SIMES
Universidade Federal de Santa Catarina UFSC DHALIA GUTEMBERG
Cmara Brasilea de Diagnstico Laboratorial CBDL
CLAUDIA SEIDL
Universidade Federal de Paran UFPR DIEGO LEONEL DA COSTA VIEIRA
Universidade Federal de Minas Gerais UFMG

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 29

DIOGO POMPU DE MORAES ELZRIA DE AGUIAR NUNAN

Universidade Federal de Santa Maria UFSM Universidade Federal de Minas Gerais UFMG

ECIO GEOVANI NETO EMANUELA ANSELMO VIEIRA

Universidade Federal de Minas Gerais UFMG Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

DER LISANDRO DE MORAES FLORES EMIDIO VASCONCELOS LEITO DE LA CUNHA

Universidade Federal de Santa Maria UFSM Universidade Estadual de Paraba UEPB

EDSON IRINEU MLLER EZEQUIEL PAULO VIRIATO

3
Universidade Federal de Santa Maria UFSM Laboratorio Homeoptico Almeida Prado Ltda

EDUARDO AUGUSTO MOREIRA RICO MARLON DE MORAES FLORES

Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea Universidade Federal de Santa Maria UFSM
Brasilea 4a edicin
EVELIN ELFRIEDE BALBINO
EDUARDO LLAVES LEAL Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
Instituto Nacional de Control de Calidad en Salud
INCQS / FIOCRUZ FABIANA CREMASCHI PALMA
Asociacin Brasilea de los Distribuidores y Importadores
EDUARDO SCHMIDT DE SOUZA de Insumos Farmacuticos, Cosmticos, Veterinarios,
Universidade Federal de Santa Maria UFSM Alimenticios y Aditivos ABRIFAR

ELAINE BORTOLETI DE ARAUJO FABIANA ERNESTINA BARCELLOS DA SILVA

Instituto de Investigaciones Energticas y Nucleares Universidade Federal del Pampa UNIPAMPA
IPEN
FABIANE GOLDCHMIDT ANTES
ELDA AZEVEDO GUERRA Universidade Federal de Santa Maria UFSM
Universidade Federal de Pernambuco UFPE
FBIO ANDREI DUARTE
ELFRIDES EVA SCHERMAN SCHAPOVAL Universidade Federal del Ro Grande FURG
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
FBIO SEIGI MURAKAMI
ELFRIEDE MARIANNE BACCHI Universidade Federal de Santa Catarina UFSC
Universidade de So Paulo USP
FABRICIO CARNEIRO DE OLIVEIRA
ELIANA NUNES Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
FVERO REISDORFER PAULA
ELIANE COUTINHO DE MEDEIROS Universidade Federal del Pampa UNIPAMPA
Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ
FELIPE DE LA ROSA NOBRE
ELISABETE PEREIRA DOS SANTOS Universidade Federal de Santa Maria UFSM
Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ
FELIPE REBELLO LOURENO
ELIZABETH IGNE FERREIRA Universidade de So Paulo USP
Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea
Brasilea 4a edicin FERNANDA HERMSDORFF DE LAS NEVES
Universidade Federal Fluminense UFF
ELIZABETH MARIA ROCHA LOBO
Universidade Federal Fluminense UFF FERNANDO HENRIQUE ANDRADE NOGUEIRA
Universidade Federal de Minas Gerais UFMG
ELIZABETH VALVERDE DOS SANTOS
Universidade Federal Fluminense UFF FERNO CASTRO BRAGA
Universidade Federal de Minas Gerais UFMG
ELOY JULIUS GARCIA
Universidade Estadual do Rio Grande do Sul UERGS FLBIO DE LA ROSA PONS JNIOR
Centro Universitario Franciscano UNIFRA
ELZA ANDERS SAAD
Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea FLVIA DAS MARQUES MARINHO
Brasilea 4a edicin Universidade Federal de Minas Gerais UFMG

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 30 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

FLVIA NEVES ROCHA ALVES HRIDA REGINA NUNES SALGADO

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Universidade Estadual Paulista Jlio de Mesquita Filho
UNESP
FRANCINETE RAMOS CAMPOS
Universidade Federal de Paran UFPR HIDELGARDO SEIBERT FRANA
Universidade Federal Fluminense UFF
FRANCISCA MARIA BARROS SOUSA
Universidade Federal del Cear UFC HISAKO GONDO HIGASHI
Universidade Estadual Paulista Jlio de Mesquita Filho
FRANCISCO JOS DE FREITAS UNESP

3
Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ
IARA COUTINHO DESMARALES
GABRIELA GONALVES DA SILVA Universidade Federal Fluminense UFF
Asociacin Brasilea de los Distribuidores y Importadores
de Insumos Farmacuticos, Cosmticos, Veterinarios, ILIO MONTANARI JNIOR
Alimenticios y Aditivos ABRIFAR Universidade Estadual de Campinas UNICAMP

GEISIANE MARIA ALVES PRESMICH INGRID BEZERRA

Laboratorio Industrial Farmacutico de Alagoas LIFAL Universidade Federal del Cear UFC

GERALDO FENERICH IRENE SATIKO KIKUCHI

Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea Universidade de So Paulo USP
Brasilea 4a edicin
ISABEL CRISTINA FRACCIN DIEFENBACH
GERSON ANTNIO PIANETTI Universidade Federal de Santa Maria UFSM
Universidade Federal Minas Gerais UFMG
ISABELA DA COSTA CSAR
GILBERTO DOLEJAL ZANETTI Instituto de Ciencias Farmacuticas de Estudios y
Universidade Federal de Santa Maria UFSM Investigaciones ICF

GILSON ANDRADE RAMALDES ISABELLA PIAZZA

Universidade Federal de Minas Gerais UFMG Universidade Federal Fluminense UFF

GIOVANA SECRETTI VENDRUSCOLO JACQUELINE DE SOUZA

Universidade Comunitaria de la Regin de Chapec Universidade Federal de Oro Preto UFOP
UNOCHAPEC
JAIMARA AZEVEDO OLIVEIRA
GISELE DA SILVA BOTAS Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
Universidade Federal Fluminense UFF
JAIR CALIXTO
GISELY CRISTINY LOPES Sindicato de la Industria de Productos Farmacuticos en
Universidade Estadual de Maring UEM el Estado de So Paulo Sindusfarma

GISLAINE CARMO ROESCH JAIR CSSIO FARIA

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Colaborador Independiente

GISLAINE KUMINEK JANANA DUQUE DE SOUZA

Universidade Federal de Santa Catarina UFSC Bio Manguinhos FIOCRUZ

GIZELE SCOTTI DEL CANTO JARBAS FARIAS LEAL

Universidade Federal de Santa Maria UFSM Universidade Federal Fluminense UFF

GLYN MARA FIGUEIRA JOO BATISTA DA SILVA JNIOR

Universidade Estadual de Campinas UNICAMP Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

GUILHERME DINIZ TAVARES JOO CARLOS PALAZZO DE MELLO

Universidade de So Paulo USP Universidade Estadual de Maring UEM

GUSTAVO RODRIGUES DE REZENDE JOO CLEVERSON GASPARETTO

Universidade Federal de Minas Gerais UFMG Universidade Federal de Paran UFPR

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 31

JOO DIMAS RIBEIRO JULIANO DE MORALES FERREIRA SILVA

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Universidade de So Paulo USP

JOO FERREIRA MARTINS JULIANO SMANIOTO BARIN

Instituto Nacional de Control de la Calidad en Salud Universidade Federal de Santa Maria UFSM
INCQS / FIOCRUZ
JLIO CSAR CARESTIATO
JOO MXIMO DE SIQUEIRA Universidade Federal Fluminense UFF
Universidade Federal de Mato Grosso do Sul UFMS
KARINA ALVES DA SILVA

3
JOO PAULO SILVRIO PERFECTO Universidade Estadual de Campinas UNICAMP
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
KATIA ANDREA DOMINGOS DE MORALES
JONATHAS FELIPE REVOREDO LOBO Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
Universidade Federal Fluminense UFF
KATIA REGINA TORRES
JOS ALEIXO PRATES Y SILVA Ministrio da Sade MS
Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea
Brasilea 4a edicin KATIA SUZI DE LA SILVEIRA SILVA
Instituto de Investigaciones Energticas y Nucleares
JOS ANGELO SILVEIRA ZUANAZZI IPEN
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
KOICHI MIZUTA
JOS ANTNIO DE AQUINO RIBEIRO Instituto de Investigaciones Tecnolgicas del Estado de
Empresa Brasilea de Investigacin Agropecuaria So Paulo IPTSP
EMBRAPA
LAS SANTANA DANTAS
JOS ANTONIO DE OLIVEIRA BATISTUZZO Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
Facultades Oswaldo Cruz
LARISSA SAKIS BERNARDIS
JOS CARLOS BARBRIO Universidade Federal de Santa Catarina UFSC
Genese Productos Diagnsticos Ltda.
LAURA JANE MOREIRA SANTIAGO
JOS CARLOS TAVARES CARVALHO Universidade Estadual del Norte Fluminense UENF
Universidade Federal do Amap UNIFAP
LAURA TERUMI UEDA HERNANDES MELERO
JOS LAMARTINE SOARES SOBRINHO Instituto de Investigaciones Energticas y Nucleares
Universidade Federal del Piau UFPI IPEN

JOS LOURENO DE FREITAS NETO LAUREN ROSA CROSSETTI VAUCHER

Universidade Federal de Pernambuco UFPE Universidade Federal de Santa Maria UFSM

JOS MARIA BARBOSA FILHO LAURO DOMINGOS MORETTO

Universidade Federal de la Paraba UFPB
JOS MURADIAN FILHO
Pall do Brasil Ltda.
JOSEANE MARIA BEZERRA DE MENEZES
Vigilancia Sanitaria RN
JOSIANE DE CARVALHO VITORINO
Universidade del Vale del Itaja UNIVALI
JULIA APARECIDA LOURENO DE SOUZA
Universidade Federal de Pernambuco UFPE
JULIANA ASSUMPCIN DA SILVA
Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ
JULIANA SEVERO FAGUNDES PEREIRA
Universidade Federal de Santa Maria UFSM
Sindicato de la Industria de Productos Farmacuticos en
el Estado de So Paulo Sindusfarma
LEANDRO MACHADO ROCHA
Universidade Federal Fluminense UFF
LEANDRO SOARES PINHEIRO
Universidade Federal Fluminense UFF
LEILA BRASIL FERREIRA
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
LEILA SCHREINER DELGADO
Universidade Federal de Santa Maria UFSM
LENISE DE LIMA SILVA
Universidade Federal de Santa Maria UFSM

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 32 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

LEONARDO BAHA TAVARES LUS CARLOS BRGIDO MOURA

Universidade Federal de Minas Gerais UFMG Universidade Federal del Cear UFC

LEONARDO DE SOUZA TEIXEIRA LUIS CARLOS DE ALENCAR SAMPAIO FILHO

Instituto de Ciencias Farmacuticas de Estudios y Universidade Federal de Pernambuco UFPE
Investigaciones ICF
LUIZ ALBERTO LIRA SOARES
LEONARDO PAES CINELLI Universidade Federal del Ro Grande del Norte UFRN
Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ
LUIZ ANTNIO BATISTA DA COSTA

3
LEOPOLDO CLEMENTE BARATTO Centro de Excelencia en Salud Integral de Paran
Universidade Federal de Paran UFPR CESIP

LETCIA LENZ SFAIR LUIZ ARMANDO ERTHAL

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

LETICIA NORMA CARPENTIERI RODRIGUES LUIZ CLUDIO MARTINS ALEIXO

Universidade Federal de So Paulo UNIFESP Instituto de Ingeniera Nuclear IEN-CNEN

LETCIA SCHERER KOESTER LUIZ FERNANDO SECIOSO CHIAVEGATTO

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ

LIDIANE BUENO DE MORAES LUIZ GUSTAVO TORRES

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Naturofarma Productos Naturales Ltda.

LGIA MARIA MOREIRA DE CAMPOS LUIZA DE CASTRO MENEZES CANDIDO

Universidade Federal de Minas Gerais UFMG Universidade Federal de Minas Gerais UFMG

LILIA RIBEIRO SERDIO LUMA WOSCH

Instituto Vital Brasil IVB Universidade Federal de Paran UFPR

LILIAN AULER MENTZ LUZIA DE FTIMA PEREIRA

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Alko del Brasil Ind y Con LTDA

LIVIA DUARTE PEREIRA MAGDA RHAYANNY ASSUNCIN FERREIRA

Universidade Federal Fluminense UFF Universidade Federal del Ro Grande del Norte UFRN

LORENA FRATINI MAIQUE WEBER BIAVATTI

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Universidade del Vale del Itaja UNIVALI

LUANA LENZI MANUELA DA COSTA SOLIZ

Universidade Federal de Paran UFPR Universidade Federal de Santa Maria UFSM

LUANA MARTINS DE LA LUZ MARA EL CORAB MOREIRA DE OLIVEIRA

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Ministrio da Sade MS

LUCLIA MAGALHES DA SILVA MARCELA ZART AREND

Universidade Federal de Santa Maria UFSM Universidade Federal de Santa Maria UFSM

LCIA DE FTIMA FRANCELINO DA SILVA MARCELE GIACOMIN GONALVES

Laboratorio Central de Salud Pblica de Pernambuco Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
LACEN
MARCELO CAMILO MORERA
LUCIANA CATIA BLOCK Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
Universidade del Vale del Itaja UNIVALI
MRCIA FOSTER MESKO
LUCIANA CRISTINA MOTA Universidade Federal de Pelotas UFPel
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
MRCIA VIGNOLI DA SILVA
LUCIANE VARINI LAPORTA Universidade Federal de Ciencias de la Salud de Puerto
Centro Universitario Franciscano UNIFRA Alegre UFCSPA

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 33

MRCIO LABASTIE (In memorian) MARIA JOS CARNEIRO DEL NASCIMENTO

Instituto Nacional de Control de Calidad en Salud Empresa Brasilea de Hemoderivados y Biotecnologa
INCQS / FIOCRUZ HEMOBRAS

MARCO ANDR CARDOSO MARIA LCIA SILVEIRA MALTA DE ALENCAR

Universidade Federal de Paran UFPR Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

MARCO ANTONIO STEPHANO MARIA TERESINHA KREINEKER DRESH

Universidade de So Paulo USP Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS

3
MARCOS ANTONIO SEGATTO SILVA MARIANE GEHLEN PERIN
Universidade Federal de Santa Catarina UFSC Universidade Federal de Santa Maria UFSM

MARCOS ROBERTO DOS SANTOS MARINGELA TORCHIA DEL NASCIMENTO

Centro Universitario Franciscano UNIFRA Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

MARGARETH LINDE ATHAYDE MARIBETE HOMRICH HOLZSCHUH

Universidade Federal de Santa Maria UFSM Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS

MARGARETH MIE NAKAMURA MATSUDA MARILI VILLA NUEVA RODRIGUES

Instituto de Investigaciones Energticas y Nucleares Universidade Estadual de Campinas UNICAMP
IPEN
MARILIA DE MORAES CASTRO
MARIA ALICE BOCKELMANN Universidade Estadual de Campinas UNICAMP
Cristlia Productos Qumicos Farmacuticos Ltda.
MARINA DAUMAS NEVES DUARTE
MARIA AUGUSTA TRAVASSOS LEMOS Universidade Federal Fluminense UFF
Universidade Federal Fluminense UFF
MARINA SCOPEL
MARIA AUXILIADORA MILANEZE GUTIERRE Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
Universidade Estadual de Maring UEM
MARINS JOST Y SOUZA
MARIA CRISTINA DICIAULA Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
Universidade Estadual de Maring UEM
MRIO LUIS RIBEIRO MOURA
MARIA DE LAS GRAAS LINS BRANDO Universidade Federal del Cear UFC
Universidade Federal de Minas Gerais UFMG
MRIO SRGIO PIANTAVINI
MARIA DIANA CERQUEIRA SALES Universidade Federal de Paran UFPR
Facultad Brasilea UNIVIX
MARISA COELHO ADATI
MARIA DEL CARMO ESTANISLAU DEL AMARAL Instituto Nacional de Control de Calidad en Salud
Universidade Estadual de Campinas UNICAMP INCQS / FIOCRUZ

MARIA DEL CARMO VASQUES GARCIA MARISA DE MOURA SOUZA DE LA LUZ

Instituto Nacional de Control de Calidad en Salud Laboratorio de Control de Calidad y Investigacin
INCQS / FIOCRUZ LCQPq

MARIA DEL ROSRIO SILVEIRA BRITTO MARISA KEIKO UEMA

Universidade Federal de Pernambuco UFPE Eurofarma Comercial y Importadora Ltda

MARIA ELISA GIRO MOREIRA MARTA CRISTINA TEIXEIRA DUARTE

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Universidade Estadual de Campinas UNICAMP

MARIA ELISABETE AMARAL DE MORAES MARTHA ANA GATTUSO

Universidade Federal del Cear UFC Universidade Nacional de Rosario, Argentina

MARIA ELIZABETE DALMORA MARTIN STEPPE

Universidade Federal de Santa Maria UFSM Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS

MARY ANN FOGLIO

Universidade Estadual de Campinas UNICAMP

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 34 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

MARYANGELA REZENDE MASCARENHAS NARA DEITOS BITTENCOURT

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Universidade Federal de Santa Maria UFSM

MARYCEL ROSA FELISA F. BARBOSA NEEMIAS SILVA DE ANDRADE

Instituto de Investigaciones Energticas y Nucleares Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
IPEN
NELIO DE BASTOS MORAIS
MAURO FERREIRA WITZEL Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
Blanver Farmoquimica Ltda
NELISE GONALVES DUARTE Y DUARTE

3
MAX WEBER PEREIRA Universidade Federal Fluminense UFF
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
NEUZA TAEKO OKASAKI FUKUMORI
MELNIA DE FTIMA CORDELINO Instituto de Investigaciones Energticas y Nucleares
Baxter Hospitalar Ltda IPEN

MELNIA PALERMO MANFRON NIKOLAI SHARAPIN (In memoriam)

Universidade Federal de Santa Maria UFSM Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea
Brasilea 4a edicin
MERIANE PIRES CARVALHO
Universidade Federal Fluminense UFF NILTON LUZ NETTO JNIOR
Universidade Catlica de Brasilia UCB
MICHELE FEITOSA SILVA
Instituto Nacional de Control de Calidad en Salud NIRLA RODRIGUES ROMERO
INCQS / FIOCRUZ Universidade Federal del Cear UFC

MICHELI WRASSE SANGI ONSIMO ZARA PEREIRA

Universidade Federal de Santa Maria UFSM
MIGUEL DE LUCCA NETO
Medley S.A. Industria Farmacutica
MILENA BANDEIRA BARROZO
Universidade Federal del Cear UFC
MIRACY MUNIZ DE ALBUQUERQUE
Universidade Federal de Pernambuco UFPE
MIRION ANDERS APEL
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
MIRION DE FTIMA VIANNA LEONEL
Universidade Federal de Minas Gerais UFMG
MIRIAN PARENTE PINHEIRO
Universidade Federal del Cear UFC
MNICA DA LUZ CARVALHO SOARES
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
MONIKA TAGLIARI
Universidade Federal de Santa Catarina UFSC
NADIA LIMA DAS CABRAL
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
NADIA MARIA VOLPATO
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
NAIALY FERNANDES ARAJO REIS
Universidade Federal de Minas Gerais UFMG
Asociacin Brasilea de la Industria Farmoqumica y de
Insumos Farmacuticos ABIQUIFI
ORLANDO FATIBELLO FILHO
Universidade Federal de So Carlos UFSCar
ORLANDO SILVA
Serono Productos Farmacuticos Ltda
PAOLA DE AZEVEDO MELLO
Universidade Federal de Santa Maria UFSM
PATRCIA DE ANDRADE MARTINS
Instituto de Investigaciones Energticas y Nucleares
IPEN
PATRICIA HAUSCHILDT DE OLIVEIRA MENDES
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
PAULA CRISTINA REZENDE ENAS
Universidade Federal de Minas Gerais UFMG
PAULA REGINA ALVES DE SIQUEIRA
Universidade del Vale del Itaja UNIVALI
PAULA RENATA APARECIDA NIGRO RIVERA
CARAZZATTO
Asociacin Nacional de Farmacuticos Magistrales
ANFARMAG
PAULA ROCHA CHELLINI
Universidade Federal de Minas Gerais UFMG
PAULO ANTONIO DE SOUZA MOURO
Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 35

PAULO CHANEL DEODATO DE FREITAS RENATA BARBOSA DE OLIVEIRA

Universidade de So Paulo USP Universidade Federal de Minas Gerais UFMG

PAULO EDUARDO MAYORGA BORGES RENIERE HENRIQUE DA SILVA

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Universidade Federal de Pernambuco UFPE

PAULO RENATO DE OLIVEIRA RICARDO CHIAPPA

Universidade Federal de Santa Catarina UFSC Unin Educacional del Planalto Central UNIPLAC

PAULO VICTOR PIRES DOS SANTOS RICARDO PEREIRA LOURO

3
Universidade Estadual de Maring UEM Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ

PEDRO EDUARDO FROEHLICH RINALDO FERREIRA

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Universidade del Vale del Itaja UNIVALI

PEDRO JOS ROLIM NETO ROBERTO PONTAROLO

Universidade Federal de Pernambuco UFPE Universidade Federal de Paran UFPR

PEDRO MELILO DE MAGALHES ROCHELE CASSANTA ROSSI

Universidade Estadual de Campinas UNICAMP Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS

POLIANA BERNARDES GONALVES ROCHELE SOGARI PICOLOTO

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Universidade Federal de Santa Maria UFSM

POLIANA DE FTIMA HILRIO RODNEY ALEXANDRE FERREIRA RODRIGUES

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Universidade Estadual de Campinas UNICAMP

PRISCILLA STUDART RODRIGO ALVES SOARES CRUZ

Universidade Federal del Cear UFC Universidade Federal Fluminense UFF

RAFAEL DEITOS BEGNIS RODRIGO CRISTOFOLETTI

Universidade Federal de Santa Maria UFSM Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

RAFAEL NICOLAY PEREIRA RODRIGO FERNANDES ALEXANDRE

Universidade Federal de Santa Catarina UFSC Ministrio da Sade MS

RAFAELA MARIN RONALDO FERREIRA DA SILVA

Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS Universidade Federal Fluminense UFF

RAFAELLA GOMES BEZERRA ROSA NORIKO YAMAMOTO

Universidade Federal del Cear UFC Universidade de So Paulo USP

RALPH SANTOS OLIVEIRA ROSALI MARIA FERREIRA DA SILVA

Instituto de Ingeniera Nuclear IEN-CNEN Universidade Federal del Par UFPA

RAPHAEL DE ANDRADE LUCAS Y SILVA ROSANA MIGUEL MESSIAS MASTELARO

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Sindicato de la Industria de Productos Farmacuticos en
el Estado de So Paulo Sindusfarma
RAQUEL LIMA Y SILVA
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa ROSANE MARIA SILVA ALVES
Ministrio da Sade MS
REBECA RIBEIRO DE MOURA
Universidade Federal del Cear UFC ROSANGELA ANDRADE
Linde Gases Ltda.
RENATA APARECIDA DAS
Sindicato de la Industria de Productos Farmacuticos en ROSANGELA BOLZAN
el Estado de So Paulo Sindusfarma Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa.

RENATA ARACELLI PIRES ROSE VANESSA BANDEIRA

Baxter Hospitalar Ltda Universidade Federal de Santa Maria UFSM

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 36 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

ROSEMARIE APARECIDA DE ARAJO BONATTO SILVNIA VAZ DE MELO MATTOS

Merck Sharp & Dohme Farmacutica Ltda Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

ROSILENE RODRIGUES SANTIAGO SILVIA DEBENEDETTI

Universidade Federal del Ro Grande del Norte UFRN Universidade Nacional Argentina

ROSIMAR LEITENBERG DE LA SILVEIRA SILVIA HELENA MIOLLO BORGMANN

Centro Universitario Franciscano UNIFRA Universidade Federal de Santa Catarina UFSC

ROSIMEIRE PEREIRA ALVES DE LA CRUZ SILVIA PAREDES FUENTES

3
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa

RUBENS RAPHAEL SIMES DE OLIVEIRA SLVIA STORPIRTIS

Instituto de Investigaciones Energticas y Nucleares Universidade de So Paulo USP
IPEN
SIMONE CRISTINA BENOVIT
RUTH RIESINGER STRATTMANN Universidade Federal de Santa Maria UFSM
Universidade Federal de Pernambuco UFPE
SIMONE GONALVES CARDOSO
SAID GONALVES DE LA CRUZ FONSECA Universidade Federal de Santa Catarina UFSC
Universidade Federal del Cear UFC
SOLANGE MARIA COUTINHO BRANDO
SALVADOR ALVES PEREIRA (In memoriam) Instituto Nacional de Control de Calidad en Salud
Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea INCQS / FIOCRUZ
Brasilea 4a edicin
SUSANA JULIA GATTUSO BITTEL
SLVIO FILGUEIRAS Universidade Nacional de Rosario, Argentina
Linde Gases Ltda.
SUZANA MACHADO DE VILA
SAMANTA CARDOSO MOURO Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea
Universidade del Vale del Itaja UNIVALI Brasilea 4a edicin

SAULO FERNANDES DE ANDRADE TAILANE SANTANNA MOREIRA

Universidade Federal de Minas Gerais UFMG Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ

SEBASTIO BAETA HENRIQUE TALITA GESSER CESCA

Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea Universidade del Vale del Itaja UNIVALI
Brasilea 4a edicin
TANIA MARI BELL BRESOLIN
SERGIO LUIZ DALMORA Universidade del Vale del Itaja UNIVALI
Universidade Federal de Santa Maria UFSM
TATIANE PEREIRA DE SOUZA
SERGIO ROBERTO MORTARI Universidade Federal del Amazonas UFAM
Centro Universitario Franciscano UNIFRA
TAYOMARA DE SOUSA NASCIMENTO
SEVERINO BARBOSA Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
Universidade Federal del Pernambuco UFPE
TELMA MARY KANEKO
SEVERINO GRANJEIRO JNIOR Universidade de So Paulo USP
Laboratorio Farmacutico del Estado de Pernambuco
LAFEPE TRCIO PASCHKE OPPE
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
SILAS GOUVEIA
Fundacin Ezequiel Das FUNED TERESA CRISTINA TAVARES DALLA COSTA
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS
SILSIA DE SOUZA AMORIM
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa TEREZINHA DE JESUS ANDREOLI PINTO
Universidade de So Paulo USP
SILVANA TERESA LACERDA JALES
Asociacin de los Laboratorios Oficiales Brasileos THALES MARTINS GUIMARES DE FRANCISCO
ALFOB Universidade Federal de Paran UFPR

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 37

THALES MESQUITA DEL COUTO ARAUJO VIVIANE DE OLIVEIRA GARCIA

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa Universidade Federal de Santa Maria UFSM

THELMA DE BARROS MACHADO VLADI OLGA CONSIGLIERI

Universidade Federal Fluminense UFF Universidade de So Paulo USP

THEREZA CRISTINA VESSONI PENNA VOLKER BITTRICH

Universidade de So Paulo USP Universidade Estadual de Campinas UNICAMP

THEREZINHA COELHO BARBOSA TOMASSINI WAGNER LUIZ RAMOS BARBOSA

3
Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea Universidade Federal del Par UFPA
Brasilea 4a edicin
WALFREDO DA SILVA CALMON
THIELE FACCIN DE BRUM Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria Anvisa
Centro Universitario Franciscano UNIFRA
WILSON CAMARGO
TIAGO ASSIS MIRANDA Instituto Nacional de Control de Calidad en Salud
Universidade Federal de Minas Gerais UFMG INCQS / FIOCRUZ

VALDIR FLORNCIO DE LA VEIGA JUNIOR WILSON REINHARDT FILHO

Universidade Federal Amazonas UFAM Comisin Permanente de Revisin de la Farmacopea
Brasilea 4a edicin
VALRIA PEREIRA DE SOUSA
Universidade Federal do Rio de Janeiro UFRJ YASMIN LOURENZO FIGUEIREDO
Vigilancia Sanitaria y Ambiental BA
VALQUIRIA LINCK BASSANI
Universidade Federal do Rio Grande do Sul UFRGS YEDO ALQUINI
Universidade Federal de Paran UFPR
VERA LCIA GARCIA REHDER
Universidade Estadual de Campinas UNICAMP

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

4 GENERALIDADES
TTULO
El ttulo completo de esta obra es Farmacopea de la Rep-
blica Federativa de Brasil, 5a edicin. Puede ser denomi-
nada Farmacopea Brasilea, 5a edicin o FB 5.
DEFINICIONES
Accin, uso y dosis
Son las constantes del informe para registro del produc-
to en el rgano sanitario, actualizadas mediante revisin
bibliogrfica nacional e internacional, cuando sea el caso.
Cuando indicadas en las monografas, las dosis represen-
tan la cantidad del medicamento usualmente prescrita,
que tenga eficacia teraputica, para pacientes adultos. El
prescriptor habilitado, a su criterio y bajo su exclusiva
responsabilidad, considerando la farmacocintica y farma-
codinmica, podr variar las cantidades y la frecuencia de
administracin de cualquier medicamento. No obstante, la
prescripcin de dosis muy superiores a las usuales, estable-
cida en literatura, obliga al farmacutico a confirmar, con
el prescriptor de la receta, las dosis establecidas.
Acidez y alcalinidad ensayos rpidos
Una solucin es considerada neutra cuando no modifica
el color de los papeles azul y rojo de tornasol, o cuando el
papel indicador universal adquiere los colores de la escala
neutra, o cuando 1 ml de la misma solucin se colorea de
verde con una gota de azul de bromotimol SI (pH 7,0).
Es considerada cida cuando toma color rojo el papel azul
de tornasol o 1 ml se torna amarillo por una gota de rojo de
fenol SI (pH 1,0 a 6,6).
Es considerada levemente cida cuando toma color leve-
mente rojo el papel azul de tornasol o 1 ml se colorea de
anaranjado por una gota de rojo de metilo SI (pH 4,0 a 6,6).
Es considerada fuertemente cida cuando toma color azul
el papel rojo de congo o 1 ml se torna rojo por la adicin de
una gota de anaranjado de metilo SI (pH 1,0 a 4,0).
Es considerada alcalina cuando toma color azul el papel
rojo de tornasol o 1 ml toma color azul por una gota de azul
de bromotimol SI (pH 7,6 a 13,0).
Es considerada levemente alcalina cuando toma color azul
el papel rojo de tornasol o 1 ml toma color rosa por una
gota de rojo de cresol SI (pH 7,6 a 8,8).
Es considerada fuertemente alcalina cuando toma color
azul por una gota de timolftaleina SI (pH 9,3 a 10.5,) o de
rojo por una gota de fenolftaleina SI (pH 10,0 a 13,0).
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 39
Adhesivo
Es el sistema destinado a producir un efecto sistmico por
la difusin del(de los) principio(s) activo(s) en una veloci-
dad constante por un perodo de tiempo prolongado.
Agua para inyectables
Agua para inyectables es el insumo utilizado en la prepa-
racin de medicamentos para administracin parenteral,
como vehculo o en la disolucin o diluicin de sustancias
o de preparaciones.
Agua para uso farmacutico 4
Se considera como agua para uso farmacutico los diversos
tipos de agua empleados en la sntesis de frmacos, en la
formulacin y produccin de medicamentos, en laborato-
rios de ensayos, diagnsticos y dems aplicaciones relacio-
nadas al rea de la salud, inclusive como principal compo-
nente en la limpieza de utensilios, equipos y sistemas.
Agua purificada
Agua purificada es el agua potable que pas por algn tipo
de tratamiento para retirar los posibles contaminantes y
atender a los requisitos de pureza establecidos en la mo-
nografa.
Agua ultrapurificada
Agua ultrapurificada es el agua purificada que pas por tra-
tamiento adicional para retirar los posibles contaminantes
y atender a los requisitos de pureza establecidos en la mo-
nografa.
Aguas aromticas
Son soluciones saturadas de aceites esenciales u otras sus-
tancias aromticas en agua. Poseen olor caracterstico de
las drogas con las cuales son preparadas, recibiendo, tam-
bin, el nombre de ellas.
Bao mara y bao a vapor
Es un bao de agua hirviendo, a no ser que la monografa es-
pecifique otra temperatura. Las expresiones agua caliente y
agua muy caliente indican temperaturas aproximadas entre
60 C y 70 C y entre 85 C y 95 C respectivamente.
Bao a vapor significa exposicin al vapor fluente u otra
forma de calor, correspondiendo en temperatura a la del
vapor fluente.
 40 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Biodisponibilidad
Indica la velocidad y la extensin de absorcin de un prin-
cipio activo en una forma de determinacin de dosis, a
partir de su curva concentracin/tiempo en la circulacin
sistmica o su excrecin en la orina.
Bioequivalencia
Consiste en la comprobacin de equivalencia farmacutica
entre productos presentados bajo la misma forma farma-
cutica, conteniendo idntica composicin cualitativa y
cuantitativa de principio(s) activo(s), y que tengan com-
parable biodisponibilidad, cuando son estudiados bajo un
mismo diseo experimental.
Cpsula
4 Es la forma farmacutica slida en que el principio activo
y los excipientes estn contenidos en un envoltorio soluble
duro o blando, de formatos y tamaos variados, usualmen-
te, conteniendo una dosis nica del principio activo. Nor-
malmente es formada de gelatina, pero puede, tambin, ser
de almidn o de otras sustancias. Abreviatura: cap.
Cpsula dura
Es la cpsula que consiste de dos partes cilndricas pre- fa-
bricadas (cuerpo y tapa) que se encajan y cuyas extremida-
des son redondeadas. Es tpicamente llenada con principios
activos y excipientes en la forma slida. Normalmente es
formada de gelatina, pero puede tambin ser de otras sus-
tancias. Abreviatura: cap. dura
Cpsula dura de liberacin prolongada
Es la cpsula que consiste de dos partes cilndricas pre-fa-
bricadas (cuerpo tapa) que se encajan y cuyas extremida-
des son redondeadas. Es tpicamente llenada con principios
activos y excipientes en la forma slida. Normalmente es
formada de gelatina, pero puede tambin ser de otras sus-
tancias. Ver definicin general de liberacin prolongada.
Abreviatura: cap. dura. lib. pro.
Cpsula dura de liberacin retardada
Es la cpsula que consiste de dos secciones cilndricas pre-
fabricadas (cuerpo y tapa) que se encajan y cuyas extremi-
dades son redondeadas. Es tpicamente llenada con princi-
pios activos y excipientes en la forma slida. Normalmente
es formada de gelatina, pero puede tambin ser de otras
sustancias. Ver definicin general de liberacin retardada.
Abreviatura: cap. dura lib. ret.
Cpsula blanda
Es la cpsula constituida de un envoltorio de gelatina, de
varios formatos, ms maleable que el de las cpsulas duras.
Normalmente son llenadas con contenidos lquidos o se-
mislidos, pero pueden ser llenadas tambin con polvos y
otros slidos secos. Abreviatura: cap. blando
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Cpsula blanda de liberacin prolongada
Es la cpsula constituida de un envoltorio de gelatina, de
varios formatos, ms maleable del que el de las cpsulas
duras. Normalmente son llenadas con contenidos lquidos
o semislidos, pero pueden ser llenadas tambin con pol-
vos y otros slidos secos. Ver definicin general de libera-
cin prolongada. Abreviatura: cap. blanda lib.pro.
Cpsula blando de liberacin retardada
Es la cpsula constituida de un envoltorio de gelatina, de
varios formatos, ms maleable del que el de las cpsulas
duras. Normalmente son llenadas con contenidos lquidos
o semislidos, pero pueden ser llenadas tambin con pol-
vos y otros slidos secos. Ver definicin general de libera-
cin retardada. Abreviatura: cap. blando lib. ret.
Cilindro de gas
Es el recipiente metlico, perfectamente cerrado, de pare-
des resistentes, destinado a contener gas bajo presin, ob-
turado por vlvula regulable, capaz de mantener la salida
del gas en un caudal determinado.
Colirio
Es la preparacin farmacutica lquida destinada a la apli-
cacin sobre la mucosa ocular. Abreviatura: col.
Complejo protrombnico humano total liofilizado
Es una fraccin de protenas plasmticas que contienen
obligatoriamente los Factores II, VII, IX y X de la coagu-
lacin humana.
Comprimido
Es la forma farmacutica slida que contiene una dosis
nica de uno o ms principios activos, con o sin excipien-
tes, obtenida por la compresin de volmenes uniformes
de partculas. Puede ser de una amplia variedad de tama-
os, formatos, presentar marcaciones en la superficie y ser
revestido o no. Abreviatura: comp.
Comprimido de liberacin modificada
Es el Comprimido que tiene una liberacin modificada.
Debe ser clasificado como de liberacin modificada apenas
cuando las clasificaciones liberacin retardada y libera-
cin prolongada no fuesen adecuadas. Abreviatura: comp.
lib. mod.
Comprimido de liberacin prolongada
Es el comprimido cuyos excipientes son destinados espec-
ficamente a modificar la liberacin del principio activo en
los fluidos digestivos. Vea definicin de liberacin prolon-
gada. Abreviatura: comp. lib. pro.

Comprimido efervescente
Es el comprimido que contiene, en adicin a los ingredien-
tes activos, sustancias cidas y carbonatos o bicarbonatos,
los cuales liberan dixido de carbono cuando el comprimi-
do es disuelto en agua. Es destinado a ser disuelto o disper-
so en agua antes de la administracin. Abreviatura: comp.
efer.
Comprimido masticable
Es el comprimido formulado para que pueda ser mastica-
do, produciendo un sabor residual agradable en la cavidad
oral. Abreviatura: comp. mast.
Comprimido bucal
Es el comprimido que desintegra o disuelve, rpidamente,
cuando colocado sobre la lengua. Abreviatura: comp. buc.
Comprimido para colutorio
Es el comprimido que debe ser disuelto en agua para la
preparacin del colutorio, que es un lquido destinado al
enjuague bucal de accin sobre las encas y las mucosas de
la boca y de la garganta. No debe ser tragado. Abreviatura:
comp. colu.
Comprimido para solucin
Es el comprimido destinado a ser disuelto en agua antes
de la administracin. La solucin producida puede ser le-
vemente lechosa debido a los excipientes utilizados en la
fabricacin de los comprimidos. Abreviatura: comp. sol.
Comprimido para suspensin
Es el comprimido que cuando en contacto con un lquido,
rpidamente produce una dispersin homognea (suspen-
sin). Est destinado a ser disperso antes de la administra-
cin. Abreviatura: comp. susp.
Comprimido revestido
Es el comprimido que posee una o ms camadas finas de
revestimiento, normalmente, polimricas, destinadas a
proteger el frmaco del aire o humedad; para frmacos con
olor y sabor desagradables; para mejorar la apariencia de
los comprimidos, o para alguna otra propiedad que no sea
la de alterar la velocidad o extensin de la liberacin del
principio activo. Abreviatura: comp. rev.
Comprimido revestido de liberacin prolongada
Es el comprimido que posee una o ms camadas finas de
revestimiento, normalmente polimricas, destinadas a mo-
dificar la velocidad o extensin de la liberacin de los prin-
cipios activos. Vea la definicin de liberacin prolongada
Abreviatura: comp. rev. lib. pro.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 41
Comprimido revestido de liberacin retardada
Es el comprimido que posee una o ms camadas finas de
revestimiento, normalmente polimricas, destinadas a mo-
dificar la velocidad o extensin de la liberacin de los prin-
cipios activos, presentando una liberacin retardada del
principio activo. Vea definicin de liberacin retardada.
Abreviatura: comp. rev. lib. ret.
Comprimido sin revestimiento
el comprimido en que excipientes usados no son desti-
nados, especficamente, a modificar la liberacin del prin-
cipio activo en los fluidos digestivos. Abreviatura: comp.
sin rev.
Control de calidad
Es el conjunto de medidas destinadas a garantizar, en cual-
quier momento, la produccin de lotes de medicamentos y
4
dems productos, que satisfagan las normas de identidad,
actividad, tenor, pureza, eficacia y inocuidad.
Colorantes
Son sustancias adicionales a los medicamentos, productos
dietticos, cosmticos, perfumes, productos de higiene y
similares, productos de limpieza y similares, con el efecto
de otorgarles color y, en determinados tipos de cosmticos,
transferirlo para la superficie cutnea y anexos de la piel.
Para su uso observar la legislacin Federal y las resolucio-
nes editadas por la Anvisa.
Relacionados (relacionados)
Producto para la salud, tal como equipo, aparato, material,
artculo o sistema de uso o aplicacin mdica, odontolgi-
ca o laboratorial, destinado a la prevencin, diagnstico,
tratamiento, rehabilitacin o anticoncepcin y que no utili-
za medio farmacolgico, inmunolgico o metablico para
realizar su principal funcin en seres humanos pudiendo,
no obstante, ser auxiliado en sus funciones por tales me-
dios.
Cosmticos
Son productos para uso externo; destinados a la proteccin,
o al embellecimiento de las diferentes partes del cuerpo,
tales como polvos faciales; talcos; cremas de belleza; cre-
ma para las manos y similares; mscaras faciales; lociones
de belleza; soluciones lechosas; cremosas y astringentes;
lociones para las manos; bases de maquillaje y aceites cos-
mticos; colorete; rubor; brillos labiales; lpiz labial; pro-
tectores solares; bronceadores y bronceadores artificiales;
rimels; sombras; delineadores; tinturas capilares; agentes
aclaradores de cabellos; preparados para ondular y para
alisar cabellos; fijadores de cabellos; laca; brillantinas y
similares; lociones capilares; depilatorios y epilatorios;
preparados para uas y otros.
 42 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Crema
Es la forma farmacutica semislida que consiste de una
emulsin, formada por una fase lipoflica y una fase hidro-
flica. Contiene uno o ms principios activos disueltos o
dispersos en una base apropiada y es utilizada, normalmen-
te, para aplicacin externa en la piel o en las membranas
mucosas.
Crioprecipitados del plasma fresco humano
Son constituidos por las fracciones insolubles a fro con-
teniendo principalmente los Factores I (140 a 250 mg ) y
VIII (70 a 120 UI) de la coagulacin humana por unidad
recogida de sangre humana. Otros factores de la coagula-
cin tambin son encontrados en menores concentraciones
junto al crioprecipitado como el Factor de Von Willebrand
4 (40 a 70%) y el Factor XIII (20 a 30%).
Denominacin Comn Brasilea (DCB)
Es la denominacin del frmaco o principio farmacolgi-
camente activo, aprobada en el rgano federal responsable
de la vigilancia sanitaria.
Denominacin Comn Internacional (DCI)
Es la denominacin del frmaco o principio farmacolgi-
camente activo, recomendada en la Organizacin Mundial
de Salud.
Densidad de masa y densidad relativa
Densidad de masa (p) de una sustancia es la razn de su
masa por su volumen a 20 C.
La densidad relativa usualmente adoptada ( d 20) es defini-
da como la relacin entre la masa de una sustancia al aire
a 20 C y la masa de igual volumen de agua en la misma
temperatura.
Desinfectantes
Son productos destinados a destruir, indiscriminada o se-
lectivamente, microorganismos, cuando aplicados en obje-
tos inanimados o ambientes.
Detergentes
Son productos destinados a disolver grasas; a la higiene
de recipientes y vasijas y a aplicaciones de uso domstico.
Donantes de sangre
Son individuos saludables y cuidadosamente selecciona-
dos que, despus de exmenes mdicos, pruebas sangu-
neas laboratoriales y estudio de su historia mdica, estn
ausentes de agentes infecciosos transmisibles pueden ser
aceptados y utilizados para recoleccin de su sangre total o
de sus fracciones celulares o plasmticas para fines profi-
lcticos, curativos o de fraccionamiento.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Grageas
Son comprimidos revestidos con camadas constituidas por
mezclas de sustancias diversas, como resinas, naturales o
sintticas, gomas, gelatinas, materiales inactivos e insolu-
bles, azcares, plastificantes, polioles, ceras , colorantes
autorizados y, a veces, aromatizantes y principios activos.
Abreviatura: grag.
Elixir
Es la preparacin farmacutica, lquida, lmpida, hidroal-
cohlica, de sabor dulce, agradable, presentando tenor al-
cohlico en la banda de 20% a 50%.
Los elixires son preparados por disolucin simple y deben
ser envasados en frascos de color mbar y mantenidos en
lugar fresco y al abrigo de la luz.
Embalaje
Es el envoltorio, recipiente o cualquier forma de envasado,
removible o no, destinada a cubrir, empaquetar, envasar,
proteger o mantener, especficamente o no, los medica-
mentos, las drogas, los insumos farmacuticos y relaciona-
dos, los cosmticos, los desinfectantes y otros productos.
Las condiciones de envasado son descritas en las mono-
grafas individuales utilizando los trminos relacionados a
continuacin.
Embalaje primario
Es el que est en contacto directo con su contenido duran-
te todo el tiempo. Se considera material de embalaje pri-
mario: ampolla, tubo, sobre, estuche, frasquito, frasco de
vidrio o de plstico, frasco-ampolla, cartucho, lata, pote,
bolsa de papel y otros.
No debe haber cualquier interaccin entre el material de
embalaje primario y su contenido capaz de alterar la con-
centracin, la calidad o la pureza del material envasado.
Embalaje secundario
Es el que posibilita total proteccin del material envasado
en las condiciones usuales de transporte, almacenamiento
y distribucin. Se considera embalaje secundario: cajas de
cartn, cartuchos de cartulina, madera o material plstico o
estuche de cartulina y otros.
Emplasto
Es la forma farmacutica semislida para aplicacin exter-
na. Consiste de una base adhesiva que contiene uno o ms
principios activos distribuidos en una camada uniforme en
un soporte apropiado hecho de material sinttico o natural.
Destinada a mantener el principio activo en contacto con la
piel actuando como protector o como agente queratoltico.
Abreviatura: emp.

Emulsin
Es la forma farmacutica lquida de uno o ms principios
activos que consiste de un sistema de dos fases que en-
vuelven por lo menos dos lquidos inmiscibles y en la cual
un lquido est disperso en forma de pequeas gotas (fase
interna o dispersa) a travs de otro lquido (fase externa o
continua). Normalmente es estabilizada por medio de uno
o ms agentes emulsionantes. Abreviatura: emu.
Emulsin aerosol
Es la emulsin embalada bajo presin que contiene un gas
propelente e ingredientes teraputicamente activos que son
liberados despus de la activacin de un sistema apropiado
de vlvulas. Abreviatura: emu. aer.
Emulsin gotas
Es la emulsin destinada a la administracin en forma de
gotas. Abreviatura: emu. go.
Emulsin inyectable
Es la emulsin estril. Abreviatura: emu. iny.
Emulsin para infusin
Es la emulsin estril con agua como la fase continua,
normalmente, isotnica con la sangre y utilizada principal-
mente para la administracin en gran volumen. Abreviatu-
ra: emu. inf.
Emulsin spray
Es la emulsin administrada en forma de lquido finamente
dividido por un chorro de aire o vapor. Abreviatura: emu.
spray
Ensayos biolgicos
Son procedimientos destinados a evaluar la potencia de
principios activos contenidos en las materias primas y pre-
paraciones farmacopeicas, utilizando reactivos biolgicos
tales como microorganismos, animales, fluidos y rganos
aislados de animales.
Espritu
Es la forma farmacutica lquida alcohlica o hidroalcoh-
lica, conteniendo principios aromticos o medicamentosos
y clasificados en simples y compuestos. Abreviatura: esp.
Los espritus son obtenidos por la disolucin de sustancias
aromticas en etanol, generalmente en la proporcin de 5%
(p/v).
Esterilidad
Esterilidad es la ausencia de microorganismos viables.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 43
Extracto
Es la preparacin de consistencia lquida, slida o inter-
media, obtenida a partir de material animal o vegetal. El
material utilizado en la preparacin de extractos puede
sufrir tratamiento preliminar, tales como, inactivacin de
enzimas, trituracin o desengrasado. Abreviatura: ext.
El extracto es preparado por percolacin, maceracin u
otro mtodo adecuado y validado, utilizando como solven-
te alcohol etlico, agua u otro solvente adecuado. Despus
de la extraccin, materiales indeseables pueden ser elimi-
nados.
Extracto fluido
Es la preparacin lquida obtenida de drogas vegetales o
animales por extraccin con liquido apropiado o por diso-
lucin del extracto seco correspondiente, en que, excepto
cuando indicado de manera diferente, una parte del extrac-
4
to, en masa o volumen corresponde a una parte, en masa,
de la droga, seca utilizada en su preparacin. si necesario,
los extractos fluidos pueden ser estandarizados en trmi-
nos de concentracin del solvente; tenor de constituyentes,
o de residuo seco. si necesario pueden ser aadidos con-
servantes inhibidores del crecimiento microbiano. Deben
presentar tenor de principios activos y residuos secos pres-
critos en las respectivas monografas. Abreviatura: ext. flu.
Extracto blando
Es la preparacin de consistencia pastosa obtenida por eva-
poracin parcial del solvente utilizado en su preparacin.
Son utilizados como solvente, nicamente, alcohol etlico,
agua, o mezclas alcohol etlico/agua en proporcin adecua-
da. Presentan, como mnimo, 70% de residuo seco (p/p).
si necesario pueden ser aadidos conservantes inhibidores
del crecimiento microbiano. Abreviatura: ext. blando
Extracto seco
Es la preparacin slida; obtenida por evaporacin del sol-
vente utilizado en su preparacin. Presenta, como mnimo,
95% de residuo seco, calculado como porcentaje de masa.
Pueden ser aadidos materiales inertes adecuados. Abre-
viatura: ext. seco
Los extractos secos estandarizados tienen el tenor de sus
constituyentes ajustado por la adicin de materiales inertes
adecuados o por la adicin de extractos secos obtenidos
con el mismo frmaco utilizado en la preparacin.
Fabricacin
Son todas las operaciones que se hacen necesarias para la
obtencin de los productos para la salud.
Banda de destilacin
Banda de destilacin es el intervalo de temperatura corre-
gida para la presin de 101,3 kPa (760 mm de Hg), dentro
 44 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
de la cual el lquido, o fraccin especfica del lquido, se
destila por completo.
Banda de fusin
Banda de fusin de una sustancia es el intervalo de tempe-
ratura comprendido entre el inicio (en el cual la sustancia
comienza a fluidificarse) y el trmino de la fusin (es evi-
denciado por la desaparicin de la fase slida).
Frmaco
Vea Insumo farmacutico activo. Farmacopeico
La expresin farmacopeico sustituye las expresiones: ofi-
cial y oficinal, utilizadas en ediciones anteriores, equiva-
lindose a esas expresiones para todos los efectos.
4 Factor VII de la coagulacin sangunea humana, liofilizado
Es la fraccin proteica del plasma que contiene el Factor
VII (un derivado glicoproteico de cadena simple), pudien-
do igualmente contener pequeas cantidades de su forma
activada (el derivado de 2 cadenas o Factor VIIa).
Factor VIII de la coagulacin sangunea de origen humana,
liofilizado
Es la fraccin proteica del plasma que contiene una gli-
coprotena llamada Factor VIII de la coagulacin y, en
funcin del mtodo de purificacin, cantidades variables
del Factor de Von Willebrand. Es preparado a partir de una
mezcla de plasma humano para fraccionamiento obtenido
de donantes sanos.
Fibringeno humano, liofilizado
Es la fraccin soluble del plasma humano, obtenida a partir
del Plasma humano para fraccionamiento, que por adicin
de la trombina, se transforma en fibrina. La preparacin
puede contener aditivos (sales, tampones o estabilizantes)
y cuando reconstituida (adicin del diluyente) debe conte-
ner como mnimo, 10 g/L de fibringeno.
Forma farmacutica
Es el estado final de presentacin de los principios activos
farmacuticos despus de una o ms operaciones farma-
cuticas ejecutadas con la adicin o no de excipientes apro-
piados a fin de facilitar su utilizacin y obtener el efecto
teraputico deseado, con caractersticas apropiadas a una
determinada va de administracin.
Gel
Es la forma farmacutica semislida de uno o ms prin-
cipios activos que contiene un agente gelificante para su-
ministrar firmeza a una solucin o dispersin coloidal (un
sistema en el cual partculas de dimensin coloidal tpi-
camente entre 1 nm y 1 m son distribuidas uniforme-
mente a travs del lquido). Un gel puede contener partcu-
las suspendidas.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Gel hidrofbico
Es el gel que consiste, usualmente, de parafina lquida con
polietileno o aceites grasosos con slice coloidal o jabones
de aluminio o zinc.
Gel lipoflico
Es el gel resultante de la preparacin obtenida por la in-
corporacin de agentes gelificantes tragacanto, almidn,
derivados de celulosa, polmeros carboxivinlicos y sili-
catos dobles de magnesio y aluminio al agua, glicerol o
propilenglicol.
Glbulo
Es la forma farmacutica slida que se presenta bajo la
forma de pequeas esferas constituidas de sacarosa o de
mezcla de sacarosa y lactosa. Estn impregnadas por la po-
tencia deseada y con alcohol arriba de 70%.
Goma de mascar
Es la forma farmacutica slida de dosis nica que contie-
ne uno o ms principios activos, que consiste de material
plstico insoluble, dulce y sabroso. Cuando es masticado,
libera el principio activo.
Granulado
Es la forma farmacutica slida que contiene una dosis
nica de uno o ms principios activos, con o sin excipien-
tes. Consiste de agregados slidos y secos de volmenes
uniformes de partculas de polvo resistentes a la manipula-
cin. Abreviatura: granu.
Granulado efervescente
Es el granulado que contiene, en adicin a los ingredientes
activos, sustancias cidas y carbonatos o bicarbonatos, los
cuales liberan dixido de carbono cuando el granulado es
disuelto en agua. Est destinado a ser disuelto o disperso en
agua antes de la administracin. Abreviatura: granu. efer.
Granulado para solucin
Es el granulado destinado a ser disuelto en agua antes de la
administracin. La solucin producida puede ser levemen-
te lechosa debido a los excipientes utilizados en la fabrica-
cin de los granulados. Abreviatura: granu. sol.
Granulado para suspensin
Es el granulado que en contacto con un lquido, rpida-
mente, produce una dispersin homognea (suspensin).
Es destinado a ser disperso antes de la administracin.
Abreviatura: granu. susp.
Granulado revestido
Es el granulado que posee una o ms camadas finas de re-
vestimiento, normalmente polimricas, destinadas a prote-

ger el frmaco del aire o humedad, para frmacos con olor
y sabor desagradables, para mejorar la apariencia de los
granulados o para alguna otra propiedad que no sea la de
alterar la velocidad o extensin de la liberacin del princi-
pio activo. Abreviatura: granu. rev.
Granulado revestido de liberacin prolongada
Es el granulado que posee una o ms camadas finas de
revestimiento, normalmente polimricas, destinadas a
modificar la velocidad o extensin de la liberacin de los
principios activos. Ver definicin de liberacin prolongada.
Abreviatura: gran. rev. lib. pro.
Granulado revestido de liberacin retardada
Es el granulado que posee una o ms camadas finas de
revestimiento, normalmente polimricas, destinadas a
modificar la velocidad o extensin de la liberacin de los
principios activos, presentando una liberacin retardada
del principio activo. Ver definicin general de liberacin
retardada. Abreviatura: granu. rev. lib. ret.
Inmunoglobulina humana contra la hepatitis A
Es una preparacin estril; lquida, o liofilizada que contiene
inmunoglobulinas, principalmente la inmunoglobulina G.
Inmunoglobulina humana contra la hepatitis B
Es una preparacin estril; lquida, o liofilizada que contie-
ne inmunoglobulinas, Inmunoglobulina humana contra la
hepatitis B principalmente la inmunoglobulina G.
Inmunoglobulina humana contra la hepatitis B para uso
intravenoso
Es una preparacin estril; lquida, o liofilizada que contiene
inmunoglobulinas, principalmente la inmunoglobulina G.
Inmunoglobulina humana contra la rabia
Es una preparacin estril; lquida, o liofilizada que con-
tiene inmunoglobulinas, principalmente la inmunoglobu-
linaG.
Inmunoglobulina humana contra la rubeola
Es una preparacin estril; lquida, o liofilizada que contiene
inmunoglobulinas, principalmente la inmunoglobulina G.
Inmunoglobulina humana contra la varicela
Es una preparacin estril; lquida, o liofilizada que contiene
inmunoglobulinas, principalmente la inmunoglobulina G.
Inmunoglobulina humana contra la varicela para uso
intravenoso
Es una preparacin estril; lquida, o liofilizada que contie-
ne inmunoglobulinas, principalmente la inmunoglobulina
G.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 45
Inmunoglobulina humana contra el antgeno D
Es una preparacin estril; lquida, o liofilizada que contiene
inmunoglobulinas, principalmente la inmunoglobulina G.
Inmunoglobulina humana contra el sarampin
Es una preparacin estril; lquida, o liofilizada que contie-
ne inmunoglobulinas, principalmente la inmunoglobulina
G.
Inmunoglobulina humana contra el ttanos
Es una preparacin estril; lquida, o liofilizada que con-
tiene inmunoglobulinas, principalmente la inmunoglobu-
linaG. Es obtenida a partir del plasma conteniendo anti-
cuerpos especficos contra la toxina del Clostridium tetani.
Inmunoglobulina humana normal 4
Es una preparacin estril; lquida, o liofilizada contenien-
do principalmente IgG. Otras protenas, tambin, pueden
estar presentes.
Inmunoglobulina humana normal para administracin
por va intravenosa
Es una preparacin estril; lquida, o liofilizada contenien-
do inmunoglobulinas, principalmente la inmunoglobuli-
naG (IgG). Pueden estar presentes otras protenas. Contie-
ne anticuerpos IgG de individuos normales.
Indicador biolgico
Es una preparacin caracterizada de microorganismo espe-
cfico que posee resistencia definida y estable a un determi-
nado proceso de esterilizacin.
ndice de refraccin
El ndice de refraccin (n) de una sustancia es la relacin
entre la velocidad de la luz en el vaco y su velocidad en el
interior de la sustancia.
Para fines prcticos se mide la refraccin con referencia
al aire y a la sustancia y no con referencia al vaco y a la
sustancia.
Se puede definir el ndice de refraccin como la relacin
entre el seno del ngulo de incidencia y el seno del ngulo
de refraccin, esto es, n = sen i / sen r.
Inyectable
Es la preparacin estril destinada a la administracin pa-
renteral. Se presenta como solucin, suspensin, o emul-
sin. Abreviatura: iny.
 46 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Insecticidas
Son productos para usos externos, destinados a la preven-
cin y al control de los insectos, en habitaciones, recintos y
lugares de uso pblico y sus cercanas.
Insulina
Insulina es una protena que afecta el metabolismo de la
glucosa. Ella es obtenida del pncreas de bovinos y porci-
nos saludables, o ambos, utilizados como alimento por los
humanos.
Insulina humana
Insulina humana es una protena correspondiente a un prin-
cipio activo elaborado en el pncreas humano que afecta el
4 metabolismo de los carbohidratos (particularmente gluco-
sa), lpidos, y protenas.
Insulina humana isfana suspensin
Insulina humana isfana suspensin es una suspensin es-
tril de cristales de insulina humana zinc y sulfato prota-
mina en agua tamponada para la inyeccin, combinados de
una manera tal que la fase slida de la suspensin es com-
puesta por cristales de insulina humana, protamina, y zinc.
Insulina humana isfana suspensin e inyeccin insulina
humana
Insulina humana isfana suspensin e insulina humana in-
yeccin es una suspensin estril tamponada de insulina
humana, completada con sulfato de protamina, en una so-
lucin de insulina humana.
Insulina humana zinc suspensin
Es una suspensin estril de insulina humana en agua tam-
ponada para la inyeccin, modificada por la adicin de una
sal de zinc adecuada de modo que la fase slida de la sus-
pensin es constituida por una mezcla de insulina cristalina
y amorfa en una razn de cerca de 7 partes de cristales y de
3 partes de material amorfo.
Insulina humana zinc suspensin extendida
Es una suspensin estril de insulina humana en agua tam-
ponada para la inyeccin, modificada por la adicin de una
sal de zinc adecuada para que la fase slida de la suspen-
sin sea predominantemente cristalina.
Insulina inyectable
Insulina inyectable es una solucin isotnica y estril de
insulina.
Insulina lispro
Es idntica en estructura a la insulina humana, excepto que
ella tiene de lisina y prolina en las posiciones 28 y 29, res-
pectivamente, de la cadena B, mientras esta secuencia es
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
invertida en insulina humana. Insulina lispro es producida
por sntesis microbiana a travs de un proceso de ADN re-
combinante.
Insumo farmacutico activo
Es una sustancia qumica activa, frmaco, droga, o materia
prima que tenga propiedades farmacolgicas con finalidad
medicamentosa utilizada para diagnstico, alivio, o trata-
miento, empleada para modificar o explorar sistemas fisio-
lgicos o estados patolgicos en beneficio de la persona en
la cual se administra.
Cuando se destina al empleo en medicamentos, deben
atender a las exigencias previstas en las monografas in-
dividuales.
Aisladores
Son equipos que emplean tecnologa usada para doble pro-
puesta, de proteger el producto de la contaminacin del
ambiente y personas durante envase y cierre y de proteger
personas de productos txicos o nocivos que son produci-
dos.
Liberacin convencional
Es el tipo de liberacin de formas farmacuticas que no son
modificadas intencionalmente por un diseo de formula-
cin especial y/o mtodo de fabricacin.
Liberacin paramtrica
Es definida como la liberacin de carga o lotes de produc-
tos sometidos a la esterilizacin terminal, por medio del
cumplimiento de parmetros crticos del proceso de este-
rilizacin, sin la necesidad de realizacin de la prueba de
esterilidad.
Liberacin prolongada
Es el tipo de liberacin modificada de formas farmacu-
ticas que posibilita por lo menos una reduccin en la fre-
cuencia de dosis cuando se compara con el medicamento
presentado en la forma de liberacin convencional. Es ob-
tenida por medio de un diseo de formulacin especial y/o
mtodo de fabricacin.
Liberacin retardada
Es el tipo de liberacin modificada de formas farmacuticas
que presenta una liberacin retardada del principio activo.
La liberacin retardada es obtenida por medio de un dise-
o de formulacin especial y/o mtodo de fabricacin. Las
preparaciones gastrorresistentes son consideradas formas de
liberacin retardada, pues son destinadas a resistir al fluido
gstrico y liberar el principio activo en el fluido intestinal.

Locin
Es la preparacin lquida acuosa o hidroalcohlica, con vis-
cosidad variable, para aplicacin en la piel, incluyendo el
cuero cabelludo. Puede ser solucin, emulsin o supensin
conteniendo uno o ms principios activos o adyuvantes.
Lote o partida
Es la cantidad de un medicamento, u otro producto, que
se produce en un ciclo de fabricacin y cuya caracterstica
esencial es la homogeneidad.
Material de embalaje
Se comprende por material de embalaje el recipiente; en-
voltorio; o cualquier otra forma de proteccin, removible o
no, usado para envasar; proteger; mantener; cubrir; o em-
paquetar, especficamente, o no, materias primas; reactivos
y medicamentos. Abreviatura: mat. emb.
Materias primas
Sustancias activas o inactivas que se emplean en la fabrica-
cin de medicamentos y de otros productos, tanto las que
permanecen inalteradas como las posibles de sufrir modi-
ficaciones.
Media fill (prueba de llenado de medios)
Es una prueba para simulacin de las operaciones aspticas
en que el producto es sustituido por un medio de cultivo y
sirve para asegurar que los procesos utilizados sean capa-
ces de producir productos estriles.
Medicamento
Es el producto farmacutico, tcnicamente, obtenido, o
elaborado, que contiene uno o ms frmacos y otras sustan-
cias, con finalidad profilctica; curativa; paliativa; o para
fines de diagnstico.
Medicamento de referencia
Es el producto innovador registrado en el rgano federal
Brasileo, responsable de la vigilancia sanitaria y comer-
cializado en el pas, cuya eficacia, seguridad y calidad
fueron comprobadas, cientficamente, en el rgano federal
competente, por ocasin del registro.
Medicamento genrico
Es el medicamento similar a un producto de referencia o
innovador, que pretende ser con ese intercambiable, gene-
ralmente producido despus de la expiracin o renuncia de
la proteccin de la patente o de otros derechos de exclusivi-
dad, comprobada su eficacia, seguridad y calidad, y desig-
nado por la DCB o, en su ausencia, por la DCI.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 47
Medicamento intercambiable
Es el medicamento equivalente teraputico de un medica-
mento de referencia, comprobados, esencialmente, los mis-
mos efectos de eficacia y seguridad.
Medicamento magistral
Es todo medicamento cuya prescripcin pormenoriza la
composicin, la forma farmacutica y la posologa. Es
preparado en la farmacia, por un profesional farmacutico
habilitado o bajo su supervisin directa.
Medicamento presurizado
Es el medicamento envasado en frascos mantenidos sobre
presin, conteniendo un gas propelente e ingredientes, te-
raputicamente activo que es liberado despus de la activa-
cin de sistema apropiado de vlvulas. 4
Medicamento similar
Es aquel que contiene el mismo o los mismos principios
activos, presenta la misma concentracin, forma farma-
cutica, va de administracin, posologa e indicacin te-
raputica, y que es equivalente al medicamento registrado
en el rgano federal, responsable de la vigilancia sanitaria,
pudiendo diferir solamente en caractersticas relativas al
tamao y forma del producto, plazo de validez, embalaje,
etiquetado, excipientes y vehculo, debiendo siempre ser
identificado por nombre comercial o marca.
Media vida biolgica
Es el tiempo necesario para que un organismo retire, por
eliminacin biolgica, mitad de la cantidad de una sustan-
cia administrada.
Media vida efectiva
Es el tiempo necesario para que un radionuclido en un
organismo disminuya su actividad por la mitad como un
resultado combinado de la eliminacin biolgica y de la
decadencia radioactiva. La media vida efectiva es impor-
tante para el clculo de la dosis ptima del radiofrmaco a
ser administrada y en el monitoreo de la cantidad de expo-
sicin a la radiacin.
Mtodos inmunoqumicos
Son mtodos que se basan en una conexin selectiva, re-
versible y no covalente entre antgenos y anticuerpos.
Mezclas de plasma humano excedente tratado por
inactivacin viral
Preparacin congelada o liofilizada, estril, apirognica,
obtenida a partir de plasma humano excedente proveniente
de donantes del mismo grupo sanguneo ABO y Rh(Du).
La preparacin es descongelada o reconstituida antes de su
uso para obtener una solucin inyectable. El plasma huma-
 48 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
no utilizado debe satisfacer a las exigencias de la monogra-
fa Plasma humano para fraccionamiento.
Nivel de garanta de esterilidad
Es el grado de garanta que el proceso en cuestin esteriliza
una poblacin de tems, siendo expresado como la probabi-
lidad de un tem no estril en aquella poblacin.
Nombre qumico
Es el nombre de la sustancia farmacopeica, de acuerdo con
la nomenclatura preconizada por la Unin Internacional de
Qumica Pura y Aplicada (IUPAC).
Nmero del lote
4 Designacin impresa en la etiqueta de un medicamento y
de otros productos que permita identificar el lote o la par-
tida a la que pertenecen y, en caso de necesidad, localizar
y rever todas las operaciones de fabricacin e inspeccin
practicadas durante la produccin.
Nutrimentos
Son sustancias constituyentes de los alimentos de valor nu-
tricional, incluyendo protenas, grasas, hidratos de carbo-
no, agua, elementos minerales y vitaminas.
Osmolalidad
Es una forma prctica que da una medida total de la contri-
bucin de varios solutos en una solucin por la presin os-
mtica de la solucin. La unidad de osmolalidad es osmol
por kilogramo (osmol/kg), pero el submltiplo miliosmol
por kilogramo (mosmol/kg) es normalmente usado.
vulo
Es la forma farmacutica slida, de dosis nica, que con-
tiene uno o ms principios activos dispersos o disueltos en
una base adecuada que tiene varios formatos, usualmente,
ovoide. Se funden en la temperatura del cuerpo.
Estndares de referencia de la Farmacopea Brasilea
De acuerdo con definicin de la OMS, estndares de refe-
rencia farmacopeicos (PRef) son productos de uniformidad
reconocida, destinados al uso en ensayos donde una o ms
de sus propiedades ser(n) comparada(s) con la(s) de la
sustancia en examen. Poseen un grado de pureza adecuado
al uso al cual se destinan.
El PRef es establecido y distribuido por autoridades far-
macopeicas, cuyo valor atribuido a una o ms de sus pro-
piedades es aceptado sin necesitar comparacin con otro
estndar, destinado al uso en ensayos especficos descri-
tos en las monografas farmacopeicas. Incluyen sustancias
qumicas de referencia, productos biolgicos, extractos y
polvos vegetales, radiofrmacos, entre otros. La expresin
relacionada ms usada es: Sustancia Qumica de Referen-
cia Farmacopeica.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Pasta
Es la pomada que contiene gran cantidad de slidos en dis-
persin (por lo menos 25%). Debern atender las especifi-
caciones establecidas para pomadas.
Pastilla
Es la forma farmacutica slida que contiene uno o ms
principios activos, usualmente, en una base dulce y con sa-
bor. Es utilizada para disolucin, o desintegracin lenta en
la boca. Puede ser preparada por modelado, o por compre-
sin. Abreviatura: pas.
Pastilla dura
Pastilla rgida para ser disuelta lentamente. Abreviatura:
pas. dura
Pastilla gomosa
Pastilla flexible y suave de mezclas que contiene polmeros
sintticos o naturales. Abreviatura: pas. go.
Perfume
Es el producto de composicin aromtica obtenida a base
de sustancias naturales o sintticas, que, en concentracio-
nes y vehculos apropiados, tengan como principal finali-
dad la aromatizacin de personas o ambientes, incluidos los
extractos, las aguas perfumadas, los perfumes cremosos,
preparados para bao y los aromatizantes de ambientes,
presentados en forma lquida, gelatinosa, pastosa o slida.
Plasma fresco congelado
Es la parte lquida remanente de una unidad de sangre to-
tal obtenida despus de centrifugacin y separacin de sus
fracciones celulares que deber ser totalmente congelado
hasta 4 horas despus de la recoleccin de la sangre to-
tal que le dio origen, asegurando el mantenimiento de la
integridad y concentraciones de los factores lbiles de la
coagulacin.
Plasma humano para fraccionamiento
Es la parte lquida remanente de la sangre total despus de
separacin de las fracciones celulares sanguneas mediante
el uso de sistemas cerrados apropiados de recoleccin o
centrifugacin, que contienen los factores lbiles de la coa-
gulacin. Contiene solucin anticoagulante, conservadora
y preservadora, siendo almacenado a una temperatura de
30 C o inferior. Se destina a la preparacin de hemoderi-
vados de acuerdo con las Buenas Prcticas de Fabricacin
de Medicamentos.
Polvo
Es la forma farmacutica slida conteniendo uno o ms
principios activos secos y con tamao de partcula reduci-
do, con o sin excipientes.

Polvo aerosol
Es el polvo embalado bajo presin conteniendo un gas pro-
pelente e ingredientes teraputicamente activos que son li-
berados despus de la activacin de un sistema apropiado
de vlvulas. Abreviatura: polvo aer.
Polvo efervescente
Es el polvo conteniendo, en adicin a los ingredientes ac-
tivos, sustancias cidas y carbonatos o bicarbonatos, los
cuales liberan dixido de carbono cuando el polvo es di-
suelto en agua. Es destinado a ser disuelto o disperso en
agua antes de la administracin. Abreviatura: polvo efev.
Polvo liofilizado para solucin inyectable
Es el polvo estril destinado a la adicin subsiguiente de
lquido para formar una solucin. Preparado por liofiliza-
cin, un proceso que envuelve la eliminacin de agua de
los productos por el congelamiento a presiones extrema-
mente bajas. Abreviatura: polvo liof. sol. iny.
Polvo liofilizado para suspensin inyectable
Es el polvo estril destinado a la adicin subsiguiente de
lquido para formar una suspensin. Preparado por liofili-
zacin, un proceso que envuelve la eliminacin de agua de
los productos por el congelamiento a presiones extrema-
mente bajas. Abreviatura: polvo liof. sus. iny.
Polvo liofilizado para suspensin inyectable de liberacin
prolongada
Es el polvo estril destinado a la adicin subsiguiente de
lquido para formar una suspensin. Preparado por liofili-
zacin, un proceso que envuelve la eliminacin de agua de
los productos por el congelamiento a presiones extrema-
mente bajas. Vea definicin general de liberacin prolon-
gada. Abreviatura: polvo. liof. sus. iny. lib. pro.
Polvo para colutorio
Es el polvo que debe ser disuelto en agua antes del uso para
el preparo del colutorio, que es un lquido destinado al en-
juague bucal para actuar sobre las encas y las mucosas de
la boca y de la garganta. No debe ser tragado. Abreviatura:
polvo colu.
Polvo para solucin
Es el polvo destinado a ser reconstituido para formar una
solucin. Abreviatura: polvo sol.
Polvo para solucin inyectable
Es el polvo estril destinado a la adicin subsiguiente de
lquido para formar una solucin. Abreviatura: polvo sol.
iny.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 49
Polvo para solucin para infusin
Es el polvo estril destinado a la reconstitucin para for-
mar una solucin para uso por infusin. Esa solucin es,
normalmente, isotnica con la sangre y utilizada principal-
mente para administracin en gran volumen. Abreviatura:
polvo sol. inf.
Polvo para suspensin
Es el polvo destinado a ser reconstituido para formar una
suspensin. Abreviatura: polvo sus.
Polvo para suspensin inyectable
Es el polvo estril destinado a la adicin subsiguiente de
lquido para formar una suspensin. Abreviatura: polvo
sus. iny.
Polvo para suspensin inyectable de liberacin prolongada
4
Es el polvo estril destinado a la adicin subsiguiente de
lquido para formar una suspensin. Vea definicin de li-
beracin prolongada. Abreviatura: polvo sus. iny. lib.pro.
Pomada
Es la forma farmacutica semislida, para aplicacin en
la piel o en membranas mucosas, que consiste de la solu-
cin o dispersin de uno o ms principios activos en bajas
proporciones en una base adecuada usualmente no acuosa.
Abreviatura: pom.
Plazo de validez
Es el tiempo durante el cual el producto podr ser usado,
caracterizado como perodo de vida til y fundamentada
en los estudios de estabilidad especficos. Abreviatura: val.
El plazo de validez deber ser indicado en los embalajes
primarios y secundarios. Cuando indicar mes y ao, se en-
tiende como vencimiento del plazo el ltimo da de ese
mes. Las condiciones especificadas, por el fabricante, de
almacenamiento y transporte deben ser mantenidas.
Preparacin tpica semislida
Es la preparacin prevista para aplicacin en la piel o en
ciertas mucosas para accin local o penetracin percut-
nea de medicamentos, o adems por su accin emoliente
o protectora.
Proceso asptico
Es aquel proyectado para prevenir la contaminacin de los
componentes estriles por microorganismos viables o ade-
ms en la fase intermedia de la produccin.
 50 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Producto de higiene
Es el producto para uso externo; antisptico o no; desti-
nado al aseo o a la desinfeccin corporal, comprendiendo
el jabn, shampoo, dentfrico, enjuague bucal, antitrans-
pirante, desodorante, producto para barbear y despus de
barbear, estptico y otros. Abreviatura: pro. hig.
Producto diettico
Es el producto tcnicamente elaborado para atender a las
necesidades dietticas de personas en condiciones fisiol-
gicas especiales. Abreviatura: pro. diet.
Producto semielaborado
Es toda sustancia o mezcla de sustancias todava bajo el
4 proceso de fabricacin.
Pureza
Grado en que un frmaco, materia prima contiene otros
materiales extraos.
Raticida
Es la preparacin destinada al combate de ratas, ratones
y otros roedores, en domicilios, embarcaciones, recintos
y lugares de uso pblico, conteniendo sustancias activas,
aisladas o en asociacin, que no ofrezcan riesgo a la vida
o a la salud del hombre y de los animales tiles de sangre
caliente, cuando aplicados en conformidad con las reco-
mendaciones contenidas en su presentacin.
Reacciones qumicas de identificacin
Son reacciones usadas en el auxilio de la caracterizacin
de una sustancia. A pesar de que especficas, slo sern su-
ficientes para establecer o confirmar la identidad de la sus-
tancia cuando consideradas en conjunto con otras pruebas
y especificaciones constantes en la monografa.
A no ser que la monografa especifique diferentemente,
las reacciones qumicas son hechas en tubos de ensayo de
aproximadamente 15 mm de dimetro interno. Se utilizan
5 ml del lquido o solucin a examinar, adicionando tres
gotas de reactivo o de cada reactivo. El examen del conte-
nido del tubo de ensayo debe ser hecho sobre toda la ca-
mada lquida, observando de cima para bajo, en el sentido
del eje longitudinal de los tubos, despus de cinco minutos
de reposo.
Usualmente, es presentado en la monografa el orden de
preferencia de las pruebas de identificacin. Cuando no
consta el orden, todas las pruebas de identificacin deben
ser realizadas.
Reactivos
Son sustancias utilizadas en pruebas, reacciones, ensayos y
dosificaciones farmacopeicas, como tales o en soluciones.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Recipiente bien cerrado
Es aquel que protege su contenido de prdidas y contami-
nacin por slidos extraos, en las condiciones usuales de
manipulacin, almacenamiento, distribucin y transporte.
Recipiente hermtico
Es aquel impermeable al aire, o cualquier otro gas, en las
condiciones usuales de manipulacin, almacenamiento,
distribucin y transporte.
Recipiente opaco
Es aquel que impide la visualizacin del contenido, cu-
briendo todos los colores. Constituye barrera de proteccin
a la luminosidad.
Recipiente para dosis nica
Es el recipiente hermtico que contiene determinada canti-
dad del medicamento destinada a ser administrada de una
sola vez y que despus de abierto, no podr ser cerrado con
garanta de esterilidad.
Recipiente para dosis mltiples
Es el recipiente hermtico que posibilita la retirada de por-
ciones sucesivas de su contenido, sin modificar la concen-
tracin, la pureza y la esterilidad de la porcin remanente.
Recipiente perfectamente cerrado
Es aquel que protege su contenido de prdidas y de conta-
minacin por slidos, lquidos y vapores extraos, eflores-
cencia, delicuescencia, o evaporacin en las condiciones
usuales de manipulacin, almacenamiento, distribucin, y
transporte.
Recipiente translcido
Es aquel que posibilita la visualizacin parcial del conteni-
do, cubriendo todos los colores excepto el mbar.
Recipiente transparente
Es aquel que posibilita la visualizacin total del contenido,
cubriendo todos los colores excepto el mbar.
Registro
Es la inscripcin, en libro propio despus del despacho
asignado del dirigente del rgano del Ministerio de Salud,
bajo nmero de orden, de los productos, con la indicacin
del nombre, fabricante, de la procedencia, finalidad y de
los otros elementos que los caractericen.
Resistencia hidroltica o alcalinidad
Es el ensayo que cuantifica la intensidad de la reaccin
qumica entre el agua y los elementos alcalinos existentes

en el vidrio, especialmente sodio y potasio. Esa resistencia
determina la clasificacin del tipo de vidrio.
Rtulo
Es la identificacin impresa o litografiada, as como los
textos pintados o grabados a fuego, a presin o autoadhe-
siva, aplicados directamente sobre recipientes; envoltorios;
cartuchos; o cualquier otro protector de embalaje, externo
o interno, no pudiendo ser retirado o alterado durante el uso
del producto y durante su transporte, o su almacenamiento.
La confeccin de los rtulos deber obedecer a las normas
vigentes del rgano federal de Vigilancia Sanitaria.
Sala limpia
Sala en la cual la concentracin de partculas en suspensin
en el aire es controlada. Es construida y utilizada de mane-
ra para minimizar la introduccin, generacin y retencin
de partculas dentro de la sala, en la cual los otros parme-
tros relevantes como, por ejemplo, temperatura, humedad
y presin, son controlados conforme necesario.
Saneante sanitario
Es la sustancia o preparacin destinada a la higienizacin;
desinfeccin o desinfeccin domiciliar; de ambientes co-
lectivos, particulares o pblicos, en lugares de uso comn
y en el tratamiento del agua.
Sangre humana
Es un tejido vivo, circulante, conjuntivo, de naturaleza ce-
lular, plasmtica y o proteica, que se encuentra contenido
dentro del aparato cardiovascular, desempeando mltiples
y complejas funciones que aseguren al organismo humano
el mantenimiento de la vida.
Sangre humana de transfusin
Es la sangre total humano in vitro proveniente de donantes
saludables recolectado en sistemas de envase para recolec-
cin, almacenamiento y procesamiento del sangre humana
conteniendo solucin anticoagulante conservadora y pre-
servadora.
Sistema cerrado
Sistema de administracin de soluciones parenterales que,
durante toda la preparacin y administracin, no permite el
contacto de la solucin con el medio ambiente.
Sistemas de envase para recoleccin, almacenamiento y
procesamiento de la sangre humana o sistemas cerrados de
recoleccin de sangre humana
Son recipientes conocidos o denominados por bolsas pls-
ticas conteniendo o no una solucin anticoagulante, con-
servadora y preservadora, destinados a recoleccin, alma-
cenamiento, fraccionamiento y administracin de la sangre
humana o de sus derivados. Son atxicos, estriles, apiro-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 51
gnicos y descartables, pudiendo ser fabricados a partir de
uno o varios polmeros, y conforme los casos, de ciertos
aditivos y son validados por sus respectivos mtodos ana-
lticos.
Solucin forma farmacutica
Es la forma farmacutica lquida; lmpida y homognea,
que contiene uno o ms principios activos disueltos en un
solvente adecuado o en una mezcla de solventes miscibles.
Abreviatura: sol.
Solucin colorimtrica
Es la solucin utilizada en la preparacin de estndares
colorimtricos para fines de comparacin. Son designadas
por SC.
Solucin de albmina humana 4
Solucin de albmina humana es una solucin proteica, es-
tril y apirognica obtenida del plasma humano que est de
acuerdo con las exigencias de la monografa Plasma Hu-
mano para Fraccionamiento.
Solucin molar
Es la solucin que contiene un molar del soluto por kilo-
gramo de solvente.
Solucin molar
Es la solucin que contiene una molcula-gramo del soluto
en 1000 ml de la solucin. Los mltiplos y submltiplos de
la solucin molar, tambin, son designados por nmeros
enteros o fracciones decimales como: 2 M; M; 0,5 M; 0,1
M; etc.
Solucin normal
Es la solucin que contiene un equivalente gramo del so-
luto en 1000 ml de la solucin. Los mltiplos y submlti-
plos de la solucin normal, tambin, son designados por
nmeros enteros o fracciones decimales como 2 N, N; 0,5
N, 0,1 N, etc.
Solucin volumtrica
Es la solucin de reactivos, de concentracin conocida,
destinada al uso en determinaciones cuantitativas. En la
FB 5 las concentraciones de las soluciones volumtricas
estn expresadas en molaridad. Son designadas por SV.
Soluciones anticoagulantes conservadoras y
preservadoras de la sangre humana
Son soluciones destinadas a la recoleccin de sangre hu-
mana objetivando no slo tornarla incoagulable, pero
tambin asegurar el mantenimiento y la integridad morfo-
funcionales y proteicas de sus constituyentes celulares y
plasmticos.
 52 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Soluciones indicadoras
Son soluciones de indicadores en solventes especficos y
concentraciones definidas. Son designadas por SI.
Soluciones reactivas
Son soluciones de reactivos en solventes especficos y con-
centraciones definidas. Son designadas por SR.
Sueros hiperinmunes para uso humano
Los sueros hiperinmunes son preparaciones conteniendo
inmunoglobulinas purificadas, de origen animal, que neu-
tralizan especficamente toxinas bacterianas, bacterias, vi-
rus o componentes txicos del veneno de una o ms espe-
cies de animales ponzoosos.
4 Sustancia adyuvante
Es la sustancia con finalidad especfica adicionada a las
preparaciones inyectables. Esa sustancia debe ser selec-
cionada teniendo en vista el aumento de la estabilidad del
producto; no interferencia en la eficacia teraputica ni en la
determinacin de dosis del principio activo; tampoco cau-
sar toxicidad en la cantidad administrada al paciente. La
sustancia adyuvante puede ser solubilizante; antioxidante;
agente quelante; tampn; agente antibacteriano; agente an-
tifngico; agente antiespumante y otros, cuando especifi-
cado en la monografa individual. Abreviatura: subs. ady.
La presencia de sustancia adyuvante debe ser, claramente,
indicada en los rtulos de los embalajes primarios y secun-
darios, en que el producto es entregado para el consumo.
Si no hubiese contraindicacin expresa, el aire de los reci-
pientes puede ser sustituido por dixido de carbono o nitr-
geno. No est permitida la adicin de sustancia colorante.
Estn relacionados a continuacin los lmites mximos
para algunos adyuvantes, a menos que la monografa espe-
cifique de otra forma:
a) para agentes que contienen mercurio o compuestos ten-
soactivos catinicos 0,01%;
b) para agentes del tipo clorobutanol, cresol y fenol 0,5%;
c) para dixido de azufre, o cantidad equivalente de sulfi-
to, bisulfito o metabisulfito de potasio o sodio 0,2%.
Sustancia qumica caracterizada
SQR utilizada en la inexistencia de una SQR Farmacopei-
ca. Esa SQR debe ser caracterizada por medio de ensayos
adecuados y los valores obtenidos deben ser debidamente
documentados.
Sustancia Qumica de Referencia de la Farmacopea
Brasilea (SQR.FB)
Est establecida y dispuesta por la Direccin de la Far-
macopea Brasilea, siguiendo los principios de la OMS,
y oficializada por la Anvisa, siendo su uso obligatorio en
todo territorio nacional. En la ausencia de una SQR. FB es
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
permitido el uso de SQR establecida por otras farmacopeas
reconocidas, conforme legislacin vigente.
Los estndares para Espectrofotometra de Absorcin At-
mica son identificados por medio de la denominacin del
metal, seguida de la sigla SRA (Solucin Reactivo para
Absorcin Atmica).
Sustancia qumica de trabajo
Es establecida por comparacin con una SQR Farmacopei-
ca, por medio de ensayos farmacopeicos, o debidamente
validados, y registrados por el propio laboratorio que ir
a utilizarla. En esa situacin, debern ser mantenidos los
registros analticos y realizados controles peridicos, em-
plendose una SQR Farmacopeica.
Sustancias insaponificables
Sustancias insaponificables son aquellas remanentes a la
reaccin de saponificacin, no voltiles a 100 105 C y
que fueron acarreadas en el proceso de extraccin de la
sustancia a ser ensayada.
Supositorio
Es la forma farmacutica slida de varios tamaos y for-
matos adaptados para introduccin en el orificio rectal, va-
ginal o uretral del cuerpo humano, conteniendo uno o ms
principios activos disueltos en una base adecuada. Ellos,
usualmente, se funden, derriten o disuelven en la tempera-
tura del cuerpo Abreviatura: supo.
Suspensin
Es la forma farmacutica lquida que contiene partculas
slidas dispersas en un vehculo lquido, en el cual las par-
tculas no son solubles. Abreviatura: sus.
Suspensin aerosol
Es la suspensin embalada bajo presin conteniendo un
gas propelente e ingredientes teraputicamente activos que
son liberados despus de la activacin de un sistema apro-
piado de vlvulas. Abreviatura: sus. aer.
Suspensin de liberacin prolongada
Es la forma farmacutica lquida que contiene partculas
slidas dispersas en un vehculo lquido, en el cual las par-
tculas no son solubles. Vea definicin de liberacin pro-
longada. Abreviatura: sus. lib. pro.
Suspensin de liberacin retardada
Es la forma farmacutica lquida que contiene partculas
slidas dispersas en un vehculo lquido, en el cual las par-
tculas no son solubles. Vea definicin de liberacin retar-
dada. Abreviatura: sus. lib. ret.

Suspensin gotas
Es la suspensin destinada a la administracin en la forma
de gotas. Abreviatura: sus. go.
Suspensin inyectable
Es la suspensin estril. Abreviatura: sus. iny.
Suspensin inyectable de liberacin prolongada
Es la suspensin estril. Vea definicin de liberacin pro-
longada. Abreviatura: sus. iny. lib. pro.
Suspensin spray
Es la suspensin administrada en forma de lquido fina-
mente dividido por un chorro de aire o vapor. Abreviatura:
sus. spray.
Tableta
Es la forma farmacutica slida preparada a partir de una
masa hecha con solucin hidroalcohlica, el principio acti-
vo y lactosa, o de la propia trituracin humedecida en solu-
cin hidroalcohlica. Es moldeada en tableteros y es frgil
y quebradiza.
Tampn
Es la preparacin a base de sales que son capaces de sopor-
tar variaciones en la actividad de iones hidrgeno.
Temperatura o punto de congelamiento
Temperatura o punto de congelamiento de lquido o de
slido fundido es la ms alta temperatura en la cual l se
solidifica.
Para sustancias puras que se funden sin descomposicin,
el punto de congelamiento del lquido es igual a su punto
de fusin.
Temperatura o punto de ebullicin
Temperatura o punto de ebullicin de un lquido es la tem-
peratura corregida en la cual el lquido hierve bajo presin
de vapor de 101,3 kPa (760 mm de Hg).
Temperatura o punto de fusin
Temperatura o punto de fusin de una sustancia es la tempe-
ratura en la cual esta se encuentra completamente fundida.
Tintura
Es la preparacin alcohlica o hidroalcohlica resultante
de la extraccin de drogas vegetales o animales o de la
diluicin de los respectivos extractos. Est clasificada en
simple y compuesta, conforme sea preparada con una o
ms materias primas. Abreviatura: tin.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 53
A menos que est indicado de manera diferente en la mo-
nografa individual, 10 ml de tintura simple corresponden
a 1 g de droga seca.
Vacunas
Productos biolgicos que contienen una o ms sustancias
antignicas que, cuando inoculadas, son capaces de inducir
inmunidad especfica activa y proteger contra enfermedad
causada por el agente infeccioso que origin el antgeno.
Valor D (tiempo de reduccin decimal)
Es el tiempo, en minutos, necesario para reducir la pobla-
cin microbiana en 90% o un ciclo logartmico.
Valor F
Es una medida de la eficacia esterilizante, esto es, el nme-
ro de minutos de esterilizacin trmica por vapor a la deter-
4
minada temperatura suministrada a un recipiente o unidad
de producto, en un dado valor Z.
Valor Z
Es la elevacin de temperatura, en grados, necesaria para
reducir el Valor D en 90% o producir la reduccin de un
ciclo logartmico en la curva de resistencia trmica.
Vas de administracin
Es el local del organismo por medio del cual el medica-
mento es administrado.
Viscosidad
Es la expresin de la resistencia de lquidos al drenaje,
o sea, al desplazamiento de parte de sus molculas sobre
molculas vecinas. La viscosidad de los lquidos viene del
rozamiento interno, eso es, de las fuerzas de cohesin entre
molculas relativamente juntas. Con el aumento de la tem-
peratura, aumenta la energa cintica media de las molcu-
las, disminuye (en promedio) el intervalo de tiempo que las
molculas pasan unas junto de las otras, menos efectivas se
tornan las fuerzas intermoleculares y menor la viscosidad.
La unidad dinmica, Sistema CGS, de viscosidad es el poi-
se. El Sistema CGS de unidades es un sistema de unidades
de medidas fsicas, o sistema dimensional, de tipologa
LMT (longitud, masa, tiempo), cuyas unidades base son
el centmetro para la longitud, el gramo para la masa y el
segundo para el tiempo.
Jarabe
Es la forma farmacutica acuosa caracterizada por la alta
viscosidad, que presenta no menos que 45% (p/p) de saca-
rosa u otros azcares en su composicin. Los jarabes gene-
ralmente contienen agentes saborizantes. Abreviatura: jbe.
Cuando no se destina al consumo inmediato, debe ser adi-
cionado conservantes antimicrobianos autorizados.
 54 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
INFORMACIONES GENERALES
Agua
El agua mencionada en las pruebas, reacciones y ensayos
es agua purificada. Para preparaciones inyectables, se debe
utilizar agua para inyectables, descrita en monografa in-
dividual. Cuando est prescrito el uso de agua exenta de
dixido de carbono, utilizar agua purificada hervida du-
rante, como mnimo, cinco minutos y protegida del aire
atmosfrico durante el enfriamiento y almacenamiento.
Aparatos volumtricos
Los aparatos volumtricos son empleados en las medidas
de volumen en las pruebas, en los ensayos y en las dosifi-
caciones farmacopeicas, y deben estar calibrados a la tem-
4 peratura de 25 C. Caso el aparato volumtrico no tenga
sido calibrado a 25 C, las medidas de volumen deben ser
realizadas en la temperatura en el indicada.
En las mediciones de volumen, el nivel inferior del menis-
co del lquido contenido en los aparatos volumtricos debe
tangenciar la parte superior de la lnea de referencia, con la
lnea de visin en el mismo plano. En los casos de lquidos
fuertemente coloridos, u opacos se utiliza como referencia el
borde superior del menisco, en el plano horizontal de visin.
Los aparatos volumtricos para transferencia de lquidos
(pipetas; o buretas), en virtud de haber sido medidos con
agua, slo podrn suministrar exactamente el volumen in-
dicado cuando los lquidos a ser medidos tengan, aproxi-
madamente, la viscosidad, la tensin superficial y la den-
sidad del agua.
Conservacin
Las sustancias farmacopeicas deben ser conservadas bajo
condiciones tales que eviten su contaminacin o deterioro.
Las condiciones de conservacin de sustancias farmaco-
peicas figuran en las respectivas monografas.
Proteger de la luz significa que la sustancia debe ser con-
servada en recipiente opaco o capaz de impedir la accin
de la luz.
Proteger del polvo significa que la sustancia debe ser man-
tenida en frasco encorchado y usar capa protectora.
En la monografa pueden estar definidas las condiciones
de temperatura en que la sustancia debe ser conservada,
utilizndose trminos descritos a continuacin.
En congelador En temperatura entre -20 C y 0 C.
En refrigerador En temperatura entre 2 C y 8 C.
Local fresco Ambiente cuya temperatura permanece en-
tre 8 C y 15 C.
Local fro Ambiente cuya temperatura no excede 8 C.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Temperatura ambiente Temperatura, normalmente, en-
contrada en un ambiente de trabajo, entre 15 C y 30 C.
Local caliente Ambiente cuya temperatura permanece
entre 30 C y 40 C.
Calor excesivo Indica temperaturas arriba de 40 C.
Cuando sea necesario conservar un frmaco en local fres-
co, se puede conservar en refrigerador, a menos que indica-
do de manera diferente en la monografa individual.
Cuando en la monografa no estn especificadas condicio-
nes de conservacin, ellas incluyen proteccin contra la
humedad, congelamiento y calor excesivo.
Descripcin de sustancia
Las informaciones referentes a la descripcin de una sustancia
son genricas y se destinan a la evaluacin preliminar de su
integridad. La descripcin, por s, no es indicativa de la pure-
za, debiendo ser asociada a otras pruebas farmacopeicas para
asegurar que la sustancia est de acuerdo con la monografa.
Desecacin hasta peso constante
Esa expresin significa que el secado debe proseguir hasta
que dos pesadas consecutivas no difieran en ms de 0,5
mg por gramo de la sustancia en examen, siendo que la
segunda pesada debe ser efectuada despus de una hora de
secado adicional en las condiciones especificadas.
Desecador
Se comprende por desecador un recipiente que pueda ser
perfectamente cerrado, de formato y dimensiones adecua-
das que posibilitan mantener atmsfera de bajo tenor de
humedad por medio de agentes desecantes en el introdu-
cidos, tales como: gel de slice; cloruro de calcio anhidro;
pentxido de fsforo; cido sulfrico; entre otros.
Desecador a la presin reducida es lo que posibilita mante-
ner atmsfera de baja humedad a la presin reducida de no
ms que 6,7 kPa (aproximadamente 50 mm de mercurio),
o a la presin indicada en la monografa.
Determinacin de dosis y determinacin de la potencia
Cuando el resultado de un ensayo o de una determinacin
de dosis est expresado en relacin a la sustancia seca; en
relacin a la sustancia; o cualquier otra base especfica, la
determinacin de la prdida por secado, del tenor de agua o
de otra propiedad designada es efectuada segn el mtodo
descrito en el respectivo ensayo en la monografa de la sus-
tancia en causa, o segn lo descrito en la etiqueta.
Ensayos de identificacin
Los ensayos de identificacin posibilitan verificar, con un
nivel de certeza aceptable, que la identidad del material
bajo examen est de acuerdo con el rtulo de su embalaje.
A pesar de que especficos, ellos no son, necesariamente,

suficientes para establecer prueba absoluta de identidad.
No obstante, el no cumplimiento de los requerimientos de
un ensayo de identificacin puede significar error de eti-
quetado del material. Otras pruebas y especificaciones en
la monografa contribuyen para la confirmacin de la iden-
tidad del artculo bajo examen.
Algunos ensayos de identificacin deben ser considerados
conclusivos como; infrarrojo; espectrofotometra con ab-
sorcin especfica y cromatografa a lquido de alta eficien-
cia acoplada a espectrofotometra. Esos ensayos deben ser
realizados en complemento al ensayo del contrain, cuan-
do aplicable.
Estructura de las monografas
Las monografas de materias primas son identificadas por
sus denominaciones comunes Brasileas (DCB), grabadas
en caja alta y centralizadas. Adems de eso, son incluidos,
tambin:
siempre que posible, la denominacin en latn propues-
ta por el INN International Non-propietary Names
Nombres genricos internacionales de la Organizacin
Mundial de la Salud;
la frmula estructural de la sustancia;
frmula molecular seguida de la masa molar;
Denominacin Comn Brasilea y su respectivo nme-
ro;
nombre qumico, segn la ACS American Chemical
Society;
registro CAS Chemical Abstracts Service;
texto de la monografa.
Las monografas de las preparaciones farmacuticas son
identificadas por el nombre de la materia prima correspon-
diente, seguido del nombre de la forma farmacutica.
Expresin de concentraciones
Las concentraciones en porcentaje son expresadas como
las siguientes.
Por ciento p/p (peso en peso) o % p/p Expresa el nmero
de g de un componente en 100 g de mezcla.
Por ciento p/v (peso en volumen) o % p/v- Expresa el n-
mero de g de un componente en 100 ml de solucin.
Por ciento v/v (volumen en volumen) o % v/v Expresa el
nmero de ml de un componente en 100 ml de solucin.
Por ciento v/p (volumen en peso) o % v/p Expresa el n-
mero de ml de un componente en 100 g de mezcla.
La expresin por ciento, usada sin otra atribucin, signifi-
ca: mezcla de slidos y semislidos, por ciento p/p; para
soluciones o suspensiones de slidos en lquidos, por cien-
to p/v; para soluciones de lquidos, por ciento v/v; para so-
luciones de gases en lquidos, por ciento p/v; para expresar
tenor de aceites esenciales en drogas vegetales, por ciento
v/p.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 55
Impurezas
Las pruebas descritas en las monografas limitan las im-
purezas a cantidades que aseguren calidad al frmaco. El
hecho de que los ensayos no incluyan una impureza poco
frecuente no significa que ella pueda ser tolerada.
Incineracin hasta peso constante
Esa expresin significa que la incineracin debe proseguir
a 800 25 C, o a otra temperatura indicada en la mo-
nografa, hasta que dos pesadas consecutivas no difieran
en ms de 0,5 mg por gramo de la sustancia en examen,
siendo que la segunda pesada debe ser efectuada despus
de quince minutos de incineracin adicional.
Interpretacin de la precisin de los dados numricos y
lmites de tolerancia
La precisin deseada en las pruebas; reacciones y ensayos
4
farmacopeicos est indicada por el nmero de decimales
que se presenta en el texto. Por ejemplo, el valor numrico
20 indica valores no menores que 19,5 y no mayores que
20,5; el valor numrico 2,0 indica valores no menores que
1,95 y no mayores que 2,05; el valor numrico 0,20 indica
valores no menores que 0,195 y no mayor que 0,205.
Los lmites de tolerancia, expresados, numricamente, por
un valor mximo y mnimo, indican la pureza de una sus-
tancia farmacopeica. Esos valores pueden ser expresados
en porcentaje o nmeros absolutos.
La banda de la variacin debe ser estrictamente observada,
no siendo tolerados valores fuera de los lmites mximo y
mnimo.
Material de embalaje primario y secundario
Se comprende por material de embalaje el recipiente; en-
voltorio o cualquier otra forma de proteccin; removible o
no; usado para envasar; proteger; mantener; cubrir o empa-
quetar, especficamente o no, materias primas; reactivos y
medicamentos.
Material de embalaje primario es lo que est en contacto
directo con su contenido durante todo el tiempo. Se con-
sidera material de embalaje primario: ampolla; tubo; so-
bre; estuche; frasquito; frasco de vidrio o de plstico; fras-
co-ampolla; cartucho; lata; pote; bolsa de papel y otros.
Embalaje secundario es el que se destina a la total protec-
cin del material envasado en las condiciones usuales de
transporte, almacenamiento y distribucin. Se considera
embalaje secundario: cajas de cartn; cartuchos de cartu-
lina; madera o material plstico o estuche de cartulina y
otros. No debe haber cualquier interaccin entre el mate-
rial de embalaje primario y su contenido capaz de alterar
la concentracin; la calidad; o la pureza del material en-
vasado. Las condiciones de envasado son descritas en las
monografas individuales, utilizndose los trminos rela-
cionados a continuacin.
 56 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Recipiente bien cerrado Es aquel que protege su conteni-
do de prdidas y contaminacin por slidos extraos, en las
condiciones usuales de manipulacin; de almacenamiento;
de distribucin y de transporte.
Recipiente perfectamente cerrado Es aquel que protege
su contenido de prdidas y de contaminacin por slidos,
lquidos y vapores extraos, eflorescencia, delicuescencia,
o evaporacin en las condiciones usuales de manipulacin;
almacenamiento; distribucin y transporte.
Recipiente hermtico Es aquel impermeable al aire, o
cualquier otro gas, en las condiciones usuales de manipu-
lacin; almacenamiento; distribucin y transporte,
Cilindro de gas Es el recipiente metlico, perfectamente
cerrado, de paredes resistentes, destinado a contener gas
4 bajo presin, obturado por vlvula regulable, capaz de
mantener la salida del gas en caudal determinado.
Recipiente para dosis nica Es el recipiente hermtico
que contiene determinada cantidad del medicamento des-
tinada a ser administrada de una sola vez y que despus de
abierto, no podr ser cerrado con garanta de esterilidad.
Recipiente para dosis mltiples Es el recipiente herm-
tico que permite la retirada de porciones sucesivas de su
contenido, sin modificar la concentracin; la pureza y la
esterilidad de la porcin remanente.
Medidas de presin
La expresin pascal (Pa), usada para medidas de presin
como la arterial; la atmosfrica o la interna de un aparato,
se refiere al uso de manmetros o barmetros calibrados
con relacin a la presin ejercida por la fuerza de 1 Newton
uniformemente distribuida sobre una superficie plana de
1 m2 de rea perpendicular a la direccin de la fuerza; 1
pascal equivale a 7,5 x 10-3 mm de mercurio.
Olor
Las expresiones: inodora; prcticamente inodora; leve olor
caracterstico; o sus variaciones, son usadas examinndose la
muestra despus de expuesta al aire por quince minutos, cuan-
do se trate de embalajes de hasta 25 g abiertos recientemente.
En el caso de embalajes mayores, transferir muestras de apro-
ximadamente 25 g para cpsula de 100 ml de capacidad.
La caracterizacin del olor es apenas descriptiva y no pue-
de ser considerada como estndar de pureza, excepto en los
casos en que un olor particular, no permitido, sea indicado
en la monografa individual.
Preparacin de soluciones
Todas las soluciones utilizadas en pruebas, ensayos y reac-
ciones son preparadas con agua purificada, a menos que sea
indicado de manera diferente en la monografa individual.
La expresin recientemente preparada, referente al prepa-
rado de soluciones utilizadas en pruebas, ensayos y reac-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
ciones, indica que la solucin debe ser preparada, como
mximo, 24 horas antes de la realizacin del ensayo.
Presin reducida
La expresin presin reducida significa presin menor o
igual a 6,7 kPa (aproximadamente 50 mm de mercurio),
a menos que indicado de manera diferente en la mono-
grafa. Cuando en la monografa est indicada desecacin
bajo presin reducida sobre agente desecante, la operacin
debe ser hecha bajo presin reducida en desecador u otro
aparato adecuado.
Procesos de fabricacin
Cualquiera que sea el mtodo utilizado, el producto final
debe corresponder a las especificaciones incluidas en la
Farmacopea Brasilea, 5a edicin.
En la fabricacin de productos inyectables; comprimidos;
cpsulas; o de otras preparaciones farmacopeicas, es per-
mitido el uso de sustancias adyuvantes, descritas en las
monografas y adicionadas con finalidad especfica. Ellas
deben ser inocuas y no deben tener influencia adversa so-
bre la eficacia teraputica de la sustancia activa contenida
en la preparacin, ni interferir en los ensayos y determina-
ciones.
Prueba en blanco
Las expresiones: ejecutar blanco paralelo; hacer prueba
en blanco; o efectuar ensayo en blanco, significa repetir la
determinacin en condiciones idnticas y con cantidades
idnticas de reactivos, omitindose, apenas, la sustancia en
examen.
Recipientes para inyectables
Los recipientes para preparaciones inyectables deben ser
fabricados con materiales que no provoquen interaccin
con el contenido y posean transparencia suficiente para
permitir inspeccin visual. Las tapas, cuando usadas, tam-
poco pueden influir en la composicin o en la conservacin
del medicamento, ofreciendo perfecto sellado, inclusive
despus de perforadas varias veces.
Los recipientes para preparaciones inyectables son clasi-
ficados en:
recipientes para dosis nica;
recipientes para dosis mltiple;
recipientes para perfusin.
Los recipientes para dosis nica: ampollas y cartuchos de uso
odontolgico, son frascos de vidrio o de material plstico ade-
cuado; cerrados por la fusin del vidrio o con la utilizacin de
oprculos fijos o mviles. El contenido slo debe ser utilizado
en una nica dosis, no pudiendo ser reaprovechado.
Los recipientes para dosis mltiple son frascos de vidrio de
paredes resistentes que, despus de ser llenados con prepa-
raciones lquidas o con slidos para ser disueltos o suspen-
didos, son sellados con tapa de otro material. El contenido

de esos frascos puede ser retirado para administracin en
una nica o en varias dosis.
Los recipientes para perfusin son frascos con ms de 50
ml de capacidad, pudiendo alcanzar 1000 ml, sellados
con tapa de otro material o no, fabricados de vidrio o de
plstico. Los medicamentos envasados en esos tipos de re-
cipientes deben ser administrados en una nica vez, con
la utilizacin de equipos estriles, y no pueden contener
agentes bactericidas o antifngicos. El uso de otros tipos de
adyuvantes debe ser considerado cuidadosamente.
Solubilidad
La solubilidad indicada no debe ser tomada en el sentido
estricto de constante fsica, sin embargo, complementa y
corrobora con los dems ensayos, pudiendo tener un valor
definitivo caso la sustancia no presente la solubilidad mni-
ma exigida, principalmente, en el solvente agua.
Las indicaciones sobre la solubilidad se refieren a las deter-
minaciones hechas a la temperatura de 25 C. La expresin
solvente se refiere al agua, a menos que indicado de manera
diferente en la monografa individual.
La expresin partes se refiere a la disolucin de 1 g de un
slido en el nmero de mililitros del solvente establecido
en el nmero de partes.
Las solubilidades aproximadas constantes en las monogra-
fas son designadas por trminos descriptivos cuyos signi-
ficados estn relacionados en la Tabla 1.
Tabla 1 - Trminos descriptivos de solubilidad y sus significados
Solvente Trmino descriptivo
Muy soluble Menos de 1 parte
Fcilmente soluble Soluble De 1 a 10 partes
Ligeramente soluble De 10 a 30 partes
Poco soluble De 30 a 100 partes
Muy poco soluble De 100 a 1000 partes
Prcticamente insoluble o De 1000 a 10 000 partes
insoluble Ms de 10 000 partes
Temperatura
Todas las temperaturas constantes en la FB 5. estn expre-
sadas en la escala Celsius, y las medidas son hechas a 25
C, excepto para medida de densidad y a menos que est
indicado de manera diferente en la monografa individual.
Unidades de medida
Son adoptadas en esa Farmacopea las unidades constantes
del Sistema Internacional de Unidades (SI), conforme rela-
cionado en el Anexo B.
Vehculos acuosos
Se usa, generalmente, agua para inyectables como veh-
culo para inyectables acuosos. Soluciones de cloruro de
sodio o solucin de Ringer u otras soluciones adecuadas,
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 57
preparadas con agua para inyectables, pueden ser usadas
en parte o totalmente al diferencia de solamente agua para
inyectables, a menos que la monografa lo especifique de
otra forma.
Vehculos no acuosos
Vehculos no acuosos utilizados parcial o totalmente en la
obtencin de preparaciones inyectables pueden ser misci-
bles o inmiscibles con agua. Entre los vehculos miscibles
con agua, los ms usados son los alcoholes superiores y los
polmeros del xido de etileno. Entre los inmiscibles con
agua, los ms usados son los aceites fijos de origen vegetal
y los mono y diglicridos de cidos grasos.
Los aceites fijos son inodoros o casi inodoros y su olor y
sabor no deben recordar los de rancio. Deben satisfacer a
las exigencias especificadas en las monografas y presentar
las caractersticas descritas a continuacin. 4
a) prueba de enfriamiento transferir cantidad de leo
fijo, previamente desecado a 105 C por dos horas y
enfriado a la temperatura ambiente en desecador conte-
niendo gel de slice, para recipiente de vidrio incoloro
cilndrico, con dimetro interno de aproximadamente
25 mm. Cerrar el recipiente y sumergir durante cua-
tro horas en agua mantenida a 10 C. El lquido debe
permanecer suficientemente lmpido, para que pueda
fcilmente ser vista una lnea negra de 0,5 mm de espe-
sor, cuando mantenida verticalmente atrs del cilindro
y contra fondo blanco;
b) ndice de saponificacin entre 185 y 200 (5.5.29.8);
c) ndice de yodo entre 79 y 128 (5.5.29.10);
d) sustancias insaponificables dejar en bao mara 10 ml
del leo con 15 ml de hidrxido de sodio (1:16) y 30 ml
de alcohol etlico, agitando ocasionalmente hasta que la
mezcla se torne clara. Transferir la mezcla para cpsula
de porcelana, evaporar el alcohol etlico en bao mara
y mezclar el residuo con 100 ml de agua. Debe resultar
solucin;
e) cidos grasos libres los cidos grasos libres en 10 g
del leo deben consumir, como mximo, 2 ml de hi-
drxido de sodio 0,02 M.
Los mono o diglicridos sintticos de cidos grasos deben
obedecer a las siguientes exigencias:
a) son lquidos y permanecen lmpidos cuando enfriados
a 10 C;
b) ndice de yodo no superior a 140 (5.5.29.10).
Los vehculos no acuosos deben ser seleccionados con es-
pecial cuidado, pues no pueden ser irritantes, txicos o sen-
sibilizantes y no deben interferir en la eficacia teraputica
de la preparacin. En casos excepcionales, nombres muy
difundidos, sin embargo diferentes de los adoptados por
la Denominacin Comn Brasilea para Frmacos pueden
ser citados como otra denominacin.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

5 MTODOS GENERALES
5.1 MTODOS GENERALES
APLICADOS A
MEDICAMENTOS
5.1.1 DETERMINACIN DE
PESO
La prueba se aplica a formas farmacuticas slidas en dosis
unitaria (comprimidos no revestidos, comprimidos reves-
tidos, pastillas, cpsulas duras y blandas y supositorios),
formas farmacuticas slidas envasadas en recipientes para
dosis unitaria (polvos estriles, polvos liofilizados, polvos
para inyectables y polvos para reconstitucin de uso oral)
y las formas farmacuticas slidas y semislidas envasadas
en recipientes para dosis mltiples (granulados, polvos, ge-
les, cremas, pomadas y polvos para reconstitucin).
Los pesajes son hechos en balanzas de sensibilidad ade-
cuada.
PROCEDIMIENTO PARA PRODUCTOS EN DOSIS
UNITARIA
Para productos en dosis unitaria, la prueba permite verifi-
car si las unidades de un mismo lote presentan uniformidad
de peso. Para realizar la prueba, es necesario determinar,
previamente, el peso promedio de unidades del lote.
Comprimidos no revestidos o revestidos con pelcula
Pesar, individualmente, 20 comprimidos y determinar el
peso promedio. Se puede tolerar no ms que dos unidades
fuera de los lmites especificados en la Tabla 1, en relacin
al peso promedio, sin embargo, ninguna podr estar arriba
o abajo del doble de los porcentuales indicados.
Comprimidos con revestimiento azucarado (grageas)
Pesar, individualmente, 20 grageas y determinar el peso
promedio. Se puede tolerar no ms que cinco unidades fue-
ra de los lmites especificados en la Tabla 1, en relacin al
peso promedio, sin embargo, ninguna podr estar arriba o
abajo del doble de los porcentuales indicados.
Cpsulas duras
Pesar, individualmente, 20 unidades, retirar el contenido
de cada una, limpiar adecuadamente y pesar nuevamente.
Determinar el peso del contenido de cada cpsula por la
diferencia de peso entre la cpsula llena y la vaca. Con los
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 59
valores obtenidos, determinar el peso promedio del conte-
nido. Se puede tolerar no ms que dos unidades fuera de
los lmites especificados en la Tabla 1, en relacin al peso
promedio del contenido, sin embargo, ninguna podr estar
arriba o abajo del doble de los porcentuales indicados.
Cpsulas blandas
Proceder como descrito para Cpsulas duras. Para deter-
minar el peso medio del contenido, cortar las cpsulas pre-
viamente pesadas y lavarlas con ter etlico u otro solvente
adecuado. Dejar los envoltorios expuestos al aire, en tem-
peratura ambiente, hasta completa evaporacin del solven-
te. Pesar nuevamente.
4
Supositorios y vulos
Pesar, individualmente, 20 supositorios u vulos y deter-
minar el peso promedio. Se puede tolerar no ms que dos
unidades fuera de los lmites especificados en la Tabla 1,
en relacin al peso promedio, sin embargo, ninguna podr
estar arriba o abajo del doble de los porcentuales indicados.
Polvos estriles, polvos liofilizados y polvos para
inyectables
Realizar la prueba con 20 unidades. Retirar los lacres me-
tlicos, en el caso de frascos-ampolla. Retirar rtulos que
puedan sufrir daos durante la prueba. Secar, si es nece-
sario, la superficie externa de los recipientes. Pesar, indi-
vidualmente, las 20 unidades, con las respectivas tapas.
Retirar el contenido y lavar los respectivos recipientes uti-
lizando agua y enseguida etanol. Secar en estufa a 105 C,
por 1 hora, o en temperaturas inferiores a esa, dependiendo
de la naturaleza del material, hasta peso constante. Enfriar
a la temperatura ambiente, recolocar la tapa y pesar nue-
vamente. La diferencia entre los dos pesajes representa el
peso del contenido. Determinar el peso promedio del con-
tenido de las 20 unidades. Se puede tolerar no ms que dos
unidades fuera de los lmites especificados en la Tabla 1,
en relacin al peso promedio, sin embargo, ninguna podr
estar arriba o abajo del doble de los porcentuales indicados.
Polvos para reconstitucin (uso oral)
Proceder conforme descrito para Polvos estriles, polvos
liofilizados y polvos para inyectables. Se puede tolerar no
ms que dos unidades fuera de los lmites especificados
en la Tabla 1, en relacin al peso promedio, sin embargo,
ninguna podr estar arriba o abajo del doble de los porcen-
tuales indicados.
 60 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 2 - Criterios de evaluacin de la determinacin de peso para formas farmacuticas en dosis unitaria.

Formas farmacuticas en dosis unitaria Peso medio Lmites de variacin

Comprimidos no revestidos o revestidos con pelcula,80 mg o menos 10,0%
comprimidos efervescentes, comprimidos sublinguales,ms que 80 mg y menos que 250 mg 7,5%
comprimidos vaginales y pastillas 250 mg o ms 5,0%
Comprimidos con revestimiento azucarado (grageas) 25 mg o menos 15,0%
ms que 25 mg y hasta 150 mg 10,0%
ms que 150 mg y menos que 300 mg 7,5%
300 mg o ms 5,0%
Cpsulas duras y blandas, cpsulas vaginales menos que 300 mg 10,0%
300 mg o ms 7,5%
Supositorios y vulos independiente del peso promedio 5,0 %
Polvos estriles, polvos liofilizados y polvos para ms que 40 mg* 10,0%
inyectables
Polvos para reconstitucin (uso oral) menos que 300 mg 10,0%
300 mg o ms 7,5%
_____________________(*) Si el peso promedio es de 40 mg o menos, someter a la prueba de Uniformidad de dosis unitarias (5.1.6).

PROCEDIMIENTO PARA PRODUCTOS EN DOSIS Pesar, individualmente, 10 unidades. Retirar el conteni-

MLTIPLES do y lavar los respectivos recipientes utilizando solvente

5
Para productos acondicionados en recipientes para dosis
mltiples, la prueba permite verificar la homogeneidad en
el envase.
Polvos para reconstitucin (uso oral y parenteral)
Pesar, individualmente, 10 unidades. Retirar el conteni-
do y lavar los respectivos recipientes utilizando solvente
adecuado. Secar, enfriar a la temperatura ambiente y pesar
nuevamente. La diferencia entre los dos pesajes representa
el peso del contenido.
Determinar el peso promedio del contenido de las 10 uni-
dades. Los valores individuales no difieren de 10% en re-
lacin al peso promedio.
adecuado. Secar, enfriar a la temperatura ambiente y pesar
nuevamente. La diferencia entre las dos pesajes representa
el peso del contenido.
Determinar el peso promedio del contenido de las 10 uni-
dades. El peso promedio de los contenidos no es inferior
al peso declarado y el peso individual de ninguna de las
unidades probadas es inferior al porcentaje indicado en la
Tabla 2, en relacin al peso declarado.
Caso no sea cumplida esa exigencia, determinar el peso in-
dividual del contenido de 20 unidades adicionales. El peso
promedio del contenido de las 30 unidades no es inferior
al peso declarado, y el peso individual de no ms que una
unidad en 30 es inferior al porcentaje indicado en la Tabla
2, en relacin al peso declarado.

Granulados, polvos, geles, cremas y pomadas

Nota: para realizar la prueba, es necesario conocer la

cantidad nominal del envase.

Tabla 3 - Tabla 2 Criterios de evaluacin de la determinacin de peso para formas farmacuticas en dosis mltiples.

Porcentaje mnimo en relacin al

Formas farmacuticas en dosis mltiples Peso declarado
peso declarado
Granulados, polvos, geles, cremas y pomadas hasta 60 g 90,0%
arriba de 60 g y hasta 150 g 92,5%
arriba de 150,0 g 95,0%

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 61

5.1.2 DETERMINACIN DE Productos lquidos en recipientes para dosis nica

VOLUMEN
La prueba de determinacin de volumen es requerida para
productos lquidos en recipientes para dosis mltiples y pro-
ductos lquidos en recipientes para dosis nica. La prueba se
aplica tanto a preparaciones lquidas como a preparaciones
lquidas obtenidas a partir de polvos para reconstitucin. La
prueba no es requerida para productos lquidos en recipientes
para dosis nica cuando, en la monografa individual, conste
requerimiento para Uniformidad de dosis unitarias (5.1.6).
PROCEDIMIENTO
Productos lquidos en recipientes para dosis mltiples (ex-
cepto inyectables)
Separar 10 unidades. Retirar los lacres metlicos, cuando
sea el caso. Retirar rtulos que puedan sufrir daos durante
la prueba. Pesar, individualmente, cada recipiente con las
respectivas tapas. Homogeneizar, retirar y reunir los con-
tenidos y reservar para la determinacin de la densidad de
(excepto inyectables)
Separar 10 unidades. Verter, separadamente, el contenido
de cada unidad en probetas secas calibradas de capacidad
que no exceda 2,5 veces el volumen a ser medido, tomando
precauciones para evitar la formacin de burbujas. Dejar
el lquido drenar por 5 segundos, a menos que indicado de
manera diferente en la monografa individual. Efectuar la
medicin.
A partir de los valores obtenidos, calcular el volumen pro-
medio de las unidades probadas. El volumen promedio no
es inferior al volumen declarado, y el volumen individual
de ninguna de las unidades probadas es inferior a 95,0% o
superior a 110,0% del volumen declarado.
Productos lquidos inyectables
La prueba se aplica a productos lquidos inyectables acon-
dicionados en recipientes como ampollas, frascos- ampo-
lla, bolsas plsticas, frascos plsticos, carpules o jeringas
pre-cargadas. Los recipientes son llenados con pequeo

5
masa. Lavar los recipientes y las tapas con agua y, en se- exceso volumen, de acuerdo con las caractersticas del pro-
guida, con etanol. Secar en estufa a 105 C, por una hora, ducto, para permitir la administracin del volumen decla-
o en temperatura compatible con el material del recipiente, rado. Los excesos mnimos de volumen recomendados en
hasta peso constante. Enfriar a la temperatura ambiente, la Tabla 1 generalmente son suficientes para permitir la
recolocar la tapa y otras partes correspondientes y pesar retirada y la administracin del volumen declarado.
nuevamente. La diferencia entre los dos pesajes representa
el peso del contenido. Determinar los volmenes indivi- Tabla 1 - Exceso de volumen recomendado
duales correspondientes (V), en ml, utilizando la expresin: para productos lquidos inyectables.
m
V= Exceso mnimo de
p
Volumen declarado volumen recomendado
en que (ml)
mviles / mL viscosos / mL
m = peso del contenido, en g;
p = densidad de masa del producto, en g/ml, determinada a 0,5 0,10 0,12
20 C, conforme descrito en Determinacin de la densidad 1,0 0,10 0,15
de masa y densidad relativa (5.2.5). 2,0 0,15 0,25
3,0 0,20 0,35
A partir de los valores obtenidos, calcular el volumen pro- 4,0 0,25 0,45
medio de las unidades probadas. El volumen promedio no 5,0 0,30 0,50
es inferior al volumen declarado y el volumen individual 10,0 0,50 0,70
de ninguna de las unidades probadas es inferior a 95,0% 20,0 0,60 0,90
del volumen declarado. 30,0 0,80 1,20
50,0 o ms 2% 3%
Productos lquidos en recipientes para dosis mltiples
obtenidos a partir de polvos para reconstitucin (excepto Suspensiones y emulsiones deben ser agitadas antes de la
inyectables) retirada del contenido y antes de la determinacin de la
densidad. Preparaciones oleosas o muy viscosas pueden
Separar 10 unidades. Reconstituir cada unidad conforme ser calentadas, si es necesario, segn las indicaciones del
indicado en el rtulo. Proceder conforme descrito en Pro- rtulo o a 37 C, y agitadas vigorosamente antes de la reti-
ductos lquidos en recipientes para dosis mltiples (excep- rada del contenido. Los contenidos son entonces enfriados
to inyectables). entre 20 C y 25 C antes de la medicin del volumen.

A partir de los valores obtenidos, calcular el volumen pro-
medio de las unidades probadas. El volumen promedio no
es inferior al volumen declarado y el volumen individual
de ninguna de las unidades probadas es inferior a 95,0% o
superior a 110,0% del volumen declarado.
Para inyectables en recipientes para dosis nica, probar 6
unidades si el volumen declarado es igual o superior a 10
ml, 10 unidades si el volumen declarado es superior a 3 ml
e inferior a 10 ml, o 12 unidades si el volumen declarado
es igual o inferior a 3 ml. Retirar el contenido total de cada
unidad con auxilio de jeringa de capacidad que no exceda 3
veces el volumen a ser medido, provista de aguja nmero 21

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 62 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
con no menos que 2,5 cm de largo. Eliminar burbujas even-
tualmente existentes en la aguja y en la jeringa y transferir el
contenido de la jeringa, sin vaciar la aguja, para probeta seca
calibrada de capacidad que no exceda 2,5 veces el volumen
a ser medido. Alternativamente, el contenido de la jeringa
puede ser transferido para vaso de precipitados seco tarado,
siendo el volumen calculado por el peso del lquido, en gra-
mos, dividido por su densidad. Para recipientes con volumen
declarado de 2 ml o menos, los contenidos de los recipientes
pueden ser reunidos para obtener el volumen necesario para
la medicin, debindose utilizar jeringas y agujas secas se-
paradas para cada recipiente. El contenido de recipientes con
volumen declarado de 10 ml o ms puede ser determinado
vacindose el contenido de cada recipiente directamente en
probetas calibradas o vasos de precipitados tarados.
El volumen de cada recipiente examinado no es inferior al
volumen declarado. En el caso de recipientes con volumen
declarado de 2 ml o menos, el volumen de los contenidos
reunidos no es inferior a la suma de los volmenes declara-
dos de los recipientes utilizados en la prueba.
Para inyectables en recipientes para dosis mltiples rotu-
5
lados para contener un nmero especfico de dosis de un
determinado volumen, seleccionar una unidad y proceder
conforme descrito para inyectables en recipientes para do-
sis nica, utilizando nmero de jeringas y agujas separadas
equivalente al nmero de dosis especificadas en el rtulo.
El volumen dispensado por cada jeringa no es inferior al
volumen declarado por dosis.
Para inyectables en cartuchos o jeringas pre-cargadas, pro-
bar una unidad si el volumen declarado es igual o superior
a 10 ml, 3 unidades si el volumen declarado es superior a 3
ml e inferior a 10 ml o 5 unidades si el volumen declarado
es igual o inferior a 3 ml. Ajustar a los recipientes los acce-
sorios necesarios para su utilizacin (aguja, mbolo, cuer-
po de jeringa), cuando sea el caso, y transferir el contenido
de cada recipiente, sin vaciar la aguja, para vaso de pre-
cipitados seco tarado, empujando el mbolo lenta y regu-
larmente. Calcular el volumen, en mililitros, dividiendo el
peso del lquido, en gramos, por su densidad. El volumen
de cada recipiente no es inferior al volumen declarado.
Para preparaciones inyectables de gran volumen (infusio-
nes parenterales), seleccionar dos unidades y transferir el
contenido de cada recipiente para probetas secas calibradas
de capacidad que no exceda 2,5 veces el volumen a ser
medido. El volumen de cada recipiente no es inferior al
volumen declarado.
5.1.3 DETERMINACIN DE
RESISTENCIA MECNICA EN
COMPRIMIDOS
Los pruebas de resistencia mecnica, tales como dureza y
friabilidad, son considerados oficiales dentro del contexto
legal de esta Farmacopea, constituyndose en elementos
tiles en la evaluacin de la calidad integral de los compri-
midos. Estas pruebas quieren demostrar la resistencia de los
comprimidos a la ruptura provocada por cadas o friccin.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
5.1.3.1 PRUEBA DE DUREZA
La prueba de dureza permite determinar la resistencia del
comprimido al aplastamiento o a la ruptura bajo presin
radial. La dureza de un comprimido es proporcional a la
fuerza de compresin e inversamente proporcional a su po-
rosidad. La prueba se aplica, principalmente, a comprimi-
dos no revestidos.
La prueba consiste en someter el comprimido a la accin
de un aparato que mida la fuerza, aplicada diametralmente,
necesaria para aplastarlo. La fuerza es medida en newtons
(N).
APARATOS
Pueden ser utilizados diferentes tipos de aparatos, los cua-
les difieren bsicamente cuanto al mecanismo empleado
para ejercer la presin. La fuerza puede ser ejercida ma-
nualmente o mecnicamente. A medida que la presin au-
menta, un mbolo, una placa o un pistn aplica determi-
nada fuerza sobre el comprimido, apoyado en base fija. El
aparato es calibrado con precisin de 1 N.
PROCEDIMIENTO
La prueba es realizada con 10 comprimidos, eliminando
cualquier residuo superficial antes de cada determinacin.
Los comprimidos son probados, individualmente, obede-
ciendo siempre a la misma orientacin (considerar la for-
ma, presencia de ranura y grabacin). Expresar el resultado
como el promedio de los valores obtenidos en las determi-
naciones. El resultado de la prueba es informativo.
5.1.3.2 PRUEBA DE FRIABILIDAD
La prueba de friabilidad permite determinar la resistencia
de los comprimidos a la abrasin, cuando sometidos a la
accin mecnica de aparatos especficos. La prueba se apli-
ca, nicamente, a comprimidos no revestidos.
La prueba consiste en pesar con exactitud un nmero deter-
minado de comprimidos, someterlos a la accin del aparato
y retirarlos despus de efectuadas 100 rotaciones. Despus
de retirar cualquier residuo de polvo de los comprimidos,
ellos son nuevamente pesados. La diferencia entre el peso
inicial y el final representa la friabilidad, medida en fun-
cin de la porcentaje de polvo perdido.
APARATOS
El aparato (Figura 1) consiste de un cilindro rotativo, con
287,0 4,0 mm de dimetro y 38,0 2,0 mm de profun-
didad, constituido de polmero sinttico transparente con
caras internas pulidas de baja actividad esttica, el cual gira
en torno de su eje a una velocidad de 25 1 rotaciones por
minuto. Una de las pertes del cilindro es removible. Los
comprimidos son recogidos cada vuelta del cilindro por
una proyeccin curva con rayo interno de 80,5 5,0 mm
que se extiende del centro a la pared externa del cilindro,
y llevados a una altura de 156,0 2,0 mm, de donde caen
repetidamente

Figura 1 - Aparato para prueba de friabilidad (friabilmetro).
PROCEDIMIENTO
Para comprimidos con peso promedio igual o inferior a
0,65 g, utilizar 20 comprimidos. Para comprimidos con
peso promedio superior a 0,65 g, utilizar 10 comprimi-
dos. Pesar, con exactitud, los comprimidos, introducirlos
en el aparato. Ajustar la velocidad para 25 rotaciones por
minuto y el tiempo de prueba para 4 minutos. Transcurri-
do el plazo, retirar cualquier residuo de polvo de la su-
perficie de los comprimidos y pesar nuevamente. Ningn
comprimido puede presentarse, al final de la prueba, que-
brado, trisado, rajado o partido. Son considerados acepta-
bles los comprimidos con prdida igual o inferior a 1,5%
de su peso o el porcentaje establecido en la monografa.
Si el resultado es dudoso o si la prdida es superior al
lmite especificado, repetir la prueba dos veces ms, con-
siderndose, en la evaluacin, el resultado promedio de
las tres determinaciones.
5.1.4 PRUEBAS DE
DESINTEGRACIN
5.1.4.1 PRUEBA DE DESINTEGRACIN
PARA COMPRIMIDOS Y CPSULAS
La prueba de desintegracin permite verificar si comprimi-
dos y cpsulas se desintegran dentro del lmite de tiempo
especificado, cuando seis unidades del lote son sometidas
a la accin de un aparato especfico bajo condiciones expe-
rimentales descritas.
La prueba se aplica a comprimidos no revestidos, revesti-
dos con pelcula o con revestimiento azucarado (grageas),
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 63
5
comprimidos con revestimiento entrico, comprimidos su-
blinguales, comprimidos solubles, comprimidos descarta-
bles, cpsulas duras y cpsulas blandas. Puede ser aplicado
a comprimidos masticables, en ese caso las condiciones y
criterios de evaluacin constarn en la monografa indivi-
dual. La prueba no se aplica a pastillas y comprimidos o
cpsulas de liberacin controlada (prolongada).
La desintegracin es definida, para los fines de esta
prueba, como el estado en el cual ningn residuo de las
unidades probadas (cpsulas o comprimidos) permanece
en la tela metlica del aparato de desintegracin, salvo
fragmentos insolubles de revestimiento de comprimidos
o envoltorios de cpsulas. Se consideran, tambin, como
desintegradas las unidades que durante la prueba se trans-
forman en masa pastosa, siempre que no presenten ncleo
palpable.
APARATOS
Consiste de sistema de cestas y tubos (Figura 1), de re-
cipiente apropiado para el lquido de inmersin (un vaso
de precipitados con capacidad de 1 litro), de termostato
para mantener el lquido a 37 1 C y de mecanismo para
mover verticalmente la cesta y los tubos en el lquido de
inmersin, con frecuencia constante y recorrido especfico.
El volumen del lquido de inmersin deber ser suficiente
para que, al alcanzar el punto ms alto del recorrido, la
parte inferior de la cesta se quede, en el mnimo, a 25 mm
abajo de la superficie del lquido, y que en el punto ms
bajo se quede, en el mnimo, a 25 mm del fondo del vaso de
precipitados. Los movimientos ascendente y descendente
debern tener la misma velocidad y el cambio del sentido
del movimiento debe ser suave.
 64 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
La cesta consiste en seis tubos de vidrio o acrlico transpa-
rente, abiertos en ambos lados. Las dimensiones de los tubos
son: largo 77,5 2,5 mm, dimetro interno entre 20,7 mm y
23,0 mm y espesor de las paredes aproximadamente 2 mm.
Los tubos son mantenidos verticalmente, adaptndose en
cada extremidad de la cesta un disco de material transpa-
rente adecuado, con dimetro entre 88,0 mm y 92,0 mm y
espesor entre 5,0 mm y 8,5 mm, poseyendo seis orificios
en los cuales son introducidos los tubos. Los seis orificios
equidistan del centro de cada disco, estando igualmente se-
parados. En la cara externa del disco inferior se encuentra
una tela de alambre (dimetro de 0,635 0,030 mm) de
acero inoxidable, con abertura entre 1,8 mm y 2,2 mm, pre-
sa por medio de tres tornillos.
Para la prueba de desintegracin de cpsulas, una tela de
alambre de acero inoxidable, semejante a aquella adaptada
al disco inferior de la cesta, u otro dispositivo adecuado
puede ser adaptado a la cara externa del disco superior
para evitar que las cpsulas escapen de los tubos durante
Figura 1 - Aparato para prueba de desintegracin
de comprimidos y cpsulas (dimensiones en mm)
PROCEDIMIENTO
Comprimidos no revestidos
Utilizar seis comprimidos en la prueba. Colocar un compri-
mido en cada uno de los seis tubos de la cesta, aadir un dis-
co cada tubo y accionar el aparato, utilizando agua manteni-
da a 37 1 C como lquido de inmersin, a menos que otro
lquido sea especificado en la monografa del medicamento.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
la prueba.Las partes que constituyen la cesta son monta-
das y mantenidas firmemente unidas mediante eje metlico
central, con dimetro de cerca de 5 mm. La extremidad
superior del eje central debe tener dispositivo para fijar la
cesta al mecanismo que produce el movimiento vertical del
sistema.
Cuando indicado, debe ser adicionado en cada tubo de la
cesta un disco cilndrico de material transparente adecuado,
con densidad relativa entre 1,18 y 1,20, dimetro de 20,70
0,15 mm, y espesor de 9,50 0,15 mm. Cada disco posee
cinco orificios, cada uno con 2 mm de dimetro, estando un
orificio en el eje del cilindro y los otros cuatro equidistan-
tes, dispuestos sobre un crculo de 6 mm de radio relativo al
centro del disco. La superficie lateral del disco posee cuatro
abolladuras equidistantes, con profundidad de 2,6 0,1 mm,
en forma de V, las cuales, en el lado superior del disco, mi-
den 9,4 0,2 mm de largura, y en el lado inferior, 1,6 mm.
Todas las superficies del disco son lisas. El diseo y montaje
de la cesta pueden variar desde que las especificaciones para
los tubos y abertura de las telas sean mantenidas.
Al final del intervalo de tiempo especificado, parar el mo-
vimiento de la cesta y observar el material en cada uno de
los tubos. Todos los comprimidos deben estar completa-
mente desintegrados. Si los comprimidos no se desintegran
debido a la adherencia a los discos, repetir la prueba con
seis otros comprimidos, omitiendo los discos. Al final de la
prueba, todos los comprimidos deben estar completamente
desintegrados. El lmite de tiempo establecido como crite-
rio general para la desintegracin de comprimidos no re-

vestidos es de 30 minutos, a menos que indicado de manera
diferente en la monografa individual.
Comprimidos con revestimiento azucarado (grageas) o re-
vestidos con pelcula
Utilizar seis comprimidos en la prueba. Colocar un com-
primido en cada uno de los seis tubos de la cesta. Colo-
car un disco en cada tubo y accionar el aparato, utilizando
agua mantenida a 37 1 C, como lquido de inmersin.
Al final del intervalo de tiempo especificado, parar el mo-
vimiento de la cesta y observar el material en cada uno
de los tubos. Si los comprimidos no estn completamente
desintegrados, probar otros seis comprimidos, sustituyen-
do el agua por cido clorhdrico 0,1 M, mantenido a 37
1 C, como lquido de inmersin. Al final del intervalo
de tiempo especificado, parar el movimiento de la cesta y
observar el material en cada uno de los tubos. Todos los
comprimidos deben estar completamente desintegrados.
Se los comprimidos no se desintegraron debido a la adhe-
rencia a los discos, repetir la prueba con seis otros compri-
midos, omitiendo los discos. Al final de la prueba, todos los
comprimidos deben estar completamente desintegrados. El
lmite de tiempo establecido como criterio general para la
desintegracin de comprimidos revestidos con pelcula es
de 30 minutos, y para comprimidos con revestimiento azu-
carado (grageas) es de 60 minutos, a menos que indicado
de manera diferente en la monografa individual.
Comprimidos o cpsulas con revestimiento entrico
(gastrorresistentes)
Utilizar seis unidades en la prueba. Colocar una unidad en
cada uno de los seis tubos de la cesta. Accionar el apara-
to, sin aadir los discos, utilizando cido clorhdrico 0,1
M mantenido a 37 1 C como lquido de inmersin, por
60 minutos o el tiempo especificado en la monografa in-
dividual. Parar el movimiento de la cesta y observar los
comprimidos o cpsulas. Ninguna unidad puede presentar
cualquier seal de desintegracin, trizadura o ablanda-
miento, que posibilite el desborde de su contenido. Colo-
car un disco en cada tubo y accionar el aparato, utilizando
solucin tampn fosfato pH 6,8 mantenido a 37 1 C
como lquido de inmersin. Pasados 45 minutos o el tiem-
po especificado en la monografa, parar el movimiento de
la cesta y observar el material en cada uno de los tubos.
Todos los comprimidos o cpsulas deben estar completa-
mente desintegrados, pudiendo restar apenas fragmentos
de revestimiento insolubles. Si los comprimidos o cpsulas
no se desintegran debido a la adherencia a los discos, repe-
tir la prueba con seis otras unidades, omitiendo los discos.
Al final de la prueba, todos los comprimidos o cpsulas
deben estar completamente desintegrados. La prueba no se
aplica a cpsulas no revestidas que contienen preparacin
de liberacin entrica.
Comprimidos sublinguales
Realizar la prueba conforme descrito para Comprimidos no
revestidos, omitiendo el uso de discos. Despus de 5 mi-
nutos, todos los comprimidos deben estar completamente
desintegrados.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 65
Comprimidos solubles y comprimidos dispersables
Realizar la prueba conforme descrito para Comprimidos no
revestidos, utilizando agua mantenida entre 15 C y 25 C,
como lquido de inmersin. Despus de 3 minutos, todos
los comprimidos deben estar completamente desintegra-
dos.
Cpsulas gelatinosas (duras)
Realizar la prueba conforme descrito para Comprimidos no
revestidos, omitiendo el uso de los discos. Utilizar una tela
con abertura de 1,8 mm a 2,2 mm, de alambre de acero
inoxidable adaptada a la tapa de la cesta, conforme descrito
en el tem Aparatos. Observar las cpsulas despus de 45
minutos o conforme especificado en la monografa del me-
dicamento. Todas las cpsulas deben estar completamente
desintegradas, o restando, en la tela, apenas fragmentos in-
solubles de consistencia blando.
Cpsulas blandas
Realizar la prueba conforme descrito para Comprimidos
5
no revestidos, utilizando los discos. Observar las cpsulas
despus de 30 minutos o conforme especificado en la mo-
nografa del medicamento. Todas las cpsulas deben estar
completamente desintegradas, o restando, en la tela, ape-
nas fragmentos insolubles de consistencia blando. Si las
cpsulas no se desintegran debido a la adherencia a los dis-
cos, repetir la prueba con otras seis unidades, omitiendo los
discos. Al final de la prueba, todas las cpsulas deben estar
completamente desintegradas.
5.1.4.2 PRUEBA DE DESINTEGRACIN
DE SUPOSITRIOS, VULOS Y
COMPRIMIDOS VAGINALES
Esta prueba permite verificar la mayor o menor capacidad
de esas formas farmacuticas de ablandarse o desagregarse
en medio lquido, en el espacio de tiempo prescrito.
Se considera desintegracin completa cuando el suposito-
rio o vulo presente:
a) disolucin completa;
b) separacin completa de sus componentes, acumulndo-
se sustancias grasas fundidas en la superficie del lqui-
do, depositndose los polvos insolubles en el fondo del
recipiente y disolvindose los componentes solubles de
la muestra, siendo que la distribucin de los componen-
tes ocurre de uno o ms modos descritos arriba;
c) ablandamiento de la muestra que puede ser acompaa-
do por el cambio de su forma sin que ocurra separacin
completa de sus componentes; el ablandamiento debe
ser tal que, al presionar la muestra ablandada con bas-
tn de vidrio, no se perciba existencia de camada ms
dura en su superficie;
d) ruptura de la cpsula gelatinosa de vulos, permitiendo
liberacin de sus componentes;m
e) ausencia de residuo sobre el disco perforado o, cuando
hubiese, tenga la consistencia de masa blanda que no
ofrezca resistencia a la presin de bastn de vidrio.
 66 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
APARATOS
El aparato (Figura 1) consiste de cilindro de vidrio o pls-
tico, transparente, con paredes de espesor apropiado, en
cuyo interior se encuentra preso, por tres ganchos de metal,
un dispositivo metlico que consiste de dos discos perfora-
dos de acero inoxidable, conteniendo cada uno 39 orificios
de 4 mm de dimetro. El dimetro de cada disco es tal que
permite su introduccin en el cilindro transparente, que-
dando los discos alejados por, aproximadamente, 30 cm.
La determinacin es llevada a cabo con el uso tres apara-
tos, conteniendo cada uno una nica muestra. Cada aparato
es introducido en el interior de vaso de precipitados de,
por lo menos, 4 litros de capacidad, conteniendo agua a
la temperatura de 36 C a 37 C, a menos que indicado de
manera diferente en la monografa individual. El vaso de
precipitados es provisto de agitador que opere en veloci-
dad lenta y dispositivo que permita invertir el cilindro sin
retirarlo del agua.
Figura 1 - Aparelho para teste de desintegrao de supositrios,
vulos e comprimidos vaginais (dimenses em mm).
PROCEDIMIENTO
Supositorios y vulos
Utilizar tres supositorios u vulos. Colocar cada uno de
ellos sobre el disco inferior del dispositivo, introducir y
fijar el disco en el interior del cilindro. Invertir el aparato
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
cada 10 minutos. Examinar las muestras despus de trans-
currido el tiempo prescrito en la monografa. La prueba es
considerada satisfactoria si todas las muestras se presentan
desintegradas. El lmite de tiempo establecido como cri-
terio general para la desintegracin es de 30 minutos para
supositorios, vulos y comprimidos vaginales con base
hidrofbica, y de 60 minutos para supositorios con base
hidroflica, a menos que indicado de manera diferente en la
monografa individual.
Comprimidos vaginales
Utilizar el aparato descrito en Desintegracin de suposi-
torios y vulos, montado conforme Figura 2. Introducir
el cilindro en vaso de precipitados de dimetro adecuado
conteniendo agua entre 36 C y 37 C que debe cubrir uni-
formemente las perforaciones del disco. Utilizar tres apara-
tos, colocando en cada uno de ellos un comprimido vaginal
sobre el disco superior. Cubrir el aparato con una placa de
vidrio para asegurar la humedad adecuada. Examinar el
estado de cada muestra despus de transcurrido el tiempo
prescrito en la monografa. La prueba es considerada satis-
factoria si todas las muestras se presentan desintegradas.
Figura 2 - Aparato para prueba de desintegracin
de supositorios, vulos y comprimidos vaginales.
_______________
A, placa de vidrio; B, comprimido vaginal; C, superficie del agua; D,
agua; E, fondo del recipiente.
5.1.5 PRUEBA DE DISOLUCIN
La prueba de disolucin posibilita determinar la cantidad
de sustancia activa disuelta en el medio de disolucin
cuando el producto es sometido a la accin de aparatos
especficos, bajo condiciones experimentales descritas. El
resultado est expresado en porcentaje de la cantidad de-
clarada en el rtulo. La prueba se destina a demostrar si el
producto atiende a las exigencias constantes en la mono-
grafa del medicamento en comprimidos; cpsulas y otros
casos en que la prueba sea requerida.

APARATOS PARA LOS MTODOS 1 Y 2
El aparato de disolucin consiste de un sistema de tres
componentes, descritos a continuacin.
Recipientes abiertos de forma cilndrica y fondo hemisf-
rico (cubas), hechos en vidrio boro silicato, plstico u otro
material transparente e inerte, a los cuales puede ser adap-
tada tapa de material inerte, con aberturas adecuadas para
el agitador, recogida de muestras e insercin de termme-
tro. Las cubas pueden presentar las siguientes dimensiones
y capacidades: 185 25 mm de altura y 102 4 mm de
dimetro interno para una capacidad nominal de un litro;
290 10 mm de altura y 102 4 mm de dimetro interno
para una capacidad nominal de dos litros; 290 10 mm de
altura y 150 5 mm de dimetro interno para una capaci-
dad nominal de cuatro litros.
Barras en acero inoxidable para proveer agitacin del me-
dio, que pueden presentar bajo dos formas: cestas (Mtodo
1) o palas (Mtodo 2) (Figuras 1 y 2). La barra debe ser
centralizada de tal forma que, al ser accionada, su eje de
rotacin no se aleje ms de 2 mm en relacin al eje vertical
del recipiente conteniendo el medio de disolucin.
Un motor que posibilita ajustar la velocidad de rotacin
de la barra a aquella especificada en la monografa indi-
Figura 1 - Mtodo 1 (Cestas). La cesta y la cuba no estn en la misma proporcin
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 67
vidual, mantenindola en los lmites de 4%. La rotacin
no debe producir efectos indeseables en la hidrodinmica
del sistema.
Las cubas son inmersas en bao de agua termostatizado, de
material transparente y tamao adecuado, en que la tem-
peratura sea mantenida a 37 C 0,5 C durante la ejecu-
cin de la prueba. El aparato debe estar exento de cualquier
fuente de vibracin, inclusive externa, que pueda influir en
la hidrodinmica del sistema. De preferencia, el aparato
debe posibilitar la visualizacin de las muestras y de los
agitadores durante la prueba.
Mtodo 1: Cestas
Cuando especificado en la monografa, se utiliza como agi-
tador una barra de acero inoxidable, en cuya extremidad se
adapta una cesta del mismo material (Figura 1). La tela es-
tndar utilizada en la confeccin de la cesta posee dimetro
de hilo de 0,25 mm y abertura de malla cuadrada de 0,40
0,04 mm (mesh 40), salvo especificacin contraria en la
monografa individual. La muestra debe ser colocada den-
tro de la cesta seca, antes del inicio de la prueba. Durante
5
su ejecucin, una distancia de 25 2 mm debe ser mante-
nida entre la parte inferior de la cesta y el fondo interno del
recipiente que contiene el medio de disolucin.
 68 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Mtodo 2: Palas
Cuando especificado en la monografa, se utiliza como
agitador una barra de acero inoxidable, revestida o no de
material inerte, cuya extremidad presenta la forma de pala
(Figura 2), capaz de girar suavemente y sin desvi de eje
durante el tiempo y velocidad especificados en la monogra-
fa correspondiente. La muestra debe ser adicionada, siem-
pre que posible, antes del inicio de la prueba. Durante su
ejecucin, una distancia de 25 2 mm debe ser mantenida
Figura 2 - Mtodo 2 (Ps). La pala y la cuba no estn en la misma proporcin.
APARATOS PARA El MTODO 3
Mtodo 3: Cilindros Alternados
El aparato de disolucin para el Mtodo 3 consiste de una
serie de frascos cilndricos de fondo plano; una serie de
cilindros de vidrio con sistema de cierre de material inerte
(acero inoxidable u otro material adecuado) y telas con-
feccionadas de material no adsorbente y no reactivo, des-
tinadas a ser acopladas en las partes: superior e inferior de
los cilindros. Un motor y un dispositivo de encaje de los
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
entre el extremo inferior de las palas y el fondo interno del
recipiente que contiene el medio de disolucin.
Es importante que las muestras no floten en el medio de
disolucin. Se puede recurrir a un dispositivo apropiado,
confeccionado en hilo de acero espiralado en pocas vuel-
tas y en dimetro suficiente para aprisionar la cpsula o el
comprimido sin deformarlos ni reducir el rea de contacto
con el medio.
cilindros deben posibilitar movimiento alternado vertical,
ascendente y descendente, de los cilindros en los frascos y,
tambin, propiciar desplazamiento horizontal del cilindro
para otro frasco dispuesto en una fila diferente.
Los frascos permanecen parcialmente inmersos en un bao
de agua, de dimensiones adecuadas, que posibilita la termo
estatizacin a 37 C 0,5 C durante el perodo de ensa-
yo. El aparato debe estar exento de cualquier vibracin,
interna o externa, que pueda influir en el movimiento suave
ascendente y descendente de los cilindros. El aparato debe

poseer dispositivo de ajuste de la velocidad de movimiento
alternado, de acuerdo con el preconizado en la monografa
individual, con variacin mxima de 5%.
Preferentemente, el aparato debe posibilitar la visualiza-
cin de los cilindros y de las muestras en anlisis en su
interior. Los frascos poseen tapa adecuada, la cual debe
permanecer fija durante la realizacin del ensayo. Los
componentes del conjunto poseen las dimensiones presen-
tadas en la Figura 3, a menos que haya alguna especifica-
cin diferente en la monografa.
Figura 3 - Mtodo 3 (Cilindros alternados). Las
dimensiones indicadas son en milmetros.
MEDIO DE DISOLUCIN
Se utiliza el medio de disolucin especificado en la mono-
grafa del producto, previamente desgasificado por proce-
dimiento conveniente, cuando necesario, para evitar la for-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 69
macin de burbujas que puedan interferir en la velocidad
de disolucin a ser medida. Cuando el medio de disolucin
sea solucin tampn, el pH debe ser ajustado a 0,05 uni-
dades del valor del pH especificado en la monografa del
producto.
TIEMPO DE DISOLUCIN
Cuando un nico tiempo sea especificado en la monografa
del producto, l representa el tiempo mximo dentro del
cual debe ser disuelta la cantidad mnima, en porcentaje,
de sustancia activa en ella establecida. Cuando ms de un
tiempo sea especificado en la monografa, deben ser to-
madas alcuotas, adecuadamente medidas, al final de cada
tiempo indicado.
PROCEDIMIENTO GENERAL PARA LOS MTODOS
1Y2
Montar y verificar los aparatos conforme especificaciones
mencionadas anteriormente, a fin de reducir, al mnimo,
factores que alteren significativamente la hidrodinmica
del sistema (desvi de eje, vibracin, etc.). Aadir el vo-
5
lumen medido del Medio de disolucin especificado en la
monografa del producto, convenientemente desgasifica-
do, caso necesario, al recipiente del aparato de disolucin.
Mantener la temperatura del medio a 37 C 0,5 C, re-
tirando el termmetro antes de iniciar la agitacin. En el
caso del Mtodo 1, colocar la muestra dentro de la cesta
seca. En el caso del Mtodo 2, colocar la muestra dentro
del recipiente de disolucin, como descrito anteriormente.
En ambos casos, al observar formacin de burbujas en la
superficie de las muestras, cuando est en contacto con el
medio de disolucin, verificar su influencia en el resultado.
Iniciar inmediatamente la agitacin, conforme velocidad
prefijada. En intervalo(s) de tiempo especificado(s) en la
monografa del producto, retirar alcuota para anlisis de
la regin intermedia entre la superficie del medio de di-
solucin y la parte superior del cesto o palas, a no menos
que 1 cm de la pared interna del recipiente (Figuras 1 y 2).
Durante la retirada de la alcuota, mantener la agitacin.
Filtrar inmediatamente las muestras, caso no est utilizan-
do filtros acoplados al sistema de muestreo. Los filtros em-
pleados deben ser inertes, no adsorber porcin significativa
del frmaco y poseer porosidad adecuada. De acuerdo con
lo especificado en la monografa del producto, el volumen
de muestra retirado puede o no ser repuesto. Si es necesaria
la reposicin, el mismo medio de disolucin calentado a 37
C debe ser utilizado. En el caso de que la reposicin del
medio de disolucin no sea realizada, corregir el volumen
en los clculos. Despus de filtracin y diluicin (cuando
necesario) de la alcuota, la cuantificacin del frmaco es
efectuada mediante la tcnica indicada en la monografa
del producto. Repetir la prueba con dosis unitarias adicio-
nales, conforme necesario, considerando los Criterios de
aceptacin.
Disolucin de cpsulas: caso se obtenga resultado insatis-
factorio, repetir la prueba de la siguiente forma: cuando el
medio de disolucin sea agua o tampn con pH inferior
a 6,8, utilizar el mismo medio de disolucin especificado
con adicin de pepsina purificada con actividad de, como
 70 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
mximo, 750 000 unidades/ 1000 ml. Para medio de diso-
lucin con pH igual o superior a 6,8, aadir pancreatina de,
como mximo, 1750 unidades de proteasa/ 1000 ml.
PROCEDIMIENTO PARA FORMAS FARMACUTI-
CAS DE LIBERACIN RETARDADA
Emplear el Mtodo A o el Mtodo B o el mtodo indicado
en la monografa individual.
Mtodo A
Etapa cida: utilizar 750 ml de HCl 0,1 M como Medio de
disolucin en las cubas cuando empleando los Mtodos 1
y 2. Montar el aparato de disolucin conforme descrito en
Aparatos para los Mtodos 1 y 2 y aadir una unidad de
ensayo en cada cuba o cesta, conforme el caso. Proceder
a la prueba con la velocidad especificada en la monografa
por 2 horas. Al final de este tiempo, retirar una alcuota del
Medio de disolucin e, inmediatamente, ejecutar la etapa
tampn pH 6,8. Determinar la cantidad de frmaco disuel-
to en la alcuota muestreada, empleando mtodo analtico
adecuado.
5
Etapa tampn pH 6,8: ejecutar la preparacin de la etapa
tampn y ajuste del pH en 5 minutos. Con el aparato de
disolucin operando en la velocidad especificada para el
producto, aadir al Medio de disolucin de la Etapa cida
250 ml de solucin de fosfato de sodio tribsico 0,20 M
previamente climatizado a 37 C 0,5 C. Ajustar, si ne-
cesario, el pH para 6,8 0,05 con HCl 2 M o NaOH 2 M.
Continuar operando el aparato de disolucin por 45 minu-
tos, o el tiempo especificado en la monografa. Al final de
este tiempo, retirar alcuota del Medio de disolucin de la
etapa tampn pH 6,8 y determinar la cantidad de frmaco
disuelto, empleando mtodo analtico adecuado.
Mtodo B
Etapa cida: utilizar 1000 ml de HCl 0,1 M como Medio
de disolucin en las cubas y montar el aparato de disolu-
cin conforme descrito en Aparatos para los Mtodos 1
y 2. Aadir una unidad de ensayo en cada cuba o cesta,
conforme el caso. Proceder a la prueba con la velocidad
especificada en la monografa por 2 horas. Al final de ese
tiempo, retirar una alcuota del Medio de disolucin e, in-
mediatamente, ejecutar la etapa tampn pH 6,8. Determi-
nar la cantidad de frmaco disuelto en la alcuota muestrea-
da, empleando mtodo analtico adecuado.
Etapa tampn pH 6,8: emplear tampn fosfato pH 6,8 pre-
viamente climatizado a 37 C 0,5 C. Drenar el medio
de disolucin de la etapa cida de las cubas y aadir 1000
ml de medio de disolucin tampn fosfato pH 6,8. Como
alternativa se puede retirar cada cuba con el medio de la
etapa cida del aparato de disolucin y sustituir por otra
cuba con el medio de la etapa tampn pH 6,8, transfiriendo
cuidadosamente la unidad de ensayo del medicamento a
prueba. Continuar operando el aparato de disolucin por
45 minutos, o el tiempo especificado en la monografa. Al
final de ese tiempo, retirar alcuota del medio de disolu-
cin de la etapa tampn pH 6,8 y determinar la cantidad de
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
frmaco disuelto, empleando mtodo analtico adecuado.
El tampn pH 6,8 puede ser preparado por la mezcla de 3
volmenes de HCl 0,1 M y 1 volumen de solucin de fos-
fato de sodio tribsico 0,20 M, ajustando, si es necesario, el
pH para 6,8 0,05 con HCl 2 M o NaOH 2 M.
PROCEDIMIENTO PARA El MTODO 3
Formas farmacuticas de liberacin inmediata: emplean-
do el Mtodo 3, aadir el volumen del Medio de disolucin
especificado en la monografa del producto en cada frasco
del aparato, disponer los frascos en el bao del instrumen-
tal para climatizar a 37 C 0,5 C y retirar los termme-
tros antes de iniciar la prueba. Colocar una unidad de de-
terminacin de dosis de la muestra en cada uno de los seis
cilindros alternados, evitando la formacin de burbujas de
aire en la superficie del material, e, inmediatamente, iniciar
la operacin del aparato de acuerdo con lo especificado en
la monografa individual del producto. Durante el movi-
miento ascendente y descendente de los cilindros, la ampli-
tud en altura debe situarse entre 9,9 y 10,1 cm. En el(los)
intervalo(s) de tiempo especificado(s) en la monografa
individual, levantar los cilindros y muestrear una alcuota
del Medio de disolucin de cada frasco, de la regin inter-
media entre la superficie del lquido y el fondo del frasco.
Despus de filtracin y diluicin (cuando necesario) de la
alcuota, realizar anlisis cuantitativo del frmaco disuelto
de acuerdo con el preconizado en la monografa individual
del producto. si necesario, repetir la prueba con unidades
adicionales del medicamento. Reponer el volumen de me-
dio muestreado con igual volumen de Medio de disolucin
fresco mantenido a 37 C o, en situaciones donde com-
probadamente no sea necesaria la reposicin del medio,
efectuar la correccin de la alteracin del volumen durante
los clculos. Mantener los frascos cubiertos con sus res-
pectivas tapas durante la ejecucin de la prueba y verificar
peridicamente la temperatura del medio. Para el medio y
el tiempo de disolucin seguir las orientaciones generales
indicadas en Medio de disolucin y Tiempo de disolucin.
Formas farmacuticas de liberacin prolongada: em-
pleando el Mtodo 3, ejecutar el procedimiento conforme
descrito en Formas farmacuticas de liberacin inmedia-
ta y seguir las orientaciones generales indicadas en Medio
de disolucin y Tiempo de disolucin. Los tiempos estn
expresados en horas y normalmente son indicados por lo
menos 3 intervalos de tiempo.
Formas farmacuticas de liberacin retardada: emplean-
do el Mtodo 3, tomar como base el procedimiento indica-
do en Mtodo B para Formas farmacuticas de liberacin
retardada, empleando una fila de frascos para la etapa cida
y la fila sucesiva de frascos para la etapa con solucin tam-
pn pH 6,8, adicionando el volumen de medio especificado
en la monografa (usualmente 300 ml). Los tiempos de re-
coleccin son los especificados en la monografa o los ge-
nerales indicados en Mtodo B para Formas farmacuticas
de liberacin retardada.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 71

CRITERIOS DE ACEPTACIN PARA FORMAS FARMACUTICAS DE LIBERACIN INMEDIATA

El producto cumple la prueba si los resultados atienden las exigencias descritas en la Tabla 1, salvo especificacin con-
traria en la monografa individual.

Tabla 1 - Tabla 1 Criterios de aceptacin para la prueba de disolucin de formas farmacuticas de liberacin inmediata
Etapas N de muestras probadas criterios de aceptacin
E1 06 Cada unidad presenta resultado mayor o igual a Q + 5%
E2 06 Promedio de 12 unidades (E1 + E2) es igual o mayor que Q y ninguna unidad
presenta resultado inferior a Q 15%.
E3 12 Promedio de 24 unidades (E1 + E2 + E3) es igual o mayor que Q, no ms
que dos unidades presentan resultados inferiores a Q 15% y ninguna
unidad presenta resultado inferior a Q 25%.

El trmino Q corresponde a la cantidad disuelta de frma- Etapa E3

co, especificada en la monografa individual, expresada
como porcentaje de la cantidad declarada. Los valores 5%,
15% y 25% tambin representan porcentuales de la canti-
dad declarada.
En circunstancias especiales, el porcentaje mximo de di-
solucin debe ser establecido experimentalmente. En esos
En el caso que el criterio para el Etapa E2 tampoco sea
atendido, repetir la prueba con 12 unidades ms. Si el pro-
medio de las 24 unidades probadas (Etapas E1, E2 y E3) es
mayor o igual a Q, como mximo dos unidades presen-
tan resultados inferiores a Q 15% y ninguna unidad pre-
sentase resultado inferior a Q 25%, el producto est en

5
casos, asegurar un valor de Q (cantidad disuelta en tiem- conformidad con lo especificado. Caso el criterio para la
po infinito) verificando que dos dosificaciones consecuti- Etapa E3 tampoco sea atendido, el producto es considerado
vas no difieren entre s ms de 2% despus de 10 minutos. insatisfactorio.

Etapa E1 CRITERIOS DE ACEPTACIN PARA FORMAS

En la Etapa E1 son probadas seis unidades. Si cada unidad,
individualmente, presenta resultado igual o mayor del que
Q + 5%, el producto est en conformidad con lo especifica-
do, no siendo necesario efectuar la Etapa E2.
Etapa E2
En el caso que el criterio para la Etapa E1 no sea atendido,
repetir la prueba con seis unidades ms. Si el promedio de
las doce unidades probadas (Etapas E1 y E2) es mayor o
igual a Q y, si ninguna de las unidades probadas presentase
resultado inferior a Q 15%, el producto est en confor-
midad con lo especificado, no siendo necesario efectuar la
Etapa E3.
FARMACUTICAS DE LIBERACIN PROLONGADA
El producto cumple la prueba si los resultados atienden las
exigencias presentadas en la Tabla 2, salvo especificacin
contraria en la monografa individual. Los trminos Q1 y
Q2 corresponden a la cantidad mnima y mxima de fr-
maco disuelto en cada intervalo de tiempo especificado en
la monografa, expresados como porcentaje de la cantidad
declarada. En el ltimo tiempo la especificacin puede ser
presentada apenas con un valor de Q mnimo. Los trminos
L1, L2 y L3 se refieren a las tres posibles etapas de evalua-
cin de la liberacin (L).

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 72 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 2 - Criterios de aceptacin para la prueba de disolucin (liberacin) realizada para formas farmacuticas de liberacin prolongada
N de unidades
Etapas Criterios de aceptacin
probadas
L 6 Cada resultado individual se encaja en el intervalo establecido (Q1 y Q2) para cada
1 determinado tiempo y ningn resultado individual es inferior al Q del ltimo tiempo.
L 6 El promedio de 12 unidades (E1 + E2) se encaja en el intervalo establecido (Q1 y Q2)
2 para cada determinado tiempo y no es inferior al Q del ltimo tiempo. Ninguna unidad
individual presenta resultado que supera los lmites de Q1 y Q2 en 10% de la cantidad
declarada, para cada determinado tiempo, y ningn resultado individual da un valor
inferior al Q del ltimo tiempo que supera en 10% a cantidad declarada.
L3 12 El promedio de 24 unidades (E1 + E2 + E3) se encaja en el intervalo establecido (Q1
y Q2) para cada determinado tiempo y no es inferior al Q del ltimo tiempo. No ms
que 2 unidades de las 24 probadas presentan resultados que superan los lmites de Q1
y Q2 en 10% de la cantidad declarada, para cada determinado tiempo, y no ms que
2 unidades de las 24 probadas presentan resultados con valor inferior al Q del ltimo
tiempo que superen en 10% la cantidad declarada.
Ninguna unidad individual presenta resultado que supera los lmites de Q1 y Q2 en
20% de la cantidad declarada, para cada determinado tiempo, y ningn resultado
individual da un valor inferior al Q del ltimo tiempo que supera en 20% la cantidad
declarada.

CRITERIOS DE ACEPTACIN PARA FORMAS FAR- el valor de Q indicado en la monografa del producto y,

5
MACUTICAS DE LIBERACIN RETARDADA cuando no especificado, emplear 75% como valor de Q en
la etapa tampn pH 6,8. Los trminos A1 A2 y A3 refieren
El producto cumple la prueba si los resultados atienden a las tres posibles etapas de evaluacin en la etapa cida
las exigencias presentadas en la Tabla 3 en la etapa cida (A) y los trminos B1, B2 y B3 se refieren a las tres posibles
(Mtodos A o B) y, tambin, las exigencias indicadas en etapas de evaluacin en la etapa tampn pH 6,8 (B).
la Tabla 4 en la etapa tampn pH 6,8 (Mtodos A o B),
salvo especificacin contraria en la monografa individual.
Emplear

Tabla 3 - Criterios de aceptacin para la etapa cida de la prueba de disolucin (Mtodos

A o B) realizada para Formas farmacuticas de liberacin retardada.

N de unidades
Etapas Criterios de aceptacin
probadas
A1 6 Ninguna unidad individual presenta cantidad disuelta superior a 10% de lo declarado.

A2 6 El promedio de 12 unidades no es superior a 10% de lo declarado y ninguna unidad

individual presenta cantidad disuelta superior a 25% de lo declarado.
A3 12 El promedio de 24 unidades no es superior a 10% de lo declarado y ninguna unidad
individual presenta cantidad disuelta superior a 25% de lo declarado.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 73

Tabla 4 - Criterios de aceptacin para la etapa tampn pH 6,8 de la prueba de disolucin

(Mtodos A o B) realizada para Formas farmacuticas de liberacin retardada.

N de unidades
Etapas Criterios de aceptacin
probadas
B1 6 Cada unidad presenta resultado mayor o igual a Q + 5%

B2 6 Promedio de 12 unidades (B1 + B2) es igual o mayor que Q y ninguna unidad presenta
resultado inferior a Q 15%.
B3 12 Promedio de 24 unidades (B1 + B2 + B3) es igual o mayor que Q, no ms que dos
unidades presentan resultados inferiores a Q 15% y ninguna unidad presenta
resultado inferior a Q 25%.

formas farmacuticas con un nico frmaco o con ms de

5.1.6 UNIFORMIDAD DE DOSIS un componente activo. A menos que indicado de manera
diferente en la monografa individual, la prueba se aplica,
UNITARIAS individualmente, cada componente activo del producto.

Para asegurar la administracin de dosis correctas, cada
unidad del lote de un medicamento debe contener cantidad
del componente activo prximo de la cantidad declarada.
La prueba de uniformidad de dosis unitarias permite eva-
luar la cantidad de componente activo en unidades indivi-
La uniformidad de las dosis unitarias de formas farmacu-
ticas puede ser evaluada por dos mtodos: Variacin de
peso y Uniformidad de Contenido. La aplicacin de cada
mtodo considerando la forma farmacutica, dosis y pro-
porcin del frmaco es presentada en la Tabla 1.

5
duales del lote y verificar si esta cantidad es uniforme en
las unidades probadas. Las especificaciones de esta prueba
se aplican a las

Tabla 1 - Aplicacin del mtodo de Uniformidad de Contenido (UC) o de Variacin de peso

(VP) de acuerdo con la forma farmacutica, dosis y proporcin del frmaco.

Dosis y proporcin del

frmaco
Forma Farmacutica Tipo Subtipo
> 25 mg y > < 25 mg o <
25% 25%
Comprimidos no revestidos VP UC
revestidos Pelcula VP UC
Otros UC UC
Cpsulas duras VP UC
moles suspensiones, emulsiones o geles UC UC
soluciones VP VP
Slidos envasados componente nico VP VP
en recipientes mltiplos componentes solucin liofilizada en el VP VP
para dosis nica recipiente final
otros UC UC
Soluciones envasadas VP VP
en recipientes para dosis
nica
Otros UC UC

El mtodo de Uniformidad de Contenido para preparacio-
nes en dosis unitarias se basa en la determinacin de do-
sis del contenido individual del componente activo de un
nmero de dosis unitarias para determinar si el contenido
individual est dentro de los lmites especificados. El m-
todo de Uniformidad de Contenido puede ser aplicado en
todos los casos.
El mtodo de Variacin de peso puede ser aplicado a las
siguientes formas farmacuticas:
1. soluciones envasadas en recipientes para dosis nica y
en cpsulas blandas;
2. slidos (incluyendo polvos, grnulos y slidos estri-
les) acondicionados en recipientes para dosis nica que
no contienen otras sustancias adicionadas, sean ellas
activas o inactivas;
3. slidos (incluyendo slidos estriles) envasados en re-
cipientes para dosis nica, conteniendo o no sustancias
activas o inactivas adicionadas, que tengan sido pre-
parados a partir de soluciones homogneas liofilizadas
en los recipientes finales, y sean rotulados para indicar
este modo de preparacin;

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 74 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
4. cpsulas duras, comprimidos no revestidos o revestidos
con pelcula, conteniendo 25 mg o ms de la sustancia
activa comprendiendo 25% o ms, en peso, de la do-
sis unitaria o, en el caso de cpsulas duras, el conteni-
do de la cpsula, excepto que la uniformidad de otras
sustancias activas presentes en menores proporciones
debe ser demostrada por el mtodo de Uniformidad de
Contenido.
El mtodo de Uniformidad de Contenido es exigido para
todas las formas farmacuticas que no atienden a las con-
diciones especificadas para aplicacin del mtodo de Va-
riacin de peso.
UNIFORMIDAD DE CONTENIDO
Para determinar la uniformidad de dosis unitarias por el
mtodo de uniformidad de contenido separar, como m-
nimo, 30 unidades y proceder conforme descrito para las
formas farmacuticas indicadas. Cuando la cantidad de
componente activo de una dosis unitaria sea diferente de lo
especificado en la determinacin de dosis, hacer los ajustes
de diluicin de las soluciones y/o el volumen de las alcuo-
5
tas para obtener la concentracin del componente activo
en la solucin final semejante a la de la determinacin de
dosis. En el caso de determinacin de dosis por titulacin,
utilizar titulante con concentracin diferente, si necesario,
para consumo de volumen adecuado de titulante. Conside-
rar cualquier modificacin de las diluiciones para efectuar
los clculos.
Cuando hubiere procedimiento especial para la prueba de
uniformidad de contenido en la monografa individual,
hacer la correccin necesaria de los resultados obtenidos
conforme descrito a continuacin.
1. Pesar cantidad de unidades del producto suficiente para
efectuar la determinacin de dosis y el procedimiento
especial de la prueba de uniformidad de contenido pre-
sentados en la monografa individual. Reducir los com-
primidos a polvo fino (o mezclar los contenidos de las
cpsulas, soluciones, suspensiones, emulsiones, geles
o slidos en recipientes para dosis nica) para obtener
mezcla homognea. Se no es posible obtener mezcla
homognea de esta forma, usar solventes apropiados u
otros procedimientos para obtener solucin contenien-
do el frmaco. Emplear alcuotas apropiadas de esta
solucin para los ensayos especificados.
2. Analizar, separadamente, porciones de la muestra, me-
didas con precisin, conforme el procedimiento indica-
do para la determinacin de dosis (D) y el procedimien-
to especial indicado para uniformidad de contenido (E),
descritos en la monografa individual.
3. Calcular la cantidad de frmaco por peso medio uti-
lizando los resultados obtenidos por el procedimiento
de determinacin de dosis (D) y por el procedimiento
especial (E).
4. Calcular el factor de correccin (F) segn la ecuacin:
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
F = D/E
en que
D = cantidad del componente activo por peso medio de la
forma farmacutica obtenida por el procedimiento de de-
terminacin de dosis;
E = cantidad del componente activo por peso medio de la
forma farmacutica obtenida por el procedimiento espe-
cial. Si (100|D E|)/D fuese superior a 10, no es vlido el
uso de F.
1. Si F est entre 0,970 y 1,030, no hay necesidad de co-
rreccin.
2. La correccin ser aplicada cuando el valor de F est
entre 0,900 y 0,970 y entre 1,030 y 1,100 y debe ser
efectuada calculndose la cantidad del frmaco en cada
unidad, multiplicndose las cantidades obtenidas en el
procedimiento especial por el factor de correccin F.
Formas farmacuticas slidas
Analizar, individualmente, 10 unidades conforme indicado
en la monografa individual para la determinacin de dosis,
a menos que un procedimiento especial para uniformidad
de contenido sea descrito en la monografa. Calcular el Va-
lor de Aceptacin (VA).
Formas farmacuticas lquidas
Analizar, individualmente, 10 unidades conforme indicado
en la monografa individual para la determinacin de dosis,
a menos que un procedimiento especial para uniformidad
de contenido sea descrito en la monografa. Conducir la
prueba, individualmente, en cantidad homognea del ma-
terial que es retirada de cada recipiente en condiciones
normales de uso. Expresar el resultado como cantidad dis-
pensada por unidad. Calcular el Valor de Aceptacin (VA).
Valor de Aceptacin para Uniformidad de Contenido
Calcular el Valor de Aceptacin (VA) segn la ecuacin:
Cuyos trminos estn definidos en la Tabla 2.
VARIACIN DE PESO
Para determinar la uniformidad de dosis unitarias por el
mtodo de variacin de peso separar, como mnimo, 30
unidades y proceder conforme descrito para las formas far-
macuticas indicadas. La cantidad de frmaco por unidad
es estimada a partir del resultado de la determinacin de
dosis y de los pesos individuales, asumindose distribucin
homognea del componente activo. Las cantidades indivi-
duales estimadas (x) son calculadas segn la ecuacin:
xi = pi x A/P
en que
pt = pesos individuales de las unidades o de los contenidos
de las unidades probadas;

A = cantidad de componente activo, expresada en porcen-
taje de la cantidad declarada, determinada en la determina-
cin de dosis;
P = peso medio de las unidades utilizadas en la determina-
cin de dosis.
Comprimidos no revestidos o revestidos con pelcula
Pesar, exactamente e individualmente, 10 comprimidos.
A partir del resultado de la determinacin de dosis y del
peso individual de cada comprimido, estimar la cantidad
de componente activo en cada unidad y expresar los resul-
tados individuales en porcentaje de la cantidad declarada.
Calcular el Valor de Aceptacin (VA ).
Cpsulas duras
Pesar, exactamente e individualmente, 10 cpsulas, preser-
vando la identidad de cada una. Retirar, cuidadosamente,
el contenido y pesar las cpsulas vacas. Calcular el peso
del contenido de cada cpsula y, a partir del resultado de la
determinacin de dosis, estimar la cantidad de componente
activo en cada cpsula. Expresar los resultados individua-
les en porcentaje de la cantidad declarada. Calcular el Va-
lor de Aceptacin (VA).
Cpsulas blandas
Pesar, exactamente e individualmente, 10 cpsulas, preser-
vando la identidad de cada una. Cortar las cpsulas con
lmina y retirar el contenido, lavando los envoltorios con
solvente adecuado. Dejar los envoltorios a temperatura
ambiente, por 30 minutos, para completa evaporacin del
solvente, tomando precauciones para evitar adicin o pr-
dida de humedad. Pesar las cpsulas vacas y calcular el
peso del contenido de cada cpsula. Estimar la cantidad de
componente activo en cada cpsula a partir del resultado de
la determinacin de dosis y del peso del contenido de cada
cpsula. Calcular el Valor de Aceptacin (VA).
Formas farmacuticas slidas (excepto comprimidos y
cpsulas)
Proceder como indicado en Cpsulas duras. Calcular el
Valor de Aceptacin.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 75
Formas farmacuticas lquidas
Pesar, exactamente e individualmente, la cantidad de lqui-
do que es retirada de cada uno de 10 recipientes en condi-
ciones normales de uso. si necesario, calcular el volumen
equivalente del contenido retirado despus de la determi-
nacin de la densidad. Estimar la cantidad de componente
activo en cada recipiente a partir del resultado de la deter-
minacin de dosis y del peso del contenido retirado de los
recipientes individuales. Calcular el Valor de Aceptacin.
Valor de Aceptacin para Variacin de Peso
Calcular el Valor de Aceptacin conforme descrito en Va-
lor de Aceptacin para Uniformidad de Contenido, excep-
to que las cantidades individuales de componente activo en
las unidades son sustituidas por las cantidades individuales
estimadas.
CRITERIOS
Aplicar los criterios a continuacin, tanto para Uniformi-
dad de Contenido como para Variacin de peso, a menos
5
que est indicado de manera diferente en la monografa
individual.
Formas farmacuticas slidas y lquidas
El producto cumple la prueba de uniformidad de dosis
unitarias si el Valor de Aceptacin calculado para las 10
primeras unidades probadas no es mayor que L1. Si el Va-
lor de Aceptacin es mayor que L1, probar 20 unidades
ms y calcular el Valor de Aceptacin. El producto cumple
la prueba de uniformidad de dosis unitarias si el Valor de
Aceptacin final calculado para las 30 unidades probadas
no es mayor que L1 y la cantidad de componente activo de
ninguna unidad individual es menor que (1 L2 x 0,01)M
o mayor que (1 + L2 x 0,01)M. A menos que indicado de
manera diferente en la monografa individual, L1 es 15,0
y L2 es 25,0.
 76 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 2 - Trminos y expresiones para el clculo del Valor de Aceptacin (VA).

Variable Definicin Condiciones Valores
Promedio de los contenidos
individuales (x1, x2,..., xn), expresado
como porcentaje de la cantidad
declarada.
x1, x2,..., xn Contenidos individuales de las
unidades probadas, expresos como
porcentaje de la cantidad declarada.
n Nmero de unidades probadas
k de aceptabilidad Se n = 10, entonces k = 2,4
Se n = 30, entonces k = 2,0
s Desvo estndar de la muestra

M a ser utilizado Valor de referncia Se 98,5% 101,5%, entonces

cuando
T 101,5 (caso 1)
Se < 98,5%, entonces M = 98,5%
(VA = 98,5 - + ks

5 Se > 101,5%, entonces M = 101,5%

(VA = - 101,5 + ks
M a ser utilizado Valor de referencia Se 98,5 T, entonces M=
cuando (VA = ks)
T > 101,5 (caso 2) Se < 98,5%, entonces M = 98,5%
(VA = 98,5 - + ks
Se > T, entonces M=T

(VA = - T + ks

VA Valor de Aceptacin Frmula general:

Los clculos son especificados

arriba para los diferentes casos

L1 Valor mximo permitido L1 = 15,0 a menos que

para el valor de aceptacin especificado de forma diferente
en la monografa individual

L2 Desvo mximo permitido para cada Ningn resultado individual es L2 = 25,0 a menos que
unidad probada en relacin al valor de menor que especificado de forma diferente
M utilizado en los clculos del valor (1 L2 0,01)M o mayor que en la monografa individual
de aceptacin. (1 + L2 0,01)M

T Promedio de los lmites especificados T es igual a 100% a menos que

en la monografa individual para otro valor haya sido aprobado por
la cantidad o potencia declarada, razones de estabilidad; en estos
expresada en porcentaje. casos, T es mayor que 100%.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


5.1.7 CONTAMINACIN POR
PARTCULAS
5.1.7.1 PARTCULAS SUBVISIBLES
La contaminacin de inyectables por partculas es la pre-
sencia de materiales insolubles, extraos y mviles que no
sean burbujas de aire.
Las especificaciones exigidas para las preparaciones far-
macuticas se encuentran descritas en las monografas es-
pecficas.
La contaminacin, por partculas, de las preparaciones
para uso parenteral y de las preparaciones para perfusin
es constituida de partculas extraas no solubles y mviles,
adems de las burbujas de gas que se encuentran, involun-
tariamente, en esas preparaciones. Para la determinacin
de la contaminacin por partculas se especifican a conti-
nuacin 2 mtodos: mtodo 1 (ensayo de conteo de partcu-
las por bloqueo de la luz) y mtodo 2 (ensayo de conteo de
partculas por microscopa ptica). Para la determinacin
de partculas no visibles en las preparaciones inyectables
y en las preparaciones para perfusin utilice de preferencia
el mtodo 1. En determinadas preparaciones, no obstante,
puede ser necesario realizar ensayos de conteo de partcu-
las por bloqueo de la luz en primer lugar y slo despus por
microscopa ptica para poder concluir con conformidad
de los resultados obtenidos.
La investigacin de las partculas no visibles efectuada
aplicando uno de estos mtodos, o los dos, no es posible
para todas las preparaciones inyectables. Cuando el mto-
do 1 no es aplicable, por ejemplo en el caso de las prepa-
raciones poco lmpidas o muy viscosas, el ensayo es reali-
zado por el mtodo 2 (es el caso de las emulsiones, de las
soluciones coloidales y de las preparaciones de liposomas).
Del mismo modo, un ensayo de conteo de partculas por
microscopa ptica puede igualmente ser exigido en el caso
de productos que formen burbujas de aire o de gas cuando
pasan a travs del detector. Si la viscosidad de la prepara-
cin es tal que el examen por uno u otro de los mtodos es
imposible, puede efectuarse una dilucin cuantitativa con
un diluyente apropiado para reducir la viscosidad hasta el
grado considerado suficiente para permitir el ensayo.
Los resultados obtenidos cuando se examina una unidad o
un grupo de unidades no puede ser extrapolado con confia-
bilidad a otras unidades que no fueron analizadas. Por con-
secuencia, conviene establecer planes de muestreo estads-
ticamente vlidos si se quiere llegar a conclusiones vlidas,
a partir de los datos recolectados, para determinar el grado
de contaminacin particular de un gran grupo de unidades.
El agua utilizada en los ensayos es libre de partculas.
Agua libre de partculas puede ser obtenida por filtracin
en membrana de porosidad de 0,22 m
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 77
MTODO 1 CONTEO DE PARTCULAS POR
BLOQUEO DE LA LUZ
Equipo
Utilizar contador de partculas con funcionamiento basado
en el principio de bloqueo de luz que posibilite la determi-
nacin del tamao de las partculas y su nmero conforme
sus dimensiones.
Calibracin
Calibrar el equipo con el auxilio de partculas esfricas es-
tndares de tamao comprendido entre 10 a 25 m. Esas
partculas estndares estn dispersas en agua libre de par-
tculas. Evitar la agregacin de las partculas durante la
dispersin.
Precauciones
Realizar la prueba en condiciones de contaminacin li-
mitada, preferencialmente, en campana de flujo laminar.
Lavar los elementos de vidrio y el equipo de filtracin uti-
5
lizado, con excepcin de las membranas filtrantes, con so-
lucin detergente tibio y enjuagar con agua hasta que todo
el detergente sea retirado. Inmediatamente antes del uso,
enjuagar el equipo de la parte superior a la inferior, interna
y externamente con agua libre de partculas.
Observar que no se introduzcan burbujas de aire en la
muestra a ser analizada, especialmente cuando alcuotas
de muestra estn siendo transferidas para el accesorio de
lectura.
Para verificar su adecuacin al ambiente, de los elementos
de vidrio y del agua utilizada, efectuar el conteo de part-
culas en cinco muestras de 5 ml de agua libre de partculas,
de acuerdo con el mtodo descrito en este captulo. En el
caso de que el nmero de partculas mayores que 10 m
exceda a 25, para el volumen total de 25 ml, el ambiente no
presenta condiciones para realizar la prueba.
Procedimiento
Homogeneizar la muestra por medio de 25 cambios conse-
cutivos lentos y suaves del recipiente. Eliminar las burbu-
jas dejando la muestra en reposo por 2 minutos. Transfe-
rir cuatro porciones no menores que 5 ml, y determinar el
nmero de partculas con tamao igual o mayor que 10 y
25 m. Desconsiderar el resultado obtenido con la primera
alcuota, y calcular el nmero promedio de partculas para
la muestra bajo examen.
Evaluacin
Emplear la prueba A, prueba B o prueba C, as como, el
nmero de muestras, conforme indicado en la monografa
especfica, de la forma farmacutica.
Prueba A Soluciones para inyectables en recipientes, con
volumen declarado, mayor que 100 ml. La muestra cumple
la prueba si el nmero medio de partculas, con tamao
 78 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
igual o mayor que 10 m, presentes en las unidades pro-
badas no excede 25 partculas por ml y el nmero de part-
culas con tamao iguales o mayores que 25 m no excede
a 3 por ml.
Prueba B Soluciones para inyectables en recipientes, con
volumen declarado, igual o menor que 100 ml. La muestra
cumple la prueba si el nmero medio de partculas, con
tamao igual o mayor que 10 m, presentes en las unida-
des probadas no excede 6 000 partculas por recipiente y el
nmero de partculas con tamao iguales o mayores que 25
m no excede a 600 partculas por recipiente.
Prueba C Polvos para inyectables en recipientes, con vo-
lumen declarado, igual o menor que 100 ml. La muestra
reconstituida con agua o diluyente apropiado libre de par-
tculas cumple la prueba si el nmero medio de partculas,
con tamao iguales o mayores que 10 m, presentes en las
unidades probadas no excede 10 000 partculas por reci-
piente y el nmero de partculas con tamao igual o mayo-
res que 25 m no excede a 1000 partculas por recipiente.
MTODO 2 CONTEO DE PARTCULAS POR MI-
5
CROSCOPA
Equipo
Utilice un microscopio binocular apropiado, un dispositivo
de filtracin para retener la contaminacin particular y una
Figura 1 - Retculo circular.
Calibracin
Es calibrado con un micrmetro de objetivo certificado por
una organizacin internacional o nacional de normaliza-
cin. Es aceptable un error relativo de 2% para la escala
lineal del retculo.
Precauciones generales
Realizar la prueba en condiciones de contaminacin limita-
da, preferencialmente, en campana de flujo laminar. Lavar
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
membrana filtrante. El microscopio equipado con un mi-
crmetro ocular calibrado, con un micrmetro de objeto,
una platina de movimientos cruzados capaz de mantener y
de atravesar toda la superficie de filtracin de la membrana
filtrante, dos iluminadores apropiados que permiten ilumi-
nacin episcpica e iluminacin oblicua, ajustado para am-
pliacin de 100 10 veces.
El micrmetro ocular es un retculo circular y comprende
un gran crculo dividido en cuadrantes, por lneas cruzadas,
crculos de referencia negros y transparentes de dimetro
de 10 m y de 25 m con un aumento de 100 y una escala
lineal graduada de 10 en 10 m (Figura 1).
El gran crculo es denominado campo de visin del re-
tculo. Son necesarios dos iluminadores, un iluminador
episcpico para fondo claro, interno del microscopio, y un
iluminador auxiliar externo regulable, ajustable para per-
mitir una iluminacin oblicua reflejada segn un ngulo
de 10-20. El dispositivo de filtracin destinado a retener
la contaminacin particular comprende un soporte de filtro
de vidrio u otro material conveniente, una fuente de vaco
y una membrana filtrante adecuada. La membrana filtrante,
de dimensiones apropiadas, es de color negra o gris oscura;
est cubierta o no con una rejilla y el tamao de los poros
es inferior o igual a 1,0 m.
los elementos de vidrio y el equipo de filtracin utilizado,
con excepcin de las membranas filtrantes, con solucin
detergente tibio y enjuagar con agua hasta que todo el de-
tergente sea retirado. Inmediatamente antes del uso, lave
los dos lados de la membrana filtrante enjuagar el equipo
de la parte superior a la inferior, interna y externamente
con agua libre de partculas.
Para verificar la adecuabilidad del ambiente, de los elemen-
tos de vidrio y del agua utilizada, efectuar el conteo de part-
culas en 50 ml de agua libre de partculas, de acuerdo con el

mtodo descrito en este captulo. En el caso que el nmero
de partculas de 10 m o mayores exceda a 20, o si ms
de 5 partculas de 25 m o mayores estuviesen presentes,
el ambiente no presenta condiciones para realizar la prueba.
Procedimiento
Homogeneizar la muestra por medio de 25 cambios con-
secutivos lentos y suaves del recipiente. si necesario, retire
con cuidado el dispositivo de cierre. Lave las superficies
exteriores de la abertura del frasco con un chorro de agua
exenta de partculas y retire el cierre evitando cualquier
contaminacin del contenido.
En el caso de las preparaciones parenterales de gran volu-
men, efecte el ensayo en unidades separadas. En el caso
de preparaciones parenterales de gran volumen o de peque-
o volumen igual o superior a 25 ml, pueden ser suficientes
para el ensayo menos de 10 embalajes de acuerdo con un
plan de muestreo apropiado. En cuanto a las preparacio-
nes parenterales de pequeo volumen, cuyo volumen sea
inferior a 25 ml rena el contenido de 10 unidades o ms
en un recipiente limpio para obtener un volumen mnimo
de 25 ml; en casos justificados y autorizados, la solucin
problema puede ser preparada mezclando el contenido de
un nmero apropiado de frascos y completando 25 ml con
agua exenta de partculas R o un solvente apropiado exento
de contaminacin particular, cuando el agua exenta de par-
tculas R no sea apropiada. Las preparaciones parenterales
de pequeo volumen cuyo volumen sea superior o igual a
25 ml pueden ser examinadas individualmente.
En el caso de los polvos para uso parenteral, reconstituya
la preparacin con agua exenta de partculas o un solvente
apropiado exento de contaminacin particular, cuando el
agua exenta de partculas no sea apropiada.
Humedecer el interior del soporte del filtro provisto de la
membrana filtrante con algunos mililitros de agua exenta de
partculas. Pase para el filtro la totalidad de la muestra (mez-
cla de las tomas de ensayo o la unidad en ensayo) y aplique
el vaco. si es necesario, junte, poco a poco, porciones de la
solucin hasta que el volumen total sea filtrado. Despus de
la ltima adicin, comience el lavado de las paredes internas
del soporte del filtro utilizando un chorro de agua exenta de
partculas. Mantenga el vaco hasta que la superficie de la
membrana filtrante quede exenta de lquido.
Coloque el filtro en una placa de Petri y seque al aire dejan-
do la placa ligeramente abierta. Cuando el filtro est seco,
coloque la placa de Petri en la platina del microscopio,
efecte la barredura de toda la membrana filtrante sobre la
luz reflejada del iluminador y cuente el nmero de partcu-
las de tamao superior o igual a 10 m y el nmero de par-
tculas de tamao superior o igual a 25 m. Es igualmente
posible efectuar conteo parcial y determinar por clculo el
nmero total de partculas retenidas en el filtro. Calcule el
nmero medio de partculas presentes en la muestra. Para
determinar el tamao de las partculas con auxilio del ret-
culo circular, proceda a la transformacin de la imagen de
cada partcula en un crculo y despus comprela con los
crculos de referencia del retculo de 10 m y de 25 m.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 79
As, las partculas mantienen su posicin inicial en el in-
terior del campo de visin del retculo y no se superponen
a los crculos de referencia para fines de comparacin. El
dimetro interior de los crculos de referencia transparen-
tes del retculo es utilizado para determinar el tamao de
las partculas blancas o transparentes mientras que el tama-
o de las partculas oscuras es determinado con el dimetro
exterior de los crculos de referencia negros y opacos del
retculo. Cuando se realice un ensayo de conteo de partcu-
las en microscopio no busque medir o enumerar materias
amorfas, semilquidas o morfolgicamente indistintas que
se asemejan a una mancha o zona desteida de la mem-
brana filtrante. Estos materiales pueden presentar un brillo
suave o nulo y asumir aspecto gelatinoso o la apariencia de
una pelcula. La interpretacin de la evaluacin puede ser
facilitada realizando un ensayo de conteo de las partculas
por retencin de la luz sobre una muestra de la solucin.
Evaluacin
Emplear los criterios abajo, de acuerdo con el volumen de
las muestras o conforme indicado en la monografa espec-
fica, de la forma farmacutica.
5
En las preparaciones envasadas en recipientes de conte-
nido nominal superior a 100 ml, la preparacin satisface
al ensayo si el nmero medio de partculas presentes en
las unidades examinadas no es superior a 12 por mililitro
para las partculas de tamao superior o igual a 10 m y
no excede de 2 partculas por mililitro para las de tamao
superior o igual a 25 m.
En las preparaciones envasadas en recipientes de contenido
nominal igual o inferior a 100 ml, la preparacin satisface
al ensayo si el nmero medio de partculas presentes en las
unidades examinadas no es superior a 3000 por recipiente
para las partculas de tamao superior o igual a 10 m y a
300 por recipiente para las partculas de tamao superior o
igual a 25 m.
5.1.7.2 PARTCULAS VISIBLES
La contaminacin por partculas de las preparaciones in-
yectables y de las preparaciones inyectables para perfusin
es constituida por partculas extraas, no disueltas y m-
viles, adems de las burbujas de gas, y que se encuentran
involuntariamente en estas soluciones. La finalidad del en-
sayo es suministrar un mtodo simple de evaluacin visual
de la calidad de las soluciones en lo que respecta a las par-
tculas visibles. Pueden utilizarse otros mtodos validados.
Aparatos
El aparato (Figura 1) es compuesto por un puesto de ob-
servacin, comprendiendo: un panel negro opaco, de di-
mensiones apropiadas, colocado en posicin vertical, un
panel blanco antirreflejo de dimensiones apropiadas, colo-
cado en posicin vertical al lado del panel negro, una ram-
pa de iluminacin ajustable, con una fuente de luz blanca
protegida y un difusor apropiado (un sistema de ilumina-
cin conteniendo 2 lmparas fluorescentes de 13 W, con
largo de onda de 525 nm cada una, es apropiado).
 80 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

La intensidad de la iluminacin en el punto de observacin (N1 x p)

Nt =
es mantenida entre 2000 y 3750 lux siendo aconsejable una mi
intensidad ms elevada para recipientes de vidrio colorido
o de plstico. en que

N1 = nmero de gotas utilizado en la prueba, que puede ser

el nmero de gotas declaradas por mililitro (Nd) o 20 gotas;
p = densidad de masa del producto, en g/ml, determinada
a 20 C, conforme descrito en Determinacin de densidad
de masa y densidad relativa (5.2.5);
mi = masa, en g, correspondiente al nmero de gotas utili-
zado en la prueba.

Determinacin de la cantidad de frmaco por gota

Calcular la cantidad del frmaco, en mg/gota, para cada

unidad probada (qt), segn la ecuacin:

Q
qt =
Nt

Figura 1 - Aparato para partculas visibles. En que

5
Procedimiento Q = cantidad de frmaco, en mg/ml, determinada en la de-
terminacin de dosis;
Retire eventualmente los rtulos, lave y seque el exterior Nt = nmero de gotas por mililitro calculado para cada uni-
del recipiente. Agite suavemente e invierta cada recipiente dad probada.
con precaucin, evitando la formacin de burbujas de aire
y obsrvelo durante cerca de 5 segundos contra el panel Calcular el porcentaje con relacin a la cantidad declarada,
blanco. Repita este procedimiento, observando el recipien- para cada unidad probada (%Qt o %qt), empleando una de
te contra el panel negro. Anote la presencia de cualquier las ecuaciones abajo:
partcula.
qt qt
%Qt = x 100 o %qt = x 100
5.1.8 PRUEBA DE GOTEO Qd/Nd qd

La prueba de goteo se destina a determinar la relacin del en que

nmero de gotas por mililitro y la cantidad de frmaco por
gota en formas farmacuticas lquidas envasadas en reci-
pientes con dispositivo dosificador integrado. Para reali-
zar la prueba es necesario conocer el nmero declarado de
gotas por mililitro, o la cantidad declarada de frmaco en
masa por gota.
qt = cantidad del frmaco, en mg/gota, calculada para cada
unidad probada;
Qd = cantidad declarada del frmaco, en mg/ml;
Nd = nmero declarado de gotas por mililitro;
qd = cantidad declarada del frmaco en mg/ gota.

PROCEDIMIENTO Calcular el promedio de los porcentuales individuales ob-

tenidos (%Q) y el desvi estndar relativo (DPR) segn las
Determinacin del nmero de gotas por mililitro ecuaciones:

El goteo debe ser realizado con el frasco invertido en la

posicin vertical o conforme el ngulo de goteo declarado
por el fabricante, permitiendo el flujo por gravedad, a una
tasa constante, sin cualquier tipo de presin adicional. Una
leve presin puede ser aplicada en frascos de polietileno.

Separar 30 unidades. Proceder a la prueba utilizando 10

unidades, en ambiente con temperatura controlada de 20 100 x s
DPR =
2 C. Para cada unidad determinar la masa relativa al %Q
nmero de gotas correspondiente a 1 mililitro, conforme
declarado por el fabricante. Si esta relacin no est decla- en que
rada, utilizar 20 gotas para la prueba. %Qt = porcentaje con relacin a la cantidad declarada cal-
culada para cada unidad probada;
Calcular el nmero de gotas por mililitro para cada unidad s = desvo estndar;
probada (Nt) segn la ecuacin: n = nmero de unidades probadas.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


CRITERIOS
El producto cumple los requisitos de la prueba si los por-
centuales individuales, para cada una de las 10 unidades
probadas, estn situadas entre 85,0% y 115,0% de la can-
tidad declarada y el desvo estndar relativo (DPR) no es
mayor que 6,0%.
Si una unidad est fuera de la banda de 85,0% a 115,0% de
la cantidad declarada, o si el DPR fuese mayor que 6,0%,
o si ambas condiciones fueron observadas, probar 20 uni-
dades ms.
El producto cumple la prueba si como mximo una unidad
est fuera de la banda de 85,0% a 115,0% de la cantidad
declarada, ninguna unidad est fuera de la banda de 75,0%
a 125,0% y el DPR de las 30 unidades probadas no es ma-
yor que 7,8%.
5.2 MTODOS FSICOS Y
FSICO-QUMICOS
5.2.1 DETERMINACIN DE LA
MASA
Para ser efectuada la medicin de la masa, las balanzas de-
ben presentar capacidad y sensibilidad de acuerdo con el
grado de precisin requerido y certificado de calibracin
actualizado.
Tratndose de actividades que exigen pesajes exactos, en la
determinacin de masas iguales o mayores que 50 mg utilizar
balanza analtica de 100 a 200 g de capacidad y 0,1 mg de sen-
sibilidad. Para cantidades inferiores a 50 mg utilizar balanza
analtica de 20 g de capacidad y 0,01 mg de sensibilidad.
APARATOS
Las balanzas analticas a ser utilizadas en este ensayo de-
ben ser de plato nico, preferencialmente electrnicas.
Las balanzas deben poseer dispositivo adecuado que posi-
bilite la verificacin de la carga aplicada, siempre que sean
calibradas peridicamente por medio de masas de referen-
cia evaluadas.
Las balanzas analticas deben presentar las siguientes ca-
ractersticas:
armario o caja de proteccin, con aberturas apropiadas
para posibilitar operaciones en su interior y excluir co-
rrientes de aire;
estar instalada sobre base de material compacto y resis-
tente (mrmol, granito, metal o caucho, por ejemplo);
indicador de nivel (gravimtrico o hidrulico) y dispo-
sitivo que posibilite su nivelacin;
estar instalada sobre sistema amortiguador (magntico,
neumtico o hidrulico, por ejemplo) para restablecer
rpidamente el equilibrio;
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 81
sistema que posibilite la lectura de la masa (por inter-
medio de mostradores y/o proyeccin ptica de escala
etc.).
Deben, tambin, soportar su carga total sin sufrir tensiones
inadecuadas que puedan comprometer su sensibilidad en
pesajes sucesivos en esas condiciones.
La balanza no debe estar sobrecargada.
Localizacin de la balanza analtica
La balanza analtica debe asentarse nivelada sobre mesa
o estantera firme y pesada, protegida por amortiguadores
de choque, como bases de corcho o lminas de caucho,
o adems sobre superficie de concreto, apoyada a pilares
que estn fijos en el piso o conectados a los elementos de
la construccin del edificio a fin de impedir vibraciones.
Debe estar en local aislado, que ofrezca seguridad y estabi-
lidad a la medida, en ambiente de atmsfera relativamente
seca, protegida del ataque de gases y vapores cidos, a la
distancia de fuentes de calor (luz solar directa, hornos, es-
tufas, muflas etc.) y de corrientes de aire.
Conservacin y limpieza 5
El plato y dems partes de la balanza, inclusive su caja de
proteccin, deben permanecer limpios, exentos de polvo
y sustancias que accidentalmente caigan en el plato de la
balanza o en el piso de la caja. Tales materiales deben ser
retirados inmediatamente.
Los cuerpos a ser pesados no deben ser colocados directa-
mente sobre el plato. Para tanto, se utilizan papeles o reci-
pientes adecuados a la masa, como vasos de precipitados,
vidrios de relojes, crisoles, cpsulas de porcelana y pesafil-
tros con o sin tapa.
Las partes mviles de la balanza y los pesos no deben ser
tocados con las manos. Se usa, para este fin, pinza apropia-
da, que debe ser guardada en la caja de pesos.
Agentes desecantes, tales como gel de slice o cloruro de
calcio, pueden ser colocados en el interior de la caja de
proteccin, para mantenimiento de atmsfera relativamen-
te seca.
Cuando la balanza no est en uso, sus puertas debern per-
manecer cerradas y trabadas.
La sensibilidad de la balanza analtica debe ser, peridi-
camente, inspeccionada y evaluada por tcnico habilitado.
Utilizacin de la balanza analtica
El material a ser pesado debe estar en equilibrio trmico
con el aire del interior de la caja de proteccin de la balan-
za a fin de evitar errores debido a las corrientes de convec-
cin, adems de la condensacin de la humedad sobre los
cuerpos fros.
 82 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

La balanza debe estar nivelada en la ocasin de su uso. La

posicin de equilibrio con o sin carga debe ser confirmada
varias veces con 10% de la carga total y con la carga total.
La diferencia de equilibrio, encontrada en dos determina-
ciones sucesivas, hechas con pesos iguales, no debe exce-
der a 0,1 mg para balanzas analticas (mximo 200 g) y
0,01 mg para balanzas analticas (mximo 20 g).

Tanto los pesos cuanto el material a ser pesado deben ser

depositados en el centro del plato. Durante las operaciones
de pesaje, las puertas de la caja de proteccin deben estar
cerradas.

5.2.2 DETERMINACIN DEL

PUNTO O INTERVALO DE
FUSIN
Temperatura o punto de fusin de una sustancia es la tem-
peratura corregida en la cual esta se encuentra completa-
mente fundida.

Intervalo de fusin de una sustancia es aquella compren-

5
dida entre la temperatura corregida en la cual la sustancia
comienza a fluidificarse o a formar gotas en la pared del
tubo capilar y la temperatura corregida en la cual est com-
pletamente fundida, lo que est evidenciado por la desapa-
ricin de la fase slida.
Existen, bsicamente, cuatro mtodos para determinacin
del punto o intervalo de fusin.
MTODO I MTODO DEL CAPILAR
Generalmente aplicado para sustancias fcilmente trans-
formadas en polvo.
Aparatos
Consiste del aparato presentado en la Figura 1.
Figura 1 - Aparato para determinacin del punto
o intervalo de fusin por el mtodo del capilar.
El vaso de precipitados debe tener capacidad de 150 ml y
contener lquido apropiado para el bao de inmersin de
acuerdo con la temperatura deseada. Esos lquidos pueden
ser: parafina lquida de alto punto de ebullicin, silicona
fluida de alto punto de ebullicin, cido sulfrico concen-
trado, etilenoglicol o agua.
El agitador debe mezclar el lquido rpidamente, mante-
niendo homognea la temperatura del medio. El termme-
tro, calibrado hasta su marca de inmersin, debe cubrir una
banda de -10 a 360 C, con divisiones de 1 C y colocado a
2 cm del fondo del vaso de precipitados.

El capilar de vidrio borosilicato debe ser cerrado en una

de las extremidades y tener aproximadamente 8 a 9 cm de
largo, 0,8 a 1,2 mm de dimetro interno y paredes con 0,10
a 0,30 mm de espesor. Para observar el tubo capilar se debe
emplear lente de aumento. Como fuente de calor, utilizar
una boca de gas o chapa elctrica

Procedimiento

Pulverizar la sustancia en anlisis y desecar en estufa a va-

co sobre gel de slice, pentxido de fsforo u otro agente
desecante durante 24 horas.

Introducir porcin del polvo en el tubo capilar seco y com-

pactarlo, golpeando el capilar sobre superficie dura para
formar columna de aproximadamente 3 a 4 mm de altura.

Calentar el bao rpidamente, bajo agitacin constante.

Cuando la temperatura alcance 10 C abajo de la supues-
ta banda de fusin, regular la velocidad de aumento de la

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


temperatura para 1 a 2 C por minuto, dependiendo de la
estabilidad de la sustancia bajo ensayo.
Cuando el bao est 10 C abajo de la banda de fusin, in-
troducir el capilar en el bao, de forma que su parte inferior
est bien prxima del medio del bulbo del termmetro.
Las temperaturas obtenidas son corregidas mediante adap-
tacin de termmetro auxiliar al dispositivo anterior, de
forma que su bulbo se apoyen en el termmetro del bao,
en la zona media de la columna emergente de mercurio,
cuando la sustancia funde, leyndose en esta altura la tem-
peratura t marcada en el termmetro auxiliar.
El clculo de la correccin a ser adicionada cada una de las
temperaturas, que definen el punto de fusin, es efectuado
a travs de la expresin
0,00015 N(T-t)
en que
N = nmero de grados correspondientes a la columna
emergente,
T = temperatura leda en el termmetro estndar,
t = temperatura lida en el termmetro auxiliar.
El equipo debe ser calibrado a travs del empleo de estn-
dares de punto de fusin entre aquellos reconocidos inter-
nacionalmente u otros.
MTODO II MTODO DEL CAPILAR ABIERTO
Generalmente aplicado para sustancias que no son fcil-
mente transformadas en polvo.
Aparatos
Se debe emplear aparato semejante al descrito en el Mto-
do del Capilar, con las siguientes modificaciones:
el bao de calentamiento debe ser con agua;
el termmetro debe ser graduado en 0,2 C, cubriendo
banda de -10 a 100 C; y
el tubo capilar. semejante a aquel empleado en el Mto-
do del Capilar, debe ser abierto en ambas extremidades.
Procedimiento
Fundir la sustancia rpidamente a temperatura no superior
a 10 C arriba del punto de fusin completo. Agitar y, si
necesario, filtrar a travs de filtro de papel seco.
Insertar la sustancia fundida en la extremidad del capilar
hasta formar columna de 8 a 12 mm de altura. Enfriar el
capilar conteniendo la muestra a la temperatura de 15 C,
mantenindola, en el mnimo, por 16 horas. Sujetar el tubo
capilar en el termmetro de forma tal que la columna de
sustancia se localice en la parte media del bulbo de mer-
curio. Colocar el sistema en bao de agua a 15 C, a la
profundidad de 3 cm de la superficie del agua. Calentar
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 83
con agitacin constante para que la temperatura aumente
2 C por minuto.
La temperatura en la cual la sustancia comienza a ascender
en el capilar es el punto de fusin.
MTODO III MTODO DE LA GOTA
Generalmente aplicado para determinacin del punto de
fusin de sustancias grasas de consistencia pastosa.
Aparatos
Se debe emplear aparatos semejante al del Mtodo I, con
las siguientes diferencias:
termmetro con lectura hasta 100 C graduado en 1 C
no utiliza capilar
el lquido de inmersin es agua.
Procedimiento
Fundir la muestra, agitando hasta alcanzar una temperatura
5
de 90 a 92 C e inmediatamente dejar la muestra fundida
enfriar hasta una temperatura de 8 a 10 C arriba del punto
de fusin esperado. Enfriar el bulbo de un termmetro has-
ta 5 C, secar y, mientras est fro, sumergirlo en la muestra
fundida hasta la altura de la mitad del bulbo, aproximada-
mente. Retirarlo inmediatamente y mantenerlo en posicin
vertical hasta que la superficie de la muestra depositada
sobre el bulbo solidifique, mantenindolo en bao de agua
durante aproximadamente 5 minutos a una temperatura no
mayor que 16 C. Adaptar el termmetro con la muestra
dentro de un tubo de ensayo por medio de un tapn de cau-
cho o corcho, de modo que su extremo inferior quede cerca
de 15 mm arriba del fondo del tubo de ensayo. Suspender
el tubo de ensayo en un bao de agua a una temperatura de
16 C y elevar la temperatura del bao hasta 30 C a una
velocidad de 2 C por minuto y despus a una velocidad de
1 C por minuto, hasta que la primera gota se desprenda del
termmetro. La temperatura en la cual esto ocurre repre-
senta el punto de fusin.
Para cada determinacin emplear una porcin recin fun-
dida de la muestra. Si la variacin de tres determinaciones
es menor que 1 C, calcular el promedio. Si la variacin
fuese mayor que 1 C realizar dos determinaciones ms y
determinar el promedio de las cinco lecturas.
MTODO IV MTODO DEL BLOQUE METLICO
CALENTADO
De aplicacin generalizada en la determinacin del punto o
intervalo de fusin de sustancias.
Aparatos
Consiste de bloque metlico de elevada conductividad tr-
mica, resistente a las sustancias bajo anlisis y de superficie
plana y pulida, como bronce, acero inoxidable y similares.
 84 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
El bloque debe contener cavidad cilndrica interna, paralela
a su superficie superior y a cerca de 3 mm de esta, con di-
mensiones adecuadas para acomodar termmetro calibrado.
El bloque debe ser uniformemente calentado a travs de re-
sistencia elctrica o llama microajustable. El aparato debe
ser calibrado constantemente con sustancias apropiadas y
de comprobado grado de pureza.
Procedimiento
Calentar el bloque rpidamente hasta temperatura de 10 C
abajo del punto de fusin previsto y, entonces, ajustar el
calentamiento para incrementos de temperatura de la orden
de C por minuto.
En intervalos regulares, colocar algunas partculas de la
muestra, previamente pulverizada y seca, sobre la superfi-
cie metlica, en la regin inmediatamente arriba del bulbo
del termmetro. Limpiar la superficie despus de cada en-
sayo. Anotar la temperatura (t1) en la cual la sustancia se
funde inmediatamente despus del contacto con el metal.
Interrumpir el calentamiento. Durante el enfriamiento, co-
5
locar nuevamente algunas partculas de la muestra, a inter-
valos regulares, en el mismo local del bloque, limpiando la
superficie despus de cada ensayo. Anotar la temperatura
(t2) en la cual la sustancia solidifica instantneamente al
contacto con el metal.
El punto de fusin instantneo de la muestra es calculado
mediante la siguiente expresin:
Figura 1 - Aparato para determinacin de la banda de destilacin (dimensiones en mm). A, baln de destilacin; B, condensador; C, adaptador.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
5.2.3 DETERMINACIN
DE LA TEMPERATURA DE
EBULLICIN Y BANDA DE
DESTILACIN
Temperatura o punto de ebullicin de un lquido es la tem-
peratura corregida en la cual el lquido hierve bajo presin
de vapor de 101,3 kPa (760 mm de Hg).
Banda de destilacin es el intervalo de temperatura corre-
gida para la presin de 101,3 kPa (760 mm de Hg), en el
cual el lquido, o fraccin especfica del lquido, destila to-
talmente.
APARATOS
Usar aparato como el sugerido en la Figura 1 en que A es
un baln de destilacin con capacidad de 100 ml conec-
tado al condensador B. En la extremidad inferior de B se
acopla el adaptador C. Una probeta de 50 ml graduada en
0,2 ml es utilizada como colector. El termmetro debe ser
adaptado al baln de forma que el sensor de temperatura se
encuentre en el centro del cuello y a cerca de 5 mm abajo
del nivel del tubo lateral. El calentamiento (a gas, elctrico
o a travs de bao) debe ser seleccionado de acuerdo con la
naturaleza de la sustancia.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 85

PROCEDIMIENTO 5.2.4 DETERMINACIN

Aadir al baln cerca de 50 ml de la muestra para no drenar
para el tubo lateral. Aadir perlas de vidrio u otro material
poroso adecuado. Adaptar el termmetro al baln y calen-
tar, lentamente, protegiendo el sistema contra corriente de
aire.
Registrar la temperatura en la cual fueron colectadas las
cinco primeras gotas del destilado. Ajustar el calentamien-
to para obtener el destilado a un caudal de 3 a 4 ml por
minuto. Anotar la temperatura en la cual la ltima gota se
evapore del baln de destilacin o cuando la fraccin es-
pecificada sea colectada. Mantener el destilado a la misma
temperatura en la cual el lquido fue originalmente medido
y anotar el volumen del destilado.
Comparar los valores obtenidos del punto de ebullicin,
banda de destilacin y volumen del destilado con las res-
pectivas especificaciones de las monografas.
Corregir las lecturas en funcin de la presin atmosfrica
utilizando la frmula:
DE LA TEMPERATURA DE
CONGELAMIENTO
Temperatura o punto de congelamiento de lquido o de s-
lido fundido es la ms alta temperatura en la cual ocurre
solidificacin.
Para sustancias puras que se funden sin descomposicin,
el punto de congelamiento del lquido es igual al punto de
fusin.
APARATOS
El aparato (Figura 1) consiste en tubo de ensayo de aproxi-
madamente 25 mm de dimetro interno y 150 mm de largo
suspendido por intermedio de un tapn adecuado dentro
de un segundo tubo mayor de 40 mm de dimetro interno
y 160 mm de largo formando una camisa de aire que evita
cambio brusco de temperatura. Ese sistema es fijo por aga-
rre en el centro del vaso de precipitados con capacidad de
1000 ml conteniendo agua o solucin refrigerante.

Donde:
t1 = t2 + k (101,3 b)
El tubo interior es fechado con tapn para contener barra
agitadora y termmetro con divisiones de 0,2 C. El sensor
5
de temperatura del termmetro debe estar fijo a aproxima-
tj = temperatura corregida; damente 15 mm del fondo del tubo. El agitador es un bas-
t2 = temperatura observada a presin atmosfrica b; tn de vidrio adaptado con anillo en su extremidad inferior
k = factor de conversin (Tabla 1), a menos que ese factor (Figura 1).
no sea considerado;
b = presin atmosfrica, expresada en kilopascal, durante
la destilacin.

Tabla 1 - Factores de correccin para

diferentes temperaturas de destilacin.

Temperatura de destilacin Factor de correccin K

Hasta 100 C 0,30
Arriba de 100 C y hasta 140 C 0,34
Arriba de 140 C y hasta 190 C 0,38
Arriba de 190 C y hasta 240 C 0,41
Arriba de 240 C 0,45
Nota 1: cuando el lquido es puro, la mayor parte destila
a temperatura constante (en una banda de 0,5 C). Esa
temperatura es el punto de ebullicin del lquido.

Nota 2: lquidos que destilan abajo de 80 C deben ser en-

friados a 10-15 C antes de medirse el volumen y la probeta
que recibe el destilado debe estar inmersa en bao de hielo.

Nota 3: cuando el punto de ebullicin es superior a 140150

C, se puede sustituir el condensador de agua por conden-
sador de aire.

Figura 1 - aparato para determinacin del punto

o intervalo de fusin por el mtodo del capilar.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 86 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

PROCEDIMIENTO Nota 1: si la sustancia es slida a temperatura ambiente,

Transferir la muestra en cantidad suficiente para alcanzar
30 mm en el tubo interno. Transferir para el vaso de pre-
cipitados la mezcla refrigerante adecuada a 5 C abajo del
punto de congelamiento esperado. Cuando la muestra est
enfriada a cerca de 5 C arriba del punto de congelamien-
to, mover verticalmente el agitador entre la superficie y el
fondo por, aproximadamente, 20 ciclos por minuto y regis-
trar la temperatura del termmetro de 30 en 30 segundos.
Interrumpir la agitacin cuando la temperatura permanezca
constante o presente leve aumento. Registrar la temperatu-
ra de 30 en 30 segundos como mnimo 3 minutos despus
de que la temperatura comience a disminuir nuevamente.
Registrar el mximo en la curva de la temperatura-tiem-
po que ocurre despus de que la temperatura permanece
constante, o presente leve aumento, y antes de que la tem-
peratura comience a disminuir nuevamente. El punto de
congelamiento es atribuido al promedio de no menos que
tres puntos mximos consecutivos que estn dentro de una
banda de 0,4 C.
fundir la sustancia y calentar hasta como mximo 20 C
arriba de la temperatura de congelamiento esperada antes
de transferir para el tubo interno.
Nota 2: si la sustancia es lquida a temperatura ambiente
utilizar bao a 15 C abajo de la temperatura de congela-
miento esperada.
5.2.5 DETERMINACIN DE
LA DENSIDAD DE MASA Y
DENSIDAD RELATIVA
Densidad de masa (p) de una sustancia es la razn de su
masa por su volumen a 20 C. La densidad de masa de la
sustancia (pt) en una determinada temperatura (t) es cal-
culada a partir de su densidad relativa (dl) por la frmula:
rt = d(gua) dtt + 0,0012
Cuando la temperatura, por ejemplo, 20 C la frmula es
expresada por:

5 Tabla 2 - Tabla 1 Densidad del agua de 0 a 40 C.

Densidade Densidade Densidade Densidade
Temp. (C) Temp. (C) Temp. (C) Temp. (C)
(g/mL) (g/mL) (g/mL) (g/mL)
0 0,99984 10 0,99970 20 0,99820 30 0,99565
1 0,99990 11 0,99961 21 0,99799 31 0,99534
2 0,99994 12 0,99950 22 0,99777 32 0,99503
3 0,99996 13 0,99938 23 0,99754 33 0,99470
4 0,99997 14 0,99924 24 0,99730 34 0,99437
5 0,99996 15 0,99910 25 0,99704 35 0,99403
6 0,99994 16 0,99894 26 0,99678 36 0,99368
7 0,99990 17 0,99877 27 0,99651 37 0,99333
8 0,99985 18 0,99860 28 0,99623 38 0,99297
9 0,99978 19 0,99841 29 0,99594 39 0,99259
10 0,99970 20 0,99820 30 0,99565 40 0,99222
Densidad relativa de una sustancia es la razn de su masa Transferir la muestra para el picnmetro. Ajustar la tem-
por la masa de igual volumen de agua, ambas a 20 C(d2020) peratura para 20 C, retirar exceso de la sustancia, si nece-
o por masa de igual volumen de agua a 4 C ( d420): sario, y pesar. Obtener el peso de la muestra a travs de la
diferencia de masa del picnmetro lleno y vaco. Calcular
d 420 = 0,998234 d 2020 la densidad relativa (d20) determinando la razn entre la
masa de la muestra lquida y la masa del agua, ambas a
PROCEDIMIENTO 20C. Utilizar la densidad relativa para calcular la densi-
dad de masa (p).
La densidad relativa de la sustancia puede ser determinada
a travs de picnmetro, balanza hidrosttica o densmetro. 5.2.6 DETERMINACIN DEL
El uso de esos dos ltimos es condicionado al tipo de apa-
ratos disponible. NDICE DE REFRACCIN
MTODO DEL PICNMETRO ndice de refraccin (n) de una sustancia es la relacin en-
tre la velocidad de la luz en el vaco y su velocidad en la
Utilizar picnmetro limpio y seco, con capacidad de, como sustancia.
mnimo, 5 ml que tenga sido previamente calibrado. La
calibracin consiste en la determinacin de la masa del Cuando un rayo de luz monocromtica pasa de un medio
picnmetro vaco y de la masa de su contenido con agua, transparente para otro de densidad ptica diferente ese es
recientemente destilada y hervida, a 20 C. reflejado o refractado, excepto cuando incide perpendicu-
larmente la interfaz. La relacin entre el seno del ngulo de
incidencia (sen i) y el seno del ngulo de refraccin (sen r)

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


es constante. Esa relacin equivale al ndice de refraccin
(n).
Para fines prcticos se mide la refraccin con referencia
al aire y a la sustancia y no con referencia al vaco y a la
sustancia, por lo tanto las diferencias entre los valores ob-
tenidos con ambas medidas no son significativos para fines
farmacopeicos.
En sustancias isotrpicas, el ndice de refraccin es carac-
terstica constante en determinado largo de onda, tempe-
ratura y presin. Por esta razn, ese ndice es til no slo
para identificar la sustancia, sino, tambin, para detectar
la presencia de impurezas. Es empleado para caracterizar
principalmente grasas, aceites grasos, ceras, azcares y
solventes orgnicos, as como para identificar ciertos fr-
macos. Es igualmente usado para determinar la pureza de
aceites voltiles.
Generalmente se determina el ndice de refraccin en fun-
cin de la luz de sodio en el largo de onda 589,3 nm (raya
D) y a 20 0,5 C. De ah expresarse el valor del ndice de
20
refraccin como n D .
REFRACTMETROS
Los refractmetros utilizados normalmente en anlisis far-
macopeica usan luz blanca, pero son calibrados para sumi-
nistrar el ndice de refraccin en trminos de largo de onda
correspondiente al de la luz de la raya D de sodio.
El refractmetro Abbe mide la banda de valores de ndice
de refraccin de las sustancias farmacuticas. Otros refrac-
tmetros de mayor o igual precisin pueden ser empleados.
Visto que el ndice de refraccin vara significativamen-
te con la temperatura, durante la lectura se debe ajustar y
mantener a 20 C.
La calibracin del aparato es realizada con estndar sumi-
nistrado por el fabricante. Para control de la temperatura y
limpieza del equipo se debe determinar el ndice de refrac-
cin del agua destilada cuyos valores son 1,3330 a 20 C y
1,3325 a 25 C.
5.2.7 DETERMINACIN DE LA
VISCOSIDAD
Viscosidad es la expresin de la resistencia de lquidos al
drenaje, o sea, al desplazamiento de parte de sus molculas
sobre molculas vecinas. La viscosidad de los lquidos vie-
nen del rozamiento interno, esto es, de las fuerzas de cohe-
sin entre molculas relativamente juntas. Con el aumento
de la temperatura, aumenta la energa cintica promedio
de las molculas, disminuye (en promedio) el intervalo
de tiempo que las molculas pasan unas junto a las otras,
menos efectivas se tornan las fuerzas intermoleculares y
menor la viscosidad.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 87
La unidad dinmica, Sistema CGS, de viscosidad es el poi-
se. El Sistema CGS de unidades es un sistema de unidades
de medidas fsicas, o sistema dimensional, de tipologa
LMT (longitud, masa tiempo), cuyas unidades base son el
centmetro para la longitud, el gramo para la masa y el se-
gundo para el tiempo.
La unidad dinmica anloga en el Sistema Internacional de
Unidades (SI) es el pascal segundo. El poise es frecuente-
mente utilizado con el prefijo centi; un centipoise (cP) es
un milipascal segundo (mPa-s) en unidades SI.
Sistema CGS poise (P)
1 P = 1 g cm1 s1
Por definicin, poise es la fuerza, en dinas, necesaria al
desplazamiento de camada plana de lquido, con rea de
1 cm2, sobre otra camada idntica, paralela y distanciada
de la primera en 1 cm, a la velocidad de 1 cm/s. El poi-
se es, por lo tanto, demasiado grande para la mayora de
las aplicaciones, por lo que se recurre de ah al centipoise,
cP, correspondiente a un centsimo de poise. A veces es
conveniente que se utilice la viscosidad cinemtica, que
5
consiste en la relacin entre la viscosidad dinmica y la
densidad. En ese caso, en el sistema CGS, la unidad es el
stoke. A ejemplo de lo que ocurre con viscosidad absoluta
(medida en poise), es ms conveniente expresar viscosidad
cinemtica en centistokes (100 centistokes = 1 stoke) para
caracterizar la mayora de los lquidos usuales en Farmacia
y Qumica.
Sistema Internacional de Unidades pascal segundo(Pas)
1 Pas = 1 kg m1 s1 = 10 P
Pascal segundo equivale a 10 poise, pero, normalmente, es
ms utilizado milipascal segundo (mPa s)
En la Tabla 1 est registrada la viscosidad de algunos l-
quidos.
Tabla 1 - Viscosidad de algunos lquidos.
Viscosidad Viscosidad Viscosidad
Lquido (P)a Unidades Nsm cP = mPa.s
CGS Unidades SI
Agua 0,0101 (298 K) 0,00101 0,890
Acetona 0,00316 0,000316 0,306
Etanol 0,01200
Glicerina 14,9
0,001200
1,49
1,074
934
_____________
a
1 poise (P) = 1 dina. s. cm-2 = 0,1 N s m-2. cP = centi-poise = mPa.s =
mili Pascal por Seg.
La determinacin de la viscosidad ensayo para el cual la
especificacin de la temperatura es imprescindible debido a su
influencia decisiva sobre el resultado (en general, la viscosidad
es inversamente proporcional a la temperatura) es efectuada
con base en propiedades diversas. El mtodo ms frecuente
se basa en el tiempo de drenaje de lquidos a travs de capila-
res (viscosmetros de Ostwald,Ubbelohde, Baum y Engler)
debido a la simplicidad y al precio accesible de los aparatos.
 88 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Viscosmetros que tienen como principio de funcionamiento Tabla 2 - Valores de viscosidad, de acuerdo
la determinacin del tiempo de cada libre de esferas a travs con la temperatura del ensayo
de tubos conteniendo el lquido bajo ensayo (Hoppler) o la
velocidad de rotacin de ejes metlicos inmersos en el lquido Temperatura (oC) (cP)
(Brookfield, entre otros) son igualmente empleados. 15 1,140
16 1,110
Diversas metodologas que pueden ser empleadas: 17 1,082
18 1,055
resistencia de lquidos al drenaje, tiempo de caudal 19 1,029
de un lquido a travs de un capilar (viscosmetro de
20 1,004
Oswald, Ubbelohde, Baum y Engler);
21 0,980
medida del tiempo de cada de una esfera a travs de
22 0,957
tubos conteniendo el lquido bajo ensayo (Hoppler);
midiendo la resistencia al movimiento de rotacin de 23 0,936
ejes metlicos cuando inmersos en el lquido (remetro 24 0,915
de Brookfield). 25 0,895

A pesar de que sea posible la determinacin de viscosidad ab-
soluta, con base en las dimensiones exactas del viscosmetro
empleado, es ms frecuente la prctica de la calibracin pre-
via del aparato con lquido de viscosidad conocida, permitien-
do, por comparacin, evaluacin relativa de la viscosidad del
lquido bajo ensayo. As, emplendose viscosmetro de Os-
Para lquidos mucho viscosos (glicerina y aceites en gene-
ral), se puede determinar la viscosidad relativa por el mto-
do de la velocidad de la queda de bolas a travs del lquido,
usando el viscosmetro de Hoppler. Ese mtodo, tambin,
es apropiado para determinar la viscosidad absoluta de l-
quidos, aplicndose la ecuacin:

5
twald o similar, se determinan los tiempos de drenaje t1 y t2 de
volmenes iguales de los lquidos de referencia y muestra, de
densidad d1 y d2, respectivamente. Siendo h2 la viscosidad del
lquido de referencia, la viscosidad absoluta (cP) del, lquido
muestra, puede ser calculada por la ecuacin:
1 t1d1
= bricante.
2 t2d2
o mejor
t1d1
1 = 2
t2d2
El cociente n2/t2.d2 posee valor constante, k, para cada l-
quido de referencia, en el mismo viscosmetro. As, cono-
cido ese valor (generalmente, encontrado en el manual del
aparato), se simplifica la ecuacin:
= k.t.d.
El valor de k puede, tambin, ser determinado, experimen-
talmente, midindose el tiempo de drenaje de lquido es-
tndar, puro, y aplicndose la ecuacin:
k=
t.d.
= t(ds dL)K
Donde:
t = tiempo de cada de la bola (seg).
K = cte especfica de la bola (mPcm3),provista por el fa-
dS = densidad de la bola (g/cm3).
dL = densidad del lquido (g/cm3).
La densidad del lquido (dL), para una cierta temperatura,
puede ser obtenida en libros de referencia (como hand-
books), o determinada experimentalmente.
La viscosidad relativa en el mtodo de Hoppler puede ser
determinada aplicndose la ecuacin:
1 (ds d1)t1
=
2 (ds d2)t2
donde n, d y t son, respectivamente, el coeficiente de visco-
sidad dinmica, la masa especfica y el tiempo de drenaje
de igual volumen de los lquidos 1 y 2.
VISCOSMETRO DE OSTWALD

Emplendose agua como estndar, usual para determina-
cin de lquidos de baja viscosidad, se adoptan los valores
de viscosidad registrados en la Tabla 2, conforme la tem-
peratura del ensayo:
El principio operacional del viscosmetro de Stokes se basa en
la determinacin de la velocidad de cada libre de una esfera a
travs del fluido del cual se desea obtener la viscosidad.
El viscosmetro de Ostwald es el ms simple y popular
entre los aparatos disponibles. Consta de tubo doblado en
U (Figura 1), con uno de los ramos provisto de ampolla
terminada en capilar. Hay dos trazos de referencia, uno
inmediatamente arriba de la ampolla y el otro sobre el ca-
pilar. El otro ramo es suficientemente ancho para permitir
su llenado con el lquido en ensayo hasta la altura de cerca
de 5 mm abajo del trazo de referencia inferior. Para posi-
bilitar mayor variedad de viscosidades, posibles de deter-

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


minacin, se emplean colecciones de viscosmetros, con
diferentes calibres. El aparato indicado para determinada
evaluacin es lo que posibilita drenaje de la muestra en
perodo no inferior a 60 segundos.
Para la determinacin propiamente dicha, transferir para el
viscosmetro escogido, lavado y seco, cantidad suficiente
de lquido para alcanzar nivel de 5 mm abajo del trazo de
referencia inferior. Fijar el aparato en termostato (20 C),
despus de aguardar que el lquido en el interior del aparato
adquiera la temperatura controlada, aspirar el lquido por el
tubo capilar/ampolla (por medio de tubo de caucho fijado
en la extremidad) hasta que el nivel del lquido exceda li-
geramente el trazo de referencia superior. Soltar entonces
el tubo y, en el instante en que el menisco alcance el trazo
de referencia superior, accionar cronmetro de precisin,
retrabndolo cuando el menisco pase por el trazo de refe-
rencia inferior. Registrar el tiempo transcurrido y repetir
el ensayo diversas veces con intervalos de algunos minu-
tos hasta que tiempos sucesivos no difieran en ms de 0,5
segundos Determinar la densidad del lquido bajo ensayo
(5.2.5), corrigiendo el valor para la densidad relativa al
agua, a 20 C, y calcular la viscosidad del lquido muestra
por la frmula indicada, empleando la constante k suminis-
trada o determinada por procedimiento similar.
Figura 1 - Viscosmetro de Ostwald (dimensiones en mm).
VISCOSMETRO DE HOPPLER
El sistema de medida Hoppler, mide el tiempo que una
esfera slida precisa para recorrer una distancia entre dos
puntos de referencia dentro de un tubo inclinado con mues-
tra. Los resultados obtenidos son considerados como vis-
cosidad dinmica en la medida estandarizada en el Sistema
Internacional (mPa.s). Determina la viscosidad de lquidos
Newtonianos y gases (con una bola especial para gases),
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 89
con precisin. Entre sus aplicaciones figuran la investiga-
cin, el control de procesos y el control de calidad, utiliza-
do principalmente para sustancias de baja viscosidad, entre
0,6 y 100 000 mPa.s.
El Viscosmetro de Hoppler es compuesto por un tubo de
vidrio con dos marcas (A y B) separadas por 10 mm entre s
en la columna, las cuales definen la distancia de medicin.
Una bola (de vidrio, aleacin de nquel y hierro o acero),
con dimetro compatible con el calibre del tubo de vidrio
es instalada en el tope de su contenido lquido. El tubo est
envuelto por un cilindro de vidrio lleno con agua en circu-
lacin, bajo temperatura controlada. Todo el conjunto se en-
cuentra dispuesto en posicin ligeramente inclinada (10%
en vertical), pudiendo ser girado 180o en torno de un eje
perpendicular a ambos los tubos, para posibilitar la repeti-
cin de las determinaciones y el retorno de la bola a la po-
sicin inicial. La tcnica consiste, en cronometrar el tiempo
(de cada) que una esfera (con densidad y dimetro variables
con la respectiva constitucin estructural) lleva para recorrer
el espacio entre aquellas dos marcas (A y B) existentes en las
extremidades del tubo de vidrio. Cuanto mayor sea la visco-
sidad mayor ser el tiempo que a bola llevar para recorrer
5
aquel espacio. El tipo de esfera a ser utilizada es escogida en
funcin del valor presumible de la viscosidad del lquido en
observacin. En el caso de la sangre son utilizadas esferas
de vidrio. Los resultados de la viscosidad, de los lquidos
newtonianos son expresos en unidades absolutas estndares
internacionales (milipascal. segundo, mPa.s).
Para la determinacin propiamente dicha, enjuagar el vis-
cosmetro, escogido, lavado y seco, con el lquido que sea
usado para determinar la viscosidad. Ajustar la plomada del
aparato. Escoger la esfera adecuada para cada lquido (agua
= esfera de vidrio). Llenar completamente el tubo interno
del viscosmetro con agua. Anotar el tiempo de cada de la
esfera entre las marcas A y B en el viscosmetro. Hacer dos
determinaciones ms para obtener el mejor promedio.
VISCOSMETRO BROOKFIELD
La viscosidad de una forma farmacutica puede ser de-
terminada por un viscosmetro de Brookfield, que mide la
viscosidad por la fuerza necesaria para girar el spindle en
el lquido que est siendo probado.
Para utilizar ese aparato, se debe proceder de la siguiente
forma:
aadir la muestra a ser analizada en el recipiente colec-
tor del aparato, hasta la marca deseada;
programar el aparato, eligiendo un nmero de spindle
y una rotacin a ser probados, de acuerdo con metodo-
loga especfica;
sumergir el spindle en la muestra a ser analizada;
accionar el aparato y, despus de estabilizacin del va-
lor, que aparecer en el display del aparato, anotar ese
valor que ser expresado en centipoise (cP);
caso no haya estabilizacin del valor, probar nuevamente,
utilizando otro nmero de spindle u otra rotacin.
 90 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
VISCOSIMETRO DE GRAVEDAD MODELO
COPAFORD
Seleccionar el orificio adecuado. La directriz para la se-
leccin del orificio debe ser la obtencin de un tiempo de
drenaje del lquido a prueba al redor de 60 segundos. Se
debe tener un tiempo de drenaje entre 20 y 100, segundos,
para la muestra a 25 C.
La muestra debe ser, perfectamente, homogeneizada. En
el momento del ensayo, el viscosmetro y el material a
ser probado deben estar a 25 0,1 C. Cerrar el orificio
con lmina de vidrio plana y llenar el vaso con muestra
hasta el nivel ms elevado. Verter la muestra, lentamente,
evitando la formacin de burbujas. Nivelar la muestra en
el vaso utilizando placa de vidrio plana. Retirar la lmina
del orificio. La muestra quedar retenida dentro del vaso.
Retire la placa de vidrio plana y accione el cronmetro
cuando la muestra comience a drenar por el orificio.
Cuando ocurra la primera interrupcin del flujo de drena-
je, parar el cronmetro y anotar el tiempo transcurrido en
segundos. Realizar el ensayo, en el mnimo, en triplica-
do. La viscosidad ser la media de los valores obtenidos,
5
expresada en mm2/s o Centistokes, siendo permitido un
desvo estndar mximo 3%. La conversin de segundos
para mm2/s o Centistokes est dada de acuerdo con el
manual del equipo utilizado.
5.2.8 DETERMINACIN
DEL PODER ROTATORIO
Y DEL PODER ROTATORIO
ESPECFICO
Muchas sustancias farmacuticas son pticamente activas,
luego desvan la luz plano-polarizada de modo que la luz
transmitida es desviada en un determinado ngulo con re-
lacin al incidente.
Sustancias con la misma estructura conteniendo uno o ms
centros quirales las cuales son imgenes especulares no su-
perponibles una de la otra son denominadas enantimeros.
Uno de los enantimeros desva la luz plano-polarizada
para la derecha (+) y es llamado de dextrgiro, o d; el ant-
poda desva para la izquierda (-) y es conocido como lev-
giro o l. El ngulo de ese desvi es igual en mdulo para
los enantimeros, sin embargo con seales opuestas.
Las propiedades fsico-qumicas de los enantimeros
como densidad, ndice de refraccin, momento dipolo-di-
polo, puntos de ebullicin y fusin son idnticas ya que el
ambiente qumico en el cual est insertado cada tomo es
igual para los enantimeros.
La polarimetra, eso es, la medicin del poder rotatorio de
una sustancia con polarmetro es uno de los mtodos ms
prcticos para distinguir los enantimeros y, por tanto, es
un importante criterio de identificacin, caracterizacin y
de determinacin de pureza enantiomrica de los frmacos.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
El poder rotatorio vara con la temperatura, el largo de
onda de la luz incidente, el solvente utilizado, la naturaleza
de la sustancia y su concentracin. Si la solucin contiene
dos sustancias pticamente activas y estas no reaccionasen
entre s, el ngulo de desvo ser la suma algebraica de los
ngulos de desvo de ambas.
Polarmetro
Histricamente, la polarimetra fue realizada utilizando un
instrumento en que el poder rotatorio es estimado por la
visualizacin de la intensidad de campos divididos. Por esa
razn, la lnea-D de la lmpara de sodio en el largo de onda
visible a 589 nm fue el ms frecuentemente utilizado. El
poder rotatorio especfico determinado en la lnea D est
expresado, la mayora de las veces, por el smbolo:
25 20
[a] ou[a]
D D
El uso de largos de onda ms bajos como los disponibles
con las lneas de lmpara de mercurio aislados por medio
de filtros de transmitancia mxima a cerca de 578, 546,
436, 405 y 365 nm en un polarmetro fotoelctrico mos-
traron mayor sensibilidad; consecuentemente hubo una re-
duccin en la concentracin de la sustancia en ensayo. En
general, el poder rotatorio observado en 436 nm es apro-
ximadamente el doble y en 365 nm es cerca de tres veces
mayor que en 589 nm.
Poder rotatorio y poder rotatorio especifico
La ecuacin general usada en polarimetra es:
t 100a
[a] =
lc
En que [] es el poder rotatorio especfico en el largo de
onda 1 y en la temperatura t, a es el poder rotatorio obser-
vado en grados (), l es el camino ptico en decmetros y
c es la concentracin de la sustancia en g por 100 ml. As,
[] es 100 veces para una solucin conteniendo 1 g en
100 ml en una clula con un camino ptico de 1,0 decme-
tro bajo condiciones definidas del largo de onda de la luz
incidente y de la temperatura.
Procedimiento
El poder rotatorio especfico de un frmaco es un valor de re-
ferencia y debe ser calculado a partir del poder rotatorio obser-
vado para la solucin de la muestra o para el lquido conforme
especificado en la monografa. Las medidas del poder rotato-
rio son realizadas a 589 nm a 20 C excepto cuando especifi-
cado. Siempre que un polarmetro fotoelctrico es usado, una
nica medida corregida por el blanco es realizada. Para un po-
larmetro visual es empleada la media de por lo menos cinco
determinaciones corregidas por el blanco. En ambos casos, el
solvente utilizado para el preparado de la solucin de la mues-
tra debe ser utilizado como blanco o el tubo vaco en el caso
de lquidos. La temperatura experimental debe ser mantenida
en 0,5 C en relacin al valor especificado. Usar el mismo
tubo del polarmetro en la misma orientacin angular para la

muestra y el blanco. Posicionar el tubo para que la luz pase
por l en la misma direccin cada vez.
El poder rotatorio de las soluciones debe ser determinado
dentro de 30 minutos despus de la preparacin. En los casos
en los cuales ocurren racemizacin o mutarrotacin todas
las condiciones deben ser estandarizadas desde el tiempo de
preparado de la solucin y el de medida en el polarmetro.
El poder rotatorio y el poder rotatorio especfico se refieren
a la sustancia seca, anhidra o exenta de solvente en todas
las monografas en que se proveen los valores de la hume-
dad, prdida por desecacin o contenido de solvente.
5.2.9 DETERMINACIN DE LA
PRDIDA POR DESECACIN
Este ensayo se destina a determinar la cantidad de sustan-
cia voltil de cualquier naturaleza eliminada en las condi-
ciones especificadas en la monografa. En el caso de ser el
agua la nica sustancia voltil, basta determinar su tenor
segn uno de los mtodos descritos en Determinacin de
agua (5.2.20).
Para los dems casos, el procedimiento adoptado es el des-
crito abajo, siendo el mtodo a ser adoptado especificado
en las monografas.
PROCEDIMIENTO
Mtodo Gravimtrico
Reducir la sustancia a polvo fino, caso se presente en la
forma de cristales voluminosos. Pesar, exactamente, cerca
de 1 a 2 g y transferir para pesafiltro chato previamente de-
secado durante 30 minutos en las mismas condiciones a ser
empleadas en la determinacin. Despus de enfriamiento
en desecador, pesar el pesafiltro, tapado, conteniendo la
muestra. Agitar el pesafiltro suavemente para distribuir la
muestra de la manera ms uniforme posible, a una altura
ideal de 5 mm. Colocar el pesafiltro en la estufa, retirar
la tapa, dejndola tambin en la estufa. Secar la muestra
(generalmente a 105 C) y por un determinado plazo (ge-
neralmente 2 horas) especificado en la monografa. Enfriar
hasta temperatura ambiente en desecador. Pesar. Repetir la
operacin hasta peso constante.
Observacin: En el caso de la sustancia fundir a una tempe-
ratura ms baja que la especificada para la determinacin,
mantener el pesafiltro con su contenido por 1 a 2 horas a la
temperatura de 5 a 10 C abajo del punto de fusin, antes
de secarla a la temperatura especificada. Cuando la sustan-
cia se descompone a temperatura de 105 C, ella debe ser
desecada en una temperatura ms baja. En ambos casos, se
puede realizar el secado a presin reducida, en desecador.
El porcentaje de prdida por desecacin est dado por la
ecuacin
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 91
en que
Pa = peso de la muestra,
Pu = peso del pesafiltro conteniendo la muestra antes de la
desecacin,
Ps = peso del pesafiltro conteniendo la muestra despus de
la desecacin.
Balanza por infrarrojo o utilizando lmpara halgena
El procedimiento debe ser realizado como a continuacin.
retirar la humedad del equipo;
pesar cerca de 1g de la sustancia a ser analizada y dis-
tribuir el material uniformemente en el colector de alu-
minio contenido dentro del aparato;
definir el tiempo y temperatura de secado segn des-
crito en la monografa de la respectiva sustancia. La
mayora de las veces, se utiliza un (1) minuto a 105 C.
accionar el aparato y anotar el valor de la humedad, en
porcentual, que aparecer en el display del aparato.
Termogravimetra
5
Proceder conforme descrito en Anlisis Trmico (5.2.27).
5.2.10 DETERMINACIN
DE CENIZAS SULFATADAS
(RESIDUO POR INCINERACIN)
Cenizas sulfatadas comprenden el residuo no voltil a la
incineracin en la presencia de cido sulfrico, conforme
la tcnica especificada. En general, el ensayo espera deter-
minar el tenor de constituyentes o impurezas inorgnicas
contenidos en sustancias orgnicas. Tambin se destina a
la determinacin de componentes inorgnicos en mezclas
y de la cantidad de impurezas contenidas en sustancias in-
orgnicas termolbiles.
PROCEDIMIENTO
Pesar exactamente de 1 a 2 g (o la cantidad especificada
en la monografa) de sustancia pulverizada, transferir para
crisol (como ejemplo: platino, porcelana, slice, cuarzo)
previamente calcinado, enfriado en desecador y tarado, y
aadir cerca de 1 ml de cido sulfrico. Calentar suave-
mente hasta carbonizacin en temperatura no superior a
600 C 50 C. Enfriar y aadir lentamente cerca de 1 ml
de cido sulfrico para humedecer el residuo, carbonizar e
incinerar con calentamiento gradual hasta 600 C 50 C.
Enfriar, pesar nuevamente e incinerar por 30 minutos ms.
Repita este procedimiento hasta que la diferencia entre dos
pesajes sucesivos no sea mayor que 0,5 mg. Un equipo ca-
librado, por ejemplo mufla, debe ser utilizado para el con-
trol de la temperatura. Calcular el porcentaje de cenizas
sulfatadas con relacin a la sustancia en ensayo, utilizando
el siguiente clculo:
Cenizas sulfatadas
en que:
 92 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

P1 = Peso del crisol despus de la calcinacin y enfriamien- para el tamiz superior, distribuyendo uniformemente el
to (tara del crisol); polvo. Tapar el conjunto.
P2 = Peso del crisol con muestra despus de la calcinacin
y enfriamiento en desecador; Accionar el aparato, por cerca de 15 minutos, con vibra-
P3 = Peso de la muestra inicial cin adecuada. Despus del trmino de este tiempo, utili-
100 = Factor de porcentaje. zando un pincel adecuado, retirar toda la muestra retenida
en la superficie superior de cada malla para un papel imper-
5.2.11 DETERMINACIN DE meable, y pesar el polvo. Pesar tambin el polvo retenido
en el colector.
LA GRANULOMETRA DE LOS
POLVOS Calcular el porcentual retenido en cada tamiz, utilizando el
siguiente clculo:
El grado de divisin o la granulometra de polvos est expre-
sado por la referencia a la abertura nominal de la malla del
tamiz utilizado. Los tamices empleados son de acero inoxida-
ble, latn, no siendo permitido el revestimiento de los hilos. donde:

En la descripcin de los polvos son utilizados los trminos
abajo:
Polvo grueso aquel cuyas partculas pasan en su totalidad
por el tamiz con abertura nominal de malla de 1,70 mm y,
como mximo, 40% por el tamiz con abertura nominal de
P1 = Peso de la muestra retenida en cada tamiz (en gramos);
P2 = Suma de los pesos retenidos en cada tamiz y en el
colector (en gramos);
100 = Factor de porcentaje.
Tabla 1 - Abertura de malla de los tamices.

5
malla de 355m.
Nmero del tamiz
Orificio del tamiz
Polvo moderadamente grueso aquel cuyas partculas pa- (ABNT/ ASTM)
san en su totalidad por el tamiz con abertura nominal de 2 9,5 mm
malla de 710 m y, como mximo, 40% por el tamiz con 3,5 5,6 mm
abertura nominal de malla de 250 m. 4 4,75 mm
8 2,36 mm
Polvo semifino aquel cuyas partculas pasan en su totali- 10 2 mm
dad por el tamiz de abertura nominal de malla de 355 m 20 850 m
y, como mximo, 40% por el tamiz con abertura nominal 30 600 m
de malla de 180 m. 40 425 m
50 300 m
Polvo fino aquel cuyas partculas pasan en su totalidad 60 250 m
por el tamiz con abertura nominal de malla de 180 m. 70 212 m
80 180 m
Polvo finsimo aquel cuyas partculas pasan en su totali- 100 150 m
dad por el tamiz con abertura nominal de malla de 125 m. 120 125 m
200 75 m
La determinacin de la granulometra de polvos es hecha
230 63 m
por el proceso descrito abajo, con el auxilio de tamices, cu-
270 53 m
yas caractersticas estn estandarizadas en la tabla anexa.
325 45 m
PROCEDIMIENTO 400 38 m
500 25 m
La granulometra es determinada con el auxilio de tamices 635 20 m
operados por dispositivo mecnico. Este tipo de dispositivo _____________
reproduce los movimientos horizontales y verticales de la * El nmero del tamiz corresponde a la clasificacin de la Asociacin
Brasilea de Normas Tcnicas ABNT (1984), ISO 33101:2000.
operacin manual, a travs de la accin mecnica uniforme.
Para utilizar este dispositivo, proceda de la siguiente forma:
5.2.12 COLOR DE LQUIDOS
Separar, por lo menos, 4 tamices que estn descritos en la
Tabla 1, de acuerdo con las caractersticas de la muestra. La evaluacin del color de lquidos es ejecutada por com-
Montar el conjunto con el tamiz de mayor abertura sobre paracin de la solucin bajo anlisis preparada confor-
el de abertura menor. Colocar el conjunto sobre el receptor me instrucciones de la monografa y soluciones estndar
de tamices. de color (SC). Tales soluciones encuentran empleo como
referencia para algunos frmacos y en pruebas de carbo-
Pesar cerca de 25 g de la muestra (dependiendo de la natu- nizacin con cido sulfrico especificado en diversas mo-
raleza del material, densidad del polvo o grnulo y del di- nografas.
metro de los tamices a ser utilizados). Transferir la muestra

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 93

El proceso comparativo, salvo especificacin contraria,
debe ser ejecutado en tubos de ensayo de vidrio transpa-
rente y fondo chato, con dimetro de 16 mm, del tipo em-
pleado en ensayo lmite de impurezas. Los tubos deben ser
los ms uniformes posibles.
de tiosulfato de sodio 0,1 M SV equivale a 24,97 mg de Cu-
SO4.5H2O. Ajustar el volumen de la solucin adicionando
cantidad suficiente de mezcla de cido clorhdrico y agua
para obtener solucin conteniendo exactamente 62,4 mg de
CuSO4.5H2O por ml de solucin.

Para la evaluacin, utilizar volmenes de 10 ml tanto para
la preparacin muestra como para la preparacin estndar,
asegurando altura aproximada de 50 mm para los lquidos
en los tubos. Observar los tubos transversalmente contra
fondo blanco, bajo luz difusa. Es importante comparar las
soluciones en las mismas condiciones, inclusive de tempe-
ratura (25 C).
La preparacin muestra es preparada para presentar colo-
racin semejante a la de la preparacin de referencia espe-
cificada.
ESTNDARES BSICOS
Las soluciones de referencia de color (SC) son obtenidas
a partir de tres soluciones bsicas, a ser preparadas y al-
macenadas en frascos hermticos. De esas con base en
Solucin base de cloruro frrico
Preparar solucin de 25 ml de cido clorhdrico y 975 ml
de agua. Disolver cerca de 55 g de cloruro frrico (Fe-
Cl3.6H2O) en aproximadamente 900 ml de esa solucin y
completar el volumen para 1000 ml con la misma solucin.
Transferir, utilizando pipeta, 10 ml de esa solucin para
frasco de yodo de 250 ml, aadir 15 ml de agua, 3 g de
yoduro de potasio y 5 ml de cido clorhdrico. Dejar en
reposo durante 15 minutos. Completar el volumen de la
solucin para 100 ml con agua y titular el yodo liberado
con tiosulfato de sodio 0,1 M SV, juntando 3 ml de almidn
SI como indicador. Corregir el volumen de titulante consu-
mido por determinacin en blanco. Cada ml de tiosulfato
de sodio 0.1 M SV equivale a 27,03 mg de FeCl3 6H2O.
Ajustar el volumen de la solucin adicionando cantidad
suficiente de solucin de cido clorhdrico y agua para ob-

5
la Tabla 1, conteniendo indicaciones de volmenes para tener solucin conteniendo exactamente 45,0 mg de FeCI3
la preparacin de 20 soluciones estndar de color (SC) de- 6H2O por ml de solucin.
signadas con las letras del alfabeto, de A a T preparar la
solucin o soluciones especificadas para la comparacin. Tabla 2 - Tabla 1 Composicin de las
Transferir los volmenes indicados (dejar el agua por l- soluciones-estndar de color (SC).
timo) y homogeneizar, directamente, en los tubos de com-
paracin. Partes de
Solucin Solucin Solucin
Solucin base de cloruro de cobalto II Agua,
SC base de base de base de
para
cloruro de cloruro sulfato
Preparar solucin de 25 ml de cido clorhdrico y 975 ml completar
cobalto II, frrico, en cprico,
de agua. Disolver 65 g de cloruro de cobalto (II) en aproxi- 10 ml.
en ml ml en ml
madamente 900 ml de esa solucin y completar el volumen
para 1000 ml con el mismo solvente. Transferir, usando A 0,1 0,4 0,1 4,4
pipeta, 5 ml de esa solucin para frasco de yodo de 250 ml, B 0,3 0,9 0,3 8,5
juntar 5 ml de perxido de hidrgeno SR y 15 ml de hi- C 0,1 0,6 0,1 4,2
drxido de sodio 5 M. Hervir durante diez minutos, enfriar D 0,3 0,6 0,4 3,7
y aadir 2 g de yoduro de potasio y 20 ml de cido sulfrico Y 0,4 1,2 0,3 3,1
0,26 M. Titular con tiosulfato de sodio 0,1 M SV, juntando F 0,3 1,2 0,0 3,5
3 ml de almidn SI como indicador. Corregir el volumen G 0,5 1,2 0,2 3,1
de titulante consumido por determinacin en blanco. Cada H 0,2 1,5 0,0 3,3
ml de tiosulfato de sodio 0,1 M SV equivale a 23,79 mg de I 0,4 2,2 0,1 2,3
CoCl2.6H2O. Ajustar el volumen de la solucin adicionan- J 0,4 3,5 0,1 1,0
do cantidad suficiente de solucin de cido clorhdrico y K 0,5 4,5 0,0 0,0
agua para obtener solucin conteniendo exactamente 59,5 L 0,8 3,8 0,1 0,3
mg de CoCl2.6H2O por ml de solucin. M 0,1 2,0 0,1 2,8
N 0,0 4,9 0,1 0,0
Solucin base de sulfato cprico El 0,1 4,8 0,1 0,0
P 0,2 0,4 0,1 4,3
Preparar solucin de 25 ml de cido clorhdrico y 975 ml
Q 0,2 0,3 0,1 4,4
de agua. Disolver 65 g de sulfato cprico (CuSO4.5H2O)
R 0,3 0,4 0,2 4,1
en 900 ml de esa solucin y completar el volumen para
S 0,2 0,1 0,0 4,7
1000 ml con la misma solucin. Transferir, usando pipe-
ta, 10 ml de esa solucin para frasco de yodo de 250 ml, T 0,5 0,5 0,4 3,6
juntar 40 ml de agua, 4 ml de cido actico glacial, 3 g de
yoduro de potasio y 5 ml de cido clorhdrico. Titular el
yodo liberado con tiosulfato de sodio 0,1 M SV, juntando 3
ml de almidn SI como indicador. Corregir el volumen de
titulante consumido por determinacin en blanco. Cada ml

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 94 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
5.2.13 ESPECTROMETRA
ATMICA
5.2.13.1 ESPECTROMETRA DE
ABSORCIN ATMICA
La espectrometra de absorcin atmica es utilizada para
la determinacin de diversos elementos de la tabla peri-
dica y consiste, bsicamente, de cuatro tcnicas: absorcin
atmica con llama, generacin de hidruros, generacin
de vapor fro y horno de grafito. Las tcnicas que utilizan
llama y horno de grafito como atomizadores permiten la
determinacin de cerca de 70 elementos siendo la mayora
metales. La tcnica de generacin de hidruros permite la
determinacin de arsnico, antimonio, selenio, bismuto,
telurio, plomo, indio, estao, germanio y talio; ya la ge-
neracin de vapor fro es utilizada, bsicamente, para la
determinacin de mercurio.
Para la determinacin de la concentracin del analito por
absorcin atmica, la radiacin de una fuente de largo de
onda especfico de acuerdo con el elemento analizado in-
5
cide bajo el vapor atmico conteniendo tomos libres de
ese elemento en el estado fundamental. La atenuacin de
la radiacin es proporcional a la concentracin del analito
segn la ley de Lambert-Beer.
La instrumentacin para absorcin atmica consiste, bsi-
camente, de fuente de radiacin, atomizador, monocroma-
dor, detector y sistema de procesamiento de datos. Como
fuentes de luz se utilizan lmparas de ctodo hueco y lm-
paras de descarga sin electrodo que emiten radiacin inten-
sa de mismo largo de onda que la adsorbida por el elemen-
to a ser determinado. El atomizador puede ser constituido
de una llama o un horno de grafito. El monocromador es
responsable de la separacin del largo de onda deseado. La
radiacin incide en el monocromador por una ranura es-
trecha; en seguida, es separada en sus diferentes largos de
onda en una red de difraccin y, posteriormente, dirigida al
detector. El detector, generalmente, es un fotomultiplica-
dor, que transforma la energa luminosa en corriente elc-
trica, la cual es amplificada y, posteriormente, interpretada
por un sistema de lectura.
PROCEDIMIENTO
Para operar los espectrmetros de absorcin atmica, se
recomienda seguir las instrucciones del fabricante. Las de-
terminaciones son hechas por comparacin con soluciones
de referencia conteniendo concentraciones conocidas del
analito. Las determinaciones pueden ser efectuadas por el
Mtodo de calibracin directa (Mtodo I) o por el Mtodo
de adicin estndar (Mtodo II). Se recomienda el Mtodo
I, salvo cuando especificado.
Mtodo de calibracin directa (Mtodo I): preparar como
mnimo cuatro soluciones de referencia del elemento a ser
determinado utilizando la banda de concentracin reco-
mendada por el fabricante del equipo para el analito. Todos
los reactivos empleados en el preparado de la muestra de-
ben ser igualmente incluidos, en las mismas concentracio-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
nes, en el preparado de las soluciones de referencia. Des-
pus de la calibracin del equipo con solvente, introducir
en el atomizador tres veces cada una de las soluciones de
referencia y, despus de la lectura, registrar el resultado.
Lavar el sistema de introduccin de la muestra con agua
despus de cada operacin. Trazar la curva analtica para
el promedio de las absorbancias de las tres lecturas para
cada solucin referencia con la respectiva concentracin.
Preparar la muestra conforme indicado en la monografa
ajustando su concentracin para que esta se site en la ban-
da de concentracin de las soluciones de referencia para el
analito. Introducir la muestra en el atomizador, registrar la
lectura y lavar el sistema de introduccin de la muestra con
agua. Repetir esa secuencia dos veces. Determinar la con-
centracin del elemento por la curva analtica utilizando el
promedio de las tres lecturas.
Mtodo de adicin estndar (Mtodo II): aadir a, como
mnimo, cuatro balones volumtricos volmenes iguales
de la solucin de la sustancia a ser determinada preparada
conforme indicado en la monografa. A los balones, ex-
cepto en uno, aadir volmenes determinados de la solu-
cin de referencia especificada para obtener una serie de
soluciones conteniendo cantidades crecientes del analito.
Completar el volumen de cada baln con agua. Despus de
calibrar el espectrmetro con agua, registrar tres veces las
lecturas de cada solucin. Trazar la curva analtica para el
promedio de las absorbancias de las tres lecturas para cada
solucin frente a la respectiva cantidad del analito adicio-
nada a la solucin. Registrar la cantidad del analito en m-
dulo en la muestra por extrapolacin de la curva analtica
en el eje de las abscisas.
5.2.13.1.1 Espectrometra de absorcin atmica
con llama
El sistema consiste de una cmara de pre-mezcla en la
cual el combustible y el oxidante son mezclados y del
quemador que recibe la mezcla combustible-oxidante.
La solucin es introducida a travs de un nebulizador
neumtico, en el cual es generado un fino aerosol que
es conducido hasta la llama. La cantidad de energa que
puede ser suministrada por la llama para la disociacin
y atomizacin de la muestra es proporcional a la tempe-
ratura. Si una llama de baja temperatura es utilizada, la
solucin puede no ser convertida en tomos neutros. Por
otro lado, si una llama con temperatura muy elevada es
empleada podr ocurrir la formacin de gran cantidad de
iones que no absorben radiacin de la fuente. A travs de
la modificacin de la proporcin de oxidante y combus-
tible utilizados para cada tipo de llama, es posible alterar
significativamente su temperatura. Las llamas ms popu-
larmente utilizadas son las producidas por aire acetileno
(2100 2400 C) y acetileno xido nitroso (2650 2850
C). La mezcla aire acetileno es utilizada para elementos
con temperaturas de atomizacin inferiores como Na, K,
Mg, Cd, Zn, Cu, Mn, Co, etc. La llama generada por ace-
tileno xido nitroso es aplicada a elementos refractarios
como Al, V, Ti, Si, U, entre otros.

INTERFERENCIAS
Interferencias fsicas: la utilizacin de la preparacin
muestra con propiedades fsicas como viscosidad y tensin
superficial diferentes de la preparacin estndar puede re-
sultar en diferencias con relacin a la aspiracin y nebuli-
zacin levando a lecturas incorrectas. Se debe siempre que
posible utilizar las preparaciones con las mismas propieda-
des fsicas y constituyentes de matriz.
Interferencia de ionizacin: ocurre, normalmente, para
elementos alcalinos y alcalinos terrosos que son fcil-
mente ionizables. Cuanto mayor el grado de ionizacin
menor la absorbancia. Para minimizar interferencias de
ionizacin, es posible utilizar llamas con temperaturas
ms bajas o usar supresores de ionizacin que son ele-
mentos como el cesio que se ionizan ms fcilmente que
el analito aumentando, as, el nmero de tomos en el
estado fundamental.
Interferencias qumicas: la formacin de compuestos tr-
micamente estables en la llama como los xidos de algunos
elementos (Ca, Ti, Cr, V, Al, etc) reduce la poblacin de
tomos en el estado fundamental. Eso puede ser resuelto
por el aumento de la temperatura de la llama lo que resulta
en la disociacin de estos compuestos. Otra posibilidad es
la utilizacin de un agente supresor o libertador que
posee mayor afinidad por el oxgeno en relacin al analito
evitando la formacin de los xidos. La solucin conte-
niendo cloruro de cesio y cloruro de lantano, Solucin de
Schinkel, es la ms comnmente empleada.
Interferencias espectrales: ocurren por medio de la absor-
cin o esparcimiento de la radiacin seleccionada para el
analito. Las interferencias espectrales causadas por tomos
son poco comunes y pueden ser resueltas alterando la lnea
espectral utilizada. Las interferencias causadas por espe-
cies moleculares son ms graves pero, normalmente, son
contornadas a travs de la correccin de fondo.
5.2.13.1.2 Espectrometra de absorcin atmica
con generacin de hidruros
La espectrometra de absorcin atmica con generacin
de hidruros es una tcnica utilizada para la determina-
cin de elementos formadores de hidruros voltiles ms
comnmente para As, Se, Sb, Bi, Ge, Sn, Pb y Te. El pro-
ceso es constituido de tres etapas principales: generacin,
transporte y atomizacin de los hidruros. El sistema pue-
de ser construido en discontinuo o en flujo. La genera-
cin de los hidruros consiste de la reaccin del analito,
normalmente en medio cido, con un reductor (NaBH4).
El transporte de los hidruros del frasco de reaccin hasta
la celda de cuarzo est hecho a travs de un gas inerte de
arrastre tal como argn o nitrgeno. Para elementos que
absorben en largo de onda inferior a 200 nm, antes de
la etapa de generacin de los hidruros, se debe efectuar
una purga para eliminacin de los gases atmosfricos a
fin de evitar que esos gases absorban la radiacin de la
fuente. La atomizacin est hecha en una celda de cuar-
zo calentada elctricamente o con un quemador tpico de
sistemas de atomizacin con llama; la temperatura interna
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 95
de la celda es de 850 a 1000 C. La seal obtenida, nor-
malmente, es del tipo transitoria; cerca de 20 segundos
son necesarios para total integracin de la seal para casi
todos los elementos.
INTERFERENCIAS
Influencia del Estado de Oxidacin: los analitos poseen,
normalmente, ms de un estado de oxidacin. Arsnico y
antimonio, por ejemplo, poseen estados de oxidacin III y
V y selenio y telurio poseen estados de oxidacin IV y VI,
respectivamente. Los estados de oxidacin superiores, en
general, son inertes para la conversin a hidruros voltiles;
es necesaria, por tanto, la pre-reduccin antes de la deter-
minacin en esos casos.
Elementos Formadores de Hidruros: interferencias mutuas
pueden ocurrir entre los elementos formadores de hidruros,
como por ejemplo, entre arsnico y selenio. En esos casos,
la cintica de volatilizacin y atomizacin es decisiva en
el proceso.
Elementos de Transicin: algunos iones metlicos como
5
Cu2+ y Ni2+, si estn presentes en elevadas concentracio-
nes, son reducidos formando precipitados que pueden ad-
sorber los hidruros voltiles.
5.2.13.1.3 Espectrometra de absorcin atmica
con generacin de vapor fro
La espectrometra de absorcin atmica con generacin
de vapor fro es utilizada para la determinacin de mercu-
rio. El equipo y los reactivos son los mismos utilizados en
el sistema de generacin de hidruros, sin embargo la cel-
da de cuarzo no precisa ser calentada, pues el mercurio es
reducido a mercurio metlico que es voltil a temperatura
ambiente. Sin embargo, vapor de agua puede ser transpor-
tado por el gas de arrastre e interferir en la determinacin.
Para solucionar ese problema, se utiliza una lmpara de
infrarrojo para calentar la celda de cuarzo, previniendo
la condensacin de vapor de agua. En ese caso, normal-
mente no es necesario efectuar la purga, pues el largo de
onda utilizado para la determinacin de Hg es 253,7 nm
en el cual es rara la absorcin de radiacin por gases de
la atmsfera.
5.2.13.1.4 Espectrometra de absorcin atmica
con horno de grafito
La espectrometra de absorcin atmica con horno de gra-
fito es una tcnica amplia que posee elevada sensibilidad.
El horno consiste de un tubo de grafito de 3 a 5 cm de largo
y de 3 a 8 mm de dimetro revestido con grafito piroltico.
La cantidad de muestra inyectada en el horno vara de 5
L a 50 L y es generalmente introducida por un sistema
automatizado. El horno es calentado elctricamente a tra-
vs del paso de corriente elctrica de modo longitudinal o
transversal. Flujos de gases inertes como argn son man-
tenidos externamente e internamente para evitar la com-
bustin del horno. Adems de eso, el flujo interno expulsa
el aire atmosfrico del horno y tambin los vapores gene-
rados durante las etapas de secado y pirlisis. Un horno
 96 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
de grafito presenta durabilidad de, aproximadamente, 300
ciclos dependiendo del modelo.
El anlisis con el horno de grafito puede ser dividido en las
siguientes etapas: secado de la muestra, pirlisis, atomiza-
cin y limpieza. El paso de una etapa para otra est marca-
do por el aumento de la temperatura, por tanto un programa
especial de calentamiento debe ser planeado. Primeramen-
te es realizado el secado de la muestra; en esa etapa los
solventes y cidos residuales son evaporados. Despus del
secado, la temperatura es elevada para eliminacin de la
matriz (etapa de pirlisis). En seguida, el aumento de la
temperatura lleva a la atomizacin del analito para poste-
rior cuantificacin. Finalmente es realizada la limpieza del
horno en alta temperatura (p. ej. 2600 C) durante pocos
segundos. La temperatura y la duracin de cada etapa de
calentamiento pueden ser controladas; eso es esencial para
el desarrollo de metodologas analticas.
Curvas de atomizacin y pirlisis son usadas para optimi-
zacin de las temperaturas para tales procesos. La curva
de pirlisis permite determinar la temperatura mxima en
que no ocurre prdida del analito. La curva de atomizacin
5
permite determinar la temperatura mnima de atomizacin
del analito con adecuada sensibilidad. Se recomienda que
las curvas de pirlisis y atomizacin sean hechas siempre
que una muestra desconocida sea analizada.
El proceso de atomizacin en un horno de grafito es com-
plejo y depende de varios factores como el material del
horno y de la plataforma, la atmsfera dentro del tubo, la
velocidad de calentamiento, la temperatura y la naturaleza
de las sustancias. Para la obtencin de mejores resultados
se recomienda el uso de la plataforma de LVov en el inte-
rior del tubo y calentamiento transversal. La seal obtenida
es del tipo transitoria; son necesarios, como mximo, 12
segundos para la integracin de la seal.
INTERFERENCIAS
Interferencias espectrales: interferencias causadas por so-
breposiciones de lneas entre tomos son poco comunes.
La atenuacin del haz de radiacin por especies generadas
durante el proceso de atomizacin derivados de la matriz
es ms frecuente. Para solucionar tal problema se debe eli-
minar eficientemente la matriz. El uso de un modificador
de matriz y de un corrector de fondo son esenciales para la
confiabilidad de los resultados.
Formacin de sustancias voltiles: en muestras con eleva-
dos contenidos de halgenos (especialmente Cl) existe la
posibilidad de formacin de sustancias voltiles del analito
que podrn ser perdidas en temperaturas bajas ocasionando
un error en el anlisis. En ese caso, el uso de un modifi-
cador qumico capaz de formar complejos trmicamente
estables con el analito minimiza la formacin de sustancias
voltiles. Adems de eso, cuando el modificador qumico
es combinado con la plataforma de Lvov, los efectos de
interferencia de matriz son bastante reducidos. Es impor-
tante resaltar que un determinado modificador qumico
puede ser muy eficaz para algunos elementos, sin embargo
ineficiente para otros.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
5.2.13.2 ESPECTROMETRA DE EMISIN
ATMICA
Espectrometra de emisin atmica es el mtodo que per-
mite determinar la concentracin de un elemento en una
muestra por la medida de la intensidad de una de las lneas
de emisin del elemento. La determinacin es hecha en el
largo de onda correspondiente a esa lnea de emisin. Las
fuentes de emisin en espectrometra de emisin atmica
deben poseer energa para generar tomos neutros y para
excitar los elementos de inters.
5.2.13.2.1 Fotometra de llama
La Fotometra de llama es una tcnica que presenta buena
sensibilidad siendo utilizada, principalmente, para la deter-
minacin de metales alcalinos. El equipo consiste de una
llama normalmente producida por mezcla aire-gas licuado
de petrleo, un monocromador y un detector. El solvente
de eleccin para el preparado de la solucin muestra y so-
luciones de referencia debe ser, preferentemente, acuoso.
Los solventes orgnicos pueden ser usados, siempre que no
interfiera en la estabilidad de la llama.
INTERFERENCIAS
Las interferencias que ocurren en la Fotometra de llama
son muy semejantes a las observadas en la Espectrome-
tra de absorcin atmica (5.2.13.1). Sin embargo, pueden
ocurrir interferencias espectrales causadas por la emisin
de bandas de rotacin vibracin molecular, tales como OH
(310-330 nm), NH (en torno de 340 nm), N2+ (en torno de
390 nm), C2 (en torno de 450 nm), etc.
SOLVENTES
El solvente debe ser seleccionado con cautela. Si hubie-
re diferencia significativa de tensin superficial o visco-
sidad entre muestra y solucin de referencia ocurrirn
variaciones en las tasas de aspiracin y nebulizacin y,
en consecuencia, diferencias significativas en las seales
producidas. As, el solvente empleado en el preparado de
las muestras y de las referencias debe ser el ms similar
posible.
PROCEDIMIENTO
El equipo debe ser operado de acuerdo con las instruccio-
nes del fabricante y en el largo de onda especificado. Ajus-
tar el cero con el solvente. En seguida, inyectar la solucin
de referencia ms concentrada y ajustar la sensibilidad de-
seada. Las determinaciones son hechas por comparacin
con soluciones de referencia conteniendo concentraciones
conocidas del analito. Las determinaciones pueden ser
realizadas por el Mtodo de calibracin directa (Mtodo
I) o por el Mtodo de adicin estndar (Mtodo II) con-
forme descrito en Espectrometra de absorcin atmica
(5.2.13.1).

5.2.13.2.2 Espectrometra de emisin ptica con
plasma inductivamente acoplado
La espectrometra de emisin ptica con plasma inductiva-
mente acoplado es una tcnica bastante amplia que posee
elevada sensibilidad y con caracterstica multielementar.
De manera general, en la espectrometra con plasma induc-
tivamente acoplado, el aerosol de la muestra es introducido
en una fuente de plasma, donde es evaporado y disociado
en tomos y iones libres que son excitados. El plasma con-
siste de un gas parcialmente ionizado de elevada tempera-
tura (6000 a 10 000 C), elctricamente neutro y con buena
conductividad elctrica. Debido a la alta temperatura del
plasma es generada una radiacin policromtica derivada
de la emisin de varios elementos e iones presentes en la
muestra. Por tanto, es necesario el uso de un monocroma-
dor con elevada capacidad de resolucin para separacin
de los largos de onda caractersticos para cada elemento.
La deteccin de la radiacin generada por largos de onda
especficos puede ser aplicada para anlisis cualitativo y
las intensidades de estos largos de onda pueden ser usadas
para anlisis cuantitativo.
INSTRUMENTACIN
Los instrumentos utilizados en la espectrometra con plas-
ma inductivamente acoplado consisten bsicamente del ge-
nerador y del procesador de seal. El generador es formado
por fuente plasma y sistema de introduccin de muestra
(bomba propulsora y nebulizador). El procesador de seal
es comprendido por sistemas pticos y electrnicos y uni-
dad de adquisicin de datos.
Fuentes de plasma: la ms comn es el plasma inductiva-
mente acoplado. El plasma es generado en una antorcha
que consiste en tres tubos concntricos generalmente de
cuarzo. Flujos de gas generalmente argn son mantenidos
en los tres compartimientos formados por los tubos con-
cntricos. En el compartimiento externo, el gas es utilizado
para la formacin del plasma. El compartimiento interme-
dio carga el gas auxiliar que es responsable de mantener
el plasma alejado del compartimiento interno y prevenir
deposicin de carbono y sales provenientes de la muestra
en ese compartimiento. El flujo de argn interno carga el
aerosol de la muestra para el centro del plasma. Cuando
una determinada potencia (entre 700 y 1500 W) es apli-
cada por el generador de radiofrecuencia en la bobina de
induccin una corriente alternada es generada en la bobina
en una frecuencia de 27 o 40 MHz. Esa oscilacin en la
bobina resulta en un intenso campo electromagntico en
la extremidad de la antorcha. Con el argn fluyendo por la
antorcha una descarga elctrica de alto voltaje es aplicada
en el gas generando electrones e iones argn. Los electro-
nes son acelerados por el campo magntico y chocan con
ms tomos de argn generando ms iones y electrones.
La ionizacin del argn contina en una reaccin en cade-
na generando el plasma que consiste de tomos de argn,
electrones y iones argn.
Sistema de deteccin para espectrometra de Emisin p-
tica con Plasma Inductivamente Acoplado: todos los ele-
mentos presentes en el plasma emiten radiacin al mismo
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 97
tiempo, luego es necesario el uso de un sistema de detec-
cin multielementar. Los espectrmetros pueden ser simul-
tneos o secuenciales. Para a espectrometra de emisin
ptica con plasma inductivamente acoplado, tanto los
espectrmetros secuenciales cuanto los simultneos son
ampliamente utilizados. A configuracin ms comn para
espectrmetros secuenciales es a Czerny-Turner. Ya los es-
pectrmetros simultneos son encontrados, bsicamente,
con las configuraciones Echelle y Paschen-Runge.
INTERFERENCIAS
La sobreposicin de las lneas de emisin es una de las
principales interferencias para espectrometra de emisin
ptica con plasma inductivamente acoplado. Este tipo de
interferencia puede ser eliminada con el uso de espectr-
metros de alta resolucin y procedimientos de correccin
de fondo. Muchas interferencias espectrales son observa-
das en la banda de 200 a 400 nm, en la cual ms de 200
000 lneas de emisin atmica y bandas moleculares son
observadas.
Las interferencias fsicas son semejantes a aquellas en Es-
5
pectrometra de absorcin atmica con llama (5.2.13.1.1).
SOLVENTES
El solvente ideal para la espectrometra de emisin ptica
con plasma inductivamente acoplado interfiere lo menos
posible en los procesos de emisin. El tipo de solven-
te debe ser seleccionado con cautela. Si hubiere diferen-
cia significativa de tensin superficial o viscosidad entre
muestra y solucin de referencia, ocurrirn variaciones en
las velocidades de aspiracin y nebulizacin y, en conse-
cuencia, diferencias significativas en las seales produci-
das. As, los solventes empleados en el preparado de las
muestras y de las soluciones de referencia deben ser lo ms
similar posible.
PROCEDIMIENTO
El equipo debe ser operado de acuerdo con las instruc-
ciones del fabricante y en el largo de onda adecuado para
cada elemento. Las determinaciones son hechas por com-
paracin con soluciones de referencia conteniendo concen-
traciones conocidas de los analitos. Las determinaciones
pueden ser hechas por el Mtodo de calibracin directa
(Mtodo I) o por el Mtodo de adicin estndar (Mtodo
II) conforme descrito en Espectrometra de absorcin at-
mica (5.2.13.1).
5.2.13.3 ESPECTROMETRA DE MASAS
CON PLASMA INDUCTIVAMENTE
ACOPLADO
La espectrometra de masas con plasma inductivamente
acoplado es utilizada para la determinacin de diversos
elementos con elevada sensibilidad, en la banda de ppt, y
con capacidad multielementar.
 98 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
INSTRUMENTACIN
As como en la espectrometra de emisin ptica con plas-
ma inductivamente acoplado (5.2.13.2.2), la espectrome-
tra de masas con plasma inductivamente acoplado con-
siste de dos unidades principales: el generador de seal y
el procesador de seal. La diferencia fundamental es que
en la espectrometra de masas con plasma inductivamente
acoplado el procesador de seal es comprendido por una
interfaz, un separador de masa y una unidad de adquisi-
cin de datos. La interfaz es responsable del muestreo y
el transporte eficiente de los iones del plasma a presin
atmosfrica (760 Torr) hasta el separador de masa (10-6
Torr) es hecha por la reduccin de presin a travs de la
aplicacin de vaco. La interfaz consiste en dos conos me-
tlicos con orificios muy pequeos (de 1 mm de dimetro).
Despus de la generacin de los iones en el plasma, ellos
pasan por el primer cono (cono de muestreo) y, luego des-
pus de, por el segundo cono (skimmer). Despus del paso
de los iones por el skimmer, debido a la expansin, hay
necesidad de que los mismos sean centrados para garanti-
zar su llegada hasta el analizador de masas. Los iones son
enfocados por la accin de una lente inica o conjunto de
5
lentes inicas, que consiste de un cilindro (o una serie de
cilindros o placas perforadas) metlico hueco sometido a
una diferencia de potencial (normalmente en la banda de
2 a 15 V de corriente continua). Gran parte de los espec-
trmetros de masas con plasma inductivamente acoplado
comercializados actualmente utiliza el cuadrupolo como
separador de masas. El cuadrupolo consiste en cuatro ba-
rras metlicas cilndricas o hiperblicas de mismo largo y
dimetro. Por la aplicacin combinada de corriente conti-
nua (cc) y de corriente alternada (ca) a los electrodos (cua-
drupolo), solamente los iones con una determinada razn
masa/carga (m/z) son conducidos a travs del cuadrupolo.
Los dems iones chocan con los electrodos o son retirados
del interior del cuadrupolo. De esta forma, los iones son
secuencialmente separados por el cuadrupolo. Varios tipos
de detectores pueden ser utilizados para recoger los iones
en la salida del cuadrupolo y convertir en seal elctrico,
pero los ms populares son los de dinodos discretos, vaso
de Faraday (Faraday Cup) y Chaneltron.
INTERFERENCIAS
As como en otras tcnicas espectromtricas, la espectro-
metra de masas con plasma inductivamente acoplado po-
see interferencias espectrales y no espectrales. Las interfe-
rencias espectrales son dependientes de la especie presente
y pueden ser divididas en cuatro tipos principales: poliat-
micas, isobricas, iones de carga doble y iones de xidos
refractarios. Este tipo de interferencia puede ser corregida
por la simulacin de la composicin de la matriz, por la
eleccin de otro istopo (cuando posible) o por el uso de
celda de reaccin y/o colisin. En algunos casos, las inter-
ferencias espectrales pueden ser corregidas con el uso de
un programa de computadora apropiado.
Las interferencias no espectrales pueden surgir por varios
motivos: deposicin sobre los conos de la interfaz, presen-
cia de otro elemento fcilmente ionizable, efecto espacio
carga, entre otros. Sin embargo, la mayora de las inter-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
ferencias no-espectrales puede ser corregida por el uso de
estndar interno. En este caso, el estndar interno debe po-
seer razn masa/ carga y potencial de ionizacin semejan-
te al analito. Escandio y Rodio, por ejemplo, son amplia-
mente utilizados como estndar interno para elementos con
baja y alta razn masa/carga, respectivamente.
SOLVENTES
El solvente ideal para la espectrometra de masas con plas-
ma inductivamente acoplado debe interferir lo menos posi-
ble en los procesos de ionizacin. El tipo de solvente debe
ser seleccionado con cautela. Se hubiere diferencia signi-
ficativa de tensin superficial o viscosidad entre muestra y
solucin de referencia, ocurrirn variaciones en las velo-
cidades de aspiracin y nebulizacin y, en consecuencia,
diferencias significativas en las seales producidas. As,
los solventes empleados en el preparado de las muestras
y de las soluciones de referencia deben ser lo ms similar
posible.
PROCEDIMIENTO
El equipo debe ser operado de acuerdo con las instruc-
ciones del fabricante y con el istopo adecuado para cada
elemento. Ajustar el cero con el solvente inyectado en el
equipo. Las determinaciones son hechas por comparacin
con soluciones de referencia, conteniendo concentraciones
conocidas de los analitos. Las determinaciones pueden ser
hechas por el Mtodo de Calibracin Directa (Mtodo I),
por el Mtodo de Adicin Estndar (Mtodo II) o por el
Mtodo de Estndar Interno (Mtodo III).
Mtodo de Calibracin Directa (Mtodo I). Preparar al
menos cuatro soluciones de referencia de los analitos, cu-
briendo la banda de concentraciones recomendada por el
fabricante del equipo para los elementos en anlisis. To-
dos los reactivos empleados en el preparado de la solucin
muestra deben ser igualmente incluidos, en las mismas
concentraciones, a las soluciones de referencia. Despus de
la calibracin del equipo con solvente, inyectar, tres veces,
cada una de las soluciones de referencia y, despus de la es-
tabilizacin de la lectura, registrar el resultado, lavando el
sistema con el solvente despus de cada inyeccin. Trazar
la curva analtica, trazando el promedio de las lecturas de
cada grupo de tres, con la respectiva concentracin. Prepa-
rar la solucin de la sustancia a ser determinada conforme
indicado en la monografa, ajustando su concentracin para
que esta quede dentro de la banda de las concentraciones
de las soluciones de referencia. Introducir la muestra en el
equipo, registrar la lectura y lavar el sistema con solvente.
Repetir esta secuencia dos veces y, adoptando el promedio
de tres mediciones, determinar la concentracin del analito
por la curva analtica.
Mtodo de Adicin Estndar (Mtodo II). Aadir a cada
uno de, al menos, cuatro balones volumtricos similares,
volmenes iguales de solucin de la sustancia a ser deter-
minada, preparada conforme indicado en la monografa.
Juntar todos los balones, con excepcin de uno, volme-
nes medidos de la solucin de referencia especificada, para
obtener una serie de soluciones conteniendo cantidades

crecientes de los analitos. Diluir convenientemente el vo-
lumen de cada baln con agua. Despus de calibrar el es-
pectrmetro con agua, como indicado arriba, registrar tres
veces las lecturas de cada solucin.
Mtodo de Estndar Interno (Mtodo III). Preparar al
menos cuatro soluciones de referencia de los analitos, cu-
briendo la banda de concentraciones recomendada por el
fabricante del equipo para los analitos. Todos los reactivos
empleados en el preparado de la solucin muestra deben
ser igualmente incluidos, en las mismas concentraciones,
a las soluciones de referencia. El estndar interno debe ser
adicionado en todas las soluciones (solvente, soluciones
de referencia y muestras), con concentracin fija y en el
mismo orden de grandeza de los analitos. Despus de la
calibracin del equipo con solvente, inyectar, tres veces,
cada una de las soluciones de referencia y, despus de la es-
tabilizacin de la lectura, registrar el resultado, lavando el
sistema con el solvente despus de cada inyeccin. Trazar
la curva analtica, trazando un grfico de la razn entre el
promedio de las intensidades de las lecturas de cada grupo
de tres y la intensidad del estndar interno, con la respecti-
va concentracin. Preparar la solucin de la sustancia a ser
determinada conforme indicado en la monografa, ajustan-
do su concentracin para que esta quede dentro de la ban-
da de las concentraciones de las soluciones de referencia.
Inyectar la muestra en el equipo, registrar la lectura y lavar
el sistema con solvente. Repetir esta secuencia dos veces
y, adoptando el promedio de tres mediciones, determinar la
concentracin del analito por la curva analtica.
5.2.14 ESPECTROFOTOMETRA
EN EL ULTRAVIOLETA,
VISIBLE E INFRARROJO
Las tcnicas espectrofotomtricas estn fundamentadas en
la absorcin de la energa electromagntica por molculas
que depende tanto de la concentracin como de la estructu-
ra de las mismas. De acuerdo con el intervalo de frecuencia
de la energa electromagntica aplicada, la espectrofoto-
metra de absorcin puede ser dividida en ultravioleta, vi-
sible e infrarroja, pudiendo ser utilizada como tcnica de
identificacin y cuantificacin de sustancias.
RADIACIN ELECTROMAGNTICA
La radiacin electromagntica es una forma de energa que
se propaga como ondas y, generalmente, puede ser subdi-
vidida en regiones de largo de onda caracterstico. Adems,
puede ser considerada, tambin, como un flujo de partcu-
las denominadas fotones (o cuantos). Cada fotn contiene
determinada energa cuya magnitud es proporcional a la
frecuencia e inversamente proporcional al largo de onda.
El largo de onda () es, generalmente, especificado en na-
nmetros, nm (10-9 m), y en algunos casos en micrme-
tros, m (10-6 m). En el caso del infrarrojo la radiacin
electromagntica puede ser, tambin, descrita en trminos
de nmero de onda y expresada en cm-1. Las bandas de
largo de onda de energa electromagntica de inters para
la espectrofotometra son las descritas en la Tabla 1.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 99
Tabla 1 - Bandas de largo de onda de
inters para la espectrofotometra.
Regin Banda de largo de onda
Ultravioleta (UV) 190-380 nm
Visible (VIS) 380-780 nm
Infrarrojo prximo (NIR) 780-2500 nm (12800-4000 cm-1)
Infrarrojo medio (MIR) 4-25m (2500-400 cm-1)
Infrarrojo distante 25-300 m (400-33 cm-1)
INTERACCIN ENERGA-MATERIA
La energa total de la molcula envuelve la energa derivada
de la vibracin (energa vibracional, debida al movimiento
relativo de tomos o grupos de tomos constituyentes de la
molcula); de la rotacin (energa rotacional, debida a la
rotacin de la molcula en torno de un eje) y, normalmente,
de la energa electrnica, generada por la configuracin de
electrones en la molcula.
Las molculas al absorber energa sufren una transicin
para un estado de mayor energa o estado excitado. El paso
al estado excitado no es de naturaleza continua realizndo-
5
se, generalmente, en etapas llamadas de transiciones. En la
regin del ultravioleta y visible las transiciones son elec-
trnicas y ocurren en porciones de la molcula llamadas de
cromforos. Estas transiciones comprenden promociones
de electrones de orbitales moleculares ocupados, general-
mente, y alenates y no aleantes, para los orbitales de
energa inmediatamente superiores, antialeantes * y *.
En la regin del infrarrojo medio (MIR) ocurren solamen-
te transiciones de energa vibracional por ser la radiacin
en esta regin insuficientemente energtica para promover
transiciones electrnicas. Las vibraciones inducidas por
radiacin infrarroja comprenden estiramientos y tensiona-
mentos de aleaciones interatmicas y modificaciones de
ngulos de aleaciones.
Los espectros en el infrarrojo prximo (NIR) son carac-
terizados por la absorcin de la radiacin por sobretonos
y combinacin de modos vibracionales fundamentales de
aleaciones como C-H, N-H, O-H y S-H. Las bandas de un
espectro NIR, son, generalmente, ms dbiles que las ban-
das del espectro MIR. Informaciones qumicas y fsicas, de
caracterstica cualitativa y cuantitativa, pueden ser obteni-
das a partir del espectro NIR. Sin embargo, la comparacin
directa entre el espectro de la muestra y de la sustancia
qumica de referencia no es recomendada.
La espectrofotometra NIR es ampliamente utilizada para
anlisis fsicos y qumicos, como por ejemplo: cuantifica-
cin e identificacin de principios activos y excipientes,
identificacin de formas cristalinas y polimorfas, determi-
nacin del tamao de partcula, estndar de desintegracin
y control de proceso.
MODOS DE ADQUISICIN DE LOS ESPECTROS
Los espectros pueden ser obtenidos utilizndose diferentes
modos de adquisicin. En el caso de la espectrofotometra
UV/VIS el principal modo es la transmisin. En el caso
 100 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
de la espectrofotometra NIR y MIR los espectros pueden
ser adquiridos utilizando el modo transmisin y reflexin.
Esta ltima se subdivide en reflexin difusa y reflexin to-
tal atenuada. Hay adems la posibilidad de la combinacin
de los modos de transmisin y reflexin, llamada de trans-
reflexin.
Transmisin: es la medida de la disminucin de la intensi-
dad de la radiacin en determinados largos de onda cuando
la radiacin pasa a travs de la muestra. La muestra est
dispuesta en el haz ptico entre la fuente y el detector. La
transmisin (T) puede ser calculada por la frmula abajo:
I Los compartimientos utilizados para recibir la muestra son
T=
I0
I0 = intensidad de la radiacin incidente
I = intensidad de la radiacin transmitida.
Los espectros en transmisin pueden ser convertidos para
absorbancia:
5
Reflexin difusa: es la medida de la razn de la intensidad
de la luz reflejada por la muestra y la luz reflejada por una
superficie reflexiva de referencia. La radiacin no adsorbi-
da es reflejada en direccin al detector.
Reflexin total atenuada: la radiacin infrarroja se propa-
ga en el interior de un elemento de reflexin interna (alto
ndice de refraccin) a travs de reflexiones en las paredes
de este elemento. La muestra es colocada en contacto con
la pared de este elemento de reflexin donde interacta con
la radiacin infrarroja (onda evanescente).
Transreflexin: este modo es la combinacin de los modos
de transmisin y reflexin. En la medida por transreflexin
un espejo o una superficie reflexiva es usado para reflejar
la radiacin transmitida a travs de la muestra, incidien-
do una segunda vez en la misma para, entonces, doblar el
camino ptico. La radiacin no adsorbida y reflejada en
direccin al detector.
INSTRUMENTACIN UTILIZADA EN EL
ULTRAVIOLETA (UV) Y VISIBLE (VIS)
Espectrofotmetros utilizados en la regin del ultravioleta
y visible son dotados, fundamentalmente, de fuente de ra-
diacin; selector de largo de onda; celdas de absorcin (cu-
betas), para insercin de soluciones de muestras en el haz
de luz monocromtica; detector de radiacin y una unidad
de lectura y de procesamiento de seal.
Las lmparas ms empleadas como fuente de radiacin en
la espectrofotometra en la regin del ultravioleta y visible
son de deuterio y tungsteno, que proporcionan radiacin
comprendida entre 160 a 380 nm y 320 a 2500 nm, respec-
tivamente. Los instrumentos para las regiones del UV/VIS
son, generalmente, equipados con uno o ms dispositivos
para restringir la radiacin que est siendo medida dentro
de una banda estrecha que es adsorbida o emitida por el
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
analito. La mayora de los equipos utiliza un monocroma-
dor o filtro para aislar la banda de largo de onda deseada
de forma que solamente la banda de inters sea detectada y
medida. Los monocromadores, generalmente, poseen una
red de difraccin, mientras que los filtros pueden ser de in-
terferencia o de absorcin. Los fotmetros o colormetros
son instrumentos ms simples que utilizan un filtro para
seleccin del largo de onda y son utilizados, generalmente,
en la regin del visible. Los espectrofotmetros, a su vez,
utilizan monocromadores para seleccin del largo de onda
y son utilizados en las regiones del UV/VIS.
denominados de cubetas que deben presentar ventanas que
sean transparentes en la regin espectral de inters. Para la
regin del UV son necesarias cubetas de cuarzo mientras
que, para la regin del VIS, se puede emplear cubetas de
vidrio o acrlico.
Los principales tipos de detectores son los fototubos, los
arreglos de fotodiodos y los dispositivos de transferencia
de carga. Los fototubos son los detectores ms simples y su
respuesta est basada en el efecto fotoelctrico. El detector
de arreglo de diodos permite que todos los largos de onda
puedan ser monitoreados simultneamente. Los dispositi-
vos de transferencia de carga han sido empleados en nme-
ro creciente en instrumentos espectroscpicos.
Los espectrofotmetros pueden ser encontrados en la con-
figuracin de haz nico, haz doble y multicanal. Los ins-
trumentos de haz doble presentan la ventaja de compensar
cualquier fluctuacin en la potencia radiante de la fuente,
cuando comparados con los instrumentos de haz simples.
Ya los instrumentos multicanal son ms recientes, utilizan
detectores del tipo arreglo de diodo y dispositivos de trans-
ferencia de carga y permiten la obtencin del espectro total
de una muestra en menos de un segundo. En estos instru-
mentos el sistema dispersivo es un espectrgrafo de red
colocado despus de la clula de la muestra.
Espectrofotmetros pueden disponer de registradores gr-
ficos que permiten la obtencin de espectros de absorcin.
Tal recurso es importante para fines de caracterizacin de
la sustancia a partir de la obtencin de los largos de onda
donde se obtienen las mayores absorbancias (mximo ).
Actualmente, la mayor parte de los espectrofotmetros
presenta conexin a una microcomputadora y programa
apropiado, que permiten la obtencin de los espectros de
absorcin de las sustancias en medio digital.
INSTRUMENTACIN UTILIZADA EN EL
INFRARROJO MEDIO (MIR) E INFRARROJO
PRXIMO (NIR)
Los espectrofotmetros utilizados para adquisicin de es-
pectros en el infrarrojo medio y prximo consisten de una
fuente de luz, monocromador o interfermetro y detector,
y permiten la obtencin de espectros en la regin compren-
dida entre 750 a 2500 nm (13300 a 400 cm-1).

Actualmente, los espectrofotmetros en el infrarrojo me-
dio (4000 a 400 cm-1) utilizan el interfermetro en lugar de
usar el monocromador y la radiacin policromtica incide
bajo la muestra y los espectros son obtenidos en el dominio
de la frecuencia con auxilio de la transformada de Fourier.
Clulas de transmisin, accesorios para reflexin difusa y
reflexin total atenuada son los accesorios ms comunes
para la adquisicin de los espectros.
La espectrofotometra en el infrarrojo prximo (NIR) es
una tcnica que permite la obtencin de espectros en la re-
gin comprendida entre 13300 a 4000 cm-1 (750 a 2500
nm). Los espectrofotmetros en la regin del NIR son
constituidos de fuente de radiacin apropiada, monocro-
mador o interfermetro y detector. Cubetas convenciona-
les, fibras pticas, clulas de transmisin y accesorios para
reflexin difusa son los accesorios ms comunes para ad-
quisicin de los espectros.
IDENTIFICACIN POR ESPECTROFOTOMETRA
La identificacin de diversas sustancias farmacuticas pue-
de ser hecha utilizando las regiones ultravioleta, visible,
infrarrojo medio e infrarrojo prximo. De manera general,
la espectrofotometra en las regiones UV/VIS requiere so-
luciones con concentracin de 10 g ml-1 de la sustancia
mientras que para el MIR y NIR son necesarias concentra-
ciones en la orden de 100 mg ml-1. A pesar de ms sensible
los espectros obtenidos en las regiones del UV/VIS presen-
tan menor especificidad cuando comparados con los espec-
tros en la regin del MIR. En el caso del MIR las medidas
realizadas utilizando los modos de reflexin (difusa y total
atenuada) proporcionan informacin espectral equivalente
a aquella obtenida por el modo de transmisin. Cuando po-
sible debe ser hecha la comparacin del espectro obtenido
frente al espectro de la sustancia qumica de referencia.
Ultravioleta (UV) y visible (VIS)
Diversas monografas incluyen espectros de absorcin en
el ultravioleta como prueba de identificacin. En estos ca-
sos, habr especificacin de la extensin de la barredura,
solvente, concentracin de la solucin y espesor de la cu-
beta. Algunos frmacos requieren el uso de estndares de
referencia. Las lecturas de estndar y muestra son efectua-
das simultneamente y en condiciones idnticas cuanto a
largo de onda, tamao de cubeta, etc.
Para la caracterizacin utilizando la espectrofotometra
UV/ VIS, el frmaco es disuelto utilizando solvente apro-
piado. Muchos solventes son apropiados incluyendo agua,
alcoholes, teres y soluciones cidas y alcalinas diluidas.
Se debe observar para que los solventes no absorban en la
regin espectral que est siendo utilizada.
Infrarrojo medio (MIR)
La espectrofotometra en el MIR es un ensayo de identifi-
cacin por excelencia siendo capaz de diferenciar sustan-
cias con diferencias estructurales. De las tres regiones del
infrarrojo (prximo, medio y distante) la regin compren-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 101
dida entre 4000 a 400 cm-1 (infrarrojo medio) es la ms
empleada para fines de identificacin.
Los espectros de transmisin de muestras slidas son obte-
nidos a partir de su dispersin en aceite mineral o mediante
la preparacin de pastillas de haluros de potasio y sodio.
Dispersiones de la muestra son preparadas triturndose
cerca de 5 mg de la sustancia en una gota de aceite mineral
de grado espectroscpico. La pasta obtenida es esparcida
entre dos ventanas de bromuro de potasio o cloruro de so-
dio. Para el preparado de las pastillas cerca de 1 mg de
la muestra es triturada con aproximadamente 300 mg de
bromuro de potasio de grado espectroscpico.
Para muestras slidas en polvo opacas la transmisin de
la radiacin infrarroja, el espectro puede ser, tambin, ad-
quirido mediante la utilizacin de accesorio para reflexin
difusa. En este accesorio la radiacin infrarroja incide di-
rectamente en la muestra en polvo. Parte de la radiacin es
adsorbida y enseguida reflejada de forma difusa en direc-
cin al detector. En este caso la muestra en la forma de pol-
vo es mezclada con bromuro de potasio, aproximadamen-
te, 5% (p/p) y dispuesta en el accesorio de reflexin difusa.
5
Por fin, el espectro de muestras slidas en polvo y pastosas,
puede ser obtenido utilizando accesorio para reflexin total
atenuada. La muestra en la forma de polvo est dispuesta
bajo el cristal de alto ndice de refraccin donde entra en
contacto con la radiacin infrarroja no exigiendo prepara-
do previo de la muestra.
UTILIZACIN CUANTITATIVA DE LA
ESPECTROFOTOMETRA
Espectrofotometra en el UV/VIS
El anlisis espectrofotomtrico cuantitativo por absorcin
tiene como principio la relacin directa existente entre la
cantidad de luz adsorbida y la concentracin de la sustan-
cia, tambin conocida como ley de Beer.
Cuando la concentracin (c) est expresada en mol. L-1 y
el camino ptico (b) en centmetro, la ecuacin se torna:
A=ebc
en que
A = absorbancia, logaritmo del inverso de la transmitancia
(A = log T)
e = absortividad molar.
T = transmitancia
Sabindose que la transmitancia es el cociente entre la in-
tensidad de la radiacin transmitida por la solucin (I0) y a
intensidad de la radiacin incidente (I), se tiene:
log10 (I0/I) = A = e b c
La intensidad de la absorcin de la luz ultravioleta por sus-
tancias cromforas est, en general, expresada como ab-
sortividad molar, en las condiciones de mxima absorcin.
 102 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Si la masa molar de la sustancia no es conocida, es posible
expresar la intensidad de absorcin por la ecuacin de la
absortividad especfica A (1%, 1 cm):
A (1%, 1 cm) = A / b c
en que A(1%, 1 cm) corresponde a la absorbancia de la so-
lucin a 1% (p/v) de la sustancia cuando el camino ptico
es 1 cm.
Para evitar posibles desvos en la ley de Beer se debe pro-
curar trabajar con soluciones diluidas (de la orden de 0,01
M), evitando asociaciones entre las molculas, y con radia-
ciones monocromticas.
Espectrofotometra en el Infrarrojo prximo
La cuantificacin a travs de la espectrofotometra en el
NIR puede ser realizada utilizando datos obtenidos de un
mtodo de referencia o a partir de un conjunto de calibra-
cin con muestras de composicin conocida. Los espectros
pueden ser obtenidos utilizando los modos de transmisin
y reflexin con el auxilio de accesorios adecuados. En un
5
primer momento los datos espectrales son tratados a travs
de transformaciones matemticas con el objetivo de reducir
fuentes de variaciones indeseadas antes de la etapa de cali-
bracin. El proceso de calibracin consiste en la construc-
cin de un modelo matemtico que relaciona la respuesta del
espectrofotmetro a una propiedad de la muestra. Existe una
serie de algoritmos quimiomtricos que pueden ser utiliza-
dos en la calibracin. Generalmente, estos algoritmos estn
disponibles en softwares y dispuestos junto con el espectro-
fotmetro. Los principales algoritmos de calibracin son: re-
gresin lineal mltiple (del ingls, multiple lineal regression
MLR), mnimos cuadrados parciales (del ingls, partial
least squares PLS) y regresin de componentes principales
(del ingls, principal component regression PCR).
La validacin de una metodologa que emplea la espec-
trofotometra NIR es semejante a aquella requerida para
cualquier procedimiento analtico y, generalmente, es esta-
blecida a partir de herramientas quimiomtricas. Los prin-
cipales parmetros a ser evaluados son: especificidad, li-
nealidad, banda de trabajo, exactitud, precisin y robustez.
La extensin de la especificidad es dependiente del proce-
dimiento utilizado. La demostracin de la especificidad de
los mtodos NIR puede ser hecha a travs de las siguientes
formas: (i) los largos de onda utilizados en los modelos
de calibracin deben corresponder a bandas del analito de
inters; (ii) para calibracin utilizando PLS los coeficien-
tes deben ser trazados y las regiones de mayor coeficiente
comparadas con el espectro del analito; (iii) variaciones en
la matriz de la muestra no deben afectar de forma signifi-
cativa a cuantificacin del analito.
La validacin de la linealidad del mtodo NIR envuelve
la demostracin de la respuesta lineal de la tcnica para
muestras distribuidas a travs de una banda definida de ca-
libracin. El coeficiente de correlacin, r, no es una herra-
mienta adecuada para verificacin de linealidad, pero es la
medida de la variacin de los datos que es adecuadamente
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
modelada por la ecuacin. La mejor manera de demostrar
la linealidad de los mtodos NIR es a travs de la evalua-
cin estadstica de los valores de la inclinacin e intercepto
obtenidos para el conjunto de validacin.
La banda de trabajo de los valores de referencia del analito
del conjunto de validacin define la banda de trabajo del
mtodo NIR. Controles deben ser establecidos para garan-
tizar que los resultados fuera de la banda de trabajo no sean
aceptados. La validacin de un mtodo NIR debe generar
un valor anmalo cuando una muestra conteniendo analito
fuera de la banda de trabajo sea analizada.
La exactitud de un mtodo NIR est demostrada por la co-
rrelacin de los resultados NIR con los datos de la tcnica
de referencia. Adems de eso, la exactitud puede ser verifi-
cada a partir de la proximidad del error estndar de predic-
cin (SEP) con el error del mtodo de referencia. El error
del mtodo de referencia debe ser conocido con base en los
valores histricos. Diferentes mtodos estadsticos pueden
ser utilizados para verificar diferencias estadsticas entre
los resultados obtenidos por el mtodo NIR y el mtodo
de referencia.
La precisin de un mtodo NIR expresa la concordancia
entre una serie de medidas obtenidas bajo condiciones pre-
determinadas. Hay dos niveles de precisin que pueden ser
considerados: la repetitividad y la precisin intermediaria.
La precisin de un mtodo NIR es tpicamente expresada
como coeficiente de variacin.
La robustez del mtodo NIR puede ser verificada a travs
de cambios de parmetros del mtodo como: condiciones
ambientales, temperatura de la muestra, caractersticas de
la muestra y cambios instrumentales.
5.2.15 ESPECTROFOTOMETRA
DE FLUORESCENCIA
Algunas sustancias pueden ser analizadas con mayor sensi-
bilidad y especificidad por medio de mtodos fluorimtri-
cos del que por otras tcnicas espectrofotomtricas. La es-
pectrofotometra de fluorescencia, o espectrofluorimetra,
comprende la medida de la fluorescencia emitida cuando
estas sustancias dichas fluorescentes son expuestas a la
radiacin ultravioleta, visible u otras tambin de naturaleza
electromagntica. Tales radiaciones promueven la excita-
cin de electrones de la molcula para niveles energticos
ms elevados. Despus de corta permanencia en el estado
excitado cerca de 10-8 a 10-4 segundos los electrones
retornan al estado fundamental por medio de proceso no
radioactivo, denominado desactivacin por colisin, aliado
a proceso radioactivo llamado luminescencia (fluorescen-
cia o fosforescencia), al contrario de lo que ocurre con la
mayora de las sustancias en que el retorno al estado me-
nos energtico no comprende emisin de luz. En la desac-
tivacin por colisin, la energa se pierde como calor en
los choques entre las molculas. En el proceso radiante,
el exceso de energa es remitido con intensidad mxima
en largo de onda mayor (en cerca de 20 a 30 nm) que el
de la radiacin excitatoria adsorbida, debido a la prdida

energtica que acontece en el proceso. Siendo de naturale-
za fluorescente, la radiacin emitida por la sustancia cesa
cuando la fuente de energa es retirada y esta caracterstica
la distingue de la fosforescencia, que prosigue por algn
tiempo despus del trmino de la excitacin.
La intensidad de la luz emitida por una solucin fluores-
cente es, en determinadas condiciones, proporcional a la
concentracin del soluto y, en consecuencia, utilizada para
fines analticos. La medida de la intensidad de fluorescen-
cia no puede ser usada directamente para la determinacin
de la concentracin del analito. Por eso, la determinacin
est hecha a travs de la comparacin de la intensidad de
fluorescencia obtenida para una solucin muestra con so-
luciones estndar, cuyas concentraciones son conocidas. El
fundamento de la espectro fluorescencia consiste, pues, en
excitar la sustancia con radiacin en el largo de onda de
mxima absorcin y medir comparativamente la intensidad
de la luz fluorescente emitida frente a un estndar.
DEFINICIONES
Intensidad de fluorescencia: Expresin emprica de la acti-
vidad fluorescente, en unidades arbitrarias proporcionales
a la respuesta del detector.
Espectro de excitacin de fluorescencia: Representacin
grfica del espectro de activacin, presentando la intensi-
dad de la radiacin emitida por sustancia activada (ordena-
da) y el largo de onda de la radiacin incidente excitatoria
(abscisa).
Espectro de emisin de fluorescencia: Representacin
grfica de la distribucin espectral de la radiacin emiti-
da por sustancia activada, presentando la intensidad de la
radiacin emitida como ordenada y el largo de onda como
abscisa.
EQUIPO
La determinacin de la intensidad de fluorescencia puede
ser efectuada en simple fluormetro de filtro (fluormetro),
en espectrofotmetros de absorcin adaptados o en espec-
trofotmetro de fluorescencia (espectrofluormetro).
El fluormetro de filtro comprende fuente de luz, filtro pri-
mario, cmara de muestra, filtro secundario y sistema de
deteccin. En los fluormetros de este tipo, el detector se
encuentra dispuesto a 90o con relacin a la luz incidente.
Tal disposicin en ngulo recto permite que la luz inciden-
te atraviese la solucin de la muestra sin interferir con la
seal fluorescente captada por el detector. Tal mecanismo
no impide que parte de la luz difusa alcance el detector de-
bido a las propiedades difusoras inherentes a las soluciones
o en funcin de la presencia de partculas slidas suspendi-
das. Esta dispersin residual es controlada con empleo de
filtros. El filtro primario selecciona la radiacin de largo
de onda apropiado a la excitacin de la muestra mientras
el filtro secundario selecciona la radiacin fluorescente de
largo de onda mayor, bloqueando el acceso de la radiacin
dispersa al detector.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 103
En su mayora, los detectores de fluormetros de filtro son
equipados con vlvulas fotomultiplicadoras, habiendo,
sin embargo, diferencias entre tipos de equipos cuanto a
la regin espectral de mxima sensibilidad. Amplificada
la corriente elctrica generada en el fotomultiplicador, se
obtiene lectura correspondiente en instrumento analgico
o digital.
Espectrofotmetros de fluorescencia, por su vez, se diferen-
cian de fluormetros por no disponer de filtros y si de mono-
cromadores de prisma o de rejilla de difraccin, proporcio-
nando mayor selectividad de largo de onda y flexibilidad.
Tanto fluormetros como espectrofotmetros de fluores-
cencia permiten empleo de diversas fuentes de luz. Lmpa-
ras de mercurio o tungsteno, a pesar de que comunes, son
sustituidas con ventaja por la lmpara de arco de xenn a
la alta presin, pues esta proporciona, al contrario de las
dems, espectro continuo desde el ultravioleta hasta el in-
frarrojo. De cualquier forma, la radiacin es muy intensa
y no debe jams ser observada con los ojos desprotegidos,
bajo riesgo de lesiones permanentes.
5
Los monocromadores, a su vez, disponen de ajuste de an-
cho de hendidura. Ranuras estrechas proporcionan mayor
resolucin y menor ruido espectral mientras ranuras an-
chas aseguran mayor intensidad de luz en detrimento de
estas caractersticas. El ancho de hendidura a ser adoptada
es funcin de la diferencia entre los largos de onda de la
luz incidente y emitida, as como del nivel de sensibilidad
necesario al anlisis.
La cmara de muestra generalmente permite uso de tubos
redondos y cubetas cuadradas, semejantes a las empleadas
en espectrofotometra de absorcin, salvo por la necesidad
de que las cuatro paredes verticales estn pulidas. Vol-
menes de muestra de la orden de 2 a 3 ml son adecuados a
pesar de que algunos instrumentos puedan estar dotados de
cubetas pequeas, con capacidad para 0,1 a 0,3 ml o tam-
bin de soportes para capilares que requieren volmenes
tambin menores.
Calibracin del equipo
Fluormetros y espectrofluormetros deben ser calibrados
con sustancias fluorforas, estables, para asegurar resulta-
dos reproducibles. Las variaciones son, en general, debidas
a alteraciones en la intensidad de las lmparas o en la sensi-
bilidad del tubo fotomultiplicador. El fluorforo puede ser
la muestra pura de la sustancia a ser analizada o cualquier
otra sustancia fluorescente de fcil purificacin, cuyos lar-
gos de onda de absorcin y fluorescencia sean semejantes
a los de la sustancia en anlisis. Por ejemplo, quinina en
cido sulfrico 0,05 M es un estndar adecuado para fluo-
rescencia azul. Por otro lado, fluorescena en hidrxido de
sodio 0,1 M es apropiada para fluorescencia verde y roda-
mina es fluorforo de eleccin en la fluorescencia roja. La
escala de largos de onda del espectrofotmetro de fluores-
cencia tambin requiere calibracin peridica.
 104 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
PREPARADO DE LAS SOLUCIONES
La eleccin del solvente utilizado en la preparacin de
soluciones fluorescentes requiere precauciones. Naturale-
za, pureza y pH del solvente son parmetros relevantes en
la intensidad y distribucin espectral de la fluorescencia.
En consecuencia, es recomendable atenerse al volumen
especificado en mtodos establecidos. Muchas sustancias
presentan fluorescencia en solventes orgnicos, pero son
prcticamente no fluorescentes cuando disueltas en agua.
As, cabe la experimentacin en diversos solventes para
determinar la propiedad fluorescente de una sustancia.
Para fines cuantitativos, es fundamental que la intensidad
de la fluorescencia guarde relacin lineal con la concentra-
cin de la muestra dentro de lmites compatibles con la tc-
nica. Si la solucin es muy concentrada, parte significativa
de la luz incidente ser adsorbida en la periferia de la cu-
beta y menor ser la cantidad de radiacin a alcanzar la re-
gin central. Esto significa que la propia sustancia actuar
como filtro interno. Sin embargo, tal fenmeno es raro,
considerndose que la espectrofotometra de fluorescencia
es una tcnica de elevada sensibilidad, permitiendo el em-
5
pleo de soluciones de concentraciones de 10-5 a 10-7 M.
Debido a los lmites de concentracin usualmente estre-
chos en los cuales la fluorescencia es proporcional a la
concentracin de la sustancia, se tiene como regla la obe-
diencia a la relacin (c-d)/(a-b) = 0,40 a 2,50. En este caso,
a es la intensidad de fluorescencia de la solucin de refe-
rencia, b es la intensidad del blanco correspondiente, c es la
intensidad de la solucin- muestra y d es la intensidad del
blanco correspondiente.
Las determinaciones de fluorescencia son sensibles a la
presencia de partculas slidas en las soluciones. Tales im-
purezas reducen la intensidad del haz incidente, producien-
do falsas lecturas elevadas debido a reflexiones mltiples
en la cubeta. Es, por tanto, necesario eliminar estos slidos
por centrifugacin o filtracin antes de la lectura, llevando
en consideracin, sin embargo, que algunos papeles de fil-
tro pueden contener impurezas fluorescentes.
La presencia de oxgeno disuelto en el solvente ejerce
efecto atenuador sobre la intensidad de la fluorescencia y
cabe eliminarlo usando, por ejemplo, paso de corriente de
nitrgeno, helio o cualquier gas inerte en la solucin, pre-
viamente a la lectura.
El control de temperatura tambin es importante. En algu-
nas sustancias, la emisin de fluorescencia puede dismi-
nuir de 1 a 2% por cada aumento de temperatura de 1 C.
En vista de eso, cuando sea necesaria mxima precisin,
es recomendado el empleo de cubetas termostatizadas. No
obstante, para anlisis de rutina, no hay necesidad de este
recurso mientras que las determinaciones sean hechas con
rapidez suficiente para evitar calentamiento debido a la ex-
posicin de la solucin a la luz intensa.
Algunas sustancias fluorescentes son sensibles a la luz y,
cuando expuestas a la radiacin luminosa intensa del es-
pectrofotmetro de fluorescencia, pueden descomponerse
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
en productos ms o menos fluorescentes. Tal efecto puede
ser detectado observndose la respuesta del detector en re-
lacin al tiempo y atenuado con la reduccin de la intensi-
dad luminosa incidente por la utilizacin de filtros
5.2.16 TURBIDIMETRA Y
NEFELOMETRA
Turbidimetra y nefelometra variantes de espectrofotome-
tra -se destinan a la evaluacin cuantitativa de sustancias en
funcin de la turbidez de sus suspensiones, proporcional a
su poder de difraccin sobre luz incidente (efecto Tyndall).
En la turbidimetra, tambin conocida por opacimetra, se
mide la intensidad de la luz transmitida en el mismo senti-
do de direccin de la luz incidente. A pesar de que existan
turbidmetros, destinados especficamente a la medida de
turbidez, colormetros y espectrofotmetros convenciona-
les son satisfactorios a la medida de la luz transmitida des-
de que ajustados para largo de onda apropiado.
La nefelometra (o difusimetra), a su vez, comprende la
medida de la intensidad de luz difundida (reflejada) por las
partculas en suspensin, en ngulo recto al haz de luz inci-
dente. Una vez ms, adems de nefelmetros, es posible el
empleo de colormetros y espectrofotmetros en la medida
nefelomtrica. Para tanto, cabe modificarlos para permitir
la captacin perpendicular al ngulo de la luz incidente, por
transferencia de la fuente de luz, o por alteracin de posi-
cin del detector. Fluormetros, a ejemplo de nefelmetros,
se destinan a la medida de luz dispersa (posicionamiento
del detector en ngulo de 90 con relacin a la luz inciden-
te) siendo, por tanto, compatibles con la nefelometra.
Turbidez
Turbidez (S) en analoga a la transmitancia (T), definida en
Espectrofotometra de absorcin en el ultravioleta, visible
e infrarrojo (5.2.14) es la expresin oficial de dispersin
de la luz producida por partculas suspendidas. Y determi-
nable por turbidimetra o nefelometra, correspondiendo a
la ecuacin
en que
P0 = intensidad de radiacin incidente;
P = intensidad de radiacin transmitida;
b = espesor de la muestra (cubeta);
C = concentracin de la muestra;
d = dimetro medio de las partculas;
= largo de onda;
k = constante de proporcionalidad, dependiente de la natu-
raleza de la suspensin y del mtodo de medida.
Una suspensin evaluada en dado instrumento, bajo luz
monocromtica, presenta turbidez que corresponde al
producto de la concentracin C por una constante de pro-
porcionalidad k, que combina los dems parmetros de la

ecuacin arriba. Se tiene, por tanto, S = kC, expresin de
la ley de Lambert-Beer, permitiendo que procedimientos
turbidimtricos y nefelomtricos sean anlogos a los adop-
tados en espectrofotometra. Es, sin embargo, relevante
observar que la proporcionalidad slo es verdadera para
suspensiones muy diluidas, pues reflexiones secundarias
provocan excesivo desvo de linealidad cuando el nmero
de partculas en suspensin ultrapasa determinado lmite.
Otra fuente de error en medidas turbidimtricas y nefelom-
tricas es la decantacin de las partculas en suspensin. Tal
hecho puede ser minimizado con el aumento de la viscosi-
dad, con la incorporacin de coloide protector gelatina,
goma arbiga o almidn al medio lquido de la suspensin.
PROCEDIMIENTO
El procedimiento bsico para el empleo de tcnicas turbi-
dimtricas o nefelomtricas obedece a los principios de las
tcnicas espectrofotomtricas, comprendiendo la prepara-
cin de las soluciones de referencia con suspensiones de
concentracin conocida, En la prctica, est permitido el
trazado contra valores de transmitancia en vez de turbidez.
Las etapas del procedimiento comprenden, en resumen:
(1) ajustar el instrumento en el largo de onda especificado
en la monografa (para colormetros, a falta de especifica-
cin, emplear filtro que proporcione luz en la banda azul);
(2) llenar la cubeta con la suspensin ms concentrada y
ajustar la lectura de transmitancia para 100% (transmitan-
cia ofrece ms linealidad que absorbancia); (3) medir la
transmitancia de las dems suspensiones-estndar y trazar
recta de calibracin (con empleo del mtodo de los mni-
mos cuadrados) y (4) medir la transmitancia de la muestra
determinando su concentracin por la recta de calibracin.
Comparacin visual
Medidas de turbidez pueden ser ejecutadas por compara-
cin visual, tcnica por la cual la suspensin de muestra es
confrontada con suspensin o suspensiones estndar. Para
ello, emplear tubos de ensayo idnticos, de fondo plano
con 70 ml de capacidad y cerca de 23 mm de dimetro
interno. Los tubos deben ser comparados horizontalmente
sobre fondo oscuro, con incidencia de luz lateral.
5.2.17 CROMATOGRAFA
5.2.17.1 CROMATOGRAFA EN CAMADA
DELGADA
Consiste en el sistema cromatogrfico en que la separacin
de los componentes de una mezcla ocurre a travs de la mi-
gracin diferencial sobre una fase estacionaria compuesta
por una fina camada de adsorbente aplicado sobre un so-
porte plano, el cual puede ser constituido de diversos mate-
riales tales como vidrio, aluminio o polister. La fase mvil
a su vez est constituida por diversas mezclas de solventes
y permanece en el interior de un recipiente o cuba de ma-
terial transparente e inerte, generalmente vidrio, permane-
ciendo sellada donde se deposita la cromatoplaca en posi-
cin vertical bajo una atmsfera saturada de la fase mvil.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 105
EQUIPOS Y PROCEDIMIENTOS:
Los equipos utilizados para la cromatografa en camada
delgada consisten en: placa, cuba o cmara de elucin, fase
estacionaria, fase mvil, sistema revelador. Las placas ge-
neralmente son de vidrio, aluminio o material plstico. Los
tamaos varan conforme explicado a continuacin: 20 cm
x 20 cm; 10 cm x 20 cm; 10 cm x 10 cm; 5 cm x 10 cm.
Fase estacionaria (absorbentes)
Slice Es el adsorbente ms ampliamente utilizado en la
CCD. Es un adsorbente amorfo, poroso. Es usado tambin
en la cromatografa en columna, no obstante la slice utili-
zada en CCD es ms fina. La slice es preparada por espon-
tnea polimerizacin y deshidratacin del cido silcico.
Las sustancias son adsorbidas por la slice va puente de
hidrgeno e interaccin dipolo-dipolo. Una slice de condi-
cin satisfactoria es aquella con 11 a 12% de agua en peso.
Un nivel de 11 a 12% de humedad es alcanzado cuando la
slice est en equilibrio con el aire, a una humedad relativa
de 50% y una temperatura de 20 C.
5
Las slicas comerciales poseen tamaos de poros variables
entre 40 a 150 Angstrom. Los tamaos de partculas varan
de 5 a 40 m, con promedio de 10 a 15 m, dependiendo
del fabricante.
Reduciendo el tamao de la partcula, se aumenta la efi-
ciencia de la slice. Partculas de tamao de 5 a 6 m son
utilizadas para preparar CCDAE (Cromatografa en cama-
da delgada de alta eficiencia). Los tamaos de poros afec-
tan la selectividad y, por tanto, pueden ser utilizados para
las tasas de migracin y resolucin de los componentes de
las muestras.
Los tamaos de poros de slice ms comunes comercial-
mente son 40, 60, 80 y 100 Angstrom. Siendo la slice 60
Angstrom, la ms verstil y ampliamente utilizada. Las
slicas son utilizadas para la separacin de compuestos li-
poflicos como aldehdos, cetonas, fenoles, cidos grasos,
aminocidos, alcaloides, terpenoides y esteroides, usando
el mecanismo de adsorcin.
Almina Despus de la slice, es el adsorbente ms utili-
zado. Las propiedades fsicas de la almina son similares a
las de la slice en trminos de tamao de partcula, dime-
tro medio del poro y superficie. Estn disponibles comer-
cialmente almina cida (pH 4,0 4,5), neutra (7,0 8,0)
y bsica (9,0 10,0). As como la slice, la almina separa
los componentes de las muestras por polaridad, puentes de
hidrgeno o fuerzas dipolo. La selectividad de la almina en
la CCD de adsorcin es similar al gel de slice, por tanto la
almina es un adsorbente mejor que la slice para separacin
de sustancias cidas lipoflicas. La almina de carcter cido
atrae fuertemente compuestos bsicos, mientras la almina
de carcter bsico atrae ms fuertemente compuestos cidos.
La almina retiene compuestos aromticos ms fuertemente
que el gel de slice. Tiene el inconveniente de promover la
catlisis de algunas reacciones de sustancias lbiles. Es em-
pleada en la separacin de vitaminas liposolubles, alcaloi-
des, ciertos antibiticos, hidrocarburos policclicos.
 106 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Kieselguhr Es a Tierra de Diatomeas trmicamente tra-
tada de granulacin de 5 a 40 m. Su principal constitu-
yente es SiO2. Una variedad de otros compuestos inorgni-
cos tambin estn presentes. Los tamaos de los poros son
muy variables, sus caractersticas la tornan adecuada para
la separacin de azcares, aminocidos y otras sustancias
polares similares.
Celulosa La celulosa es un polisacrido altamente po-
limerizado por monmeros de celobiosa. La presencia de
gran nmero de grupos hidroxilo libre permite la conexin
de hidrgeno con lquidos de bajo peso molecular como
agua y alcoholes. Celulosa es, por tanto, adecuada para la
separacin de sustancias hidroflicas, tales como carbohi-
dratos y aminocidos.
Poliamida En contraste con la celulosa, la poliamida es
una resina sinttica. Dos tipos de poliamida son utilizadas:
poliamida 6 y poliamida 11. La poliamida 6 viene de la
aminopolicaprolactama, mientras a poliamida 11 es prepa-
rada a partir del cido poliaminoundecanico. Poliamidas
son utilizadas para la separacin de compuestos polares
que son capaces de interactuar con el grupo amida por
5
aleaciones de hidrgeno debido a su estructura molecular.
Entre ellas estn aminocidos y derivados, benzodiazep-
nicos, cidos carboxlicos, ciclodextrinas, cidos grasos,
flavonoides, conservantes, plaguicidas.
Silicato de magnesio ideal para separacin de azcares,
antraquinonas, flavonas, glucsidos, esteroides, lpidos,
residuos de plaguicidas, vitaminas, carbazol, acetato de
hidrocortisona.
Reveladores y mtodos de deteccin
Despus del desarrollo de la cromatografa y la evapora-
cin de los solventes, se pasa al mtodo de revelacin de
las manchas. Este por su vez, puede ser fsico o qumico.
Los mtodos fsicos comprenden: luz ultravioleta (lm-
paras con emisin de radiacin entre 254 a 366 nm), en
el caso de sustancias que se tornan fluorescentes, cuando
excitadas por luz UV o visible. Los mtodos qumicos
comprenden utilizacin de reactivos cromgenos. Hay
una amplia lista de reveladores apropiados para cada gru-
po de compuestos.
Identificacin
La posicin final de cada mancha es designada por el Rf.
Despus de la revelacin de la cromatoplaca, se mide la
distancia alcanzada por cada mancha a partir del origen.
Esa distancia es una fraccin de la distancia total recorrida
por el solvente en la fase estacionaria.
Rf = (distancia alcanzada por la mancha a partir del origen)
/ (distancia recorrida por el solvente desde el origen)
5.2.17.2 CROMATOGRAFA EN PAPEL
Utiliza para la separacin e identificacin de las sustancias
o componentes de la mezcla la migracin diferencial sobre
la superficie de un papel de filtro de calidad especial (fase
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
estacionaria). La fase mvil puede ser un solvente puro o
una mezcla de solventes.
En el papel cromatogrfico, el adsorbente es una camada
de papel de textura y espesor adecuados. La separacin
cromatogrfica procede a travs de la accin de la fase
mvil lquida semejante al proceso de la adsorcin en cro-
matografa en columna. Debido al contenido de agua in-
trnseco del papel, o inhibicin selectiva del componente
hidroflico de la fase lquida por las fibras de papel, que
puede ser considerado como fase estacionaria, un mecanis-
mo de particin puede contribuir significativamente para
la separacin.
El cromatograma es desarrollado por el paso lento de la
fase mvil sobre la camada. El desarrollo puede ser ascen-
dente, en el caso de solvente acarreado para arriba a travs
de fuerzas capilares, o descendente, en el caso en que el
flujo del solvente es auxiliado por fuerza de la gravedad.
La forma ms simple de la cromatografa en papel es la
cromatografa ascendente que utiliza una tira de papel de
ancho y largura variables, en funcin de la cuba cromato-
grfica a ser utilizada.
Este mtodo es muy til para separar sustancias muy pola-
res, como azcares y aminocidos. Posee el inconveniente
de poder aplicarse poca cantidad de sustancia por vez. Se
debe procurar trabajar en las condiciones ms prximas
posibles, de calidad y cantidad, entre estndar y muestra,
usndose el mismo papel, fase mvil, temperatura, etc.
EQUIPO Y PROCEDIMIENTOS
Consiste en cmara o cuba cromatogrfica de vidrio, pro-
vista de bordes y tapa esmerilados y de dimensiones ade-
cuadas para contener el papel cromatogrfico, que puede ser
adaptado para cromatografa ascendente o descendente. Es
importante que no deje escapar los vapores de la fase mvil.
Utilizar papel de filtro especial para cromatografa, cortado
en el sentido de las fibras en tiras de largo variable y ancho
no inferior a 2,5 cm. Existen varios tipos de papel para cro-
matografa con finalidades diferentes para separacin de
sustancias hidrfilas o hidrofbica, orgnicas o inorgni-
cas, anfteras o con muchas hidrxilas, entre otras.
Para cromatografa descendente, utilizar cuba con tapa
provista de orificio central, cerrado por tapn de vidrio u
otro material inerte. En la parte superior de la cuba, hay
una cubeta suspendida, que contiene dispositivo para su-
jetar el papel (generalmente barra o bastn de vidrio). De
cada lado de la cubeta hay guas de vidrio, que sustentan el
papel, para no tocar en las paredes de la cuba cromatogr-
fica. El ancho del papel cromatogrfico no puede ser supe-
rior al de la cubeta suspendida y la altura debe ser aproxi-
madamente igual a la altura de la cmara cromatogrfica.
Para cromatografa ascendente, en la parte superior de la
cuba hay dispositivo que permite sustentar el papel croma-
togrfico y que puede bajar sin abrir la cmara cromato-
grfica. Se manipula el papel con cuidado y por las puntas,

y se cortan tiras en tamaos que puedan ser contenidos en
las cubas. Es importante cortar el papel siguiendo el eje de
las fibras, pues la celulosa est orientada en este sentido, lo
que facilitar el paso de la fase mvil. La tira de papel no
debe tocar las paredes de la cuba.
Al aadir el papel en la cuba (no se debe demorar a colocar
el papel para no haber prdida de saturacin), cuidar para
que la muestra no entre en contacto directo con el eluyente,
dejando que ascienda o descienda por la superficie del pa-
pel, apenas por capilaridad.
Cuando la tcnica utilizada sea la de cromatografa ascen-
dente, trazar lnea fina con lpiz a 3 cm del borde inferior
del papel; si la cromatografa es descendiente, trazar lnea a
la distancia, tal que la misma quede pocos centmetros aba-
jo de la varilla que sujeta el papel en la cubeta del eluyente.
Se debe marcar tambin la lnea de llegada de la fase mvil
(o frente del solvente), generalmente con una distancia de
10 cm del punto de partida.
Figura 1 - Diferentes tipos de cromatografa en papel de acuerdo con las tcnicas de desarrollo.
___________
FM: Fase Mvil; PP: Punto de Partida; LC: Lnea de Llegada; dr1 y dr2: distancias recorridas por las sustancias; dm: distancia de migracin de la fase
mvil
CROMATOGRAFA DESCENDENTE
En la cromatografa descendente, la fase mvil posee un
flujo orientado para abajo y cuenta con la accin de la gra-
vedad.
Introducir en la cmara una camada de eluyente especi-
ficado en la monografa, tapar y dejar en reposo por 24
horas. Aplicar la muestra en el papel, colocndolo ade-
cuadamente sobre las guas de manera que la extremidad
superior permanezca dentro de la cubeta suspendida y
sujetarlo con la varilla de vidrio. Cerrar la cuba y dejar
en reposo por 1 hora y media. En seguida, a travs del
orificio en la tapa introducir el eluyente en la cubeta.
Desarrollar el cromatograma hasta la distancia o tiempo
prescritos, protegiendo el papel de la incidencia de luz
directa. Retirar el papel, marcar el recorrido de la fase
mvil, secar y visualizar de la manera prescrita en la
monografa.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 107
Aplicar las soluciones en la forma de manchas circulares
(se utilizan tubos capilares o micropipetas), conteniendo
de 1 a 20 g de la muestra, siendo que cada mancha debe
producir una anchura entre 6 a 10 mm sobre la lnea tra-
zada con lpiz. Dependiendo del ancho del papel, puede
colocarse apenas una alcuota del estndar o de la muestra,
centralizndose esta aplicacin en la lnea de partida. En el
caso de la posibilidad de colocarse ms de una alcuota en
el punto de partida, se dejan 2 cm de distancia de los bordes
laterales y un intervalo entre los puntos de aplicacin de 3
cm. Si cada mancha producida es mayor que 6 a 10 mm,
aplicar la muestra en porciones, dejndose evaporar el sol-
vente antes de aplicar la porcin siguiente.
El nivel de la fase mvil debe quedar abajo del punto de
partida de la sustancia, debiendo, siempre, haber un buen
sellado de la cuba cromatogrfica para que no se pierda el
vapor de esta fase. Al final de la corrida, esperar secar el
papel y someterlo a algn proceso de revelacin.
CROMATOGRAFA ASCENDENTE
El flujo ascendente de la fase mvil sobre el papel cromato-
grfico es permitido por la accin de la capilaridad.
Colocar en el fondo de la cmara recipiente conteniendo el
eluyente, cerrar la cuba y dejarla en reposo por 24 horas.
Aplicar la muestra en el papel introducindolo en la cuba
y dejar en reposo por 1 hora y media. Sin abrir la cmara,
bajar el papel para colocar su extremidad inferior en con-
tacto con el eluyente y desarrollar el cromatograma hasta
la distancia o tiempo prescritos. Retirar el papel, marcar
el recorrido del eluyente, secar y visualizar de la manera
prescrita en la monografa.
5.2.17.3 CROMATOGRAFA EN COLUMNA
Cromatografa preparativa en columna es un mtodo de
separacin que desempea un papel importante en la puri-
 108 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
ficacin de compuestos de valor en la investigacin, en la
operacin de planta piloto y produccin de productos farma-
cuticos. Es un mtodo que puede ser utilizado, de manera
rpida y econmica, para la obtencin de sustancias con pu-
reza elevada. En la prctica, adsorbentes estandarizados son
utilizados, pues proporcionan un alto grado de confiabilidad
del mtodo, la transferencia directa de escala de anlisis y
un procesamiento optimizado. Los tipos de cromatografa
en columna pueden ser: por adsorcin (lquido- slido), por
particin (lquido-lquido) o por cambio inico.
EQUIPO
Los aparatos utilizados para procedimientos en columnas
cromatogrficas consisten de un tubo cromatogrfico ciln-
drico, en posicin vertical, de vidrio (u otro material inerte
y transparente especificado en monografa individual) de
largo y dimetros variables en cuya parte inferior hay es-
trangulamiento (de paso reducido) y grifo para regulacin
del caudal de los varios tipos de solventes o sistemas de
elucin utilizados. En algunas columnas, la parte inferior
presenta en su base, un disco de vidrio poroso cuya fina-
lidad es evitar a salida de la fase fija (gel de slice). Las
5
columnas tienen dimensiones variables, sin embargo, en
anlisis farmacutico, las bandas ms comnmente utiliza-
das son de 10 a 30 mm de dimetro a lo largo del tubo y de
3 a 6 mm en su parte inferior, donde el grifo se encuentra
acoplado. El largo del tubo es usualmente de 150 a 400
mm. En la parte superior de la columna podr haber una di-
latacin de forma esfrica, destinada a contener un mayor
volumen de solvente seguido de una conexin esmerilada,
cilndrica tamponada por un tapn cilndrico de plstico,
de vidrio, acero inoxidable, aluminio (u otro material espe-
cificado en monografa individual) firmemente fijada a la
vena. La vena de la barra es sustancialmente menor que el
dimetro de la columna y posee, como mnimo, 5 cm ms
en relacin al efectivo largo de la columna. El tapn tiene
un dimetro menor en aproximadamente 1 mm en relacin
al dimetro interno de la columna.
PROCEDIMIENTO
Cromatografa en columna por adsorcin
Iniciar el preparado de la columna, si necesario, tamponando
la parte inferior, prxima al grifo, con un pedazo de algodn
o lana de vidrio en la base del tubo a fin de impedir el paso
del material adsorbente y la entrada de aire (evitando forma-
cin de burbujas). Llenar entonces uniformemente el tubo
(conforme altura especificada) con ese material adsorbente
(tal como almina activada o gel de slice, slice diatomeas
o slice calcinada) previamente suspendida en la fase mvil
(sistema de solventes), realizando retirada del exceso de elu-
yente. Despus de sedimentacin del material adsorbente,
aplicar la mezcla de sustancias previamente solubilizada en
una pequea cantidad de solvente en el tope de la columna
hasta que penetre en el material adsorbente. Una cierta can-
tidad de solvente puede ser adicionada al tope para ayudar
en la adsorcin de las sustancias en el material adsorbente,
dejndose, en seguida, sedimentar por accin de la gravedad
o por la aplicacin de presin positiva de aire quedando la
mezcla adsorbida en una estrecha banda horizontal en el tope
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
de la columna. La tasa de movimiento de una determinada
sustancia es determinada o afectada por diversas variables,
incluyendo la baja o alta absortividad del material adsorben-
te, el tamao de partcula y el rea superficial (superficie de
contacto), la naturaleza y polaridad del solvente, la presin
aplicada y la temperatura del sistema cromatogrfico.
Un cromatograma de flujo es ampliamente utilizado y
es obtenido por un proceso en que solventes recorren la
columna, hasta que la sustancia sea separada en solucin
efluente, conocido como eluato. El eluato es controlado,
reuniendo fracciones conforme especificado en la mono-
grafa y examinndose cada fraccin por mtodo adecua-
do. La sustancia puede ser determinada en el eluato por
varios mtodos: titulacin, colorimetra, espectrometra o
ser aislada (purificada) en ocasin de la evaporacin del
solvente. La eficiencia de la separacin puede ser medida
por cromatografa en camada delgada (CCD) de cada frac-
cin recogida a lo largo de la corrida cromatogrfica.
Cromatografa en columna por particin
En la cromatografa de particin, las sustancias a ser sepa-
radas son repartidas entre dos lquidos inmiscibles, uno de
los cuales, la fase fija, es adsorbido en un soporte slido,
presentando as un rea de superficie bastante amplia para
el solvente circulante o fase mvil. El elevado nmero de
sucesivos contactos entre lquido-lquido permite una se-
paracin efectiva, la cual no ocurre a travs de la extrac-
cin lquido-lquido habitual.
El soporte slido generalmente es polar, mientras la fase fija
adsorbente es ms polar que la fase mvil. El soporte slido
ms utilizado consiste en tierra silicosa cromatogrfica cuyo
tamao de partcula es satisfactorio para el caudal apropiado
del eluyente. En la cromatografa de particin de fase rever-
sa, la fase adsorbida fija es menos polar que la fase mvil, y
el adsorbente slido, se torna apolar por tratamiento con un
agente silanizante (ej.: diclorodimetilsilano; parafinas), para
producir una arena cromatogrfica silanizada.
La muestra a ser cromatografada generalmente es insertada
en un sistema cromatogrfico de dos maneras: (a) una solu-
cin de la muestra en un pequeo volumen de la fase mvil
en el tope de la columna; o (b) una solucin de la muestra
en un pequeo volumen de la fase fija es mezclada con el
soporte slido y transferida para la columna formando una
camada transversal sobre el material adsorbente.
El desarrollo y la elucin son alcanzados a travs de la co-
rrida del solvente circulante. El solvente (fase mvil) gene-
ralmente es saturado con el solvente (fase fija) antes del uso.
En el caso de cromatografa de particin lquido-lquido
convencional, el grado de particin de un determinado com-
puesto entre las dos fases lquidas est expresado a travs
de su coeficiente de particin o distribucin. En el caso de
compuestos que se disocian, se puede controlar la distribu-
cin al modificar el pH, constante dielctrica, fuerza inica,
y otras propiedades de las dos fases. La elucin selectiva de
los componentes de la mezcla puede ser alcanzada con el
cambio exitoso de la fase mvil para una que proporcione un

coeficiente de particin ms favorable, o alterando el pH de
la fase fija in situ con una fase fija constituida de la solucin
de un cido o una base apropiados en un solvente orgnico.
Salvo disposicin contraria de la monografa individual,
ensayos y pruebas empleando cromatografa de particin
en columna son realizados en consonancia con los mtodos
convencionales descritos a continuacin.
Soporte slido Utilizar arena de slice purificada. Para
fase reversa de cromatografa de particin, utilizar arena
de slice cromatogrfica.
Fase estacionaria -- Utilizar el solvente o solucin espe-
cificada en la monografa individual. Se es utilizada una
mezcla de lquidos en la fase estacionaria, mezclar antes de
introducir el soporte slido.
Fase mvil -- Utilizar el solvente o solucin especificados
en la monografa individual. Equilibrar con agua, si la fase
estacionaria es una solucin acuosa; si la fase estacionaria
es un fluido polar orgnico, equilibrar con este fluido.
Preparacin de una Columna Cromatogrfica El tubo
cromatogrfico mide cerca de 22 mm de dimetro interno
y de 200 a 300 mm de largo, sin disco de vidrio poroso, en
el cual es acoplado un tubo de distribucin, sin grifo, con
cerca de 4 mm de dimetro interno y aproximadamente 50
mm de largo. Introducir un tampn delgado de lana de vi-
drio en la base del tubo. Aadir la cantidad especificada de
soporte slido en un vaso de precipitados (probeta) de 100-
250 ml y mezclar hasta producir una pasta homognea.
Transferir la mezcla para el tubo cromatogrfico, tapar,
presionndolo levemente, hasta obtener una masa unifor-
me. Si la cantidad de soporte slido especificada fuese ms
de 3 g, transferir la mezcla para la columna en porciones
de aproximadamente 2 g, tapando cada porcin. Si el en-
sayo o prueba solicita una columna multisegmentada, con
una fase estacionaria diferente para cada segmento, tapar
despus de la adicin de cada segmento, y aadir cada seg-
mento siguiente directamente al anterior. Si una solucin
del analito fuese incorporada en la fase estacionaria, com-
pletar la transferencia cuantitativa para el tubo cromatogr-
fico a travs del lavado del vaso de precipitados utilizado
para la preparacin de la mezcla de ensayo con una mezcla
de aproximadamente 1 g de soporte slido y varias gotas
del solvente utilizado para preparar la solucin de ensayo.
Introduzca un tampn delgado de lana de vidrio encima
de la columna de llenado completa. La fase mvil fluye a
travs de una columna adecuadamente llenada como una
corriente moderada o, si fuese utilizada la cromatografa de
fase reversa, lentamente, gota a gota.
Transferir la fase mvil para el espacio de la columna sobre
la columna de llenado, y djela fluir a travs de la columna
bajo accin de la gravedad. Humedecer la punta de la co-
lumna cromatogrfica con cerca de 1 ml de la fase mvil
antes de cada cambio de composicin de la fase mvil y
despus de completar la elucin. Si el analito fuese intro-
ducido en la columna como una solucin de la fase mvil,
djelo pasar completamente por la columna de llenado, en-
tonces adicione la fase mvil en varias porciones menores,
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 109
permitiendo que cada una sea completamente retirada an-
tes de aadir la fase mvil almacenada.
Cromatografa en columna por cambio inico
Utilizar como fase estacionaria resina de cambio inico.
El cambio de iones consiste en intercambio reversible de
iones presentes en la solucin con iones del polmero re-
sinoso (celulosa modificada o soporte de gel de slice). La
eleccin de la resina, fuerte o suave, aninica o catinica,
depender en gran parte del pH en el cual deber ocurrir
el cambio inico y de la naturaleza de los iones (aniones o
cationes) a ser cambiados. Las resinas fuertemente cidas
y fuertemente bsicas son convenientes para la mayora
de las aplicaciones analticas. Se emplea, en la prctica,
gran exceso (200 300%) de resina sobre la cantidad de la
muestra estequiomtricamente calculada; la capacidad de
las resinas vara de 2 a 5 mM/g (peso seco).
Tratamiento de la resina y preparado de la columna Sus-
pender la resina de cambio inico en agua y dejar en reposo
por 24 horas. Introducirla en columna adecuada y, tratn-
dose de resina aninica, convertirla en bsica pasando a
5
travs de la columna, solucin de hidrxido de sodio SR, a
la velocidad de 3 ml/ min., hasta que el eluato proporcio-
ne reaccin negativa para cloruro. Pasar, en seguida, agua
exenta de dixido de carbono. En caso de resina catinica,
la conversin para la forma cida se da por el paso de cido
clorhdrico SR a travs de la columna, seguida de lavado
con agua exenta de dixido de carbono hasta que el eluato
proporcione reaccin neutra.
Se desarrolla columna de cambio inico de manera an-
loga a la descrita para cromatografa de adsorcin. Ter-
minada la operacin, se regenera la resina lavndola con
hidrxido de sodio SR (columnas aninicas) o con cido
clorhdrico SR (columnas catinicas) y, en seguida, con
agua exenta de dixido de carbono hasta que proporcione
reaccin neutra.
5.2.17.4 CROMATOGRAFA A LQUIDO
DE ALTA EFICIENCIA
La cromatografa a lquido de alta eficiencia (CLAE) es
una tcnica de separacin fundamentada en la distribu-
cin de los componentes de una mezcla entre dos fases
inmiscibles, la fase mvil, lquida, y la fase estacionaria
slida, contenida en una columna cilndrica. Las separa-
ciones son alcanzadas por particin, adsorcin, cambio
inico, exclusin por tamao o interacciones estereoqu-
micas, dependiendo del tipo de fase estacionaria utilizada.
La CLAE presenta ventajas sobre la cromatografa a gas
para los anlisis de combinaciones orgnicas. Muestras no
voltiles y termolbiles son, preferencialmente, analizadas
por CLAE. La mayora de los anlisis farmacuticos estn
basados en el mtodo de separacin por particin y deben
ocurrir en tiempo corto de anlisis. Varios factores qumi-
cos y fsico qumicos influencian en la separacin croma-
togrfica, los cuales dependen de la naturaleza qumica de
las sustancias a ser separadas, de la composicin y caudal
de la fase mvil, de la composicin y rea superficial de la
fase estacionaria.
 110 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
APARATOS
El equipo utilizado consiste en un depsito que contiene
la fase mvil, una bomba con la finalidad de llevar la fase
mvil por el sistema cromatogrfico, un inyector para in-
troducir la muestra en el sistema, una columna cromato-
grfica, un detector y un dispositivo de captura de datos,
como un software, integrador o registrador. Adems de
recibir y enviar informaciones para el detector, softwares
son utilizados para controlar todo el sistema cromatogr-
fico, proporcionando mayor operacionalidad y logstica
de anlisis.
Los sistemas cromatogrficos modernos consisten de bom-
bas para presurizar la fase mvil, controladas por softwa-
re, que pueden ser programadas para variar la relacin de
componentes de la fase mvil, como es requerido para cro-
matografa por gradiente de solvente, o para mezclar, de
forma isocrtica, la fase mvil (fases mviles con relacin
fija de solventes). Presiones operacionales de hasta 5000
psi (cerca de 345 bar) y caudal de hasta 10 ml por minuto
pueden ser utilizados. Presiones superiores quedan condi-
cionadas a evolucin del instrumental.
5
Despus de disolver la muestra en la fase mvil o en otro
solvente adecuado, la solucin es inyectada en el sistema
cromatogrfico, de forma manual, utilizando jeringa apro-
piada, o por medio de un inyector o muestreador autom-
tico. Este consiste en una bandeja, capaz de acomodar
diversos frascos conteniendo las muestras. Algunos mues-
treadores automticos pueden ser programados para inyec-
tar diferentes volmenes de muestra, diversas cantidades
de inyecciones, controlar el intervalo entre inyecciones y
otras variables operacionales.
Cuando se trabaja a altas presiones, una vlvula de inyec-
cin es esencial. Esta presenta un sistema calibrado, con
volumen definido, denominado anillo de inyeccin o ansa
de muestreo, que ser llenado con la solucin a ser analiza-
da y, posteriormente, transferida a la columna.
Para la mayora de los anlisis farmacuticos, la separacin
es alcanzada por particin de los componentes, presentes
en la solucin a ser analizada, entre las fases mvil y esta-
cionaria. Sistemas que consisten de fases estacionarias po-
lares y fases mviles apolares son definidos como croma-
tografa en fase normal, mientras el opuesto, fases mviles
polares y fases estacionarias apolares, son denominados de
cromatografa en fase reversa. La afinidad de una sustan-
cia por la fase estacionaria y, consecuentemente, su tiempo
de retencin en la columna, es controlada por la polaridad
de la fase mvil.
Las fases estacionarias utilizadas en cromatografa en fase
reversa consisten, tpicamente, de una molcula orgnica
qumicamente ligada a las partculas de slice u otros so-
portes, como grafito poroso. El dimetro de las partculas
es de, normalmente, 3 m a 10 m. Cuanto menor es el
dimetro de la partcula y la pelcula que recubre el sopor-
te, ms rpida y eficiente ser la transferencia de las sustan-
cias entre las fases estacionarias y mviles. La polaridad de
la columna depende de los grupos funcionales presentes,
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
siendo los ms comunes los grupos apolares octil, octa-
decil, fenil, cianopropil y polar, nitrilo. La proporcin de
grupos silanoles no ligados al grupo funcional influencia,
significativamente, en la eficiencia de la separacin croma-
togrfica y en el formato del pico eluido. Comercialmente,
estn disponibles columnas cromatogrficas con diferentes
cualidades de fases estacionarias, inclusive aquellas con
pequea proporcin de grupos silanoles libres, denomina-
das capeadas. Generalmente, columnas de slice en fase
reversa presentan vida til en la banda de pH de 2 a 8,
no obstante, columnas conteniendo grafito poroso o ma-
teriales polimricos, como el estireno-divinilbenceno, son
estables en una banda ms amplia de pH. De forma menos
comn, pueden ser utilizados lquidos, no ligados, como
revestimiento del soporte de slice y, por tanto, deben ser
inmiscibles con la fase mvil. Las columnas normalmente
usadas para separaciones analticas tienen dimetros inter-
nos de 1 mm a 5 mm. Esas pueden ser calentadas, propor-
cionando separaciones ms eficientes, pero slo raramente
son utilizadas temperaturas superiores a 60 C, debido al
potencial de degradacin de la fase estacionaria o a la vo-
latilidad de la fase mvil. A menos que especificado en la
monografa de la sustancia a ser analizada, las columnas
son utilizadas en temperatura ambiente.
Los detectores ms frecuentemente utilizados en cromato-
grafa a lquido de alta eficiencia son los espectrofotom-
tricos (UV/Vis). Los detectores espectrofotomtricos son
utilizados para detectar compuestos con agrupamiento cro-
mforo. Tales detectores consisten de una clula de flujo
localizada en el trmino de la columna cromatogrfica. La
radiacin ultravioleta atraviesa, constantemente, por la clu-
la de flujo y es recibida en el detector. Con el sistema en fun-
cionamiento, las sustancias son eluidas de la columna, pasan
por la clula de detector y absorben la radiacin, resultan-
do en alteraciones mensurables en el nivel de energa. Esos
detectores pueden presentar largo de onda fijo, variable o
mltiple. Detectores de largo de onda fijo operan en un nico
valor, tpicamente 254 nm, emitido por una lmpara de mer-
curio de baja presin. Aquellos con largo de onda variable
contienen una fuente continua de emisin, como una lmpa-
ra de deuterio o xenn de alta presin, y un monocromador
o un filtro de interferencia, para generar radiacin monocro-
mtica a un valor seleccionado por el operador, pudiendo,
adems, ser programados para alterar el largo de onda du-
rante el desarrollo del anlisis. Los detectores de largo de
onda mltiple miden, simultneamente, la absorbancia en
dos o ms largos de onda, siendo denominados de detectores
de arreglo de diodos (DAD). En estos, la radiacin ultravio-
leta es transmitida a travs de la clula de flujo, adsorbida
por la muestra y entonces separada en sus componentes ori-
ginales, que son detectados, individualmente, por el detector
de fotodiodos, registrando datos de absorbancia en toda la
banda del espectro ultravioleta y visible y, adicionalmente,
los espectros de cada pico registrado en el cromatograma.
Los detectores de ndice de refraccin miden la diferencia
entre el ndice de refraccin de la fase mvil pura y de la
fase mvil conteniendo la sustancia a ser analizada. Son
utilizados para detectar sustancias que no absorben en el
ultravioleta o visible, no obstante son menos sensibles que
los detectores espectrofotomtricos. Los detectores de n-

dice de refraccin presentan la desventaja de ser sensibles
a pequeos cambios de la composicin de los solventes de
la fase mvil, tasa de flujo y temperatura.
Los detectores fluorimtricos son utilizados para detectar
compuestos con agrupamiento fluorforo o que pueden ser
convertidos en derivados fluorescentes, por transformacin
qumica o adicionando reactivos fluorescentes a grupos
funcionales especficos. Si la reaccin qumica es reque-
rida, se puede realizar en el momento de la preparacin de
la muestra o, alternativamente, el reactivo puede ser intro-
ducido en la fase mvil, con la reaccin ocurriendo antes
de la deteccin.
Los detectores potenciomtricos, voltamtricos o electro-
qumicos son tiles para cuantificacin de sustancias que
pueden ser oxidadas o reducidas en un electrodo. Esos
detectores son altamente selectivos, sensibles y seguros,
pero requieren fases mviles libres de oxgeno y iones de
metales reductibles. Una bomba de flujo continuo debe
ser utilizada, asegurando que el pH, la fuerza inica, y la
temperatura de la fase mvil permanezcan constantes. De-
tectores electroqumicos con electrodos especficos de car-
bono pueden ser utilizados, ventajosamente, para cuantifi-
car nanogramos de sustancias fcilmente oxidables, como
fenoles y catecol.
Los detectores de espectrometra de masas tienen la ca-
pacidad de medir la masa molar de una sustancia, combi-
nados con la cromatografa lquida proporcionan una alta
selectividad una vez que picos no resueltos pueden ser ais-
lados monitoreando un valor de masa seleccionado. Esos
detectores pueden ser de cuadrupolo simple denominados
(MS) o (MS/MS), cuando asociados, para ejemplificar al-
gunos de los modelos utilizados. Las fuentes de ionizacin
ms comunes son las del tipo ionizacin por electrospray
y la ionizacin qumica a presin atmosfrica.
Los detectores de conductividad tienen aplicacin en la
cromatografa de cambio inico y miden la conductividad
de la fase mvil continuamente que es modificada con la
presencia de analitos en la clula.
Actualmente, sistemas de recoleccin de datos modernos
estn disponibles con las funciones de recibir y almace-
nar las seales provenientes del detector y, posteriormente,
proporcionar el manejo de esas informaciones, generando
los cromatogramas con los datos de rea y altura del pico,
identificacin de la muestra y mtodos. Las informaciones
tambin pueden ser recopiladas en sistemas simples de gra-
bacin de datos, como registradores, para la garanta de la
integridad de los datos generados.
PROCEDIMIENTO
El largo y el dimetro interno de la columna, el tipo y el
tamao de las partculas de la fase estacionaria, la tempera-
tura de la operacin, la composicin y el caudal de la fase
mvil y el tipo de deteccin son descritos en las monogra-
fas individuales.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 111
La composicin de la fase mvil tiene influencia significa-
tiva en el rendimiento cromatogrfico y en la separacin de
las sustancias presentes en la solucin a ser analizada. Para
un anlisis cuantitativo precisa, reactivos de alto grado de
pureza o solventes orgnicos de pureza cromatogrfica
deben ser utilizados. El agua, de calidad adecuada, debe
presentar baja conductividad y absorcin en la banda del
ultravioleta. En la cromatografa de particin, el coeficien-
te de particin y, consecuentemente, la separacin pueden
ser modificados por la adicin de otro solvente a la fase
mvil. En la cromatografa de cambio inico, la retencin
de las sustancias es afectada por el pH, por la fuerza inica
y por otras modificaciones en la composicin de la fase
mvil. La tcnica de modificar continuamente la composi-
cin de los solventes de la fase mvil durante el recorrido
cromatogrfico es denominada de elucin gradiente, y es
aplicada para separar mezclas complejas de sustancias con
diferentes factores de capacidad. No obstante, detectores
que son sensibles a modificaciones en la composicin de
la fase mvil, como los refractmetros, tiene su utilizacin
limitada con la tcnica de elucin gradiente.
El detector debe presentar una amplia banda de actuacin
5
y las sustancias a ser analizadas deben estar separadas de
cualquier interferente. La banda lineal para una sustancia
es aquella en la cual la respuesta del detector es directa-
mente proporcional a su concentracin.
Los sistemas de CLAE son calibrados comparando las res-
puestas de los picos obtenidos con las respectivas concen-
traciones de sustancias qumicas de referencia (SQR). Re-
sultados cuantitativos confiables son obtenidos por medio
de calibracin con estndar externo, cuando inyectores o
muestreadores automticos son preferencialmente utiliza-
dos. Ese mtodo envuelve la comparacin directa de las
respuestas obtenidas con los picos, separadamente anali-
zados, de las soluciones estndar y muestra. En los casos
en que la estandarizacin externa es utilizada, los clculos
pueden ser realizados segn la ecuacin:
Ca = Cp (Ra / Rp)
en que,
Ca = concentracin de la solucin muestra;
Cp = concentracin de la solucin estndar;
Ra = respuesta (rea o altura) del pico de la solucin mues-
tra;
Rp = respuesta (rea o altura) del pico de la solucin es-
tndar.
Si la inyeccin es realizada por medio de jeringa, mejores
resultados cuantitativos son obtenidos por medio de cali-
bracin con estndar interno, adicionndose una cantidad
conocida de una sustancia qumica de referencia no interfe-
rente a las soluciones estndar y muestra. La relacin de las
respuestas obtenidas con la sustancia a ser analizada y con
el estndar interno es utilizada para expresar el resultado
cuantitativo. En los casos en que la estandarizacin inter-
na es utilizada, los clculos pueden ser realizados segn la
ecuacin:
 112 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
en que,
Rai = respuesta (rea o altura) del pico del estndar interno
en la solucin muestra;
Rpi = respuesta (rea o altura) del pico del estndar interno
en la solucin estndar.
Debido a variaciones normales entre equipos, solventes,
reactivos y tcnicas, es necesaria una prueba de adecuacin
del sistema para asegurar que el mtodo descrito sea apli-
Figura 1 - Separacin cromatogrfica de dos sustancias.
Tiempo de retencin (t), Factor de retencin (k) y Tiempo
de retencin relativo
El tiempo de retencin en cromatografa es caracterstico de
la sustancia analizada, no obstante no es exclusivo. La com-
paracin entre los tiempos de retencin de la muestra y de la
sustancia qumica de referencia puede ser utilizada como in-
dicativo de la identidad de la sustancia, sin embargo es insu-
ficiente para garantizar la total caracterizacin de la muestra.
El tiempo de retencin absoluto puede variar entre equipos
y conforme el uso de solventes y reactivos diferentes. En ese
sentido, las comparaciones son hechas en trminos de factor
de retencin, k, calculado segn la expresin:
(t-t0)
k=
t0
en que,
t = tiempo de retencin de la sustancia analizada;
t0 = tiempo muerto.
El factor de retencin, k, es la razn entre la cantidad de la
sustancia con afinidad por la fase estacionaria y la cantidad
con afinidad por la fase mvil. Cuanto mayor a afinidad de
la sustancia por la fase estacionaria mayor su retencin.
El concepto de tiempo de retencin relativo tambin pue-
de ser aplicado. Para tanto, se debe definir una sustancia,
de una mezcla, como la principal. Esa tendr el tiempo de
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
cado de forma irrestricta. Los principales parmetros de la
adecuacin del sistema estn descritos en Interpretacin de
los cromatogramas y en Adecuacin del sistema.
INTERPRETACIN DE LOS CROMATOGRAMAS
En la Figura 1 est representada una separacin cromato-
grfica tpica de dos sustancias, siendo t1 y t2 los respec-
tivos tiempos de retencin. Los trminos h, h/2 y Wh/2 co-
rresponden a la altura, a la media altura, al largo a media
altura respectivamente, y W representa el largo del pico en
la lnea de base, por el mtodo de la triangulacin. La seal
relativa al tiempo muerto, t0, se refiere a una sustancia no
retenida en la columna cromatogrfica.
retencin relativo de 1. Todas las otras sustancias tendrn
sus tiempos de retencin relacionados con el tiempo de re-
tencin de la sustancia principal.
Nmero de bandejas tericas(N)
El nmero de bandejas tericas, N, es indicativo de la efi-
ciencia de la columna. Puede estar expresado en nmeros
de bandejas tericas por columna o nmero de bandejas
tericas por metro. Para picos con formato gaussiano, el
nmero de bandejas tericas por columna es calculado se-
gn las expresiones:
El valor de N depende de la sustancia a ser analizada y de
las condiciones de anlisis, como fase mvil, temperatura
y fase estacionaria.
Resolucin (R)
La resolucin, R, es el parmetro cromatogrfico que indi-
ca el grado de separacin entre dos sustancias en una mez-
cla, y es calculada segn las expresiones,

en que,
t2 y t1 = tiempos de retencin de las dos sustancias de la
mezcla;
W2 y W2 = respectivas anchuras de los picos en la lnea de
base, por el mtodo de la triangulacin;
W1h/2 y W2h/2 = respectivas anchuras de los picos a la media
altura.
El rea o a altura del pico son, usualmente, proporcionales
a la cantidad de la sustancia eluida. el rea bajo el pico, ge-
neralmente, es ms utilizada, no obstante puede ser menos
precisa si hubiere otros picos interferentes. Para medidas
manuales, el grfico debe ser obtenido en velocidad mayor
que la usual, minimizando los errores en la obtencin de la
anchura y de la anchura a la media altura de los picos. Para
el anlisis cuantitativo, las sustancias deben estar totalmen-
te separadas de cualquier sustancia interferente.
Figura 2 - Cromatograma representando la asimetra del pico.
ADECUABILIDAD DEL SISTEMA
Las pruebas de adecuabilidad del sistema son parte in-
tegrante de los mtodos de cromatografa lquida. Son
aplicadas con la finalidad de verificar si la resolucin y la
reproductibilidad del sistema cromatogrfico estn adecua-
das para los anlisis a ser realizados. Los principales par-
metros necesarios para la verificacin de la adecuabilidad
del sistema son descritos a continuacin.
La resolucin, R, es funcin de la eficiencia de la columna,
N, y es especificada para garantizar que sustancias eluidas
prximamente, presenten separacin satisfactoria sin inter-
ferencias mutuas.
Rplicas de inyecciones de la solucin estndar son traba-
jadas, estadsticamente, para verificar si los requisitos para
la precisin del anlisis fueron alcanzados. A menos que
especificado en la monografa individual, son utilizados
los datos de cinco rplicas de inyecciones para calcular el
desvo estndar relativo (DPR), si la especificacin fuese
igual o inferior a 2,0%. Si el desvo estndar relativo es-
pecificado fuese superior a 2,0%, los datos de seis rplicas
deben ser utilizados.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 113
Factor de cola (T)
El factor de cola, T, que indica la simetra del pico, presen-
ta valor igual a 1 cuando el pico es perfectamente simtri-
co. Ese valor aumenta a medida que la asimetra del pico se
torna ms pronunciada. En algunos casos, valores inferio-
res a 1 pueden ser observados. A medida que la asimetra
del pico aumenta, la integracin y la precisin se tornan
menos confiables. El factor de cola es calculado segn la
expresin:
en que,
W0 05 = anchura del pico a 5% de la altura;
f = valor de la porcin anterior del pico, con relacin a la
anchura a 5% de la altura, de acuerdo con la Figura 2
El factor de cola, T, que indica la simetra del pico, es igual
a 1 para picos perfectamente simtricos y mayor que 1 para
picos que presentan asimetra. En algunos casos, valores
menores que 1 pueden ser observados.
Estas pruebas son realizadas despus de recoger los resul-
tados de rplicas de inyecciones de la solucin estndar
u otra solucin especificada en la monografa individual.
La especificacin de esos parmetros cromatogrficos, en
una monografa, no impide la modificacin de las condi-
ciones de anlisis. Ajustes en las condiciones de trabajo,
para alcanzar los parmetros de adecuabilidad del siste-
ma, pueden ser necesarios. A menos que especificado en
la monografa individual, los parmetros de adecuabilidad
del sistema son determinados a partir de los datos obteni-
dos con el pico de la sustancia de inters. La precisin del
sistema, demostrada por medio de rplicas de la solucin
estndar, debe ser alcanzada antes de las inyecciones de las
soluciones muestras. La adecuabilidad del sistema debe ser
verificada durante todo el anlisis cromatogrfico, por in-
yeccin de solucin estndar en intervalos de tiempo apro-
piados. Cuando hubiere cambio significativo en el equipo
o en un reactivo, las pruebas de adecuabilidad del sistema
deben ser realizadas antes de las inyecciones de la muestra.
 114 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
El anlisis no ser vlido a menos que los requisitos de la
prueba de adecuabilidad del sistema sean alcanzados.
5.2.17.4.1 Cromatografa de iones
La cromatografa de iones se refiere al mtodo de separa-
cin y determinacin de iones utilizando cromatografa a
lquido de alta eficiencia (CLAE). Esta tcnica est basa-
da en un proceso de separacin de los componentes de la
muestra entre dos fases: fase mvil y fase estacionaria. El
proceso de separacin es resultante de interacciones espe-
cficas entre las especies presentes en la muestra en ambas
las fases. El mecanismo de interaccin con la fase estacio-
naria es a cambio inico, donde las columnas utilizadas son
constituidas por un grupo funcional cargado, generalmente
SO3-, COO-, NH3+, NR3+ ligado a una matriz polimrica,
como slice o copolmero del tipo poliestireno-divinil-
benceno. La fase mvil tambin contiene especies inicas
ocurriendo, de esta forma, una competicin entre la distri-
bucin de las especies presentes en la muestra entre a fase
mvil y la fase estacionaria. Para cada ion, el proceso de
cambio est caracterizado por el equilibrio de distribucin
entre la fase mvil y la fase estacionaria.
5
Los intercambiadores utilizados pueden ser clasificados en
fuertes, medios y suaves, dependiendo del grupo funcional
ligado a la matriz polimrica. Los intercambiadores ini-
cos fuertes son aquellos que se ionizan completamente en
una amplia banda de pH, como grupo sulfnico y amonio
cuaternario. El grado de disociacin de los intercambiado-
res inicos suaves y medios es dependiente del pH y, de
esta forma, la capacidad de estos intercambiadores vara
en funcin del pH. Se puede citar como ejemplo, el grupo
carboxlico y poliamina.
Esta tcnica permite que la conductividad elctrica sea
usada para la deteccin y determinacin cuantitativa de
los iones en solucin, despus de la separacin. General-
mente, la cromatografa de iones con columna de cambio
aninica y detector por conductividad puede ser utilizada
para la determinacin de los iones F-, Cl-, Br-, SO/42-
, PO43-, I-, entre otros. En virtud de la conductividad
elctrica ser una propiedad comn a todas las especies
inicas en solucin, el detector por conductividad tiene
la capacidad de monitorear todas las especies inicas. El
problema que ocurre en la utilizacin de la conductivi-
dad elctrica para cuantificar las especies inicas eluidas
puede ser causado por la alta conductividad de los iones
presentes en la fase mvil, principalmente debido al ion
sodio, imposibilitando la cuantificacin de otros iones.
Este problema es superado con el uso de un supresor del
eluyente, posicionado despus de la columna de separa-
cin, donde ocurre la conversin de los iones del eluyente
en especies que contribuyen para una condutancia baja o
nula. El cido carbnico, resultante del cambio catinico,
es levemente disociado, poseyendo una baja conductivi-
dad (seal de conductividad de la lnea base es menos
significativa). De esta forma, la sensibilidad, para la de-
terminacin de aniones, puede ser aumentada significati-
vamente, en un factor de 10 veces o superior, cuando son
utilizados supresores.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Un equipo de cromatografa de iones consiste, bsicamen-
te, en el mismo sistema utilizado para CLAE. Este sistema
consiste de una bomba de alta propulsin, una vlvula de
inyeccin con ansa de muestreo adecuada, columna de se-
paracin (para la separacin de aniones debe ser utilizada
una columna de cambio aninico), una post-columna, caso
necesario, para conversin de los iones del eluyente en es-
pecies con menor conductividad y un detector de conduc-
tividad.
PROCEDIMIENTO
Para operar el cromatgrafo de iones, se recomienda seguir
las instrucciones del fabricante. Las determinaciones son
hechas por comparacin con soluciones de referencia, con-
teniendo concentraciones conocidas del analito.
Fase mvil: preparar la fase mvil de acuerdo con las espe-
cificaciones recomendadas por el fabricante de la columna
de cambio aninico utilizada. Se recomienda la utilizacin
de fase mvil compuesta por una mezcla de carbonato y bi-
carbonato de sodio (Na2CO3/NaHCO3), en la banda de con-
centracin de 1,0 a 4 mmol/L, dependiendo de la columna
utilizada. Utilizar el caudal de la fase mvil recomendada
por el fabricante del equipo y de acuerdo con la columna
de cambio inico utilizada. Durante los anlisis utilizando
la deteccin por conductividad, regenerar la columna de
supresin qumica, conforme recomendacin del fabrican-
te. Se recomienda la utilizacin de H2SO4 0,005 mol/L y
posterior lavado con agua purificada.
Calibracin: preparar al menos cuatro soluciones de refe-
rencia del elemento a ser determinado, cubriendo la banda
de concentracin recomendada por el fabricante del equi-
po para el analito en anlisis e inyectar, separadamente,
cada solucin de referencia en el equipo, utilizando ansa
de muestreo adecuada. Se recomienda el uso de ansa de
muestreo de 20 a 100 L. Registrar los cromatogramas e
integrar las seales en rea o en altura de pico. Despus de
la calibracin, trazar la curva de calibracin. Preparar la
solucin de la muestra conforme indicado en la monogra-
fa, ajustando su concentracin para que esta quede situada
dentro de la banda de concentracin de las soluciones de
referencia. Inyectar la muestra en el cromatgrafo, regis-
trar la lectura y repetir esta secuencia tres veces, adoptando
el promedio de las tres lecturas. Determinar la concentra-
cin del elemento por la curva de calibracin. En el caso
que sea hecha la determinacin simultnea de varios anio-
nes, pueden ser hechas soluciones de referencia contenien-
do todos los analitos.
5.2.17.5 CROMATOGRAFA A GAS
Cromatografa a gas (CG) es una tcnica de separacin
cromatogrfica basada en la diferencia de distribucin de
especies de una mezcla entre dos fases no miscibles, en la
cual la fase mvil es un gas de arrastre que se mueve a tra-
vs de la fase estacionaria contenida en una columna. CG
est basada en el mecanismo de adsorcin, distribucin de
masa o exclusin por tamao. Es aplicada a sustancias y
sus derivados que se volatilizan bajo las temperaturas em-

pleadas, y es utilizada para identificacin, prueba de pureza
y determinacin cuantitativa.
Cuando un constituyente vaporizado es conducido por el
gas de arrastre para dentro de la columna, l es particiona-
do entre la fase mvil gaseosa y la fase estacionaria por un
proceso de distribucin contracorriente dinmico, presen-
tando una retencin mayor o menor debido a fenmenos de
sorcin y desorcin sobre a fase estacionaria.
EQUIPO
El equipo consiste en una fuente de gas de arrastre y un
controlador de flujo, una cmara de inyeccin, una colum-
na cromatogrfica contenida en un horno, un detector y un
sistema de adquisicin de datos (o un integrador o registra-
dor). El gas de arrastre circula por la columna con flujo y
presin controlados y sigue directamente para el detector.
El inyector, la columna y el detector presentan temperatura
controlada. La cromatografa se realiza a temperatura cons-
tante o utilizando un programa de temperatura adecuado.
Los compuestos que harn la cromatografa, tanto en solu-
cin como gases, son inyectados, entrando en contacto con
el gas de arrastre en la cmara de inyeccin. Dependiendo
de la configuracin del equipo, la mezcla a ser analizada
debe ser inyectada directamente en la columna o debe ser
vaporizada en la cmara de inyeccin y mezclada en el gas
de arrastre antes de entrar en la columna.
Una vez en la columna, los constituyentes de la mezcla son
separados en funcin de sus diferentes ndices de retencin
lineal, los cuales son dependientes de la presin de vapor
y del grado de interaccin con la fase estacionaria. El n-
dice de retencin, que define la resolucin, el tiempo de
retencin y la eficiencia de la columna con relacin a los
componentes de la mezcla, tambin es dependiente de la
temperatura. El uso de programas de temperatura para el
horno donde est la columna presenta una ventaja en la efi-
ciencia de separacin de los compuestos que se comportan
diferentemente en la presin de vapor.
Los compuestos salen separados de la columna, pasando
por un detector, que responde a cantidad de cada compues-
to presente. El tipo de detector a ser utilizado depende de
la naturaleza de los compuestos a ser analizados y es espe-
cificado en cada monografa. Los detectores son calentados
para evitar la condensacin de los compuestos eluidos. La
salida del detector est dada en funcin del tiempo de re-
tencin, generando un cromatograma, que consiste de una
serie de picos en el eje del tiempo. Cada pico representa un
compuesto de la mezcla vaporizada, a pesar de que algunos
picos puedan salir superpuestos. El tiempo de elucin es
caracterstico de un compuesto individual y la respuesta
del instrumento, medido como el rea del pico o la altura
del pico, es en funcin de la cantidad presente.
Inyectores
Inyecciones directas de soluciones es el modo usual de in-
yeccin, a menos que sea indicado diferentemente en la
monografa. La inyeccin puede realizarse directamente
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 115
en la cabeza de la columna utilizando una jeringa o una
vlvula de inyeccin, o en una cmara de vaporizacin que
puede estar equipada con un divisor de flujo. La cantidad
de muestra que puede ser inyectada en una columna capilar
sin saturar es menor cuando comparada a la cantidad que
puede ser inyectada en columnas empaquetadas. Columnas
capilares, sin embargo, frecuentemente son utilizadas con
inyectores capaces de dividir la muestra en dos fracciones
(modo split), una menor que entra en la columna y otra
mayor que es descartada. Esos inyectores pueden ser utili-
zados sin divisor de muestra (modo splitless) para anlisis
de componentes en menor cantidad o en trazos.
Las inyecciones de la fase de vapor pueden ser efectuadas
por sistema de inyeccin en espacio confinado (headspace)
esttico o dinmico.
Sistema de inyeccin en espacio confinado (headspace)
esttico (purge y trap) incluye un dispositivo de concen-
tracin, por donde las sustancias voltiles de la solucin
son arrastradas hasta una columna adsorbente, mantenida
a baja temperatura donde son adsorbidas. Las sustancias
retenidas son entonces desorbidas en una fase mvil por
5
calentamiento rpido de la columna adsorbente.
Sistema de inyeccin en espacio confinado (headspace) di-
nmico incluye una cmara de calentamiento de las mues-
tras, termostticamente controlada, en la cual se colocan
frascos (viales) cerrados donde muestras slidas o lquidas
son colocadas por un perodo de tiempo determinado, para
permitir que los componentes voltiles de las muestras al-
cancen el equilibrio entre la fase no gaseosa y la fase de
vapor. Despus de establecido el equilibrio, una cantidad
pre- determinada del espacio confinado del frasco es inyec-
tada en el cromatgrafo.
Fases estacionarias
Las fases estacionarias estn contenidas en columnas que
pueden ser:
Una columna capilar de slice fundida cuya pared est
revestida con la fase estacionaria;
Una columna empaquetada con partculas inertes im-
pregnadas con la fase estacionaria;
Una columna empaquetada con la fase estacionaria s-
lida. Las columnas capilares, usualmente hechas de s-
lice fundida, presentan un dimetro interno () de 0,10
a 0,53 mm y un largo de 5 a 60 m. La fase lquida o
estacionaria que puede estar qumicamente ligada a la
superficie interna, es una pelcula de 0,1 a 5,0 ^m de
espesor, a pesar de que fases estacionarias no polares
puedan alcanzar 5 m de espesor.
Las columnas empaquetadas, de vidrio o metlicas, pre-
sentan largo de 1a 3 m con un dimetro interno () de 2 a
4 mm. Las fases estacionarias consisten, generalmente, en
polmeros porosos o soportes slidos impregnados con la
fase lquida llegando a, aproximadamente, 5% (p/p). Co-
lumnas de alta capacidad, con la fase lquida llegando a,
aproximadamente, 20% (p/p), son utilizadas para una am-
plia banda de compuestos y para determinacin de com-
 116 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
puestos con bajo peso molecular como el agua. La capa-
cidad requerida influencia la eleccin del soporte slido.
Los soportes para anlisis de compuestos polares en co-
lumnas empaquetadas con una fase estacionaria de baja
polaridad y baja capacidad deben ser inertes para evitar
una excesivo prolongacin de los picos. La reactividad de
los materiales de soporte puede ser reducida por silaniza-
cin antes del llenado con la fase lquida. Generalmente se
utiliza tierra de diatomeas lavada con cido y calcinada.
Los materiales estn disponibles en diversos tamaos de
partcula, siendo las partculas ms comnmente utilizadas
de 150 a 180 m (80 a 100 mesh) y de 125 a 150 m (100
a 120 mesh).
Fases mviles
El suprimento del gas de arrastre puede ser obtenido a par-
tir de un cilindro de alta presin o por un generador de gas
de alta pureza. En ambos los casos, el gas pasa por una
vlvula de reduccin de presin y el flujo es medido para,
entonces, entrar en la cmara de inyeccin y en la columna.
El tiempo de retencin y la eficiencia del pico dependen
5
de la calidad del gas de arrastre; el tiempo de retencin
es directamente proporcional al largo de la columna y la
resolucin es proporcional a la raz cuadrada del largo de
la columna. Para columnas empaquetadas, el promedio de
flujo del gas acarreador est usualmente expresado en mi-
lilitros por minuto, a la presin atmosfrica y temperatura
ambiente. El flujo medio es medido en la salida del detec-
tor, o con un dispositivo mecnico calibrado o con un tubo
de burbujeo, mientras la columna est con temperatura
de funcionamiento. La velocidad lineal del gas de arrastre
a travs de la columna empaquetada es inversamente pro-
porcional a la raz cuadrada del dimetro interno de la co-
lumna para un dado volumen de flujo. Flujos de 60 ml/min
en una columna de 2 mm de dimetro interno y 15 ml/min
en una columna de 2 mm de dimetro interno, proporcio-
nan velocidades lineares idnticas y, con eso, tiempos de
retencin similares. A menos que especificado en la mono-
grafa, el promedio de flujo para columnas empaquetadas
es de, aproximadamente, 30 a 60 ml/min. Para columnas
capilares, la velocidad del flujo lineal es usualmente utili-
zada en lugar del promedio de flujo. Esto es determinado a
partir del largo de la columna y del tiempo de retencin de
una muestra de metano diluida, utilizando un detector por
ionizacin de llama. Operando a altas temperaturas, exis-
te presin de vapor suficiente para que ocurra una gradual
prdida de la fase lquida, un proceso llamado sangrado.
Helio o nitrgeno son, generalmente, empleados como ga-
ses de arrastre para columnas empaquetadas, mientras que
los gases de arrastre utilizados para columnas capilares son
nitrgeno, helio e hidrgeno.
Detectores
Detectores por ionizacin de llama son los ms utilizados
pero, dependiendo de la finalidad de la anlisis, otros de-
tectores pueden ser empleados, incluyendo: conductividad
trmica, captura de electrones, nitrgeno-fsforo, espec-
trometra de masas, espectrometra en el infrarrojo con
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
transformada de Fourier, entre otros. Para anlisis cuan-
titativos, los detectores deben presentar una amplia varia-
cin dinmica lineal: la respuesta debe ser directamente
proporcional a la cantidad de compuesto presente en el
detector en una amplia banda de concentraciones. Detec-
tores por ionizacin de llama presentan una amplia banda
lineal y son sensibles a la mayora de los compuestos. La
respuesta de los detectores depende de la estructura y de la
concentracin del compuesto y del promedio de flujo de
la combustin, del aire y del gas de arrastre. A menos que
especificado diferentemente en la monografa, detectores
por ionizacin de llama operan tanto con helio cuanto con
nitrgeno como gas de arrastre para columnas empaqueta-
das, y con helio o hidrgeno para columnas capilares.
Los detectores por conductividad trmica emplean hilo de
metal calentado localizado en la corriente del gas de arras-
tre. Cuando un analito entra en el detector con el gas de
arrastre, la diferencia en la conductividad trmica de la co-
rriente de gas de arrastre (gas y componentes de la muestra)
relativo a un flujo de referencia del gas de arrastre sin ana-
lito es medida. En general, detectores por conductividad
trmica responden uniformemente a compuestos voltiles
sin considerar su estructura; no obstante, son considerados
menos sensibles que el detector por ionizacin de llama.
Detectores por ionizacin de llama alcalina, tambin lla-
mado NP o detector nitrgeno-fsforo, contienen una fuen-
te terminica, con una sal metal lcali o un elemento de
vidrio conteniendo rubidio u otro metal, que resulta en una
eficiente ionizacin de nitrgeno orgnico y compuestos
conteniendo fsforo. Es un detector selectivo que presenta
baja respuesta para hidrocarburos.
Detectores por captura de electrones contienen una fuente
radioactiva de radiacin ionizante. Exhiben una respuesta
extremamente alta a compuestos halogenados y grupo ni-
tro, pero poca respuesta a hidrocarburos. La sensibilidad
aumenta con el nmero y el peso atmico de tomos de
halgeno.
Dispositivos para tratamiento de datos
Estaciones de tratamiento de datos conectados en la salida
de los detectores calculan el rea y la altura de los picos, y
presentan los cromatogramas completos conteniendo los pa-
rmetros de la corrida y los datos de los picos. Los datos de
los cromatogramas pueden ser almacenados y reprocesados
por integracin electrnica u otro tipo de clculo que sea ne-
cesario. Esas estaciones de tratamiento de datos son utiliza-
das tambin para programar los recorridos cromatogrficos.
PROCEDIMIENTO
Columnas empaquetadas y capilares deben ser condiciona-
das antes del uso hasta que la lnea de base est estable. Eso
debe ser realizado operando a una temperatura arriba de
la especificada por el mtodo o por repetidas inyecciones
del compuesto o de la mezcla a realizar la cromatografa.
El fabricante de la columna generalmente da instrucciones
para el adecuado procedimiento de condicionamiento de la
columna. En caso de polisiloxanos metil y fenil sustituidos

trmicamente estables, una secuencia especial aumenta la
eficiencia y la inactividad: mantener la columna a la tem-
peratura de 250 C por 1 hora, con flujo de gas helio, para
retirar el oxgeno y solvente. Para el flujo de helio, calentar
hasta 340 C por 4 horas, y entonces reducir el calenta-
miento hasta temperatura de 250 C, y condicionar con flu-
jo de helio hasta la estabilidad de la lnea de base.
Despus del procedimiento de condicionamiento, equili-
brar la columna, el inyector y el detector a las temperaturas
y flujo de los gases especificados en la monografa hasta
la obtencin de una lnea de base estable. Preparar la(s)
solucin(es) muestra y de referencia como descrito. Las
soluciones deben estar exentas de partculas slidas.
Muchos frmacos son molculas polares reactivas. En ese
caso, puede ser necesaria la conversin de estos a deriva-
dos menos polares y ms voltiles, por tratamiento de los
grupos reactivos con reactivos apropiados.
Los ensayos requieren comparacin cuantitativa de un cro-
matograma con otro. La mayor fuente de error es la irrepro-
ductibilidad de la cantidad de muestra inyectada, marcada-
mente cuando inyecciones manuales son realizadas con el
auxilio de una jeringa. Los efectos de variabilidad pueden
ser minimizados por la adicin de un estndar interno, un
compuesto no interferente adicionado en la misma concen-
tracin en las soluciones muestra y estndar. El promedio
de las respuestas del pico del analito en relacin al estndar
interno es comparado entre los cromatogramas de la muestra
y del estndar. Cuando el estndar interno es qumicamen-
te similar a la sustancia a ser analizada, existe tambin una
compensacin para variaciones menores en la columna y en
las caractersticas del detector. En algunos casos, el estndar
interno puede ser conducido a travs de la preparacin de
la muestra antes del anlisis cromatogrfico para controlar
otros aspectos cuantitativos del ensayo. Inyectores autom-
ticos aumentan la reproductibilidad de las inyecciones de las
muestras y reducen la necesidad de estndares internos.
5.2.17.5.1 Cromatografa a gas en espacio
confinado (headspace)
La cromatografa a gas en espacio confinado (headspace)
es una tcnica particularmente adecuada para la separa-
cin y determinacin de compuestos voltiles presentes en
muestras slidas y lquidas. Este mtodo est basado en
el anlisis de una fase de vapor en equilibrio con una fase
slida o lquida.
EQUIPO
El equipo consta de un cromatgrafo a gas al cual se adapta
un dispositivo para la introduccin de la muestra, que puede
estar conectado a un mdulo de programacin que contro-
la automticamente la presin y la temperatura. Se es ne-
cesario, se puede acoplar un dispositivo de eliminacin de
solventes. La muestra a ser analizada es introducida en un
frasco provisto de un obturador adecuado que lo cierra y de
un sistema de vlvulas que permite la entrada de un gas de
arrastre. El frasco es colocado en una cmara termostatizada
a determinada temperatura para la muestra ser examinada.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 117
La muestra es dejada en esta temperatura por tiempo sufi-
ciente para permitir que se establezca el equilibrio entre la
fase slida y la fase gaseosa. El gas de arrastre es introducido
en el frasco y, despus de determinado tiempo, una vlvula
es abierta para permitir que el gas se expanda hasta la colum-
na cromatogrfica, arrastrando los componentes voltiles.
En lugar de utilizar un cromatgrafo especialmente adapta-
do para la introduccin de las muestras, tambin se pueden
utilizar jeringas hermticas y un cromatgrafo convencio-
nal. En este caso, el equilibrio entre las dos fases es condu-
cido en una cmara separada y la fase de vapor es transfe-
rida para la columna, tomando las precauciones necesarias
para evitar cualquier modificacin del equilibrio.
PROCEDIMIENTO
Ajustar las condiciones de trabajo del equipo a fin de ob-
tener una respuesta satisfactoria, utilizando las soluciones
de referencia.
Calibracin directa
5
Introducir separadamente, en frascos idnticos, la prepara-
cin a examinar y cada una de las soluciones de referencia,
segn las condiciones descritas en la monografa y evitan-
do el contacto entre la muestra y el dispositivo de inyec-
cin. Cerrar hermticamente los frascos e introducirlos en
la cmara termostatizada a temperatura y presin descritas
en la monografa. Despus de alcanzar el equilibrio, proce-
der a anlisis cromatogrfico en las condiciones descritas.
Adicin de estndar
Aadir, a una serie de frascos idnticos, volmenes iguales
de la solucin a examinar. Aadir a todos los frascos, ex-
cepto a uno de ellos, cantidades crecientes de una solucin
de referencia, de concentracin conocida de la sustancia a
examinar. De este modo, se obtiene una serie de prepara-
ciones conteniendo cantidades crecientes de determinada
sustancia. Cerrar hermticamente los frascos e introducir-
los en la cmara termostatizada, segn condiciones de tem-
peratura y presin descritas en la monografa. Despus de
alcanzar el equilibrio, proceder al anlisis cromatogrfico
en las condiciones descritas.
Calcular la ecuacin de la recta por regresin lineal, utili-
zando el mtodo de los mnimos cuadrados y, a partir de
ella, obtener la concentracin de la sustancia en examen en
la preparacin de la muestra, indicada por el intercepto de
la ecuacin.
5.2.18 POLAROGRAFIA
La polarografa, mtodo analtico electroqumico, se fun-
damenta en la medida de la corriente elctrica resultante
de la electrlisis de sustancias electroactivas (reducibles u
oxidables) bajo determinado potencial de electrodo y con-
diciones controladas. En otras palabras, la tcnica impli-
ca en el registro del aumento de la corriente en electrodo
polarizable, durante la electrlisis de sustancia disuelta en
el medio electroltico, en funcin del aumento de la ten-
 118 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

sin aplicada al sistema. El grfico de esta evolucin de la que las molculas electroactivas de la muestra alcancen el
corriente con relacin a la tensin el polarograma da microelectrodo por migracin elctrica y asegura, por eso,
informaciones cuali y cuantitativas sobre constituyentes que la corriente lmite sea efectivamente regulada apenas
electro reductibles o electro oxidables de la muestra. por difusin.

Entre las variantes de metodologa polarogrfica, la ms Al emplearse un microelectrodo de mercurio goteante, la

simple es la tcnica en corriente continua. Requiere, a superficie del electrodo es constantemente renovada (se
ejemplo de la potenciometra, el empleo de dos electrodos, forma gota nueva cada 3-5 segundos), ocurriendo, de ah,
el de referencia (generalmente electrodo de calomelano sa- variacin en la corriente medida dentro de dado intervalo;
turado, ECS) y el microelectrodo indicador (generalmente la corriente es ms baja cuando la gota se forma, llegando
electrodo de mercurio goteante, EMG). En algunos casos al mximo en el instante de la cada. El fenmeno explica
se emplea un tercer electrodo, auxiliar. El ECS de ele- la forma diente de sierra caracterstica de la onda pola-
vada rea superficial da potencial constante durante el rogrfica.
ensayo, mientras el EMG gotas de mercurio de dimen-
siones reproducibles fluyendo peridicamente de la extre-
midad de capilar ligado al depsito del metal asume el
potencial que le es dado por la fuente externa. El equipo
polarogrfico comprende, adems de los electrodos, la c-
lula polarogrfica (cuba de electrlisis), fuente de alimen-
tacin variable, dotada de voltmetro y microampermetro
(galvanmetro) y registrador grfico o digital.

De forma simplificada, la tcnica consiste en la disolucin

5
de la muestra (el mtodo tiene sensibilidad para concentra-
ciones de especie electroactiva en la banda de 10-2 a 10-4
M) en electrolito de soporte, responsable del mantenimien-
to de pequea corriente residual, pero que se muestra inerte
en la banda de potencial de transformacin de la muestra
(ventana de potencial). Inicialmente, sin aplicacin de ten-
sin en la fuente, (potenciostato de precisin), la tensin
suministrada al microelectrodo es nula y no habr indi-
cacin de corriente en el microampermetro. El creciente
aumento de tensin har con que un pequeo potencial al-
cance los electrodos. Bajo esta tensin, adems reducida,
eventuales impurezas del electrolito soporte y pequeas
concentraciones de oxgeno pueden sufrir reduccin en el
EMG (ctodo, en este caso), reducindose y provocando la
indicacin de pequeo paso de corriente. La elevacin pro-
gresiva de la tensin aplicada acentuar el proceso de re-
duccin y el aumento casi proporcional de la corriente. Se
alcanza, finalmente, el potencial necesario a la reduccin
del analito en la solucin de la muestra, lo que se refleja en
elevacin acentuada de la corriente leda en el microam-
permetro (galvanmetro) y registrada en el polarograma.
Hay, sin embargo, lmite para la proporcionalidad de la ele-
vacin tensin-corriente. Mientras la corriente se eleva (y Figura 1 - Polarograma de especie electrorreducible.
la reduccin se procesa), ocurre disminucin progresiva de
la concentracin de la especie electroactiva original junto POLAROGRAMA
a la superficie del electrodo. En dado momento la veloci-
dad de la electrlisis siendo constante tal concentracin Es ilustrado en la Figura 1 un polarograma tpico (EMG),
alcanza nivel insuficiente para permitir elevacin adicional caracterizado por 4 fases distintas. El segmento A es debi-
de la corriente y esta ltima pasa a ser limitada por la di- do a la corriente capacitiva, ic, incorporada a la corriente
fusin con la cual la especie electroactiva consigue difun- fardica, ip resultante de la oxidacin o reduccin de im-
dirse en el seno (interior) de la solucin electroltica para purezas del electrolito soporte, o de la muestra y pequeas
la superficie del EMG. Surge el nivel observado en el po- concentraciones de oxgeno, cuando este no es retirado por
larograma (Figura 1), siendo la corriente medida enton- completo de la solucin. El conjunto de estas corrientes se
ces denominada corriente de difusin un parmetro pro- denomina corriente residual, ir (ir = ic + if). En el segmento
porcional a la concentracin de especie electroactiva en la B del polarograma ocurre la corriente fardica, if debido
muestra (aspecto cuantitativo de la polarografa). Superado a la conversin de la sustancia en ensayo. La electrodes-
determinado nivel de tensin, la corriente vuelve a elevar- composicin lleva a la escasez de esta sustancia junto al
se. Ese aumento es causado por la reaccin del electrolito microelectrodo, verificndose el nivel (segmento C) donde
soporte. Su presencia, en elevadas concentraciones, impide aparece la corriente lmite, il. Esta comprende la suma de

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


las corrientes residual y de difusin (i= ir + id) en que la
corriente de difusin proporcional a la concentracin de
la especie electroactiva en la muestra tiene su valor de-
terminado por:
id = il + ir
Dos otras corrientes indeseables la de migracin y la
de conveccin pueden incorporar la corriente lmite. La
primera es suprimida por el empleo de electrolito soporte
inerte en la banda de potencial empleada, en concentracio-
nes, en el mnimo, 100 veces mayores que las de la especie
electroactiva.
La corriente de conveccin, a su vez, es eliminada por la no
agitacin de la solucin.
Finalmente, el segmento D del polarograma, en el cual
ocurre reversin de la proporcionalidad tensin-corriente,
corresponde a la reduccin de otras especies electroactivas,
cuando presentes, o, ms frecuentemente, a la electrlisis
del soporte.
Ecuacin de Ilkovic
A ecuacin de Ilkovic establece relaciones entre variables
comprendidas en la medida polarogrfica y la corriente de
difusin en el EMG:
en que
id = corriente de difusin, en A
708 = constante dependiente de diversos parmetros, inclu-
yendo la unidad adoptada para las variables, dimensin de
la gota de mercurio e instante de la medida de id,
n = nmero de electrones necesarios a la reduccin u oxi-
dacin de una molcula o ion de sustancia electroactiva,
D = coeficiente de difusin, en cm2/s,
C = concentracin de sustancia electroactiva, en milimo-
les/L, m = masa del flujo de mercurio, en mg/s,
t = tiempo de vida de la gota, en s.
La constante 708 englobando constante natural y el valor
del faraday es establecida para operacin a 25 C y es
aplicable a la polarografa de corriente continua muestrea-
da, en la cual, en vez del registro continuo de corriente, se
efecta apenas la lectura de la corriente al trmino de la
vida de la gota de mercurio, permitiendo obtencin de po-
larograma lineal. No obstante, al emplearse instrumentos
dotados de amortiguador de diente de sierra en el regis-
trador, se considera la corriente media de los pulsos. La
corriente de difusin obtenida segn la ecuacin de Ilkovic
pasa a ser a media para toda la vida de la gota de mercurio.
En este caso la constante adquiere el valor 607.
Las variables comprendidas en la ecuacin de Ilkovic de-
ben ser controladas para que la corriente de difusin sea
efectivamente proporcional a la concentracin de especie
electroactiva en la muestra analizada. Algunos iones y mo-
lculas orgnicas en solucin acuosa modifican su coefi-
ciente de difusin a la razn de 1 a 2% para cada grado
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 119
centgrado aumentado, tornando necesario que la clula
polarogrfica tenga su temperatura controlada con toleran-
cia de 0,5 C Los parmetros m y t, relacionados con di-
mensin y velocidad de renovacin de la gota de mercurio,
dependen de la geometra del capilar, siendo la corriente
de difusin proporcional a la raz cuadrada de la altura de
la columna de mercurio. Alturas adecuadas midindose
de la extremidad del capilar hasta el nivel de mercurio en
el depsito se encuentran entre 40 y 80 cm. El dimetro
interno del capilar en este caso es de 0,04 mm para largos
entre 6 y 15 cm. La altura exacta del capilar es ajustada
para permitir la formacin de una gota cada 3-5 segundos,
con circuito abierto y capilar inmerso en el electrolito bajo
ensayo.
As, si durante un ensayo en particular todos los parme-
tros a excepcin de la concentracin de la especie elec-
troactiva fueren mantenidos constantes, la ecuacin de
Ilkovic puede ser escrita como
id = KC
en que K representa el conjunto de variables mantenidas
5
constantes.
Esta relacin directa entre corriente de difusin y concen-
tracin es usualmente adoptada mediante la determinacin
previa de la corriente de difusin de solucin estndar de
referencia, de concentracin conocida. En seguida, bajo
condiciones idnticas, se determina la corriente de difusin
de la muestra y, finalmente, su concentracin:
en que P y A corresponden, respectivamente, a estndar y
muestra.
Una vez que polargrafos, en su mayora, son dotados de
registradores automticos, es ms fcil determinar grfica-
mente corrientes de difusin por la medida de la altura de
la onda polarogrfica (ver Figura 1). Los valores anotados,
en cm, pueden ser directamente aplicados a la frmula, sin
necesidad de su conversin en unidades de corriente elc-
trica:
AP CP
=
AA CA
en que AP y AA corresponden a las alturas de las ondas po-
larogrficas del estndar y de la muestra, respectivamente.
Potencial de media onda
La medida de la altura de la onda polarogrfica para fines
de anlisis cuantitativo debe ser efectuada trazndose lneas
rectas junto a los picos de las oscilaciones de la corriente
residual y de la corriente lmite y unindose, por medio de
tercera recta paralela al eje de las abscisas, las prolongacio-
nes de las dos primeras. La recta vertical es trazada pasando
por el punto de inflexin de la onda polarogrfica, corres-
pondiendo a la mitad de la distancia entre la corriente resi-
 120 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

dual y la corriente lmite (I = l / 2id). La proyeccin de esta Advertencia

recta sobre el eje de las ordenadas da el llamado potencial de
media onda, parmetro empleado para caracterizar sustan- Vapores de mercurio son txicos. Al manosear el metal,
cias electroactivas (aspecto cualitativo de la polarografa). trabajar en rea ventilada y evitar derrames que, en el caso
El potencial de media onda, E1/2, est dado en volts versus que ocurran, deben ser inmediata y cuidadosamente reco-
ECS (electrodo de referencia), salvo cuando hubiere espe- gidos.
cificacin diferente, y su valor como parmetro de identi-
ficacin deduce de su independencia de la concentracin y POLAROGRAFIA DE PULSO
caractersticas del EMG. No obstante, este parmetro vara
en funcin de la composicin, pH y temperatura del medio Polarografa de pulso consiste en una variante de tcnica,
electroltico. Cabe resaltar que, para los equipos modernos, superior, por la precisin y sensibilidad, a la polarografa
la medida de la altura de la onda polarogrfica puede ser de corriente continua en el dosificacin y en la identifica-
hecha automticamente empleando programas especficos cin de elevado nmero de sustancias en bajas concentra-
para adquisicin y procesamiento de datos. ciones, incluyendo elementos de trazo, metabolitos y, evi-
dentemente, frmacos. Su sensibilidad, cerca de 10 veces
Eliminacin de oxgeno ms elevada que la de la polarografa DC, permite determi-
naciones de 10-6 M.
El oxgeno es reducido en el EMG en dos etapas, convir-
tindose inicialmente en perxido de hidrgeno y, en se-
guida, en agua. El hecho de tales reacciones ocurren en
potenciales ms negativos que cero volts, versus ECS, pu-
diendo as interferir con la onda polarogrfica de la mues-
tra, torna necesario eliminar el gas disuelto en la solucin

5
previamente a la determinacin. La mejor forma consiste
en burbujear nitrgeno exento de oxgeno a travs de la
solucin durante un perodo de 10 a 15 minutos inmediata-
mente antes del ensayo, tomando la precaucin de previa-
mente saturar el nitrgeno (para evitar alteraciones en la
solucin electroltica debidas a la evaporacin) burbujen-
dolo a travs de pequeo volumen de solucin electroltica
en recipiente separado.

Es importante mantener la cuba electroltica parada y sin

vibraciones durante el registro polarogrfico con el intui-
to de evitar la formacin de corrientes de conveccin. En
consecuencia, es necesario retirar el tubo de nitrgeno de
la solucin durante el registro, y dejar el tubo sobre la su-
perficie de la solucin para llenar la parte superior de la
clula polarogrfica con nitrgeno (N ) previniendo, as, la
entrada de aire en la clula polarogrfica. Soluciones alca-
linas pueden ser desoxigenadas por la adicin de bisulfito
de sodio, siempre que este no interacte con integrantes de
la solucin electroltica.

Mximo polarogrfico

Efectuada la reduccin de la especie electroactiva (EMG

catodizado), muchas veces la onda polarogrfica se eleva
acentuadamente, muchas veces, antes de caer, de forma
igualmente acentuada, hasta el valor de la corriente lmi-
te. El fenmeno es denominado mximo polarogrfico y
la corriente correspondiente recibe el nombre de corriente
de adsorcin (ia). Trae el inconveniente de dificultar la me-
dida de la onda polarogrfica (corriente de difusin) y sus
causas todava poco claras comprenden la adsorcin de
electrolito a la superficie de la gota de mercurio. La elimi- Figura 2 - Medida de la corriente en relacin al tiempo en
nacin del mximo polarogrfico es, sin embargo, fcil- la polarografa de corriente continua (A); en la polarografa
mente efectuada mediante adicin de cantidades diminutas de pulso (B); y en la polarografa de pulso diferencial (C).
de determinados tensoactivos (supresores de mximo) al
medio electroltico. Sobresalen, para tal fin, el uso de so- En lugar de la aplicacin linealmente progresiva de poten-
lucin de gelatina a 0,005% (p/v) y solucin de rojo de cial y medida continua de la corriente desarrollada, la pola-
metilo a 0,01% (p/v), entre otras. rografa de pulso comprende la aplicacin de pulsos de po-

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


tencial creciente al EMG, coincidentes con el perodo final
de vida de las gotas de mercurio, cada pulso presentando
potencial ligeramente superior al anterior. La corriente, por
su vez, es muestreada en el instante final de duracin del
pulso de potencial, perodo en el cual la corriente capaci-
tiva adquiere valor prcticamente nulo y la corriente resi-
dual se compone casi que exclusivamente de la corriente
de difusin.
Tabla 2 - Polarograma obtenido en la
polarografa de pulso diferencial.
Por otro lado, la tcnica de pulsos no provoca disminu-
cin acelerada de la camada de difusin (concentracin
de especies electroactivas junto al electrodo), propiciando
la obtencin de corrientes de difusin ms elevadas para
concentraciones equivalentes. De ah el aumento de sen-
sibilidad inherente a la tcnica. Otro aspecto favorable de
la polarografa de pulso es la mayor facilidad en la medida
de la corriente lmite, exenta de oscilaciones, al contrario
de lo que ocurre en la polarografa de corriente continua.
En la polarografa de pulso diferencial, pulsos constantes,
de pequea amplitud, son superpuestos a una rampa de po-
tencial de tensin linealmente creciente. La medida de la
corriente es efectuada dos veces cada pulso inmediata-
mente antes de la aplicacin del pulso y, nuevamente, en
su instante final registrndose apenas la diferencia entre
los dos valores medidos (Figura 2). El registro grfico de
este sistema de medida diferencial da una curva semejante
a la derivada de la onda polarogrfica, mostrando pico ca-
racterstico (Figura 3). El potencial del pico polarogrfico
corresponde a E1/2 /2 en que E representa la altura del
pico. Gracias a la naturaleza del polarograma, que presen-
ta picos en vez de ondas polarogrficas tradicionales, la
polarografa de pulso diferencial propicia resolucin ms
elevada, a punto de permitir determinaciones simultneas
de especies electroactivas con potenciales de media-onda
prximos entre s, en concentraciones de la orden de 10-7M.
5.2.19 DETERMINACIN DEL PH
DETERMINACIN POTENCIOMTRICA DEL pH
El valor de pH es definido como la medida de la actividad
del ion hidrgeno de una solucin. Convencionalmente es
usada la escala de la concentracin de ion hidrgeno de
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 121
la solucin. El agua es un electrolito extremamente suave,
cuya autoionizacin produce ion hidronio (hidrgeno hi-
dratado) e ion hidrxido:
H2O + H2O <> H3O+ + OH-
Las concentraciones del ion hidronio en las soluciones
acuosas pueden variar entre lmites amplios, que experi-
mentalmente
pH = log [H3O+] = log 1/[H3O+],
Desta forma, a escala de pH uma escala invertida em re-
lao s concentraes de on hidrnio, ou seja, quanto me-
nor a concentrao de on hidrnio, mayor o valor do pH.
A determinao potenciomtrica do pH feita pela medi-
dada diferena de potencial entre dois eletrodos adequa-
dos, imersos na soluo em exame. Um destes eletrodos
sensvel aos ons hidrognio e o outro o eletrodo de
referncia, de potencial constante.
A equao que expressa a medida potenciomtrica de uma
5
clula :
pH = pHt = (E -Et)/ K,
en que
E = potencial medido cuando la clula contiene la solucin
muestra,
Et = potencial medido cuando la clula contiene la solu-
cin tampn,
pH = valor de pH en la solucin muestra
pHt = valor de pH en la solucin tampn, y
K = variacin del potencial por unidad de variacin de pH
tericamente equivale a 0,0591631 + 0,000198 (t-25), en
que t corresponde a la temperatura en la cual se opera.
El valor de pH est expresado por la ecuacin en relacin
al pH de la solucin estndar (pHp) y determinado en me-
didor de pH utilizando electrodo de vidrio.
Los aparatos comercialmente utilizados para la determina-
cin de pH son instrumentos potenciomtricos, provistos
de amplificadores electrnicos de corriente con clula de
vidrio calomelano, los cuales son capaces de reproducir
valores correspondientes a 0,02 de unidades de pH. La es-
cala de pH es calibrada no slo en milivolts, pero tambin
en unidades correspondientes de pH. De esa forma, no hay
necesidad de aplicarse la ecuacin arriba, que traduce la
medida electromtrica de pH. Una vez que las medidas de
actividad hidrognica son sensibles a variaciones de tem-
peratura, todos los medidores de pH son equipados con
ajuste electrnico de temperatura.
Soluciones tampn para calibracin del medidor de pH
Son empleadas buscando la medicin del aparato, permi-
tiendo linealidad en las respuestas con relacin a las altera-
ciones de potencial observadas. Las ms importantes son:
tetraoxalato de potasio 0,05 M, fosfato equimolar 0,05 M,
 122 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

tetraborato de sodio 0,01 M, carbonato de sodio y hidrxi-
do de calcio saturado a 25 C.
Las soluciones tampn son preparadas de la siguiente ma-
nera:
Tetraoxalato de potasio, 0,05M Reducir el te-
traoxalato de potasio a polvo fino y desecar en deseca-
dor con slice. Disolver exactamente 12,71g de KH3(-
C2O4)-2H2O en agua para alcanzar 1000 ml.
Biftalato de potasio, 0,05M Reducir el biftalato de
potasio a polvo fino y desecar a 110 C hasta peso cons-
tante. Disolver exactamente 10,21g de KHC8H4O4, pre-
viamente desecado a 100 C durante 1 hora, en agua,
para alcanzar 1000 ml.
Fosfato equimolar, 0,05M Reducir el Na2HPO4 y
KH2PO4 a polvo fino y desecar a 110 C hasta peso
constante. Disolver 3,55g de Na2HPO4 y 3,40g de
KH2PO4, en agua, para alcanzar 1000 ml.
Tetraborato de sodio, 0,01M Desecar el tetraborato
de sodio en desecador conteniendo solucin acuosa de
bromato de sodio hasta peso constante. Disolver 3,81g
de Na2B4O7-10H2O, en agua, para alcanzar 1000 ml.
Evitar absorcin de dixido de carbono.
volumtrico y aadir agua hasta 1000 ml. Agitar bien y
mantener en temperatura de 25 C 2oC, para adecua-
da saturacin (aproximadamente 0.02 M). Decantar a
25C antes de usar. Proteger para evitar absorcin de
dixido de carbono.
Carbonato de sodio Desecar el carbonato de sodio
en desecador con slice gel hasta peso constante. Pesar
exactamente 2,10 g. Desecar en estufa de 300 a 500
C hasta peso constante. Pesar 2,65 g. Disolver ambas
muestras en agua hasta 1000 ml.
Tales soluciones deben ser recin preparadas con agua exen-
ta de dixido de carbono y empleadas en plazo de tres me-
ses, tomndose cautela para evitar el crecimiento de hongos
y bacterias. Se acepta el empleo de conservantes desde que
no interfiera en la medicin potenciomtrica del pH.
El agua utilizada en el preparado de las soluciones debe ser
recientemente destilada, calentada a ebullicin por, como
mnimo, 15 minutos, enfriada y mantenida en recipiente
impermeable al dixido de carbono. Preparar, individual-
mente, las seis soluciones estndar y almacenarlas en fras-
cos de vidrio o de polietileno adecuados. Observar el plazo

5
Hidrxido de calcio, saturado a 25C Reducir el hi- de validez de las soluciones, una vez que el pH sufre alte-
drxido de calcio a polvo fino y desecar con slice en raciones con el pasar del tiempo.
desecador hasta peso constante. Transferir 5 g a baln

Tabla 1 - Relacin entre las temperaturas y los valores de pH de las soluciones-tampn para calibracin del medidor de pH
Tetraoxalato Tetraborato Hidrxido de
Temperatura Biftalato de Fosfato Carbonato
de potasio de sodio calcio saturado a
(C) potasio 0,05M equimolar de sodio
0,05M 0,01M 25C
10 1,67 4,00 6,92 9,33 13,00 10,18
15 1,67 4,00 6,90 9,27 12,81 10,12
20 1,68 4,00 6,88 9,22 12,63 10,07
25 1,68 4,01 6,86 9,18 12,45 10,02
30 1,68 4,01 6,85 9,14 12,30 9,97
35 1,69 4,02 6,84 9,10 12,14 9,93
40 1,70 4,03 6,84 9,07 11,99 -

PROCEDIMIENTO cos acoplados con detergentes aninicos, empleados como

Afericin del medidor de pH
Retirar el vaso de precipitados conteniendo solucin de
KCl en la cual est sumergido el electrodo cuando el medi-
dor no est en uso;
soluciones de lavado entre cada una de las operaciones de
afericin de los valores de pH. El agua tambin se presta
a esa funcin;
Si no hubiere precisin en las medidas, verificar posibles
daos en los electrodos y cambiarlos.

Lavar el electrodo con chorros de agua destilada y secar
con papel filtro;
Sumergir el electrodo en solucin tampn de referencia,
verificndose la temperatura en que se va a operar;
Ajustar el valor de pH hasta el valor de la tabla, mediante
el valor de calibracin;
Lavar el electrodo con varias porciones de la segunda solu-
cin tampn de referencia, sumergir el electrodo y verificar
el valor de pH registrado. El valor de pH no debe presentar
variaciones que superen 0,07 del valor de la tabla para la
segunda solucin estndar. Hay aparatos que poseen fras-
Determinacin del pH en la solucin muestra
Despus de la afericin conveniente, lavar el electrodo con
agua (o soluciones propias) y con varias porciones de la
solucin muestra. Para diluicin de las muestras, usar agua
destilada exenta de dixido de carbono;
La primera determinacin da un valor variable, habiendo
necesidad de proceder a nuevas lecturas. Los valores en-
contrados posteriormente no debern variar ms que 0,05
de unidad en tres lecturas sucesivas;
Para determinaciones que exijan alta precisin, las tempe-
raturas de las soluciones tampn y muestra, de los electro-

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


dos y de las aguas de lavado no deben estar arriba de 2 C
entre s. As, para que se reduzcan los efectos de histresis
trmica o elctrica de los electrodos, las soluciones deben
estar a la misma temperatura por, como mnimo, 30 minu-
tos antes del inicio de la operacin;
Es importante que, despus de la utilizacin del aparato, se
conserve el electrodo en solucin apropiada, normalmente
de KCl.
Contaminaciones de las soluciones stock deben ser evita-
das por la adopcin de procedimientos sistemticos, tales
como el cierre inmediato de los frascos conteniendo las
soluciones, a fin de prevenir introducciones accidentales
de pipetas o bastones, el uso de pipetas individuales para
cada solucin.
DETERMINACIN COLORIMTRICA DEL pH
Se basa en el empleo de soluciones indicadoras o de pape-
les indicadores, que tienen la propiedad de mudar de colo-
racin conforme la variacin del pH. En este caso, se trata
de medida aproximada, indicando apenas una banda de
valores, ms o menos amplia, conforme el indicador em-
pleado. La determinacin es llevada a cabo adicionndose
gotas de la solucin indicadora a la solucin en examen
o humedecindose papeles indicadores con la solucin en
examen y observndose el cambio de coloracin. Los colo-
res desarrollados por los indicadores en diversas bandas de
pH estn relacionados en Indicadores (14.1)
ACIDEZ Y ALCALINIDAD: ENSAYOS RPIDOS
Una solucin es considerada neutra cuando no modifica el
color de los papeles azul y rojo de tornasol, o cuando el
papel indicador universal adquiere los colores de la escala
neutra, o cuando 1 ml de la misma solucin toma color ver-
de con una gota de azul de bromotimol SI (pH 7,0).
Es considerada cida cuando toma color rojo el papel azul
de tornasol o 1 ml toma color amarillo por una gota de rojo
de fenol SI (pH 1,0 a 6,6).
Es considerada levemente cida cuando toma color leve-
mente rojo el papel azul de tornasol o 1 ml toma color ana-
ranjado por una gota de rojo de metilo SI (pH 4,0 a 6,6).
Es considerada fuertemente cida cuando toma color azul el
papel de rojo de congo o 1 ml toma color de rojo por la adi-
cin de una gota de anaranjado de metilo SI (pH 1,0 a 4,0).
Es considerada alcalina cuando toma color azul el papel
rojo de tornasol o 1 ml toma color azul por una gota de azul
de bromotimol SI (pH 7,6 a 13,0).
Es considerada levemente alcalina cuando toma color de
azul el papel rojo de tornasol o 1 ml toma color de rosa por
una gota de rojo de cresol SI (PH 7,6 a 8,8).
Es considerada fuertemente alcalina cuando toma color de
azul por una gota de timolftalena SI (pH 9,3 a 10,5) o de
rojo por una gota de fenolftalena SI (pH 10,0 a 13,0).
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 123
5.2.20 DETERMINACIN DE
AGUA
Muchas sustancias farmacopeicas se encuentran en la for-
ma hidratada o contienen agua adsorbida, tornndose rele-
vante su determinacin por mtodos especficos como el
mtodo volumtrico (5.2.20.1); mtodo de la destilacin
azeotrpica (5.2.20.2), o mtodo semimicro (5.2.20.3),
siendo indicado en la monografa especfica para cada sus-
tancia.
5.2.20.1 MTODO VOLUMTRICO
Determinar el tenor de agua, por el mtodo directo, salvo
cuando hubiere otra especificacin en la monografa espe-
cfica de la sustancia en anlisis.
MTODO DIRECTO
Se basa en la reaccin cuantitativa del agua con solucin
anhidra de dixido de azufre y yodo en presencia de una
solucin tampn que reacciona con iones hidrgeno.
5
En la solucin volumtrica, original, conocida como Re-
activo de Karl Fischer, el dixido de azufre y el yodo son
disueltos en piridina y metanol. La muestra puede tanto ser
titulada directamente (mtodo directo) como por retorno
(mtodo indirecto).
Aparatos
Se admite el empleo de cualquier equipo que permita la
exclusin adecuada de la humedad atmosfrica y la deter-
minacin del punto final de la titulacin. Para sustancias
incoloras, es posible detectarse el punto de equivalencia
por el cambio de color del reactivo, de amarillo canario
para mbar. Lo inverso es observado al adoptarse la titu-
lacin por retorno. Todava, es ms frecuente y preciso
determinarse el final de la titulacin electromtricamente.
Comprende el uso de dispositivo elctrico capaz de generar
diferencia de potencial de 200 mV entre dos electrodos de
platino inmersos en la solucin a ser titulada. Al ser alcan-
zado el punto de equivalencia, ligero exceso de reactivo
provoca elevacin brusca del flujo de corriente entre 50 a
150 A, durante 30 segundos a 30 minutos, dependiendo de
la naturaleza de la muestra (el perodo es menor cuando la
sustancia es soluble en el reactivo).
Algunos tituladores automticos poseen mecanismo para
cierre inmediato de la vlvula que controla la entrada del
titulante, as que detecta el cambio de potencial. Los apara-
tos comercialmente disponibles poseen un sistema cerrado
que consiste de una o dos buretas automticas, vaso de ti-
tulacin, agitador magntico y electrodo especifico. El aire
en el sistema es mantenido seco, con el uso de desecantes
adecuados.
Reactivo de Karl Fischer
Aadir 125 g de yodo a una solucin conteniendo 670 ml
de metanol y 170 ml de piridina. Dejar enfriar. Transfe-
 124 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
rir 100 ml de piridina para probeta de 250 ml, mantenida
fra en bao de hielo, pasar corriente de dixido de azufre
a travs del solvente hasta que su volumen alcance 200
ml. Lentamente, y bajo agitacin, aadir esa solucin a la
mezcla de yodo, fra, previamente preparada. Agitar hasta
completa disolucin del yodo y aguardar 24 horas antes de
estandarizar. Cuando recin preparada, la solucin reacti-
va neutraliza cerca de 5 mg de agua/ml, pero se deteriora
con rapidez, por tanto, se recomienda a su estandarizacin
inmediatamente antes del uso, o diariamente, cuando en
uso continuo. Proteger de la luz cuando en uso. Almacenar
el reactivo bajo refrigeracin en frasco mbar, provisto de
tapa esmerilada hermtica. Como opcin al preparado del
reactivo, se puede recurrir a soluciones reactivas comercia-
les. Tambin, pueden ser utilizados reactivos comerciales
que contengan otros solventes, base diferente de la piridina
u otro alcohol que no el metanol. Esos reactivos pueden ser
soluciones individuales u obtenidas por la mezcla de dos
reactivos provenientes de soluciones distintas. Cuando la
monografa especifique que el reactivo debe ser diluido,
seguir las instrucciones del fabricante del producto. Como
diluyente puede utilizarse metanol u otro solvente adecua-
do, como ter monoetlico de etilenoglicol.
5 Estandarizacin del reactivo
Colocar cantidad suficiente de metanol u otro solvente
apropiado en el frasco de titulacin para cubrir los electro-
dos y aadir cantidad suficiente de reactivo para suminis-
trar el color caracterstico de la orientacin o la indicacin
de (100 50) microamperes de corriente continua en oca-
sin de la aplicacin de 200 mV entre los electrodos.
Para la determinacin de trazos de agua (menos de 1%), es
preferible usar reactivos con un factor de equivalencia de
agua inferior a 2,0, como el tartrato de sodio dihidratado
(C4H4Na2O6.2H2O), previamente desecado a 150 C, por 3
horas. Pesar, rpidamente, de 150 a 350 mg de sal, exac-
tamente pesados, por diferencia, en el frasco de titulacin
y titular hasta el punto de equivalencia. El ttulo del reac-
tivo, en mg de agua/ml de reactivo, es suministrado por la
ecuacin:
en que
18,02 = peso molecular del agua
230,08 = peso molecular del tartrato de sodio di-hidratado
p = masa, en mg, de la porcin de ensayo de sal,
v = volumen, en ml, de reactivo consumido en la titulacin.
Para a determinacin precisa de cantidad significativa de
agua (ms de 1%), utilizar agua como referencia. Transfe-
rir de 25 a 250 mg de agua, exactamente pesados, por di-
ferencia, para el frasco de titulacin y titular hasta el punto
de equivalencia. Calcular el ttulo del reactivo, T, en mg de
agua/ml de reactivo, por la ecuacin
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
en que
p = masa, en mg, del agua,
v = es el volumen, en ml, de reactivo consumido.
Procedimiento
Salvo cuando en la monografa est especificado de modo
diverso, transferir 35 a 40 ml de metanol, u otro solvente
apropiado, para el recipiente de titulacin y titular con el
reactivo estandarizado hasta cambio visual o electromtri-
co, con el objetivo de eliminar toda la humedad que pue-
da estar presente (desconsiderar el volumen consumido,
pues l no entra en los clculos). Rpidamente, aadir al
recipiente de titulacin cantidad, exactamente pesada de la
muestra, que contenga 10 a 250 mg de agua, mezclar y titu-
lar hasta cambio visual o electromtrico. Calcular el tenor
de agua de la muestra, en mg, por la ecuacin
Tenor de agua (mg) = v xT
en que
v = volumen, en ml, de reactivo consumido;
T = ttulo del reactivo.
MTODO INDIRECTO
Sigue el mismo principio del mtodo directo, sin embargo,
en ese caso, se incorpora exceso de reactivo a la muestra
y, despus de aguardarse el tiempo necesario a la reaccin
cuantitativa, se titula el exceso de reactivo con solucin
estndar de agua en metanol. Esa tcnica, de uso irrestricto,
es especialmente recomendada para sustancias que liberan,
lentamente, su contenido de agua.
Aparatos y reactivo
Utilizar los mismos descritos en el mtodo directo.
Estandarizacin de solucin estndar de agua (mtodo
indirecto)
Preparar solucin estndar de agua diluyendo 2 ml de agua
en cantidad suficiente de metanol, u otro solvente adecua-
do, para completar 1000 ml. Estandarizar esa solucin con-
forme el procedimiento anterior, utilizando alcuotas de 25
ml. Calcular el contenido de agua, en mg/ ml de solucin,
por la ecuacin
en que
v = volumen, en ml, de reactivo consumido,
T = ttulo del reactivo, en mg/ml.
Procedimiento Cuando en la monografa as especifique,
transferir 35 a 40 ml de metanol, u otro solvente apropia-
do, para el recipiente de titulacin y titular con el reactivo
estandarizado hasta cambio visual o electromtrico, a fin
de eliminar toda la humedad que pueda estar presente (des-
considerar el volumen consumido, pues l no entra en los
clculos). Rpidamente, aadir al recipiente de titulacin,

cantidad, exactamente pesada de la muestra, que contenga
10 a 250 mg de agua y un volumen en exceso, exactamente
medido, del reactivo. Dejar en reposo por el tiempo nece-
sario para que la reaccin se complete y titular el reactivo
no consumido con solucin estndar de agua, hasta cambio
visual o electromtrico. Calcular el contenido, en mg, de
agua en la porcin de ensayo por la ecuacin:
en que
T = ttulo del reactivo,
v = volumen, en ml, del reactivo adicionado en exceso
despus de la incorporacin de la porcin de ensayo,
v = volumen, en ml, de solucin estndar de agua, nece-
sario
la neutralizacin del exceso de reactivo,
vr = volumen, en ml, de reactivo por ml de solucin estn-
dar de agua, determinado en la estandarizacin de esa.
Caso sea especificado en la monografa, calcular el tenor
de agua en porcentaje.
MTODO CULOMBIMTRICO
Para determinacin culombimtrica del agua se utiliza el
reactivo de Karl Fischer. El yodo, sin embargo, no es uti-
lizado como solucin volumtrica, pero obtenido por oxi-
dacin andica de una solucin conteniendo yoduro. La
clula de reaccin es constituida de un amplio comparti-
miento andico y de un restricto compartimiento catdico;
separados, entre s, por un diafragma. Tambin, pueden ser
utilizados otros tipos adecuados de clulas de reaccin,
como por ejemplo, sin el diafragma. Cada compartimiento
tiene un electrodo de platino que conduce la corriente a
travs de la clula. El yodo, que se produce en el electrodo
andico, reacciona, inmediatamente, con el agua que est
en el compartimiento. Cuando toda el agua es consumida,
se produce un exceso de yodo que normalmente se detecta,
electromtricamente, indicando el punto final. No es nece-
sario cambiar el reactivo de Karl Fischer despus de cada
determinacin. Un requisito necesario para ese mtodo es
que cada componente de la muestra sea compatible con los
dems componentes y que no produzcan reacciones secun-
darias. Normalmente las muestras son transferidas al reci-
piente de titulacin, en la forma de soluciones, mediante la
inyeccin a travs de un septo. Los gases pueden ser intro-
ducidos en la clula utilizando un tubo de entrada adecua-
do. La precisin del mtodo depende, fundamentalmente,
de la eliminacin de la humedad en el sistema. El control
del sistema puede ser monitoreado por la lnea de base. Ese
mtodo es, especialmente adecuado, para sustancias qu-
micas inertes como hidrocarburos, alcoholes y teres. En
comparacin con el mtodo volumtrico de Karl Fischer, la
culombimetra es un mtodo de microtitulacin.
Aparatos
Se admite el empleo de cualquier equipo disponible co-
mercialmente que posea un sistema totalmente hermtico,
equipado con electrodos especficos y agitador magntico.
El microprocesador del equipo controla el procedimiento
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 125
analtico y posibilita la visualizacin de los resultados. No
es necesario proceder a la calibracin previa del equipo, ya
que la corriente consumida puede ser medida en la forma
absoluta.
Reactivo
Utilizar el mismo descrito en el mtodo directo.
Preparacin de la muestra
Si la muestra es soluble, disolver cantidad adecuada, exac-
tamente pesada, en metanol anhidro o en otro solvente ade-
cuado. Si la muestra es insoluble, puede extraerse el agua
utilizndose un solvente anhidro que puede ser inyectado,
en cantidad adecuada, exactamente pesada, en la solucin
del analito. Alternativamente, puede utilizarse tcnica de
evaporacin, en que el agua liberada es colectada en un
tubo de aire corriente de gas inerte y anhidro.
Procedimiento
Con una jeringa seca, inyectar rpidamente, la muestra pre-
5
viamente preparada conforme descrito en Preparacin de
la muestra, medido con exactitud y con un contenido de
agua estimado de 0,5 mg a 5 mg, o de acuerdo con las ins-
trucciones del fabricante del equipo. Mezclar y cuantificar
por culombimetra, determinando el punto final electrom-
tricamente. Determinar el contenido de agua en la muestra
directamente en la planilla del equipo y calcular el porcen-
taje presente de la sustancia. Realizar la determinacin en
blanco y proceder las correcciones necesarias.
5.2.20.2 MTODO DE LA DESTILACIN
AZEOTRPICA
A semejanza del mtodo volumtrico, el azeotrpico po-
sibilita la determinacin de agua contenida en muestras
de naturaleza mltiple. El agua presente es destilada con
tolueno, solvente en el cual es prcticamente inmisci-
ble, y separada en tubo receptor apropiado despus de
enfriamiento. Conviene, sin embargo, emplear tolueno
previamente saturado con agua para evitar resultados ba-
jos debido a la disolucin de agua residual en el solvente
anhidro.
APARATO
Utilizar baln de fondo redondo (A) con capacidad para
500 ml, conectado por un tubo cilndrico (D) al tubo recep-
tor (B) (Figura 1). Las dimensiones crticas de las piezas
del aparato son: tubo cilndrico de 9 a 11 mm de dimetro
interno; tubo receptor con capacidad de 5 ml, y porcin
cilndrica, con 146 156 mm de largo, graduada en sub-
divisiones de 0,1 ml, de modo que el error de lectura no
sea superior a 0,05 ml para cualquier volumen indicado,
pudiendo, opcionalmente, ser provisto de grifo. La parte
superior del tubo cilndrico se liga, siempre, por medio de
juntas esmeriladas, al condensador de reflujo vertical (C)
de, aproximadamente, 400 mm de largo, por lo menos, por
8 mm de dimetro interno.
 126 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Partes del baln y del tubo cilndrico pueden ser guarneci-
das con tejido de amianto para mayor aislamiento trmico.
El calor para la destilacin debe ser, preferentemente, su-
ministrado por calentador elctrico dotado de control por
regulador o bao de aceite.
Limpiar el tubo receptor y condensador con mezcla sulfo-
crmica, enjuagar con agua y secar en estufa. Introducir en
el baln seco 200 ml de tolueno y aproximadamente 2 ml
de agua y destilar durante 2 horas. Enfriar y, despus de
cerca de media hora, medir el volumen de agua acumulado
en el tubo graduado.
PROCEDIMIENTO
Aadir al baln cantidad de muestra, exactamente pesada,
que contenga de 2 a 4 ml de agua. Si la sustancia es de na-
turaleza pastosa, envolverla en hoja de aluminio de modo
que la dimensin del paquete sea suficiente solamente para
su paso por el cuello del frasco. Si la sustancia induce a
Figura 1 - Aparato para determinacin de agua por el mtodo azeotrpico.
5.2.20.3 DETERMINACIN DEL AGUA
POR EL MTODO SEMIMICRO
La determinacin del agua por el mtodo semimicro es rea-
lizada en un aparato de titulacin de capacidad de 60 ml,
provisto de 2 electrodos de platino, de un tubo de admisin
para el nitrgeno, de un tapn adaptado a la extremidad de
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
ebullicin, aadir arena lavada y seca en cantidad sufi-
ciente para cubrir el fondo del baln o tubos capilares de
vidrio, del tipo empleado para determinacin de punto de
fusin, vedados en una de las extremidades. Aadir 200 ml
de tolueno, encender el equipo y calentar, moderadamente,
durante 15 minutos. Cuando el tolueno comience a hervir,
regular el calentamiento para que destile 2 gotas por se-
gundo. Destilada prcticamente toda el agua, acelerar la
velocidad de destilacin para 4 gotas por segundo. Con-
cluida la destilacin del agua, verter cerca de 10 a 15 ml de
tolueno por la boca del condensador de reflujo y proseguir
la destilacin por ms 5 minutos. Retirar la fuente de calor,
aguardar el enfriamiento del tubo receptor a temperatura
ambiente y desplazar eventuales gotas de agua retenidas
en la pared del tubo receptor con el auxilio de alambre de
cobre con extremidad envuelta en caucho (ltex). Una vez
concluida la separacin de las fases, leer el volumen de
agua depositado en el tubo receptor (descontando el volu-
men inicial) y calcular el porcentaje de agua en la porcin
de ensayo.
una bureta y de un tubo de admisin de aire protegido por
un agente de secado. La porcin de ensayo es introducida
por un tubo lateral provisto de un tapn esmerilado. Duran-
te la titulacin, la agitacin debe ser asegurada mediante el
auxilio de un agitador mecnico o a travs del burbujeo de
nitrgeno seco.

El trmino de la reaccin es determinado por la intensidad
del aparato. Un circuito apropiado, constituido por un po-
tencimetro de aproximadamente 2000 , conectado a una
batera de 1,5 V, permite aplicar una diferencia de potencial
variable. Esta es ajustada de tal manera para conducir una
corriente inicial suave a travs de los electrodos de platino
conectados en serie a un microampermetro. La aguja del
microampermetro se desva despus de cada adicin del
reactivo, volviendo inmediatamente a su posicin inicial.
El fin de la reaccin es indicado por un desvo que persiste
por, como mnimo, 30 segundos.
Utilizar el yodo sulfuroso SR despus de determinar su
equivalente en agua. Las soluciones y los reactivos utili-
zados deben ser mantenidos en condicin anhidra y preser-
vados de la humedad atmosfrica durante el dosificacin o
cualquier manipulacin.
El yodo sulfuroso SR debe ser conservado al abrigo de la
luz, de preferencia en un frasco provisto de una bureta au-
tomtica.
Las soluciones de yodo sulfuroso SR, comercialmente, dis-
ponibles presentan (o pueden presentar) una composicin
que difiere de la solucin de yodo sulfuroso SR por susti-
tucin de la piridina por diversos compuestos bsicos. El
empleo de esas soluciones reactivas debe ser precedido de
evaluacin que permita, en cada caso, verificar estequio-
metra y ausencia de incompatibilidad entre la sustancia a
ser ensayada y el reactivo. Salvo indicacin contraria, el
Mtodo A debe ser utilizado.
Mtodo A. Introducir en el frasco de titulacin cerca de 20
ml de metanol anhidro o el solvente prescrito en la mo-
nografa. Adicione al reactivo yodo sulfuroso SR solucin
hasta el cambio amperomtrico. Introducir, rpidamente, la
porcin de ensayo, agitar durante 1 minuto y titular con la
solucin yodo sulfuroso SR hasta nuevo cambio.
Mtodo B. Introducir en el frasco de titulacin cerca de 10
ml de metanol anhidro o del solvente prescrito en la mono-
grafa. Aadir yodo sulfuroso SR hasta el cambio ampero-
mtrico. Introducir, rpidamente, la porcin de ensayo de
la sustancia en un estado de divisin conveniente, y ense-
guida un volumen de yodo sulfuroso SR, suficiente para
obtener un exceso de aproximadamente 1 ml. En ese caso,
tambin, puede ser utilizado el volumen prescrito en la mo-
nografa. Dejar en reposo en frasco cerrado y al abrigo de
la luz durante 1 minuto o durante el tiempo prescrito en la
monografa, agitando ocasionalmente. Titular el exceso de
yodo sulfuroso SR con metanol anhidro o con otro solvente
prescrito en la monografa, adicionado de una cantidad de
agua conocida y prxima de 2,5 g/L, hasta regresar a la
suave corriente inicial.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 127
5.2.21 ANLISIS DE
SOLUBILIDAD POR FASES
La solubilidad de sustancia pura en dado solvente, a tem-
peratura constante, es parmetro caracterstico de la sus-
tancia, pudiendo, pues, servir para fines de identificacin y
evaluacin de grado de pureza. En ese principio, se basa el
anlisis de solubilidad por fases. El procedimiento consiste
en la adicin de porciones crecientes de muestra a volme-
nes constantes de solvente en el cual la sustancia analizada
muestra apenas ligera solubilidad, buscando la obtencin
de solucin saturada de esa sustancia. Una vez promovido
el equilibrio del sistema por agitacin prolongada, bajo
temperatura constante se determina el contenido total
de soluto en la solucin sobrenadante (generalmente por
tcnica gravimtrica) y se traza el diagrama de solubilidad
por fases, representando la composicin de la solucin, en
mg de soluto por g de solvente (ordenadas), por la com-
posicin del sistema, en mg de muestra adicionada por g
de solvente (abscisas). La Figura 1 ilustra diagrama de
ese tipo. a lo largo del segmento AB, la totalidad del s-
lido disuelve y es encontrada en la solucin (inclinacin
5
corresponde a la unidad). En el punto B la muestra satura
la solucin y adiciones subsiguientes no implican aumento
en su concentracin. La inclinacin del segmento de recta
BC es, por tanto, nula y la interseccin de la prolongacin
de esa recta con el eje de las Y da el valor de la solubilidad
de la sustancia.
Figura 1 - Diagrama de solubilidad por fases de
muestra constituida por una sola sustancia.
Si la muestra es constituida de dos sustancias (una de ellas
impureza de la otra, por ejemplo), el diagrama asume la
forma ilustrada en la Figura 2. El segmento AB presenta
inclinacin unitaria; el punto B indica saturacin de la so-
lucin con relacin a uno de los componentes de la muestra
(generalmente aquel que est presente en mayor propor-
cin); el segmento BC indica la solubilizacin del segundo
componente y el segmento CD la saturacin de la solucin
con este ltimo (inclinacin nula).
 128 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

a 50 mg/g. La solubilidad ptima comprende la banda de

10 a 20 mg.

Recomendaciones adicionales incluyen la inercia del sol-

vente frente a los componentes de la muestra (previndose,
inclusive, la posibilidad de formacin de solvatos o sales) y
el empleo de solvente de pureza y concentracin conocida
(trazos de impurezas afectan intensamente la solubilidad),
admitindose, sin embargo, el empleo de mezclas.

APARATOS

Comprende bao mara termostatizado, frascos y ampollas

Figura 2 - Diagrama de solubilidad por fases
de muestra conteniendo dos sustancias.
El valor de la inclinacin del segmento BC fase en que
solamente el segundo componente es solubilizado corres-
ponde a la proporcin de este componente en la muestra.
La sustraccin de este valor de la unidad da el contenido
del primer componente en la muestra, permitiendo el em-
pleo de la frmula (1-1).100 para la obtencin del tenor.
apropiadas y balanza analtica, con precisin de 10 g.
El bao de agua es provisto de termostato con tolerancia de
control de temperatura no superior a 0,1 C, especialmente
en la banda de 25-30 C, usual para los ensayos. El bao es
equipado con barra horizontal rotativa (25 rpm) provista de
garras fijadoras para las ampollas. Como alternativa, puede
ser usado vibrador (100 a 120 vibraciones / segundo) igual-
mente provisto de garras fijadoras de ampollas.

5
La inclinacin, i, es obtenida por la frmula (Y2-Y1) / (X2- La ampolla con capacidad para 15 ml al lado del llama-
X1), en queY1Y2 y X1, X2 corresponden, respectivamente, a do frasco de solubilidad tambin empleado en los ensayos,
proyecciones de puntos del segmento de recta BC sobre la est ilustrada en la Figura 3. Recipientes de especificacin
ordenada (composicin de la solucin) y la abscisa (com- diferente son admisibles desde que hermticos y apropia-
posicin del sistema). La extrapolacin del segmento BC dos a la tcnica descrita.
da el lmite de solubilidad, S1 en mg de soluto por g de
solvente, del primer componente, mientras la prolongacin
de la recta del segmento CD hasta el eje de las Y lleva a la
suma de las solubilidades de los dos componentes, S1 + S2.

La ocurrencia de desvos pronunciados en los puntos que

constituyen los segmentos de recta del diagrama indica fal-
ta de equilibrio en el sistema, a pesar de que estos tambin
puedan ser atribuidos a la existencia de solucin slida o
a desvos del comportamiento terico. si necesario, la in-
clinacin I puede ser calculada por aproximacin grfica o
a partir del mtodo estadstico de los mnimos cuadrados.

Una peculiaridad del anlisis de solubilidad por fases es

no ser tcnica aplicable a mezclas cuyos componentes es-
tn presentes en la muestra en la proporcin de sus solu-
bilidades. En este caso particular, ambos los componentes
promueven saturacin en el mismo punto, dando, como re-
sultado, diagrama de fases equivalente al de sustancia pura.

ELECCIN DE SOLVENTE

La eleccin de solvente para anlisis de solubilidad por fa-

ses est basada en la solubilidad del componente presente
en mayor proporcin en la muestra y en el mtodo de do-
sificacin adoptado para la determinacin de la concentra-
cin de la solucin formada. Siendo ms usual la tcnica
gravimtrica, conviene al solvente presentar volatilidad
suficiente para permitir su evaporacin al vaco, pero in-
suficiente para dificultar operaciones de transferencia y
pesaje. Se recomiendan solventes con punto de ebullicin Figura 3 - Ampolla utilizada en el anlisis de solubilidad por fases.
entre 60 C y 150 C. En trminos de solubilidad, es conve-
niente que el solvente presente capacidad de solubilizacin
de muestra en proporcin no inferior a 4 mg/g ni superior

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


PROCEDIMIENTO
Composicin del sistema
Pesar con exactitud un mnimo de 7 ampollas de 15 ml
rigurosamente limpias. Transferir cantidades crecientes
exactamente pesadas de muestra para cada ampolla, de
modo que la primera contenga cantidad apenas ligera-
mente menor que la solubilizable en 5 ml de solvente y
la ltima contenga ligero exceso de muestra. Despus de
transferir 5,0 ml de solvente para cada ampolla, enfriarlas
en mezcla de hielo seco y acetona y sellarlas con soplete
aire/gas, tomando la precaucin de guardar fragmentos de
vidrio resultantes del proceso.
Permitir que las ampollas alcancen la temperatura ambiente
y pesarlas, conjuntamente con sus respectivos fragmentos
de vidrio. Calcular la composicin del sistema, en mg/g,
para cada ampolla, por la frmula: 1000(M2-M1)/(M3-M2),
en que M2 corresponde a la masa de la ampolla conteniendo
muestra; M1 es a masa de la ampolla vaca y M3 es la masa
de la ampolla conteniendo muestra, solvente y eventuales
fragmentos de vidrio.
Equilibrio
El perodo necesario al establecimiento de equilibrio en los
sistemas contenidos en las ampollas es variable de acuerdo
con la naturaleza de la muestra, mtodo de agitacin (ro-
tacin o vibracin) y temperatura. La experiencia indica
plazo medio de 1 a 7 das para agitacin por vibracin y
7 a 14 das para el proceso rotacional. Para confirmar la
promocin de equilibrio, calentar la penltima ampolla de
la serie a 40 C con el objetivo de obtener supersaturacin.
El resultado es positivo si el punto correspondiente a esta
ampolla fuese coherente con los dems en el diagrama de
fases. Todava, resultado diverso no significa necesaria-
mente no haber sido alcanzado el equilibrio. Hay sustan-
cias con tendencia a permanecer en solucin supersaturada
y, siendo este el caso, cabe la ejecucin de serie de anlisis,
varindose el perodo de espera con el fin de asegurar la
coherencia de los puntos de la curva de solubilidad.
Composicin de la solucin
Alcanzado el equilibrio, colocar las ampollas en soporte
apropiado para que permanezcan en posicin vertical, con
los cuellos arriba del nivel del agua del bao termostatiza-
do. Aguardar la decantacin de los slidos en las ampollas,
abrirlas y recoger 2,0 ml de cada una por medio de pipeta
provista de copo de algodn o de otro material capaz de
actuar como filtro. Retirar el material filtrante de la pipeta
y transferir el lquido lmpido para frasco de solubilidad
(Figura 3) tarado y debidamente identificado, pesando
cada frasco despus de la operacin. Enfriar los frascos
en bao de hielo seco y acetona y, en seguida, evaporar el
solvente bajo presin reducida. Aumentar gradualmente la
temperatura de evaporacin, tomando la precaucin de no
exceder el lmite compatible con la estabilidad de la mues-
tra y desecar el residuo hasta peso constante. Calcular la
composicin de la solucin en cada frasco, en mg/g, por la
frmula 1000 (P3 P1)/(P2 -P3), en que P3 corresponde a la
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 129
masa del frasco conteniendo el residuo de la evaporacin;
P1 es la masa del frasco de solubilidad vaco (tara) y P2 es
la masa del frasco conteniendo la solucin.
Trazar diagrama de fases con base en los valores obtenidos
y determinar la pureza porcentual de la muestra en funcin
de la inclinacin del segmento de recta.
APLICACIN DEL ANLISIS DE SOLUBILIDAD
POR FASES EN LA PURIFICACIN DE SUSTANCIAS
Mientras las soluciones obtenidas en el proceso analtico
descrito contienen esencialmente todas las impurezas pre-
sentes en la muestra en proporcin aumentada con relacin
a la muestra original, prestndose despus de evapora-
cin del solvente a la determinacin cualitativa de las
impurezas, la fase es adecuada, por la elevada pureza, al
preparado de estndares de referencia para otros ensayos
analticos.
Procedimiento
Pesar cantidad apropiada de muestra y suspenderla en sol-
5
vente adecuado para alcanzado el equilibrio disolver
solamente 10% del material. Cerrar el frasco y aguardar es-
tablecimiento del equilibrio a la temperatura ambiente (en
general, 24 horas son suficientes). En seguida, recolectar la
solucin sobrenadante lmpida y evaporar, a temperatura
ambiente o prxima de esta, hasta sequedad. Por el hecho
de que la solucin contenga las impurezas de la muestra
original, se obtiene, por este procedimiento, material en
que la proporcin de impurezas se encuentra aumentada,
siendo la relacin de enriquecimiento aproximadamente
igual a la razn de la masa de la muestra por la masa de
slidos disueltos en el volumen de solvente empleado. Pu-
rificar el residuo no disuelto por lavado y secado (estndar
de referencia).
5.2.22 ELECTROFORESIS
PRINCIPIOS GENERALES
Por accin de un campo elctrico, las partculas cargadas
disueltas o dispersas en una solucin electroltica migran
en direccin al electrodo de polaridad opuesta. En la elec-
troforesis en gel, el desplazamiento de las partculas es re-
tardado por las interacciones con el gel de la matriz que
constituye el medio de migracin y se comporta como un
tamiz molecular.
Las interacciones de oposicin de la fuerza elctrica y de
la tamizacin molecular resultan en la tasa de diferencial
de migracin de acuerdo con el tamao, forma y carga de
partculas. Debido a sus propiedades fsico-qumicas di-
ferentes, las diversas molculas contenidas en una mezcla
migrarn a velocidades diferentes durante la electrofore-
sis, quedando as separadas en fracciones bien definidas.
Las separaciones electroforticas pueden ser conducidas
en sistemas sin fase de soporte (por ejemplo, separacin
en solucin libre en la electroforesis capilar), y o en me-
dios estabilizados como placas de camada fina, pelculas
o geles.
 130 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
ELECTROFORESIS DE FRONTERA, O DIVISIN, O
LMITE LIBRE, O EN MOVIMIENTO
Ese mtodo es principalmente utilizado en la determina-
cin de movilidades, siendo las caractersticas experimen-
tales directamente mensurables y reproducibles. Se aplica,
sobretodo, a sustancias de masa moleculares relativamente
elevadas, poco difusibles. Las divisiones son, inicialmente,
marcadas por un proceso fsico como la refractometra o
la conductimetra. Despus de la aplicacin de un campo
elctrico definido, durante un tiempo determinado, se ob-
tienen nuevas divisiones y sus respectivas posiciones son
observadas. Las condiciones operacionales posibilitan la
determinacin de las divisiones y de los constituyentes.
ELECTROFORESIS EN SOPORTE, O
ELECTROFORESIS DE ZONA
Ese mtodo es usado apenas para muestras reducidas. La
naturaleza del soporte, como papel, gel de agarosa, acetato
de celulosa, almidn, agarosa, metacrilamida o gel mixto,
introduce un nmero de factores adicionales que modifican
la movilidad:
5
a) debido a la sinuosidad de la canalizacin del soporte, a
la distancia aparentemente recorrida que es menor que
la distancia real;
b) ciertos soportes no son eltricamente neutros y, como el
medio constituye una fase estacionaria, puede algunas
veces originar una considerable corriente electroendos-
mtica importante;
c) el calentamiento debido al efecto de Joule puede pro-
ducir cierta evaporacin del lquido del soporte, lo que
conduce, por capilaridad, a un desplazamiento de la so-
lucin de las extremidades para el centro; as, la fuerza
inica tiende a aumentar progresivamente.
La velocidad de migracin depende de cuatro factores
principales: movilidad de la partcula, corriente de elec-
troendosmtica, corriente de evaporacin e intensidad del
campo. Por esas razones es necesario proceder en condi-
ciones experimentales bien determinadas y utilizar, si posi-
ble, estndares de referencia.
Aparatos
Un aparato de electroforesis consta de:
un generador de corriente continua de tensin controla-
ble y de preferencia estabilizada;
una cuba de electroforesis. Generalmente rectangular,
de vidrio o de material plstico rgido, con dos compar-
timientos separados, andico y catdico, que contienen
la solucin tampn conductora. En cada compartimien-
to sumerge un electrodo, de platino o de grafito, esos
estn conectados por medio de un circuito debidamente
aislado de la fuente de alimentacin del terminal co-
rrespondiente para formar, respectivamente, el nodo
y ctodo, conectados por un circuito convenientemente
aislado al poste correspondiente del generador. El nivel
del lquido en los dos compartimientos es igual para
evitar el efecto de sifonaje. La cuba de electroforesis
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
debe estar equipada con una tapa hermtica, permitien-
do mantener en su interior una atmsfera saturada de
unidad y atenuar as, la evaporacin del solvente du-
rante la migracin. Se utiliza un dispositivo de seguri-
dad que corte la corriente, cuando se retira la tapa de la
cuba. Si la medida de corriente elctrica excede a 10 W
es preferible enfriar el soporte;
un dispositivo de soporte:
Electroforesis en tiras. En la electroforesis las tiras en el
soporte, son previamente impregnadas con la misma solu-
cin conductora y cada extremidad sumergida en el com-
partimiento del electrodo. Las tiras quedan bien extendidas,
fijadas sobre un soporte apropiado para evitar la difusin
de la solucin conductora como, por ejemplo, una moldu-
ra horizontal, un soporte en V invertido, o una superficie
uniforme, con puntos de contacto en intervalos adecuados.
Electroforesis en gel. En la electroforesis en gel, el dispo-
sitivo consiste en una placa de vidrio, como, por ejemplo,
una simple lmina de microscopio, en la cual se deposi-
ta una camada de gel adherente y de espesor uniforme en
toda la superficie de la lmina. El contacto entre el gel y la
solucin conductora vara en funcin del tipo del aparato
utilizado. Se evita cualquier condensacin de humedad o
secado de la camada slida;
un dispositivo de medicin o medios de deteccin.
Procedimiento. Colocar la solucin de electrolito en los
compartimientos de los electrodos. Colocar el soporte,
convenientemente embebido con la solucin del electrolito
en la cuba, de acuerdo con el tipo de aparato utilizado. Tra-
zar la lnea de partida y aplicar la muestra de ensayo. Dejar
pasar la corriente durante el tiempo indicado; enseguida
desconectar la corriente, retirar el soporte de la cuba, secar
y revelar.
ELECTROFORESIS EN GEL DE POLIACRILAMIDA
EN TUBO CILNDRICO
En la electroforesis en gel de poliacrilamida, cilndrico (en
tubo) la fase estacionaria es constituida por un gel prepara-
do a partir de acrilamida y de N,N-metilenobisacrilamida.
Los geles son preparados en tubos, generalmente con 7,5
cm de largo y 0,5 cm de dimetro interno (gel cilndrico);
una nica muestra es aplicada en cada tubo.
Aparatos. El aparato es constituido de dos depsitos des-
tinados a recibir las soluciones tampn y construidos con
un material apropiado, tal como el polimetacrilato de me-
tilo. Estn dispuestos, verticalmente, uno arriba del otro, y
son provistos, cada uno, de un electrodo de platino. Esos
dos electrodos son ligados a una fuente de corriente posi-
bilitando operar con intensidad y tensin constantes. Para
geles cilndricos, el aparato tiene en la base superior del de-
psito un nmero de juntas de elastmero situadas a igual
distancia del electrodo.
Procedimiento. De un modo general, se recomienda desga-
sificar las soluciones antes de la polimerizacin y utilizar
el gel inmediatamente despus de su preparacin. Preparar

el gel segn las indicaciones de la monografa. Colocar la
mezcla de gel en los tubos de vidrio apropiados, cerrados
en la extremidad inferior con un tapn, hasta una altura
igual en todos ellos, a la distancia de cerca de 1 cm del
borde superior del tubo. Evitar la introduccin de burbujas
de aire en los tubos. Cubra la mezcla con una camada de
agua a fin de impedir el contacto con el aire y dejar en
reposo. La formacin del gel requiere, generalmente, cerca
de 30 minutos y est completa cuando aparece una delimi-
tacin ntida entre el gel y la camada acuosa. Eliminar la
camada acuosa. Llenar el depsito inferior con la solucin
tampn, prescrita y retirar los tapones de los tubos. Encajar
los tubos en las juntas del depsito superior de modo que
su parte inferior se sumerja en la solucin tampn del de-
psito inferior y ajuste de forma que el fondo de los tubos
est inmerso en la solucin tampn del depsito inferior.
Delicadamente llenar los tubos en la solucin del dep-
sito inferior. Preparar las soluciones problema y estndar
conteniendo el colorante indicado prescrito. Llenar, cui-
dadosamente, los tubos con la solucin tampn indicada.
Aplicar las soluciones, cuya densidad fue aumentada, por
adicin de sacarosa, por ejemplo, a la superficie del gel,
utilizando un tubo diferente para cada solucin. Colocar la
misma solucin tampn en el depsito superior. Conectar
los electrodos a la fuente de corriente y proceder a la elec-
troforesis, utilizando la corriente de intensidad o de tensin
constante y a la temperatura prescrita en la monografa. In-
terrumpa la corriente cuando el indicador coloreado alcan-
ce el depsito inferior. Retirar, inmediatamente, los tubos y
proceder a la extrusin del gel. Localizar la posicin de las
bandas en los electroforetogramas segn el procedimiento
indicado.
ELECTROFORESIS EN GEL DE POLIACRILAMIDA
CON DODECILSULFATO DE SODIO (DSS-EGPA)
Campo de aplicacin. La electroforesis en gel de poliacri-
lamida es utilizada para la caracterizacin cualitativa de
las protenas contenidas en preparaciones biolgicas, para
controles de pureza y determinaciones cuantitativas.
Finalidad. El anlisis por electroforesis en gel es un pro-
ceso adaptado a la identificacin y al control de la homo-
geneidad de las protenas contenidas en preparaciones far-
macuticas. Es utilizada como rutina para evaluar la masa
molecular de las subunidades proteicas y determinar las
subunidades que componen las protenas purificadas. En
el mercado existe una gran variedad de geles y reactivos
listos para ser utilizados en vez de los que se describen
a continuacin, siempre que los resultados obtenidos sean
equivalentes y que puedan ser satisfechas las condiciones
de validez descritas en Validacin del ensayo.
Caractersticas de los geles de poliacrilamida
Las propiedades de tamiz de los geles de poliacrilamida
estn relacionadas con su estructura particular que es la de
una red tridimensional de fibras y poros resultantes de la
formacin de ligaciones cruzadas entre la bisacrilamida bi-
funcional y las cadenas adyacentes de poliacrilamida. La
polimerizacin es catalizada por un generador de radica-
les libres compuesto de persulfato de amonaco (PSA) y
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 131
N,N,N,N- tetrametiletilendiamina (TEMED). El tamao
real de los poros de un gel es tan menor cuanto ms elevada
sea su concentracin en acrilamida. Como la concentracin
de acrilamida del gel aumenta, su porosidad efectiva dis-
minuye.
La porosidad real de un gel es definida de modo operacio-
nal por sus propiedades de tamiz molecular, eso es, la resis-
tencia que l opone a la migracin de las macromolculas.
Existen lmites para las concentraciones de acrilamida que
pueden ser utilizadas. En concentraciones muy elevadas
los geles se deshacen ms fcilmente y se tornan difciles
de manipular. Cuando el tamao de los poros de un gel
disminuye, la velocidad de migracin de una protena en
ese gel disminuye, tambin. Ajustando la porosidad de un
gel, alterando la concentracin en acrilamida, es posible
optimizar la resolucin del mtodo para un determinado
producto proteico. de ese modo, las caractersticas fsicas
de un gel dependen, por tanto, de su tenor en acrilamida
y en bisacrilamida. Adems de la composicin del gel, el
estado de la protena constituye otro factor importante para
su movilidad electrofortica.
5
En el caso de las protenas, la movilidad electrofortica de-
pende del pK de los grupos con carga elctrica y del tamao
de la molcula. Es igualmente afectada por la naturaleza,
concentracin y pH del tampn, por la temperatura, inten-
sidad del campo elctrico y por la naturaleza del soporte.
ELECTROFORESIS EN GEL DE POLIACRILAMIDA
EN CONDICIONES DESNATURALIZANTES
El mtodo descrito a ttulo de ejemplo es aplicable al an-
lisis de los polipptidos monmeros de masa molecular
comprendida entre 14 000 y 100 000 Dalton. Es posible
ampliar ese intervalo por diferentes tcnicas (por ejemplo,
por los empleos de geles en gradiente o de sistemas tam-
pn especiales), pero tales tcnicas no forman parte de este
texto. La electroforesis en gel de poliacrilamida en condi-
ciones desnaturalizantes usando el dodecilsulfato de sodio
(DSS-EGPA) es la tcnica de electroforesis ms utilizada
para evaluar la calidad farmacutica de los productos pro-
teicos y es sobre todo el foco de este texto. De modo gene-
ral, la electroforesis analtica de las protenas es realizada
en gel de poliacrilamida en condiciones que favorecen la
disociacin de las protenas en sus subunidades polipep-
tdicas y que limitan el fenmeno de agregacin. Se utili-
za frecuentemente ese efecto del dodecilsulfato de sodio
(DSS) un detergente fuertemente aninico, para disociar
las protenas antes de su aplicacin en el gel, en combina-
cin con el calor. Los polipptidos desnaturalizados se co-
nectan al DSS, adquieren cargas negativas y se caracteriza
por una relacin carga/masa constante cualquiera que sea
el tipo de protena considerada. Siendo la cantidad de DSS
ligada casi siempre proporcional a masa molecular del po-
lipptido e independiente de su secuencia, los complejos
DSS-polipptido migran en los geles de poliacrilamida con
movilidades que son funcin del tamao del polipptido.
La movilidad electrofortica de los complejos detergente-
polipptidos resultantes presenta siempre la misma rela-
cin funcional con la masa molecular. La migracin de los
 132 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
complejos DSS es, como sera de preverse, en direccin
al anodo a la velocidad ms elevada para los complejos
de baja masa molecular del que para los de alta. Es, as,
posible determinar la masa molecular de una protena a
partir de su movilidad relativa, despus de comparacin
con soluciones estndar de valor de masa molecular co-
nocida y la observacin de una banda nica constituye un
criterio de pureza. Todava, las modificaciones eventuales
en la constitucin del polipptido, por ejemplo, una N- o
una O-glicosilacin, tienen un impacto significante no ne-
gligenciable sobre la masa molecular aparente de una pro-
tena, no se liga a una molcula de carbohidratos de forma
semejante a un polipptido. Con efecto, el DSS no se co-
necta de la misma manera a los agrupamientos glucdicos o
a los agrupamientos peptdicos, de modo que la constancia
de la relacin carga/masa deja de ser verificada. La masa
molecular aparente de las protenas que sufrieron modifi-
caciones polvos-traslacionales no refleja realmente la masa
de la cadena polipeptdica.
Condiciones reductoras
La asociacin de las subunidades polipeptdicas y la es-
5
tructura tridimensional de las protenas se basan, muchas
veces, en la existencia de puentes disulfuro. Uno de los ob-
jetivos a alcanzar en el anlisis DSS- EGPA en condiciones
reductoras es romper esa estructura por reduccin de los
puentes disulfuro. La desnaturacin y la disociacin com-
pletas de las protenas por tratamiento con 2-mercaptoeta-
nol o con ditiotreitol (DTT) provocan un desdoblamiento
de la cadena polipeptdica seguida de una complejacin
con el DSS. En esas condiciones, la masa molecular de las
subunidades polipeptdicas puede ser calculada por regre-
sin lineal con la ayuda de estndares de masa molecular
apropiada.
Condiciones no reductoras
Para ciertos anlisis, la disociacin completa de la protena
en subunidades peptdicas no es deseable. En la ausencia
de tratamiento por los agentes reductores, como el 2-mer-
captoetanol o el DTT, los puentes disulfuro covalentes
permanecen intactas y la conformacin oligomrica de la
protena es preservada. Los complejos DSS- oligmero mi-
gran ms lentamente que las subunidades DSS-peptdicas.
Adems de eso, las protenas no reducidas pueden no ser,
totalmente, saturadas en DSS y, por consecuencia, no se
conectan al detergente en una relacin de masa constante.
Esa circunstancia torna la determinacin de la masa mole-
cular de esas molculas por el DSS- EGPA ms difcil que
el anlisis de polipptidos totalmente desnaturalizados,
pues, para que la comparacin sea posible es necesario que
los estndares y las protenas desconocidas tengan confi-
guraciones semejantes. No obstante, la obtencin en el gel
de una nica banda coloreada permanece como criterio de
pureza.
CARACTERSTICAS DE LA ELECTROFORESIS DE
GEL EN SISTEMA TAMPN DISCONTINUO
El mtodo electrofortico ms divulgado para la carac-
terizacin de las mezclas complejas de protenas se fun-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
damenta en el empleo de un sistema tampn discontinuo
que incluye dos geles continuos, pero distintos: un gel (in-
ferior) de separacin o de resolucin y un gel (superior)
de concentracin. Esos dos geles son de porosidad, pH
y fuerza inica diferentes. Adems de eso, los diferentes
iones mviles son usados en los geles y en los tampones
del electrodo. La discontinuidad del sistema tampn con-
duce a una concentracin de gran volumen de las muestras
en el gel de concentracin y, por tanto, a una mejora de
la resolucin. Cuando el campo elctrico es aplicado, un
gradiente de tensin negativo se instaura a travs de la so-
lucin de la muestra y arrastra las protenas del gel de con-
centracin para el gel de apilamiento. Los iones glicinato
contenidos en el tampn del electrodo siguen las protenas
en el gel de apilamiento. Se forma, rpidamente, una zona
de divisin mvil cuya frente es constituida por los iones
cloruro de alta movilidad y la parte de atrs por los iones
glicinato ms lentos. Un gradiente de alta tensin localiza-
do se instaura entre las frentes inicas de la cabeza y de la
cola y lleva los complejos DSS-protena a concentrarse en
una banda mucho estrecha que migra entre las fracciones
cloruro y glicinato.
En amplia escala, independientemente del volumen de la
muestra aplicada, el conjunto de los complejos DSS-pro-
tena sufre un efecto de condensacin y penetra en el gel
de separacin en la forma de una banda estrecha, bien de-
finida, de alta densidad proteica. El gel de apilamiento, de
poros anchos, no retarda, generalmente, la migracin de
las protenas, pero desempea, principalmente, el papel de
medio anticonvecitivo. En la interfaz de los geles de api-
lamiento y de separacin, las protenas son confrontadas
con un brusco aumento del efecto de ralentizacin debido
al pequeo dimetro de los poros del gel de separacin.
Cuando penetran en el gel de separacin, esa ralentizacin
prosigue debido al efecto de tamiz molecular ejercido por
la matriz. Los iones glicinato pasan a las protenas cuya
migracin prosigue, entonces, en un medio de pH uniforme
constituido por la solucin tampn de trometamina (TRIS)
y por la glicina. El efecto de tamiz molecular conduce a
una separacin de los complejos DSS-polipptido con base
en su respectiva masa molecular.
PREPARACIN DE GELES DE POLIACRILAMIDA
DSS VERTICALES DE TAMPN DISCONTINUO
Montaje del molde
Con un detergente suave, limpiar las dos placas de vidrio
(por ejemplo de tamao 10 cm x 8 cm), el peine de polite-
trafluoroetileno, los dos separadores y el tubo de caucho de
silicona (por ejemplo, dimetro de 0,6 mm x 350 mm), y
enjuagar, abundantemente, con agua. Secar todos los ele-
mentos con servilleta de papel o tela. Lubricar los separa-
dores y el tubo con lubricante que no sea a la base de silico-
na. Colocar los separadores a 2 mm del borde a lo largo de
los dos lados cortos y de uno de los lados largos de la placa
de vidrio. Ese ltimo corresponder al fondo del gel. Co-
menzar a instalar el tubo sobre la placa de vidrio utilizando
un de los separadores como gua. Alcanzada la extremidad
del separador, doblar el tubo con precaucin para hacerlo
seguir el lado largo de la placa de vidrio. Mantenga el tubo

en su lugar con uno de los dedos, dblelo de nuevo para
hacerlo seguir el segundo lado corto de la placa, utilizar el
separador como gua. Colocar la segunda placa en el lugar,
alinendola, perfectamente, sobre la primera, y mantenga
el conjunto por presin manual. Colocar dos pinzas en cada
uno de los lados cortos del molde y despus, con precau-
cin, cuatro otras pinzas en el lado largo que constituir la
base del molde. Verificar si el tubo sigue el borde de las
placas y no se desplaz despus de la colocacin de las pin-
zas. El molde est listo y el gel puede ser colocado en el.
Preparacin de los geles
Para los geles del sistema tampn discontinuo, se reco-
mienda colocar primero el gel de separacin y dejarlo po-
limerizar antes de colocar el gel de concentracin, porque
el tenor en acrilamida-bisacrilamida en los dos geles, en el
tampn y del pH es diferente.
Preparacin del gel de separacin. En un matraz prepa-
rar el volumen apropiado de una solucin de acrilamida de
concentracin deseada, usando los valores indicados en la
Tabla 1. Mezclar los componentes por la orden indicada.
Antes de aadir la solucin de persulfato de amonaco y la
de tetrametiletilendiamina (TEMED), filtrar, si necesario,
por succin usando una membrana de acetato de celulosa
(dimetro de los poros; 0,45 m); mantenga bajo succin
agitando la unidad de filtracin hasta no formar ms bur-
bujas en la solucin. Aadir las cantidades apropiadas de
solucin de PSA y de TEMED (Tabla 1), agitar e introdu-
cir, inmediatamente, en el espacio que separa las dos placas
de vidrio del molde. Dejar una altura libre suficiente para
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 133
el gel de concentracin (altura de un diente del peine ms
1 cm). Usando una pipeta de vidrio afilada, recubra, con
precaucin, la solucin con alcohol isobutlico saturado de
agua. Dejar polimerizar el gel en posicin vertical, a tem-
peratura ambiente.
Preparacin del gel de apilamiento. Cuando la polimeriza-
cin termine (cerca de 30 minutos), agotar el alcohol iso-
butlico y lavar varias veces la superficie del gel con agua
para eliminar completamente el alcohol isobutlico y, si ne-
cesario, la acrilamida no polimerizada. Dejar el mnimo de
lquido en la superficie del gel y, eventualmente, absorba
el agua residual con la punta de una servilleta de papel. En
un matraz, preparar un volumen apropiado de una solucin
de acrilamida de concentracin deseada usando los valores
registrados en la
Antes de juntar la solucin de PSA y de TEMED, filtrar si
necesario, por succin por una membrana de acetato de ce-
lulosa (dimetro de los poros: 0,45 mantenga bajo succin
agitando la unidad de filtracin hasta no formar ms bur-
bujas en la solucin. Aadir las cantidades apropiadas de
soluciones de persulfato de amonaco y de TEMED (Tabla
5
2), agitar y aadir, inmediatamente, sobre el gel de sepa-
racin. Colocar, inmediatamente, en el lugar un peine de
politetrafluoroetileno limpio en la solucin del gel de con-
centracin, tomando la precaucin de evitar la formacin
de burbujas de aire. Aadir solucin para el gel de con-
centracin para llenar totalmente los intersticios del peine.
Dejar polimerizar el gel en posicin vertical, a temperatura
ambiente.
 134 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Volumen de los componentes en ml por volumen del molde del gel de:
Componentes de la solucin
5 ml 10 ml 15 ml 20 ml 25 ml 30 ml 40 ml 50 ml
6% de Acrilamida
Agua 2,6 5,3 7,9 10,6 13,2 15,9 21,2 16,5
Solucin de acrilamida(1) 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 6,0 8,0 10,0
Tris 1,5 M pH 8,8 (2) 1,3 2,5 3,8 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
(DSS) 100 g/L de Dodecil Sulfato de Sodio(3) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(PSA) 100 g/L de Persulfato de Amonaco(4) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(TEMED) Tetrametiletilendiamina(5) 0,004 0,008 0,012 0,016 0,02 0,024 0,032 0,04
8% de Acrilamida
Agua 2,3 4,6 6,9 9,3 11,5 13,9 18,5 23,2
Solucin de acrilamida(1) 1,3 2,7 4,0 5,3 6,7 8,0 10,7 13,3
Tris 1,5 M pH 8,8 (2) 1,3 2,5 3,8 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
(DSS) 100 g/L de Dodecil Sulfato de Sodio(3) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(PSA) 100 g/L de Persulfato de Amonaco(4) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(TEMED) Tetrametiletilendiamina(5) 0,003 0,006 0,009 0,002 0,005 0,008 0,024 0,03
10% de Acrilamida
Agua 1,9 4,0 5,9 7,9 9,9 11,9 15,9 19,8
Solucin de acrilamida(1) 1,7 3,3 5,0 6,7 8,3 10,0 13,3 16,7
Tris 1,5 M pH 8,8(2) 1,3 2,5 3,8 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
(DSS) 100 g/L de Dodecil Sulfato de Sodio(3) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5

5
(PSA) 100 g/L de Persulfato de Amonaco(4) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(TEMED) Tetrametiletilendiamina(5) 0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 0,002 0,016 0,02
12% de Acrilamida
Agua 1,6 3,3 4,9 6,6 8,2 9,9 13,2 16,5
Solucin de acrilamida(1) 2,0 4,0 6,0 8,0 10,0 12,0 16,0 20,0
Tris 1,5 M pH 8,8(2) 1,3 2,5 3,8 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
(DSS) 100 g/L de Dodecil Sulfato de Sodio(3) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(PSA) 100 g/L de Persulfato de Amonaco(4) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(TEMED) Tetrametiletilendiamina(5) 0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 0,012 0,016 0,02
14% de Acrilamida
Agua 1,4 2,7 3,9 5,3 6,6 8,0 10,6 13,8
Solucin de acrilamida(1) 2,3 4,6 7,0 9,3 11,6 13,9 18,6 23,2
Tris 1,5 M pH 8,8 (2) 1,2 2,5 3,6 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
(DSS) 100 g/L de Dodecil Sulfato de Sodio(3) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(PSA) 100 g/L de Persulfato de Amonaco(4) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(TEMED) Tetrametiletilendiamina(5) 0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 0,012 0,016 0,02
15% de Acrilamida
Agua 1,1 2,3 3,4 4,6 5,7 6,9 9,2 11,5
Solucin de acrilamida(1) 2,5 5,0 7,5 10,0 12,5 15,0 20,0 25,0
Tris 1,5 M pH 8,8 (2) 1,3 2,5 3,8 5,0 6,3 7,5 10,0 12,5
(DSS) 100 g/L de Dodecil Sulfato de Sodio(3) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(PSA) 100 g/L de Persulfato de Amonaco(4) 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,4 0,5
(TEMED) Tetrametiletilendiamina(5) 0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 0,012 0,016 0,02
______________
(1) Solucin de acrilamida: acrilamida/bisacrilamida (29:1) a 30% (p/v) SR
(2) Tris 1,5 M pH 8,8: tampn de trisclorhidrato 1,5 M pH 8,8.
(3) DSS 100 g/L: solucin de dodecilsulfato de sodio a 10% (p/v).
(4) PSA 100 g/L: solucin de persulfato de amonio a 10% (p/v). El persulfato de amonio da los radicales libres que inducen la polimerizacin de la
acrilamida y de la bisacrilamida. La solucin de persulfato de amonaco se descompone, lentamente, y es renovada toda semana.
(5) TEMED: N,N,N,N-tetrametiletilendiamina.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 135

Componentes de la solucin 1 ml 2 ml 3 ml 4 ml 5 ml 6 ml 8 ml 10 ml
Agua 0,68 1,4 2,1 2,7 3,4 4,1 5,5 6,8
Solucin de acrilamida(1) 0,17 0,33 0,5 0,67 0,83 1,0 1,3 1,7
Tris M pH 6,8(2) 0,13 0,25 0,38 0,5 0,63 0,75 1,0 1,25
(DSS) 100 g/L de Dodecil Sulfato de Sodio(3) 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,08 0,1
(PSA) 100 g/L de Persulfato de Amonaco(4) 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,08 0,1
(TEMED) Tetrametiletilendiamina(5) 0,001 0,002 0,003 0,004 0,005 0,006 0,008 0,01
______________
(1) Solucin de acrilamida: acrilamida/bisacrilamida (29:1) a 30% (p/v) SR
(2) Tris M pH 6,8: tampn de trisclorhidrato M de pH 6,8.
(3) DSS 100 g/L: solucin de dodecilsulfato de sodio a 10% (p/v).
(4) PSA 100 g/L: solucin de persulfato de amonaco a 10% (p/v). El persulfato de amonaco da los radicales libres que inducen la polimerizacin de la
acrilamida y de la bisacrilamida. La solucin de persulfato de amonaco se descompone, lentamente, y es renovada toda semana.
(5) TEMED: N,N,N,N-tetrametiletilendiamina.

Montaje del gel en el aparato de electroforesis y
separacin electrofortica
Cuando la polimerizacin termine (cerca de 30 minutos),
retirar el peine con precaucin. Lavar los pozos inmedia-
tamente con agua o tampn de electroforesis DSS- EGPA
para eliminar la acrilamida eventualmente no polimerizada.
si necesario, enderezar los dientes del gel de apilamiento,
deteccin de bandas con 10 ng a 100 ng de protena. Todas
las etapas de la coloracin de los geles son realizadas a
temperatura ambiente; con agitacin moderada y con mo-
vimiento orbital en un equipo apropiado. Es necesario el
uso de guantes para evitar depositar en el gel impresiones
digitales que tambin quedaran coloreadas.
Coloracin con azul de Coomassie. Sumergir el gel du-

con una aguja hipodrmica, de punta partida, anexada a una
jeringa, de uno de los lados cortos de la placa, retirar con
precaucin el tubo y recolocar las pinzas. Proceda del mis-
mo modo del otro lado corto y despus en la base del molde.
Introducir el gel en el aparato de electroforesis. Introducir
los tampones de electroforesis en los depsitos superior e
inferior. Eliminar las burbujas, eventualmente aprisiona-
das, en la base del gel entre las placas de vidrio. Es re-
comendable emplear para ese fin una aguja hipodrmica
doblada fijada en una jeringa. Nunca establezca tensin
elctrica en el gel sin las muestras porque puede destruir
la discontinuidad del sistema tampn. Antes de depositar
la muestra, lave o rellene los pozos con precaucin con
tampn de electroforesis DSS-EGPA. Preparar las solucio-
nes problema y estndar utilizando el tampn para muestra
recomendada y tratar como se especifica en la monografa
de la sustancia a ser analizada. Aplicar en los pozos del gel
de concentracin el volumen apropiado de las diferentes
soluciones. Proceda a la electroforesis en las condiciones
recomendadas por el fabricante del aparato. Ciertos fabri-
cantes de aparatos para DSS- EGPA proveen geles de di-
versas superficies y espesores. Para obtener una separacin
ptima, puede ser necesario hacer variar la duracin de la
electroforesis y los parmetros elctricos como indicado
por el fabricante. Verificar que la frente de coloracin se
desplaza en el gel de separacin, ella alcanza la base del
gel, parar la electroforesis. Retirar el molde del aparato y
separar las dos placas de vidrio. Retirar los separadores,
separar y rechazar el gel de apilamiento y proceder, inme-
diatamente, a la coloracin.
DETECCIN DE LAS PROTENAS EN LOS GELES
La coloracin con azul de Coomassie es el mtodo ms
corrientemente utilizado para las protenas, con un nivel
de deteccin de 1 g a 10 g de protena por banda. La
coloracin con nitrato de plata es el mtodo ms sensible
para la visualizacin de las protenas en geles; posibilita la
5
rante, por lo menos, una hora en un gran exceso de azul de
Coomassie SR. Eliminar la solucin de coloracin. Sumer-
gir el gel en un gran exceso de solucin de descoloracin
(consiste en una mezcla de 1 volumen de cido actico gla-
cial y 4 volmenes de metanol y 5 volmenes de agua). Re-
novar varias veces la solucin de descoloracin hasta que
las bandas proteicas aparezcan, ntidamente, sobre fondo
claro. Cuanto ms fuerte sea la descoloracin del gel, tanto
menores cantidades de protenas son detectables por ese
mtodo. Es posible acelerar la descoloracin incorporando
en la solucin de descoloracin algunos gramos de resina
de cambio inico o una esponja.
Nota: las soluciones cido-alcohlicas utilizadas en ese
mtodo no fijan totalmente las protenas del gel. Puede, por
tanto, haber prdida de ciertas protenas de masa molecular
baja durante las operaciones de coloracin y descoloracin
de los geles finos. Puede ser conseguida una fijacin per-
manente colocando el gel durante 1 hora en una mezcla de
1 volumen de cido tricloroactico, 4 volmenes de meta-
nol y 5 volmenes de agua, antes de sumergirse en azul de
Coomassie SR.
Coloracin con nitrato de plata. Sumergir el gel durante 1
hora en un gran volumen de solucin de fijacin (consiste
en aadir 0,27 ml de formaldehido en 250 ml de metanol
y diluir para 500 ml con agua). Eliminar y renovar la solu-
cin de fijacin y dejar incubar durante, por los menos, 1
hora, o durante toda la noche, se as es ms prctico. Eli-
minar la solucin de fijacin y colocar el gel en un volu-
men en exceso de agua durante 1 hora y, en seguida, su-
mergir durante 15 minutos en solucin de glutaraldehido
a 1% (v/v). Lavar el gel colocndolo por dos veces en un
volumen excesivo de agua durante 15 minutos y, en se-
guida, sumergirlo durante 15 minutos, al abrigo de la luz,
en nitrato de plata SR1 recientemente preparado. Lavar el
gel colocndolo por tres veces en un volumen excesivo de
agua durante 15 minutos y, en seguida, sumergirlo durante
cerca de 1 minuto en solucin de desarrollo (consiste en

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 136 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
diluir 2,5 ml de cido ctrico monohidratado a 2% (p/v)
y 0,27 ml de formaldehido en agua a 500 ml) hasta ob-
tener coloracin satisfactoria. Suspenda el desarrollo por
inmersin durante 15 minutos en solucin de cido actico
a 10% (v/v). Lavar con agua.
Secado de los geles de poliacrilamida DSS coloridos
El tratamiento de los geles es ligeramente diferente confor-
me el mtodo de coloracin utilizado. En el caso de la colo-
racin con Coomassie, la etapa de descoloracin es seguida
de una inmersin del gel en solucin de glicerol a 10% (p/v)
durante, por lo menos, 2 horas (o una noche). En el caso de
la coloracin con plata, el lavado final es seguido de una
inmersin en solucin de glicerol a 2% (p/v) durante 5 minu-
tos. Sumergir dos hojas de celulosa porosa en agua durante
5 a 10 minutos. Colocar una de las hojas en una moldura de
secado. Levantar, delicadamente, el gel y depositarlo sobre
la hoja de celulosa. Eliminar burbujas que, eventualmente,
hayan quedado aprisionadas y aadir algunos mililitros de
agua a lo largo de los bordes del gel. Cubrir con la segun-
da hoja y eliminar eventuales burbujas de aire aprisionadas.
Terminar el conjunto del cuadro de secado. Colocar en la
5
estufa o dejar secar a temperatura ambiente.
DETERMINACIN DE LA MASA MOLECULAR
La masa molecular de las protenas es determinada por
comparacin de su movilidad con la movilidad de varios
marcadores proteicos de peso molecular conocidos. Exis-
ten, para la estandarizacin de los geles, mezclas de prote-
nas de masa molecular exactamente conocida que posibi-
litan obtener una coloracin uniforme. Tales mezclas estn
disponibles para diferentes bandas de masa molecular. Las
soluciones madre concentradas de las protenas de masa
molecular conocida son diluidas en tampn para muestreo
apropiada y depositadas en el mismo gel que la muestra
proteica a ser examinada. Inmediatamente despus de la
electroforesis, determinar la posicin exacta del colorante
de marcacin (azul de bromofenol) para identificar el fren-
te de migracin de los iones. Para ese efecto, puede cor-
tarse una pequea porcin del borde del gel, o sumergir en
el interior del gel, en el nivel de la frente de migracin del
colorante, una aguja mojada en tinta China. Despus de la
coloracin del gel, determinar la distancia de migracin de
cada banda proteica (marcadores y bandas desconocidas)
a partir del borde superior del gel de separacin y dividir
cada una de esas distancias de migracin por la distancia
recorrida por el colorante de marcacin. Las distancias de
migracin, as, obtenidas son llamadas movilidades relati-
vas de las protenas (en referencia a la frente de coloracin)
y, convencionalmente, representadas por Rf. Construir un
grfico usando los logaritmos de la masa molecular rela-
tiva (Mr) de los estndares proteicos en funcin de los Rf
correspondientes. Los grficos obtenidos son ligeramente
sigmoides. El clculo de las masas moleculares descono-
cidas puede ser calculado por regresin lineal, o por in-
terpolacin a partir de la curva de variacin de log (Mr)
en funcin del Rf desde que los valores obtenidos para las
muestras desconocidas se siten en la parte lineal del gr-
fico.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Validacin del ensayo
El ensayo slo ser vlido si las protenas utilizadas como
marcadores de masa molecular se distribuyen en 80% del
largo del gel y si, en el intervalo de separacin deseado
(por ejemplo, el intervalo que cubra el producto y su dme-
ro, o el producto y sus impurezas relacionadas) existir para
las bandas proteicas en causa una relacin lineal entre el
logaritmo de la masa molecular y el valor del Rf. Exigen-
cias de validacin suplementarios hablando al respecto de
la preparacin de la muestra pueden ser especificadas en
las monografas en particular.
DETERMINACIN CUANTITATIVA DE LAS IMPU-
REZAS
Cuando sea especificado en una monografa en particular
un tenor en impurezas, es conveniente preparar una solu-
cin estndar correspondiente a ese tenor diluyendo la so-
lucin problema. Si, por ejemplo, este lmite fuese de 5%,
la solucin estndar es una diluicin a 1:20 de la solucin
problema. El electroforetograma obtenido con la solucin
problema no presenta ninguna banda debido a la impureza
(adems de la banda principal) que sea ms intensa que la
banda principal del electroforetograma obtenido con la so-
lucin estndar. Desde que se opere en condiciones valida-
das, es posible cuantificar las impurezas por normalizacin
con relacin a la banda principal, utilizando un densitme-
tro integrador. En ese caso, es verificada la linealidad de
las respuestas.
5.2.22.1 ELECTROFORESIS CAPILAR
Electroforesis capilar (EC) es un mtodo fsico de anlisis
basado en la migracin, dentro de un capilar, de solutos
cargados, disueltos en una solucin electroltica, bajo la
influencia de una corriente elctrica. Actualmente, la EC
comprende una familia de tcnicas de separacin electro-
cinticas que separan compuestos basada, sobretodo, en la
diferencia de movilidad electrofortica, separacin entre
fases, punto isoelctrico, tamao molecular, o adems, en
la combinacin de una o ms de estas propiedades.
PRINCIPIOS GENERALES
En EC, la separacin es gobernada por dos factores. El
primero corresponde al movimiento de los solutos en el
capilar debido al campo elctrico (E), tambin denominado
de velocidad electrofortica. El segundo ocurre en funcin
del flujo del electrolito debido a la superficie cargada en la
pared del capilar, siendo llamado de flujo electrosmtico.
La movilidad electrofortica de un soluto (ep) est relacio-
nada a caractersticas especficas como tamao molecular,
forma y carga elctrica as como propiedades inherentes al
electrolito en el cual la migracin ocurre (fuerza inica del
electrolito, pH, viscosidad y presencia de aditivos). Bajo la
influencia de tensin, los solutos cargados migran a travs
del electrolito con una determinada velocidad, Vep, dada en
cm/s, y calculada por la ecuacin:

donde:
ep = movilidad electrofortica;
Y = tensin aplicada;
q = carga efectiva del soluto;
h = viscosidad del electrolito;
r = rayo de Stokes;
V = voltaje aplicada al sistema;
L = largo total del capilar.
Cuando un campo elctrico es aplicado a lo largo del ca-
pilar, un flujo de electrolito es generado en el interior del
mismo. La migracin de diferentes solutos a lo largo del
capilar en direccin al detector, independiente de la pre-
sencia de carga inica, indica que adems de la movilidad
electrofortica, est involucrada una fuerza adicional. Caso
no hubiese esta fuerza adicional, compuestos con carga po-
sitiva migraran por el capilar mientras los aniones perma-
neceran a la distancia del detector y los solutos neutros
simplemente no migraran. La fuerza adicional que direc-
ciona todos los solutos a travs del capilar es denominada
de flujo electrosmtico (FEO) y posee papel importante en
los diversos tipos de EC.
El FEO tiene su origen a partir de la ionizacin de los
grupos silanoles en la pared interna del capilar, que son
transformados en grupos silanoato (Si-O-), en pH arriba
de tres. Estos grupos con carga negativa atraen los cationes
del electrolito, formando una camada interna en la pared
del capilar. La doble camada formada prxima a la super-
ficie del capilar es esencialmente esttica. La camada ms
difusa, prxima a la doble camada es mvil y, bajo accin
de una tensin elctrica, migra en direccin al ctodo aca-
rreando conjuntamente el agua de hidratacin. Entre las
dos camadas existe un plano de rozamiento y el desequi-
librio elctrico generado corresponde a la diferencia de
potencial que atraviesa las dos camadas, denominada de
potencial zeta ().
La velocidad del flujo electrosmtico es dependiente de
la movilidad electrosmtica (eo) que, por su vez, est di-
rectamente relacionada a la densidad de carga de la pared
interna del capilar y a las caractersticas del electrolito. La
velocidad del flujo electrosmtico (Veo) puede ser calculada
por la ecuacin:
donde
= constante dielctrica del electrolito;
= potencial zeta de la superficie del capilar;
h = viscosidad del electrolito;
V = voltaje aplicada al sistema;
L = largo total del capilar.
Las movilidades electrofortica y electrosmtica de un so-
luto pueden actuar en la misma direccin o en direcciones
opuestas, dependiendo de la carga (positiva o negativa) del
soluto y de la velocidad del soluto (v), conforme a ecua-
cin abajo:
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 137
V = Vep Veo
La suma o diferencia entre las dos velocidades es usada en
la dependencia de las movilidades acten en la misma di-
reccin o en direcciones opuestas. En la electroforesis ca-
pilar en su forma ms usual, aniones migrarn en direccin
opuesta al flujo electrosmtico y sus velocidades sern me-
nores que la velocidad del flujo electrosmtico. Cationes
migrarn en la misma direccin del flujo electrosmtico y
sus velocidades sern mayores del que la velocidad del flu-
jo electrosmtico. En esta condicin, en la cual existe una
rpida velocidad de flujo electrosmtico con relacin a la
velocidad electrofortica de los solutos, cationes y aniones
pueden ser separados en la misma corrida electrofortica.
El tiempo (t) necesario para que el soluto migre una distan-
cia (l) del terminal de inyeccin del capilar hasta la ventana
de deteccin del capilar (largo efectivo del capilar) es defi-
nido por la ecuacin:
l l(L)
t= =
Vep Veo V(ep eo)
5
donde:
l = distancia del terminal de inyeccin del capilar hasta la
ventana de deteccin del capilar (largo efectivo del capi-
lar);
Vep = velocidad electrofortica;
Veo = velocidad del flujo electrosmtico.
La reproductibilidad en la velocidad de migracin de los
solutos est directamente relacionada al mantenimiento de
un valor constante del flujo electrosmtico entre diferentes
corridas electroforticas. Para algunas aplicaciones espe-
cficas, puede ser necesario reducir el mismo suprimir el
flujo electrosmtico a travs de modificaciones en la pared
del capilar o en la concentracin, composicin y/o pH de la
solucin electroltica.
Despus de introduccin de la muestra en el capilar, cada
soluto de la muestra migra junto al electrolito como una
banda independiente, conforme su movilidad intrnseca.
Bajo condiciones ideales el nico factor que puede con-
tribuir para la ampliacin de la banda es oriundo de la di-
fusin molecular del soluto a lo largo del capilar (difusin
longitudinal). En este caso, la eficiencia de la banda est
expresada como nmero de bandejas tericas(N) de acuer-
do con la ecuacin:
(ep eo).(VL)
N=
2DL
donde:
D = coeficiente de difusin molecular del soluto en el elec-
trolito;
Los dems trminos fueron abordados anteriormente.
La separacin entre dos bandas puede ser alcanzada por la
modificacin de la movilidad electrofortica de los solutos,
por el flujo electrosmtico y por el aumento de la eficien-
 138 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
cia de las bandas de cada soluto en anlisis. La resolucin
puede ser calculada a travs de la ecuacin:
donde:
epb y epa = movilidades electroforticas de dos solutos a
ser separados;
eo = movilidad del flujo electrosmtico
ep =movilidad electrofortica media de los solutos (ep-
b
+epa)/2
EQUIPO
Un equipo de electroforesis capilar est compuesto por:
una fuente de alto voltaje;
dos depsitos de electrolitos, mantenidos en el mismo
nivel, conteniendo soluciones andica y catdica;
dos electrodos (ctodo y anodo), inmersos en los de-
psitos de los electrolitos y conectados a la fuente de
alto voltaje;
un capilar de slice fundido provisto de ventana de
deteccin para alineamiento a determinados tipos de
5
detectores. Los terminales del capilar son inmersos en
los depsitos conteniendo las soluciones electrolticas.
El capilar debe ser llenado con la solucin electroltica
prescrita en la monografa;
sistema de inyeccin de la muestra de soluto(s) por ac-
cin hidrodinmica o electrocintica. La eleccin del
proceso de inyeccin y su automacin son imprescin-
dibles en el anlisis cuantitativo por electroforesis ca-
pilar. La introduccin de la muestra por el modo elec-
trocintico debe llevar en consideracin la movilidad
electrofortica intrnseca de cada soluto, permitiendo
adecuada discriminacin de los diferentes componen-
tes de la muestra;
detector capaz de monitorear la cantidad de solutos que
pasan a travs del segmento de deteccin del capilar
en intervalo especfico de tiempo. Los detectores ms
usuales estn basados en espectrofotometra de absor-
cin (UV y UV-VIS) o fluorimetra. Anlisis tambin
pueden ser realizados utilizando detectores electroqu-
micos o a travs de la espectrometra de masas;
sistema de control de temperatura capaz de mantener-
la constante en el interior del capilar. Alteraciones de
temperatura implican la falta de reproductibilidad en la
separacin de solutos;
sistema computadorizado para registro e integracin de
los electroferogramas.
La monografa de cada sustancia debe detallar el tipo de
capilar, las soluciones electrolticas, el mtodo de pre- con-
dicionamiento, las condiciones de la muestra y de la migra-
cin electrofortica.
La solucin electroltica debe ser filtrada (filtro de 0,45
m) para retirar partculas y desairada para evitar la for-
macin de burbujas que puedan interferir en el sistema de
deteccin o interrumpir el contacto elctrico en el capilar
durante la migracin electrofortica. Los mtodos electro-
forticos deben establecer un detallado procedimiento de
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
lavado del capilar entre cada corrida a fin de permitir tiem-
pos de migracin reproducibles de los solutos en anlisis.
5.2.22.1.1 Electroforesis capilar en solucin libre
PRINCIPIO
En esta tcnica los solutos son separados en un capilar con-
teniendo apenas electrolito sin cualquier medio anticon-
vectivo. El mecanismo de separacin est basado en las
diferencias presentadas por la razn carga / masa de las es-
pecies analizadas que migran como bandas las velocidades
diferenciadas. Los solutos son separados por la combinacin
entre la movilidad electrofortica intrnseca y la magnitud
del flujo electrosmtico en el capilar. Capilares recubiertos
internamente, con reducido flujo electrosmtico, pueden ser
utilizados para aumentar la capacidad de separacin de los
solutos que adsorben en la superficie del capilar.
La tcnica en solucin libre es adecuada para anlisis de
solutos de pequea masa molecular (PM < 2000) y elevada
masa molecular (2000 < PM < 100 000). Debido a la alta
eficiencia del sistema, molculas con diferencias mnimas
en su razn masa / carga pueden ser discriminadas. La tc-
nica tambin permite separacin de solutos quirales a tra-
vs de la adicin de selectores quirales en el electrolito de
separacin. La optimizacin de la separacin requiere la
evaluacin de diferentes parmetros instrumentales y rela-
cionados a la solucin electroltica.
PARMETROS INSTRUMENTALES
Voltaje el tiempo de separacin es proporcional al voltaje
aplicado. Todava, un aumento en el voltaje usado puede
causar produccin de calor excesivo (efecto Joule), deter-
minando elevacin de la temperatura y gradientes de vis-
cosidad en el electrolito dentro del capilar, los cuales son
responsables de la ampliacin de la banda y reduccin en
la resolucin de los solutos en anlisis;
Polaridad la polaridad del electrodo puede ser normal
(anodo en la admisin y ctodo en la salida). En este caso
el flujo electrosmtico se mueve en direccin al ctodo. Si
la polaridad del electrodo es revertida, la direccin del flujo
electrosmtico es contraria a la salida y apenas solutos car-
gados con movilidad electrofortica superior a la del flujo
electrosmtico migran en direccin a la salida;
Temperatura el principal efecto de la temperatura es ob-
servado en la viscosidad y conductividad elctrica del elec-
trolito. Alteraciones en estas dos propiedades del electro-
lito determinan diferencias en la velocidad de migracin;
Capilar el largo y dimetro interno influencian parme-
tros analticos como tiempo de migracin total de los so-
lutos, eficiencia de las separaciones y capacidad de carga.
Bajo voltaje constante, el aumento del largo total y efectivo
del capilar puede disminuir la corriente elctrica que, por
su vez, determina el aumento en el tiempo de migracin de
los analitos. Capilares con menor dimetro interno poseen
mejor capacidad de disipacin del calor generado por la co-
rriente elctrica (efecto Joule), permitiendo la elevacin de

el voltaje aplicada y reduccin en el tiempo de anlisis. El
lmite de deteccin del mtodo tambin puede ser influen-
ciado por el dimetro interno, dependiendo del volumen de
muestra inyectado y del sistema de deteccin utilizado. La
eficiencia de las separaciones tambin puede ser aumenta-
da por la reduccin del dimetro interno del capilar.
La adsorcin de componentes de la muestra en la pared
interna del capilar puede limitar la eficiencia. Por esta ra-
zn, estrategias para evitar estas interacciones deben ser
consideradas en el desarrollo de un mtodo de separacin
por electroforesis capilar. Este es un factor crtico, por
ejemplo, en muestras conteniendo protenas. Una de estas
estrategias (uso de pH(s) extremos y adsorcin de electro-
litos cargados con carga positiva) requiere la modificacin
de la composicin del electrolito para prevenir la adsorcin
de las protenas. Alternativamente, es posible recubrir la
pared interna del capilar con un polmero a travs de liga-
ciones covalentes, previniendo la interaccin de protenas
con la superficie de la slice cargada negativamente. Para
esta propuesta, capilares con la pared interna previamente
recubierta con polmeros de naturaleza neutro-hidroflica,
catinica y aninica son disponibles comercialmente.
PARMETROS DE LA SOLUCIN ELECTROLTICA
Naturaleza del tampn y concentracin Los electrolitos
para electroforesis capilar deben presentar capacidad tampo-
nante adecuada en la banda de pH escogido y baja movilidad
a fin de minimizar la generacin de corriente elctrica. Para
disminuir la distorsin del pico electrofortico es importante
combinar la movilidad del ion del electrolito a la movilidad
del soluto. La eleccin del solvente de la muestra es impor-
tante para alcanzar una uniformidad del soluto el cual per-
mite el aumento de la eficiencia de separacin y mejora la
deteccin. Adems de eso, un aumento en la concentracin
del electrolito en un pH especfico determina la disminucin
del flujo electrosmtico y de la velocidad del soluto.
pH del electrolito El pH del electrolito puede afectar la
separacin a travs de la modificacin de la carga del so-
luto o de otros aditivos, as como de la alteracin del flujo
electrosmtico. El cambio en el valor del pH del electrolito
arriba o abajo del punto isoelctrico de protenas y ppti-
dos influencia la separacin de estos solutos, a travs de la
modificacin de la carga lquida de carcter negativo para
positivo. En general, un aumento en el pH del electrolito
ocasiona elevacin del flujo electrosmtico.
Solventes orgnicos Solventes orgnicos como metanol,
acetonitrilo entre otros pueden ser aadidos al electrolito
acuoso para aumentar la solubilidad del soluto y/o de otros
aditivos presentes en el electrolito, o adems, influenciar
el grado de ionizacin de los solutos de la muestra. La adi-
cin de estos solventes en el electrolito generalmente pro-
voca la reduccin del flujo electrosmtico.
Aditivos para separaciones quirales Las separaciones
enantiomricas deben ser realizadas a travs de la adicin
de selectores quirales al electrolito de corrida. Los selectores
quirales ms utilizados son las ciclodextrinas. Sin embargo,
teres corona, polisacridos y protenas tambin pueden ser
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 139
empleados para esta finalidad. La discriminacin enantiom-
rico est regida por diferentes interacciones entre el selector
quiral y cada uno de los enantimeros del soluto en anlisis.
As, la eleccin correcta del selector influencia directamente
la resolucin enantiomrico obtenida para solutos quirales.
Durante el desarrollo de un mtodo para separacin enan-
tiomrico, es recomendable probar ciclodextrinas de diferen-
tes tamaos de cavidad, (, , ), ciclodextrinas modificadas
con agrupamientos neutros (metil, etil, hidroxialquil, etc.),
o con agrupamientos ionizables (aminometil, carboximetil,
sulfobutil eter, etc.). La resolucin de separaciones quirales
es igualmente controlada por la concentracin del selector
quiral, de la composicin y pH del electrolito y de la tempe-
ratura de anlisis. Aditivos orgnicos como metanol y Urea
pueden ser empleados para modificar la resolucin obtenida.
5.2.22.1.2 Cromatografa Electrocintica
Micelar (CIEN)
PRINCIPIO
En la Cromatografa Electrocintica Micelar, la separacin
ocurre en una solucin electroltica que contiene un tensoac-
5
tivo a una concentracin arriba de la concentracin micelar
crtica (cmc). Las molculas del soluto son distribuidas entre
el electrolito y la fase pseudoestacionaria compuesta de mi-
celas, de acuerdo con el coeficiente de particin del soluto.
Es una tcnica que puede ser usada para separacin de solu-
tos neutros e/o ionizados, manteniendo la eficiencia, veloci-
dad y adecuabilidad instrumental de la electroforesis capilar.
El tensoactivo aninico dodecil sulfato de sodio (DSS) es
uno de los tensoactivos ms usados en la CEM, a pesar de
otros tambin ser utilizados, como, por ejemplo, tensoacti-
vos catinicos (sales de cetiltrimetilamonio).
En pH neutro o alcalino, un fuerte flujo electrosmtico es
generado moviendo los iones del electrolito de separacin
en la direccin del ctodo. Si DSS fuese utilizado como ten-
soactivo, la migracin electrofortica de la micela aninica
ser en la direccin opuesta, en direccin al anodo. Como
resultado, la velocidad de migracin micelar total es reduci-
da, en comparacin al flujo de la solucin electroltica. En el
caso de solutos neutros, una vez que el analito puede estar
distribuido entre la micela y el electrolito, y no hay movi-
lidad electrofortica, la velocidad de migracin del analito
depender solamente del coeficiente de separacin entre la
micela y el electrolito. En el electroferograma, los picos co-
rrespondientes cada soluto neutro estn siempre localizados
entre el marcador de flujo electrosmtico y el de la micela
(el tiempo transcurrido entre estos dos picos es llamado de
ventana de separacin). Para solutos ionizados, la velocidad
de migracin depende del coeficiente de particin del soluto
entre la micela y electrolito y de la movilidad electrofortica
del soluto en la ausencia de la micela.
En la CEM el mecanismo de solutos neutros y levemente
ionizados es esencialmente cromatogrfica. As, la migra-
cin del soluto y la resolucin pueden ser representadas
en trminos de factor de retencin del soluto (k), tambin
denominada de razn de distribucin de masa (Dm), que es
la relacin entre nmero de moles del soluto en el interior
 140 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
de la micela y en la fase mvil. Para una sustancia neutra, k
puede ser calculado a travs de la siguiente ecuacin:
donde
tR = tiempo de migracin del soluto;
t0=tiempo de migracin de un soluto no retenido (determi-
nado por la inyeccin de un marcador de flujo electrosm-
tico que no se liga a la micela, por ejemplo, metanol);
tmc = tiempo de migracin de la micela (determinado por
la inyeccin de un marcador de micela, como Sudan III, el
cual migra continuamente asociado a la micela a lo largo
de la migracin electrofortica);
K = coeficiente de particin del soluto;
VS = volumen de la fase micelar;
VM = volumen de la fase mvil;
Igualmente, la resolucin entre 2 picos adyacentes (Rs) est
dada por:
5
donde:
N = nmero de bandejas tericas de cada soluto;
a = selectividad;
ka y kb = factores de retencin para ambos solutos respecti-
vamente (kb > ka).
De forma similar, sin embargo no idntica, las ecuaciones
dan los valores de k y Rs para solutos con carga.
OPTIMIZACIN
El desarrollo de mtodos por CEM envuelve parmetros
instrumentales y de la solucin electroltica:
Parmetros instrumentales
Voltaje El tiempo de separacin es inversamente propor-
cional al voltaje aplicado. Todava, un aumento en el volta-
je puede causar produccin excesiva de calor, elevando los
gradientes de temperatura y viscosidad del electrolito en la
seccin transversal del capilar. Este efecto puede presentar
impacto relevante en electrolitos que presenten mayor con-
ductividad como aquellos que contienen sistemas micela-
res. Los sistemas que presentan menor capacidad de disi-
pacin del calor determinan la ampliacin de las bandas y
menor resolucin entre los picos.
Temperatura Alteraciones en la temperatura del capi-
lar afectan el coeficiente de particin del soluto entre el
electrolito y las micelas, la concentracin micelar crtica
y la viscosidad del electrolito. Estos parmetros influen-
cian directamente en el tiempo de migracin de los solutos
durante la separacin electrofortica. La utilizacin de un
adecuado sistema de refrigeracin aumenta la reproducti-
bilidad del tiempo de migracin de los solutos.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Capilar Las dimensiones del capilar (largo y dimetro
interno) contribuyen en el tiempo de anlisis y en la efi-
ciencia de las separaciones. Un aumento del largo total y
efectivo del capilar puede disminuir la corriente elctrica
(bajo voltaje constante), aumenta el tiempo de migracin y
mejora la eficiencia de separacin. El dimetro interno del
capilar controla la disipacin del calor (en un dado electro-
lito y corriente elctrica) y consecuentemente la amplia-
cin de las bandas de los solutos.
Parmetros de la solucin electroltica
Naturaleza del tensoactivo y concentracin La naturale-
za del tensoactivo, de forma anloga a la fase estacionaria
en cromatografa, afecta la resolucin, pues modifica la se-
lectividad de la separacin. El log k de una sustancia neutra
aumenta linealmente con la concentracin del tensoactivo
en la fase mvil. dado que la resolucin en CEM alcanza
un mximo cuando k presenta valor prximo a la
tmc/t0
modificaciones en la concentracin de tensoactivo presente
en la fase mvil determinan alteraciones en la resolucin
de las bandas.
pH del electrolito el pH no altera el coeficiente de parti-
cin de solutos no ionizados, pero puede determinar cam-
bios en el flujo electrosmtico en capilares no recubiertos.
Una disminucin en el pH del electrolito reduce el flujo
electrosmtico, proporcionando un aumento en la resolu-
cin de los solutos neutros y en el tiempo de anlisis.
Solventes orgnicos solventes orgnicos (metanol, propa-
nol, acetonitrilo) pueden ser aadidos a la solucin electro-
ltica para mejorar la separacin de solutos hidrofbicos. En
general, la adicin de estos modificadores reduce el tiempo
de migracin y la selectividad de la separacin. El porcen-
tual de solvente orgnico adicionado debe llevar en consi-
deracin la concentracin micelar crtica del tensoactivo,
teniendo en vista que valores excesivos pueden afectar, o
tambin, inhibir el proceso de formacin de las micelas y,
por consiguiente, la ausencia del fenmeno de particin. La
disociacin de micelas en la presencia de porcentuales ele-
vados de modificador no significa necesariamente mejores
resultados en la separacin. En determinadas situaciones, la
interaccin hidrofbica entre el monmero del tensoactivo
y solutos neutros forman complejos solvofbicos que puede
ser separados electroforticamente.
Modificadores para separaciones quirales la separacin de
enantimeros en CEM puede ser obtenida a travs de la inclu-
sin de selectores quirales al sistema micelar, ligados covalen-
temente al tensoactivo o aadidos al electrolito de separacin.
Micelas que poseen ligaciones con propiedades de discrimi-
nacin quiral incluyen sales de N-dodecanoyl- L aminoci-
dos, sales biliares, entre otros. La resolucin quiral tambin
puede ser obtenida a travs de selectores quirales, tales como
las cidodextrinas, adicionadas directamente a las soluciones
electrolticas que contienen tensoactivos no quirales.

Otros aditivos La selectividad puede ser modificada a
travs de varias estrategias, por adicin de sustancias qu-
micas al electrolito. La adicin de diversos tipos de ciclo-
dextrinas al electrolito tambin puede ser utilizada para
reducir interaccin de solutos hidrofbicos con la micela,
aumentando as la selectividad para este tipo de soluto.
La adicin de sustancias capaces de modificar las interac-
ciones soluto-micela por adsorcin en esta ltima ha sido
usada para aumentar la selectividad de las separaciones en
CEM. Estos aditivos pueden ser un segundo tensoactivo
(inico o no inico) que origina mezcla de micelas o catio-
nes metlicos que disuelven la micela formando complejos
de coordinacin con los solutos.
CUANTIFICACIN
Las reas de los picos deben ser divididas por el tiempo de
migracin correspondiente para suministrar el rea correc-
ta con el objetivo de:
compensar el desplazamiento en el tiempo de migra-
cin entre corridas, reduciendo as la variacin de la
respuesta;
compensar las diferentes respuestas de los componen-
tes de la muestra con diferentes tiempos de migracin.
Cuando un estndar interno es utilizado, se debe verificar
si ningn pico de soluto a ser analizado presenta sobrepo-
sicin al pico del estndar interno.
CLCULOS
El tenor del componente (o componentes) en anlisis debe
ser calculado a partir de los valores obtenidos. Cuando
prescritos, el tenor porcentual de uno o ms componentes
de la muestra a ser analizada es calculado por la determi-
nacin del rea corregida (s) del pico (s) como un porcen-
taje del total de las reas corregidas de todos los picos,
excluyendo aquellos resultantes de solventes o reactivos
aadidos (proceso de normalizacin). Es recomendable la
utilizacin de un sistema de integracin automtica (inte-
grador o sistema de adquisicin y procesamiento de datos).
ADECUABILIDAD DEL SISTEMA
Los parmetros de adecuabilidad del sistema son emplea-
dos para verificar el comportamiento del mtodo por elec-
troforesis capilar. La eleccin de estos parmetros depende
del tipo de Electroforesis Capilar utilizado. Los factores
son: factor de retencin (k) (apenas para cromatografa
electrocintica micelar), nmero aparente de bandejas
tericas(N), factor de simetra (As) y resolucin (Rs). Las
ecuaciones que permiten calcular los valores de N y Rs a
travs de los electroferogramas son suministradas abajo.
Nmero aparente de bandejas tericas
donde:
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 141
tR = Tiempo de migracin o distancia de lnea de base a
partir del punto de inyeccin hasta la lnea perpendicular
del punto mximo del pico correspondiente al componente.
Wh = Ancho del pico a media altura
Resolucin
A resolucin (Rs) entre picos de alturas similares de 2 com-
ponentes puede ser calculada usando a expresin:
donde:
tR1 y tR2 = tiempos de migracin o distancias de la lnea de
base a partir del punto de inyeccin hasta a lnea perpendi-
cular del punto mximo de dos picos adyacentes
wh1 y wh2 = largura de los picos a la media altura
Cuando apropiado, la resolucin puede ser calculada a tra-
vs de la medida de la altura del valle (Hv) entre 2 picos par-
cialmente resueltos en una preparacin estndar y la altura
del pico menor (Hp), calculando la razn pico/valle (p/v):
5
p Hp
=
v Hv
Factor de simetra
El factor de simetra (Las) de un pico puede ser calculado
usando a expresin:
w0,05
As =
2d
donde:
w0 05 = largura del pico determinada a 5% del valor de la
altura; d = distancia entre la lnea perpendicular del pico
mximo y la tangente del pico a 5% de la altura del pico.
Pruebas para repetibilidad de rea (desvo estndar de las
reas o de la razn rea / tiempo de migracin) y para re-
petibilidad del tiempo de migracin (desvo estndar del
tiempo de migracin) son introducidos como parmetros
de adecuabilidad. La repetibilidad del tiempo de migracin
da una prueba para adecuabilidad de procedimientos de
lavado del capilar. Una prctica alternativa para evitar la
falta de repetibilidad del tiempo de migracin es usar el
tiempo de migracin relativo a un estndar interno.
Un prueba para verificar la razn seal/ruido de una pre-
paracin estndar (o la determinacin del lmite de cuan-
tificacin) tambin puede ser til para determinacin de
sustancias relacionadas.
Proporcin seal: ruido
Los lmites de deteccin y cuantificacin corresponden a la
razn seal : ruido de 3 y 10, respectivamente.
La proporcin seal : ruido (S/N) es calculada usando a
expresin:
 142 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
S 2H
=
N h
donde:
H = altura del pico correspondiente al componente espec-
fico, en el electroferograma obtenido con la solucin refe-
rencia, medida a partir del mximo del pico hasta la lnea
de base extrapolada del seal observado a lo largo de una
distancia igual a 20 veces el ancho a media altura del pico;
h = intervalo de la lnea de base en un electroferograma
obtenido despus de inyeccin del blanco, observado a una
distancia igual a 20 veces el ancho a media altura del pico
en el electroferograma obtenido con la solucin referencia,
y si posible, localizado prximo del tiempo de retencin
donde este pico sera encontrado.
5.2.23 ANLISIS
ENANTIOMRICO
FRMACOS QUIRAIS
Los enantimeros generalmente exhiben diferentes pro-
piedades farmacolgicas y toxicolgicas debido a que los
5
principales objetivos moleculares como protenas, cidos
nucleicos y polisacridos son quirales. Por ejemplo, los
enantimeros del ter metlico del levorfanol, el dextrome-
torfano y el levometorfano, son utilizados diferentemente
en la teraputica. Mientras el dextrometorfano es indicado
como antitusivo, el levometorfano es indicado como anal-
gsico.
Debido al reconocimiento de la importancia del uso clnico
de frmacos enantiomricamente puros en el tratamiento
de diversas enfermedades, las industrias farmacuticas son
incentivadas constantemente a disponer frmacos resueltos
en cantidades industriales.
Para garantizar la seguridad y la eficiencia de los frmacos
disponibles y en desarrollo, es necesario resolver los enan-
timeros y examinar cada uno cuanto a las actividades far-
macolgicas y toxicolgicas. Despus de la identificacin
del enantimero ms activo (eutmero) se debe evaluar el
exceso enantiomrico del eutmero desde la sntesis hasta
el consumo para garantizar la calidad del medicamento.
SEPARACIN Y DETERMINACIN ENANTIOMRI-
CO DE FRMACOS
La separacin, o resolucin, de enantimeros por croma-
tografa a lquido de alta eficiencia (CLAE) comenz a ser
aplicada desde los aos sesenta. En los aos setenta, con el
aparecimiento de las columnas de pequeas partculas para
cromatografa a lquido, se incluy el desarrollo de las fases
estacionarias quirales para resolucin de frmacos racmicos.
La CLAE es considerada una de las tcnicas ms eficientes
para separacin, deteccin y cuantificacin de frmacos. El
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
uso de fase estacionaria quiral (FEQ) adecuada se torna un
poderoso mtodo para la separacin de los enantimeros.
La resolucin cromatogrfica de los enantimeros pue-
de ser alcanzada por varios mtodos, todava, es siempre
necesario el uso de algn tipo de discriminador o selector
quiral. El mtodo indirecto y el directo son los dos caminos
para separacin de los enantimeros utilizando cromato-
grafa a lquido.
En el mtodo indirecto, los enantimeros son convertidos
en diastereoismeros por la reaccin con una sustancia
quiral. Los diastereoismeros son sustancias que presentan
propiedades fsico-qumicas diferentes y, por tanto, pueden
ser separados utilizando fase estacionaria no quiral.
El mtodo indirecto fue largamente utilizado en el pasa-
do. No obstante presenta limitaciones como necesidad del
aislamiento de la sustancia de inters y su derivatizacin.
Esos hechos dificultan el desarrollo del proceso automati-
zado para gran nmero de muestras. Adems de eso, la pu-
reza enantiomrico de los agentes derivatizantes es impor-
tante para evitar falsos resultados. Otra limitacin son las
diferentes velocidades y/o constantes de reaccin para los
enantimeros ya que los estados de transicin reacionales
son diastereoisomricos lo que puede resultar en proporcin
diferente de la composicin enantiomrico inicial.
En el mtodo directo, la mezcla de enantimeros a ser re-
suelta es inyectada directamente en el cromatgrafo. Para
la separacin de los enantimeros se puede utilizar una
FEQ, o un solvente quiral, o una fase mvil con aditivo
quiral. La resolucin ocurre debido a la formacin de com-
plejos diastereoisomricos entre la mezcla enantiomrica
y el selector quiral utilizado para la resolucin. El uso de
FEQ es hoy el mtodo ms empleado para resolucin por
CLAE.
En las tablas a continuacin (Tablas 1, 2, 3, 4 y 5) son pre-
sentadas las principales clases de fases estacionarias utili-
zadas para la resolucin de mezclas racmicas y algunos
ejemplos de selectores quirales en cada clase. Consultar el
fabricante para la indicacin del uso de cada selector.
Tabla 1 - Fases estacionarias quirales del tipo Pirkle.
Discriminador quiral*
(R)-DNB-fenilglicina
(S)-DNB-fenilglicina
(R)-DNB-leucina
(S)-DNB-leucina
Fosfonato de dimetilo de DNB-a-amino-2,2-dimetil-4-
pentenila
DNB-tetraidrofenantreno
Naftiletilamida
______________
La mayora das columnas do tipo Pirkle son disponibles en las dos formas
enantiomricas.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 143

Tabla 2 - Fases estacionarias quirales del tipo protena. Las conductividades combinadas de los iones intrnsecos
secos y de los iones externos varan en funcin del pH y
Discriminador quiral son la base para las especificaciones de la conductividad
a1-Glicoprotena cida descritas en la tabla 3 y empleadas cuando realizada la eta-
Albumina srica bovina pa 3 de la prueba. Dos etapas preliminares son incluidas en
Albumina srica humana esta prueba. Si las condiciones de la prueba y los lmites de
Celobioidrolase I conductividad son atendidos en cualquiera de estas etapas
Pepsina preliminares (Etapas 1 y 2), el agua satisface las exigencias
Ovomucoid de esta prueba y no es necesaria la aplicacin de la Etapa
3. Solamente en el caso de que la muestra no obedezca a
Tabla 3 - Fases estacionarias quirales del tipo cavidad o inclusin. las exigencias de la Etapa 3, el agua es juzgada como no
conforme con los requisitos de la prueba de conductividad.
Discriminador quiral
-Ciclodextrina INSTRUMENTACIN Y PARMETROS OPERACIO-
b-Ciclodextrina NALES
g-Ciclodextrina
O-(S)-2-Hidroxipropil-b-ciclodextrina La conductividad del agua debe ser medida usando instru-
O-(R/S) 2-Hidroxipropil-b-ciclodextrina mentos calibrados con resolucin de 0,1 S/cm. El term-
O-(S)-Naftiletilcarbamoil-b-ciclodextrina metro debe tener divisiones de 0,1 C y cubrir la banda de
23 a 27 C. Los electrodos deben ser mantenidos conforme
Tabla 4 - Fases estacionarias quirales del tipo carbohidratos. la recomendacin del fabricante del aparato.
Discriminador quiral La constante de conductividad de la clula es un factor

5
Tris (dimetilfenilcarbamoil) celulosa usado como multiplicador para los valores de la escala del
Tris (4-metilbenzoato) celulosa conductivmetro.
Tris (fenilcarbamoil) celulosa
Triacetato de celulosa Constante de la clula: el valor debe ser conocido en 2%.
Tribenzoato de celulosa Generalmente clulas de conductividad presentan constan-
ter tribenzlico de celulosa te de 0,1 cm-1, 1 cm-1 y 2 cm-1. La mayora de los equi-
Tricinamato de celulosa pos presenta la constante de la clula definida. Es necesario
comprobar esa constante con solucin de KCl de referencia
Tabla 5 - Fases estacionarias quirales del descrita en la Tabla 1. Normalmente la verificacin es rea-
tipo antibiticos macrocclicos. lizada utilizando solamente una solucin de referencia; en
ese caso utilizar la solucin de referencia de menor con-
Discriminador quiral ductividad. Sin embargo, es recomendable medir peridi-
Vancomicina camente la conductividad de los dems estndares y obser-
Teicoplanina var la concordancia entre la lectura del conductivmetro y
Ristocetina el valor nominal de cada solucin de referencia.

5.2.24 CONDUCTIVIDAD DEL Calibracin: conforme instrucciones del fabricante. La

AGUA
La conductividad elctrica del agua es una medida del flujo
de electrones la cual es facilitada por la presencia de iones.
Molculas de agua se disocian en iones en funcin del pH
y de la temperatura resultando en una determinada conduc-
tividad. Algunos gases, en especial el dixido de carbono,
se disuelven en agua e interactan para formar iones que
afectan la conductividad y el pH del agua. Esos iones y
su conductividad resultante pueden ser considerados como
intrnsecos al agua. La exposicin de la muestra a la atms-
fera puede alterar la conductividad/resistividad, debido a la
prdida o ganancia de gases disueltos.
El ion cloruro y el ion amonio son algunas de las prin-
cipales impurezas encontradas en la agua y, tambin, in-
fluencian en su conductividad. Esos iones externos pueden
tener impacto significativo en la pureza qumica del agua y
comprometer su utilizacin en aplicaciones farmacuticas.
mayora de los equipos de mltiples escalas posee un ni-
co punto calibracin, luego es necesario calibrar siempre
que se use una escala diferente. La lectura obtenida debe
estar entre + 0,1 S/cm del valor nominal de la solucin de
referencia.
Para la calibracin del conductivmetro, utilizar las solu-
ciones de referencias descritas a continuacin.
Solucin A (0,01 M): pesar exactamente 0,7455 g de cloru-
ro de potasio seco a 105 C durante 2 horas, transferir para
baln volumtrico de 1000 ml y completar el volumen con
agua.
Solucin B (0,005 M): pipetear 50 ml de la Solucin A para
baln volumtrico de 100 ml y completar con agua.
Solucin C (0,001 M): pipetear 10 ml de la Solucin A para
baln volumtrico de 100 ml y completar con agua.
Solucin D (0,0005 M): pipetear 5 ml de la Solucin A para
baln volumtrico de 100 ml y completar con agua.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 144 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Solucin Y (0,0001 M): pipetear 5 ml de la Solucin A para las exigencias para la conductividad. Sin embargo, si el
baln volumtrico de 500 ml y completar con agua. valor medido es mayor que el de la tabla, proceder a la
determinacin de acuerdo con la Etapa 2.
Nota 1: para el preparado de las soluciones arriba utilizar
siempre agua exenta de dixido de carbono, o sea, con con- Tabla 2 - Valores lmites para conductividadde
ductividad inferior a 0,10 S.cm-1. acuerdo con la temperatura (solamente para valores de
conductividad sin compensacin de temperatura).
Nota 2: no utilizar compensacin de temperatura y mante-
ner las soluciones de referencia a 25 C durante la lectura. Temperatura (C) Conductividad (pS/cm)
0 0,6
Tabla 1 - Conductividad de las soluciones 5 0,8
de cloruro de potasio (25C). 10 0,9
15 1,0
Concentracin Conductividad
Solucin 20 1,1
(mol/L) S/cm
30 1,3
A 0,01 1412 35 1,4
B 0,005 717,5 40 1,5
C 0,001 146,9 45 1,7
D 0,0005 73,9 50 1,8
E 0,0001 14,9 55 1,9
60 2,1
PROCEDIMIENTO
65 2,2
70 2,4

5
El procedimiento escrito a continuacin es establecido
para medidas de agua purificada y agua para inyectables. 75 2,5
80 2,7
Alternativamente la Etapa 1 puede ser realizada (con modi- 85 2,7
ficaciones) apropiadas de acuerdo en el tem 1 de la Etapa 90 2,7
1) usando instrumentos de tipo en lnea que hayan sido 95 2,9
calibrados apropiadamente, cuyas constantes de clula ha- 100 3,1
yan sido exactamente determinadas y cuyas funciones de
compensacin de termperatura hayan sido desabilitadas. Etapa 2

La adecuabilidad de tales instrumentos en lnea para
prueba de control de calidad es tambin dependiente de la
localizacin en el sistema de agua. Evidentemente, el posi-
cionamiento del instrumento precisa reflejar la calidad del
agua que ser usada.
Etapa 1
1. Enjuagar la clula por lo menos con tres porciones de
la muestra.
2. La determinacin debe ser realizada en recipiente apro-
piado o como determinacin en lnea. El valor obte-
nido debe ser inferior a 1,3 S/cm, en la temperatura de
25,0 C + 0,1 C.
1. Transferir cantidad suficiente de agua (100 ml o ms)
para recipiente apropiado y agitar a muestra. Ajustar a
(25 1) C y agitar la muestra vigorosamente obser-
vando peridicamente la lectura del conductivmetro.
Cuando el cambio en la conductividad debido a la ab-
sorcin de dixido de carbono atmosfrico es menor
que 0,1 S/cm por 5 minutos, registrar la conductivi-
dad.
2. Si la conductividad no es mayor que 2,1 S/cm, el agua
obedece a las exigencias para la prueba de conductivi-
dad. Si la conductividad es mayor que 2,1 S/cm, pro-
ceder conforme la Etapa 3.
Etapa 3

3. En la tabla 2, localizar el valor de la temperatura ms
prxima y menor que la temperatura en la cual la con-
ductividad fue medida. El valor de conductividad co-
rrespondiente a esa temperatura es el lmite. (No inter-
polar)
4. Si el valor de conductividad medido no es mayor que
el valor correspondiente en la Tabla 2, el agua atiende a
Realizar este prueba como mximo 5 minutos despus de
la Etapa 2 con la misma muestra mantenindola a tempera-
tura de (25 1) C. Aadir solucin saturada de cloruro de
potasio (0,3 ml para 100 ml de muestra) y determinar el pH
con precisin de 0,1 unidad de acuerdo con Determinacin
del pH (5.2.19). Utilizando la Tabla 3 determinar el valor
lmite para la conductividad de acuerdo con el pH.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 145

Tabla 3 - Valores lmites de conductividad de acuerdo Si el valor de conductividad medido no es mayor que el
con el pH (solamente para muestras mantenidas valor correspondiente en la Tabla 4, el agua ultrapurificada
en atmsfera y temperatura equilibradas). atiende a las exigencias para la conductividad.
pH Conductividad (pS/cm) Tabla 4 - Valores lmites para conductividad de
5,0 4,7 acuerdo con la temperatura (solamente para valores de
5,1 4,1 conductividad sin compensacin de temperatura).
5,2 3,6
Temperatura (C) Conductividad (pS/cm)
5,3 3,3
5,4 3,0 0 0,012
5,5 2,8 5 0,017
5,6 2,6 10 0,023
5,7 2,5 15 0,031
5,8 2,4 20 0,042
5,9 2,4 25 0,055
6,0 2,4 30 0,071
6,1 2,4 35 0,090
6,2 2,5 40 0,113
6,3 2,4 45 0,140
6,4 2,3 50 0,171
6,5 2,2 55 0,207
6,6 2,1 60 0,247
65 0,294

5
6,7 2,6
6,8 3,1 70 0,345
6,9 3,8 75 0,403
7,0 4,6 80 0,467
85 0,537
Despus de determinado el pH y establecido el lmite de 90 0,614
acuerdo con la Tabla 3, el agua atiende la prueba si la con- 95 0,696
ductividad medida en la Etapa 2 no es mayor que ese lmi- 100 0,785
te. Si la conductividad fuese mayor o el valor del pH est
fuera de la banda de 5 a 7, el agua no atiende la prueba para 5.2.25 LIMPIDEZ DE LQUIDOS
conductividad.
PROCEDIMIENTO
AGUA ULTRAPURIFICADA
Utilizar tubos de vidrio neutro, incoloro y transparente, con
Para el agua ultrapurificada, en general los conductivmetros fondo chato y de 15 a 25 mm de dimetro interno, a me-
o resistivmetros instalados en los equipos de purificacin de nos que indicado de manera diferente en la monografa.
agua poseen un circuito de compensacin de la temperatura Introducir, en tubos separados, el lquido en examen y la
para 25,0 C y dan la lectura directa. Esos equipos deben ser suspensin de referencia indicada en la monografa, pre-
calibrados peridicamente. La conductividad del agua ultra- parndola por ocasin del uso, conforme especificado en
purificada debe ser 0,055 S/cm a 25,0 C (resistividad > la Tabla 1. El lquido en examen y la suspensin de refe-
18,0 M.cm) para una aplicacin especfica. rencia deben alcanzar, en los tubos, una altura de 40 mm.
Cinco minutos despus del preparado de la suspensin de
Alternativamente, caso el equipo no proporcione la lectura referencia, comparar el contenido de los tubos, observn-
directa de la conductividad, proceder conforme a continua- dolos, verticalmente, bajo luz visible difusa y contra fondo
cin: negro. La difusin de la luz debe ser tal que la suspensin
1. Enjuagar la clula con por lo menos tres porciones de de referencia I sea fcilmente distinguida del agua y de la
la muestra. suspensin de referencia II.

2. Determinar simultneamente la temperatura y la con-
ductividad del agua sin compensacin automtica de
la temperatura. La determinacin debe ser realizada en
recipiente apropiado o como determinacin en lnea.
El valor obtenido debe ser inferior a 0,055 S/cm, en la
temperatura de 25,0 C + 0,1C.
3. En la Tabla 4, localizar el valor de temperatura ms
prximo y menor que la temperatura en la cual la con-
ductividad fue medida. El valor de conductividad corres-
pondiente a esa temperatura es el lmite. (No interpolar)
Un lquido es considerado lmpido cuando, al ser examina-
do en las condiciones anteriormente descritas, su transpa-
rencia corresponde a la del agua o a la del solvente utiliza-
do, o cuando su opalescencia no es ms pronunciada que la
de la suspensin de referencia I.
Estndar de opalescencia
Disolver 1 g de sulfato de hidracina en agua y completar el
volumen para 100 ml con el mismo solvente. Dejar en repo-
so por 4 a 6 horas. Aadir 25 ml de esa solucin a una so-

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 146 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
lucin conteniendo 2,5 g de metenamina en 25 ml de agua.
Mezclar bien y dejar en reposo por 24 horas. Esa suspensin
es estable por dos meses si es conservada en recipiente de
vidrio, con superficie libre de defectos. La suspensin no
debe adherir a las paredes del recipiente y debe ser, vigo-
rosamente, agitada, en el recipiente original, antes del uso.
Para el preparo del estndar de opalescencia, diluir 15 ml
de la suspensin para 1000 ml con agua. El estndar de opa-
lescencia debe ser preparado en el momento del uso y puede
ser conservado por, como mximo, 24 horas.
Tabla 1 - Preparo de las suspensiones de referencia
Suspensin de referencia I II III
Estndar de opalescencia (ml) 5 10 30
Agua (ml) 95 90 70
5.2.26 ALCOHOLIMETRA
Alcoholimetra es la determinacin del grado alcohlico
o ttulo etanlico de las mezclas de agua y alcohol etlico.
5
El ttulo alcohomtrico volumtrico de una mezcla de agua
y alcohol est expresado por el nmero de volmenes de
etanol a 20 C contenido en 100 volmenes de esa mezcla
a misma temperatura. Est expresado en % (v/v).
El ttulo alcohomtrico ponderal est expresado por la re-
lacin entre la masa de etanol contenida en una mezcla de
agua y etanol y la masa total de esta. Est expresado en %
(m/m).
El alcohol etlico contiene, como mnimo, 95,1% (v/v) co-
rrespondiendo a 92,55% (m/m) y, como mximo, 96,9%
(v/v) correspondiendo a 95,16% (m/m) de C2H6O a 20 C.
El alcohol etlico absoluto contiene, como mnimo, 99,5%
(v/v) correspondiendo a 99,18% (m/m) de C2H6O a 20 C.
Esos valores pueden ser observados en la tabla alcohom-
trica (Anexo D).
DETERMINACIN DEL GRADO ALCOHLICO O
TTULO ALCOHOMTRICO
El alcohmetro centesimal se destina a la determinacin del
grado alcohlico de las mezclas de agua y alcohol indicando
solamente la concentracin del alcohol en volumen y expre-
sado por su unidad de medida, grado Gay-Lussac (G.L.).
Las determinaciones del alcohmetro son exactas sola-
mente para la mezcla de agua y alcohol a 20 C, en la cual
el instrumento fue graduado. Si la temperatura durante el
ensayo fuese inferior o superior a 20 C se torna necesario
corregir la temperatura del alcohol para 20 C.
La determinacin del grado alcohlico de las mezclas de
agua en volumen es realizada por el alcohmetro.
Para la determinacin del grado alcohlico de las mezclas de
agua y alcohol en masa, puede ser utilizado el mtodo de la
densidad relativa o verificada a graduacin en la tabla alco-
homtrica despus de la determinacin por el alcohmetro.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
5.2.27 ANLISIS TRMICO
El Anlisis Trmico es un conjunto de tcnicas que posi-
bilitan medir las propiedades fsico-qumicas de una sus-
tancia en funcin de la temperatura. Las tcnicas ms co-
mnmente utilizadas son las que miden las variaciones de
energa o de masa de una sustancia.
TERMOGRAVIMETRA (TG)
La termogravimetra es la tcnica de Anlisis Trmico en
que la variacin de masa de la muestra es determinada
como una funcin de la temperatura, o tiempo de calenta-
IV miento, utilizando un programa controlado de temperatura.
50
Aparatos
50
Es constituido bsicamente de una termobalanza que es
una asociacin entre el horno elctrico y una balanza elec-
trnica de alta precisin en la cual la sustancia es insertada
en un porta muestra bajo atmsfera especificada y progra-
ma controlado de temperatura. El dispositivo posibilita
calentar y medir simultneamente la masa del analito. En
ciertos casos, el aparato puede ser asociado a un sistema
que posibilita detectar y analizar los productos voltiles.
Calibracin y/o comprobacin de la termobalanza. Transfe-
rir una cantidad adecuada de oxalato de calcio monohidrata-
do SQR en el porta muestra. La termobalanza indicar con
gran precisin y exactitud su masa. Emplear la razn de ca-
lentamiento de 10 C/min y calentar la muestra hasta 900 C.
Al finalizar el proceso trmico registrar: i) la curva termo-
gravimtrica (TG) marcando la temperatura en el eje de las
abscisas (valores crecientes de la izquierda para la derecha)
y la masa porcentual de la muestra en el eje de las ordenadas
(valores crecientes de abajo para arriba); ii) la curva termo-
gravimtrica derivada (DTG), derivada primera de la curva
TG, que posibilita definir mejor donde se inici y finaliz la
prdida de masa. Determine en el grfico la distancia entre
los estndares inicial y final de la curva masa- temperatura,
distancia que representa la prdida de masa de la muestra en
el dado intervalo de temperatura. Las prdidas de masas de-
claradas del oxalato de calcio monohidratado SQR son cal-
culadas, estequiomtricamente, a partir de las tres etapas de
prdidas de masas debido a las sucesivas liberaciones de: a)
H2O; b) CO; c) CO2. La verificacin de la escala de la tem-
peratura puede ser realizada utilizando la tcnica del gancho
metlico fundible (In, Pb, Zn, Al, Ag y Au) de acuerdo con
las indicaciones del fabricante.
Procedimiento
Utilizar el mismo mtodo descrito para calibracin y/
o comprobacin adicionando una cantidad adecuada de
muestra. Las curvas TG y DTG ilustradas en la Figura 1
indican una etapa de prdida de masa de la muestra. En la
curva DTG, se observa que entre los puntos ab se sita el
nivel inicial. La prdida de masa se inicia en el punto b y se
finaliza en el punto c. Entre los puntos cd se sita el nivel
final. El intervalo bc corresponde al intervalo reaccional.
Para calcular la prdida de masa de la muestra en la curva
TG, se utiliza la comparacin con la curva DTG para ma-

yor precisin en la localizacin de los puntos b y c. Trazar
las prolongaciones de los estndares inicial y final de la
curva TG en el eje de las ordenadas utilizando los puntos b
y c. La distancia medida corresponde a la prdida de masa
(m) de la muestra. Las proyecciones de los puntos b y c
en el eje de abscisas corresponden, respectivamente, a la
temperatura inicial (Ti) y final (Tf) de la prdida de masa.
Registrar el resultado en porcentaje de la relacin m/m.
Nota 1: es necesaria la obtencin de una curva del ensayo
en blanco (calentamiento en las mismas condiciones
experimentales emplendose el porta muestra vaco) antes
del ensayo de la muestra para sustraccin de lnea base.
Nota 2: en el caso de la utilizacin frecuente del aparato,
realizar, regularmente, la verificacin y/o calibracin. En
caso contrario, realizar esas operaciones antes de cada
determinacin.
Figura 1 - Ejemplo de la curva termogravimtrica y sus medidas.
Aplicaciones
La determinacin de la variacin de la masa para una sus-
tancia en determinados intervalos de temperatura puede
ser utilizada para evaluacin del comportamiento trmico;
determinacin del tenor de humedad y/o solventes; deter-
minacin de la temperatura de ebullicin y sublimacin;
determinacin de la temperatura de descomposicin trmi-
ca y determinacin del tenor de cenizas.
CALORIMETRA EXPLORATORIA DIFERENCIAL
(DSC)
La calorimetra exploratoria diferencial es una tcnica que
posibilita evaluar los fenmenos energticos, fsicos y/o
qumicos producidos durante el calentamiento (o enfria-
miento) de una sustancia. Esa tcnica posibilita medir el
flujo de calor diferencial entre la muestra y un material de
referencia trmicamente inerte en funcin de la temperatu-
ra y/o tiempo de calentamiento bajo un programa controla-
do de temperatura. La muestra y el material de referencia
son mantenidos aproximadamente a la misma temperatura
durante el experimento. Se pueden determinar las variacio-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 147
nes de entalpa; las cambios de calor especfico y la tem-
peratura de eventos endo y exotrmicos. De acuerdo con
el mtodo de medicin utilizado, hay dos modalidades: el
DSC con compensacin de potencia y el DSC con flujo de
calor.
APARATOS
El DSC con compensacin de potencia es constituido por
una clula calorimtrica que contiene dos hornos, uno para
el material de referencia y el otro para la muestra. El DSC
con flujo de calor se constituye por una clula calorimtri-
ca conteniendo un nico horno que dispone de un sensor
calorimtrico para la referencia y muestra. Los equipos
comportan un dispositivo de programacin controlada de
la temperatura, uno o varios detectores trmicos y un sis-
tema de registro que puede ser asociado a un sistema de
tratamiento de datos. Las determinaciones son efectuadas
bajo atmsfera especificada.
Calibracin y/o comprobacin del aparato. Calibrar el
aparato para el eje de temperatura y de flujo de calor utili-
zando indio metlico de alta pureza o cualquier otro mate-
5
rial certificado apropiado de acuerdo con las indicaciones
del fabricante. Para el ajuste de la linealidad, se utiliza una
combinacin de dos metales como el indio y el zinc para la
comprobacin del eje de temperatura.
PROCEDIMIENTO
Para un porta muestra adecuado transferir una cantidad de
la muestra, rigurosamente conocida. Fijar la temperatura
inicial y final del ensayo y la razn de calentamiento. Ini-
ciar el calentamiento. Despus del ensayo, registrar la cur-
va de la calorimetra exploratoria diferencial escribiendo
en el eje de las abscisas la temperatura, o el tiempo (valo-
res crecientes de la izquierda para la derecha) y el flujo de
calor en el eje de las ordenadas, indicando el sentido (en-
dotrmico o exotrmico). En la curva DSC ilustrada en la
Figura 2 se observa la variacin entlpica entre los puntos
acd. El punto de interseccin b, referente a la prolongacin
de la lnea de base con la tangente en el punto de mayor
inclinacin (punto de inflexin) de la curva, corresponde a
la temperatura onset (inicio extrapolado del evento, Tonset),
empleado en eventos de fusin como la temperatura inicial
del cambio de estado. El fin del evento trmico es marcado
por el punto c (T ), sin embargo para finalidades del clcu-
lo de rea de la curvas se considera el punto d (Tfinal). La
variacin de entalpa (H) del fenmeno es proporcional
al rea bajo la curva limitada por los puntos acd siendo
determinado el factor de proporcionalidad a partir de la de-
terminacin de la entalpa de fusin de una sustancia estn-
dar conocida (indio, por ejemplo) en las mismas condicio-
nes de trabajo. Cada curva trmino analtica es registrada
conteniendo los siguientes datos: indicacin de la ltima
calibracin, tamao e identidad de la muestra, tipo de porta
muestra, material de referencia, atmsfera (caudal y com-
posicin del gas), tasa de calentamiento y sensibilidad de
la clula calorimtrica.
 148 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Figura 2 - Ejemplo de una curva DSC tpica y sus medidas.
Aplicaciones
La evaluacin del flujo de calor diferencial referente a
las variaciones de capacidad trmica y de la entalpa de
las transiciones de fase de una sustancia en funcin de la
temperatura puede ser utilizada para la determinacin del
punto y banda de fusin; determinacin de la temperatura
de sublimacin, evaporacin y solidificacin; determina-
5
cin de la temperatura de transicin vtrea; evaluacin de
polimorfismo, construccin de diagrama de fases, determi-
nacin de la pureza (excepto las sustancias amorfas, los
polimorfos inestables en la banda de la temperatura expe-
rimental, los compuestos que funden con descomposicin
trmica y las sustancias que poseen pureza inferior a 95%).
Determinacin de pureza
El mtodo es basado en el hecho de que la presencia de pe-
queas cantidades de impurezas en un dato material dismi-
nuye su punto de fusin y alarga su banda global de fusin.
La Figura 3 ilustra ese comportamiento para tres muestras
hipotticas, una de ellas es la estndar y las otras dos con-
tienen pequeas cantidades de impurezas.
Figura 3 - Ejemplo de curvas DSC de una uestra
hipottica con diferentes contenidos de pureza
Basndose en la ecuacin de vant Hoff (Ecuacin 1), es
posible la determinacin de la fraccin molar de las impu-
rezas X2 (nmero de moles de las impurezas por el total de
nmero de moles de la muestra) considerando que no hay
formacin de fase slida durante la fusin.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
(To Tm) Hf
X2 =
RTo2 (Ecuacin 1)
en que Tm representa la temperatura de fusin de la mues-
tra; To es el punto de fusin de la sustancia pura en gra-
dos Kelvin; R es la constante de los gases (8,3143 J.K-1.
mol-1); Hf es el calor de fusin del principal componente
expresado en J.mol-1.
Cuando no hay formacin de fase slida, la concentracin
de impureza en la fase lquida en una dada temperatura du-
rante la fusin es inversamente proporcional a la fraccin
fundida en esa temperatura y la disminucin del punto de
fusin es directamente proporcional a la fraccin molar de
impureza. El grfico de la temperatura de la muestra (Ts)
versus el inverso de la fraccin fundida (1/F) en la tempe-
ratura resulta en una recta con inclinacin igual a la dis-
minucin del punto de fusin (To Tm). El punto de fusin
terico de la sustancia pura puede ser obtenido por extra-
polacin cuando 1/F = 0.
(Ecuacin 2)
Sustituyendo los valores experimentales obtenidos para To
Tm, AHf y To en la ecuacin 1 es posible calcular la frac-
cin molar de las impurezas en la muestra.
5.2.28 DETERMINACIN DE LA
OSMOLALIDAD
Osmolalidad es una forma prctica que da una medida total
de la contribucin de varios solutos presentes en la solu-
cin por la presin osmtica de la solucin. Una aceptable
aproximacin de la osmolalidad en solucin acuosa est
dada por: m = vm , si el soluto no es ionizado, v= 1; sin
embargo v es el nmero total de iones siempre presente
o formado por la lisis de la solucin de una molcula de
soluto; m = molaridad de la solucin, que es el nmero
de moles del soluto por kilogramo de solvente; = coe-
ficiente osmtico molar el cual es cuantificado de la inte-
raccin entre iones de la carga opuesta de la solucin. Es
dependiente del valor de m. Si la complejidad de la solu-
cin aumenta, comienza a ser difcil de medir. La unidad
de osmolalidad es osmol por kilogramo (osmol/ kg), pero
el submltiplo miliosmol por kilogramo (mosmol/ kg) es
normalmente usado.
De otra forma descrita, la osmolalidad es determinada por
la medida de la disminucin del punto de congelamiento.
Existe una relacin entre la osmolalidad y la disminucin
del punto de congelamiento T:
m = T / 1,86 x 1000 mosmol/kg
EQUIPO
El equipo Osmmetro consiste de: contenedor refrige-
rado para la medida; sistema de medicin de temperatura
provisto de un termosensor, con un dispositivo de medi-
cin de diferentes potenciales que puede ser graduado para
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 149

la disminucin de la temperatura o directamente en la os-
molalidad; y debe ser incluido un recurso para homogenei-
zar la solucin.
PROCEDIMIENTO
Preparar la solucin referencia conforme descrito en la
Tabla 1. Determinar el cero del equipo usando Agua. Ca-
librar el equipo usando la solucin de referencia: pipetear
50 a 250 L de la muestra a ser analizada; transferir para
la clula de medicin e iniciar el sistema de enfriamiento.
Normalmente, un dispositivo de homogeneizar es progra-
mado para operar la temperatura abajo de la esperada de la
disminucin crioscpica para prevenir sper enfriamiento.
Un dispositivo indica cuando el equilibrio es alcanzado.
Antes de cada medicin limpiar la clula de medicin con
la solucin a ser examinada.

Tabla 1 - Informaciones para preparar la solucin de referencia para la calibracin del Osmmetro.
Masa en g de la
Osmolaridad real Osmolaridad ideal Coeficiente Disminucin
solucin de Cloruro de
(mosmol/kg) (mosmol/kg) osmtico molal crioscpica (C)
sodio por kg de agua
3,087 100 105,67 0,9463 0,186
6,260 200 214,20 0,9337 0,372
9,463 300 323,83 0,9264 0,558
12,684 400 434,07 0,9215 0,744
15,916 500 544,66 0,9180 0,930
19,147 600 655,24 0,9157 1,116
22,380 700 765,86 0,9140 1,302

Realizar la misma operacin con la muestra prueba. Leer
directamente la osmolalidad o calcular por la medicin de
la disminucin del punto de congelamiento. La prueba es
considerada vlida cuando el valor encontrado est entre
dos valores de la escala de calibracin.
5.2.29 ENSAYOS FSICOS
Y FSICO QUMICOS PARA
GRASAS Y ACEITES
5.2.29.1 DETERMINACIN DE LA
DENSIDAD RELATIVA
Proceder conforme descrito en Determinacin de la densi-
dad de masa y densidad relativa (5.2.5).
5.2.29.2 DETERMINACIN DE LA
TEMPERATURA DE FUSIN
Proceder conforme descrito en Determinacin de la tem-
peratura y banda de fusin, Mtodo III (5.2.2).
5
5.2.29.3 DETERMINACIN DE LA
TEMPERATURA DE SOLIDIFICACIN
SEPARACIN DE LOS CIDOS GRASOS
Transferir 75 ml de solucin de hidrxido de potasio en
glicerol (25 g de hidrxido de potasio en 100 ml de glice-
rol) para vaso de precipitados de 1000 ml y calentar a 150
C. Aadir 50 ml de muestra tratada conforme indicado
en la monografa especfica y proseguir el calentamiento
bajo agitacin. La temperatura no debe ultrapasar 150 C.
La saponificacin es dada por concluida cuando la mezcla
presenta homogeneidad, sin vestigios de material particu-
lado. Transferir la mezcla para otro vaso de precipitados de
1000 ml, conteniendo 500 ml de agua casi hirviendo. Jun-
tar, lentamente, 50 ml de solucin de cido sulfrico 25%
(v/v) y calentar, bajo agitacin, hasta separacin definida
de fase lmpida (cidos grasos). Lavar la fase grasa con
agua hirviendo a fin de eximirla de cido sulfrico y man-
tenerla, en vaso de precipitados pequeo, en bao mara
hirviendo hasta decantacin del agua, dejando lmpida la
fase oleosa. Filtrar y recolectar la mezcla de cidos grasos
todava caliente en vaso de precipitados seco y desecarla a
150 C durante 20 minutos. Transferir la mezcla caliente
para frasco apropiado y mantenerla en bao de hielo hasta
solidificacin.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 150 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Para evaluar el grado de pureza de los cidos grasos sepa-
rados por el procedimiento anterior, transferir, previamen-
te al congelamiento, 3 ml de la solucin de cidos grasos
desecados para tubo de ensayo y aadir 15 ml de etanol.
Calentar la solucin hasta que hierva y juntar 15 ml de hi-
drxido de amonio 6 M. La preparacin resultante debe ser
lmpida.
PROCEDIMIENTO
Proceder conforme descrito en Determinacin temperatura
de congelamiento (5.2.4).
5.2.29.4 DETERMINACIN DEL NDICE
DE REFRACCIN
El ndice de refraccin nt de un medio referido al aire es
igual a la relacin entre el seno del ngulo de incidencia de
un radio luminoso en el aire y el seno del ngulo de refrac-
cin del radio refractado en el medio considerado. Salvo
indicacin contraria, el ndice de refraccin es determinado
a 20 C 0,5 C y en largo de onda 589,3 nm, correspon-
diente al de la luz de la raya D del sodio. En ese caso, el
5
smbolo que representa el ndice de refraccin es n20/D.
En los refractmetros corrientes hay determinacin del n-
gulo lmite. En algunos aparatos, la parte esencial es un
prisma de ndice de refraccin conocido, en contacto con
el lquido en ensayo.
Para calibracin del aparato, utilizar los lquidos de refe-
rencia mencionados en la Tabla 1. El valor del ndice de
refraccin de cada lquido de referencia est indicado en
su rtulo.
Tabla 1 Lquidos de referencia en la
determinacin del ndice de refraccin.
n/t (coeficiente de
Lquido de referencia
temperatura)
Trimetilpentano 0,00049
Tolueno 0,00056
Metilnaftaleno 0,0048
Se es utilizada luz blanca para la determinacin del ndice
de refraccin, el refractmetro posee un sistema de com-
pensacin. El aparato deber suministrar lecturas exactas
hasta la tercera casa decimal, en el mnimo, y poseer un
dispositivo que posibilite operar a la temperatura prescrita:
el termmetro posibilita la lectura con la aproximacin de,
por lo menos, 0,5 C.
5.2.29.5 DETERMINACIN DEL PODER
ROTATORIO
Proceder conforme descrito en Determinacin del poder
rotatorio y del poder rotatorio especfico (5.2.8).
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
5.2.29.6 DETERMINACIN DE AGUA
Proceder conforme descrito en Mtodo volumtrico
(5.2.20.1).
5.2.29.7 NDICE DE ACIDEZ
El ndice de acidez, IA, expresa, en miligramos, la cantidad
necesaria de hidrxido de potasio para la neutralizacin de
los cidos grasos libres en 1 g de muestra.
ndices elevados de acidez son sugestivos de hidrlisis
acentuada de los steres constituyentes de la materia grasa.
Las causas de la degradacin incluyen tratamientos qumi-
cos integrantes de los procesos industriales de extraccin y
purificacin, actividad bacteriana, accin cataltica (calor,
luz), almacenamiento inadecuado y presencia de impure-
zas como la humedad, entre otros.
Pesar, colocada en matraz de 250 ml, cerca de 10,0 g o
exactamente la cantidad prescrita (en g) de la sustancia
prueba. Aadir 50 ml de una mezcla de etanol 96% y ter
etlico (1:1) v/v. Excepto cuando hubiere indicacin con-
traria en la monografa especfica, la mezcla de solventes
debe ser previamente neutralizada con hidrxido de pota-
sio 0,1 M, o hidrxido de sodio 0,1 M, en presencia de 0,5
ml de solucin de fenolftalena. Calentar la muestra hasta
90 C si es necesario para la disolucin de la misma. Des-
pus de solubilizacin completa; titular con hidrxido de
potasio 0,1 M hasta observacin del color rosa plido per-
sistente por, como mnimo, 15 segundos. Proceder al ensa-
yo en blanco y corregir el volumen de titulante consumido.
Calcular el IA de acuerdo con la ecuacin:
5,610n
Ia =
m
En que
n = volumen (en ml) de hidrxido de potasio 0,1 M gastado
en la titulacin
m = masa de muestra en gramos.
5.2.29.8 DETERMINACIN DEL NDICE
DE SAPONIFICACIN
El ndice de saponificacin IS exprime, en miligramos, la
cantidad de hidrxido de potasio necesaria para neutralizar
los cidos libres y saponificar los steres existentes en 1 g
de sustancia.
El IS da indicios de adulteraciones de la materia grasa con
sustancias insaponificables (aceite mineral, por ejemplo).
Salvo indicacin en la monografa especfica, utilizar la
cantidad de muestra indicada en la Tabla 1.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 151

Tabla 1 - Cantidad de muestra para medida cuantitativa del grado de insaturaciones de los ci-
determinar el ndice de saponificacin. dos grasos, esterificados y libres, en la muestra. El Iy valor
encontrado en la determinacin es sugestivo del grado de
Cantidad de pureza del material ensayado as como de la presencia de
Valor esperado de Is
muestra (g) adulterantes. La sustitucin del Mtodo A por el Mtodo B
3 10 12-15 debe ser objeto de una validacin.
10 40 8-12
40 60 5-8 MTODO A
60 100 3-5
100 200 2,5-3 Salvo indicacin en la monografa especfica, utilizar la
200 300 1-2 cantidad de muestra indicada en la Tabla 1.
300 400 0,5-1
Tabla 1 - Cantidad de muestra para
Pesar, colocada en baln de 250 ml, la cantidad de muestra determinacin del ndice de yodo.
indicada (m), aadir 25,0 ml de solucin metanlica de hi-
drxido de potasio 0,5 M y algunas piedras de ebullicin. ndice esperado I Cantidad de muestra
Adaptar el condensador de reflujo vertical. Calentar en Inferior a 20 1,0
bao mara durante 30 min, salvo en indicacin especfica. 20 60 0,5 0,25
Aadir 1 ml de solucin de fenolftalena y titular, inmedia- 60 100 0,25 0,15
tamente, el exceso de hidrxido de potasio con solucin de Superior a 100 0,15 0,10
cido clorhdrico 0,5 M (ml). Efectuar ensayo en blanco en
las mismas condiciones y corregir el volumen del titulante En recipiente de 250 ml, provisto de tapn esmerilado,
(n2 ml). seco, o lavado con cido actico glacial, introducir la

5
muestra (m g) y disolverla en 15 ml de cloroformo, salvo
Calcular el ndice de saponificacin (LS), utilizando la ex- en indicaciones especificadas en la respectiva monografa.
presin: Aadir 25,0 ml de solucin de bromato de yodo. Tapar el
recipiente y conservarlo bajo proteccin de la luz durante
28,05 (n1 n2) 30 min, agitndolo, frecuentemente. Despus de adicin de
Is =
m 10 ml de solucin de yoduro de potasio a 100 g/L y 100
ml de agua, titular con tiosulfato de sodio 0,1 M agitando,
5.2.29.9 DETERMINACIN DEL INDICE enrgicamente, hasta que la coloracin amarilla casi haya
DE STERES desaparecido. Juntar 5 ml de solucin de almidn y conti-
nuar la titulacin, adicionando el tiosulfato de sodio 0,1 M,
El ndice de steres, IE, expresa la cantidad de hidrxido de gota a gota, agitando, hasta la desaparicin del coloracin
potasio, en miligramos, necesaria para la saponificacin de (n2 ml). La prueba en blanco debe ser realizada en las mis-
los steres presentes en 1 g de muestra. El IE es calculado a mas condiciones y sin la muestra (n1 ml).
partir del ndice de saponificacin IS y del ndice de acidez
IA, conforme la ecuacin: Calcular el ndice de yodo por la expresin:

IE = IS IA 28,05 (n1 n2)

Is =
m
5.2.29.10 DETERMINACIN DEL INDICE
DE YODO MTODO B

El ndice de yodo Iy, expresa, en gramos, la cantidad de Salvo indicacin contraria, utilizar la cantidad de muestra
yodo susceptible a complejacin en 100 g de sustancia indicada en la Tabla 2.
bajo las condiciones descritas a continuacin. Constituye

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 152 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 2 - Cantidad de muestra para determinacin del ndice de yodo.

Masa (g) correspondiente a Masa (g) correspondiente a
Solucin de cloruro de
ndice de yodo probable I un exceso de 150 por ciento un exceso de 100 por ciento
yodo (ml)
de ICl de ICl
<3 10 10 25
3 8,4613 10,5760 25
5 5,0770 6,3460 25
10 2,5384 3,1730 20
20 0,8461 1,5865 20
40 0,6346 0,7935 20
60 0,4321 0,5288 20
80 0,3173 0,3966 20
100 0,2538 0,3173 20
120 0,2115 0,2644 20
140 0,1813 0,2666 20
160 0,1587 0,1983 20
180 0,1410 0,1762 20
200 0,1269 0,1586 20

En recipiente de 250 ml con tapn esmerilado, previamen- tamente, y aadir 30 ml de agua. Titular con tiosulfato de
te lavado con cido actico glacial o seco, introducir la sodio 0,01 M, adicionando, lentamente, sin parar la agita-

5
cantidad de muestra (m g) y disolverla en 15 ml de una
mezcla de volmenes iguales de ciclohexano y cido acti-
co glacial, salvo en indicacin contraria. si necesario, fun-
dir previamente la sustancia (punto de fusin superior a 50
C). Aadir, lentamente, el volumen de solucin de cloruro
de yodo indicado en la Tabla 2. Tapar el recipiente y agitar,
al abrigo de la luz, durante 30 min, salvo indicacin con-
traria. Aadir 10 ml de solucin de yoduro de potasio a 100
g/L y 100 ml de agua. Titular con tiosulfato de sodio 0,1 M,
agitando, enrgicamente, hasta que la coloracin amarilla
casi desaparezca. Aadir 5 ml de solucin de almidn y
continuar la titulacin adicionando, gota a gota, el tiosul-
fato de sodio 0,1 M hasta desaparicin de la coloracin (n1
ml de tiosulfato de sodio 0,1 M). Realizar un ensayo en
blanco en las mismas condiciones (n2 ml de tiosulfato de
sodio 0,1 M).
cin enrgica hasta que la coloracin amarilla haya casi
desaparecido. Aadir 5 ml de solucin de almidn. Conti-
nuar la titulacin agitando enrgicamente, hasta desapari-
cin de la coloracin (n1 ml de tiosulfato de sodio 0,01 M).
Realizar un ensayo en blanco en las mismas condiciones
(n2 ml de tiosulfato de sodio 0,01 M). El ensayo en blanco
no consume ms de 0,1 ml de tiosulfato de sodio 0,1 M.
Calcular el ndice de perxidos por la expresin:
10 (n1 n2)
Ip =
m
MTODO B
Nota: operar al abrigo de la luz.

Calcular el ndice de yodo utilizando a siguiente expresin:
5.2.29.11 DETERMINACIN DEL NDICE
DE PERXIDOS
El ndice de perxido Ip es el nmero que expresa, en mi-
liequivalentes de oxgeno activo, la cantidad de perxido
en 1000 g de sustancia.
Si la monografa no indica el mtodo a ser utilizado, ejecu-
tar el Mtodo A. La sustitucin del Mtodo A por el Mtodo
B es siempre objeto de validacin.
MTODO A
Pesar 5,00 g de la muestra, colocada en matraz de 250 ml
con tapn esmerilado. Aadir 30 ml de una mezcla v/v de
cido actico glacial y cloroformo (proporcin 3:2). Agitar
hasta disolucin de la muestra y juntar 0,5 ml de solucin
saturada de yoduro de potasio. Agitar durante1 min, exac-
En un matraz, con tapn esmerilado, introducir 50 ml de
una mezcla v/v de cido actico glacial con trimetilpentano
(3:2). Cerrar y agitar hasta disolucin de la muestra (Tabla
1). Aadir 0,5 ml de solucin saturada de yoduro de pota-
sio, cerrar nuevamente y dejar la solucin en reposo duran-
te 60 1s. En ese tiempo de reposo, agitar, por lo menos,
tres veces y, en seguida, aadir 30 ml de agua. Titular con
solucin de tiosulfato de sodio 0,01 M (v1 ml), adicionado
lentamente, con agitacin enrgica y constante, hasta des-
aparicin casi total de la coloracin amarilla dada por la
presencia del yodo. Aadir cerca de 0,5 ml de solucin de
almidn SI y continuar la titulacin, sin parar la agitacin,
en especial cuando est prximo del punto de equivalencia,
para garantizar la liberacin del yodo del solvente. Aadir,
gota a gota, la solucin de tiosulfato de sodio hasta que el
color azul comience a desaparecer. Si en la titulacin fue-
se gastado menos de 0,5 ml de tiosulfato de sodio 0,1 M,
repetir el procedimiento utilizando tiosulfato de sodio 0,01
M (v1 ml) bajo agitacin constante y enrgica.
En el caso de que el ndice de perxido sea igual o superior
a 70, y habiendo retraso en el cambio de color del indica-

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 153

dor almidn de 15 a 30 s, agitar, vigorosamente, hasta la Tabla 2 - Tabla 1 Cantidad de muestra

desaparicin de la coloracin amarilla. Eso es debido a la y volumen del reactivo acetilante.
tendencia de que el trimetilpentano sobrenade en la fase
acuosa y al tiempo necesario para obtener una mezcla ade- Volumen de
cuada entre el solvente y el titulante acuoso. Cantidad de reactivo (de
IOH esperado
muestra (g) acetilacin) en
Para ndices de perxido inferiores a 150, se utiliza tio- mililitros
sulfato de sodio 0,01 M. Puede adicionarse a la mezcla 10 100 2,0 5,0
una pequea cantidad (0,5 a 1,0% (m/m)) de emulsionante 100 150 1,5 5,0
apropiado, para retardar la separacin de las fases y dismi- 150 200 1,0 5,0
nuir el tiempo de liberacin del yodo (por ejemplo, poli- 200 250 0,75 5,0
sorbato 60). Efectuar un ensayo en blanco (v0 ml). Si fuese 250 300 0,6 o 1,20 5,0 o 10
consumido, ms de 0,1 ml de tiosulfato de sodio 0,01 M,
300 350 1,0 10,0
sustituir los reactivos y repetir la titulacin. El ndice de
350 700 0,75 15,0
perxido es calculado por la frmula a continuacin.
700 950 0,5 15,0
Calentar a bao mara durante 1 h, cuidando para mantener
el nivel del agua del bao cerca de 2,5 cm arriba del nivel
del lquido contenido en el baln. Retirar el baln y dejar-
en que: lo enfriar. Aadir 5 ml de agua a travs de la extremidad
c = concentracin de la solucin de tiosulfato de sodio en superior del condensador. Si la adicin del agua origina
moles por litro. una turbacin, aadir piridina hasta la desaparicin de la
turbacin y anotar el volumen adicionado. Agitar, calentar

5
Tabla 1 - Cantidad de muestra para nuevamente el baln en bao de agua durante 10 min. Re-
determinacin del ndice de perxido tirar el baln y dejarlo enfriar. Lavar el condensador y las
paredes del baln con 5 ml de alcohol, previamente neu-
Valor esperado de Ip Valor esperado de Ip tralizado en presencia de solucin de fenolftalena. Titular
0-12 0-12 con solucin alcohlica de hidrxido de potasio 0,5 M, en
12-20 12-20 presencia de 0,2 ml de solucin de fenolftalena SI (n1 ml).
20-30 20-30 Realizar un ensayo en blanco, en las mismas condiciones
30-50 30-50 (n2 ml).
50-90 50-90
Calcular el ndice de hidroxilo utilizando la expresin:
5.2.29.12 DETERMINACIN DEL NDICE
DE HIDROXILO
El ndice de hidroxilo IOH es el nmero que expresa, en en que
miligramos, la cantidad de hidrxido de potasio necesaria IA = ndice de acidez
para la neutralizacin de cido que se combina, por acila-
cin, con 1 g de sustancia. MTODO B

MTODO A En matraz seco y provisto de tapn esmerilado introducir

Introducir la muestra, exactamente pesada (g), de acuerdo
con la cantidad indicada en la Tabla 1, en baln de ace-
tilacin de 150 ml, salvo si en la monografa especfica
est solicitado otro valor. Aadir el volumen de solucin
de anhdrido actico indicado y adaptar el condensador de
reflujo.
la porcin de ensayo (m g). Aadir 2,0 ml de reactivo de
anhdrido propinico, cerrar el baln y agitar suavemente,
hasta disolucin. Despus de 2 h de reposo, salvo bajo in-
dicacin contraria, retirar el tapn del matraz y transferir su
contenido para otro de 500 ml con boca ancha conteniendo
25,0 ml de solucin de anilina a 9 g/L en ciclohexano y 30
ml de cido actico glacial. Agitar y despus de 5 min de
reposo aadir 0,05 ml de solucin cristal violeta SI. Titular
con cido perclrico 0,1 M hasta cambio para verde esme-
ralda (n1 ml). Realizar un ensayo en blanco en las mismas
condiciones (n2 ml).

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 154 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Calcular el ndice de hidroxilo utilizando a expresin:
en que
IA = ndice de acidez
Por la posibilidad de haber presencia de agua, determinar
el tenor de humedad (y por ciento) en la muestra segn el
mtodo especfico. El ndice de hidroxilo es obtenido por
la ecuacin:
I OH= (ndice encontrado) 31,1y
5.2.29.13 DETERMINACIN DEL NDICE
DE ACETILO
El ndice de acetilo es la cantidad de lcali, en mg de hi-
drxido de potasio, necesaria para la neutralizacin del
cido actico liberado por la hidrlisis de 1 g de sustancia
acetilada. Es usado para establecer el grado de presencia
de alcoholes libres en sustancias grasas. Es calculado con
5
base en la diferencia entre los ndices de saponificacin de
la sustancia acetilada por la tcnica descrita a continuacin
y de la sustancia no acetilada.
PROCEDIMIENTO
Transferir 10 g de sustancia y 20 ml de anhdrido acti-
co para baln Kjeldahl de 200 ml de capacidad. Adaptar
el condensador de reflujo. Apoyar el frasco sobre tela de
amianto en cuyo centro haya sido cortado un orificio de
cerca de 4 cm de dimetro y calentar sobre llama de que-
mador de gas con altura mxima de 25 mm (evitando que
la llama alcance la base del baln). Mantener en ebullicin
regular durante 2 horas, enfriar y transferir el contenido del
baln para vaso de precipitados de 1000 ml conteniendo
600 ml de agua. Aadir 0,2 g de polvo de piedra pmez y
hervir durante 30 minutos. Enfriar y transferir la mezcla
para embudo de separacin, rechazando la camada acuosa
inferior. Lavar la sustancia acetilada con tres o ms por-
ciones de 50 ml de solucin saturada caliente de cloruro
de sodio, hasta que la solucin de lavado no proporcione
ms reaccin cida al papel de tornasol. Aadir, adems,
20 ml de agua caliente al embudo y agitar, removiendo,
en seguida, lo ms completamente posible, la fase acuosa.
Transferir la sustancia para cpsula de porcelana, aadir 1
g de sulfato de sodio pulverizado y filtrar a travs de papel
de filtro plegado. Determinar el ndice de saponificacin
de la sustancia original, no acetilada, y de la sustancia ace-
tilada por el procedimiento descrito y calcular el ndice de
acetilo por la frmula:
(b a).1335
IAC =
1335 a
en que
a = ndice de saponificacin de la sustancia original,
b = ndice de saponificacin de la sustancia acetilada.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
5.2.29.14 DETERMINACIN DE
SUSTANCIAS INSAPONIFICABLES
Sustancias insaponificables son aquellas remanentes a la
reaccin de saponificacin, no voltiles a 100 105 C y
que fueron acarreadas en el proceso de extraccin de la
sustancia de ensayo.
Si la monografa especfica no indica el procedimiento,
utilizar el Mtodo I. Utilice material de vidrio con boca
esmerilado y desengrasado.
MTODO I
Aadir 2,0 2,5 g de la muestra en baln de 250 ml. Aadir
25 ml de hidrxido de potasio etanlico 0,5 M. Acoplar
un condensador de reflujo al baln y hervir en bao ma-
ra por 1 hora, bajo agitacin. Transferir el contenido del
baln para embudo de separacin, usando 50 ml de agua
y, mientras el lquido todava est tibio, extraer, mediante
agitacin vigorosa, con tres cantidades de 50 ml de ter
exento de perxidos. Lavar el baln con la primera al-
cuota de ter. Mezclar las soluciones etreas en embudo
de separacin conteniendo 20 ml de agua. (Si las solucio-
nes etreas contienen slidos en suspensin, filtrar para el
embudo de separacin a travs de un filtro de papel libre
de grasa. Lavar el filtro con ter libre de perxido). Agi-
tar, cuidadosamente, y descartar la fase acuosa. Lavar la
fraccin orgnica, con dos porciones de 20 ml de agua. En
seguida, aadir tres cantidades de 20 ml de hidrxido de
potasio 0,5 M y agitar, vigorosamente, en cada una de las
adiciones. Despus de cada tratamiento debe ser realizado
el lavado con 20 ml de agua. Finalmente, lave con canti-
dades sucesivas de 20 ml de agua hasta que la fase acuosa
no muestre reaccin alcalina en presencia de fenolftalena.
Transferir la fraccin orgnica para un baln previamente
tarado, lavando el embudo de separacin con ter exento
de perxidos. Eliminar el ter y aadir 3 ml de acetona al
baln. Eliminar el solvente por completo hasta constante
la temperatura no superior a 80 C. Disolver el contenido
del baln en 10 ml de etanol recientemente hervido (96%)
y previamente neutralizado. Titular con hidrxido de sodio
etanlico 0,1 M y solucin de fenolftalena como indica-
dor. Si el volumen de solucin titulante gastado no excede
0,1 ml, la cantidad de residuos pesados, debe ser tomada
como materia insaponificable. Calcular la materia insapo-
nificable como un porcentaje de la sustancia a ser exami-
nada. Si el volumen de titulante gastado excede 0,1 ml, la
cantidad de residuos pesados no pueden ser tomadas como
la materia insaponificable y de la prueba debe ser repetido.
MTODO II
En un baln de 250 ml, acoplado en sistema de condensa-
cin por reflujo, introducir la cantidad prescrita (m g) de la
muestra. Juntar 50 ml de solucin alcohlica de hidrxido
de potasio 2 M y calentar en bao mara, durante 1 h bajo
agitacin. Despus de enfriar la temperatura inferior a 25
C, transfirir el contenido del baln para embudo de se-
paracin. Aadir 100 ml de agua. Aadir 100 ml de ter
exento de perxidos y agitar cautelosamente. Repetir la
operacin dos veces ms con 100 ml de ter etlico. Re-

unir las fracciones etreas en otro embudo de separacin
conteniendo 40 ml de agua. Agitar, suavemente, durante
algunos minutos y dejar separar las fases. Rechazar la fase
acuosa. Lavar la fase etrea dos veces con 40 ml de agua
cada vez. Lavar en seguida, sucesivamente, con 40 ml de
hidrxido de potasio a 30 g/L y con 40 ml de agua. Repe-
tir tres veces esta operacin. Lavar, repetidamente, la fase
etrea con 40 ml de agua de cada vez, hasta que la fase
acuosa no d reaccin exento de perxidos. Evaporar el
ter hasta la sequedad, con las precauciones usuales. Juntar
6 ml de acetona al residuo. Eliminar, cuidadosamente, el
solvente en corriente de aire. Seque a 100 105 C, hasta
masa constante, deje enfriar en desecador y pese (a g). El
resultado es calculado en porcentaje m/m.
% de insaponificables = 100/m
Disolver el residuo en 20 ml de alcohol, neutralizados pre-
viamente en presencia de solucin de fenolftalena y titular
con solucin alcohlica de hidrxido de sodio 0,1 M. Si el
volumen de solucin alcohlica de hidrxido de sodio 0,1
M gastado en esa titulacin es superior a 0,2 ml, indica que
hubo separacin incompleta de las dos fases y residuo ob-
tenido no puede ser considerado insaponificable. El ensayo
debe ser repetido.
5.2.29.15 IDENTIFICACIN DE ACEITES
FIJOS
5.2.29.15.1 Identificacin de los aceites
vegetales por cromatografa en camada delgada
Fase fija: gel de slice octadecilsilanizada (RP-18).
Solucin muestra. Salvo indicacin en monografa espec-
fica, disolver cerca de 20 mg (1 gota) de la muestra en 3 ml
de diclorometano.
Solucin estndar. Disolver cerca de 20 mg (1 gota) de
aceite de maz en 3 ml de diclorometano.
Procedimiento. Aplicar, separadamente, 1 L de cada so-
lucin en la placa. Desarrollar dos veces en la distancia de
0,5 cm con ter. En seguida, desarrollar dos veces la distan-
cias de 8 cm con mezcla de diclorometano, cido actico
glacial con acetona (2:4:5). Dejar la placa secar al aire y
nebulizar con solucin de cido fosfomolbdico a 100 g/L
en alcohol. Calentar la placa a 120 C durante cerca de 3
min. Examinar a la luz del da.
El cromatograma presenta manchas comparables a las re-
producidas en la Figura 1.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 155
Figura 1 - Cromatografa en camada delgada
para la identificacin de los aceites fijos.
_____________
1. Aceite de man 6. Aceite de soja
2. Aceite de oliva 7. Aceite de girasol
3. Aceite de ssamo 8. Aceite de canola
4. Aceite de maz 9. Aceite de canola (exento de
cido ercico)
5. Aceite de almendras 10. Aceite de germen de trigo
5
5.2.29.15.2 Impurezas alcalinas
Introducir 10 ml de acetona recientemente destilada, 0,3 ml
de agua y 0,05 ml de solucin alcohlica de azul de bromo-
fenol a 0,4 g/L en tubo de ensayo. Neutralizar, si necesario,
con cido clorhdrico 0,01 M o hidrxido de sodio 0,01
M. Aadir 10 ml de la muestra, agitar y dejar en reposo.
El punto de cambio es indicado por el desarrollo de color
amarillo en la camada superior. No es necesario volumen
superior a 1,1 ml de cido clorhdrico 0,01 M
5.2.29.15.3 Aceites extraos en aceites vegetales
por cromatografa en camada delgada
Proceder por cromatografa en camada delgada (5.2.17.1),
utilizando placa (kieselguhr G). Impregnar la placa, colo-
cndola en una cmara cerrada conteniendo la cantidad
necesaria de la mezcla de ter etlico y parafina lquida
(90:10; v/v) para que la superficie del lquido alcance cerca
de 5 mm de la camada de adsorbente. Cuando la mezcla
de impregnacin haya recorrido, por lo menos, 12 cm de
la camada, retirar la placa de la cmara y dejar evaporar el
solvente durante 5 min. Desarrollar en la misma direccin
de la impregnacin.
Preparacin de la mezcla de cidos grasos. Calentar bajo
reflujo, durante 45 min, 2 g de la muestra con 30 ml de
solucin alcohlica de hidrxido de potasio 0,5 M. Jun-
tar 50 ml de agua, dejar enfriar. Transferir para embudo
de separacin. Agitar tres veces con 50 ml de ter etlico
de cada vez. Rechazar las soluciones etreas. Acidificar la
fase acuosa con cido clorhdrico y agitar tres veces con 50
ml de ter etlico de cada vez. Rena las soluciones etreas
y lvelas tres veces con 10 ml de agua de cada vez. Recha-
zar las aguas de lavado. Aadir sulfato de sodio anhidro a
la fraccin etrea y filtrar. Evaporar el ter en temperatura
inferior a 50 C. Utilizar el residuo para preparar la solu-
cin problema.
 156 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Los cidos grasos pueden, tambin, ser obtenidos a partir
de la solucin saponificada resultante de la reaccin de de-
terminacin de insaponificables.
Solucin muestra. Disolver 40 mg de la mezcla de cidos
grasos obtenidos de la muestra en 4 ml de cloroformo.
Solucin estndar. Disolver, en 4 ml de cloroformo, 40 mg
de la mezcla de cidos grasos obtenidos a partir de una
mezcla de 19 volmenes de aceite de maz y 1 volumen de
aceite de canola.
Procedimiento. Aplicar, separadamente, en la placa, 3 L
de cada solucin. Desarrollar el cromatograma con mez-
cla de cido actico glacial: agua (90:10 v/v) por recorrido
de 8 cm. Secar la placa a 110 C durante 10 min. Dejar
enfriar. Introducir la placa, salvo indicacin contraria, en
cuba de cromatografa saturada de vapores de yodo. Para
tal, coloque yodo en cristalizador, de forma baja, en el fon-
do de la cuba. Despus de cierto tiempo, aparecen manchas
castaas o amarillas castaas. Retirar la placa de la cuba y
aguardar algunos minutos. Cuando la coloracin de fondo,
castaa de la camada desaparezca, pulverizar con solucin
5
de almidn; aparecen, entonces, manchas azules que, cuan-
do se secan, pueden pasar a castaas y vuelven de nuevo a
azul despus de pulverizacin con agua. El cromatograma
obtenido con la Solucin muestra presenta siempre man-
chas correspondientes a las manchas del cromatograma ob-
tenido con la Solucin estndar: una con Rf prxima de 0,5
(cido oleico) y otra con Rf prxima de 0,65 (cido linolei-
co). En ciertos aceites puede aparecer una mancha con Rf
prxima de 0,75 (cido linolnico). Por comparacin con
el cromatograma obtenido con la Solucin estndar, verifi-
que la ausencia de la mancha con Rf 0,25 (cido ercico) en
el cromatograma obtenido con la solucin problema.
5.2.29.15.4 Aceites extraos en aceites fijos por
cromatografa a gas
Cuando no hubiere cualquier indicacin en la monografa
especfica, utilice el Mtodo A. La investigacin de aceites
extraos es efectuada sobre los steres metlicos de los ci-
dos grasos del aceite en anlisis, utilizando cromatografa
a gas (5.2.17.5).
MTODO A
Ese mtodo no se aplica a los aceites que contienen gli-
cridos de cidos grasos con grupos epoxi, hidro epoxi,
ciclopropil o ciclopropenilo, ni a los que contienen gran
cantidad de cidos grasos con nmero de tomos de car-
bono en la cadena inferior a 8, ni aquellos cuyo ndice de
cido sea superior a 2,0.
Solucin muestra. Si la monografa indica, seque la mues-
tra antes de iniciar el ensayo. Pesar 1,0 g de la muestra, en
baln de boca esmerilada de 25 ml. Acoplar condensador
de reflujo y un dispositivo que posibilite hacer pasar una
corriente de nitrgeno en el interior del baln. Aadir 10
ml de metanol anhidro y 0,2 ml de solucin de hidrxido
de potasio a 60 g/L en metanol. Adaptar el condensador y
hacer pasar una corriente de nitrgeno con flujo de cerca
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
de 50 ml/min hasta eliminacin del aire. Agitar y calentar
hasta la ebullicin. Cuando la preparacin quede lmpida
(normalmente cerca de 10 min despus), calentar por ms 5
min. Enfriar en agua corriente y transfirir para un embudo
de separacin. Lavar el baln con 5 ml de heptano, aadir
al contenido del embudo de separacin y agitar. Aadir 10
ml de solucin de cloruro de sodio a 200 g/L y agitar vigo-
rosamente. Dejar separar las fases y transfirir la fase org-
nica para un baln conteniendo sulfato de sodio anhidro.
Dejar en reposo y filtrar.
Solucin estndar (a). Preparar 0,50 g de mezcla de sus-
tancias de referencia, conforme prescrito en la monografa
especfica. Si la monografa no indica la solucin estndar,
utilice una de las que son descritas en la Tabla 1. Disolver
en heptano y diluir a 50,0 ml con el mismo solvente. Ob-
servacin: Para cromatografa en columna capilar y razn
de split es recomendado que el componente con cadena
larga de la mezcla en anlisis sea adicionado a la mezcla
de calibracin, cuando el anlisis cuantitativo sea realizado
por curva de calibracin.
Solucin estndar (b). Diluir 1,0 ml de la solucin estndar
(a) y completar para 10,0 ml con heptano.
Solucin estndar (c). Preparar 0,50 g de una mezcla de
metil steres de cidos grasos conforme indicado en la mo-
nografa de la sustancia en anlisis. Disolver en heptano
y diluir hasta 50 ml en baln volumtrico con el mismo
solvente. Mezclas comerciales de metil steres de cidos
grasos, tambin, pueden ser utilizadas.
Condiciones cromatogrficas
Columna:
material: slice fundida, vidrio o cuarzo;
tamao: 10 a 30 m de largo y 0,2 a 0,8 mm de dimetro
interno;
fase estacionaria: poli(cianopropil) metilfenilmetilsi-
loxano o de macrogol
20 000 (espesor del pelcula de 0,1 a 0,5 m) u otra fase
estacionaria apropiada;
Gas de arrastre: helio o hidrgeno para cromatografa;
Flujo del gas de arrastre: 1,3 ml/min (para columnas de
0,32 mm de dimetro interno);
Razn de split: 1:100 o menor, de acuerdo con el di-
metro interno de la columna en uso (1:50 cuando el di-
metro sea de 0,32 mm);
Detector: ionizacin de llama;
Temperatura:
columna: 160 200 C, de acuerdo con la fase esta-
cionaria y largo (200 C para una columna de 30 m de
largo, revestida internamente con macrogol 20 000). si
necesario o indicado en la monografa de la sustancia
en anlisis, elevar la temperatura de la columna de 170
a 230 C con rampa de calentamiento de 3 C por mi-
nuto (columna con macrogol 20 000).
inyector: 250 C;
detector: 250 C;

Volumen de inyeccin: 1 L;
Sensibilidad: A altura del pico principal en el cromatogra-
ma obtenido con la Solucin de estndar (a) es de 50 a
70% de la escala total del registrador.
Adecuacin del sistema cuando fuesen utilizadas las
mezclas de sustancias referencia (Tabla 2).
Observacin. Para cromatografa en columna capilar y ra-
zn de split es recomendado que el componente con cade-
na larga de la mezcla en anlisis sea adicionado a la mezcla
de calibracin, cuando el anlisis cuantitativo sea realizado
por curva de calibracin.
resolucin: como mnimo, de 4 entre los picos de ca-
prilato de metilo y caprato de metilo, calculados en el
cromatograma obtenido con la Solucin estndar (a);
razn seal/ruido: como mnimo, 5 para el pico referen-
te al caprato de metilo, observado en el cromatograma
obtenido por el anlisis de la Solucin estndar (b);
nmero de bandejas tericas: mnimo de 15000, calcu-
lado para el pico correspondiente al caproato de metilo.
Adecuacin del sistema cuando fuesen utilizadas las
mezclas de sustancias referencia listadas en las Tablas 1,
o 3:
Observacin. Para cromatografa en columna capilar y ra-
zn de split es recomendado que el componente con cadena
longa de la mezcla en anlisis sea adicionado a la mezcla
de calibracin, cuando el anlisis cuantitativo sea realizado
por curva de calibracin.
resolucin: como mnimo, de 1,8 entre los picos de
oleato de metilo y estearato de metilo, calculados en el
cromatograma obtenido con la Solucin estndar (a);
razn seal/ruido: como mnimo, 5 para el pico referen-
te al miristato de metilo observado en el cromatograma
obtenido por el anlisis de la Solucin estndar (b);
nmero de bandejas tericas: mnimo de 30 000, calcu-
lado para el pico correspondiente al estearato de metilo.
Evaluacin del cromatograma. Evite condiciones de an-
lisis que posibiliten el surgimiento de picos enmascara-
dos (presencia de constituyentes con tiempos de retencin
prximos como, por ejemplo, los cidos linolnico y ara-
qudico).
Anlisis cualitativo
Identificar los picos del cromatograma obtenido con la So-
lucin estndar (c) (en condiciones isotrmicas de opera-
cin o con programacin lineal de temperatura).
Cuando fuesen utilizadas condiciones isotrmicas de ope-
racin, los picos pueden ser identificados por comparacin
con el cromatograma obtenido de la Solucin estndar (a)
e informaciones registradas en las Tablas 1, 2, o 3:
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 157
a) medir el tiempo de retencin reducido (tR) de cada pico
obtenido de la Solucin estndar (a). El tR el tiempo
de retencin medido en relacin al pico del solvente y
no en relacin al tiempo de la inyeccin. Trazar la recta
por medio de la ecuacin:
Log (tR) = f (nmero de carbonos de la cadena equivalente)
b) los logaritmos de los tiempos de retencin reducidos
de los cidos insaturados son puntos de la recta con
valores no enteros de tomos de carbono denominados
de largo equivalente de cadena. El largo equivalen-
te de cadena corresponde al nmero terico de tomos
de carbonos de cidos grasos saturados que tendran
el mismo tR. Por ejemplo, el cido linoleico posee tR
como cido graso tericamente saturado con 18,8 to-
mos de carbono. Identificar los picos del cromatograma
obtenido con la solucin prueba por curva de calibra-
cin y por el tiempo de retencin reducido. Largos de
cadena estn registrados en la Tabla 4.
Anlisis cuantitativo
5
Generalmente, la cuantificacin es realizada usando el m-
todo de normalizacin, en el cual la suma de las reas bajo
los picos del cromatograma, con excepcin del pico del
solvente, es considerada como siendo igual a 100%. Utili-
zar, preferencialmente, un integrador electrnico.
El tenor porcentual de cada componente es calculado deter-
minando el rea bajo el pico correspondiente con relacin a
la suma de las reas bajo todos los picos. No considerar los
picos cuya rea sea inferior a 0,05 por ciento del rea total.
En determinados casos, cuando la cadena de cidos grasos
es inferior o igual a doce tomos de carbono, pueden ser
indicados factores de correccin en las monografas indi-
viduales para convertir el rea bajo los picos en porcentaje
m/m.
Tabla 1 - Mezcla de sustancias para calibracin.
Mezcla de sustancias Composicin (%m/m)
Laurato de metilo 5
Miristato de metilo 5
Palmitato de metilo 10
Estearato de metilo 20
Araquidato de metilo 40
Oleato de metilo 20
Tabla 2 - Mezcla de sustancias para calibracin.
Mezcla de sustancias Composicin (%m/m)
Caproato de metilo 10
Caprilato de metilo 10
Caprato de metilo 20
Laurato de metilo 20
Miristato de metilo 40
 158 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 3 - Mezcla de sustancias para calibracin. Soluciones estndar y evaluacin de los cromatogramas.
En la ausencia de indicacin especfica en la monografa
Mezcla de sustancias Composicin (% m/m) individual, proceda conforme descrito en Mtodo A.
Miristato de metilo 5
Palmitato de metilo 10 Condiciones cromatogrficas. La cromatografa puede ser
Estearato de metilo 15 realizada, utilizando:
Araquidato de metilo 20
columna de slice fundida de 30 m de largo y 0,25 mm de
Oleato de metilo 20
dimetro interno, recubierta con macrogol 20 000 (espesor
Eicosanoato de metilo 10
de la pelcula: 0,25 ^m);
Behenato de metilo 10
Lignocerato de metilo 10 gas de arrastre: helio para cromatografa, con flujo 0,9 ml/
min;
Tabla 4 - Largo equivalente de cadena (valores calculados a partir
de curva de calibracin y anlisis con columna de macrogol 20000). detector de ionizacin de llama;

Largo de cadena razn de split 1:100

cido graso
equivalente
Acido caproico 6,0 Utilizar la programacin de temperatura representada en
cido caprlico 8,0 la Tabla 1.
Acido cprico 10,0
Acido lurico 12,0 Tabla 1 - Programacin de temperatura para cromatografa.
Acido mirstico 14,0

5
Tiempo Temperatura
Acido palmtico 16,0
(minutos) (grados Cent)
Acido palmitoleico 16,3
Acido margrico 17,0 Columna 0-15 100
Acido esterico 18,0 15-36 100-225
Acido oleico 18,3 36-61 225
Acido linoleico 18,8 Inyector 250
Acido gama-linolnico 19,0 Detector 250
Acido alfa-linolnico 19,2 MTODO C
Acido araqudico 0,0
Acido eicosanoico 20,2 Ese mtodo no se aplica a los aceites que contengan gli-
Acido araquidnico 21,2 cridos de cido grasos con grupos epoxi, hidroperoxi, al-
Acido behnico 22,0 dehdo, cetona, ciclopropil y ciclopropenilo, as como, a
Acido ercico 22,2 los aceites con grupos poliinsaturados conjugados o con
Acido 12-oxoesterico 22,7 grupos acetilnicos por causa de la destruicin parcial o
Acido ricinolico 23,9 total de esos grupos.
Acido 12-hidroxiesterico 23,9
Lignocerato de metilo 24,0 Solucin problema. En frasco cnico de 25 ml, disolver
Acido nervnico 24,2 0,10 g de la muestra en 2 ml de solucin de hidrxido de
sodio a 20 g/L en metanol. Adaptar el frasco al condensa-
MTODO B dor de reflujo vertical y calentar durante 30 min. A travs
del condensador, aadir 2,0 ml de solucin metanlica de
Este mtodo no se aplica a los aceites que contengan glic- trifluoruro de boro y calentar durante 30 min. A travs del
ridos de cidos grasos con grupos epoxi, hidroepoxi, ciclo- condensador, aadir 4 ml de heptano y calentar durante 5
propilo o ciclopropenilo, ni a los aceites cuyo ndice cido min. Enfriar la mezcla y aadir 10,0 ml de solucin satu-
sea superior a 2,0. rada de cloruro de sodio. Agitar durante 15 s y aadir una
cantidad de solucin saturada de cloruro de sodio suficien-
Solucin problema. Introducir 0,100 g de la muestra en te para hacer la fase superior llegar al cuello del frasco re-
tubo de centrfuga de 10 ml con tapn esmerilado. Disol- cipiente. Retirar alcuota de 2 ml de la fase superior. Lavar
ver con 1 ml de heptano y 1 ml de dimetilcarbonato. Agitar tres veces con 2 ml de agua de cada vez y secar con sulfato
enrgicamente, calentando a calor suave (50 60 C). Aa- de sodio anhidro.
dir 1 ml de solucin de sodio a 12 g/L en metanol anhidro a
la solucin todava caliente. Agitar enrgicamente, durante Soluciones estndar, condiciones cromatogrficas y eva-
cerca de 5 min. Aadir 3 ml de agua destilada y agitar enr- luacin de los cromatogramas. En la ausencia de indica-
gicamente, durante cerca de 30 s. Centrifugar durante 15 cin en la monografa especfica, proceder conforme des-
min a 1500 g. Inyectar 1 L de la fase orgnica. crito en Mtodo A.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


5.2.29.16 DETERMINACIN DE
ESTEROLES EN ACEITES FIJOS
SEPARACIN DE LA FRACCIN DE ESTEROLES
Preparar la fraccin insaponificable. Separar la fraccin de
esteroles del aceite fijo por cromatografa en camada del-
gada, utilizando una placa de gel de slice G (espesor de la
camada entre 0,3 mm y 0,5 mm).
Solucin muestra (a). En baln de 150 ml, introducir vo-
lumen de solucin de betulina a 2 g/L en diclorometano,
que corresponda a cerca de 10% del tenor de esteroles de
la muestra utilizada para el dosificacin (por ejemplo, vo-
lumen de 500 L de solucin de betulina en el caso del
aceite de oliva virgen, y de 1500 L en el caso de otros
aceites vegetales). Si en la monografa est registrada la
exigencia del clculo del tenor porcentual de cada esterol
en la fraccin esterlica, la adicin de la betulina puede
ser omitida. Evaporar hasta a que se seque en corriente de
nitrgeno. Aadir 5,00 g de la muestra y aadir 50 ml de
hidrxido de potasio alcohlico 2 M. Acoplar condensa-
dor de reflujo vertical. Calentar en bao mara durante 1
h, bajo agitacin. Enfriar hasta temperatura inferior a 25
C y transferir el contenido del baln para un embudo de
separacin, con el auxilio de 100 ml de agua. Agitar, con
precaucin, tres veces con 100 ml de ter etlico exento de
perxidos. Reunir las fracciones etreas en otro embudo de
separacin con el auxilio de 40 ml de agua destilada. Agitar
suavemente durante algunos minutos. Dejar separar las fa-
ses por decantacin y rechazar la fase acuosa. Lavar la fase
orgnica varias veces con 40 ml de agua (por vez) hasta
que la fase acuosa no presente reaccin alcalina a fenolfta-
lena. Transferir la fraccin orgnica para un baln, tarado
y lavar el embudo de separacin con ter etlico. Evaporar
el ter. Aadir al residuo 6 ml de acetona. Eliminar, cuida-
dosamente, el solvente con corriente de nitrgeno. Secar
en estufa a 100 105 C hasta masa constante. Disolver el
residuo con volumen mnimo de diclorometano.
Solucin muestra (b). Someter 5,00 g de aceite de canola
al mismo procedimiento descrito para la Solucin muestra
(a) a partir de Aadir 50 ml de hidrxido de potasio alco-
hlico 2 M....
Solucin problema (c). Someter 5,00 g de aceite de girasol
al mismo procedimiento descrito para la Solucin proble-
ma (a) a partir de Aadir 50 ml de hidrxido de potasio
alcohlico 2 M....
Solucin estndar. Disolver 25 mg de colesterol y 10 mg
de betulina en 1 ml de diclorometano. Utilizar una placa
diferente para cada solucin problema.
Aplicar, separadamente, 20 L de la Solucin estndar en
forma de banda de 20 mm por 3 mm y 0,4 ml de la solucin
problema (a), (b) o (c) en forma de banda de 40 mm por
3 mm. Migrar por la distancia de 18 cm con la fase mvil
ter:n-hexano (35:65; v/v). Secar las placas en corriente de
nitrgeno. Revelar con solucin de diclorofluorescena a 2
g/L en etanol. Examinar en 254 nm.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 159
El cromatograma obtenido con la Solucin estndar pre-
senta bandas correspondientes, respectivamente, al coles-
terol y a la betulina. Los cromatogramas obtenidos con las
Soluciones muestra presentan bandas de Rf prximos de
los correspondientes a los esteroles. De cada uno de los
cromatogramas raspar la regin de la placa correspondien-
te a las bandas de los esteroles as como una zona situada
2 3 mm para arriba y para abajo de las zonas visibles
correspondientes a la solucin estndar. Colocar esas re-
giones en tres matraces diferentes de 50 ml. Aadir cada
uno, 15 ml de diclorometano caliente y agitar. Filtrar, se-
paradamente, cada solucin por un filtro de vidrio poroso
(40), o por filtro de papel apropiado. Lavar, cada filtro, tres
veces con 15 ml de diclorometano. Transferir lo filtrado
y lquidos de lavado en matraz, tarado. Evaporar hasta la
sequedad en corriente de nitrgeno y pesar.
DOSIFICACIN DE LOS ESTEROLES
Proceder por cromatografa a gas (5.2.17.5). La dosifica-
cin debe ser realizada al abrigo de la humedad y preparar
las soluciones en el momento del uso.
5
Solucin muestra. A los esteroles separados a partir de la
muestra por cromatografa en camada delgada, aadir 0,02
ml de la mezcla, recientemente preparada, de clorotrimetil-
silano: hexametildisilazano: piridina anhidra (1:3:9; v/v/v)
por miligramo de residuo. Agitar, cuidadosamente, hasta
disolucin completa de los esteroles. Dejar en reposo en
desecador con pentxido de difsforo durante 30 min.
Centrifugar, si necesario, y utilizar el sobrenadante.
Solucin estndar (a). A nueve partes de los esteroles se-
parados del aceite de canola por cromatografa en camada
delgada, juntar una parte de colesterol. Aadir 0,02 ml de
la mezcla, recientemente preparada, de clorotrimetilsilano:
hexametildisilazano: piridina anhidra (1:3:9; v/v/v) por
miligramo de residuo. Agitar, cuidadosamente, hasta diso-
lucin completa de los esteroles. Dejar en reposo en dese-
cador con pentxido de difsforo durante 30 min. Centri-
fugar, si necesario, y utilizar el sobrenadante.
Solucin estndar (b). A los esteroles separados del acei-
te de girasol por cromatografa en camada delgada, juntar
0,02 ml de la mezcla, recientemente preparada, de clorotri-
metilsilano: hexametildisilazano: piridina anhidra (1:3:9;
v/v/v) por miligramo de residuo. Agitar, cuidadosamente,
hasta disolucin completa de los esteroles. Dejar en reposo
en desecador con pentxido de difsforo durante 30 min.
Centrifugar, si necesario, y utilizar el sobrenadante.
Condiciones cromatogrficas
columna de slice fundida de 20 a 30 m de largo y 0,25-
0,32 mm de dimetro interno, recubierta por pelcula de
poli[metil(95)fenil(5)]siloxano o de poli[metil(94) fe-
nil(5)vinil(l)]siloxano (espesor de la pelcula 0,25 m);
gas de arrastre: gas hidrgeno con flujo de 30 a 50 cm/s
o helio con flujo de 20 a 35 cm/s;
razn de split (1/50 o 1/100);
temperaturas: columna: 260 C;
inyector: 280 C;
 160 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

detector: 290 C; A x ms x 100

volumen de inyeccin: 1 L. A x ms

Resultados. El cromatograma obtenido con la Solucin en que

estndar (a) presenta cuatro picos principales correspon-
diendo, respectivamente, al colesterol, brasicasterol, cam- A = rea bajo el pico correspondiente al compuesto a ser
pesterol y -sitosterol. El cromatograma obtenido con la cuantificado;
Solucin estndar (b) presenta cuatro picos principales AS = rea bajo el pico correspondiente a betulina;
correspondiendo, respectivamente, al campesterol, estig- m = masa de la porcin de la muestra para el ensayo, en
masterol, -sitosterol y 7-estigmastenol. Los tiempos de gramos;
retencin relativos de los diferentes esteroles en relacin al ms = masa, en miligramos, de la betulina adicionada
-sitosterol son indicados en la Tabla 1.
5.2.30 CARBONO ORGNICO
El pico correspondiente al estndar interno (betulina) est,
ntidamente separado, de los picos correspondientes a los TOTAL
esteroles a ser cuantificados.
La determinacin del carbono orgnico total (COT) es un
Tabla 1 - Tiempos de retencin relativos, de los esteroles en mtodo sensible e inespecfico de cuantificar los tomos
relacin al -sitosterol, obtenidos con dos diferentes columnas. de carbono ligados por covalencia en molculas orgnicas
presentes en una muestra. El anlisis es utilizado para iden-
Poli[metil(94) tificar la contaminacin del agua por impurezas orgnicas
Poli[metil(95) fenil(5) y auxiliar en el control de los procesos de purificacin y
Esteris
fenil(5) siloxano vinil(1) distribucin. Bajos niveles de COT sugieren la ausencia
siloxano
5
de compuestos qumicos orgnicos potencialmente peli-
Colesterol 0,63 0,67 grosos en el agua usada en la elaboracin de frmacos. El
Brassicasterol 0,71 0,73 tenor de COT puede estar relacionado a la ocurrencia de
24-Metilenocolesterol 0,80 0,82 endotoxinas, al crecimiento microbiano y al desarrollo de
Campesterol 0,81 0,83 biopelculas en las paredes de la tubera de los sistemas de
Campestanol 0,82 0,85 distribucin de agua de uso farmacutico. El contenido de
Estigmasterol 0,87 0,88 COT es independiente del estado de oxidacin de la mate-
7-Campesterol 0,92 0,93 ria orgnica y no sufre interferencia de otros tomos liga-
5,23-Estigmastadienol 0,95 0,95 dos a la estructura orgnica, como nitrgeno e hidrgeno.
Clerosterol 0,96 0,96 Hay varios mtodos apropiados para a anlisis del COT y
-Sitosterol 1 1 las determinaciones pueden ocurrir en lnea o en el labora-
Sitostanol 1,02 1,02 torio (fuera de lnea).
5-Avenasterol 1,03 1,03
5,24-Estigmastadienol 1,08 1,08 Los mtodos en general se fundamentan en la oxidacin
7-Estigmastenol 1,12 1,12 completa de las molculas orgnicas a dixido de carbono,
A7-Avenasterol 1,16 1,16 que es cuantificado como carbono. Normalmente, el carbo-
no orgnico es oxidado por combustin, aplicando calor,
Betulina 1,4 1,6
emisin de rayos ultravioleta o agentes oxidantes, como el
Examinar el cromatograma obtenido con la Solucin mues- persulfato de sodio. La cuantificacin del dixido de car-
tra. Identificar los picos y calcular el tenor porcentual de bono est hecha por deteccin del gas producido con in-
cada esterol en la fraccin de esteroles usando a ecuacin: frarrojo o por la lectura de la conductividad de la solucin.

A El mtodo comprendido en ese captulo es sugestivo y el

x 100
S usuario puede adoptar cualquier otro que sea apropiado y
en que
A = rea bajo el pico correspondiente del compuesto a
cuantificar;
S = suma de las reas bajo los picos correspondientes a los
compuestos indicados en la Tabla 1.
Si en la monografa hubiere exigencia, calcule el tenor de
cada esterol en la muestra, en miligramos por 100 gramos,
utilizando la expresin:
accesible a sus finalidades especficas, siempre que el l-
mite de cuantificacin sea adecuado a la banda de lectura
esperada. Utiliza una solucin estndar de sustancia f-
cilmente oxidable, como la sacarosa, por ejemplo, en una
concentracin tal que la respuesta instrumental obtenida
corresponda al lmite establecido para el COT. El mtodo
puede igualmente ser realizado con un aparato instalado
en lnea, que haya sido convenientemente calibrado y que
satisfaga al ensayo de conformidad del sistema.
En la Tabla 1 son mostrados los valores medios esperados
para los principales tipos de purificacin de agua

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Figura 1 - Valores tpicos de COT en agua
Tipo de purificacin
Agua potable
Destilacin
Desionizacin
Osmosis reversa
Osmosis reversa + desionizacin
Tecnologas combinadas
Tecnologas combinadas + Oxidacin UV
EQUIPO
Consiste de un inyector, un equipo para descomponer la
muestra, un sistema para separar el dixido de carbono for-
mado, un detector y un registrador del seal elctrico emi-
tido. El tubo de descomposicin debe ser capaz de generar,
como mnimo, 0,450 mg/L de carbono orgnico, para una
muestra de 1,071 mg/L de sacarosa.
El lmite de deteccin del equipo, especificado por el fa-
bricante, es igual o inferior a 0,050 mg de carbono por li-
tro (0,05 ppm). La conformidad del sistema es verificada,
peridicamente, por medio de una solucin preparada con
una sustancia de difcil oxidacin, como por ejemplo, a
1,4-benzoquinona. La localizacin del aparato es escogida
para asegurar que los resultados obtenidos sean representa-
tivos del agua utilizada. La lectura debe ser hecha inmedia-
tamente despus de la recoleccin de la muestra de agua.
AGUA COT (ACOT)
Utilizar agua de alta pureza, que satisfaga las siguientes
especificaciones:
Conductividad: como mximo 0,1 S.cm-1 a 25 C;
Carbono orgnico total como mximo 0,10 mg/L.
Dependiendo del tipo de equipo utilizado los contenidos en
metales pesados y en cobre pueden ser crticos. Observar
las instrucciones del fabricante.
Utilizar el agua COT como blanco; en la preparacin de las
soluciones del estndar; de solucin de conformidad del
sistema y en la limpieza del equipo. La preparacin de la
solucin estndar y de la solucin de conformidad del sis-
tema debe ser concomitante a la de la muestra.
PREPARACIN DEL MATERIAL DE VIDRIO.
Lavar, cuidadosamente, el material de vidrio por medio de
un proceso que elimine la materia orgnica. Dejar el mate-
rial inmerso en mezcla de partes iguales de solucin de pe-
rxido de hidrgeno diluido a 30% y cido ntrico diluido.
Enjuagar con agua COT.
Caso use una microjeringa para inyectar la muestra, esta
debe ser lavada con mezcla de solucin de hidrxido de so-
dio a 5% con alcohol etlico absoluto (1:1), o en cido clor-
hdrico a 25%. Enjuagar abundantemente con agua COT.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 161
Banda esperada de COT (mg/L
0,5 a 7,0
Cerca de 0,10
0,05 a 0,50
,04 a 0,10
0,01 a 0,05
0,003 a 0,005
< 0,002
PREPARACIN DE LAS SOLUCIONES
Blanco. Preparar la solucin del blanco, o cualquier otra
solucin necesaria para definir la lnea de base, o proceder
a la calibracin, segn las instrucciones del fabricante. Uti-
lizar el blanco apropiado para regular el cero del aparato.
Solucin estndar. Disolver la sacarosa R, previamente de-
secada en temperatura de 105 C durante 3 h, en agua COT,
para obtener una solucin conteniendo 1,19 mg de sacaro-
sa por litro (0,50 mg de carbono por litro), para verificar el
instrumento.
5
Utilizar solucin, en agua COT, de ftalato cido de pota-
sio, previamente seco a 105 C durante 4 hs, en la con-
centracin determinada por el fabricante del equipo, para
la calibracin del instrumento. Preservar la solucin, aci-
dificando con H3PO4 concentrado o H2SO4 concentrado a
pH < 2. Para determinar carbono orgnico e inorgnico,
separadamente, preparar, tambin, la solucin estndar de
solucin de bicarbonato de sodio (seco en desecador, como
mnimo por 18 horas) y carbonato de sodio decahidratado
(seco a 500 600 C por 30 minutos), en la proporcin del
contenido de carbono de 1:1, en agua COT.
La concentracin de la solucin estndar est calculada
para el agua purificada, cuyo lmite de COT es de 500 ppb.
Para otros tipos de agua, hacer la debida adecuacin.
Solucin de conformidad del sistema. Disolver 1,4-benzo-
quinona en agua COT, para obtener una solucin a 0,75
mg de 1,4-benzoquinona por litro (0,50 mg de carbono por
litro).
Muestra. Recoger la muestra de agua en recipiente limpio;
seco y con tapa, dejando un mnimo de aire. Cuidar para no
haber cualquier tipo de contaminacin. No utilizar material
de plstico. Proceder al anlisis el ms breve posible, para
minimizar los riesgos de deterioro o de contaminacin de
la muestra.
CONFORMIDAD DEL SISTEMA
Proceder las lecturas (L) de las soluciones de agua COT
(LCot), solucin estndar (LPa), solucin de conformidad
del sistema (LCS) y registrar. Calcular la eficacia del siste-
ma en porcentaje, usando a expresin:
LCS LCot
x 100
LPa LCot
 162 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
El sistema estar conforme si el valor obtenido est entre
85% y 115% del valor terico.
PROCEDIMIENTO
Emplear el mtodo analtico recomendado por el fabrican-
te del equipo utilizado. Inyectar volumen adecuado de la
muestra y proceder a la lectura del carbono total.
Determinar la lectura de la muestra (LAm). La muestra satis-
face el ensayo si LAm no es superior a LPa LCot.
LAm < LPa LCot
Para clculos diferenciados de las fracciones de carbono
orgnico e inorgnico, hacer la lectura del carbono orgni-
co total, mudar la configuracin del equipo para la lectura
de carbono inorgnico y calcular el carbono orgnico por
sustraccin. Alternativamente, puede medir el carbono or-
gnico despus de eliminacin del carbono inorgnico y
sustraer del carbono total. Normalmente, para aguas de alta
pureza la fraccin de carbono inorgnico es despreciable.
5 5.3 MTODOS QUMICOS
5.3.1 REACCIONES DE
IDENTIFICACIN
5.3.1.1 IONES, GRUPOS Y FUNCIONES
Los mtodos clsicos de identificacin de funciones o de-
terminados grupos qumicos presentes en frmacos consis-
ten en reacciones que resultan en formacin de precipitado,
producto colorido, desprendimiento de gas, decoloracin
del reactivo utilizado u otro fenmeno cualquier fcilmen-
te perceptible. Estos ensayos no son aplicables a mezclas
de frmacos.
Acetato
1. Calentar la muestra con cantidad igual de cido oxli-
co; se desprenden vapores cidos con olor caractersti-
co de cido actico.
2. Calentar la muestra con cido sulfrico SR y etanol; se
desprenden acetato de etilo, de olor caracterstico.
3. Tratar solucin neutra de la muestra con cloruro frrico
SR; se produce color rojo oscuro, que desaparece por la
adicin de cidos minerales.
4. Disolver la muestra en agua, aadir cinco gotas de ni-
trato de lantano SR, dos gotas de yodo 0,1 M y una
gota de solucin concentrada de amonaco. Calentar
cuidadosamente hasta ebullicin. Despus de algunos
minutos se forma precipitado azul o aparece coloracin
azul intensa.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Acetilo
Colocar la muestra en tubo de ensayo y juntar tres gotas de
cido fosfrico SR. Cerrar el tubo con tapa atravesada por
otro tubo de ensayo menor lleno de agua y en cuyo exterior
se deposit una gota de nitrato de lantano SR. Calentar el
conjunto en bao mara durante cinco minutos (ciertas sus-
tancias acetiladas se hidrolizan con dificultad; en este caso
la mezcla debe ser calentada lentamente, hasta ebullicin,
sobre llama directa). Transferir la gota de nitrato de lantano
SR a una cpsula de porcelana y mezclar con una gota de
yodo SR. Colocar en el borde de la mezcla una gota de
hidrxido de amonio 2 M. En la zona de contacto de los
dos lquidos aparece lentamente color azul que persiste por
poco tiempo.
Alcaloide
Disolver algunos miligramos de la muestra en 5 ml de
agua, juntar cido clorhdrico SR hasta acidificar la solu-
cin y, en seguida, verter 1 ml de iodobismutato de potasio
acuoactico; se forma inmediatamente precipitado anaran-
jado o rojo anaranjado.
Aluminio, ion
1. Juntar la muestra a hidrxido de amonio 6 M; se forma
precipitado blanco gelatinoso, insoluble en exceso del
mismo reactivo.
2. Aadir la muestra a hidrxido de sodio M o sulfuro de
sodio SR; se forma precipitado blanco gelatinoso, solu-
ble en exceso del mismo reactivo.
A la solucin de la muestra juntar hidrxido de amonio 5
M hasta que se forme turbacin. Aadir, en seguida, de tres
a cuatro gotas de la solucin recin preparada de quinali-
zarina a 0,05% en hidrxido de sodio a 1% (p/v). Calentar
hasta ebullicin, enfriar y acidificar con exceso de cido
actico 5 M; se produce color violeta rojizo.
Amina aromtica primaria
Acidificar la solucin de la muestra con cido clorhdrico
2 M y juntar cuatro gotas de nitrito de sodio SR. Despus
de 1 a 2 minutos, aadir 1 ml de 2-naftol SR; aparece color
anaranjado intenso o rojo, formndose generalmente pre-
cipitado.
Amonaco y amina aliftica voltil
Disolver la muestra en tubo de ensayo, aadir xido de
magnesio y calentar si necesario; se desprenden paulati-
namente vapores alcalinos, que oscurecen el papel de pla-
ta-manganeso colocado en la parte superior del tubo.
Amonio, ion
Juntar a la muestra exceso de hidrxido de sodio M a fro;
ocurre desprendimiento de amonaco, de olor caractersti-
co, y que cambia para azul a color rojo del papel de torna-
sol. La descomposicin es acelerada por el calentamiento.

Antimonio (III), ion
Tratar la solucin de la muestra, fuertemente acidificada
por cido clorhdrico (en el mximo 2 M), con sulfuro de
hidrgeno SR; se forma precipitado anaranjado de sulfuro
de antimonio, insoluble en hidrxido de amonio 6 M, pero
soluble en sulfuro de amonio SR, hidrxido de sodio 2 M y
cido clorhdrico concentrado.
Disolver la muestra en tartrato de sodio y potasio SR; des-
pus de enfriamiento, juntar, gota a gota, sulfuro de sodio
SR1; se forma precipitado rojo anaranjado soluble en hi-
drxido de sodio 2 M.
Arsnico
1. La una solucin amoniacal de la muestra aadir sulfuro
de sodio SR y acidificar con cido clorhdrico diluido;
se forma precipitado amarillo, insoluble en cido clor-
hdrico, pero soluble en soluciones alcalinas.
2. Calentar 5 ml de la solucin de la muestra fuertemen-
te clorhdrica en bao mara con volumen igual de hi-
pofosfito de sodio SR; se forma precipitado de color
marrn a negro. En el caso que se trate de As (V), la
reduccin es ms lenta; el aumento de yoduro de pota-
sio SR ejercer efecto cataltico.
Barbtrico sin sustituyente en el nitrgeno
A una solucin metanlica de la muestra juntar algunas go-
tas de solucin conteniendo nitrato de cobalto (II) a 10%
(p/v) y cloruro de calcio a 10% (p/v), mezclar y aadir,
con agitacin, algunas gotas de hidrxido de sodio 2 M; se
forma precipitado azul violeta.
Bario, ion
1. Tratar solucin de la muestra con cido sulfrico M; se
forma precipitado blanco, insoluble en los cidos clor-
hdrico y ntrico.
2. Colocar la muestra en la zona reductora de llama; esta
adquiere color verde amarillo, que se presenta azul
cuando visto a travs de vidrio verde.
Benzoato
1. Tratar solucin neutra de la muestra con cloruro frrico
SR; se forma precipitado amarillo oscuro, soluble en
ter etlico.
2. Acidular solucin moderadamente concentrada de la
muestra con cido sulfrico M; se forma precipitado de
cido benzoico, fcilmente soluble en ter etlico.
Bicarbonato
1. Tratar la muestra con cido mineral; se produce efer-
vescencia con desprendimiento de gas incoloro que, al
reaccionar con hidrxido de calcio SR, forma inmedia-
tamente precipitado blanco.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 163
2. A una solucin fra de la muestra juntar fenolftalena
SI; la solucin permanece inalterada o queda apenas
levemente colorida.
Bismuto, ion
Disolver la muestra en ligero exceso de cidos ntrico o
clorhdrico y diluir con agua; se forma precipitado blan-
co que, tratado con sulfuro de hidrgeno, pasa a marrn;
el compuesto resultante es soluble en mezcla caliente de
partes iguales de cido ntrico y agua, pero insoluble en
sulfuro de amonio SR.
Bisulfito
Tratar la muestra con cido clorhdrico 3 M; se desprende
dixido de azufre, reconocido por su olor penetrante ca-
racterstico y por oscurecer papel de filtro humedecido con
nitrato de mercurio (I) SR.
Borato
1. A una solucin de la muestra acidulada con cido clor-
5
hdrico, juntar algunas gotas de solucin de yodo a
0,1% (p/v) y de solucin de alcohol polivinilo a 2%
(p/v); se produce color verde intenso. La reaccin es
alterada por agentes de oxidacin o reduccin.
2. Tratar la muestra con cido sulfrico, aadir metanol y
llevar la mezcla a la ignicin; ella quema con llama de
bordes verdes.
Bromato
1. A solucin de la muestra acidificada con cido sulfrico
SR, juntar agua de cloro SR; se desprende bromo, que
le da color pardo a la solucin; agitndose esta con clo-
roformo, el solvente adquiere color variando de rojo a
marrn rojizo y la camada acuosa permanece incolora.
2. Tratar la solucin de la muestra con cido ntrico SR y
nitrato de plata SR; se forma precipitado caseoso blan-
co levemente amarillento, insoluble en cido ntrico y
poco soluble en hidrxido de amonio 6 M
Calcio, ion
1. Humedecer la muestra con cido clorhdrico y llevarla
a la zona reductora de la llama; aparece color rojo ana-
ranjado transitorio.
2. Disolver la muestra, juntar dos gotas de rojo de metilo
SI, neutralizar con hidrxido de amonio 6 M, aadir
cido clorhdrico 3 M, gota a gota, hasta acidular la so-
lucin y verter oxalato de amonio SR; se forma preci-
pitado blanco de oxalato de calcio, insoluble en cido
actico 6 M, pero soluble en cido clorhdrico SR.
Carbonato
1. Tratar la muestra con cido mineral; se produce efer-
vescencia, con desprendimiento de gas incoloro que, al
 164 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
reaccionar con hidrxido de calcio SR, forma inmedia-
tamente precipitado blanco.
2. A una solucin fra de la muestra soluble juntar fenolf-
talena SI; aparece color rojo.
Plomo, ion
3. Tratar solucin de la muestra con cido sulfrico M; se
forma precipitado blanco, insoluble en cido clorhdri-
co 3 M o cido ntrico 2 M, pero soluble en hidrxido
de sodio M calentado, en acetato de amonio a 10% (p/v)
y en exceso de cido sulfrico M.
4. Tratar solucin de la muestra, exenta de cidos mine-
rales, con cromato de potasio SR; se forma precipitado
amarillo, insoluble en cido actico 6 M, pero soluble
en hidrxido de sodio M y en cido ntrico, en caliente.
Cianuro
Tratar solucin de la muestra con sulfato ferroso SR, hi-
drxido de sodio SR y cloruro frrico SR, calentar hasta
5
ebullicin y acidular con cido clorhdrico; se produce co-
loracin o precipitado azul. Si la cantidad de cianuro pre-
sente es pequea, se forma solucin coloidal de coloracin
azul verdosa.
Citrato
A 15 ml de piridina aadir algunos miligramos de la mues-
tra disuelta o suspendida en 1 ml de agua, agitar, juntar 5
ml de anhdrido actico a la mezcla, agitar nuevamente;
aparece color rojo claro.
Clorato
1. Tratar solucin de la muestra con nitrato de plata SR
en medio de cido ntrico SR; no se forma precipitado.
Verter cido sulfuroso o solucin reciente de nitrito de
sodio SR a esta mezcla; se forma precipitado blanco,
insoluble en cido ntrico SR, pero soluble en hidrxido
de amonio 6 M.
2. Someter la muestra a la ignicin; se forma cloruro,
identificado por ensayos apropiados.
3. Tratar la muestra seca con cido sulfrico; ocurre cre-
pitacin desprendindose gas amarillo verdoso (para
este ensayo usar cantidad pequea de clorato, debiendo
tomar cuidado extremo al ejecutarlo, pues el gas que se
forma se descompone de modo explosivo arriba de 45
C utilizar campana).
Cloruro
1. Tratar solucin de la muestra, acidificada con cido
ntrico, con nitrato de plata SR; se forma precipitado
blanco caseoso, insoluble en cido ntrico, pero, solu-
ble en ligero exceso de hidrxido de amonio 6 M.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
2. Mezclar la muestra seca con igual peso de dixido de
manganeso, humedecer con cido sulfrico SR y ca-
lentar suavemente; se desprende cloro, identificado por
el olor y por la produccin de color azul en papel de
almidn con yoduro humedecido.
Cobre (II), ion
1. Tratar la solucin de la muestra con ferrocianuro de
potasio SR; se forma precipitado marrn rojizo, inso-
luble en cidos diluidos, pero soluble en hidrxido de
amonio.
2. Tratar solucin de la muestra con cido clorhdrico y
virutas de hierro metlico; se deposita pelcula roja de
cobre metlico.
3. Tratar solucin de la muestra con exceso de hidrxido
de amonio 6 M; se forma primero precipitado azulado
y, en seguida, solucin fuertemente azulada.
ster
Juntar a la muestra solucin de clorhidrato de hidroxila-
mina a 7% (p/v) en metanol y solucin de hidrxido de
potasio a 10% (p/v) en etanol, calentar hasta ebullicin,
enfriar, acidular con cido clorhdrico SR y juntar solucin
de cloruro frrico SI; se produce color rojo azulado o rojo.
Hierro
Tratar la muestra con sulfuro de amonio SR; se forma pre-
cipitado negro, que se disuelve en cido clorhdrico 3 M,
con desprendimiento de gas sulfhdrico, caracterizado por
el papel acetato de plomo.
Frrico, ion
1. Tratar solucin cida de la muestra con ferrocianuro de
potasio SR; se forma precipitado azul oscuro, que no
disuelve por adicin de cido clorhdrico SR, pero es
descompuesto por hidrxido de sodio 2 M.
2. Tratar la muestra con tiocianato de amonio SR; se pro-
duce color rojo intenso que no desaparece con adicin
de cidos minerales diluidos, pero puede ser extrado
con ter etlico, pasando la coloracin roja para la ca-
mada etrea.
Ferroso, Ion
1. Tratar solucin de la muestra con ferrocianuro de pota-
sio SR; se forma precipitado azul oscuro, insoluble en
cido clorhdrico 3 M, pero descompuesto por hidrxi-
do de sodio M.
2. Tratar solucin de la muestra con hidrxido de sodio M;
se forma precipitado blanco verdoso, que pasa rpida-
mente a verde y, en seguida, cuando agitado, a marrn.

Fosfato (o ortofosfato)
1. Tratar solucin neutra de la muestra con nitrato de pla-
ta SR; se forma precipitado amarillo, soluble en cido
ntrico 2 M o hidrxido de amonio 6 M.
2. Tratar solucin ntrica de la muestra con molibdato de
amonio SR; se forma precipitado amarillo, soluble en
hidrxido de amonio 6 M; la reaccin es acelerada por
el calor.
Hipofosfito
1. Calentar solucin de la muestra, acidulada por cido
sulfrico SR, con sulfato cprico SR; se forma preci-
pitado rojo.
2. Tratar solucin de la muestra con cloruro mercrico
SR; se forma precipitado blanco, que se toma gris en la
presencia de exceso de hipofosfito.
Yoduro
1. Tratar solucin de la muestra con agua de cloro SR,
gota a gota; se desprende yodo, que cambia el color de
la solucin de amarillo para rojo; agitndose esta solu-
cin con cloroformo, esta adquiere color violeta.
2. Tratar solucin de la muestra acidificada con cido n-
trico SR, con nitrato de plata SR; se forma precipitado
amarillo caseoso, insoluble en cido ntrico SR e hi-
drxido de amonio 6 M
Lactato
Tratar solucin de la muestra, acidulada por cido sulfrico
SR, con permanganato de potasio SR y calentar la mezcla;
se desprende acetaldehdo, identificado por el olor carac-
terstico.
Litio, ion
1. Tratar la solucin de la muestra moderadamente con-
centrada y alcalinizada por hidrxido de sodio SR, con
carbonato de sodio SR; se forma, por calentamiento,
precipitado blanco, soluble en cloruro de amonio SR.
2. Humedecer la muestra con cido clorhdrico y calentar
en la zona reductora de la llama; esta adquiere color
rojo intenso.
Magnesio, ion
1. Tratar solucin de la muestra con hidrxido de sodio
SR; se forma precipitado blanco, que se disuelve con la
adicin de cloruro de amonio SR.
2. Tratar solucin de la muestra, en la presencia de cloru-
ro de amonio SR, con carbonato de amonio SR; no se
forma precipitado pero, al aadir fosfato de sodio dib-
sico heptahidratado SR, se forma precipitado cristalino
blanco, insoluble en hidrxido de amonio 6 M.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 165
Mercurio
1. Tratar solucin de la muestra con sulfuro de hidrgeno
SR; se forma precipitado negro, insoluble en sulfuro de
amonio SR y en cido ntrico 2 M hirviendo.
2. Aplicar solucin de la muestra, sin exceso de cido n-
trico, en lmina de cobre brillante; se forma depsito
que, al ser pulido, se torna brillante y plateado.
Mercurio (II), ion
1. Tratar solucin de la muestra con hidrxido de sodio
M; se forma precipitado amarillo.
2. Tratar solucin neutra de la muestra con yoduro de po-
tasio SR; se forma precipitado escarlata, muy soluble
en exceso de reactivo.
Mercurio (I),ion
1. Tratar la muestra con hidrxido de sodio M; la sal se
descompone, dando color negro.
5
2. Tratar solucin de la muestra con cido clorhdrico SR;
se forma precipitado blanco, que oscurece al ser tratado
con hidrxido de amonio 6 M.
3. Tratar solucin de la muestra con yoduro de potasio
SR; se forma precipitado amarillo que, con el tiempo,
puede pasar a verde.
Nitrato
1. Calentar la muestra con cido sulfrico y cobre me-
tlico; se desprenden vapores rojo pardos (realizar en
campana).
2. Tratar solucin de la muestra con igual volumen de ci-
do sulfrico, enfriar la mezcla y juntar 0,5 ml de solu-
cin de sulfato ferroso 0,5 M; en la interfaz se produce
color pardo a violeta.
Nitrito
1. Tratar la muestra con cidos minerales diluidos o con
cido actico 5 M; se desprenden vapores pardos (rea-
lizar en campana).
2. Tratar papel de almidn yodado con solucin de la
muestra; el indicador se torna color azul.
3. Aadir la muestra a la solucin acidificada de perman-
ganato de potasio SR; desaparece el color.
Oxalato
1. Tratar solucin neutra o alcalina de la muestra con clo-
ruro de calcio SR; se forma precipitado blanco, insoluble
en cido actico 6 M, pero soluble en cido clorhdrico.
 166 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
2. Tratar solucin acidificada caliente de la muestra con
permanganato de potasio SR; desaparece el color.
Permanganato
1. Tratar solucin de la muestra, acidulada por cido sul-
frico SR, con perxido de hidrgeno a 3% (p/v) SR; el
color desaparece en fro.
2. Tratar solucin de la muestra, acidulada por cido sul-
frico SR, con cido oxlico SR en solucin calentada;
el color desaparece.
Perxido
Tratar solucin de la muestra, ligeramente acidulada por
cido sulfrico SR, con dicromato de potasio SR; aparece
color azul intenso. Agitando la mezcla con igual volumen
de ter etlico y dejando que los lquidos se separaren, el
color azul pasa para la camada etrea.
Potasio, ion
5
1. Tratar solucin alcalina de la muestra con tetrafenilbo-
rato sdico a 1% (p/v); se forma precipitado blanco.
2. Tratar solucin de la muestra con cido actico SR y 1
ml de cobaltinitrito de sodio SR; se forma inmediata-
mente precipitado amarillo o amarillo anaranjado, en la
ausencia de iones amonio.
3. Colocar la solucin de la muestra, acidulada con cido
clorhdrico SR, en la zona reductora de la llama; esta
adquiere color violeta; la presencia de pequea canti-
dad de sodio enmascara el color.
4. Tratar solucin de la muestra con cido perclrico SR;
se forma precipitado blanco cristalino.
Plata, ion
1. Tratar solucin de la muestra con cido clorhdrico; se
forma precipitado caseoso blanco, insoluble en cido
ntrico SR, pero fcilmente soluble en hidrxido de
amonio 6 M
2. Tratar la solucin de la muestra con hidrxido de amo-
nio 6 M y pequea cantidad de solucin de formalde-
hido; por calentamiento, se deposita espejo de plata
metlica en la superficie del recipiente.
Salicilato
1. Tratar la solucin diluida de la muestra con cloruro f-
rrico SR; se produce color violeta.
2. Tratar solucin moderadamente concentrada de la
muestra con cido mineral; se forma precipitado cris-
talino blanco de cido saliclico, que funde entre 156
y 160 C.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Sodio, ion
1. Colocar solucin de la muestra, acidulada, con cido
clorhdrico SR, en la zona reductora de la llama; esta
adquiere color amarillo intenso.
2. Tratar solucin de la muestra con cido clorhdrico o
ntrico y, en seguida, con acetato de uranilo y zinc SR;
se forma precipitado cristalino amarillo oro, despus de
agitacin por algunos minutos.
Succinato
1. Tratar solucin neutra de la muestra con cloruro frrico
SR; se forma precipitado marrn claro.
2. Tratar solucin neutra de la muestra con nitrato de plata
SR; se forma precipitado blanco, fcilmente soluble en
hidrxido de amonio 6 M.
Sulfato
1. Tratar solucin de la muestra con cloruro de bario SR;
se forma precipitado blanco, insoluble en cido clorh-
drico SR y en cido ntrico SR.
2. Tratar solucin de la muestra con acetato de plomo
SR; se forma precipitado blanco, soluble. en acetato
de amonio SR, pero insoluble en cido clorhdrico o
ntrico SR.
3. Tratar solucin de la muestra con cido clorhdrico SR;
no se forma ningn precipitado (distincin del tiosul-
fato).
Sulfito
1. Tratar la muestra con cido clorhdrico 3 M; se des-
prende dixido de azufre, reconocido por su olor pe-
netrante caracterstico y por oscurecer papel de filtro
humedecido con nitrato de mercurio (I) SR.
2. Acidificar solucin de la muestra con cido clorhdrico
SR, calentar con algunas gotas de permanganato de po-
tasio SR y juntar gotas de cloruro de bario SR; se forma
precipitado blanco.
Tartrato
1. Disolver algunos miligramos de la muestra en agua,
acidificada con cido actico SR, aadir una gota de
solucin de sulfato ferroso a 1% (p/v) y una gota de
perxido de hidrgeno a 3% (p/v); se produce color
amarillo fugaz. Juntar hidrxido de sodio 2 M gota a
gota; se produce color azul intenso.
2. Acidificar solucin de la muestra con cido sulfrico
M, juntar algunas gotas de resorcinol 2% (p/v) y aadir,
cuidadosamente, cido sulfrico, para que se formen
dos camadas; calentando en bao mara, por algunos
minutos, en la interfaz aparece un anillo rojo.

Tiocianato
Tratar solucin de la muestra con cloruro frrico SR; se
produce color rojo, que no desaparece por la adicin de
cidos minerales moderadamente concentrados y puede ser
extrado con ter etlico, pasando la coloracin roja para la
camada etrea.
Tiosulfato
1. Tratar solucin de la muestra con cido clorhdrico; se
forma precipitado blanco, que pasa luego a amarillo, y
se desprende dixido de azufre, reconocido por el olor.
2. Tratar solucin actica de la muestra con cloruro frri-
co SR; se produce color violeta oscuro que desaparece
rpidamente.
Xantina
Tratar la muestra con dos gotas de solucin concentrada
de perxido de hidrgeno concentrado y cinco gotas de
cido clorhdrico 2 M, y calentar hasta sequedad en bao
mara; se obtiene residuo rojo amarillento que, tratado con
hidrxido de amonio 2 M, cambia para rojo violeta.
Zinc, ion
1. Tratar solucin de la muestra con ferrocianuro de pota-
sio SR; se forma precipitado blanco, insoluble en cido
clorhdrico 3 M
2. Tratar solucin neutra o alcalina de la muestra con sul-
furo de amonio SR; se forma precipitado blanco.
3. Tratar solucin de la muestra con solucin de hidrxido
de sodio 2 M, gota a gota; se forma precipitado blanco,
soluble en exceso de hidrxido de sodio SR.
5.3.1.2 IDENTIFICACIN DE
ESTEROIDES POR CROMATOGRAFA
EN CAMADA DELGADA
PROCEDIMIENTO
Preparar cromatoplaca utilizando Kieselguhr G como so-
porte. Introducir la cromatoplaca en la cuba conteniendo
el solvente de impregnacin y dejar desarrollar hasta que
el solvente alcance el topo de la cromatoplaca. Retirar la
cromatoplaca de la cuba y dejar evaporar el solvente. Pre-
parar solucin de la muestra a 0,25% (p/v) y solucin del
estndar a 0,25% (p/v) utilizando, como solvente, mezcla
de 9 volmenes de cloroformo y 1 volumen de metanol. A
no ser que la monografa establezca diferentemente, apli-
car sobre la cromatoplaca 2 L de la solucin de muestra,
2 L de la solucin estndar y 2 L de la mezcla 1:1 de
las soluciones de la muestra y del estndar. Desarrollar el
cromatograma con el eluyente especificado en la monogra-
fa, dejndolo subir en el mismo sentido que el solvente
de impregnacin. Retirar la cromatoplaca de la cuba, dejar
evaporar el eluyente, calentar la cromatoplaca a 120 C por
15 minutos y nebulizar con solucin de cido sulfrico a
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 167
10% (v/v) en etanol a 96%. Calentar a 120 C por 10 mi-
nutos ms, dejar enfriar y examinar a la luz normal y a la
luz ultravioleta (366 nm). La mancha principal del croma-
tograma obtenido con la solucin de la muestra correspon-
der a la mancha principal obtenida en el cromatograma de
la solucin del estndar. La mancha principal resultante de
la aplicacin de la mezcla de las soluciones de muestra y de
estndar aparecer como nica y compacta.
Solventes de impregnacin
Mezcla de 1 volumen de formamida y 9 volmenes de
acetona
Mezcla de 1 volumen de 1 ,2-propanodiol y 9 volme-
nes de acetona
Mezcla de 1 volumen de parafina lquida y 9 volmenes
de ter de petrleo de banda de ebullicin 40 -60 C.
Eluyentes A Cloroformo
B Mezcla de 3 volmenes de tolueno y 1 volumen de
cloroformo
C Tolueno
D Mezcla de 4 volmenes de ciclohexano y 1 volumen
de tolueno
5
Y Mezcla de volmenes iguales de ciclohexano y ter de
petrleo de banda de ebullicin 40 60 C F Mezcla
de 2 volmenes de cido actico glacial y 3 volmenes
de agua
G Mezcla de 8 volmenes de hexano y 2 volmenes de
dioxano.
5.3.1.3 INVESTIGACIONES DE
ESTEROIDES EXTRAOS POR
CROMATOGRAFA EN CAMADA
DELGADA
PROCEDIMIENTO I
Preparar cromatoplacas conforme descrito en Cromatogra-
fa en camada delgada (5.2.17.1), utilizando gel de slice
G como soporte. Preparar 3 soluciones utilizando, como
solvente, mezcla de 9 volmenes de cloroformo y 1 volu-
men de metanol en las siguientes concentraciones: 1,5%
(p/v) de la sustancia en examen Solucin 1; 1,5% (p/v) de
la sustancia qumica de referencia (SQR) correspondiente
Solucin 2 y 0,03% (p/v) de cada una de las siguientes
SQR: prednisolona y acetato de cortisona Solucin 3.
Aplicar sobre la cromatoplaca 1 L de cada una de estas
soluciones, separadamente, y desarrollar el cromatograma
utilizando, como eluyente, mezcla de 77 volmenes de di-
clorometano, 15 volmenes de ter, 8 volmenes de me-
tanol y 1,2 volmenes de agua. Secar el cromatograma al
aire, calentar a 105 C por 10 minutos y nebulizar con solu-
cin de azul de tetrazolio alcalino SR. La mancha principal
del cromatograma obtenida con la Solucin 1 correspon-
de, en posicin, color e intensidad, a la mancha principal
del cromatograma obtenido con la Solucin 2. Cualquier
mancha secundaria obtenida con la Solucin 1 no es ms
intensa que la mancha correspondiente en el cromatograma
obtenida con la Solucin 3.
 168 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
PROCEDIMIENTO II
Proceder a la cromatografa utilizando gel de slice G
como soporte y, como eluyente, mezcla de 95 volmenes
de 1,2-dicloroetano, 5 volmenes de metanol y 0,2 vol-
menes de agua.
Aplicar sobre la cromatoplaca, separadamente, 1 L de
cada una de las 3 soluciones en mezcla de 9 volmenes
de cloroformo y 1 volumen de metanol, como en el Pro-
cedimiento I, con excepcin de la Solucin 3, en que se
adiciona acetato de desoxicortona SQR.
5.3.1.4 INVESTIGACIN DE SUSTANCIAS
RELACIONADAS A SULFONAMIDAS
POR CROMATOGRAFA EN CAMADA
DELGADA
PROCEDIMIENTO I
Proceder a la cromatografa en camada delgada (5.2.17.1)
utilizando gel de slice H como soporte. Preparar solucin
5
de la sustancia en examen a 1,0% (p/v) utilizando, como sol-
vente, mezcla de 9 volmenes de etanol a 96% y 1 volumen
de hidrxido de amonio 13,5 M Solucin 1. Preparar solu-
cin de sulfanilamida SQR a 0,005% (p/v), usando el mismo
solvente Solucin 2. Aplicar separadamente sobre la cro-
matoplaca 10 L de la Solucin 1 y de la Solucin 2. Desa-
rrollar el cromatograma usando mezcla de 15 volmenes de
1-butanol y 3 volmenes de hidrxido de amonio M como
eluyente. Retirar la cromatoplaca de la cuba, calentar a 105
C por 10 minutos y nebulizar con solucin a 0,1% (p/v) de
4-dimetilaminobenzaldehdo en etanol a 96%, conteniendo
1% de cido clorhdrico (v/v): cualquier mancha secundaria
obtenida en el cromatograma con la Solucin 1, diferente de
la mancha principal, no es ms intensa que aquella obtenida
en el cromatograma con la Solucin 2.
PROCEDIMIENTO II
Proceder a la cromatografa en camada delgada (5.2.17.1)
utilizando gel de slice H como soporte y mezcla de 20 vo-
lmenes de cloroformo, 2 volmenes de metanol y 1 volu-
men de dimetilformamida como fase mvil. Aplicar sobre
la cromatoplaca, separadamente, 10 L de cada una de las
siguientes soluciones: 0,25% (p/v) de la sustancia en exa-
men en mezcla de 9 volmenes de etanol y 1 volumen de
hidrxido de amonio 13,5 M Solucin 1; 0,00125% (p/v)
de sulfanilamida SQR en el mismo solvente de la Solucin
1 Solucin 2. Desarrollar el cromatograma, dejar secar
al aire y revelar conforme prescrito en el Procedimiento
I: cualquier mancha secundaria obtenida con la Solucin
1, diferente de la mancha principal, no es ms intensa que
aquella obtenida en el cromatograma con la Solucin 2.
5.3.1.5 IDENTIFICACIN DE
FENOTIAZINAS POR CROMATOGRAFA
EN CAMADA DELGADA
Proceder conforme descrito en Cromatografa en camada
delgada (5.2.17.1). Usar Kieselguhr G como soporte. Im-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
pregnar la cromatoplaca seca, colocndola en cuba conte-
niendo mezcla de 10 volmenes de 2-fenoxietanol, 5 vol-
menes de macrogol 300 y 85 volmenes de acetona. Dejar
el eluyente subir por lo menos 17 cm. Retirar la cromato-
placa de la cuba y utilizar inmediatamente.
Aplicar sobre la cromatoplaca, separadamente, 2 L de
cada una de las soluciones siguientes: 0,2% (p/v) de la sus-
tancia en examen en cloroformo Solucin 1 y 0,2% (p/v)
de la sustancia qumica de referencia (SQR) correspon-
diente Solucin 2, operando en atmsfera de nitrgeno
y luz reducida. Desarrollar el cromatograma usando, como
eluyente, mezcla de 2 volmenes de dietilamina y 100 vo-
lmenes de ter de petrleo de banda de ebullicin 40 60
C saturada con 2-fenoxietanol. Retirar la cromatoplaca de
la cuba, dejar secar al aire y examinar bajo luz ultravioleta
con intensidad mxima en 366 nm: se observa fluorescen-
cia, producida en pocos minutos. En seguida, nebulizar la
cromatoplaca con solucin de cido sulfrico a 10% (v/v)
en etanol y observar la coloracin producida: la mancha
principal en el cromatograma, obtenida con la Solucin 1,
corresponde, en posicin, color e intensidad de fluorescen-
cia a aquella obtenida en el cromatograma con la Solucin
2 y tiene la misma estabilidad por el perodo de, por lo
menos, 20 minutos despus de la nebulizacin.
5.3.1.6 INVESTIGACIN DE IMPUREZAS
RELACIONADAS A FENOTIAZINAS
POR CROMATOGRAFA EN CAMADA
DELGADA
PROCEDIMIENTO
Preparar cromatoplacas utilizando gel de slice GF254 como
soporte, operando en atmsfera de nitrgeno y al abrigo de
la luz. Preparar solucin conteniendo 2,0% (p/v) de la sus-
tancia en examen en mezcla de 95 volmenes de metanol
y 5 volmenes de dietilamina Solucin 1. Preparar solu-
cin a 0,01% (p/v) de la sustancia en examen, utilizando el
mismo solvente Solucin 2. Aplicar sobre la cromatopla-
ca, separadamente, 10 L de cada solucin recin prepara-
da. Usar fase mvil especificada en la monografa. Dejar el
solvente subir 12 cm arriba del punto de aplicacin. Retirar
la cromatoplaca de la cuba, dejar secar al aire y exami-
nar bajo luz ultravioleta (254 nm). Despreciar cualquier
mancha sobre a lnea base. Cualquier mancha secundaria
obtenida en el cromatograma con la Solucin 1, excepto la
mancha principal, no es ms intensa que la mancha obteni-
da con la Solucin 2, excepto si la monografa lo establece
diferentemente.
Fases mviles
A Mezcla de 80 volmenes de ciclohexano, 10 volmenes
de acetona y 10 volmenes de dietilamina
B Mezcla de 85 volmenes de hexano, 10 volmenes de
acetona y 5 volmenes de dietilamina
C Mezcla de 15 volmenes de 1-butanol y 3 volmenes de
hidrxido de amonio M
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 169

5.3.2 ENSAYOS LMITE PARA m = 354,6/ l

IMPUREZAS INORGNICAS siendo l el lmite de cloruro en ppm en la materia prima.

5.3.2.1 ENSAYO LMITE PARA
CLORUROS
Preparacin muestra: transferir la cantidad de muestra es-
pecificada en la monografa, o indicada en la Tabla 1, o
calculada, para un tubo de Nessler (capacidad de 50 ml
y 22 mm de dimetro interno), adicionando un volumen
de 30 a 40 ml de agua destilada. Caso sea utilizada una
solucin de la muestra, transferir el volumen de la solucin
especificado en la monografa, o calculado, para el tubo de
Nessler y completar el volumen para 30 a 40 ml con agua
destilada. Neutralizar, si necesario, con cido ntrico SR
Se debe emplear una cantidad de muestra que posibilite el
uso de volumen mayor del que 0,2 ml de cido clorhdrico
estndar.
Preparacin estndar: transferir el volumen de cido clor-
hdrico estndar (HCl 0,01 M SV), indicado en la monogra-
fa, o en la Tabla 1, o calculado, para un tubo de Nessler y
aadir un volumen de 30 a 40 ml de agua destilada.
Procedimiento: a los tubos de Nessler conteniendo la pre-
paracin estndar y la preparacin muestra, aadir 1 ml de
cido ntrico SR. Si, despus de la acidificacin, la prepara-
cin no est perfectamente lmpida, filtrar a travs de papel
de filtro exento de cloruro, transferir el filtrado para el tubo
de Nessler y aadir 1 ml de nitrato de plata SR. Completar
el volumen para 50 ml con agua destilada y homogeneizar.
Dejar en reposo, al abrigo de la luz, durante 5 minutos. La
turbidez de la preparacin muestra no debe ser superior a
la de la estndar.

Fijndose el volumen de solucin estndar en 1 ml puede

calcularse m (masa en gramo de la muestra) por la frmula:

5
Figura 1 - Lmites de impureza cloruro y cantidades correspondientes de la materia prima para realizarse el ensayo
considerando la utilizacin constante de 1,0 ml de la solucin estndar que contiene 3,546 x 10-4 g de cloruro.

Cantidad de muestra (g) Lmite de cloruro (ppm) Cantidad de muestra (g) Lmite de cloruro (ppm)
0,10 3546 (= 0,355%) 3,8 93
0,15 2364 (= 0,236%) 4,0 88
0,20 1773 (= 0,180%) 4,2 84
0,25 1418 (= 0,142%) 4,4 80
0,30 1182 (= 0,120%) 4,6 77
0,35 1013 (= 0,100%) 4,8 74
0,40 886 5,0 71
0,45 788 5,2 68
0,50 709 5,4 65
0,55 645 5,6 63
0,60 591 5,8 61
0,65 545 6,0 59
0,70 506 6,2 57
0,75 473 6,4 55
0,80 443 6,6 53
0,85 417 6,8 52
0,90 394 7,0 50
0,95 373 7,2 49
1,00 354 7,4 48
1,2 295 7,6 46
1,4 253 7,8 45
1,6 221 8,0 44
1,8 197 8,2 43
2,0 177 8,4 42
2,2 161 8,6 41
2,4 148 8,8 40
2,6 136 9,0 39
2,8 126 9,2 38
3,0 118 9,4 37
3,2 111 9,6 37
3,4 104 9,8 36
3,6 98 10,0 35

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 170 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Siendo fija la cantidad de cloruro (= 3,546 x 10-4 g) en la
preparacin estndar, si el lmite de cloruro en determinada
sustancia fuese, por ejemplo, 354 ppm, se deber utilizar 1
g de la sustancia para obtenerse hasta la misma turbidez del
estndar; si el lmite fuese de 71 ppm de cloruro, debern
ser utilizados 5 g de muestra y as sucesivamente.
Alternativamente, proceder conforme descrito en Croma-
tografa inica (5.2.17.4.1), utilizando cromatgrafo equi-
pado con columna de cambio aninica y detector por con-
ductividad con supresin qumica.
est perfectamente lmpida, filtrar a travs de papel de filtro
exento de sulfato. Transferir lo filtrado para tubo de Ness-
ler. Se debe emplear una cantidad de muestra que posibilite
el uso de volumen mayor del que 0,2 ml de solucin de
cido sulfrico estndar. Fijndose el volumen de solucin
estndar en 2,5 ml puede calcularse m (masa en gramo de
la muestra) por la frmula:
m = 1200,8/ l
siendo l el lmite de sulfato en ppm en la materia prima.

5.3.2.2. ENSAYO LMITE PARA
SULFATOS
Preparacin muestra: transferir la cantidad de la muestra
especificada en la monografa, o indicada en la Tabla 2, o
calculada, para un tubo de Nessler (capacidad de 50 ml y
22 mm de dimetro interno), adicionando 30 a 40 ml de
agua destilada. Caso sea utilizada una solucin de la mues-
tra, transferir el volumen de la solucin especificado en la
monografa, o calculado, para el tubo de Nessler y com-
pletar el volumen para 30 a 40 ml con agua destilada. Si
Preparacin estndar: transferir el volumen de cido sul-
frico estndar (H2SO4 0,005 M SV) indicado en la mono-
grafa, o indicado en la Tabla 2, o calculado, para un tubo
de Nessler y aadir un volumen de 30 a 40 ml de agua
destilada.
Procedimiento: a los tubos de Nessler conteniendo la pre-
paracin estndar y la preparacin muestra, aadir 1 ml
de cido clorhdrico 3 M y 3 ml de cloruro de bario SR.
Completar el volumen para 50 ml con agua destilada. Ho-
mogeneizar. Dejar en reposo por cerca de 10 minutos. La

5
necesario, neutralizar con cido clorhdrico SR. Se puede, turbidez de la preparacin muestra no debe ser superior a
eventualmente, utilizar cido actico. Si la preparacin no la de la estndar.

Tabla 2 - Lmites de impureza sulfato y cantidades correspondientes de la materia prima para realizar el ensayo
considerando la utilizacin constante de 2,5 ml de la solucin estndar que contiene 1,2008 x 10-3 g de sulfato.

Cantidad de muestra (g) Lmite de sulfato (ppm) Cantidad de muestra (g) Lmite de sulfato (ppm)
0,50 2401 (= 0,240%) 4,6 261
0,55 2183 (= 0,220%) 4,8 250
0,60 2001 (= 0,200%) 5,0 240
0,65 1847 (= 0,185%) 5,2 231
0,70 1715 (= 0,171%) 5,4 222
0,75 1601 (= 0,160%) 5,6 214
0,80 1501 (= 0,150%) 5,8 207
0,85 1412 (= 0,141%) 6,0 200
0,90 1334 (= 0,133%) 6,2 194
0,95 1264 (= 0,126%) 6,4 187
1,00 1200 (= 0,120%) 6,6 182
1,2 1001 (= 0,100%) 6,8 177
1,4 858 7,0 171
1,6 750 7,2 166
1,8 667 7,4 162
2,0 600 7,6 158
2,2 546 7,8 154
2,4 500 8,0 151
2,6 462 8,2 146
2,8 429 8,4 143
3,0 400 8,6 139
3,2 375 8,8 136
3,4 353 9,0 133
3,6 333 9,2 130
3,8 316 9,4 127
4,0 300 9,6 125
4,2 286 9,8 122
4,4 273 10,0 120

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Siendo fija la cantidad de sulfato (= 1,2008 x 10-3 g), si el
lmite de sulfato en determinada sustancia fuese, por ejem-
plo, 500 ppm, debern ser utilizados 2,4 g de muestra para
obtenerse hasta la misma turbidez del estndar; si el lmite
fuese de 151 ppm de sulfato, debern ser utilizados 8 g de
muestra y as sucesivamente.
Alternativamente, proceder conforme descrito en Croma-
tografa inica (5.2.17.4.1), utilizando cromatgrafo equi-
pado con columna de cambio aninica y detector por con-
ductividad con supresin qumica.
5.3.2.3 ENSAYO LMITE PARA METALES
PESADOS
La determinacin de metales pesados puede ser efectuada
por
dos mtodos: ensayo lmite por formacin de partculas
slidas de sulfuros o determinacin por espectrometra
atmica.
El ensayo lmite consiste en la formacin de partculas s-
lidas de los sulfuros de metales pesados, en suspensin, y
posterior comparacin visual de la intensidad del color en
las preparaciones muestra y estndar en tubo de Nessler. El
ensayo es semi cuantitativo y posibilita inferir si a muestra
pasa o no en la prueba, representando la suma de la con-
centracin de los elementos contaminantes en la muestra.
El mtodo por espectrometra atmica posibilita cuan-
tificar cada elemento contaminante en la muestra y lmi-
tes diferenciados son establecidos para cada elemento de
acuerdo con su toxicidad y el tipo de forma farmacutica.
Elementos como As, Cd, Pb y Hg, debido a la elevada to-
xicidad presentan lmites ms bajos que los dems. Debido
a la mayor biodisponibilidad de elementos eventualmente
presentes en sustancias utilizadas en la fabricacin de pro-
ductos parenterales, los lmites requeridos son inferiores
aquellos relacionados para utilizacin por va oral.
MTODO DEL ENSAYO LMITE
Reactivos especiales
Solucin stock de nitrato de plomo: disolver, exactamente,
159,8 mg de nitrato de plomo en 100 ml de agua adicio-
nada de 1 ml de cido ntrico. Diluir con agua para 1000
ml y homogeneizar. Preparar y almacenar esa solucin en
recipientes de vidrio exentos de sales solubles de plomo.
Solucin estndar de plomo (10 ppm Pb): en el da del uso,
diluir 10 ml de la solucin stock de nitrato de plomo para
100 ml con agua. Cada mililitro de esa solucin contiene el
equivalente a 10 g de plomo (10 ppm Pb).
Tampn acetato pH 3,5: disolver 25,0 g de acetato de amo-
nio en 25 ml de agua y aadir 38 ml de cido clorhdrico
6 M. si necesario, ajustar el pH en 3,5 con hidrxido de
amonio 6 M o cido clorhdrico 6 M. Diluir para 100 ml
con agua y homogeneizar.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 171
Preparo del reactivo de tioacetamida: disolver 4 g de tioa-
cetamida en agua y completar el volumen a 100 ml. Tomar
0,2 ml y aadir a 1 ml de la mezcla de hidrxido de sodio
M, 5 ml de agua y 20 ml de glicerina. Calentar en bao
mara por 20 s, enfriar y utilizar inmediatamente.
MTODO I
Preparacin muestra: transferir para tubo adecuado solu-
cin de la muestra preparada conforme especificado en la
monografa y diluir para 25 ml con agua, o disolver y diluir
con agua para 25 ml a cantidad de muestra, en gramos, es-
pecificada en la monografa o calculada segn a ecuacin:
2 / (1000l)
en que
l = lmite de metales pesados en la muestra en porcentaje
(p/p).
Ajustar el pH entre 3,0 y 4,0 con cido actico M o hi-
drxido de amonio 6 M utilizando papel indicador de ban-
da estrecha como indicador externo. Diluir con agua para
5
aproximadamente 40 ml y homogeneizar.
Preparacin estndar: transferir para tubo adecuado 2 ml
de solucin estndar de plomo (10 ppm Pb) y diluir para 25
ml con agua. Ajustar el pH entre 3,0 y 4,0 con cido actico
M o hidrxido de amonio 6 M utilizando papel indicador
de banda estrecha como indicador externo. Diluir con agua
para aproximadamente 40 ml y homogeneizar.
Preparacin control: transferir para un tercer tubo volu-
men de solucin de la muestra preparada conforme descri-
to en la monografa o en preparacin muestra y aadir 2 ml
de solucin estndar de plomo (10 ppm Pb). Ajustar el pH
entre 3,0 y 4,0 con cido actico M o hidrxido de amonio
6 M utilizando papel indicador de banda estrecha como in-
dicador externo. Diluir con agua para aproximadamente 40
ml y homogeneizar.
Procedimiento: cada una de las preparaciones aadir 2 ml
de tampn acetato pH 3,5 y 1,2 ml de tioacetamida. Diluir
con agua para 50 ml, homogeneizar y dejar en reposo por
2 minutos. Despus de 2 minutos, se desarrollar tonalidad
que vara del amarillo al negro. Observar las preparaciones
de arriba para abajo, segn el eje vertical del tubo, sobre
fondo blanco. Cualquier coloracin desarrollada en la pre-
paracin muestra no es ms intensa que en la estndar. La
prueba solamente es vlida si la intensidad de la coloracin
desarrollada en la preparacin control fuese igual o supe-
rior a aquella de la estndar.
MTODO II
Preparacin muestra: transferir para tubo adecuado so-
lucin de la muestra preparada conforme especificado en
la monografa y diluir para 25 ml con solvente orgnico
(dioxano o acetona, conteniendo, en el mnimo, 15% v/v
de agua), o disolver y diluir con el mismo solvente para 25
ml la cantidad de muestra, en gramos, especificada en la
monografa o calculada segn a ecuacin:
 172 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
2 / (1000l)
en que
l = lmite de metales pesados en la muestra en porcentaje
(p/p).
Ajustar el pH entre 3,0 y 4,0 con cido actico M o hi-
drxido de amonio 6 M utilizando papel indicador de ban-
da estrecha como indicador externo. Diluir con agua para
aproximadamente 40 ml y homogeneizar.
Preparacin estndar: transferir para tubo adecuado 2 ml
de solucin estndar de plomo (10 ppm Pb) y diluir para 25
ml con el mismo solvente empleado para la disolucin de
la muestra. Ajustar el pH entre 3,0 y 4,0 con cido actico
M o hidrxido de amonio 6 M utilizando papel indicador
de banda estrecha como indicador externo. Diluir con el
mismo solvente empleado para la disolucin de la muestra
para aproximadamente 40 ml y homogeneizar.
Preparacin control: transferir para un tercer tubo volu-
men de solucin de la muestra preparada conforme descri-
to en la monografa o en preparacin muestra y aadir 2 ml
5
de solucin estndar de plomo (10 ppm Pb). Ajustar el pH
entre 3,0 y 4,0 con cido actico M o hidrxido de amonio
6 M utilizando papel indicador de banda estrecha como in-
dicador externo. Diluir con el mismo solvente empleado
para la disolucin de la muestra para aproximadamente 40
ml y homogeneizar.
Procedimiento: cada una de las preparaciones aadir 2 ml
de tampn acetato pH 3,5 y 1,2 ml de tioacetamida. Diluir
con agua para 50 ml, homogeneizar y dejar en reposo por 2
minutos. Despus de 2 minutos, se desarrollar coloracin
que vara del amarillo al negro. Observar las preparaciones
de arriba para abajo, segn el eje vertical del tubo, sobre
fondo blanco. Cualquier coloracin desarrollada en la pre-
paracin muestra no es ms intensa del que en la estndar.
La prueba solamente es vlida si la intensidad de la colo-
racin desarrollada en la preparacin control fuese igual o
superior a aquella en la estndar.
MTODO III
Preparado de la muestra: utilizar la cantidad de muestra,
en gramos, especificada en la monografa o calculada se-
gn la ecuacin:
2 / (1000l)
en que
l = lmite de metales pesados en la muestra en porcentaje
(p/p).
Transferir la muestra para crisol adecuado, aadir cido
sulfrico suficiente para humedecer la sustancia e incine-
rar, cuidadosamente, bajo temperatura baja. Aadir a la
masa carbonizada 2 ml de cido ntrico y 5 gotas de cido
sulfrico. Calentar, con cuidado, hasta que no se despren-
dan ms vapores blancos. Incinerar en mufla a 500 600
C hasta completa combustin del carbono.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Enfriar en temperatura ambiente, aadir 4 ml de cido clor-
hdrico 6 M, cubrir, digerir en bao mara por 15 minutos,
descubrir y evaporar en bao mara, lentamente, hasta se-
quedad. Humedecer el residuo con 1 gota de cido clorh-
drico, aadir 10 ml de agua caliente y digerir en bao mara
por 2 minutos. Alcalinizar al papel tornasol con hidrxido
de amonio 6 M adicionado gota a gota. Diluir con agua
para 25 ml y ajustar el pH entre 3,0 y 4,0 con cido actico
M, utilizando papel indicador de banda estrecha como in-
dicador externo. Filtrar si necesario, lavar el crisol y el fil-
tro con 10 ml de agua y combinar el filtrado y las aguas de
lavado en tubo adecuado para comparacin de color. Diluir
con agua para aproximadamente 40 ml y homogeneizar.
Preparacin estndar: transferir para tubo adecuado 2 ml
de solucin estndar de plomo (10 ppm Pb) y diluir para 25
ml con el mismo solvente empleado para la disolucin de
la muestra. Ajustar el pH entre 3,0 y 4,0 con cido actico
M o hidrxido de amonio 6 M utilizando papel indicador
de banda estrecha como indicador externo. Diluir con el
mismo solvente empleado para la disolucin de la muestra
para aproximadamente 40 ml y homogeneizar.
Preparacin control: transferir para un tercer tubo volu-
men de solucin de la muestra preparada conforme descri-
to en la monografa o en preparacin muestra y aadir 2 ml
de solucin estndar de plomo (10 ppm Pb). Ajustar el pH
entre 3,0 y 4,0 con cido actico M o hidrxido de amonio
6 M utilizando papel indicador de banda estrecha como in-
dicador externo. Diluir con el mismo solvente empleado
para la disolucin de la muestra para aproximadamente 40
ml y homogeneizar.
Procedimiento: cada una de las preparaciones aadir 2 ml
de tampn acetato pH 3,5 y 1,2 ml de tioacetamida. Diluir
con agua para 50 ml, homogeneizar y dejar en reposo por 2
minutos. Despus de 2 minutos, se desarrollar coloracin
que vara del amarillo al negro. Observar las preparaciones
de arriba para abajo, segn el eje vertical del tubo, sobre
fondo blanco. Cualquier coloracin desarrollada en la pre-
paracin muestra no es ms intensa del que aquella en la
estndar. La prueba solamente es vlida si la intensidad de
la coloracin desarrollada en la preparacin control fuese
igual o superior a aquella en la estndar.
MTODO IV
Preparado de la muestra: Pesar, exactamente, cantidad de
muestra recomendada en la monografa o calculada segn
la ecuacin:
2 / (1000l)
en que
l = lmite de metales pesados en la muestra en porcentaje
(p/p).
Transferir para tubo de digestin de vidrio borosilicato de
100 ml y aadir cerca de 10 ml de cido ntrico. Proceder
a la digestin en chapa de calentamiento o bloque digestor
en temperatura de 120 C, durante 3 horas. Se recomienda
calentar el sistema lentamente, para evitar proyeccin de
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 173

la muestra. Caso haya evaporacin del cido, aadir otra
alcuota de 5 ml. Caso una preparacin lmpida no sea ob-
tenida, aadir, despus de enfriamiento, 2 ml de perxido
de hidrgeno a 30% (p/p) y calentar a 140 C por una hora
ms. Enfriar y diluir, cautelosamente, con pequeo volu-
men de agua. Transferir, con lavado, para tubo de Nessler
de 50 ml, sin asar los 25 ml.
Preparacin estndar: transferir para tubo adecuado 2 ml
de solucin estndar de plomo (10 ppm Pb) y diluir para 25
ml con agua. Ajustar el pH entre 3,0 y 4,0 con cido actico
M o hidrxido de amonio 6 M utilizando papel indicador
de banda estrecha como indicador externo. Diluir con agua
para aproximadamente 40 ml y homogeneizar.
Preparacin control: transferir para un tercer tubo volu-
men de solucin de la muestra preparada conforme descri-
to en la monografa o en preparacin muestra y aadir 2 ml
de solucin estndar de plomo (10 ppm Pb). Ajustar el pH
entre 3,0 y 4,0 con cido actico M o hidrxido de amonio
6 M utilizando papel indicador de banda estrecha como in-
dicador externo. Diluir con agua para aproximadamente 40
ml y homogeneizar.
Preparacin estndar: transferir para tubo adecuado 2 ml
de solucin estndar de plomo (10 ppm Pb) y diluir para 25
ml con agua. Ajustar el pH entre 3,0 y 4,0 con cido actico
M o hidrxido de amonio 6 M utilizando papel indicador
de banda estrecha como indicador externo. Diluir con agua
para aproximadamente 40 ml y homogeneizar.
Preparacin control: transferir para un tercer tubo volu-
men de solucin de la muestra preparada conforme descri-
to en la monografa o en preparacin muestra y aadir 2 ml
de solucin estndar de plomo (10 ppm Pb). Ajustar el pH
entre 3,0 y 4,0 con cido actico M o hidrxido de amonio
6 M utilizando papel indicador de banda estrecha como in-
dicador externo. Diluir con agua para aproximadamente 40
ml y homogeneizar.
Procedimiento: cada una de las preparaciones aadir 2 ml
de tampn acetato pH 3,5 y 1,2 ml de tioacetamida. Diluir
con agua para 50 ml, homogeneizar y dejar en reposo por 2
minutos. Despus de 2 minutos, se desarrollar coloracin
que vara del amarillo al negro. Observar las preparacio-
nes de arriba para abajo, segn el eje vertical del tubo, so-
bre fondo blanco. Cualquier coloracin desarrollada en la

Procedimiento: cada una de las preparaciones aadir 2 ml
de tampn acetato pH 3,5 y 1,2 ml de tioacetamida. Diluir
con agua para 50 ml, homogeneizar y dejar en reposo por 2
minutos. Despus de 2 minutos, se desarrollar coloracin
que vara del amarillo al negro. Observar las preparaciones
de arriba para abajo, segn el eje vertical del tubo, sobre
fondo blanco. Cualquier coloracin desarrollada en la pre-
paracin muestra no es ms intensa del que en la estndar.
La prueba solamente es vlida si la intensidad de la colo-
racin desarrollada en la preparacin control fuese igual o
superior a aquella en la estndar.
MTODO V
5
preparacin muestra no es ms intensa del que aquella en
la estndar. La prueba solamente es vlida si la intensidad
de la coloracin desarrollada en la preparacin control es
igual o superior a aquella en la estndar.
MTODO DE ESPECTROMETRA ATMICA
Utilizar tcnicas de espectrometra atmica para determi-
nacin de As, Cd, Cr, Cu, Hg, Ir, Mn, Mo, Ni, Os, Pb, Pd,
Pt, Rh, Ru y V, conforme Espectrometra atmica (5.2.13).
No obstante, diferentes procedimientos de preparado de la
muestra pueden ser aplicados, como demostrado en la Fi-
gura 1.

Preparado de la muestra: en los casos en que los mtodos

anteriores de preparado de muestra no fuesen eficientes,
proceder conforme descrito en Descomposicin por va
hmeda en sistema cerrado o Mtodo de combustin ini-
ciada por micro ondas en sistema presurizado descritos en
Mtodo de espectrometra atmica.

La sustancia es No La sustancia es soluble No

Descomposicin de la muestra
soluble en agua? en otros solventes?

Sim

Sim Los solventes son compatibles No

con la/s tcnica/s de determinacin?

Sim

Efectuar la determinacin por espectometra atmica

Figura 1 - Procedimientos de preparado de muestra para el mtodo de espectrometra atmica.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 174 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

En el caso de sustancias solubles en agua, no hay necesidad
de la descomposicin previa de la muestra y esa puede ser
analizada directamente despus de disolucin. Caso no sea
soluble en agua y presentar solubilidad en otro solvente,
la sustancia puede ser analizada directamente despus de
disolucin si no hubiere incompatibilidad entre el solvente
y la tcnica de espectrometra atmica utilizada. Cuando
ninguna de las condiciones anteriores sea atendida, se re-
comienda la descomposicin previa de la muestra. En esos
casos, dos procedimientos son recomendados:
Descomposicin por va hmeda en sistema cerrado
Pesar, exactamente, cantidad de muestra entre 0,1 y 0,5 g
de muestra y aadir cido ntrico conforme recomendacin
del fabricante y proceder a digestin en sistema cerrado
con calentamiento convencional o con micro ondas en
temperatura de 180 C o superior. En los sistemas que em-
plean calentamiento convencional y micro ondas, cuando
no hubiere especificacin en la monografa, se recomienda
la digestin por 240 min y 20 min, respectivamente.
Mtodo de combustin iniciada por micro ondas en
sistema presurizado
Proceder conforme descrito en el tem Mtodos de combus-
tin (5.3.3.3).
En principio, los dos procedimientos de descomposicin
descritos pueden ser utilizados indistintamente. No obs-
tante, se recomienda la utilizacin de la descomposicin
por va hmeda debido a mayor simplicidad y capacidad
de procesamiento de muestras. Otros reactivos, tales como
cido clorhdrico, cido sulfrico, perxido de hidrgeno
y cido fluorhdrico (no puede ser utilizado en frascos de
cuarzo), tambin, pueden ser utilizados en la etapa de di-
gestin, dependiendo de la necesidad.
La descomposicin por combustin iniciada por micro on-
das es recomendada en los casos en que la digestin por va
hmeda no sea eficiente para muestras orgnicas.
Los lmites mximos permitidos para cada elemento estn
descritos en la Tabla 1.

5
Tabla 1 - Lmites permitidos de impurezas de metales y no metales.
Uso oral Uso parenteral
Elemento
Lmite mximo (g g-1) Lmite mximo (g g-1)
Arsnico (As) 1,5 0,15
Cadmio (Cd) 0,5 0,05
Plomo (Pb) 1,0 0,1
Mercurio (Hg) 1,5 0,15
Cromo (Cr) 25 2,5
Cobre (Cu) 250 25
Manganeso (Mn) 250 25
Molibdeno (Mo) 25 2,5
Nquel (Ni) 25 2,5
Paladio (Pd) 10 1,0
Platino (Pt) 10 1,0
Vanadio (V) 25 2,5
Iridio (Ir) La suma de la concentracin no La suma de la concentracin no
Osmio (Os) puede exceder 10 puede exceder 10
Rodio(Rh)
Rutenio (Ru)
5.3.2.4 ENSAYO LMITE PARA HIERRO MTODO I

Solucin estndar de hierro (100 ppm Fe): disolver 0,8634
g de sulfato frrico amoniacal decahidratado en agua des-
tilada en un baln volumtrico de 1000 ml. Aadir 5 ml
de cido sulfrico SR y completar el volumen con agua
destilada.
Solucin estndar de hierro (10 ppm Fe): diluir 10 ml de la
Solucin estndar de hierro (100 ppm Fe) con agua desti-
lada y completar el volumen para 100 ml.
Solucin estndar de hierro (2 ppm Fe): diluir 2 ml de la
Solucin estndar de hierro (100 ppm Fe) con agua desti-
lada y completar el volumen para 100 ml.
Preparacin muestra: disolver cantidad de la muestra es-
pecificada en la monografa, o en la Tabla 1, o calculada,
en solvente adecuado, transferir para tubo de Nessler (ca-
pacidad de 50 ml y 22 mm de dimetro interno). Aadir
agua destilada, o el solvente indicado en la monografa, en
cantidad suficiente para 40 ml. Aadir 2 ml de cido ctrico
a 20% (p/v).
Fijndose el volumen de la Solucin estndar de hierro
(100 ppm Fe) en 1 ml, se puede calcular el valor de m
(masa en gramo de la muestra) por la frmula:
100
m=
l

siendo l el lmite de hierro en ppm en la materia prima.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 175

Preparacin padro: empregar 10 mL de Soluo padro
de ferro (10 ppm de Fe) ou 1 mL da Soluo padro de fer-
ro (100 ppm Fe), conforme Tabela 1, ou volume calculado,
adicionar gua destilada, ou o solvente indicado na mono-
grafia, em quantidade suficiente para 40 mL. Adicionar 2
mL de cido ctrico a 20% (p/v).
Procedimento: concomitantemente, acrescentar aos tubos
contendo as preparaes amostra e padro duas gotas de
cido tiogliclico. Homogeneizar, alcalinizar com hidrxi-
do de amnio, completar o volume para 50 mL com gua
destilada e homogeneizar. Deixar em repouso por 5 minu-
tos. A cor rsea produzida na preparao amostra no deve
ser mais intensa do que na padro.
MTODO II
Preparacin amostra: dissolver quantidade da amostra es-
pecificada na monografia, ou calculada, em solvente ade-
quado, ou utilizar volumen de la solucin de la muestra
conforme especificado en la monografa. Aadir 2 ml de
cido clorhdrico 2 M y 0,5 ml de agua de bromo SR. Des-
pus de 5 minutos, retirar el exceso de bromo por corriente
monografa, o el volumen calculado, conforme descrito en
la preparacin muestra.
Procedimiento: concomitantemente, aadir a los tubos
conteniendo las preparaciones muestra y estndar, 3 ml de
tiocianato de potasio M, completar el volumen para 50 ml,
homogeneizar y dejar en reposo por 5 minutos. La colora-
cin producida en la preparacin muestra no debe ser ms
intensa que en la estndar.
MTODO III
Preparacin muestra: transferir para un tubo de Nessler
(capacidad de 50 ml y 22 mm de dimetro interno) la canti-
dad de muestra especificada en la monografa, o calculada,
o el volumen de la solucin de la muestra indicado en la
monografa. Diluir para 40 ml con agua destilada. Aadir 2
ml de cido clorhdrico M y homogeneizar.
Preparacin estndar: transferir el volumen de la Solucin
estndar de hierro (10 ppm Fe) indicado en la monografa,
o volumen calculado, para un tubo de Nessler y proceder
conforme descrito en la preparacin muestra.

de aire en campana (CUIDADO! REACTIVO TXICO)
y transferir para tubo de Nessler (capacidad de 50 ml y 22
mm de dimetro interno).
Preparacin estndar: someter el volumen de la Solucin
estndar de hierro (2 ppm o 10 ppm de Fe) indicado en la
5
Procedimiento: aadir a los tubos conteniendo las prepa-
raciones muestra y estndar 50 mg de cristales de peroxi-
disulfato de amonio. Aadir 3 ml de tiocianato de amonio
SR, completar el volumen para 50 ml con agua destilada y
homogeneizar. La coloracin producida en la preparacin
muestra no debe ser ms intensa que en la estndar.

Tabla 1 - Lmites de impureza hierro y cantidad correspondientes de la materia prima para realizar el ensayo considerando a
utilizacin constante de 1,0 ml de la solucin estndar de hierro de 100 ppm, que contiene 10-4 g de hierro, en la preparacin estndar.

Cantidad de muestra (g) Lmite de hierro (ppm) Cantidad de muestra (g) Lmite de hierro (ppm)
0,100 1000 0,4 250
0,105 950 0,5 200
0,111 900 0,667 150
0,116 850 1 100
0,125 800 1,111 90
0,133 750 1,250 80
0,143 700 1,429 70
0,154 650 1,667 60
0,167 600 2 50
0,182 550 2,5 40
0,200 500 3,333 30
0,222 450 5 20
0,250 400 10 10
0,285 350 20 5
0,333 300

Siendo fija la cantidad de hierro (= 10-4 g de Fe) en la MTODO IV

Preparacin estndar, si el lmite de hierro en determinada
sustancia fuese, por ejemplo, 1000 ppm, deber ser utiliza-
do 0,1 g de muestra para obtener hasta la misma coloracin
de la preparacin estndar; si el lmite fuese 200 ppm de
hierro, deber ser utilizado 0,5 g de muestra, y as sucesi-
vamente.
Alternativamente, para determinacin de hierro, proceder
al preparado de la solucin muestra conforme descrito en
Ensayo lmite para metales pesados (5.3.2.3) y efectuar la
determinacin por una de las tcnicas de Espectrometra
atmica (5.2.13).

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 176 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
5.3.2.5 ENSAYO LMITE PARA ARSNICO
MTODO ESPECTROFOTOMTRICO
El mtodo est basado en la reaccin entre el arsano (AsH3)
liberado y dietilditiocarbamato de plata que forman com-
plejo rojo; la absorcin de la radiacin puede ser medida en
espectrofotmetro o colormetro.
Dos mtodos pueden ser empleados diferendo, apenas, en
el preparado de la muestra y del estndar. El Mtodo I es,
en general, utilizado para sustancias inorgnicas, mientras
el Mtodo II es empleado para sustancias orgnicas.
El sistema utilizado Figura 1 comprende: (a) gene-
rador de arsano; (b) y (d) juntas; (c) unidad esmerilada;
(e) tubo de absorcin. Otro sistema adaptado que tenga las
caractersticas esenciales del presentado puede, eventual-
mente, ser utilizado
5
Figura 1 - Sistema para determinacin de
arsnico por el mtodo espectrofotomtrico.
Solucin stock estndar de arsnico: secar trixido de ar-
snico por 1 hora a 105 C. Pesar, exactamente, 132 mg y
disolver en 5 ml de solucin de hidrxido de sodio (1:5)
en baln volumtrico de 1000 ml. Neutralizar con cido
sulfrico M y, en seguida, aadir ms 10 ml de cido sul-
frico M. Completar el volumen con agua recin hervida
y enfriada.
Solucin estndar de arsnico: transferir 1 ml (o 0,5; o
0,25; o 0,1 ml) de la solucin stock estndar de arsnico
para un baln volumtrico de 100 ml (o de 50, o de 25, o de
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
10 ml, de acuerdo con la necesidad del laboratorio) Pre-
servar el medio ambiente. Aadir 1 ml de cido sulfrico M
y completar el volumen con agua recin hervida y, poste-
riormente, enfriada. Homogeneizar. Conservar la solucin
en recipiente de vidrio y utilizar en hasta 3 das. Cada ml de
la solucin obtenida contiene 1 g de arsnico.
Mtodo I
Preparacin muestra: transferir para frasco generador de
arsano la cantidad de sustancia indicada en la monografa,
o la cantidad calculada.
Fijndose el volumen de la solucin estndar de arsnico
en 3 ml se puede calcular m (masa en gramo de la muestra)
por la frmula:
m = 3/l
siendo l el lmite de arsnico en ppm en la materia prima.
Disolver con agua destilada completando el volumen para
35 ml. Aadir 20 ml de cido sulfrico M, 2 ml de yoduro
de potasio SR, 0,5 ml de cloruro de estao SR fuertemente
cido y 1 ml de alcohol isoproplico. Homogeneizar. De-
jar en reposo por 30 minutos a temperatura ambiente. En
la unidad (c) del aparato descrito, colocar dos porciones
de algodn embebidas en solucin saturada de acetato de
plomo, dejando entre ellas espacio de 2 mm. El exceso de
la solucin debe ser eliminado exprimiendo las porciones
de algodn y secndolas a presin reducida a temperatura
ambiente. Las juntas (b) y (d) deben ser lubricadas con va-
selina y unidas como en la Figura 1.
Preparacin estndar: transferir para el frasco generador
de arsano 3 ml de la Solucin estndar de arsnico. Diluir
con agua destilada para 35 ml. Proceder de la misma forma
descrita para la preparacin muestra.
Procedimiento: transferir 3 ml de dietilditiocarbamato de
plata SR para la unidad de absorcin (e) de los frascos
generadores conteniendo las preparaciones muestra y es-
tndar. Aadir 3 g de zinc granulado (malla de 1 mm) a
la mezcla en cada frasco generador de arsano. Inmediata-
mente unir las unidades (c) y (e) al frasco generador. Dejar
en bao de agua a (25 3) C por 45 minutos. En interva-
los de 10 minutos agitar, vagarosamente. Despus de ese
perodo, transferir el contenido de la unidad de absorcin
para celda de 1 cm. Comparar el color rojo producido en
las preparaciones muestra y estndar. La coloracin produ-
cida en la preparacin muestra no debe ser ms intensa del
que en la estndar. En el caso que sea necesario, determinar
la absorcin en espectrofotmetro o colormetro en largo
de onda entre 535 y 540 nm empleando dietilditiocarbama-
to de plata SR como blanco para el ajuste del cero.
Mtodo II
Ese mtodo emplea, adicionalmente, perxido de hidr-
geno en la digestin de la muestra. Con ciertas sustancias
puede provocar reaccin violenta. As, es importante pro-
ceder, cuidadosamente, en todas las etapas. Debe tomarse

cuidado, tambin, en la presencia de compuestos haloge-
nados, especialmente, cuando se caliente la muestra con
cido sulfrico y, posteriormente, aadir perxido de hi-
drgeno a 26% (v/v). El calentamiento debe ser ms suave
impidiendo que alcance la temperatura de ebullicin de la
mezcla y carbonizacin para evitar la prdida de arsnico.
Preparacin muestra: transferir para el frasco generador
cantidad de la muestra especificada en la monografa, o
calculada.
Fijndose el volumen de la solucin estndar de arsnico
en 3 ml se puede calcular m (masa en gramo de la muestra)
por la frmula:
m = 3/l
siendo l el lmite de arsnico en ppm en la materia prima.
Aadir 5 ml de cido sulfrico y perlas de vidrio. Si nece-
sario, emplear mayor cantidad del cido para humedecer
completamente la sustancia cuidando para que el volu-
men no rebase 10 ml. Proceder a digestin en campana de
preferencia usando placa de calentamiento con tempera-
tura no superior a 120 C por tiempo necesario al inicio
de la digestin. Una vez iniciada la descomposicin de la
muestra, aadir gota a gota, cuidadosamente, perxido de
hidrgeno concentrado. Esperar que la reaccin se ablan-
de y, entonces, calentar entre adicin de cada gota. Caso
haya exceso de espuma, interrumpir el calentamiento. As
que disminuya la intensidad de la reaccin, calentar, cau-
telosamente, con agitacin del frasco para promover ca-
lentamiento homogneo. Es necesario que se mantengan
las condiciones oxidantes durante toda la digestin. Para
ello, aadir pequeas cantidades de perxido de hidrgeno
concentrado siempre que la mezcla se torne marrn o se
oscurezca. Destruida la materia orgnica, aumentar pau-
latinamente la temperatura de calentamiento permitiendo
que los vapores de trixido de azufre sean desprendidos
y la solucin se torne incolora o levemente beige. Enfriar,
aadir, cuidadosamente, 10 ml de agua destilada, evaporar
hasta el trixido de azufre sea nuevamente desprendido y
enfriar. Caso necesario, repetir la operacin, removiendo
trazos de perxido de hidrgeno. Enfriar y aadir 10 ml de
agua destilada. Lavar el frasco y diluir con agua destilada
completando el volumen para 35 ml. Proceder como en la
preparacin muestra del Mtodo I iniciando por Aadir 20
ml de cido sulfrico M....
Preparacin estndar: transferir para frasco generador de
arsano 3 ml de la Solucin estndar de arsnico y aadir
2 ml de cido sulfrico. Homogeneizar. Aadir el mismo
volumen de perxido de hidrgeno concentrado emplea-
do para la preparacin muestra. Proceder, en seguida, al
calentamiento de la solucin obtenida hasta que se formen
vapores. Enfriar y aadir, cuidadosamente, 10 ml de agua
destilada. Repetir el procedimiento de calentamiento con
ms 10 ml y, despus de, enfriar nuevamente y diluir con
agua destilada para completar 35 ml. Proceder como para
la preparacin muestra.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 177
Procedimiento: proceder conforme descrito en el Mtodo I.
Nota: antimonio es interferente de la reaccin, una vez que
forma estibina (SbH3) dando resultado falsamente positivo
en el desarrollo de color con dietilditiocarbamato de plata
SR. En esos casos, se debe comparar las preparaciones en
largo de onda de 535 y 540 nm, en el cual la interferencia
de la estibina es insignificante.
MTODO DE ESPECTROMETRA DE ABSORCIN
ATMICA CON GENERACIN DE HIDRUROS
Proceder a preparacin muestra conforme descrito en el
tem Descomposicin por va hmeda en sistema cerrado
Ensayo lmite para metales pesados (5.3.2.3) y determinar
por Espectrometra de absorcin atmica con generacin
de hidruros (5.2.13.1.2). Proceder de acuerdo con las es-
pecificaciones del fabricante empleando largo de onda de
193,7 nm y resolucin del monocromador de (0,5 0,1)
nm.
MTODO DE ESPECTROMETRA DE EMISIN PTI-
CA CON PLASMA INDUCTIVAMENTE ACOPLADO
5
Proceder a preparacin de la muestra conforme descrito en
el tem Descomposicin por va hmeda en sistema cerra-
do Ensayo lmite para metales pesados (5.3.2.3) y deter-
minar por Espectrometra de emisin ptica con plasma
inductivamente acoplado (5.2.13.2.2). Proceder de acuer-
do con las especificaciones del fabricante. Se recomienda
la utilizacin del largo de onda de 188,979 a 189,042 nm.
5.3.2.6 ENSAYO LMITE PARA
AMONACO
Solucin estndar de amonaco (2,5 ppm NH3): transferir
1 ml de la solucin de cloruro de amonio 0,00741% (p/v)
para un baln volumtrico de 10 ml. Completar el volumen
con agua destilada.
Solucin estndar de amonaco (1 ppm NH3): diluir 40 ml
de la solucin estndar de amonaco (2,5 ppm de NH3) para
100 ml con agua destilada.
Preparacin muestra: disolver la cantidad indicada de la
sustancia en anlisis en 12 ml de agua destilada, alcalini-
zar, si necesario, con hidrxido de sodio 2 M. Transferir
para baln volumtrico de 15 ml, aadir 0,3 ml de solucin
alcalina de tetrayodomercurato (II) de potasio y completar
el volumen con agua destilada. Homogeneizar y dejar en
reposo por 5 minutos. Transferir para un tubo de Nessler
(capacidad de 50 ml y dimetro interno de 22 mm).
Preparacin estndar: transferir 10 ml de solucin estn-
dar de amonaco (1 ppm de NH3), o el volumen calculado,
para baln volumtrico de 15 ml, aadir 4,0 ml de agua
destilada, 0,3 ml de solucin alcalina de tetrayodomercu-
rato (II) de potasio y completar el volumen. Homogeneizar
y dejar en reposo por 5 minutos. Transferir para un tubo
de Nessler.
 178 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Procedimiento: comparar el color desarrollado en las pre-
paraciones. El color amarillo producido en la preparacin
muestra no debe ser ms intenso que en la estndar.
5.3.2.7 ENSAYO LMITE PARA CALCIO
Solucin estndar alcohlica de calcio (100ppm Ca): pe-
sar, exactamente, 2,5 g de carbonato de calcio y transferir
para baln volumtrico de 1000 ml con 12 ml de cido ac-
tico. Disolver y completar el volumen con agua destilada.
Transferir, inmediatamente antes del uso, 10 ml de esa so-
lucin para baln volumtrico de 100 ml y completar el
volumen con etanol.
Solucin estndar de calcio (10 ppm Ca): pesar, exacta-
mente, 0,624 g de carbonato de calcio y transferir para
baln volumtrico de 250 ml con 3 ml de cido acti-
co. Disolver y completar el volumen con agua destilada.
Transferir, inmediatamente antes del uso, 10 ml de esa so-
lucin para baln volumtrico de 1000 ml y completar el
volumen con agua.
Preparacin muestra: aadir 1 ml de oxalato de amonio
5
SR a un tubo de Nessler (capacidad de 50 ml y 22 mm de
dimetro interno) conteniendo 0,2 ml de la solucin estn-
dar alcohlica de calcio (100 ppm Ca). Aguardar 1 minuto,
aadir mezcla de 1 ml de cido actico diluido y 15 ml de
la solucin de la muestra preparada como descrita en la
monografa.
Preparacin estndar: transferir para un tubo de Nessler
las mismas cantidades de oxalato de amonio SR y de la
solucin estndar alcohlica de calcio (100 ppm Ca) con-
forme preparacin muestra. Aguardar 1 minuto, aadir
mezcla de 10 ml de la solucin estndar de calcio (10 ppm
Ca), 1 ml de cido actico diluido y 5 ml de agua destilada.
Procedimiento: Homogeneizar las preparaciones en los tu-
bos de Nessler. Despus de 15 minutos, la turbidez de la
preparacin muestra no debe ser ms intensa que la de la
estndar.
Alternativamente, proceder al preparado de la muestra
conforme indicado en la monografa y efectuar la determi-
nacin de calcio por Espectrometra de absorcin atmica
con llama (5.2.13.1.1) empleando llama del tipo aire ace-
tileno, largo de onda de 422,7 nm y resolucin del mono-
cromador de (0,7 0,1) nm; o Espectrometra de emisin
ptica con plasma inductivamente acoplado (5.2.13.2.2)
empleando el largo de onda de 393,366 nm.
5.3.2.8 ENSAYO LMITE PARA
MAGNESIO
Preparacin muestra: aadir 0,1 g de tetraborato sdico a
10 ml de la solucin de la muestra preparada conforme lo
especificado en la monografa. Ajustar el pH entre 8,8-9,2
con cido clorhdrico SR o hidrxido de sodio SR.
Preparacin estndar: aadir 0,1 g de tetraborato sdico
a una mezcla de 1 ml de la solucin estndar de magnesio
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
(10 ppm Mg) y 9 ml de agua destilada. Proceder conforme
preparacin muestra.
Procedimiento: transferir la preparacin muestra para un
embudo de separacin y extraer 2 veces, agitando por 1 mi-
nuto cada vez, con 5 ml de una solucin de hidroxiquinolina
a 0,1% (p/v) en cloroformo. Descartar las fases orgnicas
y aadir a la fase acuosa 0,4 ml de butilamina y 0,1 ml de
trietanolamina. Ajustar el pH entre 10,5-11,5 si necesario.
Aadir 4 ml de la solucin de hidroxiquinolina a 0,1% (p/v)
en cloroformo y agitar por 1 minuto. Utilizar la fase inferior
para a comparacin. Proceder de la misma manera con la
preparacin estndar. La coloracin producida en la prepa-
racin muestra no debe ser ms intensa que en la estndar.
Alternativamente, proceder a la determinacin de magne-
sio por Espectrometra de absorcin atmica con llama
(5.2.13.1.1) empleando llama del tipo aire acetileno, largo
de onda de 285,2 nm y resolucin del monocromador de
(1,2 0,1) nm; o Espectrometra de emisin ptica con
plasma inductivamente acoplado (5.2.13.2.2) empleando
largo de onda de 285,213 nm.
5.3.2.9 ENSAYO LMITE PARA
MAGNESIO Y METALES ALCALINOS
TERROSOS
A 200 ml de agua destilada aadir 0,1 g de clorhidrato de
hidroxilamina, 10 ml de tampn cloruro de amonio pH 10,
1 ml de solucin de sulfato de zinc 0,1 M y cerca de 15 mg
de negro de eriocromo T. Calentar a, aproximadamente, 40
C. Titular con EDTA disdico 0,01 M SV hasta que la
coloracin violeta cambie para azul. Aadir a esa solucin
cantidad recomendada de la muestra disuelta en 100 ml de
agua destilada o preparada de modo descrito en la mono-
grafa. Si la coloracin de la solucin cambia para violeta,
titular con EDTA disdico 0,01 M SV hasta el cambio para
azul. El volumen de la solucin de EDTA disdico 0,01 M
SV utilizado en la segunda titulacin no debe exceder el
volumen establecido en la monografa.
5.3.2.10 ENSAYO LMITE PARA
ALUMINIO
Solucin estndar de aluminio (200 ppm Al): tratar una
porcin de aluminio metlico con cido clorhdrico 6 M
a 80 C por pocos minutos. Pesar 100 mg de la porcin
tratada y disolver en mezcla de 10 ml de cido clorhdrico
y 2 ml de cido ntrico, a 80 C por, aproximadamente,
30 minutos. Mantener bajo calentamiento hasta reduccin
del volumen para cerca de 4 ml. Enfriar hasta temperatura
ambiente y aadir 4 ml de agua destilada. Dejar evaporar
hasta obtener el volumen de 2 ml. Enfriar y transferir la
solucin, cuantitativamente, usando agua destilada, para
baln volumtrico de 100 ml. Completar el volumen con
agua destilada y homogeneizar. Pipetear 20 ml de esa so-
lucin y transferir para otro baln volumtrico de 100 ml.
Completar el volumen con agua destilada y homogeneizar.
Solucin estndar de aluminio (10 ppm Al): transferir, in-
mediatamente antes del uso, 5 ml de la Solucin estndar
de aluminio (200ppm Al) para baln volumtrico de 100

ml; completar el volumen con agua destilada y homoge-
neizar.
Solucin estndar de aluminio (2 ppm Al): transferir, inme-
diatamente antes del uso, 1 ml de la Solucin estndar de
aluminio (200ppm Al) para baln volumtrico de 100 ml;
completar el volumen con agua destilada y homogeneizar.
Solucin diluyente de cido ntrico: transferir 40 ml de ci-
do ntrico para baln volumtrico de 1000 ml; completar el
volumen con agua destilada y homogeneizar.
MTODO I
Preparacin muestra: utilizar la cantidad especificada de
la muestra, o calculada, preparada conforme especificado
en la monografa.
Preparacin estndar: utilizar el volumen especificado, o
calculado, de la Solucin estndar de aluminio (10 ppm o
2 ppm).
Procedimiento: transferir para embudo de separacin las
preparaciones muestra y estndar y extraer con 3 porciones
(20, 20 y 10 ml) de la solucin de hidroxiquinolina a 0,5%
(p/v) en cloroformo. Juntar los extractos clorofrmicos y di-
luir para 50 ml con cloroformo. Realizar una preparacin en
blanco utilizando el mismo solvente. Medir la intensidad de
la fluorescencia (5.2.15) de la preparacin muestra (I1), de la
preparacin estndar (I2) y de la preparacin en blanco (I3)
utilizando largo de onda de excitacin de 392 nm y mono-
cromador ajustado en 518 nm. La fluorescencia de la prepa-
racin muestra (I1), descontada de la preparacin en blanco
(I3) no debe ser mayor que la de la preparacin estndar (I2),
descontada de la preparacin en blanco (I3).
MTODO II
Preparacin muestra: transferir cantidad de la muestra es-
pecificada en la monografa, o calculada, para baln volu-
mtrico de plstico de 100 ml, aadir 50 ml de agua desti-
lada y someter al ultrasonido durante 30 minutos. Aadir 4
ml de cido ntrico; completar el volumen con agua desti-
lada y homogeneizar.
Preparaciones estndar: preparar soluciones conteniendo
0,01, 0,02 y 0,04 ppm de aluminio, inmediatamente antes
del uso, por medio de la diluicin de la Solucin estndar
de aluminio (1 ppm Al) con Solucin diluyente de cido
ntrico en baln volumtrico de 100 ml.
Procedimiento: determinar las absorbancias de las pre-
paraciones estndar y de la preparacin muestra por Es-
pectrometra de absorcin atmica con horno de grafito
(5.2.13.1.4) equipado con lmpara de ctodo hueco de alu-
minio. Ajustar el largo de onda en 309,3 nm empleando
una resolucin del monocromador de (0,7 0,1) nm. Uti-
lizar la Solucin diluyente de cido ntrico como blanco y
proceder a calibracin conforme descrito en (5.2.13.1.4)
Mtodo 1(Calibracin directa). Determinar la concentra-
cin de Al en la preparacin muestra en ppm. Calcular la
cantidad de Al en la muestra en ppm, por medio de la mul-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 179
tiplicacin de la concentracin de la preparacin muestra
en ppm por 100/P en la cual P es la masa en gramos de la
sustancia utilizada en la preparacin muestra.
MTODO III
Proceder conforme descrito en el Mtodo II y efectuar la
determinacin por Espectrometra de emisin ptica con
plasma inductivamente acoplado (5.2.13.2.2). Proceder de
acuerdo con las especificaciones del fabricante. Se reco-
mienda la utilizacin del largo de onda de 396,153 nm.
5.3.2.11 ENSAYO LMITE PARA
FOSFATOS
Solucin estndar de fosfato (5 ppm): disolver 0,716 g de
fosfato de potasio monobsico en agua destilada y comple-
tar el volumen para 1000 ml. Transferir 10 ml de esa solu-
cin para un baln volumtrico de 1000 ml y completar el
volumen con agua destilada.
Preparacin muestra: transferir la cantidad de la muestra
especificada, o calculada, o el volumen de la solucin de
5
la muestra preparada conforme descrito en la monografa
para baln volumtrico de 100 ml y completar el volumen
con solvente adecuado. Transferir esa solucin para vaso
de precipitados y aadir 4 ml de reactivo sulfomolbdico,
0,1 ml de cloruro estaoso SR y homogeneizar.
Preparacin estndar: transferir 2 ml de la Solucin estn-
dar de fosfato (5 ppm) para baln volumtrico de 100 ml
y completar el volumen con solvente adecuado. Continuar
conforme descrito en la preparacin muestra.
Procedimiento: aguardar 10 minutos, transferir 20 ml del
contenido de las preparaciones muestra y estndar para tu-
bos de Nessler (capacidad de 50 ml y 22 ml de dimetro
interno) y comparar la coloracin de las preparaciones. La
coloracin producida en la preparacin muestra no es ms
intensa que en la estndar.
Alternativamente, proceder conforme descrito en Cromato-
grafa inica (5.2.17.4.1) utilizando cromatgrafo equipado
con columna de cambio inico para separacin de aniones y
detector por conductividad con supresin qumica.
5.3.2.12 ENSAYO LMITE PARA PLOMO
Solucin estndar de plomo diluida (1 ppm Pb): diluir vo-
lumen exactamente medido de la Solucin estndar de plo-
mo (10ppm Pb) preparada conforme descrito en Ensayo
lmite para metales pesados (5.3.2.3) con 9 volmenes de
cido ntrico a 1% (v/v).
Nota: almacenar todas las soluciones de reactivos en re-
cipientes de vidrio de borosilicato. Enjuagar todos los ele-
mentos de vidrio con solucin de cido ntrico a 20% (v/v)
y, en seguida, con agua destilada.
Preparacin muestra: en la ausencia de especificacin en
la monografa, preparar la solucin muestra como sigue.
Proceder cautelosamente, pues algunas sustancias pueden
 180 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
reaccionar con violencia cuando digeridas con perxido de
hidrgeno. Transferir 1 g de la muestra para frasco ade-
cuado, aadir 5 ml de cido sulfrico, algunas perlas de
vidrio y calentar en placa de calentamiento, en campana,
hasta evolucin de humos. Pueden ser utilizados otros
medios de calentamiento adecuados. Si necesario, aadir
exceso de cido sulfrico para humedecer completamen-
te la muestra no pasando un total de 10 ml. Aadir, gota
a gota, con cuidado, perxido de hidrgeno concentrado,
calentando entre las adiciones, permitiendo que la reaccin
ocurra. Aadir las primeras gotas de a poco y muy lenta-
mente mezclando cuidadosamente para prevenir reaccin
rpida e interrumpiendo el calentamiento si llega a ocurrir
una excesiva formacin de espuma. Agitar la solucin en
el frasco para permitir la reaccin de la muestra adherida
en las paredes. Aadir perxido de hidrgeno siempre que
la mezcla se torne marrn u oscura. Continuar la digestin
hasta que vapores de trixido de azufre sean desprendidos
abundantemente para que la reaccin sea completa y la
solucin se torne incolora. Enfriar, cautelosamente, con el
aumento de 10 ml de agua destilada, evaporar nuevamente
hasta que el trixido de azufre se desprenda por comple-
to y enfriar. Repetir ese procedimiento con 10 ml de agua
5
destilada para retirar cualquier rastro de perxido de hidr-
geno. Cuidadosamente, diluir con 10 ml de agua destilada
y enfriar.
Nota: si, antes de calentar, la muestra reacciona muy rpi-
damente y comienza a humear con 5 ml de cido sulfrico,
se debe utilizar 10 ml de cido sulfrico a 50% (v/v) en fro
y aadir algunas gotas de perxido de hidrgeno antes de
calentar.
Preparacin estndar: utilizar volumen especificado,
o calculado de la Solucin estndar de plomo diluida (1
ppm Pb). Someter al mismo tratamiento de la preparacin
muestra.
Procedimiento: transferir las preparaciones muestra y es-
tndar para un embudo de separacin usando 10 ml de agua
destilada. Aadir 6 ml de citrato de amonio SR y 2 ml de
clorhidrato de hidroxilamina SR1 (para la determinacin
de plomo en sales de hierro usar 10 ml de citrato de amonio
SR). Aadir dos gotas de rojo de fenol a 0,1% (p/v) en eta-
nol, alcalinizar con hidrxido de amonio hasta coloracin
roja y homogeneizar. Enfriar la solucin, si necesario, y
aadir 2 ml de cianuro de potasio SR. Extraer, inmediata-
mente, con porciones de 5 ml de la solucin extractora de
ditizona y recolectar cada extracto para otro embudo de
separacin hasta que la solucin de ditizona mantenga su
color verde. Agitar las soluciones de ditizona combinadas
durante 30 segundos con 20 ml de cido ntrico a 1% (v/v)
y descartar la fase orgnica. Aadir a la solucin cida, 5
ml de la solucin estndar de ditizona y 4 ml de cianuro
amonaco SR, y agitar durante 30 segundos. La coloracin
violeta producida en la fase orgnica de la preparacin
muestra no es ms intensa que en la estndar.
Alternativamente, preparar la muestra conforme descrito
en Ensayo lmite para metales pesados (5.3.2.3) y deter-
minar plomo por una de las tcnicas de Espectrometra
atmica (5.2.13).
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
5.3.3 ENSAYOS QUMICOS
5.3.3.1 TITULACIONES POR
DIAZOTACIN
Ese tipo de titulacin es muy til en el anlisis de frmacos
que contienen grupo amino aromtico primario tales como
las sulfonamidas y los anestsicos locales derivados del
cido aminobenzico. La titulacin es realizada con solu-
cin volumtrica de nitrito de sodio, en medio cido, dando
la sal de diazonio de la amina aromtica primaria.
Son utilizados dos mtodos de cuantificacin.
En el Mtodo I, es utilizada solucin de almidn yodado
o papel de almidn yodado como indicador. El exceso de
cido nitroso convierte el yoduro a yodo, que en contacto
con el almidn resulta en color azul caracterstico.
En el Mtodo II, el punto final de la titulacin es deter-
minado potenciomtricamente. En ese mtodo, se emplean
electrodos de platino calomelano o platino-platino con di-
ferencia de potencial y sensibilidad adecuados. Despus
del uso, se debe sumergir los electrodos por algunos se-
gundos en cido ntrico SR al cual se adicion 1 mg/ml de
cloruro frrico y, en seguida, lavar con agua destilada.
MTODO I
Tcnica Pesar, exactamente, cerca de 500 mg de la sul-
fonamida o a cantidad especificada en la monografa para
otras aminas aromticas primarias. Transferir para matraz de
250 ml, y aadir, con agitacin, 100 ml de cido clorhdrico
SR para solubilizar la muestra. En seguida, aadir cerca de
30 ml de agua y enfriar en bao de hielo hasta aproximada-
mente 15 C. Titular, bajo agitacin constante, con solucin
de nitrito de sodio 0,1 M SV previamente estandarizada con
sulfanilamida SQR. Se alcanza el punto final de titulacin
cuando una gota de la solucin del matraz forma, inmedia-
tamente, una coloracin azul con una solucin de almidn
yodado SI en placa de toque o sobre papel de almidn yo-
dado SI humedecido. Para comprobarse el trmino de la ti-
tulacin, repetir la prueba de toque 2 minutos despus de la
ltima adicin. Esa debe continuar positiva.
El peso, en mg, de la muestra correspondiente cada ml de
nitrito de sodio 0,1 M SV se encuentra descrito en la mo-
nografa de cada frmaco.
MTODO II
Tcnica Pesar, exactamente, cerca de 500 mg de la sulfo-
namida, o el equivalente en masa del principio activo para
las especialidades farmacuticas, o la cantidad especificada
en la monografa para otras aminas aromticas primarias.
En el caso de inyectables u otras formas lquidas debe pi-
petearse cantidad equivalente a 500 mg de principio activo
o la cantidad especificada en la monografa. Transferir para
matraz y aadir 20 ml de cido clorhdrico SR y 50 ml de
agua. Agitar hasta disolucin. Enfriar hasta aproximada-
mente 15 C manteniendo esa temperatura en el curso de
la titulacin. Aadir catalizador adecuado cuando especifi-

cado. Titular, lentamente y bajo agitacin magntica, con
nitrito de sodio 0,1 M SV previamente estandarizado con
sulfanilamida SQR.
El peso, en mg, de la muestra que equivale cada ml de nitri-
to de sodio 0,1 M SV adicionado se encuentra especificado
en la monografa de cada frmaco.
Nota: la punta de la bureta debe permanecer poco arriba
de la superficie de la solucin a fin de evitar la oxidacin
del nitrito de sodio. Se debe agitar con cuidado evitando
la formacin de un torbellino de aire abajo de la superfi-
cie. Cuando la titulacin est a, aproximadamente, 1 ml
del punto final calculado, aadir volmenes de 0,1 ml en
intervalos de, como mnimo, 1 minuto.
5.3.3.2 DETERMINACIN DE
NITRGENO POR EL METODO DE
KJELDAHL
El mtodo de Kjeldahl descrito en la forma de macro y
de semimicro tcnica se destina a la determinacin de ni-
trgeno en sustancias relativamente lbiles como amidas y
aminas. Comprende dos fases: (1) digestin cataltica de la
sustancia orgnica en cido sulfrico con la derivado con-
versin cuantitativa del nitrgeno en sulfato de amonio; (2)
destilacin de lo digerido alcalinizado y titulacin volum-
trica de la amonaco liberada en el proceso.
5.3.3.2.1 Macrodeterminacin (mtodo I)
Transferir, exactamente, cerca de 1 g de muestra para baln
de Kjeldahl de 500 ml. Aadir 10 g de sulfato de potasio, 0,5
g de sulfato cprico y 20 ml de cido sulfrico. Inclinar el
baln cerca de 45o y calentar, lentamente, manteniendo la
temperatura abajo del punto de ebullicin mientras hubiere
desarrollo de espuma. Aumentar la temperatura hasta la ebu-
llicin vvida del cido y proseguir con el calentamiento por
30 minutos hasta que la mezcla quede lmpida y adquiera
color verde claro. Enfriar, aadir 150 ml de agua, mezclar y
enfriar nuevamente. Aadir, cuidadosamente, 100 ml de la
solucin de hidrxido de sodio 40% (p/v) posibilitando que
el lcali escurra por la pared del baln y forme fase indepen-
diente bajo la solucin cida. Aadir pequea cantidad de
zinc granulado; inmediatamente, conectar el baln al bulbo
de aislamiento previamente fijado al condensador, y sumer-
gir el tubo colector en 100 ml de solucin de cido brico
5% (p/v) en matraz de 500 ml. Homogeneizar la mezcla en
el baln agitando suavemente y destilar hasta recolectar en
el matraz cerca de 80% del volumen contenido en el baln.
Aadir cerca de 3 gotas de mezcla de rojo de metilo con azul
de metileno SI al matraz y titular con cido sulfrico 0,25
M SV. Realizar ensayo en blanco y hacer las correcciones
necesarias. Cada ml de cido sulfrico 0,25 M SV equivale
a 7,003 mg de nitrgeno. Para muestras con bajo tenor de
nitrgeno, emplear cido sulfrico 0,05 M SV. En ese caso,
cada ml equivale a 1,401 mg de nitrgeno.
En la presencia de nitratos o nitritos
Transferir cantidad exactamente pesada de la muestra
conteniendo cerca de 150 mg de nitrgeno para baln de
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 181
Kjeldahl de 500 ml y aadir 25 ml de cido sulfrico conte-
niendo 1 g de cido saliclico disuelto. Mezclar y aguardar
durante cerca de 30 minutos agitando con frecuencia. Aa-
dir 5 g de tiosulfato de sodio, mezclar y, en seguida, aadir
0,5 g de sulfato cprico. Proseguir conforme indicado en el
procedimiento anterior a partir de Inclinar el baln cerca
de 45o....
Cuando el tenor de nitrgeno en la muestra exceda 10%,
aadir, previamente a la digestin, 0,5 a 1,0 g de cido ben-
zoico para facilitar la descomposicin de la sustancia.
5.3.3.2.2 Semimicrodeterminacin (mtodo II)
Transferir cantidad exactamente pesada de la sustancia
correspondiente a 2 3 mg de nitrgeno para baln de
Kjeldahl compatible con el aparato. Aadir 1 g de sulfato
de potasio y 0,1 g de sulfato cprico y, si necesario, lavar
los slidos adherentes al cuello con fino chorro de agua.
Aadir 7 ml de cido sulfrico y, en seguida, 1 ml de pe-
rxido de hidrgeno a 30% (v/v) de modo que los lquidos
escurran por la pared del baln. Calentar el frasco y mante-
ner la digestin hasta desaparicin de los residuos de car-
5
bonizacin y la preparacin azul clara est perfectamente
lmpida. Cuidadosamente, aadir 70 ml de agua y enfriar.
Conectar el baln al aparato de destilacin y, a travs del
embudo, aadir 30 ml de solucin de hidrxido de sodio
40% (p/v) posibilitando que el lcali escurra por la pared
del baln y forme fase independiente bajo la solucin ci-
da. Lavar el embudo con agua e, inmediatamente, iniciar
la destilacin. Recolectar el destilado en matraz de 250 ml
conteniendo 15 ml de solucin de cido brico 5% (p/v),
cantidad de agua suficiente para sumergir el tubo colector
y 3 gotas de mezcla de rojo de metilo con azul de metileno
SI. Destilar hasta que el volumen de destilado alcance 80 a
100 ml; retirar el frasco colector, lavar las paredes con pe-
quea cantidad de agua y titular con cido sulfrico 0,005
M SV Realizar ensayo en blanco y hacer las correcciones
necesarias. Cada ml de cido sulfrico 0,005 M SV equiva-
le a 0,1401 mg de nitrgeno.
5.3.3.3 MTODO DE COMBUSTIN
Los mtodos de combustin consisten en la descomposi-
cin de sustancias orgnicas en la presencia de oxgeno,
a travs de la oxidacin de la materia orgnica para la
subsiguiente etapa de identificacin o dosificacin. Estos
mtodos pueden ser aplicados de dos maneras: mtodo del
frasco de combustin en presin atmosfrica y mtodo de
combustin iniciada por micro ondas en sistema presuri-
zado.
MTODO DEL FRASCO DE COMBUSTIN EN
PRESIN ATMOSFRICA
Aparatos
Comprende un frasco cnico de vidrio borosilicato refrac-
tario resistente, con volumen interno de 500 ml y tapa de
vidrio esmerilada. Para determinacin de flor, se emplea
frasco de cuarzo. La base de la tapa esmerilada que acom-
paa el frasco presenta una prolongacin de vidrio en la
 182 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
cual es fijado un hilo de platino con extremidad compuesta
por un soporte de platino donde es introducida la muestra
(Figura 1).
Muestras slidas
Pesar la cantidad especificada en la monografa en pedazo
de papel de filtro de formato y dimensiones apropiadas, do-
blar y prender en la tela de platino, dejando libre una parte
de la extremidad. Colocar en el interior del frasco la solu-
cin absorbente especificada y burbujear oxgeno en esta
solucin para saturar el interior del frasco. Hacer la igni-
cin de la extremidad del papel (vea Nota 1) y, sin demora,
colocar la tapa en el frasco, mantenindolo en posicin con
firmeza para evitar su desplazamiento debido a la presin
ejercida por los gases de combustin. Invertir el frasco para
asegurar sellado lquido en la tapa, tomando la precaucin
de evitar que material incompletamente quemado caiga en
el lquido. Concluida la combustin, agitar el frasco, hasta
que los gases formados en el proceso desaparezcan. Pasa-
dos 15 a 30 minutos, colocar pequea porcin de agua en el
borde del frasco y retirar la tapa, permitiendo que esta agua
fluya para el interior del frasco, lavando las paredes del
5
cuello. Lavar tapa, cuello, hilo y red de platino con agua
y juntar estas aguas de lavado a la solucin absorbente. La
solucin obtenida segn este procedimiento es designada
solucin muestra. Para el preparado del blanco, proceder
de la misma manera, omitiendo la muestra (Nota 2).
Muestras lquidas
Embalar pequea cantidad de algodn absorbente en peda-
zo de papel de filtro y pesar, en este dispositivo, la cantidad
especificada de la muestra, que es adsorbida en el algodn.
Despus de la fijacin del algodn involucrado en el papel
de filtro a la rejilla de platino, proceder a la combustin tal
como descrita para muestras slidas.
Determinacin de cloro y bromo
Quemar la cantidad especificada de sustancia bajo examen,
empleando como solucin absorbente 20 ml de agua aadi-
dos de 1 ml de perxido de hidrgeno concentrado y 3 ml
de hidrxido de sodio 0,1 M. Concluida la absorcin, jun-
tar 2 gotas de azul de bromofenol y cantidad suficiente de
cido ntrico 0,1 M para cambiar el indicador de azul para
amarillo, incorporando 0,5 ml de exceso. Si la sustancia
en anlisis contiene azufre, aadir algunas gotas de nitrato
de bario 0,005 M. Juntar 100 ml de etanol aprovechando
la adicin para lavar las paredes internas del frasco y, en
seguida, 15 gotas de difenilcarbazona SI. Titular con nitra-
to de mercurio (II) 0,005 M SV hasta coloracin rosa per-
manente. Cada ml de nitrato de mercurio (II) 0,005 M SV
equivale a 0,3550 mg de cloro o a 0,79904 mg de bromo.
Alternativamente, proceder conforme descrito en Croma-
tografa de iones (5.2.17.4.1), utilizando cromatgrafo
equipado con columna de cambio aninica y detector por
conductividad con supresin qumica.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Determinacin de yodo
Quemar la cantidad especificada de sustancia bajo examen
de la forma descrita, empleando como lquido absorbente
10 ml de agua enriquecidos con 2 ml de hidrxido de sodio
M. Concluida la absorcin, juntar 1 ml de solucin de hi-
drato de hidracina 4 M en agua, tapar nuevamente el frasco
y agitar hasta decoloracin de la solucin. En seguida, pro-
ceder como descrito en Determinacin de cloro y bromo a
partir de Concluida a absorcin.... Cada ml de nitrato de
mercurio (II) 0,005 M SV equivale a 1,269 mg de yodo.
Alternativamente, proceder conforme descrito en Croma-
tografa de iones (5.2.17.4.1), utilizando cromatgrafo
equipado con columna de cambio inico para separacin
de aniones y detector por conductividad con supresin qu-
mica.
Determinacin de flor
Quemar cantidad especificada de sustancia bajo examen de
la forma descrita, empleando como solucin absorbente 15
ml de agua. Completada la operacin, lavar tapa, hilo de
platino, tela de platino y paredes del frasco (Nota 3) con
40 ml de agua. Aadir 0,6 ml de alizarina SI y, en seguida,
gota a gota, hidrxido de sodio 0,1 M hasta que el color
cambie de rosado para amarillo. Aadir 5 ml de solucin
tampn acetato cido clorhdrico pH 3,5 y titular con ni-
trato de torio 0,005 M SV hasta que a color amarilla mude
para amarillo rosado. Cada ml de nitrato de torio 0,005 M
SV equivale a 0,380 mg de flor. Habiendo dificultad en la
identificacin del punto de cambio, hacer ensayo prelimi-
nar con solucin estandarizada de flor inorgnico.
Alternativamente, proceder conforme descrito en Croma-
tografa de iones (5.2.17.4.1), utilizando cromatgrafo
equipado con columna de cambio inico para separacin
de aniones y detector por conductividad con supresin qu-
mica.
Determinacin de azufre
Quemar la cantidad especificada de sustancia bajo examen
de la forma descrita, empleando como solucin absorbente
12,5 ml de perxido de hidrgeno SR. Concluida la absor-
cin, juntar 40 ml de agua, aprovechando para lavar tapa,
hilo y tela de platino y paredes del frasco. Hervir la solu-
cin por 10 minutos, enfriar, aadir 2 ml de cido actico
SR y 20 ml de etanol. Titular con nitrato de bario 0,01 M
SV, usando 2 gotas de torina SI y 2 gotas de cloruro de me-
tiltioninio SI como indicador hasta que, el color amarillo
cambie para rosa. Cada ml de nitrato de bario 0,01 M SV
equivale a 0,3206 g de azufre.
Alternativamente, proceder conforme descrito en Croma-
tografa de iones (5.2.17.4.1), utilizando cromatgrafo
equipado con columna de cambio aninica y detector por
conductividad con supresin qumica.

Notas:
1. Se recomienda al analista usar gafas de seguridad y
proteccin adecuada para evitar que fragmentos de
frasco lo alcancen en caso de accidente. Actualmente,
existen comercialmente sistemas que evitan la ignicin
manual, empleando radiacin infrarroja o corriente
elctrica, disminuyendo los riesgos al operador.
2. Asegurarse de que los frascos de combustin estn lim-
pios y exentos de trazos de solventes orgnicos.
3. Sustancias conteniendo flor dan contenidos bajos si la
combustin fuese ejecutada en frascos de vidrio boro-
silicato. Se obtiene resultados satisfactorios en frascos
de vidrio soda exento de boro pero el rendimiento ideal
implica el empleo de frascos de cuarzo.
Figura 1 - Frasco de oxgeno para
determinacin de azufre y halgenos.
MTODO DE COMBUSTIN INICIADA POR
MICROONDAS EN SISTEMA PRESURIZADO
Aparatos
Comprende un frasco cuarzo con volumen interno de 80
ml y presin operacional de trabajo de 80 atm. La tapa que
acompaa el frasco es de polmero fluorado, que posee un
orificio para liberar los gases en el caso de la descomposi-
cin por va hmeda, el cual es utilizado para la presuriza-
cin del sistema con oxgeno. Un soporte de cuarzo para la
muestra es insertado en el interior del frasco de descom-
posicin.
Muestras slidas
Pesar la cantidad especificada de sustancia y prensar en la
forma de comprimido (aproximadamente 1,2 cm de di-
metro). Colocar la muestra sobre el soporte de cuarzo con-
teniendo un pedazo de papel de filtro (aproximadamente
10 mg) humedecido con nitrato de amonio 6 M. Colocar
en el interior del frasco la solucin absorbente especifica-
da e insertar el soporte conteniendo la muestra y el papel
en el interior del frasco. Cerrar el sistema adecuadamen-
te, conforme especificaciones del fabricante, y presurizar
con 20 atm de oxgeno. Proceder a insercin de los frascos
de descomposicin en el rotor del horno de microondas y,
sin demora, colocar el rotor en la cavidad del horno, ini-
ciando inmediatamente la irradiacin. Iniciada la ignicin,
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 183
utilizando potencia mxima, la irradiacin puede ser con-
tinuada por ms 5 min, para que el reflujo de la solucin
absorbente se de, permitiendo la completa absorcin de los
analitos en la solucin. Despus del enfriamiento (20 min),
el frasco de descomposicin puede ser abierto y la solucin
transferida para recipiente apropiado con auxilio de agua
y medida a volumen conocido, para la subsiguiente iden-
tificacin o determinacin de los analitos de inters. La
solucin obtenida segn este procedimiento es designada
solucin muestra. Para el preparado del blanco, proceder
de la manera descrita, omitiendo la muestra.
Determinacin de cloro y bromo
Proseguir conforme descrito en Determinacin de cloro y
bromo en el Mtodo del Frasco de Combustin en Presin
Atmosfrica.
Determinacin de yodo
Proseguir conforme descrito en Determinacin de yodo
en el Mtodo del Frasco de Combustin en Presin Atmos-
frica.
Determinacin de flor 5
Proseguir conforme descrito en Determinacin de flor
en el Mtodo del Frasco de Combustin en Presin Atmos-
frica.
Determinacin de azufre
Proseguir conforme descrito en Determinacin de azu-
fre en el Mtodo del Frasco de Combustin en Presin
Atmosfrica.
5.3.3.4 TITULACIONES
COMPLEJOMTRICAS
Complejometra es el mtodo analtico volumtrico que
comprende la titulacin de iones metlicos (A) con agente
complejante (B). La reaccin involucrada es del siguiente
tipo:
An+ + Bm- = ABn-m
Muchos complejantes denominados quelantes son capaces
de formar estructuras cclicas por medio de la coordina-
cin simultnea de varios grupos con el ion metlico. El
cido edtico (cido etilenodiaminotetractico, EDTA) es
el ejemplo tpico. Ese cido es el agente complejante ms
utilizado. El EDTA forma complejos 1:1 con muchos me-
tales con estado de oxidacin superior a +1 siendo esos
complejos mucho solubles en agua.
La estabilidad de los complejos con EDTA es dependiente
del pH para los diversos metales. Luego condiciones idea-
les de pH deben ser establecidas para el anlisis por com-
plejacin para cada metal.
En la complejometra, el punto de cambio puede ser de-
terminado visual, o instrumentalmente. Se emplean indi-
 184 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
cadores complejantes que exhiben profundas alteraciones
de color mediante coordinacin con el metal. Ejemplos
tpicos son: anaranjado de xilenol, chalcona y negro de
eriocromo T. El indicador complejomtrico acta de forma
competitiva con el agente titulante, logo debe ser despla-
zado efectivamente por este en las proximidades del punto
de equivalencia.
PROCEDIMIENTOS
Aluminio
Pesar, exactamente, a cantidad de la sustancia indicada en
la monografa, aadir 50 ml de agua y acidificar, si nece-
sario, con cantidad mnima de cido clorhdrico M, salvo
que la monografa indique otro tipo de solvente. Aadir 25
ml de edetato disdico 0,1 M SV y 10 ml de la mezcla, en
volmenes iguales, de acetato de amonio 2 M con cido
actico 2 M. Calentar la solucin hasta ebullicin y mante-
ner por 2 minutos. Enfriar. Aadir 50 ml de etanol y 3 ml
de solucin recin preparada de ditizona a 0,025% (p/v)
en etanol. Titular el exceso de edetato disdico con sulfato
de zinc 0,1 M SV hasta cambio del color de azul verdoso
5
para violeta rosa. Cada ml de edetato disdico 0,1 M SV es
equivalente a 2,698 mg de aluminio.
Bismuto
Pesar, exactamente, la cantidad de la sustancia indicada
en la monografa y disolver en cantidad mnima de cido
ntrico 2 M. Aadir 50 ml de agua y solucin concentra-
da de amonaco, gota a gota con agitacin, hasta que la
preparacin quede turbia. Aadir 0,5 ml de cido ntrico.
Calentar a 70 C hasta la desaparicin de la turbidez de la
preparacin. Aadir algunas gotas de anaranjado de xilenol
SI. Titular, lentamente, con edetato disdico 0,05 M SV
hasta cambio del color de violeta rosa para amarillo. Cada
ml de edetato disdico 0,05 M SV es equivalente a 10,45
mg de bismuto.
Calcio
Pesar, exactamente, la cantidad de la sustancia indicada en
la monografa, disolver en algunos mililitros de agua y aci-
dificar, si necesario, con cantidad mnima de cido clorh-
drico 2 M. Diluir para 100 ml con agua. Titular con edetato
disdico 0,05 M SV hasta cerca de 2 ml antes del punto de
equivalencia previsto. Aadir 4 ml de hidrxido de sodio 10
M y gotas de chalcona SI. Proseguir la titulacin hasta que el
color cambie de rosa para azul intenso. Cada ml de edetato
disdico 0,05 M SV es equivalente a 2,004 mg de calcio.
Plomo
Pesar, exactamente, la cantidad de la sustancia indicada en
la monografa y disolver en 5 a 10 ml de agua, o en can-
tidad mnima de cido actico 5 M. Diluir para 50 ml con
agua. Aadir gotas de anaranjado de xilenol SI y metena-
mina suficiente (cerca de 5 g) para que la solucin adquiera
color violeta. Titular con edetato disdico 0,05 M SV, o 0,1
M SV, conforme indicado en la monografa hasta cambio
del color de violeta para amarillo. Cada ml de edetato dis-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
dico 0,05 M SV es equivalente a 10,36 mg de plomo. Cada
ml de edetato disdico 0,1 M SV es equivalente a 20,72 mg
de plomo.
Magnesio
Pesar, exactamente, la cantidad de la sustancia indicada en
la monografa y disolver en 5 a 10 ml de agua, o en canti-
dad mnima de cido clorhdrico 2 M. Diluir con agua para
50 ml. Aadir 10 ml de tampn de cloruro de amonio pH
10,0, y algunas gotas de negro de eriocromo T SI. Titu-
lar con edetato disdico 0,05 M SV o 0,1 M SV, conforme
indicado en la monografa, hasta cambio del color de vio-
leta para azul. Cada ml de edetato disdico 0,05 M SV es
equivalente a 1,215 mg de magnesio. Cada ml de edetato
disdico 0,1 M SV es equivalente a 2,431 mg de magnesio.
Zinc
Pesar, exactamente, la cantidad de la sustancia indicada en
la monografa y disolver en 5 a 10 ml de agua, o en can-
tidad mnima de cido actico 5 M. Diluir para 50 ml con
agua. Aadir gotas de anaranjado de xilenol SI y metena-
mina suficiente (cerca de 5 g) para que la solucin adquiera
color violeta. Titular con edetato disdico 0,05 M SV o 0,1
M SV, conforme indicado en la monografa, hasta cambio
del color de violeta para amarillo. Cada ml de edetato di-
sdico 0,05 M SV es equivalente a 3,268 mg de zinc. Cada
ml de edetato disdico 0,1 M SV es equivalente a 6,536
mg de zinc.
5.3.3.5 TITULACIONES EN MEDIO NO
ACUOSO
Los frmacos que son bases o cidos suaves no pueden ser
cuantificados en medio acuoso, pero pueden ser en medio
no acuoso.
La titulacin en medio no acuoso se basa en el concepto
cido / bsico de Brnsted-Lowiy, en el cual el cido es una
sustancia que dona protn y la base es aquella que recibe
protn. Sustancias potencialmente cidas son cidas sola-
mente en presencia de base a la cual puedan donar protn
y viceversa.
El solvente desempea, por consiguiente, papel muy im-
portante en la determinacin del carcter cido / bsico
de una sustancia, ya que la fuerza del cido o de la base
depende de la capacidad del solvente de recibir o donar
protones. El agua debera ser el solvente de eleccin, de-
bido a la fcil disponibilidad. No obstante, el cido ms
fuerte que puede existir en medio acuoso es el ion hidronio
(H3O+) y la base ms fuerte el ion hidrxido (OH-), eso es
conocido como efecto nivelador del solvente. En la dosifi-
cacin de cidos o bases muy suaves, el titulante debe ser
una base o cido muy fuerte, respectivamente, para que la
reaccin cido-base ocurra; sin embargo debido al efecto
nivelador del agua no es posible titular tales sustancias en
medio acuoso.
Utilizando solventes poco protoflicos como el cido acti-
co, es posible la titulacin de bases mucho suaves ya que el

ion acetonio (CH3COOH2+) es un cido mucho ms fuerte
que el ion hidronio. cidos ms fuertes que el ion hidronio
no pueden ser diferenciados en medio acuoso, pero pueden
en cido actico mostrando que el orden decreciente para
la fuerza de los cidos es perclrico, bromhdrico, sulf-
rico, clorhdrico y ntrico. Anlogamente, la titulacin de
cidos suaves es posible con el uso de solventes bsicos
como la n-butilamina. El amideto (CH3CH2CH2CH2NH-)
es una base mucho ms fuerte que el hidrxido.
Los solventes empleados en la titulacin en medio no acuo-
so deben satisfacer ciertas exigencias: (1) no reaccionar
con la sustancia ni con el titulante; (2) disolver la sustancia
posibilitando, como mnimo, preparado de solucin 0,01
M; (3) disolver el producto de la titulacin si la precipi-
tacin fuese inevitable, el precipitado debe ser compacto
y cristalino; (4) posibilitar, con facilidad, la visualizacin
del punto final, sea ese medido con el uso de indicadores o
potencimetro; (5) ser de bajo costo y de fcil purificacin.
Para la titulacin de sustancias de carcter bsico (ami-
nas, heterocclicos nitrogenados, compuestos de amonio
cuaternario, sales alcalinas de cidos orgnicos e inorg-
nicos y algunas sales de aminas) se emplean solventes de
naturaleza relativamente neutra, o cida, siendo el cido
actico glacial el ms utilizado. El anhdrido actico se re-
serva para bases mucho suaves como amidas. La mezcla
de dioxana con cido actico puede ocasionalmente ser
utilizada a fin de la reduccin de la constante dielctrica
y consecuentemente menor potencial de ionizacin de los
cidos favoreciendo la reaccin de neutralizacin. Como
titulante se emplea, generalmente, la solucin de cido
perclrico en cido actico. Otros titulantes tiles son ci-
do perclrico en dioxano; cido p-toluenosulfnico (cido
tsico) y cido fluorsulfnico son generalmente utilizados
con solventes aprticos como cloroformo.
Para la dosificacin de sales de cidos halogenados (clorhi-
drato, bromhidrato y yodhidrato) debe adicionarse acetato
de mercurio; ese no se disocia en solucin de cido acti-
co. El ion haluro es una base demasiadamente suave para
reaccionar cuantitativamente con cido perclrico en cido
actico. Ese ion puede ser sustituido, cuantitativamente,
por el ion acetato siendo retirado en la forma de complejo
mercrico que no se disocia. El acetato, que es una base
relativamente fuerte en cido actico, puede ser precisa-
mente titulado con cido perclrico.
Para la titulacin de sustancias que se comportan como
cidos (haluros de cidos, anhdridos de cidos, cidos
carboxlicos, aminocidos, enoles, imidas, fenoles, pirro-
les y sulfas) se emplean como solventes los de naturaleza
bsica o aprtica. En la dosificacin de sustancias de aci-
dez intermediaria es comn el uso de dimetilformamida.
Ya en la dosificacin de cidos suaves se emplean bases
ms fuertes como morfolina, etilenodiamina y n-butilami-
na. Los solventes bsicos seleccionados, adecuadamente,
pueden posibilitar la determinacin selectiva de mezcla de
cidos. Dos clases de titulantes pueden ser empleadas para
determinacin de sustancias cidas: los alcxidos de meta-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 185
les alcalinos y los hidrxidos de alquilamonio cuaternario.
El metxido de sodio es el ms empleado de los alcxidos
en mezcla de metanol y tolueno o metanol y benceno. El
metxido de litio en metanol y benceno es utilizado para
los compuestos que forman precipitado gelatinoso en las
titulaciones con metxido de sodio. El ms utilizado entre
los hidrxidos es el de tetrabutilamonio. Con los hidrxi-
dos de amonio cuaternario como los hidrxidos de tetra-
butilamonio y el de trimetilexadecilamonio (en mezcla de
benceno y metanol o alcohol isoproplico) hay ventaja de
que la sal del cido titulado es, en general, soluble en el
medio de titulacin.
Es importante que se protejan los solventes para la titu-
lacin de sustancias cidas de la exposicin excesiva a
la atmsfera debido a la interferencia de CO2. Por eso, se
puede emplear atmsfera inerte o aparato especial durante
la titulacin. Para determinar la absorcin de CO2 se debe
proceder a la titulacin del blanco que no debe consumir
ms que 0,01 ml del metxido de sodio 0,1 M SV por mi-
lilitro de solvente.
El punto final del dosificacin puede ser determinado vi-
5
sualmente por el cambio de color o potenciomtricamente.
Generalmente la eleccin del mtodo se basa en el pKa de
los analitos en agua. Para bases con el pKa de 4, la detec-
cin es, en general, por medio de indicadores; para las que
el pKa est entre 1 y 4, la deteccin es potenciomtrica.
En ese caso, el electrodo de vidrio / calomelano es til.
En cido actico, tal electrodo funciona de acuerdo con
lo previsto tericamente. En el caso del electrodo de ca-
lomelano como referencia, es ventajoso sustituir el puente
salino de cloruro de potasio acuoso por perclorato de litio
0,1 M en cido actico glacial para titulacin en solventes
cidos o por cloruro de potasio en metanol para la titula-
cin en solventes bsicos. La determinacin del punto final
en la cuantificacin de cidos cuyo pKa en agua es en tor-
no de 7 puede ser hecha con el uso de indicador. Para los
cidos con pKa entre 7 y 11 se recomienda determinacin
potenciomtrica, aunque en ciertos casos se recurra a indi-
cadores, como violeta azoico o o-nitroanilina con menor
precisin.
Con el uso de solventes orgnicos, se debe considerar el
alto coeficiente de expansin cbica de la mayora de esos
en relacin al del agua. Eso porque hay posibilidad de ocu-
rrir variacin del tenor del titulante en medio no acuoso
en funcin de la temperatura. Se debe corregir el volumen
del titulante, multiplicando-el por el factor de correccin
abajo:
[1 + coeficiente de expansin cbica del solvente (t0 t)]
en que:
t0 = temperatura de estandarizacin del titulante,
t = temperatura de utilizacin del titulante.
Los sistemas ms empleados para la titulacin en medio no
acuoso estn relacionados en la Tabla 1.
 186 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 1 - Sistemas para titulacin en medio no acuoso

Tipo de solvente Solventea Indicador Electrodos
Acido (para titulacin de cido actico glacial Alfazurina 2 G
bases o sus sales) cido frmico Cloruro de metilrosanilina Vidrio / calomelano
cido propinico p-Naftolbenceina Vidrio / plata / cloruro de
plata
Anhdrido actico Verde de malaquita
Cloruro de sulfonila Rojo de quinaldina

Relativamente neutro (para Acetato de etilo p-Naftolbenceina Calomelano / plata / cloruro

titulacin diferencial de de plata
bases) Acetonitrilo Rojo de metilo Vidrio / calomelano
Alcoholes Anaranjado de metilo
Benceno
Clorobenceno
Cloroformo
Dioxana

Bsico (para titulacin de n-Butilamina p-Hidroxiazobenceno Antimonio / calomelano

cidos) Dimetilformamida O-Nitroanilina Antimonio / vidrio
Etilenodiamina Timolftalena Platino / calomelano

5
Morfolina Violeta azoico Vidrio / calomelano

Relativamente neutro (para Acetona Azul de bromotimol Antimonio / calomelano

titulacin diferencial de
cidos)
Acetonitrilo Azul de timol Vidrio / calomelano
Alcohol tert-butlico p-Hidroxiazobenceno Vidrio / platinob
2-Butanona Violeta azoico
Isopropilacetona
_________
a
solventes relativamente neutros de constante dielctrica baja, tales como benceno, cloroformo, o dioxana, pueden ser utilizados junto con cualquier
solvente cido o bsico a fin de aumentar la sensibilidad de los puntos de cambio de la titulacin.
b
en el titulante.

Titulacin de sustancias bsicas usar el electrodo adecuado a la determinacin potenciom-

Disolver cantidad de la sustancia indicada en la mono-
grafa en cantidad especificada del solvente, o mezcla de
solventes adecuados. En el caso de la titulacin de sales
de cidas halogenadas, se debe aadir 10 ml de acetato de
mercurio SR. Aadir el indicador apropiado, o en el caso
de determinacin potenciomtrica, emplear electrodo ade-
cuado titulando con cido perclrico 0,1 M SV en cido
actico. Para realizacin del ensayo en blanco, proceder de
la manera descrita omitiendo la muestra.
Si t0 es diferente a t corregir el volumen por:
trica. Titular con metxido de sodio 0,1 M SV previamente
estandarizada con cido benzoico. Evitar la absorcin de
dixido de carbono. Efectuar titulacin en la preparacin
en blanco. Hacer las correcciones necesarias.
Mtodo II Disolver cantidad de la sustancia indicada en
la monografa en el solvente o mezcla de solventes indi-
cados
Titular con hidrxido de tetrabutilamonio 0,1 M SV utili-
zando bureta equipada con absorsor de dixido de carbono.
Determinar el punto final potenciomtricamente.

[1+0,0011(t0-t)] Efectuar titulacin en la preparacin en blanco. Hacer las

en que:
t0 = temperatura en la cual el titulante fue estandarizado,
t = temperatura en la cual la titulacin fue realizada.
Titulacin de sustancias cidas
Mtodo I Disolver cantidad de la sustancia especificada
en la monografa en el solvente o mezcla de solventes indi-
cados. Aadir el indicador recomendado o, se fuera el caso,
correcciones necesarias.
5.3.3.6 DETERMINACIN DE METOXILA
La tcnica es destinada a la determinacin de grupos me-
toxila en sustancias orgnicas por reaccin con cido yod-
hdrico concentrado. El yoduro de metilo formado es sepa-
rado por destilacin bajo corriente continua de nitrgeno o
dixido de carbono, lavado y adsorbido en solucin bromo

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


/ actica. El yoduro de metilo es convertido a yodo y, en
seguida, titulado con tiosulfato de sodio.
APARATOS
El aparato (Figura 1) empleado en la determinacin de la
metoxila consiste de baln de fondo redondo con capaci-
dad de 50 ml al cual se encuentra soldado un brazo lateral
capilar con 1 mm de dimetro interno destinado al influjo
de gas de arrastre inerte nitrgeno o dixido de carbono.
Se conecta al baln por juntas esmeriladas un condensador
vertical de 24 cm de altura y 12 mm de dimetro externo en
cuyo topo est fijado a tubo curvo cuya extremidad capilar
con 3 mm de dimetro se encuentra inmersa en frasco de
lavado. La salida del lavador consiste en tubo de cerca de
10 mm de dimetro que termina en tubo removible de 6
mm de dimetro inmerso en el lquido absorbente.
Figura 1 - Aparato empleado en la determinacin de la metoxila.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 187
PROCEDIMIENTO
Preparacin lavadora: suspender 1 g de fsforo rojo en
100 ml de agua.
Lquido absorbente: disolver 15 g de acetato de potasio en
150 ml de una mezcla de cido actico glacial y anhdrido
actico (9:1). A 145 ml de esa solucin aadir 5 ml de bro-
mo. Preparar inmediatamente antes del uso.
Aadir preparacin lavadora suficiente para cubrir mitad
del lavador de gas. Aadir 20 ml del lquido absorbente
al tubo de absorcin. Aadir al baln cantidad de muestra
correspondiente a 6,5 mg de metoxila o la cantidad indi-
cada en la monografa. Aadir perlas de vidrio y 6 ml de
cido yodhdrico. Humedecer la junta esmerilada con ci-
do yodhdrico y conectar al condensador de aire. Conectar
las dos partes del aparato por la junta de bola utilizando
grasa de silicona para sellado. Ajustar el influjo de gas por
el tubo B suficiente para formacin de dos burbujas por
segundo en el lavador de gas Y. Calentar gradualmente por
20 30 minutos el baln hasta 150 C y mantener el calen-
tamiento en esa temperatura por 60 minutos. Despus del
5
enfriamiento del baln hasta temperatura ambiente bajo
flujo de gas, verter la preparacin contenida en el tubo de
absorcin en matraz con capacidad de 500 ml provisto de
tapa esmerilada conteniendo 10 ml de la solucin acuosa
de acetato de sodio trihidratado (1:5). Lavar las paredes del
tubo con agua, transferir el agua de lavado para el matraz
y diluir para 200 ml con agua. Aadir cido frmico gota a
gota con agitacin hasta la desaparicin del color rojizo del
bromo y aadir 1 ml ms de cido frmico. Aadir 3 g de
yoduro de potasio y 15 ml de cido sulfrico M; tapar, agi-
tar suavemente y dejar en reposo por 5 minutos. Titular el
yodo liberado con tiosulfato de sodio 0,1 M SV empleando
almidn SI como indicador. Realizar titulacin en la pre-
paracin en blanco procediendo de la manera descrita omi-
tiendo la muestra y efectuar correccin si necesario. Cada
ml de Na2S2O3 0,1 M SV equivale a 0,5172 mg de metoxila
(CH3O).
 188 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
5.3.3.7 DETERMINACIN DE DIXIDO
DE AZUFRE
El mtodo comprende el arrastre de SO2 liberado en el ca-
lentamiento de la sustancia en medio acuoso acidificado
por corriente de dixido de carbono seguido de la absor-
cin del SO2 en solucin de perxido de hidrgeno. El ci-
do sulfrico formado en el proceso es titulado con hidrxi-
do de sodio estandarizado.
APARATOS
El aparato (Figura 1) empleado en la determinacin de
dixido de azufre consiste de baln de fondo redondo tritu-
bulado de capacidad de 1000 a l500 ml. A una de las salidas
laterales del baln se acopla dispositivo destinado al influjo
de dixido de carbono. Embudo de adicin de capacidad de
100 ml y condensador de reflujo vertical ambos provistos
de juntas esmeriladas son acoplados a otra salida lateral y
la salida central, respectivamente. En la extremidad supe-
rior del condensador es conectado el tubo de absorcin D.
Figura 1 - Aparato empleado en la determinacin de dixido de azufre.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
PROCEDIMIENTO
Transferir para el baln cerca de 300 ml de agua, fijar el
baln al aparato y promover influjo lento y uniforme de
dixido de carbono durante 15 minutos. Aadir al tubo de
absorcin 20 ml de perxido de hidrgeno 3% (p/v) SR
previamente neutralizado con hidrxido de sodio 0,1 M
utilizando como indicador azul de bromofenol SI. Sin in-
terrumpir el influjo del gas, retirar momentneamente el
embudo, aadir al baln, exactamente, cerca de 50 g de
muestra y 200 ml de agua. Aadir, gota a gota, 50 ml de
cido clorhdrico 6 M por el embudo y mantener en reflujo
por 45 minutos. Transferir, cuantitativamente, por lavado
con agua, el lquido contenido en el tubo de absorcin para
matraz de 250 ml y titular con hidrxido de sodio 0,1 M SV
empleando como indicador azul de bromofenol SI. Reali-
zar titulacin en la preparacin en blanco procediendo de
la manera descrita omitiendo la muestra y efectuar correc-
cin si necesario. Cada ml de hidrxido de sodio 0,1 M SV
equivale a 3,203 mg de dixido de azufre.

5.3.3.8 DETERMINACIN DEL ALCOHOL
5.3.3.8.1 Mtodo por destilacin
Ese mtodo debe ser usado en la determinacin de alcohol,
en solucin que contenga alcohol, a menos que en la mo-
nografa sea especificado otro mtodo. Es adecuado para
anlisis de la mayora de los extractos fluidos y tinturas.
PROCEDIMIENTO
Nota
Debe ser usado baln destilador con capacidad de dos a
cuatro, veces, el volumen, del lquido a ser calentado.
Durante todas las manipulaciones, tomar precaucin para
minimizar la prdida de alcohol por evaporacin.
Para evitar la ocurrencia de ebullicin violenta, aadir
fragmentos de material insoluble y poroso, tal como carbo-
nato de silicio o perlas de vidrio.
Los lquidos que formen demasiada espuma durante la
destilacin deben ser tratados previamente con cido fos-
frico, sulfrico o tnico, hasta reaccin fuertemente ci- sustancias voltiles, adems de alcohol y agua, tales como:
da o con ligero exceso de solucin de cloruro de calcio, o
pequea cantidad de parafina o adems aceite de silicona,
antes de iniciar a destilacin.
La velocidad de destilacin debe ser tal que permita la pro-
duccin de destilados lmpidos. Destilados turbios deben
ser clarificados por agitacin con talco o con carbonato de
calcio, precipitados y filtrados. Ajustar la temperatura del
filtrado y determinar el tenor de alcohol por la densidad.
Mtodo 1
Lquidos con menos de 30% de alcohol Transferir para
aparato destilador adecuado, por medio de pipeta, muestra
de, en el mnimo, 35 ml del lquido en el cual est siendo
determinado el tenor de alcohol, registrar la temperatura en
la cual el volumen fue medido. Aadir igual cantidad de
agua, destilar y recoger un volumen de destilado que sea
cerca de 2 ml menor que el volumen inicial de la muestra.
Ajustar la temperatura del destilado a aquella en que fue
medida la muestra y aadir agua suficiente hasta obtener el
volumen inicial de la muestra y homogeneizar. El destilado
debe ser lmpido o, como mximo, levemente turbio. De-
terminar la densidad del lquido a 20 C. Con el resultado,
evaluar el porcentaje, en volumen, de C2H5OH contenido
en el lquido examinado, por la Tabla Alcohomtrica.
Mtodo 2
Lquidos con ms de 30% de alcohol Proceder como
indicado en el mtodo anterior, con la siguiente modifi-
cacin: diluir la muestra con volumen de agua dos veces
mayor y recoger volumen de destilado cerca de 2 ml menor
que dos veces el volumen inicial de la muestra. Ajustar la
temperatura del destilado a aquella en que fue medida la
muestra y completar con agua a volumen igual a dos veces
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 189
el volumen inicial de la muestra. Mezclar y determinar la
densidad a 20 0C. La proporcin de C2H5OH, en volumen,
en ese destilado, evaluada por la densidad, es igual a la
mitad de aquella del lquido examinado.
Tratamientos especiales
cidos y Bases Voltiles Lquidos conteniendo bases vo-
ltiles deben ser tratados con cido sulfrico diluido SR,
hasta reaccin levemente cida. Si estn presentes cidos
voltiles, a la preparacin deber ser adicionado hidrxido
de sodio SR hasta reaccin levemente alcalina.
Glicerol Lquidos conteniendo glicerol deben ser aadi-
dos de volumen tal de agua que el residuo, despus de la
destilacin, contenga, como mnimo, 50% de agua.
Yodo Soluciones conteniendo yodo libre deben ser tra-
tadas antes de la destilacin con zinc pulverizado o deste-
idas con cantidad suficiente de solucin de tiosulfato de
sodio 10% (p/v) seguida de la adicin de algunas gotas de
hidrxido de sodio SR.
5
Otras sustancias voltiles Elixires, tinturas y preparacio-
nes similares que contengan proporciones apreciables de
aceites voltiles, cloroformo, ter, alcanfor etc., deben su-
frir, antes de la destilacin, uno de los tratamientos a con-
tinuacin.
1. Lquidos con menos de 50% de alcohol Mezclar la
muestra de 35 ml, exactamente medidos, con volumen
igual de agua, en embudo de separacin, saturando esa
mezcla con cloruro de sodio. Extraer los componentes
voltiles, agitando con porcin de 25 ml de hexano.
Transferir la camada inferior para un segundo embudo
de separacin y repetir la extraccin con dos porciones
ms de hexano. Reunir las porciones de hexano y tratar
con 3 porciones de 10 ml de solucin saturada de clo-
ruro de sodio. Reunir las soluciones salinas y destilar
recolectando volumen de destilado correspondiente a
dos veces el volumen inicial de la muestra.
2. Lquidos con ms de 50% de alcohol Medir una
muestra y diluir con agua de modo que contenga apro-
ximadamente 25% de alcohol y que su volumen final
sea cerca de 35 ml. a continuacin proceder como indi-
cado para lquidos con menos de 50% de alcohol, pro-
siguiendo a partir de saturando esa mezcla con cloruro
de sodio.
En la preparacin de colodin para destilacin, usar agua
en lugar de la solucin saturada de cloruro de sodio, indi-
cada anteriormente. Si no fue empleado en la muestra el
tratamiento con hexano y el destilado obtenido es turbio
(debido a la presencia de aceites voltiles presentes en pe-
queas proporciones), l puede ser clarificado y adecuado
para la determinacin de la densidad, por agitacin con
cerca de 1/5 de su volumen de hexano o por filtracin a
travs de fina camada de talco.
 190 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
5.3.3.8.2 Mtodo por cromatografa a gas
Proceder de acuerdo con las especificaciones generales
para Cromatografa a gas (5.2.17.5). Usar aparato eficiente
para la determinacin cuantitativa de alcohol.
Solucin estndar
Para lquidos conteniendo ms que 10% de alcohol, prepa-
rar dos soluciones estndar de alcohol en agua, de manera
que las concentraciones sean, respectivamente, cerca de
5% abajo (solucin estandar1) y cerca de 5% arriba (so-
lucin estndar 2) de la concentracin de alcohol esperada
en la muestra bajo anlisis. Determinar la densidad de cada
una de las soluciones estndar a 20 C (5.2.5) y obtener
la concentracin exacta de C2H5OH por la Tabla Alcoho-
mtrica. Para lquidos conteniendo menos que 10% de al-
cohol, preparar, exactamente, dos soluciones estndar de
alcohol, de manera que las concentraciones sean, respecti-
vamente, cerca de 1% menor y cerca de 1% mayor que la
concentracin, esperada, diluyendo con agua. Determinar
las densidades de las soluciones del mismo modo que las
anteriores.
5 EQUIPO
Bajo condiciones tpicas, el instrumento contiene una
columna de 2 m x 4 mm cargada con macrogol (polieti-
lenglicol) 400 a 20% en slice cromatogrfica calcinada.
La columna es mantenida en la temperatura de 100 C; el
inyector es equipado con filtro para slidos y es mantenido
a 160 C; como conductor se usa gas inerte, como helio,
fluyendo con caudal de cerca de 60 ml por minuto.
PROCEDIMIENTO
Proceder con la muestra y cada una de las soluciones es-
tndar como sigue: transferir 25 ml para recipiente ade-
cuado de tapn esmerilado, aadir 1,0 ml del estndar in-
terno (acetona, a menos que especificado diferentemente
en la monografa) para cada 6% de alcohol estimado en la
muestra y mezclar. Aadir agua solamente se es necesario
para efectuar la solucin. Inyectar cantidad, apropiada de
la solucin, en el aparato. Calcular la relacin entre el rea
bajo el pico del alcohol y el rea bajo el pico del estndar
interno en los cromatogramas. Calcular el porcentaje de al-
cohol en la muestra por la frmula
P1 (Y Z + P2 (Z X)
(Z X)
en que
P1 = porcentaje de alcohol en la solucin estndar 1,
P2 = porcentaje de alcohol en la solucin estndar 2,
X = relacin entre el rea bajo el pico del alcohol y el rea
bajo el pico del estndar interno de la solucin estndar 1,
Y = relacin entre el rea bajo el pico del alcohol y el rea
bajo el pico del estndar interno de la solucin estndar 2
Z = relacin entre el rea bajo el pico del alcohol y el rea
bajo el pico del estndar interno de la solucin Muestra.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Si el valor obtenido esta fuera de la banda de los valores
incluidos por las soluciones estndar, repetir el procedi-
miento usando aquellas que dieron una banda que incluya
el valor de la muestra.
5.3.3.9 ANLISIS DE AMINOCIDOS
El anlisis de aminocidos es realizado por medio de dos
etapas: hidrlisis de las ligaciones peptdicas y evaluacin
de cada aminocido en el hidrolizado resultante.
Tcnica para hidrlisis de protenas y pptidos aislados
1. Transferir cantidad de muestra conteniendo de 4 a 10
mg de protena para tubo de ensayo de 20 x 150 mm
con tapa de rosca y disco de politetrafluoroetileno pre-
viamente lavado con hidrxido de sodio 0,2 M, enjua-
gado y seco en estufa.
2. Si la muestra fuese slida, aadir 5 de cido clorhdrico
y 5 ml de agua. Si la muestra fuese lquida, aadir cido
clorhdrico de modo que la concentracin final de cido
clorhdrico sea 6 M.
3. Retirar el oxgeno del tubo por flujo de nitrgeno du-
rante 2 3 minutos. Cerrar enseguida el tubo con disco
y tapa a rosca.
4. Colocar el tubo en la posicin vertical en estufa regula-
da a 110 C 2 C mantenindolo por 22 h.
5. Retirar el tubo de la estufa y, adems en la vertical, res-
friarlo en agua corriente o bao de hielo.
6. Transferir, cuantitativamente, el contenido del tubo
para baln volumtrico de 10 ml y completar el volu-
men con agua destilada.
7. Si hubiere algn residuo o precipitado, removerlo por
centrifugacin y filtracin en placa de vidrio sinteriza-
do, o membrana filtrante de 0,45 m de porosidad.
8. Pipetear 5,0 ml de la solucin, transferir para baln de
fondo redondo y retirar el solvente la presin reducida
a, como mximo, 50 C.
9. Aadir al residuo del baln 10 ml de agua destilada y
re-evaporar. Esa operacin debe ser repetida dos veces
ms, o hasta que el residuo no presente olor de cido
clorhdrico.
10. Solubilizar la pelcula seca formada por el hidrolizado
en volumen adecuado de tampn citrato pH 2,2 (0,20
M en Na+). La solucin resultante de aminocidos debe
entonces ser mantenida en frasco de vidrio, tapado y
bajo refrigeracin hasta la realizacin del anlisis.

Tcnica para hidrlisis de muestras con bajo tenor de
protena conteniendo carbohidratos y/o lpidos
1. Transferir cantidad de muestra que contenga 10 mg de
protena para baln de 150 ml de fondo redondo y boca
esmerilada.
2. Aadir al medio 40 ml de cido clorhdrico 6 M y algu-
nas perlas de vidrio.
3. Conectar condensador de reflujo e iniciar el calenta-
miento del baln usando manta elctrica. Mantener la
suspensin bajo ebullicin constante y suave por 24 h.
4. Enfriar hasta la temperatura ambiente y transferir,
cuantitativamente, el contenido para baln volumtrico
de 50 ml completando el volumen con agua destilada.
5. Seguir las dems etapas conforme los tems 7 a 10 de
la tcnica anterior.
Mezclas de aminocidos en solucin (sueros) o en
preparaciones farmacuticas
1. Diluir, adecuadamente, la solucin con tampn citrato
pH 2,2 (0,20 M en Na+) pudiendo ser analizada en se-
guida.
2. Caso est en la forma de polvo, o comprimido, solubi-
lizar la muestra en cido clorhdrico 0,1 M.
3. Transferir el material para baln volumtrico y comple-
tar el volumen con el mismo tampn arriba.
4. Filtrar la solucin y mantener bajo refrigeracin (4 C)
hasta ser analizada.
Tcnica de hidrlisis con oxidacin de cistena y
metionina
Debido a prdidas durante la hidrlisis cida de protenas,
los aminocidos sulfurados son preferentemente analiza-
dos por medio de sus respectivos derivados oxidados. La
oxidacin es promovida por cido perfrmico, que con-
vierte cistena y cistena en cido cisteico y metionina en
metionina / sulfona, ambos resistentes a las condiciones de
hidrlisis.
1. Preparar el cido perfrmico acrecentando 1 ml de
perxido de hidrgeno 30 volmenes a 9 ml de cido
frmico.
2. Agitar ligeramente la solucin mantenindola ensegui-
da en reposo por 1 h a temperatura ambiente.
3. Enfriar el cido perfrmico formado en bao de hielo.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 191
4. Pesar la muestra conteniendo 10 mg de protena en ba-
ln de fondo redondo de 25 ml y aadir 2 ml de cido
perfrmico helado.
5. Mantener la mezcla en bao de hielo durante 4 h, si la
muestra fuese soluble, o 16 h, se fuese insoluble.
6. Aadir 0,5 ml de cido bromhdrico 40% para retirar el
exceso de cido perfrmico.
7. Acoplar el baln a evaporador rotatorio y retirar por
medio de presin reducida el bromo residual haciendo
pasar los vapores por solucin de hidrxido de sodio M.
8. Proceder a la hidrlisis como descrito anteriormente.
Separacin y anlisis cuantitativo de aminocidos
aislados
La separacin de los aminocidos en los hidrolizados es,
normalmente, realizada por cromatografa de cambio ini-
co por medio de resinas de poliestireno sulfonado en ana-
lizadores de aminocidos. En esos aparatos, despus de la
5
separacin, los aminocidos eluidos de las columnas cro-
matogrficas forman sustancias de coloracin azul/violeta
por la reaccin con ninhidrina. La determinacin cuanti-
tativa est hecha espectrofotomtricamente. En el uso de
autoanalizadores de aminocidos, deben ser seguidas las
especificaciones de los respectivos fabricantes.
5.3.3.10 ENSAYO YODOMTRICO DE
ANTIBITICOS
Este ensayo yodomtrico de antibitico se destina a la do-
sificacin de frmacos antibiticos penicilmicos y de sus
productos farmacuticos elaborados, para los cuales la titu-
lacin yodomtrica es particularmente adecuada.
Preparacin estndar
Disolver cantidad adecuada, exactamente pesada, de la
sustancia qumica de referencia (SQR), previamente dese-
cada, especificada en la monografa individual, utilizando
el solvente descrito en la Tabla 1 o conforme descrito en
la monografa. Diluir, cuantitativamente, con el mismo sol-
vente, para obtener solucin con concentracin final cono-
cida, especificada en la Tabla 1 o conforme descrito en la
monografa. Transferir 2,0 ml de esta solucin para matraz
de 250 ml con tapa.
Preparacin muestra
A menos que especificado de otra forma en la monografa
individual, disolver cantidad adecuada, exactamente pe-
sada, de la muestra, utilizando el solvente descrito en la
Tabla 1. Diluir, cuantitativamente, con el mismo solvente,
para obtener solucin con concentracin final conocida, es-
pecificada en la Tabla 1. Transferir 2,0 ml de esta solucin
para matraz de 250 ml con tapa.
 192 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 1 - Solventes e concentraes finais.

Antibitico Solvente* Concentracin final
Amoxicilina trihidratada Agua 2,00 mg/ml
Ampicilina Agua 2,50 mg/ml
Ampicilina sdica Solucin 1 2,50 mg/ml
Ampicilina trihidratada Agua 2,50 mg/ml
Bencilpenicilina benzatina Solucin 1 4000 U/ml
Bencilpenicilina potsica Solucin 1 4000 U/ml
Bencilpenicilina procana Solucin 1 4000 U/ml
Bencilpenicilina sdica Solucin 1 4000 U/ml
Cloxacilina sdica Agua 2,50 mg/ml
Ciclacilina Agua 2,00 mg/ml
Dicloxacilina sdica Solucin 1 2,50 mg/ml
Fenoximetilpenicilina potsica Solucin 1 2,50 mg/ml
Feneticilina potsica Solucin 1 2,50 mg/ml
Meticilina sdica Solucin 1 2,50 mg/ml
Nafcilina sdica Solucin 1 2,50 mg/ml
Oxacilina sdica Solucin 1 2,50 mg/ml
________
*A menos que especificado de otra forma, la Solucin 1 es aquella definida en la seccin Soluciones en Ensayo microbiolgico de antibiticos (5.5.3.3),
excepto que la esterilizacin no es necesaria.

5 5.4 MTODOS DE
PROCEDIMIENTO

Inactivacin y titulacin FARMACOGNOSIA

A cada matraz conteniendo, respectivamente, 2,0 ml de
las preparaciones estndar y muestra, aadir 2 ml de hi-
drxido de sodio 1,0 M, homogeneizar con movimientos
circulares y dejar en reposo por 15 minutos. Aadir 2 ml de
cido clorhdrico 1,2 M, 20,0 ml de yodo 0,005 M SV, tapar
inmediatamente y dejar en reposo por 15 minutos. Titular
con tiosulfato de sodio 0,01 M SV Prximo al punto final
de la titulacin, aadir 3 gotas de almidn SI y proseguir
con la titulacin hasta desaparicin del color azul.
Ensayo en blanco
Aadir 20,0 ml de yodo 0,005 M SV cada matraz conte-
niendo 2,0 ml de la preparacin estndar. Si la prepara-
cin estndar contiene amoxilina o ampicilina, aadir in-
mediatamente 0,1 ml de cido clorhdrico 1,2 M. Titular
con tiosulfato de sodio 0,01 M SV. Prximo al punto final
de la titulacin, aadir 3 gotas de almidn SI y proseguir
con la titulacin hasta desaparicin del color azul. Proce-
der de forma similar para matraz conteniendo 2,0 ml de la
preparacin muestra.
2(CP x PP)
F=
Vb Vi
5.4.1 EXAMEN VISUAL E
INSPECCIN MICROSCPICA
5.4.1.1 EXAMEN VISUAL, OLOR Y SABOR
La identidad, pureza y calidad de un material vegetal deben
ser establecidas mediante detallado examen visual, macros-
cpico y microscpico. Siempre que posible, el material
vegetal debe ser comparado con materia prima autntica,
oriunda de muestra perfectamente identificada en la Far-
macopea. La muestra que no sea semejante en color, con-
sistencia, olor y sabor debe ser descartada por no presentar
los requisitos mnimos especificados en las monografas.
La identificacin macroscpica de las drogas, cuando estn
enteras, es basada en la forma; tamao; color; superficie;
textura; fractura y apariencia de la superficie de fractura.
En virtud de que esas caractersticas de identificacin son
subjetivas y existen adulterantes muy parecidos, es necesa-
rio realizar, al mismo tiempo, anlisis microscpico y fsi-
co-qumico de la muestra. La inspeccin microscpica es
indispensable cuando el material est rasurado o en polvo.
Tamao

en que Medidas de largo, ancho y espesor deben coincidir con

Cp = concentracin, en mg/ml, de la sustancia qumica de
referencia en la preparacin estndar;
Pp = potencia, en g/mg o Unidades/mg, de la sustancia
qumica de referencia;
Vb = volumen del titulante, en ml, consumido en Ensayo
en blanco;
Vi. = volumen del titulante, en ml, consumido en Inactiva-
cin y titulacin.
aquellas citadas en las monografas. Frutos y semillas pe-
queos exigen una muestra igual a diez unidades y poste-
riores clculos del promedio y del desvo estndar.
Color
Examinar la materia prima antes de cualquier tratamiento,
a la luz del da o bajo lmparas de largo de onda similares

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


a los de la luz del da. El color de la muestra debe ser com-
parado con el material de referencia.
Superficie, textura y fractura
Examinar la materia prima antes de cualquier tratamiento.
Cuando necesario, utilizar lente de cinco hasta diez aumen-
tos. Cuando indicado en la monografa, humedecer con
agua o reactivo especificado para observar caractersticas
de la superficie de fractura. Tocar el material para verifi-
car se es blando o duro, doblar y partir el material para la
obtencin de informaciones cuanto a la fragilidad y apa-
riencia de la fractura, si es fibrosa, lisa, rugosa, granulada,
entre otras.
Olor
Antes de verificar el olor del material, certificarse de que
no existe riesgo. Colocar una pequea muestra en la palma
de la mano o en recipiente de vidrio e inhalar despacio y
repetidamente. Si el olor es indistinto, presionar parte del
material entre los dedos e inhalar nuevamente. Cuando la
monografa indique material txico, colocar un poco de
material aplastado en agua caliente. Primeramente, de-
terminar la intensidad del olor: ninguno; suave; distinto o
fuerte y, a continuacin, la sensacin causada por el olor:
aromtico; frutado; mofado o rancio. Cuando sea posible,
es importante la comparacin del olor con sustancia defi-
nida, como, por ejemplo, menta pimenta debe tener olor
similar al mentol y clavo de olor, similar al eugenol.
Sabor
Probar el sabor apenas cuando exigido en la monografa.
5.4.1.2 PREPARACIN DEL MATERIAL
PARA ANLISIS MICROSCPICA
ABLANDAMIENTO DEL MATERIAL
Los rganos y tejidos vegetales empleados normalmente se
presentan secos, y para ser observados al microscopio, es
conveniente primero ablandarlos mediante tratamiento con
agua caliente. El tiempo necesario para el ablandamiento
de cada rgano vegetal o sus partes vara de acuerdo con
su textura. Tratndose de rgano recin colectado, apenas
los de consistencia ms firme necesitan de tal tratamiento.
Mtodo de hidratacin para materiales secos
Colocar la muestra en solucin de hidratacin, preparada
con cinco partes de agua, cuatro partes de etanol, una par-
te de glicerina y cinco gotas de detergente comercial para
cada 200 ml de solucin, en estufa a 60 C, por, como m-
nimo, 48 horas.
EJECUCIN DE LOS CORTES
Una vez ablandados, proceder a la preparacin de los cortes
de los rganos vegetales o sus partes. Las secciones pue-
den ser realizadas con el auxilio de objeto cortante como
navaja, hoja de afeitar o bistur, para cortes a mano. A fin
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 193
de ser seccionada, incluir la muestra en material adecuado,
que permita fijar el fragmento. Secciones de mejor calidad
pueden ser obtenidas con el empleo de micrtomos. Hay,
bsicamente, tres tipos de micrtomos: los de congela-
miento, usados para los materiales ms frgiles; los rotati-
vos, para cortes en serie de material incluido en parafina; y
los de gua, para aquellos materiales ms resistentes, como
ramas, partes de tallos y de races. En ese ltimo caso, un
mtodo relativamente fcil de preparado del material a ser
seccionado consiste en su inclusin en macrogol soluble en
agua o en historresina.
Inclusin del material en parafina
Hervir la muestra en agua, cuando seca, para ablandar
y retirar el aire;
deshidratar la muestra en serie de etanol diluido en
agua: 50, 70, 80, 96% y, por ltimo, en etanol absoluto;
transferir la muestra para mezcla de etanol absoluto y
xileno en la proporcin 3:1 (v/v) y, a continuacin, para
1:1 y 1:3;
transferir la muestra para xileno puro;
transferir la muestra para xileno en parafina en la pro-
5
porcin 1:1, mantenindola en estufa;
transferir la muestra para parafina calentada, para que
ocurra la infiltracin, mantenindola en la estufa hasta
que permanezca depositada en el fondo del recipiente;
emblocar y dejar enfriar en recipiente con agua helada;
seccionar el bloque para introduccin en el micrtomo;
seccionar el material y colocar en lmina de vidrio pre-
viamente untada con adhesivo de Haupt o Bissing;
colocar las lminas sobre placa calentadora para disten-
der los cortes;
desparafinizar;
aguardar, como mnimo, una hora antes de colorear.
Inclusin del material en macrogol (polietilenglicol
PEG 4000 o PEG 6000)
Hervir la muestra en agua, cuando seca, para ablandar
y retirar el aire;
colocar la muestra en vaso de precipitados, contenien-
do macrogol a 20% (p/v);
marcar el vaso de precipitados, a partir de la superficie
del lquido, dividindolo en cinco partes aproximada-
mente iguales;
dejar el material en estufa a 65 C por 3 a 4 das;
cuando la solucin se evapore hasta 1/5 de su volumen
inicial, transferir la muestra para macrogol puro y fun-
dido donde debe permanecer durante 12 a 25 horas, en
estufa a 65 C;
retirar de la estufa, emblocar y dejar enfriar a tempera-
tura ambiente;
seccionar los bloques para introduccin en el micrto-
mo;
seccionar el material a seco;
lavar los cortes con agua y colorear.
Inclusin en historresina
Existen diferentes marcas de historresina en el mercado,
comercializadas en kits, siendo la metodologa para em-
 194 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
blocamiento caracterstica de cada fabricante. Obedecer al
manual de instrucciones. Todas contienen tres elementos
principales: una resina, un agente endurecedor y un agente
acelerador o catalizador. La mezcla y temperatura deben
seguir las especificaciones, para que haya completa inte-
raccin, obtenindose como producto final un polmero.
Los materiales vegetales deben ser previamente fijados y
deshidratados. Se sugiere que las secciones a ser emblo-
cadas sean inmersas en la resina durante una noche, para
que haya completa infiltracin. Slo despus de, sustituir
la resina de infiltracin por la mezcla de nueva porcin de
resina, agente endurecedor y agente acelerador. La resina
de infiltracin puede ser reutilizada de dos a cuatro veces,
debiendo entonces ser descartada. Los cortes son coloca-
dos sobre las lminas sin adhesivo. Colorear.
MTODOS DE COLORACIN
Los mtodos de coloracin pueden comprender la aplica-
cin de un slo colorante (coloracin simple) o de dos o
tres colorantes diferentes (coloracin compuesta).
Coloracin simples (algunos colorantes pueden ser
5
usados)
Solucin de safranina a 1% (p/v) en etanol: coloracin
de cutina, lignina y suberina.
Solucin de Verde rpido a 0,5% (p/v) en etanol: colo-
racin de celulosa.
Azul de Astra a 1% (p/v) en etanol: coloracin de com-
puestos pcticos de la laminilla media y pared.
Floroglucina SR: coloracin de lignina.
Coloracin compuesta (algunas mezclas de colorantes
que pueden ser usadas)
Safranina-Azul de Astra: coloree la lignina de rojo y la
celulosa de azul. Colocar la muestra en solucin acuosa
de safranina a 1% (p/v) de 5 a 25 minutos. Lavar dos
veces con agua destilada. Colocar en Azul de Astra por
10 a 25 minutos. Lavar dos veces con agua destilada.
Pasar por batera de etanol a 50%, 70%, 90%, 96%, y
etanol absoluto (dos veces), xileno. Montar en lminas
con blsamo del Canad o resina sinttica.
Safranina-Verde rpido: coloree la lignina de rojo y la
celulosa de verde. No desparafinizar las lminas. Colo-
car en solucin acuosa de safranina a 1% (p/v) por 10
a 20 minutos (o ms). Lavar en agua corriente. Colocar
en agua destilada por 1 minuto. Escurrir el agua de la
lmina. Colocar en Verde rpido a 0,5% (p/v) en etanol
de 10 a 40 minutos. Lavar en agua corriente. Colocar
en agua destilada por 1 minuto. Repetir la operacin.
Escurrir el agua de la lmina. Secar en placa calentado-
ra por 30 minutos. Retirar la parafina con xileno en dos
cambios de 5 minutos. Montar en lminas con blsamo
de Canad o resina sinttica.
PREPARADO Y MONTAJE DE LAS LMINAS
Los cortes histolgicos son montados, entre lmina y cu-
breobjetos, en agua, glicerol, hidrxido de potasio a 30%
(p/v), hidrato de cloral a 50% (p/v), u otro lquido cualquier
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
que posibilite la observacin. El glicerol es ms usado en
los estudios microqumicos de muclagos, goma, inulina
y aleurona. El hidrxido de potasio es agente diafaniza-
dor, teniendo accin sobre protenas, almidn, grasa, resi-
nas y materias colorantes. El hidrato de cloral, tambin, es
agente diafanizador y, a pesar de su accin ms lenta que
los hidrxidos alcalinos, tiene la ventaja de no disolver el
oxalato de calcio.
Dependiendo de la finalidad a que se destina, se pueden
montar los cortes en lminas para observacin inmediata o
en lminas dichas permanentes.
En las preparaciones para observacin, inmediata, despus
de seleccionados y coloridos, se montan los cortes en me-
dio adecuado, tomndose el cuidado de evitar la formacin
de burbujas de aire. Si el examen fuese ms prolongado, se
recomienda revestir los bordes del cubreobjetos de un luto
(sello), que puede ser esmalte de uas, blsamo de Canad
o solucin alcohlica de goma laca, para evitar la evapo-
racin del medio de montaje, todos ellos aplicables con el
auxilio de pincel suave y pequeo.
En las preparaciones, permanentes, despus de selecciona-
dos y coloridos, los cortes deben ser montados entre lmi-
na y cubreobjetos, con resina sinttica, blsamo de Canad
u otro medio conveniente. Se debe mantener el montaje
comprimido por medio de la aplicacin de pequeos pesos
sobre el cubreobjetos, en posicin perfectamente horizon-
tal y sobre papel de filtro, con la finalidad de evitar posibles
excesos del medio de montaje.
MACERACIN DE LOS TEJIDOS
Secciones de tallos, races, cscaras u otras partes vegeta-
les ni siempre dan idea precisa de la naturaleza real de sus
clulas. Lo mismo acontece con materia prima comercia-
lizada, cuando rasurada o en polvo. Para revelar algunas
particularidades, como, por ejemplo, engrosamientos y
puntuaciones, se debe emplear uno de los mtodos indi-
cados para la disociacin de tejidos. En esos mtodos, la
estructura a ser estudiada es tratada con sustancias qumi-
cas capaces de disolver la laminilla media y, de esa forma,
posibilitar la separacin de las clulas.
Mtodo de disociacin de tejidos
Cortar el material en pequeos fragmentos o en lminas
con cerca de 300 nm de espesor y colocar en agua;
retirar todo el aire del material, hirviendo y enfriando
rpidamente;
macerar el material en solucin de Jeffrey. El tiempo de
maceracin vara con la naturaleza del material. Gene-
ralmente las clulas comienzan a separarse en cerca de
24 horas. si necesario, puede ser usado bastn de vidrio
de punta arredondada para amasar muy levemente el
material.
Habiendo dificultad en la separacin de las clulas, re-
novar la solucin maceradora;
lavar muy bien el material con agua de grifo, para reti-
rar los cidos. Verter la mezcla con el tejido macerado
para un embudo conteniendo papel de filtro;
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 195

cerrar la abertura inferior del embudo y cubrir el ma-
cerado con solucin acuosa de safranina a 1% (p/v),
durante tiempo suficiente para buena coloracin del
material (de 15 minutos a 6 horas);
abrir la punta del embudo y lavar nuevamente con agua,
hasta retirar el exceso de colorante;
deshidratar por la adicin de soluciones de etanol a
50%, 70%, 90% y etanol absoluto; retirar con pinza el
macerado del papel de filtro y colocar en xileno;
montar entre lmina y cubreobjetos, con resina sintti-
ca o blsamo de Canad;
mantener la lmina en posicin horizontal, sin embargo
no utilizar peso sobre el cubreobjetos, pues las clulas
maceradas son muy frgiles.
2. Anisoctico (clulas desiguales): los estomas son nor-
malmente rodeados por 3 o 4 clulas subsidiarias, sien-
do una de ellas, ntidamente, menor del que las otras;
3. Diactico (clulas transversales): los estomas son
acompaados por 2 clulas subsidiarias, cuyas pare-
des comunes forman un ngulo recto con las clulas de
guarda de los estomas;
4. Paractico (clulas paralelas): los estomas presentan de
cada lado una o varias clulas subsidiarias paralelas al
eje longitudinal del ostiolo y a las clulas de guarda de
los estomas.

OBSERVACIN DE LA EPIDERMIS FOLIAR

Separacin de la epidermis con solucin de Jeffrey

Para obtener epidermis foliar, seccionar pequeos pe-

dazos de hoja y colocarlos en solucin de Jeffrey dilui-
da en agua destilada a 50% (v/v), tapar el recipiente y
dejar de 12 a 48 horas, de acuerdo con la textura de la

5
hoja (la solucin atacar el mesfilo, dejando la epider-
mis aislada);
cuando el mesfilo est destruido, lavar las muestras
varias veces con agua destilada;
colocar una muestra sobre lmina, seccionar entre las
epidermis y colocar las dos partes de forma que las
frentes externas estn dirigidas para cima;
corar el material sobre la lmina con solucin etanlica
de safranina a 1% (p/v);
preparar la lmina con gelatina glicerinada y sellar.
Figura 1 - Tipos de estomas. 1. anomoctico;
Separacin de la epidermis con hidrato de cloral 2. anisoctico; 3. diactico; 4. paractico.

Usar fragmentos de hojas de cerca de 0,5 cm de ancho ndice estomtico

por 0,5 cm de largo;
colocar los fragmentos en un tubo de ensayo, adicio-
nando 5 ml de hidrato de cloral, calentar en bao mara
por cerca de 15 minutos o hasta que los fragmentos se
queden transparentes;
transferir los fragmentos para una lmina, cuidando
para que la frente abaxial quede dispuesta para arriba;
aadir una gota de hidrato de cloral y una gota de etanol
glicerinado y cubrir con cubreobjetos para impedir la
deshidratacin. Sellar.
Clasificacin de los estomas y determinacin del ndice
estomtico
La clasificacin empleada, didcticamente, para determi-
nacin de los tipos de estomas (Figura 1), se basa en la
forma y disposicin de las clulas que los rodean. Los tipos
bsicos son:
1. Anomoctico (clulas irregulares): los estomas estn
rodeados por un nmero variable de clulas que no di-
fieren, en general, en ninguna caracterstica de las otras
clulas fundamentales de la epidermis;
El ndice de estomas es calculado segn la ecuacin 100S
/ (E + S), siendo S el nmero de estomas en un rea deter-
minada de la superficie de la hoja y E el nmero de clulas
epidrmicas, incluyendo los tricomas, existentes en el mis-
mo campo microscpico observado. Para cada muestra de
hojas, efectuar y calcular la media de, como mnimo, diez
determinaciones.
ANLISIS DEL POLVO (IDENTIFICACIN DE MA-
TERIA PRIMA COMERCIALIZADA EN POLVO)
Colocar 1 o 2 gotas de agua, o glicerol-etanol (1:1) o
hidrato de cloral en una lmina;
aadir un poco del polvo y mezclar con un pincel fino
y suave;
cubrir con cubreobjetos y observar al microscopio;
otros fluidos pueden ser usados con la misma tcnica;
colorantes o reacciones histoqumicas pueden ser uti-
lizados.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 196 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
REACCIONES HISTOQUMICAS
Las reacciones pueden ser hechas con material fresco sec-
cionado o material cortado en micrtomo e incluido en pa-
rafina o macrogol, adicionndose una gota de los reactivos
sobre una lmina con una seccin de la muestra.
Almidn. Aadir una gota de yodo SR. El almidn adquie-
re coloracin azul o azul violeta.
Carbonato de calcio. Aadir cido actico a 6% (p/v) o
cido clorhdrico a 7% (p/v). Cristales o depsitos de car-
bonato de calcio se disuelven lentamente, con produccin
de efervescencia.
Hidroxiantraquinonas. Aadir una gota de hidrxido de
potasio a 5% (p/v). Las clulas que contienen 1,8-diidro-
xiantraquinonas colorean de rojo.
Inulina. Aadir 1 gota de 1-naftol SR y cido sulfrico.
Esferocristales de inulina se colorean de violeta rojizo y
se disuelven.
5
Lignina. Aadir 1 gota de floroglucina SR, calentar rpi-
damente la lmina y aadir una gota de cido clorhdrico a
25% (p/v). La lignina se torna roja.
Lpidos. Aadir Sudan III SR o Sudan IV SR por 10 mi-
nutos, lavar rpidamente con etanol a 70% (v/v). Lpidos,
cutina y suberina se colorean de naranja rojizo.
Muclagos. Aadir 1 gota de tinta china sobre muestra
seca. El muclago aparece como fragmentos esfricos di-
latados y transparentes sobre un fondo negro. La caracte-
rizacin, tambin, puede ser realizada por la adicin de 1
gota de tionina SR a la muestra seca, dejando reposar por
15 minutos, seguida de lavado en etanol a 20% (v/v). El
muclago se torna violeta rojizo (lignina y celulosa toman
color azul o azul violeta).
Tabla 2 - Nmero de embalajes a ser muestreadas de acuerdo con el nmero de embalajes existentes.
Nmero de embalajes
1a3
4 a 10
11 a 20
21 a 50
51 a 80
81 a 100
Ms de 100
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Oxalato de calcio. Cristales de oxalato de calcio son in-
solubles en cido actico a 6% (p/v) y solubles en cido
clorhdrico a 7% (p/v), sin producir efervescencia.
Protenas. Aadir ninhidrina a 0,5% (p/v) en etanol ab-
soluto, y mantener a 37 C por 24 horas. Lavar en etanol
absoluto y en agua destilada, aadir fucsina descolorida SR
y dejar en contacto por 10 a 30 minutos. Lavar en agua y
aadir bisulfito de sodio a 2% (p/v), dejar en contacto por
1 a 2 minutos. Lavar en agua corriente de 10 a 20 minutos,
deshidratar y montar la lmina. Las protenas se colorean
de rojo prpura. Realizar ese procedimiento solamente con
material fresco.
Saponinas. Aadir una gota de cido sulfrico. Ocurre una
secuencia de color amarillo, seguida de color rojo y, final-
mente, color violeta o azul verdoso.
Taninos. Aadir cloruro frrico a 10% (p/v) y una pequea
cantidad de carbonato de sodio, dejar en contacto por 2 a 3
minutos, lavar con agua destilada. Los taninos se colorean
de azul verdoso.
5.4.2 MTODOS DE ANLISIS
DE DROGAS VEGETALES
5.4.2.1 MUESTREO
Los procedimientos de muestreo especificados tienen en
consideracin tres aspectos: (a) nmero de embalajes que
contienen la droga; (b) grado de divisin de la droga y (c)
cantidad de droga disponible.
NMERO DE EMBALAJES
Examinar la integridad de los recipientes de embalaje y la
naturaleza de la droga en ellos contenida. Habiendo ho-
mogeneidad, tomar muestras conforme especificado en la
Tabla 1.
Nmero de embalajes a ser muestreados
Todos
3
5
6
8
10
10% del total de embalajes

GRADO DE DIVISIN Y CANTIDAD DE DROGA
Consistiendo la droga de componentes de dimensiones
inferiores a 1 cm o cuando ella se constituye de material
finamente fragmentado o pulverizado, emplear aparato de
muestreo (tubo provisto de dispositivo de cierre en la base).
Recolectar muestras de arriba para abajo y de abajo para
arriba (direccin vertical) y lateralmente (direccin hori-
zontal), sumando muestra de, como mnimo, 250 g hasta
100 kg de droga. Habiendo ms de 100 kg a muestrear, pro-
ceder al muestreo seguida de seleccin por cuarteamiento,
generando muestra de 250 g en el final del proceso.
Para drogas con dimensiones superiores a 1 cm, proceder al
muestreo manual. Combinar las muestras retiradas de cada
embalaje abierto, tomando la precaucin de no aumentar
su grado de fragmentacin durante la manipulacin. Para
cantidades de droga hasta 100 kg, a muestra debe consti-
tuirse de, como mnimo, 500 g. Habiendo ms de 100 kg
de droga a muestrear, proceder al muestreo seguida de se-
leccin por cuarteamiento, generando muestra de 500 g en
el final del proceso.
En ambos los casos, drogas con dimensiones inferiores o
superiores a 1 cm, es permitido muestrear cantidades infe-
riores a las especificadas arriba desde que la cantidad total
de droga disponible sea inferior a 10 kg. Todava, la mues-
tra final no deber ser inferior a 125 g.
CUARTEAMIENTO
Distribuir la droga sobre rea cuadrada, en cuatro partes
iguales. Con la mano distribuir la droga sobre el rea de
modo homogneo y rechazar las porciones contenidas
en dos cuadrados opuestos, en una de las diagonales del
cuadrado. Juntar las dos porciones restantes y repetir el
proceso, si necesario. Habiendo diferencia acentuada en
dimensiones de fragmentos, ejecutar separacin manual y
anotar los porcentuales aproximados de los componentes
de diferentes grados de divisin encontrados en la muestra.
5.4.2.2 DETERMINACIN DE MATERIA
EXTRAA
Los frmacos vegetales son exentos de hongos, de insectos
y de otras contaminaciones de origen animal. Salvo indica-
cin en contrario, el porcentaje de elementos extraos no
debe ser superior a 2% m/m. Materia extraa a la droga es
clasificada en tres tipos: (a) partes del organismo u orga-
nismos de los cuales la droga deriva, exceptuados aquellos
incluidos en la definicin y descripcin de la droga, arriba
del lmite de tolerancia especificado en la monografa; (b)
cualquier organismo, porciones o productos de organismos
adems de aquellos especificados en la definicin y des-
cripcin de la droga, en su respectiva monografa; y (c)
impurezas de naturaleza, minerales u orgnicas, no-inhe-
rentes a la droga.
PROCEDIMIENTO
Determinar la cantidad de muestra a ser sometida al ensayo
conforme especificado a continuacin.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 197
Races, rizomas, cascaras, planta entera y partes areas:
500 g;
hojas, inflorescencias, semillas y frutos: 250 g;
materiales particulados o fraccionados (peso medio in-
ferior a 0,5 g/componente): 50 g;
polvos: 25 g.
Recoger, por cuarteamiento, la cantidad de muestra espe-
cificada, a partir de la muestra obtenida, segn el procedi-
miento descrito anteriormente, y desparramarla en camada
fina sobre la superficie plana. Separar, manualmente los
materiales extraos a la droga, inicialmente a ojo y, en se-
guida, con auxilio de lente de aumento (cinco a diez veces).
Pesar el material separado y determinar su porcentaje con
base en el peso de la muestra sometida al ensayo.
5.4.2.3 DETERMINACIN DE AGUA EN
DROGAS VEGETALES
Tres mtodos son empleados para la determinacin de agua
en drogas vegetales: mtodo gravimtrico (desecacin),
mtodo azeotrpico (destilacin con tolueno) y mtodo
volumtrico (Karl Fischer). El primero, tcnicamente ms
5
simple y rpido, no es aplicable cuando la droga contiene
sustancias voltiles. Los dems requieren equipos especia-
les y comprenden tcnicas ms complejas.
PREPARADO DE LA MUESTRA
Reducir por corte, granulacin o fragmentacin drogas no
pulverizadas o trituradas para limitar la dimensin de sus
componentes a, como mximo, 3 mm de espesor. Semillas
y frutos, aunque sea de dimensiones inferiores a 3 mm, de-
ben ser quebrados. Evitar moledores de alta velocidad u
otros procedimientos que acarreen prdida de humedad de
la muestra.
Mtodo gravimtrico
Transferir cerca de 2 a 5 g, o lo especificado, en la mono-
grafa, exactamente pesados, de muestra preparada confor-
me instrucciones anteriores, para pesafiltro tarado, previa-
mente desecado en las mismas condiciones a ser adoptadas
para la muestra, durante 30 minutos. Desecar la muestra a
100105 C durante 5 horas, hasta peso constante. Calcular
el porcentaje de agua con relacin a la droga seca al aire.
Mtodo volumtrico
Proceder conforme descrito en Determinacin de agua
(5.2.20.1).
Mtodo azeotrpico
Proceder conforme descrito en Determinacin de agua
(5.2.20.2).
DETERMINACIN DE CENIZAS TOTALES
Las cenizas totales incluyen cenizas fisiolgicas y cenizas
no- fisiolgicas.
 198 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

PROCEDIMIENTO 5.4.2.7 DETERMINACIN DE ACEITES

VOLTILES EN DROGAS VEGETALES
Pesar, exactamente, cerca de 3 g de la muestra pulverizada,
o la cantidad especificada en la monografa, transferir para El tenor de aceites voltiles en drogas vegetales es deter-
crisol (de silicio o platino) previamente tarado. Distribuir minado por el proceso de destilacin por arrastre de vapor,
la muestra uniformemente en el crisol e incinerar aumen- con auxilio de equipo descrito a continuacin.
tando, gradualmente, la temperatura hasta, como mximo,
600 25 C, hasta que todo el carbn sea eliminado. Un El equipo (Figura 1), confeccionado en vidrio resistente,
gradiente de temperatura (30 minutos a 200 C, 60 minu- de calidad apropiada, comprende:
tos a 400 C y 90 minutos a 600 C) puede ser utilizado.
Enfriar en desecador y pesar. En los casos en que el carbn
no pueda ser eliminado totalmente, enfriar el crisol y hu-
medecer el residuo con cerca de 2 ml de agua o solucin
saturada de nitrato de amonio. Evaporar hasta sequedad en
bao mara y, en seguida, sobre chapa caliente, e incinerar
hasta peso constante. Calcular el porcentaje de cenizas con
relacin a la droga seca al aire.

DETERMINACIN DE CENIZAS INSOLUBLES EN

CIDO

Cenizas, insolubles en cido, constituyen, el residuo ob-

tenido en la ebullicin de cenizas totales, o sulfatadas con

5
cido clorhdrico diluido despus de filtrado; lavado e inci-
neracin. El mtodo se destina a la determinacin de slice
y constituyentes silcicos de la droga.

PROCEDIMIENTO

Hervir el residuo obtenido en la determinacin de cenizas

totales durante 5 minutos con 25 ml de cido clorhdrico a
7% (p/v) en crisol cubierto con vidrio de reloj. Lavar el vi-
drio de reloj con 5 ml de agua caliente, juntando el agua de
lavado al crisol. Recolectar el residuo, insoluble en cido,
sobre papel de filtro, exento de ceniza, lavndolo con agua
caliente hasta que el filtrado se muestre neutro. Transferir
el papel de filtro conteniendo el residuo para el crisol ori-
ginal, secar sobre chapa caliente e incinerar a cerca de 500
C hasta peso constante. Calcular el porcentaje de cenizas
insolubles en cido con relacin a la droga seca al aire.

5.4.2.6 DETERMINACIN DE CENIZAS Figura 1 - aparato para determinacin del

SULFATADAS
PROCEDIMIENTO
Calentar al rojo por 10 minutos un crisol de porcelana, de-
jar enfriar en un desecador y pesar. Colocar exactamente
cerca de 1,0 g de la droga en el crisol previamente tarado
y humedezca la droga con cido sulfrico concentrado y
carbonice en mechero de Bunsen. Humedezca nuevamente
con cido sulfrico concentrado, carbonice e incinere con
calentamiento gradual hasta 800 C. Enfre, pese nueva-
mente, incinere por 15 minutos ms. Repita ese procedi-
miento hasta que la diferencia entre dos pesajes sucesivas
no sea mayor que 0,5 mg.
tenor de aceites voltiles en drogas vegetales por el
proceso de destilacin por arrastre de vapor.
1. baln de fondo redondo de 500 ml a 1000 ml de ca-
pacidad, de cuello corto, provisto de una junta 24/40,
hembra;
2. condensador, adaptable al baln por medio de una junta
esmerilada 24/40, macho, construido en pieza nica de
vidrio, comprendiendo las partes descritas a continua-
cin, con las respectivas medidas:
2.1. tubo vertical (AC) de 210 a 260 mm de largo y
13-15 mm de dimetro interno;
2.2. tubo doblado, con segmentos (CD) y (DE) mi-
diendo 145-155 mm de largo cada y dimetro in-
terno de 8 mm;
2.3. condensador de bolas, tipo Allihn (FG), de 145-
155 mm de largo y dimetro interno de 15 mm en
las bolas y 10 mm en los estrechamientos;

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


2.4. tapn (junta esmerilada 14/20) (K) conteniendo
orificio de cerca de 1 mm de dimetro, que obtura
una salida lateral (K) provista de junta esmerilada
14/20 hembra, en la extremidad;
2.5. tubo (GH) de 30-40 mm de largo y 7-8 mm de
dimetro interno, formando las partes (HK) ngu-
lo (GHK) de 30 a 40;
2.6. alargamiento en forma de pera (J) de 3 ml de ca-
pacidad;
2.7. tubo (JL) provisto de escala graduada de 100-110
mm; de 3 ml de capacidad y subdividida en vig-
simos de mililitro;
2.8. alargamiento en forma de bola (L) de aproxima-
damente 2 ml de capacidad;
2.9. grifo de 3 vas;
2.10. tubo de conexin (BM) de 7-8 mm de dimetro,
provisto de tubo de seguridad. El punto de inser-
cin (B) se encuentra a 20-25 mm arriba de la
parte ms alta de la escala graduada;
3. fuente de calor que puede ser calentador elctrico o
quemador de gas dotado de regulacin fina de la llama;
4. soporte vertical adecuado.
Antes de la utilizacin, el aparato debe ser limpiado por
lavados repetidos y sucesivos con acetona, agua, mezcla
sulfocrmica y nuevamente agua. Despus de seco, debe
ser montado en local protegido de corrientes de aire. La
escala graduada debe ser medida y, si necesario, establecer
factor de correccin para cada aparato.
PROCEDIMIENTO
Introducir en el baln el volumen del lquido indicado en
la monografa y fragmentos de porcelana porosa o cuentas
de vidrio para regularizar la ebullicin. Adaptar el conden-
sador al baln. Retirar el tapn esmerilado (K) y, por la
abertura (K), introducir el agua hasta que esta comience a
escurrir en (B). Usando pipeta volumtrica, introducir xi-
leno, en la cantidad prescrita, apoyndose la punta de la
pipeta en el fondo de la salida lateral (K). Calentar el lqui-
do en el interior del baln hasta el inicio de la ebullicin
y destilar en la razn de 2 a 3 ml por minuto, o conforme
prescrito en la monografa.
Para determinar la velocidad de la destilacin, drenar el
agua con auxilio de grifo de tres vas, hasta que el menisco
est en el nivel del trazo de referencia inferior (Figura 2).
Cerrar el grifo y cronometrar el tiempo necesario para lle-
nar el volumen comprendido entre los trazos de referencia
inferior y superior (3 ml). Abrir el grifo y continuar la des-
tilacin por 30 minutos. Desligar el calentamiento, dejar
enfriar por 10 minutos y hacer la lectura del volumen de
xileno en el tubo graduado.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 199
trazo de
referencia
superior
trazo de
referencia
inferior
Figura 2 - Indicacin para determinar la velocidad de destilacin.
Introducir en el baln a cantidad de droga prescrita en la
monografa y destilar por arrastre de vapor, como descri-
to arriba, por el tiempo y en la velocidad indicada en la
monografa. Terminada la operacin, dejar enfriar por 10
minutos y leer el volumen del aceite esencial recogido en
el tubo graduado. Sustraer de la lectura el volumen del xi-
leno determinado anteriormente. La diferencia representa
la cantidad de aceite esencial contenido en la muestra. Cal-
cular el resultado en mililitros de aceite esencial por 100 g
de la droga.
5
5.4.2.8 DETERMINACIN DE ACEITES
FIJOS
La determinacin de aceites fijos se basa en su extraccin
por solvente que, despus de evaporado, deja como residuo
el aceite cuya cantidad es determinada por pesaje.
En el caso de que la muestra contenga tenor elevado de
componentes hidrosolubles (carbohidratos, urea, cido
lctico, entre otros), cabe pretratamiento de la muestra a
fin de evitar interferencia en la determinacin de materias
grasas. Para tanto, transferir la porcin de ensayo para em-
budo conteniendo papel de filtro, lavar con agua y secar el
residuo en estufa a 105 C durante 2 horas.
Emplear el aparato de Soxhlet (Figura 1). El equipo, con-
feccionado en vidrio resistente, de calidad apropiada, com-
prende baln de fondo redondo (A), con 500 ml a 1000 ml
de capacidad, conectado al extractor Soxhlet (B) y conden-
sador de reflujo (C).
 200 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
5
Figura 3 - Aparato de Soxhlet.
Antes de la utilizacin, el aparato debe ser limpiado por
lavados repetidos y sucesivos con acetona, agua, mezcla
sulfocrmica y, nuevamente, agua. Despus de seco, debe
ser montado en local protegido de corrientes de aire.
PROCEDIMIENTO
Transferir, exactamente, cerca de 10 g de droga previamente
desecada conforme descrito en Determinacin de agua en
drogas vegetales (5.4.2.3), Mtodo gravimtrico, y transferir
para aparato extractor de Soxhlet (B), cubrindola con algo-
dn desengrasado. Pesar el baln (A) limpio y seco (conte-
niendo fragmentos de porcelana o cuentas de vidrio) y mon-
tarlo en el aparato sobre bao mara, tomando la precaucin
de asegurar sellado en la junta esmerilada del baln (se re-
comienda operacin en campana). Transferir para el extrac-
tor ter de petrleo en cantidad suficiente para realizar tres
sifonajes y encajar el condensador de reflujo (C). Proceder a
la extraccin bajo calentamiento suficiente para mantener el
solvente en ebullicin moderada durante 4 horas.
Concluida la extraccin, aguardar enfriamiento, transferir el
contenido del cartucho para mortero de porcelana y juntar
cantidad aproximadamente igual de arena lavada y seca.
Pulverizar la droga y transferirla nuevamente, en el interior
del cartucho, para el extractor. Reiniciar y mantener a ex-
traccin en las condiciones arriba por perodo adicional de
2 horas. Desligar el baln del aparato y evaporar el solvente
(de preferencia por destilacin bajo corriente de dixido de
carbono). Transferir el baln para estufa a 105 C, enfriar y
pesar. Repetir la operacin hasta peso constante. Calcular el
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
porcentaje de aceites fijos en la droga con base en la masa de
droga pesada y en la masa de aceite obtenida.
5.4.2.9 DETERMINACIN DE 1,8-CINEOL
EN ACEITES ESSENCIAIS
La determinacin de cineol comprende la determinacin
de la temperatura de congelamiento (criometra) del com-
puesto de combinacin molecular entre cineol y el-cre-
sol-cresineol. Siendo esa temperatura proporcional al con-
tenido de cineol en el compuesto, es posible establecerse su
tenor por el anlisis de los datos registrados en la Tabla 1.
El mtodo es empleado en la dosificacin de cineol en
esencias de eucalipto y niaouli. Determinaciones en otras
esencias no son recomendadas sin comprobacin previa de
exactitud en vista de que algunos constituyentes del acei-
te esencial solubilicenel cresineol (mismo en la esencia de
eucalipto, hay riesgos de error cuando el contenido de al-
fa-terpineol es superior a 12,5%).
Errores, tambin, vienen de la presencia de humedad, sea
en la esencia o en el el-cresol. El el-cresol empleado debe
ser puro y seco, presentando punto de fusin superior a
30 C. Debe ser conservado en frasco hermtico, por ser
higroscpico.
PROCEDIMIENTO
Secar la muestra del aceite esencial en ensayo, agitndola
en mezcla con sulfato de sodio o con cloruro de calcio,
anhidros, en tubo de ensayo o en Matraz provisto de tapa
esmerilada. Dejar en contacto durante 24 horas y filtrar.
Transferir para tubo de ensayo (cerca de 15 mm de dime-
tro y 80 mm de altura) 3,0 g de aceite esencial, exactamen-
te, pesados y aadir 2,1 g de o-cresol en sobrefusin. Agitar
la mezcla con bulbo de termmetro (0 60 C, graduado
en dcimos de grado) suspenso sobre el tubo de modo que
la extremidad del bulbo no exceda el lmite de 5 mm de la
base del tubo y sin tocar en sus paredes, hasta induccin
de cristalizacin. Anotar la temperatura mxima observada
en el termmetro durante la cristalizacin. Calentar el tubo
a cerca de 5-10 C arriba de la temperatura leda e intro-
ducirlo en otro tubo mayor (cerca de 60 mm de dimetro
y 100 mm de altura) para crear camada de aire. Fijar el
tubo menor dentro del otro con auxilio de placas de corcho
adaptadas o por cualquier otro medio y sumergir el conjun-
to en bao de agua con temperatura controlada, mantenien-
do la temperatura cerca de 5 C abajo del punto de conge-
lamiento previamente anotado para el cresineol. Agitar la
mezcla con movimientos verticales del termmetro y, al
iniciarse la cristalizacin (turbacin del lquido), observar
a estabilizacin de la temperatura. Habiendo fluctuaciones
durante la cristalizacin, considerar siempre la temperatura
mxima leda durante el perodo de congelamiento.
Repetir la determinacin cuantas veces sea necesario para
que dos lecturas sucesivas den una variacin mxima de
0,1 C.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 201

Tabla 3 - Tenor de 1,8-cineol en aceites esenciales en funcin de la temperatura de congelamiento.

Temperatura (C) 0,0 0,1 0,2 0,3 04 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9
24 45,6 45,7 45,9 46,0 46,1 46,3 46,4 46,5 46,6 46,8
25 46,9 47,0 47,2 47,3 47,4 47,6 47,7 47,8 47,9 48,1
26 48,2 48,3 48,5 48,6 48,7 48,9 49,0 49,1 49,2 49,4
27 49,5 49,6 49,8 49,9 50,0 50,2 50,3 50,4 50,5 50,7
28 50,8 50,9 51,1 51,2 51,3 51,5 51,6 51,7 51,8 52,0
29 52,1 52,2 52,4 52,5 52,6 52,8 52,9 53,0 53,1 53,3
30 53,4 53,5 53,7 53,8 53,9 54,1 54,2 54,3 54,4 54,6
31 54,7 54,8 55,0 55,1 55,2 55,4 55,5 55,6 55,7 55,9
32 56,0 56,1 56,3 56,4 56,5 56,7 56,8 56,9 57,0 57,2
33 57,3 57,4 57,6 57,7 57,8 58,0 58,1 58,2 58,3 58,5
34 58,6 58,7 58,9 59,0 59,1 59,3 59,4 59,5 59,6 59,8
35 59,9 60,0 60,2 60,3 60,4 60,6 60,7 60,8 60,9 61,1
36 61,2 61,3 61,5 61,6 61,7 61,9 62,0 62,1 62,2 62,4
37 62,5 62,6 62,8 62,9 63,0 63,2 63,3 63,4 63,5 63,7
38 63,8 63,9 64,1 64,2 64,4 64,5 64,6 64,8 64,9 65,1
39 65,2 65,4 65,5 65,7 65,8 66,0 66,2 66,3 66,5 56,6
40 66,8 67,0 67,2 67,3 67,5 67,7 67,9 68,1 68,2 68,4
41 68,6 68,8 69,0 69,2 69,4 69,6 69,7 69,9 70,1 70,3
42 70,5 70,7 70,9 71,0 71,2 71,4 71,6 71,8 71,9 72,1

5
43 72,3 72,5 72,7 72,9 73,1 73,3 73,4 73,6 73,8 74,0
44 74,2 74,4 74,6 74,8 75,0 75,2 75,3 75,5 75,7 75,9
45 76,1 76,3 76,5 76,7 76,9 77,1 77,2 77,4 77,6 77,8
46 78,0 78,2 78,4 78,6 78,8 79,0 79,2 79,4 79,6 79,8
47 80,0 80,2 80,4 80,6 80,8 81,1 81,3 81,5 81,7 81,9
48 82,1 82,3 82,5 82,7 82,9 83,2 83,4 83,6 83,8 84,0
49 84,2 84,4 84,6 84,8 85,0 85,3 85,5 85,7 85,9 86,1
50 86,3 86,6 86,8 87,1 87,3 87,6 87,8 88,1 88,3 88,6
51 88,8 89,1 89,3 89,6 89,8 90,1 90,3 90,6 90,8 91,1
52 91,3 91,6 91,8 92,1 92,3 92,6 92,8 93,1 93,3 93,6
53 93,8 94,1 94,3 94,6 94,8 95,1 95,3 95,6 95,8 96,1
54 96,3 96,6 96,9 97,2 97,5 97,8 98,1 98,4 98,7 99,0
55 99,3 99,7 100,0

5.4.2.10 DETERMINACIN DEL NDICE
DE ESPUMA
Pesar, exactamente, 1 g del material vegetal reducido a pol-
vo fino (malla de 180 m, 5.2.11) y transferir para matraz
conteniendo 50 ml de agua hirviendo. Mantener bajo ebu-
llicin moderada durante 30 minutos. Enfriar, filtrar para
baln volumtrico de 100 ml. Completar el volumen, a tra-
vs del filtro, hasta 100 ml.
Distribuir el decocto obtenido, en 10 tubos de ensayo con
tapa (16 mm de dimetro por 16 cm de altura), en serie
sucesiva de 1, 2, 3, hasta 10 ml, y ajustar el volumen del
lquido en cada tubo a 10 ml con agua. Tapar los tubos y
agitarlos con movimientos verticales por 15 segundos, con
dos agitaciones por segundo. Dejar en reposo por 15 minu-
tos y medir la altura de la espuma.
Si, en cualquiera de los tubos, la altura de la espuma medi-
da es 1 cm, la diluicin del material vegetal en ese tubo (A)
es el ndice observado. Si ese tubo es el primero o segundo
en la serie, es necesario hacer una diluicin intermediaria,
por el mismo mtodo descrito anteriormente, para obtener
un resultado ms preciso.
Si la altura de la espuma es mayor que 1 cm en todos los
tubos, el ndice de espuma es mayor del que 1000. En ese
caso, la determinacin precisa ser hecha con una nueva se-
rie de diluiciones del decocto para obtenerse un resultado
preciso.
El ndice de espuma es calculado segn a ecuacin 1000/A,
siendo A el volumen, en mililitros, del decocto usado para
preparacin de la diluicin en el tubo donde la espuma fue
observada.

Si la altura de la espuma de todos los tubos es inferior a 1

cm, el ndice de espuma es menor que 100.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 202 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
5.4.2.11 DETERMINACIN DE
SUSTANCIAS EXTRAIBLES POR
ALCOHOL (EXTRACTO ALCOHLICO)
MTODO A: EXTRACCIN POR SOXHLET
Pesar, exactamente, cerca de 2 g de la droga y transferir
para cartucho del extractor de Soxhlet, previamente tarado
y seco. Introducir en el baln del extractor 0,2 g de hi-
drxido de sodio y etanol absoluto en cantidad suficiente.
Extraer por 5 horas, retirar el cartucho con el residuo y
secarlo en estufa a 105 C por 30 minutos. Pesar el residuo
seco y calcular el tenor de sustancias extraibles por etanol
por diferencia entre el peso de la muestra y el peso del
residuo seco. Referir el resultado con relacin a la droga
seca (Determinacin de agua en drogas vegetales, 5.4.2.3).
MTODO B: EXTRACCIN EN CALIENTE
Pesar un Matraz de 250 ml, con boca esmerilada, transferir
hacia l, exactamente, cerca de 4,0 g de droga
vegetal seca, finamente, pulverizada. Aadir 100 ml de
5
agua y pesar para obtener el peso total, incluyendo el fras-
co. Tapar, agitar bien y dejar descansar por 1 h. Acoplar un
condensador de reflujo y calentar por 1 h, enfriar y pesar.
Despus del reflujo, corrija el peso original con solvente
especificado en el ensayo para la droga vegetal. Mezclar
bien y filtrar, rpidamente, por medio de un filtro seco.
Transferir 25 ml del filtrado para una cpsula de porcelana
tarada y evaporar hasta sequedad en bao de agua. Secar
105 C por 6 h, enfriar en desecador por 30 min y pesar,
inmediatamente. Calcular el porcentaje de materiales ex-
trados en mg/g de material seco.
MTODO C: EXTRACCIN A FRO
Pesar un matraz de 250 ml, con boca esmerilada y transfe-
rir hacia l, exactamente, cerca de 4,0 g de droga vegetal
seca, finamente, pulverizada. Macerar, con 100 ml de sol-
vente especificado, durante 6 h, agitando frecuentemente,
y dejar en reposo por 18 h. Filtrar, rpidamente, sin dejar
perder cualquier cantidad de solvente; transferir 25 ml del
filtrado para una cpsula de porcelana tarada y evaporar
hasta sequedad en bao de agua. Secar a 105 C por 6 h,
enfriar en desecador por 30 min y pesar inmediatamente.
Calcular el porcentaje de materiales extrados en mg/g de
material vegetal seco.
Tabla 1 - Diluiciones de clorhidrato de quinina para la prueba inicial en la obtencin del ndice de amargor.
1 2
ST (b) (ml) 4,2 4,4
Agua potable (ml) 5,8 5,6
Clorhidrato de quinina (mg/10 mL) (c) 0.042 0.044
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Para materiales extraibles con etanol, use la concentracin
especificada para el solvente en la prueba para cada dro-
ga vegetal. Para los materiales extraibles con agua, use el
agua como solvente. Use otros solventes, especificados en
cada monografa.
5.4.2.12 DETERMINACIN DEL NDICE
DE AMARGOR
Las propiedades amargas de los materiales vegetales son
determinadas por la comparacin de la concentracin del
umbral de amargor de un extracto con una solucin diluida
de clorhidrato de quinina. El valor del ndice de amargor
est expresado en trminos de unidades, equivalentes a una
solucin de clorhidrato de quinina a 0,05% (p/v).
Para la extraccin de los materiales vegetales y para el
lavado de la boca despus de cada degustacin, se debe
utilizar agua potable como vehculo. La dureza del agua
raramente tiene influencia significativa sobre el amargor.
La sensibilidad al amargor puede variar de individuo para
individuo o, inclusive para un individuo en situaciones
diferentes (cansancio, humo, ingestin de alimentos). Por
lo tanto, la determinacin de la concentracin umbral de
amargor del material a ser probado con clorhidrato de qui-
nina debe ser hecha por la misma persona, dentro de un
corto espacio de tiempo. La sensacin de amargor no es
percibida por toda la superficie de la lengua, pero es res-
tricta a las partes superior y lateral de la base de la lengua.
La determinacin de la concentracin limiar de la solucin
requiere entrenamiento del analista. Primeramente, es he-
cha la determinacin de la concentracin umbral del clor-
hidrato de quinina y, en seguida, la del material a ser proba-
do. Individuos insensibles a la sensacin amarga inducida
por una solucin conteniendo 0,058 mg de clorhidrato de
quinina en 10 ml de agua no son indicados para la realiza-
cin de la prueba.
La preparacin de la solucin-stock de material vegetal a
ser probado (ST) debe ser especificada en la monografa
correspondiente. En series nicas de prueba, la determi-
nacin siempre inicia con la menor concentracin (a me-
nos que otra orden sea especificada en la monografa) para
mantener la sensibilidad de las papilas gustativas.
PREPARADO DE LAS SOLUCIONES
Solucin stock y solucin diluida de clorhidrato de
quinina
3 4 5 6 7 8 9
4,6 4,8 5,0 5,2 5,4 5,6 5,8
5,4 5,2 5,0 4,8 4,6 4,4 4,2
0.046 0.048 0.050 0.052 0.054 0.056 0.058
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 203

Solucin stock y solucin diluida del material vegetal

Preparar la solucin stock como especificado en la monografa (ST). Utilizar 10 tubos de ensayo para la diluicin en serie,
como indicado en la Tabla 2 para la segunda prueba.

Tabla 2 - Diluiciones de la solucin stock para la segunda prueba en la obtencin del ndice de amargor.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
ST (b) (ml) 1,00 2,00 3,00 4,00 5,00 6,00 7,00 8,00 9,00 10,0
Agua potable (ml) 9,00 8,00 7,00 6,00 5,00 4,00 3,00 2,00 1,00 -

PROCEDIMIENTO
Despus de enjuagar la boca con agua potable, probar 10
ml de la diluicin, girndola en la boca, principalmente
cerca de la base de la lengua por 30 segundos. Siempre
comenzar con la solucin menos concentrada de la serie,
excepto cuando prescrito de manera diferente en la mo-
nografa. Si la sensacin de amargor no es ms sentida,
retirar la solucin y esperar 1 minuto para asegurarse que
no haya sensibilidad retardada. Enjuagar la boca con agua.
Aguardar, por lo menos, 10 minutos para probar la prxima
diluicin. La concentracin umbral de amargor es la dilui-
en que
V = valor de amargor, en unidades/g;
a = cantidad de material, en mg/ml, en la ST;
b = volumen de ST en 10 ml de la diluicin de la concenra-
cin umbral de amargor;
c = cantidad de clorhidrato de quinina, en mg/10 ml, en la
diluicin de la concentracin umbral de amargor.
5.4.2.13 DETERMINACIN DE LA
ACTIVIDAD HEMOLTICA
La actividad hemoltica de extractos vegetales, o de una

cin de menor concentracin en que el material adems
provoca sensacin de amargor. Despus de la primera serie
de pruebas, enjuagar bien la boca con agua, hasta que el
amargor no sea ms percibido y esperar, como mnimo, 10
minutos antes de hacer la segunda serie de pruebas.
En esa serie de pruebas, para mayor rapidez, es aconsejable
asegurar que la solucin en el tubo nmero 5 (contenien-
do 5 ml de ST en 10 ml de solucin) provoque sensacin
de amargor. Si es percibida, encontrar la concentracin de
amargor del material, probando las diluiciones en los tubos
de nmeros 1 a 4. Si la solucin en el tubo de nmero 5 no
provoca sensacin de amargor, encontrar la concentracin
umbral de amargor en los tubos de nmeros 6 a 10.
Todas las soluciones y el agua deben estar en una tempera-
tura entre 20 C y 25 C.
5
preparacin conteniendo saponinas, es determinada por
comparacin con la actividad de una referencia de saponi-
na con actividad hemoltica de 1000 unidades por gramo.
Una suspensin de eritrocitos es mezclada con volmenes
iguales de una diluicin en serie del extracto. La menor
concentracin a provocar hemlisis completa es determi-
nada despus de dejar el sistema en reposo por un perodo
especfico de tiempo. Una prueba similar es hecha simult-
neamente con solucin de referencia de saponina.
PROCEDIMIENTO
Para la preparacin de la suspensin de sangre, colocar ci-
trato de sodio a 3,65% (p/v) en un frasco con tapa hasta
1/10 de su capacidad. Agitar para mojar totalmente las pa-
redes del frasco y aadir sangre bovina fresco, con nueva
agitacin.

El ndice de amargor es calculado segn a ecuacin: La sangre, con citrato de sodio, as preparado puede ser
almacenada por 8 das a una temperatura entre 2 C y 4 C.
2000 x c
V=
(a x b)

Tabla 1 - Diluicin en serie del extracto vegetal para determinacin de la actividad hemoltica.
Tubo 1 2 3 4
Extracto vegetal (ml) 0,10 0,20 0,50 1,00
Tampn fosfato pH 7,4 (ml) 0,90 0,80 0,50 -
Suspensin de sangre (2%) (ml) 1,00 1,00 1,00 1,00

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 204 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Logo que los tubos sean preparados, invertirlos cuidadosa-
mente para mezclar, evitando la formacin de la espuma.
Despus de 30 minutos, agitar nuevamente y dejar descan-
sar por 6 horas a temperatura ambiente. Examinar los tubos
y anotar en cual diluicin ocurri hemlisis total, lo que
ser constatado en el lquido, lmpido, rojo y sin depsito
de eritrocitos.
Si, despus de 6 horas, todos los tubos convierten un lqui-
do lmpido y rojo, preparar una solucin diluida 10 veces y
hacer la prueba preliminar, como descrito arriba.
Si la hemlisis total no es observada en ninguno de los tu-
bos, repetir la prueba preliminar, usando un extracto ms
concentrado.

Si la hemlisis total es observada apenas en el tubo de n- Prueba principal

mero 4, usar el extracto vegetal original directamente para
la prueba principal.
Si la hemlisis total es observada en los tubos 3 y 4, diluir
dos veces el extracto original con tampn fosfato.
Preparar la diluicin en serie del extracto vegetal, diluyen-
do o no, como consta en la prueba preliminar, con tampn
fosfato pH 7,4 y suspensin de sangre (2%), utilizando 13
tubos de ensayo, conforme especificado en la Tabla 2.

Si la hemlisis total es observada en los tubos 2, 3 y 4, Hacer las diluiciones y evaluaciones como en la prueba
preparar una solucin diluida cinco veces, como descrito preliminar, observando los resultados despus de 24 horas.
arriba. Calcular la cantidad de material vegetal en gramos, o pro-
porcin en g/ml que produce hemlisis total (b).

Tabla 2 - Diluicin en serie del extracto vegetal con tampn fosfato y suspensin de sangre para la prueba principal
Tubos 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13

5
Extracto vegetal (o diluicin) (ml) 0,40 0,45 0,50 0,55 0,60 0,65 0,70 0,75 0,80 0,85 0,90 0,95 1,00
Tampn fosfato (ml) 0,60 0,55 0,50 0,45 0,40 0,35 0,30 0,25 0,20 0,15 0,10 0,05 -
Suspensin de sangre 2% (ml) 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00

Prueba para saponinas 5.4.2.14 DETERMINACIN DEL NDICE

Para eliminar el efecto de variaciones individuales en la
resistencia de suspensin de sangre a la solucin de sapo-
nina, preparar una serie de diluiciones de saponina de la
misma manera descrita anteriormente para el extracto ve-
getal. Calcular la cantidad de saponinas (g) que produce
hemlisis total (a).
Actividad hemoltica
La actividad hemoltica es calculada segn a ecuacin
1000 a / b
en que
1000 = actividad hemoltica de la saponina, en relacin a
la sangre bovina;
a = cantidad, en gramos, de saponina;
b = cantidad, en gramos, de material vegetal.
DE INTUMESCENCIA
El ndice de intumescencia o ndice de entumecimiento es
la medida del volumen ocupado por el entumecimiento de
1 g de la droga, por la adicin de agua u otro agente intu-
mescente, bajo condiciones definidas.
Conducir, simultneamente, en el mnimo, tres determina-
ciones. Pesar, exactamente, 1 g de la droga vegetal pulveri-
zada y colocar en probeta de 25 ml con tapa esmerilada. El
largo de la parte graduada debe ser de, aproximadamente,
125 mm y el dimetro, interno, prximo a 16 mm, subdivi-
dido en 0,2 ml, marcado de 0 a 25 ml, de forma ascendente.
Aadir 25 ml de agua, u otro agente definido, y agitar cada
10 minutos, por una hora. Dejar la mezcla reposar por 3
horas, a la temperatura ambiente. Medir el volumen, en mi-
lilitros, ocupado por el material vegetal acrecentado de la
muclago o cualquier otro material adherido sustrado del
volumen inicial de la droga. Calcular el valor promedio ob-
tenido a partir de las varias determinaciones individuales
realizadas y relacionar a 1 g de material vegetal.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


5.4.3 MTODOS DE
PREPARACIN Y ANLISIS DE
EXTRACTOS VEGETALES
5.4.3.1 MTODOS DE PREPARACIN DE
EXTRACTOS VEGETALES
5.4.3.1.1 Extractos fluidos (Extracta fluida)
DEFINICIN
Extractos fluidos son preparaciones lquidas en las cuales,
excepto cuando especificado de manera diferente, una parte
del extracto, en masa o volumen, corresponde a una parte,
en masa, de la droga seca, utilizada en su preparacin. Si
necesario, los extractos fluidos pueden ser estandarizados,
en trminos de concentracin del solvente, tenor de consti-
tuyentes o residuo seco. Si necesario, pueden ser aadidos
de conservantes inhibidores del crecimiento microbiano.
OBTENCIN
Los extractos fluidos pueden ser obtenidos por percolacin,
maceracin o por disolucin de extractos secos o blandos
utilizando como solvente nicamente etanol, agua o mez-
clas etanol/agua de proporcin adecuada. Si necesario, el
extracto obtenido puede ser filtrado. Cualquiera que sea el
proceso de obtencin, los extractos fluidos presentan com-
posicin y caractersticas comparables. La formacin de un
ligero sedimento durante el almacenamiento es aceptable,
siempre que la composicin del extracto no sufra modifi-
caciones significativas.
ENSAYOS DE PUREZA
Densidad relativa (5.2.5). Cuando sea el caso, los extrac-
tos fluidos deben cumplir con los lmites prescritos en la
monografa.
Determinacin de etanol (5.3.3.8). Determinar tenor de
etanol en extractos fluidos obtenidos con etanol o mezclas
etanol/agua. El tenor de etanol debe cumplir lo especifica-
do en la monografa.
Determinacin de metanol y 2-propanol (5.4.3.2.1). A me-
nos que especificado de manera diferente, los extractos
fluidos deben contener no ms de 0,05% (v/v) de metanol
y no ms de 0,05% (v/v) de 2-propanol.
Determinacin del residuo seco (5.4.3.2.2). El residuo
seco debe cumplir con lo especificado en la monografa.
EMBALAJE Y ALMACENAMIENTO
En recipientes bien cerrados, al abrigo de la luz.
ETIQUETADO
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 205
El rtulo debe contener las siguientes informaciones:
nomenclatura botnica de la droga que dio origen al
extracto;
si el extracto fue preparado con planta fresca (cuando
sea el caso);
composicin del solvente y el tenor de etanol en por-
centaje (v/v) en el solvente utilizado en la preparacin;
cuando sea el caso el tenor de etanol en porcentaje (v/v)
en el producto final;
tenor de principios activos y/o relacin droga/extracto
final;
nombre y concentracin de conservantes antimicrobia-
nos aadidos.
5.4.3.1.2 Extractos blandos (Extracta spissa)
DEFINICIN
Los extractos blandos son preparaciones de consistencia
pastosa obtenida por evaporacin parcial del solvente uti-
lizada en su preparacin. Son obtenidos utilizndose como
solvente nicamente etanol, agua o mezclas etanol/ agua
5
en la proporcin adecuada. Presentan, como mnimo, 70%
de residuo seco (p/p). En extractos blandos pueden ser aa-
didos conservantes para inhibir el crecimiento microbiano.
OBTENCIN
Los extractos blandos son obtenidos a partir de extractos
fluidos preparados empleando nicamente etanol, agua o
mezclas etanol/agua en la proporcin adecuada; despus
de evaporacin parcial del solvente. Presentan como mni-
mo 70 % de residuo seco (p/p).
ENSAYOS DE PUREZA
Residuo seco (5.4.3.2.2). El residuo seco debe cumplir con
lo especificado en la monografa.
EMBALAJE Y ALMACENAMIENTO
En recipientes bien cerrados, al abrigo de la luz.
ETIQUETADO
El rtulo debe contener las siguientes informaciones:
nomenclatura botnica de la droga que dio origen al
extracto;
nombre y cantidad del material inerte utilizado;
si el extracto fue preparado con planta fresca (cuando
sea el caso);
composicin del solvente y el tenor de etanol en por-
centaje (v/v) en el extracto lquido que le dio origen;
tenor de principios activos y/o relacin droga/extracto
final;
nombre y concentracin de conservantes antimicrobia-
nos aadidos.
 206 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
5.4.3.1.3 Extractos secos (Extracta sicca)
DEFINICIN
Extractos secos son preparaciones slidas obtenidas por
la evaporacin del solvente utilizado en su preparacin.
Presentan, como mnimo, 95% de residuo seco, calculados
como porcentaje de masa. Los extractos secos pueden ser
aadidos de materiales inertes adecuados.
Los extractos secos estandarizados tienen el tenor de sus
constituyentes ajustado por la adicin de materiales inertes
adecuados o por la adicin de extractos secos obtenidos
con la misma droga utilizada en la preparacin.
Cuando necesario, la monografa podr prescribir realiza-
cin de ensayo lmite para el solvente utilizado en la pre-
paracin.
OBTENCIN
Extractos secos son preparaciones slidas obtenidas por
evaporacin o vaporizacin del solvente. Independiente de
5
la tcnica de secado, deben presentar en el mnimo 95 % de
residuo seco, calculados como porcentaje de masa.
ENSAYOS DE PUREZA
Residuo seco (5.4.3.2.3). El residuo seco debe cumplir con
lo especificado en la monografa.
EMBALAJE Y ALMACENAMIENTO
En recipientes hermticamente cerrados, al abrigo de la
luz.
ETIQUETADO
El rtulo debe contener:
nomenclatura botnica de la droga que dio origen al
extracto;
nombre y cantidad del material inerte utilizado;
si el extracto fue preparado con planta fresca (cuando
sea el caso);
nombre del solvente y el tenor de etanol en porcentaje
(v/v) en el solvente utilizado en la preparacin;
tenor de principios activos y/o relacin droga / extracto
final.
5.4.3.1.3 Extractos secos (Extracta sicca)
DEFINICIN
Extractos secos son preparaciones slidas obtenidas por
la evaporacin del solvente utilizado en su preparacin.
Presentan, como mnimo, 95% de residuo seco, calculados
como porcentaje de masa. Los extractos secos pueden ser
aadidos de materiales inertes adecuados.
Los extractos secos estandarizados tienen el tenor de sus
constituyentes ajustado por la adicin de materiales inertes
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
adecuados o por la adicin de extractos secos obtenidos
con la misma droga utilizada en la preparacin.
Cuando necesario, la monografa podr prescribir realiza-
cin de ensayo lmite para el solvente utilizado en la pre-
paracin.
OBTENCIN
Extractos secos son preparaciones slidas obtenidas por
evaporacin o vaporizacin del solvente. Independiente de
la tcnica de secado, deben presentar como mnimo 95 %
de residuo seco, calculados como porcentaje de masa.
ENSAYOS DE PUREZA
Residuo seco (5.4.3.2.3). El residuo seco debe cumplir con
lo especificado en la monografa.
EMBALAJE Y ALMACENAMIENTO
En recipientes hermticamente cerrados, al abrigo de la
luz.
ETIQUETADO
El rtulo debe contener:
nomenclatura botnica de la droga que dio origen al
extracto;
nombre y cantidad del material inerte utilizado;
si el extracto fue preparado con planta fresca (cuando
sea el caso);
nombre del solvente y el tenor de etanol en porcentaje
(v/v) en el solvente utilizado en la preparacin;
tenor de principios activos y/o relacin droga / extracto
final.
5.4.3.2 MTODOS DE ANLISIS DE
EXTRACTOS VEGETALES
5.4.3.2.1 Determinacin de metanol y
2-propanol en extractos fluidos
Proceder a la destilacin del extracto conforme descrito en
Determinacin de etanol (5.3.3.8.1). Examinar el destilado
por Cromatografa a gas (5.2.17.5), utilizando cromat-
grafo provisto de detector de ionizacin de llama, columna
cromatogrfica de vidrio con 2 m de largo y 2 mm de di-
metro interno, empaquetada con copolmero de etilvinil-
benceno / divinilbenceno, partculas de 125 m a 150 m,
y nitrgeno para cromatografa como gas de arrastre, con
flujo de 30 ml/min. Mantener la temperatura de la columna
en 130 C, la temperatura del inyector en 200 C y la tem-
peratura del detector en 220 C.
Solucin estndar interna: solucin de 1-propanol a 2,5%
(v/v) en agua.
Solucin muestra: aadir a un volumen determinado del
destilado 2 ml de la solucin estndar interna. Diluir para

50 ml con agua o etanol a 90% (v/v), ajustando el tenor de
etanol para 10% (v/v).
Solucin estndar: preparar 50 ml de solucin conteniendo
2 ml de solucin estndar interno, 10% de etanol (v/v),
0,05% de 2-propanol (v/v) y 0,05% de metanol anhidro
(v/v).
Procedimiento: inyectar, separadamente, 1 L de la So-
lucin estndar y de la Solucin muestra, registrar los
cromatogramas y medir las reas de los picos. Calcular
los contenidos de metanol y 2-propanol con relacin a la
muestra sometida a la destilacin a partir de las respuestas
obtenidas con la Solucin estndar y la Solucin muestra.
5.4.3.2.2 Determinacin de residuo seco en
extractos fluidos y blandos
Transferir 2 ml o 2 g de extracto para pesafiltros o placa
de Petri, midiendo, aproximadamente, 50 mm en dimetro
y 30 mm de altura. Evaporar hasta secura en bao mara y
desecar en estufa a 100 105 C, por 3 horas. Dejar enfriar
en desecador, sobre pentxido de fsforo y pesar. Calcular el
residuo seco en porcentaje sobre la masa o sobre el volumen.
5.4.3.2.3 Determinacin de residuo seco en
extractos secos
Pesar, en placa de Petri midiendo, aproximadamente, 50
mm en dimetro y 30 mm de altura, 0,50 g de extracto seco
finamente pulverizado. Desecar en estufa a 100 105 C
por 3 horas. Dejar enfriar en desecador, sobre pentxido
de fsforo y pesar. Calcular el residuo seco en porcentaje
sobre la masa.
5.5 MTODOS BIOLGICOS,
ENSAYOS BIOLGICOS Y
MICROBIOLGICOS
5.5.1 MTODOS BIOLGICOS
5.5.1.1 DETERMINACIN DE LA
HEPARINA EN LOS FACTORES DE LA
COAGULACIN
La heparina es determinada bajo la forma de un complejo
a la antitrombina III (AT) va inhibicin de la actividad
del Factor Xa de la coagulacin. En la mezcla reactiva es
mantenido un exceso de AT para garantizar una concen-
tracin constante del complejo heparina-AT. El Factor Xa
es neutralizado por el complejo heparina-AT y el Factor
Xa residual hidroliza un sustrato cromognico peptdico
especfico libertando un cromforo. La cantidad del cro-
mforo es inversamente proporcional a la actividad de la
heparina.
Sustrato cromognico para el Factor Xa: sustrato cromo-
gnico especfico del Factor Xa tal como: el clorhidrato
de N-a-benzoil-L-isoleucil-L-glutamil-glicil-L-arginina-4-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 207
nitro-anilida. Reconstituya de acuerdo con las instruccio-
nes del fabricante.
Tampn de diluicin: solucin de trometamina a 0,605%
(p/v). si necesario, ajuste para pH 8,4 con cido clorhdrico.
Solucin problema: diluir la muestra con el Tampn de di-
luicin para obtener una solucin que supuestamente con-
tenga 0,1 UI de heparina por mililitro.
Solucin de referencia: diluir la preparacin de referencia
de la heparina con el Tampn de diluicin para obtener una
solucin que contenga 0,1 UI de heparina por mililitro. Las
condiciones descritas son aplicables a las placas de micro-
titulacin. Si el ensayo es realizado en tubos, ajustar los
volmenes para mantener las proporciones en la mezcla.
Poco tiempo antes del ensayo, colocar todas las soluciones
a 37 C en bao mara. Distribuir en una serie de pozos, 20
L de plasma humano normal y 20 L de antitrombina III
SR. Juntar a los pozos una serie de volmenes (20 L, 60
L, 100 L y 140 L) de la Solucin problema o de la So-
lucin de referencia y completar el volumen de cada pozo
con 200 L utilizando el Tampn de diluicin (0,02 0,08
5
UI de heparina por mililitro en la mezcla reactiva final).
MTODO DEL PUNTO DE EQUIVALENCIA
Transferir 40 L de cada pozo para una segunda serie de
pozos, juntar 20 L de la solucin del Factor Xa bovino
e incubar a 37 C durante 30 segundos. Juntar 40 L de
solucin del Sustrato cromognico para el Factor Xa a 1
mmol/L e incubar a 37 C, durante 3 minutos. Parar la re-
accin disminuyendo el pH con un reactivo apropiado, tal
como una solucin de cido actico glacial a 20% (v/v)
y medir la absorbancia a 405 nm (5.2.14). El tiempo de
reaccin es generalmente de 3 minutos a 15 minutos, pero
son toleradas ciertas variaciones si ellas permiten mejorar
la linealidad de la curva dosis/respuesta.
MTODO CINTICO
Transferir 40 L de cada pozo para una segunda serie de
pozos, juntar 20 L de la solucin del Factor Xa bovino
e incubar a 37 C durante 30 segundos. Juntar 40 L de
la solucin del Sustrato cromognico para el Factor Xa
a 2 mmol/L, incubar a 37 C y determinar la velocidad de
clivaje del sustrato procediendo a la lectura continua de la
variacin de absorbancia a 405 nm (5.2.14) posibilitando,
as, calcular la velocidad inicial de clivaje del sustrato. Esa
velocidad debe ser proporcional a la concentracin residual
del Factor Xa. Verificar la validez del ensayo y calcular la
actividad de la heparina de la muestra por los procedimien-
tos estadsticos aplicables a los ensayos biolgicos (8).
5.5.1.2 DETERMINACIN DEL FACTOR
DE VON WILLEBRAND HUMANO
La potencia del Factor de Von Willebrand humano es de-
terminada por la comparacin, en condiciones obligatoria-
mente dadas, de su actividad en colgeno o como cofactor
de ristocetina con la misma actividad, y calibrada utilizn-
dose un estndar de referencia internacional, en unidades
 208 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
internacionales, cuando aplicable. La Unidad Internacional
es la actividad de un monto declarado del estndar de refe-
rencia internacional para el Factor de Von Willebrand exis-
tente en el concentrado de Factor VIII de la coagulacin de
la sangre humana. La equivalencia en unidades internacio-
nales del estndar de referencia internacional es indicada
por la Organizacin Mundial de Salud (OMS).
DOSIFICACIN DE LA CONEXIN AL COLGENO
La conexin al colgeno es determinada por tcnica de
inmunoensayo enzimtico en placas de micro titulacin,
revestidas por colgeno. El mtodo se basa en la cone-
xin especfica del Factor de Von Willebrand a las fibras
de colgeno y de la subsiguiente conexin de un anticuer-
po policlonal anti- Factor de Von Willebrand conjugado a
una enzima. Despus de la adicin de un sustrato cromo-
gnico hay formacin de un producto cuantificable espec-
trofotomtricamente. En condiciones apropiadas, hay una
relacin lineal entre el colgeno, Factor de Von Willebrand
y la absorbancia indicada.
MATERIALES
5
Colgeno: usar fibrillas de colgeno de equino nativo, o
humanas, tipo I o III. Para facilitar la manipulacin, pue-
den ser usadas las soluciones de colgeno.
Diluyente de colgeno: disolver 50 g de glucosa en agua.
Ajustar el pH en 2,7 a 2,9 con cido clorhdrico M y diluir
en agua a 1000 ml.
Tampn de cloruro-fosfato: disolver 8 g de cloruro de sodio,
1,05 g de fosfato de sodio dibsico, dihidratado, 0,2 g de
fosfato de sodio monobsico dihidratado y 0,2 g de cloruro
de potasio en agua. Ajustar el pH en 7,2 con hidrxido de
sodio M o cido clorhdrico M. Diluir a 1000 ml con agua.
Solucin de lavado tamponada: solucin de polisorbato 20
a 0,1% (p/v) en Tampn de cloruro fosfato.
Reactivo de neutralizacin: preparar el Tampn de cloruro
fosfato conteniendo polisorbato 20 a 0,1% (p/v) y albmi-
na bovina a 1% (p/v).
Tampn para diluicin: preparar el Tampn de cloruro fos-
fato conteniendo polisorbato 20 a 0,1% (p/v) y albmina
bovina a 5% (p/v).
Conjugacin: suero de conejo del anti-Factor de Von Wi-
llebrand humano conjugado a la peroxidasa del rbano sil-
vestre, un marcador histoqumico. Seguir las recomenda-
ciones del fabricante.
Solucin de sustrato: disolver, inmediatamente antes de
su uso, un comprimido de clorhidrato de el-fenilendiami-
na y un comprimido de perxido de carbamida en 20 ml
de agua, o usar un volumen adecuado de agua oxigenada.
Proteger de la luz.
Placas de microtitulacin: deben poseer fondo plano, pla-
cas de polietileno con propiedades de superficie optimiza-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
das para ensayo inmunoenzimtico y protena de alta capa-
cidad de conexin.
PROCEDIMIENTO
Solucin prueba: reconstituir la preparacin a ser analiza-
da como indicado en el rtulo. Diluir con Tampn para
diluicin para preparar una solucin conteniendo cerca de
1 UI/ ml de Factor de Von Willebrand. Preparar dos series
independientes con por lo menos tres diluiciones mediante
el uso del Tampn para diluicin.
Soluciones de referencia: reconstituir la preparacin de re-
ferencia como indicado. Diluir con Tampn para diluicin
para preparar una solucin conteniendo cerca de 1 UI/ml
de Factor de Von Willebrand. Preparar dos series indepen-
dientes con por lo menos tres diluiciones mediante el uso
del Tampn para diluicin.
Posibilitar que la solucin de colgeno alcance la temperatu-
ra ambiente. Diluir con Diluyente de colgeno para obtener
una solucin conteniendo 30 a 75 mg/ml de colgeno. Mez-
clar, suavemente, para producir una suspensin uniforme de
las fibras de colgeno y enseguida pipetear 0,1 ml y trans-
ferir para cada pozo de la microplaca. Cubrir la placa con
pelcula plstico e incubar a 37 C de un da para el otro.
Vaciar los pozos de la placa revestida con el colgeno por
inversin y drenaje en una servilleta de papel. Aadir 0,25
ml de Solucin de lavado tamponada. Vaciar los pozos de la
placa por inversin y drenar en una servilleta de papel, repi-
tiendo esa operacin tres veces. Aadir, cada pozo, 0,25 ml
de Reactivo de neutralizacin, cubrir la placa con pelcula
plstico e incubar a 37 C por 1 hora. Los pozos de la placa
deben ser vaciados por inversin y drenaje en servilleta de
papel. Aadir 0,25 ml de Solucin de lavado tamponada.
Vaciar los pozos de la placa por inversin y drenar en una
servilleta de papel. Repetir esa operacin tres veces.
Aadir 0,1 ml de cada una de las Soluciones prueba o refe-
rencia a los pozos. Aadir 0,1 ml de Tampn para diluicin
a una serie de pozos para obtenerse el control negativo.
Cubrir la placa con pelcula plstico e incubarla a 37 C
por 2 horas. Los pozos de la placa deben ser vaciados por
inversin y drenaje en servilleta de papel. Aadir 0,25 ml
de Solucin de lavado tamponada. Vaciar los pozos de la
placa por inversin y drenaje en una servilleta de papel,
repitiendo esta operacin por tres veces.
Preparar una diluicin adecuada de Conjugacin con Tam-
pn de cloruro fosfato conteniendo albmina bovina a
0,5% (p/v) y aadir 0,1 ml cada pozo. Cubrir la placa con
pelcula plstico e incubar a 37 C por 2 horas. Vaciar los
pozos de la placa por inversin y drenaje en una servilleta
de papel. Aadir 0,25 ml de Solucin de lavado tampona-
da. Vaciar los pozos de la placa por inversin y drenar en
una servilleta de papel. Repetir esta operacin tres veces.
Aadir 0,1 ml de Solucin de sustrato a cada uno de los po-
zos e incubar a la temperatura ambiente por 20 minutos en lo
oscuro. Aadir 0,1 ml de cido clorhdrico M a cada uno de
los pozos. Medir la absorbancia a 492 nm (5.2.14). Utilizar
los valores de absorbancia para estimar la potencia de la pre-

paracin a ser analizada mediante el empleo de los procedi-
mientos estadsticos aplicables a los ensayos biolgicos (8).
El ensayo es vlido si las absorbancias medidas para los
controles negativos fuesen mayores que 0,05.
5.5.1.3 DETERMINACIN DEL FACTOR
II DE LA COAGULACIN SANGUINEA
HUMANA
La determinacin del Factor II de la coagulacin humana
es realizada despus de activacin especfica en Factor IIa.
El Factor IIa es calculado comparando su actividad en un
sustrato cromognico peptdico especfico con la misma
actividad del estndar internacional o de una preparacin
estndar calibrada en Unidades Internacionales (UI). La
Unidad Internacional del Factor II corresponde a la acti-
vidad de una dada cantidad del estndar internacional, que
es constituido por un concentrado liofilizado del Factor II
de la coagulacin sangunea. La correspondencia entre la
Unidad Internacional y el Estndar Internacional es esta-
blecida por la Organizacin Mundial de Salud.
El mtodo de la determinacin cromognica incluye dos
etapas sucesivas: activacin del Factor II por accin del
veneno de cobra y el clivaje enzimtica de un sustrato
cromognico por el Factor IIa que liberta un cromforo
cuantificable por espectrofotometra. En condiciones de
dosificacin apropiados, existe una relacin lineal entre la
actividad del Factor IIa y el clivaje del sustrato cromog-
nico.
REACTIVOS
Activador especfico del Factor II proveniente del veneno
de la vbora (Ecarina): protena obtenida a partir del vene-
no de la vbora Echis carinatus, activa especficamente el
Factor II. Reconstituir la preparacin siguiendo las instruc-
ciones del fabricante. Una vez reconstituida, conservar a 4
C y utilizar en el tiempo de 1 mes.
Sustrato cromognico para el Factor IIa: sustrato cro-
mognico especfico del Factor IIa como: clorhidrato de
H-D-fenilalanil-L-pipecolil-L-arginina-4-nitroanilida, 4-to-
luenosulfonil-glicil-prolil-Larginina-4-nitroanilida, H-D-ci-
clohexilglicil-a-aminobutiril-L-arginina-4-nitroanilida,
D-ciclohexilglicil-L-alanilarginina-4-nitroanilida-diacetato.
Reconstituir siguiendo las instrucciones del fabricante.
Tampn de diluicin: solucin conteniendo 0,606% (p/v)
de trometamina, cloruro de sodio a 1,753% (p/v), cido
edtico a 0,279% (p/v) y albmina bovina o de albmina
humana a 0,1% (p/v). Ajustar, si necesario, el pH para 8,4
con cido clorhdrico.
PROCEDIMIENTO
Solucin prueba: diluir la muestra en el Tampn de dilui-
cin para obtener una solucin conteniendo 0,015 UI de
Factor II por mililitro. Preparar, por lo menos, tres diluicio-
nes ms de esa solucin en Tampn de diluicin.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 209
Solucin estndar: diluir el estndar en el Tampn de di-
luicin para obtener una solucin conteniendo 0,015 UI
de Factor II por mililitro. Preparar, por lo menos, ms tres
diluiciones de esa solucin en el Tampn de diluicin.
Colocar todas las soluciones en bao mara a 37 C, poco
tiempo antes del ensayo. Las condiciones descritas se apli-
can a las placas de microtitulacin. Si la determinacin es
realizada en tubos, ajustar los volmenes para mantener las
proporciones en la mezcla. Introducir 25 L de las dife-
rentes diluiciones de la Solucin muestra y de la Solucin
estndar, en una serie de pozos de la placa de microtitu-
lacin mantenida a 37 C. Juntar en cada pozo125 L del
Tampn de diluicin y 25 L de Activador especfico del
Factor II proveniente del veneno de la vbora e incubar
durante exactamente 2 minutos. Juntar en cada pozo 25 L
de Sustrato cromognico para el Factor IIa.
Proceder a la lectura de la velocidad de variacin de la ab-
sorbancia en 405 nm (5.2.14) y continuar durante tres minu-
tos de modo obtener la velocidad promedio de variacin de
la absorbancia. Se no es posible una lectura continua, deter-
minar la absorbancia en 405 nm en intervalos consecutivos
apropiados, por ejemplo, de 40 en 40 segundos. Construir
5
el grfico lineal de los valores de absorcin en funcin del
tiempo y calcular la velocidad promedio de variacin de la
absorbancia. A partir de los valores individuales encontrados
para cada diluicin del estndar y de la muestra, calcular la
actividad de la muestra y verificar la validez de la dosifica-
cin por los mtodos estadsticos habituales (8).
5.5.1.4 DETERMINACIN DEL FACTOR
IX DE LA COAGULACIN SANGUNEA
HUMANA
Se determina la actividad de la muestra, comparando la
cantidad de la muestra necesaria para reducir el tiempo
de coagulacin de una mezcla de prueba que contiene las
sustancias, adems del Factor IX, necesarias para la coagu-
lacin de la sangre; con la cantidad de una preparacin de
referencia, evaluada en unidades internacionales, necesa-
rias para obtener el mismo efecto.
La Unidad Internacional corresponde a la actividad de una
determinada cantidad del Estndar Internacional consti-
tuido por un concentrado liofilizado del Factor IX de la
coagulacin sangunea. La equivalencia en unidades inter-
nacionales del estndar internacional es establecida por la
Organizacin Mundial de Salud.
Reconstituir, respectivamente, la muestra y la preparacin
de referencia de acuerdo con las indicaciones del rtulo y
utilice inmediatamente. Cuando aplicable, determinar la
cantidad de heparina presente y neutralcela juntando sulfa-
to de protamina (10 g de sulfato de protamina neutralizan
1,0 UI de heparina). Diluya la muestra y la preparacin de
referencia con tampn de imidazol de pH 7,3 para obtener
soluciones con 0,5 a 2,0 UI por mililitro. Con una mezcla de
citrato de sodio a 3,8% (p/v) y tampn de imidazol de pH 7,3
(1:5), preparar una serie de diluiciones comprendiendo 1/10,
1/20, 1/40 y 1/80. Esas diluiciones debern ser preparadas
con precisin y son utilizadas inmediatamente.
 210 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Utilizar, por ejemplo, tubos de incubacin mantenidos en
bao mara a 37 C. Introducir en cada tubo 0,1 ml de sus-
trato de plasma y 0,1 ml de cada una de las diluiciones de
la preparacin de referencia y de la muestra. Juntar en cada
tubo 0,1 ml de una diluicin apropiada de cefalina SR o
sustituto de plaquetas y 0,1 ml de una suspensin de 0,5 g
de caoln leve en 100 ml de cloruro de sodio a 0,9% (p/v)
y dejar en reposo durante cerca de 10 min, inclinando los
tubos regularmente. Juntar cada tubo 0,1 ml de solucin
de cloruro de calcio a 0,74% (p/v). Con el auxilio de un
cronmetro, determine el tiempo de coagulacin, eso es,
el intervalo de tiempo entre el momento de la adicin del
cloruro de calcio y la primera indicacin de la formacin
de fibrina que se observa visualmente o con aparatos apro-
piados. Calcular la actividad utilizando el procedimiento
estadstico aplicables a los ensayos biolgicos (8).
Para asegurar que no existe contaminacin apreciable del
sustrato de plasma por el Factor IX, realizar un ensayo en
blanco utilizando, en vez de la muestra, un volumen corres-
pondiente de una mezcla de citrato de sodio a 3,8% (p/v) y
tampn de imidazol de pH 7,3 (1:5). El ensayo slo es vli-
do si el tiempo de coagulacin determinado en el ensayo en
5
blanco est comprendido entre 100 y 200 segundos.
5.5.1.5 DETERMINACIN DEL FACTOR
VII DE LA COAGULACIN SANGUINEA
HUMANA
La determinacin del Factor VII de la coagulacin es rea-
lizada por la determinacin de su actividad biolgica como
un cofactor en la activacin del Factor X por el Factor
VIIa/Factor Tisular en presencia de iones de calcio y de
fosfolpidos. La actividad de una preparacin del Factor
VII es calculada por comparacin de las cantidades res-
pectivas de esa preparacin y del estndar internacional o
de una preparacin de referencia determinada en unidades
internacionales que son necesarias para obtener una velo-
cidad de formacin del Factor Xa en un medio de reaccin
conteniendo las diferentes sustancias que intervienen en la
activacin del Factor X.
La Unidad Internacional de la actividad del Factor VII co-
rresponde a la actividad de una dada cantidad del estndar
internacional que es actualmente constituido por un plasma
liofilizado. La correspondencia entre la Unidad Internacio-
nal y el Estndar Internacional es establecida por la Orga-
nizacin Mundial de Salud.
El mtodo de la determinacin cromognica comporta dos
etapas sucesivas: la activacin del Factor X, bajo la ac-
cin del Factor VIIa, en una mezcla reactiva conteniendo
el Factor Tisular/fosfolpido y el ion calcio y la lisis enzi-
mtica de un sustrato cromognico por el Factor Xa que
liberta un cromforo cuantificable por espectrofotometra.
En condiciones apropiadas de dosificacin, existe una re-
lacin lineal entre la velocidad de formacin del Factor Xa
y la concentracin del Factor VII. El esquema siguiente
resume el principio de la determinacin:
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Etapa 1
Fator Tisular + Ca2+
a) Factor VII Factor VIIa
Factor VIIa + Ca2+
+ Fator Tisular/fosfolpido
b) Factor X Factor Xa
Etapa 2
Factor Xa
a) Sustrato cromognico Pptido + cromforo
Las dos etapas utilizan reactivos disponibles en el merca-
do, originario de diversos proveedores. A pesar de que la
composicin de esos reactivos pueda variar, ligeramente,
sus caractersticas esenciales son descritas en las especifi-
caciones que se siguen.
REACTIVOS
La mezcla reactiva de factores de la coagulacin contiene,
especialmente, protenas purificadas de origen humana, o
bovina, especficamente el Factor X, la tromboplastina y
Factor Tisular/fosfolpido y un activador del Factor VII.
Esas protenas son, parcialmente, purificadas y no contie-
nen impurezas capaces de interferir en la activacin del
Factor VII o del Factor X. El Factor X est presente en
cantidad tal que su concentracin final, fuera de la etapa
de activacin, sea de 10 350 nmol/L, de preferencia de
14 70 nmol/L. La tromboplastina utilizada puede ser de
origen natural (cerebro de buey o conejo) o sinttica. La
tromboplastina utilizada para la determinacin del tiempo
de Quick es diluida de 5 a 50 veces en una solucin tampn
de manera que la concentracin final de Ca2+ sea de 15-
25 nmol/L. La etapa final de formacin del Factor Xa es
conducida en una solucin conteniendo albmina humana
o albmina bovina a una concentracin en que no ocurren
prdidas en la adsorcin y, convenientemente, tamponada
a pH comprendido entre 7,3 y 8,0. El Factor VII es el nico
Factor que limita la formacin del Factor Xa en la mezcla
de incubacin final y ninguno de los constituyentes reac-
tivos de la mezcla tiene el poder de inducir por si slo la
formacin el Factor Xa.
La segunda etapa consiste en la cuantificacin del Factor
Xa formado en la etapa precedente, en el medio de un sus-
trato cromognico especfico del Factor Xa. Ese sustrato
es generalmente un pptido corto derivado de 3 a 5 cidos
aminados ligados a un agrupamiento cromforo. La cisin
de ese agrupamiento y del sustrato peptdico promueve un
desplazamiento de la actividad cromofrica para un largo
de onda que posibilita su cuantificacin por espectrofoto-
metra. El sustrato es generalmente disuelto en agua y uti-
lizado en una concentracin final de 0,2 2 nmol/L. Puede
igualmente comprender los inhibidores apropiados impi-
diendo el proseguir de la formacin del Factor Xa (adicin
de yoduro).

PROCEDIMIENTO
Reconstituir, separadamente, el contenido de una ampolla
de la preparacin de referencia y de la muestra adicionando
una cantidad de agua pretendida y una vez reconstituidas
utilcelas en el tiempo de una hora. Aadir a las prepara-
ciones reconstituidas las cantidades de prediluyente nece-
sarias para obtener soluciones a 0,5 2,0 UI del Factor VII
por mililitro.
Preparar las diluiciones siguientes de la preparacin de re-
ferencia y de la muestra con una solucin tampn isotnica
sin agente de quelacin, conteniendo albmina humana o
bovina a 1% (p/v), y de preferencia tamponada para pH
7,3 8,0. Hacer de cada una de las dos preparaciones por
lo menos tres diluiciones separadas independientes, de pre-
ferencia, en duplicado. Las concentraciones de esas dilui-
ciones en Factor VII son ajustadas de modo que la concen-
tracin final sea inferior a 0,005 UI/ml.
Preparar, igualmente, una solucin control conteniendo el
conjunto de los constituyentes de la mezcla reactiva con
excepcin del Factor VII.
Todas las diluiciones son preparadas en tubos de plstico y
utilizadas durante la primera hora.
Etapa 1. A cada una de las diluiciones, obtenidas a partir de
la preparacin de referencia y de la muestra, aadir un vo-
lumen apropiado del reactivo de coagulacin precalentado
(o de una mezcla de sus constituyentes separados), mezclar
e incubar a 37 C en tubos de plstico o pozos de una mi-
croplaca. La concentracin de los diferentes constituyentes
durante la formacin del Factor Xa es como la especificada
en reactivos. Dejar desarrollar la reaccin de activacin del
Factor X durante un tiempo apropiado; el trmino de la re-
accin acontece, de preferencia, antes que la concentracin
en Factor Xa haya alcanzado su nivel mximo, a fin de que
la curva dosis-respuesta presente una linealidad satisfacto-
ria. El tiempo de reaccin es igualmente escogido de modo
que la condicin de linealidad de la curva de produccin
del Factor Xa en funcin del tiempo sea satisfactoria. Es
generalmente de la orden de 2 a 5 minutos, pero son admi-
sibles ciertas variaciones para posibilitar mejorar la lineali-
dad de la curva dosis-respuesta.
Etapa 2. Parar la reaccin de activacin por adicin de una
mezcla reactiva conteniendo el sustrato cromognico. La
velocidad de clivaje del sustrato, que es proporcional a la
concentracin del Factor Xa es determinada con el auxilio
de un espectrofotmetro por la variacin de la absorban-
cia en un largo de onda apropiado. Puede determinarse la
absorbancia, continuamente, lo que posibilita calcular la
velocidad inicial de clivaje del sustrato, interrumpiendo
la reaccin de hidrlisis al final de un tiempo apropiado,
bajando el pH con un reactivo apropiado tal como el ci-
do actico a 50% (p/v) o una solucin de citrato de sodio
M en pH 3,0. Ajustar el tiempo de hidrlisis de modo que
la condicin de linealidad de formacin del cromforo en
funcin del tiempo sea satisfactoria. Este tiempo es gene-
ralmente de los 3 a 15 minutos, pero son toleradas ciertas
variaciones si posibilitan mejorar la linealidad de la curva
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 211
dosis-respuesta. Verifique la validez de la titulacin y cal-
cule la actividad de la preparacin de la muestra por los
procedimientos estadsticos aplicables a los ensayos bio-
lgicos (8).
5.5.1.6 DETERMINACIN DEL FACTOR
X DE LA COAGULACIN SANGUINEA
HUMANA
La determinacin del Factor X de la coagulacin sangunea
humana es realizada despus de activacin especfica en
Factor Xa, que es calculada por comparacin de su activi-
dad en clivar un sustrato cromognico peptdico especfico
con la misma actividad del Estndar Internacional o de una
preparacin de referencia medida en Unidades Internacio-
nales.
La Unidad Internacional del Factor X corresponde a la
actividad de una dada cantidad del Estndar Internacional
que es constituido por un concentrado liofilizado del Factor
X de la coagulacin sangunea humana.
La correspondencia entre la Unidad Internacional y el Es-
5
tndar Internacional es establecida por la Organizacin
Mundial de Salud.
El mtodo de la determinacin cromognica incluye dos
etapas: activacin del Factor X bajo accin del veneno
de cobra, seguida de clivaje enzimtico de un sustrato
cromognico por el Factor Xa que liberta un cromforo
cuantificable por espectrofotometra. En condiciones de
dosificacin apropiados, existe una relacin lineal entre la
actividad del Factor Xa y el clivaje del sustrato.
REACTIVOS
Activador especfico del Factor X proveniente del veneno
de la vbora de Russell (VVR): protena obtenida a partir
del veneno de la vbora de Russell (Vipera russelli) que
activa, especficamente, el Factor X. Reconstituir la prepa-
racin siguiendo las instrucciones del fabricante. Una vez
reconstituida, conservar a 4 C y utilizar en el espacio de
1 mes.
Sustrato cromognico para el Factor Xa: sustrato cro-
mognico especfico del Factor Xa tal como: clorhidrato
de N-a-benciloxicarbonil-D-arginil-L-glicil-L-arginina-
4-nitroanilida, clorhidrato de Nbenzoilo-L-isoleucil-L-
glutamil-glicil-L-arginina-4-nitroanilida, metanosulfo-
nil- D-leucil-glicil-L-arginina-4-nitroanilida, acetato de
metoxicarbonil-D-ciclo-hexilalanil-glicil-L-arginina- 4-ni-
troanilida. Reconstituir siguiendo las instrucciones del fa-
bricante.
Tampn de diluicin: solucin conteniendo trometamina
a 0,37% (p/v), cloruro de sodio a 1,8% (p/v), imidazol a
0,21% (p/v), bromato de hexadimetrina a 0,002% (p/v) y
albmina bovina, o de albmina humana a 0,1% (p/v). Si
necesario, ajustar para pH 8,4 con cido clorhdrico.
 212 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
PROCEDIMIENTO
Solucin prueba: diluir la muestra en el Tampn de dilui-
cin para obtener una solucin conteniendo 0,18 UI del
Factor X por mililitro. Preparar, por lo menos, tres diluicio-
nes ms de esa solucin en el Tampn de diluicin.
Solucin estndar: diluir la preparacin estndar en el
Tampn de diluicin para obtener una solucin contenien-
do 0,18 UI del Factor X por mililitro. Preparar, por lo me-
nos, tres diluiciones ms de esa solucin en el Tampn de
diluicin.
Poco tiempo antes del ensayo, colocar todas las soluciones
en bao mara a 37 C.
Las condiciones descritas se aplican a las placas de micro-
titulacin. Si la determinacin es realizada en tubos, ajustar
los volmenes para mantener la proporcin en las mezclas.
Transferir 12,5 L de las diferentes diluiciones de la So-
lucin prueba o de la Solucin estndar para una serie de
pozos de una placa de microtitulacin mantenida a 37 C.
5
Aadir en cada pozo 25 L de VVR. Incubar durante exac-
tamente 90 segundos. Aadir cada pozo, 150 L Sustrato
cromognico para el Factor Xa, diluido seis veces en el
Tampn de diluicin. Proceder a la lectura de la variacin
de absorbancia en 405 nm (5.2.14) y continuar durante tres
minutos para obtener la velocidad promedio de variacin
de la absorbancia. Se no es posible una lectura contina,
determinar la absorbancia en 405 nm con intervalos con-
secutivos apropiados, por ejemplo, de 40 en 40 segundos.
Construir el grfico lineal de los valores de absorbancia en
funcin del tiempo y calcular la velocidad media de varia-
cin de la absorbancia. A partir de los valores individuales
encontrados para cada diluicin del estndar y de la mues-
tra, calcular la actividad de la muestra y verificar la validez
de la medida por los mtodos estadsticos habituales (8).
5.5.1.7 DETERMINACIN DEL FACTOR
VIII DE LA COAGULACIN SANGUNEA
HUMANA, LIOFILIZADO
Es realizado por la determinacin de la actividad biolgica
del Factor VIII como un cofactor en la activacin del Fac-
tor X por el Factor IX activado (IXa) en presencia de iones
calcio y de fosfolpidos. La actividad de una preparacin
del Factor VIII es calculada por comparacin de las can-
tidades respectivas de esa preparacin y del Estndar In-
ternacional; o de una preparacin de referencia medida en
unidades internacionales que son necesarias para obtener
una determinada velocidad de formacin del Factor Xa en
un medio de reaccin conteniendo las diferentes sustancias
que participan en la activacin del Factor X.
La Unidad Internacional de la actividad del Factor VIII
corresponde a la actividad de una determinada cantidad
del Estndar Internacional que consiste en un concentrado
liofilizado del Factor VIII de la coagulacin sangunea hu-
mana. La equivalencia del Estndar Internacional con Uni-
dades Internacionales es establecida por la Organizacin
Mundial de Salud (OMS). El concentrado de Factor VIII
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
de la coagulacin sangunea humana es medido en unida-
des internacionales en relacin al Estndar Internacional.
El mtodo de medicin colorimtrica consiste en dos eta-
pas sucesivas: la activacin del Factor X bajo a accin del
Factor VIII en una mezcla reactiva de factores de coagula-
cin compuestos de sustancias purificadas y el clivaje en-
zimtico de un sustrato cromognico por el Factor Xa que
libera un cromforo cuantificable por espectrofotometra.
En condiciones apropiadas de medicin hay una relacin
lineal entre la velocidad de formacin del Factor Xa y la
concentracin del Factor VIII. En el esquema siguiente se
resume el principio de la medicin:
Etapa 1
Factor VIII activado
Factor X Factor Xa
Factor IXa, fosfolpido, Ca2+
Etapa 2
Factor Xa
sustrato cromognico pptido + cromforo
Las dos etapas utilizan reactivos que pueden ser obtenidos
comercialmente. A pesar de que la composicin de esos
reactivos pueda estar sujeta a alguna variacin, sus carac-
tersticas esenciales son descritas en las presentes especi-
ficaciones. Pueden ser permitidos desvos con relacin a
tales especificaciones desde que sea demostrado, mediante
el uso del Estndar Internacional, que los resultados obte-
nidos no difieren significativamente. Los embalajes comer-
ciales son utilizados de acuerdo con las instrucciones del
fabricante; es importante asegurar que el embalaje escogi-
do es adecuado.
Los conjuntos usados deben ser debidamente validados,
pudiendo ser utilizada en ese caso, la verificacin del tiem-
po de generacin del Factor Xa, a fin de determinar el tiem-
po necesario para alcanzar 50% de formacin mxima de
Factor Xa.
REACTIVOS
La mezcla reactiva de factores de la coagulacin corres-
ponde a las protenas purificadas, de origen humana, o
bovina, especficamente, el Factor X, el Factor IXa y un
activador del Factor VIII, generalmente la trombina. Esas
protenas son parcialmente purificadas, preferencialmente,
como mnimo a 50% y no contienen impurezas capaces de
interferir en la activacin del Factor VIII, o Factor X. La
trombina puede estar presente bajo la forma de su precur-
sor, la protrombina, siempre que su activacin en la mez-
cla reactiva sea suficientemente rpida para posibilitar una
activacin completa y casi instantnea del Factor VIII en
el ensayo. La mezcla reactiva debe contener fosfolpidos
que pueden ser de origen natural (por ejemplo: cerebro,
medula espinal bovina y extracto de soja) u obtenida ar-
tificialmente, siendo constituida, por cerca de 15 a 31%
de fosfatidilserina. La concentracin final en fosfolpidos
durante la etapa de formacin del Factor Xa es de, aproxi-
madamente, 10 a 35 mol/L. La mezcla reactiva contiene,
tambin, iones calcio en cantidad tal que su concentracin
final sea de 5 a 15 mmol/L. La etapa final de formacin del
Factor Xa es conducida en una solucin que debe contener,

como mnimo, 1 mg/ml de albmina humana, o bovina,
convenientemente tamponada (pH 7,3 a 8,0). Los diferen-
tes constituyentes del medio reactivo son generalmente
reunidos en dos preparaciones separadas, que no debern
inducir por s solas a la formacin de Factor Xa. Despus
de la reconstitucin esas dos preparaciones pueden ser re-
unidas con la condicin de que no se formen cantidades de
Factor Xa en la ausencia del Factor VIII. El Factor VIII es
el nico factor que limita la formacin del Factor Xa en la
mezcla de incubacin final. La segunda etapa consiste en
la cuantificacin del Factor Xa formado en la etapa ante-
rior en el medio de un sustrato cromognico especfico del
Factor Xa. Ese sustrato es generalmente un pptido corto
derivado de 3 a 5 aminocidos ligados a un agrupamiento
cromforo. La cisin de ese agrupamiento y del sustra-
to peptdico promueve un desplazamiento de la actividad
cromofrica para un largo de onda que posibilita su cuanti-
ficacin por espectrofotometra. El sustrato, generalmente
disuelto en agua y utilizado en una concentracin final de
0,2 a 2 mmol/L, debe contener los inhibidores apropiados
al impedimento de la formacin adicional del Factor Xa
y suprimir toda la actividad trombnica, lo que posibilita
mejorar la selectividad de la dosificacin en presencia del
Factor Xa.
PROCEDIMIENTO
Debe ser reconstituido todo contenido de una ampolla de
la preparacin de referencia y de la muestra adicionando la
cantidad de agua; usar inmediatamente. Aadir cantidades
de prediluyentes necesarios para obtener soluciones entre
0,5 a 2,0 UI/ml. El prediluyente es constituido por plasma
proveniente de un donante portador grave de la hemofilia
A, o de un reactivo preparado artificialmente, dando resul-
tados equivalentes a los obtenidos con plasma hemoflico
y con las mismas preparaciones estndar y muestra. Las
soluciones prediluidas deben presentar buena estabilidad
para adems del tiempo necesario a la determinacin (por
lo menos 30 minutos) a 20 C, y deben ser utilizadas den-
tro de 15 minutos. Realizar las diluiciones siguientes de
la preparacin estndar y de la muestra por medio de una
solucin tampn isotnica sin agente de quelacin, y con-
teniendo 1% de albmina humana o bovina; la solucin
puede contener, por ejemplo, trometamina o imidazol y es
de preferencia tamponada (pH 7,3 a 8,0). Preparar, como
mnimo, tres diluiciones adicionales independientes, de
preferencia en duplicado. Las soluciones deben ser prepa-
radas de modo que la concentracin final en Factor VIII,
fuera de la etapa de formacin del Factor Xa, sea inferior
a 0,03 UI/ml y de preferencia a 0,01 UI/ml. Preparar un
estndar conteniendo el conjunto de los constituyentes de
la mezcla reactiva, con excepcin del Factor VIII. Preparar
las diluiciones en tubos plsticos y usar inmediatamente.
Etapa 1. A cada una de las diluiciones precalentadas, ob-
tenidas a partir de la preparacin estndar y de la muestra,
juntar un volumen apropiado del reactivo de coagulacin
precalentado (o de una mezcla de sus constituyentes sepa-
rados), mezclar e incubar a 37 C en tubos plsticos o pozo
de una microplaca. Dejar correr la reaccin de activacin
del Factor X durante tiempo apropiado; el fin de la reac-
cin acontece de preferencia antes que la concentracin en
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 213
Factor X haya alcanzado su nivel Mximo, a fin de que la
curva dosis-respuesta presente una linealidad satisfactoria.
El tiempo de reaccin es igualmente escogido de modo que
la condicin de linealidad de la curva de produccin del
Factor Xa en funcin del tiempo sea satisfactoria. Y gene-
ralmente de la orden de 2 a 5 minutos no siendo admisibles
ciertas variaciones que posibiliten mejorar la linealidad de
la curva dosis-respuesta.
Etapa 2. Interrumpir la reaccin de activacin por adicin
de una mezcla reactiva conteniendo el sustrato cromog-
nico. La velocidad de clivaje del sustrato, que es propor-
cional a concentracin del Factor Xa, es determinada en
un espectrofotmetro, por la variacin de la absorbancia
en un largo de onda apropiado. Determinar la absorbancia,
continuadamente, para posibilitar el clculo de la veloci-
dad inicial de clivaje del sustrato, interrumpiendo la reac-
cin de hidrlisis al final de un tiempo apropiado bajando
el pH, con un reactivo apropiado tal como el cido actico
(50% v/v de C2H4O2) o tampn citrato M pH 3,0. Ajustar
el tiempo de hidrlisis de modo que la condicin de linea-
lidad de la formacin del cromforo en funcin del tiempo
sea satisfactoria. Ese tiempo es generalmente de los 3 a
5
15 minutos, siendo toleradas ciertas variaciones, siempre
que posibiliten el mejoramiento de la linealidad de la curva
dosis-respuesta. Verificar la validez del ensayo y calcular
la actividad de la muestra por procedimientos estadsticos
aplicados a los ensayos biolgicos (8).
5.5.1.8 DETERMINACIN DE FACTORES
DE LA COAGULACIN ACTIVADOS
Si la muestra contiene heparina, determine la cantidad
existente y neutralcela juntando sulfato de protamina (10
g de sulfato de protamina neutralizan 1 UI de heparina).
Con el tampn tris-cloruro de sodio pH 7,5, prepare dilui-
ciones a 1/10 y 1/100. Coloque una serie de tubos de polie-
tileno en bao mara a 37 C. Introduzca en cada tubo 0,1
ml de plasma pobre en plaquetas y 0,1 ml de una diluicin
apropiada de cefalina SR o de una preparacin fosfolipdi-
ca que acte como sustituto de plaquetas. Deje en reposo
durante 60 segundos y junte cada tubo 0,1 ml de una de las
diluiciones y para el tubo de ensayo en blanco 0,1 ml de la
solucin tampn.
Junte, inmediatamente, cada tubo 0,1 ml de una solucin
de cloruro de calcio a 0,37% (p/v), previamente calentada
a 37 C, y determine el intervalo de tiempo entre la adicin
de la solucin de cloruro de calcio y la formacin del co-
gulo, esa determinacin es realizada en los 30 minutos que
siguen a la primera diluicin. El ensayo slo es vlido si
el tiempo de coagulacin del ensayo en blanco es de 200 a
350 segundos.
5.5.1.9 DETERMINACIN DE TTULO DE
HEMAGLUTININAS ANTI-A Y ANTI-B
(MTODO INDIRECTO)
Preparar una diluicin seriada en duplicado de la prepa-
racin a ser examinada en solucin de cloruro de sodio a
0,9% (p/v). Para cada diluicin de una serie, aadir volu-
men igual a 5% (v/v) de la suspensin de eritrocitos del
 214 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
grupo A1. Los eritrocitos deben ser previamente lavados
tres veces en solucin de cloruro de sodio. Para cada di-
luicin de la otra serie aadir volumen igual de 5% (v/v)
de la suspensin de eritrocitos del grupo B. Los eritrocitos
deben ser previamente lavados tres veces en solucin de
cloruro de sodio a 0,9% (p/v). Incubar las series de dilui-
cin a 37 C por 30 minutos y entonces lavar tres veces
con cloruro de sodio a 0,9% (p/v). Dejar los eritrocitos en
contacto con el reactivo antiglobulina humano polivalente
por 30 minutos. Sin centrifugar, examinar cada suspensin
para aglutinacin en microscopio.
5.5.1.10 TCNICAS DE AMPLIFICACIN
DE CIDOS NUCLEICOS
INTRODUCCIN
Las tcnicas de amplificacin de cidos nucleicos fueron
establecidas con base en dos principios diferentes:
a) amplificacin de una secuencia blanco de cidos nu-
cleicos utilizando la reaccin en cadena de la polime-
rasa (PCR), la reaccin en cadena de la ligasa (LCR), o
la amplificacin isotrmica de una secuencia de cido
5
ribonucleico (RNA);
b) amplificacin de una seal de hibridacin para el cido
desoxirribonucleico (ADN) mediante el empleo del m-
todo del ADN ramificado (bADN), por ejemplo. En ese
caso, la amplificacin de la seal se realiza sin someter
el cido nucleico a ciclos repetitivos de amplificacin.
En lneas generales, el mtodo PCR es descrito como la
tcnica de referencia. Pueden ser utilizados mtodos alter-
nativos, siempre que satisfagan los requisitos de calidad y
sean debidamente validados.
CAMPO DE APLICACIN
Establecer los requisitos de preparacin de la muestra, de
la amplificacin de secuencias del ADN y de la deteccin
especfica del producto de la reaccin PCR. La PCR posi-
bilita deteccin y amplificacin de secuencias definidas de
ADN y de RNA (despus de su transcripcin reversa en
ADN complementario cADN).
PRINCIPIO DEL MTODO
La PCR es el fundamento de un mtodo que posibilita la
amplificacin especfica in vitro de segmentos de ADN o
RNA. Despus de la desnaturalizacin de la cadena doble
de ADN en cadenas simples de ADN, de los oligonucle-
tidos sintticos iniciadores, de polaridad opuesta, se hibri-
dan con sus respectivas secuencias complementarias, en el
ADN a ser amplificado. En ese caso, la actividad de los ini-
ciadores posibilita que sea completada la cadena simple del
ADN, dando lugar a secuencias cortas, bi-cuaternarias que
rodean el fragmento del ADN a ser amplificado; sirviendo
as como punto de partida de la sntesis del ADN. Sealn-
dose que tal proceso es realizado mediante la accin de un
ADN polimerasa termoestable.
La amplificacin del ADN ocurre en ciclos que consisten
en:
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
desnaturalizacin del cido nucleico por el calor (se-
cuencia blanco a ser amplificada) en dos cadenas mo-
no-cuaternarias;
hibridacin especfica de los iniciadores con la secuen-
cia a ser amplificada, bajo condiciones adecuadas de
reaccin;
alargamiento, mediante la accin del ADN polimerasa,
de los iniciadores ligados cada una de las dos cadenas
simples, a una temperatura adecuada (favorable al pro-
ceso de sntesis de ADN).
Los ciclos repetidos de desnaturalizacin por el calor, a hi-
bridacin de los iniciadores y la sntesis de ADN dan lugar
a una amplificacin exponencial del fragmento de ADN
entonces delimitado por los iniciadores.
El producto especfico de la reaccin de PCR, conocido
como amplicon, puede ser detectado por medio de una va-
riedad de mtodos de especificidad y sensibilidad apropia-
das.
El ensayo de PCR Multiplex usa varios pares de iniciado-
res, destinados a amplificacin simultnea para diferentes
objetivos de una reaccin.
MATERIAL PARA El ENSAYO
Debido a la gran sensibilidad de la PCR, las muestras de-
ben ser protegidas de la incidencia de luz y de cualquier
contaminacin externa. El muestreo, conservacin y trans-
porte del material a ser ensayado deben ser desarrollados
en condiciones que posibilitan reducir al mnimo los ries-
gos de degradacin de la secuencia a ser amplificada. En el
caso de las secuencias de RNA marcado, deben ser tomas
precauciones especiales ya que el RNA es mucho sensible
a la degradacin por ribonucleasa, como tambin, a algu-
nos aditivos (anticoagulantes y conservantes) que pueden
interferir en los ensayos.
PROCEDIMIENTO
Prevencin de los contaminantes
El riesgo de contaminacin requiere la existencia de reas
restrictas, segn la naturaleza de los materiales y tecnolo-
ga utilizados. Los puntos a ser considerados incluyen: el
movimiento de personal, el flujo de trabajo, el movimiento
de materiales, sistemas de ventilacin y los procedimientos
de descontaminacin.
Conviene realizar una subdivisin del sistema en reas,
como:
rea de preparacin primaria (local donde se manipulan
exclusivamente los materiales no contenidos en la ma-
triz, por ejemplo, los iniciadores y tampones);
rea pre-PCR (donde son manipulados los reactivos,
las muestras y los controles);
rea de amplificacin (donde el material amplificado es
manipulado en sistema cerrado);
rea de deteccin polvos-PCR (nica rea en que los
productos de la amplificacin son manipulados en sis-
tema abierto).

Preparado de las muestras
La preparacin de las muestras consiste en la extraccin
o en la liberacin de la secuencia blanco a ser amplificada
a partir del material a examinar. El mtodo utilizado para
tal fin debe ser eficaz, tener reproductibilidad y compati-
bilidad con la realizacin de la amplificacin en las condi-
ciones de reaccin seleccionadas. Puede ser utilizada una
variedad de mtodos fsico qumicos para extraccin y/o de
enriquecimiento.
Posibles aditivos en el material en anlisis pueden interferir
en el mtodo PCR. Deben ser utilizados los procedimien-
tos descritos en el tem de Control Interno, con objetivo de
verificar la ausencia de factores de inhibicin en el material
a ser examinado.
Cuanto a los modelos de RNA, deben ser tomas precau-
ciones para que haya ausencia de actividad del tipo ribo-
nucleasa.
Amplificacin
La amplificacin de una secuencia blanco por la tcnica
de PCR requiere, como mnimo, un par de iniciadores, los
cuatro tipos de desoxinucletidos trifosfato (dNTPs), iones
de magnesio (MgCl2), y un ADN polimerasa termoestable
para sntesis del ADN.
La amplificacin de la secuencia blanco por PCR es con-
ducida bajo condiciones cclicas definidas: perfil de tempe-
ratura para desnaturalizacin de la doble-hlice de ADN;
anillado y extensin de los iniciadores y tiempos de incu-
bacin en temperaturas seleccionadas dentro de una banda
de variacin.
Deben ser considerados los siguientes parmetros:
el largo y la composicin base del iniciador y de la se-
cuencia blanco;
el tipo de ADN polimerasa, la composicin del tampn
y el volumen de reaccin usado en la amplificacin;
el tipo de termociclador usado y la tasa de conducti-
vidad trmica entre el equipo, el tubo de reaccin y el
medio de reaccin.
La amplificacin ocurre en ciclos que consisten en:
desnaturalizacin de la secuencia blanco del cido nu-
cleico por calentamiento de las dos hlices simples; re-
accin es calentada entre 92 96 C;
anillado especfico de los iniciadores a la secuencia
blanco que ser sintetizada, bajo condiciones adecua-
das de reaccin. La temperatura normalmente es de 55
C, dependiendo de la homologa de los iniciadores por
la secuencia blanco a ser amplificada, de la composi-
cin de los iniciadores y de la cantidad de bases citosi-
na y guanina;
extensin de los iniciadores que estn ligados a las h-
lices simples, por medio de la accin de la ADN poli-
merasa termoestable, a una temperatura adecuada a la
sntesis de ADN. Normalmente a 72 C;
despus del trmino del ciclo se tiene el enfriamiento a
4 C y conservacin.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 215
Deteccin
La secuencia amplificada generada puede ser identificada:
por su tamao, por su secuencia, por modificacin qumica
o por la combinacin de esos parmetros. La deteccin y
caracterizacin por medio del tamao puede ser realizada
por electroforesis en gel (utilizando placas de gel de aga-
rosa, o de gel de poliacrilamida, o por electroforesis capi-
lar), o adems por cromatografa de columna (por ejemplo,
HPLC High performance liquid chromatographe)). La
deteccin y caracterizacin mediante la composicin de la
secuencia puede ser realizada por hibridacin especfica
con sondas complementarias de la secuencia blanco o por
fragmentacin del material amplificado mediante una enzi-
ma de restriccin en los sitios especficos de la secuencia a
ser amplificada. La caracterizacin por medio de la modi-
ficacin qumica puede ser realizada por incorporacin de
un fluorforo en las secuencias marcadas y posterior exci-
tacin y deteccin de la fluorescena. Pueden ser, tambin,
utilizadas sondas marcadas que posibilitan una deteccin
posterior radioisotpica o inmunoenzimtico.
EVALUACIN E INTERPRETACIN DE LOS RESUL-
5
TADOS
El resultado de un ensayo slo es vlido si el (los) con-
trol(es) positivo(s) es (son), inequvocamente positivo(s) y
el control(es) negativo(s) es (son), inequvocamente nega-
tivo(s). Debido a la alta sensibilidad del mtodo PCR y a
los riesgos inherentes de contaminacin, es necesario con-
firmar los resultados positivos realizando el ensayo en du-
plicado o, cuando hay posibilidad, con una nueva alcuota
de la muestra. La muestra se considera positiva si al menos
uno de los ensayos repetidos presenta resultado positivo.
GARANTA DE CALIDAD
Validacin del sistema de ensayo de la PCR
El programa de validacin debe incluir los equipos y el m-
todo PCR utilizado. Como referencias deben ser utilizadas
las recomendaciones del ICH (The International Conference
on Harmonisation of Technical Requirements for Registra-
tion of Pharmaceuticals for Human Use: Q2B, Validacin
del Mtodo Analtico), o referencia alternativa equivalente.
Es indispensable efectuar esa validacin mediante estn-
dares biolgicos de referencia oficiales, adecuadamente
calibrados por medio de Estndares Internacionales para
las secuencias blanco utilizadas en el ensayo.
La validacin debe incluir la determinacin del umbral de
respuesta positiva, o sea, el nmero mnimo de secuencias
marcadas por unidad de volumen que se pueden detectar
en por lo menos 95% de los ensayos. Ese valor depende de
varios factores inter-relacionados, como: el volumen de la
muestra sometida a la extraccin y de la eficacia del mtodo
de extraccin; de la transcripcin del RNA marcado en ADN
complementario; del procedimiento de amplificacin y del
sistema de deteccin. Para definir el lmite de deteccin del
sistema utilizado, conviene considerar el umbral de respues-
ta positiva para cada secuencia a ser amplificada y las carac-
 216 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
tersticas de funcionamiento del ensayo con los respectivos
lmites mximos y mnimos de la respuesta positiva.
Control de calidad de los reactivos
Todos los reactivos cruciales usados en la metodologa
puesta en prctica deben ser objeto de control antes de su
uso en rutina. La aceptacin/rechazo debe estar basada en
criterios de calidad predefinidos.
Los iniciadores constituyen un de los componentes esen-
ciales del mtodo PCR exigiendo as, atencin particular
cuanto a su concepcin; pureza y validacin de su uso en
el ensayo. Cada nuevo lote de iniciadores debe ser contro-
lado cuanto a la especificidad; eficacia de la amplificacin
y ausencia de impurezas inhibidoras. Los iniciadores pue-
den ser modificados (por ejemplo, por conjugacin con un
fluorforo, o un antgeno) para posibilitar la utilizacin de
un mtodo especfico de deteccin de la secuencia blanco
a ser amplificada; desde que aquellas modificaciones no
inhiban la precisin y la eficacia de la amplificacin de la
secuencia blanco.
5
Controles del ensayo
Controles externos
Para detectar eventuales contaminaciones y asegurar la
sensibilidad adecuada, conviene incluir en todos los ensa-
yos de PCR los siguientes controles externos:
un control positivo con un nmero definido de copias
de la secuencia blanco, siendo ese nmero determi-
nado, especficamente, para cada sistema de ensayo y
expresado como un mltiplo del umbral de respuesta
positiva del sistema en cuestin;
un control negativo constituido por una muestra de ma-
triz que demostr estar exenta de secuencias blanco.
Control interno
El control interno es formado por secuencias nucleotdicas
definidas conteniendo los locales de conexin del inicia-
dor. El control interno debe ser amplificado con eficacia
definida y los productos deben ser claramente discernibles.
Ese control interno debe pertenecer al mismo tipo de cido
nucleico (ADN/RNA) de la muestra. El control interno es
preferencialmente adicionado a la muestra antes del ais-
lamiento del cido nucleico y, por tanto, acta como un
control global (extraccin, transcripcin reversa, amplifi-
cacin y deteccin).
Evaluacin externa de la calidad
Para cada laboratorio y cada operador, la participacin en
programas externos de la evaluacin de calidad constituye
un aspecto importante de la garanta de calidad en materia
de PCR.
La seccin siguiente (5.5.1.10.1) est dada a ttulo de in-
formacin.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
5.5.1.10.1 Recomendaciones para la validacin
de las tcnicas de amplificacin de los cidos
nucleicos para la deteccin del RNA del virus de
la hepatitis c (HCV) en las mezclas de plasma
INTRODUCCIN
Este captulo es suministrado a ttulo de informacin.
La mayora de las tcnicas de amplificacin de cidos nu-
cleicos corresponde a ensayos analticos cuantitativos des-
tinados a detectar su presencia. Hay algunos ensayos cuan-
titativos comercializados o desarrollados internamente por
los propios laboratorios. Para detectar la contaminacin de
RNA del HCV en las mezclas de plasma, son adecuados los
ensayos cualitativos, pudiendo, inclusive, ser considerados
como ensayos lmite para control de impurezas. En esas re-
comendaciones estn descritos los mtodos de validacin
de las tcnicas de amplificacin de los cidos nucleicos
aplicables apenas a los ensayos cualitativos destinados a
detectar el RNA del VHC en las mezclas de plasma. Por
consiguiente, los dos parmetros de validacin considera-
dos los ms importantes son la especificidad y el lmite de
deteccin. La robustez es, tambin, evaluada. Sin embargo,
ese documento puede, tambin, ser utilizado como base de
validacin general de las tcnicas de amplificacin.
En ese documento est definida la tcnica analtica como el
conjunto de operaciones realizadas despus de extraccin
del cido nucleico, seguido de deteccin de los productos
amplificados. Sealndose que en casos de uso de conjun-
tos comerciales, como parte del procedimiento analtico
completo, las consideraciones de validacin documentadas
ya realizadas por el fabricante pueden sustituir la valida-
cin por el operador. No obstante, el desempeo del con-
junto comercializado con respecto al uso al cual se destina
tiene que ser demostrado por el usuario (ej: lmite de detec-
cin, robustez y contaminacin cruzada).
ESPECIFICIDAD
La especificidad es la capacidad para evaluar, inequvoca-
mente, el cido nucleico en presencia de componentes de
presencia no esperada.
La especificidad de los procedimientos analticos de ampli-
ficacin del cido nucleico es dependiente de la eleccin de
los iniciadores, de la eleccin de la sonda (para anlisis del
producto final) y el rigor de las condiciones de prueba (para
ambas etapas de amplificacin y deteccin).
En la concepcin de los iniciadores y de las sondas, uno de
los aspectos a ser considerado es su especificidad en la de-
teccin del RNA del HCV; para ese hecho es conveniente
comparar las secuencias blanco con las secuencias publi-
cadas en bancos de datos. Para el HCV, los iniciadores y
sondas son, normalmente, escogidos a partir de las reas de
la regin 5 no codificante (5NCR) del genoma del HCV,
compuesta por 341 nucletidos, que son las ms conserva-
das entre los diferentes aislados del HCV.

El producto amplificado debe ser identificado, inequvoca-
mente, por el uso de mtodos como: amplificacin con ini-
ciadores entrelazados, anlisis de enzimas de restriccin,
secuenciamiento, o hibridacin con sonda especfica.
Para validacin de la especificidad de la tcnica analtica,
es conveniente probar, como mnimo, 100 mezclas de plas-
ma negativo para el RNA del HCV, y que todos los resulta-
dos obtenidos sean negativos. La Organizacin Mundial de
Salud (OMS) dispone de muestras apropiadas de plasmas
no reactivos.
La capacidad de la tcnica en la deteccin de todos los ge-
notipos del HCV depender de la eleccin de los iniciado-
res, de las sondas y de los parmetros operacionales. Es
conveniente que esa capacidad sea demostrada por medio
del uso de una coleccin de preparaciones de referencia
caracterizadas.
Tiene sido sugerido que el estndar de distribucin de los
genotipos del HCV en Brasil es semejante al encontrado en
muchos pases europeos, con la prevalencia de los tipos 1 y
3. Se observa un comportamiento epidemiolgico tpico de
una propagacin exponencial en los ltimos aos, proba-
blemente como consecuencia de transfusiones sanguneas.
En ese contexto, los genotipos 1 y 3 deben ser detectados
en niveles apropiados.
LMITE DE DETECCIN
El lmite de deteccin de una tcnica individual es la menor
cantidad de cido nucleico que puede ser detectada, pero,
no, necesariamente, cuantificada, con un valor exacto en
la muestra.
El proceso de amplificacin utilizado para la deteccin del
RNA del HCV en las mezclas de plasmas da, generalmente,
resultados cualitativos. El nmero de resultados posibles se
limita a dos respuestas: positivo o negativo. A pesar de que
sea recomendada la determinacin del lmite de deteccin,
por razones prcticas, es determinado el umbral de la res-
puesta positiva para las tcnicas de amplificacin del cido
nucleico. El umbral de la respuesta positiva es el nmero
mnimo de secuencias blanco por unidad de volumen que
puede ser detectado en 95% de los ensayos. Ese umbral de
la respuesta positiva es influenciado por la distribucin de
los genomas virales en las muestras individuales ensaya-
das y por factores tales como a eficacia de la enzima, que
pueden llevar a diferencias de 95% en los umbrales de la
respuesta positiva obtenidos en las anlisis individuales.
Para determinar el umbral de respuesta positiva, es indis-
pensable ejecutar la tcnica en das diferentes con una serie
de diluiciones de un reactivo de trabajo o del virus de la
Hepatitis C (estndar biolgico de referencia), calibrado
por comparacin con el Estndar Internacional del HCV
96/790 OMS, a fin de evaluar entre los ensayos. Son proba-
das, como mnimo, tres series de diluiciones separadas con
un nmero suficiente de replicaciones de cada diluicin
para obtener un nmero total de 24 resultados por diluicin
y posibilitar, as, el anlisis estadstico de los resultados.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 217
Por ejemplo, en un laboratorio se testean tres series de
diluiciones con ocho replicaciones para cada diluicin en
das diferentes; cuatro series de diluicin con seis replica-
ciones para cada diluicin en das diferentes, o seis series
de diluiciones con cuatro replicaciones para cada diluicin
en das diferentes.
Para que el nmero de diluiciones utilizadas se manten-
ga igual, es indispensable efectuar un ensayo preliminar
(como, por ejemplo, diluiciones logartmicas en la muestra
de la mezcla de plasma para obtener un valor preliminar
del umbral de respuesta positiva, o sea, la mayor diluicin
en que ocurre una seal positiva).
La distribucin de las diluiciones puede entonces ser rea-
lizada con base en ese valor preliminar precalculado (uti-
lizando, por ejemplo, un factor de diluicin de 0,5 log),
o inferior a una mezcla de plasma negativo como matriz
de diluicin. El tenor en RNA del HCV que puede ser de-
tectado es de 95% en los ensayos y puede ser calculado
utilizando un mtodo estadstico apropiado.
Esos resultados, tambin, sirven para demostrar la varia-
5
cin interna del ensayo y la variacin en los varios das del
mtodo analtico.
ROBUSTEZ
La robustez de un mtodo analtico es la medida de su capa-
cidad de permanecer inalterable cuando sujeto a pequeas,
pero deliberadas, variaciones en los parmetros operacio-
nales y da una indicacin de la viabilidad de la tcnica en
las condiciones normales de utilizacin. La evaluacin de
la robustez es uno de los aspectos a ser considerado durante
la fase de desarrollo. Posibilita establecer la viabilidad de la
tcnica frente a las variaciones deliberadas en los parme-
tros operacionales. En las tcnicas de amplificacin de los
cidos nucleicos, pequeas variaciones en los parmetros
operacionales pueden tener una importancia especial. Sin
embargo, la robustez de esta puede ser demostrada durante
el desarrollo del mtodo, cuando son ensayadas pequeas
variaciones en la concentracin de reactivos (por ejemplo:
MgCl2, iniciadores, o dNTPs). Para demostrar la robustez
durante la validacin, deben examinarse, como mnimo,
veinte mezclas de plasma (escogidos por casualidad) ne-
gativos para RNA del HCV a las cuales es adicionada una
concentracin, tpica final, que corresponde al umbral de la
respuesta positiva, previamente, determinada. Todos los re-
sultados obtenidos son positivos.
Pueden surgir problemas con la robustez en el caso de
mtodos en que se usan, en su fase inicial, la ultra-centri-
fugacin previamente a la extraccin del RNA viral. Por
consiguiente para probar la robustez de esos mtodos. Son
ensayadas, como mnimo, veinte mezclas de plasma con-
teniendo concentraciones variadas de RNA del HCV, pero
exentas de anticuerpos especficos del HCV Todos los re-
sultados obtenidos son positivos.
Es conveniente demostrar la ausencia de contaminacin
cruzada por la deteccin exacta de un conjunto de, por lo
menos veinte muestras, alternando muestras de mezclas
 218 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
de plasma negativas y de mezclas de plasma negativos a
las cuales fue adicionada una alta concentracin del HCV
(como mnimo, 102 veces 95% del umbral de respuesta
positiva, o, como mnimo, 104 UI/ml.
GARANTA DE CALIDAD
Los mtodos de ensayos biolgicos tales como la tcnica
de amplificacin de los cidos nucleicos, pueden presentar
problemas especficos que interfieren en la validacin e in-
terpretacin de los resultados.
Los procedimientos deben ser descritos precisamente en la
forma de procedimientos operacionales estndar (sigla en
portugus POPs), que deben incluir:
modo de muestreo (tipo de recipientes, etc.);
preparacin de las mini-mezclas (se fuera el caso);
condiciones de conservacin antes del anlisis;
descripcin exacta de las condiciones operacionales
(incluyendo precauciones que deben ser tomas, a fin de
evitar contaminacin cruzada o destruccin del RNA
viral) as como de los reactivos y preparaciones de re-
5
ferencia utilizadas;
frmulas detalladas del clculo de los resultados, inclu-
yendo a evaluacin estadstica.
El uso de un control apropiado (por ejemplo, una diluicin
apropiada del virus de la hepatitis C, estndar biolgico de
referencia; o de plasma al cual fue adicionada una muestra
del HCV calibrada por comparacin con el Estndar Inter-
nacional del HCV 96/790 de la OMS) puede ser considera-
do un medio estable satisfactorio de control del sistema y
de asegurar y mantener la viabilidad de la tcnica en cada
utilizacin.
Calificacin tcnica. Para cada elemento crtico del equi-
po utilizado es criada una instalacin apropiada y un pro-
grama de calificacin operacional. Despus de cualquier
modificacin de un equipo crtico (por ejemplo, los ter-
mocicladores) es indispensable reconfirmar la aceptabili-
dad de la tcnica procediendo en paralelo el examen de
ocho muestras de una mezcla de plasma al cual se adicion
una concentracin tripla de RNA del HCV de aquella que
corresponde al umbral de respuesta positiva previamente
determinada; todos los resultados obtenidos son positivos.
Calificacin de los operadores. Es desarrollado un progra-
ma apropiado de calificacin para el conjunto de opera-
dores involucrados en el ensayo. Para ese efecto, es con-
veniente que cada operador examine por lo menos ocho
muestras de una mezcla de plasma a la cual fue adicionada
una concentracin triple de RNA del HCV que correspon-
de al umbral de respuesta positiva, previamente, determi-
nada. Ese ensayo (ocho muestras) es repetido dos veces en
das diferentes en un total de veinticuatro anlisis realiza-
dos en tres das diferentes. Todos los resultados obtenidos
son positivos.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
5.5.1.11 DETERMINACIN DEL
TTULO DEL ACTIVADOR DE LA
PRECALICRENA
El activador de la precalicrena (APC) transforma la preca-
licrena en calicrena y puede ser titulado por presentar la
capacidad de separar un cromforo de un sustrato peptdico
sinttico, determinndose la velocidad de la reaccin por
espectrofotometra. La concentracin en APC es calculada
por comparacin con la preparacin estndar cuya activi-
dad est expresada en unidades internacionales. La Unidad
Internacional corresponde a la actividad de una determina-
da cantidad de Estndar Internacional constituida por ac-
tivador de la precalicrena liofilizada. La correspondencia
entre la Unidad Internacional y el Estndar Internacional es
establecida por la Organizacin Mundial de Salud.
REACTIVOS
Tampn A
Trometamina 6,055 g
Cloruro de sodio 1,17 g
Bromato de hexadimetrina 50 mg
Azida Sdica 0,100 g
Disolver los reactivos en agua, ajustar el pH para 8,0 con
cido clorhdrico 2 M y completar a 1000 ml con agua.
Tampn B
Trometamina 6,055 g
Cloruro de sodio 8,77 g
Disolver los reactivos en agua, ajustar el pH para 8,0 con
cido clorhdrico 2 M y completar a 1000 ml con agua.
PREPARACIN DEL SUSTRATO DE
PRECALICRENA.
La sangre o el plasma usado en la preparacin de la pre-
calicrena debe ser recolectado y manipulado apenas en
materiales de plstico o de vidrio siliconado para evitar la
activacin de la precalicrena resultante de la coagulacin.
Mezclar 9 volmenes de sangre humana con 1 volumen de
solucin anticoagulante (ACD, CPD o una solucin de ci-
trato de sodio a 38 g/L) adicionada de 1 mg por mililitro de
bromato de hexadimetrina. Centrifugar a 3600 g durante 5
minutos. Separar el plasma y centrifugar a 6000 g durante
20 minutos para separar las plaquetas. Separar el plasma
pobre en plaquetas y proceder a la dilisis contra 10 vol-
menes de Tampn A durante 20 horas. Despus de la dili-
sis, depositar el plasma en una columna de cromatografa
conteniendo dos veces su volumen de agarosa-DEAE para
cromatografa de cambio inico previamente equilibrada
con Tampn A. Proceder a elucin con Tampn A (dbito
de 20 ml/cm2/hora). Recolectar el eluato por fracciones
y registrar la absorbancia en 280 nm (5.2.14). Reunir las
fracciones que contienen el primer pico de protenas para
obtener un volumen de cerca de, 1,2 veces el del plasma
pobre en plaquetas.

Para verificar que el sustrato no presenta calicrena acti-
va, mezclar 1 volumen con 20 volmenes de solucin de
sustrato cromognico que ser utilizado en la dosificacin,
previamente calentado a 37 C, y mantener la mezcla a 37
C durante 2 minutos. El sustrato es apropiado si la absor-
bancia no aumenta ms de 0,001 por minuto. Aadir a la
solucin de sustrato 7 g por litro de cloruro de sodio y fil-
trar por membrana (0,45 m). Congelar el filtrado despus
de partirlo en alcuotas y conservar a -25 C; se puede,
tambin, liofilizar el filtrado antes de la conservacin. Rea-
lizar las operaciones comprendidas entre la cromatografa
y la congelacin de las alcuotas en el mismo da.
TITULACIN
De preferencia, la titulacin es realizada en un analizador
enzimtico automtico, a 37 C. Ajustar los volmenes, la
concentracin de los sustratos y los tiempos de incubacin
para que la velocidad de la reaccin sea lineal por lo menos
hasta 35 UI por mililitro. Si necesario, se puede diluir los
estndares, las muestras y el sustrato de precalicrena con
Tampn B.
Incubar los estndares o las muestras diluidas con el sus-
trato de precalicrena durante 10 minutos; el volumen del
estndar o de la muestra antes de la diluicin no excede
1/10 del volumen total de la mezcla a ser incubada para
evitar errores resultantes de las diferencias de fuerza inica
o de pH. Incubar la mezcla o una parte de la mezcla con
un volumen igual o superior de una solucin de un sustrato
cromognico sinttico, reconocidamente especfico, para
la calicrena (por ejemplo, acetato de N-benzolo-L-pro-
lil- L-fenilalanil- L-arginina 4-nitroanilida o diclorhidrato
de D-propil- L-fenilalanil- L-arginina 4-nitroanilida ) y
disuelto en Tampn B. Registrar la variacin de la absor-
bancia por minuto (AA/min) durante 2 a 10 minutos en
el largo de onda apropiado para el sustrato utilizado. Para
cada mezcla del estndar o de la muestra, preparar un blan-
co sustituyendo el sustrato de precalicrena por Tampn
B. Corregir la variacin de la absorbancia por minuto sus-
trayendo el valor obtenido con el blanco correspondiente.
Trazar una curva de calibracin a partir de los valores de
la variacin de la absorbancia por minuto, obtenidos con el
estndar y las respectivas concentraciones y determinar el
tenor en APC de la muestra.
5.5.1.12 DETERMINACIN DE LA
ANTITROMBINA III HUMANA
El tenor de antitrombina III de la muestra es determinado
comparndose a su capacidad de inactivacin de la trombi-
na en presencia de un exceso de heparina con la capacidad
de una preparacin estndar de concentrado de antitrombi-
na III humana de concentracin en unidades internaciona-
les. Cantidades variables de la muestra son adicionadas a
una trombina y la actividad trombina residual es determi-
nada con un sustrato cromognico apropiado.
La Unidad Internacional corresponde a la actividad de una
cantidad determinada del Estndar Internacional de con-
centrado de antitrombina III humana. La equivalencia de
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 219
la Unidad Internacional con el Estndar Internacional es
indicada por la Organizacin Mundial de Salud.
PROCEDIMIENTO
Para la muestra y para el estndar preparar con tampn de
tris-EDTA ASB de pH 8,4 conteniendo 15 UI de heparina
por mililitro, dos series independientes de tres o cuatro di-
luiciones comprendidas entre 1/75 y 1/200 a partir de 1 UI/
ml. Calentar a 37 C durante 1 a 2 minutos 200 L de cada
diluicin. Aadir a cada diluicin 200 L de una solucin
de trombina bovina conteniendo 2 UI/ml en tampn de tris-
EDTA ASB de pH 8,4. Mezclar y mantener a 37 C duran-
te, exactamente, 1 minuto. Aadir 500 L de un sustrato
cromognico apropiado (por ejemplo, D-fenilalanil-L- pi-
pecolil-L-arginina-4-nitroanilida; disolver ese sustrato en
agua para obtener una solucin conteniendo 4 mmol/L y
diluir con tampn de tris-EDTA ASB de pH 8,4 sin alb-
mina hasta una concentracin apropiada para el ensayo de
titulacin). Determinar, inmediatamente, la absorbancia en
405 nm (5.2.14) por lo menos por 30 segundos. Calcular
la variacin de la absorbancia (AA/min). Se puede utilizar
igualmente una titulacin de punto final parando la reac-
5
cin con cido actico y determinando la absorbancia en
405 nm. La variacin de la absorbancia (AA/min) es in-
versamente proporcional a la actividad de la antitrombina
III humana. Verificar la validez del ensayo y calcular la
actividad de la muestra por los procedimientos estadsticos
aplicables a los ensayos biolgicos (8).
5.5.1.13 DETERMINACIN DE LA
ACTIVIDAD ANTICOMPLEMENTARIA
DE LA INMUNOGLOBULINA
La determinacin de la actividad anticomplementaria
(AAC) de la inmunoglobulina es realizada por incubacin
de una muestra de inmunoglobulina (10 mg) con una de-
terminada cantidad de complemento de cobaya (20 CH50).
Sigue la titulacin del complemento restante: la actividad
anticomplementaria est expresada por la proporcin del
complemento consumido, tomando el complemento estn-
dar como 100%.
La unidad hemoltica de actividad complementaria (CH50)
es la cantidad de complemento que, en las estipuladas con-
diciones de reaccin, provoca la lisis de 2,5 x 108 de un
nmero total de 5 x 108 eritrocitos debidamente sensibi-
lizados
REACTIVOS
Solucin madre de magnesio y de calcio. Disolver 1,103 g
de cloruro de calcio y 5,083 g de cloruro de magnesio en
agua y completar 25 ml con el mismo solvente.
Solucin madre de tampn de barbital. Disolver 207,5 g de
cloruro de sodio y 25,48 g de barbital sdico en 4000 ml
de agua y ajustar el pH para 7,3 con cido clorhdrico M.
Aadir 12,5 ml de Solucin madre de magnesio y de calcio
y completar 5000 ml con agua. Filtrar por membrana (0,22
m) y conservar a 4 C en recipiente de vidrio.
 220 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Solucin de gelatina. Disolver 12,5 g de gelatina en cerca PROCEDIMIENTO

de 800 ml de agua y calentar a ebullicin en bao mara.
Enfriar hasta 20 C y completar 10 litros con agua. Filtrar
por membrana (0,22 m) y conservar a 4 C. Utilizar, ni-
camente, una solucin lmpida.
Solucin citratada. Disolver 8 g de citrato de sodio, 4,2 g
de cloruro de sodio y 20,5 g de glucosa en 750 ml de agua.
Ajustar a pH 6,1 con solucin de cido ctrico a 10% (p/v)
y completar 1000 ml con agua.
Tampn de gelatina-barbital. Juntar 4 volmenes de Solu-
cin de gelatina a 1 volumen de Solucin madre de tampn
barbital y mezclar. si necesario, ajustar el pH para 7,3 con
cido clorhdrico M o hidrxido de sodio M y conservar a
4 C. Preparar, diariamente, una nueva solucin.
Sangre de carnero estabilizada. Recolectar 1 volumen de
sangre de carnero en 1 volumen de Solucin citratada y
mezclar. Conservar la sangre estabilizada a 4 C durante,
por lo menos, 7 das y, como mximo, durante 28 das. La
sangre de carnero o los eritrocitos de carnero estabilizados
pueden ser obtenidos, comercialmente, en diversos provee-
Estandarizacin de la solucin de eritrocitos de carnero a
5%.
Separar los eritrocitos de carnero por centrifugacin de un
volumen apropiado de sangre de carnero estabilizada; la-
var las clulas, por lo menos tres veces, con el Tampn
gelatina- barbital y preparar una suspensin a 5% (v/v)
en el mismo tampn. Determinar la concentracin celular
por el siguiente mtodo: aadir 0,2 ml de la suspensin a
2,8 ml de agua y centrifugar el lisado durante 5 minutos a
1000 g. La concentracin celular es adecuada si la absor-
bancia (5.2.14) del sobrenadante, determinada en 541 nm,
es de 0,62 0,01. Corregir la concentracin celular por
adicin de Tampn de gelatina-barbital, de acuerdo con
la frmula:
en que
Vf = volumen final,

5
dores.
Hemolisina. Suero anti-hemates de carnero, preparado en
conejo. Tales sueros pueden ser obtenidos, comercialmen-
te, en diversos proveedores.
Complemento de cobaya. Mezclar los sueros obtenidos a
partir de, por lo menos, 10 cobayas. Separar el suero de
la sangre coagulado por centrifugacin a una temperatura
cerca de 4 C. Conservar el suero, en pequeas porciones,
a una temperatura inferior a -70 C.
Vi = volumen inicial,
A = absorbancia determinada en 541 nm para la suspensin
original.
Una vez ajustada la concentracin celular, la suspensin
contiene cerca de 1 x 109 clulas por mililitro.
Titulacin de hemolisina
Preparar las diluiciones de hemolisina de acuerdo con la
Tabla 1.

Tabla 1 - Diluiciones de hemolisina.

Diluicin de Tampn de gelatina-barbital Hemolisina

hemolisin a preparar Volumen (ml) Diluicin (1/...) Volumen (ml)
7,5 0,65 no diluido 0,1
10 0,90 no diluido 0,1
75 1,80 7,5 0,2
100 1,80 10 0,2
150 1,00 75 1,0
200 1,00 100 1,0
300 1,00 150 1,0
400 1,00 200 1,0
600 1,00 300 1,0
800 1,00 400 1,0
1200 1,00 600 1,0
1600 1,00 800 1,0
2400 1,00 1200 1,0
3200(*) 1,00 1600 1,0
4800(*) 1,00 2400 1,0
____________
(*) Rechace 1,0 ml de la mezcla.

Juntar 1 ml de la suspensin a 5% de eritrocitos de carnero mezcla incubada de diluicin de hemolisina para nuevos
en cada uno de los tubos de la serie de diluiciones de hemo- tubos y aadir 1,1 ml de Tampn de gelatina-barbital y 0,2
lisina a partir de la diluicin a 1/75 y mezclar. Incubar los ml de una diluicin de complemento de cobaya (por ejem-
tubos a 37 C durante 30 minutos. Transferir 0,2 ml de cada plo, 1/150). Realizar esas manipulaciones en duplicado.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 221

Preparar tres tubos control de clulas no hemolizadas En el caso que el porcentaje de hemlisis total no pueda
transfiriendo para cada uno de ellos 1,4 ml de Tampn ge- ser determinado a partir de la diluicin utilizada, repetir la
latina-barbital y 0,1 ml de la suspensin de eritrocitos de titulacin utilizando una solucin de complemento ms o
carnero a 5%. menos diluida.

Preparar tres tubos control de clulas totalmente hemoli-
zadas transfiriendo para cada uno de ellos 1,4 ml de agua
y 0,1 ml de la suspensin de eritrocitos de carnero a 5%.
Incubar todos los tubos a 37 C durante 60 minutos y cen-
trifugar a 1000 g durante 5 minutos. Determinar la absor-
bancia (5.2.14) de los sobrenadantes en 541 nm y calcular
el porcentaje de hemlisis ocurrido en cada tubo, usando
la frmula:
Ac A1
x 100
Ab A1
Preparacin ptima de eritrocitos de carnero
sensibilizada (sistema hemoltico).
Preparar una cantidad apropiada de hemolisina diluida
conteniendo 2 UHM por mililitro y un volumen igual de
suspensin estandarizada de eritrocitos de carnero a 5%.
Aadir la diluicin de hemolisina a la suspensin estan-
darizada de clulas y mezclar. Incubar a 37 C durante 15
minutos, conservar la temperatura de 2 a 8 C y utilizar
dentro del perodo de 6 horas.
Titulacin del complemento

en que Preparar una diluicin apropiada de complemento (por

Aa = absorbancia de los tubos hemolisina, ejemplo, 1:250) utilizando a Tampn de gelatina-barbital
Ab = absorbancia promedio de los tres tubos con hemlisis y realizar la titulacin, en duplicado, de acuerdo con las
total, informaciones registradas en la Tabla 2.
A1 = absorbancia promedio de los tres tubos control sin

hemlisis.
Construir un grfico conteniendo los porcentuales de he-
mlisis en el eje de las ordenadas y los inversos de las di-
luiciones de hemolisina en el eje de las abscisas. Determi-
nar la diluicin ptima de hemolisina a partir del grfico,
eligiendo una diluicin tal que un aumento de la cantidad
de hemolisina no produzca una variacin apreciable en el
grado de hemlisis. Esa diluicin se considera como con-
teniendo 1 unidad de hemlisis mnima (1 UHM) en 1,0
ml. Para la preparacin de los eritrocitos de carnero sensi-
bilizados, la diluicin de hemolisina correspondiente a la
hemlisis ptima contiene 2 UHM por mililitro.
La titulacin de hemolisina slo es vlida si el porcentaje
de hemlisis total est comprendido entre 50 y 70%.
5
A cada tubo, aadir 0,2 ml de eritrocitos de carnero sensi-
bilizados, mezclar bien e incubar todos los tubos a 37 C
durante 60 minutos. Enfriar los tubos en agua con hielo
y centrifugar a 1000 g durante 5 minutos. Determinar la
absorbancia de los sobrenadantes en 541 nm y calcular el
grado de hemlisis (Y), usando la frmula:
Ac A1
x 100
Ab A1
en que
Ac = absorbancia de los tubos 1 a 12,
Ab = absorbancia promedio de los tubos con 100% de he-
mlisis,
Construir un grfico inscribiendo los valores en abscisas, y
el correspondiente volumen en mililitros de complemento
diluido en ordenadas.

Tabla 2 - Diluicin del complemento

Volumen del complemento diluido en Volumen de Tampn de gelatina-
Nmero del tubo
mililitros (por ejemplo, 1:250) barbital en mililitros
1 0,1 1,2
2 0,2 1,1
3 0,3 1,0
4 0,4 0,9
5 0,5 0,8
6 0,6 0,7
7 0,7 0,6
8 0,8 0,5
9 0,9 0,4
10 1,0 0,3
11 1,1 0,2
12 1,2 0,1
3 tubos control con 0% de hemlisis - 1,3
3 tubos control con 110% de hemlisis - 1,3 ml de agua

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 222 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Construir un grfico inscribiendo los valores en abscisas, y
el correspondiente volumen en mililitros de complemento
diluido en ordenadas.
A partir de los puntos, trazar la recta ideal y determinar la
ordenada de la dosis hemoltica a 50% del complemento en
el punto donde Y/(1-Y) = 1,0. Calcular la actividad en tr-
minos de unidades hemolticas (CH50/ml) de acuerdo con
la frmula:
Cd
x5
Ca
en que
Cd = valor inverso de la diluicin de complemento,
Tabla 3 - Tabla 3 Mezclas de incubacin.
Inmunoglobulina(50 mg/ml)
Tampn de gelatina-barbital
Complemento
5
Realizar la determinacin en la muestra y preparar el con-
trol de la AAC negativo y positivo a partir de un estndar
internacional de inmunoglobulina humana, de acuerdo con
las instrucciones suministradas en el rtulo que acompaa la
preparacin estndar. Si la muestra no contiene 50 mg/ml de
inmunoglobulina, ajustar los volmenes de la preparacin y
del Tampn de gelatina- barbital; por ejemplo, pipetear 0,33
ml de una preparacin que contienen 30 mg/ml de inmuno-
globulina y aadir 0,47 ml de Tampn de gelatina-barbital
para obtener el mismo volumen total de 0,8 ml. Cerrar los
tubos e incubarlos a 37 C durante 60 minutos. Aadir 0,2
ml de cada mezcla de incubacin a 9,8 ml de Tampn de
gelatina- barbital para diluir el complemento. En cada tubo,
realizar las titulaciones del complemento tal como descrito
arriba para determinar a actividad anticomplementaria resi-
dual (Tabla 2). Calcular la actividad anticomplementaria de
la muestra, por referencia al control del complemento consi-
derado como 100%, de acuerdo con la frmula:
ab
x 100
a Solucin muestra. Disolver una cantidad apropiada de la
en que
a = actividad complementaria promedio (CH50/ml) de los
controles,
b = actividad complementaria (CH50/ml) de la muestra.
El ensayo slo es vlido si:
las actividades anticomplementares encontradas para el
control AAC negativo y control AAC positivo se sitan
dentro de los lmites indicados en el rtulo que acom-
paa la preparacin estndar;
la actividad complementaria del control del comple-
mento (a) es de 80 a 120 CH50/ml.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Ca = volumen en mililitros de complemento diluido que
produce 50% de hemlisis, 5 = Factor de escala para tener
en cuenta el nmero de eritrocitos.
El ensayo slo es vlido si, entre 15 y 85% de hemlisis, la
curva obtenida es una recta cuya inclinacin se sita entre
0,15 y 0,40, de preferencia, entre 0,18 y 0,30.
Determinacin de actividad anticomplementaria
Diluir el complemento de cobaya titulado con el Tampn
de gelatina-barbital para obtener 100 CH50/ml. si necesa-
rio, ajustar la muestra para pH 7,0. Para una inmunoglobu-
lina conteniendo 50 mg/ml, preparar las mezclas de incu-
bacin (Tabla 3)
Muestra Complemento control
0,2 ml
0,6 ml 0,8 ml
0,2 ml 0,2 ml
5.5.1.14 DOSIFICACIN DE PROTENAS
TOTALES
MTODO 1
Las protenas en solucin absorben la luz ultravioleta en
el largo de onda de 280 nm, debido a la presencia en su
estructura de aminocidos aromticos (especialmente tiro-
sina y triptfano), propiedad que puede ser utilizada para
la dosificacin de protenas. El uso de un tampn como
lquido de compensacin puede remediar la interferencia
producida en el caso de que el tampn utilizado para di-
solucin de la protena posea absorbancia elevada, lo que
podra comprometer los resultados. En bajas concentracio-
nes, la protena adsorbida sobre la curva puede provocar
una disminucin significativa del tenor proteico de la solu-
cin. Es posible prevenir ese fenmeno preparando mues-
tras de tenor elevado o utilizando un detergente no inico
durante la preparacin.
muestra en el tampn escogido para obtener una solucin
cuya concentracin proteica se site entre 0,2 mg/ml y 2
mg/ml.
Solucin estndar. Preparar una solucin de la sustancia de
referencia apropiada correspondiente a la protena a dosi-
ficar, en el mismo tampn que se usa para la solucin de la
muestra y para obtener la misma concentracin.
Procedimiento. Mantener la solucin de la muestra, la so-
lucin estndar y el lquido de compensacin a la misma
temperatura durante todo el ensayo. Determinar la absor-
bancia (5.2.14) de la solucin muestra y de la solucin
estndar en 280 nm en cubetas de cuarzo, utilizando el
tampn especfico como lquido de compensacin. Para
exactitud de los resultados, la respuesta es lineal en el in-
tervalo de las concentraciones proteicas a dosificar.

Difusin de la luz. La difusin de la luz por la muestra pue-
de afectar la exactitud de la dosificacin de las protenas. Si
las protenas en solucin forman partculas cuyo tamao es
de la misma grandeza del largo de onda del haz de medida
(250 300 nm), la difusin del haz luminoso se traduce
por un aumento de la absorbancia aparente de la muestra.
Para calcular la contribucin de ese efecto de difusin en
la absorbancia lida en 280 nm, determinar la absorbancia
de la solucin de la muestra en varios largos de onda (320
nm, 325 nm, 330 nm, 335 nm, 340 nm, 345 nm y 350 nm).
Construir un grfico del logaritmo de la absorbancia le-
da en funcin del logaritmo del respectivo largo de onda
y determinar, por anlisis de regresin lineal, la curva de
calibracin que mejor se ajuste a los diferentes puntos ins-
critos en el grfico.
Determinar por extrapolacin el logaritmo de la absorban-
cia en 280 nm. La absorbancia debido al efecto de difusin
es el antilogaritmo de ese valor. Corregir los valores ob-
servados sustrayndose la absorbancia total en 280 nm de
la absorbancia debido al efecto de difusin para obtener el
valor de la absorbancia debido a la protena en solucin. Es
posible realizar una filtracin usando un filtro de 0,2 que
no absorba las protenas, o una clarificacin por centrifuga-
cin, a fin de que sean reducidos los efectos de la difusin
de la luz en caso de solucin.
Clculos. Utilizar los valores corregidos para los clculos.
Calcular el tenor en protena de la solucin de la muestra
(Cu), usando la expresin:
Au
Cu = Cs
As
en que
CS = tenor en protena de la solucin estndar;
Au = valor de la absorbancia corregida de la solucin de la
muestra;
AS = valor de la absorbancia corregida de la solucin es-
tndar.
MTODO 2
Ese mtodo fue concebido con base en la propiedad que las
protenas poseen de reducir cidos fosfomolibdenotungst-
nico contenidos en el reactivo fosfomolibdeno y tungsteno;
esa reaccin es cromognica y se traduce por la existencia
de un pico de absorcin en 750 nm.
El reactivo fosfomolibdeno y tungsteno reaccionan prime-
ramente con los residuos de la tirosina de la protena. El
desarrollo de la coloracin alcanza un mximo al final de
20 30 minutos de incubacin a temperatura ambiente; se
produce enseguida una descoloracin progresiva. Siendo el
mtodo sensible a sustancias interferentes, puede utilizarse
un tratamiento que produzca la precipitacin de las prote-
nas de la muestra. La mayor parte de las sustancias interfe-
rentes reduce la intensidad de la coloracin obtenida, pero
algunos detergentes la aumentan, ligeramente. Una fuerte
concentracin salina puede provocar la formacin de un
precipitado. Dado que la intensidad de la coloracin obte-
nida puede variar segn la especie proteica considerada, la
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 223
protena a dosificar y la protena estndar son las mismas.
Si es necesario, separar las sustancias interferentes de la
protena de la muestra, proceder como es indicado a con-
tinuacin en sustancias interferentes antes de preparar la
solucin de la muestra. Es posible minimizar el efecto de
las sustancias interferentes por diluicin, siempre que el
tenor en protena a dosificar se mantenga suficientemente
elevado para posibilitar una determinacin exacta.
Utilizar el agua destilada para la preparacin de todos los
tampones y reactivos utilizados en ese mtodo.
Solucin muestra. Disolver una cantidad apropiada de la
muestra en el tampn especificado para obtener una con-
centracin comprendida en el intervalo alcanzado por la
curva de calibracin. El pH de una solucin preparada con
un tampn apropiado est comprendido entre 10,0 y 10,5.
Soluciones estndar. Disolver la sustancia de referencia
correspondiente a la protena a dosificar en el tampn es-
pecificado. Tomar muestras de esa solucin y completarlas
con el mismo tampn para obtener, por lo menos, cinco
soluciones estndar de diferentes concentraciones com-
5
prendidas entre 5 g/ ml y 100 g/ml y uniformemente
repartidas en el intervalo escogido.
Solucin en blanco. Utilizar el mismo tampn que fue uti-
lizado para preparar la Solucin muestra y las Soluciones
estndar.
Reactivo de sulfato de cobre. Disolver 100 mg de sulfato
de cobre y 0,2 g de tartarato de sodio en agua destilada y
completar 50 ml con el mismo diluyente. Disolver 10 g de
carbonato de sodio anhidro en agua destilada y completar
50 ml con el mismo diluyente. Verter, lentamente, la so-
lucin de carbonato de sodio en la solucin de sulfato de
cobre, mezclando siempre. Esa solucin es utilizada en las
24 horas siguientes a su preparacin.
Reactivo alcalino de cobre. Preparar una mezcla de 1 volu-
men de Reactivo de sulfato de cobre, 2 volmenes de lau-
rilsulfato de sodio a 5% (p/v) con 1 volumen de hidrxido
de sodio a 3,2% (p/v). Conservar esa mezcla a temperatura
ambiente. La mezcla es utilizada en las 2 semanas que si-
guen a su preparacin.
Reactivo fosfomolibdeno y tungsteno diluido. Mezclar 5 ml
de reactivo fosfomolibdeno y tungsteno con 55 ml de agua
destilada. Conservar el reactivo a temperatura ambiente en
frasco de vidrio mbar.
Procedimiento. A 1 ml de cada Solucin estndar, de la
Solucin muestra y de la Solucin en blanco aadir 1 ml
del Reactivo alcalino de cobre y mezclar. Dejar en reposo
durante 10 minutos. Aadir 0,5 ml del Reactivo fosfomo-
libdeno y tungsteno diluido, mezclar y dejar en reposo a
temperatura ambiente durante 30 minutos.
Determinar la absorbancia (5.2.14) de las soluciones en
750 nm, utilizando la solucin en blanco para ajuste del
cero.
 224 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Clculos. La relacin entre la absorbancia y el tenor en
protena no es lineal; no obstante, si el intervalo de con-
centracin alcanzado por la curva de calibracin es sufi-
cientemente estrecho, la curva obtenida ser sensiblemente
lineal. Construir un grfico de la absorbancia de las solu-
ciones estndar en funcin del tenor en protena de esas
soluciones y determinar la curva de calibracin por anlisis
de regresin lineal. A partir de la curva de calibracin y de
la absorbancia de la solucin de la muestra, determinar el
tenor en protena de la solucin muestra.
Sustancias interferentes. En ese mtodo se aade desoxi-
colato de sodio y cido tricloroactico a la muestra para
precipitar las protenas y separarlas de las sustancias inter-
ferentes, antes de dosificar. Esa tcnica puede igualmente
ser utilizada para concentrar las protenas contenidas en
una solucin muy diluida. A 1 ml de una solucin de la
muestra adicione 0,1 ml de desoxicolato de sodio a 0,15%
(p/v). Agitar con un agitador tipo vortex y dejar en reposo
a temperatura ambiente durante 10 minutos. Aadir 0,1 ml
de cido tricloroactico a 72% (p/v). Agitar con un agita-
dor tipo vortex y centrifugar a 3000 g durante 30 minu-
tos. Rechazar el sobrenadante lquido y eliminar el lquido
5
residual con una pipeta. Disolver el cogulo en 1 ml del
Reactivo alcalino de cobre.
MTODO 3
Este mtodo fue basado en la propiedad que las protenas
poseen de desplazar de 470 nm para 595 nm el mximo de
absorcin del azul cido 90 cuando se ligan al colorante.
El colorante azul cido 90 presenta una afinidad marcada
para los residuos de arginina y de lisina en la protena lo
que puede provocar variaciones de la respuesta a la dosifi-
cacin de diferentes protenas. La protena utilizada como
sustancia de referencia debe, por tanto, ser la misma que
la protena a ser dosificada. Existen, relativamente, pocas
sustancias interferentes, pero es preferible evitar los deter-
gentes y los analitos en la muestra a ser dosificada. Mues-
tras muy alcalinas pueden provocar interferencias con el
reactivo cido.
Utilizar el agua destilada para la preparacin de todos los
tampones y reactivos a ser usados en ese mtodo.
Solucin muestra. Disolver una cantidad apropiada de la
muestra en el tampn indicado para obtener una concen-
tracin comprendida en el intervalo cubierto por la curva
de calibracin.
Soluciones estndar. Disolver la sustancia de referencia
correspondiente a la protena a dosificar en el tampn indi-
cado. Tomar muestras de esa solucin y completar con el
mismo tampn para obtener por lo menos cinco soluciones
estndar de concentraciones proteicas comprendidas entre
0,1 mg/ ml y 1 mg/ml y uniformemente repartidas en el
intervalo escogido.
Solucin en blanco. Utilizar el mismo tampn que fue uti-
lizado para preparar la solucin de la muestra y las solu-
ciones estndar.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Reactivo azul cido 90. Disolver 0,10 g de azul cido 90
en 50 ml de etanol. Aadir 100 ml de cido fosfrico, com-
pletar 1000 ml con agua destilada y mezclar. Filtrar la so-
lucin y conservarla a temperatura ambiente en frasco de
vidrio mbar. Se produce una lenta precipitacin del colo-
rante durante el almacenamiento. El precipitado es elimi-
nado por filtracin antes de utilizar el reactivo.
Procedimiento. A 0,100 ml de cada Solucin estndar, de
la Solucin muestra y de la Solucin en blanco aadir 5 ml
del Reactivo azul cido 90. Homogeneizar la mezcla por
rotacin, evitando la formacin de espuma que puede crear
problemas de reproductibilidad. Determinar la absorbancia
(5.2.14) de las Soluciones estndar y de la Solucin mues-
tra en 595 nm, utilizando la Solucin en blanco para ajuste
del cero. Se evita el uso de cubetas de cuarzo (slice) ya que
el colorante se liga a ese material.
Clculos. La relacin entre la absorbancia y el tenor en
protena no es lineal. No obstante, si el intervalo de con-
centracin cubierto por la curva de calibracin fuese sufi-
cientemente estrecho, la curva obtenida ser sensiblemente
lineal. Construir un grfico de la absorbancia de las Solu-
ciones estndar en funcin del tenor en protena de esas
soluciones y determinar la curva de calibracin por anlisis
de regresin lineal. A partir de la curva de calibracin y de
la absorbancia de la Solucin muestra determinar el tenor
en protena de la Solucin muestra.
MTODO 4
Ese mtodo, tambin, conocido como mtodo del cido bi-
cinconnico (BCA), fue elaborado con base en la propiedad
que las protenas poseen de reducir el ion cprico (Cu2+) a
ion cuproso (Cu+). El reactivo de cido bicinconnico sirve
para detectar los iones cuprosos. Existen pocas sustancias
interferentes. Se existiesen sustancias interferentes, es po-
sible minimizar sus efectos por diluicin, siempre que el
tenor en protenas a ser dosificadas se mantenga suficien-
temente elevado para posibilitar una determinacin exacta.
La tcnica de precipitacin de las protenas descrita en el
Mtodo 2 puede ser utilizada para eliminar las sustancias
interferentes. La intensidad de la coloracin obtenida por
la reaccin con el reactivo puede variar de un tipo de pro-
tena para otro y, por eso, a protena a ser dosificada y la
protena de referencia son las mismas.
Utilizar el agua destilada para la preparacin de todos los
tampones y reactivos a ser usados en ese mtodo.
Solucin muestra. Disolver una cantidad apropiada de la
muestra en el tampn indicado para obtener una concentra-
cin comprendida en el intervalo de la concentracin de las
Soluciones estndar.
Soluciones estndar. Disolver la sustancia de referencia
correspondiente a la protena a ser dosificada en el tam-
pn indicado. Tomar muestras de esa solucin y completar
con el mismo tampn para obtener por lo menos cinco so-
luciones estndar de concentraciones comprendidas entre
10 g/ml y 1200 g/ml y uniformemente repartidas en el
intervalo escogido.

Solucin en blanco. Utilizar el mismo tampn que fue uti-
lizado para preparar la Solucin de la muestra y las Solu-
ciones estndar.
Reactivo BCA. Disolver 10 g de bicinconinato disdico, 20
g de carbonato de sodio monohidratado, 1,6 g de tartarato
de sodio, 4 g de hidrxido de sodio y 9,5 g de bicarbonato
de sodio en agua destilada. Si necesario, ajustar el pH para
11,25 con solucin de hidrxido de sodio o bicarbonato de
sodio. Completar para 1000 ml con agua destilada y mez-
clar.
Reactivo de cobre-BCA. Mezclar 1 ml de sulfato de cobre
a 4% (p/v) con 50 ml de Reactivo BCA.
Procedimiento. Mezclar 0,1 ml de cada Solucin estndar,
de la Solucin muestra y de la Solucin en blanco con 2 ml
de Reactivo de cobre-BCA. Incubar las soluciones a 37 C
durante 30 minutos, tomar nota de la hora y dejar enfriar
hasta la temperatura ambiente. En los 60 minutos a conti-
nuacin al perodo de incubacin, determinar la absorban-
cia (5.2.14) en 562 nm de las Soluciones estndar y de la
Solucin muestra en cubetas de cuarzo, utilizando la Solu-
cin en blanco para ajuste del cero. Cuando la temperatura
de las soluciones retorne para la temperatura ambiente, la
intensidad de la coloracin contina aumentando, progre-
sivamente.
Clculos. La relacin entre la absorbancia y el tenor en
protena no es lineal. No obstante, si el intervalo de con-
centracin cubierto por la curva de calibracin es suficien-
temente estrecho, la curva obtenida ser sensiblemente
lineal. Registrar en un grfico la absorbancia de las solu-
ciones estndar en funcin del tenor en protena de esas
soluciones y determinar la curva de calibracin por anlisis
de regresin lineal. A partir de la curva de calibracin y de
la absorbancia de la solucin de la muestra determine el
tenor en protena de la solucin de la muestra.
MTODO 5
Ese mtodo, tambin, conocido como mtodo del biuret,
elaborado con base en la propiedad que las protenas po-
seen de interactuar con el ion cprico (Cu2+), en medio al-
calino, dando un producto de reaccin que presenta absor-
bancia en 545 nm. La utilizacin de ese mtodo posibilita
obtener un desvo mnimo entre muestras equivalentes de
lgG y de albmina. Por el contrario, la adicin simultnea
de hidrxido de sodio y del reactivo de biuret (en la forma
de mezcla), una homogeneizacin insuficiente despus de
la adicin del hidrxido de sodio o un intervalo de tiempo
muy largo entre la adicin del hidrxido de sodio y del
reactivo de biuret conduce a la obtencin de una respuesta
ms elevada con muestras de lgG que con muestras de al-
bmina. El tratamiento con cido tricloroactico utilizado
para reducir las interferencias puede igualmente permitir
cuantificar la protena cuando su concentracin en la mues-
tra sea inferior a 0,5 mg/ml.
Utilizar el agua destilada para la preparacin de todos los
tampones y reactivos a ser usados en ese mtodo.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 225
Solucin muestra. Disolver una cantidad apropiada de la
muestra en solucin de cloruro de sodio a 0,9% (p/v) para
obtener una concentracin comprendida en el intervalo de
la concentracin de las soluciones estndar.
Soluciones estndar. Disolver la sustancia de referencia co-
rrespondiente a la protena a ser dosificada en solucin de
cloruro de sodio a 0,9% (p/v). Tomar muestras de esa solu-
cin y completar con solucin de cloruro de sodio a 0,9%
(p/v) para obtener por lo menos tres soluciones estndar de
concentraciones comprendidas entre 0,5 mg/ml y 10 mg/ ml
y, uniformemente, repartidas en el intervalo escogido.
Solucin en blanco. Utilizar solucin de cloruro de sodio
a 0,9% (p/v).
Reactivo de biuret. Disolver 3,46 g de sulfato de cobre en
10 ml de agua destilada caliente y deje enfriar (solucin A).
Disolver 34,6 g de citrato de sodio y 20 g de carbonato de
sodio anhidro en 80 ml de agua destilada caliente y dejar
enfriar (solucin B). Mezclar las soluciones A y B y com-
pletar 200 ml con agua destilada. Ese reactivo es utilizado
dentro de los 6 meses que siguen a su preparacin; no es
5
utilizado si desarrolla turbacin o precipitado.
Procedimiento. A un volumen de la Solucin muestra aa-
dir un volumen igual de solucin de hidrxido de sodio
a 6% (p/v) y mezclar. Aadir, inmediatamente, 0,4 volu-
men (calculado con relacin a la solucin de la muestra)
de Reactivo de biuret y mezclar rpidamente. Mantener las
muestras durante, por lo menos, 15 minutos a una tempe-
ratura comprendida entre 15 C y 25 C. En los 90 mi-
nutos que siguen a la adicin del reactivo, determinar la
absorbancia (5.2.14), como mximo en 545 nm, de las So-
luciones estndar y de la Solucin de la muestra, usando la
Solucin en blanco como lquido de compensacin. Si en
las soluciones surge turbacin o precipitado, no son usadas
para el clculo del tenor en protena.
Clculos. La relacin entre la absorbancia y el tenor en pro-
tena es, sensiblemente, lineal en el intervalo de concentra-
ciones indicado para las Soluciones estndar. Construir un
grfico de la absorbancia de las Soluciones estndar en fun-
cin del tenor en protena de esas soluciones y determinar la
curva de calibracin por anlisis de regresin lineal. Calcu-
lar el coeficiente de correlacin para la curva de calibracin.
El sistema satisface si obtiene una reta cuyo coeficiente de
correlacin sea, por lo menos, de 0,99. A partir de la curva
de calibracin y de la absorbancia de la Solucin muestra
determinar el tenor en protena de la Solucin muestra.
Sustancias interferentes. Es posible limitar el efecto de
las sustancias interferentes precipitando, como se indica a
continuacin, la protena de la muestra: junte 0,1 volumen
de solucin de cido tricloroactico a 50% (p/v) a 1 volu-
men de Solucin de la muestra, eliminar el sobrenadante y
disolver el precipitado en un pequeo volumen de hidrxi-
do de sodio 0,5 M. Utilizar la solucin as obtenida para
preparar la solucin de la muestra.
MTODO 6
 226 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Ese mtodo fluorimtrico fue elaborado con base en una de-
rivacin de la protena por el o-ftalaldehido que reacciona
con las aminas primarias de la protena, eso es, el aminoci-
do N-terminal y la funcin -amina de los residuos de lisina.
La sensibilidad de la dosificacin puede ser mejorada por
una hidrlisis previa de la protena, antes de la adicin del
o-ftalaldehido. La hidrlisis liberta la funcin -amina de los
aminocidos constituyentes de la protena y que le posibilita
reaccionar con el reactivo de ftalaldehido. Ese mtodo es
aplicable a diminutas cantidades de protena.
Las aminas primarias contenidas, por ejemplo, en los tam-
pones de trometamina y en los tampones de aminocidos
reaccionan con el ftalaldehido y son, por tanto, de evitar o
eliminar. El amonaco en elevada concentracin reacciona
igualmente con el ftalaldehido. La fluorescencia resultante
de la reaccin amina ftalaldehido puede ser inestable. El
empleo de procesos automatizados para estandarizar el m-
todo puede posibilitar mejorarle la exactitud y la viabilidad.
Utilice el agua destilada para la preparacin de todos los
tampones y reactivos a ser usados en ese mtodo.
5
Solucin muestra. Disolver una cantidad apropiada de la
muestra en solucin de cloruro de sodio a 0,9% (p/v) para
obtener una concentracin comprendida en el intervalo de
la concentracin de las Soluciones estndar. Ajustar el pH
de la solucin para 8 10,5 antes de juntar el Reactivo de
ftalaldehido.
Soluciones estndar. Disolver la sustancia de referencia
correspondiente a la protena a ser dosificada en solucin
de cloruro de sodio a 0,9% (p/v). Tomar muestras de esa
solucin y completar con solucin de cloruro de sodio a
0,9% (p/v) para obtener por lo menos cinco soluciones es-
tndar de concentraciones comprendidas entre 10 g/ml
y 200 g/ ml y uniformemente repartidas en el intervalo
escogido. Ajustar el pH de las soluciones para 8-10,5 antes
de aadir el Reactivo de ftalaldehido.
Solucin en blanco. Utilizar solucin de cloruro de sodio
a 0,9% (p/v).
Tampn de borato. Disolver 61,83 g de cido brico en
agua destilada y ajuste el pH para 10,4 con solucin de
hidrxido de potasio. Completar a 1000 ml con agua des-
tilada y mezclar.
Solucin madre de ftalaldehido. Disolver 1,20 g de ftalal-
dehido en 1,5 ml de metanol, aadir 100 ml de Tampn de
borato y mezclar. Aadir 0,6 ml de solucin de ter lurico
de macrogol 23 a 30% (p/v) y mezclar. Conservar la so-
lucin a temperatura ambiente y utilizar, dentro de las 3
semanas siguientes de su preparacin.
Reactivo de ftalaldehido. A 5 ml de la Solucin madre de
ftalaldehido junte 15 L de 2-mercaptoetanol. Preparar el
reactivo 30 minutos, por lo menos, antes de utilizar y den-
tro de las 24 horas despus de su preparacin.
Tcnica. Mezclar 10 L de la solucin muestra y de cada
una de las soluciones estndar con 0,1ml de Reactivo de
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Ftalaldehido y dejar en reposo a temperatura ambiente du-
rante 15 minutos. Aadir 3 ml de hidrxido de sodio 0,5
M y mezclar. Determinar la intensidad de la fluorescencia
(5.2.15) de las muestras de la Solucin estndar y de la
Solucin muestra en el largo de onda de excitacin de 340
nm y en el largo de onda de emisin de 440 nm a 455 nm.
Determinar la intensidad de la fluorescencia de una mues-
tra una sola vez porque la irradiacin provoca una disminu-
cin de la intensidad de la fluorescencia.
Clculos. La relacin entre la intensidad de fluorescencia
y el tenor en protena es lineal. Registrar en un grfico las
intensidades de fluorescencia obtenidas con las Soluciones
estndar en funcin del tenor en protena de esas solucio-
nes y determine la curva de calibracin por anlisis de re-
gresin lineal. A partir de la curva de calibracin y de la
intensidad de fluorescencia de la Solucin muestra, deter-
mine el tenor en protena de la Solucin muestra.
MTODO 7
Ese mtodo fue elaborado con base en la cuantificacin de
las protenas por dosificacin del nitrgeno. La presencia
en la muestra de otras sustancias nitrogenadas puede afec-
tar el resultado de la dosificacin de las protenas. Las tc-
nicas utilizadas para dosificar el nitrgeno conducen a la
destruicin de la muestra durante el anlisis, pero no se li-
mitan a la determinacin de las protenas en medio acuoso.
Tcnica A. Proceder como indicado para la dosificacin del
nitrgeno despus de mineralizacin por el cido sulfrico
(5.3.3.2) o utilizar instrumentos disponibles en el mercado
adaptados a la dosificacin del nitrgeno por el mtodo de
Kjeldahl.
Tcnica B. Existen en el mercado instrumentos adaptados
para la dosificacin del nitrgeno. La mayor parte de ellos
utiliza la pirolisis (combustin de la muestra en presencia
del oxgeno a temperaturas prximas de 1000 C), que
provoca la formacin de monxido de nitrgeno (NO) y
otros xidos de forma NOx a partir del nitrgeno existente
en la muestra. Ciertos instrumentos convierten esos xi-
dos de nitrgeno en nitrgeno gaseoso que es cuantificado
por conductimetra trmica. Otros mezclan el monxido
de nitrgeno (NO) con ozono (O3) para producir dixido
de nitrgeno en el estado excitado (NO2) que emite una
radiacin luminosa cuando de su reduccin y es cuantifi-
cado por quimioluminiscencia. Un producto de referencia,
relativamente puro, y semejante, como su composicin, a
la protena a ser dosificada es utilizado para atomizar los
parmetros de inyeccin y de pirolisis y para evaluar la
reproductibilidad del anlisis.
Clculos. El tenor en protena se calcula dividiendo el te-
nor en nitrgeno de la muestra por el tenor en nitrgeno
(conocido) de la protena que puede ser determinada o a
partir de la estructura qumica de la protena, o por compa-
racin con una sustancia de referencia apropiada.

5.5.1.15 DETERMINACIN DE LA
INMUNOGLOBULINA HUMANA ANTI-D
La actividad de la inmunoglobulina humana anti-D es eva-
luada por comparacin de la cantidad necesaria para pro-
ducir a aglutinacin de eritrocitos D-positivos y la de una
preparacin de referencia, medida en unidades internacio-
nales, necesarias para producir el mismo efecto. La Unidad
Internacional corresponde a la actividad de una determi-
nada cantidad de la preparacin internacional de referen-
cia. La correspondencia entre unidades internacionales y la
preparacin de referencia internacional es indicada por la
Organizacin Mundial de Salud.
Utilizar una mezcla de eritrocitos D-positivos, con menos
de 7 das y conservados en las condiciones adecuadas, ob-
tenida a partir de, por lo menos, cuatro donantes del grupo
OR1R1. A un volumen apropiado de eritrocitos, lavados,
previamente, tres veces con solucin de cloruro de sodio
a 0,9% (p/v), juntar un volumen igual de bromelina SR,
dejar en reposo a 37 C durante 10 minutos. Centrifugar,
eliminar el lquido sobrenadante y lavar tres veces los eri-
trocitos con solucin de cloruro de sodio a 0,9% (p/v). Sus-
pender 20 volmenes de los eritrocitos en una mezcla de 15
volmenes de suero inerte, 20 volmenes de solucin de
albmina bovina a 30% (p/v) y 45 volmenes de solucin
de cloruro de sodio a 0,9% (p/v). Colocar la suspensin en
agua con hielo bajo agitacin continua.
Con un aparato automtico de diluicin calibrado preparar
diluiciones de la muestra y de la preparacin de referencia
en una solucin de albmina bovina a 0,5% (p/v) y solu-
cin de cloruro de sodio a 0,9% (p/v).
Utilizar un aparato apropiado para anlisis automtico con-
tinuo; mantenga la temperatura en los estuches a 15 C con
excepcin de los espirales de incubacin. Aspirar para los
estuches de admisin del aparato a suspensin de eritroci-
tos con un dbito de 0,1 ml por minuto y una solucin de
metilcelulosa 450 a 0,3% (p/v) con un dbito de 0,05 ml
por minuto.
Introducir las diluiciones de la muestra y de la preparacin
de referencia con un dbito de 0,1 ml por minuto durante
2 minutos y despus el diluyente a la razn de 0,1 ml por
minuto durante 4 minutos antes de introducir la diluicin
siguiente. Introducir aire a la razn de 0,6 ml por minuto.
Incubar a 37 C durante 18 minutos y despus dispersar
los espirales por introduccin, con un dbito de 1,6 ml por
minuto, de una solucin de cloruro de sodio a 0,9% (p/v)
que contiene un agente humectante apropiado (por ejem-
plo, polisorbato 20 en una concentracin final de 0,2 g/L)
para evitar alterar la continuidad de las burbujas. Dejar de-
positar los aglutinados y decantar 2 veces, la primera vez
a 0,4 ml por minuto y la segunda vez a 0,6 ml por minuto.
Proceder a lisis del residuo de los eritrocitos no aglutinados
con la ayuda de una solucin de octoxinol 10 a 0,5% (p/v),
de ferricianuro de potasio a 0,02% (p/v), de bicarbonato de
sodio a 0,1% (p/v) y de cianuro de potasio a 0,005% (p/v),
con un dbito de 2,5 ml por minuto. Es introducida una
serpentina de ralentizacin de 10 minutos para permitir la
transformacin de la hemoglobina.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 227
Realizar el registro continuo de la absorbancia (5.2.14) del
hemolizado en el largo de onda de 540 a 550 nm.
Determinar las concentraciones de anticuerpos para las
cuales existe una relacin lineal entre la concentracin y
la modificacin de la absorbancia (A). Con base en los
resultados, construir una curva de calibracin y utilizar la
parte lineal de la curva para determinar la actividad de la
muestra. Calcular la actividad de la muestra en unidades
internacionales por mililitro usando la frmula:
axd
D
en que
a = actividad de la preparacin referencia en unidades in-
ternacionales por mililitro para una diluicin de 1 en D,
d = factor de diluicin de la muestra que corresponde a un
dado valor de A,
D = factor de diluicin de la preparacin de referencia que
corresponde al mismo valor de A.
5.5.1.16 DETERMINACIN
5
DE LA FUNCIN FC DE LA
INMUNOGLOBULINA
REACTIVOS
Sangre humana estabilizada. Hacer una flebotoma para
recoger la sangre humana del grupo O en solucin anticoa-
gulante conservadora y preservadora del tipo ACD. Con-
servar la sangre humana estabilizndola a 4 C, durante 3
semanas, como mximo.
Solucin salina tamponada de fosfato de pH 7,2. Disolver
1,022 g de fosfato de sodio dibsico anhidro, 0,336 g de
fosfato de sodio monobsico y 8,766 g de cloruro de so-
dio en 800 ml de agua y completar 1000 ml con el mismo
diluyente.
Solucin madre de magnesio y de calcio. Disolver 1,103 g
de cloruro de calcio y 5,083 g de cloruro de magnesio en
agua y completar 25 ml con el mismo diluyente.
Solucin madre de tampn de barbital. Disolver 207,5 g de
cloruro de sodio y 25,48 g de barbital sdico en 4000 ml de
agua y ajustar para pH 7,3 con cido clorhdrico M. Juntar
12,5 ml de la Solucin madre de magnesio y de calcio y
completar 5000 ml con agua. Filtrar por membrana (0,22
m) y conservar a 4 C en recipiente de vidrio.
Tampn de albmina-barbital. Disolver 0,150 g de alb-
mina bovina en 20 ml de Solucin madre de tampn de
barbital y completar 100 ml con agua.
Solucin de cido tnico. Disolver 10 mg de cido tnico
en 100 ml de Solucin salina tamponada de fosfato de pH
7.2. Preparar inmediatamente antes del uso.
Complemento de cobaya. Mezclar los sueros obtenidos a
partir de, por lo menos, 10 cobayas. Separar el suero de la
sangre coagulada por centrifugacin a una temperatura de
 228 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
aproximadamente de 4 C. Conservar el suero, en peque-
as porciones, a una temperatura inferior a -70 C. Inme-
diatamente antes de iniciarse la hemlisis por accin del
complemento, diluir para 125 200 CH50 por mililitro con
Tampn de albmina-barbital y, durante el ensayo, mante-
ner la solucin diluida en un bao de hielo.
Antgeno de la rubola. Antgeno de rubola apropiado
para las titulaciones de la inhibicin de hemaglutinacin.
Ttulo > 256 unidades HA.
PROCEDIMIENTO
Tratamiento de los eritrocitos humanos con cido tnico.
Separar los eritrocitos por centrifugacin de un volumen
apropiado de sangre humana estabilizada. Lavar los eritro-
citos, por lo menos tres veces, con Solucin salina tam-
ponada de fosfato de pH 7,2 y despus suspender a 2%
(v/v) en Solucin salina tamponada de fosfato de pH 7,2.
Tomar 0,1 ml de la Solucin de cido tnico y completar
7,5 ml con Solucin salina tamponada de fosfato de pH 7,2
(concentracin final 1,3 mg/L); mezclar 1 volumen de la
diluicin recientemente preparada con l volumen de la sus-
5
pensin de eritrocitos e incubar a 37 C durante 10 minu-
tos. Recolectar los eritrocitos tratados con cido tnico por
centrifugacin (400 800 g, durante 10 minutos), rechazar
el sobrenadante y lavar los eritrocitos una vez con Solucin
salina tamponada de fosfato de pH 7,2. Suspender a 1%
(v/v) los eritrocitos tratados con cido tnico en la Solucin
salina tamponada de fosfato de pH 7,2.
Adicin de los antgenos a los eritrocitos. Tomar un volu-
men apropiado (v) de eritrocitos tratados con cido tnico,
junte 0,2 ml de antgeno de la rubola por 1,0 ml de eritro-
citos e incubar a 37 C durante 30 minutos. Recolectar los
eritrocitos por centrifugacin (400-800 g, durante 10 mi-
nutos) y rechazar el sobrenadante, dejando un volumen de
200 L. Juntar un volumen de Tampn de albmina- bar-
bital igual al volumen del sobrenadante rechazado, agitar
hasta suspensin de los eritrocitos, recolectar estos como
arriba es descrito y repetir el lavado. Completar el volumen
remanente obtenido de 0,2 ml hasta tres-cuartos de vs, obte-
niendo as el volumen inicial (vi).
Mezclar 900 L de Tampn de albmina-barbital con 100
L de vi, que es as reducido al volumen residual y deter-
minar la absorbancia inicial en 541 nm (A). Diluir vr por un
factor igual a A utilizando Tampn de albmina- barbital.
Se obtiene, as, el volumen final ajustado vf = vr x A de eri-
trocitos humanos sensibilizados y un valor para A de 1,0
0,1 en el caso de una diluicin a 1/10.
Conexin de los anticuerpos a los eritrocitos con cido t-
nico y cubiertos de antgeno. Preparar, en duplicado y, su-
cesivamente, las siguientes soluciones utilizando para cada
solucin, en separado, una cubeta semimicro (por ejemplo,
placas descartables) o un tubo de ensayo para cada solu-
cin:
Soluciones problema. si necesario, ajustar la muestra a pH
7 adicionando, por ejemplo, hidrxido de sodio M. Tomar
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
volmenes de la muestra conteniendo, respectivamente, 30
y 40 mg de inmunoglobulina y completar 900 L con
Tampn de albmina-barbital.
Solucin estndar. Preparar la solucin tal como se des-
cribe para la Solucin problema a partir de un estndar de
referencia para inmunoglobulina humana.
Testigo del Complemento. 900 L de Tampn de albmi-
na-barbital. A cada cubeta/tubo de ensayo juntar 100 L
de eritrocitos humanos sensibilizados y mezclar cuidadosa-
mente. Dejar en reposo durante 15 minutos, juntar 1000 L
de Tampn de albmina-barbital, recolectar los eritrocitos
por centrifugacin (1000 g durante 10 minutos) de la cubeta/
tubo de ensayo y retirar 1900 L del sobrenadante. Sustituir
este volumen con 1900 L de Tampn de albmina-barbital
y repetir el procedimiento del lavado dejando un volumen
final de 200 L. Las muestras pueden ser conservadas en
cubetas/tubos de ensayo cerrados a 4 C durante 24 horas.
Hemlisis por accin del complemento. Para la determina-
cin de la hemlisis aadir 600 L de Tampn de albmi-
na-barbital calentada a 37 C a la muestra, suspender, cui-
dadosamente, los eritrocitos pipetendolos, repetidamente,
(por lo menos cinco veces) y colocar la cubeta en el porta
muestra de un espectrofotmetro con termostato. Despus
de 2 minutos, juntar 200 L de Complemento de cobaya
diluido para 125 200 CH50/ml, mezclar, cuidadosamente,
pipeteando la mezcla dos veces e inicie inmediatamente
despus de la segunda pipeteada el registro de la absorban-
cia en 541 nm en funcin del tiempo, utilizando el Tampn
de albmina-barbital como lquido de compensacin. Pa-
rar el registro si la curva de la absorbancia en funcin del
tiempo pasa ntidamente el punto de inflexin.
Dosificacin. Determinar el declive (S) de la curva de hem-
lisis en el punto aproximado de la inflexin segmentando la
curva en la regin de mayor declive por intervalos de tiempo
apropiados (por ejemplo, t = 1 minuto) y calculando S, ex-
presado en A por minuto entre los puntos de interseccin
adyacentes. El valor ms elevado de S corresponde a (Sexp).
Determinar, tambin, la absorbancia en el inicio de la curva
(As) por extrapolacin de la curva, la cual es casi siempre
lineal y paralela al eje del tiempo en los primeros minutos
del registro. Corregir Sexp de acuerdo con la frmula:
Sexp
S =
As
Para cada preparacin, calcular el promedio aritmtico de
los valores de S. Calcular el ndice de la funcin Fc (IFc) a
partir de la frmula:
S Sc
IFc = 100 x
S s Sc
S = media aritmtica del declive corregido para la mues-
tra; Ss = media aritmtica del declive corregido para el es-
tndar; Sc = media aritmtica del declive corregido para el
testigo del complemento.

Calcular el ndice de la funcin Fc para la muestra. El valor
no es inferior al indicado por el fabricante del estndar.
5.5.2 ENSAYOS BIOLGICOS
5.5.2.1 PIRGENOS
La prueba de pirgenos se fundamenta en la medida del
aumento de la temperatura corporal de conejos, despus
de inyeccin intravenosa de la solucin estril en anlisis.
Para productos bien tolerados por los animales, utilizar una
dosis que no exceda 10 ml/kg, inyectada en tiempo no su-
perior a 10 minutos.
Para los productos que necesiten preparacin preliminar o
condiciones especiales de administracin, seguir las reco-
mendaciones establecidas en la monografa.
Condiciones generales
Usar conejos del mismo sexo, adultos, sanos, preferencial-
mente de la misma raza, pesando, como mnimo, 1,5 kg.
Despus de la seleccin, mantener los animales en jaulas
individuales en sala con temperatura uniforme entre 20 y
23 C libre de perturbaciones que puedan estresarlos. La
temperatura seleccionada puede variar hasta 3 C.
Realizar condicionamiento para determinacin de la tem-
peratura de los animales, por lo menos una vez, hasta siete
das antes de iniciar la prueba. Los animales debern ser
condicionados segn el mismo procedimiento de la prueba
apenas sin inoculacin del producto. Animales que presen-
ten elevacin de temperatura igual o superior a 0,5 C, con
relacin a la temperatura inicial, no debern ser utilizados
en la prueba.
Cuando se realice la prueba, usar apenas animales con tem-
peratura igual o inferior a 39,8 C y que no presenten, de
uno para el otro, variacin superior a 1,0 C.
Registro de la temperatura
Usar termmetro clnico calibrado con precisin de 0,1
C o cualquier otro dispositivo de registro de temperatura
calibrado de igual sensibilidad.
Introducir el termmetro en el recto del animal en profun-
didad aproximada de 6 centmetros. Se es utilizado dispo-
sitivo registrador, que deba permanecer en el recto durante
el perodo de la prueba, contener los conejos de manera
que se queden en postura natural de reposo. Cuando se em-
plea termmetro clnico, dejar pasar el tiempo necesario
(previamente determinado) para que alcance la temperatu-
ra mxima, antes de proceder a la lectura.
Material
Las jeringas, agujas y elementos de vidrios estriles y piro-
gnicos. Los diluyentes y soluciones extractoras o de lava-
do deben, tambin, ser estriles y pirognicos.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 229
Procedimiento
Ejecutar la prueba en rea especialmente destinada para
la prueba, bajo condiciones ambientales controladas, libre
de perturbaciones que puedan estresar los conejos. En las
dos horas precedentes y durante la prueba, suprimir la ali-
mentacin. El acceso a agua est permitido, pero puede ser
restringido durante la prueba.
Como mximo 40 minutos antes de la inyeccin de la dosis
del producto a ser probado, registrar la temperatura de cada
animal mediante dos lecturas efectuadas con intervalo de
30 minutos. El promedio de las dos lecturas ser adoptado
como temperatura de control necesaria para evaluar cual-
quier aumento individual de temperatura subsiguiente a la
inyeccin de la muestra.
Preparar el producto a ser probado conforme especificado
en la monografa y calentar a 37 2 C. Para la prueba
de pirgenos de materiales de uso hospitalario lavar, con
solucin fisiolgica estril, las superficies del material que
entran en contacto con el producto, local de inyeccin o
tejido interno del paciente. Efectuar los procedimientos
5
asegurndose de que la solucin no sea contaminada.
Inyectar por la vena marginal de la oreja de tres conejos no
menos que 0,5 ml ni ms que 10 ml de la solucin por kg de
peso corporal o la cantidad indicada en la monografa. La
inyeccin no debe durar ms que 10 minutos, a menos que
en la monografa se especifique tiempo diferente.
Registrar la temperatura de cada animal en intervalos de 30
minutos durante 3 horas despus de la inyeccin.
Interpretacin
No considerar las disminuciones de temperatura presen-
tados por los animales durante la prueba. El aumento de
temperatura es verificado por la diferencia entre la mayor
temperatura presentada por el conejo durante la prueba y
su temperatura de control.
Si ninguno de los tres conejos presenta aumento individual
de la temperatura igual o superior a 0,5 C, con relacin a
sus respectivas temperaturas control, el producto cumple
con los requisitos de la prueba de pirgenos.
Si algn conejo presenta aumento de la temperatura igual
o superior a 0,5 C, repetir la prueba utilizando otros cinco
animales.
El producto en examen cumple los requisitos para ausen-
cia de pirgenos si como mximo tres de los ocho conejos
presentan aumentos individuales de temperatura iguales o
superiores a 0,5 C, y si la suma de los aumentos individua-
les de todos los conejos no excede a 3,3 C.
5.5.2.2 ENDOTOXINAS BACTERIANAS
La prueba de endotoxina bacteriana es usada para detec-
tar o cuantificar endotoxinas de bacterias gram negativas
presentes en muestras para cual la prueba es solicitada. Se
 230 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
utiliza el extracto acuoso de los amibocitos circulantes de
Limulus polyphemus o de Tachypleus tridentatus prepara-
do y caracterizado como reactivo LAL.
Hay dos tcnicas con sensibilidad diferente para esta prue-
ba:
1. MTODO DE COAGULACIN EN GEL: basado en
la formacin de cogulo o gel (mtodo semi-cuantita-
tivo)
2. MTODOS FOTOMTRICOS cuantitativos que in-
cluyen:
El MTODO TURBIDIMTRICO, (basado en el desarro-
llo de turbidez despus de quiebra de un sustrato endge-
no);
El MTODO CROMOGNICO (basado en el desarrollo
de color despus de quiebra de un complejo pptido sint-
tico cromgeno).
Cualquiera de estos procedimientos puede ser realizado, a
5
menos que sea indicado lo contrario en la monografa.
En el mtodo de coagulacin en gel, la determinacin del
punto final de la reaccin est hecha a partir de diluicio-
nes de la sustancia bajo prueba en comparacin directa con
diluiciones paralelas de la endotoxina estndar. Las canti-
dades de endotoxinas estn expresadas en unidades de en-
dotoxina (UE) definidas.
Nota: 1 UE es igual a 1 UI (unidad internacional).
El reactivo LAL (lisado de amebocito de Limulus sp.) es
preparado para las lecturas turbidimtricas o colorimtricas
y estos procedimientos pueden ser utilizados si cumplen
los requisitos de los mtodos. Para su calibracin es nece-
saria la elaboracin de una curva estndar obtenindose su
regresin lineal, en la cual se determina, por interpolacin,
la concentracin de endotoxina de la sustancia bajo prueba.
El procedimiento incluye incubacin de la endotoxina es-
tndar para obtencin de una curva de calibracin y de las
soluciones control con reactivo LAL, por tiempo predeter-
minado y lectura espectrofotomtrica en el largo de onda
adecuado.
En el caso del procedimiento del mtodo turbidimtrico,
la lectura est hecha inmediatamente despus de perodo
final de incubacin, y para el procedimiento colorimtrico
la reaccin enzimtica es interrumpida en el final del tiem-
po predeterminado por la adicin del reactivo, antes de las
lecturas. Para los procedimientos cinticos turbidimtricos
y colorimtricos los valores de absorbancia medida duran-
te el perodo de la reaccin y valores de velocidades son
determinados para aquellas lecturas.
ELEMENTOS DE VIDRIO Y DESCARTABLES.
Todos los elementos de vidrio deben ser higienizados en
estufa usando un proceso validado. Utilice un tiempo y
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
temperatura mnimos de 250 C por 30 minutos. Si utilizar
descartables plsticos, como punteras y pipetas usen sola-
mente los certificados que indican ser libres de endotoxinas
para no haber interferencia en la prueba.
PREPARACIN DE LA ENDOTOXINA ESTNDAR
DE REFERENCIA Y DEL ESTNDAR DE
ENDOTOXINA
El estndar de endotoxina de referencia tiene una poten-
cia definida de 10.000 UE (unidades de endotoxina) por
frasco. Reconstituya el frasco con 5 ml de agua grado re-
activo LAL (libre de pirgenos) y agite en vortex intermi-
tentemente por 30 minutos. Use esta solucin concentrada
(conservada en refrigerador por no ms que 14 das) para
hacer diluiciones seriadas. Agite vigorosamente antes del
uso por lo menos por 3 minutos y proceda a las diluicio-
nes seriadas, agitando como mnimo 30 segundos antes de
las prximas diluiciones. Despus del uso descartar las di-
luiciones debido a la prdida de actividad por adsorcin.
Para la preparacin del estndar de endotoxina (siga las
orientaciones del proveedor, certificados en el laudo de en-
dotoxina).
Preparacin para la prueba
Usar reactivo LAL con sensibilidad declarada confirmada.
La validez de los resultados de la prueba para endotoxinas
bacterianas requiere la demostracin de que las muestras,
soluciones de lavados o extractos bajo prueba no inhiben
o potencializan la reaccin y tampoco interfieren con la
prueba. La validacin es realizada por medio de prueba
de inhibicin o potencializacin descrito para cada una de
las tcnicas indicadas. Estn incluidos controles negati-
vos apropiados. La validacin debe ser repetida si hubiere
cambio en el origen del reactivo LAL, en el mtodo de
produccin o en la formulacin de la sustancia bajo prueba.
Preparacin de la muestra
Prepare la solucin de muestra disolviendo la misma en
agua grado reactivo LAL. Si necesario ajuste el pH de la
solucin de la muestra para que la mezcla reactiva LAL
ms muestra caiga en la banda de pH de 6 a 8. El pH puede
ser ajustado usando un tampn adecuado recomendado por
el proveedor. cidos y bases pueden ser preparados con
agua grado reactivo LAL y ser validados para ser libres de
endotoxinas y factores de interferentes.
DETERMINACIN DE LA MXIMA DILUICIN
VALIDA (MDV)
La mxima diluicin vlida es la mxima diluicin permi-
tida de la muestra en anlisis donde el lmite de endotoxina
puede ser determinado. Ella se aplica para inyecciones o
soluciones de administracin parenteral en la forma re-
constituida o diluida para administracin, cantidad de fr-
maco por peso, si el volumen de la forma de la dosificacin
fuese variable.
La frmula para el clculo de la MDV es la siguiente:

lmite de endotoxina
MDV =
en que:
= es la sensibilidad rotulada del reactivo de LAL
Observacin: frmula usada para cuando el lmite de endo-
toxina del frmaco especificado en la monografa est en
volumen (UE/ml)
Cuando lmite de endotoxina del frmaco especificado en
la monografa est en peso (UE/mg) o en unidad del fr-
maco activo (UE/unidades) el MDV es calculado por la
siguiente frmula:
lmite de endotoxina x concentracin
de la muestra en la solucin
MDV =
en que:
= es la sensibilidad rotulada del reactivo de LAL
El MDV obtenido es el factor de diluicin lmite para que
la prueba sea validada.
ESTABLECIMIENTO DEL LMITE DE ENDOTOXINA
La frmula para establecer lmite de endotoxina para dro-
gas parenterales es:
K
LE =
M La sensibilidad del reactivo LAL en UE/ml es calculada
en que:
LE es el lmite de endotoxina
K es la dosis lmite humana de endotoxina por quilo de
peso corpreo;
M es igual a la mxima dosis del producto por kg de peso
en un perodo de una hora.
El lmite de endotoxina es especificado en las monografas
individuales de las drogas parenterales en UE/ml, UE/mg
o UE/unidad de actividad biolgica.
TCNICA DE COAGULACIN EN GEL
La tcnica de la coagulacin en gel permite la deteccin
y cuantificacin de endotoxinas basada en la reaccin de
gelificacin del reactivo LAL
La sensibilidad del LAL rotulada es la concentracin de
endotoxina necesaria para causar una gelificacin del re-
activo LAL
Para garantizar la precisin y validez de la prueba son ne-
cesarios pruebas para confirmar la sensibilidad del LAL
rotulada as como pruebas para verificacin de factores in-
terferentes, como descrito en la preparacin de la muestra
para la prueba.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 231
Prueba para confirmacin de sensibilidad del LAL
Confirmar la sensibilidad declarada del LAL usando como
mnimo 01 frasco de reactivo LAL y preparar una serie de
diluiciones de endotoxina usando el estndar de Endotoxi-
na de referencia (RSE) o el estndar de Endotoxina (CSE),
con razn geomtrica igual a 2 para obtener las concen-
traciones de 0,25 , 0,5 , y 2 s, donde es la sensi-
bilidad declarada del LAL en UE/ml. Ejecutar la prueba
con las cuatro concentraciones del estndar de endotoxina
en cuadruplicado e incluir controles negativos. El prome-
dio geomtrico de la concentracin del punto final cuyo
clculo e interpretacin se encuentran a continuacin debe
ser mayor o igual a 0,5 y menor o igual a 2 . La confir-
macin de la sensibilidad del LAL debe ser realizada para
cada nuevo lote de LAL.
Clculo e interpretacin. El punto final de gelificacin es
la ltima prueba de la serie decreciente de concentracin
de endotoxina estndar que form gel. Calcule el promedio
geomtrico logartmico de los puntos finales de gelifica-
cin y el antilog del promedio por la frmula:
Promedio geomtrico de Ee
concentracin del punto final = antilog f
en que
5
Ee es la suma de los log de las concentraciones del punto
final de la serie de diluiciones utilizada
f es el nmero de rplicas.
por la frmula arriba y no debe ser menor que 0,5 y ma-
yor que 2 .
Pruebas de interferencias en el mtodo coagulacin en
gel (Inhibicin/Potencializacin)
Realizar la prueba en alcuotas de la muestra en la cual no
hay endotoxina detectable y en diluiciones que no exce-
da el MDV (mxima diluicin vlida). Ejecutar la prueba,
como en el procedimiento de la prueba, en la muestra sin
adicin de endotoxina (solucin A) y en la muestra con en-
dotoxina adicionada (solucin B), en las concentraciones
de 1/4 , 1/2 , 1 y 2 , en cuadruplicatas, y testando tam-
bin en paralelo las mismas concentraciones de endotoxina
en agua (solucin C) y control negativo en agua grado re-
activo LAL (solucin D) en duplicado.
Calcular el promedio geomtrico de la concentracin de
endotoxina del punto final de gelificacin de la muestra
como descrito en el procedimiento de la prueba arriba
(prueba para confirmacin de la sensibilidad del LAL).
La prueba es vlida para la muestra bajo anlisis si el pro-
medio geomtrico de esta concentracin es mayor o igual
a 0,5 y menor o igual a 2 . Si el resultado obtenido en
las muestras en las cuales fueron adicionadas endotoxina
est fuera del lmite especificado, la prueba de inhibicin o
potencializacin de endotoxina deber ser repetida despus
de neutralizacin, inactivacin o eliminacin de las sustan-
cias interferentes o despus de la diluicin de la muestra
por factor que no exceda la MDV. Repetir la prueba en
 232 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
una diluicin mayor no excediendo la MDV o usar un LAL
de sensibilidad mayor para que la interferencia pueda ser
eliminada en la muestra analizada.
Interferencias pueden ser eliminadas por un tratamiento
adecuado como filtracin, neutralizacin, dilisis o calen-
tamiento.
COAGULACIN EN GEL PRUEBA LMITE
Esta prueba es usada cuando la monografa contiene requi-
sitos para lmite de endotoxina.
Procedimiento. Realice las pruebas en duplicatas con las
soluciones A, B, C, D como sigue. Prepare solucin de
muestra diluida sin adicin de endotoxina (solucin A);
con adicin de endotoxina (control positivo del producto)
a 2 (solucin B); agua grado reactivo LAL con adicin de
endotoxina a 2 (solucin C) y agua grado reactivo LAL
sin adicin de endotoxina (solucin D control negativo).
La diluicin de la solucin A y B no debe pasar la MDV.
Interpretacin. La prueba solamente ser vlida si las r-
5
plicas de los controles positivos de las soluciones B y C
forman gel, y las rplicas de los controles negativos de las
soluciones A y C no forman gel. Resultados contrarios, no
sern vlidos y debern ser repetidos.
Ensayo de la prueba por la coagulacin en gel
Mezcle un volumen (ej. 100 L) de LAL con igual volu-
men de las soluciones arriba, muestra, estndares, y control
negativo de la prueba en tubos de ensayo 10 x 75mm, en
duplicatas. Incubar los tubos por 1 hora a 37 C 1 C, evi-
tando vibraciones. Despus de este perodo retire los tubos
uno a uno, girando a 180 grados y verificando la integridad
del gel; si el gel permanece firme despus de la inversin
de los tubos considere el resultado como positivo, y si no
hubiere formacin de gel o el mismo no se presenta firme
considere como negativo.
La prueba solamente ser vlida si las siguientes condicio-
nes son obedecidas:
Si ambas rplicas del control negativo (D) presentan reac-
ciones negativas;
Si ambas rplicas del control positivo del producto (B) pre-
sentan reacciones positivas;
Si el promedio geomtrico de la solucin C est dentro de
la banda de 0,5 a 2.
Para calcular la concentracin de endotoxina de la solu-
cin A, calcule la concentracin del punto final de cada
rplica de la serie de diluiciones, multiplicando cada factor
de diluicin del punto final por la sensibilidad rotulada del
reactivo LAL ()
La concentracin de endotoxina en la solucin prueba es
el promedio geomtrico de la concentracin del lmite de
las rplicas.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Si la prueba es realizada en la muestra diluida, determi-
na la concentracin de endotoxina en la solucin original
multiplicando el resultado por el factor de diluicin de la
muestra. Si ninguna de las diluiciones de la muestra prue-
ba es positiva, exprese el resultado de la concentracin de
endotoxina como menor que la sensibilidad del LAL () o
menor del que a sensibilidad del LAL multiplicado por el
menor factor de diluicin de la muestra.
Si todas las diluiciones de la muestra presentan reacciones
positivas, la concentracin de endotoxina es expresa como
igual o mayor que multiplicado por el ms alto factor de
diluicin de la muestra.
La muestra encuentra los requisitos de la prueba si la con-
centracin de endotoxina es menor que el lmite individual
especificado en la monografa.
TCNICAS FOTOMTRICAS
Los mtodos fotomtricos cuantitativos incluyen:
a) Mtodo cintico turbidimtrico: basado en el desarrollo
de turbidez despus de quiebra de un sustrato endge-
no.
b) Mtodo cintico cromognico: basado en el desarrollo
de color despus de quiebra de un complejo pptido
sinttico cromgeno.
c) Mtodo cromognico lmite (endpoint).
d) Mtodo turbidimtrico lmite (endpoint).
Tcnica turbidimtrica
Esta tcnica se basa en la medida de aumento de turbidez, y
dependiendo del principio empleado, puede ser clasificado
en 2 tipos:
a) Lmite Turbidimtrico: basado en la relacin entre la
concentracin de endotoxina y la turbidez (absorbancia
o transmisin) de la reaccin
b) Cintico Turbidimtrico: mtodo basado en el tiempo
de reaccin (onset time) necesario para la mezcla que
la reaccin alcance una absorbancia predeterminada o
en la relacin de desarrollo de turbidez.
La prueba es realizada en una temperatura de incubacin
recomendada de 37 C 1 C.
Tcnica cromognica
Esta tcnica es basada en la medida de un cromforo li-
berado por un pptido cromognico por la reaccin de la
endotoxina con el lisado y dependiendo del principio em-
pleado puede ser clasificado en dos tipos:
a) Prueba cromognica lmite- est basada en la relacin
entre la concentracin de endotoxina y la cantidad del
cromforo liberado en el final de un perodo de incu-
bacin.
b) Prueba cintica cromognica: basada en la medida del
tiempo de reaccin (onset time) necesaria para que la

mezcla de la reaccin alcance una predeterminada ab-
sorbancia o en la velocidad de desarrollo de color.
La prueba es realizada en una temperatura de incubacin
recomendada de 37 1 C.
Preparacin de la prueba
Para asegurar la precisin y validez de las pruebas turbidi-
mtricas y cromognicas, pruebas preparatorias son reali-
zadas para asegurar que los criterios para la curva estndar
son satisfactorios y la muestra en prueba no interfiere con
la prueba.
La validacin del mtodo es requerida cuando cualquier
cambio en las condiciones experimentales es realizado y
puede interferir en la prueba.
Criterios para la curva estndar
Prepare una curva estndar utilizando tres concentraciones
de endotoxina, usando una solucin preparada de estndar
de endotoxina, y realice la prueba, como mnimo en tri-
plicado de cada concentracin, como recomendado por el
proveedor del LAL (relacin de volumen, tiempo de incu-
bacin, temperatura y pH, etc.)
Si se desea una banda mayor que 2 logs, una concentracin
estndar deber ser adicionada para aumentar la banda de
la curva estndar.
El valor absoluto de correlacin lineal R deber ser mayor
o igual a 0,980 para la banda. De concentracin de endoto-
xina indicada por el proveedor de LAL.
Prueba para factores de interferencia para las tcnicas
fotomtricas
Prepare soluciones de muestra diluida sin exceder la MDV
(mxima diluicin vlida) sin endotoxina (solucin A) y
con endotoxina adicionada (solucin B) en la concentra-
cin igual o prxima del punto medio de la curva estndar.
Prepare tambin una serie de control positivo con solucio-
nes de endotoxina (solucin C) con tres concentraciones
diferentes, y tambin el control negativo con agua pirog-
nica (solucin D) y realizar las pruebas adicionando reacti-
vo LAL, como mnimo en duplicado (siga las orientaciones
del reactivo utilizado con relacin al volumen de muestra
y del reactivo, tiempo de incubacin), el punto ms bajo de
la curva es considerado .
Calcule el promedio de recuperacin de la endotoxina adi-
cionada a la muestra sustrayndose el promedio de la con-
centracin de endotoxina en la solucin prueba (solucin
A) (si hubiere) de la media de la solucin cuya endotoxina
fue adicionada (solucin B).
La solucin prueba es considerada libre de interferentes si
la medida de la concentracin de endotoxina adicionada
a la solucin prueba (solucin B) est en la banda de 50
a 200% de recuperacin, despus de sustraccin de cual-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 233
quier endotoxina detectada en la solucin sin adicin de
endotoxina.
Cuando la recuperacin de endotoxina est en la banda de
especificacin, factores interferentes deben ser retirados
conforme descritos en la seccin de la tcnica de coagu-
lacin en gel.
Procedimiento
Siga los procedimientos descritos arriba en los tems:
Preparacin para la prueba y Pruebas para factores inter-
ferentes.
Clculos para tcnicas fotomtricas
Calcule la concentracin de endotoxina para cada rplica
de la solucin A, usando la curva estndar generada por la
serie de control positivo solucin C.
La prueba solamente es vlida si los tres requisitos abajo
son encontrados:
5
El resultado obtenido de la solucin D (control negativo)
no excede el lmite del valor del blanco requerido en la
descripcin del lisado empleado;
El resultado obtenido con la serie de control positivo, solu-
cin C, est de acuerdo con los requisitos para validacin
definidos en los criterios para curva estndar.
La recuperacin de endotoxina, calculada a partir de la en-
dotoxina encontrada en la solucin B despus de sustrac-
cin de la concentracin de endotoxina encontrada en la
solucin A est dentro de la banda de 50 a 200%.
Interpretacin de los resultados en ensayos fotomtricos
La solucin de muestra a ser examinada estar de acuerdo
con la prueba si el promedio de la concentracin de endo-
toxina encontrada en las rplicas (solucin A), despus de
correccin para diluicin y concentracin es menor que el
lmite de endotoxina del producto probado.
REACTIVOS
Lisado de Amebocito
El lisado de amebocito es un liofilizado obtenido del lisado
de amebocitos de crustceo en forma de herradura (Limu-
lus polyphemus o Tachypleus tridentatus) Este reactivo se
refiere apenas al producto manufacturado de acuerdo con
las reglamentaciones de autoridad competente.
El lisado reacciona tambin con algunos B-Glucanos ade-
ms de endotoxinas.
Preparado del lisado que no reacciona con B-Glucanos
tambin estn disponibles; ellos son preparados o por eli-
minacin o por inhibicin del factor G, que reacciona con
 234 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
los glucanos. Estos preparados pueden ser utilizados para
prueba de endotoxina en la presencia de glucanos.
Reconstitucin del reactivo. Disuelva el lisado de amebo-
cito (LAL) en agua grado reactivo para BET (prueba de
endotoxina bacteriana) o tampn, sin agitacin y almacene
el mismo en refrigerador o freezer de acuerdo con la reco-
mendacin del proveedor.
Agua para prueba de endotoxina bacteriana
El agua para prueba y agua para inyeccin o producida
para otros procedimientos que demuestre no tener ninguna
reaccin con el lisado empleado en el lmite de deteccin
del reactivo.
5.5.2.3 TOXICIDAD
La prueba de toxicidad posibilita detectar reactividad bio-
lgica inesperada y no aceptable de frmacos y medica-
mentos. Esa prueba in vivo es sugerida para la evaluacin
de la seguridad de productos biolgicos y derivados de
biotecnologa.
5
PRUEBA GENERAL
Seleccin de los animales
Usar ratones sanos, de ambos los sexos, de especmenes
conocidos, no utilizados previamente en pruebas biolgi-
cas. Mantenerlos a dieta uniforme, agua a gusto y en tem-
peratura ambiente constante de 21 3 C. En el da de la
prueba, seleccionar ratones con peso entre 17 g y 22 g.
Preparacin de la muestra
La muestra debe ser preparada conforme especificado en
la respectiva monografa y administrada inmediatamente.
Procedimiento
Usar jeringas, agujas y elementos de vidrio estriles. Ad-
ministrar, en cinco ratones, volumen de la preparacin
muestra indicada en la monografa, por una de las vas des-
critas a continuacin.
Intravenosa Inyectar la dosis en la vena caudal, mante-
nindose la velocidad constante de 0,1 ml por segundo o la
indicada en la monografa.
Intraperitoneal Inyectar la dosis en la cavidad peritoneal.
Subcutnea Inyectar la dosis en la regin cervical o ab-
dominal.
Oral Administrar la dosis por medio de sonda u otro dis-
positivo adecuado.
Interpretacin
Mantener los animales en observacin durante 48 horas des-
pus de la administracin o por el tiempo indicado en la mo-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
nografa. La muestra cumple la prueba si todos los animales
sobreviven y no ms de uno presenta sntomas anormales
en el intervalo de tiempo establecido. Si uno o dos animales
mueren, o ms de uno presenta sntomas anormales o de to-
xicidad inesperada, repetir la prueba utilizando otros cinco o
ms ratones, con peso entre 19 g y 21 g. La muestra cumple
los requisitos de la prueba si el nmero de ratones muertos
no excede 10% del total de animales probados, incluyendo
la prueba original, y ningn animal del segundo grupo pre-
senta sntomas indicativos de toxicidad anormal.
PRUEBA PARA PRODUCTOS BIOLGICOS,
SUEROS Y VACUNAS
Seleccin de los animales
Usar, por lo menos, cinco ratones con peso entre 17 g y 22
g y, por lo menos, dos cobayos sanos con peso entre 250
g y 350 g.
Procedimiento
Pesar los animales y registrar en formulario propio antes
de inyectar la muestra. A menos que especificado de otra
forma en la monografa, inyectar intraperitonealmente en
cada animal el equivalente a una dosis humana de la pre-
paracin, sin pasar de 1,0 ml para ratones y de 5,0 ml para
cobayos. La dosis humana es definida en el rtulo de la
preparacin a prueba o en la bula que la acompaa.
Interpretacin
Por un perodo de, como mnimo, 7 das, observar los ani-
males cuanto a seales de enfermedad, prdida de peso,
anormalidades o muerte. Si, durante el perodo de obser-
vacin, todos los animales sobreviven, no manifiestan res-
puestas que no son especficas o esperadas para el producto
y no sufren reduccin de peso, la preparacin cumple la
prueba. De lo contrario, la prueba debe ser repetida para las
especies en las cuales los requisitos no fueron cumplidos.
La preparacin cumple la prueba si todos los animales del
segundo grupo cumplen los criterios especificados para la
prueba inicial.
Si, despus de la segunda prueba, la preparacin no cumple
los requisitos, pero no son observadas muertes en porcen-
taje igual o superior a 50% del nmero total de animales
probados, una segunda prueba puede ser realizada, en las
especies en las cuales se observ el no cumplimiento de
los requisitos. Utilizar el doble de animales de la prueba
inicial. Si los animales cumplen los criterios especificados
para la prueba inicial, la preparacin cumple la prueba.
5.5.2.4 SUSTANCIAS VASOPRESORAS
Preparacin estndar de referencia
Como preparacin estndar, emplear bitartrato de epinefri-
na. Esa preparacin debe ser conservada en frascos her-
mticos y opacos y desecada sobre gel de slice durante 18
horas antes del uso.

Solucin estndar de referencia
Disolver 91 mg de bitartrato de epinefrina (equivalente a
50 mg de epinefrina base C9H13NO3) en solucin recien-
te de bisulfito de sodio 0,4% (p/v). Completar 50 ml con
agua y homogeneizar. La solucin final tendr 1,0 mg de
epinefrina (base libre) por mililitro. Conservar, bajo refri-
geracin, en frasco hermtico mbar. Usar, como mximo,
durante seis meses. Descartar la solucin cuando est pre-
sente alguna seal de deterioro, tal como cambio de color.
Diluicin del estndar
Diluir la solucin estndar de referencia de epinefrina, en
solucin fisiolgica, de modo que la administracin de do-
sis entre 0,1 ml y 0,5 ml produzca aumento de 20 mm a 70
mm de mercurio en la presin arterial.
Mtodo propuesto
Seleccionar rata con peso entre 275 g y 325 g y aneste-
siar con anestsico que posibilite el mantenimiento de la
presin arterial constante. (Exento de efecto sobre presin
arterial). Inmovilizar el animal y mantenerlo caliente para
prevenir la prdida de calor corporal. Quirrgicamente
proceder a la intubacin traqueal, si necesario, y exponer
la vena femoral o yugular, preparndola, para inyecciones
intravenosas. Administrar 200 unidades de heparina por
100 g de peso corporal. Quirrgicamente exponer la arte-
ria cartida y canular, conectndola al manmetro ajustado
para el registro continuo de la presin arterial.
Inyectar, intravenosamente, solucin de sulfato de atropina
0,1% (p/v) en la proporcin de 1 ml por quilogramo de
peso corporal. Considerar el receptor muscarnico suficien-
temente bloqueado solamente si inyecciones subsiguientes
de la solucin reciente de cloruro de acetilcolina 0,001%
(p/v) en la dosis de 1 ml por quilogramo de peso no produ-
ce cada transitoria en la presin arterial. Si ese mecanis-
mo no est suficientemente paralizado, inyectar dosis de
0,5 ml de la solucin de sulfato de atropina hasta parlisis
completa.
Procedimiento
Seleccionar dosis de la diluicin estndar que produzca
aumento entre 2,7 kPa y 9,3 kPa (20 mm a 70 mm de mer-
curio) en la presin arterial. Inyectar la dosis en intervalos
constantes de, como mnimo, cinco minutos para posibili-
tar el retorno de la presin arterial al nivel basal. Despus
de cada inyeccin administrar, inmediatamente, 0,2 ml de
solucin fisiolgica para lavar la cnula. Asegurarse de la
reproductibilidad de la respuesta, repitiendo la dosis dos
o ms veces. Administrar nueva dosis de la diluicin del
estndar para obtener respuesta hipertensora aproximada-
mente 20% mayor que el promedio de las respuestas de la
dosis menor. Considerar el animal apto para la prueba si
(1) las respuestas para la primera dosis seleccionada fueren
reproducibles entre 2,7 kPa y 9,3 kPa (20 mm a 70 mm de
mercurio) y (2) significativamente menores con relacin a
la respuesta de la dosis mayor.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 235
Manteniendo constante el intervalo de tiempo establecido,
inyectar serie de cinco dosis en la cual se alternen la dosis
seleccionada de la diluicin estndar y dosis de igual vo-
lumen de la sustancia a prueba, diluida convenientemente.
Despus de cada una de las cinco inyecciones, medir la
variacin en la presin arterial.
Calcular la diferencia entre cada respuesta de la muestra y
el promedio de las respuestas de las dosis de la diluicin
estndar, inmediatamente anterior y posterior. La muestra
cumple los requisitos de la prueba si el promedio de esas
diferencias significa que las respuestas obtenidas con so-
lucin de la muestra no son mayores que aquellas de la
diluicin estndar. Los resultados deben corresponder al
lmite de actividad presora especificado para esta prueba
en la monografa correspondiente.
5.5.2.5 HISTAMINA
Someter a eutanasia una cobaya con peso entre 250 g y 350
g, en ayuno de aproximadamente 24 horas. Retirar apro-
ximadamente 10 cm de la porcin distal del leon. Lavar
internamente con solucin nutritiva. Seleccionar porcin
5
con cerca de dos o tres centmetros de largo y amarrar dos
lneas finas en las extremidades. Efectuar pequea incisin
en la porcin central del tejido. Transferirlo para cuba de
rgano aislado, de 10 ml a 20 ml de capacidad, en tem-
peratura controlada entre 34 C a 36 C bajo corriente de
aire o mezcla de 95% de oxgeno y 5% de CO2. Fijar una
de las lneas en el fondo de la cuba y amarrar la otra en
la palanca destinada a registrar las contracciones muscula-
res en el quimgrafo u otro sistema de registro adecuado.
Ajustar la palanca para el registro de las contracciones del
leon con grado de amplificacin de la orden de 20 veces.
Lavar la preparacin con solucin y dejarla en reposo por
10 minutos.
Aadir volmenes conocidos de 0,2 ml a 0,5 ml de so-
lucin estndar de referencia de histamina (1 g/ ml) para
obtener respuesta submxima (dosis mayor). Lavar el leon
tres veces con solucin nutritiva. Efectuar las adiciones
sucesivas en intervalos regulares de aproximadamente 2
minutos. Aadir nuevas dosis de solucin estndar de refe-
rencia de histamina obtenida por diluicin de la solucin
original, para mantener los volmenes de dosis siempre
iguales estableciendo la dosis responsable de respuesta
cuya intensidad sea la mitad de la dosis mayor (dosis me-
nor).
Proseguir la prueba adicionando secuencias de tres dosis:
dosis estndar de referencia menor, dosis de solucin de la
sustancia bajo prueba y dosis estndar de referencia mayor.
Ajustar la diluicin de la muestra para que, ocurriendo con-
traccin del leon, esta sea menor que la producida por la
dosis estndar de referencia mayor.
Establecer la reproductividad de la contraccin por repeti-
ciones sucesivas de las secuencias de dosis.
Calcular la actividad de la sustancia bajo prueba en tr-
minos de su equivalente en microgramo por mililitro de
histamina (base libre), tomando por base las diluiciones
 236 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
efectuadas. El valor encontrado no debe exceder el lmite
establecido en la monografa.
No ocurriendo contraccin en dicha prueba por efecto de
la muestra ensayada, preparar nueva solucin de la mues-
tra, adicionado cantidad de histamina correspondiente al
lmite mximo especificado en la monografa y observar
si la contraccin producida es proporcional a la cantidad
de histamina adicionada. Considerar la prueba vlida si
esa respuesta es proporcional y si confirma la reproducti-
bilidad de las contracciones inducidas por la secuencia de
dosis: dosis estndar de referencia menor, dosis de solu-
cin de la sustancia a prueba y dosis estndar de referencia
mayor. Caso contrario, realizar la prueba para sustancias
vasodepresoras.
Solucin nutritiva (preparar en el momento de la
utilizacin)
Solucin A* 50 ml
Sulfato de atropina 0,5 mg
Bicarbonato de Sodio 1,0 g
Dextrosa anhidra (para uso parenteral) 0,5 g
5
Agua para inyectables suficiente para 1000 ml
Solucin A
Cloruro de sodio 160,0 g
Cloruro de potasio 4,0 g
Cloruro de calcio anhidro 2,0 g
Cloruro de magnesio anhidro 1,0 g
Fosfato de sodio dibsico 0,05 g
Agua para inyectables suficiente para 1000 ml
5.5.2.6 SUSTANCIAS VASODEPRESORAS
Preparacin del estndar de referencia
Emplear diclorhidrato de histamina, conservando en frasco
hermtico y opaco, desecado sobre gel de slice durante
dos horas, antes del uso.
Solucin estndar de referencia
Disolver, en agua para inyectable estril, cantidad sufi-
ciente y exactamente pesada de diclorhidrato de histamina
para obtener solucin conteniendo el equivalente a 1 mg/
ml de histamina (base libre). Conservar bajo refrigeracin
en recipiente de vidrio mbar dotado de tapa esmerilada,
al abrigo de la luz, durante un mes. En el da de la prue-
ba, preparar solucin estndar de referencia conteniendo el
equivalente a 1 g/ml de histamina (base libre), en solu-
cin fisiolgica.
Solucin de muestra
Preparar a solucin de muestra conforme a especificacin
de la monografa respectiva.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Mtodo sugerido
Realizar la prueba usando un gato con peso mnimo de 2
kg (pesar gato adulto y sano) (en el caso de hembras, que
no estn preadas) y anestesiarlo por medio de inyeccin
de cloralosa o barbitrico que posibilite el mantenimiento
de presin arterial uniforme. Inmovilizar el animal y pro-
tegerlo para prevenir prdida de calor corporal, hacer el
monitoreo rectal de la temperatura para mantenimiento de
los lmites fisiolgicos.
Disecar la vena femoral, o yugular, preparndola por inser-
cin de cnula repleta de heparina (1000 unidades/ml de
solucin fisiolgica) para la administracin de las solucio-
nes estndar de referencia y muestra.
Exponer, quirrgicamente, la arteria cartida, disecndola
completamente de las estructuras circundantes, inclusive el
nervio vago. Insertar una cnula conectndola directamen-
te al manmetro de mercurio u otro dispositivo apropiado
para el registro continuo de presin arterial.
Evaluar la sensibilidad del gato a histamina, inyectando
en intervalos uniformes de, como mnimo cinco minutos,
dosis correspondientes a 0,05 g (dosis A); 0,10 g (dosis
B) y 0,15 g (dosis C) de histamina (base libre) por quilo-
gramo de peso corporal. Despus de cada administracin,
lavar inmediatamente a cnula por inyeccin de aproxima-
damente 0,5 ml de solucin fisiolgica, para retirar acti-
vidad residual. Repetir tres veces la administracin de la
dosis B a fin de observar la uniformidad de respuesta a la
misma dosis. El animal es considerado apto a la realizacin
de la prueba si las respuestas a los tres niveles de dosifica-
cin fueren ntidamente diferenciadas y las respuestas a la
secuencia de dosis B fueren aproximadamente similares,
correspondiendo a cadas de presin arterial no inferiores a
2,7 kPa (20 mm de mercurio).
Inyectar dos series de cuatro dosis, consistiendo cada serie
de dos inyecciones de la dosis especificada en la monogra-
fa de la muestra, intercaladas con la dosis B, siempre con
intervalo uniforme de, como mnimo, cinco minutos.
Medir la alteracin de la presin arterial despus de cada
una de las inyecciones. En el anlisis de los resultados, se
considera que la muestra cumple los requisitos de la prueba
si el promedio de sus respuestas depresoras es inferior a
aquella de la dosis B.
Terminar la prueba administrando una dosis C del estndar
para comprobar que la respuesta se mantiene superior a la
dosis B: caso esto no ocurra, la prueba no es vlida.
El animal puede ser usado mientras permanezca estable y
responda, adecuadamente, a la administracin de la solu-
cin estndar de referencia.

5.5.3 ENSAYOS
MICROBIOLGICOS
5.5.3.1 ENSAYOS MICROBIOLGICOS
PARA PRODUCTOS NO ESTRILES
La contaminacin microbiana de un producto puede pro-
vocar alteraciones en sus propiedades fsicas y qumicas
y adems caracteriza riesgo de infeccin para el usuario.
As, productos farmacuticos de uso oral y tpico (cpsu-
las, comprimidos, suspensiones, cremas, adhesivos, etc.)
que no tienen como requerimiento ser estriles deben estar
sujetos al control de contaminacin microbiana.
La garanta de calidad y el control de fabricacin previstos
en las buenas prcticas deben garantizar que el producto
cumpla las especificaciones determinadas, esto es, que
atiendan adems de otros parmetros, a los lmites acepta-
bles para microorganismos.
Para la realizacin de la prueba deben ser considerados los
lmites microbianos, el tipo de contaminacin ms proba-
ble en las diferentes categoras de productos y la va de
administracin.
La naturaleza y la frecuencia de la prueba varan de acuer-
do con el producto. Ciertas categoras deben ser probadas
reiteradamente cuanto a la contaminacin total microbia-
na, tales como: productos de origen vegetal, mineral y/o
animal as como productos con elevado tenor de agua (so-
luciones orales acuosas, cremas, etc). Para las dems ca-
tegoras como comprimidos, polvos, cpsulas, productos
lquidos no acuosos, pomadas y supositorios, la frecuencia
de la prueba puede ser establecida con base en datos hist-
ricos de las pruebas de monitoreo microbiolgico tanto el
ambiental como el de equipos. Otros criterios a ser consi-
derados seran la carga microbiana de la materia prima, el
proceso de fabricacin, la formulacin del producto y los
resultados de determinacin de la actividad de agua, cuan-
do aplicable. Resultados de baja actividad de agua (igual
o inferior a 0,75 medidos a la 25 C), as como bajo o alto
pH, ausencia de nutrientes y adicin de conservantes ayu-
dan a prevenir la contaminacin microbiana.
5.5.3.1.1 Condiciones generales
Para los ensayos microbiolgicos en productos no estri-
les, se debe utilizar tcnicas aspticas en el muestreo y en
la ejecucin de la prueba. La prueba debe ser realizada,
preferentemente, en campana de flujo laminar y emplear,
cuando posible, la tcnica de filtracin por membrana.
Si la muestra posee actividad antimicrobiana, esa debe ser
convenientemente retirada o neutralizada.
La eficacia y la ausencia de toxicidad del agente inactivan-
te para los microorganismos considerados debe ser demos-
trada. Si se usan sustancias tensoactivas en la preparacin
de la muestra, tambin, debe ser demostrada la ausencia de
toxicidad para los microorganismos y compatibilidad con
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 237
el agente inactivante, conforme descrito en Conteo del n-
mero total de microorganismos mesfilos (5.5.3.1.2).
SOLUCIONES Y MEDIOS DE CULTIVO
Las soluciones y los medios de cultivos descritos son con-
siderados satisfactorios para realizar los ensayos lmite de
contaminacin microbiana prescritos. Sin embargo, pue-
den ser utilizados otros medios que posean propiedades
nutritivas y selectivas similares para las especies microbia-
nas analizadas.
Solucin Tampn cloruro de sodio-peptona, pH 7,0
Fosfato de potasio monobsico 3,6 g
Fosfato dissdico dihidratado 7,2 g
Cloruro de sodio 4,3 g
Peptona (carne o casena) 1,0 g
Agua purificada 1000 ml
Esterilizar en autoclave usando ciclo validado.
Tampn Fosfato pH 7,2 Solucin stock
5
Fosfato de potasio monobsico 34,0g
Hidrxido de sodio 4% Aadir aproximadamente 175 ml
Agua purificada 1000 ml
Disolver el fosfato de potasio monobsico en 500 ml de
agua, acertar el pH para 7,2 0,2 con hidrxido de sodio
4%. Completar el volumen con agua, esterilizar y conser-
var bajo refrigeracin. En ocasin de la utilizacin diluir
la solucin stock con agua en la proporcin de 1 para 800
(v/v) y esterilizar.
Fluido de lavado
Peptona de carne digestin pptica 1,0 g
Polisorbato 80 1,0 g (si necesario)
Agua 1000 ml
Pesar y disolver el ingrediente en el agua destilada agitan-
do constantemente. Calentar si necesario. Ajustar el pH de
forma que sea 7,1 0,2. Esterilizacin en autoclave usando
ciclo validado.
Diluyente Universal
Fosfato de potasio monobsico 3,6 g
Fosfato disdico Dihidratado 7,2 g
Cloruro de sodio 4,3 g
Peptona de carne o de casena 1,0 g
Lecitina de gema de huevo 3,0 g
L-histidina 1,0g
Polisorbato 80 30,0 g
Agua purificada 1000 ml
Pesar y disolver los ingredientes en el agua destilada agi-
tando constantemente. Calentar si necesario. Ajustar el pH
de forma que sea 6,8 0,2. Esterilizar en autoclave usando
ciclo validado.
 238 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Caldo neutralizante DEY-ENGLEY
Casena enzimtica hidrolizada 5,0 g
Prpura Bromocresol 20,0 mg
Extracto de Levadura 2,50 g
Tiosulfato de Sodio 6,00 g
Tioglicolato de Sodio 1,0 g
Bisulfito de sodio 2,50 g
Polisorbato 80 5,00 g
Dextrosa 10,0 g
Lecitina 7,0 g
Agua 1000 ml
Pesar y disolver los ingredientes en el agua destilada agi-
tando constantemente. Calentar si necesario. Ajustar el pH
de forma que sea 7,6 0,2. Esterilizar en autoclave usando
ciclo validado.
Caldo Casena-soja
Peptona de Casena pancretica 17,0 g
Harina de soja obtenida por digestin papanica 3,0 g
Cloruro de sodio 5,0 g
Fosfato de potasio dibsico 2,5 g
5
Glucosa monohidratada 2,5 g
Agua purificada 1000 ml
pH 7,3 0,2. Esterilizar en autoclave usando ciclo vali-
dado.
Agar Casena-soja
Peptona de casena pancretica 15,0 g
Harina de soja obtenida por digestin papanica 5,0 g
Cloruro de sodio 5,0 g
Agar 15,0 g
Agua purificada 1000 ml
pH 7,3 0,2. Esterilizar en autoclave usando ciclo vali-
dado.
Agar Violeta Rojo Neutro Glucosa Citrato de amonio frrico 0,8 g
Extracto de levadura 3,0 g
Peptona de gelatina pancretica 7,0 g
Sales Biliares 1,5 g
Cloruro de sodio 5,0 g
Glucosa monohidratada 10,0 g
Agar 15,0 g
Rojo neutro 30,0 mg
Cristal violeta 2,0 mg
Agua purificada 1000 ml
pH 7,4 0,2.. Calentar hasta ebullicin. No esterilizar en
autoclave.
Caldo de Enriquecimiento para Enterobacterias Mossel
Hidrolizado de pancretico de gelatina 10,0 g
Glucosa monohidratada 5,0 g
Bilis de buey deshidratada 20,0 g
Fosfato de potssico monobsico 2,0 g
Fosfato disdico dihidratado 8,0 g
Verde brillante 15,0 mg
Agua purificada 1000 ml
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
pH 7,2 0,2. Calentar a 100 C durante 30 minutos. En-
friar inmediatamente.
Caldo MacConkey
Hidrolizado de pancretico de gelatina 20,0 g
Lactosa monohidratada 10,0 g
Bilis de buey deshidratada 5,0 g
Prpura de bromocresol 10,0 mg
Agua purificada 1000 ml
pH 7,3 0,2. Esterilizar en autoclave usando ciclo vali-
dado.
Agar MacConkey
Hidrolizado de pancretico de gelatina 17,0 g
Peptona (carne o casena) 3,0 g
Lactosa monohidratada 10,0 g
Cloruro de sodio 5,0 g
Bilis de buey deshidratada 1,5 g
Rojo neutro 30,0 mg
Cristal violeta 1,0 mg
Agar 13,5 g
Agua purificada 1000 ml
pH 7,1 0,2. Hervir 1 minuto con constante agitacin. Es-
terilizar en autoclave usando ciclo validado.
Agar Xilosa, Lisina, Desoxicolato
Xilosa 3,5 g
L-Lisina 5,0 g
Lactosa monohidratada 7,5 g
Sacarosa 7,5 g
Cloruro de sodio 5,0 g
Extracto de levadura 3,0 g
Rojo fenol 80,0 mg
Agar 13,5 g
Desoxicolato de sodio 2,5 g
Tiosulfato de sodio 6,8 g
Agua purificada 1000 ml
Ajustar de forma que despus de calentamiento sea pH 7,4
0,2. Calentar hasta la ebullicin. No esterilizar en auto-
clave.
Caldo Enriquecimiento Salmonela Rappaport Vassiliadis
Peptona de soja 4,5 g
Cloruro de magnesio hexahidratado 29,0 g
Cloruro de sodio 8,0 g
Fosfato de potasio dibsico 0,4 g
Fosfato de potasio monobsico 0,6 g
Verde malaquita 36,0 mg
Agua purificada 1000 ml
pH 5,2 0,2. Esterilizar en autoclave en temperatura que
no exceda 115 C.
Agar Cetrimida
Hidrolizado de pancretico de gelatina 20,0 g
Cloruro de magnesio 1,4 g
Sulfato dipotsico 10,0 g

Cetrimida 0,3 g
Agar 13,6 g
Agua purificada 1000 ml
Glicerol 10,0 ml
Hervir 1 minuto con constante agitacin. Ajustar el pH de
forma que sea 7,2 0,2. Esterilizacin en autoclave usando
ciclo validado.
Agar Manitol Salado
Hidrolizado de pancretico de casena 5,0 g
Peptona pptica de tejido animal 5,0 g
Extracto de carne 1,0 g
D-manitol 10,0 g
Cloruro de sodio 75,0 g
Agar 15,0 g
Rojo fenol 25 ,0 mg
Agua purificada 1000 ml
Hervir 1 minuto con constante agitacin. Ajustar el pH de
forma que sea 7,4 0,2. Esterilizar en autoclave usando
ciclo validado.
Agar Papa-dextrosa
Infusin de papa 200,0 g
Dextrosa 20,0 g
Agar 15,0 g
Agua purificada 1000 ml
Suspender 39 g en 1000 ml de agua. pH 5,6 0,2. Esterili-
zar en autoclave usando ciclo validado. Si pretende pH 3,5,
aadir aproximadamente 14 ml de solucin estril de cido
tartrico 10% (p/v) al medio enriado a 45-50 C.
Agar Sabouraud-dextrosa 4%
Dextrosa 40,0 g
Peptonas 10,0 g
Agar 15,0 g
Agua purificada 1000 ml
pH 5,6 0,2. Esterilizar en autoclave usando ciclo vali-
dado.
Caldo Sabouraud-dextrosa Cuando usado para ese propsito, se debe seguir las indi-
Dextrosa 20,0 g
Peptonas 10,0 g
Agua purificada 1000 ml
pH 5,6 0,2. Esterilizar en autoclave usando ciclo vali-
dado.
Agar Selectivo para Candida segn Nickerson
Extracto de levadura 1,0 g
Peptona harina de soja 2,0 g
Glicina 10,0 g
Glucosa 10,0 g
Indicador bismuto-sulfito 2,0 g
Agar 15,0 g
Agua purificada 1000 ml
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 239
Disolver 40 g en 1000 ml de agua. pH 6,5 0,2. Esterilizar
bajo vapor fluente.
Medio Reforzado para Clostridium
Extracto de carne 10,0 g
Peptona 10,0 g
Extracto de levadura 3,0 g
Almidn soluble 1,0 g
Glucosa monohidratada 5,0 g
Clorhidrato de cistena 0,5 g
Cloruro de sodio 5,0 g
Acetato de sodio 3,0 g
Agar 0,5 g
Agua purificada 1000 ml
Dejar entumecer el Agar y disolver calentando a ebulli-
cin, agitando constantemente. si necesario ajustar el pH
de forma que sea 6,8 0,2. Esterilizar en autoclave usando
ciclo validado.
Agar Columbia
Hidrolizado de pancretico de casena 10,0 g
5
Peptona de carne digestin 5,0 g
Digesto pancretico de corazn 3,0 g
Extracto de levadura 5,0 g
Almidn de maz 1,0 g
Cloruro de sodio 5,0 g
Agar, de acuerdo con el poder gelificante 10,0 15,0 g
Agua purificada 1000 ml
Dejar entumecer el agar y disolver calentando hasta ebulli-
cin, agitando constantemente. Si necesario ajustar el pH
de forma que sea 7,3 0,2. Esterilizar en autoclave usando
ciclo validado. Enfriar para 45 a 50 C y aadir, si nece-
sario, sulfato de gentamicina correspondiente a 20 mg de
gentamicina base, verter en placas de Petri.
5.5.3.1.2 Conteo del nmero total de
microorganismos mesfilos
Con esta prueba es posible determinar el nmero total de
bacterias mesfilas y hongos en productos y materias pri-
mas no estriles y es aplicado para determinar si el produc-
to satisface las exigencias microbiolgicas farmacopeicas.
caciones dadas, incluyendo el nmero de muestras tomas
e interpretacin de los resultados. La prueba no es aplica-
da para productos que contienen microorganismos viables
como ingrediente activo.
Esa prueba consiste en el conteo de la poblacin de mi-
croorganismos que presentan crecimiento visible, en hasta
5 das, en Agar casena-soja a 32,5 C 2,5 C y en hasta 7
das, en Agar Sabouraud-dextrosa a 22,5 C 2,5 C.
Mtodos microbiolgicos alternativos, inclusive los auto-
matizados, pueden ser utilizados desde que su equivalencia
con el mtodo farmacopeico haya sido debidamente vali-
dada.
 240 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
PREPARACIN DE LAS MUESTRAS
Productos hidrosolubles
Transferir 10 g o 10 ml de la mezcla de muestra para 90
ml de solucin tampn cloruro de sodio-peptona pH 7,0
o solucin tampn fosfato pH 7,2, Caldo Casena-soja u
otro diluyente adecuado. Si necesario, ajustar el pH para
6,0 a 8,0 con solucin HCl 0,1 M o NaOH 0,1 M. Preparar
diluiciones decimales sucesivas con el mismo diluyente.
Productos de naturaleza no lipdica insolubles en agua
Preparar una suspensin de 10 g o 10 ml de la mezcla de
muestra en solucin tampn cloruro de sodio-peptona, pH
7,0 o caldo de casena-soja u otro diluyente adecuado. En
general, la proporcin de diluyente y muestra es de 10:1,
pero las caractersticas del producto pueden exigir que sea
alterada esa relacin. Puede ser adicionado agente tensoac-
tivo como polisorbato 80, en la concentracin de 1 g/L,
para facilitar la dispersin. Si necesario, ajustar el pH para
6,0 a 8,0. Preparar diluiciones decimales sucesivas con el
mismo diluyente.
5
Productos de naturaleza lipdica
Mtodo de filtracin por membrana Disolver 1 g o 1 ml
de la mezcla de muestra en 100 ml de miristato de isopro-
pilo esterilizado por filtracin en membrana (y su extracto
acuoso debe presentar pH no inferior a 6,5) y calentado a
40 45 C. Puede ser utilizado polisorbato 80 estril u otro
agente tensoactivo no inhibitorio;
Mtodo de conteo en placa Transferir 10 g o 10 ml de la
mezcla de muestra para frasco conteniendo no ms que 5 g
de polisorbato 20 o 80 estril u otro agente tensoactivo no
inhibitorio. Calentar si necesario, a una temperatura entre
40 45 C.
Homogeneizar, cuidadosamente, manteniendo, si necesa-
rio, la temperatura 40 45 C. Aadir diluyente adecuado
entre los presentados en 5.5.3.1.1 Soluciones y Medios
de Cultivo, previamente calentado, en la cantidad necesa-
ria para obtener una diluicin a 1:10 del producto inicial.
Mezclar, cuidadosamente, manteniendo la temperatura
mxima de 40 45 C durante el tiempo necesario para
la formacin de una emulsin, en cualquier caso no ms
que 30 minutos. Si necesario, ajustar el pH para 6,5 7,5.
Preparar diluiciones decimales sucesivas con el mismo di-
luyente acrecido de polisorbato 20 o 80.
Cremas y pomadas insolubles en miristato de isopropilo
Transferir 10 g de la mezcla de muestra para obtener una
diluicin a 1:10 en caldo casena-soja conteniendo 0,1 de
tetradecil sulfato de sodio, calentado a 40 45 C. Agitar
hasta mezcla homognea.
Mezclar, cuidadosamente, manteniendo siempre la tempe-
ratura durante el tiempo mnimo necesario para la forma-
cin de una emulsin, en cualquier caso no ms que 30
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
minutos. Si necesario, ajustar el pH para 6,5 7,5. Prepa-
rar diluiciones decimales sucesivas con el mismo diluyente
acrecido de 0,1% de tetradecil sulfato de sodio.
Aerosoles
Enfriar por lo menos 10 recipientes del producto en mez-
cla de alcohol y hielo seco durante una hora. Abrir los
recipientes y dejarlos a temperatura ambiente para que el
propelente sea eliminado. Retirar 10 g o 10 ml de los re-
cipientes y transferir el producto para equipo de filtracin
o para frasco conteniendo solucin tampn fosfato pH 7,2
u otro diluyente adecuado para obtener diluicin 1:10. Si
necesario, ajustar el pH para 6,0 a 8,0. Preparar diluiciones
decimales sucesivas con el mismo diluyente.
Cpsulas vacas
Transferir 10 g de cpsulas vacas para 90 ml de solucin
tampn fosfato pH 7,2 calentados a 40 45 C y agitar
como mximo durante 30 minutos. Completar el volumen
para 100 ml (diluicin 5:10). Si necesario, ajustar el pH
para 6,0 a 8,0.. Preparar diluiciones decimales sucesivas
con el mismo diluyente.
Gelatinas
Transferir 10 g de la mezcla de muestra para frasco conte-
niendo agua estril calentada a 40 45 C y dejar en reposo
durante una hora (diluicin 1:10). Enseguida transferir el
frasco para bao mara a 45 C, agitando vigorosamente
en intervalos frecuentes. Si necesario, ajustar el pH para
6,0 a 8,0. Preparar diluiciones decimales sucesivas en agua
estril.
Dispositivo transdrmico
Con pinzas estriles, retirar la pelcula protectora de 10 dis-
positivos transdrmicos y colocarlos con el frente adhesivo
para arriba, en placas estriles y cubrir el frente adhesivo
con gaza esterilizada. Transferir los 10 dispositivos para
500 ml, en el mnimo, de solucin tampn cloruro de so-
dio-peptona pH 7,0 conteniendo agente inactivante apro-
piado como polisorbato 80 o lecitina de soja. Agitar vigo-
rosamente durante como mximo de 30 minutos.
Relacionados
Algodn y gaza transferir tres porciones de 3,3 g de las
partes ms internas de las muestras para solucin tampn
cloruro de sodio-peptona pH 7,0 conteniendo agente in-
activante apropiado. Preparar diluiciones decimales suce-
sivas con el mismo diluyente.
Otros relacionados transferir 10 unidades cuya forma y
dimensin permita su fragmentacin o inmersin total en
no ms que 1000 ml de solucin tampn cloruro de sodio-
peptona pH 7,0 u otro diluyente adecuado. Dejar en con-
tacto entre 10 30 minutos. Preparar diluiciones decimales
sucesivas con el mismo diluyente. Para aquellos que no
pueden ser fragmentados o inmersos, introducir asptica-
mente, en el recipiente 100 ml de solucin tampn cloruro

de sodio-peptona pH 7,0. Agitar. Utilizar mtodo de fil-
tracin por membrana de 0,45 m.
El mtodo para preparacin depende de las caractersti-
cas fsicas del producto a ser probado. Si ninguno de los
procedimientos descritos son satisfactorios, desarrollar un
procedimiento adecuado1.
ANLISIS DEL PRODUCTO
Cantidad de muestra
Salvo indicacin contraria, utilizar mezcla de muestras
conteniendo 10 g o 10 ml del producto a examinar. Tomar
10 unidades para aerosol forma lquida o slida y para
dispositivos transdrmicos.
La cantidad a ser probada podr ser reducida en el caso
de sustancias activas que son formuladas en las siguientes
condiciones: la cantidad por dosis unitaria (ejemplo: com-
primido, cpsula) es menor o igual a 1 mg. En ese caso, la
cantidad de muestra a ser probada no debe ser menor que
la cantidad presente en 10 dosis unitarias.
Para productos en que el tamao del lote es extremamente
pequeo (eso es, menor que 1000 ml o 1000 g), la cantidad
a ser probada debe ser 1% del lote o menor cuando justifi-
cado o autorizado.
Para productos donde el nmero total de unidades en el lote
es menor que 200, usar dos unidades o una unidad si el lote
fuese menor o igual a 100 unidades.
En el muestreo de productos en procesamiento, recoger 3
muestras del inicio, 4 del medio y 3 del final del proceso.
Ejecutar la prueba en la mezcla de esas muestras.
PROCEDIMIENTOS
La determinacin puede ser efectuada por el Mtodo de
filtracin por membrana, Mtodo en placa o Mtodo de los
Tubos Mltiples (MNP). Ese ltimo es reservado para las
determinaciones bacterianas que no puedan ser realizadas
por uno de los otros mtodos y cuando se espera que el
producto presente baja densidad bacteriana.
La eleccin del mtodo es determinada por factores tales
como la naturaleza del producto y el nmero esperado de
microorganismos. Cualquier mtodo escogido debe ser de-
bidamente validado.
Filtracin por membrana
Utilizar equipo de filtracin que posibilite la transferencia
de la membrana para los medios de cultivo. Las membranas
de nitrato de celulosa, por ejemplo, pueden ser utilizadas
1 Algunos productos pueden requerir una calefaccin mayor en la Prepa-
racin de la muestra, pero esta no debe pasar los 48 C.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 241
para soluciones acuosas, oleosas o levemente alcohlicas y
las membranas de acetato de celulosa para soluciones fuer-
temente alcohlicas. Preparar la muestra usando el mtodo
ms adecuado previamente determinado.
Transferir 10 ml, o la cantidad de diluicin que represente 1
g o 1 ml de la muestra a ser probada, para dos membranas y
filtrar inmediatamente. Si necesario, diluir la muestra para
obtener conteo de colonias entre 10 y 100 UFC. Lavar las
membranas por lo menos tres veces con aproximadamente
100 ml del fluido de lavado adecuado. Transferir una de
las membranas para la superficie de una placa conteniendo
agar casena-soja, incubar a 32,5 C 2,5 C durante 3-5
das, para determinacin del nmero de microorganismos
aerbicos totales. Transferir la otra membrana para la su-
perficie de una placa conteniendo agar Sabouraud-dextrosa
e incubar a 22,5 C 2,5 C durante 5-7 das, para la deter-
minacin de mohos y levaduras.
Calcular el nmero de UFC por gramo o mililitro del pro-
ducto.
Cuando se analicen dispositivos transdrmicos y produc-
5
tos mdicos, filtrar, separadamente, 10% del volumen de
la preparacin, conforme procedimiento de adecuacin del
producto, y proceder al lavado e incubacin conforme des-
crito anteriormente.
Conteo en placa
Mtodo de profundidad Aadir 1 ml de la muestra pre-
parada como descrito en Preparacin de las muestras, en
placa de Petri y verter, separadamente, 15 20 ml de agar
casena soja y, agar Sabouraud-dextrosa mantenidos a 45
50 C. Utilizar dos placas para cada medio y diluicin. In-
cubar las placas conteniendo agar casena-soja a 32,5 C
2,5 C durante 3 5 das y las placas conteniendo agar Sa-
bouraud- dextrosa a 22,5 C 2,5 C durante 5-7 das para
determinacin del nmero de microorganismos aerbicos
totales y mohos y levaduras, respectivamente. Solamente
las placas que presenten nmero de colonias inferior a 250
(bacterias) y 50 (mohos y levaduras) por placa debern ser
consideradas para el registro de los resultados. Tomar el
promedio aritmtico de las placas de cada medio y calcular
el nmero de UFC por gramo o ml del producto.
Mtodo de superficie aadir en placas de Petri, separa-
damente, 15 20 ml de agar casena soja y agar Sabou-
raud-dextrosa y dejar solidificar. Secar las placas. Aadir a
la superficie de cada medio de cultivo, 0,1 ml de la muestra
preparada como descrito en Preparacin de las muestras.
Incubar las placas conteniendo agar casena-soja a 32,5 C
2,5 C durante 3-5 das y las placas conteniendo agar Sa-
bouraud-dextrosa a 22,5 C 2,5 C durante 5 7 das para
determinacin del nmero de microorganismos aerbicos
totales y mohos y levaduras, respectivamente. Tomar el
promedio aritmtico de las placas de cada medio y calcular
el nmero de UFC por gramo o ml del producto.
 242 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Ejemplo de clculo: 1:1000. Transferir 1 ml de cada una de las diluiciones, para

3 tubos, conteniendo cada uno, 9 ml de caldo casena-soja.
Colonias por Incubar todos los tubos a 32,5 C 2,5 C durante 3 5
Diluicin UFC/g, o ml
placas das. Anotar el nmero de tubos positivos y el nmero de
1:100 293 2,93 x 104 tubos negativos.
1:100 100 1,00 x 104
1:1000 41 4,10 x 104 Si la naturaleza de la muestra torna la lectura difcil, como,
1:1000 12 1,20 x 104 por ejemplo, una suspensin, efectuar subcultivo para el
mismo caldo o para agar casena-soja por 2 das en la mis-
(2,93+1,00+4,10+1,20) ma temperatura.
Promedio= x104=2,30x104
4
Determinar el nmero ms probable de microorganismos
Nmero Ms Probable viables por gramo o mililitro del producto, de acuerdo con
las informaciones descritas en la Tabla 1.
Preparar la muestra conforme procedimientos de ade-
cuacin del producto. Preparar diluiciones 1:10; 1:100;

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 243

Tabla 1 - Valor del Nmero Ms Probable de Microorganismos NMP.

Nmero de tubos positivos
NMP por g, o Lmite de
Nmero de g, o ml del producto por tubo
ml del producto confianza a 95%
10-1 (0,1) 10-2 (0,01) 10-3 (0,001)
0 0 0 <3 0,0 9,4
0 0 1 3 0,1 9,5
0 1 0 3 0,1 10
0 1 1 6,1 1,2 17
0 2 0 6,2 1,2 17
0 3 0 9,4 3,5 35
1 0 0 3,6 0,2 17
1 0 1 7,2 1,2 17
1 0 2 11 04 35
1 1 0 7,4 1,3 20
1 1 1 11 04 35
1 2 0 11 04 35
1 2 1 15 05 38
1 3 0 16 05 38
2 0 0 9,2 1,5 35
2 0 1 14 04 35

5
2 0 2 20 05 38
2 1 0 15 04 38
2 1 1 20 05 38
2 1 2 27 09 94
2 2 0 21 05 40
2 2 1 28 09 94
2 2 2 35 09 94
2 3 0 29 09 94
2 3 1 36 09 94
3 0 0 23 05 94
3 0 1 38 09 104
3 0 2 64 16 181
3 1 0 43 09 181
3 1 1 75 17 199
3 1 2 120 30 360
3 1 3 160 30 380
3 2 0 93 18 360
3 2 1 150 30 380
3 2 2 210 30 400
3 2 3 290 90 990
3 3 0 240 40 990
3 3 1 460 90 1980
3 3 2 1100 200 4000
3 3 3 >1100

5.5.3.1.3 Bsqueda de microorganismos PROCEDIMIENTO

patognicos
Ese mtodo posibilita verificar la presencia o a ausencia
de microorganismos especficos en medios selectivos. Los
procedimientos experimentales deben incluir etapas de
pre-enriquecimiento para garantizar la recuperacin de los
microorganismos, si presentes en el producto.
Mtodos microbiolgicos alternativos, inclusive los auto-
matizados, pueden ser utilizados desde que su equivalencia
al mtodo farmacopeico haya sido debidamente validada
Bacterias gram-negativas bilis tolerantes
Preparado de la muestra y pre-incubacin Preparar la
muestra usando la diluicin 1:10 de no menos que 1 g o
1 ml del producto a ser probado, conforme descrito en
Conteo del nmero total de microorganismos mesfilos
(5.5.3.1.2), usando caldo casena-soja (Diluicin A) como
diluyente. Homogeneizar e incubar a 22,5 C 2,5 C por
2 horas y no ms de 5 horas (tiempo necesario para re-
activar la bacteria, pero no el suficiente para estimular la
multiplicacin del microorganismo).

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 244 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Prueba de ausencia Homogeneizar la Diluicin A y
transferir volumen correspondiente a 1 g o 1 ml del pro-
ducto para el Caldo de Enriquecimiento de Enterobacterias
segn Mossel (Aeromonas y Pseudomonas tambin pueden
crecer en este medio, as como otros tipos de bacterias).
Incubar a 32,5 C 2,5 C por 24 a 48 horas. Preparar sub-
cultivo en placas conteniendo Agar Violeta Rojo Neutro
Bilis Glucosa. Incubar a 32,5 C 2,5 C durante 18 a 24
horas. El producto cumple la prueba si no hubiere creci-
miento de colonias.
Prueba cuantitativa (seleccin y subcultivo) Diluir canti-
dad apropiada de la Diluicin A para el Caldo de Enrique-
cimiento de Enterobacterias segn Mossel, para obtener
diluiciones conteniendo 0,1; 0,01 y 0,001 g (o 0,1; 0,01 y
0,001 ml) del producto a ser probado. Incubar a 32,5 C
2,5 C durante 24 a 48 horas. Para cada tubo positivo, reali-
zar subculturas en Agar Violeta Rojo Neutro Bilis Glucosa.
Incubar a 32,5 C 2,5 C durante 18 a 24 horas.
Interpretacin El crecimiento de colonias bien desarro-
lladas de bacterias Gram-negativas, generalmente rojas o
rojizas, indica contaminacin (resultado positivo). Anotar
5
los resultados positivos y negativos. Determinar el nmero
ms probable de bacterias por gramo o mililitro del pro-
ducto segn Tabla 1.
Tabla 1 - Interpretacin de los resultados de la prueba
cuantitativa para bacterias gram-negativas bilis tolerantes.
Resultados para cantidad
de producto de Nmero probable de
0,01 g, 0,001 g, bacterias por gramo, o
0,1 g, o
o 0,01 o 0,001 mililitro del producto
0,1 ml
ml ml
+ + + Ms de 103
+ + - Menos de 103 y ms de 102
+ - - Menos de 102 y ms de 10
- - - Menos de 10
Escherichia coli
Preparado de la muestra y pre-incubacin Preparar la
muestra usando la diluicin 1:10 de no menos que 1 g del
producto a ser examinado conforme descrito en Conteo del
nmero total de microorganismos mesfilos (5.5.3.1.2).
Utilizar 10 ml de la diluicin para 90 ml de Caldo de En-
riquecimiento (Caldo Casena-soja), o cantidad correspon-
diente a 1 g o 1 ml. Homogeneizar e incubar 32,5 C 2,5
C durante 18 a 24 horas.
Seleccin y subcultivo Agitar y transferir 1 ml de la mues-
tra enriquecida para 100 ml de Caldo MacConkey. Incubar
a 43 C 1 C durante 24 48 horas. Realizar subcultivo
en placa de Agar MacConkey e incubar a 32,5 C 2,5 C
durante 18 a 72 horas.
Interpretacin El crecimiento de colonias rojas, general-
mente no mucosas, con micromorfologa caracterstica de
bacilo Gram-negativo, indica presencia probable de E.coli
que debe ser confirmada por pruebas de identificacin mi-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
crobiana. El producto cumple la prueba se no es observado
crecimiento de tales colonias o si las pruebas microbianas
fueren negativas.
Salmonela
Preparacin de la muestra y pre-incubacin Preparar la
muestra usando la diluicin 1:10 de no menos que 10 g,
o 10 ml del producto a ser examinado, conforme descrito
en Conteo del nmero total de microorganismos mesfilos
(5.5.3.1.2). Homogeneizar e incubar 32,5 C 2,5 C du-
rante 18 a 24 horas.
Seleccin y subcultivo Agitar y transferir 0,1 ml del con-
tenido para 10 ml de Caldo Enriquecimiento Salmonela
Rappaport Vassiliadis. Incubar a 32,5 C 2,5 C durante
18 a 24 horas. Realizar subcultivo en placa conteniendo
Agar Xilosa Lisina Desoxicolato e incubar a 32,5 C 2,5
C durante 18 a 48 horas.
Interpretacin El crecimiento de colonias bien desarro-
lladas, rojas con o sin centro negro indica presencia proba-
ble de Salmonela que debe ser confirmada por pruebas de
identificacin microbiana. El producto cumple la prueba
se no es observado crecimiento de tales colonias o si las
pruebas microbianas fueren negativas.
Pseudomonas aeruginosa
Preparacin de la muestra y pre-incubacin Preparar la
muestra usando la diluicin 1:10 de no menos que 1 g del
producto a ser examinado, conforme descrito en Conteo
del nmero total de microorganismos mesfilos (5.5.3.1.2).
Utilizar 10 ml de la diluicin para 90 ml de Caldo de Ca-
sena-soja o cantidad correspondiente a 1 g o 1 ml. Homo-
geneizar e incubar 32,5 C 2,5 C durante 18 a 24 horas.
Cuando se pruebe el dispositivo transdrmico, filtrar 50 ml
de Caldo Casena-soja por membrana estril y transferir la
membrana para 100 ml de Caldo Casena-soja. Incubar a
32,5 C 2,5 C durante 18 a 24 horas.
Seleccin y subcultivo Agitar y transferir una ansa para
placa conteniendo Agar Cetrimida. Incubar a 32,5 C 2,5
C durante 18 72 horas. El crecimiento de colonias indica
presencia probable de Pseudomonas aeruginosa que debe
ser confirmada por pruebas de identificacin microbiana.
El producto cumple la prueba se no es observado creci-
miento de tales colonias o si las pruebas de identificacin
fueren negativas.
Staphylococcus aureus
Preparacin de la muestra y pre-incubacin Preparar la
muestra usando la diluicin 1:10 de no menos que 1 g del
producto a ser examinada conforme descrito en Conteo del
nmero total de microorganismos mesfilos (5.5.3.1.2).
Utilizar 10 ml de la diluicin para 90 ml de Caldo de En-
riquecimiento (Caldo Casena-soja) o cantidad correspon-
diente a 1 g o 1 ml. Homogeneizar e incubar 32,5 C 2,5
C durante 18 a 24 horas.

Cuando se pruebe el dispositivo transdrmico, filtrar 50
ml de Caldo de Enriquecimiento por membrana estril y
transferir la membrana para 100 ml de Caldo Casena-soja.
Incubar a 32,5 C 2,5 C durante 18 a 24 horas.
Seleccin y subcultivo Agitar y transferir una ansa para
placa conteniendo Agar Manitol Salado. Incubar a 32,5 C
2,5 C durante 18 72 horas.
Interpretacin El crecimiento de colonias amarillas o
blancas rodeada por una zona amarilla indica presencia
probable de S. aureus que debe ser confirmada por pruebas
de identificacin microbiana.
El producto cumple la prueba se no es observado creci-
miento de tales colonias o si las pruebas de identificacin
fueron negativas.
Clostridium
Preparacin de la muestra y pre-incubacin Preparar la
muestra conforme descrito en Conteo del nmero total de
microorganismos mesfilos (5.5.3.1.2). Utilizar dos frac-
ciones iguales correspondientes a no menos que 1 g o ml
del producto a ser examinado. Calentar una de las porcio-
nes a 80 C durante 10 minutos y enfriar inmediatamente.
Inocular 10 ml de cada fraccin homogeneizada en 2 fras-
cos conteniendo 100 ml de medio Caldo Reforzado para
Clostridium. Incubar en anaerobiosis a 32,5 C 2,5 C
durante 48 horas.
Seleccin y subcultivo Transferir una ansa de cada frasco
para placa conteniendo Agar Columbia. Incubar en anaero-
biosis a 32,5 C 2,5 C durante 48 horas.
Interpretacin El crecimiento de colonias catalasa- nega-
tivas, con micromorfologa de bacilo Gram-positivo (con o
sin endosporas) indica presencia probable de Clostridium.
El producto cumple la prueba se no es observado creci-
miento de microorganismo anaerobio o si la prueba de ca-
talasa es negativa.
Candida albicans
Preparacin de la muestra y pre-incubacin Preparar la
muestra usando la diluicin 1:10 de no menos que 1 g, o ml
del producto a ser examinado conforme descrito en Conteo
del nmero total de microorganismos mesfilos (5.5.3.1.2).
Utilizar 10 ml de la diluicin para 90 ml de Caldo Sabou-
raud Dextrosa. Incubar 32,5 C 2,5 C durante 3 a 5 das.
Seleccin y subcultivo Transferir una ansa para placa
conteniendo Agar Sabouraud Dextrosa o Agar Nickerson.
Incubar a 32,5 C 2,5 C durante 24 48 horas.
Interpretacin El crecimiento de colonias blancas en
Agar Sabouraud o colonias marrn/negra en Agar Nic-
kerson indica presencia probable de C. albicans que debe
ser confirmada por pruebas de identificacin microbiana.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 245
El producto cumple la prueba se no es observado el creci-
miento de las colonias.
5.5.3.1.4 Adecuacin de los mtodos
farmacopeicos
Para adecuacin de los mtodos farmacopeicos a los pro-
ductos no estriles debe ser demostrada la eliminacin de
cualquier propiedad antimicrobiana antes de la verificacin
de la existencia de contaminacin microbiana en los pro-
ductos.
El protocolo de la prueba de adecuacin debe mimetizar la
prueba de lmite microbiano preparacin de la muestra,
tipo de medio de cultivo y soluciones tampn, nmero y
tipo de la solucin de lavados de las membranas as como
las condiciones de incubacin. Ese protocolo requiere el
uso de microorganismos para la prueba de recuperacin
microbiana.
Durante la adecuacin, demostrar que la eleccin del m-
todo para estimativa cualitativa y/o cuantitativa de los
microorganismos viables es sensible, exacta y confiable y
5
que es capaz eliminar cualquier interferencia o inhibicin
durante la recuperacin de los microorganismos viables.
Revalidar el mtodo de adecuacin si fuesen modificadas
las condiciones de ensayo y/u ocurriesen alteraciones en el
producto que puedan afectarlo.
Con la finalidad de indicacin, fueron listados los microor-
ganismos disponibles en la ATCC. Los mismos microor-
ganismos pueden, tambin, ser obtenidos de otras fuentes:
INCQS, CIP, NBRC, NCIMB, NCPF, NCTC, NCYC, IMI
y IP. La correspondencia entre los microorganismos y las
direcciones de las entidades que los proveen se encuentra
indicada en Microorganismos empleados en pruebas y en-
sayos (5.5.3.5).
CONTEO DEL NMERO TOTAL DE
MICRORGANISMOS MESFILOS
Mantenimiento y preparacin de los microorganismos
prueba
Los cultivos liofilizados deben ser rehidratados de acuer-
do con las instrucciones de proveedores y mantenidos por
transferencias para medios de cultivo recin preparados o
por proceso de congelamiento o de refrigeracin por pe-
rodo de almacenamiento que mantenga las caractersticas
originales de la cultivo.
Usar suspensiones estandarizadas de los microorganismos
conforme establecido a continuacin. Utilizar tcnica de
mantenimiento de forma que el inculo no rebase 5 pasajes
del cultivo original. Realizar subculturas de cada microor-
ganismo (bacteria y hongo) separadamente como descrito
en la Tabla 1.
 246 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 1 - Preparacin y uso de los microorganismos.

Medios de cultivo para adecuacin
Medios de cultivo para
del mtodo de conteo en la presencia
Medios de enriquecimiento
del producto
Microorganismo cultivo para
mantenimiento Conteo total Conteo total Conteo Total Conteo total
de bacterias de mohos y de bacterias de mohos y
aerbicas levaduras aerbicas levaduras
Staphylococcus Agar Casena- Agar Casena- - Agar Casena- -
aureus (ATCC 6538) soja o Caldo soja y Caldo de soja /MNP Caldo
de Casena-soja Casena-soja de Casena-soja
32,5 C 2,5 C,
18-24 horas 100 UFC 100 UFC
32,5 C 2,5 32,5C 2,5
C, 3 das C, 3 das

Pseudomonas Agar Casena- Agar Casena- - Agar Casena- -

aeruginosa soja o Caldo soja y Caldo de soja /MNP Caldo
(ATCC 9027) de Casena-soja Casena-soja de Casena-soja
32,5 C 2,5 C,
18-24 horas
100 UFC 100 UFC
32,5 C 2,5 32,5 C 2,5

5 Bacillus subtilis Agar Casena-

C, 3 das

Agar Casena- -
C, 3 das

Agar Casena- -
(ATCC 6633) soja o Caldo soja y Caldo de soja /MNP Caldo
de Casena-soja Casena-soja de Casena-soja
32,5 C 2,5 C,
18-24 horas
100 UFC 100 UFC
32,5 C 2,5 32,5 C 2,5
C, 3 das C, 3 das

Cndida albicans Agar Sabouraud- Agar Casena- Agar Sabouraud- Agar Casena- Agar Sabouraud-
(ATCC 10231) dextrosa o Caldo Soja dextrosa soja dextrosa
Sabouraud
100 UFC 100 UFC 100 UFC 100 UFC
22,5 C 2,5 C
32,5 C 2,5 22,5 C 2,5 32,5 C 2,5 22,5 C 2,5
2-3 das C, 5 das C, 5 das C, 5 das C, 5 das
NMP: no
se aplica

Aspergillus Agar Sabouraud- Agar Casena- Agar Sabouraud- Agar Casena- Agar Sabouraud-
brasiliensis dextrosa o Agar Soja dextrosa soja dextrosa
(ATCC 16404) Papa-dextrosa
100 UFC 100 UFC 100 UFC 100 UFC
22,5 C 2,5 C
32,5 C 2,5 22,5 C 2,5 32,5 C 2,5 22,5 C 2,5
5-7 das, o hasta C, 5 das C, 5 das C, 5 das C, 5 das
esporulacin
evidente NMP: no
se aplica
_________
Usar solucin tampn cloruro de sodio-peptona pH 7,0 o solucin tampn fosfato pH 7,2 para preparar las suspensiones. Al preparar la suspensin
de esporas de A. brasiliensis, aadir a la solucin tampn 0,05% de polisorbato 80. Usar las suspensiones dentro de 2 horas o dentro de 24 horas si
mantenidas a la temperatura de 2- 8 C. Tiempos mayores podrn ser utilizados desde que validados.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Capacidad nutritiva de los medios de cultivo
Para los medios indicados en la Tabla 3, inocular una pe-
quea cantidad de microorganismo, inferior a 100 UFC.
Usar una placa o tubo para cada microorganismo.
Probar cada lote de medio de cultivo cuanto a su capacidad
nutritiva conforme descrito a continuacin:
Medio de cultivo lquido: inocular menos que 100 UFC
del microorganismo prueba en el medio de cultivo in-
dicado. Incubar a temperatura adecuada y observar el
crecimiento visible comparando con un control (blan-
co) del mismo medio de cultivo.
Medio de cultivo slido: inocular cada placa contenien-
do el medio de cultivo indicado con menos que 100
UFC del microorganismo prueba. Incubar a tempera-
tura adecuada y comparar el crecimiento obtenido que
no debe ser inferior a 50% en relacin al inculo estan-
darizado.
Control negativo Para verificar la esterilidad de los me-
dios de cultivo, colocarlos en incubacin por, como mni-
mo, 72 horas, en la temperatura adecuada. No debe haber
crecimiento de microorganismos.
Inoculacin de los microorganismos prueba en la muestra
Aadir a la muestra diluida y al control (diluyente sin
muestra) conforme descrito en Preparacin de la muestra,
en Conteo del nmero total de microorganismos mesfilos
(5.5.3.1.2), cantidad suficiente del microorganismo para
obtener una concentracin de no ms que 100 UFC/ml. El
volumen de la suspensin del inoculo no debe exceder 1%
del volumen del producto diluido.
Debe ser demostrada la capacidad del medio de cultivo
para detectar microorganismos en la presencia y en la au-
sencia de la muestra.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 247
Para demostrar la recuperacin del microorganismo en el
producto, usar el menor factor de diluicin posible. Si la
recuperacin no es adecuada debe ser realizado un mtodo
alternativo como neutralizacin, diluicin o filtracin.
a) Neutralizacin/eliminacin de la actividad antimicro-
biana
El nmero de microorganismos recuperados en la muestra
diluida es comparable con el nmero de microorganismos
en el control.
Si el crecimiento fuese inhibido (reduccin menor que
50%), se debe hacer modificaciones en el procedimiento
de conteo para asegurar la validez de los resultados. Las
modificaciones incluyen las relacionadas a continuacin.
Aumentar el volumen del diluyente o medio de cultivo,
manteniendo constante la cantidad del producto.
Incorporar un agente neutralizante especfico o agente
neutralizante universal.
Asociar ambos procedimientos arriba.
Realizar filtracin por membrana.
5
Si las modificaciones en el mtodo de neutralizacin fue-
sen ineficaces, es posible atribuir que la falla sea debido a
la actividad antimicrobiana del producto, que no permite el
desarrollo del microorganismo control probado.
b) Agentes neutralizantes
Agentes neutralizantes para inhibicin de la actividad an-
timicrobiana deben ser aadidos al diluyente escogido o al
medio de cultivo preferencialmente antes de la esteriliza-
cin (Tabla 2). Demostrar su eficacia y ausencia de toxi-
cidad a los microorganismos prueba utilizando diluyente
con neutralizante y producto y realizando un blanco con
diluyente y neutralizante, respectivamente.
 248 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 2 - Agentes conservantes y neutralizantes

Conservantes Agente neutralizante/mtodo de neutralizacin
Alcohol Diluicin
Aldehdos Diluicin, Tiosulfato, Glicina
Bis-biguanidas Lecitina
Cloruro de mercurio y otros compuestos mercuriales Tioglicolato*; Tiosulfato de sodio
Clorhexamida Polisorbatos y Lecitina
Compuestos amonio cuartenarios Lecitina, Polisorbato 80
Compuestos Fenlicos Diluicin y Polisorbato 80
EDTA Iones de Mg++ y Ca++
Glutaraldehdo Glicina y Bisulfito de sodio
Halgenos Tiosulfato
Hipoclorito de sodio Tiosulfato de sodio
cidos orgnicos y sus steres Diluicin y Polisorbato 80
Parabenos Polisorbato 80 y Lecitina
Sorbatos Diluicin
Antibitico beta-lactmico Beta-lactamasa
Cloranfenicol Cloranfenicol acetiltransferasa
Sulfonamida cido p-aminobenzoico
Trimetoprima Timidina
________________

5
* Tioglicolato puede ser txico para ciertos microorganismos, especialmente esporas y estafilococos; tiosulfato puede ser txico para estafilococos.
Utilizar Caldo Neutralizante Day-Engley o Neutralizante Universal.
Si la neutralizacin no fuese adecuada, puede admitirse que la falla en recuperar el microorganismo inoculado sea atribuida a la actividad antimicrobiana
del producto. Esta informacin sirve para indicar que el producto no es suceptible a la contaminacin por los microorganismos probados, sin embargo
no puede inhibir otros no incluidos en la lista, los cuales no son representativos y prdrn ser empleados en la sustitucin de aquellos preconizados.

Recuperacin de los microorganismos en el producto
Realizar las pruebas separadamente para cada microorga-
nismo prueba listada en la Tabla 3. Utilizar la muestra con-
forme preparada en Inoculacin de los microorganismos
prueba en la muestra.
tra y aadir 15 20 ml de agar Casena-soja o agar Sabou-
raud-dextrosa mantenidos a 45 50 C. Para cada microor-
ganismo probado, utilizar dos placas para cada medio y
cada diluicin. Incubar en las condiciones descritas en la
Tabla 1. Tomar la media aritmtica de las placas con cada
medio de cultivo y calcular el nmero de UFC.

a) Filtracin por membrana
Usar membrana filtrante con 0,45 m de dimetro de poro-
sidad y eficacia comprobada de retencin. Las membranas
de nitrato de celulosa, por ejemplo, pueden ser utilizadas
para soluciones acuosas, oleosas o levemente alcohlicas
y las de acetato de celulosa para soluciones fuertemente
alcohlicas. Para cada microorganismo prueba, utilice una
membrana.
De la muestra preparada, conforme descrito en Inoculacin
de los microorganismos prueba en la muestra, transferir 10
ml para equipo de filtracin por membrana y filtrar inme-
diatamente. Lavar la membrana con volumen apropiado de
lquido de lavado.
Para determinacin del conteo de microorganismo aerbi-
co y conteo de mohos y levaduras, transferir las membra-
nas para agar Casena-soja y Agar Sabouraud- dextrosa,
respectivamente. Incubar en las condiciones descritas en la
Tabla 3 y realizar el conteo de las colonias.
b) Conteo en placa
Mtodo de profundidad Utilizar placas con 9 cm de di-
metro. Aadir 1 ml de la muestra preparada como descrito
en Inoculacin de los microorganismos prueba en la mues-
Mtodo de superficie Para cada placa de Petri de 9 cm,
aadir 15 20 ml de agar casena soja o agar Sabou-
raud-dextrosa y dejar solidificar. Secar las placas. Aadir
a la superficie del medio de cultivo 0,1 ml de la muestra
preparada como descrito en inoculacin del microorga-
nismo en la muestra. Para cada microorganismo probado
utilizar dos placas. Realizar el conteo y calcular el nmero
de UFC.
c) Mtodo del Nmero Ms Probable
A partir de la muestra preparada conforme descrito en Ino-
culacin de los microorganismos prueba en la muestra
(1:10), preparar diluiciones 1:100 y 1:1000. Transferir 1
ml de cada diluicin para 3 tubos conteniendo cada uno 9
ml de caldo Casena-soja. Si necesario aadir agente inac-
tivante.
Incubar todos los tubos a 32,5 C 2,5 C no ms que 5
das. Anotar el nmero de tubos positivos. Si la naturaleza
de la muestra torna la lectura difcil, efectuar subcultivo
para otros tubos conteniendo el mismo medio de cultivo o
para agar Casena- soja por 2 das en la misma temperatu-
ra. Determinar el nmero ms probable de microorganismo
por gramo o mililitro del producto de acuerdo con informa-
ciones en la Tabla 3.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Resultados e interpretacin
Cuando se utiliza el mtodo de filtracin por membrana
y los mtodos de conteo en placas, el nmero de colonias
obtenido no debe ser menor que 50% (factor 2) del inculo
inicial para cada microorganismo en la ausencia del pro-
ducto y, el nmero de colonias obtenido en el diluyente no
debe ser menor que 50% (factor 2) del inculo estndar.
Cuando se utiliza el mtodo de NMP el valor calculado
est comprendido en el intervalo de confianza de 95% de
los resultados obtenidos.
INVESTIGACIN DE MICRORGANISMOS
PATOGNICOS
Condiciones generales
Neutralizar convenientemente la muestra si esta posee ac-
tividad antimicrobiana. Se es utilizado agente tensoactivo,
para la preparacin de la muestra, demostrar ausencia de
toxicidad para los microorganismos y su compatibilidad
con el agente inactivante, como descrito en Neutralizacin/
eliminacin de la actividad antimicrobiana del tem Con-
teo del nmero total de microorganismos mesfilos de este
mtodo general.
Microorganismos aislados del ambiente u otras especies
pueden ser incluidos en las pruebas de desafos, especial-
mente, se ellos representan contaminantes que puedan ser
introducidos durante la fabricacin o durante el uso del
producto.
Mantenimiento y preparacin de los microorganismos
prueba
Los cultivos liofilizados deben ser rehidratados de acuer-
do con las instrucciones de proveedores y mantenidos por
transferencias para medios frescos o por proceso de conge-
lamiento o refrigeracin por perodos de almacenamiento
debidamente calificados.
Usar suspensiones estandarizadas de las cepas pruebas
conforme establecido abajo. Utilizar tcnica de manteni-
miento de forma que el inculo no rebase 5 pasajes del
cultivo original. Cultivar cada microorganismo (bacteria y
hongo) separadamente.
Usar solucin tampn cloruro de sodio-peptona pH 7,0 o
solucin tampn fosfato pH 7,2 para preparar las suspen-
siones de los microorganismos. Al preparar la suspensin
de esporas de A. brasiliensis, aadir a la solucin tampn
0,05% de polisorbato 80. Usar las suspensiones dentro de
2 horas o dentro de 24 horas si mantenidas a temperatura
de 2 8 C.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 249
Microorganismos
a) Microorganismos aerbicos:
Staphylococcus aureus ATCC 6538 P
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
Escherichia coli ATCC 8739
Salmonela enterica ssp serotipo typhimurium ATCC
14028
Candida albicans ATCC 10231
Realizar subcultivos separadamente en tubos conteniendo
medio de cultivo Caldo Casena-soja o Agar Casena Soja
a 32,5 C 2,5 C durante 18 a 24 horas. Cultivar Candi-
da albicans en Agar Sabouraud-dextrosa a 22,5 C 2,5
C durante 2 3 das. Utilice solucin tampn cloruro de
sodio- peptona pH 7,0 o solucin tampn fosfato pH7,2
para preparar las suspensiones. Usarlas dentro de 2 horas o
dentro de 24 horas si almacenadas a 2 8 C.
b) Microorganismo anaerbico
Clostridium sporogenes ATCC 11437
Cultivar la cepa Clostridium sporogenes bajo condiciones
5
anaerbicas en Medio Reforzado para Clostridium a 32,5
C 2,5 C durante 24 48 horas. Como mtodo alter-
nativo, realizar diluiciones de una suspensin de clulas
vegetativas de Clostridium sporogenes. Esta suspensin de
esporas puede ser utilizada como inculo se mantenida a
2 8 C por un perodo adecuado.
Capacidad nutritiva y selectiva de los medios de cultivo
Para los medios de cultivo indicados en la Tabla 3, inocu-
lar una pequea cantidad de microorganismo prueba (no
ms que 100 UFC). Usar una placa de Petri o tubo para
cada microorganismo.
Probar cada lote de medio de cultivo utilizado en los ensa-
yos cuanto a su capacidad nutritiva o selectiva conforme
descrito a continuacin.
Medio de cultivo lquido Inocular menos que 100 UFC
del microorganismo prueba en el medio de cultivo indi-
cado. Incubar a temperatura adecuada y observar el cre-
cimiento visible comparando con un control (blanco) del
mismo medio de cultivo.
Medio de cultivo slido Inocular cada placa conteniendo
el medio de cultivo indicado con menos que 100 UFC del
microorganismo prueba. Incubar a temperatura. El creci-
miento obtenido debe poseer las caractersticas estndares
del microorganismo en el medio utilizado.
Control negativo
Para verificar las condiciones del ensayo, realizar prueba
de esterilidad de los medios de cultivos. No debe haber
crecimiento de microorganismos.
 250 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 3 - Promocin del crecimiento, propiedades inhibitorias e indicativas del medio de cultivo
Medio de cultivo Propiedad Microorganismo prueba
Bacteria Gram-negativa bilis tolerante
Caldo de Enriquecimiento de Promocin de crecimiento Inhibitorio Escherichia coli
Enterobacterias segn Mossel
Pseudomonas aeruginosa
Inhibitorio Staphylococcus aureus
Agar Bilis, Violeta, Rojo y Glucosa Crecimiento presuntivo E. coli

P. aeruginosa
Escherichia coli
Caldo MacConkey Promocin de crecimiento E. coli
Inhibitoria S. aureus
Agar MacConkey Crecimiento presuntivo E. coli
Salmonela
Caldo Enriquecimiento Salmonela, Promocin de crecimiento Salmonela enterica ssp serotipo
segn Rappaport Vassiliadis typhimurium

o S. entrica ssp serotipo abony

Inhibitorio S. aureus
Agar Xilosa Lisina Desoxicolato Crecimiento presuntivo S. enterica ssp serotipo

5
typhimurium

o S. entrica ssp serotipo abony

Pseudomonas aeruginosa
Agar Cetrimida Crecimiento presuntivo P. aeruginosa
Inhibitorio E. coli
Staphylococcus aureus
Agar Manitol Salado Crecimiento presuntivo S. aureus
Inhibitorio E. coli
Clostridium
Medio Reforzado para Clostridium Promocin de crecimiento Clostridium sporogenes
Agar Columbia Promocin de crecimiento C. sporogenes
Candida albicans
Caldo Sabouraud Promocin de crecimiento Candida albicans
Agar Sabouraud-dextrosa Crecimiento presuntivo C. albicans
Agar Nickerson Crecimiento presuntivo C. albicans

Recuperacin de los microorganismos en el producto lizacin/eliminacin de actividad antimicrobiana de este

Para cada producto a ser analizado realice la prueba con-
forme descrito en Procedimiento, en Mtodo general para
investigacin de microorganismos patognicos (5.5.3.1.3).
Al homogeneizar, aadir cada cepa descrita en la promo-
cin de crecimiento. Inocular los microorganismos indivi-
dualmente en inculos conteniendo no ms que 100 UFC.
La realizacin de la prueba debe ocurrir en el menor pero-
do de tiempo.
Los microorganismos deben ser detectados por las reaccio-
nes indicadas en los prrafos correspondientes, descritos
en Procedimiento, en Mtodo general para investigacin
de microorganismos patognicos (5.5.3.1.3).
Si el producto posee actividad antimicrobiana y es nece-
sario modificar la metodologa, proceda como en Neutra-
captulo utilizando Caldo de Casena-soja como diluyente
5.5.3.1.5 Lmites microbianos
La contaminacin microbiana de un producto no estril
(especialidad y materia prima farmacutica) puede condu-
cir no solamente a su deterioro, con los cambios fsicos y
qumicas asociadas, pero tambin, al riesgo de infeccin
para el usuario. Consecuentemente, los productos farma-
cuticos orales y tpicos (cpsulas, comprimidos, suspen-
siones, cremas, etc.), que no son estriles, deben ser some-
tidos a los controles de la contaminacin microbiana.
La garanta de calidad y los controles de produccin deben
ser tales que los microorganismos capaces de proliferar y
contaminar el producto, estn dentro de los lmites. Los
lmites microbianos deben ser adecuados a las varias cate-
goras de productos que reflejen el tipo de contaminacin
ms probable introducida durante la fabricacin, as como

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


la va de administracin, el consumidor final (neonatos,
nios, ancianos, debilitados), el uso de agentes inmunosu-
presores, corticosteroides y otros factores. Al evaluar los
resultados de las pruebas microbiolgicas, el nmero y los
tipos de microorganismos presentes deben ser considera-
dos en el contexto del uso del producto propuesto.
La prueba microbiolgica de productos no estriles y de
materia prima para uso farmacutico es realizada segn
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 251
la metodologa descrita en Ensayos microbiolgicos para
productos no estriles (5.5.3.1).
Los lmites de aceptacin estn descritos en la Tabla 1 y
son interpretados del siguiente modo:
101 UFC: valor mximo aceptable = 20
102 UFC: valor mximo aceptable = 200
103 UFC: valor mximo aceptable = 2000 y, as suce-
sivamente
 252 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 4 - Tabla l Lmites microbianos para productos no estriles.

Conteo total Conteo total

de bacterias de Hongos/
Va de administracin* Investigacin de Patgenos
aerobias levaduras
UFC/g o ml UFC/g o ml
Productos sintticos y biolgicosa
Preparacin acuosa para uso oral 102 101 Ausencia de Escherichia coli en 1 g, o ml
Preparacin no acuosa para uso 103 102 Ausencia de Escherichia coli en 1 g, o ml
oral
Preparacin para uso rectal 103 102 -
Preparacin uso tpico 102 101 Ausencia de Staphylococcus aureus y
(oromucosal, nasal, gingival, Pseudomonas aeruginosa en 1 g, o ml
cutneo, auricular)
Inhalatorios 102 101 Ausencia de Staphylococcus aureus,
Pseudomonas aeruginosa y Bacteria Gram
negativa bilis tolerante b en 1 g, o ml
Preparacin vaginal 102 101 Ausencia de Staphylococcus aureus ,
Pseudomonas aeruginosa y Candida albicans
en 1 g, o ml
Dispositivo Transdrmico (lmite 102 101 Ausencia de Staphylococcus aureus y
por unidad) Pseudomonas aeruginosa/dispositivo
Productos de origen vegetal, mineral y/o animala

5 Preparacin para uso oral

conteniendo materia prima de
104 102 Ausencia de Escherichia coli y
Staphylococcus aureus en 1 g, o ml. Ausencia
origen natural de Salmonela en 10 g, o 10 ml. Lmite
mximo de 102 bacterias Gram negativa bilis
tolerante b en 1 g, o ml.
Drogas vegetales que sern 107 104 Lmite mximo de 102 Escherichia coli
sometidas a procesos extractivos en en 1 g. Lmite mximo de 104 bacterias
caliente Gram negativa bilis tolerante b en 1 g, o ml.
Ausencia de
Salmonela en 10 g
Drogas vegetales que sern 105 103 Lmite mximo de 101 Escherichia coli
sometidas a procesos extractivos en 1 g. Lmite mximo de 103 bacterias
en fro Gram negativa bilis tolerante b en 1 g, o ml.
Ausencia de
Salmonela en 10 g
Extracto seco 104 103 Ausencia de Salmonela spp y Escherichia coli
en 10 g
Tintura, Extracto fluido 104 103 -
Sustancias para uso farmacutico
Materia prima, base galnica 103 102 Ausencia de Escherichia coli,
Pseudomonas aeruginosa y
Staphylococcus aureus en 1 g, o ml. Ausencia
de Salmonela spp en 10 g, o 10ml
____________
(a) para produtos que se enquadrem em mais de uma situao prevalecero os limites mais restritivos
(b) outras enterobactrias

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Con base en datos histricos de las pruebas de monitoreo
microbiolgico, de la baja carga microbiana de la materia
prima, de los ingredientes acuosos, del proceso de fabri-
cacin, de la formulacin, la frecuencia de la prueba para
la determinacin del lmite microbiano puede ser altera-
da para las formas farmacuticas si presentan actividad de
agua (Aa) inferior a 0,75 medida a 25 C.Para los relacio-
nados, considerar como lmite microbiano aquellos expre-
sados de acuerdo con la va de aplicacin.
5.5.3.2 ENSAYOS MICROBIOLGICOS
PARA PRODUCTOS ESTRILES
5.5.3.2.1 Prueba de esterilidad
Las pruebas de esterilidad se aplican a insumos farmacuti-
cos, medicamentos y productos para salud que, de acuerdo
con la Farmacopea, deben ser estriles, siendo adecuados
para revelar la presencia de bacterias y hongos. Sin embar-
go, un resultado satisfactorio indica que no fue encontra-
do microorganismo contaminante solamente en la muestra
examinada.
La extensin de ese resultado a lo restante del lote requie-
re la seguridad de que todas las unidades del mismo lote
hayan sido preparadas para garantizar gran probabilidad
de que todo el lote pasara por la prueba. Obviamente, eso
depende de las precauciones tomadas durante los procesos
operacionales de fabricacin, de acuerdo con las Buenas
Prcticas de Fabricacin.
PRECAUCIONES DURANTE LA PRUEBA
Para la realizacin de la prueba de esterilidad es impor-
tante que las personas sean adecuadamente entrenadas y
calificadas.
Las pruebas deben ser realizadas bajo condiciones asp-
ticas, utilizando, por ejemplo, campana de flujo laminar
clase II tipo A (mximo 3520 partculas 0,5 m/m3),
que debe estar instalada en sala limpia clase B ISO 7
(mximo 352 000 partculas 0,5 m/m3). Para pruebas
de esterilidad de frmacos oncognicos, mutagnicos, an-
tibiticos, hormonas, esteroides y otros, las pruebas deben
ser realizadas en la campana clase II tipo B2, que posee
sistema de extraccin externa al ambiente del laboratorio.
No deben ser realizadas pruebas bajo exposicin directa
de luz ultravioleta o en reas bajo tratamiento con aero-
soles. Las condiciones deben ser adecuadas para evitar
contaminacin accidental de la muestra durante la prueba
y, tambin, no afectar la deteccin de posibles contaminan-
tes. Controles ambientales de las reas de trabajo deben ser
realizados regularmente (control del aire y de superficies,
conteos de partculas, determinacin de velocidad y direc-
cin del flujo de aire, entre otros).
MEDIOS DE CULTIVO
Los medios de cultivo utilizados para pruebas de este-
rilidad son el Medio fluido de tioglicolato y el Caldo de
casena- soja. El primero es utilizado primariamente para
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 253
cultivo de bacterias anaerbicas, a pesar de que, tambin,
pueda detectar el crecimiento de bacterias aerbicas. El se-
gundo es adecuado para el cultivo de levaduras, hongos y
bacterias aerbicas. Los medios utilizados deben cumplir
con los requisitos de las Pruebas de promocin de creci-
miento de los medios de cultivo. Preparar los medios de
cultivo conforme descrito a continuacin. Formulaciones
deshidratadas, tambin, pueden ser utilizadas, debindose
demostrar que, despus de reconstitucin conforme indi-
caciones del fabricante, los requisitos de las Pruebas de
promocin de crecimiento de los medios de cultivo sean
cumplidos. Los medios de cultivo deben ser esterilizados
por proceso validado.
Medio fluido de tioglicolato
L-Cistina 0,5 g
Cloruro de sodio 2,5 g
Dextrosa 5,5 g
Agar granulado (humedad no superior a 15%) 0,75 g
Extracto de levadura (soluble en agua) 5,0 g
Casena obtenida por digestin pancretica 15,0 g
Tioglicolato de sodio (o cido tiogliclico) 0,5 g (0,3 ml)
5
Resazurina sdica a 0,1% (p/v)
recientemente preparada 1,0 ml
Agua purificada 1000 ml
pH del medio despus de esterilizacin 7,1 0,2
Mezclar la L-cistina, cloruro de sodio, dextrosa, extracto
de levadura y casena de digestin pancretica con 1000
ml de agua purificada y calentar hasta disolucin total. Di-
solver el tioglicolato de sodio o cido tiogliclico en esa
solucin y ajustar el pH con hidrxido de sodio M de modo
que, despus de la esterilizacin, el pH de la solucin sea
de 7,1 0,2. Si hubiere necesidad de filtracin, calentar la
solucin nuevamente, sin dejar alcanzar la ebullicin y fil-
trar, todava caliente, en papel de filtro. Aadir la solucin
de resazurina sdica, mezclar y distribuir en frascos ade-
cuados. El medio debe presentar una coloracin rosa en su
superficie que no exceda un tercio de la altura de su masa
lquida. En el caso de se obtenga un medio con coloracin
rosa en ms de un tercio de su masa lquida, restaurar el
medio por un nico calentamiento en bao mara o en va-
por fluente.
Esterilizar utilizando proceso validado. Si no fuese a uti-
lizar inmediatamente, estocar en temperatura entre 2 C y
25 C conforme orientacin del fabricante. No utilizar el
medio por un perodo de almacenamiento superior a aquel
para el cual l fue validado.
El Medio lquido de tioglicolato debe ser incubado a 32,5
C 2,5 C bajo condiciones aerbicas.
Medio alternativo del fluido tioglicolato
Proceder conforme descrito para Mediofluido de tioglico-
lato sin la adicin del agar y de la resazurina sdica. El pH
despus de esterilizacin es 7,1 0,2.
El Medio alternativo del fluido tioglicolato debe ser incu-
bado a 32,5 C 2,5 C bajo condiciones anaerbicas.
 254 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Caldo de casena soja
Casena de digestin pancretica 17,0 g
Harina de soja de digestin papanica 3,0 g
Cloruro de sodio 5,0 g
Fosfato de potasio dibsico 2,5 g
Dextrosa 2,5 g
Agua purificada 1000 ml
pH del medio despus de esterilizacin 7,3 0,2
Disolver todos los componentes en agua purificada, calen-
tando suavemente. Enfriar a temperatura ambiente y ajus-
tar el pH con hidrxido de sodio M de modo que, despus
de la esterilizacin, el pH de la solucin sea de 7,3 0,2.
Si necesario, filtrar para clarificacin del medio. Distri-
buir en frascos adecuados y esterilizar utilizando proceso
validado. Se no fuese utilizar inmediatamente, estocar en
temperatura entre 22,5 C 2,5 C, conforme orientacin
del fabricante. No utilizar el medio por un perodo de al-
macenamiento superior a aquel para el cual l fue validado.
El Caldo de casena soja debe ser incubado a 22,5 C + 2,5
C bajo condiciones aerbicas.
5
Medios para penicilinas y cefalosporinas
En los casos en que los medios de cultivo sean utilizados
para la prueba de esterilidad de penicilinas y cefalospori-
nas por el mtodo de Inoculacin directa, la preparacin
del Medio fluido de tioglicolato y del Caldo de casena soja
debe ser modificada conforme descrito a continuacin.
Transferir, aspticamente, para los frascos esterilizados
conteniendo cada medio, cantidad de -lactamasa sufi-
ciente para inactivar el antibitico presente en la muestra.
Nmero representativo de frascos conteniendo medio con
-lactamasa sin muestra deben ser incubados durante el pe-
rodo de la prueba (control negativo). Controles positivos,
tambin, deben ser incluidos para verificar si toda penicili-
na o cefalosporina fue inactivada. Proceder a la prueba de
validacin para bacteriostasis y fungistasis, utilizando Sta-
phylococcus aureus (ATCC 6538 / INCQS 00039) como
microorganismo prueba. La observacin de crecimiento
microbiano tpico constituye confirmacin de que la con-
centracin de -lactamasa utilizada es apropiada.
ESTANDARIZACIN DEL INCULO
Usualmente, son necesarios ajustes para obtener densidad
especfica de clulas microbianas viables (no ms que 100
UFC) en el medio de cultivo. Para establecer un volumen
que contenga la densidad recomendada de clulas, diluicio-
nes en serie deben ser realizadas a partir de una suspensin
stock, procedindose a conteo en placas para determinar la
densidad microbiana obtenida con cada diluicin.
Si el procedimiento est bien estandarizado, es posible re-
producir los resultados con la misma cepa microbiana.
Es recomendable la utilizacin de subcultivos de microor-
ganismos hasta como mximo 5 transferencias, a partir del
cultivo original.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Nota: los medios de cultivo utilizados en la estandarizacin
del inculo son aquellos descritos en el captulo Conteo
del nmero total de microorganismos mesfilos (5.5.3.1.2)
para cada microorganismo.
Procedimiento
Usando ansa de cultivo, transferir el crecimiento del mi-
croorganismo especfico para tubo de ensayo conteniendo
agar inclinado indicado para su crecimiento. Sembrar el
cultivo sobre la superficie del agar inclinado, para obtener
pelcula uniforme de crecimiento. Incubar en las condicio-
nes ptimas de crecimiento del microorganismo prueba.
Como sugerencia de diluiciones para el inculo, despus
del perodo de incubacin lavar el crecimiento del microor-
ganismo con 1 ml de solucin estril de cloruro de sodio a
0,9% (p/v) o agua peptonada 0,1% (p/v) estril y transferir
para frasco conteniendo 99 ml de solucin estril de clo-
ruro de sodio a 0,9% (p/v) o agua peptonada 0,1% (p/v)
estril (suspensin stock). Homogeneizar la suspensin
manualmente o en agitador de tubos del tipo vrtex.
Preparar diluiciones en serie (1:100, 1:10000 y 1:1000000)
a partir de la suspensin stock utilizando solucin estril
de cloruro de sodio a 0,9% (p/v) o agua peptonada 0,1%
(p/v) estril como diluyente. Incorporar 1 ml de cada di-
luicin en medio slido adecuado para el microorganismo,
previamente fundido y enfriado a aproximadamente 45 C.
Homogeneizar e incubar.
Proceder al conteo del nmero de colonias que se desa-
rrollaron en el medio slido y escoger, a partir de los re-
sultados, la diluicin a ser utilizada para obtenerse, como
mximo, 100 UFC por frasco de medio de cultivo.
Repetir el procedimiento para cada microorganismo utili-
zado.
Para el preparado de suspensin fngica, la solucin de
cloruro de sodio a 0,9% (p/v) estril puede ser sustituida
por agua purificada estril.
PRUEBAS DE ADECUACIN DE LOS MEDIOS DE
CULTIVO
Los medios de cultivo utilizados deben cumplir con las
pruebas descritas a continuacin, realizadas antes de la
prueba de esterilidad de la muestra.
Esterilidad
Confirmar la esterilidad de cada lote de medio esterilizado
incubando todos los frascos de los medios en las condicio-
nes especificadas por 14 das. No debe ocurrir crecimiento
microbiano.
La ocurrencia de crecimiento microbiano inutiliza el lote
de medio para la prueba de esterilidad.

Promocin de crecimiento
Cada lote de medio de cultivo esterilizado debe ser proba-
do cuanto a su capacidad en promover el crecimiento de
microorganismos. Inocular, separadamente, en duplicado,
tubos de cada medio con volumen de inculo conteniendo
no ms que 100 UFC de cada cepa microbiana listada en la
Tabla 1 - Microorganismos indicados para utilizacin en pruebas de promocin de crecimiento y de validacin.
Medio Microorganismo
Medio fluido de Staphylococcus aureus
tioglicolato
Pseudomonas aeruginosa
Clostridium sporogenes*
Alternativo del Clostridium sporogenes
tioglicolato
Caldo de casena-soja Bacillus subtilis
Candida albicans
Aspergillus brasiliensis
Bacteroides vulgatus (ATCC 8482, NCTC 11154, INCQS
00059) puede ser utilizado alternativamente a Clostridium
sporogenes, cuando no sea necesario el uso de un microor-
ganismo esporulado.
Una alternativa a Staphylococcus aureus es el Bacillus
subtilis (INCQS 00001, ATCC 6633, CIP 52.62,NBRC
3134, NCIMB 8054, NCTC 10400).
Un microorganismo alternativo para Pseudomonas aerugi-
nosa es la Kocuria rhizophila (INCQS 00010, ATCC 9341,
CIP 53.65, NCTC 8340).
ALMACENAMIENTO DE LOS MEDIOS
Si los medios preparados fueren estocados en frascos no
hermticamente cerrados, podrn ser utilizados por 1 mes,
siempre que sean probados para promocin de crecimiento
dentro de 15 das a partir del tiempo de uso y que cumplan
el requisito para el indicador de color.
Si los medios fueren estocados en frascos hermticamente
cerrados, podrn ser usados por 1 ao, siempre que sean
probados para promocin de crecimiento dentro de 3 me-
ses a partir del tiempo de uso y que cumplan el requisito
para el indicador de color.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 255
Tabla 1 e incubar conforme las condiciones especificadas
para cada medio. La prueba de promocin de crecimiento
es considerada vlida si hubiere evidencia de crecimiento
microbiano, visualizado por la turbacin y/o por mtodos
microscpicos, despus de 3 das de incubacin de los me-
dios inoculados con bacterias y despus de 5 das de incu-
bacin de los medios inoculados con hongos.
Cepa
ATCC 6538, NCTC 10788, NCIMB 9518, CIP 4.83,
NBRC 13276, INCQS 00039
ATCC 9027, NCIMB 8626, CIP 82.118, NBRC 13275,
INCQS 00230
ATCC 19404, NCTC 532, CIP 79.3, INCQS 00352 o
ATCC 11437, NCIMB 14239, CIP 100651, NBRC
14293
ATCC 19404 ,NCTC 532, CIP 79.3, INCQS 00352 o
ATCC 11437, NCIMB 14239, CIP 100651, NBRC
5
14293
ATCC 6633, NCIMB 8054, CIP 52.62, NBRC 3134,
INCQS 00001
ATCC 10231, NCPF 3179, IP 48.72, NBRC 1594,
INCQS 40006
ATCC 16404, IMI 149007, IP 1431.83, NBRC 9455,
INCQS 40036
FLUIDOS DE DILUICIN Y LAVADO
Fluido I
Peptona de Carne 1,0 g
Agua purificada 1000 ml
pH despus de esterilizacin 7,1 0,2
Disolver la peptona de carne en agua purificada, filtrar
o centrifugar para clarificacin del medio, si necesario y
ajustar el pH en 7,1 0,2. Distribuir en frascos adecuados
y esterilizar utilizando proceso validado.
Preparacin para penicilinas o cefalosporinas. Para la rea-
lizacin del ensayo de esterilidad de penicilinas o cefalos-
porinas por el mtodo de filtracin en membrana, aadir,
aspticamente, al Fluido I esterilizado, cantidad de -lacta-
masa suficiente para inactivar cualquier actividad antibi-
tica residual en la membrana despus de la filtracin de la
muestra.
Fluido II
Para cada litro de Fluido I, aadir 1 ml de polisorbato 80
antes de la esterilizacin. Ajustar el pH en 7,1 0,2. Distri-
buir en frascos adecuados y esterilizar utilizando proceso
validado.
 256 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Usar ese fluido para productos que contienen lecitina o
aceite y para productos para salud.
Fluido III
Peptona de carne 5,0 g
Extracto de carne 3,0 g
Polisorbato 80 10,0 g
Agua purificada q.s.p. 1000 ml
pH despus de esterilizacin 6,9 0,2
Mezclar todos los componentes y calentar, suavemente,
hasta disolucin. Filtrar, si necesario, y ajustar el pH para
obtener, despus de la esterilizacin, el valor de 6,9 0,2.
Distribuir en frascos adecuados y esterilizar utilizando pro-
ceso validado.
PRUEBA DE VALIDACIN PARA BACTERIOSTASIS
Y FUNGISTASIS
Antes de establecer un procedimiento para la prueba de
esterilidad de insumos farmacuticos, medicamentos o
productos para salud, se debe garantizar que cualquier ac-
5
tividad bacteriosttica o fungisttica inherente al produc-
to no tenga influencia adversa sobre la confiabilidad de la
prueba, demostrndose que el procedimiento utilizado es
adecuado para el producto bajo examen.
La prueba de validacin para bacteriostasis y fungistasis
debe ser realizada cuando la prueba de esterilidad sea rea-
lizada por la primera vez para un producto y siempre que
hubiere modificaciones en la formulacin del producto y/o
en las condiciones experimentales de la prueba. La valida-
cin debe ser hecha previamente a la prueba de esterilidad
del producto bajo examen.
Procedimiento
Para realizar la prueba de validacin, proceder conforme
descrito en Procedimientos para la prueba de Esterilidad,
empleando exactamente los mismos mtodos, excepto para
las modificaciones que siguen.
Nota: para ambos mtodos descritos a continuacin, utili-
zar los microorganismos previamente especificados (Tabla
1). Realizar pruebas de Promocin de crecimiento como
control positivo. Incubar todos los frascos conteniendo los
medios por no ms que 5 das.
Mtodo de filtracin en membrana. Despus de transfe-
rencia del contenido del(de los) frasco (s) a ser probado(s)
(conforme especificado en la Tabla 3) para el dispositivo
de filtracin, aadir no ms que 100 UFC del microorga-
nismo prueba a la ltima alcuota del fluido estril utilizado
para el lavado de la membrana.
Mtodo de inoculacin directa. Despus de transferencia
del contenido del(de los) frasco(s) a ser probado(s) (con-
forme especificado en la Tabla 3) para frascos conteniendo
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
los medios de cultivo, aadir no ms que 100 UFC de los
microorganismos pruebas a los medios.
Interpretacin
Si el crecimiento de microorganismos obtenido despus de
la incubacin es visiblemente comparable a aquel obtenido
en el control positivo (frasco sin adicin de muestra), la
muestra no presenta actividad antimicrobiana bajo las con-
diciones de la prueba o tal actividad fue satisfactoriamente
eliminada. La prueba de esterilidad puede, entonces, ser
conducida sin necesidad de modificaciones.
Si el crecimiento de microorganismos no es obtenido en la
presencia de la muestra, o si l no es visiblemente compa-
rable a aquel obtenido en los controles positivos, la mues-
tra presenta actividad antimicrobiana que no fue satisfacto-
riamente eliminada, bajo las condiciones de la prueba. En
ese caso, deben ser hechas modificaciones en las condicio-
nes de la prueba para eliminar la actividad antimicrobia-
na, tales como diluicin, uso de sustancias neutralizantes,
aumento del nmero de lavados en el mtodo de filtracin
en membrana o una combinacin de ellas. La prueba de va-
lidacin debe ser repetida para verificar si la actividad an-
timicrobiana fue eliminada por la modificacin propuesta.
PROCEDIMIENTOS PARA LA PRUEBA DE
ESTERILIDAD
La prueba de esterilidad puede ser realizada utilizando los
mtodos de filtracin en membrana o de inoculacin di-
recta conforme la naturaleza del producto, excepto cuando
uno de los mtodos es especificado en la monografa in-
dividual. En ambos casos, controles negativos apropiados
deben ser incluidos.
Antes de proceder a la prueba, efectuar asepsia de las su-
perficies externas de los frascos y ampollas, sumergin-
dolos en solucin antisptica adecuada, o utilizando otros
procedimientos de desinfeccin externa de los embalajes
como por ejemplo, vapores de perxido de hidrgeno. En
el caso de artculos cuyos embalajes no resisten a ese trata-
miento, hacer asepsia de las muestras por medio de tejido
no liberador de partculas embebido en solucin antisp-
tica.
Muestreo
A menos que especificado de forma diferente en la mo-
nografa individual, probar el nmero de unidades de la
muestra especificado en la Tabla 2. Si las unidades de la
muestra presentan contenido en cantidad suficiente (Tabla
3), el contenido de cada unidad puede ser dividido en dos
porciones iguales para cada tipo de medio de cultivo utili-
zado. Si las unidades de la muestra no presentan contenido
en cantidad suficiente para cada medio, separar el doble
del nmero de unidades especificado en la Tabla 2 para
realizacin de la prueba.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 257

Tabla 2 - Nmero mnimo de unidades a ser probadas en funcin del tamao del lote.
Nmero de unidades del lote Nmero mnimo de unidades a ser probadasa b
Preparaciones parenterales
Hasta 100 10% o 4 unidades (lo que sea mayor)
Arriba de 100 hasta 500 10 unidades
Arriba de 500 2% o 20 unidades (lo que sea menor)
Parenterales de gran volumen 2% o 10 unidades (lo que sea menor)
Antibiticos slidos
Frascos con capacidad < 5 g 20 unidades
Frascos con capacidad 5 g 6 unidades
Oftlmicos y otras preparaciones no inyectables
Hasta 200 5% o 2 unidades (lo que sea mayor)
Arriba de 200 10 unidades
Producto presentado en embalaje de dosis nica aplicar lo mismo recomendado para preparaciones parenterales
Productos para salud
Hasta 100 10% o 4 unidades (lo que sea mayor)
Arriba de 100 hasta 500 10 unidades
Arriba de 500 2% o 20 unidades (lo que sea menor)
Productos slidos a granel
Hasta 4 cada unidad
Arriba de 4 hasta 50 20% o 4 unidades (lo que sea mayor)

5
Arriba de 50 2% o 10 unidades (lo que sea mayor)
Dispositivos mdicos quirrgicos
Catgut y otras suturas 2% o 5 embalajes (lo que sea mayor) como mximo 20 embalajes
Hasta 100 10% o 4 unidades (lo que sea mayor)
Arriba de 100 hasta 500 10 unidades
Arriba de 500 2% o 20 unidades (lo que sea mayor)
___________
a. muestreo especificado considerndose que el contenido de un recipiente es suficiente para inocular ambos medios de cultivo.
b. para materias primas, el muestreo satisfactorio puede ser basado en la raz cuadrada del nmero total de recipientes del lote

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 258 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 3 - Cantidades mnimas a ser utilizadas para cada medio de cultivo.

Cantidad por recipiente Volumen mnimo a ser inoculado en cada medio (ml)
Lquidos (no antibiticos)
menos de 1 ml de 1 a 40 ml todo el contenido
de 1 a 40 ml mitad del contenido, pero no menos que 1
arriba de 40 ml hasta 100 ml 20mL
arriba de 100 ml 10% del contenido del producto, pero no menos que 20 ml
Antibiticos (lquidos) 1 ml
Otras preparaciones solubles en agua o en solvente del tipo contenido total, pero no menos que 0,2 g miristato de
isopropila
Cremas y pomadas insolubles a ser suspendidos o contenido total, pero no menos que 0,2 g emulsificados
Slidos
menos de 0,05 g todo el contenido
arriba de 0,05g hasta 0,3 g mitad del contenido pero no menos que 0,05g
arriba de 0,3 g hasta 5 g 0,15 g
arriba de 5 g 0,5 g
Productos para salud
suturas quirrgicas 3 partes del hilo (30 cm de largo cada)
cinta quirrgica / gaza / algodn en embalaje 0,1 g por embalaje
mltiple
suturas y otros materiales en embalajes individuales todo el material

5
otros relacionados mdicos todo el material cortado en pedazos, o desmontado

MTODO DE FILTRAAO EN MEMBRANA Lquidos miscibles en vehculos acuosos

Utilizar membranas filtrantes con porosidad nominal no
superior a 0,45 m cuya eficiencia en retener microorga-
nismos haya sido establecida. Filtros de nitrato de celu-
losa, por ejemplo, son utilizados para soluciones acuosas,
oleosas y suavemente alcohlicas y filtros de acetato de ce-
lulosa, por ejemplo, para soluciones fuertemente alcohli-
cas. Filtros especialmente adaptados pueden ser requeridos
para determinados productos, como antibiticos.
Para productos oncolgicos extremamente agresivos sus-
tituir a membrana de ster de celulosa por difluoruro de
polivinilideno (PVDF) o politetrafluoroetileno (PTFE).
Los procedimientos descritos a continuacin se aplican
a membranas con dimetro de aproximadamente 50 mm.
Si filtros con dimetros diferentes son utilizados, los vo-
lmenes de las diluiciones y lavados deben ser ajustados
conforme el dimetro de la membrana empleada. El dis-
positivo de filtracin y la membrana son esterilizados por
proceso adecuado. El dispositivo presenta configuracin
tal que la solucin a ser examinada pueda ser introducida y
filtrada bajo condiciones aspticas. El dispositivo de filtra-
cin debe posibilitar, adems, la eliminacin asptica de la
membrana para su transferencia al medio de cultivo o ser
adecuado para proceder a la incubacin despus de adicin
del medio de cultivo al propio dispositivo. El tipo de fluido
utilizado en el lavado de la membrana depende de la natu-
raleza del producto, siendo especificado en la monografa
individual, cuando sea el caso.
Controles negativos, o blancos deben ser incluidos para los
fluidos y solventes utilizados, para los cuales no se debe
observar crecimiento microbiano. Se debe verificar, ade-
ms, si los fluidos utilizados no presentan actividad anti-
microbiana en las condiciones de la prueba.
Transferir pequea cantidad de diluyente estril, como el
Fluido I, para la membrana y filtrar. El diluyente puede
contener sustancias neutralizantes y o inactivantes, como
en el caso de antibiticos. Transferir para la membrana los
contenidos de los recipientes a ser probados o la diluicin
apropiada (previamente definida en la prueba de validacin
para bacteriostasis y fungistasis) en cantidades no inferio-
res a las recomendadas en las Tablas 2 y 3 y filtrar inme-
diatamente. Si el producto presenta actividad antimicrobia-
na, lavar la membrana, como mnimo, tres veces filtrando,
cada vez, el volumen del diluyente estril establecido en la
prueba de validacin para bacteriostasis y fungistasis. La
cantidad de fluido de lavado utilizada no debe ser superior
a cinco porciones de 200 ml, incluso si durante la prueba
de validacin haya sido demostrado que tal ciclo de lava-
dos no elimina completamente la actividad antimicrobiana.
Transferir la membrana entera para medios seleccionados.
Utilizar los mismos volmenes de medio empleados en la
prueba de validacin. Incubar los medios por lo menos por
14 das.
Aceites y soluciones oleosas
Utilizar, para cada medio de cultivo la cantidad de mues-
tra especificada en las Tablas 2 y 3. Aceites y soluciones
oleosas de baja viscosidad pueden ser filtradas sin diluicin
a travs de la membrana seca. Aceites viscosos deben ser
diluidos en solvente estril adecuado como, por ejemplo,
miristato de isopropilo, siempre que demostrado no poseer
actividad antimicrobiana en las condiciones de la prueba.
Dejar el aceite penetrar en la membrana, filtrar utilizando
vaco gradualmente. Lavar la membrana con, como mni-
mo, tres porciones del Fluido III. Proseguir conforme des-
crito para Lquidos miscibles en vehculos acuosos.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Pomadas y cremas
Utilizar, para cada medio de cultivo, cantidad de muestra
especificada en las Tablas 2 y 3. Pomadas de base oleosa y
emulsiones del tipo agua en aceite pueden ser diluidas para
1% en solvente adecuado (miristato de isopropilo, u otro)
como descrito en el tem anterior, calentando, si necesario,
a 40 C (en casos excepcionales, calentar como mximo
hasta 44 C). Filtrar, lo ms rpidamente posible, y pro-
seguir conforme descrito en Aceites y soluciones oleosas.
En el caso de utilizacin del miristato de isopropilo como
diluyente, siempre que demostrado no poseer actividad an-
timicrobiana en las condiciones de la prueba, este debe ser
esterilizado antes del uso, por filtracin en membrana, y su
extracto acuoso debe presentar pH no inferior a 6,5.
Slidos solubles (no antibiticos)
Utilizar, para cada medio de cultivo, cantidad de muestra
especificada en las Tablas 2 y 3. Disolver el producto en
fluido adecuado, como el Fluido I, y proseguir conforme
descrito para Lquidos miscibles en vehculos acuosos.
Slidos para preparaciones inyectables (no antibiticos)
Reconstituir el producto como descrito en el rtulo y proce-
der conforme descrito para Lquidos miscibles en vehculos
acuosos, o Aceites y soluciones oleosas, dependiendo del
caso. Si necesario, puede ser utilizado un exceso de diluyen-
te para auxiliar en la reconstitucin y filtracin del producto.
Antibiticos slidos para preparaciones inyectables
Para embalajes con menos de 5 g retirar, aspticamente, de
cada uno de los 20 frascos recomendados, cerca de 0,3 g
de muestra, disolver en 200 ml de Fluido I y mezclar. Al-
ternativamente, reconstituir el producto conforme descrito
en el rtulo, transferir el equivalente, en lquido, a 0,3 g de
muestra y diluir para 200 ml con Fluido I. Para embalajes
con 5 g o ms transferir, aspticamente, de cada seis reci-
pientes, 1 g de muestra para frasco adecuado, disolver en
200 ml de Fluido I y mezclar.
Alternativamente, reconstituir los seis frascos del producto
como recomendado por el fabricante, transferir cantidad de
lquido, equivalente a 1 g de la muestra, para frasco ade-
cuado, diluir para 200 ml con Fluido I y mezclar. Proseguir
conforme descrito para Lquidos miscibles en vehculos
acuosos.
Aerosoles estriles
Para productos lquidos presurizados, congelar el conteni-
do en mezcla de etanol y hielo seco a por lo menos -20 C,
por aproximadamente 1 hora. Si posible, antes de la aber-
tura de la embalaje, dejar el propelente escapar y transferir
aspticamente el contenido para frasco adecuado estril.
Aadir 100 ml de Fluido II y homogeneizar suavemente.
Proseguir conforme descrito para Lquidos miscibles en ve-
hculos acuosos o Aceites y soluciones oleosas, conforme
el caso.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 259
Jeringas ya llenadas con o sin aguja acoplada
Expeler el contenido de cada jeringa directamente sobre
la(s) membrana(s) o en frascos separados y despus filtrar.
Proseguir conforme descrito para Lquidos miscibles en ve-
hculos acuosos.
Dispositivos estriles
Pasar aspticamente un volumen de Fluido II no inferior a
10% del volumen de cada unidad del total de dispositivos a
ser probados conforme establecido en las Tablas 2 y 3. Re-
colectar el fluido en un recipiente adecuado estril y proce-
der conforme indicado para lquidos miscibles en vehculos
acuosos o soluciones acuosas de aceites y soluciones oleo-
sas, conforme el caso. En el caso de las jeringas vacas, est-
riles, extraer el diluyente estril del recipiente a travs de la
aguja estril, si est acoplada, o a travs de una aguja estril
acoplada para proceder al ensayo, y expulsar el contenido en
un recipiente estril. Proceder como indicado anteriormente.
MTODO DE INOCULACIN DIRECTA EN MEDIO
DE CULTIVO
5
Transferir, directa y aspticamente, para los medios de cul-
tivo la cantidad del producto especificada en las Tablas 2 y
3, de tal forma que el volumen del producto no sea mayor
que 10% del volumen del medio de cultivo, a menos que
especificado de manera diferente en la monografa indivi-
dual o en esa seccin. Si la muestra presenta actividad anti-
microbiana, realizar la prueba despus de la neutralizacin
de la actividad con una sustancia neutralizante adecuada o
por diluicin en cantidad suficiente de medio de cultivo.
Cuando sea necesario el uso de grandes volmenes del pro-
ducto, puede trabajarse con medio de cultivo concentrado,
preparado teniendo en cuenta la diluicin subsiguiente a la
adicin del producto. Si el recipiente sirve, el medio con-
centrado puede ser adicionado directamente a la muestra.
Lquidos
Transferir el volumen indicado de cada muestra conforme
Tabla 3 para tubos conteniendo los medios fluidos de tio-
glicolato y caldo de casena-soja, utilizando pipeta estril o
jeringa y aguja estriles. Mezclar el lquido con el medio,
sin airear excesivamente. Incubar en las condiciones espe-
cificadas para cada medio durante 14 das.
Lquidos oleosos
Utilizar medio de cultivo conteniendo agente emulsionante
apropiado en concentracin que se haya mostrado adecua-
do en la validacin, por ejemplo, polisorbato 80 a 1% (p/v).
Pomadas y cremas
Preparar diluicin de la muestra a 10% utilizando un agen-
te emulsionante adecuado adicionado a un diluyente estril
como el Fluido I. Transferir a muestra diluida para medios
de cultivo sin emulsionante. Incubar los medios inoculados
por, como mnimo, 14 das. Observar los medios duran-
te todo el perodo de incubacin. Agitar, suavemente, los
 260 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
frascos de medio de cultivo conteniendo aceite, diariamen-
te, durante todo el perodo de incubacin. Los frascos con-
teniendo Medio lquido de tioglicolato u otro medio similar
deben ser agitados para no perjudicar las condiciones de
anaerobiosis.
Slidos
Transferir la cantidad de muestra especificada en las Ta-
blas 2 y 3 o preparar una solucin o suspensin del produc-
to adicionando volumen no superior a 20 ml de diluyente
estril al recipiente. Transferir el material as obtenido para
200 ml de Medio fluido de tioglicolato. Del mismo modo,
transferir la misma cantidad del material para 200 ml de
Caldo de casena-soja y mezclar. Proseguir conforme des-
crito para Lquidos.
Catgut y otras suturas quirrgicas
Para cada medio, utilizar la cantidad de muestra especifi-
cada en las Tablas 2 y 3. Abrir el embalaje aspticamente
y retirar tres porciones del hilo para cada medio de cultivo.
Esas porciones deben ser retiradas en el inicio, en el medio
5
y en el final y tener 30 cm de largo. Cubrir cada parte del
hilo con volumen suficiente de los medios (20 ml a 150
ml).
Algodn purificado, gaza, vendaje y material relacionado
De cada embalaje de algodn, gaza en rollo o gaza en ven-
daje a ser analizado, retirar, con instrumentos estriles, dos
porciones de 0,1 g a 0,5 g de las partes ms internas de
la muestra. Para materiales en embalaje individual, tales
como copo de gaza, retirar dos porciones individuales de
0,25 g a 0,5 g, o dos unidades totales, en el caso de unida-
des pequeas (ej.: vendaje menores que 25 mm a 75 mm).
Transferir una porcin para tubo con 40 ml de Medio fluido
de tioglicolato y otra para tubos con 40 ml de Caldo de
casena-soja. Proseguir conforme descrito para Lquidos.
Aparatos parenterales
Para aparatos de formas y dimensiones que permitan su
inmersin en volumen de medio que no rebase 1000 ml,
hacer su inmersin utilizando las cantidades especificadas
en las Tablas 2 y 3 y proceder conforme descrito en L-
quidos. Para aparatos muy grandes, hacer la inmersin de
partes que entren en contacto con el paciente en volumen
de medio suficiente para la inmersin de todas las partes.
Para catteres cuyos lmenes, interno y externo, deban ser
estriles, pasar el medio dentro del lumen o llenar el lumen
con el medio y promover la inmersin del aparato entero.
OBSERVACIONES E INTERPRETACIN DE LOS
RESULTADOS
Durante el perodo de incubacin y hasta su trmino, exa-
minar los medios cuanto a las evidencias macroscpicas
de crecimiento microbiano. Si la muestra bajo examen
provoca turbacin de los medios de cultivo, para impedir
la observacin del crecimiento microbiano, transferir por-
ciones adecuadas de cada frasco (no menos que 1 ml) para
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
frascos nuevos de los mismos medios 14 das despus del
inicio de la incubacin. Incubar los frascos originales y los
frascos nuevos por un perodo adicional de no menos que 4
das. Si, al final del perodo de incubacin, no hubiere evi-
dencias de crecimiento microbiano, la muestra en examen
cumple con el requisito de esterilidad. Si fuese evidencia-
do crecimiento de microorganismos, la muestra no cumple
con el requisito de esterilidad, a no ser que se evidencie
falla durante la ejecucin de la prueba como, por ejemplo,
contaminacin no relacionada con el producto en anlisis.
La prueba de esterilidad puede ser considerada invlida si
una o ms de las siguientes condiciones fueren observadas.
a) los datos de monitoreo microbiolgico del rea de rea-
lizacin de la prueba demuestran falla;
b) una revisin de los procedimientos analticos utilizados
durante la prueba revela falla;
c) crecimiento microbiano es observado en los controles
negativos;
d) despus de la identificacin del microorganismo(s) ais-
lado(s) a partir de la prueba, el crecimiento de esa es-
pecie(s) puede ser atribuido, inequvocamente, a fallas
relacionadas al material utilizado y/o a tcnicas utiliza-
das en la ejecucin de la prueba de esterilidad.
Si fuese considerada invlida, la prueba de esterilidad debe
ser repetida con el mismo nmero de unidades de la prue-
ba inicial. Si, despus de la repeticin de la prueba, no es
observado crecimiento microbiano, la muestra cumple con
el requisito de esterilidad. Si es observado crecimiento mi-
crobiano despus de la repeticin de la prueba, la muestra
bajo examen no cumple con el requisito de esterilidad.
Tcnicas microbiolgicas/bioqumicas convencionales son
generalmente satisfactorias para identificacin de los mi-
croorganismos recuperados en una prueba de esterilidad.
En el caso de considerarse solamente que, despus de la
determinacin de la identidad de los microorganismos
aislados en la prueba, el crecimiento de esa(s) especie(s)
pueda ser atribuido inequvocamente a fallas con respecto
al material y/o tcnica utilizados en el procedimiento del
ensayo de esterilidad, puede ser necesario emplear tcni-
cas ms sensibles para demostrar que el microorganismo
aislado en el producto es idntico al aislado en materiales
o en el ambiente. Mientras las tcnicas de identificacin
microbiolgicas / bioqumicas de rutina pueden demostrar
que dos aislados no son idnticos, esos mtodos pueden no
ser suficientemente sensibles o confiables para suministrar
evidencia inequvoca de que dos aislados son provenien-
tes de una misma fuente. Mtodos moleculares pueden ser
empleados para determinar si dos microorganismos perte-
necen a un mismo clon y poseen origen en comn.
APLICACIN DE LA PRUEBA DE ESTERILIDAD A
PREPARACIONES PARENTERALES, OFTLMICAS
Y OTRAS PREPARACIONES NO-INYECTABLES
CON REQUERIMENTO PARA ESTERILIDAD
Al emplear la tcnica de filtracin por membrana, utilizar,
siempre que posible, todo el contenido del recipiente, pero
no menos que la cantidad indicada en las Tablas 2 y 3, di-

luyendo, cuando necesario, para aproximadamente 100 ml
con una solucin estril adecuada, como el Fluido I.
Al emplear la tcnica de inoculacin directa, utilizar las
cantidades indicadas en las Tablas 2 y 3, a menos que de
otra forma autorizada y justificada. Las pruebas para bac-
terias y hongos sean realizados con una misma unidad de
la muestra bajo examen. Cuando el volumen o la cantidad
en un nico recipiente es insuficiente para la realizacin
de la prueba, los contenidos de dos o ms recipientes son
utilizados para inocular los diferentes medios.
APLICACIN DE LA PRUEBA DE ESTERILIDAD A
PRODUCTOS FARMACUTICOS RADIOACTIVOS
Debido al rpido decaimiento radioactivo, no es practica-
ble atrasar la liberacin de algunos productos farmacuti-
cos radioactivos por cuenta de la prueba de esterilidad.
En tales casos, los resultados de las pruebas de esterilidad
dan apenas evidencia retrospectiva confirmatoria para la
garanta de la esterilidad, y por tanto dependen de los m-
todos iniciales establecidos en la fabricacin y en los pro-
cedimientos de validacin / certificacin.
5.5.3.3 ENSAYO MICROBIOLGICO DE
ANTIBITICOS
Se determina la potencia o actividad de un producto que
contiene antibitico comparando la dosis que inhibe el cre-
cimiento de un microorganismo susceptible con relacin a
la dosis de una sustancia estndar o preparacin biolgica
de referencia del antibitico que produce inhibicin similar.
UNIDAD INTERNACIONAL Y PREPARACIN
ESTNDAR
Unidad Internacional es la actividad especfica contenida
en una cantidad (masa) de Estndar Biolgico Internacio-
nal o Preparacin de Referencia Biolgica Internacional.
La cantidad equivalente de unidades para uso internacional
es establecida, siempre que necesario, por la Organizacin
Mundial de la Salud.
Sustancias Qumicas de Referencia Internacional no presen-
tan unidades de actividad biolgica definidas. Cuando son
necesarios ensayos biolgicos, la potencia de esos productos
es en trminos de masa equivalente a la de la sustancia pura.
El nmero de unidades, o la masa equivalente de la sustan-
cia pura, en microgramos, contenidos en 1 mg de sustancia
antibitica, est indicado en la monografa de cada uno de
los productos inscritos en la Farmacopea.
Para los ensayos microbiolgicos registrados en la Farma-
copea, Preparaciones Estndar (Estndares Primarios) son
los Estndares Internacionales y Preparaciones de Referen-
cia establecidos por la Organizacin Mundial de la Salud y
por la Farmacopea Europea o los Estndares y Preparacio-
nes de Referencia brasileos. Otras preparaciones adecua-
das, de uso internacional corriente, en las cuales la poten-
cia haya sido determinada con relacin a las preparaciones
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 261
estndar de la Organizacin Mundial de la Salud, poseen
valor legal idntico.
Se recomienda que sean preparados y empleados estnda-
res de trabajo (secundarios); todava, es imprescindible que
la potencia haya sido determinada por nmero adecuado de
ensayos comparativos con relacin a un estndar primario
o farmacopeico, validados por anlisis estadstica apropia-
da y que los datos y resultados sean archivados a disposi-
cin de la fiscalizacin competente por plazo idntico al de
la validez de los productos ensayados.
Para el ensayo de lotes de sustancias antibiticas para las
cuales existan Preparaciones Estndar nacionales, refren-
dadas por organizaciones internacionales, es obligatorio el
uso de esas preparaciones.
SOLUCIONES
Solucin 1 (tampn fosfato de potasio a 1%, estril. pH
6,0) Disolver 2,0 g de fosfato de potasio dibsico y 8 g
de fosfato de potasio monobsico en agua purificada sufi-
ciente para alcanzar 1000 ml. Esterilizar la solucin por 20
5
minutos en autoclave a 121 C y, si necesario, ajustar el
pH para 5,9 6,1 con cido fosfrico 6 M o hidrxido de
potasio 10 M.
Solucin 2 (tampn fosfato de potasio 0,1 M, estril, pH
8,0) Disolver 16,73 g de fosfato de potasio dibsico y
0,523 g de fosfato de potasio monobsico en agua purifica-
da suficiente para alcanzar 1000 ml. Esterilizar la solucin
por 20 minutos en autoclave a 121 C y, si necesario, ajus-
tar el pH para 7,9 8,1 con cido fosfrico 6 M o hidrxido
de potasio 10 M.
Solucin 3 (tampn fosfato de potasio 0,1 M, estril, pH
4,5) Disolver 13,6 g de fosfato de potasio monobsico en
agua purificada suficiente para alcanzar 1000 ml. Esterili-
zar la solucin por 20 minutos en autoclave a 121 C y, si
necesario, ajustar el pH para 4,4 4,5 con cido fosfrico
6 M o hidrxido de potasio 10 M
Solucin 4 (tampn fosfato de potasio a 10%, estril,
pH 6,0) Disolver 20,0 g de fosfato de potasio dibsico y
80,0 g de fosfato de potasio monobsico en agua purificada
suficiente para alcanzar 1000 ml. Esterilizar la solucin por
20 minutos en autoclave a 121 C y, si necesario, ajustar
el pH 5,9 6,1 con cido fosfrico 6 M o hidrxido de
potasio 10 M.
Solucin 5 (tampn fosfato de potasio 0,2 M, estril, pH
10,5) Disolver 35,0 g de fosfato de potasio dibsico y
aadir 2,0 ml de hidrxido de potasio 10 M en agua purifi-
cada suficiente para alcanzar 1000 ml. Esterilizar la solu-
cin por 20 minutos en autoclave a 121 C y, si necesario,
ajustar el pH para 10,4 10,6 con cido fosfrico 6 M o
hidrxido de potasio 10 M
Solucin 6 (cido clorhdrico metanlico 0,1 M) Diluir
10,0 ml de cido clorhdrico 1,0 M en metanol suficiente
para alcanzar 1000 ml.
 262 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Solucin 7 (solucin de alcohol isoproplico a 80%)
Diluir 800 ml de alcohol isoproplico en agua purificada
suficiente para alcanzar 1000 ml.
Solucin 8 (tampn fosfato de potasio 0,1 M, estril, pH
7,0) Disolver 13,6 g de fosfato de potasio dibsico y 4,0
g de fosfato de potasio monobsico en agua purificada su-
ficiente para alcanzar 1000 ml. Esterilizar la solucin por
20 minutos en autoclave a 121 C y, si necesario, ajustar el
pH para 6,8 7,2 con cido fosfrico 6 M o hidrxido de
potasio 10 M.
MEDIOS DE CULTIVO
Pueden ser empleados medios de cultivo deshidratado, dis-
ponible en el comercio que, al ser reconstituidos con agua
purificada, conforme las especificaciones del fabricante, po-
sean la misma composicin que el medio producido con los
ingredientes individualmente indicados para su obtencin.
Medio de cultivo n 1 Disolver 6,0 g de peptona seca,
4,0 g de casena de digestin pancretica. 3,0 g de extracto
de levadura, 1,0 g de dextrosa y 15,0 g de agar en agua
5
purificada suficiente para alcanzar 1000 ml. El pH, despus
de esterilizacin, deber ser 6,6.
Medio de cultivo n 2 Disolver 6,0 g de peptona seca,
3,0 g de extracto de levadura, 1,5 g de extracto de carne y
15,0 g de agar en agua purificada suficiente para alcanzar
1000 ml. El pH, despus de esterilizacin, deber ser 6,6.
Medio de cultivo n 3 Disolver 5,0 g de peptona seca,
1,5 g de extracto de levadura, 1,5 g de extracto de carne,
2,5 g de cloruro de sodio, 1,0 g de dextrosa, 3,68 g de fos-
fato de potasio dibsico y 1,32 g de fosfato de potasio mo-
nobsico, en agua purificada suficiente para alcanzar 1000
ml. El pH, despus de esterilizacin, deber ser 7,0.
Medio de cultivo n 4 Disolver 6,0 g de peptona seca,
3,0 g de extracto de levadura, 1,5 g de extracto de carne,
1,0 g de D-glucosa y 15,0 g de agar en agua purificada
suficiente para alcanzar 1000 ml. El pH, despus de esteri-
lizacin, deber ser 6,6.
Medio de cultivo n 5 Usar el medio de cultivo n 2, sin
embargo, el pH, despus de esterilizacin, deber ser 7,8.
Medio de cultivo n 6 Disolver 40,0 g de dextrosa y 10,0
g de peptona seca en agua purificada suficiente para alcanzar
1000 ml. El pH, despus de esterilizacin, deber ser 5,6.
Medio de cultivo n 7 Usar el medio de cultivo n 1,
esterilizado y enfriado a 50 C. Preparar solucin acuosa
conteniendo 10 mg de neomicina por ml y esterilizar por
filtracin en membrana con porosidad de 0,22 m. Aadir,
aspticamente, solucin estril de sulfato de neomicina,
para obtener concentracin final con potencia de 100 g de
neomicina por ml de medio.
Medio de cultivo n 8 Usar el medio de cultivo n 2,
sin embargo, el pH, despus de esterilizacin, deber ser
ajustado para 5,8 6,0.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Medio de cultivo n 9 Disolver 17,0 g de casena de
digestin pancretica, 3,0 g de soja de digestin papanica,
5,0 g de cloruro de sodio, 2,5 g de fosfato de potasio dib-
sico, 2,5 g de dextrosa y 20,0 g de agar en agua purificada
suficiente para alcanzar 1000 ml. El pH, despus de esteri-
lizacin, deber ser 7,3.
Medio de cultivo n 10 Usar el medio de cultivo n 9,
adicionando, sin embargo, en lugar de 20,0 g, 12,0 g de
agar y 10,0 ml de polisorbato 80 (ese ltimo adicionado
despus de calentar el medio para disolver el agar, diluyen-
do inmediatamente, con agua para alcanzar 1000 ml). El
pH, despus de esterilizacin, deber ser 7,3.
Medio de cultivo n 11 Usar el medio de cultivo n. 1,
pero el pH, despus de esterilizacin, deber ser ajustado
para 8,0.
Medio de cultivo n 12 Preparar como el medio de cul-
tivo n 1, adicionando, sin embargo, 300 mg de sulfato de
manganeso hidratado (MnSO4.H2O) para cada 1000 ml de
medio.
Medio de cultivo n 13 Disolver 10,0 g de peptona seca
y 20,0 g de dextrosa en agua purificada suficiente para al-
canzar 1000 ml. El pH, despus de esterilizacin, deber
ser 5,6.
Medio de cultivo n 14 Disolver 10,0 g de glicerol, l0,6
g de peptona seca, 10,6 g de extracto de carne y 3,0 g de
cloruro de sodio en agua purificada suficiente para alcanzar
1000 ml. El pH, despus de esterilizacin, deber ser 7,0.
Medio de cultivo n 15 Preparar como el medio de cul-
tivo n 14, adicionando, sin embargo, 17,0 g de agar para
cada 1000 ml de medio.
Medio de cultivo n 16 Disolver 15,0 g de casena de
digestin pancretica, 5,0 g de soja de digestin papanica,
5 g de cloruro de sodio y 15,0 g de agar en agua purificada
suficiente para alcanzar 1000 ml. El pH, despus de esteri-
lizacin, deber ser 7,3.
Medio de cultivo n 17 Disolver 17,0 g de casena de
digestin pancretica, 3,0 g de peptona de soja, 2,5 g de
dextrosa. 5,0 g de cloruro de sodio y 2,5 g de fosfato de
potasio dibsico en agua purificada suficiente para alcanzar
1000 ml. El pH, despus de esterilizacin, deber ser 7,3.
Medio de cultivo n 18 Usar el medio de cultivo n 11,
pero, despus de calentar la solucin para disolver los in-
gredientes, aadir 20,0 ml de polisorbato 80. El pH, des-
pus de esterilizacin deber ser 8,0.
Medio de cultivo n 19 Disolver 9,4 g de peptona seca,
4,7 g de extracto de levadura, 2,4 g de extracto de carne,
15,0 g de cloruro de sodio, 10,0 g de dextrosa y 23,5 g agar
en agua purificada suficiente para alcanzar 1000 ml. El pH,
despus de esterilizacin, deber ser 6,1.
Medio de cultivo n 20 Disolver 40,0 g de dextrosa, 10,0
g de peptona seca, 15,0 g de agar y 0,05 g de cloranfenicol

(en potencia) en agua purificada suficiente para alcanzar
1000 ml. El pH, despus de esterilizacin, deber ser 5,6.
Medio de cultivo n 21 Usar el medio de cultivo n 20,
esterilizado y enfriado a 50 C. Aadir, aspticamente, 2,0
ml de solucin estril de cicloheximida para cada 100 ml
de agar fundido. Preparar solucin conteniendo 10,0 mg de
cicloheximida por ml, en agua purificada, y esterilizar, por
filtracin en membrana con porosidad de 0,22 m.
Medio de cultivo n 22 Disolver 15,0 g de peptona seca,
5,0 g de harina de soja de digestin papanica, 4,0 g de
cloruro de sodio, 0,2 g de sulfito de sodio, 0,7 g de L-cis-
tina, 5,5 g de dextrosa y 15,0 g de agar, en agua purificada
suficiente para alcanzar 1000 ml. El pH, despus de esteri-
lizacin, deber ser 7,0.
PREPARACIN DEL INCULO
Microorganismos recomendados
Staphylococcus aureus (ATCC 6538p)
Micrococcus luteus (ATCC 7468)
Kocuria rhizophila (ATCC 9341)
Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228)
Saccharomyces cerevisiae (ATCC 9763)
Bordetella bronchiseptica (ATCC 4617)
Bacilius cereus var. mycoides (ATCC 11778)
Bacillus subtilis (ATCC 6633)
Klebsiella pneumoniae (ATCC 10031)
Escherichia coli (ATCC 10536)
Enterococcus hirae (ATCC 10541)
Micrococcus luteus (ATCC 10240)
Microsporum gypseum (ATCC 14683)
Saccharomyces cerevisiae (ATCC 2601)
Micrococcus luteus (ATCC 14452)
Pseudomonas aeruginosa (ATCC 25619)
Mycobacterium smegmatis (ATCC 607)
Con la finalidad de indicacin, fueron listados los microor-
ganismos disponibles en la ATCC. Los mismos microor-
ganismos pueden, tambin, ser obtenidos de otras fuentes:
INCQS, CIP, NBRC, NCIMB, NCPF, NCTC, NCYC, IMI
y IP. La correspondencia entre los microorganismos y las
direcciones de las entidades que los proveen se encuentran
indicadas en Microorganismos empleados en pruebas y en-
sayos (5.5.3.5).
Procedimiento 1 Staphylococcus aureus, Micrococcus
luteus, Kocuria rhizophila, Staphylococcus epidermidis,
Bordetella bronchiseptica, Bacillus subtilis, Klebsiella
pneumoniae, Escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa.
Preparacin de la suspensin Transferir el microorganis-
mo de un cultivo stock para tubos que contengan 10 ml de
medio de cultivo n 1 inclinado. Incubar el tubo a 32 35
C, por 24 horas. Despus de incubacin, lavar el creci-
miento del microorganismo con 50 ml de solucin fisiol-
gica estril.
Estandarizacin de la suspensin Diluir la suspensin
preparada, con solucin fisiolgica estril, para obtener la
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 263
transmitancia de 25% en el largo de onda de 580 nm, em-
pleando espectrofotmetro adecuado y tubos de ensayo con
13 mm de dimetro como cuba de absorcin. Determinar la
cantidad de suspensin a ser adicionada cada 100 ml de agar
o caldo nutriente para producir zonas de inhibicin claras y
definidas o relacin satisfactoria dosis- respuesta en el m-
todo turbidimtrico. Las suspensiones de los microorganis-
mos sometidos al procedimiento 1 pueden ser estocadas a
una temperatura de 4 C, respectivamente, por los siguientes
perodos: 1 semana, 2 semanas, 2 semanas, 2 semanas, 2
semanas, 6 meses, 1 semana, 2 semanas y 2 semanas.
Micrococcus luteus ATCC 14452. Efectuar como indicado
en el Procedimiento 1. Emplear, no obstante, en el tubo con
medio inclinado y en el frasco de Roux, medio de cultivo
n 7, incubando el frasco por perodo de 48 horas. La sus-
pensin puede ser estocada por dos semanas, a una tempe-
ratura no superior a 4 C.
Procedimiento 2 Bacillus subtilis.
Efectuar como indicado en el Procedimiento 1. En la pre-
paracin de la suspensin, sin embargo, emplear medio de
5
cultivo n 12, cuyo perodo de incubacin es de 5 das. En
la estandarizacin de la suspensin, proceder a choque tr-
mico y estandarizar la suspensin de la siguiente manera:
centrifugar y decantar el lquido sobrenadante. Resuspen-
der el sedimento con 50 a 70 ml de solucin fisiolgica es-
tril y calentar la suspensin por 30 minutos a 70 C. Eje-
cutar pruebas en placas, para asegurar la viabilidad de las
esporas y determinar la cantidad que deber ser adicionada
cada 100 ml de medio, para obtener zonas de inhibicin
adecuadas. La suspensin puede ser estocada, por 6 meses,
en temperatura no superior a 4 C.
Procedimiento 3 Bacillus cereus.
Efectuar como indicado en el Procedimiento 1. No obstan-
te, incubar el tubo con el microorganismo por una semana.
En la estandarizacin de la suspensin, proceder a choque
trmico y estandarizar la suspensin de la siguiente mane-
ra: calentar la suspensin por 30 minutos, a 80 C. Lavar
tres veces la suspensin de esporas con 20 a 25 ml de agua
estril. Resuspender los microorganismos en 50 a 70 ml de
agua estril y promover nuevo choque trmico por 30 mi-
nutos a 70 C. Ejecutar pruebas en placas para asegurarse
de la viabilidad de las esporas y determinar la cantidad de
los que debern ser aadidos cada 100 ml de agar, para ob-
tener zonas de inhibicin adecuadas. La suspensin puede
ser estocada, por 6 meses, a una temperatura no superior
a 4 C.
Procedimiento 4 Microsporum gypseum.
Incubar el microorganismo, por 6 a 8 semanas a 25 C, en
frascos de Matraz de 3 litros, conteniendo 200 ml de medio
de cultivo n 6. Verificar el crecimiento por esporulacin.
Cuando a esporulacin sea 80% o ms, recolectar los co-
nidiforos de la capa micelial con esptula estril u otro
instrumento adecuado. Los conidiforos estarn en la parte
superior de la capa fluctuante. Mantener los conidiforos
en 50 ml de solucin fisiolgica. Determinar, experimen-
 264 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
talmente, la cantidad de conidiforos para el ensayo. La
suspensin puede ser estocada, por dos meses, a una tem-
peratura no superior a 4 C.
Procedimiento 5 Enterococcus hirae.
Transferir el microorganismo de una cultivo stock para me-
dio n 33 e incubar, por 16 a 18 horas, a 37 C. Determinar,
experimentalmente, la cantidad de microorganismos para
el ensayo. Mantener ese cultivo bajo refrigeracin por pla-
zo no superior a 24 horas.
Procedimiento 6 Saccharomyces cerevisiae. (ATCC
9763).
Mantener el microorganismo en tubos conteniendo 10 ml
de medio de cultivo n 19 inclinado. Incubar los tubos a
32 35 C, durante 24 horas. Inocular 100 ml de caldo nu-
triente medio de cultivo n 13 e incubar, por 16 a 18 ho-
ras, a 37 C. Estandarizar la suspensin conforme descrito
en el Procedimiento 1. La suspensin puede ser estocada,
por 4 semanas, a una temperatura no superior a 4 C.
5
Procedimiento 7 Saccharomyces cerevisiae. (ATCC
9763 y ATCC 2601).
Seguir lo indicado en el Procedimiento 1. Incubar, sin em-
bargo, el tubo inclinado con el medio de cultivo n 19, a
30 C, el ltimo por perodo de 48 horas. La suspensin
puede ser estocada, por 4 semanas, a una temperatura no
superior a 4 C.
Procedimiento 8 Mycobacterium smegmatis.
Mantener el microorganismo en tubos con medio inclinado
conteniendo 10 ml del medio de cultivo n 16 y efectuar
repiques semanalmente. Incubar el tubo a 37 C, por 48
horas. Usando 3 ml de solucin fisiolgica estril, transfe-
rir las cultivos que crecern en el agar inclinado para frasco
matraz de 500 ml, conteniendo 100 ml de medio de culti-
vo n 14 y 50 g de perlas de vidrio. Agitar el cultivo por
rotacin a una velocidad de 130 ciclos por minuto, en un
radio de 3,5 cm y a una temperatura de 27 C, por perodo
de cinco das. Determinar la cantidad de suspensin a ser
adicionada cada 100 ml de agar por medio de ensayo en
placas. La suspensin puede ser estocada, por dos sema-
nas, a una temperatura no superior a 4 C.
Mtodo 1
Transferir quantidade suficiente de padro para pesa-fil-
tro tarado provido de tampa esmerilhada. Pesar o frasco
e coloc-lo em estufa sob presso reduzida, inclinando a
tampa sobre a boca do frasco para assegurar que perma-
nea aberto durante a dessecao. Dessecar a 60 C, sob
presso de 0,67 kPa ou menos, durante trs horas. Conclu-
do o processo, introduzir ar seco na estufa, submetendo-o
a agente dessecante como cido sulfrico ou silica-gel. Re-
por a tampa e colocar o pesa-filtro em dessecador contendo
agente dessecante como pentxido de fsforo ou slica-gel.
Deixar esfriar temperatura ambiente e pesar, calculando
a perda porcentual de massa do padro.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Mtodo 2
Proceder conforme el Mtodo 1. Emplear, sin embargo,
pesafiltro tarado provisto de tapa con tubo capilar de di-
metro interno de la orden de 0,20 a 0,25 mm, y desecar sin
retirar la tapa.
Mtodo 3
Proceder conforme el Mtodo 1. Desecar, sin embargo la
muestra a 110 C, bajo presin de 0,67 kPa o menos, du-
rante tres horas.
Mtodo 4
Proceder conforme el Mtodo 1. Desecar, sin embargo la
muestra a 40 C, bajo presin de 0,67 kPa o menos, durante
dos horas.
Mtodo 5
Proceder conforme el Mtodo 1. Desecar, sin embargo la
muestra a 100 C, bajo presin de 0,67 kPa o menos, du-
rante cuatro horas.
Mtodo 6
Proceder conforme el Mtodo 1. Desecar, sin embargo la
muestra a 40 C, bajo presin de 0,67 kPa o menos, durante
tres horas.
Mtodo 7
Proceder conforme el Mtodo 1. Desecar, sin embargo la
muestra a 25 C, bajo presin de 0,67 kPa o menos, durante
tres horas.
Mtodo 8
La sustancia antibitica no es sometida a la desecacin.
PROCEDIMIENTO
Todo material debe ser adecuado para el uso pretendido y
debe ser minuciosamente limpiado, despus de cada uti-
lizacin, para retirar cualquier vestigio de antibitico. El
material debe permanecer cubierto cuando no est en uso.
Todos los elementos de vidrio utilizados en contacto con el
microorganismo deben ser esterilizados en estufa, en tem-
peratura entre 200 C y 220 C por 2 horas. En la diluicin
de la solucin estndar y muestra emplear balones volum-
tricos, pipetas o equipos cuidadosamente calibrados.
5.5.3.3.1 Ensayo microbiolgico por difusin en
agar
PROCEDIMIENTO
Para cada antibitico relacionado en la Tabla 1, verificar
el medio de cultivo (conforme la relacin de los medios de
cultivo), la cantidad de medio a ser usada en la capa base
y en la capa inoculada y el microorganismo de ensayo. El

volumen de inculo a ser adicionado cada 100 ml de medio
de cultivo debe ser determinado experimentalmente.
No obstante, como referencia inicial, se sugiere cantidad
de inculo a ser adicionada por 100 ml de medio.
Preparar la capa base por medio de la adicin de cantidad
apropiada de agar fundido en las placas de Petri las cuales
deben ser, especialmente seleccionadas, tener fondo plano,
poseer dimensiones de 20 x 100 mm y tapa de material
apropiado. Distribuir el agar uniformemente en las placas,
que deben ser colocadas en superficie nivelada para que la
capa de medio tenga profundidad uniforme. Colocar la tapa
de cada placa al lado de esa; se fuese utilizada tapa no po-
rosa, dejarla levemente entreabierta para evitar la acumu-
lacin de humedad condensada a partir de la capa de agar
caliente. Despus del endurecimiento del agar, tapar las
placas. Para preparar la capa inoculada superficie, aadir
el volumen de inculo determinado para la cantidad apro-
piada de medio de cultivo que haya sido fundido y enfriado
entre 46 C y 48 C. Agitar el frasco, por rotacin para ob-
tener suspensin homognea y aadir la cantidad indicada
del medio inoculado en cada placa de Petri, que contiene la
capa base no inoculada. Esparcir uniformemente la capa,
tapar las placas y permitir su endurecimiento sobre super-
ficie plana. Despus del endurecimiento del medio, colocar
seis cilindros de acero inoxidable, con dimetro externo de
8 mm 0,1 mm, dimetro interno de 6 mm 0,1 mm y
largo de 10 mm 0,1 mm, sobre la superficie del agar ino-
culado, de manera que formen entre s ngulo de 60 y con
radio de 2,8 cm. Tambin, pueden ser utilizados cilindros
confeccionados en vidrio, porcelana o aluminio y esterili-
zados en las condiciones ya descritas. En lugar de los ci-
lindros, pueden ser perforados, en el medio, con perforador
estril, pozos de 5 a 8 mm de dimetro. Pueden, adems,
ser usados discos de papel, confeccionados con papel de
calidad apropiada o moldes de acero inoxidable. Cuando
son usados discos de papel, estos deben ser estriles.
Preparacin de la solucin estndar de trabajo, de la mues-
tra y de la curva estndar
La preparacin de las muestras de los antibiticos est in-
dicada en la respectiva monografa.
Las concentraciones del antibitico utilizadas en el ensayo
deben estar en progresin geomtrica; por ejemplo, por la
preparacin de series de diluicin en la razn 2:1 u otra de-
terminada experimentalmente desde que sea comprobada
la relacin lineal entre el logaritmo de la concentracin del
antibitico y el dimetro del halo de inhibicin.
En la Tabla 2 est indicada para cada antibitico, la re-
paracin de la solucin estndar de trabajo y de la curva
estndar, comprendiendo:
a) condiciones de desecacin, conforme descrito en el
tem Desecacin de sustancias antibiticas (5.5.3.3);
b) solvente inicial para disolucin del antibitico, caso sea
necesario, y hasta cual concentracin es usado;
c) solucin para diluicin hasta la concentracin de traba-
jo, conforme descrito en Soluciones;
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 265
d) concentracin de la solucin de trabajo, expresada en
peso, o Unidades Internacionales por ml de solucin;
e) plazo de validez de la solucin estndar de trabajo bajo
refrigeracin;
f) solucin empleada para diluicin de la solucin de tra-
bajo, por ocasin de la preparacin de la curva estn-
dar, conforme Soluciones;
g) bandas de concentracin sugeridas, en peso o Unidades
Internacionales por ml, dentro de las cuales pueden ser
encontradas las concentraciones adecuadas para la cur-
va estndar.
Procedimiento para delineamiento rectas paralelas (3 x 3
o 2 x 2)
Emplear, en el ensayo, por lo menos seis placas de Petri.
Disponer las soluciones del estndar y muestra, en cada
placa, con 3 concentraciones para ensayo 3 x 3 (baja, media
y alta) o 2 concentraciones para ensayo 2 x 2 (baja y alta).
Las soluciones deben ser distribuidas de tal forma que las
soluciones de la preparacin estndar y muestra estn alter-
nadas en la capa inoculada (concentracin alta y baja) para
evitar la sobreposicin de los halos de inhibicin.
5
Procedimiento para delineamiento 5 x 1
Para la curva estndar, utilizar un total de 12 placas, 3 para
cada una de las soluciones del estndar (P1, P2, P4, P5), ex-
cepto para la concentracin media de la curva (P3) que es
incluida en todas las placas. En cada conjunto de 3 pla-
cas, utilizar 3 cilindros para la concentracin media (P3)
y alternar 3 cilindros para la concentracin baja (P1) y as
sucesivamente con las dems soluciones del estndar. De
esa manera, se obtienen 36 halos de inhibicin para la con-
centracin (P3) y 9 halos de inhibicin para cada una de las
otras cuatro concentraciones de la curva.
Para cada muestra, emplear 3 placas, donde sern coloca-
dos 3 cilindros para la concentracin media del estndar
(P3) y 3 con la solucin de la muestra preparada en la mis-
ma concentracin del estndar (A3).
Aplicar 0,2 ml de las soluciones en los cilindros o en los
moldes de acero inoxidable por medio de pipeta u otro ins-
trumento calibrado. Cuando es usado el sistema de pozos,
el volumen de lquido aplicado debe ser suficiente para lle-
narlos completamente.
Despus de realizar los procedimientos adecuados para el
delineamiento escogido, incubar las placas a la tempera-
tura indicada, cuya variacin no deber exceder 0,5 C,
durante un perodo de 16 a 18 horas. En seguida, medir el
dimetro de los halos de inhibicin empleando dispositivo
adecuado para medida, como calibrador, o proyector pti-
co que tenga precisin de 0,1 mm o menos.
Para algunos microorganismos, el procedimiento puede ser
mejorado si las placas preparadas permanecen a tempera-
tura ambiente por perodo de 30 minutos a 2 horas antes de
la incubacin, perodo en que ocurre la difusin del anti-
bitico para el medio.
 5
Tabla 1 - Ensayo microbiolgico por difusin en agar.
266

Volumen (ml) del Volumen

Medio de cultivo medio aplicado en las del Temperatura de incubacin
Antibitico Microorganismo capas inoculo (C)
Base Superficie Base Superficie ml/100 ml
Amoxicilina Kocuria rhizophila (ATCC 9341) 11 11 21 4 0,5 32 a 35
Ampicilina Kocuria rhizophila (ATCC 9341) 11 11 21 4 0,5 32 a 35
Anfomicina Micrococcus luteus resistente a neomicina (ATCC 14452) 2 1 21 4 0,5 36 a 38
Anfotericina B Saccharomyces cerevisiae (ATCC 9763) - 19 - 8 1,0 29 a 31
Bacitracina Micrococcus luteus (ATCC 7468) 2 1 21 4 0,3 32 a 35
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Bacitracina Micrococcus luteus (ATCC 10240) 2 1 21 4 0,3 32 a 35

Bencilpenicilina Staphylococcus aureus (ATCC 653 8p) 2 1 21 4 1.0 32 a 35
Bleomicina Mycobacterium smegmatis (ATCC 607) 15 15 10 6 1,0 32 a 35
Kanamicina Bacillus subtilis (ATCC 6633) 5 5 21 4 (1)
36 a 38
Carbenicilina Pseudomonas aeruginosa (ATCC 25619) 9 10 21 4 (1)
36 a 38
Cefacetril Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 1 21 4 0,5 32 a 35
Cefadroxilo Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 1 21 4 0,05 36 a 38
Cefalexina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 1 21 4 0,05 32 a 35
Cefaloglicina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 1 21 4 0.2 32 a 35
Cefaloridina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 1 21 4 0,1 32 a 35
Cefalotina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 1 21 4 0,1 32 a 35
Cefapirina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 1 21 4 0,08 32 a 35
Cefazolina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 1 21 4 0,05 32 a 35
Cefoxitina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 1 21 5 0,1 32 a 35
Cefradina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 1 21 4 0,05 32 a 35

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Ciclacilina Kocuria rhizophila (ATCC 9341) 11 11 21 4 0.5 36 a 38
Cicloserina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 1 10 4 0,04 29 a 31
Clindamicina Kocuria rhizophila (ATCC 9341) 11 11 21 4 1,5 36 a 38
Cloranfenicol Kocuria rhizophila (ATCC 9341) 1 1 21 4 2,0 32 a 35
Cloxacilina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 1 21 4 0,1 32 a 35
Colistina Bordetella bronchiseptica (ATCC 4617) 9 10 21 4 0,1 36 a 38
Dactinomicina Bacillus subtilis (ATCC 6633) 5 5 10 4 (1)
36 a 38
Dicloxacilina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 1 21 4 0,1 32 a 35
Dihidroestreptomicina Bacillus subtilis (ATCC 6633) 5 5 21 4 (1)
36 a 38
Eritromicina Kocuria rhizophila (ATCC 9341) 11 11 21 4 1,5 32 a 35
Estreptomicina Bacillus subtilis (ATCC 6633) 5 5 21 4 (1)
36 a 38
Feneticilina Kocuria rhizophila (ATCC 9341) 11 11 21 4 0.5 32 a 35
Fenoximetilpenicilina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 1 21 4 1,0 32 a 35
 Tabla 1 - (conclusin)
Volumen (ml) del
Medio de cultivo medio aplicado en las Volumen
Antibitico Microorganismo capas del inoculo Temperatura de incubacin C
ml/100 ml
Base Superficie Base Superficie
Griseofulvina Microsporum gypseum (ATCC 14683) 20 21 6 4 (1) 29 a 31 durante 48 horas
Mitomicina Bacillus subtilis (ATCC 6633)0,4 8 8 10 4 0,5 36 a 38
Neomicina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 11 11 21 4 1,0 32 a 35
Neomicina Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228) 11 11 21 4 1,0 36 a 38
Nistatina Saccharomyces cerevisiae (ATCC 2601) - 19 - 8 1,0 29 a 31
Novobiocina Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228) 2 1 21 4 4,0 34 a 36
Oxacilina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 1 21 4 0,3 32 a 35
Paromomicina Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228) 11 11 21 4 2.0 36 a 38
Polimixina B Bordetella bronchiseptica (ATCC 4617) 9 10 21 4 0,1 36 a 38
Rifampicina Bacillus subtilis (ATCC 6633) 2 2 21 4 0,1 29 a 31
Rifampicina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 2 2 21 4 0,1 36 a 38
Sisomicina Staphylococcus epidermidis (ATCC 12228) 11 11 21 4 0,03 36 a 38
Vancomicina Bacillus subtilis (ATCC 6633) 8 8 10 4 (1)
36 a 38
____________
(1) Determinar la cantidad de inoculo, en la ocasin del ensayo, a travs de difusin en placas.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Farmacopea Brasilea, 5 edicin
267

5
 5
Tabla 2 - Preparacin de la solucin estndar y de la curva estndar
268

f.
a. Condicin d. Concentracin e. Plazo de validez Solucin
c. Solucin para g. Dosis mediana (g o U.I./
Antibitico de desecacin b. Solvente inicial de la solucin de de la solucin bajo para
diluicin (5.5.3.3) ml)
(5.5.3.3) trabajo (/ml) refrigeracin diluicin
(5.5.3.3)
Amoxicilina 8 - Agua estril 1 mg 1 das 2 0,05 a 0,2 g7
Ampicilina 8 - Agua estril 0,1 mg 7 das 2 0,05 a 0,2 g7
Anfomicina8 1 - 2 0,1 mg 14 das 2 5 a 20 g
Anfotericina B 1 - Dimetilsulfxido 1 mg2 Usar en el mismo da 5 0,5 a 2 7
Bacitracina 1 - HC10,01 M 100 U.I. Usar en el mismo da 1 1 a 4 U.I.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Bencilpenicilina 8 - 1 1 000 U.I. 4 das 1 0,2 a 2 U.I.

Bleomicina 7 - 8 2 U.I. 14 das 8 0,01 a 0,2 U.I.
Kanamicina B 8 - 2 1 mg 30 das 2 0,5 a 2 g
Carbenicilina 8 - 1 1 mg 14 das 1 10 a 40 g
Cefacetril 8 - 1 1 mg 7 das 1 5 a 20 g
Cefadroxilo 8 - 1 1 mg Usar en el mismo da 1 10 a 40 g
Cefalexina 8 - 1 1 mg 7 das 1 10 a 40 g
Cefaloridina 1 - 1 1 mg 5 das 1 0,5 a 2 g
| Cefaloglicina 8 - Agua estril 100 g 7 das 3 5 a 20 g
Cefalotina 1 - 1 1 mg 5 das 1 0,5 a 2 g
Cefapirina 8 - 1 1 mg 3 das 1 0,5 a 2 g
Cefazolina 8 10 000 g por ml en la solucin 4 1 1 mg 5 das 1 0,5 a 2 g
Cefoxitina 8 - 1 1 mg Usar en el mismo da 1 10 a 40 g
Ciclacilina 8 - Agua estril 1 mg 1 da 2 0,5 a 2 g7
Cefradina 8 - 1 1 mg 5 das 1 5 a 20 g

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Cicloserina 1 - Agua estril 1 mg 30 das 1 20 a 80 g
Clindamicina 8 - Agua estril 1 mg 30 das 2 0,5 a 2 g
Cloranfenicol 8 10 000 g por ml en alcohol etlico 1 1 mg 30 das 1 20 a 80 g
Cloxacilina 8 - 1 1 mg 7 das 1 2a8 g
Colistina 1 10 000 g por ml en alcohol etlico 4 1 mg 14 das 4 0,5 a 2 g
Dactinomicina 1 10 000 g por ml en alcohol metlico 2 1 mg 90 das 2 0,5 a 2 g
Dicloxacilina 8 - 1 1 mg 7 das 1 2,5 a 10 g
Dihidroestreptomicina 5 - 2 1 mg 30 das 2 0,5 a 2 g
Eritromicina5 1 10 000 g por ml en alcohol metlico 2 1 mg 14 das 2 0,5 a 2 g
Estreptomicina 1 - 2 1 mg 30 das 2 0,5 a 2 g
Feneticilina 8 - Agua estril 1 000 U.I. 7 das 2 0,05 a 0,2 U.I.
Fenoximetilpenicilina 8 - 1 100 U.I. 4 das 1 0,2 a 2 U.I.
 Tabla 2 (conclusin)
f.
a. Condicin d. Concentracin e. Plazo de validez Solucin
c. Solucin para g. Dosis mediana (g o U.I./
Antibitico de desecacin b. Solvente inicial de la solucin de de la solucin bajo para
diluicin (5.5.3.3) ml)
(5.5.3.3) trabajo (/ml) refrigeracin diluicin
(5.5.3.3)
Gentamicina 3 - 2 1 mg 30 das 2 0,5 a 2 g
Griseofulvina 8 - Dimetilformamida lmg4 90 das 2 2 a 10 g
Mitomicina 8 - 1 1 mg 14 das 1 0,5 a 2 g
Neomicina 1 - 2 1 mg 14 das 2 5 a 20 g (S. aureus)
Neomicina 1 - 2 1 mg 14 das 2 0,5 a 2 g (S. epidermidis)
Nistatina 4 - Dimetilformamida 1 000 U.I.2 Usar en el mismo da 4 10 a 40 U.I.7
Novobiocina 5 10 000 g por ml en alcohol etlico 2 1 mg 5 das 4 0,2 a 1 g
Oxacilina 8 - 1 1 mg 3 das 1 2 a 10 g
Paromomicina 1 - 2 1 mg 21 das 2 0,5 a 2 g
Polimixina B 1 Agua estril3 4 10 000 U.I. 14 das 4 200 a 800 U.I.
Rifampicina 8 - Alcohol metlico 1 mg 1 da 1 2 a 10 g
Sisomicina6 8 - 2 1 mg 14 das 2 0,05 a 0,2 g
Vancomicina 1 - Agua estril 1 mg 7 das 2 5 a 20 g
___________________
1. Diluir alcuotas de la solucin de trabajo con dimetilsulfxido, para obtener concentracin entre 10 y 40 mg por mL conforme los puntos de la curva estandar.
2. Diluir alcuotas da solucin de trabajo con dimetilformamida, para obtener concentraciones entre 10 y 40 unidades por mL conforme los puntos de la curva estandar.
3. Aadir 2 mL de agua estril para cada 5 mg de estandar.
4. Diluir alcuotas de la solucin de trabajo con dimetilformamida, para obtener concentraciones entre 40 y 200 mg por mL conforme los puntos de la curva estandar.
5. Cuando se usa eritromicina bajo la forma de estolato, hidrolizar la solucin de trabajo, en bao mara, a 60 C, durante 2 horas.
6. Sisomicina es higroscpica, tomar cuidado durante el pesado. El estandar de trabajo de permanece a 20 C, e atmsfera de nitrgeno.
7. Preparar concomitantemente las soluciones del estandar y muestra. Las diluiciones de la muestra deben contener la misma cantidad de dimetilformamida que las diluiciones del estandar.
8. La solucin estandar de trabajo debe permanecer durante una noche a temperatura ambiente para completa disolucin.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Farmacopea Brasilea, 5 edicin
269

5
 270 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
5.5.3.3.2 Ensayo microbiolgico por
turbidimetra
PROCEDIMIENTO
Preparacin de la solucin de trabajo, de la muestra y de la
curva estndar
La preparacin de las muestras de los antibiticos est in-
dicada en la respectiva monografa.
En la Tabla 2, presentada a continuacin, hay indicacin,
para cada antibitico, de la preparacin de la solucin es-
tndar de trabajo y de la curva estndar, comprendiendo:
a) condiciones de desecacin, conforme descrito en el
tem Desecacin de sustancias antibiticas (5.5.3.3);
b) solvente inicial para disolucin del antibitico, caso sea
necesario, y hasta cual concentracin es usado;
c) solucin para diluicin del antibitico hasta la concen-
tracin de trabajo, conforme Soluciones;
d) concentracin de solucin de trabajo, expresada en
peso o Unidades Internacionales por ml de solucin;
5
e) plazo de validez de la solucin estndar de trabajo bajo
refrigeracin;
f) solucin empleada para diluicin de la solucin de tra-
bajo, en la ocasin de la preparacin de la curva estn-
dar, conforme Soluciones;
g) banda de concentracin, en peso o Unidades Internacio-
nales por ml, dentro de la cual las concentraciones ade-
cuadas para la curva estndar pueden ser encontradas.
Emplear para cada antibitico el microorganismo y el cal-
do nutritivo relacionados en la Tabla 1. Determinar expe-
rimentalmente el volumen de inculo a ser adicionado a
100 ml de caldo a partir de la cantidad sugerida como re-
ferencia inicial. El medio inoculado debe ser preparado y
utilizado inmediatamente.
Procedimiento para delineamiento rectas paralelas (3 x 3
o 2 x 2)
Distribuir, en tubos idnticos, volumen igual de cada una de
las soluciones del estndar y de la muestra. Aadir para cada
tubo volumen igual de caldo nutriente inoculado, por ejem-
plo, 1 ml de solucin con antibitico y 9 ml del medio (0,1
ml de solucin para gramicidina y tirotricina). Por lo menos
dieciocho tubos son usados para ensayo por rectas paralelas
3 x 3 y doce tubos para ensayo por rectas paralelas 2 x 2. El
nmero de rplicas por concentracin en cada ensayo debe
ser suficiente para asegurar la precisin estadstica especifi-
cada en la monografa, sin embargo se debe realizar, como
mnimo, tres tubos para cada concentracin del estndar y
de la muestra. Puede ser necesario realizar el ensayo con
nmero mayor de dosis estndar y de la muestra o repetirlo y
combinar los resultados para obtener la precisin requerida.
Las dosis usadas deben estar en progresin geomtrica.
Procedimiento para delineamiento curva 5 x 1
Para el delineamiento 5 x 1, prepare diluiciones que re-
presenten 5 concentraciones del estndar (P1, P2, P3, P4 y
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
P5) y 1 concentracin de la muestra (A3). La solucin de la
muestra debe corresponder a la misma diluicin del estn-
dar que corresponde a la concentracin media de la curva
(P3). Emplear, por lo menos tres tubos para cada concen-
tracin del estndar y de la muestra. De esa forma, por lo
menos dieciocho tubos son necesarios en el ensayo.
Despus de realizar los procedimientos adecuados para el deli-
neamiento escogido, inocular el medio de cultivo recomenda-
do con cantidad conocida de suspensin del microorganismo
sensible al antibitico, de modo que, despus de incubacin
de aproximadamente cuatro horas, la turbidez bacteriana en
el medio sea de fcil medida y mantenga correlacin entre la
dosis y la respuesta de la sustancia en anlisis.
En la Tabla 1 estn descritos los antibiticos a ser ana-
lizados por el mtodo turbidimtrico con descripcin del
microorganismo, medio de cultivo, volumen de inculo es-
tandarizado sugerido como referencia inicial y temperatura
de incubacin para cada caso.
Incubar en bao mara, por 3 a 4 horas, tomando la pre-
caucin de asegurar temperatura adecuada y uniforme para
todos los tubos. El tiempo adecuado debe ser verificado
por la observacin del crecimiento en el tubo conteniendo
a concentracin media (P3) utilizada en el ensayo. Despus
del perodo de incubacin, interrumpir la multiplicacin de
los microorganismos por la adicin de 0,5 ml de solucin
de formaldehido a 12 por ciento, en cada tubo.
Determinar la absorbancia para cada tubo en espectrofot-
metro, en el largo de onda de 530 nm. Estandarizar el apa-
rato en absorbancia por medio del blanco conteniendo la
misma cantidad de caldo nutriente y formaldehido, a 12%.
En ensayos de rutina, cuando la linealidad del sistema fue
comprobada por nmero adecuado de experimentos usan-
do el ensayo de tres puntos (3 x 3), puede ser empleado
ensayo de dos puntos (2 x 2). Ser aceptado, igualmente, el
delineamiento 5 x 1, adoptado oficialmente por otras far-
macopeas de uso internacional corriente. Todava, en caso
de controversia o litigio, debe ser aplicado el ensayo de
tres puntos.
Clculo de la potencia
A partir de los resultados, calcular la potencia de la mues-
tra y sus lmites de confianza, por medio de mtodo es-
tadstico estndar descrito en Procedimientos estadsticos
aplicables a los ensayos biolgicos ensayos indirectos
cuantitativos (8.5).
Intervalo de confianza (IC)
La precisin de un ensayo es verificada por el intervalo de
confianza el cual garantiza que la verdadera potencia est
dentro de los lmites especificados.
En la ausencia del IC en la monografa del producto, es
recomendable lmites de confianza superior e inferior de
5% o menos, con relacin a la potencia calculada, siendo
aceptados valores lmites de hasta 10%.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 271

Tabla 1 - Ensayo microbiolgico por turbidimetra.

Volumen del
Caldo Temperatura
Antibitico Microorganismo inculo ml/100
nutriente incubacin
ml
Amicacina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 3 0,1 37
Kanamicina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 3 0,2 37
Candicidina Saccharomyces cerevisiae (ATCC 9763) 13 0,2 28
Capreomicina Klebsiella pneumoniae (ATCC 10031) 3 0,05 37
Cicloserina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 3 0,4 37
Cloranfenicol Escherichia coli (ATCC 10536) 3 0,7 37
Clortetraciclina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 3 0,1 36
Demeclociclina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 3 0,1 37
Dihidroestreptomicina Klebsiella pneumoniae (ATCC 10031) 3 0,1 37
Doxiciclina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 3 0,1 37
Espectinomicina Escherichia coli (ATCC 10536) 3 0,1 37
Estreptomicina Klebsiella pneumoniae (ATCC 10031) 3 0,1 37
Gramicidina Enterococcus hirae (ATCC 10541) 3 1,0 37
Lincomicina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 3 0,1 37
Minociclina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 3 0,2 37
Oxitetraciclina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 3 0,1 37
Rolitetraciclina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 3 0,1 37

5
Tetraciclina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 3 0,1 37
Tirotricina Enterococcus hirae (ATCC 10541) 3 1,0 37
Tobramicina Staphylococcus aureus (ATCC 6538p) 3 0,15 37

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 5
Tabla 2 - Tabla 2 Preparacin de la solucin estndar y de la curva estndar- Mtodo turbidimtrico
272

a.
Condicin d. Concentracin e. Plazo de validez
c. Solucin para f. Solucin para g. Banda de
Antibitico de b. Solvente inicial de la solucin de de la solucin bajo
diluicin (5.5.3.3) diluicin (5.5.3.3) concentracin (/ml)
disecacin trabajo (/ml) refrigeracin
(5.5.3.3)
Amicacina 8 - Agua estril 1 mg 14 das Agua estril 6 a 14 g
Kanamicina 8 - Agua estril 1 mg 30 das Agua estril 6 a 14 g
Candimicina1 6 - Dimetilsulfxido 1 mg Usar en el mismo Agua estril 0,02 a 0,14 g3
da
Capreomicina 5 - Agua estril 1 mg 7 das Agua estril 60 a 180 g
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Cicloserina 1 - Agua estril 1 mg 30 das Agua estril 20 a 80 g

Cloranfenicol 8 10 000 g por ml en alcohol etlico 1 1 mg 30 das 1 1 a 4 g
Clortetraciclina 8 - HCl 0,01 M 1 mg 4 das Agua estril 0,03 a 0,09 g
Demeclociclina 1 - HCl 0,1 M 1 mg 4 das Agua estril 0,06 a 0,14 g
Dihidroestreptomicina 5 - Agua estril 1 mg 30 das Agua estril 20 a 60 g
Doxiciclina 8 - HCl 0,1 M 1 mg 5 das Agua estril 0,06 a 0,14 g
Espectinomicina 8 - Agua estril 1 mg 30 das Agua estril 20 a 60 g
Estreptomicina 1 - Agua estril 1 mg 30 das Agua estril 20 a 60 g
Gramicidina 1 - Alcohol etlico 1 mg 30 das Alcohol etlico 0,02 a 0,08 g
95% 95%
Lincomicina 8 - Agua estril 1 mg 30 das Agua estril 0,3 a 0,8 g
Minociclina 8 - HCl 0,1 M 1 mg 2 das Agua estril 0,06 a 0,12 g
Oxitetraciclina 8 - HCl 0,1 M 1 mg 4 das Agua estril 0,16 a 0,32 g
Rolitetraciclina 1 - Agua estril 1 mg 1 da Agua estril 0,16 a 0,32 g
Tetraciclina 8 - HCl 0,1 M 1 mg 1 da Agua estril 0,16 a 0,32 g

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Tirotricina2 1 - Alcohol etlico 1 mg 30 das Alcohol etlico 0,02 a 0,08 g
95% 95%
Tobramicina 8 - Agua estril 1 mg 14 das Agua estril 1 a 4 g
1
No ensaio da candicidina, empregar equipamento estril em todas as etapas.
2
Para o ensaio de tirotricina, empregar a soluo padro de trabalho e a curva dose-resposta da gramicidina.
3
Preparar, simultaneamente, as solues padro e amostra.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 273

5.5.3.4 PRUEBA DE EFICACIA La prueba y los criterios establecidos se aplican al produc-

ANTIMICROBIANA to en la forma como es encontrado en el mercado.

OBJETIVO MICROORGANISMOS UTILIZADOS

Asegurar, la eficacia de conservantes antimicrobianos aa- Candida albicans ATCC 10231

didos a los productos farmacuticos.
Conservantes antimicrobianos son sustancias adiciona-
das en formas farmacuticas no estriles con la finalidad
de protegerlas de cualquier crecimiento microbiano. Para
las formas farmacuticas estriles, envasadas en embalajes
de dosis mltiples, los conservantes antimicrobianos son
aadidos para inhibir el crecimiento de microorganismos
contaminantes durante el uso repetido de las dosis indivi-
duales.
La cantidad de conservante utilizada en una formulacin
deber ser la mnima necesaria para la proteccin del pro-
ducto sin perjudicar el paciente o consumidor.
La eficacia antimicrobiana, sea ella inherente al producto o
debido a la adicin de conservantes, precisa ser demostra-
Aspergillus niger ATCC 16404
Escherichia coli ATCC 8739
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027
Staphylococcus aureus ATCC 6538
Los microorganismos utilizados en la prueba no deben te-
ner ms que 5 pasajes contados a partir del cultivo ATCC
original. Un paso es definido como la transferencia de un
cultivo establecido para un medio de cultivo estril.
En el caso de cultivos mantenidos por tcnicas de congela-
miento, cada ciclo de congelamiento; descongelamiento y
reactivacin es considerado un paso.
Los cultivos liofilizados recibidos del ATCC deben ser re-
constituidos conforme las instrucciones suministradas con
el material.

da para productos tpicos mltiple-dosis; productos orales;
oftlmicos; otolgicos; nasales; fluidos de dilisis; irriga-
cin, etc.
5
Recuperar el material en medio de cultivo lquido o slido.
Las condiciones para la preparacin del cultivo estn regis-
tradas en la Tabla 1.

Tabla 1 - Condiciones para reconstitucin de las cepas.

Tiempo de
Tiempo de incubacin
Temperatura de
Microorganismo Medio de cultivo incubacin para a
incubacin
del inculo recuperacin
microbiana
Escherichia coli ATCC 8739 Soybean-Casein Digest Broth / 32,5 C 2,50C 18 24 3 5 das
Soybean-Casein Digest Agar horas
Pseudomonas aeruginosa ATCC Soybean-Casein Digest Broth / 32,5 C 2,50C 18 24 3 5 das
9027 Soybean-Casein Digest Agar horas
Staphylococcus aureus ATCC 6538 Soybean-Casein Digest Broth / 32,5 C 2,50C 18 24 3 5 das
Soybean-Casein Digest Agar horas
Candida albicans ATCC 10231 Sabouraud Dextrosa Broth / 22,5 C 2,50C 44 52 3 5 das
Sabouraud Dextrosa Agar horas
Aspergillus niger ATCC 16404 Sabouraud Dextrosa Broth / 22,5 C 2,50C 6 10 das 3 7 das
Sabouraud Agar

Si la recuperacin del microorganismo se da en medio de
cultivo lquido, despus de incubacin, centrifugar y des-
cartar el sobrenadante. Suspender el sedimento con una di-
luicin 1/20 del medio de cultivo de mantenimiento estril
y aadir un volumen igual de solucin de glicerol estril
20% v/v en agua.
En ambos los casos, dispensar pequeas alcuotas de la
suspensin en tubos criognicos estriles, apropiados para
congelamiento de microorganismos.
Estocar los tubos criognicos en nitrgeno lquido o ultra-
freezer (no ms que -50 C).

Si la recuperacin del microorganismo se da en medio de Esa cultivo stock puede ser utilizado para inocular una se-
cultivo slido, transferir el crecimiento de la superficie rie de cultivo de trabajo.
para el medio de cultivo de mantenimiento lquido estril,
aadindole 10% de glicerol estril.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 274 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
MEDIOS DE CULTIVO UTILIZADOS
Todos los medios de cultivo utilizados en la prueba deben
ser probados cuanto a la capacidad de crecimiento
PREPARACIN DEL INCULO
A partir del cultivo stock, inocular la superficie del medio
de cultivo slido especificado en la Tabla 1.
Para recolectar el crecimiento de bacterias y levaduras, uti-
lizar solucin salina estril. Recoger la suspensin obteni-
da en un tubo o frasco estril apropiado y aadir cantidad
suficiente de solucin salina estril para obtener una con-
centracin de 1 x 108 UFC/ml.
Para recolectar el crecimiento de A. niger, utilizar solucin
salina estril conteniendo 0,05% de polisorbato 80. Reco-
ger la suspensin obtenida en un tubo o frasco estril apro-
piado y aadir cantidad suficiente de solucin salina estril
para obtener una concentracin de 1 x 108 UFC/ml.
Alternativamente, el cultivo stock puede ser inoculado en
5
medio lquido (Tabla 1), incubado y posteriormente centri-
fugado. Descartar el sobrenadante y suspender el sedimen-
to con cantidad suficiente de solucin salina estril para
obtener una concentracin de 1 x 108 UFC /ml.
Refrigerar las suspensiones si no se utilizarn en un pero-
do de 2 horas.
Determinar el nmero de UFCs /ml de cada suspensin
por turbidimetra o conteo en placa, verificando las condi-
ciones de tiempo y temperatura de incubacin y el tiempo
de incubacin para la recuperacin microbiana descritas en
la Tabla 1, con el objetivo de confirmar el conteo en UFC
inicial. Esos valores servirn para calibrar el tamao del
inculo a ser utilizado en las contaminaciones del producto
en prueba.
La suspensin de bacterias y levaduras deber ser utilizada
en 24 horas. La suspensin de mohos puede ser utilizada en
hasta 7 das si mantenida bajo refrigeracin.
PROCEDIMIENTO
Cuando el tipo de embalaje permita la introduccin de la
suspensin de microorganismos y cuando su contenido sea
suficiente para la realizacin de todas las etapas, realizar
la prueba en 5 embalajes originales del producto a ser pro-
bado. Caso contrario, transferir el contenido de uno o ms
embalajes originales para un frasco con tapa, previamente
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
esterilizado y de tamao adecuado para contener la canti-
dad necesaria de muestra para la realizacin de todas las
etapas de la prueba.
Inocular cada embalaje original o frasco con tapa estril,
con cada uno de los microorganismos requeridos.
La concentracin del inculo utilizado debe ser suficiente
para obtener una concentracin final en el producto entre 1
x 105 y 1 x 106 UFCs / g o ml aplicable a las categoras
1, 2 y 3 (ver Tabla 2 columna Tipo de Producto).
Para la categora 4, la concentracin del inculo deber ser
suficiente para obtener una concentracin final en el pro-
ducto entre 1 x 103 y 1 x 104 UFCs / g o ml.
El volumen de inculo a ser introducido debe estar entre
0,5% y 1,0% en relacin al volumen (muestra lquida) o
peso (muestra slida o semislida) total del producto.
Incubar las muestras inoculadas en estufa con temperatura
entre 22,5 C 2,5C.
Muestrear cada embalaje o frasco con muestra inoculada
en intervalos de 7, 14 y 28 das.
Determinar por el mtodo de plaqueamiento, el nmero de
Unidades Formadoras de Colonias (UFCs) de cada mues-
tra, en el tiempo inicial y en cada intervalo de tiempo es-
pecificado.
Un agente neutralizante especfico para el(los) preservati-
vo(s) presentes en la formulacin del producto, determina-
do en el estudio de validacin, debe(n) ser incorporado(s)
en las placas de conteo o en la diluicin de la muestra pre-
parada para el plaqueamiento.
Calcular la concentracin de cada microorganismo (UFC/
ml) presente en la muestra, comparar con el conteo en el
tiempo inicial y expresar el cambio en trminos de reduc-
ciones logartmicas.
CATEGORA DE PRODUCTO Y CRITERIOS PARA LA
EFICACIA ANTIMICROBIANA
Para el propsito con la prueba, los productos fueron sepa-
rados en 4 categoras conforme la Tabla 2.
Los requisitos para la eficacia antimicrobiana del conser-
vante son cumplidos se atienden a los criterios establecidos
para cada categora conforme Tabla 2.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 275

Tabla 2 - Tabla 2 Categoras de productos y criterios para la eficacia antimicrobiana.

Tipo de producto Microorganismo 7 da 14 da 28 da

Categora 1 Inyectables, Bacterias Debe haber Debe haber El conteo no
otros parenterales incluyendo reduccin de 1 log reduccin de 3 debe aumentar en
emulsiones, productos del n de UFCs logs del n de relacin al 14 da
otolgicos, nasales estriles, inicialmente UFCs inicialmente
oftlmicos constituidos de inoculados inoculados
base o vehculo acuoso
Mohos y Levaduras No debe haber No debe haber No debe haber
aumento del n de aumento del n de aumento del n de
UFCs inicialmente UFCs inicialmente UFCs inicialmente
inoculados inoculado inoculado

Categora 2 Productos Bacterias Debe haber No debe haber

de uso tpico. constituidos reduccin de 2 aumento del conteo
de base, o vehculo acuoso, logs del n de en relacin al 14
productos nasales no estriles UFCs inicialmente da
y emulsiones, incluyendo inoculados
aquellos aplicados en
membranas mucosas
Mohos y Levaduras No debe haber No debe haber
aumento del n de aumento del n de
UFCs inicialmente
inoculados
UFCs inicialmente
inoculados 5
Categora 3 Productos Bacterias No debe haber No debe haber
orales constituidos de base aumento del n de aumento del n de
o vehculo acuoso, excepto UFCs inicialmente UFCs inicialmente
anticido inoculados inoculados
Mohos y Levaduras No debe haber No debe haber
aumento del n de aumento del n de
UFCs inicialmente UFCs inicialmente
inoculados inoculados

Categora 4 Anticidos Bacterias No debe haber No debe haber

constituido de base acuosa aumento del n de aumento del n de
UFCs inicialmente UFCs inicialmente
inoculados inoculados
Mohos y Levaduras No debe haber No debe haber
aumento del n de aumento del n de
UFCs inicialmente UFCs inicialmente
inoculados inoculados

Nota. El no aumento del n de UFCS inoculados es definido como no ms que 0,5 log10 de unidades mayores que el
valor previamente obtenido.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 276 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

5.5.3.5 MICROORGANISMOS NCIMB National Collection of Industrial Bacteria

EMPLEADOS EN PRUEBAS Y ENSAYOS http://www.ncimb.com
Email:enquiries@ncimb.com
Los microorganismos relacionados en la Tabla 1 son in-
dicados para ensayos y pruebas preconizados en la farma- NBRC NITE Biological Resource Center
copea. http://www.nbrc.nite.go.jp
Email: collection@nbrc.nite.go.jp
Principales proveedores de cultivos de microorganismos:
NCPF National Collection of Pathogenic Fungi
ATCC A
 merican Type Culture Collection http://www.hpacultures.or.uk
http://www.atcc.org Email: hpacultures@hpa.org.uk

CIP 
Collection de lInstitut Pasteur NCTC National Collection of Type Cultures
http://www.pasteur.fr/ip/index.jsp http://www.hpacultures.or.uk
Email: hpacultures@hpa.org.uk
IMI United Kingdom National Culture Collection
(UKNCC) NCYC National Collection of Yeast Cultures
http://www.cabi.org Email: cultures@cabi.org http://www.ncyc.co.uk
Email: ncyc@ncyc.co.uk
INCQS Instituto Nacional de Control de Calidad
en Salud Departamento de Microbiologia
Laboratorio de Materiales de Referencia
Av. Brasil, 4365, Manguinhos, Rio de Janeiro,

5
RJ, Brasil, CEP: 21.040-900
http://www.incqs.fiocruz.br
Email: coleo@incqs.fiocruz.br

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Tabla 1 - Microorganismos empleados en los pruebas y ensayos
Microorganismo ATCC CIP INCOS NBRC NCIMB NCTC NCPF NCYC IMI IP
Mohos y levaduras
Aspergillus brasiliensis 16404 - - 9455 - - 2275 149007 1483.83
Candida albicans 10231 - 40006 1594 - - 3179 1363 - 48.72
Miicrosporrum gypse un 14683 - 40005 - - - - - -
Saccharomyces cerevisiae 2601 - 40001 - - - - - - -
Saccharomyces cerevisiae 9763 1432.83 40002 - - 10716 - 87 - -

Bacterias
Bacillus atrophaens 9372 - - - - - - - - -
Bacillus cereus var. mycoides 11778 64.52 003 - - 10230 - - - -
Bacillus pumilis 27142 77.25 - - 10692 10327 - - - -
Bacillus subtilis 6633 52.62 001 3134 8054 10400 - - - -
Bacteroides vulgatus 8482 103717 059 - - 11154 - - - -
Bordetella bronchiseptica 4617 53.157 023 - - 8347 - - - -
Clostridium sporogenes 19404 79.3 - - 532 532 - - - -
Clostridium sporogenes 11437 - 060 - - - - - - -
Enterococcus hirae 10541 - 019 - - - - - - -
Escherichia coli 8739 53.126 - 3972 8545 12923 - - - -
Escherichia coli 10536 54.127 031 8879 10418 - - - -
Geobacillus stearothermophilus 7953 - - - - - - - - -
Klebsiella pneumoniae 10031 53.153 030 - 9111 7427 - - - -
Kocuria rhizophila 9341 53.65 010 - 8340 - - - -
Micrococcus Intens 7468 - 009 - - - - - - -
Micrococcus Intens 10240 53.160 011 8166 7743 - - - -

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Micrococcus luteus resistente a neomicina 14452 - 012 - 10418 - - - - -
Mycobacterium smegmatis 607 - 021 - - - - - - -
Peudomonas aeruginosa 9027 82.118 - 13275 8626 - - - - -
Peudomonas aeruginosa 25619 - 026 - - - - - - -
Salmonela enterica subsp entrica - 80.39 - 100797 - 6017 - - - -
Staphylococcus aureus 6538p 53.156 013 - 8625 7447 - - - -
Staphylococcus aureus 6538 4.83 039 13276 9518 10788 - - - -
Staplylococcus epidermides 12228 68.21 016 - 8853 - - - - -
Farmacopea Brasilea, 5 edicin
277

5
 278 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
5.6 MTODOS
INMUNOQUMICOS
Los mtodos inmunoqumicos se basan en una conexin
selectiva, reversible y no covalente entre antgenos y anti-
cuerpos. Esos mtodos son utilizados para detectar o ana-
lizar antgenos y anticuerpos. La deteccin o dosificacin
del complejo antgeno-anticuerpo puede ser realizada por
varias tcnicas. Los requisitos de este mtodo se aplican
a los mtodos inmunoqumicos utilizados, en el caso de
reactivos marcados o no. Los resultados de los mtodos
inmunoqumicos dependen de las condiciones de la expe-
riencia; de la naturaleza y de la calidad de los reactivos
empleados. Es esencial calcular los componentes de un en-
sayo inmunolgico y utilizar Preparaciones Internaciona-
les de Referencia para Inmunoanlisis siempre que dispo-
nibles. Los reactivos necesarios a muchos de los mtodos
inmunoqumicos estn disponibles en el mercado bajo la
forma de conjuntos que incluyen reactivos (especialmente
el antgeno o el anticuerpo) y los materiales destinados a la
evaluacin in vitro de una determinada sustancia; as como
las instrucciones necesarias para su correcta utilizacin.
Los conjuntos deben ser utilizados de acuerdo con las ins-
5
trucciones del fabricante, siendo importante asegurar que
ellos son adecuados al anlisis de la muestra, especialmen-
te, en lo que se refiere a la selectividad y sensibilidad. Los
requisitos relativos a los conjuntos para inmunoanlisis
son suministrados por la Organizacin Mundial de Salud
(Serie de Reports Techniques 658,1981).
MTODOS EN QUE SON UTLIZADOS ANTGENOS,
O ANTICUERPOS MARCADOS
Las tcnicas que utilizan sustancias marcadas deben em-
plear marcadores apropiados, tales como enzimas y radioi-
stopos. Cuando el marcador es un radioistopo llamamos
a la tcnica de ensayo radioinmunolgico. Todas las tcni-
cas realizadas con sustancias radioactivas deben ser hechas
en conformidad con la legislacin nacional e internacional
para proteccin contra el riesgo de radiaciones.
MTODOS EN QUE SON UTILIZADOS ANTGENOS,
O ANTICUERPOS NO MARCADOS
Mtodos de Inmunoprecipitacin. Los mtodos de imu-
noprecipitacin incluyen las reacciones de floculacin y de
precipitacin. Cuando una solucin de un antgeno es mez-
clada a los anticuerpos correspondientes, en condiciones
adecuadas, los reactivos forman agregados floculantes o
precipitantes. La relacin entre las cantidades de los reacti-
vos correspondientes al ms corto tiempo de floculacin, o
a la precipitacin ms acentuada se llama relacin ptima.
Esta es generalmente obtenida en presencia de cantidades
equivalentes de antgeno y anticuerpo. La imunoprecipita-
cin puede ser evaluada, visualmente, o por la medicin de
la dispersin de la luz.
Mtodos Inmunoqumicos Turbidimtricos. Puede obte-
nerse un aumento de la sensibilidad del mtodo mediante
el uso de partculas revestidas de anticuerpos, o de ant-
genos (por ejemplo, ltex). En los mtodos de floculacin
se utilizan, generalmente, diluiciones sucesivas de uno de
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
los reactivos mientras que en el mtodo de inmunodifusin
(ID), la diluicin es obtenida por difusin en un gel. Son
obtenidos gradientes de concentracin de uno, o dos reacti-
vos para crear en el gel zonas en las cuales las proporciones
de reactivos favorecen la precipitacin. Mientras que los
mtodos de floculacin son realizados en tubos de ensa-
yo, los mtodos de inmunodifusin pueden ser realizados
usndose diferentes soportes, como: probetas, placas, l-
minas, tinas, o cmaras. Se llama imunoprecipitacin sim-
ple cuando el antgeno reacciona apenas con su anticuerpo
correspondiente; se dice compleja cuando se utilizan va-
rios reactivos serolgicamente aparentados; y mltiples,
cuando se utilizan varios reactivos serolgicamente no
aparentados. En el mtodo de difusin simple es estable-
cido un gradiente de concentracin solamente para uno de
los reactivos difundidos a partir de una fuente exterior para
dentro del gel que contiene el reactivo correspondiente a
una concentracin relativamente baja.
Inmuno Difusin Radial Simple (IDRS). Es una tcnica de
inmunodifusin simple cuantitativa. Cuando se establece
el equilibrio entre los reactivos externo e interno, el rea
de la zona circular de precipitacin, originada a partir del
reactivo externo, es directamente proporcional a la concen-
tracin del antgeno aplicado e inversamente proporcional
a la concentracin de anticuerpos en el gel.
Mtodos de Difusin Doble. Los gradientes de concentra-
cin son establecidos para dos reactivos. Tanto el antgeno
como el anticuerpo difunden a partir de locales separados
en un gel inicialmente neutro bajo el punto de vista inmu-
nolgico. Los mtodos de inmunodifusin doble son uti-
lizados para comparar, cualitativamente, varios antgenos
con relacin a un anticuerpo apropiado o viceversa. La
comparacin est basada en la presencia o ausencia de in-
teraccin entre los estndares de precipitacin. Es posible
distinguir reacciones de identidad, de no identidad, o de
identidad parcial entre antgenos y anticuerpos.
Mtodos de Inmunoelectroforesis. La Inmunoelectrofore-
sis (IE) es una tcnica cualitativa de dos mtodos asocia-
dos: electroforesis en gel, seguida de inmunodifusin. La
Inmunoelectroforesis cruzada es una modificacin de la In-
munoelectroforesis (IE), adaptada al anlisis cualitativo y
cuantitativo. En un primer momento es realizada una elec-
troforesis clsica. Una banda del gel que contiene las frac-
ciones a ser analizadas, separadas por la electroforesis, es
posteriormente recortada y transferida a la otra placa. Esa
nueva placa es entonces sujeta a una segunda electroforesis
en una direccin perpendicular a la banda anterior, median-
te el uso de un gel que contiene un tenor relativamente bajo
en anticuerpos correspondientes al antgeno. Para una dada
concentracin de anticuerpos y espesor del gel, la relacin
entre el rea de cada uno de los picos de precipitacin y la
cantidad del antgeno correspondiente es lineal.
Mtodo Electroinmunolgico o Inmunoelectroforesis Fu-
siforme. El Ensayo Electroinmunolgico muchas veces
referido como Inmunoelectroforesis Fusiforme es un m-
todo rpido para analizar los antgenos cuya carga difiere
del anticuerpo y viceversa. La electroforesis del antgeno
a ser analizado es realizada en un gel que debe contener

una concentracin relativamente, inferior a la del anticuer-
po correspondiente. La sustancia a ser analizada y las di-
luiciones del antgeno usado para la calibracin deben ser
colocadas en las diferentes cavidades del gel. Durante la
electroforesis se forman zonas de precipitacin fusiformes
que migran a partir de las cavidades. Cuando el antgeno
ya no est en exceso, la lnea de precipitacin se torna es-
tacionaria. Para una dada concentracin de anticuerpos, la
relacin entre la distancia recorrida por la lnea de precipi-
tacin y la cantidad de antgeno aplicada es lineal.
Contrainmunoelectroforesis. Es un mtodo cuantitativo r-
pido que posibilita establecer gradientes de concentracin
de antgenos y anticuerpos externos, en un campo elctrico
dependiente de sus diferentes cargas. Las diluiciones del es-
tndar y de la muestra deben ser organizadas en una fila de
cavidades en el gel. Una cantidad conocida de reactivo co-
rrespondiente es colocada en una fila opuesta de cavidades.
El ttulo de la sustancia a ser analizada puede ser considera-
do como la mayor diluicin en que se observa una lnea de
precipitacin. Existen variantes de la inmunoelectroforesis
cruzada y del inmunoelectroanlisis. Otras tcnicas asocian
la separacin del antgeno por el tamao molecular y pro-
piedades serolgicas. La visualizacin y caracterizacin de
las lneas de imunoprecipitacin pueden ser realizadas por
coloraciones selectivas, o no selectivas, por fluorescencia,
por marcadores enzimticos, marcadores isotpicos, o por
otras tcnicas apropiadas. Las coloraciones selectivas son,
habitualmente, utilizadas para la caracterizacin de sustan-
cias no proteicas en los precipitados.
En los geles translcidos, tales como agar o agarosa, la l-
nea de precipitacin se torna claramente visible en el gel,
siempre que la concentracin de cada uno de los reactivos
sea apropiada.
VALIDACIN DEL MTODO
Criterios de validacin.
Un mtodo inmunoqumicos cuantitativo slo ser vlido
si:
a) el antgeno o el anticuerpo no discriminen, significa-
tivamente, del estndar la sustancia en anlisis. En el
caso de un reactivo marcado, el reactivo correspon-
diente no debe distinguir, de manera significativa, la
sustancia marcada de la no marcada;
b) el mtodo no sea influenciado por la matriz del ensayo,
eso es, todos los componentes de la muestra en anlisis,
o sus excipientes, que puedan variar de una muestra a
otra. Esos pueden incluir altas concentraciones de otras
protenas, sales, conservantes en concentraciones ele-
vadas o ejercer una actividad de contaminacin proteo-
ltica;
c) el lmite de cuantificacin est abajo de los criterios de
aceptabilidad indicados en la monografa individual;
d) la exactitud del anlisis sea tal que la variacin de los
resultados corresponda a las exigencias establecidas en
la monografa individual;
e) no ocurren errores sistemticos ligados al orden en que
el ensayo es realizado.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 279
Mtodos de validacin
Para que esos criterios sean verificados, la validacin in-
cluye los siguientes elementos:
a) el ensayo debe ser efectuado por lo menos en triplicado;
b) el ensayo debe incluir por lo menos tres diluiciones
diferentes del estndar y tres diluiciones diferentes de
la muestra con supuesta actividad semejante a la de la
preparacin estndar;
c) la distribucin de las muestras debe ser hecha casual-
mente;
d) se la muestra est presente en el suero, o se est mezcla-
da con otros constituyentes, el estndar debe ser prepa-
rado del mismo modo;
e) el ensayo debe incluir una medida de conexin no espe-
cfica del reactivo marcado;
f) para ensayos radioinmunolgicos con desplazamiento:
a1) debe ser determinada la conexin mxima (desplaza-
miento cero);
b1) las diluiciones deben cubrir la gama completa de res-
5
puestas para los valores ms prximos de la conexin
no especfica a la conexin mxima, de preferencia tan-
to para la muestra como para el estndar.
CLCULO ESTADSTICO
Para anlisis de los resultados, las curvas de respuesta de la
muestra y del estndar pueden ser analizados por los pro-
cedimientos estadsticos aplicables a los ensayos biolgicos
(8). El no paralelismo significativo indica que antgeno o
anticuerpo distingue la muestra del estndar e implica la in-
validacin del resultado. En los inmunoanlisis con despla-
zamiento, los valores de conexin no especfica y del despla-
zamiento mximo a una alta concentracin de la muestra o
del estndar no deben ser significativamente diferentes. Las
diferencias podrn reflejar efectos debido a la matriz, ya sea
por inhibicin de la conexin o degradacin del marcador.
5.7 MTODOS FSICOS
APLICADOS A MATERIALES
QUIRRGICOS Y
HOSPITALARIOS
5.7.1 RESISTENCIA A LA
TRACCIN
La determinacin de la resistencia a la traccin de las sutu-
ras quirrgicas debe ser realizada en ambiente con hume-
dad y temperatura constantes. La humedad relativa debe
ser de 60 80 por ciento y la temperatura 20 25 C.
EQUIPO
En la determinacin de la resistencia a la traccin de las
suturas quirrgicas el equipo debe poseer motor elctrico
 280 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
que aplique a la sutura en anlisis tasa de carga constante
por unidad de tiempo.
EQUIPO DE PLANO INCLINADO
Especificaciones
Los prendedores deben ser del tipo de rollo con superficies
planas para la fijacin de las suturas. El dimetro del rollo
debe ser de 1,8 cm a 1,9 cm y las superficies planas deben
tener, en el mnimo, 2,5 cm de largo. La distancia entre
los prendedores debe ser de 1,25 cm. El rozamiento del
carro de la carga debe permitir que la pena incritora deslice
hasta 2,5% de la capacidad de registro cuando no hubiere
muestra.
La velocidad de inclinacin del plano debe ser regulada
para ser necesarios 20 segundos a partir del inicio de la
prueba para que la inclinacin mxima de 30 sea alcan-
zada.
PROCEDIMIENTO
5
Determinar la resistencia a la traccin de las suturas quirr-
gicas con los mismos cuidados preliminares exigidos para
la prueba de determinacin del dimetro. Ajustar el peso
del carro para que, en el momento en que ocurre la ruptura,
la posicin de la pena inscritora est entre 20 y 80% de la
capacidad de registro.
Traccin directa
Colocar la sutura en el equipo prendiendo una de las ex-
tremidades y pasando la extremidad libre por el otro pren-
dedor. Aplicar en esa ltima una tensin equivalente a 1/4
de la resistencia mnima exigida para la sutura en prueba y
apretar el prendedor. Ajustar la pena inscritora en el punto
cero del grfico y ligar el equipo; anotar la lectura y evaluar
la resistencia. Eliminar la determinacin toda vez que la
sutura se rompa en punto prximo de los prendedores.
Traccin sobre-nudo
Determinar la resistencia a la traccin sobre-nudo quirr-
gico ejecutando en la sutura a prueba un nudo de cirujano
(Figura 1) sobre un segmento de 5 cm de largo de un tubo
de caucho flexible de 6,5 mm de dimetro interno y 8,1
mm de dimetro externo. Colocar la sutura en el equipo de
modo que el nudo quede equidistante de los prendedores.
Ajustar la pena inscritora en el punto cero del grfico y en-
cender el equipo; anotar la lectura y evaluar la resistencia.
Eliminar la determinacin toda vez que la sutura se rompa
en punto prximo de los prendedores.
Ejecucin del nudo quirrgico
Para hacer un nudo quirrgico, proceder conforme a con-
tinuacin:
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
a) agarrar las puntas de la sutura quirrgica, una en cada
mano;
b) colocar la punta que se encuentra en la mano izquierda
sobre la punta de la mano derecha formando un crculo;
c) introducir la punta superpuesta en el crculo;
d) repetir la operacin;
e) prender en el tubo de caucho flexible;
f) colocar a punta del lado derecho sobre a punta del iz-
quierdo formando un segundo crculo;
g) cerrar el nudo.
Figura 1 - Nudo quirrgico.
Resultados
Los resultados deben atender a lo descrito en las Tablas 1,
2 y 3 de las respectivas monografas.
5.7.2 DIMETRO DE SUTURAS
La determinacin del dimetro de las suturas quirrgicas
debe ser realizada en ambiente con humedad y tempera-
tura constante. La humedad relativa debe ser de 60 80
por centro y la temperatura entre 20 25 C. Los pesos
para pre-tensin para determinacin de dimetro de hilos
de multifilamentos estn registrados en la Tabla 1.
APARATOS
El reloj comparador utilizado para determinar el dimetro
de suturas es del tipo peso muerto, mecnico o electrni-
co y est equipado con un mostrador de lectura directa, di-
gital o de salida de lectura impresa. La resolucin de escala
es de por lo menos 0,002 mm y la zapata de apoyo debe
tener aproximadamente 12,70 mm 0,02 mm de dimetro.
La zapata de apoyo y las partes mviles conectadas a ella
deben aplicar una carga total de 210 g 3 g a la muestra.
Para suturas de nmero quirrgico 9-0 y menores, retirar
el peso adicional de la zapata de manera que el peso total
sobre la muestra no exceda 60 g.
La zapata y la base del equipo deben presentar paralelismo
y planicidad de 0,005 mm.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 281

Tabla 1 - Pesos para pr-tenso para determinao de dimetro de fios multifilamentares.

Dimetro Masa (g)
Nmero conforme sistema
Nmero quirrgico Suturas absorbibles Suturas no absorbibles
mtrico
0,01 12-0 - -
0,1 11-0 - -
0,2 10-0 12,5 12
0,3 9-0 25 27
0,4 8-0 35 38
0,5 7-0 70 69
0,7 6-0 125 125
1,0 5-0 340 250
1,5 4-0 475 375
2 3-0 885 600
3 2-0 1340 900
3,5 0 1950 1350
4 1 2540 1700
5 2 3175 2200
6 3y4 3645 3050
7 5 - 3850
8 6 - 4550
9 7

PROCEDIMIENTOEl dimetro de las suturas quirrgicas

- 5650

mantenindolas tensionadas con auxilio de un sistema de

de origen natural, envasadas sin lquido conservante es
determinado despus de su permanencia durante 4 horas,
como mnimo, en atmsfera con la humedad y temperatura
anteriormente especificadas. Las suturas envasadas con l-
quido conservante son sometidas a prueba, inmediatamen-
te, despus de eliminacin del lquido sin secado previo.
Suturas de multifilamentos
Para la determinacin del dimetro de suturas quirrgicas
de multifilamentos, las medidas deben estar hechas
5
polea fija a una mesa, conforme la Figura 1 y procediendo
de la siguiente forma:
a) fijar una de las puntas de la sutura a travs de un gancho
de fijacin;
b) en la otra punta libre, colocar un peso con masa de
acuerdo con a Tabla 1. Obs. se debe tomar cuidado
para no distorsionar la sutura;
c) posicionar la sutura en el reloj comparador de modo
que pase por el centro de la base circular y, con auxilio
de la palanca, bajar el pie de la barra mvil lentamente
hasta que toda la carga sea aplicada;
d) medir el dimetro de la sutura en tres puntos, aproxima-
damente a 1/4, 1/2 y 3/4 de su largo total;
e) en el caso de suturas trenzadas de dimetros superiores
al nmero quirrgico 3-0, efectuar dos medidas perpen-
diculares entre s en cada punto.

Figura 1 - Modelo de mesa sugerida para la medicin de dimetro de suturas de multifilamentos.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 282 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Suturas de monofilamentos APARATOS

Para determinacin del dimetro de las suturas de monofi-
lamentos, se debe proceder de la siguiente forma:
a) efectuar la medida en suturas en la forma seca o con
fluido, inmediatamente, despus de su eliminacin del
embalaje sin secado previo;
b) posicionar la sutura en el reloj comparador, entre la
base fija y la base de la traba mvil;
c) bajar la palanca lentamente de modo que toda la carga
quede bajo la sutura;
d) medir el dimetro de la sutura en tres puntos, aproxima-
damente a 1/4, 1/2 y 3/4 de su largo total.
Resultado
Utilizar una mquina universal de traccin equipada con
motor elctrico que aplique tasa de carga constante por uni-
dad de tiempo.
La clula de carga utilizada debe ser compatible con la
fuerza de traccin necesaria para la verificacin.
PROCEDIMIENTO
Fijar la aguja en uno de los prendedores del equipo de
modo que la parte fija quede libre y alineada con la direc-
cin en que se va a aplicar la fuerza por el prendedor mvil.
Medir la fuerza requerida para destrabar el hilo de la sutura
de la aguja.

El promedio de las medidas realizadas en las suturas debe Resultados

estar comprendido entre los lmites de las tablas 1, 2, o 3 de
las respectivas monografas.
Los valores individuales deben estar comprendidos entre
las medias de los lmites para los nmeros quirrgicos, in-
Los resultados deben ser evaluados considerando a Tabla
1.
Nota: la evaluacin a resistencia a fijar el hijo debe con-

5
mediatamente, inferior y posterior al analizado. siderar simultneamente los lmites individuales para los
hilos y los lmites para el promedio de cinco hilos del lote
5.7.3 RESISTENCIA A FIJAR EL analizado. En el caso que uno de los resultados de lmite
individual, y no ms de que uno, no satisfaga los lmites
HILO DE LA AGUJA mnimos para valores individuales, repetir el ensayo con
diez hilos ms. El requisito del ensayo ser atendido si nin-
La finalidad de ese ensayo es evaluar la fijacin de los guna de las 10 muestras est abajo de los lmites descritos.
hilos para suturas en agujas atraumticas.

Tabla 1 - Lmites de resistencia a fijar el hijo de la aguja en relacin al nmero quirrgico.

Nmero Nmero conforme sistema mtrico Lmites mnimos de resistencia
quirrgico
Absorbible No Promedio Individual
absorbible
Natural Sinttica kgf N kgf N
11-0 - 0,1 0,1 0,007 0,07 0,005 0,05
10-0 - 0,2 0,2 0,014 0,14 0,010 0,10
9-0 0,4 0,3 0,3 0,021 0,21 0,015 0,15
8-0 0,5 0,4 0,4 0,05 0,49 0,025 0,25
7-0 0,7 0,5 0,5 0,08 0,78 0,045 0,44
6-0 1 0,7 0,7 0,17 1,67 0,08 0,78
5-0 1,5 1,0 1,0 0,23 226 0,11 1,08
4-0 2 1,5 1,5 0,45 4,41 0,23 2,26
3-0 3 2 2 0,68 6,67 0,34 3,33
2-0 3,5 3 3 1,10 10,79 0,45 4,41
0 4 3,5 3,5 1,50 14,71 0,45 4,41
1 5 4,0 4,0 1,80 17,65 0,60 5,88
2 6 5 5 1,80 17,65 0,70 6,86
3 7 6 6 2,00 19,61 0,90 8,83
4 8 6 6 2,00 19,61 0,90 8,83
5 - 7 7 2,20 21,57 1,10 10,79

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


5.7.4 DETERMINACIN DE
ABSORCIN
Para la realizacin de los pruebas de Determinacin de ab-
sorcin, retirar el algodn de su embalaje original y condi-
cionarlo por, como mnimo, 4 horas, en atmsfera estndar
de 65% 2% de humedad relativa a 21 C 1,1 C.
PROCEDIMIENTO
Utilizar cesto, que pese como mximo 3 g, constituido de
alambre de cobre de aproximadamente 0,4 mm de dimetro,
en la forma de un cilindro de aproximadamente 5 cm de di-
metro y 8 cm de profundidad, con espacios de cerca de 2 cm
entre los alambres. Transferir porciones de algodn hidrfilo
de, exactamente, cerca de 1 g 0,05 g, de cinco diferentes
partes del paquete, a travs de tirones y no de cortes de la
muestra. Colocar las porciones combinadas en el cesto y pe-
sar. Sujetar el cesto por la lateral aproximadamente
a 12 mm arriba de la superficie del agua a 25 C 1 C y
dejar caer en la misma. Determinar, de preferencia por el
uso de un cronmetro, el tiempo en segundos requerido
para sumersin completa.
Retirar el cesto del agua, dejarlo drenar por 10 segundos en
la misma posicin horizontal, entonces colocarlo inmedia-
tamente en un recipiente tarado y cubierto y pesar. Calcular
la masa de agua absorbida a partir de la masa del cesto de
prueba y de la masa del algodn hidrfilo.
5.7.5 DETERMINACIN DEL
LARGO DE LA FIBRA
Para la realizacin de las pruebas de Determinacin del
largo de la fibra, retirar el algodn de su embalaje original
y condicionarlo por, como mnimo, 4 horas, en atmsfera
estndar de 65% 2% de humedad relativa a 21 C 1,1
C.
Este procedimiento se aplica al aparato separador dplex
de fibra de algodn Suter-Webb. Con alteraciones en el
procedimiento, puede ser aplicado a dos separadores Baer
arreglados uno atrs del otro o aplicado a un Johannsen u
otro aparato semejante.
APARATOS
El separador consiste en dos bancos de peines rgidamente
montados lado a lado sobre una base comn. Cada banco
de peines consiste en por lo menos 12 peines individuales
espaciados por 3,2 mm, uno atrs del otro y montados de
modo encajado para que, a medida que ellos sean apro-
ximados durante el proceso de fraccionamiento y no ms
necesarios, ellos puedan ser sueltos para que caigan abajo
del plano de trabajo. Cada peine tiene una serie simple de
dientes precisamente alineados y bien puntiagudos, de 12
mm de largo, consistiendo en agujas de 0,38 mm de dime-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 283
tro. Los dientes son espaciados de 62 mm a 25 mm en una
extensin de aproximadamente 50 mm.
Los accesorios consisten en frceps separador de fibras,
rejilla depresora de fibras, plato plano depresor de fibras
y platos cubiertos por terciopelo. El frceps separador
consiste en dos piezas de latn, de 75 mm de largo, apro-
ximadamente, encajado de un lado y levemente curvado,
presentando, as, un formato de pico para agarrar las fibras
que estn fuera y prximas a las superficies de los peines.
Usualmente, una de las extremidades cogedoras tiene un
tapizado de cuero u otro material fibroso. La extremidad
cogedora tiene aproximadamente 19 mm de largura.
La rejilla depresora de fibras consiste en series de barras de
metal espaciadas por 3,2 mm, de modo que ellas puedan
ser colocadas entre los peines para presionar las fibras para
abajo entre los dientes. El plato plano depresor de fibras
consiste en un plato de metal pulido, de aproximadamente
25 mm por 50 mm, con una saliencia arredondeada o ma-
nija en la superficie superior por medio de la cual el plato
puede ser aplanado sobre las fibras a medida que ellas son
colocadas en la superficie de los platos cubiertos por ter-
5
ciopelo. Los platos cubiertos por terciopelo, sobre los cua-
les las fibras pueden ser colocadas en orden, son placas de
aluminio de aproximadamente 100 mm por 225 mm y 2,4
mm de espesor, cubiertas en ambos los lados por terciopelo
de alta calidad, de preferencia negro.
SELECCIN DEL ALGODN
Despus de desenrollar el algodn, preparar una muestra
representativa por la porcin, a partir de un paquete con-
teniendo de 225 g a 450 g, de 32 muestras (cada una con
cerca de 75 mg) bien distribuidas a lo largo de la pieza,
siendo 16 retiradas de una mitad longitudinal y lo restante
de la otra mitad. Evitar las extremidades de la pieza y to-
mar particular cuidado, asegurando que las porciones sean
retiradas tenindose en cuenta el espesor de la pieza. Para
evitar la seleccin de solamente fibras largas o fibras cor-
tas, retirar todas las fibras de cada muestra y no dejar que
las mismas pasen a travs de los dedos.
De paquetes de, como mximo, 112,5 g, pesar 8 muestras y
de paquetes pesando entre 112,5 g y 225 g, pesar 16 mues-
tras, todas bien distribuidas.
Mezclar las muestras en pares, indiscriminadamente, y
combinar cada par tirando y enrollando suavemente en
los dedos. Entonces dividir longitudinalmente cada par
combinado en dos partes aproximadamente iguales y uti-
lizar una parte en la mezcla posterior (la otra parte puede
ser descartada o reservada para cualquier otras prueba o
controle).
Repetir el proceso descrito en el prrafo anterior con las
mitades sucesivas de las series bifurcadas hasta que resulte
solamente una muestra. Suavemente, disponer en posicin
paralela las fibras de la muestra final, tirando y enrollndo-
las en los dedos. Retener todas las fibras, incluyendo, tanto
como posible, las enredadas y las masas de fibras trenza-
das, descartando solamente los fragmentos de semillas in-
 284 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
maduras con fibras y material extrao no fibroso tal como
pecolos, hojas y fragmentos de tegumentos.
A partir de la muestra final descrita en el prrafo anterior,
separar longitudinalmente una muestra de 75 mg 2 mg,
exactamente pesados. Retener el residuo para cualquier
prueba necesaria.
PROCEDIMIENTO
Utilizando la rejilla depresora de fibras, insertar cuidado-
samente la muestra pesada en un banco de peines del sepa-
rador de algodn, de modo que ella se extienda a travs de
los peines en ngulos aproximadamente rectos.
Con el frceps separador, sujetar, por las extremidades
libres, una pequea porcin de las fibras que se extiende
a travs de los dientes del peine ms prximo al opera-
dor; suavemente sacarla de los peines y transferirla para
las puntas de los dientes del segundo banco, poniendo las
fibras paralelamente unas a las otras, linealmente y apro-
ximadamente en ngulos rectos con relacin a las caras de
los peines, liberando tan prximo a la cara del peine frontal
5
como sea posible. Utilizando la rejilla depresora, cuida-
dosamente presionar las fibras transferidas para abajo, en
los dientes de los peines. Continuar la operacin hasta que
todas las fibras sean transferidas para el segundo banco de
peines. Durante esta transferencia de las fibras, dejar caer
los peines del primer banco sucesivamente siempre y cuan-
do todas las fibras salientes hayan sido retiradas.
Girar el equipo a 180 y transferir las fibras de algodn de
vuelta para el primer banco de peines de la manera descrita
en el prrafo anterior.
Tomar mucho cuidado al aplanar las extremidades de las
fibras durante ambas transferencias, arreglndolas tan
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
prximamente como posible a la superficie frontal del pei-
ne proximal. Tal aplanamiento puede envolver la retirada
de fibras aisladas de ambos lados, frontal y distal, de los
bancos de peines y el re-depsito de las mismas en el haz
principal de los peines.
Girar el equipo nuevamente a 180. Dejar caer peines su-
cesivos, si necesario, para exponer las extremidades de las
fibras ms largas. Puede ser necesario re-depositar algunas
fibras aisladas. Utilizando el frceps, retirar las pocas fibras
ms salientes. De esta manera, continuar retirando sucesi-
vamente las fibras salientes remanentes de vuelta a la parte
frontal del peine proximal. Dejar caer este peine y repetir las
series de operaciones de la misma manera hasta que todas
las fibras hayan sido retiradas. Para no perturbar seriamente
la muestra y por tanto viciar el fraccionamiento en grupos,
jalar diversas veces (ocho a diez) entre cada par de peines.
Colocar los tirones sobre los platos cubiertos por terciope-
lo en paralelo unos a los otros, tan rectamente como posi-
ble, con las extremidades tan claramente definidas como
posible y con las partes distales arregladas en lnea recta,
presionndolas para abajo suavemente con el plato plano
depresor de fibras antes de liberar el tirn del frceps. Em-
plear, como mnimo, 50 y, como mximo, 100 tirones para
fraccionar la muestra.
Agrupar todas las fibras que tengan largo de 12,5 mm o
ms y pesar el grupo hasta dcimos de miligramo. De la
misma manera, agrupar todas las fibras que tengan largo
de 6,25 mm o menos y pesar de la misma manera. Final-
mente, agrupar las fibras remanentes, de largos intermedia-
rios y pesar. La suma de los tres pesos no debe diferir del
peso inicial de la muestra por ms de 3 mg. Dividir la masa
de cada uno de los dos primeros grupos por la masa de la
muestra para obtener el porcentaje en peso de fibra en las
dos bandas de largo.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 285

6 RECIPIENTES PARA MEDICAMENTOS Y

RELACIONADOS

6.1 RECIPIENTES DE VIDRIO Molino de bolas con estrictor de acero templado y es-
feras de acero pulido o mortero en acero templado con
CLASIFICACIN las especificaciones en la Figura 1.

Vidrio tipo I. Vidrio neutro del tipo borosilicato, no al-

calino, de alta resistencia trmica, mecnica y hidroltica,
con alcalinidad de hasta 1,0 ml de H2SO4 0,01 M (ensayo
en frasco de vidrio molido). Destinado al envasado de me-
dicamentos; para aplicacin intravascular y uso parenteral.

Vidrio tipo II. Vidrio alcalino del tipo sdico / clcico,

de resistencia hidroltica elevada, resultante del tratamien-
to apropiado de la superficie interna del vidrio tipo III,
de modo que su alcalinidad sea como mximo 0,7 ml de
H2SO4 0,01 M para frascos hasta 100 ml y 0,2 ml de H2SO4
0,01 M para capacidad arriba de 100 ml (ensayo en frasco
de vidrio entero). Destinado al envasado de soluciones de
uso parenteral; neutras y cidas, que no tengan su pH al-
terado.

Vidrio tipo III. Vidrio alcalino del tipo sdico / clcico, de

resistencia hidroltica media, sin embargo con buena resis-
tencia mecnica, sin cualquier tratamiento superficial, con
alcalinidad mxima de 8,5 ml de H2SO4 0,01 M (ensayo
en frasco de vidrio molido). Destinado al envasado de so-
luciones de uso tpico y oral; pudiendo ser utilizado para
soluciones parenterales, cuando aprobado por ensayos de
estabilidad.
Vidrio tipo NP (no parenteral). Vidrio alcalino del tipo
sdico / clcico, de resistencia hidroltica baja y alta alcali-
nidad, de como mximo 15 ml de H2SO4 0,01 M (ensayo en
frasco de vidrio molido). Indicado al envasado de produc-
tos no parenterales, o sea, de uso tpico y oral.
6.1.1 RESISTENCIA
HIDROLTICA O ALCALINIDAD
Ensayo que cuantifica la intensidad de la reaccin qumica
entre el agua y los elementos alcalinos existentes en el vi-
drio, especialmente sodio y potasio. Esa resistencia deter-
mina la clasificacin del tipo de vidrio.
EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS
Autoclave con control de temperatura de 121 C 1,0
C, equipada con termmetro, manmetro, vlvula de Solucin de HCl a 0,01 M.
seguridad y estantera para sustentacin de, como m-
nimo, 12 frascos.
6
Figura 2 - Figura 1 Mortero y piln
para pulverizacin de vidrio.
Estufa para secado con temperatura de 140 C;
Balanza de precisin con dos casas decimales;
Conjunto de tamices en acero inoxidable, n 20, n 40
y n 50, con dimetro de 20,3 cm (8), incluyendo la
olla y la tapa;
Imn;
Vaso de precipitados o papel aluminio;
Matraz de 250 ml;
Desecador;
Bureta y microbureta para titulacin;
Probeta graduada de 100 ml;
Agua bidestilada o desionizada, con conductividad
mxima de 0,15 S/cm (o 6,67 M /cm) a 25 C;
Solucin de rojo de metilo (24 mg en 100 ml de agua);
Acetona PA;
Solucin de H2SO4 a 0,01 M;

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 286 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO EN FRASCO DE VI-
DRIO MOLIDO
Lavar, como mnimo, seis frascos, escogidos aleatoriamen-
te, con agua bidestilada o desionizada, y secarlos en co-
rriente de aire limpio y seco.
Si necesario, cortar los frascos y transferir y triturar de 30
a 40 g de vidrio utilizando el molino de bolas o el morte-
ro. Pasar el vidrio molido por tamiz n 20 y transferir la
porcin retenida en el tamiz nuevamente para el molino de
bolas o el mortero. Repetir las operaciones de molienda y
pasaje de los fragmentos por el tamiz hasta que, por lo me-
nos, 2/3 del material haya pasado por el tamiz n 20. Com-
binar todas las porciones de vidrio molido que pasaron por
el tamiz n 20 y pasar por tamiz n 40. Triturar la porcin
retenida en el tamiz y repetir la operacin.
Combinar las porciones de vidrio molido que pasaron por
el tamiz n 40 y transferir para conjunto montado de tami-
ces n 40 y n 50. Agitar horizontalmente por 5 minutos.
Recoger 12,0 g de vidrio molido que pas por el tamiz n
40 pero no pas por el tamiz n 50 y almacenar en deseca-
dor hasta ser utilizado en la prueba.
Esparcir la muestra de vidrio molido sobre un pedazo de
papel satinado y pasar el imn, para retirar posibles frag-
mentos de hierro que puedan haber sido introducidos du-
rante el procedimiento de molienda.
6
Transferir la muestra para matraz de 250 ml y lavar las par-
tculas de vidrio con 6 porciones de 30 ml de acetona PA,
agitando por cerca de 30 segundos cada procedimiento, y
decantar cuidadosamente la acetona. Despus del lavado,
la muestra debe estar libre de bloques de polvo de vidrio
y la superficie de los granos debe estar prcticamente libre
de la adherencia de partculas finas. Secar el material por
20 minutos a 140 C.
La muestra debe ser probada hasta 48 horas despus del
secado y en ese caso, debe ser mantenida en desecador.
Pesar 10,0 g del vidrio molido, transferir para matraz de 250
ml, previamente preparado con agua bidestilada o desioni-
zada en bao a 90 C, por lo menos, por 24 horas o a 121 C
por 1 hora, y aadir 50 ml de agua bidestilada o desionizada.
Como blanco, utilizar matraz de 250 ml, previamente pre-
parado en agua bidestilada o desionizada en bao a 90 C,
por lo menos, por 24 horas o a 121 C por 1 hora, y aadir
50 ml de agua bidestilada o desionizada.
Cerrar los frascos matraz con el uso de vaso de precipi-
tados invertido o papel aluminio, previamente lavado con
agua bidestilada o desionizada.
Colocarlos en la autoclave y someterlos al siguiente trata-
miento:
promover el aumento de la temperatura del autoclave
despus de cerrar la vlvula de escape, entre 19 a 23
minutos, hasta alcanzar 121 C + 1 C;
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
mantener en temperatura de 121 C + 1 C durante 60
minutos;
descargar la presin en un perodo de 38 a 46 minutos,
hasta alcanzar la presin atmosfrica.
Retirar los frascos y enfriarlos, inmediatamente, en agua
corriente. Despus de enfriamiento, decantar el agua del
matraz y lavar el vidrio molido con 4 porciones de 15 ml de
agua bidestilada o desionizada. Aadir 5 gotas de la solu-
cin de rojo de metilo y titular, inmediatamente, con cido
sulfrico 0,01 M. Si el volumen esperado de solucin que
ser utilizada en la titulacin es inferior a 10 ml, utilizar
una microbureta.
Registrar el volumen de cido sulfrico utilizado en la titu-
lacin y corregir el valor en relacin al volumen del blanco.
Lmites
El valor de la alcalinidad mxima para el frasco de vidrio
tipo I es de 1,0 ml de H2SO4 0,01 M para 10 g de vidrio
molido.
El valor de la alcalinidad mxima para el frasco de vidrio
tipo III es de 8,5 ml de H2SO4 0,01 M para 10 g de vidrio
molido.
El valor de la alcalinidad mxima para el frasco de vidrio
tipo NP es de 15 ml de H2SO4 0,01 M para 10 g de vidrio
molido.
PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO EN FRASCO DE
VIDRIO ENTERO
Lavar frascos, escogidos aleatoriamente, con agua bides-
tilada o desionizada y secarlos en corriente de aire limpio
y seco. Aadir volumen de agua bidestilada o desioniza-
da correspondiente a 90% de la capacidad total del frasco,
determinada conforme descrito en Capacidad Volumtrica
Total (6.1.3).
Cerrar los frascos con papel aluminio previamente lavado
con agua bidestilada o desionizada y colocarlos en la auto-
clave. Someterlos al siguiente tratamiento:
calentar a autoclave a 100 C, con la vlvula de escape
abierta, por 10 minutos;
promover el aumento de la temperatura de la autoclave
despus del cierre de la vlvula de escape, en 1 C/min,
hasta alcanzar 121 C 1 C;
mantener la temperatura de 121 C 1 C durante 60
minutos;
bajar la temperatura, en 0,5 C/min, hasta alcanzar 100
C, descargando la presin hasta alcanzar la presin at-
mosfrica;
abrir la autoclave solamente despus de alcanzar la
temperatura de95 C;
transferir los frascos para bao mara a 80 C. Aadir
agua fra; tomando cuidado de evitar la contaminacin
de la solucin de extraccin, siendo que el tiempo de
enfriamiento no debe exceder 30 minutos.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 287

Despus de enfriamiento, combinar la solucin de extrac-
cin de cada uno de los frascos. Medir el volumen conforme
registrado en la Tabla 1 y transferir para matraz de 250 ml.
Como blanco, utilizar matraz de 250 ml y aadir el mismo
volumen de agua bidestilada o desionizada.
Tabla 1 - Volumen de solucin de extraccin de acuerdo
con la capacidad volumtrica total del recipiente.
Capacidad volumtrica Volumen de solucin
del frasco (ml) de extraccin (ml)
3 25,0
De 3 a 30 50,0
De 30 a 100 100,0
100 100,0
Aadir 5 gotas de la solucin de rojo de metilo para cada
25 ml de solucin de extraccin y titular, inmediatamente,
con cido clorhdrico 0,01 M, utilizando una microbureta.
Registrar el volumen de cido clorhdrico 0,01 M utilizado
en la titulacin y corregir el valor en relacin al volumen
del blanco.
Lmites
El valor de alcalinidad mxima no debe exceder los valores
indicados en la Tabla 2.
Colocarlos en la autoclave y someterlos al siguiente trata-
miento:
promover el aumento de temperatura del autoclave
despus de cerrar la vlvula de escape, entre 19 a 23
minutos, hasta alcanzar 121 C + 1 C;
mantener en temperatura de 121 C + 1 C durante 60
minutos;
descargar la presin en un perodo de 38 a 46 minutos,
hasta alcanzar la presin atmosfrica.
Combinar el volumen de solucin de extraccin de varios
frascos, en probeta graduada y transferir 100,0 ml para ma-
traz de 250 ml. Aadir 5 gotas de la solucin de rojo de
metilo y titular, inmediatamente, con cido sulfrico 0,01
M. Completar la titulacin dentro de 60 minutos despus
de la abertura de la autoclave. Registrar el volumen de ci-
do sulfrico utilizado en la titulacin y corregir el valor en
relacin al volumen del blanco (100 ml de agua bidestilada
o desionizada en la misma temperatura y con la misma can-
tidad de indicador).
Lmites
El valor de la alcalinidad mximo para el frasco de vidrio
tipo II es de 0,7 ml de H2SO4 0,01 M para frascos con hasta
100 ml de capacidad volumtrica.
El valor de la alcalinidad mximo para el frasco de vidrio
tipo II es de 0,2 ml de H2SO4 0,01 M para frascos con ms

6
Tabla 2 - Alcalinidad mxima de acuerdo con el tipo de 100 ml de capacidad volumtrica.
de vidrio y la capacidad volumtrica del frasco.

Volumen mximo de HCl 0,01 M

6.1.2 ARSNICO
Capacidad (ml) para 100 ml de solucin de
volumtrica del EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS
extraccin
frasco (ml)
Tipos I y II Tipo III Autoclave con control de temperatura de 121 C 1,0
C, equipada con termmetro, manmetro, vlvula de
<1 2,0 20,0
seguridad y estantera para sustentacin de, como m-
De 1 a 2 1,8 17,6
nimo, 12 frascos;
De 2 a 5 1,3 13,2
estufa para secado con temperatura de 140 C;
De 5 a 10 1,0 10,2 vaso de precipitados o papel aluminio;
De 10 a 20 0,80 8,1 matraz de 250 ml;
De 20 a 50 0,60 6,1 probeta graduada de 100 ml;
De 50 a 100 0,50 4,8 agua bidestilada o desionizada, con conductividad
De 100 a 200 0,40 3,8 mxima de 0,15 S/cm (o 6,67 M /cm) a 25 C.
De 200 a 500 0,30 2,9
> 500 0,20 2,2 PROCEDIMIENTO

PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO DE ATAQUE DE
AGUA A 121 C PARA CUALIFICAR EL VIDRIO DE
TIPO II.
Enjuagar 3 o ms frascos, escogidos aleatoriamente, con
agua bidestilada o desionizada por 2 veces y secarlos en
corriente de aire limpio y seco. Aadir volumen de agua
bidestilada o desionizada correspondiente a 90% de la ca-
pacidad total del frasco, determinada conforme descrito
en Capacidad Volumtrica Total (6.1.3). Cerrar los fras-
cos con el uso de vaso de precipitados invirtiendo el pa-
pel aluminio, previamente lavado con agua bidestilada, o
desionizada.
Lavar frascos, escogidos aleatoriamente, con agua bidesti-
lada, o desionizada y secarlos en corriente de aire limpio
y seco. Aadir volumen de agua bidestilada o desioniza-
da correspondiente a 90% de la capacidad total del frasco,
determinada conforme descrito en Capacidad Volumtrica
Total (6.1.3). Cerrar los frascos con papel aluminio previa-
mente lavado con agua bidestilada o desionizada y colo-
carlos en la autoclave. Someterlos al siguiente tratamiento:
calentar la autoclave a 100 C, con la vlvula de escape
abierta, por 10 minutos;
promover el aumento de la temperatura de la autoclave
despus del cierre de la vlvula de escape, en 1 C/min,
hasta alcanzar 121 C 1 C;

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 288 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

mantener en la temperatura de 121 C 1 C durante Determinar la temperatura del agua durante la realizacin
60 minutos; del ensayo, asegurar que la temperatura del agua no tenga
bajar la temperatura, en 0,5 C/min, hasta alcanzar 100 variacin arriba de 1 C.
C, descargando la presin hasta alcanzar la presin at-
mosfrica; Pesar el frasco lleno y determinar la masa de agua en el
abrir la autoclave solamente despus de alcanzar la contenida.
temperatura de 95 C;
transferir los frascos para bao mara a 80 C. Aadir Calcular el volumen del frasco dividiendo la masa del agua
agua fra, cuidadosamente, para evitar la contamina- por su densidad, en la temperatura del ensayo, con el uso
cin de la solucin de extraccin, siendo que el tiempo de los datos registrados en la Tabla 1 para agua destilada.
de enfriamiento no debe exceder 30 minutos.
Tabla 1 - Densidad del agua destilada
Despus de enfriamiento, combinar la solucin de extrac- en funcin de la temperatura.
cin de cada uno de los frascos para obtener 35 ml y trans-
ferir para matraz de 250 ml. Densidad Densidad
Temperatura Temperatura
del agua (g/ del agua (g/
(C) (C)
Proceder conforme descrito para Ensayos-lmite de arsni- ml) ml)
co (5.3.2.5). Lmite para arsnico es de 1 g/g. 10 0,99839 23 0,99660
11 0,99832 24 0,99638
6.1.3 CAPACIDAD 12 0,99823 25 0,99617
13 0,99814 26 0,99593
VOLUMTRICA TOTAL 14 0,99804 27 0,99569
15 0,99893 28 0,99544
Ensayo para determinar el volumen de producto lquido 16 0,99780 29 0,99518
que el frasco puede contener, cuando lleno, hasta la super- 17 0,99766 30 0,99491
ficie superior de la terminacin. 18 0,99751 31 0,99464
19 0,99735 32 0,99435
EQUIPOS Y MATERIALES
20 0,99718 33 0,99406
21 0,99700 34 0,99375

6
Balanza con resolucin mnima de 0,1 g;
22 0,99680 35 0,99345
termmetro de 0 C a 100 C, con resolucin de 0,5 C;
agua bidestilada. RESULTADOS

PROCEDIMIENTO Los resultados expresados en ml, con una casa decimal,

Seleccionar seis unidades aleatoriamente. Tarar la balanza
con el frasco seco y vaco.
Llenar el frasco con agua bidestilada hasta la superficie
de sellado de la terminacin (regin de cierre del frasco,
tambin, denominada de cuello, finish, o acabado), mante-
niendo superficie externa totalmente seca, siendo que para
ampollas el llenado debe ser realizado hasta la altura del
punto A Figura 1.
deben estar de acuerdo con las especificaciones indicadas.
6.2 RECIPIENTES PLSTICOS
El objetivo pretendido con esa seccin es establecer normas
para materiales y componentes plsticos utilizados para
acondicionar medicamentos y relacionados. Las normas y
pruebas para las propiedades funcionales de los recipientes
y de sus componentes son suministradas en Recipientes de
Plstico Pruebas de desempeo (6.2.3).

Los artculos de plstico son identificados y caracterizados

por espectroscopia de infrarrojo y calorimetra diferencial
de barrido. En esa seccin estn descritos los procedimien-
tos de pruebas y normas para la identificacin y caracte-
rizacin de los diferentes tipos de plstico. El grado de
verificacin se basa en el contacto directo o no con el me-
dicamento, y el riesgo se basa en la va de administracin.

Los plsticos pueden contener residuos del proceso de po-

Figura 1 - Llenado del volumen de ampollas (hasta el punto A).
limerizacin, plastificantes, estabilizadores, antioxidantes,
pigmentos y lubricantes. Los factores como la composicin
del plstico, procesamiento y procedimientos de limpieza,
tratamiento de superficie, medios de contacto, colorantes,
adhesivos, absorcin y permeabilidad de conservantes y
condiciones del almacenamiento, tambin, pueden afectar
la adecuacin de un plstico para un uso especfico.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Las pruebas de extrables son planeadas para caracterizar
los componentes extrados e identificar los posibles mi-
grantes. El grado o extensin de las pruebas para extraer
sustancias de un componente depende de la finalidad de
uso y del grado de riesgo de impactar negativamente en
la eficacia del producto. En este captulo estn descritos
las pruebas de extrables especficos para resinas de po-
lietileno, polipropileno, poli (tereftalato de etileno) y poli
(tereftalato de etileno glicol). Todos los otros plsticos de-
ben ser probados conforme descrito en los Pruebas Fsico
Qumicas de Mtodos de Prueba (6.2.1.3). La prueba de
Capacidad Tamponante debe ser probada para recipientes
destinados a embalar un producto lquido.
Los componentes plsticos utilizados para productos de alto
riesgo, tales como aquellos destinados a la inhalacin; pre-
paraciones parenterales y oftlmicas son probados utilizan-
do los Pruebas Biolgicas de Mtodos de Prueba (6.2.1.3).
Los recipientes plsticos destinados al embalaje de produc-
tos parenterales deben cumplir los requisitos de las Pruebas
Biolgicos y de las Pruebas Fsico Qumicas. Tambin, son
suministradas normas para los recipientes en polietileno
utilizados para embalar formas farmacuticas orales secas,
no destinadas para constitucin en solucin.
6.2.1 RECIPIENTES Y
RELACIONADOS PLSTICOS
6.2.1.1 RECIPIENTES DE POLIETILENO
Polietilenos de alta y baja densidad son polmeros de ca-
dena larga, sintetizados bajo condiciones controladas de
calor y presin, con el auxilio de catalizadores y a partir
de, como mnimo, 85,0% de etileno y un total de 95,0%
de olefinas. Tanto el polietileno de alta densidad cuanto el
de baja densidad tienen un espectro de absorcin de infra-
rrojo especfico del polietileno y poseen propiedades tr-
micas caractersticas. El polietileno de alta densidad tiene
una densidad entre 0,941 y 0,965 g/cm3. El polietileno de
baja densidad tiene una densidad entre 0,850 y 0,940 g/
cm3. Otras propiedades que pueden afectar la adecuacin
del polietileno incluyen mdulo de elasticidad, ndice de
fluidez, resistencia a la quiebra bajo tensin ambiental y
grado de cristalinidad despus del moldeo.
Las normas y ensayos descritos en esta seccin caracte-
rizan recipientes y componentes, producidos a partir del
polietileno de baja o de alta densidad de resinas homopoli-
mricas o copolimricas.
Todos los componentes de polietileno estn sujetos a
pruebas de espectroscopia en el infrarrojo y calorimetra
diferencial de barrido. Cuando estudios de estabilidad
son realizados para determinar la fecha de validez de una
forma farmacutica especial en un recipiente de polietile-
no adecuado, cualquier otro recipiente de polietileno que
cumpla esos requisitos puede ser igualmente utilizado para
embalar la forma farmacutica en cuestin, siempre que
los programas de estabilidad apropiados sean ampliados
para incluir el recipiente alternativo para garantizar que la
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 289
identidad, la fuerza, la calidad y la pureza de la forma far-
macutica sean mantenidas durante el perodo de validez.
ENSAYOS
Polietileno de Alta Densidad
Espectroscopia de Infrarrojo. Utilizar el accesorio de re-
flexin total atenuada, conforme descrito en el tem Infrarro-
jo medio (5.2.14). El espectro corregido de la muestra debe
presentar bandas de mayor absorcin apenas en los mismos
largos de onda del espectro del estndar de referencia.
Calorimetra Diferencial de Barrido. Proceder como
descrito en la Anlisis Trmico de Mtodos de Pruebas
(6.2.1.3). El termograma de la muestra debe ser parecido
con el del estndar de referencia, determinado de manera
semejante, y la temperatura endotrmica (derretimiento) en
el termograma de la muestra no debe diferir en ms de 6,0
C de los estndares de referencia.
Metales Pesados y Residuo No Voltil. Preparar extrac-
tos de la muestra conforme descrito en las Pruebas Fsico
Qumicas, en Mtodos de Pruebas (6.2.1.3), con porcin
de 60 cm2, sin considerar el espesor, para cada 20,0 ml de
Medio de Extraccin.
Metales Pesados. Los recipientes deben cumplir los requi-
sitos para Metales Pesados en Pruebas Fsico Qumicas, en
6
Mtodos de Pruebas (6.2.1.3).
Residuo No Voltil. Proceder como descrito en Residuo
No Voltil en Pruebas Fsico Qumicas en Mtodos de
Prueba (6.2.1.3), siendo que el Blanco debe ser el mismo
solvente utilizado en cada una de las condiciones de prue-
ba. La diferencia entre las cantidades obtenidas de la Pre-
paracin de la Muestra y del Blanco no debe exceder 12,0
mg cuando el agua mantenida a 70 C es utilizada como
Medio de Extraccin; no exceder 75,0 mg cuando el alco-
hol mantenido a 70 C es utilizado como Medio de Extrac-
cin; y no exceder 100,0 mg cuando el hexano mantenido
a 50 C es utilizado como Medio de Extraccin.
Sustancias Utilizadas en Contacto con Lquidos Orales.
Proceder como descrito en la Capacidad Tamponante de
Pruebas Fsico Qumicas, Mtodos de Pruebas (6.2.1.3).
Polietileno de Baja Densidad
Espectroscopia de Infrarrojo. Utilizar el accesorio de re-
flexin total atenuada, conforme descrito en el tem Infrarro-
jo medio (5.2.14). El espectro corregido de la muestra debe
presentar bandas de mayor absorcin apenas en los mismos
largos de onda del espectro del estndar de referencia.
Calorimetra Diferencial de Barrido. Proceder como
descrito en la Anlisis Trmico, en Mtodos de Pruebas
(6.2.1.3). El termograma de la muestra debe ser parecido
con el del estndar de referencia, determinado de manera
semejante, y la temperatura endotrmica (derretimiento) en
 290 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
el termograma de la muestra no debe diferir en ms de 8,0
C de los estndares de referencia.
Metales Pesados, y Residuo No Voltil. Preparar extrac-
tos de la muestra conforme descrito en Preparacin de la
Muestra en Pruebas Fsico Qumicos de Mtodos de Prue-
bas, con porcin de 60 cm2, sin considerar el espesor, para
cada 20,0 ml de Medio de Extraccin.
Metales Pesados. Los recipientes deben cumplir los requi-
sitos para Metales Pesados de Pruebas Fsico Qumicas, en
Mtodos de Pruebas (6.2.1.3).
Residuo No Voltil. Proceder conforme descrito en
Residuo No Voltil de Pruebas Fsico Qumicas, en Mto-
dos de Pruebas (6.2.1.3), siendo que el Blanco debe ser el
mismo solvente utilizado en cada una de las condiciones de
prueba. La diferencia entre las cantidades obtenidas de la
Preparacin de la Muestra y del Blanco no debe exceder
12,0 mg cuando el agua mantenida a 70 C es utilizada
como Medio de Extraccin; no exceder 75,0 mg cuando
el alcohol mantenido a 70 C es utilizado como Medio de
Extraccin; y no exceder 350,0 mg cuando el hexano man-
tenido a 50 C es utilizado como Medio de Extraccin.
Sustancias Utilizadas en Contacto con Lquidos Orales.
Proceder conforme descrito en la Capacidad Tamponan-
6
te de Pruebas Fsico Qumicas, en Mtodos de Pruebas
(6.2.1.3).
6.2.1.2 RECIPIENTES DE
POLIPROPILENO
Los polmeros de polipropileno son polmeros de cade-
na larga, sintetizados con el auxilio de catalizadores bajo
condiciones controladas de calor y presin. Factores como
composicin del plstico, procesamiento y procedimientos
de limpieza, medios de contacto, colorantes, adhesivos, ab-
sorcin, adsorcin, permeabilidad de conservantes y con-
diciones de almacenamiento pueden afectar la adecuacin
de un plstico para un uso especfico. La adecuacin de un
polipropileno caracterstico debe ser establecida por medio
de pruebas adecuadas.
El polipropileno tiene un espectro en el infrarrojo distinto
y propiedades trmicas caractersticas. Posee una densidad
de 0,880 a 0,913 g/cm3. Las propiedades de permeabilidad
de los recipientes en polipropileno moldados pueden ser
alteradas cuando el polmero repulverizado es incorporado,
dependiendo de su proporcin en el producto final. Otras
propiedades que pueden afectar la adecuacin de polipro-
pileno utilizado en recipientes para embalaje de medica-
mentos incluyen permeabilidad al oxgeno y a la humedad,
mdulo de elasticidad, ndice de fluidez, resistencia a la
quiebra bajo tensin ambiental y grado de cristalinidad
despus del moldeo.
Las normas y ensayos suministrados caracterizan recipien-
tes en polipropileno, producidos a partir de homopolmeros
o copolmeros, que son adecuados para envasado de for-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
mas farmacuticas orales secas slidas y lquidas. Conside-
rndose que estudios adecuados de estabilidad tengan sido
realizados para determinar la fecha de validez de una forma
farmacutica especfica en un recipiente apropiado en po-
lipropileno, cualquier otro recipiente en polipropileno que
atienda a esos requisitos puede ser utilizado para embalar
la misma forma farmacutica, siempre que los programas
de estabilidad apropiados sean ampliados para incluir ese
recipiente alternativo, a fin de garantizar que la identidad,
la fuerza, la calidad y la pureza de la forma farmacutica
sean mantenidas durante el perodo de validez.
ENSAYOS
Espectroscopia de Infrarrojo. Utilizar accesorio de re-
flexin total atenuada, conforme descrito en el tem
Espectrofotometra de absorcin en el infrarrojo (5.2.14).
El espectro corregido de la muestra debe presentar ban-
das de mayor absorcin solamente en los mismos largos
de onda del espectro del respectivo estndar de referencia
(homopolmero o copolmero de polipropileno) determina-
do de forma semejante.
Calorimetra Diferencial de Barrido. Proceder confor-
me descrito en la Anlisis Trmico de Mtodos de Pruebas
(6.2.1.3). La temperatura endotrmica (derretimiento) en
el termograma no debe diferir en ms que 6,0 C de los
estndares de referencia para homopolmeros. La tempe-
ratura endotrmica obtenida del termograma de la muestra
de copolmero de polipropileno no debe diferir en ms que
12,0 C de los estndares de esa sustancia.
Metales Pesados y Residuo No Voltil. Preparar extrac-
tos de las muestras conforme descrito en Preparacin de
la Muestra, de Pruebas Fsico Qumicas, en Mtodos de
Pruebas (6.2.1.3), con porcin de 60 cm2, sin considerar el
espesor, para cada 20,0 ml de Medio de Extraccin.
Metales Pesados. Los recipientes deben cumplir los requi-
sitos para Metales Pesados de Pruebas Fsico Qumicas, en
Mtodos de Pruebas (6.2.1.3).
Residuo No Voltil. Proceder conforme descrito en Resi-
duo No Voltil de Pruebas Fsico Qumicas, en Mtodos
de Pruebas (6.2.1.3), siendo que el Blanco debe ser el mis-
mo solvente utilizado en cada una de las condiciones de
prueba. La diferencia entre las cantidades obtenidas de la
Preparacin de la Muestra y del Blanco no debe exceder
10,0 mg cuando el agua mantenida a 70 C es utilizada
como Medio de Extraccin; no exceder 60,0 mg cuando
el alcohol mantenido a 70 C es utilizado como el Medio
de Extraccin; y no exceder 225,0 mg cuando el hexano
mantenido a 50 C es utilizado como Medio de Extraccin.
Los recipientes deben atender a los requisitos para Residuo
No Voltil para todos los medios de extraccin.
Nota: hexano y alcohol son inflamables. Al evaporar esos
solventes, utilizar una corriente de aire con bao mara;
al secar el residuo, utilizar estufa a prueba de explosin.

Sustancias Utilizadas en Contacto con Lquidos Orales.
Proceder conforme descrito en la Capacidad Tamponan-
te de Pruebas Fsico Qumicas, en Mtodos de Pruebas
(6.2.1.3).
6.2.1.3 RECIPIENTES DE POLI
(TEREFTALATO DE ETILENO) Y POLI
(TEREFTALATO DE ETILENO GLICOL)
Resinas de poli (tereftalato de etileno) (PET) son polmeros
cristalinos de cadena larga preparados por la condensacin
del etilenoglicol con dimetil tereftalato o cido tereftlico.
Las resinas de copolmero PET son preparadas de forma
semejante, excepto que, tambin, pueden contener una pe-
quea cantidad de cido isoftlico (inferior a 3% de mol
de la resina) o 1,4-ciclo-hexano-dimetanol (inferior a 5%
de mol de la resina). La polimerizacin es conducida bajo
condiciones controladas de calor y vaco; con el auxilio de
catalizadores y estabilizadores.
Las resinas de copolmero PET tienen propiedades fsicas
y espectrales semejantes al PET y, para efectos prcticos,
son tratadas como PET. Los ensayos y las especificacio-
nes suministradas en esta seccin para caracterizar resinas
y recipientes de PET, se aplican tambin a las resinas de
copolmero y a los recipientes fabricados a partir de ellas.
Generalmente, el PET y sus resinas de copolmero presentan
un grado elevado de orden en su estructura molecular. Como
resultado, presentan un comportamiento trmico caracters-
tico dependiente de la composicin, incluyendo una tempe-
ratura de transicin vtrea de cerca de 76 C y una tempe-
ratura de fusin de aproximadamente 250 C. Estas resinas
tienen un espectro de absorcin de infrarrojo particular que
permite la diferenciacin de otros materiales plsticos, como
policarbonato; poliestireno; polietileno y resinas poli (tere-
ftalato de etileno glicol) (PETG). El PET y sus resinas de
copolmero tienen una densidad entre 1,3 y 1,4 g/cm3 y una
viscosidad intrnseca mnima de 0,7 dL/g, que corresponde a
un peso molecular promedio de cerca de 23.000 Da.
Las resinas PETG son polmeros de alto peso molecular
preparadas por la condensacin del etilenoglicol con dimetil
tereftalato, o cido tereftlico y con 15 a 34% de 1,4-hexa-
no-dimetanol molar. Las resinas PETG son polmeros trans-
parentes, amorfos, con una temperatura de transicin vtrea
de cerca de 81 C y sin un punto de fusin cristalina, confor-
me determinado por la calorimetra diferencial de barrido.
Las resinas PETG tienen un espectro de absorcin infrarrojo
particular que posibilita la distincin entre otros materiales
plsticos, inclusive el PET. Las resinas PETG tienen una
densidad de aproximadamente 1,27 g/cm3 y una viscosidad
intrnseca mnima de 0,65 dL/g, lo que corresponde a un
peso molecular medio de cerca de 16.000 Da.
Las resinas PET y PETG no contienen ningn plastificante,
apoyo de procesamiento o antioxidantes. Cuando coloran-
tes son utilizados en la fabricacin de recipientes de PET y
de PETG, estos no deben migrar para el lquido.
Las normas y ensayos suministrados en esa seccin ca-
racterizan recipientes de tereftalato de polietileno (PET)
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 291
y tereftalato de polietileno glicol (PETG) que son usados
para embalar formas farmacuticas orales lquidas. Consi-
derando que estudios adecuados de estabilidad hayan sido
realizados para determinar la validez de una forma farma-
cutica lquida particular en un recipiente que atienda los
requisitos para recipientes de PET o de PETG, cualquier
otro recipiente de esas sustancias que atienda a estos requi-
sitos puede ser utilizado para embalar la misma forma far-
macutica, siempre que programas de estabilidad apropia-
dos sean ampliados para incluir ese recipiente alternativo,
para garantizar que la identidad, la fuerza, la calidad y la
pureza de la forma farmacutica sean mantenidas durante
toda la validez. La adecuacin de un recipiente de PET o
de PETG especfico para ser usado en la dispensacin de
una forma farmacutica oral lquida especfica debe ser es-
tablecida por medio de pruebas adecuadas.
ENSAYOS
Espectroscopia de Infrarrojo. Utilizar accesorio de re-
flexin total atenuada, proceder conforme descrito en Es-
pectrofotometra de absorcin en el infrarrojo (5.2.14). El
espectro corregido de la muestra presenta bandas de mayor
absorcin apenas en los mismos largos de onda del espec-
tro de los estndares de referencia, determinados semejan-
temente.
Calorimetra Diferencial de Barrido. Proceder conforme
descrito en el tem Anlisis Trmico en Mtodos de Prue-
6
bas. Para el tereftalato de polietileno, el termograma de la
muestra debe ser parecido con el del estndar de referencia,
determinado de forma semejante; el punto de derretimiento
de la muestra (Tm) no debe diferir de los estndares de
referencia en ms de 9 C y la temperatura de transicin v-
trea en ms de 4 C. Para el tereftalato de polietileno glicol,
el termograma de la muestra debe ser parecido con el del
estndar de referencia, determinado de forma semejante; la
temperatura de transicin vtrea de la muestra (Tg) no debe
diferir en ms de 6 C de los estndares de referencia.
Extraccin de Colorantes. Seleccionar tres recipientes
para el ensayo. Cortar una parte relativamente plana de
la pared lateral de un recipiente y apararla en la medida
necesaria para ajustar la muestra al soporte del espectrofo-
tmetro. Realizar barrido (5.2.14) para obtener el espectro
visible de 350-700 nm de la pared lateral. Con aproxima-
cin de 2 nm, determinar el largo de onda de absorbancia
mxima. Llenar los dos recipientes restantes con 50% de
etanol para recipientes PET y 25% de etanol para PETG.
Preparar los recipientes con sellados impermeables, como
una hoja de papel aluminio, y cerrar con las tapas. Llenar
con el solvente correspondiente un recipiente de vidrio de
misma capacidad que los recipientes a prueba, prepararlo
con sellado impermeable, como una hoja de papel alumi-
nio, y cerrar con una tapa. Incubar los recipientes a prueba
y el recipiente de vidrio a 49 C por 10 das. Retirar los
recipientes y aguardar que alcancen temperatura ambiente.
Concomitantemente, determinar las absorbancias (5.2.14)
de las soluciones a prueba en clulas de 5 cm en el largo
de onda de absorbancia mxima, utilizando el solvente co-
rrespondiente del recipiente de vidrio como blanco. Para
 292 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
ambas las soluciones a prueba, los valores de absorbancia,
as, obtenidos no deben ser inferiores a 0,01.
Metales Pesados; Total de Tereftalola y Etilenoglicol.
Medios de extraccin.
Agua purificada
Etanol a 50%. Diluir 125 ml de etanol en agua para 238
ml de solucin y homogeneizar.
Etanol a 25%. Diluir 125 ml de Etanol a 50% en agua
para 250 ml de solucin y homogeneizar.
n-Heptano.
Procedimiento general. Utilizar un medio de extraccin
de Etanol a 50% para recipientes de PET y Etanol a 25%
para PETG. Para cada medio de extraccin, llenar un n-
mero suficiente de recipientes pruebas con 90% de su capa-
cidad nominal para obtener como mnimo 30 ml. Llenar un
nmero correspondiente de recipientes de vidrio con Agua
purificada, la misma cantidad de recipientes con Etanol a
50%, o Etanol a 25% y el mismo nmero de recipientes de
vidrio con n-Heptano para ser utilizado como blanco de los
medios de extraccin. Colocar en los recipientes sellados
impermeables, como hoja de aluminio, y taparlos. Incubar
los recipientes pruebas y los recipientes de vidrio a 49 C por
10 das. Retirar los recipientes pruebas con las muestras y
los blancos del medio de extraccin y almacenarlos en tem-
peratura ambiente. No transferir las muestras del medio de
6
extraccin para recipientes de almacenamiento alternativos.
Metales Pesados. Pipetear 20 ml de Agua purificada ex-
trada de los recipientes pruebas, filtrada conforme necesa-
rio, colocar en uno, o dos tubos de 50 ml para comparacin
de color y guardar el Agua purificada restante para utilizar
en la prueba de Etilenoglicol. Ajustar el pH del extracto
entre 3,0 y 4,0 con cido actico M o hidrxido de amonio
6 M, utilizando un papel indicador de corto intervalo de
pH. Diluir con agua hasta cerca de 35 ml y homogeneizar.
Pipetear 2 ml de la Solucin estndar de plomo (10 ppm
Pb) (5.3.2.3), preparada en el da del uso; transferir para
un segundo tubo de comparacin de color y aadir 20 ml
de Agua purificada. Ajustar el pH entre 3,0 y 4,0 con cido
actico M o hidrxido de amonio 6 M, utilizando un papel
indicador de corto intervalo de pH. Diluir con agua hasta
cerca de 35 ml y homogeneizar.
En cada tubo, aadir 1,2 ml de tioacetamida SR y 2 ml de
Tampn acetato pH 3,5 (5.3.2.3) diluir con agua hasta 50
ml de solucin y homogeneizar. Cualquier color produci-
do dentro de 10 minutos en el tubo que contiene el Agua
purificada extrada de los recipientes pruebas, no debe ser
ms intenso que el del tubo conteniendo la Solucin estn-
dar de plomo (10 ppm Pb), ambas visualizadas sobre una
superficie blanca (lmite 1 ppm).
Total de tereftalola. Determinar la absorbancia del ex-
tracto de Etanol a 50% o de Etanol a 25% en una clula de
1 cm, en el largo de onda de absorbancia mxima a cerca
de 244 nm (5.2.14), utilizando como blanco aquel corres-
pondiente al medio de extraccin. La absorbancia del ex-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
tracto no debe exceder 0,150, lo que corresponde, como
mximo, 1 ppm del total de tereftaloila del medio.
Determinar la absorbancia del extracto de n-Heptano en
una clula de 1 cm, en el largo de onda de absorbancia
mxima a cerca de 240 nm (5.2.14), utilizando como blan-
co el medio de extraccin de n-Heptano. La absorbancia
del extracto no debe exceder 0,150, lo que corresponde,
como mximo, 1 ppm de tereftaloila del medio.
Etilenoglicol.
Solucin de cido peridico. Disolver 125 mg de cido pe-
ridico en 10 ml de agua.
cido sulfrico diluido. Para 50 ml de agua, aadir lenta-
mente y en constante agitacin, 50 ml de cido sulfrico y
aguardar que alcance la temperatura ambiente.
Solucin de bisulfito de sodio. Disolver 0,1 g de bisulfito
de sodio en 10 ml de agua. Utilizar esa solucin dentro de
7 das.
Solucin de cromotropato disdico. Disolver 100 mg de
cromotropato disdico en 100 ml de cido sulfrico. Prote-
ger la solucin de la luz y utilizarla dentro de 7 das.
Solucin estndar. Disolver una cantidad, precisamente
pesada, de etilenoglicol en agua y diluir, cuantitativamen-
te, paso a paso, si necesario, para obtener una solucin con
una concentracin de cerca de 1,0 g/ml.
Solucin prueba. Utilizar el extracto en Agua purificada.
Procedimiento. Transferir 1 ml de la Solucin estndar
para un baln volumtrico de 10 ml. Transferir 1 ml de la
Solucin prueba para un segundo baln volumtrico de 10
ml. Transferir 1 ml del medio de extraccin en Agua purifi-
cada para un tercer baln volumtrico de 10 ml. Para cada
uno de los tres balones, aadir 100 L de la Solucin de
cido peridico, agitar para homogeneizar y dejar reposar
por 60 minutos. Aadir en cada baln 1 ml de la Solucin
de bisulfito de sodio y homogeneizar. Aadir 100 L de
la Solucin de cromotropato disdico para cada baln y
homogeneizar. Todas las soluciones deben ser analizadas
hasta 1 hora despus de la adicin de la Solucin de cromo-
tropato disdico. Aadir, cuidadosamente, 6 ml de cido
sulfrico cada baln, homogeneizar y esperar que las solu-
ciones alcancen la temperatura ambiente.
Nota: la diluicin del cido sulfrico produce calor con-
siderable y puede causar la ebullicin de la solucin.
Realizar esa adicin cuidadosamente. El gas de dixido
de azufre ser liberado. La utilizacin de una cmara de
extraccin es recomendada.
Diluir cada solucin con cido sulfrico diluido hasta lle-
nar el volumen y homogeneizar. Concomitantemente, de-
terminar las absorbancias (5.2.14) de las soluciones a partir
de la Solucin estndar y de la Solucin prueba en clulas
de 1 cm, en el largo de onda de absorbancia mxima a cer-
ca de 575 nm, utilizando como blanco la solucin retirada

del medio de extraccin en Agua purificada. La absorban-
cia de la solucin obtenida a partir de la Solucin de prue-
ba no es superior a la de la solucin obtenida a partir de la
Solucin estndar, correspondiendo, como mximo, 1 ppm
de etilenoglicol.
MTODOS DE PRUEBAS
Reflectancia Interna Mltiple
Equipos. Utilizar espectrofotmetro de infrarrojo capaz de
corregir para el espectro del blanco y equipado con un ac-
cesorio de reflexin total atenuada y una placa KRS-5 de
reflexin interna. El cristal KRS-5 de 2 mm de espesor, con
un ngulo de incidencia de 45 da un nmero suficiente de
reflexiones.
Preparacin de la muestra. Cortar dos porciones pla-
nas representativas de la espesor media de la pared del
recipiente, y apararlas conforme necesario, para obtener
segmentos adecuados para montaje en el accesorio de re-
flectancia interna mltiple. Para evitar rayar la superficie,
limpiar las muestras con papel seco o, si necesario, con un
pao suave humedecido con metanol y aguardar el secado.
Encajar firmemente las muestras en ambos lados de la pla-
ca de reflexin interna KRS-5, garantizando la superficie
de contacto adecuada. Antes de colocar las muestras sobre
la placa, comprimirlas obteniendo pelculas finas unifor-
mes para ser expuestas a temperaturas de cerca de 177 C,
bajo alta presin (15 000 psi o ms).
Procedimiento General. Colocar las partes encajadas de
la muestra en el accesorio de reflectancia interna mltiple y
colocar el conjunto en el haz de luz del espectrofotmetro de
infrarrojo. Ajustar la posicin de la muestra y los espejos del
equipo para permitir la transmisin mxima de luz por el haz
de referencia no-atenuado. Completar los ajustes del acceso-
rio, atenuar el haz de referencia para permitir la escala total
de deflexin, durante el barrido de la muestra. Determinar
el espectro infrarrojo de 3500 a 600 cm-1 para polietileno y
polipropileno y de 4000 a 400 cm-1 para PET y PETG.
Anlisis Trmico
Procedimiento General. Cortar una seccin con peso
aproximado de 12 mg y colocarla en el compartimiento
para la muestra. El contacto prximo entre el comparti-
miento y el termoelemento es esencial para la reproducti-
bilidad de los resultados. Determinar el termograma bajo
nitrgeno, utilizando las condiciones de calentamiento y
enfriamiento conforme especificadas para el tipo de resina
y utilizar un equipo capaz de realizar las determinaciones.
Para Polietileno. Determinar el termograma bajo nitrge-
no en temperaturas entre 40 C y 200 C, a una tasa de
calentamiento entre 2 C y 10 C por minuto, seguido de
enfriamiento para 40 C, a una tasa entre 2 C y 10 C por
minuto.
Para Polipropileno. Determinar el termograma bajo ni-
trgeno en temperaturas que varen entre la temperatura
ambiente y 30 C arriba del punto de fusin. Mantener la
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 293
temperatura por 10 minutos, en seguida, enfriar para 50 C
abajo de la temperatura mxima de cristalizacin a una tasa
de 10 C a 20 C por minuto.
Para poli (tereftalato de etileno). Calentar la muestra de
la temperatura ambiente hasta 280 C a una tasa de calen-
tamiento de cerca de 20 C por minuto. Mantener la mues-
tra a 280 C por 1 minuto. Enfriar rpidamente la muestra
para la temperatura ambiente y recalentarla para 280 C a
una tasa de calentamiento de aproximadamente 5 C por
minuto.
Para poli (tereftalato de etileno) glicol. Calentar la mues-
tra de la temperatura ambiente hasta 120 C a una tasa de
calentamiento de cerca de 20 C por minuto. Mantener la
muestra a 120 C por 1 minuto. Enfriar rpidamente la
muestra para temperatura ambiente y recalentarla para 120
C a una tasa de calentamiento de aproximadamente 10 C
por minuto.
Pruebas Biolgicas
Las Pruebas biolgicas in vitro son realizadas de acuerdo
con los procedimientos establecidos en Pruebas de reacti-
vidad biolgica in vitro (6.2.5). Los componentes que satis-
facen los requisitos de las Pruebas in vitro no precisan ser
sometidos a pruebas adicionales. Ninguna designacin de
clase de plstico es atribuida a esos materiales. Los materia-
les que no cumplen los requisitos de las Pruebas in vitro no
6
son adecuados para uso como recipientes de medicamentos.
Si la designacin de clase fuese necesaria para plsticos y
otros polmeros que atiendan a los requisitos previstos en
Pruebas de reactividad biolgica in vitro (6.2.5), realizar la
prueba in vivo adecuado especificado para Clasificacin
de Plsticos en Pruebas de reactividad biolgica in vivo
(6.2.6).
Pruebas Fsico Qumicas
Las siguientes pruebas destinadas a determinar las pro-
piedades fsicas y qumicas de plsticos y sus extractos,
estn basadas en la extraccin de material plstico, siendo
esencial que la cantidad designada del plstico sea utiliza-
da. Adems de eso, el rea de superficie especificada debe
estar disponible para la extraccin en la temperatura deter-
minada.
Parmetros de la prueba:
Medio de Extraccin. A menos que realizada de otra for-
ma en una prueba especfica a continuacin, utilizar Agua
Purificada como medio de extraccin, manteniendo la
temperatura a 70 C, durante la extraccin para la Prepa-
racin de la muestra.
Blanco. Utilizar Agua Purificada donde el blanco es espe-
cificado en las Pruebas que siguen.
Equipos. Utilizar bao mara y Recipientes de extraccin,
conforme descrito en Pruebas de reactividad biolgica in
 294 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
vivo (6.2.6). Proceder conforme descrito en la Preparacin
de equipos en Pruebas de reactividad biolgica in vivo
(6.2.6). Los recipientes y equipos no precisan ser estriles.
Preparacin de la Muestra. A partir de una muestra ho-
mognea de plstico, utilizar una alcuota para cada 20 ml
de medio de extraccin, equivalente a 120 cm2 del rea
de la superficie total (uniendo ambos lados), y subdividida
en bandas de, aproximadamente, 3 mm de ancho y prxi-
mo a 5 cm de largo. Transferir la muestra subdividida para
una probeta de vidrio tipo I, graduada, de 250 ml con tapa
y aadir cerca de 150 ml de Agua purificada. Agitar por,
aproximadamente, 30 segundos, vaciar, descartar el lqui-
do y repetir un segundo lavado.
Extraccin para Preparacin de la Muestra. Transferir
la Preparacin de la muestra pronta para un frasco de ex-
traccin adecuado y aadir la cantidad solicitada de medio
de extraccin. Extraer por 24 horas por calentamiento en
un bao mara en la temperatura especificada para el medio
de extraccin. Enfriar para temperaturas no abajo de 20 C.
Pipetear 20 ml del extracto preparado para un recipiente
adecuado. Utilizar esa parte en la prueba para Capacidad
Tamponante. Decantar, inmediatamente, el extracto resi-
dual en un recipiente limpio adecuado y cerrarlo.
Residuo No Voltil. Transferir, en alcuotas adecuadas, 50
ml del Extracto de Preparacin de la muestra para un cri-
sol adecuado tarado (preferencialmente un crisol de slice
6
fundida que haya sido limpiado con cido) y evaporar la
parte voltil en un bao a vapor. Evaporar de forma se-
mejante 50 ml del Blanco en otro crisol. Si se espera un
residuo oleoso, examinar repetidamente el crisol durante
la evaporacin y el proceso de secado y reducir la canti-
dad de calor, si el aceite tiende a deslizar por la pared del
crisol. Secar a 105 C por 1 hora. La diferencia entre las
cantidades obtenidas del Extracto para la Preparacin de
la muestra y el Blanco no debe ser superior a 15 mg.
Residuo por incineracin (5.2.10). No es necesario reali-
zar esta prueba cuando el resultado de la prueba de Residuo
No Voltil no exceda 5 mg. Proceder con la obtencin de
los residuos, a partir del Extracto para la Preparacin de
la muestra y Blanco descrito en la prueba para Residuo No
Voltil arriba, utilizando, si necesario, ms cido sulfrico
para la misma cantidad en cada crisol. La diferencia entre
las cantidades obtenidas de residuo de ignicin a partir del
Extracto para la Preparacin de la muestra y del Blanco
no debe ser superior a 5 mg.
Metales Pesados. Pipetear 20 ml del Extracto de la Prepa-
racin de la muestra, filtrado, si necesario, para uno de los
dos tubos de 50 ml para comparacin de color. Ajustar el
pH entre 3,0 y 4,0 con cido actico M o hidrxido de amo-
nio 6 M, utilizando un papel indicador de corto intervalo de
pH. Diluir con agua hasta cerca de 35 ml y homogeneizar.
Pipetear 2 ml de Solucin estndar de plomo (10 ppm Pb)
(5.3.2.3), transferir para el segundo tubo para comparacin
de color y aadir 20 ml del Blanco. Ajustar el pH entre 3,0
y 4,0 con cido actico M o hidrxido de amonio 6 M, uti-
lizando un papel indicador de corto intervalo de pH. Diluir
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
con agua hasta cerca de 35 ml y homogeneizar. En cada
tubo, aadir 1,2 ml de tioacetamida SR y 2 ml de Tampn
acetato pH 3,5 (5.3.2.3), diluir con agua hasta 50 ml de so-
lucin y homogeneizar. Cualquier color producido dentro
de 10 minutos en la preparacin que contiene el Extracto
de la Preparacin de la muestra extrado de los recipientes
pruebas, no debe ser ms intenso que en la Preparacin
estndar, ambas visualizadas sobre una superficie blanca
(1 ppm en el extracto).
Capacidad Tamponante. Titular, potenciomtricamente,
las alcuotas de 20 ml, previamente recopiladas, del Ex-
tracto de la Preparacin de la muestra para un pH 7,0,
utilizando cido clorhdrico 0,010 M o hidrxido de sodio
0,010 M, conforme necesario. Tratar, semejantemente, una
alcuota de 20 ml del Blanco. Si el mismo titulante fuese
necesario para ambos los titulados, la diferencia entre los
dos volmenes no debe ser superior a 10 ml; y si el cido
fuese necesario o para el Extracto de la Preparacin de la
muestra, o para el Blanco, y el lcali para el otro, el total de
los dos volmenes solicitados no debe ser superior a 10 ml.
6.2.2 TAPAS DE ELASTMERO
Tapas de elastmero son fabricadas en materiales obteni-
dos a partir de la polimerizacin, poli adicin o poli con-
densacin de sustancias orgnicas. Los polmeros obteni-
dos son, generalmente vulcanizados. Las formulaciones
de las tapas contienen elastmeros naturales o sintticos y
aditivos inorgnicos y orgnicos para auxiliar o controlar
la vulcanizacin, proporcionar propiedades fsicas y qu-
micas, coloracin, o estabilizar la formulacin de la tapa.
Para tapas formuladas con sustancias de elastmero natu-
rales o sintticas, utilizadas para almacenamiento de largo
plazo. No se aplica a las tapas fabricadas en elastmero de
silicona, pero se aplica a las tapas tratadas con silicona,
como dimeticona, y tapas revestidas con otros materiales
lubricantes, como materiales ligados qumicamente, o me-
cnicamente a la tapa.
Los comentarios a continuacin se refieren apenas a las
tapas laminadas o revestidas con materiales destinados
a suministrar o funcionar como una barrera a la base del
elastmero, por ejemplo poli (tetrafluoretileno) (PTFE) o
revestimientos barnizados. No es permitida la utilizacin
de un material con el intuito de transformar una tapa que no
se encuentra dentro de las exigencias especficas para una
que est en conformidad. Sin embargo, todas las Pruebas
fsico-qumicas se aplican a la frmula base de tales tapas,
as como a las tapas laminadas o revestidas. Las pruebas
de funcionalidad deben ser realizadas utilizando tapas de
elastmero laminadas o revestidas. Las pruebas biolgi-
cas se aplican a los materiales revestidos o laminados, as
como a la frmula base. Las pruebas biolgicas pueden ser
realizadas en tapas o materiales revestidos o laminados y
en tapas no laminadas y no revestidas, siendo que los re-
sultados deben ser reportados, separadamente. La frmula
base, utilizada en las pruebas fsico- qumicas, o biolgicas
debe cumplir las especificaciones de una tapa con barrera
de revestimiento que debe ser similar al revestimiento de la
tapa en configuracin y tamao.

Las pruebas de esa seccin se limitan a las tapas de elas-
tmero de los Tipos I y II, siendo que las del Tipo I son
utilizadas para preparaciones acuosas y las del Tipo II son
normalmente destinadas a las preparaciones no acuosas. Si
una tapa no atiende a todas las exigencias de la prueba del
Tipo I, pero atiende a las exigencias para la prueba del Tipo
II, la tapa recibe la clasificacin final del Tipo II.
En esa seccin se propone realizar una clasificacin inicial
para identificar tapas de elastmero que pueden ser apro-
piadas para el uso con preparaciones inyectables, con base
en sus compatibilidades biolgicas; en las propiedades f-
sico-qumicas de sus extractos acuosos y en sus funcionali-
dades. Todas las tapas de elastmero adecuadas para uso en
preparaciones inyectables cumplen tanto con los lmites de
la prueba del Tipo I como del Tipo II. Sin embargo, con esa
especificacin no se tiene el intuito de servir como un ni-
co criterio de evaluacin para la seleccin de tales tapas.
Entre los requisitos para evaluacin de tapas que estn ade-
ms del mbito de esa seccin est el establecimiento de
pruebas de identificacin y especificaciones de la tapa, la
verificacin de la tapa, compatibilidad fsico qumica del
producto, la identificacin y la determinacin de seguridad
de tapas filtrables encontradas en el embalaje del producto,
la verificacin de la funcionalidad del embalaje del pro-
ducto bajo condiciones reales de almacenamiento y condi-
ciones de uso.
El usuario de las tapas debe obtener del proveedor una ga-
ranta de que la composicin de la tapa no vara y de que es
la misma utilizada en la prueba de compatibilidad. Cuando
el proveedor informa al usuario final sobre cambios en la
composicin, la prueba de compatibilidad debe ser repeti-
da, total o parcialmente, dependiendo de la naturaleza de
los cambios.
CARACTERSTICAS
Las tapas de elastmero son translcidas, u opacas y no
tienen coloracin caracterstica, dependiendo de los aditi-
vos utilizados. Son homogneas y prcticamente exentas
de materiales luminosos y accidentales, como fibras, part-
culas extraas, y residuos de caucho.
IDENTIFICACIN
Las tapas son fabricadas a partir de una amplia variedad de
materiales elastomricos y revestimientos polimricos op-
cionales. Por tanto, en esa seccin no se especifica pruebas
de identificacin envolviendo todas las posibles presenta-
ciones de las tapas. Es de responsabilidad del proveedor
de la tapa y del fabricante del producto acabado verificar
la formulacin de la tapa y cualquier material revestido, o
laminado utilizado de acuerdo con las pruebas de identifi-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 295
cacin adecuadas. Ejemplos de algunas pruebas analticas
que pueden ser empleadas incluyen densidad especfica,
anlisis de cenizas, determinacin del contenido de azufre,
cromatografa en capa delgada del extracto, espectrofoto-
metra de absorcin ultravioleta del extracto, o espectrofo-
tometra de absorcin.
PROCEDIMIENTOS DE PRUEBAS
Las tapas de elastmero deben estar en conformidad con
las exigencias biolgicas; fsico-qumicas y funcionales.
Como las tapas de elastmero son procesadas por el pro-
veedor antes de la distribucin para el usuario final, el pro-
veedor debe demostrar la conformidad de las tapas expues-
tas a las etapas de procesamiento o esterilizacin. De modo
anlogo, si las tapas de elastmero recibidas por el usuario
final fueren procesadas, o esterilizadas, subsiguientemente,
el usuario final es responsable en comprobar la conformi-
dad continuada de las tapas subsiguientes a las condiciones
de procesamiento o esterilizacin. Eso es importante si las
tapas son expuestas a procesos o condiciones que puedan
tener impacto significativo en las caractersticas biolgi-
cas, fsico-qumicas o funcionales de la tapa, como la ra-
diacin gamma.
Para tapas que normalmente son lubricadas con silicona
antes del uso, es permitido realizar la prueba fsico-qu-
mica en tapas no lubricadas para evitar interferencia po-
6
tencial de mtodo y/o dificultades en la interpretacin de
los resultados de la prueba. Para tapas suministradas con
otros lubricantes no oclusivos, todas las pruebas deben ser
realizadas utilizando la tapa revestida.
Para tapas revestidas, o laminadas con revestimientos des-
tinados a proporcionar una funcin de barrera, como PTFE,
o revestimientos barnizados, las Pruebas fsico-qumicas
sern aplicadas al elastmero con base no revestida, as
como a las tapas revestidas. La tapa no revestida sometida
a las Pruebas fsico-qumicas debe ser similar a la tapa re-
vestida en tamao y configuracin. Los usuarios finales de
tapas revestidas, tambin, son responsables en comprobar
la conformidad de esas tapas con las de las especificacio-
nes fsico- qumicas, procesadas o tratadas de una manera
que simula las condiciones normalmente empleadas por el
usuario final antes del uso.
En todos los casos es adecuados documentar las condicio-
nes de procesamiento, pre-tratamiento, esterilizacin o lu-
bricacin de la tapa cuando se relatan los resultados.
En la Tabla 1 estn resumidas las exigencias de las pruebas
de las tapas y las responsabilidades del proveedor y del
usuario final.
 296 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 1 - Exigencias de las pruebas de las tapas y las responsabilidades del proveedor.
Tipos de tapas (como
suministrados o Usados)
Tapas con o sin
revestimiento de silicona
Tapas con revestimientos
lubricantes (Materiales no
oclusivos, no silicona)
Pruebas Fsico qumicas
Las Pruebas deben ser
realizadas El uso de
silicona es opcional
Responsabilidad: proveedor
y usuario final
Las Pruebas deben
ser realizadas en tapas
revestidas Responsabilidad:
proveedor y usuario final
Pruebas de Funcionalidad
Las Pruebas deben ser
realizadas
El uso de silicona es
opcional Responsabilidad:
proveedor y usuario final
Las Pruebas deben
ser realizadas en tapas
revestidas Responsabilidad:
proveedor y usuario final
Pruebas Biolgicas
Las Pruebas deben ser
realizadas El uso de
silicona es opcional
Responsabilidad: proveedor
y usuario final
Las Pruebas deben
ser realizadas en tapas
revestidas Responsabilidad:
proveedor y usuario final

Tapas con revestimientos Las Pruebas deben
oclusivos ser realizadas en tapas
revestidas Responsabilidad:
proveedor y usuario final
Y:
Las Pruebas deben ser
realizadas en tapas no
revestidas (frmula base)
Responsabilidad: proveedor
Las Pruebas deben Las Pruebas deben
ser realizadas en tapas ser realizadas en tapas
revestidas Responsabilidad: revestidas
proveedor y usuario final O:
Las Pruebas deben ser
realizadas en tapas no
revestidas (frmula base)
y material laminado/
revestido (reportar los
resultados separadamente)
Responsabilidad: proveedor
y usuario final.

6
PRUEBAS BIOLGICAS
Son indicadas dos etapas de prueba. La primera etapa es
la realizacin de la prueba in vitro. Los materiales que no
atienden las exigencias de la prueba in vitro son sometidos
a la segunda atapa de pruebas in vivo, conforme descrito
en Pruebas de reactividad biolgica in vivo (6.2.6). Los
materiales que atienden las exigencias para las Pruebas in
vitro no necesitan ser sometidos a la prueba in vivo.
Las tapas Tipo I y Tipo II deben estar en conformidad con
las Pruebas de reactividad biolgica in vitro e in vivo.
las tapas y pesar. Cubrir la boca del frasco con un vaso de
precipitados de vidrio del Tipo I. Esterilizar en una autocla-
ve, de modo que la temperatura de 121 C 2 C sea alcan-
zada dentro de 20 a 30 minutos y mantener esa temperatura
durante 30 minutos. Dejar enfriar hasta alcanzar tempera-
tura ambiente durante un perodo de aproximadamente 30
minutos. Aadir agua purificada o agua para inyectables
para volver a la masa original. Agitar, decantar inmedia-
tamente y recoger el lquido. Ese lquido debe ser agitado
antes de ser utilizado en cada una de las pruebas.
Preparacin del Blanco

PRUEBAS FSICO-QUMICAS La preparacin del blanco debe ser realizada similarmente,

utilizando 200 ml de agua purificada, o agua para inyecta-
Desarrollo de la Preparacin S bles, omitiendo las tapas.

Colocar las tapas enteras, no cortadas, correspondientes a
un rea de superficie de (100 10) cm2 en un recipiente
de vidrio adecuado. Cubrir las tapas con 200 ml de agua
purificada o agua para inyectables. Se no es posible obte-
ner una tapa con el rea de superficie prescrita utilizando
tapas no cortadas, seleccionar un nmero de tapas que irn
a aproximarse de 100 cm2, y ajustar el volumen de agua
utilizado para el equivalente a 2 ml para cada 1 cm2 del
rea de superficie real de la tapa utilizada. Hervir por 5
minutos y enjuagar cinco veces con agua purificada o agua
para inyectables fra.
Colocar las tapas lavadas en un frasco de vidrio de cuello
largo del Tipo I, aadir la misma cantidad de agua purifica-
da o agua para inyectables, inicialmente adicionada a
Apariencia de la Preparacin (Turbidez y Coloracin)
Determinacin de la Turbidez
La determinacin de la turbidez puede ser realizada por
medio de comparacin visual (Procedimiento A), o instru-
mentalmente utilizando un turbidmetro adecuado (Procedi-
miento B). La evaluacin instrumental de la turbidez da una
prueba que no depende de la acuidad visual del analista.
Solucin de Sulfato de Hidracina. Disolver 1,0 g de sul-
fato de hidracina en agua y diluir con agua a 100,0 ml.
Dejar en reposo durante 4 a 6 horas.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 297

Solucin de Hexametilentetramina. Disolver 2,5 g de Preparacin Estndar de Opalescencia. Preparar una

hexametilentetramina en 25,0 ml de agua en frasco de vi-
drio, con tapn, de 100 ml.
Suspensin Stock de Opalescencia. Aadir 25,0 ml de la
solucin de sulfato de hidracina a la solucin de hexame-
tilentetramina en el frasco, mezclar y dejar en reposo du-
rante 24 horas. Esa suspensin es estable por 2 meses, si es
estocada en un recipiente de vidrio exento de defectos de
superficie. La suspensin no debe adherir al vidrio y debe
ser mezclada antes del uso.
suspensin a travs de la diluicin de 15,0 ml de la sus-
pensin stock de opalescencia con agua para 1000,0 ml. La
preparacin estndar de opalescencia es estable por, apro-
ximadamente, 24 horas despus de la preparacin.
Suspensiones de Referencia. Preparar de acuerdo con la
Tabla 2. Mezclar y agitar antes del uso. Suspensiones es-
tables de formacina que pueden ser utilizadas para prepa-
rar estndares estables estn disponibles comercialmente y
pueden ser utilizadas despus de la comparacin con estn-
dares preparados como descrito.

Tabla 2 - Preparado de las suspensiones de referencia.

Referencia Referencia Referencia Referencia
Suspensin A Suspensin B Suspensin C Suspensin D
Estndar de Opalescencia 5,0 ml 10,0 ml 30,0 ml 50,0 ml
Agua 95,0 ml 90,0 ml 70,0 ml 50,0 ml
Unidad de Turbidez Nefelomtrica 3 UTN 6 UTN 18 UTN 30 UTN

Procedimiento A. Comparacin Visual Utilizar tubos
de ensayo idnticos, de vidrio incoloro; transparente y neu-
tro; con una base plana y un dimetro interno de 15 a 25
mm. Llenar un tubo con largo de 40 mm con la Prepara-
cin S, un tubo de mismo largo con agua y cuatro otros tu-
bos de mismo largo con las Suspensiones de Referencia A,
B, C y D. Comparar las preparaciones a luz del da difusa 5
minutos despus de la preparacin de las Suspensiones de
examinada es como descrito arriba, o si su opalescencia no
es ms pronunciada del que la Suspensin de Referencia A
(consultar la Tabla 3).
Procedimiento B. Comparacin Instrumental: Medir la
turbidez de las Suspensiones de Referencia en un turbid-
metro calibrado adecuado. El blanco debe ser probado y
los resultados corregidos para el blanco. Las Suspensiones

Referencia, visualizando, verticalmente, contra un fondo
negro. Las condiciones de luz deben ser tales que la Sus-
pensin de Referencia A pueda ser rpidamente distinguida
del agua y que la Suspensin de Referencia B pueda ser
rpidamente distinguida de la Suspensin de Referencia A.
Lmite. La Preparacin S no debe ser ms opalescente que
la Suspensin de Referencia B para las tapas del Tipo I, y
no ms opalescente del que a Suspensin de Referencia C
para las tapas del Tipo II. La Preparacin S es considerada
lmpida si la claridad es la misma que la del agua cuando
6
de Referencia A, B, C y D representan 3, 6, 18 y 30 Uni-
dades de Turbidez Nefelomtricas (UTN) respectivamente.
Medir la turbidez de la Solucin S utilizando el turbidme-
tro calibrado.
Lmite. La turbidez de la Solucin S no debe ser mayor del
que aquella para la Suspensin de Referencia B (6 UTN)
para las tapas del Tipo I, y no es mayor que la de la Sus-
pensin de Referencia C (18 UTN) para las tapas del Tipo
II (Tabla 3).

Tabla 3 - Mtodo de comparacin de la turbidez desarrollada en las preparaciones.

Exigencias de Opalescencia Procedimiento A (visual) Procedimiento B (Instrumental)
Tapas del Tipo I No ms opalescente que la Suspensin B No ms que 6 UTN
Tapas del Tipo II No ms opalescente que la Suspensin C No ms que 18 UTN

Determinacin del Color terno de 15 a 25 mm. Colocar en un tubo, la Preparacin S,

formando una columna lquida de 40 mm de largo y en un
Color Estndar. Preparar una diluicin 3,0 ml del Fluido segundo el Estndar de Color formando la misma columna
de Correspondencia O con 97,0 ml de cido clorhdrico lquida. Comparar los lquidos a luz diurna difusa, visuali-
diluido. zando, verticalmente, contra un fondo blanco.

Procedimiento. Utilizar tubos idnticos, de vidrio neutro, Lmite. La Preparacin S no debe ser ms intensamente
incoloro, transparente, con un fondo plano y dimetro in- colorida que el Estndar de Color.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 298 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Acidez o Alcalinidad
Solucin de Azul de Bromotimol. Disolver 50 mg de azul
de bromotimol en una mezcla de 4 ml de hidrxido de sodio
a 0,02 M y 20 ml de alcohol. Diluir con agua para 100 ml.
Procedimiento. Aadir 0,1 ml de la solucin de azul de
bromotimol a 20 ml de la Preparacin S.
Si la preparacin se queda amarilla, titular con hidrxido
de sodio a 0,01 M hasta que el punto final azul sea alcan-
zado.
Si la preparacin se queda azul, titular con cido clorhdri-
co a 0,01 M hasta que el punto final amarillo sea alcanzado.
Si la preparacin se queda verde, ella es neutra y no es
necesaria la titulacin.
Correccin del Blanco. Probar 20 ml del blanco de modo
similar. Corregir los resultados obtenidos para la Prepara-
cin S a travs de la sustraccin o adicin del volumen de
titulante requerido para el blanco, como apropiado.
Lmite. No ms que 0,3 ml de hidrxido de sodio a 0,01 M
produce un color azul, o no ms que 0,8 ml de cido clor-
hdrico a 0,01 M produce un color amarillo, o la titulacin
no es necesaria.
6
Absorbancia
Procedimiento. Realizar esta prueba en el espacio de tiem-
po de 5 horas despus de desarrollar la Preparacin S. Fil-
trar la Preparacin S a travs de un filtro con poro de 0,45
m, descartando el primer ml de lo filtrado. Medir la absor-
bancia de lo filtrado en largos de onda entre 220 y 360 nm
en una clula de 1 cm utilizando el blanco en una clula de
correspondencia en un haz de referencia. Si la diluicin del
filtrado es necesaria antes de la medida de la absorbancia,
corregir los resultados de la prueba para la diluicin.
Lmite. Las absorbancias en todos esos largos de onda no
deben exceder 0,2 para las tapas del Tipo I o 4,0 para las
tapas del Tipo II.
Sustancias Reductoras
Procedimiento. Realizar esta prueba en el espacio de tiem-
po de 4 horas despus de desarrollar la Preparacin S. A
20,0 ml de la Preparacin S aadir 1 ml de cido sulfri-
co diluido y 20,0 ml de permanganato de potasio a 0,002
M. Hervir por 3 minutos. Enfriar, aadir 1 g de yoduro de
potasio, y titular, inmediatamente, con tiosulfato de sodio
a 0,01 M, utilizando 25,0 ml de solucin de almidn TS
como indicador. Realizar la titulacin utilizando 20,0 ml
de blanco y notar la diferencia en el volumen de tiosulfato
de sodio a 0,01 M necesario.
Lmite. La diferencia entre los volmenes de titulacin no
debe ser mayor que 3,0 ml para las tapas del Tipo I y no
debe ser mayor que 7,0 ml para las tapas del Tipo II.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Metales Pesados
Procedimiento. Proceder como realizado para el Mtodo 1
en Metales Pesados. Usar 10,0 ml de la Preparacin S, en
la preparacin problema.
Lmite. 2 ppm de metales pesados como plomo.
Zinc Extrable.
Solucin Prueba. Preparar una Solucin Prueba por me-
dio de la diluicin de 10,0 ml de la Preparacin S para 100
ml con cido clorhdrico a 0,1 M. Preparar el blanco de la
prueba similarmente, utilizando el blanco para la Prepa-
racin S.
Solucin Estndar de Zinc. Preparar una solucin (10
ppm de Zn) disolviendo sulfato de zinc en cido clorh-
drico 0,1 M
Soluciones de Referencia. Preparar, como mnimo, 3 So-
luciones de Referencia por medio de la diluicin de la So-
lucin Estndar de Zinc con cido clorhdrico 0,1 M. Las
concentraciones de zinc en estas Soluciones de Referencia
son la extensin del lmite esperado de la Solucin Prueba.
Procedimiento. Utilizar un espectrmetro de absorcin
atmica; adecuado y equipado con una fuente de radiacin
electromagntica, adecuada y una llama de aire acetileno.
Un procedimiento alternativo como un anlisis por espec-
trometra de masa o espectrometra de emisin ptica con
plasma inductivamente acoplado, apropiadamente valida-
do puede ser utilizado.
Probar cada una de las Soluciones Referencia en largo de
onda para Zinc seleccionado en 213,9 nm, por lo menos 3
veces. Registrar las lecturas estables. Enjuagar el equipo
con la solucin blanco, toda vez para garantizar que la lec-
tura retorna al valor inicial del blanco. Preparar una curva
de calibracin a partir de la media de las lecturas obtenidas
para cada Solucin de Referencia. Registrar la absorban-
cia de la Solucin Prueba. Determinar la concentracin de
zinc en ppm de la Solucin Prueba utilizando la curva de
calibracin.
Lmite. La Preparacin S contiene, como mximo, 5 ppm
de zinc extrable.
Amonio
Solucin de Tetrayodomercurato (II) de Potasio Alcali-
na. Preparar una solucin de 100 ml conteniendo 11 g de
yoduro de potasio y 15 g de yoduro de mercurio en agua.
Inmediatamente antes del uso, mezclar 1 volumen de esa
solucin con igual volumen de una solucin a 250 g por L
de hidrxido de sodio.
Solucin Prueba. Diluir 5 ml de la Preparacin S en 14
ml de agua. Tornar alcalina, si necesario, por medio de la
adicin de hidrxido de sodio 1 M, y diluir en agua a 15 ml.
Aadir 0,3 ml de la solucin de tetrayodomercurato (II) de
potasio alcalina, y cerrar el recipiente.

Solucin Estndar de Amonio. Preparar una solucin de
cloruro de amonio en agua (1 ppm de NH4). Mezclar 10
ml de la solucin de 1 ppm de cloruro de amonio con 5 ml
de agua y 0,3 ml de solucin de tetrayodomercurato (II) de
potasio alcalina. Cerrar el recipiente.
Lmite. Despus de 5 minutos, cualquier color amarillo en
la Solucin Prueba no debe ser ms oscuro que en la Solu-
cin Estndar de Amonio (como mximo, 2 ppm de NH4
en la Preparacin S).
Sulfuros Voltiles
Procedimiento. Colocar las tapas, cortar si necesario, con
un rea de superficie total de (20 2) cm2 en un frasco de
100 ml, y aadir 50 ml de una solucin de cido ctrico a 20
g por L. De la misma manera y al mismo tiempo, preparar
una solucin control en un frasco de 100 ml separado por
medio de la disolucin de 0,154 mg de sulfuro de sodio
en 50 ml de una solucin de cido ctrico a 20 g por L.
Colocar un pedazo de papel de acetato de plomo sobre la
boca de cada frasco, y agarrar el papel en la posicin, co-
locndolo sobre un frasco de pesaje invertido. Caliente los
frascos en autoclave a 121 C 2 C por 30 minutos.
Lmite. Cualquier coloracin negra en el papel producida
por la Preparacin S no es ms intensa que la producida
por la solucin control.
PRUEBAS FUNCIONALES
Las muestras tratadas como descrito para obtener la Prepa-
racin S y secas al aire deben ser utilizadas para las Prue-
bas de Funcionalidad; de Penetrabilidad; Fragmentacin
y Capacidad Autosellante. Las Pruebas de Funcionalidad
son realizadas en tapas destinadas a ser penetradas por una
aguja hipodrmica. La prueba de Capacidad autosellante
es necesaria apenas para tapas destinadas para recipientes
de dosis mltiple. La aguja especificada para cada prueba
es una aguja hipodrmica lubricada con bisel largo (ngulo
del bisel 12 2)2.
Penetrabilidad
Procedimiento. Llenar 10 frascos adecuados al volumen
nominal, con agua, ajustar las tapas a ser examinadas y ce-
rrar los frascos con las respectivas tapas. Utilizando una
nueva aguja hipodrmica, como ya descrito, para cada tapa,
perforar la tapa con la aguja perpendicular a la superficie.
Lmite. La fuerza para perforacin de cada tapa no debe
ser mayor que 10 N (1 kgf), determinada con una precisin
de 0,25 N (25 gf).
Fragmentacin
Tapas para Preparaciones Lquidas. Llenar 12 frascos
limpios con agua hasta 4 ml menos que la capacidad nomi-
2 Se refiere a la ISO 7864, agujas hipodmicas estrileis de uso nico con
un dimetro externo de 0,8 mm (calibre 21).
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 299
nal. Ajustar las tapas que sern examinadas, cerrar con una
tapa y dejar en reposo por 16 horas.
Tapas para Preparaciones Secas. Ajustar las tapas a ser
examinadas en 12 frascos limpios y cerrar cada uno con
una tapa.
Procedimiento. Utilizando una aguja hipodrmica como
descrito anteriormente, ajustada a una jeringa limpia, in-
yectar dentro de cada frasco 1 ml de agua, mientras se re-
mueve 1 ml de aire. Repetir ese procedimiento 4 veces para
cada tapa, perforar cada vez en un local diferente. Utilizar
una nueva aguja para cada tapa, verificando si ella no se
rompi durante la prueba. Filtrar el volumen total del l-
quido en todos los frascos a travs de un filtro simple con
tamao nominal de poro no mayor que 0,5 m. Contar los
fragmentos de caucho en la superficie del filtro visibles a
ojo.
Lmite. No hay ms que 5 fragmentos visibles. Ese lmite
est basado en la asuncin de que los fragmentos con un
dimetro superior a 50 m son visibles a ojo. En el caso
de dudas o controversia, las partculas son examinadas mi-
croscpicamente para verificar sus naturalezas y tamaos.
Capacidad Autosellante
Procedimiento. Llenar 10 frascos adecuados con agua has-
ta el volumen nominal. Ajustar las tapas a ser examinadas y
6
tapar. Utilizando una nueva aguja hipodrmica como ante-
riormente para cada tapa, perforar cada tapa 10 veces, cada
vez en un local diferente. Sumergir los 10 frascos en una
solucin de azul de metileno a 0,1% (1 g por L), y reducir
la presin externa por 27 kPa por 10 minutos. Restaurar la
presin atmosfrica, y dejar los frascos inmersos por 30
minutos. Enjuagar la parte externa de los frascos.
Lmite. Ninguno de los frascos debe contener cualquier
trazo de solucin azul.
6.2.3 1 RECIPIENTES DE
PLSTICO PRUEBAS DE
DESEMPEO
En esa seccin estn propuestos estndares para las pro-
piedades funcionales de recipientes plsticos y sus com-
ponentes utilizados para acondicionar medicamentos. Las
Pruebas a continuacin son establecidas para determinar
la permeabilidad a la humedad y transmisin de luz de los
recipientes plsticos aplicables a cada tipo de embalaje.
Un recipiente destinado a suministrar proteccin a la luz,
o presentado como recipiente resistente a la luz debe sa-
tisfacer la exigencia de Prueba de Transmisin de la luz
(6.2.3.5), donde la proteccin, o la resistencia es debido
a las propiedades especficas del material de que el reci-
piente es compuesto, incluyendo cualquier revestimiento
aplicado a l. Un recipiente claro e incoloro, o translcido,
fabricado como resistente a la luz por medio de inclusin
de compuesto opaco est exento de los requisitos del tem
Pruebas de Transmisin de luz (6.2.3.5). De la forma como
 300 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

utilizado en ese captulo, el trmino recipiente se refiere al V es el volumen en ml del recipiente, (TF TI) es la dife-
sistema completo incluyendo el recipiente en s, el revesti- rencia en mg entre el peso final e inicial de cada recipiente
miento cuando utilizado, el cierre en el caso de recipientes prueba; (CF CI) es la diferencia en mg entre el promedio
de unidades mltiples y las tapas y blster en los casos de final y el promedio inicial de los pesos de los 2 controles.
recipientes de dosis unitaria.
Tabla 1 - Momento aplicable al recipiente con tapa tipo rosca.
6.2.3.1 RECIPIENTES DE MLTIPLES
Intervalo de apriete
UNIDADES PARA CPSULAS Y Dimetro de Cierre sugerido con momento
COMPRIMIDOS (mm) aplicado manualmente
Desecante. Colocar una cantidad de cloruro de calcio an- (pulgadas / libras)
hidro (1) de 4 a 8 mesh en un recipiente raso, teniendo el 8 5
cuidado de excluir cualquier polvo fino, secar a 110 C du- 10 6
rante una hora y enfriar en un desecador. 13 8
15 5-9
Procedimiento. Seleccionar 12 recipientes de tamaos y 18 7-10
tipo uniformes, limpiar las superficies de cierre con un pao 20 8-12
exento de fibras, cerrar y abrir cada recipiente 30 veces. Ta- 22 9-14
par firme y uniformemente toda vez que el recipiente es ce- 24 10-18
rrado. Tapar los recipientes con tapa de rosca con movimien- 28 12-21
to de momento que est dentro del intervalo especificado en 30 12-23
la Tabla 1. Aadir desecantes a 10 recipientes, designados 33 15-25
recipientes pruebas, llenar cada uno hasta 13 mm del cierre 38 17-26
si el volumen fuese de 20 ml o superior, o llenar cada uno 43 17-27
hasta dos tercios de la capacidad si el volumen del recipiente 48 19-30
fuese inferior a 20 ml. Si la parte interna del recipiente posee 53 21-36
ms de 63 mm de profundidad, un embudo inerte o separa- 58 23-40
dor debe ser colocado en el fondo para minimizar el peso 63 25-43
total del recipiente y del desecante; la capa de desecante en 66 26-45

6
tal recipiente no debe ser inferior a 5 cm en profundidad.
Cerrar cada uno, inmediatamente despus de la adicin del
desecante, aplicando el momento designado en la Tabla 1 en
el caso de recipientes con tapa de rosca. Para cada uno de los
2 recipientes remanentes, designados como controles, aadir
un nmero suficiente de esferas de vidrio para alcanzar un
peso aproximadamente igual a los de los recipientes pruebas
y cerrar aplicando el momento designado en la Tabla 1 en el
caso de recipientes con tapa a rosca. Registrar el peso de los
recipientes, individualmente, as, preparados hasta la apro-
ximacin de 0,1 mg si el volumen del recipiente es inferior
a 20 ml, o hasta la aproximacin en mg ms prximo si el
volumen del recipiente es de 20 a 200 ml, o hasta a aproxi-
macin en centigramos (10 mg) si el volumen es de 200 ml
o superior. Almacenar a la humedad relativa de (75 3) % y
a la temperatura de 23 C 2 C. Un sistema saturado de 35
g de cloruro de sodio para cada 100 ml de agua colocado en
el fondo del desecador mantiene la humedad especificada,
u otros mtodos pueden ser empleados para mantener esas
condiciones. Despus de 336 h 1 h (14 das), registrar el
peso de los recipientes individualmente de la misma forma.
Llenar, completamente, 5 recipientes vacos del mismo ta-
mao y tipo de los recipientes pruebas con agua o un slido
no compresible, de flujo libre tal como esferas de vidrio pe-
queas bien acomodadas hasta nivel indicado por la superfi-
cie del cierre. Transferir el contenido de cada recipiente para
una probeta graduada, y determinar el volumen promedio
del recipiente en ml. Calcular la tasa de permeabilidad a la
humedad, en mg por da, por L, por medio de la frmula:
(1000/14V)[(TF-TI)-(CF-CI)]
en que
70 28-50
83 32-65
86 40-65
89 40-70
100 45-70
110 45-70
120 55-95
132 60-95
a El momento designado para el prximo dimetro de cierre mayor debe
ser aplicado en los recipientes prueba que tengan un dimetro de cierre
intermedio a los dimetros listados.
b utilizar equipamiento adecuado para medicin de momento.
Para recipientes utilizados en medicamentos concedidos
bajo prescripcin, los recipientes as probados son del tipo
recipientes sellados, si no ms que uno de los 10 recipien-
tes pruebas excede a 100 mg por da por L en permeabili-
dad a la humedad, y ninguno excede a 200 mg por da por
L. Para recipientes utilizados para medicamentos dispen-
sados bajo prescripcin, los recipientes son bien cerrados
si no ms que uno de los 10 recipientes pruebas excede a
2000 mg por da por L en permeabilidad a la humedad y
ninguno excede a 3000 mg por da por L.
RECIPIENTES DE UNIDADES MLTIPLES PARA
CPSULAS Y COMPRIMIDOS (sin cierre)
Recipiente de Polietileno. Cerrar los recipientes, con se-
llos impenetrables obtenidos por medio de sellado caliente
con una hoja de aluminio laminada con polietileno u otro
sellado adecuado. Probar los recipientes conforme descri-
to arriba. Los recipientes de polietileno de alta densidad,
probados atienden a los requisitos si la permeabilidad a la
humedad excede 10 mg por da por L, como mximo, en

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


1 de los 10 recipientes pruebas y no excede 25 mg por da
por L en ninguno de ellos. Los recipientes de polietileno
de baja densidad, as, probados atienden a los requisitos si
la permeabilidad a la humedad excede 20 mg por da por
L, como mximo, en 1 de los 10 recipientes pruebas y no
excede 30 mg por da por L en ninguno de ellos.
Recipientes de Polipropileno. Cerrar los recipientes, con
sellados impenetrables obtenidos por medio de sellado ca-
liente con una hoja de aluminio laminada con polietileno
u otro cierre adecuado. Probar los recipientes conforme
descrito arriba. Los recipientes atienden a los requisitos si
la permeabilidad a la humedad excede 15 mg por da por
L, como mximo, en 1 de los 10 recipientes pruebas y no
excede 25 mg por da por L en ninguno de ellos.
6.2.3.2 RECIPIENTES DE UNIDAD
SIMPLE Y DOSIS UNITARIA PARA
CPSULAS Y COMPRIMIDOS
Para permitir una evaluacin fundamentada con relacin
a la adecuabilidad del embalaje para un tipo especfico de
producto, los procedimientos y esquemas de clasificacin a
continuacin son presentados para evaluar las caractersti-
cas de permeabilidad a la humedad de los recipientes para
unidad simple y para dosis unitaria. Dado que los desem-
peos del equipo y del operador pueden afectar la penetra-
cin de humedad en un recipiente formado o cerrado, las
caractersticas de penetracin de humedad del sistema de
embalaje utilizado deben ser determinadas.
Desecante. Secar las pastillas desecantes apropiadas a 110
C durante 1 hora antes del uso. Utilizar pastillas con peso
aproximado de 400 mg cada una y con dimetro de, apro-
ximadamente, 8 mm. Si necesario, debido a la dimensin
limitada del recipiente de dosis unitaria, pueden ser utili-
zadas pastillas pesando menos que 400 mg cada una y con
dimetro inferior a 8 mm.
PROCEDIMIENTO
Mtodo I. Sellar no menos que 10 recipientes de dosis uni-
taria con una pastilla cada uno, y sellar 10 unidades adicio-
nales de recipientes de dosis unitaria vacos para control,
utilizando dedos de guantes o una pinza almohadada para
manipular los recipientes sellados. Numerar los recipientes
y registrar los pesos, individualmente, con la aproximacin
en mg ms prxima. Pesar los controles como una unidad y
dividir el peso total por el nmero de controles para obtener
el promedio. Almacenar todos los recipientes a una hume-
dad relativa de (75 3) % y a una temperatura de 23 C
2 C. Un sistema saturado de 35 g de cloruro de sodio para
cada 100 ml de agua colocado en el fondo de un desecador
mantiene la humedad especificada, u otros mtodos pueden
ser empleados para mantener esas condiciones. Despus de
un intervalo de 24 horas, y en cada uno de sus mltiplos,
retirar los recipientes de la cmara, y dejar equilibrar du-
rante 15 a 60 minutos en el rea de pesaje. Nuevamente
registrar el peso de los recipientes individualmente y los
controles combinados de la misma manera. Si ninguna pas-
tilla indicadora se torna rosa durante los procedimientos, o
si el aumento de peso de la pastilla excede 10%, finalizar
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 301
la prueba y considerar vlida apenas las primeras determi-
naciones. Retornar los recipientes a la cmara de humedad.
Calcular la tasa de penetracin de humedad en mg por da
de cada recipiente utilizando a frmula:
(1/N) [ (WF WI) (CF CI) ]
en que
N es el nmero de das expirados en el perodo de prueba
(comenzando despus de las 24 horas iniciales de perodo
de equilibrio);
(WF WI) es la diferencia en mg entre los pesos finales e
iniciales de cada recipiente prueba;
(CF CI) es la diferencia en mg entre los pesos promedios
finales e iniciales de los controles, con los datos calculados
con relacin a dos cifras significativas. Cuando la pene-
tracin mensurada es inferior a 5 mg por da, y cuando es
observado que los controles alcanzan el equilibrio en un
plazo de 7 das, la penetracin individual puede ser deter-
minada ms precisamente, utilizando el recipiente prueba
del 7 da y el recipiente control como WI y CI, respectiva-
mente, en los clculos. En este caso, un intervalo adecuado
de prueba para Clase A no debe ser inferior a 28 das a par-
tir del perodo de equilibrio del 7 da (un total de 35 das).
Mtodo II. Utilizar ese procedimiento para embalajes,
como cartelas que pueden ser perforadas, que incorpo-
ran un nmero de blster o recipientes de dosis unitaria
sellados, separadamente. Sellar un nmero suficiente de
6
embalajes, como mnimo, 4 y un total de, como mnimo,
10 recipientes de dosis unitaria o blster llenados con una
pastilla en cada unidad a ser probada. Sellar un nmero co-
rrespondiente de embalajes vacos, cada uno conteniendo
el mismo nmero de recipientes de dosis unitaria o blster
iguales a los utilizados en los embalajes pruebas, como
controles. Almacenar todos los recipientes en humedad re-
lativa de (75 3) % y a la temperatura de 23 C 2 C. Un
sistema saturado de 35 g de cloruro de sodio para cada 100
ml de agua, colocado en el fondo del desecador mantiene
la humedad requerida, u otros mtodos pueden ser emplea-
dos para mantener esas condiciones. Despus de 24 horas
y cada 24 horas subsiguientes, retirar los embalajes de la
cmara y dejar que se equilibren a temperatura ambiente
durante aproximadamente 45 minutos. Registrar los pesos
de los embalajes individuales y retornarlos a la cmara.
Pesar los embalajes control como una unidad y dividir el
peso total por el nmero de embalajes control para obte-
ner el peso promedio de los embalajes vacos. Si cualquier
pastilla indicadora adquiere una coloracin rosa durante el
procedimiento o si el peso promedio de la pastilla excede
a 10% en cualquiera de los embalajes, finalizar la prueba
y considerar vlidas apenas las primeras determinaciones.
Calcular la tasa promedio de penetracin de humedad, en
mg por da para cada recipiente de dosis unitaria o blster,
en cada embalaje de acuerdo con la frmula:
(1/NX) ([WF-WI) (CF CI) ]
en que
N es el nmero de das transcurridos dentro del perodo de
la prueba (comenzando despus de las 24 horas iniciales de
perodo de equilibrio);
 302 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
X es el nmero de unidades selladas separadamente por
embalaje;
(WF WI) es la diferencia en mg entre los pesos iniciales y
finales de cada embalaje prueba;
(CF CI) es la diferencia en mg entre los pesos promedios
finales e iniciales de los embalajes control, siendo esas ta-
sas calculadas hasta dos cifras significativas.
Lmites. Los recipientes de dosis unitaria individuales,
como probados en el Mtodo I, son clasificados como Cla-
se A si, como mximo, 1 de los 10 recipientes probados
excede 0,5 mg por da en tasa de penetracin de humedad
y ninguno excede 1 mg por da; son clasificados como Cla-
se B si, como mximo, 1 de los 10 recipientes probados
excede 5 mg por da y ninguno excede 10 mg por da; son
clasificados como Clase C si, como mximo, 1 de los 10
recipientes probados excede 20 mg por da y ninguno ex-
cede 40 mg por da y son clasificados como Clase D si los
recipientes probados no cumplen ninguno de esos requisi-
tos de tasa de penetracin de humedad.
Los embalajes, de la forma como son probados en el M-
todo II, son clasificados como Clase A si ningn embalaje
probado excede 0,5 mg por da de tasa de penetracin de
humedad promedio por blster; son clasificados como Cla-
se B si ningn embalaje probado excede 5 mg por da de
tasa de penetracin de humedad en promedio por blster;
son clasificados como Clase C si ningn embalaje exce-
de 20 mg de tasa de humedad en promedio por blster y
6
son clasificadas como Clase D si ningn embalaje probado
cumple los requisitos de tasa de penetracin de humedad
en promedio por blster arriba mencionados.
Con el uso del desecante descrito en el Mtodo I y Mto-
do II, despus de cada 24 horas, los recipientes pruebas y
controles son pesados; los intervalos de prueba adecuados
para los pesajes finales, WF y CF, deben ser los siguientes:
24 horas para Clase D; 48 horas para Clase C; 7 das para
Clase B y, como mnimo, 28 das para Clase A .
6.2.3.3 RECIPIENTES DE DOSIS
MLTIPLE Y DE DOSIS UNITARIA PARA
LQUIDOS
Los estndares y las pruebas presentados en esta seccin
son usados para medir las caractersticas funcionales y de
desempeo de recipientes plsticos utilizados para embalar
productos acuosos por medio de la medida de la prdida de
peso de agua lquida como un porcentaje de su contenido.
Esta prueba, tambin, puede ser utilizada para demostrar
una comparacin funcional y de desempeo. Durante todo
el procedimiento, determinar los pesos de los sistemas in-
dividuales de cierre de los recipientes (recipiente, sellado
interno si utilizado, y cierre) ambos como pesos de tara y
pesos de envase, a una aproximacin de 0,1 mg si la ca-
pacidad mxima es inferior a 200 ml; una aproximacin
en mg si la capacidad mxima est entre 200 y 1000 ml o
una aproximacin en centigramos (10 mg) si la capacidad
mxima es de 1000 ml o superior.
Procedimientos para Pruebas de Recipientes Cerrados
Comercializados (tapn si aplicable, sellado interno y
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
tapa). Seleccionar 10 recipientes de tipo y tamao unifor-
mes y limpiar las superficies de sellado con un pao exento
de fibras. Montar cada recipiente con el tapn, si aplicable,
y sistema de cierre. Numerar cada sistema de cierre y re-
gistrar el peso tarado.
Retirar los cierres y con el auxilio de una pipeta, llenar los
recipientes con agua hasta la capacidad mxima. Montar
los recipientes con los sellados y aplicar los cierres. Si fue-
ren utilizadas tapas de rosca, aplicar el momento especifi-
cado en la Tabla 1 en Recipientes de mltiples unidades
para cpsulas y comprimidos (6.2.3.1) y almacenar los re-
cipientes cerrados a temperatura de 25 C 2 C y hume-
dad relativa de (50 2)%. Despus de 168 h 1 h (7 das),
registrar el peso de los recipientes individualmente. Retor-
nar los recipientes al local de almacenamiento durante 168
h 1 h ms. Despus de transcurrido el segundo perodo
de 168 h 1 h, retirar los recipientes, registrar los pesos
de cada sistema de recipiente, individualmente, y calcular
la tasa de penetracin de vapor de agua, en porcentaje de
prdida de peso de agua, para cada recipiente por medio de
la frmula:
(W7 W14) 365 x 100/(W7-Wt)7 = Porcentaje por ao
En que
W7 es el peso en mg del recipiente a los 7 das; W14 es el
peso en mg del recipiente a los 14 das;
WT es el peso de la tara en g;
7 es el tiempo de prueba en das, despus de 7 das de pero-
do de equilibrio. Los recipientes as probados cumplen los
requisitos y son considerados como recipientes firmemente
sellados si el porcentaje de prdida de peso de agua excede
2,5% por ao, como mximo, en 1 de los 10 recipientes
probados y no excede a 5,0%, por ao, en ninguno de ellos.
Los recipientes de dosis unitaria para lquidos cumplen los
requisitos de un recipiente firmemente sellado si el peso
promedio en prdida de peso de agua es inferior o igual a
2,5% (p/p) por ao y 5% al final de 2 aos.
Procedimiento para Pruebas de Recipientes de Dosis
Mltiples en Condiciones de Uso. Seleccionar 10 reci-
pientes de tipo y tamao uniformes. Se es utilizado un sella-
do interno, abrir los recipientes, cuidadosamente, y retirar
los sellados internos de cada uno. Montar cada recipiente
con tapn, si aplicable, y su sistema de cierre. Numerar
cada sistema de cierre de recipiente y registrar el peso de
la tara. Abrir y cerrar los recipientes 30 veces, teniendo
cuidado para no perder lquido durante ese procedimiento.
Cerrar los recipientes con tapa de rosca dentro del intervalo
de momento presentado en la Tabla 1 en Recipientes de
mltiples unidades para cpsulas y comprimidos (6.2.3.1)
y almacenar los recipientes sellados a la temperatura de
25 C 2 C y humedad relativa de (50 2)%. Despus
de 168 h 1 h (7 das), registrar el peso de los recipien-
tes, individualmente. Retornar al local de almacenamiento
durante de ms 168 h 1 h. Despus del segundo perodo
de 168 h 1 h, retirar los recipientes, registrar los pesos
de cada sistema de recipiente, individualmente, y calcular
la tasa de penetracin de vapor de agua, en porcentaje de

prdida de peso de agua, para cada recipiente por medio de
la frmula:
(W7 W14) 365 x 100/(W7-Wt)7 = Porcentaje por ao
en que
W7 es el peso en mg del recipiente a los 7 das;
W14 es el peso en mg del recipiente a los 14 das;
WT es el peso tarado en g y 7 es el tiempo de prueba en das,
despus de 7 das de perodo de equilibrio.
Los recipientes as probados cumplen los requisitos y son
considerados como recipientes firmemente sellados si el
porcentaje de prdida de peso de agua excede 2,5% por
ao, como mximo, en 1 de los 10 recipientes probados y
no excede a 5,0% en ninguno de ellos.
6.2.3.4 PRUEBA DE TRANSMISIN DE
LUZ
Equipo. Utilizar un espectrofotmetro de sensibilidad y
precisin, adecuadas, adaptado, para medir la cantidad de
luz transmitida por materiales plsticos, o de vidrio trans-
lcidos, o transparentes, utilizados como recipientes far-
macuticos. Adicionalmente, el espectrofotmetro debe
medir y registrar la luz transmitida difusa as como rayos
paralelos.
Procedimiento. Seleccionar secciones para representar el
espesor promedio de la pared del recipiente. Cortar sec-
ciones circulares de dos o ms reas del recipiente y pre-
parar lo necesario para suministrar segmentos de tamaos
convenientes para su insercin en el espectrofotmetro.
Cortar, lavar y secar cada muestra, teniendo cuidado de
evitar riesgos en la superficie. Si la muestra es muy peque-
a para cubrir la abertura en el soporte de muestra, cubrir
la porcin descubierta de la abertura con un papel opaco o
cinta adhesiva, haciendo con que el largo de la muestra sea
mayor que la abertura en el espectrofotmetro. Inmediata-
mente antes de montar el soporte de la muestra, limpiar la
muestra con un tejido propio para limpiar lentes. Montar
la muestra con el auxilio de una cera viscosa, o por medio
de otros medios convenientes, teniendo cuidado de no de-
jar impresiones digitales u otras marcas en las superficies
por las cuales la luz debe pasar. Colocar la seccin en el
espectrofotmetro con su eje cilndrico paralelo al plano
de abertura y aproximadamente centralizado con relacin
a la abertura. Cuando colocado adecuadamente, el haz de
luz es normal a la superficie de la seccin y las prdidas por
reflexin son mnimas.
Medir, continuamente, la transmitancia de la seccin con
referencia al aire en el largo de onda de inters, con un
equipo de registro o en intervalos de aproximadamente 20
nm con un equipo manual, en la amplitud de onda entre
290 a 450 nm.
Lmite. La transmisin de luz observada no debe exceder
a los lmites constantes en la Tabla 1 para recipientes des-
tinados al uso parenteral.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 303
Tabla 1 - Lmites para plsticos clases I-VI.
Porcentaje mximo de transmisin de
Tamao luz en cualquier largo de onda
Nominal entre 290 y 450 nm
(en ml) Recipientes Recipientes sellados
termosellados hermticamente
1 50 25
2 45 20
5 40 15
10 35 13
20 30 12
50 15 10
Cualquier recipiente, con un tamao intermedio de los lis-
tados en la Tabla 1, presenta una transmisin no mayor
que el prximo tamao mayor, listado en la tabla. Para re-
cipientes mayores que 50 ml, se aplican los lmites para
50 ml.
La transmisin de luz observada para recipientes plsticos
para productos destinados a la administracin oral o tpica
no debe exceder a 10% en cualquier largo de onda en el
intervalo entre 290 a 450 nm.
6.2.4 BIOCOMPATIBILIDAD
En esta seccin hay orientaciones sobre procedimientos de
6
evaluacin de la biocompatibilidad de recipientes plsticos
para medicamentos, tapas de elastmero y relacionados.
La biocompatibilidad se refiere a la tendencia de que estos
productos permanezcan, biolgicamente, inertes, cuando
estn en contacto con el cuerpo. En combinacin con los
ensayos qumicos, los procesos biolgicos pueden ser uti-
lizados para detectar e identificar la toxicidad inherente o
adquirida de relacionados, antes o durante su fabricacin y
procesamiento.
Los procedimientos utilizados para evaluar la biocompa-
tibilidad de un relacionado o de sus constituyentes fueron
clasificados en un panel de efectos biolgicos o procedi-
mientos de toxicidad como citotoxicidad, sensibilizacin,
irritacin o reactividad intracutnea, toxicidad sistmica
aguda, toxicidad subcrnica (toxicidad subaguda), geno-
toxicidad, implantacin, hemocompatibilidad, toxicidad
crnica (prolonga en 10% la expectativa de vida del animal
prueba, o para ms de 90 das), carcinogenicidad, toxicidad
reproductiva o de desarrollo y biodegradacin.
La pirogenicidad, en un rea de toxicidad especial, es eva-
luada por la prueba de Endotoxinas Bacterianas (5.5.2.2)
y Prueba de Pirognicos (5.5.2.1). Actualmente no hay ca-
ptulos que detallan sobre sensibilizacin, toxicidad sub-
crnica, genotoxicidad, toxicidad crnica, carcinogenici-
dad, hemotoxicidad, toxicidad reproductiva o requisitos de
prueba de biodegradacin.
 304 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
6.2.4.1 RECIPIENTES PLSTICOS Y
TAPAS DE ELASTMEROS
Los recipientes plsticos pueden ser constituidos por pol-
meros que, por extraccin, no presentan toxicidad o no al-
teran la estabilidad del producto embalado. Los requisitos
de prueba de biocompatibilidad de recipientes para medi-
camentos son relacionados a Recipientes Plsticos. El pls-
tico, u otras porciones polimricas de esos productos son
probados de acuerdo con los procedimientos establecidos
en Pruebas de reactividad biolgica in vitro (6.2.5), siendo
que aquellos que no atienden a los requisitos de estas prue-
bas no son adecuados para un recipiente de medicamentos.
Los materiales que atienden a los requisitos in vitro se cali-
fican como materiales biocompatibles, sin la necesidad de
otras pruebas, y pueden ser utilizados en la fabricacin de
un recipiente para medicamentos. Si fuese solicitada una
designacin de clase (clases I-VI) para plsticos u otros
polmeros, los procedimientos adecuados de prueba son
realizados conforme presentado en Pruebas de reactividad
biolgica in vivo (6.2.6) y Designacin de Clase.
La biocompatibilidad de un material elastomrico es eva-
luada en dos fases, conforme descrito en Procedimientos
de Prueba Biolgica en Tapas de Elastmero (6.2.2).
Al contrario de plsticos u otros polmeros, un material
elastomrico que no atiende a las exigencias de la primera
fase de prueba in vitro, puede ser considerado un mate-
6
rial biocompatible, si es aprobado en la segunda fase in
vivo, que consiste en la prueba de Inyeccin Sistmica y
la prueba Intracutnea en Pruebas de reactividad biol-
gica in vitro (6.2.5). Ninguna distincin de clase o tipo es
realizada entre los materiales elastomricos que atienden a
los requisitos de la primera fase de prueba y aquellos que
cumplen la segunda etapa, calificndose como materiales
biocompatibles. Los materiales elastomricos no son clasi-
ficados en las clases de I-VI.
6.2.4.2 RELACIONADOS
La biocompatibilidad del plstico, de otros polmeros y
partes elastomricas de esos productos son probadas de
acuerdo con los procedimientos descritos en Pruebas de
reactividad biolgica in vitro (6.2.5). Si, tambin, es ne-
cesaria una designacin de clase para un plstico u otro
polmero, son realizados los procedimientos de pruebas
adecuados descritos en Pruebas de reactividad biolgica
in vivo (6.2.6).
6.2.4.3 PRUEBAS IN VITRO, PRUEBAS IN
VIVO Y DESIGNACIN DE CLASE PARA
PLSTICOS Y OTROS POLMEROS
Los requisitos de pruebas in vitro e in vivo son elaborados
para determinar la reactividad biolgica de las cultivos de
clulas de mamferos y la respuesta biolgica de animales
a los materiales elastomricos, plsticos y otros polmeros,
cuando en contacto directo o indirecto con el paciente. La
reactividad biolgica de esos materiales puede depender
tanto de sus caractersticas de superficie, como de sus com-
ponentes qumicos extrables. Los procedimientos de prue-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
ba pueden ser realizados con el material, o un extracto del
material en prueba, salvo indicacin contraria.
Preparacin de Extractos
Normalmente la evaluacin de la biocompatibilidad de un
relacionado entero no es realista y la utilizacin de porcio-
nes representativas, o de extractos de materiales seleccio-
nados puede ser una alternativa prctica para la realizacin
de los ensayos. Cuando porciones o extractos son utiliza-
dos, es importante considerar que la materia prima puede
sufrir alteraciones qumicas durante la fabricacin; el pro-
cesamiento y la esterilizacin de un relacionado. Ensayos,
in vitro, de materia prima pueden servir como un importan-
te proceso de clasificacin, pero la evaluacin final de la
biocompatibilidad del relacionado debe ser realizada con
partes del producto, acabado y esterilizado.
Las extracciones pueden ser realizadas en varias tempera-
turas (121, 70, 50, o 37 C), en varios intervalos de tiempo
(1, 24, o 72 horas) y en medios de extraccin diferentes.
La eleccin del medio de extraccin para pruebas in vitro
incluye solucin de cloruro de sodio inyectable a 0,9%, o
medio de cultivo de tejidos con o sin suero. Cuando el me-
dio con suero es utilizado, la temperatura de extraccin no
puede exceder 37 C. Al escoger las condiciones de extrac-
cin, seleccionar la temperatura, el solvente y las variables
de tiempo que mejor simulen las condiciones de uso del
producto. El desempeo de varias pruebas en diversas con-
diciones puede ser utilizado para simular las variaciones de
las condiciones en uso. Una evaluacin de biocompatibi-
lidad es realizada con el producto, acabado y esterilizado,
a pesar de que, una seleccin cuidadosa de las condiciones
de extraccin permita la simulacin de las condiciones de
produccin y prueba de la materia prima.
Prueba in vitro
Cuando pruebas in vitro son realizadas, la muestra es bio-
compatible, si los cultivos de clulas no presentan reactivi-
dad mayor que la suave (grado 2), conforme descrito en las
Pruebas de reactividad biolgica in vitro (6.2.5).
Prueba in vivo y designacin de clase
De acuerdo con la definicin de inyeccin e implanta-
cin descritas en Pruebas de reactividad biolgica in vivo
(6.2.6), plsticos y otros polmeros son clasificados en
clases de I a VI. Para obtener designacin de plsticos, u
otros polmeros, los extractos de la sustancia prueba son
producidos de acuerdo con los procedimientos descritos
en diversos medios. Para evaluar la biocompatibilidad, los
extractos son inoculados, por va sistmica y intracutnea,
en ratones y conejos. De acuerdo con los requisitos para
inyeccin, un plstico u otro polmero puede ser clasifica-
do inicialmente como I, II, III, o V. Si adems de la prueba
de inyeccin, es realizada la prueba de implantacin con el
mismo material, el plstico o el polmero pueden ser clasi-
ficados como clase IV o VI.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 305

6.2.4.4 BIOCOMPATIBILDAD DE Fluxograma de Decisin; la extensin y la duracin del

RELACIONADOS contacto entre el producto y el paciente, como descrito en
la Categorizacin de Relacionados y la composicin del
Adems de evaluar los relacionados para esterilidad, Prue- material del producto, como considerado en las secciones
bas in vitro e in vivo, los relacionados son evaluados para Fluxograma de Decisin, Pruebas in vivo y Designacin
sensibilizacin, toxicidad subcrnica, genotoxicidad, he- de Clases.
mocompatibilidad, toxicidad crnica, carcinogenicidad,
toxicidad reproductiva o de desarrollo y biodegradacin. FLUXOGRAMA DE DECISIN

En las orientaciones internacionales hay indicacin de que Las orientaciones para la comparacin de un relacionado
la extensin de las pruebas ejecutadas para un relaciona- con productos comercializados anteriormente son suminis-
do depende de los siguientes factores: la semejanza y la tradas por el Fluxograma de Decisin de Biocompatibili-
exclusividad del producto con relacin a los productos dad (Figura 1).
anteriormente comercializados, como considerado en el

Inicio

El correlato entra
en contacto con el No
cuerpo directa o
inmdietamente?

Si

El material
existente es el Si El proceso de Si La composicin Si La forma de Si El mtodo Si
mismo de un contacto con el
fabricacin es el qumica es la de esterilizacin es
correlato cuerpo es
mismo? misma? semejante?
comercializado? semejante?
No
No No
No No

No Justificativa
o datos de
ensayo
aceptables?
Si
6
Contiene
El material es
El material del No un metal, aleacin Si algunas No
correlato es un sustancias txicas
metlica o
polmero? como Pb, Ni,
cermica?
Cd, Zr, etc?

Si No Si

Consulta del perfil

toxicolgico especfico No Los requisitos de Si
biocompatibilidad son
del correlato para ensayos cumplidos.
apropriados.

Los requisitos de Si Los requisitos de

biocompatibilidad biocompatibilidad
son cumplidos? son cumplidos.

No

Material txico

Figura 1 - Fluxograma de biocompatibilidad adaptado a partir del FDA Blue Book Memorandum # G95-1.

El objetivo con el fluxograma es determinar si los datos
disponibles de relacionados anteriormente comercializa-
dos son suficientes para garantizar la seguridad del rela-
cionado en cuestin. Como indicado en el fluxograma, la
composicin del material y las tcnicas de fabricacin de
un producto son comparadas con los relacionados ya co-
mercializados, que entran en contacto directo con el cuer-
po. Adems de eso, en el fluxograma hay exigencia de una
evaluacin de la toxicidad de un material exclusivo que no
haya sido utilizado anteriormente en productos relaciona-
dos. Las respuestas a las cuestiones colocadas en el fluxo-
grama llevan a la conclusin de que los datos disponibles
son suficientes, o que pruebas adicionales son necesarios
para garantizar la seguridad del producto. Las orientacio-
nes cuanto a la identificacin de los procedimientos apro-
piados para pruebas adicionales son suministradas en la
seccin Matriz de Seleccin de Prueba.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 306 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

CATEGORIZACIN DE RELACIONADOS cuerpo. Las principales categoras de relacionados son de

Para facilitar la identificacin de los procedimientos de
pruebas adecuados, los relacionados estn divididos y
subdivididos, como est registrado en la Tabla 1 de acuer-
do con la naturaleza y la extensin de su contacto con el
superficie, comunicacin extracorprea e implantables.
Despus, estas clasificaciones son subcategorizadas y
ejemplos de relacionados pertenecientes cada una de las
subcategoras (Tabla 1).

Tabla 1 - Clasificacin y ejemplos de relacionados.

Categora del Subcategora del Naturaleza o Extensin Ejemplos
Relacionado Relacionado de Contacto
Superficie Piel Relacionados que entran en Electrodos, prtesis externas, cintas de
contacto solamente con la fijacin, vendas de compresin y monitores
superficie intacta de la piel.
de diversos tipos.
Mucosa Relacionados que se Lentes de contacto, catteres
comunican con membranas urinarios, dispositivos intravaginales
intactas de la mucosa. y intraintestinales (tubos de estmago,
sigmoidoscopios, colonoscopios,
gastroscopios), tubos endotraqueales,
broncoscopios, prtesis dentarias,
dispositivos ortodncicos e intrauterinos.
Superficies Relacionados que entran Curativos, dispositivos de cicatrizacin y
Comprometidas o No en contacto con superficies vendas oclusivas para lcera, quemadura y
ntegras corporales comprometidas o tejido granulado.
no-ntegras.
Vaso Sanguneo, Relacionados que entran Conjunto de administracin de solucin,
Indirecto en contacto con el vaso de transferencia y de administracin de
sanguneo en un punto y sangre, extensores.
sirven como canal de entrada
para el sistema vascular.

6 Comunicacin
extracorprea
Comunicacin con
Tejido, Hueso o
Dentina
Circulacin sangunea Relacionados que entran en
Relacionados y materiales
que se comunican
Con tejido, hueso o
sistema dentina/pulpa.
Catteres intravasculares, electrodos de
contacto con la circulacin
sangunea.
Laparoscopios, artroscopios, sistemas de
drenaje, cemento odontolgico, material de
llenado dentario y ganchos de piel.
marca-paso temporario, oxigenadores, tubo
de oxigenador extracorpreo y accesorios,
dializadores, tubo de dilisis y accesorios,
hemoadsorbentes y inmunoadsorbentes

Implantables Tejido u hueso Relacionados que entran en
contacto principalmente con
el hueso, el tejido o con el
fluido de tejido.
Sangre Relacionados en contacto
principalmente con sangre.
Ejemplos de molde como pasadores
ortopdicos, placas, juntas de sustitucin,
prtesis de hueso, cementos y dispositivos
intraseos. Ejemplos de los ltimos son
marca-pasos, dispositivos de suministro de
medicamentos, sensores y estimuladores
neuromusculares, tendones de sustitucin,
implantes mamarios, laringes artificiales,
implantes subperiosteales y ganchos de
conexin.
Electrodos de marca paso, fstula
arteriovenosa artificial, vlvulas
cardacas, injerto de vlvula, catteres de
administracin interna de medicamentos y
dispositivos de asistencia ventricular.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 307

MATRIZ DE SELECCIN DE PRUEBA el dispositivo y el cuerpo es extendida y de acuerdo con la

En la matriz hay orientaciones para identificacin de los
procedimientos adecuados para pruebas biolgicos para las
tres categoras de relacionados: Pruebas para Dispositivos
de superficie (Tabla 1 en Gua para a seleccin de plsti-
co y otros polmeros (6.2.4.5)), Pruebas para Dispositivos
de Comunicacin Extracorprea (Tabla 2 en Gua para la
seleccin de plstico y otros polmeros (6.2.4.5)), y Prue-
bas para Dispositivos Implantables (Tabla 3 en Gua para
la seleccin de plstico y otros polmeros (6.2.4.5)). Cada
categora de relacionados es subcategorizada y subdividida
conforme la duracin del contacto entre el dispositivo y el
cuerpo. La duracin del contacto es definida como limitada
(menos de 24 horas); prolongada (24 horas a 30 das) o
permanente (ms de 30 das). Los efectos biolgicos que
estn incluidos en la matriz son: citotoxicidad, sensibiliza-
cin, irritacin o reactividad intracutnea, toxicidad sist-
mica, toxicidad subcrnica, genotoxicidad, implantacin,
hemocompatibilidad, toxicidad crnica, carcinogenicidad,
toxicidad reproductiva o de desarrollo y biodegradacin.
En la matriz, para cada subcategora hay un cuadro asocia-
do a los requisitos de prueba y, generalmente, el nmero de
pruebas aumenta conforme la duracin del contacto entre
proximidad de contacto entre el dispositivo y el sistema
circulatorio. Dentro de las subcategoras, la opcin de rea-
lizar pruebas adicionales debe ser considerada caso a caso.
Las situaciones especficas, como el uso de dispositivos
implantables permanentes o con comunicacin extracor-
prea en mujeres embarazadas, deben ser consideradas por
el fabricante que decidir cuanto a la inclusin de la prueba
de reproduccin o de desarrollo. Las orientaciones sobre
la identificacin de eventuales procedimientos adicionales
para prueba son suministradas en la matriz de cada subca-
tegora de relacionados.
6.2.4.5 GUA PARA LA SELECCIN DE
PLSTICO Y OTROS POLMEROS
Designacin de Clase para Relacionado
En la Figura 1 hay orientacin para la eleccin de la desig-
nacin de la clase apropiada del plstico o de otro polmero
para un relacionado y cada subcategora de Dispositivos de
Superficie y en la Figura 2 para Dispositivos de Comuni-
cacin. Las designaciones de clase pueden ser encontradas
en Pruebas de reactividad biolgica in vivo (6.2.6).

Dispositivo de
Superficie

Piel
Superficie de
Mucosas
Superficies Rotas
o Comprometidas
6
Limitada Prolongada Permanente Limitada Prolongada Permanente Limitada Prolongada Permanente

Clase Clase Clase Clase Clase Clase Clase Clase Clase

I I I I III V III V VI

Figura 1 - Requisitos de Clase de plsticos y otros polmeros para dispositivos de superficie.

________________
Categorizacin basada en la duracin del contacto. Limita: menos de 24 horas; prolongada: de 24 horas a 30 das; permanente: ms de 30 das. De-
signacin de Clase de Plsticos.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 308 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Dispositivo de
Comunicacin
Extracorprea

Comunicacin con
Vaso Sanguneo, Circulacin
Tejido, hueso y
Indirecto Sangunea
Dentina

Duracin
Limitada* Prolongada Permanente Prolongada Permanente Limitada Prolongada Permanente
Limitada

Clase Clase Clase Clase Clase Clase Clase Clase Clase

IV V VI IV IV VI IV VI VI

Figura 2 - Requisitos de Clase de plsticos y otros polmeros para dispositivos de comunicacin extracorprea.
________________
Categorizacin basada en la duracin del contacto. Limita: menos de 24 horas; prolongada: de 24 horas a 30 das; permanente: ms de 30 das. De-
signacin de Clase de Plsticos.

El nmero de la clase indicada aumenta conforme la du-
racin de contacto entre el dispositivo y el cuerpo (ries-
go). En la categora de Dispositivos Implantables, el uso
exclusivo de la clase VI es obligatorio. La designacin de
clases de plstico est basada en las matrices de seleccin
de pruebas ilustradas en las Tablas 1, 2 y 3.
La atribucin de clase de un plstico u otro polmero a una
subcategora no se destina a restringir el uso de categoras
superiores de plsticos u otros polmeros. A pesar de que la
designacin atribuida defina la clase numrica ms baja de
plstico u otro polmero que puede ser utilizado en el re-
lacionado correspondiente, el uso de una clase de plstico
numricamente mayor es opcional. Cuando un relacionado
pertenece a ms de una categora, el plstico, u otros pol-
meros deben satisfacer las exigencias de la clase numrica
ms alta.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Tabla 1 - Matriz de seleo de testes para dispositivos de superfcie.*
Categorias de Correlatos Efecto Biolgico b

Contacto con el Cuerpo

traccin del Contactoa

Citotoxicidad
Sensibilizacin
tacin o Reactividad
Intracutnea
Toxicidad Sistmica
(Aguda)
Toxicidad Subcrnica
(Subaguda)
Genotoxicidad
Implantacin
Hemocompatibilidad
Toxicidad Crnica
Carcinogenicidad
Toxicidad Reproductiva o
de Desarrollo
Biodegradacin

A X X X
Piel B X X X
C X X X
A X X X
Dispositivos de
Mucosa B X X X O O O
Superfcie
C X X X O X X O O
A X X X O
Superficies Comprometidas
B X X X O O O
No integras
C X X X O X X O O
________________
a Legenda A: limitada (menos de 24 horas); B: prolongada (de 24 horas a 30 dias); C: permanente (ms de 30 dias).
b Legenda X: Exmenes de evaluacin ISO para cons ideracin; O: exmenes adicio nales que pueden ser aplicados.
* Adaptado do FDAs Blue Book Memorandum #G95-1(7(Tabla 1. Pruebas de Evaluacin Inicial para Consideracin y Tabla 2. Pruebas de Evaluacin Complementaria para Consideracin).

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Farmacopea Brasilea, 5 edicin
309

6
 6
Tabla 2 - Matriz de Seleo de Testes para Dispositivos de Comunicao Extracorprea.*
310

Categorias de Correlatos Efecto Biolgico b

Contacto con el Cuerpo

Farmacopea Brasilea, 5 edicin

traccin del Contactoa

Citotoxicidad
Sensibilizacin
tacin o Reactividad
Intracutnea
Toxicidad Sistmica
(Aguda)
Toxicidad Subcrnica
(Subaguda)
Genotoxicidad
Implantacin
Hemocompatibilidad
Toxicidad Crnica
Carcinogenicidad
Toxicidad Reproductiva o
de Desarrollo
Biodegradacin

A X X X X X
Vaso Sanguneo,
B X X X X O X
Indirecto
C X X O X X X O X X X
Dispositivos de A X X X O
Comunicacin con Tejido,
Comunicacin B X X O O O X X
Hueso o Dentina
Extracorprea C X X O O O X X X X
A X X X X O X
Circulacin Sangunea B X X X X O X O X
C X X X X X X O X X X
________________
a Legenda A: limitada (menos de 24 horas); B: prolongada (de 24 horas a 30 dias); C: permanente (ms de 30 dias).
b Legenda X: Exmenes de evaluacin ISO para cons ideracin; O: exmenes adicio nales que pueden ser aplicados.
* Adaptado do FDAs Blue Book Memorandum #G95-1(7(Tabla 1. Pruebas de Evaluacin Inicial para Consideracin y Tabla 2. Pruebas de Evaluacin Complementaria para Consideracin).

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Tabela 3 Matriz de Seleo de Testes para Dispositivos Implantveis.*

Categorias de Correlatos Efecto Biolgico b

Contacto con el Cuerpo

traccin del Contactoa

Citotoxicidad
Sensibilizacin
tacin o Reactividad
Intracutnea
Toxicidad Sistmica
(Aguda)
Toxicidad Subcrnica
(Subaguda)
Genotoxicidad
Implantacin
Hemocompatibilidad
Toxicidad Crnica
Carcinogenicidad
Toxicidad Reproductiva o
de Desarrollo
Biodegradacin

A X X X O
Tejido o Hueso B X X O O O X X
Dispositivos C X X O O O X X X X
Implantables A X X X X X X
Sangre B X X X X O X X X
C X X X X X X X X X X
________________
a Legenda A: limitada (menos de 24 horas); B: prolongada (de 24 horas a 30 dias); C: permanente (ms de 30 dias).
b Legenda X: Exmenes de evaluacin ISO para cons ideracin; O: exmenes adicio nales que pueden ser aplicados.
* Adaptado do FDAs Blue Book Memorandum #G95-1(7(Tabla 1. Pruebas de Evaluacin Inicial para Consideracin y Tabla 2. Pruebas de Evaluacin Complementaria para Consideracin).
Documento de la ISO 10993-1:1997 intitulado Biological Evaluation of Medical DevicesPart 1: Evaluation and Testing. [Evaluacin Biolg ica de Dispositivos Mdicos-Parte 1: Evaluacin y Pruebas],
* Adaptado del FDA s Blue BookMemorandum #G95-1 (Lisis of International Standard ISO-10993.Biological Evaluation of Medical Devices-Part 1: Evaluation and Testing. ) [(Liso de las Normas Internacionales
de la ISO-10993.Evaluacin Biolgica de Dispositivos Mdicos-Parte 1: Evaluacin y Pruebas.)

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Farmacopea Brasilea, 5 edicin
311

6
 312 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
6.2.5 PRUEBAS
DEREACTIVIDAD BIOLGICA
IN VITRO
Las Pruebas a continuacin son elaboradas para determinar
la reactividad biolgica de cultivos de clulas de mam-
feros, despus del contacto con plsticos elastomricos y
otros materiales polimricos, que entran en contacto direc-
to, o indirecto con el paciente, o despus del contacto con
extractos especficos elaborados a partir de los materiales
a prueba. Es esencial que las Pruebas sean realizadas sobre
el rea de superficie especificada. Cuando la superficie de
la muestra no puede ser determinada, utilizar 0,1 g de elas-
tmero o 0,2 g de plstico, u otro material, para cada ml de
fluido de extraccin.
Tres ensayos son descritos: Prueba de Difusin en Agar,
Prueba de Contacto Directo y Prueba de Elucin. La de-
cisin de cual tipo o del nmero de ensayos a ser realizado
para evaluar el potencial de la respuesta biolgica de una
muestra especfica o de un extracto, depende del mate-
rial, del producto final y de sus intenciones de uso. Otros
factores que, tambin, pueden afectar la adecuacin de la
muestra para un uso especfico son: composicin polim-
rica; procedimientos de procesamiento y limpieza; medios
de contacto; colorantes; adhesivos; absorcin, adsorcin
y permeabilidad de los conservantes y las condiciones de
almacenamiento. La evaluacin de tales factores debe ser
6
realizada por ensayos especficos adicionales apropiados,
antes de determinar que un producto producido por medio
de un material especfico, es adecuado para su intencin
de uso.
Preparacin del Cultivo Celular. En un medio esencial m-
nimo suplementado con suero de densidad de sembrado de
cerca de 105 clulas por ml, preparar cultivos mltiples
de clulas fibroblsticas L-929 (linaje celular ATCC CCL
1, NCTC clone 929). Incubar los cultivos a 37 C 1 C
en una incubadora humidificada, con una atmsfera de (5
1) % de dixido de carbono, por como mnimo 24 horas
hasta la obtencin de monocapa, con confluencia superior
a 80%. Examinar los cultivos preparados con un micros-
copio para asegurar un nivel uniforme de monocapas casi
confluentes.
Solventes de extraccin. Solucin de cloruro de sodio
inyectable (ver monografa correspondiente). Alternativa-
mente pueden ser utilizados medios libres o suplementados
con suero para cultivo de clulas de mamferos. La suple-
mentacin del suero es utilizada cuando la extraccin es
realizada a 37 C, por 24 horas.
Equipos
Autoclave. Emplear una autoclave capaz de mantener la
temperatura de 121 C 2 C y capaz de enfriar los reci-
pientes de ensayo en torno de 20 C.
Estufa. Utilizar preferencialmente un modelo de convec-
cin mecnica, capaz de mantener las temperaturas de ope-
racin en la banda de 50 C a 70 C 2 C.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Incubadora. Utilizar incubadora capaz de mantener la
temperatura de 37 C 1 C y una atmsfera hmeda con
(5 1) % de dixido de carbono en el aire.
Recipientes de Extraccin. Utilizar apenas recipientes de
vidrio Tipo I, tales como tubo de ensayo de cultivo con
tapa de rosca, o equivalente. La tapa de rosca debe tener
revestimiento elastomrico apropiado. La superficie ex-
puesta de ese revestimiento debe ser totalmente protegida
con un disco slido inerte de 50-75 m de espesor.
Preparacin de los Equipos. Limpiar, completamente, to-
dos los elementos de vidrio con solucin de limpieza de
cido crmico y, si necesario, con cido ntrico caliente,
seguido de enjuague prolongado con agua estril para in-
yectables. Esterilizar y secar los recipientes y equipos uti-
lizados para extraccin, transferencia o administracin del
material de ensayo, por medio de proceso adecuado. Si el
xido de etileno fuese utilizado como agente esterilizante,
aguardar por lo menos 48 horas para desgasificacin com-
pleta.
Procedimiento
Preparacin de la Muestra para Extracto. Preparar con-
forme descrito en el Procedimiento de Pruebas de reactivi-
dad biolgica in vivo (6.2.6).
Preparacin de Extractos. Preparar conforme descrito en
el Procedimiento de Pruebas de reactividad biolgica in
vivo (6.2.6), utilizando solucin de cloruro de sodio in-
yectable (0,9% NaCl) o medio libre de suero para cultivo
de clulas de mamferos conforme descrito en Extraccin
de Solventes. Si la extraccin fuese hecha a 37 C por 24
horas en incubadora, utilizar medios de cultivo celular su-
plementados con suero. En ningn caso, las condiciones de
extraccin deben causar cambios fsicos, tales como fusin
o derretimiento de las porciones del material, excepto una
leve adherencia.
PRUEBA DE DIFUSIN EN AGAR
Esta prueba fue elaborada para materiales elastomricos de
diversos modelos. La capa de agar acta como un soporte
para proteger las clulas de daos mecnicos, posibilitando
la difusin de productos qumicos lixiviables de las mues-
tras polimricas. En un pedazo de papel de filtro, son apli-
cados los extractos de materiales a ser probados.
Preparacin de la Muestra. Utilizar extractos preparados
conforme descrito o porciones de las muestras con superfi-
cies planas y no inferiores a 100 mm2.
Preparacin del Control Positivo. Proceder conforme
descrito en Preparacin de la Muestra.
Preparacin del Control Negativo. Proceder conforme
descrito en Preparacin de la Muestra.
Procedimiento. Utilizar 7 ml de la suspensin de clulas
preparada conforme descrito en la Preparacin del Cultivo
Celular y preparar las capas en placas de 60 mm de dime-
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 313

tro. Despus de realizada la incubacin, aspirar el medio de
cultivo de las capas y sustituirlo por medio suplementado
con suero conteniendo cantidades de hasta 2% de agar. La
calidad del agar debe ser adecuada para sustentar el creci-
miento celular. La capa de agar debe ser suficientemente
fina para posibilitar la difusin de los productos qumicos
lixiviables. Colocar las superficies planas de la muestra,
control negativo y control positivo, o sus extractos, en con-
tacto con la superficie solidificada de agar, en duplicado.
No utilizar ms que tres muestras en cada placa prepara-
da. Incubar todas los cultivos a 37 C 1 C, por, como
mnimo, 24 horas, en incubadora apropiada. Examinar, vi-
sualmente, o con un microscopio cada cultivo alrededor de
la muestra; control negativo y control positivo, utilizando
coloracin adecuada, si necesario.
Interpretacin de Resultados. La reactividad biolgica,
o sea, mala formacin y degeneracin celular, es descrita
y clasificada en una escala de 0 a 4 (Tabla 1). Medir las
respuestas de los cultivos celulares de la muestra, control
negativo y control positivo. El sistema de ensayo de cul-
tivo de clulas es adecuado si las respuestas observadas
fueren clasificadas como 0 (sin reactividad) para el control
negativo y como mnimo 3 (moderada) para el control po-
sitivo. La muestra atiende a los requisitos de la prueba si
la respuesta no es superior a la clasificacin 2 (suavemente
reactiva). Repetir el procedimiento, si la adecuacin del
sistema no est confirmada.

Tabla 1 - Clasificacin de la reactividad para Prueba de Difusin en Agar y Prueba de Contacto Directo.
Clasificacin Reactividad Descripcin de la Zona de Reactividad
0 Ninguna Ninguna zona detectable alrededor o bajo la muestra
1 Leve Algunas clulas mal formadas o degeneradas bajo la muestra.
2 Suave Zona limitada al rea bajo la muestra
3 Moderada La zona se extiende de 0,5 a 1,0 cm por sobre la muestra.
4 Fuerte La zona se extiende ms que 1,0 cm por sobre la muestra

PRUEBA DE CONTACTO DIRECTO PRUEBA DE ELUCIN

Esta prueba es definida para materiales en diversos forma- Este ensayo es definido para la evaluacin de extractos de
tos. El procedimiento posibilita extracciones simultneas materiales polimricos. El procedimiento posibilita la ex-

y prueba de productos qumicos lixiviables de la muestra
en un medio suplementado con suero. El procedimiento no
es apropiado para materiales con densidad muy alta o muy
baja, pues puede causar daos mecnicos a las clulas.
6
traccin de muestras por intervalos de tiempo variados y
en temperaturas fisiolgicas y no fisiolgicas. Es apropiado
para materiales de alta densidad y evaluaciones de dosis
respuesta.

Preparacin de la Muestra. Utilizar porcin de la mues-
tra con superficie plana no inferior a 100 mm2.
Preparacin del Control Positivo. Proceder conforme
descrito en Preparacin de la Muestra.
Preparacin del Control Negativo. Proceder conforme
descrito en Preparacin de la Muestra.
Procedimiento. Utilizar 2 ml de la suspensin de clulas
preparada conforme descrito en Preparacin del Cultivo
Celular, preparar las capas en placas de 35 mm de dimetro.
Despus de la incubacin, aspirar el medio de los cultivos
y sustituirlo por 0,8 ml de medio de cultivo fresco. Colocar
una nica muestra, control negativo y control positivo en
cada una de las duplicatas del medio de cultivo. Incubar
todos los cultivos a 37 C 1 C, por, como mnimo, 24
horas, en incubadora apropiada. Examinar, visualmente, o
con un microscopio cada cultivo alrededor de la muestra;
del control negativo y del control positivo, utilizando colo-
racin adecuada, si necesario.
Preparacin de la Muestra. Preparar conforme descrito
en Preparacin de Extractos, utilizando solucin de cloruro
de sodio inyectable (0,9% NaCl) o medio libre de suero
para cultivo de clulas de mamferos conforme Solventes
de Extraccin. Si el tamao de la muestra no puede ser r-
pidamente medido, puede ser utilizada una masa de como
mnimo 0,1 g de material elastomrico o 0,2 g de plsti-
co o material polimrico, por ml de medio de extraccin.
Alternativamente, para simular condiciones ms prximas
a las fisiolgicas, utilizar para la extraccin, un medio de
cultivo de clulas de mamferos, suplementado con suero.
Preparar los extractos por medio del calentamiento a 37 C
1 C por 24 horas, en una incubadora apropiada. Tem-
peraturas superiores pueden causar la desnaturalizacin de
las protenas del suero.
Preparacin del Control Positivo. Proceder conforme
descrito en Preparacin de la Muestra.
Preparacin del Control Negativo. Proceder conforme
descrito en Preparacin de la Muestra.

Interpretacin de Resultados. Proceder conforme a in- Procedimiento. Utilizar 2 ml de la suspensin de clulas

terpretacin de resultados de la prueba de Difusin en
Agar. La muestra atiende a los requisitos de la prueba, si la
respuesta de la muestra no es superior a la clasificacin 2
(suavemente reactiva). Repetir el procedimiento, si la ade-
cuacin del sistema no es confirmada.
preparada conforme descrito en la Preparacin del Cultivo
Celular, preparar las monocapas en placas de 35 mm de
dimetro. Despus de la incubacin, aspirar el medio de las
capas y sustituirlo con extracto de la muestra; del control
negativo y del control positivo. Los extractos de los medios

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 314 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

suplementados, o no con suero son probados en duplicado,
sin diluicin (100%). El extracto de la solucin de cloru-
ro de sodio inyectable es diluido con clulas del medio de
cultivo suplementado con suero y probado, en duplicado,
a una concentracin de 25%. Incubar todos los cultivos a
37 C 1 C por 48 horas, en una incubadora apropiada.
Examinar con un microscopio cada cultivo despus de 48
horas, utilizando coloracin adecuada, si necesario
Interpretacin de Resultados. Proceder conforme inter-
pretacin de resultados de la prueba de Difusin en Agar,
sin embargo utilizando la Tabla 2. La muestra atiende a
los requisitos de la prueba, si la respuesta de la muestra
no es superior a la clasificacin 2 (suavemente reactiva).
Repetir el procedimiento si la adecuacin del sistema no es
confirmada. Para evaluaciones de dosis- respuesta, repetir
el procedimiento, utilizando diluiciones cuantitativas del
extracto de la muestra.

Tabla 2 - Clasificacin de la reactividad para prueba de elucin

Clasificacin Reactividad
0 Ninguna
1 Leve
2 Suave
3 Moderada
4 Fuerte
Condiciones de los Cultivos
Grnulos intracitoplasmticos discontinuos; sin lisis celular
Hasta 20% de las clulas son redondas, vagamente unidas, sin grnulos
intracitoplasmticos; clulas lisadas estn ocasionalmente presentes.
Hasta 50% de las clulas son redondas y desprovistas de grnulos
citoplasmticos; sin lisis celular extensiva y reas vacas entre las clulas
Hasta 70% de las capas contienen clulas arredondeadas o lisadas
Zona se extiende ms que 1,0 cm por sobre la muestra

6.2.6 PRUEBAS DE nificativa. La prueba de Implante es usada para verificar la

adecuacin de plsticos y otros polmeros, utilizados en la
REACTIVIDAD BIOLGICA IN fabricacin de recipientes y accesorios; en preparaciones
VIVO parenterales, en relacionados, implantes y otros sistemas.

Las Pruebas a continuacin son elaboradas para determinar En este captulo se aplican las siguientes definiciones:
la respuesta biolgica de animales a materiales elastomri- muestra es el material a prueba, o el extracto preparado
cos, plsticos y otros materiales polimricos, que entran en a partir de un determinado material. El blanco consiste de

6
contacto directo, o indirecto con el paciente, o la respuesta
a la inoculacin de extractos especficos elaborados a par-
tir de los materiales a prueba. Es esencial disponer el rea
de superficie especfica para extraccin. Cuando el rea de
superficie de la muestra no puede ser determinado, utilizar
0,1 g de elastmero o 0,2 g de plstico, u otro material,
para cada ml de fluido de extraccin.
Tres ensayos son descritos para clasificar plsticos y otros
polmeros, que son aplicables a materiales y relacionados,
basndose en ensayos de reactividad biolgica in vivo.
Prueba de Inyeccin Sistmica y Prueba Intracutnea son
utilizados para materiales elastomricos, especialmente
para materiales en que la prueba de reactividad biolgica
in vitro (6.2.5) adecuada indic reactividad biolgica sig-
la misma cantidad del medio que es utilizado para la ex-
traccin de la muestra, siendo tratado de la misma forma
que el medio que contiene la muestra analizada. El control
negativo es una muestra que no presenta ninguna reaccin
en las condiciones del ensayo.
Clasificacin de Plsticos. Seis clases de plstico son defi-
nidas (Tabla 1), basadas en las respuestas para una serie de
ensayos in vivo en el cual los extractos, materiales y vas de
administracin son especificados. Estas pruebas estn, di-
rectamente relacionadas, con la utilizacin final de los art-
culos de plstico. En las preparaciones en que los plsticos
estn susceptibles a entrar en contacto con los vehculos, la
eleccin de la solucin de extraccin es representativa. La
clasificacin registrada en la Tabla 1.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 315

Tabla 1 - Clasificacin de plsticos y pruebas a ser realizadas.

Clases de Plsticosa pruebas a ser realizadas

I II III IV V VI Material de Prueba Animal Dosis Procedimientos b
x x x x x x Extracto de Muestra Ratn 50 ml/kg A (IV)
x x x x x x en Solucin de Cloruro de Conejo 0,2 ml/ animal en cada B
Sodio inyectable uno de los 10 sitios
x x x x x Extracto de Muestra de Ratn 50 ml/kg A (IV)
x x x x x Solucin de Alcohol 1:20 Conejo 0,2 ml/animal en cada B
en Solucin de Cloruro de uno de los 10 sitios
Sodio inyectable
x xx x x Extracto de Muestra en Ratn 10 g/kg A (IP) B
Polietilenglicol 400 Conejo 0,2 ml/ animal en cada
uno de los 10 sitios
x xx xx xx Extracto de Muestra en Ratn 50 ml/kg A (IP) B
Aceite Vegetal Conejo 0,2 ml/ animal en
cada uno de los 10 sitios
x x Tiras de Implante Conejo 4 tiras/animal C
de Muestra
________________
a Pruebas exigidas para cada clase indicada con una x en la columna apropiada.
b Explicacin: A (IP) Prueba de Inyeccin Sistmica (Intraperitoneal); A (IV) Prueba de Inyeccin Sistmica (intravenosa); B Prueba Intracutnea
(intracutnea); C Prueba de Implantacin (implantacin intramuscular).

Con excepcin de la prueba de Implante, los procedimien- Estas pruebas son elaboradas para aplicacin en materiales
tos son basados en la utilizacin de extractos que, en fun- en las condiciones en que son utilizadas. Si, antes de su
cin de la resistencia trmica del material, son preparados utilizacin final, el material debe ser expuesto a cualquier
en una de las tres temperaturas estndar: 50, 70 y 121 C. proceso de limpieza o de esterilizacin, las pruebas deben

Por esa razn, la designacin de la clase de un plstico
debe ser acompaada por una indicacin de la temperatura
de extraccin (por ejemplo IV-121 C, es la designacin
de la clase IV, de un plstico extrado a 121 C; I-50 C,
es la designacin de la clase I, de un plstico extrado a 50
C). Los plsticos pueden ser clasificados en las clases de
I a VI, con base en los criterios de respuesta registrados en
la Tabla 1.
Esa clasificacin no se aplica a los plsticos que son des-
tinados a ser utilizados como recipientes para productos
tpicos u orales, o que puedan ser utilizados como parte
integrante de una formulacin de medicamento. Las infor-
maciones registradas en la Tabla 1 no se aplican a los elas-
tmeros naturales, que son probados solamente por medio
de solucin de cloruro de sodio inyectable y de aceites ve-
getales.
La prueba de Inyeccin Sistmica y la prueba Intracutnea
son elaboradas para determinar, respectivamente, las res-
puestas biolgicas sistmicas y las locales; en animales ex-
puestos a los plsticos y otros polmeros, por la inoculacin
de dosis nica de extractos especficos de la muestra. La
prueba de Implante es elaborada para evaluar la reaccin
del tejido vivo al plstico y otros polmeros, por medio de
la implantacin de la propia muestra en el tejido animal.
La preparacin adecuada y la colocacin de las muestras
en condiciones de asepsia son importantes en la realizacin
de la prueba de Implante.
6
ser realizadas en una muestra sometida a tales procesos.
Medios de Extraccin
Solucin de cloruro de sodio inyectable. Ver monografa
correspondiente.
Solucin de Alcohol 1:20 en solucin de cloruro de sodio
inyectable.
Polietilenglicol 400. Ver monografa correspondiente.
Aceite vegetal. Utilizar aceite de ssamo, aceite de semilla
de algodn u otros aceites vegetales apropiados (ver mono-
grafa). Si posible, obtener aceites recin refinados. Utilizar
tres animales debidamente preparados e inocular intercut-
neamente en cada animal una dosis de 0,2 ml de aceite, en
cada uno de los 10 sitios, y observar los animales por 24, 48
y 72 horas despus de la inoculacin. Clasificar las observa-
ciones de cada local, conforme a la escala numrica indicada
en la Tabla 2. En cualquier momento de observacin, la res-
puesta promedio en los 3 conejos (30 sitios de inoculacin)
no debe ser superior a 0,5 para eritema, debe ser inferior a
1,0 para el edema, y en ninguno de los locales puede ocurrir
una reaccin del tejido mayor que 10 mm de dimetro total.
El residuo de aceite en el local de la inoculacin no debe ser
interpretado como edema. Cuando presionado suavemente,
el edema del tejido queda blanquecino.
Agua para inyectables. Ver monografa correspondiente.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 316 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 2 - Evaluacin de las reacciones de la piel

Eritema y Formacin de Escaras Puntuacin
Sin eritema 0
Eritema suave (muy poco perceptible) 1
Eritema bien definido 2
Eritema moderado a grave 3
Eritema grave (rojo beterava) a leve formacin de escara (heridas profundas) 4
Formacin de Edema Puntuacin
Sin eritema 0
Edema muy suave (muy poco perceptible) 1
Edema suave (bordes con rea bien definida por el aumento preciso) 2
Edema moderado (aproximadamente con 1 mm de saliencia) 3
Edema grave (con ms de 1 mm de saliencia y adems del rea de exposicin) 4

Excluye el edema no inflamatorio (mecnico) a partir de
blanco o del fluido de extraccin.
Equipos
Autoclave. Emplear una autoclave capaz de mantener la
temperatura de 121 C 2 C y capaz de enfriar los reci-
pientes de ensayo en torno de 20 C.
zas sucesivas con acetona y cloruro de metileno. Limpiar
todos los otros equipos por medio de un lavado completo
con detergente adecuado y enjuague prolongado con agua.
Esterilizar y secar los recipientes y equipos utilizados para
extraccin, transferencia o administracin del material de
ensayo, por medio de proceso adecuado. Si el xido de eti-
leno fuese utilizado como agente esterilizante, posibilitar
tiempo

Estufa. Utilizar preferencialmente un modelo de convec- adecuado para la desgasificacin completa.

cin mecnica, capaz de mantener las temperaturas de ope-
racin en la banda de 50 a 70 C 2 C. Procedimiento.

6
Recipientes de Extraccin. Utilizar apenas recipientes de
vidrio Tipo I, tales como tubo de ensayo de cultivo con
tapa de rosca, o equivalente. La tapa de rosca debe tener re-
vestimiento elastomrico apropiado. La superficie expues-
ta de ese revestimiento debe estar totalmente protegida con
un disco slido inerte de 50-75 m de espesor.
Preparacin de los Equipos. Limpiar completamente to-
dos los elementos de vidrio con solucin de limpieza de
cido crmico y, si necesario, con cido ntrico caliente,
seguido de enjuague prolongado con agua. Antes de uti-
lizar en la subdivisin de la muestra, limpiar los equipos
cortantes por medio de un mtodo adecuado, como limpie-
Preparacin de la muestra. La prueba de Inyeccin Sist-
mica y la prueba Intracutnea pueden ser realizadas con
el mismo extracto o con extractos distintos. Seleccionar y
subdividir en partes la muestra del tamao indicado en la
Tabla 3. Retirar el material particulado de cada muestra
subdividida, o del control negativo, colocando la muestra
en una probeta graduada de 100 ml, de vidrio de tipo I,
limpia y con tapa, y aadir cerca de 70 ml de agua para
inyectables. Agitar por cerca de 30 segundos y drenar el
agua, repetir esa etapa y secar las piezas preparadas para la
extraccin con aceite en una estufa hasta 50 C. No limpiar
la muestra con pao seco o mojado o lavar y enjuagar con
solvente orgnico, tensoactivo, etc.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 317

Tabla 3 - rea de superficie de la muestra a ser utilizada

Cantidad de Muestra para cada 20 ml
Forma del Material Espesor Subdividida En 1
de Medio de Extraccin
Pelcula o lmina <0,5 mm Equivalente a 120 cm2 de la rea Tiras con cerca de 5 x 0,3 cm
total de superficie (ambos lados
combinados)
0,5 a 1 mm Equivalente a 60 cm2 de la rea
total de superficie (ambos lados
combinados)
Tubo <0,5 mm (pared) Largo (en cm) = 120 cm2/ (sumatoria Partes con cerca de 5 x 0,3 cm
de las circunferencias de dimetro
interno y externo)
0,5 a 1 mm (pared) Largo (en cm) = 60 cm2/ (sumatoria de
las circunferencias de dimetro interno
y externo)
Tiras, tubo e tems >1 mm Equivalente a 60 cm2 del rea total Pedazos con hasta 5 x 0,3 cm
moldados de superficie (todas las superficies
expuestas combinadas)
Elastmeros >1 mm Equivalente a 25 cm2 del rea total Sin subdivisin2
de superficie (todas las superficies
expuestas combinadas)

Preparacin de extractos. Colocar una muestra, debida- PRUEBA DE INYECCIN SISTMICA

mente preparada, para ser probada en un recipiente de ex-
traccin y aadir 20 ml del medio adecuado. Repetir esas
instrucciones para cada medio de extraccin necesario para
la prueba. Preparar, tambin, un blanco de 20 ml de cada
medio para inyecciones paralelas y comparaciones. Extraer
Esta prueba es elaborada para evaluar las respuestas sist-
micas a los extractos de materiales probados por medio de
inoculacin en ratones.

por calentamiento, en una autoclave a 121 C, por 60 mi-
nutos, y en el caso de un horno a 70 C, por 24 horas, o a
50 C, por 72 horas. Posibilitar tiempo suficiente para que
el lquido del recipiente alcance la temperatura de extrac-
cin. En ningn momento las condiciones de extraccin
deben causar alteraciones fsicas, tales como fusin o de-
rretimiento de las partes de muestra, para no resultar en
una disminucin de la superficie disponible. Una leve ad-
herencia de las partes puede ser tolerada. Aadir siempre,
individualmente, las partes limpias al medio de extraccin.
Si los tubos de cultivo son utilizados para extraccin de
aceite vegetal con autoclave, sellar adecuadamente las ta-
pas de rosca con cinta adhesiva sensible a la presin. En-
friar hasta temperatura ambiente, sin embargo, no inferior
a 20 C, agitar, vigorosamente, por varios minutos e, inme-
diatamente, decantar cada extracto de forma asptica, en
un recipiente estril y seco. Almacenar los extractos a una
temperatura entre 20 C y 30 C y no utilizar para pruebas
despus de 24 horas.
6
Animal de prueba. Utilizar ratones albinos saludables,
no utilizados anteriormente, pesando entre 17 y 23 g. Para
cada grupo de prueba, utilizar apenas los ratones del mis-
mo origen. Agua y alimentos de composicin conocidos,
comnmente utilizados en animales de laboratorio, son
permitidos a gusto.
Procedimiento. Antes de retirar la dosis de inoculacin,
agitar, vigorosamente cada extracto para asegurar la dis-
tribucin uniforme de la materia extrada. Las partculas
visibles no deben ser administradas por va intravenosa. En
un grupo de prueba, inocular en cada uno de los cinco ra-
tones la muestra o el blanco, conforme descrito en la Tabla
4, diluyendo cada g del extracto de la muestra preparada
con Polietilenglicol 400 y el blanco correspondiente, con
4,1 volmenes de solucin de cloruro de sodio inyectable,
para obtener una solucin con una concentracin de cerca
de 200 mg de Polietilenglicol por ml.

Tabla 4 - Procedimiento para inoculacin Prueba de Inyeccin Sistmica

Velocidad de
Va de
Extracto o Blanco Dosis por kg Inoculacin, pL
Administracin*
por segundo
Solucin de alcohol 1:20 en solucin de cloruro de sodio 50 ml IV 100
inyectable
Polietilenglicol 400 10 g IP
Vehculo de medicamentos (cuando aplicable) 50 ml IV 100
50 ml IP
Oleo vegetal 50 ml IP
* IV = intravenosa (muestra acuosa y blanco); IP = intraperitoneal (muestra oleosa y blanco).

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 318 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Observar los animales en los siguientes tiempos: inmedia-
tamente despus de la inoculacin, despus de 4 horas y,
como mnimo despus de 24, 48 y 72 horas. Si durante
el perodo de observacin, ninguno de los animales trata-
dos con el extracto de la muestra presenta una reactividad
biolgica significativamente mayor que los tratados con el
blanco, la muestra satisface los requisitos de esta prue-
ba. Si dos o ms ratones mueren o presentan un compor-
tamiento anormal, como convulsiones o postracin, o si
hay prdida de peso corporal superior a 2 g en tres o ms
ratones, la muestra no atiende a los requisitos de la prueba.
Si algn animal tratado con la muestra exhibe solamente
leves seales de reactividad biolgica, y si apenas un ani-
mal presenta sntomas graves de reactividad biolgica o
muere, repetir la prueba utilizando grupos de 10 ratones.
En la prueba de repeticin, durante el perodo de obser-
vacin, todos los 10 animales tratados con la muestra no
deben presentar ninguna reactividad biolgica significativa
a ms que los tratados con el blanco.
PRUEBA INTRACUTNEA
Esta prueba fue elaborada para evaluar las respuestas loca-
les para los extractos de los materiales probados, despus
de inoculacin intracutnea en los conejos.
Animal de prueba. Seleccionar conejos albinos saluda-
bles, cuyo pelo posibilite ser preso al ras de la piel, siendo
esa, fina y libre de irritacin o trauma. Al lidiar con los
6
animales durante los perodos de observacin, evitar to-
car los locales de inoculacin, excepto para diferenciar un
edema y un residuo de aceite. Los conejos anteriormente
utilizados en pruebas independientes, como la prueba de
pirognico (5.5.2.1), y que reposaron el perodo previsto,
pueden ser utilizados para esta prueba, siempre que tengan
piel limpia, utilizados para esta prueba, siempre que tengan
piel limpia, sin manchas.
Procedimiento. Antes de retirar la dosis de inoculacin,
agitar, vigorosamente, cada extracto para asegurar la dis-
tribucin uniforme de la materia extrada. En el da de
la prueba, prender, cuidadosamente, el pelo del lomo del
animal, en ambos los lados de la columna vertebral, en-
cima de un rea de prueba suficientemente grande. Evitar
la irritacin y el trauma. Retirar el pelo suelto por medio
de vaco. Si necesario, antes de la inoculacin, limpiar
levemente la piel con alcohol diluido y secar. Ms de un
extracto de un determinado material puede ser utilizado
por conejo, se es determinado que los resultados no sern
afectados. Para cada muestra, utilizar dos animales e ino-
cular va intracutnea, utilizando un lado del animal para
la muestra y el otro para el blanco, conforme descrito en la
Tabla 5. Diluir cada g del extracto de la muestra preparada
con polietilenglicol 400, y el blanco correspondiente con
7,4 volmenes de solucin de cloruro de sodio inyectable
para obtener una solucin con concentracin de cerca de
120 mg de polietilenglicol por ml.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Tabla 5 - Prueba Intracutnea.
Nmero de
Extracto o Dosis, pL
Locales (por
Blanco por sitio
animal)
Muestra 5 200
Blanco 5 200
Examinar los sitios de inoculacin para evidenciar cual-
quier reaccin del tejido, tales como eritema, edema y ne-
crosis. Si necesario, limpiar levemente la piel con alcohol
diluido para facilitar la lectura de los locales de inocula-
cin. Observar todos los animales 24, 48 y 72 h despus de
la inoculacin. Clasificar las observaciones en una escala
numrica para el extracto de la muestra y para el blanco,
utilizando la Tabla 2. Si necesario, agarrar nuevamente
el pelo durante el perodo de observacin. El promedio
de puntuaciones de eritema y edema para los locales de la
muestra y del blanco son determinadas para cada conejo y
cada intervalo de puntuacin despus de 24, 48 y 72 horas
de inoculacin. Despus de la puntuacin referente a 72
horas, todas las puntuaciones de eritema, ms las de edema
son totalizadas, separadamente, para cada muestra y blan-
co. Dividir cada total por 12 (2 animales x 3 perodos de
puntuacin x 2 categoras de puntuacin) para determinar
el promedio total para cada muestra frente a cada blanco
correspondiente. Los requisitos de la prueba son cumplidos
si la diferencia entre la puntuacin promedio de la mues-
tra y del blanco es inferior o igual a 1,0. Si en cualquier
perodo de observacin, el promedio para la reaccin de
la muestra es cuestionable por ser mayor que el promedio
para la reaccin del blanco, repetir la prueba utilizando tres
conejos adicionales. Los requisitos de la prueba son cum-
plidos si la diferencia entre la puntuacin promedio de la
muestra y del blanco es igual o inferior a 1,0.
PRUEBA DE IMPLANTE
La prueba de implante es elaborada para evaluacin de ma-
teriales plsticos y otros polmeros cuando entran en con-
tacto directo con tejido vivo. La preparacin adecuada de
las tiras de implante y su implantacin deben ser realizadas
bajo condiciones de asepsia. Preparar para implantacin 8
tiras de la muestra y 4 tiras de estndar. Cada tira debe me-
dir como mnimo 10 x 1 mm. Los bordes de las tiras deben
ser lo ms suave posible, para evitar traumas mecnicos
adicionales en la implantacin. Las tiras de tamao mni-
mo especificado son implantadas por medio de una aguja
hipodrmica (calibre 15 a 19) con punta intravenosa y un
trcar estril. Utilizar una u otra aguja pre-esterilizada en
que las tiras estriles de plstico estn insertadas, asptica-
mente, o insertar cada tira limpia en una aguja cuya cnula
y el orificio central estn protegidos con una tapa adecuada
y, en seguida, sometidos al procedimiento de esterilizacin
apropiado.
Animal de prueba. Seleccionar conejos adultos saluda-
bles con peso mnimo de 2,5 kg, y que posean msculos
paravertebrales suficientemente grandes para posibilitar la
implantacin de las tiras de prueba. No utilizar ningn te-
jido muscular adems de aquel situado en el rea paraver-
tebral. Los animales deben ser anestesiados con un agente

anestsico comnmente utilizado para un grado de pro-
fundidad suficiente para impedir movimientos musculares,
como espasmos.
Procedimiento. Realizar la prueba en un rea limpia. En
el da de la prueba o hasta 20 horas antes, atar el pelo de
los animales en ambos los lados de la columna vertebral.
Retirar los pelos sueltos por medio de vaco. Antes de la
inoculacin, limpiar levemente la piel con alcohol dilui-
do y secarla. Implantar cuatro tiras de la muestra en los
msculos paravertebrales, distantes cerca de 2,5 cm una
de la otra, en un lado de la columna de cada uno de los dos
conejos, de 2,5 a 5,0 cm de la lnea mediana y paralela a
la columna vertebral. De forma semejante, implantar dos
tiras estndar en el msculo opuesto de cada animal. In-
sertar un catter estril en la aguja para asegurar la tira de
implante en el tejido con la retirada de la aguja. Despus
de la implantacin de una tira, si hay un sangrado excesivo,
colocar otro pedazo en duplicado en otro local. Mantener
los animales por un perodo mnimo de 120 horas, y sacrifi-
carlos en el final del perodo de observacin con una sobre-
dosis de un agente anestsico o de otros agentes adecuados.
Posibilitar que transcurra un tiempo suficiente para cortar
el tejido, sin sangrado. Examinar macroscpicamente el
rea del tejido alrededor de la parte central de cada tira de
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 319
implante. Utilizar un lente de aumento y una fuente de luz
auxiliar. Observar si hay hemorragias, necroses, descolora-
ciones e infecciones en los locales de implante de la mues-
tra y del control y registrar las observaciones. Si hubiere
encapsulamiento, medir y registrar el ancho de la cpsula,
arredondeando para el 0,1 mm ms prximo, a partir de la
periferia del espacio ocupado por el implante del control
o de la muestra hasta la periferia de la cpsula. Puntuar el
encapsulamiento, conforme a Tabla 6.
Tabla 6 - Evaluacin de encapsulamiento
en la prueba de Implante.
Ancho de la Cpsula Puntuacin
Ninguna 0
hasta 0,5 mm 1
0,6-1,0 mm 2
1,1-2,0 mm 3
Superior a 2,0 mm 4
Calcular las diferencias entre el promedio de puntuacin
para los sitios de muestra y de control. Los requisitos de
la prueba son cumplidos si la diferencia no es superior a
1, o si la diferencia para ms de uno de los cuatro locales
de implante, no excede a 1 en cualquiera de los animales.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

7 PREPARACIN DE PRODUCTOS ESTRILES
7.1 ESTERILIZACIN Y
GARANTA DE ESTERILIDAD
Esterilidad es la ausencia de microorganismos viables.
Como la obtencin de la esterilidad de cualquier tem ais-
lado de una poblacin sometida al proceso de esterilizacin
no puede ser garantizada ni demostrada, la esterilidad de
un lote es definida en trminos probabilsticos por medio
de un proceso de produccin adecuadamente validado.
La inactivacin de microorganismos por medios fsicos o
qumicos sigue una ley exponencial y, por tanto, hay una
probabilidad estadstica de que microorganismos puedan
sobrevivir al proceso de esterilizacin. Para un determina-
do proceso, la probabilidad de supervivencia est determi-
nada por el nmero; tipo y resistencia de los microorganis-
mos presentes y por el ambiente durante la esterilizacin.
El nivel de garanta de esterilidad de un proceso de esterili-
zacin traduce la seguridad con que el proceso en cuestin
esteriliza un conjunto de tems, estando expresado como
la probabilidad de un tem no estril en aquella poblacin.
El nivel de garanta de esterilidad de 10-6, por ejemplo,
indica la probabilidad de no ms que un microorganismo
viable en 1 x 106 tems esterilizados del producto final.
El nivel de garanta de esterilidad de un proceso para un
determinado producto est establecido por medio de estu-
dios de validacin apropiados y generalmente es aceptado
que productos inyectables o dispositivos crticos estriles
sometidos a la esterilizacin terminal alcancen una pro-
babilidad de supervivencia microbiana de 10-6. Con pro-
ductos termoestables, el abordaje frecuente es exceder el
tiempo crtico necesario para conseguir la probabilidad de
supervivencia microbiana de 10-6 (sobreesterilizacin).
Sin embargo, para productos termosensibles, el abordaje
de sobremorte no puede ser empleado y el desarrollo del
ciclo de esterilizacin depende del conocimiento de la car-
ga microbiana del producto.
El valor D, tiempo de reduccin decimal, es el tiempo en
minutos necesario para reducir la poblacin microbiana en
90%, o 1 ciclo logartmico, a una condicin especfica, eso
es, para una fraccin sobreviviente de 1/10. Por tanto, don-
de el valor D de una preparacin de indicador biolgico de,
por ejemplo, esporas de Geobacillus stearothermophilus
es de 1,5 minutos bajo los parmetros totales de proceso,
esto es, a 121 C, se fuese tratado por 12 minutos bajo las
mismas condiciones, se puede declarar que el incremento
de letalidad es de 8 D. La aplicacin de ese incremento
en la esterilizacin del producto depende de la carga mi-
crobiana inicial. Asumiendo que la carga microbiana del
producto presenta resistencia al proceso de esterilizacin
igual a la resistencia del indicador biolgico y que la carga
inicial del producto es de 102 microorganismos, el incre-
mento de letalidad de 2 D reducira la carga microbiana a
1 (tericamente 100) y, consecuentemente, 6 D adicionales
resultara en una probabilidad de supervivencia microbiana
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 321
calculada de 10-6. Bajo las mismas condiciones, un incre-
mento de letalidad de 12 D puede ser usado como abordaje
tpico para obtencin de la sobremorte. Generalmente, la
probabilidad de supervivencia de la carga microbiana en
el material, cuyo proceso de validacin de la esterilizacin
est siendo realizado, no es la misma del indicador biol-
gico. Para el uso vlido, sin embargo, es esencial que la re-
sistencia del Indicador Biolgico sea mayor que aquella de
la biocarga del material a ser esterilizado, siendo necesario
asumir la situacin de peor caso durante la validacin. El
valor D del indicador biolgico a ser empleado debe ser de-
terminado o verificado para cada programa de validacin y,
tambin, en la ocurrencia de alteracin de ese programa.
La determinacin de curvas de supervivencia, o abordaje de
ciclo fraccionado, pueden ser empleados para determinar el
valor D del indicador biolgico escogido para el proceso de
esterilizacin especfico. Ese abordaje, tambin, puede ser
usado para evaluar la resistencia de la biocarga del producto.
Ciclos fraccionados son utilizados para evaluar la reduccin
del conteo microbiano o para alcanzar fraccin negativa.
Esos nmeros pueden ser usados tanto para determinar la
letalidad del proceso bajo condiciones de produccin como
para establecer ciclos de esterilizacin apropiados. Un indi-
cador biolgico adecuado, tal como la preparacin de Geo-
bacillus stearothermophilus, tambin, debe ser usado du-
rante la esterilizacin de rutina. Cualquier mtodo de carga
microbiana, utilizado para la garanta de esterilidad requiere
vigilancia adecuada de la resistencia microbiana del tem
para detectar cualquier cambio.
7.1.1 MTODOS DE 7
ESTERILIZACIN
Con un mtodo de esterilizacin se tiene por finalidad re-
tirar, o destruir todas las formas de vida, animal o vegetal,
macroscpica o microscpica, saprfitas o no, del produc-
to considerado, sin garantizar la inactivacin de toxinas
y enzimas celulares. El procedimiento seleccionado para
alcanzar el nivel de garanta de esterilidad depende del co-
nocimiento de la naturaleza del material a ser esterilizado;
del proceso de esterilizacin a ser empleado y de las altera-
ciones que pueden ocurrir en el material, en funcin de la
esterilizacin. El conocimiento del tipo, de la cantidad y de
la fuente de los contaminantes en los productos, antes de la
esterilizacin, y la aplicacin de mtodos para minimizar
tal contaminacin y prevenirla post-procesamiento contri-
buyen para asegurar el xito de la esterilizacin.
En ese captulo estn registrados conceptos y principios in-
volucrados en el control de calidad de productos que deben
cumplir la exigencia de esterilidad e incluye descripcin de
los mtodos de esterilizacin e instrucciones para proceso
asptico.
 322 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
7.1.1.1 MTODOS FSICOS
7.1.1.1.1 Esterilizacin por el calor
El calor es el agente esterilizante ms simple, econmico
y seguro del que se dispone, sin embargo la sensibilidad
de los diferentes microorganismos a la accin del calor es
bastante variada, siendo las formas esporuladas las ms re-
sistentes. La eficiencia en la inactivacin de los microorga-
nismos es dependiente de la temperatura, tiempo de expo-
sicin y presencia de agua, pues en la presencia de esa son
exigidos menores tiempos de exposicin y temperaturas.
La esterilizacin por el calor hmedo causa la coagulacin
de las protenas celulares de los microorganismos, mien-
tras la esterilizacin por el calor seco se da en funcin de
procesos oxidantes, que necesitan de altas temperaturas y
largo tiempo de exposicin.
CALOR HMEDO
El proceso de esterilizacin empleando vapor saturado bajo
presin es realizado en cmara denominada autoclave. El
principio bsico de operacin es la sustitucin del aire de la
cmara por vapor saturado. Para dislocar aire ms eficien-
temente de la cmara y de dentro de los productos, el ciclo
de esterilizacin puede incluir etapas de evacuacin de aire
y de vapor. Para ese mtodo de esterilizacin, la condicin
de referencia para esterilizacin de preparaciones acuosas
es de calentamiento de, como mnimo, 121 C por lo me-
nos por 15 minutos. Combinaciones distintas de tiempo y
temperatura pueden ser utilizadas, mientras que validadas
y que demuestren la eficacia del proceso escogido, propor-
cionando un nivel adecuado y reproductible de letalidad
cuando operado, rutinariamente, dentro de las tolerancias
establecidas. Son aplicados procedimientos y precauciones
para alcanzar un nivel de seguridad de esterilidad de 10-6
7 o mejor. Combinaciones de tiempo y temperatura deben
ser establecidas basadas en factores como naturaleza del
material y su termolabilidad, penetrabilidad del vapor en
el producto a ser esterilizado y otros parmetros definidos
en el proceso de validacin. Cuando sea utilizada tempe-
ratura de esterilizacin diferente de 121 C, el concepto de
F0 debe ser empleado. El F0 en una temperatura particular
diferente de 121 C, es el tiempo en minutos necesario para
suministrar la letalidad equivalente a aquella suministrada
a 121 C durante un referido tiempo. F0 es una medida de
la eficacia esterilizante, eso es, es el nmero de minutos de
esterilizacin trmica por vapor a la determinada tempera-
tura suministrada a un recipiente o unidad de producto en
un dado valor Z.
Para garantizar la eficiencia del proceso de esterilizacin,
la distribucin de la carga en la cmara debe ser hecha de
manera que propicie el contacto del vapor con las regio-
nes de ms difcil acceso. Para materiales esterilizados por
calor hmedo, es aceptable que se alcance una probabili-
dad de supervivencia microbiana de la orden de 10-6. Para
productos termoestables, el tiempo necesario para alcanzar
la condicin anterior puede ser excedido, resultando en so-
bremorte, lo que no se aplica a productos que puedan sufrir
alteracin en funcin de la exposicin excesiva al calor. En
esa situacin, el desarrollo del ciclo de esterilizacin de-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
pende, especialmente, del conocimiento de la carga micro-
biana en el producto, que debe ser determinada en cantidad
sustancial de lotes del producto, anteriormente a la esterili-
zacin. El valor D del indicador biolgico adecuado usado,
como Geobacillus stearothermophilus, debe ser evaluado
en el programa de validacin y en la ocurrencia de alguna
alteracin de ese programa.
CALOR SECO
La esterilizacin trmica por calor seco es realizada en
estufa con distribucin homognea del calor, que puede
ser obtenida por circulacin forzada de aire. Pueden ser
esterilizados artculos como vidrios, metales, polvos, va-
selinas, grasas, ceras, soluciones y suspensiones oleosas, y
tejidos especiales. Ese proceso es aplicado, principalmen-
te, para materiales sensibles a la esterilizacin por calor
hmedo. Para ese mtodo de esterilizacin, la condicin
de referencia es una temperatura mnima de 160 C por,
por lo menos, 2 horas. Combinaciones distintas de tiempo
y temperatura pueden ser utilizadas, siempre que validadas
y que demuestren la eficacia del proceso escogido, propor-
cionando un nivel adecuado y reproductible de letalidad
cuando operado rutinariamente dentro de las tolerancias
establecidas.
Un nivel de garanta de esterilidad de 10-12 es considera-
do aceptable para productos termoestables. Un ejemplo de
indicador biolgico para validar y monitorear la esteriliza-
cin por calor seco es la preparacin de esporas de Bacillus
atrophaeus.
El proceso empleando el calor seco, tambin, puede ser
usado para esterilizacin y despirogenizacin como parte
integrante del proceso de llenado asptico, en que se re-
quiere temperaturas muy altas debido al menor tiempo de
exposicin al calor. En los procesos continuos, usualmente,
hay necesidad de una etapa de enfriamiento anterior al pro-
ceso de envasado. En funcin del menor tiempo de exposi-
cin del material. Con el programa de validacin se deben
alcanzar parmetros como la uniformidad de temperatura y
el tiempo de permanencia.
El calor seco en temperaturas mayores que 220 C puede
ser utilizado para la esterilizacin y despirogenizacin de
elementos de vidrio. En ese caso, un desafo con endoto-
xina bacteriana debe formar parte del programa de valida-
cin, demostrando una reduccin de como mnimo 3 ciclos
logartmicos de endotoxina resistente al calor, o sea, probar
materiales inoculados con como mnimo 1000 unidades de
endotoxina bacteriana. La prueba, con lisado de Limulus,
puede ser usada para demostrar que la endotoxina fue inac-
tivada a no ms que 1/1000 de la cantidad original, siendo
que el remanente de endotoxina es medido para garantizar
la reduccin de 3 ciclos logartmicos.
7.1.1.1.2 Esterilizacin por radiacin ionizante
Las radiaciones ionizantes son emisiones de alta energa,
bajo la forma de ondas electromagnticas o partculas, que
al chocarse con los tomos del material irradiado alteran
su carga elctrica por desplazamiento de electrones, trans-

formando los tomos irradiados en iones positivos o nega-
tivos. Cuando esas radiaciones atraviesan las clulas crean
hidrgeno libre; radicales hidroxilos y algunos perxidos,
que a su vez pueden causar diferentes lesiones intracelu-
lares. Las principales fuentes de radiacin son: rayos alfa;
beta; gama y rayos X. Los dos tipos de radiacin ionizante
en uso son decaimiento de radioistopo (radiacin gama)
y radiacin por haz de electrones. Los productos son ex-
puestos a una radiacin ionizante en la forma de radiacin
gama de una fuente radioisotpica adecuada (por ejemplo,
cobalto 60) o de un haz de electrones energizados por me-
dio de un acelerador de electrones.
Adems de la posibilidad del procesamiento a bajas tem-
peraturas, lo que posibilita la esterilizacin de productos
termosensibles, la esterilizacin por radiacin ionizante
posee ventajas como la baja reactividad qumica y el hecho
de que existen pocos parmetros a ser controlados, siendo
imprescindible el control de la dosis de radiacin adsorbi-
da. La dosis de radiacin establecida para la esterilizacin
debe garantizar el no comprometimiento de los materiales
a ser esterilizados. Para la radiacin gamma, la validacin
del proceso incluye el establecimiento de la compatibilidad
del material, el establecimiento del modelo de cargamento
del producto y el mapeo de dosis en el recipiente de esteri-
lizacin, identificando las zonas de dosis mxima y mni-
ma de radiacin, la definicin del tiempo de exposicin y
la comprobacin de la aplicacin de la dosis de esteriliza-
cin requerida. Para irradiacin por haz de electrones, de-
ben ser controlados, adems, voltaje, corriente, velocidad
de la cinta transportadora y dimensin de barrido del haz
de electrones. Para ese proceso de esterilizacin, la dosis
adsorbida de referencia es de 25 kGy, sin embargo en al-
gunas situaciones hay necesidad de seleccin de una dosis
mayor o menor. La dosis escogida debe ofrecer un nivel de
letalidad adecuado y reproductible cuando el proceso es
operado rutinariamente dentro de las tolerancias estable-
cidas. Procedimientos y precauciones deben ser aplicados
para alcanzar un nivel de garanta de esterilidad de 10-6 o
mejor.
Para validar la eficacia de esa esterilizacin, especialmente
cuando se utilizan dosis menores, es necesario determinar
la resistencia a la radiacin de la carga microbiana del pro-
ducto. Estndares de cargamento de producto especfico
y la distribucin de dosis mnimas y mximas adsorbidas
deben ser establecidos. Las dosis adsorbidas son normal-
mente medidas por medio de dosmetros especficos, como
soporte plstico estandarizado que muestra intensificacin
del color proporcional a la cantidad de radiacin adsorbi-
da. El abordaje de ciclo fraccionado da los datos utilizados
para determinar el valor D10 del indicador biolgico, infor-
macin aplicada para extrapolar la cantidad de radiacin
adsorbida, para establecer una probabilidad adecuada de
supervivencia microbiana. Actualmente, la dosis se basa en
la resistencia a la radiacin de la carga microbiana hetero-
gnea natural contenida en el producto a ser esterilizado.
Los procedimientos de validacin pueden usar la exposi-
cin de producto inoculado, usando organismos resisten-
tes, como Bacillus pumilus, o exposicin de muestras de
producto acabado de la lnea de produccin a la dosis su-
bletal de proceso.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 323
El procedimiento para seleccin de la dosis de radiacin,
basado en la evaluacin de la resistencia de los microorga-
nismos constituyentes de la carga microbiana del producto
a ser esterilizado, posibilita una determinacin ms repre-
sentativa de la resistencia de esa al trabajarse con microor-
ganismos con diferentes susceptibilidades a la radiacin.
Ese procedimiento exige la enumeracin de la poblacin
microbiana en muestreo representativa de diferentes lotes
de producto. Con el conocimiento de la carga microbiana,
la dosis de radiacin es establecida basndose en tabla dis-
ponible en la literatura. Otro mtodo que posibilita el esta-
blecimiento de la dosis de radiacin se basa en el empleo
de incrementos de dosis de radiacin hasta obtener, como
mximo, una muestra positiva en 100 unidades irradiadas.
Esa informacin provee la base para extrapolacin de esa
dosis y obtencin de la dosis de radiacin. Evaluaciones
peridicas deben ser hechas para garantizar que los valores
establecidos continan siendo efectivos (referencia: ISO
11137-1: 2006 Sterilization of health care products Ra-
diation Part 1: Requirements for development, validation
and routine control of a sterilization process for medical
devices).
La eficiencia del ciclo de esterilizacin debe ser evaluada,
peridicamente, por la determinacin de la carga microbia-
na del producto, o por el empleo de indicador biolgico y
por el uso de dosmetros calibrados.
7.1.1.1.3 Esterilizacin por filtracin
La filtracin es empleada para esterilizacin de soluciones
termosensibles por eliminacin fsica de los microorganis-
mos contaminantes. El material filtrante no puede liberar
fibras o materiales extrables indeseables para la solucin
filtrada, lo que restringe la naturaleza del elemento filtrante
a vidrio, metal, polmeros sintetizados y membranas poli-
mricas. El montaje de un filtro consiste de una matriz po-
rosa insertada en un abrigo impermeable. La eficiencia de
un medio, o sustrato filtrante depende del tamao del poro
7
del material, de la adsorcin de microorganismos sobre o
dentro de la matriz del filtro y del mecanismo de tamiz o
exclusin. El efecto de exclusin por tamao es funcin de
la abertura (dimetro) de los poros, y la adsorcin depende
de la composicin, espesor del elemento filtrante y fluido
que est siendo filtrado.
El tamao de los poros de las membranas filtrantes es es-
timado por valor nominal que refleja la capacidad de la
membrana del filtro de retener microorganismos repre-
sentados por cepas especficas. La filtracin para fines de
esterilizacin es, normalmente, realizada con membranas
de graduacin de tamao de poro nominal de 0,2 m, o
menor. Esas membranas de filtracin esterilizante, clasifi-
cadas como 0,22 m o 0,2 m, dependiendo del fabrican-
te, son capaces de retener 100% de un cultivo conteniendo
107 microorganismos de Brevundimonas diminuta ATCC
19146, por cm2 de superficie de membrana filtrante, bajo
una presin mnima de 30 psi (2,0 bar).
El usuario es responsable de la eleccin del filtro en funcin
de la naturaleza del material a ser filtrado, que atienda a la
necesidad del proceso de esterilizacin, debiendo, tambin,
 324 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
determinar si los parmetros empleados en la produccin
influenciarn la eficiencia de la retencin microbiana. Una
vez que la eficiencia del proceso de filtracin, tambin, es
influenciada por la biocarga de la solucin a ser filtrada,
es importante la determinacin de la calidad microbiana
de las soluciones antes de la filtracin, as como el esta-
blecimiento de parmetros como presin; tasa de flujo y
caractersticas de la unidad filtrante.
El valor de reduccin logartmica, tambin, puede ser uti-
lizado para evaluar la capacidad de retencin de la mem-
brana filtrante. Por ejemplo, un filtro de 0,2 m, que puede
retener 107 microorganismos de una cepa especfica, ten-
dr un valor de reduccin logartmica de, como mnimo, 7,
bajo condiciones declaradas.
Las membranas filtrantes comercialmente disponibles inclu-
yen acetato de celulosa, nitrato de celulosa, fluorcarbona-
to, polmeros acrlicos, polister, policarbonato, cloruro de
polivinilo, vinil, nylon, polytef y adems, membranas me-
tlicas. Los filtros de membrana, por ser pelculas polimri-
cos, ofrecen muchas ventajas y algunas desventajas cuando
comparados a los filtros de profundidad como porcelana o
material sinterizado. Como buena parte de la superficie de la
membrana es un espacio vaco o abierto, el correcto montaje
y esterilizacin del filtro proporcionan la ventaja de una alta
tasa de flujo. Una desventaja es que, debido a la fragilidad
de la membrana, se debe garantizar la ausencia de ruptura
durante el montaje, esterilizacin, o uso.
El sistema de filtracin debe ser probado antes y despus
del proceso de filtracin para garantizar el mantenimiento
de su integridad durante el proceso de filtracin. Pruebas
tpicas de uso incluyen la prueba del punto de burbuja,
la prueba de flujo de aire difusivo, la prueba de retencin
bajo presin y la prueba de flujo progresivo. La prueba de
7 punto de burbuja consiste en prueba no destructiva, cuya
denominacin va de la visualizacin de burbujas despus
de la aplicacin de una determinada presin sobre el fil-
tro. Como ejemplo, despus de la filtracin de cerca de
dos litros de agua destilada estril, se aplica presin cons-
tante de nitrgeno, durante 5 minutos para membranas de
ster de celulosa de 0,2 m. Para cada tipo de filtro hay
un valor lmite de presin a ser soportado, sin que presen-
te la formacin de burbujas, indicando la resistencia del
material filtrante. Las pruebas deben ser correlacionadas
con la retencin de microorganismos. Pruebas adicionales
realizadas por el fabricante del filtro, como el de desafo
microbiano, no son normalmente repetidas por el usuario.
7.1.1.2 MTODO QUMICO
7.1.1.2.1 Gas xido de etileno
La esterilizacin por gas puede ser el mtodo de eleccin
para materiales que no resisten a altas temperaturas como
en el procesamiento por calor seco o calor hmedo. El
agente activo generalmente empleado en la esterilizacin
por gas es el xido de etileno. Entre las desventajas de ese
agente esterilizante estn sus propiedades mutgenas; la
posibilidad de residuos txicos en los materiales tratados
y su naturaleza altamente inflamable, excepto cuando en
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
ciertas mezclas con gases inertes. El proceso de esteriliza-
cin es generalmente realizado en una cmara presurizada
proyectada de forma semejante a la autoclave, pero con ca-
ractersticas especficas como sistema para desgasificacin
despus de la esterilizacin y minimizacin de la exposi-
cin de los operadores a gas.
El programa de calificacin del proceso de esterilizacin
con xido de etileno es ms amplio que de otros procesos
de esterilizacin, dado que adems de la temperatura, de-
ben ser controlados la humedad; vaco / presin positiva y la
concentracin de xido de etileno. Es importante determinar
y demostrar que todos los parmetros crticos del proceso
estn adecuados en el interior de la cmara de esterilizacin
durante todo el ciclo. Como los parmetros de esterilizacin
aplicados a los productos a ser procesados son crticos, es
recomendable el pre-condicionamiento de la carga para mi-
nimizar el tiempo de exposicin a la temperatura requerida.
El programa de validacin es generalmente realizado em-
pleando el producto inoculado, o producto simulado inocu-
lado con preparaciones apropiadas como esporas de Bacillus
atrophaeus. Los indicadores biolgicos, normalmente, son
empleados para establecer la probabilidad final de supervi-
vencia microbiana, usando el concepto de ciclo fraccionado,
para proyectar un ciclo de esterilizacin con xido de etile-
no, y deben ser usados en cargas del producto, o producto
simulado, con cmara llena.
El indicador biolgico debe ser empleado en el monitoreo
de ciclos de rutina, adems del planeamiento del ciclo de
esterilizacin por xido de etileno. Otro aspecto importan-
te del planeamiento del proceso de esterilizacin es la de-
finicin del tipo de envasado del material a ser procesado
y su distribucin en la cmara de esterilizacin, debido a
la limitada capacidad de difusin del xido de etileno en
reas ms internas del producto.
7.1.2 VALIDACIN DEL
PROCESO DE ESTERILIZACIN
La validacin debe demostrar de forma documentada que
el proceso de esterilizacin establecido ir, consistente-
mente, suministrar productos que atiendan el nivel de ga-
ranta de esterilidad requerido. Los productos esterilizados
de acuerdo con el proceso validado deben atender las espe-
cificaciones pre-determinadas y las caractersticas de cali-
dad relacionadas a la funcionalidad y seguridad.
Una vez validado el proceso, l deber ser revalidado, pe-
ridicamente, y despus de alteraciones de producto; equi-
pos y proceso, que puedan comprometer el nivel de garan-
ta de esterilidad especificado.
Los principales elementos de la validacin son: Califica-
cin de Instalacin; Calificacin de Operacin y Califica-
cin de Desempeo.
7.1.2.1 CALIFICACIN DE INSTALACIN
La aplicacin del plano de calificacin de instalacin debe
suministrar evidencia documentada que el equipo y todos

los tems auxiliares fueron suministrados, instalados y fun-
cionan de acuerdo con las especificaciones. Debe demos-
trarse que el equipo de esterilizacin, sus componentes,
tems auxiliares y suministros, como vapor, agua y aire,
fueron correctamente proyectados, instalados y calibrados.
A fin de atender a los parmetros y lmites recomenda-
dos para la esterilizacin, es necesario el empleo de ins-
trumentacin apropiada para monitorear y controlar los
parmetros crticos como temperatura, tiempo, humedad,
concentracin del gas esterilizante o radiacin adsorbida.
Esos instrumentos deben ser evaluados en la calificacin
de instalacin.
La calificacin de instalacin comprende los siguientes
elementos: equipo, instalacin y funcin.
En lo que se refiere al equipo e instalacin, las especifi-
caciones del esterilizador; tems auxiliares y servicios; los
procedimientos operacionales; la localizacin de instala-
cin y la documentacin deben ser previamente definidos
y verificados en la calificacin de instalacin, garantizada
su conformidad. Para garantizar la funcin, debe ser verifi-
cado que el equipo y los sistemas de seguridad operacional
funcionan de acuerdo con sus especificaciones; los ciclos
de operacin estn de acuerdo con lo definido y que no hay
evidencia de fuga de las utilidades o esterilizador, cuando
aplicable.
En los procedimientos documentados para la calificacin
de instalacin debe estar especificado como cada elemento
de la calificacin es planeado, realizado y revisado. La do-
cumentacin que proporciona soporte a la calificacin de
instalacin incluye descripcin de las caractersticas fsicas
y operacionales del equipo; sus componentes y servicios.
Dibujos y diagramas de proceso e instrumentacin deben
ser verificados contra la configuracin propuesta y actuali-
zados, cuando necesario. Sistemas de seguridad aplicables
deben ser evaluados para garantizar desempeo; calidad y
seguridad de los equipos y operadores.
La calificacin de la instalacin es necesaria para nuevos
equipos, o cuando el esterilizador existente es sustituido
o transferido. La calificacin debe ser rehecha en interva-
los de tiempo definidos, y al menos parcialmente cuando
ocurren modificaciones que puedan alterar la eficacia del
proceso de esterilizacin, como sustitucin o reforma de
equipos, o partes, modificaciones en los suministros de
proceso y alteracin en fuente radioactiva
7.1.2.2 CALIFICACIN DE OPERACIN
En la calificacin de operacin debe demostrarse que el
equipo instalado es capaz de realizar el proceso de esteri-
lizacin especificado dentro de los intervalos definidos. El
intervalo de parmetros y los lmites de operacin deben
ser establecidos en la definicin del proceso. Antes de la
calificacin de operacin, el estado de calibracin de toda
instrumentacin usada para monitorear, controlar, indicar y
registrar debe ser confirmado.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 325
Para autoclaves y otros esterilizadores que emplean proce-
so trmico, deben ser realizados estudios de distribucin
del calor en diferentes posiciones considerando el tamao
de la cmara y la carga. Debe confirmarse que a cmara
(vaca y llena) opera dentro de los parmetros crticos en
todos sus principales locales. El nmero y posicin de los
termopares son determinados por el tipo y configuracin
de la carga; tamao de equipo; tipo de instrumento y ciclo
empleado. Una banda aceptable de temperatura en la c-
mara vaca es 1 C cuando la temperatura de la cmara es
121 C. Para esterilizadores a xido de etileno, la humedad
relativa; la concentracin del gas y la temperatura deben
ser monitoreadas por sensores distribuidos en posiciones
adecuadas. Sistemas de seguridad aplicables deben ser pro-
bados. Softwares de control deben ser validados y desafia-
dos en condiciones de falla. La penetracin y distribucin
de la radiacin ionizante en la carga debe ser realizada y
monitoreada por dosmetros. La operacin de calificacin
de filtros esterilizantes est hecha por medio de la prueba
de integridad de los filtros; medidas de presin diferencial
y velocidad de flujo. Como los fluidos esterilizados por
membranas filtrantes pueden ser expuestos al ambiente du-
rante el procesamiento siguiente, el control ambiental y la
calificacin y/o validacin del rea de manipulacin asp-
tica deben ser parte integrante del proceso de esterilizacin
por filtracin.
7.1.2.3 CALIFICACIN DE DESEMPEO
En la calificacin de desempeo debe demostrarse que el
proceso de esterilizacin es capaz de alcanzar, repetida-
mente, el nivel de garanta de esterilidad pre-determinado
para las cargas definidas de productos; que el equipo opera
consistentemente de acuerdo con criterios pre-determina-
dos y que el producto atiende a los requisitos especificados
de seguridad, calidad y desempeo.
La calificacin de desempeo comprende evaluaciones f-
sicas y microbiolgicas que demuestren la eficacia y repro-
7
ductibilidad del proceso de esterilizacin, manteniendo las
caractersticas especificadas del producto.
En los estudios fsicos deben ser considerados: criterios
como carga prueba representativa del proceso; embalaje
idntico al producto; pre-condicionamiento; perfil de tem-
peratura y temperatura en el punto de referencia; respuesta
de indicadores qumicos; integridad de embalaje; docu-
mentacin; entre otros. La carga para esterilizacin debe
ser establecida y documentada, teniendo en consideracin
parmetros como configuracin, distribucin, orienta-
cin, densidad, dimensin, composicin del material, uso
y tipo de pallets. El producto o material con caractersti-
cas similares al producto (producto simulado) usado para
la calificacin debe tener embalaje idntico al producto y
representar, como mnimo, el peor caso de la carga de ru-
tina de produccin, o sea, la configuracin ms difcil de
esterilizar. Criterios para reutilizacin de carga deben ser
definidos, siendo que ella debe ser equilibrada a las condi-
ciones ambientales o aireadas antes de la reutilizacin. Con
los datos generados debe demostrarse la conformidad con
los parmetros fsicos y qumicos aplicables. La relacin
 326 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
entre las condiciones de posiciones de monitoreo durante
la calificacin y la rutina debe ser establecida.
En la calificacin de desempeo fsico debe demostrarse
a reproductibilidad del proceso con mnimo de tres ciclos
consecutivos para verificar la atencin de todos los crite-
rios de aceptacin.
En la calificacin microbiolgica deben seguirse requisitos
especficos para cada agente esterilizante. Diferentes m-
todos pueden ser usados en la validacin del proceso de
esterilizacin e incluyen tres categoras: proceso basado en
la inactivacin de la carga microbiana natural (biocarga);
proceso combinado con base en la inactivacin de microor-
ganismo referencia y conocimiento de la carga microbiana
(biocarga e indicador biolgico) y proceso basado en la
inactivacin de microorganismo referencia (sobremorte u
overkill). Se indica que el desafo microbiano sea ejecuta-
do en los parmetros mnimos de proceso y debe atender
el nivel de garanta de esterilidad para todas las combina-
ciones de carga, pudiendo usar el peor caso de producto
representante de las familias. Para cada tipo de carga a
ser esterilizada, la reproductibilidad del proceso debe ser
demostrada emplendose, por lo menos, tres ciclos conse-
cutivos. Los indicadores biolgicos usados deben ser posi-
cionados en y/o sobre el producto en localizacin definida.
La calificacin de desempeo debe ser repetida cuando al-
teraciones significativas fueren propuestas, como cambios
en diseo y embalaje del producto; configuracin o den-
sidad de carga y equipo o proceso de esterilizacin. Los
efectos de esos cambios en las etapas de validacin del pro-
ceso de esterilizacin deben ser evaluados.
7.1.3 REVISIN Y APROBACIN
DE LA VALIDACIN
7 La revisin documentada, de los datos de validacin, ge-
nerados en las cualificaciones de instalacin, operacin y
desempeo debe ser hecha para confirmar la aceptabilidad
del proceso de esterilizacin y definir la especificacin del
proceso, incluyendo parmetros y tolerancia.
La etapa final del programa de validacin requiere la docu-
mentacin de los datos de apoyo desarrollados en la ejecu-
cin de este programa.
7.2 INDICADORES
BIOLGICOS
El indicador biolgico es definido como una preparacin
caracterizada de microorganismo especfico que da una re-
sistencia definida y estable a un determinado proceso de
esterilizacin. Bacterias formadoras de esporas son los mi-
croorganismos reconocidos como apropiados para empleo
como indicadores biolgicos una vez que, con excepcin
de la radiacin ionizante, estos microorganismos son, sig-
nificativamente, ms resistentes a los procesos de esterili-
zacin del que los microorganismos de la carga microbia-
na natural del producto. Un indicador biolgico puede ser
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
usado en la calificacin de desempeo del equipo de este-
rilizacin y en el desarrollo y establecimiento del proceso
de esterilizacin para un producto especfico. Los indica-
dores biolgicos son usados en procesos de obtencin de
producto estril en su recipiente final y en la esterilizacin
de equipos; materiales y componentes de embalaje, em-
pleados en el proceso asptico. Los indicadores biolgicos
pueden, adems, ser utilizados para monitorear ciclos de
esterilizacin en revalidaciones peridicas y para evaluar
la capacidad del proceso usado en la descontaminacin de
aisladores o salas limpias.
7.2.1 TIPOS DE INDICADORES
BIOLGICOS
Hay, por lo menos, tres tipos de indicadores biolgicos,
siendo que cada tipo incorpora una especie microbiana con
resistencia conocida al proceso de esterilizacin.
Un tipo de indicador biolgico incluye las esporas que son
aadidos a un soporte o acarreador (disco, o tira de papel
de filtro, vidrio, plstico, u otro material) embalado para
mantener la integridad y viabilidad del material inoculado.
Los acarreadores y embalajes primarios no deben contener
cualquier tipo de contaminacin qumica, fsica o micro-
biolgica que pueda comprometer el desempeo y estabi-
lidad del indicador biolgico y no pueden sufrir alteracin
en funcin del proceso de esterilizacin sometido. Los aca-
rreadores y embalajes primarios deben resistir al transporte
y manipulacin hasta el momento del uso y deben evitar la
prdida del inculo original durante el transporte, manipu-
lacin y almacenamiento hasta el vencimiento del perodo
de validez.
Otro tipo de indicador biolgico consiste de una suspensin
de esporas inoculada en unidades representativas del pro-
ducto a ser esterilizado. Cuando no sea posible el empleo
del producto real, puede inocularse un producto simulado,
que difiere del producto real en algunas caractersticas,
pero se comporta de forma semejante cuando sometido a
las condiciones de prueba, o de esterilizacin. Una suspen-
sin de esporas de valor D conocido debe ser utilizada para
inoculacin del producto real o simulado, garantizando que
al ser usado el producto simulado, ese no comprometa la
resistencia del indicador biolgico. La configuracin fsica
del producto a ser inoculado (real o simulado) puede afec-
tar la resistencia de la suspensin microbiana inoculada.
En el caso de productos lquidos es recomendable la de-
terminacin del valor D y valor Z del indicador biolgico
en el producto lquido especificado. La poblacin, valor D,
valor Z donde aplicable y tiempo de destruccin del mi-
croorganismo deben ser determinados.
Valor Z es la elevacin de temperatura en grados, nece-
saria para reducir el valor D en 90%, o producir la reduc-
cin de un ciclo logartmico en la curva de resistencia
trmica. El tercer tipo es el indicador biolgico auto con-
tenido, presentado de tal forma que el embalaje primario
destinado para incubacin despus de la esterilizacin
contenga el medio de crecimiento requerido para la re-
cuperacin del microorganismo. En ese caso, el sistema

constituido por el indicador biolgico y el medio de cre-
cimiento del microorganismo debe ser resistente al proce-
so de esterilizacin y debe posibilitar la penetracin del
agente esterilizante. El valor D, tiempo de destruccin del
microorganismo y el tiempo de supervivencia deben ser
determinados para el sistema y no solamente para la tira
o disco de papel que contiene los microorganismos. Des-
pus de la esterilizacin, est permitido el contacto de las
tiras o discos, conteniendo los microorganismos, con el
medio de cultivo.
El indicador biolgico auto contenido, tambin, puede
consistir de una suspensin de esporas en un medio de
cultivo conteniendo indicador de pH que permita visuali-
zar la presencia o a ausencia de crecimiento despus de la
incubacin. La resistencia del sistema auto contenido es
dependiente de la penetracin del agente esterilizante en el
embalaje, que debe ser controlado por el fabricante por me-
dio del diseo y composicin del material que constituye
el embalaje, ampolla o recipiente. El indicador biolgico
auto contenido en la forma de ampolla puede ser incubado
directamente despus de la exposicin al proceso de este-
rilizacin, en las condiciones especificadas. La ausencia o
la presencia del crecimiento microbiano son determinadas
visualmente, a partir del cambio de coloracin de un indi-
cador incorporado al medio, o por la turbidez derivada del
desarrollo del microorganismo; o adems, por el examen
microscpico del medio inoculado. El indicador biolgico
auto contenido debe soportar el transporte y la manipula-
cin durante el uso sin que ocurran rupturas o prdida del
inculo original. Durante o despus del proceso de esteri-
lizacin, el material del cual es constituido el sistema auto
contenido no debe retener o liberar cualquier sustancia que
pueda inhibir el crecimiento de microorganismos sobrevi-
vientes. La capacidad promotora de crecimiento del medio
de cultivo despus de exposicin al proceso de esteriliza-
cin debe ser comprobada.
7.2.2 PREPARACIN DEL
INDICADOR BIOLGICO
Todas las operaciones involucradas en la preparacin de
indicadores biolgicos deben ser monitoreadas por medio
de un sistema de la calidad documentado que posibilite la
rastreabilidad de todos los materiales y componentes in-
corporados a la suspensin microbiana; el acarreador ino-
culado, o el indicador biolgico. La preparacin de sus-
pensiones stock de las esporas de los microorganismos
seleccionados como indicadores biolgicos requiere el de-
sarrollo de procedimientos apropiados incluyendo su culti-
vo, recoleccin, purificacin y mantenimiento. Las suspen-
siones stock deben contener, predominantemente, esporas
latentes (no germinativos) mantenidos en lquido no nu-
tritivo. El producto final suministrado por los fabricantes
(suspensin microbiana, acarreador inoculado o indicador
biolgico) no debe contener microorganismo diferente del
microorganismo prueba en nmero suficiente que pueda
afectar el producto. El sistema para minimizar la presencia
de microorganismos diferentes del microorganismo prueba
debe ser validado, monitoreado y registrado.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 327
7.2.3 SELECCIN DEL
INDICADOR BIOLGICO
PARA EL PROCESO DE
ESTERILIZACIN
La eleccin del indicador biolgico requiere conocimien-
to de su resistencia al proceso de esterilizacin especfico
para garantizar que el sistema del indicador biolgico pro-
porcione desafo mayor que el de la carga microbiana en
el producto.
El uso eficiente de los indicadores biolgicos para desa-
rrollo del ciclo, proceso y validacin, o para monitoreo del
proceso de esterilizacin de rutina requiere conocimiento
del material a ser esterilizado incluyendo sus componen-
tes y material de embalaje. Apenas indicadores biolgicos
reconocidos y especificados en las monografas deben ser
usados en el desarrollo o validacin de un proceso de este-
rilizacin para garantizar que el indicador biolgico selec-
cionado propicie un desafo mayor al proceso de esteriliza-
cin que la carga microbiana en el producto.
En los casos del uso de indicadores biolgicos con caracte-
rsticas diferentes de aquellos comercialmente disponibles,
puede cultivarse microorganismos descritos en literatu-
ra cientfica para preparado de indicadores biolgicos. El
usuario debe ser capaz de determinar los valores D y Z para
los indicadores domsticos. Cuando indicador biolgico
no comercial fuese utilizado, la poblacin, pureza y validez
deben ser confirmadas para garantizar la legitimidad de las
pruebas a ser realizadas usando ese indicador.
Cuando la definicin del proceso de esterilizacin est
basada en la carga microbiana del producto, esa debe ser
cuantificada y las resistencias del indicador biolgico y de
la carga microbiana deben ser comparadas. El proceso de
esterilizacin debe resultar en nivel de garanta de esterili-
7
dad de como mnimo 10-6.
El mtodo de sobremorte (overkill) puede ser empleado en
el desarrollo del proceso de esterilizacin y, en ese caso,
deben ser hechas consideraciones especficas relacionadas
a la supuesta resistencia usada en el establecimiento de los
requisitos de letalidad del proceso. En general, los proce-
sos de sobremorte son desarrollados con la suposicin de
que la carga microbiana es igual a 106 microorganismos
altamente resistentes. Un proceso 12 D es definido como el
proceso que provee letalidad suficiente para reduccin de
12 ciclos logartmicos, equivalente a 12 veces el valor D
para microorganismos con resistencia arriba de la resisten-
cia promedio de los microorganismos presentes en la carga
microbiana del producto. Al asumir una carga microbiana
de 106, un proceso de sobremorte resultar en una probabi-
lidad de no esterilidad menor que 10-6. El uso del proceso
de sobremorte y su validacin pueden minimizar o evitar
la necesidad de cuantificacin e identificacin de la carga
microbiana del producto.
Para el proceso de calor hmedo, esporas de cepas apro-
piadas de Geobacillus stearothermophilus estn disponi-
 328 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
bles comercialmente como indicadores biolgicos. Otros
microorganismos formadores de esporas resistentes al
calor hmedo como Clostridium sporogenes, Bacillus
atrophaeus y Bacillus coagulans, tambin, pueden ser uti-
lizados en el desarrollo y validacin de un proceso de este-
rilizacin por calor hmedo.
Para la validacin del proceso de esterilizacin, por va
calor seco, pueden ser empleados esporas de Bacillus atro-
phaeus. Durante la validacin pueden ser realizados estu-
dios para evaluacin de la despirogenizacin en el lugar
de la inactivacin microbiana, una vez que la tasa de in-
activacin de endotoxinas bacterianas es ms lenta que la
inactivacin de las esporas de Bacillus atrophaeus. En la
prctica, una reduccin de la orden de por lo menos tres
ciclos logartmicos del nivel de endotoxina resulta en una
probabilidad de no esterilidad menor que 10-6.
Tabla 1 - Caractersticas ejemplificativas de sistemas de indicadores biolgicos disponibles comercialmente.
Banda de valor D para
Valor D
Proceso de Esterilizacin seleccin de indicador
(minutos)
biolgico (minutos)
Calor secoa 1,9
(160 C)
Oxido de etilenob 3,5
(600 mg/L, 54 C, 60% UR)
Calor hmedoc 1,9
(121 C)
_______________________
a para 1,0 x 106 a 5,0 x 106 esporas / acarreador
b para 1,0 x 106 a 5,0 x 107 esporas / acarreador
c para 1,0 x 105 a 5,0 x 106 esporas / acarreador
7 7.2.4 EVALUACIN DE
DESEMPEO
7.2.4.1 RESPONSABILIDAD DEL
FABRICANTE
Son responsabilidades del fabricante: determinacin y su-
ministro de las caractersticas de desempeo del lote de
indicador biolgico por medio de certificado de anlisis
que certifique la validez del desempeo declarado en el
embalaje del producto; definicin del proceso de esterili-
zacin para el cual el indicador biolgico es recomendado;
caracterizacin de cada tipo de indicador biolgico, usando
condiciones estandarizadas y equipos adecuados; valor D y
el mtodo por el cual ese valor fue definido; conteo micro-
biano; estabilidad de la resistencia hasta la validez indicada
en el rtulo; condiciones de almacenamiento, incluyendo
temperatura y humedad relativa; orientaciones sobre el
medio de cultivo a ser empleado y las condiciones de recu-
peracin de los microorganismos despus de la exposicin
al proceso de esterilizacin y su descarte.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Para monitorear los procesos de esterilizacin empleando
radiacin ionizante, esporas de Bacillus pumilus han sido
usados a pesar de no ser prctica usual. El mtodo de es-
tablecimiento de la dosis de radiacin, ms empleado, no
usa indicadores biolgicos. Algunos microorganismos en
la carga microbiana del material a ser esterilizado, pueden
presentar mayor resistencia al proceso de esterilizacin por
radiacin en comparacin con las esporas de Bacillus pu-
milus.
Para el proceso de esterilizacin por xido de etileno son
comnmente utilizadas esporas de subespecies de Bacillus
atrophaeus var. niger, cuando se emplea xido de etileno
100%, o diferentes mezclas de gases.
Lmites para resistencia adecuada
(dependiente del valor D en minutos)
Tiempo de
Tiempo de muerte
supervivencia
Mn. 1,0 Mn. 4,0 10,0
Mx. 3,0 Mx. 14,0 32,0
Mn. 2,5 Mn. 10,0 25,0
Mx. 5,8 Mx. 27,0 68,0
Mn. 1,5 Mn. 4,5 13,5
Mx. 3,0 Mx. 14,0 32,0
7.2.4.2 RESPONSABILIDAD DEL
USUARIO
PRODUCTOS COMERCIAIS
Cuando un indicador biolgico es adquirido, comercial-
mente, su adecuacin para uso en un proceso de esterili-
zacin debe haber sido establecida en estudios, a no ser
que existan datos disponibles para confirmar el empleo del
indicador en un proceso especfico. El usuario debe esta-
blecer dentro de su institucin, los criterios de aceptacin
para los lotes del indicador biolgico. Al adquirir un in-
dicador biolgico, ese debe venir acompaado de un cer-
tificado emitido para cada lote. Si el indicador biolgico
es empleado de forma diferente de aquella indicada por el
fabricante, el usuario debe proceder al registro de las con-
diciones de uso, de las verificaciones y del desempeo del
indicador biolgico.
Despus del recibimiento de un lote de indicador biol-
gico, el usuario debe cuantificar la carga de esporas por
unidad y proceder a la verificacin de la morfologa y pure-
za de los microorganismos, confirmando, por lo menos, el
gnero del microorganismo. Las informaciones referentes
al valor D; a las condiciones de almacenamiento; al plazo

de validez y a la estabilidad del indicador biolgico deben
ser observadas y registradas. El usuario puede considerar
la necesidad de auditar el valor D antes de la aceptacin
del lote de indicador biolgico. Para almacenamiento por
largo perodo, es importante verificar el valor D y la es-
tabilidad del conteo. En el caso de almacenamiento de la
suspensin de esporas, por perodo superior a 12 meses,
bajo condiciones documentadas, la confirmacin del con-
teo y la comprobacin de la resistencia de las esporas de-
ben ser realizadas, a menos que el desempeo de un cultivo
anterior haya sido validado despus de largo perodo de
almacenamiento. Los resultados de los ensayos de resis-
tencia y conteo de esporas deben estar dentro de la banda
de aceptacin establecida durante la aprobacin del lote de
suspensin de esporas.
PRODUCTOS NO COMERCIALES
El usuario puede decidir cultivar microorganismos para
desarrollo de indicadores biolgicos a ser empleados en el
desarrollo o en la validacin de un proceso de esteriliza-
cin. En el caso de que el usuario se torne un productor,
las exigencias de desempeo del indicador biolgico deben
ser satisfechas. Si un sistema de indicador biolgico es em-
pleado para el desarrollo de un nuevo proceso de esterili-
zacin o validacin de un proceso ya existente, los mismos
criterios de desempeo para productos comerciales deben
ser cumplidos.
7.2.4.3 PREPARACIN DE LA
SUSPENSIN DE ESPORAS
Los registros de la identificacin de las suspensiones de
esporas deben ser mantenidos por productores comercia-
les o no comerciales y deben incluir informaciones sobre
la fuente del cultivo inicial de microorganismos; la iden-
tificacin; la rastreabilidad del cultivo madre de esporas,
la frecuencia de subcultivo; el medio de cultivo utilizado
para la esporulacin; los cambios ocurridos en la prepara-
cin del medio; las observaciones sobre contaminacin de
la suspensin; los datos anteriores y posteriores al choque
trmico; los registros del uso de la suspensin de esporas y
la resistencia a la esterilizacin (particularmente, valores D
y Z, donde aplicable).
7.2.5 USO DE INDICADOR
BIOLGICO PARA VALIDACIN
Independiente del proceso de esterilizacin a ser emplea-
do, la poblacin inicial de microorganismos, su resistencia
al proceso esterilizante y el local de inoculacin del pro-
ducto pueden influenciar la tasa de inactivacin del indi-
cador biolgico. Durante el proceso de validacin, en va-
rios locales del producto deben ser inoculados el indicador
biolgico, garantizando el desafo tanto del embalaje como
del producto en l contenido, para que se asegure un nivel
de garanta de esterilidad de 10-6 para el producto y para el
embalaje. Puede ser necesario, por medio de estudios de la-
boratorio, determinar si los componentes del producto son
ms difciles de esterilizar que, por ejemplo, una solucin,
o medicamento en l contenidos. La fase de calificacin
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 329
de desempeo del producto debe identificar los parme-
tros ms importantes del proceso para inactivacin de los
microorganismos en los locales ms difciles de esterilizar.
La supervivencia del indicador biolgico es consecuencia
de la resistencia y tamao de la poblacin microbiana. Por
tanto, ni siempre un indicador biolgico con poblacin de
106 es necesario para confirmar un nivel de garanta de
esterilidad de 10-6. El uso apropiado de los indicadores
biolgicos es para confirmar que los parmetros estable-
cidos en el proceso de esterilizacin garantizan el nivel de
seguridad de esterilidad deseado. En la esterilizacin por
calor hmedo, el empleo del indicador biolgico confirma
la letalidad determinada por parmetros fsicos. Indicado-
res biolgicos con valor D relevante y poblaciones sustan-
cialmente menores que 106 son adecuados para validar
muchos procesos de esterilizacin y descontaminacin. Es
importante que los usuarios estn capacitados para justifi-
car, cientficamente, la eleccin de un indicador biolgico.
7.3 PROCESO ASPTICO
A pesar de que la esterilizacin terminal de un producto
embalado sea el procedimiento que garantice riesgos m-
nimos de contaminacin microbiana en la produccin de
un lote, existen clases de productos que no pueden ser es-
terilizados en su envasado final y que deben ser preparados
empleando proceso asptico. Ese proceso es proyectado
para prevenir la contaminacin de los componentes est-
riles por microorganismos viables, o adems, en la fase
intermediaria de la produccin, cuando algn componen-
te debe ser suministrado exento de microorganismos. Un
producto definido como procesado aspticamente consiste
de componentes que fueron esterilizados por uno de los
procesos de esterilizacin como, por ejemplo, la filtracin,
en el caso de tratarse de un lquido. En el caso de material
de envasado constituido por vidrio, puede ser empleado el
calor seco y, cuando se trata de material de envasado poli-
mrico, como tapas, puede ser utilizada la autoclavacin u
7
xido de etileno.
En el proceso asptico, el ambiente donde los insumos
son manipulados y a etapa de llenado asptico son consi-
derados puntos crticos. Las exigencias para un proyecto
adecuadamente validado y que mantenga las condiciones
necesarias para el proceso asptico abarcan un ambiente
libre de microorganismos viables, donde la calidad del aire
sea garantizada por equipos adecuados, por personal en-
trenado y paramentado de acuerdo con las exigencias del
ambiente y por operacin a ser realizada. El ambiente de-
seado puede ser obtenido por medio de la tecnologa de
filtracin del aire que propicia el suministro del aire con la
calidad microbiana exigida. El planeamiento de la planta
debe proporcionar un sistema de cascada de flujo de aire
con presin positiva mayor, de las reas ms crticas (asp-
ticas) para aquellas de exigencia intermediaria (reas de
preparacin) y finalmente, aquellas de menor exigencia de
control; y adems, debe permitir el cambio frecuente del
aire, adems del empleo de flujo de aire unidireccional en
la rea inmediata del producto o componentes expuestos y
el control de la temperatura y humedad (cuando aplicable).
Las instalaciones deben incluir sistemas de aislamiento
 330 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
primario (prximo al producto) y secundario (donde el pro-
ceso asptico es realizado) por medio de barreras fsicas.
Las superficies, como paredes y techo, deben ser lisas po-
sibilitando la sanitizacin frecuente. Los vestuarios deben
tener espacio adecuado para el personal y almacenamiento
de las vestimentas estriles. El entrenamiento del personal
cuanto a la paramentacin, debe abarcar el uso correcto de
las vestimentas como, delantales, guantes y otros tems que
propicien la cobertura de la superficie del cuerpo. Todo el
proceso de sanitizacin debe ser documentado. La certifi-
cacin y la validacin del proceso e instalaciones aspticas
son realizadas por medio de la confirmacin de la eficien-
cia de los sistemas de filtracin; por los procedimientos de
monitoreo microbiolgico del ambiente y por la simula-
cin de llenado asptico del producto, empleando medio de
cultivo estril. El monitoreo de la instalacin asptica debe
incluir el examen peridico de filtro ambiental, el monito-
reo de rutina de material particulado y viable y el llenado
simulado con medio de cultivo estril.
7.4 SALAS LIMPIAS Y
AMBIENTES CONTROLADOS
ASOCIADOS
En esa seccin estn incluidos algunos aspectos relacio-
nados al procesamiento asptico de productos con el esta-
blecimiento; mantenimiento y control de la calidad micro-
biolgica de salas y zonas limpias. Incluye la clasificacin
de esos ambientes controlados con base en los lmites de
conteo de partculas; en el programa de evaluacin micro-
biolgica para ambientes controlados; en el entrenamiento
de funcionarios; en los factores crticos en el proyecto e
implementacin de un programa de evaluacin microbio-
lgica; en el desarrollo de un plan de muestreo; en el esta-
7 blecimiento de niveles microbiolgicos de alerta y accin;
en los mtodos y equipos usados para muestreo microbio-
lgico; en los medios de cultivo y diluyentes usados; en la
identificacin de aislados microbiolgicos y en la evalua-
cin operacional por medio del envase de medio de cultivo
(media fill).
Media fill es una prueba para simulacin de las operacio-
nes aspticas en que el producto es sustituido por un medio
de cultivo y sirve para asegurar que los procesos utilizados
sean capaces de conducir a productos estriles.
Hay mtodos alternativos para evaluar y controlar el esta-
do microbiolgico de salas y zonas limpias, con variedad
de equipos y mtodos para muestreo microbiolgico. La
aplicacin impropia de muestreo y anlisis microbiolgi-
cos puede causar variabilidad significativa y potencial para
contaminacin inadvertida. Un gran nmero de productos
estriles es fabricado por procesamiento asptico, que de-
pende de la exclusin de microorganismos de la lnea de
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
procesamiento y, por tanto, la prevencin de la entrada de
los microorganismos en recipientes abiertos durante el en-
vase y la carga microbiana del producto y del ambiente de
fabricacin son factores importantes relacionados al nivel
de garanta de esterilidad de estos productos.
7.4.1 CLASIFICACIN DE
SALAS LIMPIAS Y AMBIENTES
CONTROLADOS ASOCIADOS
Sala limpia es la sala en la cual la concentracin de part-
culas en suspensin en el aire es controlada; es construida
y utilizada de manera que minimice a introduccin, gene-
racin y retencin de partculas dentro de la sala, en la cual
otros parmetros relevantes, como, por ejemplo, tempera-
tura; humedad y presin, son controlados conforme nece-
sario.
La clasificacin de limpieza del aire de salas y zonas lim-
pias, por medio del anlisis de concentracin de partculas
en suspensin en el aire, es regulada por la norma ABNT
NBR ISO 14644-1 Salas limpias y ambientes controlados
asociados Parte 1: clasificacin de la limpieza del aire.
Ese documento se aplica a partculas suspendidas en el aire
dentro de un ambiente controlado, pero no pretende carac-
terizar la naturaleza viable o no viable de las partculas.
La aplicacin de esa norma ha sido usada por fabricantes
de salas y zonas limpias para orientar la construccin, la
preparacin y el mantenimiento de esas instalaciones. Sin
embargo, no da relacin entre el nmero de partculas no
viables y la concentracin de microorganismos viables.
La industria farmacutica se preocupa con el conteo de
partculas viables y, en el caso de productos inyectables,
hay preocupacin adicional con el conteo de partculas
totales. La justificativa de que, cuanto menor el nmero
de partculas presentes en una sala limpia, menos probable
que microorganismos carreados por el aire estn presentes,
es aceptable y orientativa en el proyecto, en la construccin
y en la operacin de salas y zonas limpias.
En la Tabla 1 estn descritas las clases de limpieza de aire
de acuerdo con la norma ABNT NBR ISO 14644-1, que
est basada en lmites de partculas con tamaos de 0,1 a
5 m. En la Tabla 2 est la relacin entre los diferentes
sistemas de clasificacin de salas limpias.
Es aceptable que, si un menor nmero de partculas est
presente en la sala limpia o ambiente controlado, el con-
teo microbiano bajo condiciones operacionales ser menor,
siempre que no haya cambios en el flujo de aire, en la tem-
peratura y en la humedad. Salas limpias son mantenidas
bajo un estado de control operacional con base en datos
dinmicos (operacionales).
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 331

Tabla 1 - Clases de limpieza del aire para partculas en suspensin, seleccionadas para salas y zonas limpias.
Lmites mximos de concentracin (partculas/m3 de aire)
Nmero de Clasificacin ISO
para partculas iguales o mayores que los tamaos considerados
(N) 0,1 m 0,2 m 0,3 m 0,5 m 1 m 5 m
ISO Clase 1 10 2
ISO Clase 2 100 24 10 4
ISO Clase 3 10.000 237 102 35 8
ISO Clase 4 100.000 2.370 1.020 352 83
ISO Clase 5 1.000.000 23.700 10.200 3.520 832 29
ISO Clase 6 237.000 102.000 35.200 8.320 293
ISO Clase 7 352.000 83.200 2.930
ISO Clase 8 3.520.000 832.000 29.300
ISO Clase 9 35.200.000 8.320.000 293.000

Tabla 2 - Comparacin entre los diferentes sistemas de clasificacin de limpieza de aire.

OMS y EEC(GMP) Estados Unidos (habitual) ISO
Clase A Clase 100 ISO 5
Clase B Clase 100 ISO 5
Clase C Clase 10.000 ISO 7
Clase D Clase 100.000 ISO 8

7.4.2 PROGRAMA estado de control sea mantenido en salas y zonas limpias.

El ambiente debe ser muestreado durante operaciones nor-
DE EVALUACIN males para posibilitar a recoleccin de datos significativos
MICROBIOLGICA PARA y el muestreo microbiano debe ocurrir cuando los materia-
les estn en el rea, las actividades de procesamiento estn
SALAS LIMPIAS Y AMBIENTES ocurriendo y todos los funcionarios estn en operacin en
CONTROLADOS ASOCIADOS el local.

El monitoreo de partculas totales en suspensin en el aire
en salas y zonas limpias no da informacin sobre el con-
tenido microbiolgico del ambiente. La limitacin bsica
de los contadores de partculas es que normalmente miden
partculas de 0,5 m o mayores y los microorganismos car-
gados por el aire no son clulas que fluctan libremente,
no estn solas y frecuentemente se asocian con partculas
de 10 a 20 m. Conteos de partculas, as como, conteos
microbianos dentro de salas y zonas limpias, varan con las
actividades conducidas durante el muestreo y su localiza-
cin. El monitoreo del ambiente para partculas no viables
y microorganismos es importante porque ambos son ne-
cesarios para alcanzar las exigencias relativas al material
particulado y esterilidad establecidas para los productos.
Programas de monitoreo microbiolgico para salas y zo-
nas limpias deben evaluar la efectividad de las prcticas de
limpieza y desinfeccin que pueden tener impacto sobre
la carga microbiana del ambiente. El monitoreo microbio-
lgico, normalmente, no identifica y cuantifica todos los
contaminantes microbianos en los ambientes; sin embargo,
el monitoreo de rutina debe suministrar informacin sufi-
ciente para certificarse de que el ambiente est operando
dentro del estado de control adecuado.
El monitoreo microbiolgico ambiental y el anlisis de da-
tos realizados por personas calificadas posibilitan que el
El monitoreo microbiolgico de salas y zonas limpias debe
incluir la cuantificacin del contenido microbiano del aire
ambiental; del aire comprimido que entra en el rea crtica;
de las superficies; de los equipos; de los recipientes; de los
7
pisos; de las paredes y de las vestimentas de las personas.
El objetivo pretendido con el programa es obtener estima-
cin representativa de la carga microbiana del ambiente y,
una vez compilada y analizada, cualquier tendencia debe
ser evaluada por personas entrenadas. Es importante rever
resultados ambientales con base en frecuencia especifica-
da, as como rever resultados por perodos prolongados
para determinar si hay tendencias presentes. Tendencias
pueden ser visualizadas por medio de cuadros de control
estadstico que incluyen niveles de alerta y de accin. El
control microbiolgico de ambientes controlados, tambin,
puede ser evaluado con base en los datos de tendencia. In-
formes o resmenes peridicos deben ser emitidos para
alertar el responsable del rea.
Cuando el nivel microbiolgico especificado para un am-
biente controlado es excedido, revisin de la documenta-
cin e investigacin deben ocurrir. La investigacin debe
incluir la revisin de la documentacin de mantenimiento
del rea; de la documentacin de desinfeccin; de los pa-
rmetros fsicos u operacionales inherentes, tales como,
cambios en la temperatura ambiental y humedad relativa y
la etapa de entrenamiento de los funcionarios involucrados.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 332 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Luego de la investigacin, las acciones adoptadas pueden
incluir el refuerzo en el entrenamiento de las personas para
enfatizar el control microbiolgico del ambiente; el mues-
treo adicional en frecuencia aumentada; la desinfeccin
adicional; las pruebas adicionales de producto; la identifi-
cacin del contaminante microbiano y su posible fuente y
la reevaluacin y revalidacin de los actuales procedimien-
tos operacionales estandarizados, si necesario. Con base en
la revisin de la investigacin y en los resultados de las
pruebas, el significado del nivel microbiolgico excedido
y la aceptabilidad de las operaciones o productos proce-
sados bajo aquella condicin pueden ser definidos. Toda
investigacin y justificativa de las acciones deben ser do-
cumentadas y formar parte del sistema de gerenciamiento
de la calidad.
Sala y zona limpia son definidas por certificacin de acuer-
do con la norma aplicable, siendo que los parmetros eva-
luados incluyen integridad de filtros, diferenciales de pre-
sin y velocidad, estndares y cambios del aire. Un ejemplo
de mtodo para conducir la prueba de desafo de partculas
para el sistema consiste en aumentar la concentracin de
partculas en el ambiente por medio de humo en el entorno
de reas de trabajo crticas y visualizar los movimientos
del aire. La presencia de vrtices y zonas turbulentas pue-
den ser visualizados y el estndar de flujo de aire puede
ser finamente ajustado para eliminar o minimizar efectos
indeseables. Esa evaluacin est hecha bajo condiciones
de produccin simuladas; sin embargo, con equipos y fun-
cionarios en el local.
La prueba y la optimizacin apropiados de las caracters-
ticas fsicas de la sala limpia o ambiente controlado son
esenciales antes de concluir la validacin del programa de
monitoreo microbiolgico. La garanta de que el ambiente
est operando adecuadamente y de acuerdo con sus especi-
7 ficaciones dar mayor garanta de que la carga microbiana
del ambiente ser apropiada para procesamiento asptico.
Estas pruebas deben ser repetidas durante la certificacin
de rutina de la sala o zona limpia y siempre que alteraciones
consideradas significativas fueren hechas en la operacin,
tales como cambios en el flujo de personas, procesamiento,
operacin, flujo de material, sistemas de manipulacin de
aire o disposicin de equipos.
7.4.3 TECNOLOGAS
ALTERNATIVAS PARA
PROCESO ASPTICO
Debido a la fuerte correlacin entre el envolvimiento e
intervencin humana y el riesgo potencial para contami-
nacin de producto en el envase asptico, sistemas de pro-
duccin donde personas son retiradas de las zonas crticas
han sido implementados, empleando, por tanto, estrategias
avanzadas de procesamiento asptico, con requisitos redu-
cidos de monitoreo ambiental de partculas viables y no
viables.
Siguen algunas definiciones de sistemas usados para redu-
cir la tasa de contaminacin en el proceso asptico.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Barreras: dispositivo que restringe el contacto entre el
operador y el campo asptico. Barreras no pueden ser es-
terilizadas y ni siempre poseen sistemas de transferencia
que permiten el paso de materiales para dentro o fuera del
sistema sin exposicin al ambiente alrededor. Hay diferen-
tes tipos de barreras, desde cortinas de plstico en zonas
crticas hasta barreras rgidas en equipos, que pueden in-
corporar elementos como soporte de guantes y puerta de
transferencia.
Soplo/Llenado/Sellado (Blow/Fill/Seal): ese sistema com-
bina el montaje del recipiente con el envase del producto y
el sellado en un nico equipo. Del punto de vista microbio-
lgico, la secuencia de formacin del recipiente, envase del
producto estril y la formacin y aplicacin del sellado son
obtenidos, aspticamente, en una operacin ininterrumpida
con exposicin mnima al ambiente. Esos sistemas existen
hace muchos aos y las tasas de contaminacin son meno-
res que 0,1%.
Aisladores: tecnologa usada para doble propuesta, de pro-
teger el producto de la contaminacin del ambiente y de
personas durante envasado y cierre y de proteger personas
de productos txicos o nocivos durante su produccin. Esa
tecnologa est basada en el principio de colocar materiales
previamente esterilizados, como recipientes, productos y
tapas, en un ambiente estril, que permanecen estriles du-
rante toda operacin, una vez que personas o componentes
no estriles no estn dentro del aislador. La barrera del ais-
lador es una barrera absoluta que no permite cambios entre
ambientes protegidos y no protegidos. Aisladores pueden
ser fsicamente sellados contra la entrada de contaminantes
externos o pueden ser efectivamente sellados por la aplica-
cin continua de sobrepresin. Manipulacin de material
por funcionarios es realizada por medio de guantes o vesti-
mentas completas o parciales. El aire que entra en el aisla-
dor pasa a travs de un filtro HEPA o ULPA y la extraccin
de aire normalmente pasa por un filtro HEPA. Vapores de
perxido de hidrgeno o cido peractico normalmente
son usados para esterilizacin de las superficies o ambiente
interno. La esterilizacin del interior de los aisladores y
todo contenido son normalmente validados para un nivel
de garanta de esterilidad de 10-6.
La introduccin de equipos; componentes y materiales
puede ser hecha de diversas maneras, como uso de autocla-
ve de puerta doble, introduccin continua de componentes
a travs de una cinta que pasa por tnel de esterilizacin
o uso de un sistema de dique. Es necesario monitorear la
integridad, calibracin y mantenimiento del aislador.
Los requisitos para los ambientes controlados adyacentes a
esas nuevas tecnologas usadas en el procesamiento aspti-
co dependen del tipo de tecnologa usada.
Equipos de Soplo/Llenado/Sellado que limitan el contacto
del operador con el producto pueden ser instalados en un
ambiente controlado, especialmente si alguna intervencin
del operador es posible durante la produccin.
Sistemas de barreras requieren alguna forma de ambiente
controlado. En funcin de los numerosos tipos y aplicacio-

nes, los requisitos para el ambiente adyacente pueden va-
riar. Las estrategias de diseo y operacin para el ambiente
donde circulan esos sistemas deben ser desarrolladas por
los productores usando un criterio lgico y racional y la ca-
pacidad del sistema de suministrar productos estriles debe
ser validada de acuerdo con criterios pre-establecidos.
En aisladores, el aire entra a travs de los filtros integrales
de calidad HEPA, o mejor, y su interior es, tpicamente,
esterilizado con un nivel de garanta de esterilidad de 10-6.
Por tanto, aisladores que contienen aire estril no intercam-
bian aire con el ambiente alrededor y son libres de opera-
dores humanos. No obstante, cuando el aislador est en un
ambiente controlado, el potencial de producto contamina-
do es reducido en la eventualidad de un fuga en los guantes
o vestimentas.
La extensin y alcance del monitoreo microbiolgico am-
biental dependen del sistema utilizado. Productores deben
balancear la frecuencia del muestreo ambiental que requie-
re intervencin humana, con los beneficios acumulados
por los resultados del monitoreo. Una vez que barreras son
diseadas para reducir la intervencin humana, sistemas
de muestreo remotos deben ser usados en sustitucin a la
intervencin de personas. En general, una vez que la va-
lidacin estableci la eficacia de la barrera, la frecuencia
de muestreo para monitorear el estado microbiolgico del
rea de procesamiento asptico puede ser reducida cuando
comparada a la frecuencia de un sistema clsico de proceso
asptico.
Sistemas de aisladores requieren frecuencia menor de mo-
nitoreo microbiolgico. El monitoreo continuo de part-
culas totales puede suministrar garanta de que el sistema
de filtracin de aire dentro del aislador est funcionando
adecuadamente. Mtodos tradicionales para muestreo mi-
crobiolgico cuantitativo del aire pueden no ser suficientes
para probar el ambiente dentro del aislador. Experiencias
con aisladores indican que, bajo condiciones normales de
operacin, fuga o rompimiento en los guantes representan
el mayor potencial para contaminacin microbiolgica, lo
que requiere pruebas frecuentes de integridad de los guan-
tes y monitoreo de sus superficies. El monitoreo no fre-
cuente de superficies dentro del aislador debe ser evaluado
y puede ser benfico.
7.4.4 ENTRENAMIENTO DE
FUNCIONARIOS
Productos procesados aspticamente exigen mucha aten-
cin a los detalles, disciplina rigurosa y supervisin estric-
ta de las personas, a fin de mantener el nivel de calidad
ambiental apropiado para la garanta de esterilidad del pro-
ducto final.
El entrenamiento de todos los funcionarios que trabajan
en salas y zonas limpias es crtico. Ese entrenamiento,
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 333
tambin, es importante para las personas responsables
del programa de monitoreo microbiolgico, una vez que
la contaminacin del rea de trabajo puede ocurrir inad-
vertidamente durante el muestreo microbiolgico, por uso
de tcnicas impropias. En operaciones altamente automa-
tizadas, el monitoreo puede ser realizado por personas que
tienen contacto ms directo con zonas crticas dentro del
rea de procesamiento. El monitoreo de los funcionarios
debe ser conducido antes y despus del trabajo en el rea
de procesamiento.
El gerenciamiento de la instalacin debe garantizar que to-
das las personas involucradas en operaciones en las salas
y zonas limpias conozcan principios microbiolgicos re-
levantes, incluyendo principios bsicos del procesamiento
asptico y la relacin de los procedimientos de fabricacin
y manipulacin con fuentes potenciales de contaminacin
del producto. Tambin, deben tener conocimiento sobre
principios bsicos de microbiologa; fisiologa microbiana;
limpieza, desinfeccin y esterilizacin; seleccin y pre-
paracin de medios de cultivo; de acuerdo con el envol-
vimiento de los funcionarios en el proceso. Las personas
involucradas en la identificacin microbiana requieren en-
trenamiento especializado en los mtodos de laboratorio
aplicables. Entrenamiento adicional en el gerenciamiento
de los datos ambientales colectados debe ser suministrado.
Conocimiento y comprensin de los procedimientos ope-
racionales estndar aplicables son crticos, especialmente
aquellos relacionados con las medidas correctivas que son
tomadas cuando las condiciones ambientales lo exigen. La
comprensin de las polticas de adhesin a las exigencias
regulatorias y la responsabilidad de cada individuo, relati-
vas a las Buenas Prcticas de Fabricacin deben ser parte
integrante del programa de entrenamiento, as como entre-
namiento sobre cmo conducir investigaciones y analizar
datos.
El control de la contaminacin microbiana asociada con
las personas es uno de los elementos ms importantes del
7
programa de control ambiental. La contaminacin puede
ocurrir a partir de la diseminacin de microorganismos por
individuos, particularmente aquellos con infecciones acti-
vas y, por tanto, apenas individuos saludables deben ser
autorizados a acceder a ambientes controlados. La buena
higiene personal y atencin cuidadosa en los detalles de
los procedimientos de paramentacin asptica son tems
importantes. Los funcionarios apropiadamente paramenta-
dos deben ser cuidadosos en mantener la integridad de sus
guantes y delantales durante todo el perodo de permanen-
cia en los ambientes controlados.
Como el programa de monitoreo ambiental no es capaz de
detectar todos los eventos del procesamiento asptico que
podran comprometer la calidad microbiolgica del am-
biente, estudios peridicos de envase de medio de cultivo
o simulacin de proceso son necesarios para garantizar que
los controles operacionales apropiados y entrenamiento
sean efectivamente mantenidos.
 334 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
7.4.5 PROYECTO E
IMPLANTACIN DEL
PROGRAMA DE CONTROL
MICROBIOLGICO
AMBIENTAL
Es responsabilidad del fabricante desarrollar, iniciar, im-
plantar y documentar un programa de monitoreo microbia-
no ambiental que sea capaz de detectar un evento adverso
en las condiciones microbiolgicas a tiempo de permitir
acciones correctivas significativas y efectivas. Es imperati-
vo que el programa sea hecho a medida para las condicio-
nes e instalaciones especficas.
Un medio de cultivo de crecimiento microbiolgico gene-
ral como el medio de casena / soja, debe ser adecuado en
la mayora de los casos. Ese medio puede ser suplementado
con aditivos para contornear o minimizar los efectos de los
agentes desinfectantes o de antibiticos, si usados o proce-
sados en esos ambientes. La deteccin y cuantificacin de
levaduras y mohos deben ser consideradas. Medios, gene-
ralmente aceptados, son tales como Sabouraud y Sabou-
raud modificado. Otros medios validados para promover el
crecimiento de hongos pueden ser usados, tal como Agar
casena / soja. En general, el anlisis de microorganismos
anaerbicos obligatorios no es realizado en la rutina, a no
ser que condiciones o investigaciones exijan. La capaci-
dad de los medios de cultivo seleccionados para detectar y
cuantificar los microorganismos anaerbicos o microaer-
filos debe ser evaluada.
Los procesos de esterilizacin usados para preparar medios
de cultivo para el programa ambiental deben ser validados
y deben ser examinados para esterilidad y promocin de
7 crecimiento. Los medios deben ser capaces de mantener
el crecimiento cuando inoculados con menos de 100 UFC.
La seleccin de tiempo y temperatura de incubacin es he-
cha una vez que los medios apropiados hayan sido selec-
cionados. Tpicamente, temperaturas de incubacin en los
intervalos de 22,5 C 2,5 C y 32,5 C 2,5 C han sido
usadas con tiempos de incubacin de 72 y 48 h, respecti-
vamente.
El programa de control ambiental debe incluir identifica-
cin y evaluacin de los locales de muestreo y validacin
de los mtodos de muestreo microbiolgica del ambiente.
7.4.6 PLAN Y LOCALES DE
MUESTREO
Durante la fase inicial de actividades, as como, en la pre-
paracin de una sala limpia, u otro ambiente controlado,
locales especficos para muestreo de aire o de superficies
deben ser determinados. Debe considerarse la proximidad
del producto, si el aire y las superficies existentes en la sala
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
estn en contacto con l o con superficies internas de los
sistemas de cierre de los recipientes.
La frecuencia de muestreo depender de la criticidad de
los locales especificados y el tratamiento subsiguiente al
proceso asptico.
A medida que intervenciones manuales durante la opera-
cin y el potencial de contacto personal con el producto
aumentan, crece la importancia del programa de monitoreo
ambiental. Ese es ms crtico para productos procesados
aspticamente que para aquellos sometidos a la esteriliza-
cin terminal. Cuando el ciclo de esterilizacin terminal
no se basar en el concepto de sobremorte, el programa de
carga microbiana anterior a la esterilizacin es crtico. Los
planos de muestreo deben ser dinmicos con frecuencias
de monitoreo y localizaciones ajustadas con base en el des-
empeo de tendencia. Es apropiado aumentar o disminuir
el muestreo con base en ese desempeo.
7.4.7 LMITES
MICROBIOLGICOS DE
ALERTA Y ACCIN EN SALAS Y
ZONAS LIMPIAS
Los principios y conceptos de control de procesos estads-
ticos son tiles para establecer niveles de alerta y accin,
as como mecanismos para control de tendencias.
El nivel de alerta en el monitoreo microbiolgico ambien-
tal evidencia nivel de contaminacin significativamente
superior a las condiciones de operacin normales. Exceder
el nivel de alerta no necesariamente debe exigir accin co-
rrectiva, sin embargo, al menos llevar a una investigacin
de acompaamiento documentada, que puede incluir mo-
dificaciones en el plano de muestreo.
El indicativo de accin en monitoreo microbiolgico am-
biental, cuando excedido, requiere acompaamiento inme-
diato y, si necesario, accin correctiva.
Niveles de alerta se basan normalmente en informaciones
histricas obtenidas de operaciones de rutina del proceso
en un ambiente controlado especfico.
En una instalacin nueva, esos niveles generalmente se ba-
san en la experiencia anterior de instalaciones y procesos
similares; y, en datos obtenidos en el paso de varias se-
manas. Esos niveles son normalmente re-examinados para
adecuacin a una frecuencia establecida. Tendencias a un
deterioro de la calidad ambiental requieren atencin para
determinar la causa y para instituir un plan de accin co-
rrectiva, a fin de traer las condiciones de vuelta a los nive-
les esperados. Una investigacin debe ser implementada, y
la evaluacin del impacto potencial sobre el producto debe
ser efectuada.

7.4.8 MTODOS Y EQUIPOS
USADOS PARA MONITOREO
AMBIENTAL
Microorganismos viables del aire pueden influenciar la ca-
lidad microbiolgica de los productos fabricados en salas y
zonas limpias. La cuantificacin de estos microorganismos
puede ser influenciada por instrumentos y procedimien-
tos utilizados en los ensayos. El empleo de los mtodos, o
equipos alternativos debe ser precedido de la verificacin
cuanto a la equivalencia de los resultados. Hay diferentes
formas de monitoreo de tipos y tipos de equipos disponi-
bles para cuantificar microorganismos viables, incluyendo
muestreadores de sedimentacin, de impacto y centrfugos.
La seleccin y adecuacin del mtodo a ser utilizado es
responsabilidad del usuario.
El mtodo utilizando placas de sedimentacin es adems
el ms ampliamente diseminado debido a su simplicidad y
bajo costo y da informaciones cualitativas sobre el ambien-
te de exposicin por tiempo prolongado, sin embargo, la
exposicin de placas de Petri abiertas y conteniendo medio
de agar no es para evaluacin cuantitativa de los niveles de
contaminacin microbiana de ambientes crticos.
Una de las principales limitaciones de los muestreadores
de aire mecnicos es el tamao de la muestra de aire que
est siendo probada, pues el nivel de microorganismos en
el aire de un ambiente controlado es normalmente reducido
y un gran volumen de aire debe ser probado para que el
resultado sea preciso y exacto, lo que, muchas veces, no
es prctico. Para demostrar que los conteos microbianos
en el ambiente no estn aumentando despus del muestreo,
ella puede ser extendida para determinar si el tiempo de
muestreo es un factor limitante para obtener una muestra
representativa. Hay equipos capaces de muestrear altas ta-
sas de volumen de aire, pero debe considerarse la ruptura
del flujo de aire en reas crticas o a creacin de turbulencia
que puedan aumentar la probabilidad de contaminacin.
Muestreadores centrfugos demuestran selectividad para
partculas mayores y, por tanto, el uso de esos equipos pue-
de resultar en conteos mayores de partculas en el aire. Al
usar esos muestreadores, debe considerarse su efecto en la
linealidad del flujo de aire en la zona controlada donde es
posicionado para el muestreo. La utilizacin de sondas re-
motas requiere que sea determinado si el tubo extra usado
no tiene efecto adverso en el conteo de partculas viables,
pues ese efecto debe ser eliminado, o un factor de correc-
cin debe ser usado para los resultados obtenidos.
7.4.9 MTODOS Y EQUIPOS
USADOS PARA MONITOREO
DE PARTCULAS VIABLES EN
SUPERFICIES
El muestreo de superficies de equipos, de reas y de fun-
cionarios es un componente del programa de control mi-
crobiolgico de ambientes controlados. Para minimizar la
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 335
ruptura de operaciones crticas, normalmente el muestreo
es realizado al final de las operaciones. El muestreo puede
ser hecho usando placas de contacto o swab.
El monitoreo es realizado normalmente en las reas que
entran en contacto con el producto y en reas adyacen-
tes. Placas de contacto con agar nutriente son usadas para
muestrear superficies planas y son incubadas en temperatu-
ra adecuada para cuantificacin de partculas viables. Agar
especfico puede ser usado para cuantificar hongos, espo-
ras, etc. El swab es empleado en superficies irregulares,
especialmente en los equipos. El swab es colocado en un
diluyente adecuado y la estimativa de conteo microbiano
est hecha plaqueando una alcuota apropiada en agar nu-
triente especfico. El rea a ser muestreada usando swab es
definida usando un molde de tamao apropiado estril, en
general entre 24 a 30 cm2. El resultado est dado por placa
de contacto, o por swab.
7.4.10 MEDIOS DE CULTIVO Y
DILUYENTES PARA MUESTREO
Y CUANTIFICACIN DE
PARTCULAS VIABLES
Los medios de cultivo y diluyentes usados para muestreo y
cuantificacin de microorganismos en salas y zonas limpias
dependen de los procedimientos y equipos usados. El agar
casena / soja es el medio slido normalmente usado, pero
hay diferentes medios y diluyentes disponibles para dife-
rentes propuestas. Medios alternativos deben ser validados
para La propuesta usada. Cuando se usan desinfectantes
o antibiticos en el rea controlada, debe considerarse el
empleo de medios con agentes inactivantes apropiados.
7.4.11 IDENTIFICACIN DE
AISLADOS MICROBIANOS 7
El programa de control ambiental incluye un nivel apro-
piado de identificacin de la flora obtenida en la muestreo.
El conocimiento de la flora normal de las salas y zonas
limpias es importante para definir el monitoreo de la rea,
a eficacia de los procedimientos de limpieza y desinfeccin
y los mtodos de desinfeccin microbiana. La informacin
obtenida utilizando el programa de identificacin puede ser
til en la investigacin de fuentes de contaminacin, espe-
cialmente cuando los lmites de accin son excedidos. La
identificacin de microorganismos aislados de reas crti-
cas es importante.
7.4.12 EVALUACIN
OPERACIONAL DEL ESTADO
MICROBIOLOGICO DE
PRODUCTOS ENVASADOS
ASEPTICAMENTE
Salas y zonas limpias son monitoreadas por un programa
de monitoreo ambiental apropiado. Para garantizar carga
 336 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
microbiana mnima, informacin adicional en la evalua-
cin del estado microbiolgico del ambiente puede ser ob-
tenida por medio de la prueba de envase asptico de medio
de cultivo (media fill). La prueba de media fill es empleada
para evaluar el procesamiento asptico usando medio de
cultivo estril en el lugar del producto. Resultados satis-
factorios de media fill demuestran la adecuacin de la lnea
para la fabricacin del producto. No obstante, otros facto-
res son importantes, como construccin de las reas; moni-
toreo ambiental y entrenamiento de personas.
Cuando un proceso asptico es desarrollado e instalado, es
necesario cualificar el estado microbiolgico del proceso,
realizando, como mnimo, tres media fill consecutivos. Los
problemas en el desarrollo del programa de media fill a ser
considerados comprenden procedimientos del envase del
medio; seleccin del medio; volumen de envase; tiempo
y temperatura de incubacin; inspeccin de unidades en-
vasadas; interpretacin de resultados y posibles acciones
correctivas requeridas.
Una vez que el media fill es realizado para simular el pro-
cesamiento asptico de un producto, es importante que
sea realizado en condiciones normales de produccin.
Eso incluye nmero mximo de personas y uso de todas
las etapas y materiales usados en el proceso de produccin
normal. Durante el desarrollo del media fill, intervenciones
pre-documentadas conocidas deben ser planeadas duran-
te las corridas normales de produccin, como cambio de
picos de envase, componentes de fijacin, etc. Alternati-
vamente, para aadir un margen de seguridad, una combi-
nacin de condiciones posibles puede ser usada y ejemplos
incluyen paradas frecuentes; reparaciones no esperadas;
cambio de filtros, etc.
La calificacin de un proceso asptico debe ser hecha en
7 todos los productos y para cada lnea. Desde que la geome-
tra del recipiente (como tamao y abertura) y la velocidad
de la lnea sean factores que son variables. La combinacin
apropiada de esos factores, preferencialmente en los extre-
mos, debe ser usada en la calificacin. Un anlisis racional
de los productos usados debe ser documentado.
Se recomienda que el media fill sea realizado para cu-
brir todos los turnos de produccin para lnea / producto
/ combinaciones de recipientes para calificacin inicial y
revalidaciones peridicas. El programa de media fill debe
simular prcticas de produccin en tiempos prolongados y
puede ser realizado al final del turno de produccin.
Medios de cultivo ricos pueden ser usados, como caldo ca-
sena / soja. Despus del procesamiento asptico del medio
de cultivo, esos deben ser incubados a 22,5 C 2,5 C o
32,5 C 2,5 C, por como mnimo 14 das. Si dos tem-
peraturas fueren usadas para la incubacin de las muestras
de medio de cultivo, estas deben ser incubadas, como m-
nimo, 7 das en cada una de ellas. Despus de incubacin,
las muestras deben ser inspeccionadas para crecimiento.
Aislados deben ser identificados para gnero y, cuando sea
posible, para especie a fin de propiciar la investigacin de
las fuentes de contaminacin.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Puntos crticos en la realizacin del media fill son nmero
de recipientes para cualificar el proceso asptico; nme-
ro de unidades llenadas para el media fill; interpretacin
de resultados e implementacin de acciones correctivas.
Normalmente tres trayectos de media fill son usados para
calificacin inicial, o inicio de un rea para demostrar con-
sistencia en la lnea de envase asptico. El nmero mnimo
para demostrar la tasa de contaminacin de no ms que
0,1%, criterio de aceptacin para trayecto de media fill, es
de, como mnimo, 3000 unidades. Plantas pilotos que pre-
paran pequeos lotes pueden usar nmero menor de uni-
dades.
Una vez que los funcionarios son una fuente crtica de con-
taminacin en salas limpias, documentacin visual puede
ser til para verificar correlacin de actividades de produc-
cin con eventos de contaminacin.
7.5 PROCEDIMIENTOS DE
LIBERACIN
Debe ser establecido un programa de garanta de la calidad
que describa en detalles los pasos y la documentacin re-
querida para la liberacin de la carga o lote. La liberacin
de los productos esterilizados depender de liberacin que
puede ser convencional o paramtrica.
LIBERACIN PARAMTRICA DE PRODUCTOS
CON ESTERILIZACIN TERMINAL
La liberacin paramtrica es definida como la liberacin
de cargas o lotes de productos sometidos a la esterilizacin
terminal por medio del cumplimiento de parmetros crti-
cos del proceso de esterilizacin sin la necesidad de reali-
zacin de la prueba de esterilidad. La liberacin paramtri-
ca es una posibilidad cuando el proceso de esterilizacin
es muy bien conocido, los puntos importantes de control
del proceso son bien definidos, previsibles y mensurables
y la letalidad del ciclo de esterilizacin fue validada con
indicador biolgico adecuado, o, en el caso de esteriliza-
cin por radiacin ionizante, la realizacin de las pruebas
microbiolgicas y dosimtricos apropiados. El uso de libe-
racin paramtrica para procesos de esterilizacin requiere
aprobacin previa del rgano regulador, que debe evaluar
la justificativa cientfica para el proceso de esterilizacin
empleado y los datos documentados de validacin.
Es importante considerar las limitaciones de la prueba de
esterilidad en la evaluacin de los productos sometidos a la
esterilizacin terminal, que tiene sensibilidad comprometi-
da y es estadsticamente limitado debido a la baja probabi-
lidad de la presencia de unidades contaminadas. Por tanto,
una vez que el proceso de esterilizacin est completamen-
te validado y operando, consistentemente, los datos fsicos
de la esterilizacin combinados con otros mtodos, como
por ejemplo, indicadores biolgicos, indicadores termoqu-
micos e integradores fsico qumicos, pueden suministrar
informaciones ms exactas que la prueba de esterilidad
para la liberacin de productos sometidos a la esteriliza-
cin terminal.

Cuatro procesos de esterilizacin pueden ser calificados
para la liberacin paramtrica: calor hmedo, calor seco,
xido de etileno y radiacin ionizante. Los productos so-
metidos a la esterilizacin terminal representan la cate-
gora de menor riesgo entre los productos farmacuticos
estriles. Al contrario de productos estriles obtenidos por
produccin asptica en ambientes controlados, productos
sometidos a la esterilizacin terminal presentan nivel de
garanta de esterilidad mensurable.
Los productos estriles obtenidos por esterilizacin ter-
minal deben atender a un nivel de garanta de esterilidad
de 10-6, o sea, no ms que una unidad contaminada en un
milln de unidades producidas. La aplicacin apropiada de
los mtodos usados para desarrollo de proceso terminal re-
quiere amplio conocimiento cientfico del mtodo de este-
rilizacin seleccionado, dentro de tres categoras, para uso
con producto especfico:
a) proceso basado en la carga microbiana (biocarga);
b) proceso combinado: indicador biolgico y biocarga;
c) proceso de sobremorte.
El proceso basado en la biocarga requiere amplio cono-
cimiento de la carga microbiana del producto. Debe ser
observado que diversos procedimientos de establecimiento
de dosis en el proceso de esterilizacin por radiacin uti-
lizan el conocimiento de la carga microbiana del producto
y su resistencia a la radiacin. Ese mtodo exige, tambin,
un nivel de garanta de esterilidad de por lo menos 10-6. El
mtodo basado en la determinacin de la biocarga necesita
que sean desarrollados puntos crticos de control del pro-
ceso cuanto a la carga microbiana del producto. Procedi-
mientos de anlisis de riesgo, como Anlisis de Peligros y
Puntos Crticos de Control (HACCP), son tiles para esta-
blecer condiciones de control de manufactura y parmetros
apropiados de control en proceso.
Para los productos que posibilitan la supervivencia de la
carga microbiana son necesarios ambientes de produc-
cin ms controlados y controles de proceso ms precisos.
Ese proceso es ms indicado para productos limpios, con
reducido nivel de carga microbiana y baja frecuencia de
microorganismos formadores de esporas. Ese proceso,
tambin, puede ser til para productos que pueden sufrir
alteraciones cuando sometidos a procesos de esterilizacin
ms drsticos.
El proceso combinado que usa indicador biolgico y bio-
carga es generalmente empleado para productos que pue-
den perder atributos al usar proceso de sobremorte y cuan-
do se desea un proceso de esterilizacin que demuestre la
inactivacin de altos nmeros de microorganismos de los
indicadores biolgicos, reconocidamente ms resistentes
al proceso de esterilizacin. Ese proceso requiere el co-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 337
nocimiento de la carga microbiana del producto y datos
relativos a su resistencia al proceso de esterilizacin. La
resistencia relativa del indicador biolgico seleccionado
debe ser establecida por la inoculacin de las esporas mi-
crobianas en el producto. Normalmente son usados indica-
dores biolgicos con 106 esporas y valor D mayor que 1
minuto. Ciclos fraccionados son usados para determinar la
resistencia (valor D) relativa entre producto inoculado con
los microorganismos del indicador biolgico y con aque-
llos, frecuentemente, encontrados en la carga microbiana.
Ese proceso es empleado generalmente para desarrollo de
ciclos de esterilizacin de productos parenterales emplean-
do esterilizacin terminal y esterilizacin de relacionados
por xido de etileno.
El proceso de sobremorte es usado cuando el producto a
ser esterilizado no es deletreamente influenciado por el
agente esterilizante o condiciones del proceso de esteriliza-
cin. Cuando se emplea ese proceso, es importante conocer
la carga microbiana del producto y la prevalencia de los
microorganismos formadores de esporas. En ese caso, los
datos sobre la carga microbiana no necesitan ser minucio-
sos como para los otros dos procesos (biocarga e indicador
biolgico / biocarga). Generalmente los indicadores bio-
lgicos son resistentes al proceso. La sobremorte es de-
mostrada por la reduccin logartmica de las esporas del
indicador biolgico, calibrado en un proceso que posibilita
obtener F0 mnimo de 12 minutos.
VALIDACIN DEL PROCESO DE ESTERILIZACIN
La liberacin paramtrica requiere que el proceso de es-
terilizacin escogido sea desarrollado y consistentemente
validado, para inactivacin de la carga microbiana y la
atencin a un nivel de garanta de esterilidad de 10-6. La
validacin de la mayora de los procesos de esterilizacin
incluye la validacin de parmetros fsicos y de la efica-
cia microbiolgica por intermedio del uso de indicadores
biolgicos para demostrar una correlacin razonable entre
7
la letalidad obtenida por medio de medidas fsicas (F0) y a
letalidad biolgica determinada con el uso de indicadores
biolgicos.
Una vez que la eficacia del proceso de esterilizacin termi-
nal definido en funcin de la biocarga est asociada con el
nmero y la resistencia de los microorganismos en el pro-
ducto, uno de los componentes de la liberacin paramtrica
es el programa activo de control microbiolgico para mo-
nitorear el conteo y resistencia de la carga microbiana del
producto. El control de la carga microbiana y su enumera-
cin no es un factor crucial cuando se emplea el mtodo
de sobremorte, pues, en general, el mtodo de sobremorte
no requiere extensa evaluacin de la carga microbiana en
el transcurso del proceso y exige menor control en proceso
del ambiente de produccin.
 338 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

8 PROCEDIMIENTOS ESTADSTICOS
APLICABLES A LOS ENSAYOS BIOLGICOS

8.1 GLOSARIO DE SMBOLOS

Smbolo Definicin
a1..z1 Dosis de las preparaciones ensayadas (muestras) A.Z
a Significancia estadstica de un resultado o medida estimada del grado en que este resultado es
"verdadero"
b0 Interseccin de las respuestas (e) sobre log dosis (x) en la lnea de regresin
b,b1 Estimativa de la inclinacin de la lnea de regresin de la respuesta (e) en relacin al logaritmo de
la dosis (x).
b1 Nmero de bloques (animales) en un ensayo cruzado.
c Constante utilizada en la evaluacin de los lmites de confianza (Tabla 15)
d Nmero de niveles de dosis para cada preparacin en un ensayo balanceado.
f Nmero de diferencias en las respuestas comparadas entre estndar y muestra, en los ensayos
realizados por el delineamiento 5 x 1
gl grados de libertad
h Nmero de preparaciones en un ensayo, incluyendo la preparacin estndar
h Nmero de muestras ensayadas
k nmero de tratamientos diferentes dentro de un ensayo k = dh
k nmero de logaritmos de potencias en los ensayos realizados por el delineamiento 5 x 1, para una
misma muestra
n nmero de rplicas para cada tratamiento
n nmero de estimacin individuales de la potencia
n grados de libertad utilizado para estimar la varianza s2M en el ensayo 5 x 1
P probabilidad
P1P2P3 dosis menor, media y mayor de la preparacin estndar P; en ensayos con solamente dos niveles de
dosis, p2 representa la dosis mayor
r coeficiente de correlacin de Pearson
S2 estimativa de la varianza suministrada por el cuadrado promedio del error en el anlisis de la varianza.
Tambin usado con una letra ndice, por ejemplo, s2M representa la varianza del log potencia M.
s estimativa del desvo estndar, o sea, la raz cuadrada de s2
t estadstica de Student (Tabla 3).
T` estadstica de Dunnett (Tabla 12).
v varianza para heterogeneidad entre ensayos

8
w coeficiente de ponderacin
x log dosis tambin usado con ndice para indicar una preparacin particular.
x promedio de los log dosis
y respuesta individual o respuesta individual transformada.
y respuesta calculada para sustituir un valor perdido.
yp... yz promedios de las respuestas para las preparaciones estndar y muestra.
A.Z muestras ensayadas
A.Z suma de las respuestas para las muestras A...Z
A1A2A3 suma de las respuestas para las dosis menor, media y mayor de la muestra A. para un ensayo con dos
niveles de dosis, A2 representa la respuesta para la dosis mayor. Similarmente para otras muestras
ensayadas
B1B2n suma de las respuestas para cada sujeto (1 a 2n) en ensayo doble cruzado
B total incompleto de las respuestas en fila o bloque que tiene un valor perdido
C estadstica usada en el clculo de los lmites de confianza (Frmula 14)
C1.Cn suma de respuestas en cada columna (1 a n) en delineamiento cuadrado latino
C` suma incompleta de las respuestas en una columna de delineamiento en cuadrado latino con un valor
perdido
CV coeficiente de variacin.
x2 constante estadstica de la Tabla 18

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 339

Smbolo Definicin
Xm2
constante estadstica para probar homogeneidad de estimacin individuales de logaritmo de la
potencia
E suma de cuadrados para regresin (Tabla 10)
F razn de dos estimacin de varianzas independientes (Tablas 4 y 5)
FI` FII suma de las respuestas en la fase I o fase II en un ensayo cruzado
F 1 Fn suma de las respuestas en cada una de las filas 1 a n en delineamiento de cuadrado latino, o en cada
bloque de un delineamiento en bloques al azar
G1,G2,G3 estadstica utilizada en la prueba de valores aberrantes
G total incompleto de las respuestas en un ensayo con exclusin del valor perdido
I intervalo entre log dosis adyacentes, en el ensayo de rectas paralelas
K trmino de correccin utilizado en el anlisis de varianza K = (Ee)2/N
L intervalo de confianza en logaritmos
Lc intervalo de confianza en logaritmos para promedio semiponderado
Lp.Lz contrastes lineares para las preparaciones estndar y muestra
M estimativa del log de la potencia o del log de la razn de potencia usada con una letra ndice en un
ensayo mltiple, para denotar una preparacin particular (M = log R)
M1, M5 lmites de confianza de la estimativa del log de la potencia
M promedio de varias estimaciones independientes de M
M estimativa del log de la potencia de la muestra A o del log de la razn de potencias antes de corregir
por la potencia supuesta (M' = log R')
Ms, Mi lmites superior y inferior de la estimativa del log de la potencia, antes de corregir por la potencia
supuesta
N nmero total de respuestas del ensayo
Np NA nmero total de respuestas para las preparaciones P y A
P preparacin estndar
P suma de las respuestas para la preparacin estndar
P1,P2,P3 suma de las respuestas para las dosis inferior, media y superior de la preparacin estndar P. Para
ensayo de solamente dos niveles de dosificacin, P2 representa las respuestas para la dosis mayor
Q suma de cuadrados para linealidad en la misma direccin (Tabla 10).
QM suma de cuadrados debido a una fuente de variacin dividido por el respectivo grado de libertad
Qp.Qz contraste cuadrtico para las preparaciones estndar y muestra (Tabla 9)
R estimativa de la potencia de la muestra
Ri, Rs lmites de confianza inferior y superior de la estimativa de potencia
R estimativa de la razn de potencias antes de la correccin por la potencia supuesta
R+ constante especfica para probar valores atpicos (Tabla 2)
SA potencia supuesta para la muestra A, cuando se preparan las dosis
SQ suma de cuadrados debido a una fuente de variacin
T total incompleto de las respuestas para un tratamiento excluyendo el valor perdido
V=1/W varianza del logaritmo de potencia individual
X

W
diferencias en las respuestas comparadas entre muestra y estndar, divididas por el coeficiente de
regresin (bj), en el delineamiento 5 x 1
ponderacin estadstica usada en la combinacin de varias estimaciones independientes del log
8
potencia
W semi-ponderacin de cada logaritmo de potencia en una serie de ensayos
X2 estadstica qui-cuadrada (Tabla 18)

Nota: las Tablas de 1 a la 20 se encuentran en la seccin 8.9 TABLAS ESTADSTICAS. Las Tablas de 21 a la 47 se
encuentran en la seccin 8.10 EJEMPLOS DE ENSAYOS ESTADSTICOS.

biolgicos es su variabilidad. Mientras los reactivos fsico

8.2 FUNDAMENTOS
ENSAYOS BIOLGICOS
Son procedimientos destinados a evaluar la potencia de
principios activos contenidos en las materias primas y pre-
paraciones farmacopeicas, utilizando reactivos biolgicos
tales como microorganismos, animales, fluidos y rganos
aislados de animales. La caracterstica de los reactivos
qumicos pueden ser definidos y estandarizados para dar
resultados idnticos en todos los laboratorios, es imposi-
ble definir totalmente los reactivos biolgicos, a pesar de
los esfuerzos de entidades internacionales en ese sentido.
Esa variabilidad inherente a los reactivos biolgicos torna
imprescindible: 1) el empleo de estndares de referencia
adecuados para obtener potencias relativas y 2) el empleo
de mtodos estadsticos para los delineamientos experi-
mentales y anlisis de los resultados.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 340 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
DELINEAMIENTOS EXPERIMENTALES
El delineamiento de un ensayo comprende: a) seleccin del
conjunto de dosis del estndar (P) y de las muestras del des-
conocido (A) que sern ensayadas; b) especificacin de las
unidades experimentales (animales, microorganismos, anti-
sueros, sangre etc.); c) reglas por las cuales se distribuirn
las dosis para las unidades experimentales; d) especificacio-
nes de las medidas u otros registros que deban ser procedi-
dos en cada unidad experimental. El mejor delineamiento
experimental es aquel que produce la informacin deseada
con la mayor eficiencia. Por dificultades prcticas, puede ser
imposible alcanzar ese objetivo. Por tanto, para cada ensayo
pueden emplearse diferentes delineamientos experimenta-
les, de acuerdo con la disponibilidad de personal, reactivos
y tiempo. Todos los delineamientos que provean ensayos
vlidos y de precisin adecuada, como resultado final, son
cientficamente aceptables. Adems de eso, deben compren-
der algn sistema que asegure distribucin casual de las uni-
dades experimentales para las diversas dosis utilizadas.
CASUALIDAD Y VCIO
Debe hacerse distribucin casual utilizando aparato em-
pleado en juegos de azar o tabla de nmeros aleatorios.
Conviene sealar que ese procedimiento no elimina todos
los vicios. Por ejemplo, por efecto de la casualidad, los ani-
males de mayor peso podrn ser destinados a la determina-
da dosis y esa diferencia de pesos viciar los resultados. Por
tanto, deber ser creado el equilibrio, o sea, deben clasifi-
carse los animales por banda de peso y distribuir, al azar,
aquellos de mismo peso para todas las dosis y preparacio-
nes (estndar y muestra).
ANLISIS ESTADSTICO
Es el procedimiento matemtico aplicado a los resultados
experimentales con que se tiene como objetivo estimar la
potencia de la muestra y evaluar la validez y precisin del
ensayo. Los mtodos de anlisis se relacionan con los deli-
neamientos experimentales utilizados.
8
RESULTADOS
Expresar los resultados de evaluacin biolgica como esti-
mativa de la potencia supuesta para una muestra (R), que
ser la expresin de la verdadera potencia relativa de la
muestra en relacin al estndar (p). Esa ltima es imposible
de ser calculada con precisin debido a la variabilidad de los
reactivos biolgicos. Tal estimativa de la potencia supuesta
(R) debe ser acompaada por los lmites de confianza infe-
rior y superior (Ri, Rs), o intervalo que abarca la verdadera
potencia relativa de la muestra (p). En las monografas estn
establecidas especificaciones para la amplitud aceptable de
esos intervalos con relacin a la potencia estimada. Esas es-
pecificaciones tienen en cuenta la dificultad de los mtodos y
la necesidad prctica de estimarse la verdadera potencia con
determinada precisin. Para alcanzar los lmites de confian-
za especificados debe, a veces, realizarse ms de un ensayo.
Para obtener una estimativa de la potencia con intervalo de
confianza reducido, deben combinarse, estadsticamente, los
resultados de esos ensayos independientes.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
La probabilidad, que mide el grado de confianza de que la
potencia est fuera de los lmites de confianza superior e
inferior, est dada por la significancia estadstica (a) de un
resultado o medida estimada del grado en que ese resultado
es verdadero. El nivel de significancia ms utilizado en
ensayos biolgicos es de 5% (a = 0,05) o 1% (a = 0,01).
En los casos no especificados explcitamente se entender
que el nivel de significancia utilizado en el clculo de los
lmites es a = 0,05.
Los procedimientos de clculo son planeados para el en-
sayo en muestra nica. En el caso de ser ensayadas varias
muestras, simultneamente, emplear las modificaciones
descritas en ese volumen.
8.3 VALORES ATPICOS
Todas las respuestas obtenidas sin obedecer estrictamente
el protocolo pre-establecido deben ser eliminadas. Cuando,
despus del registro de las respuestas, se observan valores
aparentemente atpicos, la decisin de mantenerlos o eli-
minarlos debe basarse en criterios estadsticos, como los
descritos a continuacin:
Criterio basado en la variacin dentro de un nico grupo de
respuestas supuestamente equivalentes
En promedio, para, relativamente, pocas respuestas idnticas
dentro del grupo, sern rechazadas observaciones validas en
2 o 4% de las pruebas. Comenzando con el valor supuesta-
mente atpico, indicar las respuestas en orden de magnitud
de y1 a yn, donde n representa el nmero de observaciones en
el grupo o rplicas del mismo tratamiento. Calcular
G1 = (y2 y1) / (yn y1), quando n = 3 a 7
G2 = (y3 y1) / (yn-1 y1), quando n = 8 a 13 ou
G3 = (y3 y1) / (yn-2 y1), quando n = 14 a 24
Si G1, G2 o G3 exceden el valor crtico registrado en la Ta-
bla 1 para el valor correspondiente de n, existe base esta-
dstica para la eliminacin del valor sospechoso.
Criterio que contempla a amplitud de una serie K = 2 o ms
grupos de igual tamao
Los grupos pueden recibir diferentes tratamientos, sin em-
bargo todas las n respuestas dentro de cada grupo tienen
del mismo tratamiento. En esta prueba, se estudia la varia-
cin de los valores para cada tratamiento que es obtenida
por la diferencia entre el mayor y menor valor. El valor ob-
tenido con mayor diferencia debe ser dividido por la suma
de todas las diferencias y no debe exceder el valor en la
tabla de (R+) en la Tabla 2 para k = nmero de dosis y n =
nmero de rplicas. Si el valor calculado excede el valor en
la tabla, la columna sospechosa debe ser investigada para
detectar el valor discrepante. Si k fuese menor o igual a
10, usar los valores presentados en la Tabla 2; si mayor,
multiplicar R+ por (k + 2) e interpolar, si necesario, entre
los valores presentados en la Tabla 2a.

Si R+ excede el valor de la tabla o interpolado, el grupo con
intervalo mayor es sospechoso (a = 0,05) y la observacin
de sus datos permitir identificar el valor que, entonces, se
considera atpico. El procedimiento puede ser repetido con
los dems intervalos se hubiere sospecha de valor atpico
en un segundo grupo.
8.4 ENSAYOS DIRECTOS
Se miden, directamente, las dosis de cada preparacin
(estndar y muestra) necesarias para producir respuestas
pre-determinadas en cada unidad experimental de dos gru-
pos equivalentes de animales u otros reactivos biolgicos.
Ejemplo tpico es el ensayo biolgico de digital. Preparar
las soluciones del estndar y muestra de modo que con-
tengan aproximadamente la misma potencia, teniendo en
consideracin la actividad declarada de la muestra o la esti-
mada en ensayos previos (SA). Transformar cada resultado
(dosis eficaz) en logaritmos (x) y calcular los valores pro-
medios de los logaritmos de las dosis eficaces para el estn-
dar xp y para a muestra xA Calcular la potencia relativa de
la muestra (R), antes de ajustar por la potencia supuesta,
como el antilogaritmo de M, en que:
M = xp xA (1)
Calcular la varianza de M como la suma de las varianzas
de los dos promedios, a partir de la ecuacin
2)en Calcular la potencia relativa de la muestra y los l-
mites de confianza, teniendo en consideracin la potencia
supuesta de la muestra (SA) utilizada para preparar las di-
luiciones:
1 1
S M = S x
2 2
+
NP NA
(2)
en que
(3)
Np y NA son nmeros de animales tratados como estndar
y muestra; p y A representan la suma de los resultados
calculados para las dos preparaciones. Calcular los lmites
de confianza como:
(4)
Obtener el valor apropiado de t en la Tabla 3, de acuerdo
con los grados de libertad (gl) dados por el denominador
de la ecuacin (3).
Calcular la potencia relativa de la muestra y los lmites de
confianza, teniendo en consideracin la potencia supuesta
de la muestra (SA) utilizada para preparar las diluiciones:
R = anti log M (5)
em que
M = M + log SA (6)
con lmites de confianza
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 341
(7)
En este ensayo, sM es igual a sM.
Para que el ensayo sea vlido, la varianza de xp debe ser la
misma de xA, diferendo solamente por errores de muestreo.
para probar, calcular las varianzas y dividir la mayor por la
menor. De ese modo, se obtiene una relacin de varianzas
Calcular la varianza de xp del siguiente modo en que
Con lmites de confianza
2
x2p xp
Np
P P (8)
S2xp =
Np 1
Calcular anlogamente S2X.(8a)
La distribucin de la razn de varianzas (F) se encuentra en
las Tablas 4 y 5, sin embargo para esta prueba los valores
en la Tabla 4 corresponden a los niveles de significancia a
= 0,05 y los en la Tabla 5 a a = 0,01. El valor F del ensayo
no debe ultrapasar el valor en la tabla, correspondiente a
los grados de libertad del numerador y denominador con
que se obtuvo F. Los grados de libertad son aquellos de
los denominadores de las varianzas de las ecuaciones (8)
y (8a).
8.5 ENSAYOS INDIRETOS
CUANTITATIVOS
NATURALEZA Y VALIDEZ
En general no es posible medir directamente la dosis eficaz.
Por esa razn, la potencia es determinada indirectamente,
comparando las respuestas producidas en escala cuantitati-
va, por ejemplo, peso, por dosis conocidas del estndar con
aquellas producidas por una o ms dosis de muestra.
En un intervalo restricto de dosis, las respuestas o su trans-
formacin conveniente (logaritmo, probit, etc.), presentan
relacin lineal con el logaritmo de las dosis correspondien-
tes. Usar dos o ms niveles de dosis del estndar o, prefe-
8
rencialmente, del estndar y de la muestra para determinar
la posicin y la inclinacin de la recta. Proceder en cada
ensayo de esa manera, pues, dependiendo de la sensibi-
lidad de los reactivos biolgicos utilizados, puede variar
tanto la posicin cuanto la inclinacin de la recta.
Cada tratamiento consiste de una dosis fija del estndar (p1,
p2, p3 etc.) o de la muestra (a1, a2, a3, etc.) y es administrada
a un cierto nmero (n) de unidades experimentales (anima-
les, rganos, cultivos, tubos etc.). Registrar n respuestas, o
sea, una para cada unidad experimental. Para que los m-
todos presentados en ese captulo sean vlidos, se deben
cumplir las siguientes condiciones:
1. las unidades experimentales correspondientes a cada
tratamiento deben ser seleccionadas casualmente;
2. para cada tratamiento, las respuestas o sus transforma-
ciones utilizada en el clculo (e) constituyen muestra
de distribucin normal;
3. el desvo estndar de la respuesta o de su transforma-
cin es independiente del nivel de respuesta, o sea, es
 342 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
igual para todos los tratamientos, slo diferendo por los
errores de muestreo;
4. la respuesta, o su transformacin utilizada en los clcu-
los (e), tiene re1acin lineal con el logaritmo de la dosis
(x) en el intervalo de dosis utilizadas;
5. la lnea recta correspondiente a una o ms muestras
debe ser paralela a la del estndar.
A partir de estudios preliminares del mtodo de ensayo,
es posible suponer el cumplimiento de las condiciones 2
y 3. Teniendo de los resultados de cada ensayo, se puede
probar las condiciones 4 y 5. La condicin 4 (linealidad)
slo puede ser verificada en ensayos en que se aplican por
lo menos tres diluiciones de cada preparacin. Cuando se
realiza ensayo con solamente dos diluiciones, se presume
que la linealidad del sistema fue, previamente, estableci-
da. La condicin 5 (paralelismo) debe ser probada en cada
ensayo. En ese, nunca deben ser utilizadas menos de dos
diluiciones de cada preparacin.
Si no es cumplida cualquiera de las condiciones de 1 a 5,
los mtodos de clculo descritos en ese captulo no pueden
ser aplicados y se tornan necesarios estudios para que se
establezcan las condiciones recomendadas.
Es conveniente que la muestra sea ensayada con dosis cu-
yas respuestas sean aproximadamente iguales a aquellas
obtenidas con las correspondientes dosis del estndar. Eso
aumenta la precisin del resultado. Denominar la potencia
supuesta para la muestra SA.
EXPRESIN DE POTENCIA Y RESTRICCIONES
Realizadas las pruebas de validez correspondientes y sien-
do satisfactorios los resultados, se puede expresar la po-
tencia relativa de cada muestra en relacin al estndar con
una razn de potencias o convertir en unidades apropiadas
para cada muestra, por ejemplo, unidades internacionales,
nacionales, unidades de peso etc. Tambin, pueden calcu-
larse los lmites de confianza a partir del conjunto de datos
obtenidos en el ensayo.
8
Para simplificar los clculos del anlisis estadstico presen-
tado en este captulo, es necesario imponer las siguientes
restricciones al delineamiento de los ensayos:
a) probar cada preparacin, estndar y muestra, con el
mismo nmero de diluiciones. Se presentan frmulas
para ensayos farmacopeicos, utilizando dos y tres nive-
les de dosis para cada preparacin as como el delinea-
miento 5 x 1;
b) mantener constante en cada ensayo la razn de dosis
consecutivas para todos los tratamientos y
c) obtener el mismo nmero de respuestas para cada tra-
tamiento.
Caso alguna respuesta est perdida, esa puede ser estimada
por los mtodos apropiados cada delineamiento presentado
en ese captulo; si hubiere prdida de un tratamiento, aten-
der a lo especificado en la seccin de Ensayos parcialmen-
te balanceados.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
8.5.1 TIPOS DE
DELINEAMIENTO
CASUALMENTE
Cuando las unidades experimentales fueren, en su totali-
dad, razonablemente homogneas y no hubiere indicacin
de que la variabilidad de la respuesta podr ser menor en
ciertos subgrupos, proceder a la distribucin de las unida-
des experimentales para los diferentes tratamientos casual-
mente.
Habiendo posibilidad de que algunos subgrupos como,
por ejemplo, capas, posiciones en estantes o das de ex-
perimento, sean ms homogneos que la totalidad de las
unidades, la precisin del ensayo puede ser aumentada in-
troducindose una o ms restricciones en el delineamiento
experimental.
BLOQUES AL AZAR
Posibilita segregar una fuente de variacin tal como la
sensibilidad de diferentes cras de animales o la variacin
entre las placas de Petri en el ensayo microbiolgico por
difusin. Ese planeamiento obliga que cada tratamiento sea
aplicado una vez en cada bloque (cra, placa, etc.) y slo
puede ser realizado cuando el bloque es suficientemente
grande para acomodar todos los tratamientos.
CRUZADO
Utilizar este planeamiento cuando el experimento pueda ser
ajustado en bloques. Sin embargo, slo es posible aplicar
dos tratamientos por bloque. Por ejemplo, un bloque pue-
de ser un animal posible de ser probado en dos ocasiones
diferentes. Si tiene como objetivo aumentar la precisin,
eliminando la influencia de la variacin de los animales,
al mismo tiempo que se equilibran los efectos de cualquier
diferencia entre los niveles generales de respuesta, en las
dos etapas del ensayo. Denominar doble cruzado el ensayo
con dos dosis del estndar y de la muestra, y triple cruzado
aquel de tres dosis de cada preparacin. Proceder al ensayo
en dos fases conforme el perodo de tiempo definido en el
mtodo. Distribuir los animales en cuatro o seis grupos y
realizar un tratamiento en cada grupo en la primera fase.
En la segunda fase, los animales que recibieron una pre-
paracin recibirn otra; los animales que recibieron dosis
menores, en esa etapa recibirn las mayores. Seguir el es-
quema de la Tabla 6.
CUADRADO LATINO
Adecuado cuando la respuesta puede ser afectada por dos
fuentes de variacin, cada cual pudiendo tener k niveles
diferentes. Por ejemplo, se realiza el experimento en k das
diferentes y por k experimentadores, o se realiza un en-
sayo de antibiticos por difusin en placa, en el cual los
tratamientos pueden ser aplicados en un esquema de k x k,
donde cada tratamiento slo ocurre una vez en cada fila y
en cada columna. Utilizar solamente cuando el nmero de
columnas, filas y tratamientos fueren iguales.

Las respuestas son registradas en forma de un cuadrado
denominado latino. Existen muchas posibilidades de cua-
drados latinos encontradas en la literatura especializada. A
partir de uno pueden confeccionarse otros, alternando alea-
toriamente filas y/o columnas. En la Tabla 7 hay ejemplo de
cuadrado latino con dos dosis del estndar y de la muestra.
Para cualquier delineamiento, la distribucin de las unidades
experimentales en los bloques debe estar hecha por procedi-
miento al azar, siendo las unidades mantenidas lo ms uni-
formemente posible antes y durante el experimento.
8.5.2 ANLISIS DE VARIANZA
Al realizar este anlisis se tiene como objetivo estudiar la
validez del ensayo y calcular el error residual. Con excep-
cin del clculo del error residual, el anlisis de los datos
de un ensayo es idntico para los delineamientos al azar,
bloques al azar y cuadrado latino. A continuacin, sern
descritas las frmulas para el anlisis de cada tipo de en-
sayo. Consultar el glosario de smbolos. Las frmulas son
apropiadas para el caso en que se est comparando una ni-
ca muestra (A) contra el estndar de referencia (P), como,
tambin, para el caso de ensayos mltiples donde estn in-
cluidas h-1 muestras (A...Z). Las frmulas para los ensayos
cruzados no se encuadran en el esquema general y sern
presentadas separadamente.
Si es necesario, transformar las respuestas (y) para cum-
plir las condiciones de validez descritas. Sumar todos los
valores y para cada tratamiento y para cada preparacin,
como se observa en las Tablas 8 y 9. A partir de esos datos,
obtener los contrastes lineales relacionados con las inclina-
ciones de las lneas dosis-respuesta.
Cuando son ensayadas tres dosis de cada preparacin, se
obtienen, tambin, contrastes cuadrticos que representan
la curvatura de las lneas. Ver frmulas en las Tablas 8 y 9.
La variacin total de respuestas derivada de los diferentes
tratamientos puede ser como se muestra en la Tabla 10.
Las sumas de cuadrados son obtenidas a partir de los valo-
res de las Tablas 8 o 9. K representa el cuadrado de la suma
de todas las respuestas obtenidas en el ensayo dividido por
el nmero total de ellas:
k = { y )2/N}
Calcular el error residual del ensayo substrayendo las va-
riaciones controladas en el delineamiento de la variacin
total en las respuestas (Tabla 11). En esa tabla, y2 re-
presenta la suma de los cuadrados de todas las respuestas
registradas en el ensayo. Conviene sealar que la suma de
cuadrados, reducida, correspondiente, al tem tratamientos
es igual a la suma de las sumas de cuadrados reducidas
(Tabla 10) y que, para el cuadrado latino, el nmero de res-
puestas replicadas (n) es igual al nmero de filas, columnas
o tratamientos (k).
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 343
8.5.3 PRUEBAS DE VALIDEZ
Para probar el significado de las fuentes de variacin rela-
cionadas en la Tabla 10, cada suma de cuadrado reducida
obtenida en la tabla debe ser dividida por el correspondien-
te grado de libertad para obtener el cuadrado promedio. El
cuadrado promedio del error residual (s2) es cociente simi-
lar, obtenido de la lnea apropiada en la Tabla 11.
Para obtener la razn conocida como F, dividir el cuadrado
promedio de cada fuente de variacin a ser probada por
la varianza (s2). Calcular la significancia de cada fuente y
comparar con los valores en la tabla (Tablas 4 y 5) al nivel
de significancia de 5% (a = 0,05) y 1% (a = 0,01). Los
valores de F son obtenidos en la columna correspondiente
al nmero de grados de libertad asociado al cuadrado pro-
medio de la fuente ensayada (gl1) y en la fila de la tabla co-
rrespondiente al nmero de grados de libertad asociado con
s2 (g12). Si el valor de F calculado es mayor que el valor
en la tabla, la fuente de variacin ensayada es considerada
significativa para el nivel de probabilidad utilizada.
Considerar los ensayos estadsticamente vlidos si las
pruebas presentan los siguientes resultados:
Delineamiento de rectas paralelas
1. Regresin significativa, o sea, F calculado es mayor
que en la tabla al nivel de significancia de 1% (a =
0,01). Indica que la inclinacin de la lnea dosis-res-
puesta es satisfactoria;
2. trminos cuadrticos no significativos, o sea, los va-
lores de F calculados deben ser menores que aquellos
en la tabla al nivel de significancia de 5% (a = 0,05).
Equivale a satisfacer la condicin de linealidad de la re-
lacin entre la transformacin de la respuesta utilizada
y el logaritmo de la dosis;
3. paralelismo no significativo, o sea, F calculado debe
ser menor que el valor en la tabla al nivel de signifi-
cancia de 5% (a = 0,05) indicando que las rectas del
estndar y muestra son paralelas. Caso estn ensayn-
dose varias muestras, simultneamente, y se obtenga
8
un desvo significativo de paralelismo, eso puede ser
debido a la utilizacin de alguna preparacin que dio
lnea dosis-respuesta con una inclinacin diferente con
relacin a las otras muestras. En ese caso, calcular el
valor de t para cada preparacin A...Z, usando la ecua-
cin t=(LP-LA)/(2sn)
L LA
t= P (9)
2sn
Cada t calculada debe ser comparada con el valor de la Ta-
bla 12, donde g11 = h -1 y g12 es igual al nmero de grados
de libertad asociado con s2. Si se encuentra un valor de t
significativo para alguna muestra, todos los datos relati-
vos a esa preparacin deben ser eliminados del ensayo y el
anlisis repetido desde el inicio.
En ensayos con error residual muy grande, una razn F
significativa para el trmino preparaciones puede indi-
car que la suposicin de potencia que sirvi de base para
la preparacin de las diluiciones no fue correcta. Eso no
 344 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

es condicin de invalidad. Llegndose a esa conclusin, En el ensayo cruzado, la prueba de paralelismo no es muy
la potencia estimada en el ensayo puede ser usada como sensible, pues depende de la variacin entre bloques (ani-
potencia supuesta en ensayos posteriores. males).

En las pruebas de paralelismo y cuadrticos pueden darse Establecida la validez estadstica de los ensayos hechos con
por casualidad valores de F muy bajos, menores que 1. Si cualquier delineamiento, calcular la potencia y los lmites
pasa eso, repetidamente, puede ser indicacin de que no de confianza por los mtodos descritos a continuacin.
se cumplieron las condiciones supuestas, lo que debe ser
investigado ms profundamente. 8.5.4 ESTIMATIVA DE LA
Delineamiento 5 x 1 POTENCIA Y LMITES DE
CONFIANZA
La validez se establece cuando:
Clculos para delineamiento de rectas paralelas (3 x 3 o
1. regresin significativa, o sea, F calculado debe ser ma- 2 x 2)
yor que el valor en la tabla para nivel de significancia
= 0,01. Indica que la inclinacin de la lnea dosis-res- Calcular primero la respuesta promedio para cada prepara-
puesta es satisfactoria; cin (yP, yA,...,yZ)
2. desvo de linealidad no significativo. La relacin entre P
ambas variables (logaritmo de la dosis y halo de inhibi- yP =
NP
(10)
cin) debe ser lineal. El valor de F calculado debe ser
menor que aquel en la tabla para nivel de significancia y, anlogamente, para otras preparaciones.
= 0,05. Otra medida a ser realizada es el coeficiente de
correlacin de Pearson (r) que debe ser mayor que 0,98; Llamndose de I el intervalo en logaritmo de las concentra-
3. coeficiente de variacin (CV) menor que 5% es apro- ciones, para cada preparacin, en los ensayos con dos dosis
piado. La variabilidad de la respuesta en la curva de se obtiene la inclinacin comn (b), a partir de la ecuacin
calibracin debe ser constante. LP + LA + ... Lz
b= (11)
En el caso de ensayos cruzados, con esquema de clculo Inh
especial, las frmulas a utilizar se encuentran en las Tablas Para ensayos con tres dosis de cada preparacin, el deno-
13 y 14. minador Inh debe ser sustituido por 2 Inh.

Existen tres trminos de interacciones debido a las rplicas El logaritmo de la razn de potencia de la muestra A (MA),
dentro de cada grupo: Fases X Preparaciones, Fases X Re- antes de corregir por el valor de SA, es
gresin y Fases X Paralelismo.
yA yP
MA = (12)
Como en los delineamientos anteriormente discutidos, b
cada suma de cuadrados reducida debe ser dividida por el La potencia calculada es la estimativa de la verdadera po-
nmero correspondiente de grados de libertad para obtener tencia de cada muestra. Los lmites de confianza (con 5%
los cuadrados medios. de probabilidad de excluir la verdadera potencia o = 0,05)
pueden ser calculados como el antilogaritmo de la frmula
En el caso del delineamiento doble cruzado, se obtiene dos
MAs (yA yP)2

8
cuadrados medios correspondientes a los errores I y II, que tsC 1 1
b
+
NP NA
+
E-s2t2
(13)
se denominan s2I y s2II. Dividir el Cuadrado promedio de MAI
cada fuente de variacin por el s2 apropiado para obtener
la razn F. en que
C = E/(E s2t2) (14)
Para las fuentes Paralelismo, Fases X Preparaciones, Fases
X Regresin, se utiliza s2 I. Para las otras fuentes, se utiliza Obtener E de la Tabla 10. El s2 es el error residual de la
s2 II. Tabla 11 dividido por sus grados de libertad y t se encuen-
tra en la Tabla 3 de acuerdo con los grados de libertad de
Calcular La significancia de la fuente utilizando las Tablas s2.
4 y 5. SI F calculado es mayor que el valor en la tabla, para
los grados de libertad de la fuente ensayada (g11) y del s2 Para ensayos balanceados de 2 y 3 dosis por preparacin,
correspondiente (g12), la fuente de variacin es considera- la frmula para los lmites de la ecuacin 13 puede sim-
da significativa para el nivel de significancia utilizado ( plificarse:.
= 0,05 o = 0,01). MAs
(C-1) (CM2A + cI2) (15)
Para que el ensayo sea vlido, la regresin debe ser signi- MAI
ficativa y el paralelismo y las tres interacciones no deben en que c es el coeficiente obtenido en la Tabla 15 y C es
ser significativos. a medida de significancia de la regresin. En ensayo con

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


inclinacin bien definida el valor de C estar muy prximo
de la unidad.
Clculo para delineamiento 5 x 1
Procedimiento para construccin de la curva dosis-res-
puesta En el mtodo turbidimtrico, medir la turbidez en
los tubos con medio lquido.
En el mtodo por difusin en agar, medir los halos de in-
hibicin para cada una de las concentraciones del estndar
(P1, P2, P3, P4, y P5) en los 4 conjuntos de placas. El pro-
medio de las 36 lecturas de la concentracin intermediaria
del estndar (P3) es utilizado para corregir los promedios
de cada una de las otras concentraciones del estndar P1,
P2, P4, P5
La correccin se efecta de la siguiente manera: medir las 36
lecturas de P3 en todas las placas y calcular el promedio. Me-
dir las 9 lecturas de P3 en el conjunto de placas (3) para las
otras concentraciones (P1, P2, P4 y P5) y calcular el promedio.
Calcular la diferencia entre el promedio total y el promedio
en las 3 placas de cada concentracin, la cual debe ser suma-
da a las medidas de las otras concentraciones.
Ejemplo:
valor promedio de P3 en las 36 lecturas: 18,2 mm
valor promedio de P3 en las placas con P1: 18,0 mm
valor de P1 en la primera lectura de las 9 placas: 17,3 mm
valor corregido en el primer punto P1: (18,2 18,0) + 17,3
= 17,5 mm
valor de P1 en la segunda lectura de las 9 placas: 16,9 mm
valor corregido en el segundo punto P1: (18,2 18,0) +
16,9 = 17,1 mm
Construir la tabla con las respuestas corregidas para las res-
pectivas concentraciones (P1 a P5) de acuerdo con a Tabla
19 y efectuar el anlisis de varianza. Confirmada la validez
de los resultados, calcular la diferencia en las respuestas
comparadas entre muestra y estndar en el punto central de
la curva por la ecuacin
X = (yA-yP)/b1 (16)
en que yA es una de las respuestas de la muestra entre las f
repeticiones, yP es la respuesta pareada del estndar y b1 es
el coeficiente de regresin dado por la Tabla 20.
El logaritmo de la razn de potencia es
MA = X/f (17)
donde f es el nmero de diferencias en las respuestas com-
paradas entre la muestra y el respectivo estndar.
Cuando un nmero de ensayos de la misma muestra es ob-
tenido a travs de la misma curva, calcule el coeficiente de
variacin (CV) para los resultados de las muestras.
desvi padrn (s)
CV = x 100 (18)
promedio y de cada muestra)
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 345
y2 (y2)/n
S= (18)
Donde N-1 e y es respuesta de
1 a N para una misma muestra
La varianza es calculada sobre los f valores de X para el
total de muestras ensayadas como
X2 (Tx2 /f)
SM2 = (19)
n
donde Tx = X para una nica muestra en n = f h y
h es el nmero de muestras ensayadas.
El logaritmo del intervalo de confianza de cada muestra es
2sMt
L= (20)
k
donde s es el desvo estndar para el total de diferencias
X, t se encuentra en la Tabla 3 con los grados de libertad
de s2M y k es el nmero de diferencias comparadas por
muestra ensayada.
Los lmites de confianza (con 5% de probabilidad de ex-
cluir la verdadera potencia) pueden ser calculados con el
antilogaritmo de la frmula
MAs
= MA 1/2L (21)
MAI
Obtener la razn de potencia (RA) y los lmites de confian-
za (Rs, Ri) tomando los antilogaritmos de los valores obte-
nidos a partir de las frmulas 12 y 15 (delineamiento rectas
paralelas 3 x 3 o 2 x 2) y 17 y 21 (delineamiento 5 x 1),
despus de sumar log SA a ambos:
MA = MA + log SA (22)
RA = antilog MA (23)
M As = M As + log SA (24)
M Ai = M Ai + log SA (25)
8
R As = antilog M As R Ai = antilog M Ai
Valores perdidos
En ensayos balanceados se requiere el mismo nmero de
observaciones para cada concentracin. Si alguna respues-
ta estuviese perdida por causa no relacionada con los trata-
mientos aplicados, como la muerte de un animal o la ruptu-
ra de algn tubo de ensayo, el anlisis estadstico se torna
mucho ms complejo. Se puede restablecer el equilibrio de
dos modos:
1. reducir el nmero de observaciones en los grupos ma-
yores hasta que el nmero de respuestas sea el mismo
para cada tratamiento. Si el delineamiento fuese total-
mente al azar, se puede substraer el promedio de cada
grupo mayor, tantas veces como fueren necesarias, o
eliminar una o ms respuestas de cada grupo mayor, se-
leccionndolas al azar. Para ensayo de bloques al azar,
conservar solamente los bloques completos;
 346 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
2. alternativamente, un grupo, casualmente, menor puede
ser recompuesto al tamao original, cuando el nmero
de respuestas perdidas no fuese mayor que uno en cual-
quier tratamiento o 5% en el total del ensayo. En ese
caso, calcular la sustitucin del valor perdido. Se pierde
un grado de libertad en la varianza del error s2 para
cada valor sustituido:
a) si el delineamiento es totalmente al azar, sustituir el
valor perdido por la media de las respuestas restan-
tes del grupo incompleto;
b) si el delineamiento es de bloques al azar, sustituir el
valor perdido aplicando la frmula
nB + kT G
y =
(n 1) (k 1)
(26)
en que B es el total incompleto de las respuestas en el blo-
que que contiene el valor perdido, T es el total incompleto
de las respuestas en el tratamiento que contiene el valor
perdido, G es la suma total de las respuestas obtenidas en
el ensayo. Como se defini anteriormente, n es el nmero
de bloques y k es el nmero de tratamientos o dosis;
si el ensayo est basado en delineamiento de cuadrado lati-
no, el valor perdido (y) se obtiene por la ecuacin
k(B + C + T) 2G
y =
(k 1) (k 2)
(27)
en que By C son las sumas de las respuestas en las filas
y columnas, respectivamente, que contienen el valor perdi-
do. En ese caso, k = n.
Se hubiere prdida de ms de un valor, sustituir, tempora-
riamente, por la media del tratamiento respectivo, todos los
lugares vacos, excepto uno. Sustituir ese lugar con el valor
y, calculado por la ecuacin 27. Sustituir uno por uno los
valores que haban sido colocados, temporariamente, por
el promedio hasta que se obtenga conjunto estable de valo-
res para todas las respuestas perdidas.
Si el nmero de valores sustituidos es pequeo en relacin
al nmero total de observaciones en el ensayo (menor que
5%), la aproximacin derivada de las sustituciones descri-
8
tas y de la reduccin de los grados de libertad, equivalen-
te al nmero de valores sustituidos, es generalmente sa-
tisfactoria. Sin embargo, el anlisis debe ser interpretado
con cuidado, sobretodo si existe predominancia de valores
perdidos en un tratamiento o bloque particular. El mismo
es vlido para el caso de valores perdidos en los planea-
mientos cruzados.
Ensayos parcialmente balanceados
Si la potencia presumida de las muestras (usada para cal-
cular las dosis del ensayo) fuese muy diferente de la ver-
dadera potencia, es posible que la dosis mayor proporcione
respuesta mxima o que la dosis menor proporcione res-
puesta muy baja o nula. Esas respuestas estarn fuera de
la zona lineal de la curva log dosis-respuesta y las pruebas
de validez indicarn curvatura y/o desvo de paralelismo
significativo.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
En ese caso, las respuestas a la dosis mayor o menor de la
muestra pueden ser rechazadas, calculndose un valor de
potencia relativa a partir de los datos remanentes. Esa po-
tencia puede ser toma como potencia supuesta para selec-
cionar dosis de muestra para otro ensayo, con el objetivo
de obtener respuestas similares al estndar y, de ese modo,
aumentar la precisin del resultado. La ecuacin que se
emplea para calcular la potencia es:
yA yP I
MA = (28)
b 2
Esa frmula es similar a la frmula 12, sin embargo, se
substrae la mitad del intervalo log dosis cuando se omiten
las respuestas de la dosis menor y se adiciona el mismo
intervalo cuando se descarta la dosis mayor.
Las respuestas promedio yA y yP son obtenidas de la misma
frmula que en los ensayos totalmente balanceados (fr-
mula 10), sin embargo se debe introducir modificacin en
el clculo de la inclinacin (b) de acuerdo con el delinea-
miento del ensayo.
Para ensayos mltiples, que, obligatoriamente, tendran
dos dosis de cada preparacin, los contrastes lineares (LP
... LZ) deben formarse excluyendo LA (como las respuestas
para a1 o a2 fueron eliminadas, no es posible formar un con-
traste LA ). Calcular la inclinacin a partir del promedio de
los valores de L dividida por In
LP + ... + Lz
b= (29)
In(h+1)
Para ensayos con una simple muestra:
LP
b= (30)
In
Para ensayos mltiples con tres dosis de cada preparacin,
obtener LA y los dems contrastes de la Tabla 9. La ecua-
cin para la inclinacin es:
2(LP + ... + Lz) + LA
b= (31)
In(4h3)
Si existe una muestra nica, la ecuacin se reduce a:
2LP + LA
b= (32)
51n
8.6 MEDIAS MOVILES
En el caso particular del ensayo biolgico de la heparina,
el intervalo entre la dosis que posibilita la coagulacin y
aquella que la inhibe es tan pequea que la curva dosis-res-
puesta no puede ser determinada explcitamente. Para in-
terpolar el logaritmo de la dosis correspondiente a 50% de
la coagulacin, tanto para el estndar cuanto para la mues-
tra, se utilizan las medias mviles.
Clculo de la potencia
Transformar en logaritmo los volmenes de la preparacin
estndar usados en 5 o 6 tubos que constituyen la serie,
de modo que 2 o 3 tubos presenten grados de coagulacin

iguales o menores que 0,5 y 2 o 3 tubos tengan grados igua-
les o mayores que 0,5.
Confeccionar tabla correlacionando los tubos numerados,
consecutivamente, con el grado de coagulacin observado.
Denominar x los logaritmos de los volmenes utilizados
e y los grados de coagulacin correspondientes. Calcular
los promedios realizados xi e yi de los tubos 1, 2 y 3; de
los tubos 2, 3 y 4 y de los tubos 3, 4 y 5, y cuando la serie
consista de 6 tubos, de los tubos 4, 5 y 6, respectivamente.
Si para uno de esos pares de promedios el grado de coagu-
lacin medio yi es exactamente 0,50, el correspondiente xi
es la mediana del logaritmo del volumen de la preparacin
estndar xp. En el caso de que eso no ocurra, interpolar el xp
a partir de los valores realizados de yi, xi e yi+1, xi+1 que ocu-
rran, inmediatamente abajo y arriba del grado 0,50, como:
xp = xi + (yi 0,5) (xi+1 xi) / (yi yi+1) (33)
A partir de los datos obtenidos en los tubos de la muestra,
calcular del mismo modo la mediana del logaritmo del vo-
lumen xA. El logaritmo de la potencia de la muestra es:
MA = xp xA+ logSA (34)
en que SA es a suposicin de la potencia de la muestra he-
cha en la preparacin de la solucin correspondiente de los
tubos de la muestra.
Repetir el ensayo, independientemente, y calcular el pro-
medio de dos o ms valores de M para obtener M . En
el caso que la segunda determinacin de M difiera de la
primera ms que 0,05, continuar realizando ensayos hasta
que el logaritmo del intervalo de confianza, calculado con-
forme final de la seccin Combinacin de estimacin de
potencia, no exceda 0,20.
La potencia de la heparina sdica es:
R = anti log M
8.7 ENSAYOS INDIRETOS
TODO O NADA
En algunos ensayos no es posible ni conveniente medir el
efecto en cada unidad experimental (por ejemplo, animal)
en escala cuantitativa. En ese caso, pueden medirse efectos
de todo o nada, como muerte u ocurrencia de sntoma pre-
establecido. La proporcin de unidades experimentales que
presentan el sntoma constituye el resultado. Esos ensayos
son llamados quantales. En este captulo ser presentado
un clculo aproximado. En el caso de disponer de facili-
dades de computacin, se puede recurrir al clculo terico
exacto. Se debe registrar, para cada dosis, el porcentaje de
animales con efecto positivo. Ejemplo: porcentaje de rato-
nes en convulsin. Transformar los porcentuales en probit,
utilizando la Tabla 16. Cada probit ser considerado como
el valor de la respuesta transformada (y). El mtodo a con-
tinuacin es utilizado cuando no ocurren respuestas equi-
valentes a porcentuales cero o 100. En ese caso, emplear
mtodos estadsticos completos de mxima probabilidad
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 347
(logit o probit). Para cada valor de y, se debe obtener un
valor de coeficiente de ponderacin (w) en la Tabla 17.
Las frmulas de las sumas de cuadrados para los pruebas de
validez son las mismas utilizadas en los ensayos indirectos
cuantitativos (Tabla 10), tomando n = 1, con excepcin del
trmino error (s2), que tiene grados de libertad iguales a
infinito, y se calcula como:
k
s2 =
nw
(35)
en que k = nmero de tratamientos, n = nmero de anima-
les utilizados en cada tratamiento.
Calcular la potencia y los lmites de confianza usando las
frmulas 12 y 25. Ese mtodo aproximado es til cuan-
do el ensayo es delineado de modo que las respuestas en
porcentaje correspondientes a las dosis menores y mayores
estn uniformemente espaciadas alrededor de 50%. Si una
de las dosis probadas suministra respuestas cero o 100%,
esas pueden ser descartadas. En ese caso, obtener la esti-
mativa de potencia por los mtodos descritos en la seccin
Ensayos parcialmente balanceados.
8.8 COMBINACIN DE
ESTIMACIN DE POTENCIA
Cuando se realizan n ensayos independientes para cada
muestra, los resultados pueden ser combinados a fin de
obtener una potencia estimada con intervalo de confianza
reducido, que cumpla los lmites establecidos en cada mo-
nografa. Existen varios mtodos para combinar ensayos
repetidos.
Adoptar simplificaciones, tenindose en cuenta dos aspec-
tos:
a) corregir estimacin del log de la potencia (M) por la
potencia supuesta (SA) antes de realizar las combina-
ciones (M = M + log sA);
8
b) las estimaciones deben ser independientes, o sea, obte-
nidas en ensayos separados.
8.8.1 POTENCIA MEDIA
PONDERADA Y LMITES DE
CONFIANZA
Suponer que fueron analizados resultados de n ensayos
para dar n valores de M con lmites de confianza (en loga-
ritmos) asociados a cada valor de M, obtenidos segn las
ecuaciones 13 a 15 y 22 a 25. Para cada ensayo, obtener
el intervalo de confianza logartmico (L), substrayendo el
lmite inferior del superior. Calcular, tambin, una ponde-
racin (W) para cada valor de M a partir de la ecuacin
36, donde t es el mismo valor empleado en el clculo del
intervalo de confianza
4t2
W=
L2
(36)
 348 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

L2
Para cada ensayo, calcular el producto WM y dividir su V = 1/W =
4t2
(42)
suma por la suma de todas las ponderaciones a fin de obte-
ner el logaritmo de la potencia media ponderada (M), con- y v es la varianza de la heterogeneidad entre ensayos y se
forme la ecuacin 37: calcula por la ecuacin:

M= WM/ W (37) M2 (M)2 / n V

n n V= (43)
El error estndar de la potencia media (s M) es la raz cua- n 1 n
drada de la recproca de la ponderacin total: Cuando v vara de tal manera que v calculada es nmero
negativo, se puede calcular v aproximada, omitindose el
SM = 1/
n
W (38) trmino despus del signo negativo en la ecuacin 43.

Calcular los lmites de confianza aproximados ( = 0,05), a Para calcular el promedio semi-ponderado (M), sustituir en
partir del antilogaritmo de los valores obtenidos por medio la ecuacin 31 los valores de W y W por los respectivos
de la frmula 39: valores de W y W:

M ts (39) M=
n
WM/
n
W (44)
Se obtiene el valor de t en la Tabla 3, con grados de liber- Se puede considerar ese valor de M prximo al centro de
tad equivalentes a la suma de los grados de libertad de la un intervalo de confianza de tamao aproximado Lc que es
varianza del error de los ensayos individuales. la raz cuadrada de:
Lc2 = 4t2 / W (45)
Ese mtodo aproximado de combinacin da resultados sa-
tisfactorios cuando: en que t, de la Tabla 3, tiene grados de libertad iguales a la
suma de grados de libertad de la varianza del error de los n
a) C es menor que 1,1 para cada uno de los n ensayos; ensayos individuales.
b) las estimacin individuales de la potencia forman un
conjunto homogneo de acuerdo con la prueba de ho- En el caso especial del ensayo de heparina, todos los lo-
mogeneidad realizada, aplicando la estadstica x2 Esa garitmos de potencia (M) tienen la misma ponderacin y el
calculada elevndose al cuadrado la diferencia entre intervalo de confianza de logaritmo de la estimativa de la
cada valor de M en re1acin al promedio ponderado M potencia M se determina como a continuacin:
, multiplicndose ese cuadrado por la ponderacin co-
rrespondiente (W) y sumndose los valores para todos Clculo de la varianza del error con n 1 grados de liber-
tad:
los ensayos:
s2 = {M2 (M)2/n}/n 1 (46)
x M=
2
n
W (M M) (40) Determinar el lmite de confianza en logaritmos (L)
Si el valor de 2M calculado es menor que el correspon- 2st
diente en la Tabla 18 para (n 1) grados de libertad, se L= (47)
considera que no hay elementos para sospechar de la hete- n
rogeneidad de potencias. En ese caso, la potencia media y en que
los lmites calculados son correctos.
s = s2, t (Tabla 3) con n 1 grados de libertad, n = n-
Si el valor de es mayor que el de la Tabla 18, se consi-
2
M
mero de estimacin individuales de la potencia.

8
dera que las potencias son heterogneas, o sea, que la dis-
persin de los valores individuales de M es mayor que la Calcular los lmites de confianza:
esperada, de acuerdo con los respectivos lmites de confian-
za. En ese caso, no aplicar las frmulas 37 y 39, averiguar el Ms=M+1/2L (48)
origen de esa heterogeneidad y, en el caso que se considere
adecuado, calcular M usando semi-ponderaciones W: Mi=M-1/2L (48)
W = 1/(V + v) (41) Rs=antilogMs (49)
en que
Ri=antilogMi (50)

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 349

8.9 TABLAS ESTADSTICAS

Tabla 1 - Tabla G para valores atpicos.
n 3 4 5 6 7
G1 0,976 0,846 0,729 0,644 0,586
n 8 9 10 11 12 13
G2 0,780 0,725 0,678 0,638 0,605 0,578
n 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24
G3 0,602 0,579 0,559 0,542 0,527 0,514 0,502 0,491 0,481 0,472 0,464

Tabla 2 - Prueba para grupos conteniendo valores atpicos.

Valor crtico de R+ para intervalo de n observaciones cada uno, al nivel de significancia = 0,05
k
2 3 4 5 6 7 8 9 10
2 0,962 0,862 0,803 0,764 0,736 0,717 0,702 0,691 0,682
3 0,813 0,667 0,601 0,563 0,539 0,521 0,507 0,498 0,489
4 0,681 0,538 0,479 0,446 0,425 0,410 0,398 0,389 0,382
5 0,581 0,451 0,398 0,369 0,351 0,338 0,328 0,320 0,314
6 0,508 0,389 0,342 0,316 0,300 0,288 0,280 0,273 0,267
7 0,451 0,342 0,300 0,278 0,263 0,253 0,245 0,239 0,234
8 0,407 0,305 0,267 0,248 0,234 0,225 0,218 0,213 0,208
9 0,369 0,276 0,241 0,224 0,211 0,203 0,197 0,192 0,188
10 0,339 0,253 0,220 0,204 0,193 0,185 0,179 0,174 0,172

Tabla 2a Prueba para grupos conteniendo valores atpicos.

Valor crtico de (k + 2) R+ para intervalo de n observaciones cada uno,al nivel de significancia a = 0,05
k
2 3 4 5 6 7 8 9 10
10 4,06 3,04 2,65 2,44 2,30 2,21 2,14 2,09 2,05
12 4,06 3,03 2,63 2,42 2,29 2,20 2,13 2,07 2,04
15 4,06 3,02 2,62 2,41 2,28 2,18 2,12 2,06 2,02
20 4,13 3,03 2,62 2,41 2,28 2,18 2,11 2,05 2,01
50 4,26 3,11 2,67 2,44 2,29 2,19 2,11 2,06 2,01

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 350 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 3 - Distribucin t de Student.

0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 ,05 ,02 ,01 ,001

1 0,158 0,325 0,510 0,727 1,000 1,376 1,963 3,078 6,314 12,706 31,821 63,657 636,619

2 0,142 0,289 0,445 0,617 0,816 1,061 1,386 1,886 2,920 4,303 6,965 9,925 31,598

3 0,137 0,277 0,424 0,584 0,765 0,978 1,250 1,638 2,353 3,182 4,541 5,541 12,924

4 0,134 0,271 0,414 0,569 0,741 0,941 1,190 1,533 2,132 2,776 3,747 4,604 8,610

5 0,132 0,267 0,408 0,559 0,727 0,920 1,156 1,476 2,015 2,571 3,365 4,032 6,869

6 0,131 0,265 0,404 0,553 0,718 0,906 1,134 1,440 1,943 2,447 3,143 3,707 5,959

7 0,130 0,263 0,402 0,549 0,711 0,896 1,119 1,415 1,895 2,365 2,365 3,499 5,408

8 0,130 0,262 0,399 0,546 0,706 0,889 1,108 1,397 1,860 2,306 2,896 3,355 5,041

9 0,129 0,261 0,398 0,543 0,703 0,883 1,100 1,383 1,833 2,262 2,821 3,250 4,781

10 0,129 0,260 0,397 0,542 0,700 0,879 1,093 1,372 1,812 2,228 2,764 3,169 4,587

11 0,129 0,260 0,396 0,540 0,697 0,876 1,088 1,363 1,796 2,201 2,718 3,106 4,437

12 0,128 0,259 0,395 0,539 0,695 0,873 1,083 1,356 1,782 2,179 2,681 3,055 4,318

13 0,128 0,259 0,394 0,538 0,694 0,870 1,079 1,350 1,771 2,160 2,650 3,012 4,221

14 0,128 0,258 0,393 0,537 0,692 0,868 1,076 1,345 1,761 2,145 2,624 2,977 4,140

15 0,128 0,258 0,393 0,536 0,691 0,866 1,074 1,341 1,753 2,131 2,602 2,947 4,073

16 0,128 0,258 0,392 0,535 0,690 0,865 1,071 1,337 1,746 2,120 2,583 2,921 4,015

17 0,128 0,257 0,392 0,534 0,689 0,863 1,069 1,333 1,740 2,110 2,567 2,898 3,965

18 0,127 0,257 0,392 0,534 0,688 0,862 1,067 1,330 1,734 2,101 2,552 2,878 3,922

19 0,127 0,257 0,391 0,533 0,688 0,861 1,066 1,328 1,729 2,093 2,539 2,861 3,883

20 0,127 0,257 0,391 0,533 0,687 0,860 1,064 1,325 1,725 2,086 2,528 2,845 3,850

21 0,127 0,257 0,391 0,532 0,686 0,859 1,063 1,323 1,721 2,080 2,518 2,831 3,819

22 0,127 0,256 0,390 0,532 0,686 0,858 1,061 1,321 1,717 2,074 2,508 2,819 3,792

23 0,127 0,256 0,390 0,532 0,685 0,858 1,060 1,319 1,714 2,069 2,500 2,807 3,767

24 0,127 0,256 0,390 0,531 0,685 0,857 1,059 1,318 1,711 2,064 2,492 2,797 3,745

25 0,127 0,256 0,390 0,531 0,684 0,856 1,058 1,316 1,708 2,060 2,485 2,787 3,726

26 0,127 0,256 0,390 0,531 0,684 0,856 1,058 1,315 1,706 2,056 2,479 2,779 3,707

27 0,127 0,256 0,389 0,531 0,684 0,855 1,057 1,314 1,703 2,052 2,473 2,771 2,690

8
28 0,127 0,256 0,389 0,530 0,683 0,855 1,056 1,311 1,699 2,045 2,462 2,756 3,674

29 0,127 0,256 0,389 0,530 0,683 0,854 1,055 1,310 1,697 2,042 2,457 2,750 3,659

30 0,127 0,255 0,389 0,530 0,683 0,854 1,055 1,310 1,697 2,042 2,457 2,750 3,646

40 0,126 0,254 0,388 0,529 0,681 0,851 1,050 1,303 1,684 2,021 2,423 2,704 3,551

60 0,126 0,254 0,387 0,527 0,679 0,848 1,046 1,296 1,671 2,000 2,390 2,660 3,460

120 0,126 0,253 0,386 0,526 0,677 0,845 1,041 1,289 1,658 1,980 2,358 2,617 3,373

0,126 0,256 0,385 0,524 0,674 0,842 1,036 1,282 1,645 1,960 2,326 2,576 3,291

gl = grados de libertad; a = nivel de significancia

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 351

Tabla 4 - Distribucin F de Fisher para = 0,05.

gl1 gl2 Numerador

Denominador 1 2 3 4 5 6 8 12 24
1 161,40 199,50 215,70 224,60 230,20 234,00 238,90 243,90 249,00 254,30
2 18,51 19,00 19,16 19,25 19,30 19,33 19,37 19,41 19,45 19,50
3 10,13 9,55 9,28 9,12 9,01 8,94 8,84 8,74 8,64 8,53
4 7,71 6,94 6,59 6,39 6,26 6,16 6,04 5,91 5,77 5,63
5 6,61 5,79 5,41 5,19 5,05 4,95 4,82 4,68 4,53 4,36
6 5,99 5,14 4,76 4,53 4,39 4,28 4,15 4,00 3,84 3,67
7 5,59 4,74 4,35 4,12 3,97 3,87 3,73 3,57 3,41 3,23
8 5,32 4,46 4,07 3,84 3,69 3,58 3,44 3,28 3,12 2,93
9 5,12 4,26 3,86 3,63 3,48 3,37 3,23 3,07 2,90 2,71
10 4,96 4,10 3,71 3,48 3,33 3,22 3,07 2,91 2,74 2,54
11 4,84 3,98 3,59 3,36 3,20 3,09 2,95 2,79 2,61 2,40
12 4,75 3,88 3,49 3,26 3,11 3,00 2,85 2,69 2,50 2,30
13 4,67 3,80 3,41 3,18 3,02 2,92 2,77 2,60 2,42 2,21
14 4,60 3,74 3,34 3,11 2,96 2,85 2,70 2,53 2,35 2,13
15 4,54 3,68 3,29 3,06 2,90 2,79 2,64 2,48 2,29 2,07
16 4,49 3,63 3,24 3,01 2,85 2,74 2,59 2,42 2,24 2,01
17 4,45 3,59 3,20 2,96 2,81 2,70 2,55 2,38 2,19 1,96
18 4,41 3,55 3,16 2,93 2,77 2,66 2,51 2,34 2,15 1,92
19 4,38 3,52 3,13 2,90 2,74 2,63 2,48 2,31 2,11 1,88
20 4,35 3,49 3,10 2,87 2,71 2,60 2,45 2,28 2,08 1,84
21 4,32 3,47 3,07 2,84 2,68 2,57 2,42 2,25 2,05 1,81
22 4,30 3,44 3,05 2,82 2,66 2,55 2,40 2,23 2,03 1,78
23 4,28 3,42 3,03 2,80 2,64 2,53 2,38 2,20 2,00 1,76
24 4,26 3,40 3,01 2,78 2,62 2,51 2,36 2,18 1,98 1,73
25 4,24 3,38 2,99 2,76 2,60 2,49 2,34 2,16 1,96 1,71
26 4,22 3,37 2,98 2,74 2,59 2,47 2,32 2,15 1,95 1,69
27 4,21 3,35 2,96 2,73 2,57 2,46 2,30 2,13 1,93 1,67
28
29
4,20
4,18
3,34
3,33
2,95
2,93
2,71
2,70
2,56
2,54
2,44
2,43
2,29
2,28
2,12
2,10
1,91
1,90
1,65
1,64
8
30 4,17 3,32 2,92 2,69 2,53 2,42 2,27 2,09 1,89 1,62
40 4,08 3,23 2,84 2,61 2,45 2,34 2,18 2,00 1,79 1,51
60 4,00 3,15 2,76 2,52 2,37 2,25 2,10 1,92 1,70 1,39
120 3,92 3,07 2,68 2,45 2,29 2,17 2,02 1,83 1,61 1,25
3,84 2,99 2,60 2,37 2,21 2,10 1,94 1,75 1,52 1,00

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 352 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 5 - Distribucin F de Fisher para = 0,01.

gl2 gl1 Numerador

Denominador 1 2 3 4 5 6 8 12 24
1 4052 4999 5403 5625 5764 5859 5982 6106 6234 6366
2 98,50 99,00 99,17 99,25 99,30 99,33 99,37 99,42 99,46 99,50
3 34,12 30,82 29,46 28,71 28,24 27,91 27,49 27,05 26,60 26,12
4 21,20 18,00 16,69 15,98 15,52 15,21 14,80 14,37 13,93 13,46
5 16,26 13,27 12,06 11,39 10,97 10,67 10,29 9,89 9,47 9,02
6 13,74 10,92 9,78 9,15 8,75 8,47 8,10 7,72 7,31 6,88
7 12,25 9,55 8,45 7,85 7,46 7,19 6,84 6,47 6,07 5,65
8 11,26 8,65 7,59 7,01 6,63 6,37 6,03 5,67 5,28 4,86
9 10,56 8,02 6,99 6,42 6,06 5,80 5,47 5,11 4,73 4,31
10 10,04 7,56 6,55 5,99 5,64 5,39 5,06 4,71 4,33 3,91
11 9,65 7,20 6,22 5,67 5,32 5,07 4,74 4,40 4,02 3,60
12 9,33 6,93 5,95 5,41 5,06 4,82 4,50 4,16 3,78 3,36
13 9,07 6,70 5,74 5,20 4,86 4,62 4,30 3,96 3,59 3,16
14 8,86 6,51 5,56 5,03 4,69 4,46 4,14 3,80 3,43 3,00
15 8,68 6,36 5,42 4,89 4,56 4,32 4,00 3,67 3,29 2,87
16 8,53 6,23 5,29 4,77 4,44 4,20 3,89 3,55 3,18 2,75
17 8,40 6,11 5,18 4,67 4,34 4,10 3,79 3,45 3,08 2,65
18 8,28 6,01 5,09 4,58 4,25 4,01 3,71 3,37 3,00 2,58
19 8,18 5,93 5,01 4,50 4,17 3,94 3,63 3,30 2,92 2,49
20 8,10 5,85 4,94 4,43 4,10 3,87 3,56 3,23 2,86 2,42
21 8,02 5,78 4,87 4,37 4,04 3,81 3,51 3,17 2,80 2,36
22 7,94 5,72 4,82 4,31 3,99 3,76 3,45 3,12 2,75 2,31
23 7,88 5,66 4,76 4,26 3,94 3,71 3,41 3,07 2,70 2,26
24 7,82 5,61 4,72 4,22 3,90 3,67 3,36 3,03 2,66 2,21
25 7,77 5,57 4,68 4,18 3,86 3,63 3,32 2,99 2,62 2,17
26 7,72 5,53 4,64 4,14 3,82 3,59 3,29 2,96 2,58 2,13

8
27 7,68 5,49 4,60 4,11 3,78 3,56 3,26 2,93 2,56 2,10
28 7,64 5,45 4,57 4,07 3,75 3,53 3,23 2,90 2,52 2,06
29 7,60 5,42 4,54 4,04 3,73 3,50 3,20 2,87 2,49 2,03
30 7,56 5,39 4,51 4,02 3,70 3,47 3,17 2,84 2,47 2,01
40 7,31 5,18 4,31 3,83 3,51 3,29 2,99 2,66 2,29 1,80
60 7,08 4,98 4,13 3,65 3,34 3,12 2,82 2,50 2,12 1,60
120 6,85 4,79 3,95 3,48 3,17 2,96 2,66 2,34 1,95 1,38
6,64 4,60 3,78 3,32 3,02 2,80 2,51 2,18 1,79 1,00

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 353

Tabla 6 - Orden de dosis en los ensayos cruzados.

Doble Cruzado Triple Cruzado

Grupo
Fase I Fase II Fase I Fase II
1 1 a2 1 a3
2 2 a1 2 a2
3 a1 2 3 a1
4 a2 1 a1 3
5 - - a2 2
6 - - a3 1

Tabla 7 - Ejemplo de orden de dosis en el cuadrado latino.

a2 1 a1 2
2 a1 1 a2
a1 a2 2 1
1 2 a2 a1

Tabla 8 - Frmulas para ensayos con dos dosis de cada preparacin.

Estndar (P) 1 Muestra (A) Muestra h -1 (Z)

Dosis menor (suma de respuestas) P1 A1 Z1
Dosis mayor (suma de respuestas) P2 A2 Z2
Por preparacin (suma de respuestas) P1 + P2 = P A1 + A2 = A Z1 + Z2 = Z
Contraste lineal P2 P1 = LP A2 A1 = LA Z2 Z1 = LZ

Tabla 9 - Frmulas para ensayo con tres dosis de cada preparacin

Estndar (P) 1 Muestra (A) Muestra h -1 (Z)

Dosis menor (suma de respuestas) P1 A1 Z1
Dosis media (suma de respuestas) P2 A2 Z2
Dosis mayor (suma de respuestas) P3 A3 Z3
Por preparacin (suma de respuestas) P 1 + P2 + P3 = P A1 + A2 + A3 = A Z1 + Z2 + Z3= Z
Contraste lineal P3 P1 = LP A3 A1 = LA Z3 Z1 = LZ
Contraste cuadrtico P1 2P2 + P3 = QP A1 2A2 + A3 = QA Z1 2Z2 + Z3 = QZ

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 354 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 10 - Pruebas de validez (anlisis de varianza).

Suma de cuadrados reducida

Fuente de variacin Grados de libertad (gl)
Ensayo de dos dosis Ensayo de tres dosis

P2 + A2 + ... + Z2 P2 + A2 + ... + Z2
Preparaciones h1 K K
2n 3n

(LP + LA + ... + LZ)2 (LP + LA + ... + LZ)2

Regresin 1 E E
2nh 2nh

(L2P + L2A + ... + L2Z) (L2P + L2A + ... + L2Z)

Paralelismo h1 E E
2n 2n

(QP + QA + ... QZ)2

Cuadrtico 1 - =Q
6nh

(Q2P + Q2A + ... + Q2Z)

Diferencia de Cuadrticos h1 - Q
6n

Tabla 11 - Estimativa del error residual.

Fuente de Grados de Suma de cuadrados reducida

variacin libertad (gl) Delineamiento al azar Bloques al azar Cuadrado latino
P1 + P2 + ... + Z d
2 2 2
P1 + P2 + ... + Z d
2 2 2
P1 + P22 + ... + Z2d
2
Tratamientos k1 K K K
n n n
F12 + F22 + ... + FN2 F12 + F22 + ... + FN2
Bloques (filas) n1 -- K K
k k
Bloques C12 + C22 + ... + CN2
n1 -- -- K
(columnas) k
Error residual Por diferencia * * *
TOTAL N1 y2 K y2 K y2 K
* Obtenida sutrayendo, de la suma de cuadrados reducida total, todas las otras sumas de cuadrados reducidas calculadas para el delineamiento corres-
pondiente.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 355

Tabla 12 - Tabla de t para comparacin bicaudal entre (h -1) muestras y un

estndar para un coeficiente de confianza conjunto de p = 0,95.

gl1 = (h -1) = nmero de muestras (excluyendo estndar)

gl2
1 2 3 4 5 6 7 8 9
5 2,57 3,03 3,29 3,48 3,62 3,73 3,82 3,90 3,97
6 2,45 2,86 3,10 3,26 3,39 3,49 3,57 3,64 3,71
7 2,36 2,75 2,97 3,12 3,24 3,33 3,41 3,47 3,53
8 2,31 2,67 2,88 3,02 3,13 3,22 3,29 3,35 3,41
9 2,26 2,61 2,81 2,95 3,05 3,14 3,20 3,26 3,32
10 2,23 2,57 2,76 2,89 2,99 3,07 3,14 3,19 3,24
11 2,20 2,53 2,72 2,84 2,94 3,02 3,08 3,14 3,19
12 2,18 2,50 2,68 2,81 2,90 2,98 3,04 3,09 3,14
13 2,16 2,48 2,65 2,78 2,87 2,94 3,00 3,06 3,10
14 2,14 2,46 2,63 2,75 2,84 2,91 2,97 3,02 3,07
15 2,13 2,44 2,61 2,73 2,82 2,89 2,95 3,00 3,04
16 2,12 2,42 2,59 2,71 2,80 2,87 2,92 2,97 3,02
17 2,11 2,41 2,58 2,69 2,78 2,85 2,90 2,95 3,00
18 2,10 2,40 2,56 2,68 2,76 2,83 2,89 2,94 2,98
19 2,09 2,39 2,55 2,66 2,75 2,81 2,87 2,92 2,96
20 2,09 2,38 2,54 2,65 2,73 2,80 2,86 2,90 2,95
24 2,06 2,35 2,51 2,61 2,70 2,76 2,81 2,86 2,90
30 2,04 2,32 2,47 2,58 2,66 2,72 2,77 2,82 2,86
40 2,02 2,29 2,44 2,54 2,62 2,68 2,73 2,77 2,81
60 2,00 2,27 2,41 2,51 2,58 2,64 2,69 2,73 2,77
120 1,98 2,24 2,38 2,47 2,55 2,60 2,65 2,69 2,73
1,96 2,21 2,35 2,44 2,51 2,57 2,61 2,65 2,69

Tabla 13 - Totales y contrates en ensayo con delineamiento doble cruzado.

Estndar (P) Muestra (A) Total

FASE I

Dosis menor (suma de respuestas) P1I A1I -

Dosis mayor (suma de respuestas) P2I A2 -
Total PI AI PI + AI = FI
FASE II

Dosis menor (suma de respuestas) P1II A1II -

Dosis mayor (suma de respuestas)
Total
P2II
PII
A2II
AII
-
PII + AII = FII
8
Por preparacin (suma de P A y
respuestas)
Contraste lineal

FASE I P2I P1I = LPI A2I A1I = LAI LPI + LAI = LI

FASE II P2II P1II = LPII A2II A1II = LAII LPII + LAII = LII
TOTAL P2 + P1 = LP A2 + A1 = LA LP + LA = L

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 356 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 14 - Pruebas de validez en ensayo doble cruzado

Grados de
Fuente de variacin Suma de cuadrados reducida
libertad (gl)

L2P + L2A
Paralelismo 1 E
2n

PI2 + PII2 + AI2 + AII2

Fases X Preparaciones 1 K (Fases X Preparaciones)
n

L2I + L2II
Fases X Regresin 1 E
2n

Error I Diferencia Bloques - Paralelismo - (Fases X Preparaciones) - (Fases X Regresin)

B12 + B22 + ... + B2n2

Bloques (animales) bl 1 K
2

P2 + A2
Preparaciones 1 K
2n

(LP + LA)2
Regresin 1 E
N

F2I + F2II
Fases 1 K
2n

LPI2 + LPII2 + LAI2 + LAII2

Fases X Paralelismo 1 E Paralelismo (Fases X Regresin)
n

Error II Diferencia Total Bloques - Preparaciones - Regresin - Fases - (Fases X Paralelismo)

8 TOTAL N1 y2 K

K = (y)2/N
N = nmero total de respuestas
n = nmero total de rplicas por dosis incluidas las dos fases
bl = nmero de bloques (animales)
B = suma de las dos repuestas para cada bloque (animal)

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 357

Tabla 15 - Constante usada en la frmula para los lmites de confianza.

Dosis de cada preparacin (d) Nmero de muestras ensayadas (h -1) c
2 1 1
2 3/2
3 2
4 5/2
5 3
3 1 8/3
2 4
3 16/3
4 20/3
5 8
Tabla 16 - Probit correspondientes a porcentaje.
% 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
0 - 2,67 2,95 3,12 3,25 3,36 3,45 3,52 3,59 3,66
10 3,72 3,77 3,82 3,87 3,92 3,96 4,01 4,05 4,08 4,12
20 4,16 4,19 4,23 4,26 4,29 4,33 4,36 4,39 4,42 4,45
30 4,48 4,50 4,53 4,56 4,59 4,61 4,64 4,67 4,69 4,72
40 4,75 4,77 4,80 4,82 4,85 4,87 4,90 4,92 4,95 4,97
50 5,00 5,03 5,05 5,08 5,10 5,13 5,15 5,18 5,20 5,23
60 5,25 5,28 5,31 5,33 5,36 5,39 5,41 5,44 5,47 5,50
70 5,52 5,55 5,58 5,61 5,64 5,67 5,71 5,74 5,77 5,81
80 5,84 5,88 5,92 5,95 5,99 6,04 6,08 6,13 6,18 6,23
90 6,28 6,34 6,41 6,48 6,55 6,64 6,75 6,88 7,05 7,33
% 0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9
97 6,88 6,90 6,91 6,93 6,94 6,96 6,98 7,00 7,01 7,03
98 7,05 7,07 7,10 7,12 7,14 7,17 7,20 7,23 7,26 7,29
99 7,33 7,37 7,41 7,46 7,51 7,58 7,65 7,75 7,88 8,09

Tabla 17 - Coeficientes de ponderacin para probit (w).

Probit 0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9
1 0,001 0,001 0,001 0,002 0,002 0,003 0,005 0,006 0,008 0,011
2 0,015 0,019 0,025 0,031 0,040 0,050 0,062 0,076 0,092 0,110
3 0,131 0,154 0,180 0,208 0,238 0,269 0,302 0,336 0,370 0,405
4 0,439 0,471 0,503 0,532 0,558 0,581 0,601 0,616 0,627 0,634
5 0,637 0,634 0,627 0,616 0,601 0,581 0,558 0,532 0,503 0,471
6 0,439 0,405 0,370 0,336 0,302 0,269 0,238 0,208 0,180 0,154
7
8
0,131
0,015
0,110
0,011
0,092
0,008
0,076
0,006
0,062
0,005
0,050
0,003
0,040
0,002
0,031
0,002
0,025
0,001
0,019
0,001 8
Tabla 18 - Valores de 2 ( = 0,05).

gl 2 gl 2
1 3,84 9 16,92
2 5,99 10 18,31
3 7,81 11 19,67
4 9,49 12 21,03
5 11,07 13 22,36
6 12,59 14 23,69
7 14,07 15 25,00
8 15,51 20 31,41
25 37,65

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 358 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 19 - Matriz de respuestas en el ensayo de antibiticos por el delineamiento 5 x 1, despus de correccin.

Estndar Muestra
P1 P2 P3 P4 P5 A B C
y11 y21 y31 y41 y51 A31 B31 ...
y12 y22 y32 y42 y52 A32 B32 ...
y13 y23 y33 y43 y53 A33 B33 ...
y14 y24 y34 y44 y54 A34 B34 ...
Respostas y15 y25 y35 y45 y55 A35 B35 ...
y16 y26 y36 y46 y56 A36 B36 ...
y17 y27 y37 y47 y57 A37 B37 ...
y18 y28 y38 y48 y58 A38 B38 ...
y19 y29 y39 y49 y59 A39 B39 ...
Total y1. y2. y3. y4. y5. A3. B3.
ynz: n es la concentracin (P1 a P5) y z es la respuesta (de 1 a 9)
Anz: n es la concentracin mediana (P3) y z es la respuesta (de 1 a 9)

Tabla 20 - Tabla de Anlisis de varianza para el modelo de regresin lineal simples delineamiento 5 x 1.

y = b0 + b1x

(x x)(y y)
(x x)(y y) r=
b1 = b0 = y b1 x (x x)2 (y y)2
(x x)2 (N 1)
N1 N1

Fuente de
gl Suma de cuadrados Cuadrado promedio F calculado
variacin

Regresin 1 SQreg = b1xy + b0y (y)2/N QMreg = SQreg QMreg/ QMres

SQres
QMres = 2
Error residual N2 SQres = y b1xy b0y
2
N ---

8 Desvo lineal 3 SQdesv = SSres SQep SQdesv.

QMdesv. =
3
QMdesv/QMep

SQep
QMep = 5
Error puro (ep) N5 SQep = y2 (yi)2/k N ---

Total N1 SQreg + SQres ---

(yi)2 = (y11 + y12 + y13 + + y19)2 + + (y51 + y52 + y53 + + y59)2

(x x)2
N 1 = Sxx = desvo estndar de la variable (x)

(y y)2
N 1 = Syy = desvo estndar de la variable respuesta (e)

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 359

8.10 EJEMPLOS DE M= 1,3974 1,4089 = 0,0115

CLCULOS ESTADSTICOS De la ecuacin 6:
M = 0,0115 + log 1,3 = 0,1024
APLICADOS EN ENSAYOS
De la ecuacin 5:
BIOLGICOS R = antilog 0,1024 = 1,2660

8.10.1 EJEMPLO DE ENSAYO De la ecuacin 3:

DIRECTO
Ejemplo 1: ensayo directo con una muestra.

Ensayo de digital por el mtodo de la parada cardaca en De la ecuacin 2:

cobaya
La solucin del estndar fue usada en la concentracin
de 0,0658 UI/ml. Una diluicin equivalente de muestra
fue preparada a partir de la potencia supuesta de SA = 1,3
UI/100 mg.
Las cobayas fueron perfundidas aleatoriamente con solu-
cin estndar o muestra, registrndose el volumen justa-
mente necesario para producir la parada cardaca en cada
animal.
s2M = 0,003691 (1/14 + 1/10) = 0,000632
sM = 0,00632 = 0,0251
Para = 0,05 con 22 gl, t = 2,07 (Tabla 3)
De la ecuacin 7:
Rs
= antilog[0,1024 (2,07 x 0,0251)]
Ri
Rs = antilog[0,1024 + (2,07 x 0,0251)] = 1,43
Ri = antilog[0,1024 - (2,07 x 0,0251)] = 1,12

Las respuestas se encuentran en la Tabla 19. La estimativa media de la potencia de la muestra de digital
es 1,27 UI/100 mg. Los lmites de confianza (p = 0,05)
Clculo de la estimativa de potencia y lmites de para la verdadera potencia son 1,12 UI/100 mg y 1,43 UI/
confianza l00 mg.

De la ecuacin 1:

Tabla 21 - Ejemplo 1: Dosis eficaces para producir parada cardaca

Estndar P Muestra A

Dosis letal Log dosis letal Dosis letal Log dosis letal
mL/kg xp mL/kg xA
27,57 1,4404 34,02 1,5317
25,97 1,4145 21,90 1,3404
27,74 1,4431 28,33 1,4523

8
30,94 1,4905 24,87 1,3957
28,31 1,4519 27,56 1,4403
27,29 1,4360 24,73 1,3932
22,13 1,3450 21,67 1,3359
23,63 1,3735 21,30 1,3284
21,39 1,3302 29,10 1,4639
22,13 1,3450 25,54 1,4072
20,97 1,3216
29,23 1,4658
23,78 1,3762
21,40 1,3304
x 19,5641 14,0890
x 1,3974 1,4089
x2 27,3829 19,8879
s2 0,003331 0,004211
N 14 10

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 360 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

8.10.2 EJEMPLOS DE ENSAYOS Los pesos de las vesculas seminales se encuentran en la

Tabla 22.
INDIRETOS CUANTITATIVOS
Tabla 22 - Ejemplo 2: pesos de vesculas seminales (mg).
Ejemplo 2: ensayo con tres dosis, delineamiento com-
pletamente al azar. p1 p2 p3 a1 a2 a3
8,5 12,5 14,8 10,5 16,8 16,7
Ensayo de gonadotrofina corinica humana por el mtodo 10,4 13,1 14,1 10,5 14,3 16,9
del aumento de peso de vesculas seminales 11,4 8,3 14,9 9,1 14,9 18,8
11,6 13,1 13,8 9,9 12,3 16,7
Las dosis utilizadas del estndar fueron: pl = 1,0 UI/ml, 10,2 9,0 14,6 10,5 15,4 12,7
p2 = 2,0 UI/ml y p3 = 4,0 UI/ml. Dosis equivalentes de la 9,1 14,4 15,2 8,4 14,9 16,2
muestra fueron preparadas a partir de la potencia supuesta 9,5 11,7 12,3 10,1 12,8 17,3
SA = 3000 UI/mg. 7,7 11,72* 15,5 10,1 10,0 12,8
* Valor perdido sustituido por el promedio del tratamiento.
Los ratones fueron inyectados subcutneamente con 0,20
ml de la solucin respectiva, durante tres das consecuti-
vos, en un total de 0,6 ml/ratn.

Tabla 23 - Ejemplo 2: totales y contrastes.

Estndar P Muestra A
Dosis menor P1 = 78,40 A1 = 79,10
Dosis media P2 = 93,82 A2 = 111,10
Dosis mayor P3 = 115,20 A3 = 128,10
Preparacin P = 287,42 A = 318,60
Contraste lineal LP = 36,80 LA = 49,00
Contraste cuadrtico QP = 5,96 QA = 15,60
Resultados obtenidos con las frmulas de la Tabla 9.

Tabla 24 - Ejemplo 2: anlisis de varianza.

Suma de Cuadrado
Fuente de variacin gl F
cuadrados promedio
Preparaciones 1 20,26 20,26
Regresin 1 230,05 230,05 79,05 <0,01
Paralelismo 1 4,65 4,65 1,60 >0,05
Cuadrtico 1 0,97 0,97 0,33 >0,05
Diferencia de cuadrados 1 4,84 4,84 1,66 >0,05
Tratamientos 5 260,77 52,15
Error 41* 119,18 s2 = 2,91

8 TOTAL 47 379,95
*Retirado un grado de libertad por haber sido sustituido un valor perdido.
Las sumas de cuadrados fueron obtenidas emplendose las frmulas de las Tablas 9, 10 y 11.

[5,96 + (-15,6)]2
Cuadrtico = = 0,67 = Q
N = 48 96
Diferencia de = 5,96 +(-15,6) 0,97 = 4,84
2 2

n=8 cuadrticos 48

K = (y)2/N = 7 651,25

y2 = 8 031,21 Total = 8031,21 - 7651,25 = 379,95

287,422+318,62
Preparaciones = 7651,25 = 20,26
24 Error = 379,95 - 260,77 = 119,18
(36,8 + 49,0)2
Regresin = = 230,05 = E
32 Validez del ensayo
(36,82 + 49,02)
Paralelismo = 230,05 = 4,65
16 El ensayo cumple con las condiciones de validez:

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 361

a) regresin significativa, F calculada 79,05 es mayor que C = 8/3, da Tabela 15

el valor crtico de la Tabla 5 para = 0,0l, g11 = 1 y
g12 = 41;
b) desvo de paralelismo no significativo, F calculado 1,60
es menor que el valor crtico de la Tabla 4 para =
0,05, g11 = 1 y gl2 = 41y Ms = 0,2679
c) desvo de linealidad no significativo, F = 0,33 y 1,66.
Mi = 0,0381
Clculo de la estimativa de potencia y lmites de confianza
Utilizar frmulas 10 a 15. Logaritmo de los lmites de confianza de la potencia

I = log 2,0 = 0,3010 Ms = 0,2679 + 3,4771 = 3,7449

t = 2,02 com 41 gl da Tabela 3 Mi = 0,0381 + 3,4771 = 3,5151

36,8 + 49,0 Lmites de confianza de la potencia

b= = 8,9
2 x 0,301 x 8 x 2
Rs = anti log 3,7445 = 5552,64 UI/mg = anti log 3,5151 =
318,60 3274,16 UI/mg
yA = = 13,2
24
Ejemplo 3: ensayo con tres dosis, delineamiento blo-
287,42 ques al azar.
yP = = 11,97
24
Ensayo de antibitico usando placas de Petri
13,27 11,97
M = = 0,1460
8,90 Las dosis utilizadas del estndar fueron:

SA = 3 000 log SA = 3,4771 pl = 0,25 UI/ml, p2 = 0,50 UI/ml y p3 = 1,00 UI/ml.

M = 0,1460 + 3,4771 = 3,6231 Dosis equivalentes de la muestra fueron preparadas con

base en la potencia supuesta SA = 1 650 UI/mg.
R = anti log 3,6231 = 4 198,56 UI/mg
Los dimetros de los halos de inhibicin se encuentran en
230,05 la Tabla 25.
C= = 1,05
230,05 2,91(2,02)2

Tabla 25 - Ejemplo 3: dimetro de halos de inhibicin.

Placas Estndar P Muestra A Total

(Bloques) p1 p2 p3 a1 a2 a3 Bloque
1
2
3
17,0
14,9
15,0
20,4
19,7
18,6
24,0
22,7
22,0
17,4
14,9
15,0
20,7
19,3
18,0
24,4
22,2
22,3
123,9
113,7
110,9
8
4 14,6 18,3 22,4 14,8 19,0 22,2 111,3
5 14,7 18,0 22,3 14,4 17,8 22,6 109,8
6 14,4 19,1 23,3 14,5 19,3 23,0 113,6
7 14,9 19,0 22,5 15,0 19,4 22,4 113,2

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 362 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 26 - Ejemplo 3: totales y contrastes.

Estndar P Muestra A

Dosis menor P1 = 105,5 A1 = 106,0

Dosis media P2 = 133,1 A2 = 133,5
Dosis mayor P3 = 159,2 A3 = 159,1
Preparacin P = 397,8 A = 398,6
Contraste lineal LP = 53,7 LA = 53,1
Contraste cuadrtico QP = -1,5 QA = -1,9

Resultados obtenidos con las frmulas de la Tabla 9

Tabla 27 - Ejemplo 3: anlisis de varianza.

Suma de Cuadrado
Fuente de variacin gl F
cuadrados promedio
Preparaciones 1 0,0150 0,0150 0,09 >0,05
Regresin 1 407,3657 407,3657 2396 <0,01
Paralelismo 1 0,0129 0,0129 0,080 >0,05
Cuadrtico 1 0,1376 0,1376 0,81 >0,05
Diferencia de cuadrados 1 0,0019 0,0019 0,01 >0,05

Tratamientos 5 407,53 3020,25

Placas 6 22,18 3,70 21,8 < 0,01
Error 30 4,99 s2 = 0,17
Las sumas de cuadrados fueron obtenidas emplendose las frmulas de las Tablas 9, 10 y 11.

N = 42 a) regresin significativa, F calculada 2390 es mayor que

el valor crtico de la Tabla 5 para = 0,01, g11 = 1 y
n=7 gl2 = 30;
b) desvo de paralelismo no significativo, F calculado 0,08
K = ( y)2 / N = 15101,26 es menor que el valor crtico de la Tabla 4 para = 0,05,
gl 1 = 1 y gl2 = 30, y
y2 = 15 535,96 c) desvo de linealidad no significativo, F calculados =
397,82+398,62 0,81 y 0,01.
Preparaciones = 15101,2610 = 0,0
21
(53,7 + 53,1)2 Clculo de la estimativa de potencia y lmites de
Regresin = = 407,3657 = E

8
28 confianza
53,72 + 53,12
Paralelismo = 407,3657 = 0,0129
14 Utilizar frmulas 10 a 15.
[-1,5 + (-1,9)]2
Cuadrtico = = 0,1376 = Q
84 I= log l,00-log 0,50 = 0,301 t =
Diferencia de = -1,52 +(-1,9)2
cuadrticos 0,1376 = 0,0019
42 t = 2,04 con 30 gl de la Tabla 3.

53,7 + 53,1
b= = 12,67
28 x 0,301

398,6
yA = = 13,98
Total = 15 535,96 15 101,261 = 434,7 21

Error = 434,7 22,18 407,53 = 4,99 397,8

yP = = 18,94
21
Validez del ensayo
18,92 18,94
M = = 0,00315
El ensayo cumple con las condiciones de validez: 12,672

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 363

SA = 1650 UI/mg R = anti log 3,2004 = 1586 UI/mg

M = M+ log 1650 = 0,003157 + 3,217480 = 3,2206 Ejemplo 4: ensayo con dos dosis, delineamiento cuadra-
do latino.
R = anti log 3,2206 = 1662
Ensayo de oxitocina mtodo de la contraccin del tero
C = 407,3657/[407,3657 0,17 (2,04)2] = 1,0017 aislado de rata

c = 8/3, de la Tabla 15 Las dosis administradas del estndar fueron: pl = 0,2 ml y

p2 = 0,25 ml de solucin conteniendo 0,02 UI/ml.
Ms = 0,0235
Dosis equivalentes de la muestra fueron preparadas con
Mi = -0,0171 base en la potencia supuesta de 10 UI/ml diluida 1:500.

Logaritmo de los lmites de confianza de la potencia Tabla 28 - Ejemplo 4: orden de adicin de las dosis.

Ms = 0,0235 + 3,2175 = 3,2410 Columnas

Filas
1 2 3 4
Mi =-0,0 171 + 3,2175 = 3,2004
1 p1 p2 a1 a2
Lmites de confianza de la potencia 2 p2 p1 a2 a1
3 a1 a2 p1 p2
Rs = anti log 3,2410 = 1742 UI/mg
4 a2 a1 p2 p1

Tabla 29 - Ejemplo 4: registros de contracciones en mm.

Columnas Total
Filas
1 2 3 4 Filas
1 38 43 35 40 F1 = 156
2 38 30 44 38 F2 = 150
3 39 45 37 40 F3 = 161
4 45 38 45 37 F4 = 165
Total Columna C1 = 160 C2 = 156 C3 = 161 C4 = 155

Total de las dosis P1 = 142 P2 = 166 A1 = 150 A2 = 174

Tabla 30 - Ejemplo 4: totales y contrastes.

Estndar Muestra

Dosis menor
Dosis mayor
P1 = 142
P2 = 166
A1 = 150
A2 = 174 8
Preparacin P = 308 A = 324
Contraste lineal LP = 24 LA = 24

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 364 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 31 - Ejemplo 4: anlisis de varianza

Fuente de Soma dos Cuadrado
gl F
variacin cuadrados promedio
Preparacin 1 16,0 16,0 1,65 > 0,05
Regresin 1 144,0 144,0 14,89 < 0,01
Paralelismo 1 0,0 0,0 0,00 > 0,05
Tratamento 3 160,0
Filas 3 31,5 10,5 1,08 > 0,05
Colunas 3 6,5 2,2 0,23 > 0 05
Error 6 58,0 s2 = 9,67

Total 15 256,0

Las sumas de cuadrados fueron obtenidas emplendose las frmulas de las Tablas 8, 10 y 11.

N =16 324
yA = = 40,5
n =4 8

K = (y)2/N = 6322/16 = 24 964 308

yP = = 38,5
308 +3242 2
8
Preparaciones = 24964,0 = 16,0
8
(24 + 24)2 40,5 38,5
Regresin = = 144,0 = E M = = 0,0323
2 x4 x 2 61,91
242 + 242
Paralelismo = 144,0 = 0
2x4 SA = 10 log SA = l
1422 + 1662+ 1502 + 1742
Tratamientos = = 24964=160,0
4 M = 0,0323 + 1 = 1,0323
1562 + 1502+ 1612 + 1652
Filas = = 24964=31,5 R = anti log 1,0323 = 10,8 UI/mL = Potncia estimada
4
1602 + 1562+ 1612 + 1552 144,0
Columnas = = 24964=6,5 C= = 1,67
4 144,0 9,67 x 2,452
c = 1, da Tabla 15
Total= 25220 - 24964 = 256,0

Erro= 256,0 - 160,0 - 31,5 - 6,5 = 58,0

Ms = 0,1402
El anlisis no present diferencias significativas (p > 0,05)
entre filas y entre columnas. Mi = -0,0324
Logaritmo de los lmites de confianza de la potencia
Validez del ensayo
Ms= 0,1402 + 1= 1,1402

8
El ensayo cumple con las condiciones de validez: Mi= 0,0324 + 1=0,9676
a) regresin significativa, F calculada 14,9 es mayor que
el valor crtico de la Tabla 5 para = 0,01, gl1 = 1 y Lmites de confianza de la potencia
gl2 = 6; Rs= anti log 1,1402 = 13,81 UI/ml
b) desvo de paralelismo no significativo, F calculado 0,0
Ri= anti log 0,9676 = 9,28 UL/ml
es menor que el valor crtico de la Tabla 4 para =
0,05, g11 = 1 y gl2 = 6. Ejemplo 5: Ensayo doble cruzado
Clculo de la estimativa de potencia y lmites de
Ensayo de insulina en ratones
confianza
Utilizar frmulas 10 a 15 Las dosis utilizadas del estndar fueron p1=60m UL/ml y
p2=120 m UL/ml. Fueron preparadas dosis equivalentes de
I = log 0,25 - log 0,20 = 0,0969
las muestras de a1=60m UL/ml y a2=120 m UL/ml.
t = 2,45 com 6 gl da Tabela 3
24 + 24
b= = 61,9
0,0969 x 4 x 2

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 365

Los ratones fueron inyectados con 0,1 ml de la solucin respectiva para cada 10 g de peso medio, de acuerdo con a Tabla
6.

Las respuestas se encuentran en la Tabla 30.

Tabla 32 - Ejemplo 5: concentracin de glucosa sangunea (mg/100 ml), cuarenta minutos despus de inyeccin.
Grupo 1 Grupo 2 Grupo 3 Grupo 4
p1 a2 total p2 a1 total a1 p2 total a2 p1 Total
37,1 16,6 53,7 32,4 32,4 80,8 36,8 17,0 53,8 30,9 52,1 83,0
35,2 40,1 75,3 35,2 35,2 103,0 53,2 24,9 78,1 27,8 59,4 87,2
43,1 33,9 77,0 35,3 35,3 108,4 71,2 58,2 129,4 35,4 39,1 74,5
41,3 16,2 57,5 32,9 32,9 78,1 37,1 24,8 61,9 49,8 79,0 128,8
54,2 33,2 87,4 31,9 31,9 65,0 45,9 22,7 68,6 28,2 37,3 65,5
41,4 13,1 54,4 51,2 51,2 113,6 82,2 42,7 124,9 49,9 51,1 101,0
48,6 32,7 81,3 38,2 38,2 114,4 64,8 33,9 98,7 28,3 59,5 87,8
57,8 50,4 108,2 39,7 39,7 89,8 49,1 37,6 86,7 39,6 55,8 95,4
71,1 47,3 118,4 37,0 37,0 110,8 44,1 10,4 54,5 32,2 40,6 72,8
60,8 26,1 86,9 38,9 38,9 103,5 64,7 34,7 99,4 55,1 68,2 123,3
78,2 50,9 129,1 42,6 42,6 97,2 88,0 61,6 149,6 40,6 61,4 102,0
76,1 54,4 130,5 30,4 30,4 80,0 90,1 60,3 150,4 43,5 52,8 96,3

Tabla 33 - Ejemplo 5: totales y contrastes.

Estndar P Muestra A Total

Fase I
Dosis menor P1l = 644,9 A1l = 727,2
Dosis mayor P2l = 445,7 A2l = 461,3
Total Pl = 1090,6 Al =1188,5 Fl = 2279,1
Fase II
Dosis menor P1ll = 656,3 A1ll = 704,9
Dosis mayor P2ll = 428,8 A2ll = 414,9
Total Pll = 1085,1 All =1119,8 Fll = 2204,9
Preparacin Contraste P = 2175,7 A = 2308,3 y = 4484,0
Lineal
Fase I LPl = -199,2 LAl = -256,9 Ll = -465,1
Fase II LPll = -227,5 LAll = -290,0 Lll =-517,5
Total Lp =-426,7
Resultados obtenidos con las frmulas de la Tabla 13
LA = -555,9 L = -982,6
8
Tabla 34 - Ejemplo 5: anlisis de varianza.
Fuente de variacin gl Suma de cuadrados Cuadrado promedio F
Paralelismo 1 173,88 173,88 0,53 > 0,05
Fases Preparaciones 1 41,61 41,61 0,13 > 0,05
Fases Regresses 1 28,60 28,60 0,09 > 0,05
Error I 44 14 545,64 330,58
Blocos 47 14 789,73 314,67
Preparaciones 1 183,15 183,15 3,01 > 0,05
Regresin 1 10 057,32 10 057,32 165,52 < 0,01
Fases 1 57,35 57,35 0,94 > 0,05
Fases Paralelismo 1 0,19 0,19 0,00 > 0,05
Error II 44 2 673,39 60,76
TOTAL 95 27 761,13
Las sumas de cuadrados fueron obtenidas empleando las frmulas de las Tablas 13 y 14.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 366 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

N = 96 48,09 45,33
M = = 0,0406
n = 24 -68,01
b1 = 48
SA = 27,4 log SA = 1,4377
K = (y)2/N = 4 484,02/96 = 209 440,17
M = - 0,0406 + 1,4377 = 1,3791
y2 = 237 201,30
Total = 237 201,30 209 440,17 = 27 761 Potncia estimada: R = antilog 1,3971 = 24,95 UI/mL
448459,8
Bloques = 209440,17 = 14789,73 10057,32
2
C= = 1,025
2175,72+2308,32 [10057,32 60,76(2,01)2]
Preparaciones = 209440,17 = 183,15
48
2279,12+2204,92 c = 1 da Tabla 15
Fase = 209440,17 = 57,35
48
[(-426,7) + (-555,9)]2
Regresin = = 10057,32 = E
96
(-426,7)2 + (-555,9)2
Paralelismo = = 10057,32 = 17
48 Ms = 0,0064
(-465,1)2 + (-517,5)2 Mi = - 0,0064
Fase x Regresin = = 10057,32 = 28
48
Logaritmo de los lmites de confianza

Ms = 0,0064+1,4377 = 1,4441
Mi. = -0,0896+1,4377 = 1,3481

Lmites de confianza de la potencia

Rs = anti log 1,4441 = 27,80 UI/ml

Error I = 14 789,73 173,88 41,61 28,60 = 14 545,64 R = anti log 1,3481 = 22,29 UI/ml

Error II = 27 761,13 14 789,73 183,15 10 057,32 Ejemplo 6: medias mviles

53,35 0,19 = 2 673,39
Ensayo de heparina por el mtodo de inhibicin de la coa-
Validez del ensayo gulacin de plasma ovino citratado

El ensayo cumple las condiciones de validez:
a) regresin significativa, F calculada 165,52 es mayor
que el valor crtico de la Tabla 5, para = 0,01, g11 =
1 y g12 = 44;
b) paralelismo no significativo, F calculado 0,53 es menor
que el valor crtico de la Tabla 4, para = 0,05, g11 =
Las dosis utilizadas del estndar, en ml, fueron: = p1 = 0,78;
p2 = 0,76; p3 = 0,74; p4 = 0,72; p5 = 0,70 y p6 = 0,68. Dosis
equivalentes (a) de la muestra fueron preparadas a partir de
la potencia supuesta SA = 140,6 UI/mg.
El ensayo fue desarrollado conforme est descrito en el
mtodo de evaluacin de heparina en ese volumen.

8
1 y gl2 = 44; y
c) ninguna de las tres interacciones fue significativa los Fueron realizados tres ensayos. A ttulo de ejemplo del cl-
tres valores de F calculados: 0,13, 0,09 y 0,00 fueron culo de M, solamente se desarrollar el ensayo No. 1.
menores que el valor crtico de la Tabla 4 para = 0,05,
g11 = 1 y gl2 = 44. Los grados de coagulacin se encuentran en la Tabla 35.

Clculo de la estimativa de potencia y lmites de confianza Tabla 35 - Ejemplo 6: grados de coagulacin = y.

Utilizar frmulas 10 a 15. Estndar P Muestra A

Tubo
p (mL) y A (mL) Y
I= log 120 log 60 = 2,0792 l,77820,301
t = 2,01 con 44 gl de la Tabla 3 1 0,78 0,00 0,78 0,00
(-426,7) + (-555,9) 2 0,76 0,00 0,76 0,25
b= = 68,01 3 0,74 0,50 0,74 0,75
24 x 2 x 0,301
4 0,72 0,75 0,72 1,00
2175,7 5 0,70 1,00 0,70 1,00
yA = = 48,09
2 x 24 6 0,69 1,00 0,68 1,00

2175,7
yP = = 45,33
2 x 24

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 367

Clculo de la estimativa de potencia y lmites de confianza R = anti log M = 149,0 UI/mg

Utilizar frmulas 27, 28 y 40 a 45. = (2,1392+2,1995+2,1805)/3 = 2,1731 = antilog

M = 149,0 UI/mg
xiP = 0,8691
yiP = 0,8572 Calcular la varianza del error:
x(i + 1) = 0,8691 y(i + 1) = 0,750
s2 = {14,1686 42,4999/3}/2
0,8575 0,8691
xP = 0,8691 + (0,4171 0,5) = 0,8661
0,417 0,750 s2 = 0,001

xiA = 0,8807 yiA = 0,333 s = 0,001= 0,0316

8691 0,8807 n = 3
xA = 0,8807 + (0,333 0,5) = 0,8749
0,333 0,667
t = 4,3 (Tabla 3 gl =2)
x(i + 1)A = 0,8691 y(i + 1)A = 0,667
Calcular el intervalo de confianza:
SA = 140,6 UI/mg
2x0,0316x4,3
L= = 0,1569
M1 = 0,8661 0,8749 + log 140,6 = 2,1392 1,7321

Suponiendo que otros dos ensayos realizados con la misma L/2 = 0,0784
muestra dan las estimaciones:
Ms = 2,1731 + 0,0784 = 2,2515
M2 = 2,1995 y M3 = 2,1805, calcular M Mi = 2,1731 0,0784 = 2,0947
Rs = 178,4
M = (2,1392 + 2,1995 + 2,1805)/3 = 2,1731 Ri = 124,4

Tabla 36 - Ejemplo 6: promedios asociados.

Estndar P Muestra A

Tubo Log dosis Promedios Promedios grado log dose Promedios Promedios grado
(mL 10) log dosis coagulacin (mL 10) log dosis coagulacin
xP xiP yiP xA xiA yiA
1 0,8921 - - 0,8921 - -
2 0,8808 0,8807 0,167 0,8808 0,8807 0,333
3 0,8692 0,8491 0,417 0,8692 0,8691 0,667
4 0,8572 0,8572 0,750 0,8573 0,8572 0,917
5 0,8450 0,8450 0,917 0,8451 0,8450 1,000
6 - - - 0,8325 - -

Ejemplo 7: ensayo microbiolgico con 5 dosis del estn-

dar y una dosis de la muestra (5 x 1)
Las dosis estndar utilizadas fueron: 0,15 UI/ml; 0,30 UI/
ml; 0,60 UI/ml; 1,20 UI/ml; 2,40 UI/ml.
8
Ensayo de antibitico usando placas de Petri- Dosificacin Dosis equivalentes de la muestra fueron preparadas con
microbiolgica de Bencilpenicilina Benzatina en polvo base en la potencia supuesta
para inyectable.
SA de 600.000 UI/frasco

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 368 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 37 - Ejemplo 7: lecturas de los halos de inhibicin.

P1 P3 P2 P3 P4 P3 P5 P3
13,87 19,88 16,24 19,54 23,47 19,21 27,41 19,32
12,95 20,60 16,35 19,85 23,04 18,97 27,62 19,61
13,08 20,43 16,88 19,86 23,19 19,39 26,67 19,72
Dimetro de 12,86 19,85 15,34 18,49 23,04 19,68 27,50 19,65
los halos de
inhibicin 13,24 20,07 15,98 19,06 22,65 19,14 27,41 19,27
13,08 20,06 15,50 19,20 23,01 19,65 26,53 20,04
12,88 19,75 16,26 19,96 23,99 19,81 27,30 19,25
13,39 20,30 16,70 19,70 23,85 19,72 27,49 19,53
13,31 20,30 16,70 19,95 23,82 19,55 27,27 19,90
Promedio 13,184 20,138 16,217 19,512 23,340 19,458 27,244 19,588
Promedio de P3 (36 lecturas): 19,674

Tabla 38 - Ejemplo 7: lecturas de los halos de inhibicin despus de correccin.

P1 P2 P3 P4 P5
x1 = 0,82391 x2 = 0,52288 x3 = 0,22185 x4 = 0,079181 x5 = 0,380211
13,406 16,402 19,674 23,686 27,496
12,486 16,512 19,674 23,256 27,706
Dimetro de 12,616 17,042 19,674 23,406 26,756
los halos de 12,396 15,502 19,674 23,256 27,586
inhibicin
12,776 16,142 19,674 22,866 27,496
12,616 15,662 19,674 23,226 26,616
12,416 16,422 19,674 24,206 27,386
12,926 16,862 19,674 24,066 27,576
12,846 16,862 19,674 24,036 27,356
(yi)2 13106,59 21729,12 31352,37 44945,7 60503,21
x = concentracin del antibitico en logaritmo

Totais (x x)(y y) = 98,61069

N = 45 (x x)2 = 8,155715 (y y)2 = 1.199,081

x = -9,983205
(y y)2
8
y = 896,936 (x x)2
= 0,4305 = 5,2203
y2 = 19.076,73 N1 N1
(yi2)/9 = 19.070,78
xy = -100,374 b0 = 22,61426 b1 = 12,09086

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 369

Tabla 39 - Ejemplo 7: anlisis de varianza.

b1 = 12,09 b0 = 22,61 r = 0,997

Fuente de variacin gl Suma de cuadrados Cuadrado promedio F calc.

Regresin 1 1.192,3 1192,3 5691,5
Error residual 43 6,80 0,2 ---
Desvio de linearidade 3 0,85 0,3 3
Error puro 40 5,95 0,1 ---
Total 44 1.199,1 ---

Tabla 40 - Ejemplo 7: lectura de las muestras.

A1 P3 A2 P3 A3 P3
19,66 19,78 19,57 18,73 18,69 18,57
19,49 19,45 18,91 19,12 19,04 18,89
19,94 19,50 19,02 19,70 19,28 19,12
19,38 19,68 19,41 19,55 19,38 19,14
19,88 19,90 19,32 19,38 19,22 19,40
19,88 19,91 19,55 19,74 19,22 19,10
19,74 19,45 19,41 19,33 20,03 19,45
19,15 19,04 19,47 19,68 19,33 19,45
19,45 19,32 19,48 19,46 19,45 19,45
yi = 31.176,96
2
yi = 30.986,56
2
yi = 30.324,74
2
yi = 30.516,6
2
yi = 30.150,85
2
yi = 29.780,40
2

Tabla 41 - Tabla 41 Ejemplo 7: diferencias en las respuestas comparadas o X = (yA yP) / b1 (frmula 16).
X1 X2 X3 X4
- 0,0099256 0,0694789 0,0099256 - 0,0198511
0,0033085 - 0,0173697 0,0124069 - 0,0256410
0,0363937 - 0,0562448 0,0132341 0,0330852
- 0,0248139 - 0,0115798 0,0198511 - 0,0281224
- 0,0016543 - 0,0049628 - 0,0148883 0,0066170
- 0,0024814 - 0,0157155 0,0099256 0,0016543
0,0239868 0,0066170 0,0479735 - 0,0281224
0,0090984 - 0,0173697 - 0,0099256 0,0645161
0,0107527 0,0016543 0,0000000 - 0,0264682
Tx = 0,044665
Tx2/9 = 0,000222
Tx = 0,04549
Tx2/9 = 0,00023
Tx = 0,088503
Tx2/9 = 0,00087
Tx = 0,02233
Tx2/9 = 0,0000554 8
X2 = 0,024058 (Tx 2/9) = 0,001377

t = 2,042 k = 9 f = 9 n = 32

0,024058 0,001377
SM2 = = 0,00071 (frmula 19)
32

s = 0,02662

L = 0,01812 (frmula 20)

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 370 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla 42 - Ejemplo 7: logaritmo de la razn de potencia y lmites de confianza para las muestras A1, A2, A3 y A4.

A1 A2 A3 A4
Logaritmo de la razn
0,004963 - 0,00505 0,009833 - 0,00248
de potencia (log)
MAS e MAI 0,02308 - 0,01316 0,01307 0,01564 0,01564 0,02795 0,01564 - 0,02060

Clculo de la estimativa de potencia y lmites de MAi (AI ) L = 0,004963 0,01812 = -0,01316

confianza para muestra AI :
Logaritmo de los lmites de confianza de la potencia
Utilizando las frmula 17 y 20 a 25
MAS (AI) = 0,02308 + log 600.000 = 5,80123
M(AI) = XI/9 = 0,004963
MAi (A1) = -0,01316 + log 600.000 = 5,76499
M = M + log 600.000 = 5,78311
Lmites de confianza de la potencia
R = antilog 5,78311 = 606.895,97 UI/frasco
Rs = antilog 5,80123 = 632.746,9 UI/frasco
Mas (AI) + L = 0,004963 + 0,01812 = 0,02308
Ri = antilog 5,76499 = 582.091,5 UI/frasco

Tabla 43 - Ejemplo 7: coeficiente de Variacin (frmula 18).

A1 A2 A3 A4
Desvo estndar (s) 0,269 0,232 0,356 0,229
Promedio 19,62 19,35 19,24 19,26
Coeficiente de variacin (CV) 1,37 1,20 1,85 1,19

Figura 1 - Ejemplo 7: Grfico de la curva de regresin

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 371

8.10.3 EJEMPLO DE ENSAYO Dosis equivalentes de la muestra (a1 = 18 mUI/ratn y a2

= 30 mUI/ratn) fueron preparadas con base en la potencia
INDIRECTO TODO O NADA supuesta SA=40 UI/ml.

Ejemplo 8: Ensayo dicotmico de dos dosis, mtodo de Los ratones fueron inyectadas subcutneamente con 0,25
probit simplificado ml/ratn de la respectiva solucin. Previamente fueron di-
vididos cuatro grupos al azar, que recibieron respectiva-
Ensayo de insulina por el mtodo de convulsin en mente,
ratones

Las dosis estndar utilizadas fueron p1= 18 mUI/ratn y

p2= 30 mUI/ratn.

Tabla 44 - Ejemplo 8: Respuestas (% de ratones en convulsin).

Estndar P Muestra A
p1 p2 a1 a2
Nmero de ratones inyectados (n) 30 28 28 24
Nmero de ratones en convulsin 9 17 11 18
Porcentaje de respuestas (%) 30,0 60,7 39,3 75,0

(P + A)2 20,152 Validez del ensayo

K= = = 101,5056
k 4
El ensayo cumple las condiciones de valores:
9,752+10,42
Preparaciones = 101,5056 = 0,1056
2 a) regresin significativa, F calculada 12,15 es mayor que
el valor crtico de la Tabla 5, para p = 0,01, gl1 = 1 y
(0,79 + 0,94)2 gl2 = infinito; y
Regresin = = 0,7482 = E
4 b) desvo de paralelismo no significativo, F calculado 0,09
es menor que el valor crtico de la Tabla 4, para p =
0,792 + 0,942 0,05; gl1 = 1 y gl2 = infinito.
Paralelismo = = 0,748 = 0,0056
2

Tabla 45 - Ejemplo 8: Transformacin en probitos, totales y contrastes.

Estndar P Muestra A
p1 p2 a1 a2
Probito (Tabla 16) P1 = 4,48 P2 = 5,27 A1 = 4,73 A2 = 5,67
Ponderacin w (Tabla 17) 0,576 0,619 0,540 0,540
Preparacin
Contraste lineal
P = 9,75
LP = 0,79
A = 10,4
LA = 0,94
y = 20,15
L = 1,73
8
Resultados obtenidos con las frmulas de la Tabla 8.

Tabla 46 - Ejemplo 8: Anlisis de la varianza.

Suma de Cuadrado
Fuente de variacin gl F p
cuadrados promedio
Preparacin 1 0,1056 0,1056 1,71 > 0,05
Regresin 1 0,7482 0,7482 12,15 < 0,01
Paralelismo 1 0,0056 0,0056 0,09 > 0,05
Error Infinito s2 = 0,0616
Las sumas de cuadrados fueron obtenidas emplendose las frmulas de la Tabla 10, tomando n = 1.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 372 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Clculo de la estimativa de potencia y lmites de Ms

= 0,1227 0,1658
confianza Mi

Utilizar frmulas 10 a 15. Ms=0,2885

I= log 30 log 18 = 1,4771 l,2553= 0,2219 Mi = 0,0431

t = 1,96 con gl=infinito y p=0,05 de (la Tabla 3) Logaritmo de los lmites de confianza

0,79 + 0,94 Ms = 0,2885+1,6021 = 1,8906

b= = 3,9318
2(0,2219) Mi. = 0,0431+1,6021 = 1,5590

9,75 Lmites de confianza de la potencia

yP = = 4,87
2
Rs = 77,3 UI/ml
10,4 Ri = 36,22 UI/ml
yA = = 4,87
2
Usando el mtodo completo de anlisis de probitos, se ob-
5,20 4,87 tuvo una estimativa de potencia de 48,48 con lmites de
M = = 0,0839
3,9318 35,9 y 75,92 UI/ ml.

SA = 40,0 8.10.4 EJEMPLO DE

log SA = 1,6021 COMBINACIN DE
ESTIMACIN DE POTENCIA
M = 0,0839 + 1,6021 = 1,6860
Ejemplo 9: Combinacin de estimacin de potencia
RA = antilog 1,6860 = 48,53 UI/ml= Potencia estimada
0,7482 Combinacin de ensayos de corticotrofina por el mtodo
C= = 1,4625
[0,7482 0,0616(1,96)2] de deplecin de cido ascrbico supra-renal en ratas hipo-
fisectomizadas.
c = 1 (da Tabla 15)
Tres ensayos independientes de la misma muestra fueron
realizados conforme procedimiento descrito en Combina-
cin de Estimacin de Potencia (8.8). Los resultados de los
ensayos se encuentran en la Tabla 47.

Tabla 47 - Ejemplo 9: Datos para combinacin de potencias.

Ensayo 1 Ensayo 2 Ensayo 3
M 1,24797 1,25164 1,42193

8 L
t2
gl
0,29097
4,1209
34
0,90082
4,1209
33
0,11555
4,2025
27
Clculo de la potencia media ponderada Como 2 calculado es menor que el valor crtico, no se tie-
ne elementos para sospechar de heterogeneidad.
MW 2058,6174
M = = = 13966
W 1474,0148 Clculo de los lmites de confianza

R = anti log 1,3966 = 24,9 S = 1/W = 1/1474,0198 = 0,0260

Prueba de homogeneidad de los log de las estimacin de Ms

potencia. Mi = M 1,98 x 0,0260
Ms = 1,4226
x2M = W(M M)2 = 5,5 Mi = 1,3700
Rs = 26,5
x2M = 2p = 0,05 (Tabla 18) = 5,9 Ri = 23,5

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


9 RADIOFRMACOS
GLOSARIO
Actividad especfica (o radioactividad especfica):
Radioactividad del radionclido relacionada a la masa uni-
taria del elemento o compuesto. Es comnmente referida
a la actividad de 1 g de la sustancia especificada en la mo-
nografa:
en que:
S = radioactividad especfica;
N = nmero de Avogadro;
W = peso atmico;
M = peso molecular.
Componentes no radioactivos para marcacin: prepara-
cin o conjunto de reactivos que deben ser reconstituidos
o combinados con un radionclido para la sntesis del ra-
diofrmaco final, antes de la administracin al paciente.
Pueden venir en la forma de reactivos liofilizados u otras
sustancias y son ms comnmente conocidos como kits
para marcacin.
Concentracin radioactiva: la concentracin radioactiva
de la solucin es la radioactividad del radionclido conte-
nida en el volumen unitario y generalmente referida como
actividad por 1 ml. Como ocurre con todas las especifica-
ciones envolviendo radionclidos, es necesario declarar la
fecha y, en el caso de radionclidos con media vida corta,
la hora en la cual la concentracin radioactiva fue deter-
minada.
Acarreador: istopo estable del radionclido en cues-
tin, adicionado a la preparacin radioactiva en la forma
qumica idntica a aquella en la cual el radionclido est
presente.
Decaimiento radiactivo: los ncleos de los elementos
radioactivos radionclidos sufren prdida de partcu-
las y/o de energa segn sus caractersticas propias. Esas
caractersticas incluyen la velocidad de decaimiento y el
tipo de emisin. La emisin de partculas por los ncleos
determina modificacin de su nmero de masa. Cuando la
partcula emitida es portadora de carga positiva o negativa
el ncleo sufre cambio de nmero atmico y, consecuente-
mente, el nmero de electrones en la electrosfera del tomo
que le corresponde, determinando cambio en las propieda-
des qumicas del tomo. La radioactividad decae en razn
exponencial, que es caracterstica para cada radionclido.
La actividad en cualquier tiempo puede ser calculada por
la expresin
A = A0e-t
en que:
A = actividad en el tiempo t;
A0 = actividad inicial;
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 373
Neutrino: partcula de difcil deteccin, con masa insigni-
ficante, neutra, sin embargo dotada de energa, = constan-
te de decaimiento tambin denominada de constante de
desintegracin o constante de transformacin, i.e., la frac-
cin de tomos radiactivos que sufren transformaciones en
la unidad de tiempo, siempre que este tiempo sea corto en
comparacin con el media vida fsica;
t = tiempo transcurrido;
e = base de logaritmos neperianos.
Desintegracin: transformacin en la cual el ncleo emite
una o ms partculas.
Generador: sistema que incorpora un radionclido padre
que, por decaimiento, produce un radionclido hijo que
puede ser retirado por elucin o por algn otro mtodo para
ser utilizado como parte integrante de un radiofrmaco.
Istopos: nucledos de un mismo elemento qumico cuyos
ncleos tienen el mismo nmero atmico y masa atmica
diferente.
Material de Partida: todos los constituyentes que son uti-
lizados en la preparacin de radiofrmacos.
Media vida biolgica: tiempo necesario para que un orga-
nismo retire, por eliminacin biolgica, mitad de la canti-
dad de una sustancia administrada.
Media vida efectiva: tiempo necesario para que un ra-
dionclido en un organismo disminuya su actividad por
la mitad como un resultado combinado de la eliminacin
biolgica y del decaimiento radioactivo. La media vida
efectiva es importante para el clculo de la dosis ptima
del radiofrmaco a ser administrada y en el monitoreo de
la cantidad de exposicin a la radiacin.
8
Puede ser calculado a partir de la frmula:
T1/2p x T1/2b
T1/2e =
T1/2p + T1/2b
en que:
T1/2e = tiempo de media vida efectiva del radiofrmaco;
T1/2p = tiempo de media vida fsica del radionclido;
T1/2b = tiempo de media vida biolgica del radiofrmaco.
Media vida fsica: tiempo necesario que para mitad de una
poblacin de tomos de un radionclido decaiga para otra
forma nuclear. La media vida est relacionada a la constan-
te de decaimiento (1) por la ecuacin:
0,693
T1/2 =
 374 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Neutrino: partcula de difcil deteco, com massa des-
prezvel, neutra, porm dotada de energia, emitida simul-
tneamente a la emisin de partcula beta. La suma de las
energas de la partcula beta y del neutrino corresponde a
valor cuantificado para cada proceso de desintegracin beta.
Nucledos: especies de tomos caracterizados por la consti-
tucin de su ncleo, en particular por su nmero de protones
y neutrones y, tambin, por su estado de energa nuclear.
Precursores o materia prima para sntesis: generalmen-
te, esos precursores no son producidos en larga escala.
Algunos precursores son sintetizados por el laboratorio
de produccin de radiofrmacos, otros son suministrados
por laboratorios productores especializados. Pruebas para
identidad, para pureza qumica y ensayo deben ser realiza-
dos por medio de procedimientos validados. Cuando lotes
de precursores son aceptados utilizndose los certificados
de anlisis, evidencias adecuadas deben ser establecidas
para demostrar la confiabilidad del anlisis del proveedor
y por lo menos una prueba de identidad debe ser realizada.
Se recomienda probar materiales precursores antes de su
uso en la rutina de produccin del radiofrmaco, para ga-
rantizar que bajo condiciones de produccin especificadas,
el precursor posibilita la preparacin del radiofrmaco en
la cantidad y calidad especificada.
Pureza Radionuclidica: es la razn, expresada en por-
centaje, de la radioactividad del radionclido con relacin
a la radioactividad total del radiofrmaco. Las impurezas
radionuclidicas relevantes estn listadas, con sus lmites,
en las monografas individuales.
Radioactividad Especfica: la radioactividad de un radio-
nclido por unidad de masa del elemento o del producto
qumico de inters.
Radioactividad Total: la radioactividad del nucledo por
unidad de masa del elemento o del producto qumico de
inters.
Radioistopos: istopos radioactivos o radionuclidos.
Son istopos inestables los cuales sufren decaimiento ra-
dioactivo y se transmutan en nuevo elemento. Son tomos
que se desintegran por emisin de radiacin corpuscular
(partcula) o electromagntica. Todo radioistopo est ca-
racterizado por su tiempo de media vida (T1/2), expresado
en unidades de tiempo (segundos, minutos, horas, das y
9
aos) y por la naturaleza y energa de su radiacin. La ener-
ga puede ser expresada en electronvoltios (eV), kilo-elec-
tronvoltios (keV) o mega-electronvoltios (MeV).
Pureza qumica: puede ser entendida como la razn expre-
sada en porcentaje de la masa de la molcula del compues-
to de inters en su estado qumico indicado, con relacin
a la masa total de la preparacin. Las impurezas qumicas
relevantes estn listadas con sus lmites en las monografas
individuales.
Pureza Radioqumica: puede ser entendida como la razn
expresada en porcentaje de radioactividad del radionclido
de inters en su estado qumico indicado, con relacin a la
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
radioactividad total de la preparacin radio farmacutica.
Las impurezas radioqumicas relevantes estn listadas, con
sus lmites, en las monografas individuales.
INTRODUCCIN
Radiofrmacos son preparaciones farmacuticas con finali-
dad diagnstica o teraputica que, cuando estn listas para
el uso , contienen uno o ms radionuclidos.
Los radiofrmacos comprenden, tambin, los componen-
tes no-radioactivos para marcacin y los radionuclidos,
incluyendo los componentes extrados de los generadores
de radionuclidos.
La produccin de los radiofrmacos deber atender los re-
quisitos de las Buenas Prcticas de Fabricacin (BPF) de
Radiofrmacos, adems de atender a las especificaciones
farmacopeicas. Los radiofrmacos tienen su produccin,
suministro, almacenamiento, uso y volteo reglamentados
por la legislacin nacional vigente.
El radiofrmaco contiene el radionuclidos en una de las
siguientes formas:
como un elemento atmico o molecular;
como un ion;
incluido o ligado las molculas orgnicas, por proceso
de quelacin o por conexin covalente.
Las formas de obtencin de radionuclidos, usados en la
produccin de radiofrmacos son:
bombardeo de neutrones en reactores nucleares;
bombardeo con partculas cargadas en aceleradores de
partculas;
fisin nuclear de nucledos pesados despus de bom-
bardeo con neutrones o con partculas;
sistemas generadores de radionuclidos que envuelven
la separacin fsica o qumica de un radionclido hijo,
de media vida ms corta que el radionclido padre.
ALMACENAMIENTO
Los radiofrmacos deben ser mantenidos en recipientes
vedados y en local suficientemente protegido para evitar
irradiacin del personal por emisiones primarias o secun-
darias, de acuerdo con regulaciones nacionales e interna-
cionales sobre manipulacin de sustancias radioactivas.
ESTABILIDAD
Las preparaciones de radiofrmacos tienden a ser menos es-
tables que sus correspondientes inactivos, ocurriendo su des-
composicin por radilisis y, por eso, deben ser utilizadas en
corto plazo. Los efectos de la radiacin primaria incluyen la
desintegracin del tomo radioactivo y la descomposicin
de molculas cuando la fraccin de energa de partcula emi-
tida o del rayo gama es adsorbida por esas molculas.
La estabilidad de los radiofrmacos depende de muchos
factores, incluyendo la energa y la naturaleza de la ra-

diacin, la actividad especfica y el tiempo de almacena-
miento. Los efectos de radiacin primaria pueden inducir
efectos secundarios debido a la formacin de especies ex-
citadas, que pueden degradar otras molculas, por ejemplo,
las de los solventes o conservantes.
Tambin, debe ser considerada la susceptibilidad a la oxi-
dacin y reduccin de pequea cantidad de especies qu-
micas presentes. La exclusin inicial de todos los trazos de
agentes de oxidacin y reduccin ni siempre es suficiente,
porque tales agentes pueden formarse continuamente por
efectos de la radiacin. Durante el almacenamiento, reci-
pientes y soluciones pueden oscurecer debido a la radioac-
tividad emitida. Tal hecho no indica, necesariamente, el
deterioro de la preparacin.
Conservantes
Preparaciones radiofarmacuticas inyectables son general-
mente envasadas en recipientes multidosis. Los conservan-
tes antimicrobianos pueden sufrir descomposicin por la
influencia de la radiacin y eso restringe su uso para algu-
nos radiofrmacos inyectables. Por tanto, la exigencia de
que preparaciones inyectables contengan un conservante
antimicrobiano adecuado, en concentracin adecuada, no
se aplica necesariamente, a las preparaciones radiofarma-
cuticas.
Las preparaciones radiofarmacuticas inyectables con pe-
rodo de vida til mayor que un da y que no contengan
un conservante antimicrobiano deben ser suministradas en
frascos de dosis nica. Si, sin embargo, la preparacin es
suministrada en un recipiente multidosis, debe ser utiliza-
da dentro de 24 horas despus de la retirada de la primera
dosis, de forma asptica.
Las preparaciones radiofarmacuticas inyectables para las
cuales el perodo de vida til es mayor que un da y que
contengan conservante antimicrobiano pueden ser sumi-
nistradas en recipientes multidosis. Despus de la retirada
de la primera dosis, de forma asptica, el recipiente debe
ser almacenado en temperatura en la banda de 2 C a 8 C
y los contenidos utilizados en el plazo de 7 das.
DILUICIN
En el caso necesario de hacer diluicin es preferible utili-
zar vehculos de misma composicin que los presentes en
la preparacin. En caso de radiofrmacos inyectables de-
ben ser utilizados soluciones y materiales estriles, libres
de partculas y de trazos de materia orgnica.
La cantidad de material radioactivo presente en la prepara-
cin es frecuentemente muy pequea para ser medida por
los mtodos qumicos o fsicos disponibles.
Considerando la frmula
1,16 x 1020 Bq g-1
Smax =
W x T1/2
En que:
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 375
Smax = actividad especfica mnima
W= peso atmico
T = tiempo de media vida en horas
Se verifica que, por ejemplo, para solucin de pertecneta-
to de sodio (99mTc) con la concentracin radioactiva de
37 MBq (1 mCi) por ml, la concentracin del pertecnetato
puede ser tan baja como 3 x 10-10 g ml-1.
El comportamiento de masas tan pequeas en soluciones
muy diluidas puede requerir la adicin de acarreador inerte
para limitar la adsorcin a la superficie del recipiente as
como facilitar las reacciones qumicas de preparacin de
radiofrmacos.
CONTROL BIOLGICO
Esterilidad
Radiofrmacos inyectables deben ser preparados de acuer-
do con las BPF para asegurar la esterilidad, atendiendo a
los criterios de la prueba de esterilidad (5.5.3.2.1). Por cau-
sa de las caractersticas radioactivas de las preparaciones,
no es practicable atrasar la liberacin de algunos productos
farmacuticos radioactivos por cuenta de la prueba de es-
terilidad. En tales casos, los resultados de las pruebas de
esterilidad dan apenas evidencia retrospectiva confirmato-
ria para la garanta de la esterilidad, que por tanto, depende
de los mtodos iniciales establecidos en la fabricacin y en
los procedimientos de validacin/certificacin. En el caso
de radiofrmacos preparados en pequeos lotes y para los
cuales la ejecucin de la prueba de esterilidad presenta gra-
do elevado de riesgo radiolgico, la cantidad de muestra
requerida en la prueba de esterilidad debe ser considerada.
Si la preparacin radiofarmacutica es esterilizada por fil-
tracin o procesada aspticamente, la validacin del proce-
so es necesaria.
Endotoxinas Bacterianas
Cuando especificado, una monografa individual para una
preparacin radiofarmacutica requiere conformidad con
la prueba para endotoxinas bacterianas, descrito en Mto-
dos Biolgicos Endotoxinas Bacterianas (5.5.2.2). En la
realizacin de la prueba se deben tomar las precauciones
necesarias para limitar la irradiacin del personal que rea-
liza la prueba.
9
El lmite de endotoxinas bacterianas es indicado en las mo-
nografas de los radiofrmacos. La validacin de la prueba
es necesaria para excluir cualquier interferencia debido a
la naturaleza del radiofrmaco. Niveles de radioactividad
deben ser estandarizados ya que algunos tipos de radiacin
y radionuclidos, especialmente altos niveles de actividad,
pueden interferir con la prueba. El pH de algunas prepa-
raciones radiofarmacuticas deber ser ajustado a pH 6,5
7,5 para promover resultados ptimos.
Cuando la naturaleza de la preparacin radiofarmacutica
resulte en una interferencia por inhibicin o potencializa-
cin y no fuese posible eliminar el factor interferente, la
conformidad con la prueba para endotoxinas bacterianas
 376 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
debe ser especificada. En algunos casos es difcil concluir
la prueba antes de la liberacin del lote para uso, cuando
la media vida del radionclido en la preparacin es corta.
La prueba entonces se constituye un control de la calidad
de la produccin.
PLAZO DE VALIDEZ
Fecha lmite especificada por el fabricante para la utiliza-
cin de un radiofrmaco, antes y despus de la reconstitu-
cin y/o marcacin radioactiva del producto, levando en
cuenta productos de degradacin qumicos, radioqumicos
y radionuclidos, siendo mantenidas las condiciones de al-
macenamiento y transporte establecidos.
RADIOACTIVIDAD
Propiedad que ciertos nucledos tienen de emitir radiacin
por transformaciones espontneas de sus ncleos. General-
mente el trmino radioactividad es usado para describir
el fenmeno de decaimiento radioactivo y para expresar
la cantidad fsica (actividad) de ese fenmeno. La activi-
dad de una preparacin es el nmero de transformaciones
nucleares por unidad de tiempo que ocurren en la prepa-
racin. Esas transformaciones pueden envolver la emisin
de partculas cargadas, captura de electrones o transicin
isomrica. Las partculas cargadas emitidas por el ncleo
pueden ser partculas alfa (ncleos de helio, de nmero de
masa 4) o partculas beta (electrones de carga negativa o
positiva, respectivamente -1 negatrn o +1 positrn).
La emisin de partculas beta es acompaada de la emisin
de neutrino.
La emisin de partculas cargadas puede ser acompaa-
da de rayos gama, los cuales, tambin, son emitidos en
el proceso de transicin isomrica. Esa emisin de rayos
gama puede ser parcialmente sustituida por la expulsin
de electrones, conocidos como electrones de conversin
interna. Ese fenmeno, as como el proceso de captura de
electrones, causa emisin secundaria de rayos X, debido a
la reorganizacin de electrones en el tomo. Esa emisin
secundaria causa, tambin, la expulsin de electrones de
baja energa conocidos como electrones Auger. Rayos X,
eventualmente acompaados por los rayos gama, son emi-
tidos en el proceso de captura de electrones. Partculas +1
son aniquiladas en contacto con otro electrn (-1e) presente
en la materia, siendo ese proceso acompaado por la emi-
sin de dos fotones gama, cada uno con energa de 511
9
keV, generalmente emitidos a 180 uno del otro y que se
denomina radiacin de aniquilacin.
El poder penetrante de cada radiacin vara considerable-
mente de acuerdo con su naturaleza y energa. Partculas
alfa son completamente absorbidas por espesores de sli-
dos o lquidos que varan de algunos a decenas de micr-
metros; partculas beta son absorbidas completamente en
el espesor de algunos milmetros a varios centmetros. Ra-
yos gama no son completamente absorbidos, sino solamen-
te atenuados, y una reduccin de diez veces puede requerir,
por ejemplo, algunos centmetros de plomo. Cuanto ms
denso es el absorbente, menor es el alcance de partculas
alfa y beta y mayor la atenuacin de rayos gama.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Medida de la radioactividad
La medida absoluta de la radioactividad de una muestra
puede ser efectuada se el esquema de decaimiento del
nucledo es conocido, pero en la prctica muchas correc-
ciones son requeridas para obtener resultados precisos.
Por esa razn es comn realizar medidas utilizndose una
fuente estndar primaria.
Estndares primarios pueden no existir para radionucli-
dos de media vida corta, como por ejemplo, emisores de
positrones. Los instrumentos de medida son calibrados uti-
lizndose estndares apropiados para radionuclidos emi-
sores de partculas.
El contador Geiger-Mller puede ser utilizado para medir
emisores beta y beta-gama. Contadores de centelleo, semi-
conductores o cmaras de ionizacin pueden ser utilizados
para medir rayos gama. Emisores beta de baja energa ne-
cesitan de contador de centelleo lquido.
En ese caso, la muestra es disuelta en la solucin de una
o ms (generalmente dos) sustancias orgnicas fluorescen-
tes (centelladores primarios y secundarios), que convierten
parte de la energa de desintegracin en fotones de luz, los
cuales son detectados y convertidos en impulsos elctricos
en el fotomultiplicador. Cuando se utiliza el contador de
centelleo lquido, medidas comparativas deben ser corregi-
das debido a los efectos de interferencia de la luz. Medidas
directas deben ser hechas en condiciones que aseguren que
las condiciones geomtricas sean constantes (volmenes
idnticos de los recipientes y soluciones).
Cualquiera que sea el equipo usado es esencial que se tra-
baje en condiciones geomtricas extremamente bien defi-
nidas, de modo que la fuente radioactiva est siempre en
la misma posicin en el aparato y, consecuentemente, su
distancia del dispositivo de medicin sea constante y per-
manezca la misma, mientras la muestra es sustituida por el
estndar.
Todas las medidas de radioactividad deben ser corregidas
por la sustraccin de la actividad de la radiacin de fondo,
debido a la radiactividad del medio y a las seales espurias
generadas en el propio aparato. En ciertos equipos, en los
cuales el conteo est hecho en altos niveles de actividad, la
correccin puede ser necesaria en razn de las prdidas por
coincidencia, debidas al tiempo de resolucin del detector
y del equipo electrnico asociado.
Para sistema de conteo con tiempo muerto fijo (), despus
de cada conteo la correccin est dada por la ecuacin:
N0
N=
1 N0
N = tasa de conteo real por segundo;
N0 = tasa de conteo medida por segundo;
t = tiempo muerto en segundos.

En ciertos equipos, la correccin est hecha automticamen-
te. Correcciones de la prdida por coincidencia deben ser
hechas antes de las correcciones para radiacin de fondo.
En las determinaciones de radioactividad hay variaciones
estadsticas porque estn relacionadas a la probabilidad de
desintegracin nuclear. Un nmero suficiente de conteos
deben ser hechos para compensar variaciones en el nmero
de desintegraciones por unidad de tiempo. Por lo menos 10
000 conteos son necesarios para obtener desvo estndar de
no ms de 1%.
La actividad decae en razn exponencial, que es caracte-
rstica de cada radionclido. Su determinacin solamente
es verdadera en el tiempo de referencia especificado. La
actividad en otros tiempos puede ser calculada a partir de
la ecuacin exponencial o por la tabla de decaimiento o,
adems, puede ser obtenida grficamente de la curva esta-
blecida para cada radionclido. Todas las determinaciones
de actividad deben ser acompaadas de declaracin de la
fecha y, si necesario, de la hora en que las medidas fueron
hechas. La medida de la actividad de muestra en solucin
es calculada en relacin a su volumen original y expresada
por unidad de volumen concentracin radioactiva.
Unidades de Radioactividad
En el Sistema Internacional (SI) la radioactividad es expre-
sada en becquerel (Bq) que significa una transformacin
por segundo. La unidad histrica de actividad es el curie
(Ci) que es equivalente a 3,7 x 1010 Bq.
Los factores de conversin entre becquerel y curie y sus
submltiplos son sealados en la Tabla 1.
Tabla 1 - Unidades de radioactividad utilizadas en radiofarmacia
y las conversiones entre unidades SI y unidades histricas.
Nmero
de tomos Unidad SI: Unidad Histrica:
transformados becquerel (Bq) curie (Ci)
por segundo
1 1 Bq 27 picocurie (pCi)
1000 1 kilobecquerel (KBq) 27 nanocurie (nCi)
1 x106 1 megabecquerel (MBq) 27 microcurie (|Ci)
1 x109 1 gigabecquerel (GBq) 27 millicurie (mCi)
37 37 Bq 1 (nCi)
37.000 37 KBq 1 (Ci)
3,7 x 107 37 MBq 1 (mCi)
3,7 x 1010 37 GBq 1 Ci
Identificacin de radionuclidos
El radionclido es, generalmente, identificado por la me-
dia- vida fsica o por la naturaleza y energa de su radiacin
o radiaciones, o por ambos.
Medida del tiempo de media vida
La media vida es medida con auxilio de aparatos de de-
teccin tales como cmara de ionizacin, contador Geiger-
Mller, contador de centelleo o detector semiconductor. La
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 377
cantidad de radioactividad, consideradas las condiciones
experimentales, debe ser suficientemente alta para permitir
la deteccin durante varias medias-vidas presumibles, sin
embargo no alta dems, para evitar el fenmeno de prdida
por coincidencia debida, por ejemplo, al tiempo muerto del
equipo.
La fuente radioactiva es preparada para evitar prdidas du-
rante su manipulacin. Muestras lquidas deben estar conte-
nidas en frascos o tubos sellados. Productos slidos deben
ser protegidos por capa de hoja adhesiva de acetato de celu-
losa, u otro material cuya masa por unidad de rea sea insig-
nificante para evitar la atenuacin de cantidad significativa
de la radiacin en estudio. La misma fuente es medida en
condiciones geomtricas idnticas y en intervalos que co-
rresponden usualmente a la mitad de la media vida y por el
tiempo correspondiente a aproximadamente tres medias-vi-
das. El funcionamiento correcto del equipo es verificado por
medio del uso de una fuente permanente y las variaciones
del conteo son corregidas, si necesario, conforme descrito en
Medida de la radioactividad. Se traza una curva lanzndose
el tiempo en el eje de las abscisas y en el eje de las ordenadas,
el logaritmo del nmero de conteos por unidad de tiempo, o
la corriente elctrica, conforme el tipo del equipo usado. La
media vida calculada a partir de esa curva debe atender a la
especificacin descrita en la respectiva monografa.
Determinacin de la naturaleza y de la energa de la ra-
diacin
La naturaleza y la energa de la radiacin emitida pueden
ser determinadas por diversos procedimientos que inclu-
yen la elaboracin de la curva de atenuacin y el uso de
espectrometra. La curva de atenuacin es usada general-
mente para la determinacin de la energa de la radiacin
beta y la espectrometra es usada principalmente para de-
terminacin de la energa de la radiacin gamma.
La curva de atenuacin es elaborada para emisores beta
puros o para emisores beta-gama cuando no hay disponi-
bilidad de espectrmetro de rayos gama. Ese mtodo de
determinacin de energa mxima de la radiacin beta da
apenas valores aproximados.
La fuente, montada convenientemente para proporcionar
condiciones geomtricas constantes, es colocada en frente a
la ventana delgada del contador Geiger-Mller y protegida
conforme descrito en Medida del tiempo de media vida. El
9
conteo de la fuente es, entonces, medido. Entre la fuente y
el contador son colocados por lo menos seis absorbentes de
aluminio, de masa creciente por unidad de rea, hasta que la
tasa de conteo no sea afectada por la adicin de absorbentes
adicionales. Los absorbentes son insertados de modo tal que
las condiciones geomtricas sean mantenidas constantes.
Se construye una curva colocando en abscisas la masa por
unidad de rea del absorbente expresada en mg cm-2 y,
en ordenadas, el logaritmo del nmero de conteos por uni-
dad de tiempo para cada uno de los absorbentes utilizados.
Curva idntica es elaborada utilizndose el estndar. El co-
eficiente de atenuacin de masa es calculado con relacin
a la parte mediana, prcticamente rectilnea, de las curvas.
 378 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
El coeficiente de atenuacin de la masa, expresado en cm2
mg-1, depende de la energa de la emisin beta y de las
propiedades fsicas y qumicas del absorbente. Eso posi-
bilita la identificacin de emisin beta y el coeficiente es
calculado, a partir de curvas construidas como descrito an-
teriormente, por la expresin:
2,303
m = (logA1 logA2)
m2 m1
en que:
m1 = masa por unidad de rea, del absorbente ms leve;
m2 = masa por unidad de rea, del absorbente ms pesado
(medir m1 y m2 dentro de la parte rectilnea de la curva);
A1 = tasa de conteo para masa por unidad de rea ml;
A2 = tasa de conteo para masa por unidad de rea m2.
El coeficiente de atenuacin as calculado no debe dife-
rir en ms de 10% del coeficiente obtenido en condiciones
idnticas con el estndar del mismo radionclido.
La espectrometra gama es usada para identificar radionu-
clidos por la energa e intensidad de los rayos X o gama.
Se basa en la propiedad de que ciertas sustancias (cente-
lladores) tienen de emitir luz cuando interactan con ra-
diacin electromagntica. El nmero de fotones producido
es proporcional a la energa adsorbida por el centellador.
La luz es transformada en impulsos elctricos de amplitud
aproximadamente proporcional a la energa disipada por
los fotones gama.
Con el anlisis de los impulsos de salida por porcentaje se
obtiene, con auxilio del analizador de pulsos, el espectro de
energa de la fuente. En los espectros de centelleo de rayos
gama hay uno o ms picos caractersticos correspondientes
a las energas de la radiacin gamma en la fuente. Esos
picos son acompaados por otros, ms o menos anchos, de-
bido a efectos secundarios de la radiacin en el centellador
o al material en torno a l. La forma del espectro vara de
acuerdo con el equipo utilizado, tornndose necesario cali-
brarlo con auxilio de estndar del radionclido en cuestin.
El espectro de rayos gama del radionclido que los emite
es propio de l, siendo caracterizado por el nmero de ra-
yos gama de energa individualizada producida por trans-
formacin. Esa propiedad puede ser utilizada para identi-
ficar cuales radionuclidos estn presentes en la fuente y
9
las cantidades de cada uno de ellos. Posibilita, tambin,
evaluar el grado de impurezas presentes, por la deteccin
de los picos extraos a aquellos esperados.
El detector preferido para a espectrometra de rayos gama
es un detector semiconductor de germanio activado con li-
tio. Los detectores de centelleo de yoduro de sodio activa-
dos con talio, a pesar de que presenten resolucin menor,
tambin, pueden ser usados. La salida de cada uno de esos
detectores ocurre en la forma de pulsos elctricos, cuya
amplitud es proporcional a la energa de los rayos gama
detectados. Despus de amplificacin, esos pulsos son
analizados en analizador multicanal, que da el espectro de
energa gama de la fuente. La relacin entre energa gama y
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
el nmero del canal puede ser fcilmente establecida utili-
zndose fuentes de rayos gama de energa conocida. El sis-
tema de deteccin debe ser calibrado, pues la eficiencia del
detector es funcin de la energa de la radiacin gamma, de
la forma de la fuente y de la distancia de la fuente al de-
tector. La eficiencia de la deteccin puede ser medida con
auxilio de fuente calibrada del radionclido en cuestin o,
para trabajo ms genrico, puede ser construida una curva
de eficiencia contra energa gama a partir de una serie de
fuentes calibradas de varios radionclidos.
La utilizacin de detector de baja resolucin podr traer
alguna dificultad en identificar las impurezas, pues, los pi-
cos en el espectro pueden no estar bien resueltos. En ese
caso, es recomendable la determinacin de la media vida
por medidas repetidas de la muestra.
Si, en una fuente, la impureza radioactiva de media vida
diferente est presente, ella es fcilmente detectable por la
identificacin de picos caractersticos, cuyas amplitudes
decrecen en tasas diferentes de aquellas del radionclido
esperado. La determinacin de la media vida de picos in-
terferentes por medidas repetidas de la muestra ayudar en
la identificacin de la impureza. Es posible establecer la
tasa de decaimiento de la radioactividad usando espectro-
metra gama desde que los picos disminuyan en amplitud
en funcin de la media vida.
Informaciones sobre las caractersticas fsicas de los radio-
nuclidos de relevancia en la produccin de radiofrmacos
son suministradas en la Tabla 2.
PUREZA RADIONUCLIDICA
Para establecer a pureza radionuclidica de la preparacin,
la radioactividad y la identidad de cada radionclido presen-
te deben ser conocidas. El mtodo ms comnmente utiliza-
do para examinar la pureza radionuclidica es el de la espec-
trometra gama. No es un mtodo totalmente preciso porque
las impurezas alfa y beta-emisoras generalmente no son de-
tectables y, cuando son empleados detectores de yoduro de
sodio, los picos debido a las impurezas son frecuentemente
encubiertos por el espectro del radionclido principal.
En la monografa estn establecidas las exigencias genera-
les para la pureza radionuclidica (por ejemplo, el espectro
de rayos gama no debe diferir significativamente de aquel
de la fuente estndar) y puede establecer lmites para im-
purezas radionuclidicas especficas (por ejemplo, molib-
dnio-99 en tecncio-99m). Esas exigencias son necesarias
a pesar de que ellas por s solas no sean suficientes para
asegurar que la pureza radionuclidica de la preparacin
sea adecuada para uso humano. El fabricante debe analizar
sus productos, especialmente las preparaciones de radio-
nuclidos de media- vida corta, cuanto a la presencia de
impurezas de media vida larga, despus de perodo conve-
niente de decaimiento. De esa manera, pueden ser obteni-
das informaciones sobre la adecuacin de los procesos de
fabricacin y de los procedimientos de control.
Debido a las diferencias en las medias vidas de los diferen-
tes radionuclidos presentes en la preparacin farmacu-

tica, la pureza radionuclidica cambia con el tiempo. La
especificacin de pureza radionuclidica debe ser garan-
tizada durante todo el plazo de validez. A veces es difcil
realizar esta prueba antes de la liberacin para uso de un
lote producido, cuando la media vida del radionclido en la
preparacin es corta. La prueba se constituye, en ese caso,
un control de calidad de produccin.
PUREZA RADIOQUMICA
La determinacin de la pureza radioqumica requiere la se-
paracin de las sustancias qumicas diferentes conteniendo
el radionclido y la estimativa del porcentaje de la radioac-
tividad asociada a la sustancia qumica declarada.
En la determinacin de la pureza radioqumica pueden ser
usados mtodos analticos de separacin, tales como m-
todos cromatogrficos (cromatografa en papel, en camada
delgada, de exclusin molecular, cromatografa gaseosa o
cromatografa a lquido de alta eficiencia), electroforesis y
extraccin por solventes.
En la cromatografa, el volumen de la muestra a ser utili-
zado depende de la tcnica adoptada. Es preferible no di-
luir la preparacin en anlisis, pero es importante utilizar
cantidad de radioactividad tal que prdidas de conteo por
coincidencia no vengan a ocurrir durante la medida de la
radioactividad.
Considerando las masas muy pequeas del material ra-
dioactivo aplicado a los cromatogramas, el uso de acarrea-
dores es, a veces, necesario y ellos pueden ser aadidos
cuando la monografa as lo prescriba.
Despus del desarrollo de la cromatografa en papel o en
camada delgada, el soporte es seco y las posiciones de las
reas radioactivas son detectadas o por la autorradiografa
o por la medida de la radioactividad a lo largo del cromato-
grama, con auxilio de contadores debidamente colimados,
o por el corte de las cintas y conteo de cada porcin.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 379
Las posiciones de las manchas o reas permiten identi-
ficacin qumica por comparacin con soluciones de las
mismas sustancias qumicas (no radioactivas), visualizadas
por reaccin de color o examen bajo luz ultravioleta. La
visualizacin por la reaccin de color directo de la muestra
radioactiva no siempre es posible o deseable, ya que la re-
velacin puede causar difusin de la sustancia radioactiva
para ms all de las manchas o reas identificadas.
Medidas de radioactividad pueden ser hechas por integra-
cin, utilizndose equipo automtico o contador digital.
Las proporciones de las reas abajo de los picos dan las re-
laciones de las concentraciones radioactivas de las sustan-
cias qumicas. Cuando las cintas son cortadas en porciones,
las razones de las cantidades de radioactividad medidas
dan las proporciones de las concentraciones de especies
qumicas radioactivas.
Como la pureza radioqumica puede cambiar con el tiem-
po, principalmente por causa de la descomposicin por
radiacin, el resultado de la prueba debe indicar que el pro-
ducto presenta valores especificados durante todo el plazo
de validez del radiofrmaco.
ACTIVIDAD ESPECFICA
La actividad especfica es calculada relacionndose la
concentracin radioactiva (radioactividad por unidad de
volumen) con la concentracin de la sustancia qumica en
anlisis, despus de verificacin de que la radioactividad es
debida solamente al radionclido (pureza radionuclidica)
y a la especie qumica (pureza radioqumica) en cuestin.
La actividad especfica cambia con el tiempo, debiendo
estar expresada teniendo como referencia la fecha y, si
necesario, la hora. La especificacin debe ser garantizada
durante todo el perodo de validez del radiofrmaco.
 9
Tabla 2 - Informaciones sobre las caractersticas fsicas de los radionuclidos de relevancia en la produccin de radiofrmacos.
380

Transiciones
Media vida Tipo de Energia Probabilidad de
Radionucldeo Energia del Fton (MeV) Fotones Emitidos (%) Internamente
fsica Decaimiento (MeV) transicin (%)
Convertidas (%)
Csio- 137 30,1 a b+ 0,512 94,6 Via 2,6 min 137mBa 85,1 9,5
1,174 5,4 0,662 8 (Ba K Raio-X)
0,032-0,038
Carbono-11 1223,1s b+ 0,960 99,76 0,511 Proveniente de aniquilacin
Carbono-14 5730 a b- 0,158 100 - -
Cromio-51 27,7d c.e. 100 0,320 9,83
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

0,005-0,006 ~22 (V K Raio X)

Cobalto-57 270d c.e. 100 0,114 9,4
0,122 85,2
0,136 11,1
0,570 0,02
0,692 0,16
outros baixa intensidade
0,006-0,007 ~55% (Fe K Raio-X)
Cobalto-58 70,8d b+ 0,475 15,0 0,511 b+
c.e. 85 0,811 99,4
0,864 0,7
1,675 0,5
0,006-0,007 ~26 (Fe K Raio-X)
Cobalto-60 5,27a b- 0,318 99,9 1,173 99,86 0,02
1491 0,1 1,333 99,98 0,01
outros <0,01

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Disprosio-165 2,32h b+, g 0,205 0,1 0,046 2,5
0,290 1,6 0,047 4,6
1,190 14,6 0,053 1,8
1,285 83,4 0,094 3,5
0,279 0,5
0,361 0,8
0545 0,16
rbio-169 9,4d b+, g 0,341 45 0,008 0,15
0,350 55
Fluorine-18 111min b+, K 0,649 97 0,511 Proveniente de aniquilacin
 Tabla 2 (continuacin)

Transiciones
Media vida Tipo de Energia Probabilidad de
Radionucldeo Energia del Fton (MeV) Fotones Emitidos (%) Internamente
fsica Decaimiento (MeV) transicin (%)
Convertidas (%)
Galio-67 78,3h c.e. 100 0,091 3,6 0,3
0,185 23,5 0,4
0,209 2,6 0,02
0,300 16,7 0,06
0,394 4,4 0,01
0,494 0,1
0,704 0,02
0,795 0,06
0,888 0,17
0,008-0,010 43 (Zn Raio-X)
via 9,2 ms 67mZn
0,093 37,6 32,4
0,008-0,010 13 (Zn Raio-X)
Holmio-166 27,3h b-, g 0,191 0,2 0,007 7,6
0,394 1 0,048 2,8
1,773 48 0,049 5,0
1854 51 0,055 2,0
0,080 6,2
1,379 0,9
1,581 0,18
0,12

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

1,662
Indio-111 2,81 d c.e. 100 0,172 89,6 10,4
0,247 94 6
Indio-113 m 99,5 min t.i. 100 0,392 64,9 35,1
0,024-0,028 24 (em K Raio-X)
Iodo-123 13,2 h c.e. 100 0,159 83,0 16,3
0,347 0,10
0,440 0,35
0,506 0,26
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

0,529 1,05
0,539 0,27
0,027-0,032 ~86 (Te K Raio-X)
381

9
 9
Tabla 2 (continuacin)
382

Transiciones
Media vida Tipo de Energia Probabilidad de
Radionucldeo Energia del Fton (MeV) Fotones Emitidos (%) Internamente
fsica Decaimiento (MeV) transicin (%)
Convertidas (%)
Iodo-124 4,1d b-, g, K 1,53 0,511 and Proveniente de aniquilacin
2,13 0,605 66
0,644 12
0,730 14
1,320 1,0
1,510 4,2
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

1,695 14
2,09 2,0
2,26 1,5
Iodo-125 60,0d c.e. 100 0,035 7 93
0,027-0,032 138 (Te K Raio-X)
Iodo-131 8,06d b- 0,247 1,8 0,080 2,4 3,8
0,304 0,6 0,284 5,9 0,3
0,334 7,2 0,364 81,9 1,7
0,606 89,7 0,637 7,2
0,806 0,7 0,723 1,8
1,3% de 131I decaem via
12d 131mXe
100
(Xennio-131m) t.i. (porcentagem relativa 0,164 2 98
desintegrao do
131m
Xe)

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Ferro-59 44,6d b- 0,084 0,1 0,143 0,8
0,132 1,1 0,192 2,8
0,274 45,8 0,335 0,3
0,467 52,7 0,383 0,02
1,566 0,3 1,099 55,8
1,292 43,8
1,482 0,06
Kriptnio-81m 13s g - - 0,193 82
-
Lutcio-177 6,71d b, g 0,175 12,3 0,071 0,16
0,384 9,0 0,113 6,3
0,497 78,7 0,208 11,0
0,250 0,2
0,321 0,2
 Tabla 2 (continuacin)

Transiciones
Media vida Tipo de Energia Probabilidad de
Radionucldeo Energia del Fton (MeV) Fotones Emitidos (%) Internamente
fsica Decaimiento (MeV) transicin (%)
Convertidas (%)
Molibdnio-99 66,2h b- 0,454 18,3 0,041 1,2 4,8
0,866 1,4 0,141 5,4 0,7
1,232 80 0,181 6,6 1,0
outros 0,3 0,366 1,4
0,412 0,02
0,529 0,05
0,621 0,02
0,740 13,6
0,778 4,7
0,823 0,13
0,961 0,1

via 6,02h 99mTc em

equilbrio ~0 93,9
0,002 83,9 10
0,141 0,03 0,8
0,143
Nitrognio-13 10min b+ 1,19 0,511 Proveniente de aniquilacin
Oxignio-15 2,04s b+ 1,723 0,511 Proveniente de aniquilacin
Fsforo-32 14,3d b+ 1,709 100
Rnio-186 88,9h b-, g, K 0,939 22 0,123 0,7
1,076 71 0,137 9,5

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

0,631 1,9
0,768 0,8
Rnio-188 18h b-, g 1,964 25,3 0,155 14,9
2,119 71,4 0,477 1,0
0,633 1,2
0,635 0,14
0,673 0,11
0,829 0,41
0,931 0,56
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

1,13 0,7
1,306 0,01
383

9
 9
Tabla 2 (continuacin)
384

Transiciones
Media vida Tipo de Energia Probabilidad de
Radionucldeo Energia del Fton (MeV) Fotones Emitidos (%) Internamente
fsica Decaimiento (MeV) transicin (%)
Convertidas (%)
Rubdio-81 4,7h b+, g, K 0,33 0,253
0,58 0,450
filha 81mKr 1,05 1,10
Samrio-153 47h b-, g 0,26 0,1 0,0058 11,8
0,632 34,1 0,0409 17,2
0,702 44,1 0,0415 31,2
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

0,81 21 0,0470 12,2

0,0696 5,1
0,103 28,3
0,422 0,2
Selnio-75 118,5d c.e. 100 0,066 1,1
0,097 2,9
0,121 15,7
0,136 54
0,199 1,5
0,265 56,9
0,280 18,5
0,401 11,7
outros <0,05 cada
0,010-0,012 ~50 (como K Raio-X)

via 16,4 ms 75mAs

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

0,024 0,03 5,5
0,280 5,4
0,304 1,2 0,1
0,010-0,012 ~2,6 (como K Raio-X)
Strncio-89 50,5d b-, (g) 0,582 0,01 0,909 0,01
1,491 99,98
Tecncio-99m 6,02h t.i. 100 0,002 ~0 99,1
0,141 88,5 10,6
0,143 0,03 0,87
filha 99Tc
 Tabla 2 (continuacin)

Transiciones
Media vida Tipo de Energia Probabilidad de
Radionucldeo Energia del Fton (MeV) Fotones Emitidos (%) Internamente
fsica Decaimiento (MeV) transicin (%)
Convertidas (%)
Tlio-201 73,5h c.e. 100 0,031 0,29 10,1
0,032 0,25 9,6
0,135 2,9 8,9
0,166 0,13 0,2
0,167 8,81 16
Alumnio-113 115d c.e. 100 0,255 21 0,1
0,024-0,028 73 (em K Raio-X)
filha 131mIn
Trtio (3H) 12,35a b- 0,0186 100
Tungstnio-188 69,5d b-, 0,3 0,227
0,291
filhas 188m+188Re
Xennio-131m 11,9d t.i. 100 0,164 2 98
0,029-0,035 ~52 (Xe K Raio-X)
Xennio-133 5,25d b- 0,266 0,9 0,080 0,4 0,5
0,346 99,1 0,081 36,6 63,3
0,160 0,05
0,030-0,036 ~46 (Cs K Raio-X)
Xennio-133m 2,26d t.i. 100 0,233 8 92
0,029-0,035 ~59 (Xe K Raio-X)
filha 133Xe
Ytrbio-169 32,0d c.e. 100 0,021 0,21 12,3

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

0,063 45,16 50,4
0,094 0,78 12,3
0,110 3,82 56,2
0,117 0,04
0,118 1,90 3,2
0,131 11,42 13,5
0,177 17,31 17,7
0,198 26,16 25,7
0,240 0,12
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

0,261 1,74
0,308 11,04 0,7
Ytrio-90 64,5h b- 2,281 100 - -
385

9
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

10 EQUIVALENCIA FARMACUTICA Y
BIOEQUIVALENCIA DE MEDICAMENTOS
INTRODUCCIN
En este captulo son abordados aspectos cientficos y tc-
nicos relacionados a los ensayos de Equivalencia Farma-
cutica, Disolucin, Biodisponibilidad y Bioequivalencia
aplicables a medicamentos, con nfasis a las formas far-
macuticas slidas de liberacin inmediata (FFSLI) de uso
oral y suspensiones, en el contexto del intercambio entre
medicamentos. Medicamentos biolgicos (vacunas, sue-
ros, derivados de sangre, etc), biotecnolgicos, radiofr-
macos y fitoterpicos requieren otras consideraciones y,
por tanto, no sern abordados.
Los actos de registro y polvos-registro de medicamentos son
de la competencia de la Agncia Nacional de Vigilncia Sa-
nitria (Anvisa). Los aspectos cientficos y tcnicos presen-
tados en ese captulo estn en consonancia con los criterios
adoptados internacionalmente y con la reglamentacin tc-
nica vigente en Brasil sobre los temas relacionados.
Los medicamentos genricos fueron implantados en Brasil
en 1999, mientras que en 2003 se public reglamentacin
tcnica especfica para el registro y para la adecuacin del
registro de medicamentos similares que ya eran comercia-
lizados en el pas. Los medicamentos similares que estaban
en el mercado haban sido registrados segn normas que
permitan su registro sanitario por medio del concepto de
similitud a un medicamento anteriormente registrado, sin
la necesidad de presentacin, por ocasin del registro, de
los resultados de ensayos in vitro o in vivo relacionados
a la comprobacin de la eficacia y seguridad. Las nuevas
reglamentaciones para medicamentos similares publicadas
en 2003 se destinan al establecimiento de la isonoma de
criterios para registro y renovacin de registro de medica-
mentos no innovadores (genricos y similares), teniendo
como base los preceptos de la garanta de la calidad, efica-
cia y seguridad.
La Equivalencia Farmacutica y la Bioequivalencia son
criterios aplicables a medicamentos genricos y similares.
Para el registro de un medicamento genrico, la industria
farmacutica debe solicitar a la Agncia Nacional de Vigi-
lncia Sanitria (Anvisa) la indicacin del medicamento de
referencia para la realizacin de los ensayos necesarios al
desarrollo de la formulacin, de la forma farmacutica y
del proceso de fabricacin, estableciendo las condiciones
para los pruebas de estabilidad y las especificaciones del
medicamento para comprobar su Equivalencia Farmacuti-
ca (in vitro) y Bioequivalencia (in vivo) con el medicamen-
to de referencia, condicin indispensable para la compro-
bacin de la Equivalencia Teraputica entre el candidato a
genrico y el medicamento de referencia (generalmente el
medicamento innovador cuya biodisponibilidad es conoci-
da y la eficacia clnica y la seguridad fueron comprobadas
por ocasin del registro sanitario).
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 387
La Equivalencia Teraputica entre el genrico y el medica-
mento de referencia posibilita el intercambio entre ellos, lo
que, tambin, es conocido como sustitucin genrica en el
acto de la dispensacin del medicamento por el farmacu-
tico. Cuando dos medicamentos son considerados Equiva-
lentes Teraputicos se asume que ambos van a presentar
la misma eficacia y seguridad al ser administrados al or-
ganismo, as como el mismo potencial para causar efectos
adversos.
Caso una industria farmacutica pretenda registrar un nue-
vo medicamento similar, debe verificar la reglamentacin
tcnica vigente. Para medicamentos similares ya comer-
cializados, la reglamentacin tcnica pertinente presenta
un cronograma de adecuacin con base en el criterio de
riesgo sanitario, segn el cual hasta el ao 2014 todos los
medicamentos similares del mercado se habrn adecuado
a los mismos criterios exigidos para el registro de medica-
mentos genricos.
EQUIVALENCIA FARMACUTICA
La Equivalencia Farmacutica corresponde a la compro-
bacin de que dos medicamentos son equivalentes con
relacin a los resultados de los pruebas in vitro. Por de-
finicin, Equivalentes Farmacuticos son medicamentos
que contienen el mismo frmaco, eso es, la misma sal o
ster de la misma molcula teraputicamente activa, mis-
ma forma farmacutica y va de administracin y son idn-
ticos con relacin a la potencia o concentracin. Deben ser
formulados para cumplir con las mismas especificaciones
actualizadas de la Farmacopea Brasilea y, en la ausencia
de esta, con las de otros cdigos autorizados por la legis-
lacin vigente o, adems, con otros estndares aplicables
de calidad; relacionados a la identidad; dosificacin; pu-
reza; potencia; uniformidad de contenido; tiempo de des-
integracin y velocidad de disolucin, cuando sea el caso.
No obstante, pueden diferir en caractersticas como forma,
mecanismos de liberacin, embalaje, excipientes, plazo de
validez y, dentro de ciertos lmites, etiquetado.
Los estudios de Equivalencia Farmacutica se destinan a
la evaluacin de la calidad de los medicamentos por medio
de anlisis comparativo entre el medicamento prueba y el
medicamento de referencia y deben ser, necesariamente,
realizados por laboratorios autorizados por la Anvisa. Ade-
ms de eso, los estudios deben ser realizados en muestras
dentro del plazo de validez, utilizndose sustancias qumi-
cas de referencia de la Farmacopea Brasilea, oficializa-
das por medio de Resolucin de Direccin Colegiada de 10
la Anvisa u originarias de otras farmacopeas. En el caso
de inexistencia de esas sustancias, se admite el uso de sus-
tancias qumicas de trabajo con identidad, tenor y perfil de
impurezas debidamente determinados.
 388 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Los mtodos analticos empleados para evaluacin de la
calidad de los medicamentos presentan importancia consi-
derable en el estudio de Equivalencia Farmacutica. Deben
ser utilizados, preferencialmente, los mtodos analticos
descritos en la monografa individual del medicamento pre-
sente en la Farmacopea Brasilea, siendo que, en ausencia
de esta, se permite la utilizacin de mtodos incluidos en
otras farmacopeas autorizadas por la legislacin vigente.
Cuando no hubiere monografas para el producto en farma-
copeas oficiales, el estudio debe ser realizado utilizndose
mtodos analticos validados, complementndose con los
ensayos descritos en mtodos generales de la Farmacopea
Brasilea. En el caso en que el mtodo analtico es sumi-
nistrado por el fabricante del medicamento, los parmetros
de precisin, exactitud y linealidad deben ser determinados
por el laboratorio autorizado por la Anvisa donde el estudio
est siendo realizado.
Los pruebas de Equivalencia Farmacutica deben ser rea-
lizadas, simultneamente, en el medicamento candidato a
genrico, o medicamento similar, y en el respectivo medi-
camento referencia, y se basan en la comparacin de los
resultados obtenidos con ambos.
Es importante resaltar que el medicamento a prueba no
debe ser desarrollado y formulado para ser superior al me-
dicamento de referencia, pero si para presentar las mismas
caractersticas relacionadas a la liberacin del frmaco y
a la calidad ya establecidas para el medicamento de refe-
rencia. La demostracin de la Equivalencia Farmacutica
entre los dos medicamentos es un indicativo de que el can-
didato a genrico, o similar, podr presentar la misma efi-
cacia y seguridad del medicamento de referencia.
BIODISPONIBILIDAD, BIODISPONIBILIDAD
ABSOLUTA, BIODISPONIBILIDAD RELATIVA Y
BIOEQUIVALENCIA
La Biodisponibilidad (BD) es definida como la velocidad y
la extensin de la absorcin de un frmaco, a partir de una
forma farmacutica que se torna disponible, para ejercer
el efecto farmacolgico pretendido. Dependiendo del ob-
jetivo y del diseo empleado en el estudio se determina la
Biodisponibilidad Absoluta (BDA) de un medicamento o
la Biodisponibilidad Relativa (BDR) entre medicamentos.
10
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
La BDA se aplica a medicamentos innovadores que son
desarrollados como formas farmacuticas para administra-
cin por vas extravasculares. En general, corresponde a un
ensayo cruzado, realizado en voluntarios sanos, constitui-
do por dos perodos separados por un intervalo de tiempo
denominado washout. En el primer perodo, los voluntarios
son distribuidos aleatoriamente en dos grupos (A y B). Los
voluntarios del grupo A reciben el medicamento a prueba
por va extravascular, mientras que a los voluntarios del
grupo B se les administra, si es posible, la misma dosis del
medicamento por va intravascular. Las recolecciones de
lquido biolgico son realizadas de acuerdo con los proce-
dimientos establecidos previamente y, despus del interva-
lo de washout, se inicia el segundo perodo repitindose los
procedimientos con los mismos voluntarios, invirtindose
los grupos. Las concentraciones del frmaco en las mues-
tras son cuantificadas emplendose mtodo bioanaltico
validado, lo que permite la construccin de las curvas de
concentraciones contra tiempo para la realizacin de los
clculos de los parmetros farmacocinticos relativos a la
biodisponibilidad.
Cuando determinada para una forma farmacutica admi-
nistrada por va oral, por ejemplo, la BDA corresponde a
la fraccin sistmica calculada con relacin a la dosis ad-
ministrada por va intravascular, cuya biodisponibilidad es,
por definicin, igual a 100%. En el caso de que sea posible
administrar la misma dosis del medicamento por las vas
oral e intravascular y la BDA calculada sea igual a 80%,
eso significa que el aprovechamiento de la dosis por va
oral no es completo, habiendo prdida de 20% que puede
estar relacionada a las caractersticas del frmaco (elimina-
cin pre- sistmica) o de la formulacin.
El clculo de la biodisponibilidad es realizado utilizndose
los siguientes parmetros farmacocinticos: a) rea bajo la
curva de concentraciones del frmaco en el lquido bio-
lgico contra tiempo (ASC0-t), que expresa la cantidad de
frmaco absorbido, o sea, la extensin de la absorcin; b)
concentracin mxima alcanzada despus de administra-
cin de la dosis (Cmax), que est relacionada a la velocidad
del proceso de absorcin y ocurre en el tiempo denomina-
do T (Figura 1).

Figura 1 - Representacin de la curva de concentraciones plasmticas de frmaco en funcin del
tiempo despus de administracin de una dosis de medicamento por va extravascular.
En el caso de un medicamento genrico o de un medica-
mento similar en adecuacin, el desarrollo de la formula-
cin debe estar dirigido a la obtencin de un Equivalente
Farmacutico que, in vivo, no presente diferencias signi-
ficativas con relacin a la biodisponibilidad del medica-
mento de referencia, lo que es evaluado emplendose un
estudio de BDR adecuadamente planeado y un criterio de
aceptacin aplicable.
La Bioequivalencia (BE) corresponde a un caso particular
de la BDR y envuelve criterio de aceptacin y anlisis es-
tadstico que posibilita concluir sobre la comparacin de la
biodisponibilidad entre dos medicamentos con riesgo pre-
viamente establecido. Dos medicamentos son considerados
bioequivalentes y, por tanto, intercambiables, cuando los
Intervalos de Confianza (IC) de 90% calculados para las
razones de los promedios geomtricos ASC0-t (T) / ASC0-t
(R) y Cmax (T) / C max(R) se encuentran entre 80 y 125
considerndose T como el medicamento a prueba y R como
el medicamento de referencia, criterio adoptado internacio-
nalmente para la aceptacin de la bioequivalencia.
FACTORES RELACIONADOS A LA
BIODISPONIBILIDAD Y A LA DISOLUCIN DE
MEDICAMENTOS
De forma general, los principales factores que pueden
alterar la biodisponibilidad de medicamentos estn rela-
cionados al individuo (edad, sexo, peso corporal, factores
fisiopatolgicos asociados) y a las caractersticas del medi-
camento (frmaco, formulacin y proceso de fabricacin).
En el caso de los factores ligados al individuo, su influen-
cia debe ser minimizada al mximo, lo que ocurre
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 389
cuando el planeamiento del ensayo de biodisponibilidad es
bien ejecutado, por medio de criterios de inclusin y exclu-
sin bien definidos, la seleccin de un grupo de voluntarios
representativo con relacin a la poblacin para el estudio y
el empleo de un diseo experimental adecuado.
Entre los factores ligados al medicamento se citan: natu-
raleza qumica del frmaco; solubilidad; tamao de part-
cula; polimorfismo; tipo y cantidad de excipientes; tiempo
de mezcla y secado; tcnica de granulacin y compresin;
inestabilidad del frmaco. En ese sentido, se considera in-
dispensable la realizacin de estudios de pre-formulacin
y de aumento de escala para obtencin de una formulacin
estable, a ser administrada por medio de una forma farma-
cutica y una va adecuadas al objetivo teraputico. As,
el profesional involucrado en el desarrollo farmacotcnico
debe conocer ampliamente las caractersticas fsico-qu-
micas, farmacocinticas y farmacodinmicas del frmaco,
seleccionando, tambin, los adyuvantes farmacotcnicos
(excipientes) ms adecuados, adems de las mejores ope-
raciones unitarias involucradas en la fabricacin.
Entre las formas farmacuticas ms comnmente utiliza-
das en la teraputica, las formas slidas de uso oral son
aquellas que pueden originar problemas potenciales de
biodisponibilidad debido a las caractersticas del frmaco,
de la formulacin, de los procesos empleados en la fabrica-
cin y de la va de administracin. En esos casos, despus
de la administracin, el proceso de disolucin del frmaco
es fundamental para que l est en solucin y pueda ser ab-
sorbido, pudiendo ser un factor limitante para la absorcin. 10
No obstante, las suspensiones de uso oral o intramuscular,
tambin, pueden ocasionar problemas, una vez que el pro-
ceso de disolucin del frmaco, tambin, ocurre y sufre la
influencia de los factores citados.
 390 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
PERFIL DE DISOLUCIN
El perfil de disolucin puede ser definido como un ensayo
in vitro que permite la construccin de la curva de porcen-
taje de frmaco disuelto en funcin del tiempo, emplendo-
se, generalmente, las condiciones establecidas en la prueba
de disolucin descrito en la monografa del medicamento
inscrita en la Farmacopea Brasilea o, en su ausencia, en
otros compendios autorizados por la legislacin vigente.
Para realizacin del perfil de disolucin, en el caso de
inexistencia de mtodo de disolucin farmacopeico, la em-
presa solicitante del registro debe desarrollar mtodo ana-
ltico adecuado al producto evaluado de acuerdo con los
parmetros descritos en la legislacin vigente.
La evaluacin del perfil de disolucin es aplicable en los
casos de desarrollo de formulaciones, control de calidad
lote-a-lote, exencin del estudio de bioequivalencia para
11
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
menores dosis (cuando el estudio de bioequivalencia es
realizado con la mayor dosificacin y los perfiles de diso-
lucin para las dosis consideradas son semejantes al perfil
del biolote, las formulaciones de esas dosis son propor-
cionales y la farmacocintica es lineal dentro del interva-
lo entre la mayor y la menor dosificacin) y alteraciones
polvos-registro.
En el caso de medicamentos que sern sometidos al estudio
de bioequivalencia, la evaluacin del perfil de disolucin
comparativo en relacin al medicamento de referencia es
indispensable para el conocimiento del comportamiento de
las formulaciones. Cuando los perfiles de disolucin son
semejantes, de acuerdo con los criterios aplicables, hay
una indicacin de que el medicamento prueba podr ser
bioequivalente al medicamento de referencia. No obstante,
el mtodo de disolucin debe ser discriminativo, permi-
tiendo detectar alteraciones significativas en las formula-
ciones y en los procesos de fabricaci.

11 AGUA PARA USO FARMACUTICO
INTRODUCCIN
En ese captulo son considerados como agua para uso
farmacutico los diversos tipos de agua empleados en la
sntesis de frmacos; en la formulacin y produccin de
medicamentos; en laboratorios de ensayos; diagnsticos y
dems aplicaciones, relacionados al rea de la salud, inclu-
sive como principal componente en la limpieza de utensi-
lios, equipos y sistemas.
La estructura qumica del agua es peculiar, con un momen-
to dipolo y gran facilidad en formar conexiones de hidr-
geno. Esas propiedades tornan el agua un excelente medio
para solubilizar, absorber, adsorber o suspender diversos
compuestos, inclusive para carrear contaminantes y sus-
tancias indeseables, que van a alterar la pureza y eficacia
de un producto farmacutico.
En vista de sus caractersticas, los procesos de purifica-
cin; almacenamiento y distribucin deben garantizar que
las especificaciones farmacopeicas sean atendidas, mante-
nidas y controladas adecuadamente.
Los requisitos de calidad del agua dependern de su finali-
dad y empleo, y la eleccin del sistema de purificacin des-
tina atender al grado de pureza establecido. El usuario es
responsable de la seleccin del tipo de agua adecuado a sus
objetivos, as como por los controles y verificaciones nece-
sarios, en intervalos que garanticen el mantenimiento de la
calidad deseada. l debe asegurar que el sistema presenta
desempeo adecuado y capacidad para suministrar agua
con el nivel de calidad establecido, para atender a los par-
metros especificados en las monografas correspondientes.
En este captulo no se abarca todo el tema y no hay prop-
sito de sustituir la legislacin, guas o monografas oficia-
les ya existentes sobre agua para fines farmacuticos. Se
tiene como finalidad presentar subsidios que posibilitan a
los usuarios un mejor entendimiento de puntos fundamen-
tales relativos a la calidad del agua en el momento de la
obtencin y durante la distribucin y uso.
El control de la contaminacin del agua es crucial, una vez
que el agua tiene gran capacidad de agregar compuestos di-
versos y, tambin, de contaminarse nuevamente despus de
la purificacin. Los contaminantes del agua son represen-
tados por dos grandes grupos: qumico y microbiolgico.
Contaminantes qumicos
Los contaminantes orgnicos e inorgnicos tienen orgenes
diversos: de la fuente de alimentacin; de la extraccin de
materiales con los cuales el agua entra en contacto; de la
absorcin de gases de la atmsfera; de residuos contaminan-
tes, o residuos de productos utilizados en la limpieza y sa-
nitizacin de equipos, entre muchos otros. Se incluyen aqu
las endotoxinas bacterianas, resultantes de microorganismos
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 391
acuticos gram negativos, contaminantes crticos que deben
ser retirados adecuadamente.
Esos contaminantes pueden ser evaluados, principalmente,
por los ensayos de carbono orgnico total COT (5.2.30) y de
conductividad (5.2.24). La conductividad, medida en micro-
siemens/cm, es recomendada para evaluar agua con gran can-
tidad de iones y su recproco, la resistividad, en megohm.cm,
es medida cuando hay baja concentracin de iones disueltos.
La mayora de los compuestos orgnicos puede ser retira-
da por smosis reversa, no obstante, aquellos con bajo peso
molecular demandan tcnicas adicionales, como la resina de
cambio inico, carbn activado u oxidacin por ultravioleta
u ozono, para ser retirados.
Los lmites establecidos para los parmetros de los conta-
minantes qumicos orgnicos e inorgnicos se destinan a
proteger la salud y evitar que compuestos qumicos crticos
puedan interferir en la fase de pre-tratamiento de los siste-
mas de agua, considerando que, posteriormente, pueden ser
de difcil eliminacin.
Contaminantes microbiolgicos
Son representados principalmente por bacterias y presen-
tan un gran desafo a la calidad del agua. Son originarios
de la propia microbiota de la fuente de agua y, tambin, de
algunos equipos de purificacin. Pueden surgir, tambin,
debido a procedimientos de limpieza y sanitizacin inade-
cuados, que llevan a la formacin de biopelculas y, por
consecuencia, instalan un ciclo continuo de crecimiento a
partir de compuestos orgnicos que, en ltimo anlisis, son
los propios nutrientes para los microorganismos. Son de-
tectados y cuantificados por filtracin en porosidad de 0,45
m, para cultivo posterior del filtro en medio adecuado.
Las bacterias pueden afectar la calidad del agua por des-
activar reactivos o alterar sustratos por accin enzimtica,
aumentar el contenido en COT, alterar la lnea de base (rui-
do de fondo) en anlisis espectrales y producir pirognicos
y endotoxinas.
El conteo de bacterias es reportado en unidades formadoras
de colonias por mililitro (UFC/ml) y, en general, aumen-
ta con el tiempo de almacenamiento del agua. Los con-
taminantes ms frecuentes son bastones gram- negativos,
principalmente de los gneros Alcaligenes, Pseudomonas,
Escherichia, Flavobacterium, Klebsiella, Enterobacter,
Aeromonas y Acinectobacter.
El estndar microbiolgico es especificado, en paralelo a
los contaminantes qumicos, y consiste en la ausencia de
coliformes totales y termotolerantes (microorganismos pa-
tognicos de origen fecal), adems de enterovirus, quistes
y ooquistes de protozoarios, como Giardia sp y Cryptospo-
ridium sp en muestra de 100 ml.
11
 392 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Para atender a esos lmites, las estaciones de tratamiento uti-
lizan procesos de desinfeccin con sustancias qumicas con-
teniendo cloro u otros oxidantes, empleadas hace dcadas, y
consideradas relativamente seguras para los seres humanos.
No obstante, esos oxidantes pueden reaccionar con el mate-
rial orgnico de origen natural y generar productos secun-
darios de la desinfeccin, como trihalometanos, cloraminas
o adems dejar residuos de los propios desinfectantes. Esos
productos indeseables requieren atencin especial, por parte
de los legisladores y usuarios.
Las cloraminas, en particular, pueden daar irreversible-
mente un equipo de decloracin integrante de un sistema
de purificacin, adems de presentar riesgo de formacin y
liberacin de amonaco.
Adems de esos dos grupos fundamentales de contaminan-
tes, existen los particulados, constituidos por slice, residuos
de la tubera o coloides y que, adems de ser un riesgo a la
calidad del agua purificada, pueden provocar tapones y per-
judicar gravemente el proceso de purificacin, por reducir
su desempeo, o hasta tambin causar daos irreversibles a
los equipos. Pueden ser detectados por filtracin, combinada
con gravimetra o microscopa. Pero en general no es nece-
sario identificar el tipo de partcula, apenas removerla.
En ese captulo son abordadas algunas consideraciones acerca
de los principales sistemas de purificacin normalmente uti-
lizados en la produccin del agua para uso farmacutico; sus
principales aplicaciones; monitoreo y mantenimiento. Abarca,
tambin, los parmetros de pureza establecidos para aquellos
tipos de agua que no son cubiertos por la legislacin vigente.
TIPOS DE AGUA
Bsicamente, hay tres tipos de agua para uso farmacutico:
el agua purificada (AP); el agua para inyectables (API) y el
agua ultrapurificada (AUP), cuyas monografas se encuen-
tran en esta Farmacopea. Compendios oficiales de otros
pases o internacionales especifican, adems de estos, otros
tipos de agua, como: envasadas en frascos, estriles o bacte-
riostticas, para irrigacin o inhalacin. Sin embargo, todas
poseen caractersticas de pureza semejante a los tipos funda-
mentales ya mencionados.
Adems de eso es importante comentar, tambin, sobre el
agua potable y el agua reactiva, que son ampliamente uti-
lizadas y tienen aplicacin directa en instalaciones farma-
cuticas, principalmente en procedimientos generales de
limpieza. As, son considerados los cinco tipos de agua a
continuacin, con relacin a sus caractersticas principales y
las sugerencias de aplicacin. Las monografas especficas,
cuando disponibles, detallan los parmetros de pureza esta-
blecidos para cada tipo.
Agua potable
Como directriz fundamental, el punto de partida para cual-
quier proceso de purificacin de agua para fines farmacu-
ticos es el agua potable. Esa es obtenida por tratamiento del
agua retirada de manantiales, por medio de procesos ade-
cuados para atender a las especificaciones de la legislacin
11
brasilea relativa a los parmetros fsicos, qumicos, micro-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
biolgicos y radioactivos, para un determinado estndar de
potabilidad y, por tanto, no posee monografa especfica en
ese compendio.
El agua potable es empleada, normalmente, en las etapas
iniciales de procedimientos de limpieza y como fuente de
obtencin de agua de ms alto grado de pureza. Puede ser
utilizada, tambin, en la climatizacin trmica de algunos
aparatos y en la sntesis de ingredientes intermediarios.
El control rigoroso y el mantenimiento de conformidad de
los parmetros de potabilidad del agua son fundamentales,
crticos y de responsabilidad del usuario del sistema de pu-
rificacin que ser alimentado. El control debe ser peridico
para garantizar que el sistema de purificacin utilizado est
apropiado para las condiciones de la fuente de alimentacin
y que no hubo alteracin en la calidad del agua suministra-
da. Sin embargo, la mayora de las aplicaciones requiere
tratamiento adicional del agua potable, sea por destilacin,
desionizacin, cambio inico, smosis reversa, aislados
o acoplados, u otro proceso adecuado para producir agua
purificada, libre de la interferencia de contaminantes que
puedan afectar la calidad de los medicamentos producidos.
Otra variante del agua potable es el agua reactiva, descrita a
continuacin, con carcter informativo, pues no posee mo-
nografa especfica.
Agua reactiva
Es producida por uno o ms procesos, como destilacin sim-
ple, desionizacin, filtracin, decloracin u otro, adecuado
a las caractersticas especficas de su uso. Generalmente el
agua reactiva es empleada en la limpieza de materiales y de
algunos equipos y en la fase final de la sntesis de ingre-
dientes activos y de excipientes. Tambin, tiene aplicacin
en el abastecimiento de equipos, autoclaves, bao- mara y
en histologa. Deben ser adoptadas medidas para evitar la
proliferacin microbiana en los puntos de circulacin, distri-
bucin y almacenamiento. Los principales parmetros que
caracterizan el agua reactiva son: conductividad de 1,0 a 5,0
S/cm (resistividad > 0,2 M -cm) y carbono orgnico total
(COT) < 0,20 mg/L.
Agua purificada (AP)
El agua purificada es producida a partir del agua potable o
del agua reactiva y debe atender a las especificaciones esta-
blecidas en la respectiva monografa. No contiene cualquier
otra sustancia adicionada. Es obtenida por una combinacin
de sistemas de purificacin, en una secuencia lgica, tales
como mltiple destilacin; cambio inico; smosis reversa;
electrodeionizacin; ultra filtracin, u otro proceso capaz de
atender, con la eficiencia deseada, a los lmites especificados
para los diversos contaminantes.
Es empleada como excipiente en la produccin de formas
farmacuticas no parenterales y en formulaciones magistra-
les, siempre que no haya ninguna recomendacin de pureza
superior en su uso o que no necesite ser pirognica. Tam-
bin, puede ser utilizada en el lavado de material, preparado
de soluciones reactivas, medios de cultivo, tampones, di-
luiciones diversas, microbiologa en general, anlisis clni-
cos, tcnicas por Elisa o radioinmunoensayo, aplicaciones
diversas en la mayora de los laboratorios, principalmente

en anlisis cualitativos o cuantitativos menos exigentes (de-
terminaciones en porcentaje). Es utilizada en los ensayos y
determinaciones que indiquen el empleo de agua, a no ser
que haya especificacin al contrario cuanto al nivel de pure-
za requerido, como por ejemplo, algunos mtodos analticos
instrumentales y anlisis que exijan agua pirognica o de pu-
reza qumica superior. Puede ser empleada en cromatografa
a lquido de alta eficiencia, cuando confirmado que su em-
pleo no afecta la exactitud ni la precisin de los resultados.
Dependiendo de la aplicacin, puede ser esterilizada, sin ne-
cesariamente alcanzar el lmite de endotoxinas bacterianas
establecido para el Agua para Inyectables.
Necesita monitoreo de conteo del total de organismos aerbi-
cos viables, en la produccin y almacenamiento, dado que no
posee ningn inhibidor de crecimiento adicionado. Mnima-
mente, est caracterizada por conductividad de 0,1 a 1,3 S/
cm a 25,0 C (resistividad > 1,0 M-cm) y COT < 0,50 mg/L,
endotoxinas < 0,25 UI de endotoxina/ml y conteo total de bac-
terias < 100 UFC/ml, a no ser que especificado de forma dife-
rente. Todo el sistema de obtencin; almacenamiento y distri-
bucin debe ser debidamente validado y monitoreado cuanto
a los parmetros de conductividad y conteo microbiano.
Aunque sea especificado un conteo microbiano mximo de
100 UFC/ml en la monografa, cada instalacin o instalacin
productiva deber establecer su lmite de alerta o de accin,
caso las caractersticas especficas de utilizacin sean ms
restrictivas, y definir lmites apropiados.
Agua ultrapurificada (A UP)
El agua ultrapurificada posee baja concentracin inica,
baja carga microbiana y bajo nivel de COT. Esa modalidad
de agua es requerida en aplicaciones ms exigentes, prin-
cipalmente en laboratorios de ensayos, para diluicin de
sustancias de referencia, en control de calidad y en la lim-
pieza final de equipos y utensilios utilizados en procesos
que entren en contacto directo con la muestra que requiera
agua con ese nivel de pureza. Es ideal para mtodos de
anlisis que exigen mnima interferencia y mxima pre-
cisin y exactitud. La utilizacin de agua ultrapurificada
en anlisis cuantitativos de bajos contenidos de analito es
esencial para obtencin de resultados analticos precisos.
Otros ejemplos de aplicacin del agua ultrapurificada son:
anlisis de residuos, entre ellos los trazos de elementos
minerales, endotoxinas, preparaciones de calibradores,
controles, sustancia qumica de referencia, espectrome-
tra de absorcin atmica en general, ICP/IOS, ICP/ MS,
espectrometra de masa, procedimientos enzimticos, cro-
matografa a gas, cromatografa a lquido de alta eficiencia
(determinacin de residuos en ppm o ppb), mtodos en bio-
loga molecular y con cultivo celular etc. Debe ser utilizada
en el momento en que es producida, o en el mismo da de
la recoleccin.
El laboratorio debe utilizar el mismo tipo de agua requeri-
da para la lectura final del anlisis en la preparacin de las
muestras, en la obtencin de la curva estndar, de controles,
preparado de soluciones, blancos, lavado final del material
y en todos los elementos de vidrio que estarn en contacto
directo con la muestra, siempre que sea apropiado.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 393
El agua ultrapurificada se caracteriza por conductividad de
0,055 a 0,1 a S/cm a 25,0 oC 0,5 oC (resistividad > 18,0
M-cm), COT < 0,05 mg/L (algunos casos < 0,03 mg/L),
endotoxinas < 0,03 UI de endotoxina/ml y conteo total de
bacterias < 1 UFC/100 ml.
Agua para Inyectables (API)
Agua para Inyectables es utilizada como excipiente en la
preparacin de productos farmacuticos parenterales de
pequeo y gran volumen, en la fabricacin de principios
activos de uso parenteral, de productos estriles, dems
productos que requieran el control de endotoxinas y no son
sometidos a la etapa posterior de eliminacin, as como en
la limpieza y preparacin de procesos, equipos y compo-
nentes que entran en contacto con las formas parentera-
les en la produccin de frmacos. Esa modalidad engloba,
tambin, el agua esterilizada para inyeccin, utilizada en la
administracin parenteral y el agua estril para inyeccin,
que es embalada en frasco hermtico y esterilizada por tra-
tamiento de calor.
El proceso de purificacin de primera eleccin es la des-
tilacin, en equipo cuyas paredes internas sean fabricadas
en metal apropiado, como el acero inoxidable AISI 316L,
vidrio neutro o cuarzo Alternativamente, el API, tambin,
puede ser obtenida por proceso equivalente o superior a
la destilacin para la eliminacin de contaminantes qumi-
cos y microorganismos, siempre que sea validado y moni-
toreado cuanto a los parmetros establecidos. El agua de
alimentacin debe ser, como mnimo, potable y, en gene-
ral, necesitar ser pre-tratada para alimentar los equipos.
El proceso es as especificado en razn de la robustez que
tales equipos presentan cuanto a la operacin y al desem-
peo.
El sistema de obtencin, distribucin y almacenamiento
del agua debe ser validado y apropiado, para impedir la
contaminacin microbiana y la formacin de endotoxinas
bacterianas. Debe atender los requisitos establecidos en la
monografa especfica. El control ser ms riguroso cuando
la aplicacin sea para inyectables, que no permiten la ocu-
rrencia de contaminacin microbiana, ni de endotoxinas. La
adicin de uno o ms agentes antimicrobianos al agua pu-
rificada estril origina a agua bacteriosttica estril, que es
empleada como diluyente de algunas preparaciones parente-
rales, embaladas en dosis individuales.
Otra variedad de agua es el agua de hemodilisis, que es
tratada para obtener la mxima reduccin de contaminantes
qumicos y microbiolgicos. Posee reglamento propio, con
especificaciones de calidad y periodicidad especficas para
el control, y no es contemplada en esta farmacopea.
El agua para inyectables debe atender a los ensayos fsico
qumicos aconsejados para el agua purificada, adems de
las pruebas de conteo total de bacterias < 10 UFC/ 100 ml,
esterilidad, particulados y de endotoxinas bacterianas, cuyo
valor mximo es de 0,25 UI de endotoxina/ml.
Algunos parmetros de calidad y sugerencias de aplicacio-
nes son registrados, en la Tabla 1, para cada tipo de agua
11
para uso farmacutico.
 11
Tabla 3 - Tabla 1 Tipos de agua para uso farmacutico y parmetros de calidad.
394

Tipo de Agua Caractersticas Parmetros crticos sugeridos Ejemplos de Aplicacin

Agua Potable Obtenida de manantiales o de la red de Posee legislacin especfica, Limpieza en general y fuente de alimentacin de sistemas de
distribucin pblica. tratamiento
Agua Reactiva Agua potable tratada por desionizacin o Conductividad de 1 a 5,0 S/cm a 25,0 C 0,5 Lavado de material, abastecimiento de equipos, autoclaves, bao
proceso. Posee baja exigencia de pureza C (resistividad > 0,2 M-cm) COT < 0,20 mg/L mara, histologa, usos diversos.
Agua purificad Niveles variables de contaminacin orgnica Conductividad de 0,1 a 1,3 S/cm a 25,0 C Produccin de medicamentos y cosmticos en general,
y bacteriana. Exige cuidados para evitar la 0,5C (resistividad > 1,0 M-cm); COT < 0,50 farmacias, lavado de material, preparado de soluciones reactivos,
contaminacin qumica y microbiolgica. mg/L; Conteo total de bacterias < 100 UFC/ml medios de cultivo, tampones, diluiciones, microbiologa en
Puede ser obtenida por smosis reversa o por Ausencia de Pseudomonas y otros patognicos, general, anlisis clnicos, tcnicas por Elisa, radioinmunoensayo,
una combinacin de tcnicas de purificacin agua aplicaciones diversas en la mayora de los laboratorios,
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

a partir de la potable o de la reactivo. principalmente en anlisis cualitativos o cuantitativos menos

exigentes (en %). En CLAE (en %).
Agua para Agua purificada tratada por destilacin o Atiende a los requisitos qumicos del agua Como vehculo o solvente de inyectables, fabricacin de
inyectables proceso y similar purificada exige control de endotoxina, partculas principios activos de uso parenteral, lavado final de equipos,
y esterilidad tubera y recipientes usados en preparaciones parenterales.
de. Conteo microbiolgico < 10UFC/100 ml. Usada como diluyente de preparaciones parenterales.
Endotoxinas < 0,25 UI de endotoxina/ml; COT <
0,50 mg/L
Agua Para anlisis que exigen mnima interferencia Conductividad de 0,055 a 0,1 S/cm a 25,0 C Dosificacin de residuos minerales u orgnicos, endotoxinas,
ultrapurificada y mxima precisin y exactitud. Baja 0,5 C preparaciones de calibradores, controles, SQR, espectrometra de
concentracin inica, baja carga microbiana (resistividad > 18,0 M-cm) absorcin atmica, ICP/IOS, ICP/MS, espectrometra de masa,
y bajo nivel de COT < 0,05 mg/L (algunos casos < 0,003 mg/L) procedimientos enzimticos, cromatografa a gas, CLAE (ppm o
carbono orgnico total. Conteo total de mesfilos < 1 UFC/100mL(se ppb), biologa molecular y cultivo celular etc. Eventualmente en
Agua purificada tratada por proceso utilizada para fines farmacuticos). preparaciones farmacuticas que requieren agua de alta pureza
complementario

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

_________
COT = Carbono orgnico total;
UFC/100 mL = Unidades formadoras de colnias; populao microbiolgica vivel

SISTEMAS DE PURIFICACIN DE AGUA TECNO-
LOGAS DE PURIFICACINLos proyectos, instala-
ciones y operacin de sistemas para produccin de agua
purificada, agua para inyectables y el agua ultrapurificada
poseen componentes, controles y procedimientos simi-
lares. La diferencia reside en la presencia del parmetro
endotoxinas bacterianas en el agua para inyectables y en
sus mtodos de preparacin, especficamente en la ltima
etapa. Esas similitudes de parmetros de calidad posibili-
tan establecer una base comn para el proyecto de sistemas
destinados a la obtencin de AP, API o AUP, siendo el pun-
to diferencial crtico, el grado de control del sistema y las
etapas finales de purificacin necesarias para retirar bacte-
rias, endotoxinas bacterianas y reducir la conductividad.
Los procesos de obtencin emplean operaciones unitarias
secuenciales las etapas de purificacin que estn centra-
das en la eliminacin de determinados contaminantes y en
la proteccin de etapas de purificacin subsiguientes. N-
tese que la operacin unitaria final para obtencin de agua
para inyectables es limitada a la destilacin u otro proceso
equivalente o superior, en la eliminacin de contaminantes
qumicos, as como microorganismos y sus componentes.
La tecnologa de destilacin es consagrada por su largo his-
trico de confiabilidad y puede ser validada para produccin
de agua para inyectables. Sin embargo, otras tecnologas o
combinacin de tecnologas pueden igualmente ser efectivas
y validadas para esa finalidad. La ultrafiltracin colocada
en una secuencia despus de otras tecnologas de purifica-
cin de contaminantes qumicos puede ser adecuada para
la produccin de agua para inyectables demostrar la misma
eficacia y confiabilidad de la destilacin, en la validacin.
Actualmente, con la disponibilidad de nuevos materiales
para tecnologas como smosis reversa y ultrafiltracin, lo
que permite operar y sanitizar en temperatura ms elevada,
para la reduccin microbiana, surgen nuevas y promisoras
aplicaciones validables para producir agua para inyectables.
El proyecto de instalacin de un sistema de purificacin de
agua debe tener en cuenta la calidad del agua de suministro
y del agua deseada al final, el caudal necesario, la distan-
cia entre el sistema de produccin y los puntos de uso, la
disposicin (layout) de la tubera y conexiones, el material
empleado, facilidades de asistencia tcnica y mantenimien-
to y los instrumentos adecuados para el monitoreo.
Las tecnologas de purificacin aqu descritas se destinan a
la eliminacin de contaminantes en las diversas etapas de
la secuencia de purificacin. La eleccin y la orden en que
son aplicadas dependern principalmente de la calidad del
agua potable de entrada, que determinar cuales etapas se-
rn necesarias efectivamente. Las principales tecnologas
son presentadas a continuacin en una orden secuencial l-
gica, sin embargo ni todas son necesariamente obligatorias
y son utilizadas conforme a la calidad del agua de entrada
y el tipo de agua que se busca obtener.
Pre-filtracin
Tambin, conocida como filtracin de profundidad o filtra-
cin inicial, se destina a retirar contaminantes particulados
en la banda de tamao entre 5 y 10 m, esencialmente para
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 395
proteger las tecnologas subsiguientes, utilizando filtros de
arena o combinacin de filtros.
Adsorcin por carbn vegetal activado
Esa tecnologa emplea la capacidad de adsorcin del car-
bn vegetal activado en contacto con compuestos org-
nicos o contaminantes, como las cloraminas. Adems de
eso, remueve agentes oxidantes por reduccin qumica, en
especial el cloro libre, que afecta otras tecnologas basadas
en membrana, como la smosis reversa o la ultrafiltracin.
La retirada de agentes desinfectantes propicia el crecimien-
to bacteriano y la formacin de biopelcula, lo que implica
en la necesidad de sanitizacin del propio carbn activado,
con vapor directo o agua caliente, por ejemplo, y del con-
trol de partculas y conteo microbiano de su efluente.
Tratamiento con aditivos qumicos
El uso de aditivos qumicos se refiere aquellos que se desti-
nan a ajustar el pH o a retirar carbonatos y amonaco, para la
proteccin de otras tecnologas, entre ellas la smosis reversa.
Como aditivos qumicos pueden ser empleados: el ozono,
comnmente usado en el control de microorganismos y el
metabisulfito, aplicado como agente reductor para cloro li-
bre, en sustitucin al carbn vegetal activado.
Los aditivos qumicos son, necesariamente, retirados en
alguna etapa posterior de purificacin y no pueden dejar
residuo en el agua final.
Tratamiento con ablandadores
En los casos en que el agua de alimentacin es dura, se
torna necesario usar los ablandadores. Esa tecnologa em-
plea resinas regeneradoras de cambio inico, que capturan
los iones calcio y magnesio, y liberan iones sodio en la agua.
El ablandamiento es utilizado en la proteccin de tecnolo-
gas sensibles a la incrustacin, como la smosis reversa.
Aqu, tambin, existe la preocupacin con la formacin de
biopelcula y es necesario controlar el conteo microbiano,
con regeneracin frecuente, recirculacin u otras formas de
reduccin de conteo microbiano.
Desionizacin y electrodeionizacin continua
La desionizacin y la electrodeionizacin continua son tec-
nologas eficaces para la eliminacin de sales inorgnicas di-
sueltas. Los sistemas de desionizacin, tambin, conocidos
como desionizacin convencional, producen agua purifica-
da de uso rutinario, por medio de resinas de cambio inico
especficas para cationes o para aniones. Son polmeros or-
gnicos, generalmente sulfonados, en la forma de pequeas
partculas. Las resinas catinicas capturan los iones liberan-
do el ion H+ en la agua y las aninicas liberan OH-. Son re-
generables con cidos y bases, respectivamente. Ese proceso
aislado no produce agua de alta pureza, por haber fuga de
pequeos fragmentos de la resina, facilidad de crecimiento
11
microbiano y por haber baja eliminacin de orgnicos.
 396 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Los sistemas de electrodeionizacin continua combinan re-
sinas catinicas y aninicas con membranas semipermea-
bles y la aplicacin de un campo elctrico, promoviendo
as la eliminacin de iones de forma continua, eso es, sin
necesidad de parada para regeneracin.
En ambos los casos es necesario tener un control sobre la
generacin de partculas derivado de las regeneraciones
sucesivas, adems de microorganismos. Eso puede ser rea-
lizado, controlndose las regeneraciones, en el caso de la
desionizacin, utilizndose recirculacin del agua y apli-
cndose radiacin UV para el control de microorganismos
en la salida, cuya eficacia precisa ser comprobada.
smosis reversa
La smosis reversa es una tecnologa de purificacin ba-
sada en membranas semi permeables y con propiedades
especiales de eliminacin de iones; microorganismos y
endotoxinas bacterianas. Remueve 90 a 99% de la mayo-
ra de los contaminantes. No obstante, diversos factores,
como pH; presin diferencial a lo largo de la membrana;
temperatura; tipo del polmero de la membrana y la propia
construccin de los cartuchos de smosis reversa pueden
afectar significativamente esa separacin.
Las membranas de smosis reversa deben ser debidamente
controladas cuanto a la formacin de incrustaciones pro-
venientes de sales de calcio, magnesio y otros, y de bio-
pelcula, fuente crtica de contaminacin microbiana y de
endotoxinas. Por eso es imprescindible instalar un sistema
de pre-tratamiento antes de la smosis reversa, que retire
partculas y agentes oxidantes, y, en paralelo, debe hacerse,
peridicamente, la sanitizacin del sistema. Esa prctica
ayuda a aumentar la vida til de las membranas y reduce la
frecuencia de su regeneracin.
Existen, tambin, los sistemas de smosis reversa de do-
ble paso, en que el agua purificada por la primera etapa
alimenta la segundo etapa, incrementando y complemen-
tando la purificacin.
Ultrafiltracin
Sistemas de ultrafiltracin son frecuentemente utilizados
en sistemas de agua para uso farmacutico, para la eli-
minacin de endotoxinas. La ultrafiltracin es realizada
utilizndose una membrana especial con la propiedad de
retener molculas conforme su peso molecular y estereo-
qumica. Se denomina de Corte Nominal de Peso Mole-
cular cut off la banda utilizada para la separacin de las
partculas, caracterizado por el tamao del peso molecular.
En la eliminacin de endotoxinas son utilizados filtros en
la banda de 10 000 De la, que retiene molculas con masa
molecular, mayor o igual a 10 000 Da.
Esa tecnologa puede ser usada en una etapa final o interme-
diaria del sistema de purificacin, siempre que validada, y, de
la misma forma que la smosis reversa, requiere un pre-trata-
miento, un control adecuado de las condiciones operacionales
y procedimientos apropiados de limpieza y sanitizacin, para
11
mantener la calidad del agua conforme lo establecido.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Filtracin con carga electrosttica
Ese tipo de filtracin emplea cargas positivas en la super-
ficie de las membranas y se destina a reducir los niveles
de endotoxinas que poseen naturaleza elctrica negativa.
Presentan una capacidad marginal de eliminacin de mi-
croorganismos, sin embargo su mayor eficiencia es debido
a la eliminacin de endotoxinas. Presenta una limitacin
importante: cuando las cargas estn totalmente neutraliza-
das, por saturacin por la captura de las endotoxinas, la
eliminacin se paraliza. Por esa razn, filtros con carga
electrosttica son extremamente difciles de validar, dada
esa imprevisibilidad, cuanto al momento en que efectiva-
mente no ms retiene esos contaminantes.
Microfiltracin retencin de microorganismos
Esa tecnologa utiliza membranas microporosas, con una
especificacin de tamao de poro de 0,2, o 0,22 m. Deben
ser validadas cuanto a la retencin, por medio de una prue-
ba bacteriolgica, que determina el valor de la reduccin
logartmica de los microorganismos en las membranas. El
modelo usado actualmente emplea una suspensin de Bre-
vundimonas diminuta a 107 UFC/cm2 de rea filtrante, y
prueba la esterilidad del filtrado. Aunque la membrana sea
especificada como 0,2 o 0,22 m de tamao de poro, no
necesariamente ser esterilizante, si no produce un filtrado
estril por medio de esa prueba, o sea, un valor de reduc-
cin logartmica igual a 7. En el caso que la reduccin lo-
gartmica obtenida no sea de siete, la membrana puede ser
utilizada para reducir la flora microbiana, sin embargo no
sirve para esterilizar.
La microfiltracin es aplicada, igualmente, en la filtracin
de gases, o ventilacin de tanques de almacenamiento, para
evitar contaminacin del agua en ellos contenida. En esos
casos, se utilizan membranas hidrofbicas, para que el fil-
tro opere sin acumulacin de agua condensada, a partir de
la humedad del propio aire.
Radiacin ultravioleta (UV)
La radiacin UV es utilizada en sistemas de purificacin
de agua en dos largos de onda: 185 nm + 254 nm, que pro-
mueven dos efectos:
185 nm + 254 nm Oxidacin de compuestos orgni-
cos y consecuente reduccin de su concentracin, para
atender a los lmites de la AP, AUP y API;
254 nm Accin germicida en los diversos puntos de
la secuencia de purificacin, donde es necesario reducir
el conteo microbiano.
Para la oxidacin de orgnicos el agua debe estar en la etapa
final de la purificacin, y esa eliminacin ser ms efectiva
cuanto menor sea la carga de contaminantes. Otra limita-
cin es la presencia de partculas, que se pueden depositar
en la superficie de la lmpara, disminuyendo la intensidad
de la radiacin, y perjudicar la eficiencia del mtodo. Se
debe considerar adems la profundidad / espesor del lecho
de agua, el flujo de agua en el local de la radiacin y la
potencia y tiempo de uso de la fuente de radiacin.

Destilacin
En instalaciones industriales puede haber destiladores sim-
ples, de mltiples efectos y los de compresin de vapor, que
son usados, en general, para sistemas de produccin de gran-
des volmenes. El agua de alimentacin para esos equipos
requiere controles diferentes de aquellos usados en smosis
reversa. En ese caso, la concentracin de silicatos es crtica,
como en cualquier sistema de generacin de vapor. Otro as-
pecto importante es la posibilidad de acarreamiento de com-
puestos voltiles en el condensado. Eso es especialmente
importante en lo que se refiere a impurezas orgnicas, como
trihalometanos y gases disueltos en la agua, como dixido
de carbono y amonaco. As, el control del agua potable de
entrada, conforme mencionado sobre el agua de alimenta-
cin para sistemas de purificacin, es fundamental.
DISTRIBUCIN, SANITIZACIN,
ALMACENAMIENTO Y VALIDACIN
Distribucin
El diseo del sistema de distribucin debe tener en cuenta
la recirculacin constante del agua purificada y el manteni-
miento de la temperatura del agua contenida en el tanque.
Caso necesario, deber contar con un regulador de calor
para suministrar agua ms fra a los puntos de uso.
Tuberas, vlvulas, instrumentos y otros dispositivos deben
tener construccin y acabado sanitario, para no contribuir
para que ocurra la contaminacin microbiana y ser saniti-
zados.
No deben ser utilizados filtros de retencin microbiolgica
en la salida, o en el retorno de los sistemas de distribucin,
pues son repositorios de microorganismos retenidos y, por
tanto, una fuente crtica para la formacin de endotoxinas.
Los puntos de uso deben ser proyectados para evitar vol-
menes muertos y posibilitar que el agua recircule totalmen-
te en ellos cuando estn cerrados.
Sanitizacin
Diversos son los mtodos de sanitizacin de los sistemas
de produccin, almacenamiento o distribucin
El material de construccin del sistema debe ser resistente
a los agentes empleados y la temperatura utilizada en el
proceso es crtica. Es comn utilizar temperaturas de 80 C
o de 65 C, con circulacin continua del agua. Sin embar-
go, para impedir la formacin de biopelculas normalmente
es empleada una combinacin de calor y agentes qumicos
en la sanitizacin. El procedimiento de sanitizacin debe
ser debidamente validado.
Como agentes qumicos, generalmente son usados oxidan-
tes, como los compuestos halogenados, perxido de hidr-
geno, ozono o una combinacin de esos. La frecuencia de
la sanitizacin es determinada por el histrico de los resul-
tados del monitoreo y de las curvas de tendencia, de forma
que el sistema funcione sin exceder el lmite de alerta.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 397
Almacenamiento
Las condiciones de almacenamiento deben ser adecuadas
a la calidad del agua. El agua ultrapurificada no debe ser
almacenada por perodo superior a 24 horas.
La directriz fundamental para el almacenamiento del agua
purificada, del agua ultrapurificada, o del agua para inyec-
tables es tener en cuenta que, cuanto mayor el grado de
purificacin del agua, ms rpidamente ella tiende a recon-
taminarse.
Siendo as, el agua debe ser mantenida en recirculacin
constante, por medio de su sistema de distribucin, siem-
pre que sea aplicable. Las primeras porciones de agua pro-
ducida por un sistema de purificacin que haya quedado
inactivo por ms de cuatro horas deben ser descartadas,
proporcionalmente al volumen muerto del recipiente. Esas
variables deben ser validadas, para las condiciones espec-
ficas de cada sistema, as como, establecidos los parme-
tros a ser evaluados en la validacin.
El depsito utilizado para su mantenimiento debe ser apro-
piado a los fines a que se destina, compuesto por material
inerte, limpio y no servir de fuente de contaminacin al
contenido. El material de construccin debe presentar ca-
ractersticas y rugosidad apropiadas para dificultar la ad-
herencia de residuos, la formacin de biopelcula y corro-
sin por los agentes sanitizantes. El acero inoxidable 316L
electropulido, con rugosidad menor que 0,5 microRA, es la
eleccin ms frecuente para atender a esas exigencias. El
depsito debe estar protegido de fuentes de luz y calor im-
propios y la geometra debe permitir su agotamiento total
por el fondo, sin volmenes muertos.
Procedimientos adecuados deben ser adoptados para evitar
la contaminacin por particulados, orgnicos o microorga-
nismos. Debe poseer un filtro de respiracin / ventila-
cin para evitar que haya contaminacin del volumen del
tanque por la admisin de aire / humedad, contaminados y
evitar una recontaminacin por esa va.
En particular, pero no exclusivamente, depsitos de agua
para inyectables deben ser encamisados, para mantener el
agua circulante en temperatura superior a 80 C, que res-
tringe significativamente el crecimiento bacteriano.
Validacin
El propsito fundamental de la validacin es asegurar la
confiabilidad de un sistema de purificacin de agua, en-
volviendo su obtencin, almacenamiento, distribucin y
calidad en el punto de uso.
La validacin incluye la calificacin del proyecto (QP); de
la instalacin (QI); de la operacin (QO) y del desempeo
(QD).
El plano de validacin para un sistema de agua envuelve
las siguientes etapas:
11
 398 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
a) conocer el estndar de calidad de la fuente de alimen-
tacin;
b) establecer el estndar de calidad del agua purificada;
c) definir las tecnologas de purificacin y su secuencia, a
partir de la calidad del agua de entrada;
d) seleccionar los materiales de construccin de los sis-
temas de produccin, almacenamiento, distribucin y
monitoreo de los puntos de uso;
e) desarrollar los protocolos de calificacin de proyecto,
instalacin, operacin y desempeo;
f) establecer los parmetros crticos, niveles de alerta y de
accin y la periodicidad de sanitizacin y de monitoreo;
g) establecer un plan de mantenimiento de la validacin,
que incluir mecanismos para el control de cambios en
los sistemas de agua y proporcionar subsidios para un
programa de mantenimiento preventivo.
Los protocolos de calificacin deben estar previamente
aprobados antes de su ejecucin.
MONITOREO DE LA CALIDAD DEL AGUA
El proceso empleado en la produccin de agua para uso
farmacutico debe ser validado y, sistemticamente, los pa-
rmetros establecidos en la legislacin y en las monogra-
fas especficas de cada tipo de agua deben ser verificados.
El monitoreo de la calidad del agua debe envolver todos
los puntos crticos y representativos del sistema, de acuer-
do con el planeamiento establecido, de forma consistente
y continua.
As, deben ser establecidos procedimientos operacionales
y de sanitizacin, un programa de monitoreo completo,
con mantenimiento preventivo y un sistema de control de
cambios, que determine cuidadosamente si el sistema ne-
cesitar ser revalidado despus de cualquier modificacin.
Las cuestiones temporales que pueden afectar la calidad
del agua de la fuente de suministro deben ser consideradas
en la elaboracin del plan. La frecuencia de recoleccin de
las muestras es definida en la validacin del sistema, as
como los ensayos necesarios para garantizar el manteni-
miento de la calidad del agua requerida. Cualquier altera-
cin en el plan original debe ser re evaluada.
Los equipos y aparatos utilizados en las verificaciones de-
ben ser capaces de suministrar la lectura en la banda re-
querida para la pureza establecida. Los equipos utilizados
deben estar debidamente calibrados. Las verificaciones
realizadas deben ser registradas en formulario propio, en
que conste, por lo menos, el(los) parmetro(s) medido(s),
la fecha de la medicin, el valor obtenido, la banda de
aceptacin y el responsable de la lectura. El personal que
realiza esa tarea debe conocer el plan de muestreo y los
mtodos utilizados, as como los lmites de alerta y de ac-
cin establecidos. Caso el usuario externalice ese control,
debe garantizar que el De acuerdo con definicin de la
OMS, estndares de referencia farmacopeicos (PRef) son
productos de uniformidad reconocida, destinados al uso en
ensayos donde una o ms de sus propiedades ser(n) com-
11
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
parada(s) con la(s) de la sustancia en examen. Poseen un
grado de pureza adecuado al uso al cual se destinan.
El PRef es establecido y distribuido por autoridades far-
macopeicas, cuyo valor atribuido a una o ms de sus pro-
piedades es aceptado sin necesitar comparacin con otro
estndar, destinado al uso en ensayos especficos descri-
tos en las monografas farmacopeicas. Incluyen sustancias
qumicas de referencia, productos biolgicos, extractos y
polvos vegetales, radiofrmacos, entre otros. La expresin
relacionada ms usada es: Sustancia Qumica de Referen-
cia Farmacopeica. Es establecida y distribuida por autori-
dades respectivo cumpla con los requisitos y procedimien-
tos definidos.
Los datos obtenidos son comparados con las especificacio-
nes tpicas y los lmites de alerta y de accin. Esos son es-
tablecidos por el usuario, que conoce tanto el histrico del
sistema de purificacin y distribucin, como las exigencias
de calidad para una determinada aplicacin, y basado en la
validacin.
En la mayora de las aplicaciones, el monitoreo del agua
de uso farmacutico se basa en el control microbiolgico
y en los parmetros que aseguren el mantenimiento de la
calidad del agua deseada. En general, no es necesario iden-
tificar los microorganismos presentes, pero si, proceder al
conteo total de bacterias, por medio de mtodo adecuado
para cubrir una amplia gama de organismos. Muestras con-
teniendo agentes sanitizantes deben ser neutralizadas antes
de proceder al anlisis. Los ensayos microbiolgicos deben
ser realizados despus de corto intervalo de tiempo de la
recoleccin de la muestra, o esa deber ser refrigerada ade-
cuadamente y por tiempo determinado, para preservar las
caractersticas originales.
El monitoreo fsico-qumico acompaa, principalmente,
la conductividad y el carbono orgnico total, que tambin
pueden ser medidos en lnea. Esos ensayos abarcan una
amplia gama de contaminantes inorgnicos. En el caso que
la muestra no sea analizada luego de la recoleccin, debe
ser preservada y almacenada en condiciones que garanti-
cen su integridad y conservacin y por perodo adecuado.
Dependiendo de la aplicacin requerida los parmetros cr-
ticos a ser monitoreados pueden variar.
El usuario debe definir los lmites de alerta y de accin,
para evitar la utilizacin del producto con especificacin
de calidad inferior a la requerida para una dada aplicacin.
El lmite de alerta indica un aviso de desvo de la calidad y
no necesariamente requiere una medida correctiva. Puede
ser establecido con base en un anlisis estadstico del his-
trico de tendencias, utilizando dos desvos-estndar, por
ejemplo, o cerca de 70% del lmite de accin, o a 50%
del conteo del nmero de unidades viables, lo que fuese
menor. El lmite de accin indica que el desvo de la cali-
dad excedi los parmetros tolerables y requiere interrup-
cin de la actividad para la correccin farmacopeicas, y es
ampliamente reconocida como teniendo grado de pureza
apropiado, dentro de un contexto especfico y cuyo valor,
cuando utilizado como referencia analtica, es aceptado sin
requerir comparacin con otra sustancia qumica.

12 SUSTANCIAS QUMICAS DE REFERENCIA
De acordo com definio da OMS, padres de referncia
farmacopeicos (PRef) so produtos de uniformidade re-
conhecida, destinados ao uso em ensaios onde uma ou mais
de suas propriedades ser(o) comparada(s) com a(s) da
substncia em exame. Possuem um grau de pureza adequa-
do ao uso ao qual se destinam.
O PRef estabelecido e distribudo por autoridades farma-
copeicas, cujo valor atribudo a uma ou mais de suas pro-
priedades aceito sem necessitar comparao com outro
padro, destinado ao uso em ensaios especficos descritos
nas monografias farmacopeicas. Incluem substncias qu-
micas de referncia, produtos biolgicos, extratos e ps
vegetais, radiofrmacos, entre outros. A expresso rela-
cionada mais usada : Substncia Qumica de Referncia
Farmacopeica. estabelecida e distribuda por autoridades
farmacopeicas, e amplamente reconhecida como tendo
grau de pureza apropriado, dentro de um contexto especfi-
co e cujo valor, quando utilizado como referncia analtica,
aceito sem requerer comparao com outra substncia
qumica.
SUSTANCIA QUMICA DE REFERENCIA DE LA
FARMACOPEA BRASILEA (SQR-FB)
Es establecida y distribuida por la Direccin de la Far-
macopea Brasilea, siguiendo los principios de la OMS,
y oficializada por la Anvisa, siendo su uso obligatorio en
todo territorio nacional. En la ausencia de una SQR-FB es
permitido el uso de SQR establecida por otras farmacopeas
reconocidas, conforme legislacin vigente.
SUSTANCIA QUMICA DE TRABAJO
Es establecida por comparacin con una SQR Farmacopei-
ca, por medio de ensayos farmacopeicos, o debidamente
validados, y registrados por el propio laboratorio que ir
a utilizarla. En esa situacin, debern ser mantenidos los
registros analticos y realizados controles peridicos, em-
plendose una SQR Farmacopeica.
SUSTANCIA QUMICA CARACTERIZADA
SQR utilizada en la inexistencia de una SQR Farmacopei-
ca. Esa SQR debe ser caracterizada por medio de ensayos
adecuados y los valores obtenidos deben ser debidamente
documentados.
ASPECTOS GENERALES DE LAS SUSTANCIAS
QUMICAS DE REFERENCIA DE LA FARMACOPEA
BRASILEA (SQR-FB)
Las Sustancias Qumicas de Referencia de la Farmacopea
Brasilea (SQR-FB) son estndares de referencia farma-
copeicos, cuya produccin est bajo la coordinacin del
Comit Tcnico Temtico de Material de Referencia (CTT
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
399
a
12
Farmacopea Brasilea, 5 edicin
MR) de la Farmacopea Brasilea, en consonancia con
las directrices de la Comisin de la Farmacopea Brasilea.
Las SQR-FB son establecidas y monitoreadas de acuer-
do con los principios de la OMS, con la colaboracin de
laboratorios pblicos y privados, por medio de estudios
interlaboratoriales que utilizan un protocolo analtico pre-
viamente desarrollado y validado, originando un producto
de elevada calidad, cuyo valor atribuido a una o ms de sus
propiedades fsicas y/o qumicas no necesita comparacin
con otra SQR.
Mtodos analticos utilizan, frecuentemente, equipos so-
fisticados para facilitar la precisin y rapidez del proce-
dimiento utilizado, basndose en medidas relativas, que
necesitan de estndares de referencia para obtencin de los
resultados.
Las SQR-FB son desarrolladas para auxiliar en la ejecu-
cin de ensayos descritos en las monografas de la FB. Su
grado de pureza puede variar de acuerdo con el ensayo al
cual se destina. El valor declarado es especfico para el en-
sayo descrito en la FB.
Las SQR-FB deben ser almacenadas y manipuladas ade-
cuadamente a fin de obtener resultados confiables cuando
utilizadas. Deben ser almacenadas en los frascos origina-
les, cerrados y en condiciones de temperatura y humedad
de acuerdo con las especificaciones constantes en el rtulo
y/o certificado de anlisis.
Las cantidades suministradas en cada frasco de SQR-FB
son adecuadas para un determinado nmero de anlisis,
a fin de evitar problemas con la exposicin excesiva del
material. Sin embargo, las cantidades y su valor destinan
estimular el uso directo de SQR-FB, sin la necesidad del
establecimiento de estndares derivados.
Cuando indicada a secado del material antes del uso, ese
procedimiento nunca ser realizado en su embalaje origi-
nal, pero s transfiriendo parte del material para otro reci-
piente. Despus del uso, el material desecado no debe ser
retornado al frasco original, evitando posibles contamina-
ciones.
La validez de determinado lote debe ser acompaada por
el usuario a travs de la pgina web de la Farmacopea Bra-
silea en internet, que informar el lote vigente, la retirada
de lotes en uso y la disponibilidad de nuevos lotes. En esta
pgina web constan, tambin, las informaciones para la
adquisicin de los estndares de referencia farmacopeicos.
12 400 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


13 SUSTANCIAS COLORANTES
Sustancia colorante es cualquier compuesto orgnico o in-
orgnico, natural o sinttico que, independiente de poseer
o no actividad farmacolgica, es adicionado a las formas
farmacuticas con la finalidad nica de colorearlas o de al-
terar su color original.
Las sustancias colorantes utilizadas son de dos tipos:
colorantes;
pigmentos.
La diferencia bsica entre pigmentos y colorantes est en el
tamao de partcula y en la solubilidad en el medio en que
es insertado. Los pigmentos poseen, en el general, tamao
de partcula mayor y son insolubles en agua, mientras que
colorantes son molculas solubles en agua. Puede afirmar-
se que los colorantes son empleados en soluciones y los
pigmentos en suspensiones. Adems de eso, los pigmentos
tienen mayor estabilidad qumica y trmica que los colo-
rantes.
La solubilidad del colorante puede ser determinada por la
presencia de ciertos grupos qumicos en la estructura del
compuesto, los cuales pueden ocasionar las diferenciacio-
nes entre pigmentos y colorantes.
Los colorantes utilizados son, en su mayora, de origen sin-
ttico y pueden ser, de modo general, clasificados en uno
de los siete grupos qumicos, descritos a continuacin:
Grupo Indigoide;
Grupo Xantina;
Grupo Azo;
Grupo Nitro;
Grupo Trifenilmetano;
Grupo Quinolina;
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 401
Grupo Antraquinona; 13
Los colorantes tambin pueden ser subdivididos en colo-
rantes azoicos (los que contienen agrupamientos -N=N-) y
no azoicos (que pertenecen a una amplia variedad de clases
qumicas). La mayora de los colorantes de uso ms fre-
cuente es del tipo no azoico, siendo la eritrosina, el ndigo /
carmn y el amarillo de quinolina los tres ms ampliamente
conocidos.
De los pigmentos, dos son los tipos utilizados: xido de
hierro (negro, rojo y amarillo), y dixido de titanio, que
es blanco y tambin es empleado en el revestimiento de
comprimidos, para prevenir la fotodegradacin de compo-
nentes de la formulacin sensibles a la luz, o adems, para
obtener envoltorios de cpsulas opacos.
Los colorantes pueden ser clasificados, de acuerdo con el
Food and Drug Administration (FDA) en:
colorantes designados como FD&C pueden ser em-
pleados en alimentos, medicamentos y cosmticos;
colorantes designados como D&C son autorizados para
uso en medicamentos y cosmticos;
colorantes D&C de uso externo presentan empleo res-
tricto a los medicamentos y cosmticos aplicados ex-
ternamente;
A los medicamentos destinados a la aplicacin por va oral,
rectal, vaginal o cutnea pueden ser aadidas sustancias
colorantes constantes de la relacin a continuacin (Tabla
1) o de la mezcla de estas sustancias en los casos y en canti-
dades compatibles con las buenas prcticas de fabricacin
farmacutica. Las sustancias colorantes empleadas deben
satisfacer las exigencias descritas en las respectivas mo-
nografas.
 13
Tabla 1 - Relacin de colorantes permitidos.
402

Referecia
Color Referencia
Color Sustancia CAS Sinnimo Denominacin en ingls Descripcin (IUPAC) Unin Usos, restricciones y requisitos
index 21 CFR
Europea
AMARILLO AMARILLO 2783-94-0 AMARILLO 6 FD&C YELLOW #6 DISODIUM (5E)-6-OXO-5- 15985 741706 E110 Utilizado en alimentos, cosmticos
CREPSCULO INS 110 [(4-SULFONATOPHENYL) y medicamentos en general. No
HYDRAZINYLIDENE] permitida la utilizacin en el rea
NAPHTHALENE-2-SULFONATE de los ojos, en suturas quirrgicas y
formas farmacuticas inyectables.

AMARILLO AMARILLO 15790-07-5 AMARILLO 6 LACA DE FD&C YELLOW #6 ALUMINUM 6-OXIDO-5- 15985:1 741706 E110 Utilizado en alimentos, cosmticos
CREPSCULO, ALUMINIO ALUMINUM LAKE (4-SULFONATOPHENYL) y medicamentos en general. No
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

LACA DE INS 110 DIAZENYLNAPHTHALENE- permitida la utilizacin en el rea

ALUMINIO 2-SULFONATE de los ojos, en suturas quirrgicas y
formas farmacuticas inyectables.

AMARILLO AMARILLO DE 8004-92-0 AMARILLO 10 D&C YELLOW #10; 2-(2-QUINOLYL)-l,3- INDANDIONE 47005 741710 E104 Utilizado en cosmticos y
QUINOLINA QUINOLINE YELLOW DISULFONIC ACID DISODIUM medicamentos en general. No
SALT permitida la utilizacin en el rea
de los ojos, en suturas quirrgicas y
formas farmacuticas inyectables.
AMARILLO AMARILLO DE 68814-04-0 AMARILLO 10 LACA D&C YELLOW #10 ALUMINUM ;2-(2-QUINOLYL 47005:1 741710 E104 Utilizado en cosmticos y
QUINOLINA, DE ALUMINIO ALUMINUM LAKE; )- 1,3-INDANDIONE DISULFONIC medicamentos en general. No
LACA DE QUINOLINE YELLOW ACID DISODIUM SALT permitida la utilizacin en el rea
ALUMINIO ALUMINUM LAKE de los ojos, en suturas quirrgicas y
formas farmacuticas inyectables.

AMARILLO AMARILLO DE 92874-95-8 AMARILLO 11 D&C YELLOW # 11 2-QUINOLIN-2-YLINDENE- 4700 741711 N/C Utilizado en cosmticos y
QUINOLINA 1,3-DIONE medicamentos de aplicacin tpica.
SOLUBLE No permitida la utilizacin en el rea
de los ojos, en suturas quirrgicas y
formas farmacuticas inyectables.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

AMARILLO AMARILLO 6417-85-2 FLUORESCENA; D&C YELLOW # 7; 3,6-DIHYDROXYSPIRO[2- 45350:1 741707 N/C Utilizado en cosmticos y
FLUORESCENA AMARILLO 7 FLUORESCEINE BENZOFURAN-3,9- XANTHENE]-1 medicamentos de aplicacin tpica.
-ONE No permitida la utilizacin en el rea
de los ojos, en suturas quirrgicas y
formas farmacuticas inyectables.
 Tabla 1 (continuacin)

Referecia
Color Referencia
Color Sustancia CAS Sinnimo Denominacin en ingls Descripcin (IUPAC) Unin Usos, restricciones y requisitos
index 21 CFR
Europea
AMARILLO CURCUMINA 458-37-7 AMARILLO TURMERIC (1E,6E)-1,7-BIS(4-HYDROXY-3- 75300 73615 E100 Permitidas para todos los tipos de
CURCUMINA; OLEORESIN METHOXYPHENYL) HEPTA- l,6- productos, incluyendo alimentos
CRCUMA DIENE-3,5-DIONE

AMARILLO XIDO DE 51274-00-1 XIDO DE YELLOW IRON XIDOS DE HIERRO OBTENIDOS 77492 731200 E172 Utilizado en medicamentos de
HIERRO HIERRO OXIDE POR SNTESIS, INCLUSIVE administracin oral (no excediendo
AMARILLO AMARILLO SUS FORMAS HIDRATADAS O dosis diaria de 5 mg de Fe) y uso
COMBINACIONES DE MS DE UN tpico No permitido en el rea de los
DE ESTOS XIDOS ojos, en suturas quirrgicas y formas
farmacuticas inyectables.
AMARILLO RIBOFLAVINA 83-88-5 VITAMINA B2 RIBOFLAVIN 7,8-DIMETHYL-10-[(2S,3S,4R)- N/C 73450 E101 Permitidas para todos los tipos de
LACTOFLAVINA 2,3,4,5-TETRAHYDROXYPENTYL] productos, incluyendo alimentos
BENZO[G]PTERIDINE-2,4-DIONE

AMARILLO TARTRAZINA 1934-21-0 AMARILLO DE FD&C YELLOW #5 TRISODIUM (4E)-5-OXO-l- 19140 741705 E102 Utilizado en alimentos, cosmticos
TARTRAZINA; (4-SULFONATOPHENYL) y medicamentos de uso externo e
AMARILLO 5 -4-[(4-SULFONATOPHENYL) interno. No permitido en el rea de
INS 102 HYDRAZINYLIDENE] PYRAZOLE los ojos, en suturas quirrgicas y
-3-CARBOXYLATE formas farmacuticas inyectables.

AMARILLO TARTRAZINA, 12225-21-7 AMARILLO DE FD&C YELLOW #5 ALUMINUM; 4-[[3-CARBOXY- 19140:1 741705 E102 Utilizado en alimentos, cosmticos
LACA DE TARTRAZINA LACA ALUMINUM LAKE 5-OXO-1 -(4-SULFOPHENYL)- y medicamentos de uso externo e

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

ALUMINIO DE ALUMINIO; 4H-PYRAZOL-4-YL]DIAZENYL]
AMARILLO 5 LACA DE BENZENESULFONATE;
ALUMINIO INS 103 4-[[3-CARBOXY-5-OXO-
l-(4-SULFOPHENYL)-4H-
PYRAZOL-4-YL] DIAZENYL]
BENZENESULFONATE
AZUL AZUL 3844-45-9 AZULN. 1 INS 133 FD&C BLUE #1 DISODIUM 2-[[4-[ETHYL-[(3-
BRILLANTE SULFONATOPHENYL) METHYL]
AMINO]PHENYL]-[4-[ETHYL-
[(3-SULFONATOPHENYL)
METHYL] AZANIUMYLIDENE]
CYCLOHEXA-2,5-DIEN-
interno. No permitido en suturas
quirrgicas y formas farmacuticas
inyectables.
42090 741101 E133 Utilizado en medicamentos de uso
externo e interno cosmticos y
alimentos. No permitido en el rea
de los ojos, en suturas quirrgicas y
formas farmacuticas inyectables.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

1-YLIDENE] METHYL]
BENZENESULFONATE
403

13
 13
Tabla 1 (continuacin)
404

Referecia
Color Referencia
Color Sustancia CAS Sinnimo Denominacin en ingls Descripcin (IUPAC) Unin Usos, restricciones y requisitos
index 21 CFR
Europea
AZUL AZUL 68921-42-6 AZULN.l LACA DE FD&C BLUE #1 3-[[ETHYL-[4-[[4-[ETHYL-[(3- 42090:2 741101 E133 Utilizado en medicamentos de uso
BRILLANTE, ALUMINIO INS 133 ALUMINUM LAKE SULFOPHEN YL )METHYL] externo e interno cosmticos y
LACA DE AMINO]PHENYL]-(2- alimentos. No permitido en suturas
ALUMINIO SULFOPHENYL) METHYLIDENE] quirrgicas y formas farmacuticas
CYCLOHEXA-2,5-DIEN-l- inyectables.
YLIDENE] AZANIUMYL]
METHYL] BENZENESULFONATE
AZUL AZUL DE 860-22-0 AZULN. 2; FD&C BLUE #2 DISODIUM (2E)-3-OXO-2- (3-OXO- 73015 741102 E132 Utilizado en alimentos, cosmticos y
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

INDIGOTINA INDIGOTINA; NDIGO 5-SULFONATO-1H- INDOL- medicamentos de administracin por

CARMIN; INS 132 2-YLIDENE)-1H- INDOLE-5- va oral
SULFONATE

AZUL AZUL DE 16521-38-3 AZULN. 2 LACA DE FD&C BLUE #2 ALUMINUM (2E)-3-OXO-2- 73015 741102 E132 Utilizado en alimentos, cosmticos y
INDIGOTINA, ALUMINIO INS 132 ALUMINUM LAKE (3-OXO-5-SULFO-1H-INDOL- medicamentos de administracin por
LACA DE 2-YLIDENE)-1H-INDOLE- va oral
ALUMINIO 5-SULFONIC ACID

AZUL AZUL PATENTE, 3536-49-0 AZUL PATENTE V; ACID BLUE 3 ETHANAMINIUM, N-[4- 42051 1356 E131 Permitido para todos los tipos de
SAL DE CALCIO ACID BLUE 3; [[4-(DIETHYLAMINO) productos.
PHENYL](5-HYDROXY-2,4-

AZUL AZUL PATENTE, 129-17-9 ACID BLUE 1; FOOD ACID BLUE 1 ETHANAMINIUM, N-[4-[[4- 42045 1355 E131 Permitido para todos los tipos de

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

SAL DE SODIO BLUE 3; CARMINE (DIETHYLAMINO)PHENYL] productos.
BLUE; AZUL PATENTE (2,4-DISULFOPHENYL)
VS METHYLENE]-2,5-
CYCLOHEXADIEN-1-
YLIDENEJ-N-ETHYL-, INNER
SALT, SODIUM SALT (1:1)
AZUL CLORURO 61-73-4 AZUL DE METILENO METHYLTHIONINIUM 3,7-BIS(DIMETHYL AMINO) 52015 Utilizado en medicamentos,
DE METIL CHLORIDE; BASIC PHENOTHIAZIN-5- IUM incluyendo como contraste.
TIONINIO BLUE 9 CHLORIDE
 Tabla 1 (continuacin)

Referecia
Color Referencia
Color Sustancia CAS Sinnimo Denominacin en ingls Descripcin (IUPAC) Unin Usos, restricciones y requisitos
index 21 CFR
Europea
BLANCO CARBONATO 72608-12-9 CARBONATO DE CALCIUM CALCIUM CARBONATE 72220 731070 N/C Utilizado en medicamentos.
DE CALCIO CALCIO CARONATE Permitido para uso general, no siendo
permitida la utilizacin en el rea
de los ojos, en suturas quirrgicas y
formas farmacuticas inyectables.

BLANCO DIXIDO DE 13463-67-7 DIXIDO DE TITNIO TITANIUM DIOXOTITANIUM 77891 731575 E171 Utilizado en medicamentos.
TITNIO DIOXIDE Permitido para uso general
incluyendo el rea de los ojos, no
siendo permitida la utilizacin
en suturas quirrgicas, formas
farmacuticas inyectables.
NARANJA ANNATTO 8015-67-6 NARANJA N. 4 ANNATTO (2E,4E,6E,8E, 10E, 12E, 14E, 16Z, 75120 731030 E160B Utilizado en medicamentos de uso
18E)- 4,8,13,17-TETRAMETHYLI externo (incluyendo rea de los ojos)
COSA-2,4,6,8,10,12,14,16,18- e interno (excluyendo rea de los
NONAENEDIOIC ACID ojos). No permitida la utilizacin
en suturas quirrgicas y formas
farmacuticas inyectables.
NARANJA BETA CAROTENO 9000-07-1 NARANJA BETACAROTENE 1,3,3-TRIMETH YL-2- [( 48800 731095 E160E Utilizado en medicamentos de uso
ALIMENTO 5 1E,3E,5E,7E,9E, 11E ,13E ,15E externo (incluyendo rea de los ojos)
,17E)- 3,7,12,16-TETRAMETHYL-18- y interno (excluyendo rea de los
(2,6,6-TRIMETHYLCYCLOHEXEN- ojos). No permitida la utilizacin
1-YL) en suturas quirrgicas y formas
OCTADECA-1,3,5,7,9,11,13,15,17- farmacuticas inyectables
NONAENYLJCYCLOHEXENE
NARANJA BETA-APO- 4172-46-7 INS 160E ALL-TRANS-BETA- (2E,4E,6E,8E,10E,12E,14E,16E)- 40820 N/C E160E Utilizado en medicamentos de uso

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

CAROTENAL APO-8- CAROTEN AL 2,6,11,15- externo (incluyendo rea de los ojos)
TETRAMETHYL-17-(2,6,6- y interno (excluyendo rea de los
TRIMETHYLC YCLOHEXEN-1 YL ojos). No permitida la utilizacin
) HEPTADECA-2,4,6,8,10,12,14,16- en suturas quirrgicas y formas
OCTAENAL farmacuticas inyectables
NARANJA NARANJA SOLAR 633-96-5 NARANJA D&C SODIUM 4-[(2E)-2-(2- 15510 741255 N/C Utilizado en cosmticos y
PERSIA ORANGE # 5 OXONAPHTHALEN-1 medicamentos de uso externo
YLIDENE) HYDRAZINYL] (incluyendo rea de los ojos) no
BENZENESULFONATE excediendo dosis diaria de la droga
de 5mg. No permitida la utilizacin
en suturas quirrgicas y formas
farmacuticas inyectables.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin
405

13
 13
Tabla 1 (continuacin)
406

Referecia
Color Referencia
Color Sustancia CAS Sinnimo Denominacin en ingls Descripcin (IUPAC) Unin Usos, restricciones y requisitos
index 21 CFR
Europea
MARRON CARAMELO 8028-89-5 MARRON CARAMEL EN LA E150A Utilizado en medicamentos de uso
NATURAL 10 tpico y de administracin oral. No
permitida la utilizacin en la rea
de los ojos, en suturas quirrgicas y
formas farmacuticas inyectables

NEGRO OXIDO DE 12227-89-3 OXIDO DE BLACK IRON OXIDOS DE HIERRO OBTENIDOS 40800 731095 E160E Utilizado en medicamentos de uso
HIERRO NEGRO HIERRO NEGRO OXIDE POR SNTESIS, INCLUSIVE tpico y de administracin oral (no
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

SUS FORMAS HIDRATADAS O excediendo dosis diaria de 5 mg

COMBINACIONES DE MS DE UN de Fe). No permitida a utilizacin
DE ESTOS XIDOS en el rea de los ojos, en suturas
quirrgicas y formas farmacuticas
inyectables
VERDE CLOROFILA 1406-65-1 CLOROFILA INS 1401 CHLOROPHYLL MEZCLA DE CLOROFILASA EB. 75.810 N/C E140(I) Utilizado en medicamentos.
CLOROFILA A:C55H72MGN405,
STER FITLICODEL
COMPLEJO MAGNESIANODE
[(1,3,5,8-TETRAMETIL-4-
ETIL-2-VINIL-9-OXO-10-
METOXICARBONIL)FORBINIL]-
7-PROPIONATO. CLOROFILA B:
C55H70MGN406, STER FITLICO
DEL COMPLEJO MAGNESIANO
DE [(1,5,
VERDE CLOROFILINA 48240-36-4 INS 140II CHLOROPHYLLINS MAGNESIUM;3-[18- 75.810 N/C E140(II) Utilizado en medicamentos.
(DIOXIDOMETHYLIDENE)-8-
ETHENYL-l3-ETHYL-3,7,12,17- TET

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

RAMETHYL-20-(2-
OXIDO- 2-OXOETHYL)-2,3-
DIHYDROPORPHYRIN-23-ID-2-
YL]PROPANOATE; HYDRON
VERDE VERDE 4403-90-1 VERDE ALIZARINA D&C GREEN # 5 DISODIUM 5-METHYL-2-[[4-(4-
BRILLANTE METHYL-2-SULFONATOANILINO)-
9,10-DIOXO ANTHRACEN-1 YL]
AMINO] BENZENESULFONATE
61570 741205 N/C Utilizado en cosmticos y
medicamentos de uso externo
(incluyendo rea de los ojos). No
permitida la utilizacin en suturas
quirrgicas y formas farmacuticas
inyectables.
 Tabla 1 (continuacin)

Referecia
Color Referencia
Color Sustancia CAS Sinnimo Denominacin en ingls Descripcin (IUPAC) Unin Usos, restricciones y requisitos
index 21 CFR
Europea
VERDE VERDE 2353-45-9 VERDE ALIMENTO 3 FD&C GREEN # 3 DISODIUM 2-[[4-[ETHYL-[(3- 42053 741203 N/C Utilizado en alimentos y
SOLIDO SULFON ATOPHENYL )METH medicamentos de uso externo
YL] AMINO] PHENYL]-[4-[ETHYL (incluyendo rea de los ojos). No
[(3SULFONATOPHENYL) permitida la utilizacin en suturas
METHYL] AZANIUMYLIDENE] quirrgicas y formas farmacuticas
CYCLOHEXA-2,5-DIEN- 1 inyectables.
-YLIDENE]METHYL]-5-
HYDROXYBENZENESULFONATE

VERDE VERDE SOLUBLE 128-80-3 VERDE D&C GREEN # 6 1,4-BIS(4-METHYLANILINO) 61565 741206 N/C Utilizado en cosmticos y
ANTRAQUINONA ANTHRACENE-9JO-DIONE medicamentos de uso externo
(incluyendo rea de los ojos). No
permitida la utilizacin en suturas
quirrgicas y formas farmacuticas
inyectables.
VERDE VERDE 6358-69-6 VERDE PIRANINA D&C GREEN # 8 TRISODIUM 59040 741208 N/C Utilizado en cosmticos y
SOLVENTE 8-HYDROXYPYRENE- medicamentos de uso externo
1,3,6-TRISULFONATE (incluyendo rea de los ojos). No
permitida la utilizacin en suturas
quirrgicas y formas farmacuticas
inyectables. No ms que 0,01% de
la dosis.
ROJO AMARANTO 915-67-3 BORDEAU S INS 123 AMARANTH; D&C TRISODIUM (4Z)-3-OXO-4-[(4- 16185 N/C E123 Permitido para todos los tipos de
RED 2; ACID RED 27, SULFONATONAPHTHALEN- productos.
TRISODIUM SALT 1-YL) HYDRAZINYLIDENE]
NAPHTHALENE-2,7-
DISULFONATE

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

ROJO AMARANTO, 12227-62-2 BORDEAU S LACA DE AMARANTH ALUMINUM; TRISODIUM 16185:1 N/C E123 Permitido para todos los tipos de
LACA DE ALUMINIO ALUMINUM LAKE; (4Z)-3-OXO-4-[(4- productos.
ALUMINIO PIGMENT RED SULFONATONAPHTHALEN-
193; ACID RED 27 1-YL) HYDRAZINYLIDENE]
ALUMINUM LAKE; NAPHTHALENE-2,7-
FD AND C RED EN EL. DISULFONATE
2 ALUMINUM LAKE
ROJO AZORRUBINA 3567-69-9 CARMOISINA CARMOISINE DISODIUM (3Z)-4-OXO-3-[(4- 14720 N/C E122 Permitido para todos los tipos de
SULFON ATON APHTH ALEN-1 productos.
-YL) HYDRAZINYLIDENE]NAP
HTHALENE-1-SULFONATE
Farmacopea Brasilea, 5 edicin
407

13
 13
Tabla 1 (continuacin)
408

Referecia
Color Referencia
Color Sustancia CAS Sinnimo Denominacin en ingls Descripcin (IUPAC) Unin Usos, restricciones y requisitos
index 21 CFR
Europea
ROJO AZORRUBINA, 84041-67-8 CARMOISINA LACA CARMOISINE SAL DISDICO DEL CIDO 2-(4 14720 N/C E122 Permitido para todos los tipos de
LACA DE DE ALUMINIO ALUMINUM LAKE -SULFO-1 -NAFTILAZO)- 1 productos.
ALUMINIO -NAFTOL-4-SULFNICO

ROJO ERITROSINA 16423-68-0 ERITROSINA; ROJO FD&C RED #3; DISODIUM 2-(2,4,5,7-TETRAIODO- 450430 741303 E127 Utilizado en alimentos, cosmticos y
N. 3; ERITROSINA ERYTHROSINE 45430 741303 E127 3-OXIDO-6- medicamentos de administracin oral
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

SDICA INS 127 OXOXANTHEN-9-YL) BENZOATE

ROJO ERITROSINA, 12227-78-0 ERITROSINA LACA DE FD&C RED #3 DIALUMINUM; l,3,6,8- 45430 741303 E127 Utilizado en alimentos, cosmticos y
LACA DE ALUMINIO; ROJO N. 3 ALUMINUM LAKE TETRAIODO-3- OXOSPIRO[2- medicamentos de administracin oral
ALUMINIO LACA DE ALUMINIO; BENZOFURAN- 1,9-XANTHENE]
ERITROSINA SDICA -2,7-DIOLATE; l,3,6
LACA DE ALUMINIO ,8-TETRAIODO-3-OXOSPIRO[2-
INS 127 BENZOFURAN-1,9-XANTHENE]-
2,7-DIOLATE
ROJO OXIDO DE 1309-37-1 XIDO DE HIERRO RED IRON OXIDE XIDOS DE HIERRO OBTENIDOS 77491 73.1200 E172 Utilizado en medicamentos de
HIERRO ROJO ROJO POR SNTESIS, INCLUSIVE administracin oral (no excediendo
SUS FORMAS HIDRATADAS O dosis diaria de 5 mg de Fe) y uso
COMBINACIONES DE MS DE UN tpico. No permitido en el rea de los
DE ESTOS XIDOS ojos, en suturas quirrgicas y formas
farmacuticas inyectables.
ROJO ROJO PIGMENTO 74336-37-1 ROJO 34 D&C RED # 34 CALCIUM (4Z)-3-OXO-4-[(l- 15880 741334 N/C Utilizado en cosmticos y

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

ROJO 63 SULFON ATON APHTH ALEN-2- medicamentos de uso externo. No
YL) HYDRAZINYLIDENE]NAPH permitido en el rea de los ojos,
THALENE-2-CARBOXYLATE en suturas quirrgicas y formas
farmacuticas inyectables.

ROJO ROJO PONCEAU 4548-53-2 ROJO 4 FD&C RED #4 DISODIUM (3E)-3-[(2,4-DIMETHYL- 14700 741304 N/C Utilizado en alimentos, cosmticos
SX 5-SULFONATOPHENYL) y medicamentos de uso externo.
HYDRAZINYLIDENE]-4- No permitido en el rea de los ojos,
OXONAPHTHALENE-1- en suturas quirrgicas y formas
SULFONATE farmacuticas inyectables
 Tabla 1 (continuacin)

Referecia
Color Referencia
Color Sustancia CAS Sinnimo Denominacin en ingls Descripcin (IUPAC) Unin Usos, restricciones y requisitos
index 21 CFR
Europea
ROJO ROJO 27 13473-26-2 ROJO PHLOXINE El D&C RED #27 DISODIUM 2,4, 5,7-TETRAB 45410:2 741327 N/C Utilizado en cosmticos y
ROMO-4,5,6,7- TETRACHLOR medicamentos en general. No
0-3-0X0SPIR0[2-BENZ0FURAN-l,9- permitido en el rea de los ojos,
XANTHENE]-3,6-DIOLATE en suturas quirrgicas y formas
farmacuticas

ROJO ROJO 30 2379-74-0 ROJO 30 D&C RED #30; (2Z)-6-CHLORO-2-(6- 73360 741330 N/C Utilizado en cosmticos y
INDANTHREN CHLORO-4-METHYL-3-OXO-1 medicamentos en general. No
BRILLIANT PINK R BENZOTHIOPHEN-2- permitido en el rea de los ojos,
YLIDENE)-4-METHYL-1- en suturas quirrgicas y formas
BENZOTHIOPHEN-3-ONE farmacuticas

ROJO ROJO 33 3567-66-6 ROJO ESPANICO D&C RED #33 DISODIUM (3E)-5-AMINO-4-OXO- 17200 741333 N/C Utilizado en cosmticos y
3-(PHENYLHYDRAZINYLIDENE) medicamentos de administracin oral
NAPHTHALENE-2,7- y tpico. No permitido en el rea
DISULFONATE de los ojos, en suturas quirrgicas y
formas farmacuticas inyectables. No
exceder ms que 0,75 mg de la dosis
diaria de la dosis cuando utilizado en
medicamentos odontolgicos.
ROJO ROJO 40 25956-17-6 FD&C ROJO N. 40; FD&C RED #40 DISODIUM (5E)-5-[(2- METHOXY-5- 16035 741340 E129 Utilizado en alimentos. cosmticos
ROJO ALURAAC INS METHYL-4-SULFONATOPHENYL) y medicamentos en general. No
129 HYDRAZINYLIDENE]-6- permitido en el rea de los ojos,
OXONAPHTHALENE-2- en suturas quirrgicas y formas
SULFONATE farmacuticas

ROJO ROJO 40, LACA DE 68583-95-9 ROJO 40 LACA DE FD&C RED #40 LACA DE ALUMINIO O DE 16035:1 741340 E129 Utilizado en alimentos, cosmticos

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

ALUMINIO ALUMINIO; ROJO ALUMINUM LAKE CALCIO Y ALUMINIO, EN y medicamentos en general. No
ALURAAC LACA DE SUSTRATO DE SAL DISDICO DEL permitido en suturas quirrgicas y
ALUMINIO CIDO 6-HIDROXI-5-(2-METOXI- formas farmacuticas
5-METIL-4-SULFOFENIL) AZO-2-
NAFTALENUESTRULFNICO
ROJO ROJO 7, LACA DE 5281-04-9 ROJO 7 LACA DE D&C RED #7 CALCIUM (4Z)-4-[(4-METHYL- 15850:1 741307 N/C Utilizado en cosmticos y
CALCIO CALCIO; ROJO LITIO CALCIUM LAKE; D&C 2-SULFONATOPHENYL) medicamentos en general. El total
RUBIM LACA DE RED # 7 HYDRAZINYLIDENE]-3- de D&C Red n. 6 no debe ser ms
CALCIO OXONAPHTHALENE-2- que 0,01% en 5mg/ dosis diaria de
CARBOXYLATE medicamento
Farmacopea Brasilea, 5 edicin
409

13
 13
Tabla 1 (continuacin)
410

Referecia
Color Referencia
Color Sustancia CAS Sinnimo Denominacin en ingls Descripcin (IUPAC) Unin Usos, restricciones y requisitos
index 21 CFR
Europea
ROJO ROJO BETERABA, 7659-95-2 ROJO DE BETERABA; BEET POWDER (2S)-4-[2-[(2S)-2-CARBOXY-6- N/C N/C E162 Utilizado en alimentos
BETANINA BETANINA IN S 162 BEETROOT RED HYDROXY-5-[(2S,3R,4S,5S,6R)-
3A5-TRIHYDROXY-6-
(HYDROXYMETHYL)OXAN-2-YL]
OXY-2,3-DIHYDROINDOL-1
-YL] ETHENYL]-2,3-D
IHYDROPYRIDINE-2,6-
DICARBOXYLICACID
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

ROJO ROJO DE 1390-65-4 CARMIN DE CARMINE 3,5,6,8-TETRAHYDROXY- 1 75470 731100 E120 Permitido para todos los tipos de
COCHINILLA COCHINILLA; -METH YL-9,10-DIOXO- productos.
CARMIN; NATURAL 7-[3,4,5-TRIHYDROXY-6-
RED 4 INS 120 (HYDROXYMETHYL) OXAN-2-YL]
ANTHRACENE-2-CARBOXYLIC
ACID)
ROJO ROJO EOSINA 62342-51-2 ROJO 21 D&C RED # 21 2,4,5\7-TETRABROMO- 45380:2 741321 N/C Utilizado en cosmticos y
3,6-DIHYDROXYSPIRO[2- medicamentos en general. No
BENZOFURAN-3,9-XANTHENE]- permitido en la rea de los ojos,
l-ONE en suturas quirrgicas y formas
farmacuticas

ROJO ROJO EOSINA 95917-83-2 ROJO 22 D&C RED # 22 DISODIUM 45380 741322 N/C Utilizado en cosmticos y
PURA 2-(2,4,5,7-TETRABROMO-3- medicamentos en general. No
OXIDO-6-OXOXANTHEN- 9-YL) permitido en la rea de los ojos,
BENZOATE en suturas quirrgicas y formas
farmacuticas

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

ROJO ROJO 70632-40-5 ROJO 36 D&C RED # 36 (lZ)-l-[(2-CHLORO- 12085 741336 N/C Utilizado en cosmticos y
PERMANENTE 4-NITROPHENYL) medicamentos de uso externo. No
HYDRAZINYLIDENE] permitido en el rea de los ojos,
NAPHTHALEN-2-ONE en suturas quirrgicas y formas
farmacuticas inyectables. No ms
que 1,7 mg/dosis diaria de la droga
prescritos por menos de 1 ao o 1,0
mg/dosis diaria de la droga prescrita
por ms de 1 ao.
ROJO ROJO PONCEAU 2611-82-7 PONCEAU 4R; PONCEAU 4R TRISODIUM (8Z)-7-OXO-8-[(4- 16255 N/C E124 Permitido para todos los tipos de
4R ROJO 2 SULFON ATON APHTH ALEN-1 productos.
INS 124 -YL) HYDRAZINYLIDENE]EN LA
PHTHALENE-L3-DISULFONATE
 Tabla 1 (continuacin)

Referecia
Color Referencia
Color Sustancia CAS Sinnimo Denominacin en ingls Descripcin (IUPAC) Unin Usos, restricciones y requisitos
index 21 CFR
Europea
ROJO ROJO PONCEAU 15876-47-8 PONCEAU 4R LACA PONCEAU 4R LACA DE ALUMINIO O DE 16255 N/C E124 Permitido para todos los tipos de
4R LACA DE ALUMINIO; ROJO 2 ALUMINUM LAKE CALCIO Y ALUMINIO, EN productos.
ALUMINIO LACA DE ALUMINIO SUSTRATO DE SAL TRISDICO
DEL CIDO 1 -(4 -SULFO-1
-NAFTILAZO)-2- NAFTOL-6,8-
DISSULFNICO
ROJO ROJO RUBI 5858-81-1 ROJO 6 D&C RED # 6 DISODIUM (4E)-4-[(4-METHYL- 15850 741306 N/C Utilizado en cosmticos y
2-SULFONATOPHENYL) medicamentos en general. El total
HYDRAZINYLIDENE] de D&C Red n. 7 no debe ser ms
-3-OXONAPHTHALENE- que 0,01% en 5mg/ dosis diaria de
2-CARBOXYLATE medicamento

ROJO ROJO SCARLET 85-86-9 ROJO 17 D&C RED # 17 (lZ)-l-[(4- 26100 741317 N/C Utilizado en medicamentos de uso
PHENYLDIAZENYLPHENYL) externo. No permitido en el rea de
HYDRAZINYLIDENE] los ojos, en suturas quirrgicas y
NAPHTHALEN-2-ONE formas farmacuticas inyectables.

VIOLETA VIOLETA 81-48-1 VIOLETA 2 D&C VIOLET # 2 1 -HYDROXY-4-(4- 60725 741602 N/C Utilizado en medicamentos de uso
ALIZARINA METHYLANILINO) externo. No permitido en el rea de
ANTHRACENE-9, O-DIONE los ojos, en suturas quirrgicas y
formas farmacuticas inyectables.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Farmacopea Brasilea, 5 edicin
411

13
 412 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

14

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 413

14 REACTIVOS

Naranja de metilo (CI 13025)

14.1 INDICADORES Y
CAS [547-58-0]
SOLUCIONES INDICADORAS Frmula y masa molecular C14H14N3NaO3S 327,34
Indicadores son colorantes empleados para indicar el pun- Descripcin Polvo cristalino amarillo-anaranjado.

14
to final de un anlisis volumtrico o para evaluar el pH
de soluciones no coloreadas. Los indicadores de uso ms Solubilidad Poco soluble en agua y prcticamente insolu-
frecuente estn en la Tabla 1, en orden creciente del lmite ble en etanol a 96% (v/v).
inferior de su banda transicin de pH. En seguida, estn
descritos los indicadores y las soluciones indicadoras (SI) Naranja de metilo SI
utilizadas en la Farmacopea. Preparacin Disolver 0,1 g en 100 ml de etanol a 20%
(v/v).
Tabla 2 - Tabla 1 Indicadores de uso ms frecuente
Banda de pH 2,9 4,0
Banda de
Indicador Cambio de color Cambio de color Da coloracin roja en medio modera-
transicin
damente cido y coloracin amarilla en medio levemente
Verde de malaquita 0,0 a 2,0 Amarillo a verde cido y alcalino.
Rojo de cresol 0,2 a 1,8 Rojo a amarillo
Prpura de Ensayo de sensibilidad La mezcla de 0,1 ml de solucin
0,5 a 2,5 Rojo a amarillo indicadora con 100 ml de agua exenta de dixido de carbo-
metacresol
Tropeolina OO 1,0 a 2,8 Rojo a amarillo no presenta color amarillo. Son necesarios no ms que 0,1
Azul de timol 1,2 a 2,8 Rojo a amarillo ml de cido clorhdrico 0,1 M para determinar el cambio
Amarillo naftol 2,0 a 3,2 Incoloro a amarillo de color para rojo.
Amarillo de dimetilo 2,8 a 4,6 Rojo a amarillo
Naranja de metilo, solucin
Amarillo a azul-
Azul de bromofenol 2,8 a 4,6
violeta Preparacin Disolver 20 mg de naranja de metilo y 0,1
Naranja de metilo 2,9 a 4,0 Rojo a amarillo g de verde de bromocresol en 1 ml de hidrxido de sodio
Rojo de metilo 3,0 a 4,4 Rojo a amarillo 0,2 M y completar con agua hasta el volumen de 100 ml.
Rojo congo 3,0 a 5,0 Azul a rojo Banda de pH 3,0 4,0
Verde de
3,6 a 5,2 Amarillo a azul Cambio de color Da coloracin naranja en soluciones
bromocresol
Resazurina 5,0 a 7,0 Rosa a violeta moderadamente cidas y coloracin verde-oliva en solu-
ciones levemente cidas y alcalinas.
Tornasol 5,0 a 8,0 Rojo a azul
Prpura de Amarillo a azul-
5,2 a 6,8 Anaranjado de xilenol
bromocresol violeta
Azul de bromotimol 6,0 a 7,6 Amarillo a azul CAS [3618-43-7]
Rojo de fenol 6,8 a 8,4 Amarillo a rojo Frmula y masa molecular C31,H28,N2,Na4,O13,S 760,59
Rojo de cresol 7,2 a 8,8 Amarillo a rojo
Descripcin Polvo cristalino marrn-rojizo.
Prpura de
7,5 a 9,2 Amarillo a violeta
metacresol Solubilidad Soluble en agua y etanol
Azul de timol 8,0 a 9,6 Amarillo a azul
Incoloro a violeta Anaranjado de xilenol SI
Fenolftalena 8,3 a 10,0
intenso Preparacin Disolver 0,1 g en 100 ml de etanol. Cambio
Azul Nilo A 9,0 a 13,0 Azul a roja de color En medio cido presenta color amarillo- pli-
Timolftalena 9,3 a 10,5 Incoloro a azul do. Reaccionando con ciertos metales (tales como plomo y
Amarillo alizarina Amarillo plido a zinc), forma complejo de color rojo intenso. En presencia
10,0 a 12,0
GG marrn de exceso de edetato disdico adquiere color amarillo.
Tropeolina O 11,0 a 12,7 Amarillo a naranja
Amarillo titn 12,0 a 13,0 Amarillo a rojo Alizarina
CAS [130-22-3]
Frmula y masa molecular C14H7NaO7S.H2O 360,26
Descripcin Polvo amarillo-anaranjado.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y en etanol. Ali-
zarina SI

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 414 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Preparacin Disolver 0,1 g en 100 ml de agua.
Amarillo de alizarina GG (CI 14025)
CAS [584-42-9]
Frmula y masa molecular C13H8N3NaO5 309,21
Descripcin Polvo amarillo.
Solubilidad Poco soluble en agua fra y soluble en agua
caliente.
Ensayo de sensibilidad Disolver 0,1 ml de amarillo de
metanilo SI en 50 ml de cido actico glacial anhidro.
Esta solucin debe presentar coloracin rojo-rosada. Aa-
dir 0,05 ml de cido perclrico 0,1 M. La coloracin debe
cambiar para violeta.
Amarillo naftol (CI 10315)
CAS [887-79-6]
Frmula y masa molecular C10H5N2NaO5 256,16
Descripcin Polvo o cristales amarillo-anaranjados.

14
Amarillo de alizarina GG SI
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y poco soluble en
Preparacin Disolver 0,1 g en 100 ml de agua.
etanol a 96% (v/v).
Banda de pH 10,0 12,0
Banda de pH 2,0 3,2
Cambio de color Da coloracin amarilla-plida en solu-
Cambio de color Da solucin incolora en medio fuer-
ciones levemente alcalinas y coloracin marrn en solucio-
temente cido y coloracin amarilla en soluciones menos
nes fuertemente alcalinas.
cidas.
Amarillo de dimetilo (CI 11020)
Amarillo titn (CI 19540)
CAS [60-11-7]
CAS [1829-00-1]
Frmula y masa molecular C14H15N3 225,29
Frmula y masa molecular C28H19N5Na2O6S4 695,72
Descripcin Cristales amarillos.
Descripcin Polvo marrn-amarillento.
Solubilidad Insoluble en agua, soluble en etanol, ben-
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y en etanol.
ceno, cloroformo, ter etlico y cidos minerales diluidos.
Amarillo titn SI
Amarillo de dimetilo SI
Preparacin Disolver 0,05 g en agua y completar el vo-
Preparacin Disolver 0,2 g en 100 ml de etanol a 90%
lumen para 100 ml.
(v/v).
Banda de pH 12,0 13,0
Banda de pH 2,8 4,6
Cambio de color En soluciones cidas y moderadamente
Cambio de color Da coloracin roja en soluciones mo-
alcalinas da coloracin amarilla. En soluciones fuertemen-
deradamente cidas y coloracin amarilla en soluciones
te alcalinas presenta color rojo.
levemente cidas y alcalinas.
Ensayo de sensibilidad Preparar mezcla de 10 ml de
Ensayo de homogeneidad Preparar solucin a 0,01%
agua, 0,2 ml de solucin estndar de magnesio (10 ppm
(p/v) en cloruro de metileno y aplicar 0,01 ml de esta solu-
de Mg) y 10 ml de hidrxido de sodio M. Aadir 0,1 ml
cin en cromatoplaca de gel de slice G. Usar como eluyen-
de amarillo titn SI. Preparar prueba en blanco de manera
te el cloruro de metileno. El cromatograma debe mostrar
anloga, sin embargo omitiendo el estndar de magnesio.
una nica mancha.
Comparar las dos soluciones: coloracin rosa intensa se
Ensayo de sensibilidad Preparar solucin de 2 g de clo- desarrolla en comparacin a la prueba en blanco.
ruro de amonio en 25 ml de agua exenta de dixido de car-
bono. Esta solucin, adicionada de 0,1 ml de amarillo de Amarillo titn, papel
dimetilo SI, debe presentar color amarilla. La coloracin
Preparacin Impregnar papel de filtro comn con solu-
pasa a roja por la adicin de no ms que 0,1 ml de cido
cin de amarillo titn SI. Secar al aire a temperatura am-
clorhdrico 0,1 M.
biente.
Amarillo de metanilo (CI 13065)
Almidn (Almidn soluble)
CAS [587-98-4]
CAS [9005-84-9]
Frmula y masa molecular C18H14N3NaO3S 375,38
Frmula molecular (C6H10O5)x
Descripcin Polvo amarillo amarronado.
Descripcin Polvo blanco o casi blanco.
Solubilidad Soluble en agua y en etanol.
Almidn SI
Amarillo de metanilo SI
Especificacin Solucin de almidn soluble a 2% (p/v)
Preparacin Disolver 0,1 g en 100 ml de metanol. en agua caliente. La solucin puede presentar pequea
opalescencia.
Cambio de color En titulaciones desarrolladas en medio
no acuoso cambia la coloracin de amarilla (medio bsico) Ensayo de sensibilidad Mezclar 1 ml de almidn SI, 20
para carmn (medio cido). ml de agua, aproximadamente 50 mg de yoduro de potasio

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


y, finalmente, 0,05 ml de yodo 0,01 M. Hay desarrollo de
color azul.
Almidn yodado SI
Preparacin Impregnar papel de filtro con almidn SI,
recin preparado, enriquecido con 0,5 g de yoduro de po-
tasio.
Almidn exento de yoduro SI
Preparacin Triturar 1 g de almidn soluble con 5 ml
de agua y aadir, con agitacin constante, agua hirviendo
suficiente para 100 ml.
Estabilidad Preparar inmediatamente antes del uso.
Almidn yodado, papel
Preparacin Impregnar papel de filtro con almidn SI,
recin preparado, enriquecido con 0,5 g de yoduro de po-
tasio.
Azul de bromofenol
CAS [115-39-9]
Frmula y masa molecular C19H10Br4O5S 670,02
Descripcin Polvo amarillo-anaranjado claro.
Solubilidad Muy poco soluble en agua, poco soluble en
etanol y fcilmente soluble en soluciones de hidrxidos al-
calinos.
Azul de bromofenol SI
Preparacin Disolver, calentando suavemente, 0,2 g de
azul de bromofenol en 3 ml de hidrxido de sodio 0,1 M y
10 ml de etanol a 96% (v/v). Dejar enfriar y completar el
volumen para 100 ml con etanol a 96% (v/v).
Banda de pH 2,8 4,6
Cambio de color Da color amarillo en soluciones mode-
radamente cidas y color azul-violeta en soluciones leve-
mente cidas y alcalinas.
Azul de bromotimol
CAS [76-59-5]
Frmula y masa molecular C27H28Br2O5S 624,38
Descripcin Polvo marrn o rojo claro.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, soluble en
etanol y soluciones diluidas de hidrxidos alcalinos.
Azul de bromotimol SI
Preparacin Calentar 1 g de azul de bromotimol con 3,2
ml de hidrxido de sodio 0,05 M y 5 ml de etanol. Despus
de disolucin, completar el volumen a 250 ml con etanol.
Banda de pH 6,0 7,0
Cambio de color Da coloracin amarilla en soluciones
levemente cidas y coloracin azul en soluciones levemen-
te alcalinas. En medio neutro da coloracin verde.
Ensayo de sensibilidad La mezcla de 0,3 ml de azul de
bromotimol SI y 100 ml de agua exenta de dixido de car-
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 415
bono presenta coloracin amarilla. La coloracin cambia
para azul por la adicin de no ms que 0,1 ml de solucin
de hidrxido de sodio 0,02 M.
Azul de hidroxinaftol
CAS [63451-35-4]
Frmula y masa molecular C20H11N2Na3O11S3 620,47
Azul de hidroxinaftol SI
Preparacin Disolver 0,1 g en etanol para 100 ml.
Cambio de color En la banda de pH entre 12,0 y 13,0, su
solucin posee coloracin rosa-rojiza en presencia de iones
14
calcio. Frente al exceso de edetato disdico, presenta color
azul intenso.
Azul de oracet B
CAS [12769-16-3]
Frmula y masa molecular C21H16N2O2 328,36
Especificacin Se constituye de una mezcla de 1-meti-
lamino-4-anilinantraquinona y de 1-amino-4- anilinantra-
quinona.
Azul de oracet B SI
Preparacin Disolver 0,5 g en cido actico glacial anhi-
dro y completar el volumen para 100 ml.
Cambio de color Cuando utilizado en titulaciones en me-
dio no acuoso cambia de coloracin azul (medio bsico)
para prpura (medio neutro) y para rosa (medio cido).
Azul de timol
CAS [76-61-9]
Frmula y masa molecular C27H30O5S 466,60
Descripcin Polvo cristalino verde-amarronado o azul-
verdoso.
Solubilidad Poco soluble en agua, soluble en etanol a
96% (v/v) y en soluciones diluidas de hidrxidos alcalinos.
Azul de timol SI
Preparacin Calentar 0,1 g del indicador con 4,3 ml de
hidrxido de sodio a 0,05% (p/v) y 5 ml de etanol a 90%
(v/v). Despus de disolucin, completar el volumen a 250
ml con etanol a 20% (v/v).
Banda de pH 1,2 2,8 y 8,0 9,6
Cambio de color Presenta coloracin roja en soluciones
fuertemente cidas (banda de pH: 1,2 2,8), coloracin
amarilla en soluciones levemente cidas y alcalinas y co-
loracin azul en soluciones ms alcalinas (banda de pH:
8,0 9,6).
Ensayo de sensibilidad La mezcla de 0,1 ml de azul de
timol SI, 100 ml de agua exenta de dixido de carbono y
0,2 ml de hidrxido de sodio 0,02 M presenta color azul.
La coloracin cambia para amarilla por la adicin de no
ms que 0,1 ml de cido clorhdrico 0,2 M.
 416 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Azul Nilo A (CI 51180)
CAS [3625-57-8]
Frmula y masa molecular C40H40 N6 O6 S 732,85
Descripcin Polvo cristalino verde con brillo de bronce.
Solubilidad Ligeramente soluble en etanol, en cido ac-
tico glacial y en piridina.
Azul Nilo A SI
Preparacin Disolver 1 g en cido actico glacial anhi-
14
dro para 100 ml.
Banda de pH 9,0 13,0
Cambio de color Otorga coloracin azul a soluciones le-
vemente alcalinas y coloracin roja a soluciones levemente
alcalinas.
Ensayo de sensibilidad La mezcla de 0,25 ml de Azul
Nilo A SI en 50 ml de cido actico glacial anhidro pre-
senta color azul. La coloracin pasa a azul-verdosa por la
adicin de no ms que 0,1 ml de cido perclrico 0,1 M en
cido actico glacial.
Ensayo de identificacin La solucin a 0,0005% (p/v) en
etanol a 50% (v/v) presenta mximo de absorcin (5.2.14)
en 640 nm.
Chalcona
CAS [2538-85-4]
Frmula y masa molecular C20H13N2NaO5S 416,4
Descripcin Polvo pardo-negro con tonos violceos.
Solubilidad Muy soluble en agua y fcilmente soluble en
etanol y acetona.
Chalcona SI
Preparacin Disolver 0,1 g en 100 ml de metanol anhi-
dro.
Cambio de color Da color rojo-prpura con iones calcio
en medio alcalino. En presencia de exceso de edetato dis-
dico, la solucin adquiere color azul.
Chalcona, mezcla compuesta
Preparacin Mezclar una parte de chalcona con 99 partes
de sulfato de sodio.
Ensayo de sensibilidad Disolver 0,2 g de mezcla com-
puesta de chalcona en 5 ml de agua. Mezclar 1 ml de la
solucin del colorante, 50 ml de agua, 10 ml de hidrxido
de sodio M y 1 ml de sulfato de magnesio a 1% (p/v). La
solucin formada es azul, tornndose violeta por la adicin
de 0,1 ml de cloruro de calcio a 0,15% (p/v). La adicin de
0,1 ml de edetato disdico 0,01 M da color azul intenso.
Cloruro de metilrosanilina (CI 42555)
CAS [548-62-9]
Sinonimia Violeta cristal
Frmula y masa molecular C25H30CIN3 408,00
Descripcin Polvo o cristales verde oscuros.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Solubilidad Soluble en agua y en etanol a 96% (v/v).
Cloruro de metilrosanilina SI
Preparacin Disolver 0,5 g en 100 ml de cido actico
glacial anhidro.
Cambio de color En titulaciones en medio no acuoso la
coloracin cambia de violeta (medio bsico) para azul-
verdosa (medio neutro) y para verde-amarillenta (medio
cido).
Ensayo de sensibilidad La mezcla de 0,1 ml de cloruro
de metilrosanilina SI con 50 ml de cido actico glacial
anhidro muestra coloracin prpura azulada. La adicin de
0,1 ml de cido perclrico 0,1 M en cido actico altera la
coloracin para verde.
Cloruro frrico
CAS [10025-77-1]
Sinonimia Cloruro de hierro.
Frmula y masa molecular FeCl3.6H2O 270,30
Descripcin Masa cristalizada amarillo-naranja, frgil.
Solubilidad Muy soluble en agua y soluble en etanol y
ter etlico. La sal y sus soluciones, expuestas a la luz, su-
fren reduccin parcial.
Cloruro frrico SI (aproximadamente 0,4 M)
Especificacin Contiene 10,5 g en agua para 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Colorante BVF
Preparacin Disolver 0,1 g de azul de bromotimol, 0,02
g de rojo de metilo y 0,2 g de fenolftalena en etanol. Com-
pletar con el mismo solvente para hacer 100 ml. Filtrar.
Difenilcarbazida
CAS [140-22-7]
Frmula y masa molecular C13 H14 N4O 242,29
Descripcin Polvo cristalino blanco o casi blanco, gra-
dualmente se torna rosa con la exposicin al aire.
Solubilidad Muy poco soluble en agua, soluble en aceto-
na y en etanol a 96% (v/v) y en cido actico glacial.
Difenilcarbazida SI
Preparacin Disolver 1 g de difenilcarbazida en 100 ml
de etanol en caliente. Almacenar al abrigo de la luz.
Difenilcarbazona
CAS [538-62-5]
Frmula y masa molecular C13H12N4O 240,27
Descripcin Cristales o polvo cristalino naranja-amari-
llo.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y fcilmen-
te soluble en etanol a 96% (v/v).

Difenilcarbazona SI
Preparacin Disolver 0,1 g en 100 ml de etanol. Almace-
nar al abrigo de la luz.
Eosina Y (CI 45380)
CAS [17372-87-1]
Frmula y masa molecular Q20H6Br4NA2O5 691,91
Descripcin Polvo marrn.
Solubilidad Soluble en agua.
Eosina Y SI
Preparacin Disolver 1 g en 100 ml en agua.
Cambio de color La adicin de 20 ml de hidrxido de
sodio a 40% (p/v) sobre 10 ml de eosina Y SI a 1% (p/v)
forma precipitado rojo.
ster etlico de tetrabromofenolftalena
CAS [1176-74-5]
Nombre qumico ster etlico del cido 2-[(3,5-dibromo-
4-hidroxifenil)(3,5-dibromo-4-oxo-2,5-cicloexadien-1-ili-
deno)metil]-benzoico
Sinonimia Bromofenolftalena magenta Y
Frmula y masa molecular C22H14Br4O4, 661,96
ster etlico de tetrabromofenolftalena SI
Preparacin Disolver 0,1 g de ster etlico de tetrabro-
mofenolftalena en 90 ml de cido actico glacial y com-
pletar el volumen para 100 ml con el mismo solvente. Pre-
parar inmediatamente antes del uso.
Fenolftalena
CAS [77-09-8]
Frmula y masa molecular C20H14O4 318,33
Descripcin Polvo cristalino o amorfo, blanco o leve-
mente amarillento. Inodoro.
Solubilidad Insoluble en agua y soluble en etanol
Fenolftalena SI
Preparacin Disolver 0,1 g en 100 ml de etanol a 80%
(v/v). Banda de pH 8,3 10,0
Cambio de color Da soluciones incoloras en medio cido
y levemente alcalino. Presenta coloracin violeta intensa
en soluciones alcalinas ms fuertes. Ensayo de sensibili-
dad La mezcla de 0,1 ml de fenolftalena SI en 1000 ml
en de agua exenta de dixido de carbono es incolora. Son
necesarios no ms que 0,2 ml de hidrxido de sodio 0,02 M
para el aparecimiento de coloracin rosa.
Fenolftalena, papel
Preparacin Sumergir tiras de papel de filtro comn en
fenolftalena SI por algunos minutos y secar al aire a tem-
peratura ambiente.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 417
Ferroina
CAS [14634-91-4]
Frmula y masa molecular C36H24FeN6O4S 692,52
Ferroina SI
Preparacin Disolver 0,7 g de sulfato ferroso heptahi-
dratado y 1,49 g de 1,10-fenantrolina en 70 ml de agua y
completar el volumen para 100 ml con el mismo solvente.
Ensayo de sensibilidad A 50 ml de cido sulfrico M
14
aadir 0,15 ml de tetrxido de osmio SR y 0,1 ml de fe-
rrona SI. Despus de la adicin de 0,1 ml de sulfato crico
amoniacal 0,1 M SV, el color pasa de rojo-anaranjado para
verde plido.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Magneson
CAS [74-39-5]
Frmula y masa molecular C12H9N3O4 259,22
Descripcin Polvo castao-rojizo.
Magneson SI
Preparacin Disolver 0,2 g en 100 ml en tolueno.
Cambio de color En titulaciones de medio no acuoso
muda la coloracin naranja (medio cido) para azul (medio
bsico), pasando por la coloracin rosa.
Magneson, reactivo
Preparacin Solubilizar 0,1 g de magneson en 100 ml de
hidrxido de sodio a 1% (p/v).
1-Naftolbencena
CAS [6948-88-5]
Sinonimia Fenilbis (4-hidroxinaftil) metanol.
Frmula y masa molecular C27H20O3 392,50
Descripcin Polvo marrn-rojizo.
Solubilidad Insoluble en agua; soluble en benceno, en
ter etlico y en cido actico glacial.
1-Naftolbencena SI
Preparacin Disolver 0,2 g de 1-naftolbencena en 100
ml de cido actico glacial.
Cambio de color Cuando utilizado en titulaciones no-
acuosas, cambia la coloracin azul o verde-azulada (medio
bsico) para naranja (medio neutro) y para verde-oscura
(medio cido).
Ensayo de sensibilidad Aadir 0,25 ml de solucin de
1-naftolbencena SI a 50 ml de cido actico glacial anhi-
dro. Son necesarios no ms que 0,05 ml de cido perclrico
0,1 M en cido actico glacial para efectuar el cambio de la
coloracin amarilla-marrn para verde.
1-Naftolftalena
CAS [596-01-0]
 418 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Frmula y masa molecular C28H18O4 418,42 Banda de pH 5,2 6,8

Descripcin Polvo incoloro cuando puro, usualmente es Cambio de color Da coloracin amarilla en soluciones
rojo grisceo. levemente cidas y coloracin azul-violeta en soluciones
alcalinas, neutras y cidas muy prximas a la neutralidad.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y soluble
en etanol. Ensayo de sensibilidad Mezclar 0,2 ml de prpura de
bromocresol SI y 100 ml de agua exenta de dixido de car-
1-Naftolftalena SI bono. Aadir 0,05 ml de hidrxido de sodio 0,02 M. Esta
solucin posee la coloracin azul violcea. Para alterar la
Preparacin Disolver 0,5 g en 100 ml de etanol a 96%
coloracin para amarillo son necesarios no ms que 0,2 ml
(v/v).
de cido clorhdrico 0,02 M.

14 Cambio de color Da solucin incolora o roja plida en

los medios cido y neutro y coloracin azul en soluciones
moderadamente alcalinas.
Negro de eriocromo T (CI 14645)
CAS [1787-61-7]
Frmula y masa molecular C20H12N3NaO7S 461,38
Descripcin Polvo marrn oscuro.
Solubilidad Soluble en agua y en etanol a 96% (v/v).
Negro de eriocromo T SI
Preparacin Disolver 0,5 g de negro de eriocromo T y
4,5 g de Clorhidrato de hidroxilamina en metanol a 100 ml.
Preparar en el momento del uso.
Cambio de color En medio cido clorhdrico produce
precipitado violeta-marrn; tratado con cido sulfrico for-
ma precipitado azul-oscuro que, diluido, muda para color
marrn. En solucin acuosa de hidrxido de sodio presenta
color violeta.
Oxalato de amonio
CAS [6009-70-7]
Frmula y masa molecular C2H8N2O4.H2O 142,11
Descripcin Cristales incoloros transparentes o polvo
cristalino blanco. Inodoro.
Solubilidad Soluble en agua.
Oxalato de amonio SI
Especificacin Contiene 4 g de oxalato de amonio en
agua para 100 ml.
Prpura de bromocresol
CAS [115-40-2]
Frmula y masa molecular C21H16Br2O5S 540,24
Descripcin Polvo cristalino blanco para rosa.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, soluble en
etanol a 96% (v/v) y soluciones diluidas de hidrxidos al-
calinos.
Prpura de bromocresol SI
Preparacin Calentar 0,1 g de prpura de bromocresol
con 5 ml de etanol a 90% (v/v) hasta disolucin. Aadir 3,7
ml de hidrxido de sodio 0,05 M y etanol a 20% (v/v) para
completar el volumen de 250 ml.
Prpura de bromocresol, reactivo
Solucin A Disolver 38 g de fosfato de sodio monobsico
y 2 g de fosfato de sodio dibsico anhidro en agua y com-
pletar el volumen a 1000 ml. Ajustar el pH a 5,3.
Solucin B Disolver 0,4 g de prpura de bromocresol en
30 ml de agua, aadir 6,3 ml de hidrxido de sodio 0,1 M y
completar el volumen a 500 ml con agua.
Preparacin Mezclar volmenes iguales de la Solucin
A, Solucin B y cloroformo. Agitar durante 5 minutos, de-
jar decantar y descartar la camada clorofrmica.
Prpura de metacresol
CAS [2303-01-7]
Frmula y masa molecular C21H16O5S 382,44
Descripcin Polvo cristalino verde oliva.
Solubilidad Poco soluble en agua, soluble en etanol, ci-
do actico glacial y en metanol.
Prpura de metacresol SI
Preparacin Disolver 0,1 g en 100 ml de hidrxido de
sodio 0,001 M.
Banda de pH 0,5 2,5 y 7,5 9,2
Cambio de color Presenta coloracin roja en soluciones
fuertemente cidas (banda de pH: 0,5 2,5), coloracin
amarilla en soluciones menos cidas y neutras y coloracin
violeta en soluciones moderadamente alcalinas (banda de
pH: 7,5 9,2).
Resazurina
CAS [550-82-3]
Frmula y masa molecular C12H7NO4 229,19
Descripcin Cristales pequeos rojo-oscuros con brillo
verdoso.
Solubilidad Insoluble en agua y ter etlico, poco soluble
en etanol y soluble en soluciones diluidas de hidrxidos
alcalinos.
Resazurina SI
Preparacin Disolver 0,1 g en 100 ml de hidrxido de
sodio 0,02 M. Esta solucin indicadora debe ser de prepa-
racin reciente.
Banda de pH 5,0 7,0

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Cambio de color Da coloracin rosa en soluciones leve-
mente cidas y coloracin violeta en soluciones levemente
alcalinas.
Resorcinol
CAS [108-46-3]
Sinonimia Resorcina.
Frmula y masa molecular C6H6O2 110,11
Descripcin Cristales o polvo cristalino incoloro o ama-
rillo plido; expuesto a la luz y al aire, adquiere coloracin
rosa.
Solubilidad Soluble en agua y etanol.
Resorcinol SI
Preparacin Disolver 0,2 g de resorcinol en 100 ml de
benceno. Dejar decantar.
Timolftalena
CAS [125-20-2]
Frmula y masa molecular C28H30O4 430,54
Descripcin Polvo blanco o amarillo claro.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, soluble en
etanol y en soluciones de hidrxidos alcalinos.
Timolftalena SI
Preparacin Disolver 0,1 g en 100 ml de etanol a 96%
(v/v).
Banda de pH 9,3 10,5
Cambio de color Es incoloro en medio cido y levemente
alcalino. Da coloracin azul en soluciones alcalinas ms
intensas.
Ensayo de sensibilidad La mezcla de 0,05 ml de timolfta-
lena SI con 100 ml de agua exenta de dixido de carbono
es incolora. Son necesarios no ms que 0,05 ml de hidrxi-
do de sodio 0,1 M para cambiar la coloracin para azul.
Tiocianato de amonio
CAS [1762-95-4]
Frmula y masa molecular NH4SCN 76,12
Descripcin Cristales incoloros y frgiles.
Solubilidad Muy soluble en agua y soluble en etanol.
Tiocianato de amonio SI
Preparacin Disolver 7,6 g en 100 ml de agua.
Tornasol
CAS [1393-92-6]
Especificacin Es constituido de pigmento ndigo azul
preparado a partir de varias especies de Rocella, Lecanosa
u otros lquenes. El pigmento posee olor caracterstico
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 419
Tornasol SI
Preparacin Hervir bajo reflujo, durante una hora, 25 g
de tornasol, finamente pulverizado, con 100 ml de etanol
a 90% (v/v). Descartar el etanol y repetir la operacin dos
veces, utilizando en cada extraccin 75 ml de etanol a 90%
(v/v). Tratar el tornasol extrado con 250 ml de agua. Fil-
trar.
Banda de pH 5,0 8,0
Cambio de color Da coloracin roja con los cidos y azul
14
con los lcalis.
Tornasol azul, papel
Preparacin Hervir 10 partes de tornasol, finamente pul-
verizado, con 100 partes de etanol a 96% (v/v), bajo reflu-
jo, por una hora. Decantar y descartar el etanol, aadir al
residuo mezcla de 45 partes de etanol y 15 partes de agua.
Dejar macerando por dos das. Decantar el sobrenadante e
impregnar tiras de papel de filtro comn con el extracto.
Secar a temperatura ambiente.
Ensayo de sensibilidad Sumergir tira de papel de tornasol
azul, midiendo 10 mm x 60 mm, en 100 ml de mezcla de 10
ml de cido clorhdrico 0,02 M y 90 ml de agua. Agitar. El
papel adquiere color rojo al fin de 45 segundos.
Tornasol rojo, papel
Preparacin Aadir cido clorhdrico 2 M al extracto ob-
tenido en el proceso de preparacin del papel azul, gota a
gota, hasta que la solucin presente coloracin roja. Im-
pregnar tiras de papel de filtro con esta solucin y dejar
secar a temperatura ambiente.
Ensayo de sensibilidad Sumergir tira de papel de tornasol
rojo en 100 ml de hidrxido de sodio 0,002 M. Agitar. El
papel debe quedar azul al final de 45 segundos.
Tropeolina O (CI 14270)
CAS [547-57-9]
Frmula y masa molecular C12H9N2NaO5S 316,27
Descripcin Polvo marrn.
Solubilidad Soluble en agua y etanol.
Tropeolina O SI
Preparacin Disolver 25 mg en 50 ml de metanol y agua
para completar 100 ml
Banda de pH 11,0 12,7
Cambio de color Da soluciones de coloracin amarilla
en medio moderadamente alcalino y coloracin naranja en
soluciones fuertemente alcalinas.
Ensayo de homogeneidad Aplicar 0,01 ml de tropeolina
O SI en cromatoplaca de celulosa G. Desarrollar el croma-
tograma con la. mezcla alcohol n-proplico, acetato de etilo
y agua (5:1:4). El cromatograma debe mostrar una nica
mancha con Rf aproximadamente 0,9.
Tropeolina OO (CI 13080)
CAS [554-73-4]
 420 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Frmula y masa molecular C18H14N3NaO3S 375,38
Descripcin Polvo amarillo o amarillo anaranjado.
Solubilidad Soluble en agua. Banda de pH 1,0 2,8
Cambio de color Da coloracin roja en soluciones fuer-
temente cidas y coloracin amarilla en soluciones menos
cidas.
Verde de bromocresol
CAS [76-60-8]
14 Frmula y masa molecular C21H14Br4O5S 698,02
Descripcin Polvo blanco amarronado.
Solubilidad Poco soluble en agua, soluble en etanol y
soluciones diluidas de hidrxidos alcalinos.
Verde de bromocresol SI
Preparacin Calentar 0,1 g del colorante con 2,9 ml de
hidrxido de sodio 0,05 M y 5 ml de etanol a 90% (v/v).
Despus de disolucin, aadir etanol a 20% (v/v) hasta el
volumen de 250 ml.
Banda de pH 3,6 5,2
Cambio de color Da coloracin amarilla en soluciones
moderadamente cidas y azul en soluciones levemente ci-
das y alcalinas.
Ensayo de sensibilidad La mezcla de 0,2 ml de verde
de bromocresol SI y 100 ml de agua exenta de dixido de
carbono presenta color azul. Son necesarios no ms que 0,2
ml de cido clorhdrico 0,02 M para alterar la coloracin
para amarilla.
Verde de malaquita, oxalato
CAS [2437-29-8]
Frmula y masa molecular C48H50N4O42HC2O4 927,10
Descripcin Slido cristalino verde.
Solubilidad Muy soluble en agua.
Verde de malaquita SI
Preparacin Disolver 1 g de oxalato de verde de mala-
quita en 100 ml de cido actico glacial.
Banda de pH 0,0-2,0
Cambio de color Da coloracin amarilla en soluciones
cidas y verde en soluciones menos cidas y alcalinas.
Verde de metilo (CI 42590)
CAS [14855-76-6]
Frmula y masa molecular C27H35BrClN3 516,94
Descripcin Polvo verde. Normalmente, se presenta en la
forma de sal con ZnCl2.
Solubilidad Soluble en agua.
Verde de metilo SI
Preparacin Disolver 0,1 g en 100 ml de agua.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Cambio de color En solucin de cido sulfrico presen-
ta color amarillo. Por la diluicin retorna a la coloracin
verde.
Rojo cresol
CAS [1733-12-6]
Frmula y masa molecular C21H18O5S 382,43
Descripcin Polvo cristalino marrn rojizo.
Solubilidad Poco soluble en agua, soluble en etanol y
soluciones diluidas de hidrxidos alcalinos.
Rojo cresol SI
Preparacin Calentar 50 mg de rojo cresol con 2,65 ml
de hidrxido de sodio 0,05 M y 5 ml de etanol a 90%. Des-
pus de disolucin, aadir etanol a 20% hasta completar
250 ml.
Banda de pH 0,2 1,8 y 7,2 8,8
Cambio de color Da, coloracin roja en soluciones fuer-
temente cidas (banda de pH: 0,2 1,8), coloracin ama-
rilla en soluciones menos cidas y neutras; en soluciones
moderadamente alcalinas presenta color roja (banda de
pH: 7,2 8,8).
Ensayo de sensibilidad La mezcla de 0,1 ml de rojo cre-
sol SI y 1000 ml de agua, exenta de dixido de carbono,
adicionada de 0,15 ml de hidrxido de sodio 0,02 M pre-
senta coloracin roja prpura. La coloracin cambia para
amarilla por la adicin de no ms que 0,15 ml de cido
clorhdrico 0,02 M.
Rojo congo (CI 22120)
CAS [573-58-0]
Frmula y masa molecular C32H22N6NA2O6S2 696,67
Descripcin Polvo rojo amarronado.
Solubilidad Soluble en agua.
Rojo congo SI
Preparacin Disolver 0,25 g de rojo congo en 50 ml de
etanol a 90% (v/v) y agua hasta completar 250 ml.
Banda de pH 3,0 5,0
Cambio de color Presenta coloracin azul en soluciones
moderadamente cidas y coloracin roja en soluciones le-
vemente cidas y alcalinas.
Ensayo de sensibilidad La mezcla de 0,2 ml de rojo con-
go SI, 100 ml de agua exenta de dixido de carbono y 0,3
ml de cido clorhdrico 0,1 M posee coloracin azul. Son
necesarios no ms que 0,3 ml de hidrxido de sodio 0,1 M
para alterar la coloracin para rosa.
Rojo congo, papel
Preparacin Sumergir tiras de papel de filtro comn en
rojo congo SI y dejar secar a temperatura ambiente.
Rojo de fenol
CAS [143-74-8]

Frmula y masa molecular C19H14O5S 354,38
Descripcin Polvo cristalino rojo claro u oscuro.
Solubilidad Muy poco soluble en agua y poco soluble
en etanol.
Rojo de fenol SI
Preparacin Calentar 0,1 g de rojo de fenol con 1,42 ml
de hidrxido de sodio 0,2 M y 5 ml de etanol a 90% (v/v).
Despus de disolucin, aadir etanol a 20% (v/v) para
completar 250 ml. Banda de pH 6,8-8,4
Cambio de pH Da coloracin amarilla en medio neutro y
roja en solucin levemente alcalina.
Ensayo de sensibilidad La mezcla de 0,1 ml de rojo de
fenol SI y 100 ml de agua exenta de dixido de carbono
presenta color amarillo. Son necesarios no ms que 0,1
ml de hidrxido de sodio 0,02 M para alterar la coloracin
para violeta-rojiza.
Rojo de metilo (CI 13020)
CAS [493-52-7]
Frmula y masa molecular C15H15N3O2 269,30
Descripcin Cristales violetas o polvo rojo oscuro.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y soluble
en etanol.
Rojo de metilo SI
Preparacin Calentar 0,1 g de rojo de metilo con 1,85 ml
de hidrxido de sodio 0,2 M y 5 ml de etanol a 90% (v/v).
Despus de disolucin, completar el volumen de 250 ml
con etanol a 50% (v/v).
Banda de pH 3,0 4,4
Cambio de color Da coloracin roja en soluciones le-
vemente cidas y coloracin amarilla en soluciones muy
levemente cidas y alcalinas.
Ensayo de sensibilidad La mezcla de 0,1 ml de rojo de
metilo SI, 100 ml de agua exenta de dixido de carbono y
0,05 ml de cido clorhdrico 0,02 M presenta color rojo.
Son necesarios no ms que 0,1 ml de hidrxido de sodio
0,02 M para cambiar la coloracin para amarilla.
Rojo de quinaldina
CAS [117-92-0]
Frmula y masa molecular C21H23IN2 430,33
Descripcin Polvo azul oscuro.
Solubilidad Ligeramente soluble en agua y fcilmente
soluble en etanol.
Rojo de quinaldina SI
Preparacin Disolver 0,1 g en 100 ml de metanol.
Cambio de color Ocurre cambio de coloracin carmn
para casi incoloro. Utilizado en titulaciones de bases con
cido perclrico.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 421
14.2 REACTIVOS Y
SOLUCIONES REACTIVOS
Reactivos son sustancias utilizadas, como tales, o como
constituyentes de soluciones, en la realizacin de los ensa-
yos farmacopeicos.
Acetal
CAS [105-57-7]
Frmula y masa molecular C6H14O2 118,17
14
Descripcin Lquido incoloro, lmpido y voltil.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,824.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,382. Temperatura
de ebullicin: cerca de 103 C.
Miscibilidad Miscible en agua y en etanol.
Acetaldehdo
CAS [75-07-0]
Sinonimia Etanal.
Frmula y masa molecular C2H4O 44,05
Descripcin Lquido incoloro y lmpido.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,788.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,332. Temperatura
de ebullicin: cerca de 21 C.
Miscibilidad Miscible en agua y en etanol.
Seguridad Inflamable!
Acetanilida
CAS [103-84-4]
Nombre qumico N-Fenilacetamida
Frmula y masa molecular C8H9NO 135,17
Descripcin Polvo blanco cristalino, inodoro.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 114 C a 116 C.
Solubilidad Poco soluble en agua, fcilmente soluble en
cloroformo y etanol, soluble en agua hirviendo, ter etlico
y glicerina.
Conservacin En recipientes cerrados.
Acetato de amonio
CAS [631-61-8]
Frmula y masa molecular C2H7NO2 77,08
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros, muy frgiles, de suave
olor actico.
Solubilidad Muy soluble en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
 422 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Acetato de amonio SR
Especificacin Contiene 15 g de acetato de amonio en
agua a 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Estabilidad Preparar para uso inmediato.
Acetato de bornilo
CAS [5655-61-8]
Frmula y masa molecular C12H20O2 196,29
14 Descripcin Cristales incoloros o lquido incoloro.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 28
C.
Solubilidad Muy poco soluble en agua y soluble en eta-
nol.
Acetato de butilo
CAS [123-86-4]
Frmula y masa molecular C6H12O2- 116,16
Descripcin Lquido incoloro y inflamable con olor dul-
ce de fruta.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,88.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,395. Banda de ebu-
llicin: 125 C a 126 C.
Miscibilidad Poco soluble en agua. Miscible en etanol y
ter etlico.
Conservacin En recipientes cerrados.
Acetato de celulosa
CAS [9004-35-7]
Especificacin Celulosa parcialmente acetilada, con gra-
dos de acetilacin variados.
Descripcin Slido amorfo blanco.
Categora Adsorbente en cromatografa en camada del-
gada.
Acetato de plomo, trihidratado
CAS [6080-56-4]
Sinonimia Acetato de plomo (II) trihidratado.
Frmula y masa molecular C4H6PbO43H2O 379,33
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros, transparentes o polvo
cristalino blanco, de olor actico suave. Eflorescente.
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin: 75 C (ca-
lentamiento rpido); se descompone completamente a 200
C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y soluble en eta-
nol.
Conservacin En recipientes hermticos.
Seguridad Txico. Contaminante.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Acetato de plomo, papel
Preparacin Impregnar papel adecuado (generalmente
en el tamao 6 mm x 80 mm) con solucin de acetato de
plomo SR. Secar el papel reactivo a 100 C, evitando con-
tacto con metal.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz y de la humedad.
Acetato de plomo SR (aproximadamente 0,25 M)
Especificacin Contiene 9,5 g de acetato de plomo en
100 ml de agua exenta de dixido de carbono.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Txico. Contaminante.
Acetato de plomo, solucin saturada
Especificacin Contiene aproximadamente 35 g de ace-
tato de plomo en 50 ml de agua exenta de dixido de car-
bono.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Txico. Contaminante.
Acetato de clorhexidina
CAS [56-95-1]
Frmula y masa molecular C26H38Cl2N10O4 625,58
Descripcin Cristales o polvo cristalino blanco a crema
plido; inodoro.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 154 C a 155 C.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Irritante.
Categora Antimicrobiano.
Acetato de clorhexidina a 0,1% (p/v)
Especificacin Contiene 0,1 g de acetato de clorhexidina
en 100 ml de agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Txico.
Categora Antimicrobiano.
Acetato de cobre
CAS [142-71-2]
Frmula y masa molecular C4H6CuO4H2O 199,65
Descripcin Polvo o cristales verde-azulados.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua hirviendo, solu-
ble en agua y en etanol poco soluble en glicerol.
Acetato de cortisona
CAS [50-04-4]
Frmula y masa molecular C23H30O6 402,49
Especificacin Contiene, como mnimo, 96,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.

Descripcin Cristales incoloros levemente amarillentos o
polvo cristalino blanco o casi blanco. Inodoro; inicialmen-
te inspido, despus amargo.
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin: aproxima-
damente 240 C. Rotacin ptica: + 209 a + 219 (deter-
minar en solucin a 1,0% (p/v) en dioxano).
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Categora Corticosteroide.
Acetato de cortisona, inyectable
Descripcin Consiste de una suspensin en medio acuo-
so adecuado, con pH entre 5,0 y 7,0.
Especificacin Contiene, como mnimo, 90,0% (p/p).
Conservacin En ampollas de dosis nica.
Acetato de desoxicortona
CAS [56-47-3]
Sinonimia Acetato de desoxicorticosterona.
Frmula y masa molecular C23H32O4 372,50
Especificacin Contiene, como mnimo, 96,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blanco.
Inodoro.
Caractersticas fsicas Banda de fusin: 157 C a 161 C.
Rotacin ptica: +171 a +179 (determinar en solucin a
1,0% (p/v) en dioxano).
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Categora Corticosteroide.
Acetato de etilo
CAS [141-78-6]
Frmula y masa molecular C4H8O2 88,11
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,9% (p/v).
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, voltil, de olor
caracterstico.
Caractersticas fsicas Densidad: aproximadamente
0,90. Temperatura de ebullicin: aproximadamente 77 C.
ndice de refraccin (20 C): 1,371 a 1,373.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del calor.
Seguridad Inflamable.
Acetato de fenilmercurio
CAS [62-38-4]
Frmula y masa molecular C8H8HgO2 336,74
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% (p/p).
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 423
Descripcin Cristales pequeos o polvo cristalino blanco
o color crema, brillante.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 149 C a 153 C.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Txico. Contaminante.
Acetato de indofenol SR
14
Sinonimia 2,6-Diclorofenolindofenol sdico en tampn
acetato.
Preparacin Diluir 12 ml de la solucin estndar de
2,6-diclorofenol-indofenol sdico en 100 ml de agua. A
esta solucin juntar 100 ml de tampn acetato pH 7,0.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Estabilidad Utilizar en como mximo dos semanas.
Almacenamiento Mantener bajo refrigeracin.
Acetato de magnesio
CAS [16674-78-5]
Frmula y masa molecular C4H6MgO4.4H2O 214,45
Descripcin Cristales incoloros y delicuescentes.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Acetato de mentilo
CAS [2623-23-6]
Frmula y masa molecular C12H22O2 198,30
Descripcin Lquido incoloro.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,92.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,447. Temperatura
de ebullicin: cerca de 228 C.
Miscibilidad Poco soluble en agua y miscible en etanol.
Acetato de mercurio
CAS [1600-27-7]
Sinonimia Acetato mercrico.
Frmula y masa molecular C4H6HgO4 318,68
Descripcin Cristales o polvo cristalino blanco, o casi
blancos, con suave olor actico.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 178 C a 180 C
(sobrecalentamiento resulta en descomposicin).
Conservacin En recipientes bien cerrados
Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Txico.
Acetato de mercurio SR
Preparacin Disolver 6 g de acetato de mercurio en ci-
do actico glacial a 100ml
Conservacin En recipientes cerrados.
 424 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Almacenamiento Proteger de la luz solar directa.
Acetato de metilo
CAS [79-20-9]
Frmula y masa molecular C3H6O2 74,07
Descripcin Lquido incoloro y lmpido.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,933.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,361. Banda de ebu-
llicin: 56 C a 58 C.
14 Miscibilidad Soluble en agua y miscible en etanol.
Acetato de potasio
CAS [127-08-2]
Frmula y masa molecular C2H3KO2 98,14
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blan-
co, inodoro o de olor actico suave. Delicuescente.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 292 C.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Acetato de potasio SR
Especificacin Contiene 10 g de acetato de potasio en
100 ml de agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Acetato de prednisolona
CAS [52-21-1]
Frmula y masa molecular C23H30O6 402,49
Especificacin Contiene, como mnimo, 96,0% (p/p) cal-
culado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Polvo cristalino blanco o casi blanco. Ino-
doro. Amargo.
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin: aproxima-
damente 247 C. Rotacin ptica: +112 a +119 (determi-
nar en solucin a 1,0% (p/v) en dioxano).
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Categora Corticosteroide.
Acetato de sodio
CAS [6131-90-4]
Frmula y masa molecular C2H3NaO2.3H2O 136,08 (se
anhidro 82,03)
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blan-
co, inodoro o de olor actico suave. Eflorescente.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Acetato de sodio SR (aproximadamente 0,02 M)
Especificacin Contiene 0,272 g de acetato de sodio tri-
hidratado en agua a 100 ml.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Acetato de uranilo
CAS [6159-44-0]
Frmula y masa molecular C4H6O6U.2H2O 424,15.
Descripcin Polvo cristalino amarillo, de olor actico
suave.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Sustancia radioactiva.
Acetato de uranilo y zinc SR
Preparacin Disolver 10 g de acetato de uranilo en 50 ml
de agua caliente y 5 ml de cido actico 30% (p/v). Disol-
ver 30 g de acetato de zinc en 30 ml de agua caliente y 3
ml de cido actico 30% (p/v). Mezclar las preparaciones
anteriores. Dejar enfriar. Filtrar.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Sustancia radioactiva.
Acetato de zinc
CAS [5970-45-6]
Frmula y masa molecular C4H6O4Zn.2H2O 219,50
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros o blancos, o escamas
cristalinas o grnulos, de olor actico suave, de sabor me-
tlico astringente. Eflorescente.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 237 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y soluble en eta-
nol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Irritante.
Acetilacetona
CAS [123-54-6]
Frmula y masa molecular C5H8O2 100,11
Descripcin Lquido lmpido, incoloro o amarillento, de
olor aromtico.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: apro-
ximadamente 139 C. Densidad: aproximadamente 0,97.
ndice de refraccin (20 C): 1,4505 a 1,4525.
Miscibilidad Miscible en acetona y etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Irritante. Inflamable.
Acetona
CAS [67-64-1]
Frmula y masa molecular C3H60 58,08
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% (p/v).

Descripcin Lquido lmpido, incoloro, voltil, de olor
caracterstico.
Caractersticas fsicas Densidad: 0,790 a 0,793. ndice
de refraccin (20 C): 1,358 a 1,360. Temperatura de ebu-
llicin: aproximadamente 56 C.
Conservacin En recipientes hermticos.
Seguridad Inflamable. Irritante y txico.
Acetona deshidratada
Especificacin Acetona, deshidratada en sulfato de sodio
anhidro.
Conservacin Preparar en el momento de uso.
Acetona tamponada SR
Preparacin Disolver 8,15 g de acetato de sodio trihidra-
tado y 42 g de cloruro de sodio en agua, aadir 68 ml de
cido clorhdrico 0,1 M 150 ml de acetona. Completar el
volumen con agua para 500 ml.
Acetonitrilo
CAS [75-05-8]
Frmula y masa molecular C2H3N 41,05
Descripcin Lquido lmpido y incoloro. Olor semejante
al ter.
Caractersticas fsicas Densidad (20C): cerca de 0,78.
ndice de Refraccin (20 C): cerca de 1,344.
Miscibilidad Miscible en agua, acetona y metanol.
Conservacin En recipientes hermticos.
Seguridad Txico. Inflamable!
cido actico M
Especificacin Contiene 6 g de cido actico glacial en
agua a 100 ml.
Conservacin En recipientes hermticos. Informacin
adicional Al usar, confirmar el ttulo.
cido actico 6 M
Especificacin Contiene 348 g de cido actico glacial en
agua a 1000 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del calor.
Seguridad Corrosivo e inflamable.
cido actico diluido
Especificacin Contiene 12 g de cido actico glacial en
agua a 100 ml.
Conservacin En recipientes hermticos.
cido actico SR
Especificacin Contiene 30 g de cido actico glacial en
agua a 100 ml. Corresponde al cido actico 5 M.
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, de olor irritante.
Conservacin En recipientes hermticos.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 425
cido actico glacial
CAS [64-19-7]
Frmula y masa molecular C2H4O2 60,05
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% (p/p).
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, voltil, de olor
irritante y caracterstico. Cristalizable a bajas temperaturas.
Caractersticas fsicas Densidad: aproximadamente
1,05. Temperatura de ebullicin: aproximadamente 118
C. Temperatura de congelamiento: aproximadamente 14
C.
Conservacin En recipientes hermticos.
14
Seguridad Corrosivo. Inflamable. Proteger ojos, piel y
mucosas.
cido 7-aminodesacetoxicefalospornico
CAS [22252-43-3]
Sinonimia 7-ADCA
Frmula y masa molecular C8H10N2O3S- 214,24
cido ascrbico
CAS [50-81-7]
Frmula y masa molecular C6H8O6 176,13
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blan-
co. Inodoro.
Caractersticas fsicas Solucin a 5% (p/v) presenta pH
de 2,2 a 2,5. Temperatura de fusin: aproximadamente 190
C, con descomposicin. Rotacin ptica especfica: entre
+20,5 y +21,5, determinar en solucin acuosa a 1% (p/v).
Conservacin En recipientes bien cerrados, no metlicos.
Almacenamiento Proteger de la luz.
cido benzoico
CAS [65-85-0]
Frmula y masa molecular C7H6O2. 122,12
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blan-
co, de olor caracterstico.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 122 C.
Solubilidad Poco soluble en agua, soluble en agua hir-
viendo y fcilmente soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
cido brico
CAS [10043-35-3]
Frmula y masa molecular H3BO3 61,83
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,5% (p/p).
 426 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Descripcin Cristales incoloros brillantes o polvo fino Sinonimia cido 1,2-ciclohexileno-diamino-tetractico,

cristalino blanco, untuoso al tacto, de sabor levemente ci- CDTA.
do y amargo.
Frmula y masa molecular C14H22N2O8.H2O 364,35.
Solubilidad Soluble en agua y en etanol, fcilmente solu-
Descripcin Polvo blanco.
ble en agua hirviendo.
Conservacin Recipientes bien cerrados, protegidos del
Conservacin En recipientes bien cerrados.
calor.
cido brico, solucin saturada
Seguridad Irritante.
Preparacin Disolver 5 g en 100 ml de agua.
cido cinmico

14
Conservacin En recipientes bien cerrados.
CAS [140-10-3]
cido bromhdrico Frmula y masa molecular C9H8O 148,16
CAS [10035-10-6] Descripcin Cristales incoloros.
Frmula y masa molecular HBr 80,91
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 133 C.
Especificacin Contiene 48,0% (p/v).
Solubilidad Muy poco soluble en agua y fcilmente so-
Descripcin Lquido incoloro o levemente amarillo, de luble en etanol.
olor fuerte e irritante. Oscurece lentamente por la exposi-
cin al aire y a la luz. cido ctrico, monohidratado
Conservacin En recipientes bien cerrados. CAS [5949-29-1]
Almacenamiento Proteger del aire y de la luz. Frmula y masa molecular C6H8O7.H2O 210,14

Seguridad Irritante. Corrosivo. Descripcin Cristales o grnulos incoloros, o polvo cris-

talino blanco o casi blanco. Eflorescente.
cido cafeico Solubilidad Muy soluble en agua y fcilmente soluble
CAS [331-39-5] en etanol.
Frmula y masa molecular C9H8O4 180,16 Conservacin En recipientes bien cerrados.
Descripcin Cristales blancos o casi blancos.
cido clorhdrico
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 225
CAS [7647-01-0]
C, con descomposicin.
Sinonimia Cloruro de hidrgeno y cido clorhdrico con-
Solubilidad Fcilmente soluble en agua caliente y etanol, centrado.
ligeramente soluble en agua fra.
Frmula y masa molecular HCl 36,46
cido calconcarboxlico Especificacin Contiene, como mnimo, 35,0% (p/p)
CAS [3737-95-9] constituido de solucin de HCl gaseoso en agua.
Frmula y masa molecular C21H14N2O7S 438,40 Descripcin Lquido lmpido, incoloro, humeante, de
olor irritante.
Descripcin Polvo marrn-negro.
Caractersticas fsicas Densidad: aproximadamente 1,18.
Solubilidad Poco soluble en agua, muy poco soluble en
acetona y en etanol, ligeramente soluble en soluciones di- Conservacin En recipientes hermticos, de material
luidas de hidrxido de sodio. inerte al reactivo.
Conservacin En recipientes bien cerrados. Almacenamiento Proteger del calor (mantener en tempe-
raturas menores que 20 C).
cido ciclobutano-1,1-dicarboxlico
Seguridad Corrosivo. Evitar contacto externo, ojos y
CAS [5445-51-2] piel, inhalacin e ingestin.
Frmula y masa molecular C6H10O4 144,13
cido clorhdrico bromado SR
Descripcin Cristales blancos.
Preparacin Aadir 1 ml de bromo SR en 100 ml de ci-
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 160 do clorhdrico.
C.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Conservacin En recipientes cerrados.
cido clorhdrico diluido
cido 1,2-ciclohexileno-dinitrilo-tetractico
Especificacin Usar cido clorhdrico SR.
CAS [125572-95-4]
cido clorhdrico M

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 427

Especificacin Contiene 103 g de cido clorhdrico en cido crmico

1000 ml de agua.
Donde conste, usar trixido de cromo (CrO3).
Conservacin En recipientes bien cerrados. Estabilidad
cido 3,5-dinitrobenzoico
Proteger del calor.
CAS [99-34-3]
Seguridad Corrosivo.
Frmula y masa molecular C7H4N2O6 212,12
Informacin adicional Al usar, confirme el ttulo.
Descripcin Cristales prcticamente incoloros.
cido clorhdrico SR Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
Especificacin Contiene 27,4 g de cido clorhdrico con- 206 C.
centrado en 100 ml de agua.
Caractersticas fsicas Densidad: aproximadamente 1,05.
cido edtico
CAS [60-00-4]
14
Conservacin En recipientes bien cerrados. Estabilidad
Sinonimia cido etilenodiaminotetractico, EDTA.
Proteger del calor.
Frmula y masa molecular C10H16N2O8 292,24
Seguridad Corrosivo.
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% (p/p).
cido clorhdrico metanlico 0,01 M
Descripcin Cristales incoloros.
Preparacin Transferir 0,85 ml de cido clorhdrico para
Caracterstica fsica Se descompone alrededor de 220
baln volumtrico de 1000 ml y completar el volumen con
C, pudiendo descarboxilar a 150 C.
metanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
cido clorhdrico-estao SR
Preparacin Disolver 2,5 g de fenol en 15,0 ml de cido
Preparacin Mezclar 1 ml de cloruro de estao SR1 con
sulfrico. Juntar 7,5 ml de cido sulfrico humeante. Ca-
100 ml de cido clorhdrico.
lentar a 100 C por dos horas. Transferir el producto fluido
para recipiente adecuado. Para uso, licuar en bao de agua.
cido clorognico
Conservacin Recipiente de vidrio con tapa esmerilada.
CAS [327-97-9]
Frmula y masa molecular C16H18O9 354,34 Seguridad Irritante y corrosivo.

Descripcin Agujas o polvo cristalino blanco o casi blan- cido fenoxiactico

co.
CAS [122-59-8]
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 208
Frmula y masa molecular C8H8O3 152,15
C.
Descripcin Cristales casi blancos.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua hirviendo, en
acetona y en etanol. Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 98
C.
cido cloroplatnico
Solubilidad Ligeramente soluble en agua y fcilmente
CAS [18497-13-7] soluble en etanol y cido actico glacial.
Sinonimia Cloruro platnico, cloruro de platino, cido
cloroplatnico (IV). cido fluorhdrico

Frmula y masa molecular H2PtCL6.6H2O 517,90 CAS [7664-39-3]

Frmula y masa molecular HF 20,01
Especificacin Contiene, como mnimo, 37,0% (p/p) de
platino. Especificacin Contiene, como mnimo, 40% (p/p) de
HF.
Descripcin Masa cristalina amarilla amarronada, muy
delicuescente. Descripcin Lquido incoloro y lmpido.
Caractersticas fsicas Densidad: 2,431. Temperatura de Conservacin En recipientes de polietileno bien cerra-
fusin: 60 C. dos.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y soluble en eta- cido frmico
nol.
CAS [64-18-6]
Conservacin En recipientes cerrados.
Sinonimia cido metanoico.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Frmula y masa molecular CH2O2 46,03
Seguridad Txico.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 428 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Especificacin La forma anhidra contiene, como mni-
mo, 98,0% (p/p). El comercial contiene en torno de 90,0%
(p/p).
Descripcin Lquido incoloro, muy custico, de olor pi-
cante.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: 100,5
C. Densidad: aproximadamente 1,22. ndice de refraccin
(20 C): 1,3714. Solidifica a 70 C.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
14
Seguridad Custico.
cido fosfomolbdico
CAS [51429-74-4]
Sinonimia cido molibdofosfrico.
Frmula molecular Aproximadamente 12MoO3.H3PO4.
xH2O.
Descripcin Cristales levemente amarillentos.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
cido fenoldisulfnico SR
CAS [96-77-5]
Frmula y masa molecular C6H6O7S2 254,24
Descripcin Lquido lmpido a marrn claro.
cido fosfomolbdico SR
Preparacin Disolver 4 g de cido fosfomolbdico en 40
ml de agua bajo calentamiento. Despus de enfriamiento
aadir 60 ml de cido sulfrico.
cido fosfrico
CAS [7664-38-2]
Sinonimia cido ortofosfrico
Frmula y masa molecular H3PO4 98,00
Especificacin Contiene, como mnimo, 85,0% (p/p).
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, inodoro. Higros-
copio; consistencia de jarabe.
Caracterstica fsica Densidad: aproximadamente 1,7.
Conservacin En recipientes hermticos.
Seguridad Corrosivo! Evitar contacto con piel, mucosas,
membranas.
cido fosfrico SR
Preparacin Mezclar cantidad correspondiente a 15 g de
cido fosfrico concentrado con agua hasta alcanzar 100
ml.
Caracterstica fsica Densidad: aproximadamente 1,15.
cido fosfotngstico SR
Preparacin Calentar bajo reflujo por 3 horas, la mezcla
de 10 g de tungstato de sodio con 8 ml de cido fosfrico y
75 ml de agua. Dejar enfriar y diluir para 100 ml con agua.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
cido ftlico
CAS [88-99-3]
Frmula y masa molecular C8H6O4, 166,14
Descripcin Polvo cristalino blanco o casi blanco.
Solubilidad Soluble en agua caliente y en etanol.
cido glico
CAS [5995-86-8]
Frmula y masa molecular C7H6O5H2O 188,14
Descripcin Agujas largas o polvo cristalino incoloro o
amarillo claro.
Caractersticas fsicas Pierde agua de cristalizacin a
temperatura de 120 C y se funde en cerca de 206 C, con
descomposicin.
Solubilidad Soluble en agua, fcilmente soluble en agua
caliente, en etanol y en glicerol.
cido p-hidroxibenzoico
CAS [99-96-7]
Frmula y masa molecular C7H6O3 138,13
Descripcin Cristales incoloros.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 213-214 C.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
cido hipofosforoso
CAS [6303-21-5]
Sinonimia cido hipofosforoso diluido.
Frmula y masa molecular H3PO2 66,00
Especificacin Contiene, como mnimo, 48% (p/v) de
H3PO2
Descripcin Lquido incoloro o ligeramente amarillo.
Miscibilidad Miscible en agua y etanol.
cido yodhdrico
CAS [10034-85-2]
Frmula y masa molecular HI 127,91
Descripcin Solucin acuosa de cido yodhdrico. Cuan-
do recin preparado, es incoloro, pero con la exposicin al
aire y a la luz, presenta color amarillento a marrn.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz y del contacto con el
aire. Mantener en temperaturas menores que 30 C.
cido lctico
CAS [50-21-5]
Sinonimia cido 2-hidroxipropanoico
Frmula y masa molecular C3H6O3 90,08
Especificacin Mezcla del cido 2-hidroxipropanoico y
sus productos de condensacin. El equilibrio entre el cido
lctico y los cidos polilticos es dependiente de la concen-
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 429

tracin y de la temperatura. El cido lctico normalmente cido ntrico humeante

es un racemato (R,S-cido lctico).
Descripcin Lquido viscoso incoloro o levemente ama-
rillo.
Miscibilidad Miscible en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes cerrados.
cido metafosfrico
CAS [10343-62-1]
Frmula y masa molecular (HPO3)n, monmero 79,98.
Especificacin Contiene cierta proporcin de metafosfa-
to de sodio.
Descripcin Slido o masa vtrea, incoloro. Higroscpi-
co. En solucin acuosa, se transforma lentamente en cido
fosfrico (H3PO4).
Caracterstica fsica Volatiliza bajo calentamiento inten-
so.
Conservacin En recipientes hermticos.
cido metafosfrico-actico SR
Especificacin Contiene 3 g de cido metafosfrico y 8
ml de cido actico glacial en agua a 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados. Estabilidad
Limitada a dos das.
Almacenamiento Mantener bajo refrigeracin.
cido metanosulfnico
CAS [75-75-2]
Frmula y masa molecular CH4O3S 96,11
Descripcin Lquido lmpido y incoloro (solidifica a 20
C).
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 1,48.
ndice de refraccin: cerca de 1,430. Temperatura de fu-
sin: 20 C.
Miscibilidad Miscible en agua, poco miscible en tolueno
y prcticamente inmiscible en hexano.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Irritante!
cido ntrico
CAS [7697-37-2]
Frmula y masa molecular HNO3 63,01
Especificacin Contiene, como mnimo, 63,0% (p/p).
Descripcin Solucin lmpida, prcticamente incolora,
de olor caracterstico.
Caracterstica fsica Densidad: 1,384 a 1,416.
Conservacin En recipientes hermticos, al abrigo de la
luz.
Seguridad Corrosivo.
Especificacin Contiene, como mnimo, 95,0% (p/p).
Descripcin Lquido lmpido, levemente amarillento, hu-
meante en el aire.
cido ntrico SR
Especificacin Contiene cerca de 12,5% (p/v) de HNO3.
Caracterstica fsica Densidad: aproximadamente 1,5.
cido oxlico
CAS [6153-56-6] 14
Sinonimia cido etanodioico.
Frmula y masa molecular C2H2O4.2H2O 126,07
Especificacin Contiene, como mnimo, 99% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blanco.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin:
aproximadamente 101 C.
Seguridad Veneno!
cido oxlico SR
Especificacin Solucin de cido oxlico a 6,3% (p/v).
cido perclrico
CAS [7601-90-3]
Frmula y masa molecular HClO4 100,46
Especificacin Contiene, como mnimo, 70,0% (p/p) y,
como mximo, 72,0% de HClO4.
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, voltil y de olor
picante. Higroscpico.
Caracterstica fsica Densidad: aproximadamente 1,7.
Conservacin Se descompone espontneamente, pudien-
do explotar especialmente en contacto con sustancias oxi-
dables.
Seguridad Irritante. Corrosivo!
cido perclrico M
Especificacin Contiene 8,5 ml de HClO4 en agua, has-
ta100 ml.
Estabilidad Usar solucin recin preparada.
cido perclrico SR
Usar cido perclrico M.
cido perfrmico
CAS [107-32-4]
Sinonimia cido peroxifrmico.
Frmula y masa molecular CH2O3 62,03
Preparacin Mezclar 1 ml de perxido de hidrgeno a
30,0% (v/v), o 9,0% (p/p), con 90 ml del cido frmico.
Conservacin Preparar en el momento de uso.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 430 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Almacenamiento Proteger del calor.
Seguridad Irritante. Puede explotar en contacto con me-
tales, sus xidos, sustancias reductoras, o en la destilacin.
cido peridico
CAS [10450-60-9]
Frmula y masa molecular H5IO6 227,94
Descripcin Cristales blancos a incoloros.
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin: 122 C.
14 Se descompone entre 130 C y 140 C, formando I2O5,
H2O y O2.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y soluble en eta-
nol.
cido pcrico
CAS [88-89-1]
Sinonimia 2,4,6-Trinitrofenol.
Frmula y masa molecular C6H3N3O7 229,10
Especificacin Cristales amarillos o placas humedecidas
con agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados, mezclado
con igual masa de agua.
Almacenamiento En temperatura ambiente.
Seguridad Explota cuando es calentado rpidamente o
sometido a choque. Para transporte seguro, 10% a 20% de
agua son generalmente aadidos.
cido pcrico SR
Preparacin Aadir 0,25 ml de hidrxido de sodio 10 M
en 100 ml de solucin saturada de cido pcrico en agua.
cido pcrico SR1
Preparacin Disolver el equivalente a 1 g de cido pcri-
co en 100 ml de agua caliente. Enfriar y filtrar, si necesario.
cido rosmarnico
CAS [20283-92-5]
Frmula y masa molecular C18H16O8 360,31
Descripcin Polvo rojo anaranjado.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 170 C a 174 C.
cido saliclico
CAS [69-72-7]
Sinonimia cido 2-hidroxibenzoico.
Frmula y masa molecular C7H6O3 138,12
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p),
calculado sobre base seca.
Descripcin Polvo cristalino blanco o agujas cristalinas
incoloros. Inodoro y sabor cido dulce e irritante.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 156-160 C.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Solubilidad Poco soluble en agua, fcilmente soluble en
etanol a 96% (v/v), ligeramente soluble en cloruro de me-
tileno.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
cido selenioso
CAS [7783-00-8]
Frmula y masa molecular H2SeO3 128,97
Especificacin Contiene, como mnimo, 93% (p/p) de
H2SeO3.
Descripcin Cristales blancos o incoloros. Eflorescente
al aire seco y higroscpico al aire hmedo.
Solubilidad Soluble en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
cido sulfmico
CAS [5329-14-6]
Frmula y masa molecular H3NO3S 97,09
Sinonimia cido amidosulfnico.
Especificacin Cristales blancos o polvo cristalino.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
205 C, con descomposicin.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, ligeramente so-
luble en acetona, en etanol y en metanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados de vidrio m-
bar.
Seguridad Moderadamente irritante para piel y mucosas.
cido sulfanlico
CAS [6101-32-2]
Sinonimia cido 4-aminobencenosulfnico.
Frmula y masa molecular C6H7NO3 S.H2O 191,20;
anhidro 173,84.
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros o polvo blanco.
Caracterstica fsica El cido monohidratado se descom-
pone sin fundirse a aproximadamente 288 C.
Solubilidad Ligeramente soluble en agua, prcticamente
insoluble en etanol.
cido sulfanlico diazotado SR
Preparacin Disolver, cuidadosamente, 0,2 g de cido
sulfanlico en 20 ml de cido clorhdrico M, enfriar en bao
de hielo y aadir, gota a gota, con agitacin continua, 2,2
ml de solucin de nitrito de sodio a 4% (p/v). Dejar en bao
de hielo por 10 minutos y aadir 1 ml de solucin de cido
sulfmico a 5% (p/v).
cido sulfanlico SR
Preparacin Disolver 0,5 g de cido sulfanlico finamen-
te pulverizado, en agua. Aadir 6 ml de cido clorhdrico 6
M. Completar con agua hasta 100 ml.

cido sulfrico
CAS [7664-93-9]
Frmula y masa molecular H2SO4 98,07
Especificacin Contiene, como mnimo 95,0% (p/p).
Descripcin Lquido incoloro, custico, de consistencia
oleosa, muy higroscpico.
Caracterstica fsica Densidad: 1,834 a 1,839.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Irritante. Corrosivo!
cido sulfrico diluido
Usar cido sulfrico SR.
cido sulfrico libre de nitrgeno
Especificacin Cumple la siguiente prueba: en 5 ml de
agua, aadir, cuidadosamente, 45 ml de cido sulfrico, es-
perar enfriar para 40 C y aadir 8 mg de difenilbencidina.
La solucin resultante es levemente rosa o un azul plida.
cido sulfrico metanlico 0,1 M
Preparacin Diluir 5,4 ml de cido sulfrico con 20 ml
de metanol. Completar para 1000 ml con el mismo sol-
vente.
Informaciones adicionales Preparar 24 horas antes del
uso.
cido sulfrico/metanol SR
Preparacin Aadir lentamente 10 ml de cido sulfrico
en 90 ml de metanol. Observacin Mantener el sistema
fro.
cido sulfrico metanlico SR
Preparacin A 30 ml de metanol anhidro fro en bao de
hielo aadir, cuidadosamente, cido sulfrico en pequeas
cantidades, bajo agitacin. Enfriar a temperatura ambiente
y completar para 100 ml con cido sulfrico. Homogenei-
zar.
cido sulfrico, solucin etanlica
Preparacin Cuidadosamente y con constante enfria-
miento, aadir 20 ml de cido sulfrico en 60 ml de etanol.
Continuar el enfriamiento y diluir para 100 ml con etanol.
Preparar inmediatamente antes del uso.
cido sulfrico SR
Especificacin Contiene cido sulfrico a 10% (p/v) en
agua.
Preparacin Aadir, cuidadosamente, 57 ml de cido
sulfrico en 100 ml de agua, enfriar y diluir para 1000 ml
con agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
cido sulfuroso
CAS [7782-99-2]
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 431
Frmula y masa molecular H2SO3 82,07
Especificacin Contiene 5,0 a 6,0% (p/p) de dixido de
azufre puro. Preparar de acuerdo con el consumo.
Descripcin Lquido cido, lmpido, incoloro, de olor
sofocante de dixido de azufre. Al aire se oxida paulatina-
mente a cido sulfrico.
Conservacin En recipientes casi llenos, bien cerrados,
en local fro.
14
cido tartrico
CAS [87-69-4]
Sinonimia cido L-(+)-tartrico.
Frmula y masa molecular C4H6O6 150,09
Descripcin Cristales o polvos cristalinos blancos.
Caractersticas fsicas Banda de fusin: 168 C a 170 C.
Densidad (20 C): 1,756.
Solubilidad Muy soluble en agua y fcilmente soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
cido tiogliclico
CAS [68-11-1]
Sinonimia cido mercaptoactico. Frmula y masa mo-
lecular C2H4O2S 92,11
Especificacin Contiene, como mnimo, 79,0% (p/p).
Descripcin Lquido incoloro o prximo a incoloro, de
olor fuerte desagradable.
Caracterstica fsica Densidad: aproximadamente 1,33.
Miscibilidad Miscible en agua y en etanol.
Conservacin Proteger del aire.
Seguridad Puede causar graves quemaduras en la piel.
Informacin adicional Su descomposicin libera gas sul-
fhdrico.
cido p-toluenosulfnico
CAS [6192-52-5]
Frmula y masa molecular C7H8O3S.H2O 190,21
Especificacin Contiene, como mnimo, 87% de
C7H8O3S.
Descripcin Cristales o polvo cristalino blanco o casi
blanco.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y soluble en eta-
nol.
cido tricloroactico
CAS [76-03-9]
Frmula y masa molecular C2HC13O2 163,39
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% (p/p).
 432 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Descripcin Cristales incoloros o masa cristalina, de-
licuescente, de olor caracterstico levemente penetrante,
irritante.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 55 a 61 C.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger del calor y de la humedad.
Seguridad cido muy corrosivo.
cido tricloroactico-cloramina-T SR
14 Solucin A Cloramina-T a 3% (p/v).
Solucin B cido tricloroactico a 25% (v/v) en etanol
absoluto.
Preparacin Mezclar 10 ml de la Solucin A con 40 ml
de la Solucin B.
cido trifluoractico
CAS [76-05-1]
Sinonimia cido trifluoroactico.
Frmula y masa molecular C2HF3O2 114,02
Descripcin Lquido incoloro, voltil, de olor irritante y
caracterstico.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: 72,4
C. Densidad: 1,535.
Miscibilidad Miscible en acetona, benceno, etanol, ter
etlico, hexano y tetracloruro de carbono.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Corrosivo. Inflamable. Proteger ojos, piel y
mucosas.
Acrilamida
CAS [79-06-1]
Sinonimia 2-Propenamida.
Frmula y masa molecular C3H5NO 71,08
Especificacin Calidad apropiada para electroforesis.
Descripcin Polvo cristalino blanco, o casi blanco, o es-
camas incoloras o blancas.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 84
C.
Solubilidad Muy soluble en agua y en metanol, fcilmen-
te soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Altamente txico e irritante. Causa parlisis
del sistema nervioso central. Puede ser adsorbido por la
piel ntegra.
Acrilamida/bisacrilamida (29:1) a 30% (p/v) SR
Preparacin Preparar una solucin conteniendo 290 g de
acrilamida y 10 g de metilenbisacrilamida por 1000 ml de
agua caliente. Filtrar.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Agar
CAS [9002-18-0]
Sinonimia Agar-agar, gelosa.
Especificacin Polisacrido extrado de Gelidium carti-
lagineum (L) Gaillon (Gelidiaceae), Gracilaria confervoi-
des (L) Greville (Sphaerococcaceae) y algas rojas afines
(Rhodophyceae).
Descripcin Polvo fino, incoloro o ligeramente amari-
llento, seco, hidroflico.
Conservacin En recipientes hermticos.
Agarosa, gel
CAS [9012-36-6]
Especificacin Polisacrido lineal, neutro, componente
del agar.
Descripcin Polvo blanco o casi blanco.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua fra y muy
poco soluble en agua caliente.
Uso Electroforesis.
Agarosa-DEAE para cromatografa de cambio inico
Especificacin Agarosa reticulada conteniendo agrupa-
mientos dietilaminoetilo. Se presenta en forma de esferas.
Agua de bromo SR
Preparacin Mezclar 3 ml de bromo con 100 ml de agua
hasta saturacin. Agitar antes del uso. Despus de decanta-
cin, usar la solucin sobrenadante lmpida.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Conservar con exceso de bromo y al
abrigo de la luz.
Seguridad Txico.
Agua de cloro SR
Especificacin Solucin saturada de cloro en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz y del aire. Mantener
en local fro y oscuro.
Agua exenta de dixido de carbono
Especificacin Agua hervida vigorosamente por 5 minu-
tos o ms y protegida de la atmsfera, durante enfriamiento
y conservacin.
Conservacin Proteger del aire (de la absorcin de CO2).
Agua exenta de amonaco
Preparacin Transferir 0,1 ml de cido sulfrico 96%
(p/p) para 100 ml de agua y destilar empleando equipo con
paredes exentas de amonaco.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 433

Agua exenta de nitrato Sinonimia Isopropanol, 2-propanol. Frmula y masa mo-

lecular C3H8O 60,10
Preparacin Transferir 5 mg de permanganato de potasio
y 5 mg de hidrxido de bario para 100 ml de agua y destilar Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0%.
empleando equipo con paredes exentas de nitrato.
Descripcin Lquido incoloro, de olor caracterstico.
Agua libre de partculas Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: apro-
ximadamente 82 C. Densidad: aproximadamente 0,785.
Especificacin Agua obtenida por filtracin en membra-
ndice de refraccin (20 C): 1,376 a 1,378.
na de porosidad de 0,22 m.
Miscibilidad Miscible en agua y con etanol.
Albmina bovina

14
Conservacin En recipientes bien cerrados.
CAS [9048-46-8]
Seguridad Inflamable.
Sinonimia Albmina srica de origen bovina.
Descripcin Polvo blanco o marrn amarillento claro. Alcohol n-amlico

Especificacin Contiene, como mnimo, 96% de prote- CAS [71-41-0]

nas. Agua (5.2.20.3) Determinar en 0,8 g de la muestra. Sinonimia 1-Pentanol, pentan-1-ol
Como mximo, 30%.
Frmula y masa molecular C5H12O 88,15
Almacenamiento En temperaturas entre 2 C y 8 C.
Descripcin Lquido incoloro.
Albmina humana Caractersticas fsicas ndice de refraccin (20 C): cer-
ca de 1,41. Temperatura de ebullicin: cerca de 137 C.
Sinonimia Albmina srica humana.
Temperatura de fusin: cerca de -79 C.
Especificacin Contiene, como mnimo, 96% de alb-
Miscibilidad Ligeramente soluble en agua y miscible en
mina.
etanol.
Albmina Humana, solucin reactiva Conservacin En recipientes bien cerrados
Preparacin Diluir la solucin de albmina humana con Seguridad Irritante!
15% a 25% (p/v) en solucin de cloruro de sodio a 0,9%
(p/v) hasta una concentracin de 0,1% (p/v) en protenas. Alcohol n-proplico
Ajuste el pH para 3,5-4,5 con cido actico glacial.
CAS [71-23-8]
Alcohol isoamlico Sinonimia 1-Propanol, propanol. Frmula y masa mole-
cular C3H8O 60,10
CAS [123-51-3]
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, de suave olor al-
Sinonimia 3-Metilbutano-1-ol.
cohlico.
Frmula y masa molecular C5H12O 88,15
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: apro-
Descripcin Lquido incoloro. ximadamente 97 C Densidad: 0,803 a 0,805.
Caracterstica fsica Temperatura de ebullicin: cerca de Miscibilidad Miscible con agua y con etanol.
130 C.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Miscibilidad Poco soluble en agua y miscible en etanol.
Seguridad Inflamable.
Alcohol isobutlico
Alcohol polivinlico
CAS [78-83-1]
CAS [9002-89-5]
Sinonimia 2-Metilpropanol, 2-metil-1-propanol, isobuta-
Frmula molecular (C2H4O)n
nol.
Descripcin Polvo blanco.
Frmula y masa molecular C4H10O 74,12
Solubilidad Soluble en agua y insoluble en solventes or-
Descripcin Lquido incoloro y lmpido.
gnicos.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,80.
ndice de refraccin (15 C): 1,397 a 1,399. Temperatura Alcohol terc-amlico
de ebullicin: cerca de 107 C.
CAS [75-85-4]
Conservacin En recipientes bien cerrados. Sinonimia 2-Metil-2-butanol.
Seguridad Inflamable. Frmula y masa molecular C5H12O 88,15

Alcohol isoproplico Descripcin Lquido lmpido e incoloro. Voltil.

CAS [67-63-0]

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 434 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Caractersticas fsicas Densidad relativa (20 C): cerca
de 0,81. Temperatura de fusin: cerca de -8 C. Temperatu-
ra de ebullicin: 102 C.
Miscibilidad Fcilmente miscible en agua. Miscible en
etanol y en glicerol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Inflamable.
Almidn exento de yoduro SR
Usar almidn exento de yoduro SI.
Almidn soluble
Sinonimia Amilodextrina, amilogenio.
Descripcin Polvo blanco, fino, inodoro, inspido.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la humedad.

14 Alcohol terc-butlico
CAS [75-65-0]
Almidn SR
Usar almidn SI.
Sinonimia 2-Metil-2-propanol.
Frmula y masa molecular C4H10O 74,12 Almidn

Descripcin Lquido incoloro y lmpido, o masa cristali-
na de olor alcanforado.
Caractersticas fsicas Densidad (25 C): 0,778 a 0,782.
Temperatura de fusin: 25,7 C. Temperatura de ebulli-
cin: 82,5 C a 83,5 C.
Descripcin Extrados de cariopses maduras de Zea mays
L., Triticum aestivum L. u oryza sativa L. (fam. Grami-
niae). Polvo blanco, fino, inodoro, inspido y que produce
ligera crepitacin cuando es comprimido.
Conservacin En recipientes bien cerrados.

Miscibilidad Soluble en agua, miscible con etanol y ter Almacenamiento Proteger de la humedad. Informacin
etlico. adicional El etiquetado debe indicar el origen botnico.

Aluminio, metlico 4-Aminoantipirina

CAS [7429-90-5] CAS [83-07-8]

Elemento y masa atmica Al 26,98 Sinonimia Aminopirazolona

Descripcin Metal blanco o casi blanco a azulado, ma- Frmula y masa molecular C11H13N3O 203,24
leable, flexible. Disponible en barra, polvo, tiras o hilos. Descripcin Cristales o polvo cristalino, amarillo-claro.

Aluminn Caracterstica fsica Temperatura de fusin:

CAS [569-58-4] aproximadamente 109 C.

Frmula y masa molecular C22H23N3O9 473,43 Conservacin En recipientes bien cerrados.
Descripcin Cristales marrones rojizos. Aminobutanol
Solubilidad Fcilmente soluble en agua. CAS [96-20-8]
Amaranto (CI 16185) Nombre qumico 2-Amino-1-butanol

CAS [915-67-3] Frmula y masa molecular C4H11NO 89,14

Frmula y masa molecular C20H11N2Na3O10S3 604,06 Descripcin Lquido oleoso.
Descripcin Polvo fino, fcilmente soluble en agua, prc- Caracterstica fsica Temperatura de ebullicin: en torno
ticamente insoluble en etanol, acetona, ter etlico y cloro- de 180 C.
formo. Miscibilidad Miscible con agua, soluble en alcoholes.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
2-Aminoheptano
Almidn yodado SR CAS [123-82-0]
Usar almidn yodado SI. Sinonimia 2-Heptanamina; 2-heptilamina; 1-metilhexa-
namina
Almidn yodado SR1
Frmula y masa molecular C7H17N 115,22
Preparacin Disolver 0,75 g de yoduro de potasio en 100
ml de agua. Calentar hasta ebullicin y aadir, agitando Descripcin Lquido voltil.
constantemente, una solucin conteniendo 0,5 g de almi- Caracterstica fsica Temperatura de ebullicin: en torno
dn soluble en 35 ml de agua. Dejar hervir por 2 minutos de 143 C.
y enfriar.
Miscibilidad Poco miscible en agua, fcilmente miscible
en cloroformo, etanol y ter etlico.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 435

4-Aminofenol Caractersticas fsicas ndice de refraccin (25 C): cer-

CAS [123-30-8]
Frmula y masa molecular C7H7NO 109,13
Descripcin Polvo cristalino blanco o un poco colorido
debido a exposicin al aire y luz.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 186
C, con descomposicin.
Solubilidad Ligeramente soluble en agua y soluble en
etanol.
Conservacin En recipientes cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
2-Aminopiridina
CAS [504-29-0]
Sinonimia -Aminopiridina, 2-piridinamina.
Descripcin Cristales grandes.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
58 C.
ca de 1,56. Temperatura de ebullicin: cerca de 230 C.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, fcilmente
soluble en etanol y soluble en acetato de etilo y ter de
petrleo.
Anhdrido actico
CAS [108-24-7]
Frmula y masa molecular C4H6O3 102,09
Especificacin Contiene, en el mnimo, 97,0% (p/p).
Descripcin Lquido mvil, incoloro, olor actico inten-
so e irritante.
14
Caractersticas fsicas Densidad: aproximadamente
1,075. Banda de ebullicin: 136 a 142 C.
Conservacin En recipientes hermticos.
Seguridad Fcilmente combustible. Irritante fuerte.
Anhdrido actico-piridina SR
Sinonimia Mezcla anhdrido actico-piridina SR

Amonaco SR Descripcin Mezclar cautelosamente, y bajo refrigera-

cin, 25 g (o 23 ml) de anhdrido actico en 50 ml de piri-
Descripcin Contiene 37,5 ml de la solucin concentrada dina anhidra.
de amonaco en 100 ml de solucin acuosa. Esta contiene,
como mnimo, 10% (p/v) de hidrxido de amonio (aproxi- Conservacin En recipientes hermticos.
madamente 6 M). Almacenamiento Proteger del aire y de la luz. Estabilidad
Preparar en el momento de uso.
Amonaco 6 M
Seguridad Txico.
Usar amonaco SR.
Anhdrido ftlico
Amonaco 10 M
CAS [85-44-9]
Preparacin Diluir 56 ml de amonaco para 100 ml con
Frmula y masa molecular C8H4O3, 148,12
agua.
Descripcin Copos blancos o casi blancos.
Amonaco, solucin concentrada
Caracterstica fsica Banda de fusin: 130 C a 132 C.
Sinonimia Hidrxido de amonio. Frmula y masa mole-
Solubilidad Poco soluble en agua y soluble en etanol.
cular NH3 17,03
Conservacin En recipientes cerrados.
Especificacin Contiene, como mnimo, 28,0% (p/p) y,
como mximo, 30,0% (p/p).
Anhdrido propinico
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, de olor caracte-
CAS [123-62-6]
rstico y asfixiante.
Frmula y masa molecular C6H10O3, 130,14
Conservacin En recipientes hermticos, no
Descripcin Lquido incoloro de olor penetrante.
completamente llenos.
Caractersticas fsicas Densidad: 1,01. Temperatura de
Almacenamiento Proteger del aire y de la luz. ebullicin: en torno de 167 C.
Seguridad Custico. Solubilidad Soluble en etanol.

Anetol Anisaldehdo
CAS [4180-23-8] CAS [123-11-5]
Sinonimia trans-Anetol. Sinonimia Aldehdo ansico y p-metoxibenzaldehdo.
Descripcin Masa cristalina blanca o casi blanca en tem- Frmula y masa molecular C8H8O2 136,14
peratura entre 20 C y 21 C, lquido en temperatura arriba Descripcin Lquido oleoso, incoloro y amarillento, de
de 23 C. olor aromtico.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 436 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Caractersticas fsicas Densidad: aproximadamente 1,12.
Temperatura de ebullicin: aproximadamente 248 C.
Miscibilidad Poco soluble en agua, miscible con etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Solubilidad Poco soluble en agua, prcticamente insolu-
ble en etanol y en cloruro de metileno.
Azida sdica
CAS [26628-22-8]
Frmula y masa molecular NaN3 65,01

Anisaldehdo, solucin Descripcin Cristales o polvo cristalino blanco o casi

blanco.
Preparacin Mezclar, en orden, 0,5 ml de anisaldehdo,
10 ml de cido actico glacial, 85 ml de metanol y 5 ml de Solubilidad Fcilmente soluble en agua y poco soluble

14 cido sulfrico.

Anisaldehdo SR
en etanol.

Azul cido 83

Preparacin A 10 ml de anisaldehdo aadir 90 ml de CAS [6104-59-2]

etanol, mezclar, aadir 10 ml de cido sulfrico y homo- Sinonimia Azul brillante.
geneizar.
Frmula y masa molecular C45H44N3NaO7S2 825,99.
Anisaldehdo SR1 Descripcin Polvo castao.
Preparacin Mezclar 25 ml de cido actico glacial con Solubilidad Insoluble en agua fra, poco soluble en agua
25 ml de etanol, aadir 0,5 ml de anisaldehdo y 1 ml de hirviendo y en etanol, soluble en cido sulfrico y en cido
cido sulfrico. actico glacial, soluble en soluciones diluidas de los hi-
drxidos de metales alcalinos.
Antitrombina III
Azul cido 90
CAS [90170-80-2]
Especificacin La antitrombina III es purificada a partir CAS [6104-58-1]
del plasma humano por cromatografa en gelosa heparina y Frmula y masa molecular C47H48N3NaO7S2 854,04.
debe tener actividad especfica de, como mnimo, 6 UI/mg.
Descripcin Polvo castao oscuro, con reflejos violceos
y partculas con reflejos metlicos.
Antitrombina III SR
Solubilidad Soluble en la agua y en el etanol.
Preparacin Reconstituir la antitrombina III segn las
indicaciones del fabricante y diluir con tampn de tris- clo-
Azul de astra
ruro de sodio de pH 7,5, para obtener solucin a 1 UI/ml.
CAS [82864-57-1]
Aprotinina Frmula y masa molecular C47H52CuN14O6S3 1068,75
CAS [9087-70-1]
Azul de Coomassie SR
Descripcin Polvo casi blanco.
Preparacin Preparar una solucin de azul cido 83 a
Solubilidad Soluble en agua y en soluciones isotnicas,
0,125% (p/v) en una mezcla de cido actico glacial, meta-
prcticamente insoluble en solventes orgnicos.
nol y agua (1:4:5) y filtrar.
Asiaticoside
Azul de disulfina (CI 42045)
CAS [16830-15-2]
CAS [129-17-9]
Frmula y masa molecular C48H78O19 958,51
Sinonimia Azul cido I.
Descripcin Polvo blanco o casi blanco. Higroscpico.
Frmula y masa molecular C27H31N2NaO6S2 566,68
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 232
Descripcin Polvo violeta. En soluciones diluidas, pre-
C, con descomposicin.
senta coloracin azul. Despus de adicin de cido clorh-
Solubilidad Soluble en metanol, poco soluble en etanol e drico concentrado, hay cambio de color para amarillo.
insoluble en acetonitrilo.
Solubilidad Soluble en agua.
Asparagina
Azul de tetrazolio
CAS-[5794-13-8]
CAS [1871-22-3]
Frmula y masa molecular C4H8N2O3.H2O 150,13
Frmula y masa molecular C40H32N8O2Cl2 727,65
Descripcin Cristales incoloros, inodoros.
Descripcin Cristales amarillos.
Caractersticas fsicas Ismero L: Temperatura de fu-
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
sin: 234-235 C. Ismero D: Temperatura de fusin: 215
245 C, con descomposicin.
C.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Solubilidad Poco soluble en agua, fcilmente soluble en
cloroformo, etanol y metanol, insoluble en acetona y ter
etlico.
Blsamo de Canad
CAS [8007-47-4]
Descripcin Lquido oleoso amarillo o verdoso, extrado
de la Abies balsames L., Pinaceae. Con olor agradable de
pino. Si es expuesto al aire, se solidifica gradualmente en
masa no cristalina.
Caractersticas fsicas Densidad: 0,987 a 0,994. ndice
de refraccin: 1,53.
Miscibilidad Miscible en agua, benceno, cloroformo y
xileno.
Informacin adicional Usado para fijar de lminas para
microscopio.
Barbalona
CAS [1415-73-2]
Sinonimia Alona.
Descripcin Agujas amarillas o polvo cristalino amarillo
a amarillo oscuro. Oscurece con la exposicin al aire y a
la luz.
Solubilidad Ligeramente soluble en agua y en etanol,
soluble en acetona, en amonaco y soluciones hidrxido-
alcalinas.
Barbital
CAS [57-44-3]
Frmula y masa molecular C8H12N2O3 184,19
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p),
calculado con relacin a la sustancia desecada.
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blan-
co, inodoro, de sabor levemente amargo.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 190 C.
Solubilidad Poco soluble en agua, soluble en agua hir-
viendo y en etanol.
Barbital sdico
CAS [144-02-5]
Frmula y masa molecular C8H11N2NaO3 206,18
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p),
calculado con relacin a la sustancia desecada.
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalizado
blanco, inodoro, de sabor amargo y levemente custico.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y poco soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Bario SRA 1 mg/ml
Especificacin Contiene 1,775 g de cloruro de bario en
agua a 1000 ml
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 437
Conservacin En recipientes bien cerrados, inertes (tipo
polietileno).
Benceno
CAS [71-43-2]
Sinonimia Benzol.
Frmula y masa molecular C6H6 78,11
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, refractivo, vol-
til, de olor caracterstico.
Caractersticas fsicas Banda de ebullicin: 79 C a 81
C. Densidad: 0,878 a 0,880. ndice de refraccin: 1,5016. 14
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua y miscible
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del calor.
Seguridad Altamente inflamable. Cancergeno. Informa-
cin adicional Siempre que posible usar tolueno.
Bencenosulfonaminda
CAS [98-10-2]
Frmula y masa molecular C6H5SO2NH2 157,19
Descripcin Cristales blancos o beige plidos.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 150 C a 153 C.
Bencilo
CAS [134-81-6]
Nombre qumico Difeniletanodiona
Frmula y masa molecular C14H10O2 210,23
Descripcin Polvo cristalino amarillo.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
95 C.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y soluble en
etanol, acetato de etilo y tolueno.
Benzoato de bencilo
CAS [120-51-4]
Descripcin Lquido oleoso, lmpido e incoloro. Por el
enfriamiento, forma cristales incoloros.
Caractersticas fsicas Temperatura de congelamiento:
cerca de 17 C. Temperatura de ebullicin: cerca de 324
C.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua y glicerol,
miscible en etanol, ter etlico y cloroformo.
Benzoato de colesterilo
CAS [604-32-0]
Frmula y masa molecular C34H50O2 490,76
Descripcin Slido blanco.
Solubilidad Insoluble en agua.
 438 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Benzoato de metilo
CAS [93-58-3]
Frmula y masa molecular C8H8O2 136,15
Descripcin Lquido incoloro.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): 1,088. Tempe-
ratura de ebullicin: cerca de 200 C.
Benzofenona
CAS [119-61-9]
14 Frmula y masa molecular C13H10O 182,22
Descripcin Polvo cristalino blanco.
Caractersticas Temperatura de fusin: en torno de 48
C.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, fcilmente
soluble en etanol.
Benzona
CAS [119-53-9]
Nombre qumico 2-Hidroxi-1,2-difeniletanona
Frmula y masa molecular C14H12O2 212,25
Descripcin Cristales ligeramente amarillos.
Solubilidad Muy poco soluble y agua, fcilmente soluble
en acetona, soluble en etanol calentado
Bicarbonato de sodio
CAS [144-55-8]
Sinonimia Carbonato cido de sodio, hidrogenocarbona-
to de sodio.
Frmula y masa molecular NaHCO3 84,01
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% y, como
mximo 101,0% (p/p), calculado en base seca.
Descripcin Polvo cristalino blanco, inodoro, de sabor
salado y levemente alcalino. Por el calentamiento, se trans-
forma en carbonato de sodio.
Solubilidad Soluble en agua, prcticamente insoluble y
etanol.
Bicinconinato disdico
CAS [979-88-4]
Frmula y masa molecular C20H10N2Na2O4 388,28
Biftalato de potasio
CAS [877-24-7]
Sinonimia Ftalato cido de potasio, hidrogenoftalato de
potasio, potasio biftalato.
Frmula y masa molecular C8H5KO4, 204,22
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,9% y, como
mximo, 100,3% (p/p), calculado con relacin a la sustan-
cia desecada a 120 C durante dos horas.
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blanco.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Solubilidad Soluble en agua y ligeramente soluble en
etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Biftalato de potasio 0,05 M
Preparacin Disolver 10,21 g en agua a 1000 ml
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Bisulfato de potasio
CAS-[7646-93-7]
Sinonimia Hidrogenosulfato de potasio; sulfato cido de
potasio.
Frmula y masa molecular KHSO4 136,16.
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales incoloros o masa blanca;
higroscpico.
Caractersticas fsicas Solucin acuosa con carcter
fuertemente cido. Temperatura de fusin: 197 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, resultando en
una solucin muy cida.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Bisulfato de sodio
CAS [7681-38-1]
Sinonimia Sulfato cido de sodio, hidrogenosulfato de
sodio, persulfato de sodio.
Frmula y masa molecular NaHSO4 120,06
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
315 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, muy soluble en
agua hirviendo. Se descompone en etanol, formando sulfa-
to de sodio y cido sulfrico libre.
Bisulfito de sodio
CAS [7631-90-5]
Sinonimia Hidrogeno sulfito de sodio, sulfito cido de
sodio.
Frmula y masa molecular NaHSO3 104,06
Descripcin Polvo cristalino blanco o casi blanco. A ex-
posicin al aire, puede causar prdida de dixido de azufre
y la sustancia es gradualmente oxidada para sulfato.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y ligeramente
soluble en etanol.
Bitartrato de sodio
CAS [6131-98-2]
Sinonimia cido tartrato de sodio.
Frmula y masa molecular C4H5NaO6H2O 190,08
Descripcin Cristales o polvo cristalino blanco.
Solubilidad Soluble en agua.

Bitartrato de sodio SR
Preparacin Disolver 1 g de bitartrato de sodio en agua
y completar el volumen para 10 ml. Preparar la solucin
para uso inmediato.
Biuret
CAS [108-19-0]
Frmula y masa molecular C2H5N3O2 103,08
Descripcin Cristales blancos, o casi blancos. Higros-
cpicos.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 188 C a 190 C,
con descomposicin.
Solubilidad Soluble en agua, ligeramente soluble en eta-
nol, muy poco soluble en el ter etlico.
Conservacin En recipiente cerrado.
Biuret, reactivo
Preparacin Disolver 1,5 g de sulfato cprico pentahi-
dratado y 6 g de tartrato de sodio y potasio en 500 ml de
agua. Aadir 300 ml de solucin de hidrxido de sodio a
10% (p/v) exenta de carbonato, completar 1000 ml con la
misma solucin y mezclar.
Boldina
CAS [476-70-0]
Frmula y masa molecular C19H21NO4 327,37
Descripcin Polvo cristalino blanco, o casi blanco.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 163
C.
Solubilidad Muy poco soluble en agua, soluble en etanol
y en soluciones cidas diluidas.
Conservacin En recipientes cerrados.
Borneol
CAS [507-70-0]
Frmula y masa molecular C10H18O 154,25
Descripcin Cristales incoloros, subliman rpidamente.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 208
C.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, fcilmente
soluble en etanol y en ter de petrleo
Bromuro de potasio
CAS [7758-01-2]
Frmula y masa molecular KBrO3 167,00
Descripcin Cristales o polvo granulado blanco o casi
blanco.
Solubilidad Soluble en agua y poco soluble en etanol.
Bromelina
CAS [37189-34-7]
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 439
Especificacin Concentrado de enzimas proteolticas de-
rivadas de la Ananas comosus Merr.
Descripcin Polvo amarillento.
Bromelina SR
Preparacin Solubilizar 1 g de bromelina en 100 ml de
una mezcla de tampn fosfato pH 5,5 y solucin de cloruro
de sodio a 0,9% (p/v) (1:9).
Bromuro de dimidio
14
CAS [518-67-2]
Frmula y masa molecular C20H18BrN3 380,28
Descripcin Cristal rojo-oscuro.
Solubilidad Poco soluble en agua a 20 C, ligeramente
soluble en agua a 60 C y en etanol.
Bromuro de dimidio-azul de disulfina SR
Preparacin Disolver, separadamente, 0,5 g de bromuro
de dimidio y 0,25 g de azul de disulfina en 30 ml de una
mezcla en caliente de etanol y agua (1:9) (v/v) y agitar.
Mezclar las dos soluciones y completar a 250 ml con la
misma mezcla de solventes. Mezclar 20 ml de esta solu-
cin con 20 ml de una solucin de cido sulfrico a 14 %
(v/v), diluida previamente con cerca de 250 ml de agua y
completar a 500 ml con agua.
Conservacin En recipientes cerrados.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz.
Bromuro de hexadimetrina
CAS [28728-55-4]
Frmula molecular (C13H30Br2N2)n
Descripcin Polvo blanco, o casi blanco. Higroscpico.
Polmero amorfo.
Solubilidad Soluble en agua.
Conservacin En recipientes cerrados.
Bromuro de yodo
CAS [7789-33-5]
Frmula y masa molecular IBr 206,81
Descripcin Cristales marrones oscuros o azules oscuros.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: cerca
de 116 C. Temperatura de fusin: cerca de 40 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, en etanol y en
cido actico glacial.
Conservacin En recipientes cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Bromuro de yodo SR
Preparacin Disolver 13,2 g de yodo en cido actico
glacial a 1000 ml. Determinar el tenor de yodo en 20 ml de
esta solucin, mediante titulacin con tiosulfato de sodio
0,1 M SV. A lo restante de la solucin de yodo (980 ml),
aadir cantidad de bromo equivalente al yodo determinado.
 440 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Conservacin En recipientes de vidrio bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Bromuro de potasio
CAS [7758-02-3]
Frmula y masa molecular KBr 119,00
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% (p/p),
calculado con relacin a la sustancia desecada.
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blan-
14 co, de sabor acentuadamente salado.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y en glicerol,
poco soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Bromuro de tetrabutilamonio
CAS [1643-19-2]
Frmula y masa molecular C16H36BrN 322,37
Descripcin Polvo blanco cristalino.
Caracterstica fsica Banda de fusin: entre 103 C y 105
C.
Bromuro de tetraheptilamonio
CAS [4368-51-8]
Frmula y masa molecular C28H60BrN 490,69
Descripcin Polvo blanco, escamoso.
Caracterstica fsica Banda de fusin: entre 89 C y 91
C.
Bromuro mercrico
CAS [7789-47-1]
Sinonimia Bromuro de mercurio (II)
Frmula y masa molecular Br2Hg 360,39
Descripcin Cristales blancos o polvo cristalino, sensible
a la luz.
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin: en torno
de 237 C.
Solubilidad Poco soluble en agua y soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Veneno!
Bromo
CAS [7726-95-6]
Frmula y masa molecular Br2 159,80
Descripcin Lquido rojo marrn, irritante, sofocante y
humeante.
Caracterstica fsica Densidad (20 C): aproximadamen-
te 3,1.
Miscibilidad Poco soluble en agua y soluble en etanol.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Conservacin En recipientes hermticos o ampollas.
Seguridad Txico.
Bromo 0,2 M en cido actico glacial
Preparacin Juntar 15 g de bromuro de potasio y 5,5 ml
de bromo en cido actico glacial a 1000 ml. Agitar y dejar
en reposo por 24 horas. Titular antes del uso.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger del calor.
Seguridad Txico.
Bromo SR
Preparacin Disolver 30 g de bromo y 30 g de bromuro
de potasio en cantidad suficiente de agua para hacer 100
ml.
1-Butanol
CAS [71-36-3]
Sinonimia Alcohol butlico normal o primario, n-butanol,
alcohol n-butlico.
Frmula y masa molecular C4H10O 74,12
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, retractivo, de
olor caracterstico.
Caractersticas fsicas Banda de ebullicin: 117 C a 118
C. Densidad (20 C): 0,810. ndice de refraccin (20 C):
1,3993.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Irritante. Inflamable.
Betanosulfonato de sodio
CAS [2386-54-1]
Frmula y masa molecular C3H9NaO3S 160,17
Descripcin Polvo cristalino blanco o casi blanco.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: mayor que
300 C.
Solubilidad Soluble en agua.
Butilhidroxianisol
CAS [25013-16-5] Sinonimia BHA.
Frmula y masa molecular C11H16O2- 180,24
Especificacin Mezcla de dos ismeros: 2-terc-butil-4-
hidroxianisol y 3-terc-butil-4-hidroxianisol
Descripcin Slido de aspecto ceroso.
Caracterstica fsica Banda de fusin: de 48 C a 55 C.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y soluble en
ter de petrleo.
Conservacin En recipientes cerrados.
Butilamina
CAS [109-73-9] Sinonimia n-Butilamina
Frmula y masa molecular C4H11N 73,14

Descripcin Lquido incoloro, de olor amoniacal.
Caracterstica fsica Temperatura de ebullicin: en torno
de 78 C.
Miscibilidad Miscible en agua y etanol. Informacin adi-
cional Destilar y utilizar en, como mximo, 30 das.
Butilparabeno
CAS [94-26-8]
Frmula y masa molecular C11H14O3, 194,23
Descripcin Polvo cristalino blanco.
Caracterstica fsica Banda de fusin: de 68 C a 69 C.
Solubilidad Muy poco soluble en agua y fcilmente solu-
ble en acetona, ter etlico y cloroformo.
Conservacin En recipientes cerrados.
Calciferol
CAS [50-14-6]
Sinonimia Ergocalciferol, vitamina D2. Frmula y masa
molecular C28H44O 396,65
Especificacin Un gramo corresponde en actividad anti-
raqutica a 40 millones de Ul.
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blanco.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, fcilmente
soluble en etanol, soluble en aceite grasos.
Conservacin En recipientes hermticos, bajo gas inerte.
Almacenamiento Proteger del calor y de la luz.
Calcio SRA 400 g/ml
Especificacin Contiene 1,001 g de carbonato de calcio
en 25 ml de cido clorhdrico M. Hervir. Completar con
agua a 1000 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados, inertes (tipo
polietileno).
Canfeno
CAS [79-92-5]
Frmula y masa molecular C10H16 136,23
Alcanfor
CAS [76-22-2]
Frmula y masa molecular C10H16O 152,23
Caoln leve
CAS [1332-58-7]
Especificacin Silicato de aluminio natural, hidratado,
purificado. Contiene un agente dispersante apropiado.
Descripcin Polvo blanco, poco denso, exento de part-
culas granulosas, untuoso al tacto.
Solubilidad Prcticamente insoluble en la agua y en los
cidos inorgnicos.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 441
Partculas gruesas Aadir 5 g de la muestra en una pro-
beta con tapn (de 160 mm de largo y 35 mm de dimetro
interno) y junte 60 ml de solucin de pirofosfato de sodio a
1% (p/v). Agitar vigorosamente y dejar en reposo durante
5 minutos. Utilizando una pipeta, retirar 50 ml del lquido
sobrenadante, a partir de una posicin en torno de 5 cm
abajo de la superficie de la preparacin. Al lquido restante
junte 50 ml de agua, agitar, dejar en reposo durante 5 minu-
tos y retire 50 ml del lquido en las condiciones prescritas
anteriormente. Repetir el proceso hasta retirar un total de
400 ml. Transferir la suspensin para una cpsula de por-
celana, evaporar hasta sequedad en bao mara y desecar a
100-105 C hasta masa constante. La masa del residuo no
es superior a 25 mg (0,5%). Partculas finas Esparcir 5 g
14
de la muestra en 250 ml de agua, agitar vigorosamente du-
rante 2 minutos y transferir, inmediatamente, para una pro-
beta de vidrio (de 50 mm de dimetro interno). Utilizando
una pipeta, transferir 20 ml del lquido para un vidrio de
reloj. Evaporar hasta sequedad en bao mara y desecar a
100-105 C hasta masa constante (m). Dejar en reposo a
20 C durante 4 horas la suspensin restante. Retirar 20
ml del lquido, a partir de una posicin en torno de 5 cm
abajo de la superficie de la preparacin, evitando dispersar
el sedimento. Transferir para un vidrio de reloj, evaporar
hasta sequedad en bao mara y desecar a 100-105 C hasta
masa constante (m2). El valor de m2 no es inferior a 70% del valor de m1.
Carbonato de amonio
CAS [506-87-6]
Frmula y masa molecular (NH4)2CO3 96,09
Especificacin Mezcla en proporciones variables de bi-
carbonato de amonio (NH4HCO3 79,06) y carbamato de
amonio (H2NCOONH4 78,07). Contiene, como mnimo,
30,0% de NH3 (MM 17,3) (p/p).
Descripcin Masas cristalinas blancas, translcidas, de
olor amoniacal fuerte.
Solubilidad Soluble en agua. Se descompone en agua
hirviendo.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz y del calor.
Carbonato de amonio SR
Especificacin Contiene 15,8 g de carbonato de amonio
en agua a 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz y del calor.
Carbonato de calcio
CAS [471-34-1]
Frmula y masa molecular CaCO3 100,09
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,5% (p/p),
calculado en sustancia seca.
Descripcin Polvo blanco, inodoro e inspido.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
 442 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Carbonato de estroncio
CAS [1633-05-2]
Frmula y masa molecular SrCO3 147,64
Descripcin Polvo blanco, inodoro y sin sabor.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Carbonato de litio
CAS [554-13-2]
14
Frmula y masa molecular Li2CO3 73,89
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,5%, calcula-
do en base seca.
Descripcin Polvo blanco, leve, inodoro.
Solubilidad Ligeramente soluble en agua y muy
poco soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Carbonato de potasio, anhidro
CAS [584-08-7]
Frmula y masa molecular K2CO3 138,21
Descripcin Polvo granulado o grnulos blancos o casi
blancos. Higroscpico.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 891 C.
Solubilidad Muy soluble en agua y prcticamente inso-
luble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Carbonato de potasio, sesquihidratado
CAS [6381-79-9]
Frmula y masa molecular K2CO3.11/2H2O 165,23
Descripcin Cristales granulares pequeos.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Irritante! Custico!
Carbonato de sodio, anhidro
CAS [497-19-8]
Formula y masa molecular Na2CO3 105,99
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p),
calculado en base seca.
Descripcin Polvo blanco, higroscpico.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Carbonato de sodio, decahidratado
CAS [6132-02-1]
Frmula y masa molecular Na2CO3.10H2O 286,09
Especificacin Contiene, en el mnimo, 36,7% (p/p).
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Descripcin Cristales transparentes, incoloros, eflores-
centes, o polvo cristalino blanco; inodoro, de sabor alca-
lino y salado.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, y prcticamente
insoluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Carbonato de sodio, monohidratado
CAS [5968-11-6]
Frmula y masa molecular Na2CO3.H2O 124,00
Especificacin Contiene, como mnimo, 83,0% (p/p)
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blan-
co; inodoro, de sabor alcalino y salado.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, y prcticamente
insoluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Informacin adicional Cuando prescrito carbonato de so-
dio para mezcla en polvo, usar Na2CO3.H2O .
Carbonato de sodio SR
Especificacin Contiene 10,6 g de carbonato de sodio
anhidro en 100 ml de agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Carvona
CAS [2244-16-8]
Frmula y masa molecular C10H14O 150,24
Descripcin Lquido incoloro.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,965.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,500. Temperatura
de ebullicin: cerca de 230 C. Poder rotatorio (20 C):
cerca de +61.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua, miscible
en etanol.
Catequina
CAS [154-23-4]
Frmula y masa molecular C15H14O6.xH2O 290,27
(para la sustancia anhidra)
Caractersticas fsicas Banda de fusin: 93 C a 96 C, o
175 C a 177 C cuando en la forma anhidra.
Cefalina
Especificacin Consiste en steres de cido glicerofos-
frico con cidos grasos de cadena larga, siendo el grupo
fosfato esferificado con etanolamina.
Descripcin Sustancia amorfa amarillenta, de olor y sa-
bor caractersticos.
Categora Hemosttico local y reactivo laboratorial en
pruebas de funcin heptica.

Cefalina SR
Preparacin Aadir 20 ml de acetona a una cantidad de
0,5 a 1 g de polvo de cerebro de buey, dejar en reposo du-
rante 2 horas. Centrifugar durante 2 minutos y decantar el
lquido sobrenadante. Secar el residuo a presin reducida.
Juntar 20 ml de cloroformo al material seco. Dejar en re-
poso durante 2 horas, agitar frecuentemente. Despus de
eliminar el material slido, por filtracin o centrifugacin,
evaporar el cloroformo a presin reducida. Colocar el resi-
duo en suspensin en 5 a 10 ml de solucin de cloruro de
sodio a 0,9 % (p/v). Los solventes utilizados para prepa-
rar este reactivo contienen un antioxidante apropiado, tal
como el Butilhidroxianisol a 0,002% (p/v).
Conservacin Utilizar en hasta 3 meses, despus de con-
gelamiento o liofilizacin.
Celulosa cromatogrfica
CAS [9004-34-6]
Sinonimia Celulosa para cromatografa.
Descripcin Polvo fino, blanco, homogneo. Tamao
medio de partculas no es menor que 30 m.
Categora Soporte para cromatografa.
Plomo SRA 100g/ml
Especificacin Contiene 0,16 g de nitrato de plomo (II)
en 5 ml de cido ntrico. Completar con agua a 1000 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados, inertes (tipo
polietileno).
Cianuro de potasio
CAS [151-50-8]
Frmula y masa molecular KCN 65,12
Especificacin Contiene, como mnimo, 96,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Polvo cristalino, masas o grnulos blancos;
delicuescente.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 634 C.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Estabilidad Se descompone gradualmente por exposi-
cin al aire, dixido de carbono y humedad.
Seguridad Veneno!
Cianuro de potasio SR
Preparacin Disolver 50 g de cianuro de potasio en
agua destilada, completar el volumen para 100 ml. Retirar
el plomo de esa solucin por la extraccin con porciones
sucesivas de solucin extractora de ditizona. Extraer la di-
tizona remanente en la solucin de cianuro agitando con
cloroformo. Diluir la solucin de cianuro con agua des-
tilada suficiente para que, cada 100 ml, contenga 10 g de
cianuro de potasio
Conservacin En recipientes hermticos.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 443
Seguridad Veneno!
Cianuro-amonaco SR
Preparacin Disolver 2 g de cianuro de potasio en 15
ml de hidrxido de amonio y diluir para 100 ml con agua
destilada.
Cianoacetato de etilo
CAS [105-56-6]
Frmula y masa molecular C5H7NO2 113,11
14
Descripcin Lquido incoloro o amarillo plido.
Caractersticas fsicas Densidad (25 C): 1,056. Banda
de ebullicin: 205 C a 209 C, con descomposicin.
Miscibilidad Poco soluble en agua y miscible en etanol
y ter etlico.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Ciclohexano
CAS [110-82-7]
Frmula y masa molecular C6H12 84,16
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, voltil, de olor
caracterstico (semejante al de la gasolina).
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: apro-
ximadamente 80 C. Densidad: aproximadamente 0,78.
ndice de refraccin (20 C): 1,426 a 1,427.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua. Miscible
en solventes orgnicos.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Inflamable.
Cinamato de bencilo
CAS [103-41-3]
Frmula y masa molecular C16H14O2 238,28
Descripcin Cristales incoloros o amarillentos.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 39
C.
Cinamato de metilo
CAS [103-26-4]
Frmula y masa molecular C10H10O2 162,19
Descripcin Cristales incoloros.
Caractersticas fsicas Banda de fusin: 34 C a 36 C.
Temperatura de ebullicin: cerca de 260 C. ndice de re-
fraccin (20 C): cerca de 1,56.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y soluble
en etanol.
Cinchonina
CAS [118-10-5]
Frmula y masa molecular C19H22N2O 294,39
Descripcin Polvo cristalino blanco, o casi blanco.
 444 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Caractersticas fsicas Poder rotatorio especfico (20
C): +225 a +230, determinado en una solucin a 5%
(p/v) en etanol a 96% (v/v). Temperatura de fusin: cerca
de 263 C.
Conservacin En recipientes cerrados.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz.
1,8-Cineol
CAS [470-82-6]
14 Sinonimia Eucaliptol.
Frmula y masa molecular C10H18O 154,25
Descripcin Lquido incoloro.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): 0,922 a 0,927.
ndice de refraccin (20 C): 1,456 a 1,459.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua y miscible
en etanol.
Citral
CAS [5392-40-5]
Frmula y masa molecular C10H16O 152,24
Descripcin Lquido amarillo claro.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua y miscible
en etanol y glicerol.
Citrato de amonio SR
Preparacin Disolver 40 g de cido ctrico en 90 ml de
agua destilada. Aadir dos o tres gotas de rojo de fenol a
0,1% (p/v) en etanol. Aadir, cuidadosamente, hidrxido
de amonio hasta que la solucin adquiera coloracin roji-
za. Retirar cualquier plomo presente por la extraccin con
porciones de 20 ml de solucin extractora de ditizona hasta
que la coloracin verde anaranjada en la solucin de diti-
zona sea mantenida.
Citrato cprico alcalino SR
Preparacin Bajo calentamiento, disolver 173 g de citra-
to de sodio y 177 g de carbonato de sodio monohidratado
en 700 ml de agua. Filtrar si necesario para obtener una
solucin lmpida. En un frasco separado, disolver 17,3 g
de sulfato cprico pentahidratado en 100 ml de agua. Aa-
dir (lentamente y bajo agitacin constante) sobre esta so-
lucin, la primera solucin preparada. Completar para el
volumen de 1000 ml con agua.
Citrato de sodio
CAS [6132-04-3] S
inonimia Citrato trisdico.
Frmula y masa molecular C6H5Na3O7.2H2O 294,10
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales o polvo cristalino blanco, inodoro,
de sabor salado, refrescante. Delicuescente.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y prcticamente
insoluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Citronelal
CAS [106-23-0]
Frmula y masa molecular C10H18O 154,25
Descripcin Lquido incoloro o amarillo claro.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): 0,848 a 0,856.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,446.
Miscibilidad Muy poco soluble en agua y soluble en eta-
nol.
Citronelol
CAS [106-22-9]
Frmula y masa molecular C10H20O 156,26
Descripcin Lquido incoloro y lmpido.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): 0,857. ndice
de refraccin (20 C): 1,456. Banda de ebullicin: 220 C
a 222 C.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua y miscible
en etanol.
Cloramina-T
CAS [7080-50-4]
Sinonimia Sal sdica trihidratada de la N-cloro-p- tolue-
nosulfonamida.
Frmula y masa molecular C7H7ClNNaO2S.3H2O
281,69
Descripcin Cristales eflorescentes blancos o levemente
amarillentos o polvo cristalino.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 167 C a 170 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, soluble en eta-
nol con descomposicin, insoluble en benceno, cloroformo
y ter etlico.
Conservacin En recipientes perfectamente cerrados,
protegidos de la luz, en refrigerador.
Clorato de potasio
CAS [3811-04-9]
Frmula y masa molecular KClO3 122,55
Descripcin Cristales o grnulos, o polvo blanco o casi
blanco.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 368 C.
Solubilidad Soluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Evitar el contacto con materiales orgnicos u
otras sustancias oxidables.
Cloruro cobaltoso
CAS [7791-13-1]

Sinonimia Cloruro de cobalto (II).
Frmula y masa molecular CoCl2.6H2O 237,93
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Descripcin Polvo cristalino o cristales rojo violceos.
Solubilidad Muy soluble en agua y soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Cloruro cobaltoso SR
Especificacin Contiene 6,5 g, aadidos de 70 ml de ci-
do clorhdrico SR, en agua a 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Cloruro de acetilo
CAS [75-36-5]
Frmula y masa molecular C2H3ClO 78,50
Descripcin Lquido lmpido e incoloro. Inflamable. Se
descompone en contacto con agua y con etanol.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 1,10.
Temperatura de ebullicin: 52 C.
Miscibilidad Miscible en cloruro de etileno, ter etlico y
cido actico glacial.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Irritante para los ojos!
Cloruro de aluminio hexahidratado
CAS [7784-13-6]
Frmula y masa molecular AlCl3.6H2O 241,43
Descripcin Polvo blanco o levemente amarillento o
cristales incoloros, delicuescente.
Solubilidad Muy soluble en agua, fcilmente soluble en
etanol, soluble en glicerol.
Conservacin En recipientes hermticos.
Cloruro de aluminio SR
Preparacin Disolver 2 partes de cloruro de aluminio
hexahidratado en agua suficiente para 3 partes. Tratar la
solucin con carbn activado, filtrar y, si necesario, ajustar
el pH para 1,5 con hidrxido de sodio a 1% (p/v).
Cloruro de amonio
CAS [12125-02-9]
Frmula y masa molecular NH4Cl 53,49
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,5% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blan-
co, inodoro, de sabor salado. Higroscpico.
Caracterstica fsica Sublima sin fundir a 338 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 445
Cloruro de amonio SR
Especificacin Contiene 10,7 g en agua a 100 ml
(aproximadamente 2 M).
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Cloruro de amonio-hidrxido de amonio SR
Preparacin Mezclar volmenes iguales de hidrxido de
amonio y agua y saturar con cloruro de amonio.
Cloruro de bario
CAS [10326-27-9] 14
Frmula y masa molecular BaCl2.2H2O 244,27.
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blanco.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y poco soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Txico!
Cloruro de bario SR
Especificacin Contiene 10 g en agua a 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Cloruro de benzalconio
CAS [8001-54-5]
Frmula y masa molecular [C6H5CH2 N(CH3 )2R]+ Cl-
360,00 (media)
Composicin qumica Mezcla de cloruros de alquildi-
metilbencilamonio, en que R representa alquila, a partir
de n-C8H17 y homlogos superiores: n-C12H25, n-C14H29,
n-C16H33, en mayor proporcin.
Especificacin Contiene, como mnimo, 95,0% con re-
lacin a la mezcla desecada. Contenido de los homlogos
alquilados presentes, en relacin al total calculado sobre
base seca: n-C12H25: como mnimo 40,0% (p/p); n-C14H29:
como mnimo 10,0% (p/p); la suma de los dos homlogos
arriba: como mnimo 70,0% (p/p).
Descripcin Polvo amorfo o masa gelatinosa blanca o
blanco-amarillenta, de olor aromtico y de sabor amargo.
Solubilidad Muy soluble en agua y en etanol. En solucin
acuosa, forma espuma bajo agitacin.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz y del aire.
Categora Desinfectante. Detergente. Conservante.
Cloruro de bencetonio
CAS [121-54-0]
Frmula y masa molecular C27H42ClNO2.H2O 466,09
Descripcin Cristales incoloros, o polvo fino blanco, o
casi blanco.
 446 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 163 Frmula y masa molecular CsCl 168,36
C.
Descripcin Polvo blanco o casi blanco.
Solubilidad Soluble en agua y etanol.
Solubilidad Muy soluble en agua, fcilmente soluble en
Conservacin En recipientes cerrados. metanol y prcticamente soluble en acetona.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz.
Cloruro de estao (II) SR
Cloruro de bencilo Preparacin Calentar 20 g de estao con 85 ml de cido
clorhdrico hasta que no haya ms liberacin de hidrgeno.
CAS [100-44-7]
Sinonimia Clorometilbenceno

14
Cloruro de magnesio
Frmula y masa molecular C7H7Cl 126,58 CAS [7791-18-6]
Descripcin Lquido incoloro. Frmula y masa molecular MgCl2 6H2O 203,30
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): 1,100. Tempe- Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0 % (p/p).
ratura de ebullicin: 179 C. Banda de fusin: -48 C a
Descripcin Cristales incoloros, de sabor amargo. Hi-
-43 C.
groscpico.
Miscibilidad Insoluble en agua. Miscible en etanol, clo-
Solubilidad Muy soluble en agua y fcilmente soluble
roformo y ter etlico.
en etanol.
Conservacin En recipientes hermticos.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del calor.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Cloruro de calcio
Cloruro de mercurio (II)
CAS [10035-04-8]
CAS [7487-94-7]
Frmula y masa molecular CaCl2.2H2O 147,02
Sinonimia Cloruro mercrico.
Especificacin Contiene, como mnimo, 96,0% (p/p).
Frmula y masa molecular HgCl2 271,50
Descripcin Polvo cristalino o grnulos blancos, inodo-
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0%(p/p), cal-
ro, de sabor salado y fuertemente amargo. Higroscpico.
culado sobre la sustancia desecada.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y soluble en eta-
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blanco
nol.
o casi blanco, o masa cristalizada; inodoro.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 277 C (vo-
Almacenamiento Proteger de la humedad. latiliza a temperatura de aproximadamente 300 C).
Solubilidad Soluble en agua y en glicerol, fcilmente so-
Cloruro de calcio, anhidro
luble en etanol.
CAS [10043-52-4]
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Frmula y masa molecular CaCl2 -110,99
Almacenamiento Proteger de la luz.
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0%(p/p), cal-
culado sobre la sustancia desecada. Seguridad Irritante. Custico. Txico. Contaminante.

Descripcin Grnulos blancos y secos. Delicuescentes. Informacin adicional Antdoto: dimercaprol.

Solubilidad Muy soluble en agua, fcilmente soluble en Cloruro de metileno

etanol y en metanol.
CAS [75-09-2]
Conservacin En recipientes hermticos
Sinonimia Diclorometano.
Almacenamiento Proteger de la humedad
Frmula y masa molecular CH2Cl2 84,94
Categora Desecante
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, voltil, de olor
semejante al del cloroformo.
Cloruro de calcio SR
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: apro-
Especificacin Contienen 7,35 g de cloruro de calcio en
ximadamente 40 C. Densidad: aproximadamente 1,32.
agua a 100 ml (aproximadamente 0,5 M).
ndice de refraccin (20 C):1 ,424.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Miscibilidad Ligeramente soluble en agua, miscible en
etanol.
Cloruro de cesio
Conservacin En recipientes bien cerrados.
CAS [7647-17-8]

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Irritante. Txico.
Cloruro de metileno saturado con amonaco
Preparacin Mezclar 100 ml de cloruro de metileno con
30 ml de solucin concentrada de amonaco en embudo
de separacin. Dejar separar las fases y utilizar la camada
inferior.
Cloruro de metiltioninio
CAS [7220-79-3]
Sinonimia Cloruro de metiltioninio trihidratado, azul de
metileno.
Frmula y masa molecular C16H18ClN3.3H2O 373,90
Descripcin Polvo cristalino verde-oscuro o bronce. Pue-
de ser encontrado en diferentes formas hidratadas.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y en etanol.
Cloruro de metiltioninio SR
Sinonimia Azul de metileno SR
Preparacin Disolver 23 mg de cloruro de metiltioninio
en cantidad suficiente de agua para hacer 100 ml.
Cloruro de metiltioninio SR1
Sinonimia Azul de metileno SR1
Preparacin Disolver 125 mg de cloruro de metiltioninio
en 100 ml de etanol y diluir en etanol para hacer 250 ml.
Cloruro de nquel(II)
CAS [7791-20-0]
Frmula y masa molecular NiCl2.6H2O 237,71
Descripcin Polvo cristalino verde, higroscpico.
Cloruro de nitrobenzoilo
CAS [122-04-3]
Frmula y masa molecular C7H4ClNO3 185,57
Descripcin Cristales amarillos, de olor penetrante.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
73 C.
Cloruro de oro
CAS [16961-25-4]
Frmula y masa molecular HAuCl4.3H2O 393,83
Descripcin Cristales monoclnicos amarillo-rojizo a
amarillo-dorado. Muy higroscopio y delicuescente.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Cloruro de oro SR
Preparacin Disolver 1 g de cloruro de oro en 35 ml de
agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 447
Almacenamiento Proteger de la luz.
Cloruro de paladio
CAS [7647-10-1]
Frmula y masa molecular PdCl2 177,31
Especificacin Contiene, como mnimo, 59,0% (p/p) en
paladio.
Descripcin Polvo cristalino marrn rojizo.
Caracterstica fsica En altas temperaturas se descompo-
ne en paladio y cloro.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
14
Seguridad Txico!
Cloruro de potasio
CAS [7447-40-7]
Frmula y masa molecular KCl 74,55
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0%(p/p), cal-
culado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blan-
co, inodoro, de sabor salino, levemente amargo.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Cloruro de potasio, solucin saturada
Especificacin Contiene 17 g en agua a 50 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Cloruro de sodio
CAS [7647-14-5]
Frmula y masa molecular NaCI 58,44
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p) cal-
culado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blan-
co, inodoro, de sabor salino.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y prcticamente
insoluble en etanol anhidro.
Conservacin En recipientes bien cerrados. Informacin
adicional Sal exenta de aditivo.
Cloruro de sodio a 0,9% (p/v)
Sinonimia Cloruro de sodio aproximadamente 0,15 M,
solucin de cloruro de sodio isotnica, solucin fisiolgi-
ca, solucin salina.
Descripcin Contiene 9 g de cloruro de sodio en agua a
1000 ml.
Conservacin En recipientes cerrados.
Cloruro de estao
CAS [10025-69-1]
Frmula y masa molecular SnCl2.2H2O 225,63
Especificacin Contiene, como mnimo, 97,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros o casi incoloros.
 448 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Solubilidad Muy soluble en agua, fcilmente soluble en
etanol, en cido actico glacial, y en cido clorhdrico di-
luido y concentrado.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del aire y del calor.
Cloruro de estao SR
Especificacin Contiene 10 g de cloruro de estao en ci-
do clorhdrico a 100 ml.
14 Conservacin Preparar en el momento de uso.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Cloruro de estao SR1
Nombre alternativo Cloruro de estao (II) SR. Prepara-
cin Calentar 20 g de estao con 85 ml de cido clorh-
drico hasta que no haya ms liberacin de hidrgeno.
Cloruro frrico
CAS [10025-77-1]
Sinonimia Cloruro de hierro hexahidratado.
Frmula y masa molecular FeCl3.6H2O 270,30
Especificacin Contiene, 99,0% (p/p), calculado sobre la
sustancia desecada.
Descripcin Masa cristalizada, amarillo-anaranjada o
marrn. Delicuescente.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 37 C.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Cloruro frrico SR (aproximadamente 0,4 M)
Usar cloruro frrico SI.
Cloruro frrico cido SR
Preparacin Disolver 15 mg de cloruro frrico hexahi-
dratado en 20 ml de mezcla de cido actico glacial y cido
sulfrico (1:1).
Cloruro frrico metanlico
Preparacin Disolver 1 g de cloruro frrico en 100 ml
de metanol.
Cloruro mercrico SR (aproximadamente 0,2 M)
Especificacin Contiene 5,4 g de cloruro de mercurio (II)
en agua a 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Txico. Contaminante.
Cloruro platnico SR
Sinonimia Cloruro de platino SR
Preparacin Disolver 2,6 g de cido cloroplatnico en
agua a 20 ml.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Clorhidrato de benzoilo
CAS [98-88-4]
Frmula y masa molecular C7H5ClO 140,57
Descripcin Lquido incoloro. Se descompone en agua
y etanol.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 1,21.
Temperatura de ebullicin: cerca de 197 C.
Clorhidrato de (2-cloroetil) dietilamina
CAS [869-24-9]
Frmula y masa molecular C6H14ClN.HCl 172,10
Descripcin Polvo cristalino, blanco, muy soluble en
agua y en metanol, fcilmente soluble en cloruro de meti-
leno, prcticamente insoluble en n-hexano.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
211 C.
Clorhidrato de dimetil-p-fenilendiamina
CAS [536-46-9]
Sinonimia Diclorhidrato de N, N-dimetil-p-fenilendiami-
na.
Frmula y masa molecular C8H12N2.2HCl 209,12
Descripcin Polvo cristalino blanco o casi blanco. Hi-
groscpico.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y soluble en eta-
nol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Clorhidrato de o-fenilendiamina
CAS [615-28-1]
Sinonimia Diclorhidrato de 1,2-bencenodiamina.
Frmula y masa molecular C6H8N2.2HCl 181,14
Descripcin Polvo blanco o levemente rosado.
Clorhidrato de p-fenilendiamina
CAS [624-18-0]
Sinonimia Diclorhidrato de 1,4-bencenodiamina.
Formula y masa molecular C6H8N2.2HCl 181,14
Descripcin Polvo cristalino blanco, se torna rojizo en
contacto con el aire.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, poco soluble en
etanol y ter etlico.
Clorhidrato de fenilhidracina
CAS [59-88-1]
Frmula y masa molecular C6H8N2.HCl 144,60
Descripcin Polvo cristalino blanco o casi blanco, vol-
vindose marrn por la exposicin al aire.

Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
245 C, con descomposicin.
Solubilidad Soluble en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Protegido de la luz.
Clorhidrato de fenilhidracina SR
Preparacin Disolver 0,9 g de Clorhidrato de fenilhidra-
cina en 50 ml de agua. Decolorar con carbn activado y
filtrar. Recolectar el filtrado en baln volumtrico de 250
ml, aadir 30 ml de cido clorhdrico y completar para vo-
lumen con agua.
Clorhidrato de hidrastina
CAS [5936-28-7]
Frmula y masa molecular C21H22ClNO6 419,86
Descripcin Polvo blanco, o casi blanco. Higroscpico.
Caractersticas fsicas Poder rotatorio (17 C): cerca de
+127. Temperatura de fusin: cerca a 116 C.
Solubilidad Muy soluble en agua y en etanol.
Clorhidrato de hidroxilamina
CAS [5470-11-1]
Frmula y masa molecular NH4ClO 69,49
Especificacin Contiene, como mnimo, 96,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blanco.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 151 C
Solubilidad Muy soluble en agua y soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Clorhidrato de hidroxilamina SR
Preparacin Disolver 5 g en 5 ml de agua caliente. Com-
pletar a 100 ml con etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Inflamable.
Clorhidrato de hidroxilamina SR1
Preparacin Disolver 20 g de Clorhidrato de hidroxila-
mina en agua destilada para obtener, aproximadamente, 65
ml. Transferir para embudo de separacin. Aadir cinco
gotas de azul de timol SI y aadir hidrxido de amonio
hasta que la solucin adquiera color amarilla. Aadir 10 ml
de solucin acuosa de dietilditiocarbamato de sodio a 4%
(p/v), agitar, y dejar en reposo por 5 minutos. Extraer esa
solucin con sucesivas porciones de 10 a 15 ml de cloro-
formo hasta que una porcin de 5 ml del extracto de cloro-
formo no adquiera coloracin amarilla cuando agitada con
sulfato cprico a 12,5% (p/v). Aadir cido clorhdrico 3
M hasta obtener coloracin rosa (se necesario, aadir una
o dos
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 449
gotas de azul de timol SI) y diluir en 100 ml con agua des-
tilada.
Cloro SR
Especificacin Solucin saturada de cloro en agua.
Conservacin En frascos completamente llenos y bien
cerrados.
Almacenamiento En local fro, protegido de la luz y del
aire.
Observaciones La solucin tiende a deteriorarse a pesar
de estar protegida de la luz y del aire. 14
Estabilidad Utilizar solucin recin preparada.
p-Cloroacetanilida
CAS [539-03-7]
Frmula y masa molecular C8H8ClNO 169,61
Descripcin Polvo cristalino.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 178
C.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y soluble
en etanol.
Clorobenceno
CAS [108-90-7]
Frmula y masa molecular C6H5Cl 112,56
Descripcin Lquido incoloro, refringente, de olor carac-
terstico.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: apro-
ximadamente 132 C. Densidad: aproximadamente 1,11.
ndice de refraccin (20 C): 1,5251.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Txico. Inflamable.
1-Cloro-2,4-dinitrobenceno
CAS [97-00-7]
Frmula y masa molecular C6H3ClN2O4 202,55
Descripcin Cristales amarillos plidos o polvo crista-
lino.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
51 C.
Cloroformo
Sinonimia Triclorometano Frmula y masa molecular
CHCl3 119,40.
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,9 % (p/p).
Descripcin Lquido mvil, incoloro, olor dulce.
Caractersticas fsicas Densidad: aproximadamente
1,48. Temperatura de ebullicin: aproximadamente 62 C.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Txico.
 450 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Cloroformo exento de alcohol
Preparacin Preparar inmediatamente antes del uso.
Agitar cuidadosamente 20 ml de cloroformo con 20 ml de
agua por 3 minutos. Retirar con cuidado la fase orgnica y
lavar con dos porciones de 20 ml de agua. Filtrar el cloro-
formo a travs de papel seco. Aadir 5 g de sulfato de sodio
anhidro, agitar por 5 minutos y dejar en reposo por 2 horas.
Decantar o filtrar.
Clorotiazida
14 CAS [58-94-6]
Frmula y masa molecular C7H6ClN3O4S2 295,73
Descripcin Polvo cristalino blanco o casi blanco, ino-
doro.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
340 C, con descomposicin.
Solubilidad Muy poco soluble en agua, ligeramente so-
luble en acetona, poco soluble en etanol. Disuelve en solu-
ciones diluidas de hidrxidos-alcalinos.
Cobaltinitrito de sodio
CAS [13600-98-1]
Frmula y masa molecular Na3CoN6O12 403,94
Descripcin Polvo cristalino amarillo-anaranjado.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y poco soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados
Cobaltinitrito de sodio SR
Especificacin Contiene 10 g en agua a 100 ml.
Conservacin Preparar en el momento de uso.
Cobre
CAS [7440-50-8]
Elemento y masa atmica Cu 63,546.
Descripcin Lmina, hilo, polvo o fragmento, de color
rojizo y brillo metlico.
Conservacin En recipientes no metlicos.
Cobre SRA 1 mg/ml
Especificacin Contiene 1 g de cobre disuelto en el me-
nor volumen posible de cido ntrico a 50% (v/v). Comple-
tar con cido ntrico a 1% (v/v) a 1000 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados, inertes (tipo
polietileno).
o-Cresol
CAS [95-48-7]
Sinonimia 2-Metilfenol.
Frmula y masa molecular C7H8O 108,14.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Descripcin Lquido o slido, incoloro a amarillo-ma-
rrn, que se colorea por la luz y en la presencia de oxgeno;
de olor fenlico. Delicuescente.
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin: aproxima-
damente 30 C. Temperatura de ebullicin: aproximada-
mente 191 C. Densidad: aproximadamente 1,03. ndice de
refraccin (20 C): 1,540 -1,550.
Miscibilidad Miscible con etanol anhidro, ligeramente
soluble en agua y soluble en soluciones hidrxido-alcali-
nas.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la luz, humedad y oxgeno.
Seguridad Irritante. Custico. Txico.
Categora Desinfectante.
Cromato de potasio
CAS [7789-00-6]
Frmula y masa molecular K2CrO4 194,19
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales o polvo cristalino amarillo.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Oxidante. Contaminante.
Cromato de potasio SR
Especificacin Contiene 10 g en agua a 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Oxidante. Contaminante.
Cromotropato disdico
CAS [5808-22-0]
Sinonimia Sal disdica del cido cromotrpico dihidra-
tado.
Frmula y masa molecular C10H6Na2O8S2.H2O 400,29
Descripcin Polvo blanco amarillento.
Solubilidad Soluble en agua y prcticamente insoluble
en etanol.
Desoxicolato de sodio
CAS [302-95-4]
Frmula y masa molecular C24H39NaO4 414,55
Descripcin Polvo cristalino blanco o casi blanco.
Dextrosa
Ver glucosa.
Dextrosa 0,1% (p/v)
Ver glucosa 0,1% (p/v) en piridina.

Diacetato de clorhexidina
Usar acetato de clorhexidina.
1,8-Diaminonaftaleno
CAS [479-27-6]
Sinonimia 1,8-Naftalenodiamina.
Frmula y masa molecular C10H10N2 158,20
Descripcin Cristales sublimables.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 63 C a 67 C.
Diaveridina
CAS [5355-76-S]
Nombre qumico 5-[(3,4-Dimetoxifenil)metil]-2,4- piri-
midinodiamina Frmula y masa molecular C13H16N4O2
260,30
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
233 C.
2,6-Dibromoquinona-4-clorimida
CAS [537-45-1]
Frmula y masa molecular C6H2Br2ClNO 299,35
Descripcin Polvo cristalino amarillo.
Caracterstica fsica Banda de fusin: entre 82 C y
84C.
Solubilidad Insoluble en agua y soluble en etanol y en
soluciones hidrxido-alcalinas diluidas.
Conservacin En recipientes cerrados.
Dibutilamina
CAS [111-92-2]
Frmula y masa molecular C8H19N 129,24
Descripcin Lquido incoloro.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: cerca
de 159 C. ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,417.
Miscibilidad Soluble en agua y etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Dicloruro de etileno
CAS [107-06-2]
Sinonimia 1,2-Dicloroetano
Frmula y masa molecular C2H4Cl2 98,96
Descripcin Lquido incoloro y lmpido, de olor similar
al del cloroformo.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: en tor-
no de 83 C. Densidad (20 C): en torno de 1,25. ndice de
refraccin (20 C): 1,444.
Solubilidad Poco soluble en agua y fcilmente soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Irritante. Txico. Inflamable.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 451
Diclorhidrato de N-(1-naftil) etilendiamina
CAS [1465-25-4]
Sinonimia Diclorhidrato de N-1-naftalenil-1,2- etanodia-
mina.
Frmula y masa molecular C12H14N2.2HCl 259,18
Descripcin Polvo blanco o blanco amarillento.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 188 C a 190 C.
Solubilidad Soluble en agua y poco soluble en etanol.
14
Diclorhidrato de N-(1-naftil) etilendiamina SR
Sinonimia Reactivo de Bratton-Marshall Preparacin
Disolver 0,1 g de diclorhidrato de N-(1- naftil) etilendiami-
na en 100 ml de agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
2,6-Dicloroquinona-4-clorimida
CAS [101-38-2]
Sinonimia Reactivo de Gibbs, 2,6-dicloro-4- (cloroimi-
no)-2,5-cicloexadien-1-ona.
Frmula y masa molecular C6H2Cl3NO 210,45
Descripcin Polvo cristalino amarillo o anaranjado.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
66 C.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, soluble en
etanol y en soluciones alcalinas diluidas.
1-(2,6-Diclorofenil)-1,3-dihidro-2fl-indol-2-ona
(Impureza A del diclofenaco)
CAS [15362-40-0]
Sinonimia 1-(2,6-diclorofenil) indolin-2-ona Frmula y
masa molecular C14H9Cl2NO 278,14
Descripcin Polvo cristalino blanco.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz.
2,6-Dicloroindofenol sdico
CAS [620-45-1]
Sinonimia 2,6-Diclorofenolindofenol sdico.
Frmula y masa molecular C12H6Cl2NNaO2 290,08.
Descripcin Polvo verde oscuro.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y en etanol anhi-
dro. La solucin acuosa presenta coloracin azul oscura y
cuando acidificada se torna rosa.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Dicromato de potasio
CAS [7778-50-9]
Frmula y masa molecular K2Cr2O7 294,18
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,8%el (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
 452 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Descripcin Cristales rojo anaranjados, e inodoro.
Solubilidad Soluble en agua y prcticamente insoluble
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Custico. Oxidante. Contaminante.
Dicromato de potasio SR
Especificacin Contiene 5 g en agua a 100 ml.
14
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Custico. Oxidante. Contaminante.
Dietilamina
CAS [109-89-7]
Frmula y masa molecular C4H11N 73,14
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, voltil, de olor
amoniacal. Reaccin fuertemente alcalina.
Caractersticas fsicas Banda de ebullicin: 55 C a 58
C. ndice de refraccin (20 C): 1,386. Densidad: aproxi-
madamente 0,707.
Miscibilidad Miscible en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Irritante. Inflamable.
Dietilaminoetildextrano
CAS [9015-73-0]
Frmula y masa molecular C12H28N2O 216,36
Descripcin Polvo.
Solubilidad Soluble en agua.
Dietilditiocarbamato de plata
CAS [1470-61-7]
Frmula y masa molecular C5H10AgNS2 256,13
Descripcin Polvo amarillo claro a amarillo grisceo.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y soluble
en piridina.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Dietilditiocarbamato de plata SR
Especificacin Contiene 0,25 g en piridina para 50 ml.
Estabilidad Preparar para uso inmediato.
Seguridad Txico.
Dietilditiocarbamato de sodio
CAS [20624-25-3]
Frmula y masa molecular C5H10NNaS2.3H2O 225,33
Descripcin Cristales blancos o casi blancos o inodoros.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y soluble en eta-
nol.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
N,N-dietiletilendiamina
CAS [100-36-7]
Nombre qumico N,N-Dietil-1,2-diaminoetano
Frmula y masa molecular C6H16N2. 116,21
Descripcin Lquido de apariencia levemente oleosa, in-
coloro o levemente amarillento, con fuerte olor amoniacal,
irritante para La piel, ojos y membranas mucosas.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): 0,827. Banda
de ebullicin: 145 C a 147 C.
Agua (5.2.20.1) Determinar en 0,5 g. como mximo
1,0%.
Dietilftalato
CAS [84-66-2]
Frmula y masa molecular C12H14O4 222,24
Descripcin Lquido oleoso incoloro y prcticamente
inodoro.
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Caractersticas fsicas densidad 1,118. Temperatura de
ebullicin: 295 C.
Miscibilidad Miscible en agua, etanol, ter etlico y otros
solventes orgnicos.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Irritante!
Difenilamina
CAS [122-39-4]
Frmula y masa molecular C12H11N 169,22
Descripcin Cristales blancos o casi blancos.
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin: cerca de
55 C. Temperatura de ebullicin: 302 C. Pierde el color
en presencia de la luz.
Solubilidad Poco soluble en agua y soluble en etanol.
Forma sal en solucin con cidos fuertes.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Difenilamina SR
Preparacin Disolver 1 g de difenilamina en 100 ml de
cido sulfrico.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz.
Difenilbencidina
CAS [531-91-9]
Sinonimia N,N-Difenilbencidina. Frmula y masa mo-
lecular C24H20N2 336,43
Descripcin Polvo cristalino blanco o levemente gris.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 248
C.

Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, poco solu-
ble en acetona y en etanol.
Conservacin En recipientes cerrados.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz.
Difenilborato de aminoetanol
CAS [524-95-8]
Frmula y masa molecular C14H16BNO 225,09
Descripcin Polvo cristalino blanco o amarillento.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 193
C.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y soluble
en etanol.
Difenilborato de aminoetanol SR
Preparacin Disolver 1 g de difenilborato de aminoeta-
nol en metanol y completar el volumen para 100 ml con el
mismo solvente.
Difenilcarbazida
CAS [140-22-7]
Frmula y masa molecular C13H14N4O 242,28
Descripcin Polvo cristalino blanco; se torna rosa por la
exposicin al aire.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 168 C a 171 C.
Solubilidad Muy poco soluble en agua, soluble en aceto-
na, en etanol y cido actico glacial.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la luz y del aire.
Difenilcarbazida SR
Especificacin Contiene 1 g de difenilcarbazida en etanol
para 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Inflamable.
Difenilcarbazona
CAS [538-62-5]
Frmula y masa molecular C13H12N4O 240,26
Descripcin Cristales de color anaranjado-rojizo.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 157 C, con descomposicin.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y fcilmen-
te soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Difenilcarbazona-azul de bromofenol SR
Preparacin En baln volumtrico de 25 ml, disolver 12
mg de difenilcarbazona y 12,5 mg de azul de bromofenol
en 15 ml de etanol. Completar el volumen con etanol.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 453
Conservacin Acondicionar la solucin en recipiente de
vidrio mbar a la temperatura de 4 C a 8 C.
Difenilcarbazona mercrica SR
Solucin A Disolver 0,1 g de difenilcarbazona en etanol
y completar el volumen para 50 ml con el mismo solvente.
Solucin B Disolver 1 g de cloruro de mercurio (II) en
etanol y completar el volumen para 50 ml con el mismo
solvente. Preparacin Mezclar volmenes iguales de las
Soluciones A y B en el momento del uso.
N,N-Diisopropiletilenodiamina 14
CAS [4013-94-9]
Frmula y masa molecular C8H20N2 144,26
Descripcin Lquido incoloro o amarillento. Corrosivo,
inflamable e higroscpico.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,798.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,429. Temperatura
de ebullicin: cerca de 170 C.
Dimetilacetamida
CAS [127-19-5]
Frmula y masa molecular C4H9NO 87,12
Descripcin Lquido incoloro y lmpido.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: cerca
de 165 C. ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,437.
Densidad (20 C): cerca de 0,94.
Miscibilidad Miscible en agua y en la mayora de los
solventes orgnicos.
Conservacin En recipientes cerrados.
p-Dimetilaminobenzaldehdo
CAS [100-10-7]
Sinonimia 4-Dimetilaminobenzaldehdo y Reactivo de
Ehrlich.
Frmula y masa molecular C9H11NO 149,19
Descripcin Polvo cristalino, blanco a levemente ama-
rillento.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 74 C.
Solubilidad Soluble en etanol y en soluciones cidas di-
luidas.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
p-Dimetilaminobenzaldehdo SR
Preparacin Disolver, sin calentamiento, 0,2 g de p-Di-
metilaminobenzaldehdo en mezcla de 4,5 ml de agua y 5,5
ml de cido clorhdrico. Preparar en el momento de uso.
p-Dimetilaminobenzaldehdo SR1
Preparacin Disolver 0,2 g dep-Dimetilaminobenzalde-
hdo en 20 ml de etanol y aadir 0,5 ml de cido clorh-
 454 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

drico. Agitar la solucin con carbn activado y filtrar. La Descripcin Cristales blancos o casi blancos.
coloracin de la solucin es menos intensa que una solu-
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
cin de yodo a 0,0001 M recientemente preparada. Utilizar
74,5 C.
inmediatamente despus de preparado.
Dimetilformamida
p-Dimetilaminobenzaldehdo SR2
CAS [68-12-2]
Sinonimia Reactivo de Wasicky.
Frmula y masa molecular C3H7NO 73,09
Preparacin Disolver 0,5 g de p-Dimetilaminobenzalde-
hdo en 8,5 ml de cido sulfrico y aadir, cuidadosamen- Descripcin Lquido lmpido, incoloro, con olor seme-
te, 8,5 ml de agua. jante al de aminas.

14 4-Dimetilaminocinamaldedo
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: apro-
ximadamente 153 C. Densidad: aproximadamente 0,95.
ndice de refraccin (20 C): 1,428.
CAS [6203-18-5]
Frmula y masa molecular C11H13NO 175,22 Miscibilidad Miscible en agua y en etanol.
Descripcin Cristales anaranjados o marrn-anaranjados Conservacin En recipientes bien cerrados.
o polvo.
Seguridad Irritante. Txico.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
138 C. Dimetilsulfxido
Solubilidad Soluble en etanol, acetona y benceno. CAS [67-68-5]
Sinonimia DMSO.
2,6-Dimetilanilina
Frmula y masa molecular C2H6 OS 78,13
CAS [87-62-7]
Descripcin Lquido incoloro e inodoro. Higroscpico.
Sinonimia 2,6-Xilidina.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: apro-
Frmula y masa molecular C8H11N 121,18
ximadamente 189 C. Densidad: aproximadamente 1,10.
Descripcin Lquido incoloro. ndice de refraccin (20 C): 1,479.
Caracterstica fsica Densidad (20 C): cerca de 0,98 Miscibilidad Miscible en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
N,N-Dimetilanilina
Almacenamiento Proteger de la humedad y de la exposi-
CAS [121-69-7]
cin a la luz.
Sinonimia N,N-Dimetilbencenamina.
Seguridad Irritante.
Frmula y masa molecular C8H11N 121,18
Descripcin Lquido oleoso, lmpido, prcticamente in- 1,3-Dinitrobenceno
coloro, oscurece durante el almacenamiento. CAS [99-65-0]
Caracterstica fsica -Banda de destilacin: 192 C a 194 Frmula y masa molecular C6H4N2O4 168,11
C.
Descripcin Cristales amarillentos.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua, fcilmen-
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
te soluble en etanol y ter etlico.
89 C.
1,1-Dimetiletilamina Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y poco so-
luble en etanol.
CAS [75-64-9]
Sinonimia terc-Butilamina. Conservacin En recipientes bien cerrados.

Frmula y masa molecular C4H11N 73,14 1,3-Dinitrobenceno SR

Descripcin Lquido incoloro. Especificacin Contiene 1 g de 1,3-dinitrobenceno en
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,694. etanol para 100 ml.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,378. Temperatura Conservacin Recipiente bien cerrado.
de ebullicin: cerca de 46 C.
Dioxano
2,5-Dimetilfenol CAS [123-91-1]
CAS [95-87-4] Sinonimia 1,4-Dioxano, dixido de etileno, dioxano.
Sinonimia p-Xileno. Frmula y masa molecular C4H8O2 88,11

Frmula y masa molecular C8H10O 122,16 Descripcin Lquido lmpido, incoloro, con olor seme-
jante al de ter etlico.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: en tor-
no de 101 C. Densidad: en torno de 1,03. ndice de refrac-
cin (20 C): 1,421 a 1,424.
Miscibilidad Miscible en agua y en la mayora de los
solventes orgnicos.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Irritante. Txico. Inflamable.
Dixido de azufre
CAS [7446-09-5]
Sinonimia Anhdrido sulfuroso.
Frmula y masa molecular SO2 64,06
Especificacin Contiene, como mnimo, 97,0%(v/v)
Descripcin Gas incoloro, de olor caracterstico, sofo-
cante.
Conservacin En cilindros presurizados.
Seguridad Irritante. Txico.
Dixido de manganeso
CAS [1313-13-9]
Frmula y masa molecular MnO2 86,94
Descripcin Polvo fino negro o marrn oscuro.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del calor.
Seguridad Oxidante enrgico.
Dipropilenglicol
CAS [25365-71-8]
Sinonimia 1,1-xido-2-propanol
Frmula y masa molecular C6H14O3 134,17
Descripcin Lquido incoloro, prcticamente sin olor.
Caractersticas fsicas Densidad: aproximadamente 1,02.
Temperatura de ebullicin: aproximadamente 230 C.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento En locales bien ventilados.
Disulfuro de carbono
CAS [75-15-0]
Frmula y masa molecular CS2 76,14
Descripcin Lquido incoloro o amarillento. Inflamable.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 1,26.
Banda de ebullicin: 46 C a 47 C.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua y miscible
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Venenoso!
Ditiol
CAS [496-74-2]
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 455
Sinonimia 1,2-Dimercapto-4-metilbenceno; tolueno
-3,4-ditiol.
Frmula y masa molecular C7H8S2 156,27
Descripcin Cristales blancos o casi blancos.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 31 C.
Solubilidad Soluble en metanol y en soluciones hidrxi-
do- alcalinas.
Ditiol SR
Especificacin Contiene 0,5 g en 100 ml de etanol.
Estabilidad Preparar en el momento de uso.
14
Seguridad Inflamable.
Ditiotreitol
CAS [3483-12-3]
Frmula y masa molecular C4H10O2S2 154,26
Descripcin Cristales blancos.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, en acetona y en
etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Ditizona
CAS [60-10-6]
Sinonimia Difeniltiocarbazona.
Frmula y masa molecular C13H12N4S 256,32
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% (p/p).
Descripcin Polvo cristalino marrn oscuro.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 168 C, con
descomposicin.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz.
Ditizona SR
Especificacin Contiene 0,05 g en 100 ml de tetracloruro
de carbono.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger del calor.
Seguridad Veneno!
Ditizona, solucin concentrada
Preparacin Disolver 35 mg de ditizona en 80 ml de clo-
roformo (para anlisis con ditizona). Transferir para baln
volumtrico de 500 ml completar el volumen con cloro-
formo.
Conservacin En recipientes cerrados y mbar.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz y
mantener a la temperatura de 4 a 8 C.
 456 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Estabilidad Esta solucin es estable por cinco meses Estao metlico

CAS [7440-31-5]
Ditizona, solucin diluida
Elemento y masa atmica Sn 118,71
Preparacin Diluir la solucin concentrada de ditizona
en cloroformo (1:7). Especificacin Pureza de, como mnimo, 99,5%.
Descripcin Grnulos grises.
Ditizona, solucin extractora
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
Preparacin Disolver 30 mg de ditizona en 1000 ml de damente 231,9 C.
cloroformo y aadir 5 ml de etanol. Antes del uso, agitar
un volumen adecuado de la solucin extractora de ditizona Conservacin En recipientes bien cerrados.

14 con mitad de su volumen de cido ntrico a 1% (v/v) des-

cartando la fase cida.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz y del
calor.
Almacenamiento En refrigerador. Seguridad Irritante.

Edetato disdico Estearato de metilo

CAS [6381-92-6]
Sinonimia EDTA disdico; Sal disdica di-hidratada del
cido(etilenodinitrila) actico
Frmula y masa molecular C10H14N2Na2O8.2H2O
372,24
Especificacin Contiene, como mnimo, 97,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Polvo cristalino blanco, de sabor salino sua-
ve.
CAS [112-61-8]
Frmula y masa molecular C19H38O2 298,50
Descripcin Cristales blancos o masa cristalina blanca o
amarillo-plida.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 38 C.
Solubilidad Soluble en etanol y ter de petrleo.
Conservacin En recipientes bien cerrados.

Solubilidad Soluble en agua y prcticamente insoluble ster etlico de tetrabromofenolftalena

en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Categora Quelante.
Edetato disdico, solucin 0,05 M
Especificacin Contiene 1,861 g, aadidos de 10 ml de
hidrxido de sodio M, y diluir en agua para 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Emodina
CAS [518-82-1]
Frmula y masa molecular C15H10O5 270,25
Descripcin Agujas rojo-anaranjadas.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, soluble en
etanol y en soluciones hidrxido-alcalinas.
CAS [1176-74-5]
Sinonimia Bromofenolftalena magenta E
Frmula y masa molecular C22H14Br4O4 661,96
Estolato de eritromicina
CAS [3521-62-8]
Frmula y masa molecular C52H97NO18S 1056,43.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 135 C a 138 C.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, fcilmente
soluble en etanol, soluble en acetona. Es prcticamente in-
soluble en cido clorhdrico diluido.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la luz y calor.
Categora Antibitico.

Azufre Estroncio SRA 1 mg/ml

CAS [7704-34-9] Especificacin Contiene 1,685 g de carbonato de estron-
Elemento y masa atmica S 32,1 cio en 10,0 ml de cido clorhdrico a 50% (v/v). Completar
con agua a 1000 ml.
Descripcin Polvo leve, amarillo grisceo, o amarillo
verdoso. Conservacin En recipientes bien cerrados, inertes (tipo
polietileno).
Escina
Etanol
CAS [11072-93-8]
CAS [64-17-5]
Especificacin Mezcla de saponinas obtenidas de semi-
llas de Aesculus hippocastanum L. Sinonimia Alcohol etlico.

Descripcin Polvo amorfo, fino, casi blanco, o rojizo, o Frmula y masa molecular C2H6O 46,07
amarillento.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Especificacin Contiene, como mnimo, 96,0% (v/v).
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, voltil, de olor
caracterstico.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: apro-
ximadamente 78 C. Densidad: 0,803 a 0,808.
Miscibilidad Miscible en agua y en cloruro de metileno.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del calor.
Seguridad Txico. Inflamable.
Etanol absoluto
CAS [64-17-5]
Sinonimia Alcohol anhidro.
Frmula y masa molecular C2H6O 46,07
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,5% (v/v).
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, voltil, de olor
caracterstico. Higroscpico.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: 78-79
C. Densidad: 0,790 a 0,794. ndice de refraccin: (20 C):
1,361.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger del calor y de la humedad.
Seguridad Txico. Inflamable.
Etanol glicerinado
Preparacin Mezclar 20 ml de glicerina y 80 ml de eta-
nol a 70% (v/v).
ter de petrleo
CAS [8032-32-4]
Sinonimia Bencina.
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, voltil, de olor
caracterstico. No fluorescente.
Caractersticas fsicas Banda de ebullicin: 40 C a 60
C. Densidad: 0,630 a 0,656.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua y miscible
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del calor.
Seguridad Inflamable.
ter etlico
CAS [60-29-7]
Frmula y masa molecular C4H10O 74,12
Especificacin Contiene, como mnimo, 96,0% (v/v).
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, muy voltil, de
olor caracterstico, penetrante. Higroscpico.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 457
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: apro-
ximadamente 35 C. Densidad: aproximadamente 0,715.
ndice de refraccin (20 C): 1,355.
Miscibilidad Miscible en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz y del calor (no exce-
der 15 C).
Categora Anestsico.
14
Seguridad Inflamable. Riesgo de explosin!
ter isoproplico
CAS [108-20-3]
Sinonimia ter diisoproplico.
Frmula y masa molecular C6H14O 102,17
Descripcin Lquido incoloro y lmpido.
Caractersticas fsicas Banda de ebullicin: 67 C a 69
C. Densidad (20 C): 0,723 a 0,728.
Miscibilidad Muy poco miscible en agua y miscible en
etanol.
Conservacin En recipientes cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Inflamable
Etilenglicol
CAS [107-21-1]
Nombre qumico 1,2-Etanodiol
Frmula y masa molecular C2H6O2 62,07
Descripcin Lquido viscoso, incoloro.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: en tor-
no de 196 C. Densidad: 1,113 a 1,115.
Miscibilidad Miscible en agua y en etanol.
Etilparabeno
CAS [120-47-8]
Frmula y masa molecular C9H10O3 166,17
Descripcin Cristales pequeos e incoloros o polvo blan-
co.
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin: 116 C.
Banda de ebullicin: 297 C a 298 C, con descomposi-
cin.
Solubilidad Poco soluble en agua. Fcilmente soluble en
acetona, etanol y ter etlico.
Conservacin En recipientes cerrados.
Categora Conservante.
Eugenol
CAS [97-53-0]
Frmula y masa molecular C10H12O2 164,20
 458 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Descripcin Lquido oleoso, incoloro o levemente amari-
llento. Oscurece, y se torna ms viscoso, con la exposicin
a la luz y con el contacto con el aire.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 1,07.
Temperatura de ebullicin: cerca de 250 C.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua miscible
en etanol, en aceites grasos y aceites esenciales.
Verde rpido (CI 42053)
14
CAS [2353-45-9]
Frmula y masa molecular C37H34N2Na2O10S3 808,86
Descripcin Polvo o grnulo verde oscuro, con brillo
metlico.
Solubilidad Soluble en agua y ligeramente soluble en
etanol.
Conservacin En recipientes cerrados.
Factor Xa de la coagulacin sangunea bovina
Especificacin Enzima que posibilita la conversin de la
protrombina en trombina. La sustancia semi-purificada es
obtenida a partir de plasma bovino lquido y es preparada
por activacin del zimgeno del Factor X por medio de un
agente apropiado, tal como el veneno de vbora de Russel.
Almacenamiento La preparacin liofilizada debe ser al-
macenada a una temperatura de -20 C. La preparacin
congelada debe ser almacenada a una temperatura inferior
a -20 C.
Factor Xa bovino, solucin
Preparacin Reconstituir, segn las instrucciones de fa-
bricante, y diluir con la solucin tampn de trometamina
cloruro de sodio de pH 7,4.
Absorbancia (5.2.14) Cualquier modificacin de la ab-
sorbancia de la solucin en 405 nm, usando el tampn de
trometamina-cloruro de sodio de pH 7,4, como blanco, no
es superior a 0,15-0,20 por minuto.
1,10-Fenantrolina
CAS [5144-89-8]
Sinonimia Ortofenantrolina.
Frmula y masa molecular C12H8N2.H2O 198,22
Descripcin Polvo cristalino blanco.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 100 C a 104 C.
Solubilidad Poco soluble en agua, soluble en acetona y
en etanol.
Categora Indicador para sistemas de oxidacin reduc-
cin; reactivo para colorimetra.
DL-Fenilalanina
CAS [150-30-1]
Frmula y masa molecular C9H11NO2 165,19
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0%.
Descripcin Cristales monoclnicos.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Caracterstica fsica Sublima en el vaco.
Fenol
CAS [108-95-2]
Frmula y masa molecular C6H6O 94,11
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% (p/p).
Descripcin Masa cristalina o cristales incoloros o leve-
mente rosados o amarillentos, de olor caracterstico. Deli-
cuescente.
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin: aproxima-
damente 43 C. Temperatura de ebullicin: aproximada-
mente 180 C.
Solubilidad Soluble en agua, muy soluble en etanol, en
glicerol y en cloruro de metileno.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la luz y del calor.
Etiquetado Debe indicar el nombre y la cantidad del es-
tabilizante.
Seguridad Custico. Txico.
Categora Desinfectante.
Fenolftalena
CAS [77-09-8]
Frmula y masa molecular C20H14O4 318,33
Especificacin Contiene, como mnimo, 97,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Polvo cristalino o amorfo, blanco o leve-
mente amarillento. Inodoro.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 258 C.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Categora Indicador cido-base.
Fenolftalena a 0,1% (p/v)
Especificacin Contiene 0,1 g en etanol a 80% (v/v) a
100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Inflamable.
Informacin adicional Para preparacin de papel indi-
cador.
2-Fenoxietanol
CAS [122-99-6]
Frmula y masa molecular C8H10O2 138,17
Descripcin Lquido incoloro, levemente viscoso, de
olor aromtico suave y de sabor ardiente.
Caractersticas fsicas Densidad: aproximadamente 1,11.
Temperatura de ebullicin: aproximadamente 245 C.

ndice de refraccin (20 C): 1,534.
Miscibilidad Poco soluble en agua, fcilmente soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Categora Conservante.
Ferricianuro de potasio
CAS [13746-66-2]
Frmula y masa molecular K3Fe(CN)6 329,25
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,9% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales rojos.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Ferricianuro de potasio SR
Especificacin Contiene 5 g en agua a 100 ml.
Conservacin Preparar en el momento de uso.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Ferricianuro de potasio amoniacal
Preparacin Disolver 2 g de ferricianuro de potasio en
75 ml de agua. Aadir 25 ml de hidrxido de amonio y
homogeneizar.
Ferrocianuro de potasio
CAS [14459-95-1]
Frmula y masa molecular K4Fe(CN)6.3H2O 422,39
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales transparentes o polvo cristalino,
amarillo. Eflorescente. Se torna anhidro a 100 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y prcticamente
insoluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Ferrocianuro de potasio SR
Especificacin Contiene 5,3 g en agua a 100 ml
(aproximadamente 0,125 M).
Conservacin Preparar en el momento de uso.
Fibringeno
CAS [9001-32-5]
Ver monografa Fibringeno humano liofilizado.
Floroglucina SR
Preparacin Disolver 1 g de floroglucinol en etanol y
diluir para 100 ml con el mismo solvente.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 459
Almacenamiento Proteger de la luz.
Floroglucinol
CAS [6099-90-7]
Frmula y masa molecular C6H6O3.2H2O 162,14
Descripcin Cristales o polvo cristalino blanco, o ama-
rillo claro.
Solubilidad Poco soluble en agua y soluble en etanol y
ter etlico.
Fluido gstrico simulado
Preparacin Disolver 2 g de cloruro de sodio y 3,2 g de
14
pepsina purificada en 7 ml de cido clorhdrico y completar
el volumen para 1000 ml con agua. Presenta pH de cerca
de 1,2.m
Fluido gstrico simulado (sin enzima)
Preparacin Disolver 2 g de cloruro de sodio en 100 ml
de agua. Aadir 7 ml cido clorhdrico y diluir para 1000
ml con agua. Ajustar el pH en 1,2 0,1 con cido clorhdri-
co o hidrxido de sodio 10 M.
Fluido intestinal simulado sin pancreatina pH 7,5
Preparacin Disolver 6,8 g de fosfato de potasio mono-
bsico en 900 ml de agua, aadir 77 ml de hidrxido de
sodio 0,2 M y ajustar el pH en 7,5 0,1 con hidrxido de
sodio 0,2 M. Completar para 1000 ml con agua y homo-
geneizar.
Fluoruro de amonio
CAS [12125-01-8]
Frmula y masa molecular NH4F 37,04
Descripcin Cristales incoloros.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 100 C.
Conservacin Proteger de la luz, calor y humedad.
Seguridad Irritante.
Fluoruro de calcio
CAS [7789-75-5]
Frmula y masa molecular CaF2 78,08
Descripcin Cristales o polvo blanco.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Fluoruro de sodio
CAS [7681-49-4]
Frmula y masa molecular NaF 41,99
Descripcin Cristales incoloros o polvo blanco o casi
blanco.
Caractersticas fsicas Densidad: 2,78. Temperatura de
fusin: 993 C.
Solubilidad Soluble en agua y prcticamente insoluble
en etanol.
 460 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Venenoso!
Fluoruro de sodio SR
Preparacin Secar aproximadamente 0,5 g de fluoruro de
sodio a 200 C, por 4 horas. Pesar exactamente 0,222 g de
material seco y disolver agua, completando el volumen a
100 ml. Pipetear 10 ml de esta solucin para baln volum-
trico de 1000 ml y completar el volumen con agua. Cada
ml de esta solucin equivale a 10 g de flor.
14 Conservacin En recipientes bien cerrados.
Formaldehdo, solucin
Sinonimia Formol, formalina.
Frmula y masa molecular CH2O 30,03
Especificacin Contiene, como mnimo, 34,0% (p/v) y,
como mximo, 37,0% (p/v).
Descripcin Lquido incoloro, lmpido; vapores irritan-
tes.
Caractersticas fsicas Densidad: aproximadamente
1,08. ndice de refraccin (20 C): 1,374.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz, del aire y de tempe-
ratura abajo de 9 C.
Estabilidad Puede contener metanol como estabilizante.
Seguridad Irritante. Txico.
Categora Desinfectante.
Formamida
CAS [75-12-7]
Frmula y masa molecular CH3NO 45,04
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, viscoso, de olor
amoniacal suave.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: apro-
ximadamente 210 C. Densidad: aproximadamente 1,13.
ndice de refraccin (20 C) 1,447.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Seguridad Irritante.
Formato de amonio
CAS [540-69-2]
Frmula y masa molecular CH5NO2 63,06
Descripcin Grnulos y cristales delicuescentes.
Caracterstica fsica Banda de fusin: entre 119 C a 121
C.
Solubilidad Muy soluble en agua y soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Fosfatasa alcalina, solucin
Solucin A Disolver 3,1 g de cido brico en 500 ml de
agua. Aadir 21 ml de hidrxido de sodio M y 10 ml de
cloruro de magnesio 0,1 M. Diluir con agua para 1000 ml.
Preparacin Disolver 95 mg de enzima fosfatasa alcalina
en Solucin A. Diluir para 50 ml con el mismo solvente.
Fosfato de amonio dibsico
CAS [7783-28-0]
Frmula y masa molecular (NH4)2HPO4 132,06
Descripcin Grnulos o cristales blancos o casi blancos.
Higroscpico.
Caracterstica fsica Presenta pH de cerca de 8,0 en solu-
cin acuosa a 20% (p/v).
Solubilidad Muy soluble en agua y prcticamente inso-
luble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Fosfato de amonio monobsico
CAS [7722-76-1]
Sinonimia Dihidrgeno fosfato de amonio. Frmula y
masa molecular (NH4)H2PO4 115,03
Descripcin Cristales blancos o polvo cristalino.
Caracterstica fsica El pH de solucin a 0,2 M es apro-
ximadamente 4,0.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, poco soluble en
etanol, insoluble en acetona.
Fosfato de codena
CAS [41444-62-6]
Sinonimia Fosfato de codena hemi-hidratado.
Frmula y masa molecular C18H21NO3H3PO4.1/2H2O
406,37
Descripcin Polvo cristalino blanco o casi blanco, o cris-
tales pequeos y incoloros.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua. Poco o muy
poco soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Fosfato de potasio
CAS [7778-53-2]
Frmula y masa molecular K3PO4 212,27
Sinonimia Fosfato de potasio tribsico.
Descripcin Cristales o polvo cristalino blanco, delicues-
cente.
Solubilidad Soluble en agua y insoluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Fosfato de potasio monobsico
CAS [7778-77-0]

Sinonimia Bifosfato de potasio, dihidrogenofosfato de
potasio, fosfato cido de potasio, fosfato monopotsico,
fosfato potsico de Sorensen. Frmula y masa molecular
KH2PO4 136,09
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0%, calcula-
do sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blanco.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Fosfato de potasio dibsico
CAS [7758-11-4]
Sinonimia Fosfato de potasio monocido.
Frmula y masa molecular K2HPO4 174,18
Descripcin Cristales incoloros o polvo blanco o casi
blanco. Muy higroscpico.
Solubilidad Muy soluble en agua, muy poco soluble en
etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Fosfato de sodio dibsico, anhidro
CAS [7558-79-4]
Frmula y masa molecular Na2HPO4 141,96
Descripcin Polvo blanco higroscpico.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Fosfato de sodio dibsico, dihidratado
CAS [10028-24-7]
Frmula y masa molecular Na2HPO4.2H2O 178,00
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,5% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales incoloros.
Solubilidad Soluble en agua y prcticamente insoluble
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del calor y de la humedad.
Fosfato de sodio dibsico, dodecahidratado
CAS [10039-32-4]
Frmula y masa molecular Na2HPO4.12H2O 358,08
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,5% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales o grnulos incoloros, transparen-
tes, inodoros, de sabor salino, levemente alcalino. Eflores-
cente.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del calor.
Fosfato de sodio dibsico dodecahidratado SR
Especificacin Contiene 9 g en agua a 100 ml.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 461
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Fosfato de sodio dibsico, heptahidratado
CAS [7782-85-6]
Frmula y masa molecular Na2HPO4.7H2O 268,07
Descripcin Polvo granulado o cristal incoloro o blanco.
Es estable al aire. La solucin acuosa es alcalina.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
14
Fosfato de sodio dibsico heptahidratado SR
Especificacin Contiene 12 g de fosfato de sodio dibsi-
co heptahidratado en 100 ml de agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Fosfato de sodio monobsico
CAS [7558-80-7]
Sinonimia Di-hidrogeno-ortofosfato de sodio.
Frmula y masa molecular NaH2PO4 119,98
Descripcin Polvo blanco o casi blanco. Higroscopio.
Conservacin En recipientes hermticos.
Fosfato de sodio monobsico, monohidratado
CAS [10049-21-5]
Frmula y masa molcula NaH2PO4.H2O 137,99
Descripcin Cristales o grnulos blancos o casi blancos,
un poco delicuescentes.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y prcticamente
soluble en etanol. La solucin acuosa es cida.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Fosfato de sodio monobsico, dihidratado
CAS [13472-35-0]
Frmula y masa molcula NaH2PO4.2H2O 156,01
Descripcin Cristales incoloros o polvo blanco o casi
blanco.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 60 C.
Solubilidad Muy soluble en agua y muy poco soluble en
etanol.
Conservacin En recipientes cerrados.
Fosfato de sodio tribsico, dodecahidrato
CAS [10101-89-0]
Sinonimia Fosfato tribsico sdico, fosfato trisdico.
Frmula y masa molecular Na3PO4.12H2O 380,12
Descripcin Cristales incoloros o blancos. Eflorescente.
Caracterstica fsica Funde a 75 C por calentamiento
rpido.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del calor.
 462 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Fosfato de tetrabutilamonio
CAS [5574-97-0]
Frmula y masa molecular C16H38NO4P 339,46
Descripcin Polvo blanco o casi blanco. Higroscpico.
Solubilidad Soluble en agua.
Conservacin En recipientes cerrados.
Fosfato-prpura de bromocresol SR
14
Solucin A Disolver 38 g de fosfato de sodio monobsico
y 2 g de fosfato de sodio dibsico anhidro en agua y diluir
para 1000 ml con el mismo solvente. Ajustar el pH, si ne-
cesario, en 5,3 0,1 utilizando hidrxido de sodio 5 M o
cido fosfrico.
Solucin B Disolver 400 mg de prpura de bromocresol
en 30 ml de agua, aadir 6,3 ml de hidrxido de sodio 0,1
M y diluir con agua para 500 ml.
Preparacin En el da de la utilizacin, mezclar las So-
luciones A y B y cloroformo (1:1:1) en embudo de sepa-
racin. Agitar y descartar la fase orgnica. Repetir la ex-
traccin con porciones iguales de cloroformo hasta que
la camada orgnica se presente incolora. Utilizar la fase
acuosa.
Fsforo rojo
CAS [7723-14-0]
Descripcin Polvo rojo oscuro.
Solubilidad Insoluble en agua y en cidos diluidos.
Seguridad Inflamable!
Fructosa
CAS [57-48-7]
Sinonimia b-D-Fructosa, levulosa.
Frmula y masa molecular C6H12O6 180,16
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0%, calcula-
do sobre la sustancia desecada.
Descripcin Polvo cristalino blanco, inodoro, de fuerte
sabor dulce.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin con descom-
posicin: aproximadamente 103 C.
Solubilidad Muy soluble en agua y soluble etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Fructosa a 0,1 % (p/v)
Especificacin Contiene 0,1 g en piridina a 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad-Txico.
Fosfato de tributilo
CAS [126-73-8]
Frmula y masa molecular C12H27O4P 266,31
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Descripcin Lquido incoloro, o poco amarillento, ino-
doro.
Miscibilidad Poco miscible en agua.
Fosfato equimolar 0,05 M
Especificacin Contiene 3,53 g de fosfato de sodio di-
bsico y 3,39 g de fosfato de potasio monobsico en agua
para 1000 ml.
Conservacin En recipientes cerrados.
Ftalaldehido
CAS [643-79-8]
Frmula y masa molecular C8H6O2 134,14
Descripcin Polvo cristalino amarillo.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 55
C.
Conservacin En recipientes cerrados.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz y del
contacto con el aire.
Ftalato de dibutilo
CAS [84-74-2]
Frmula y masa molecular C16H22O4 278,3
Sinonimia ster dibutlico del cido ftlico, ftalato de di-
n-butilo y dibutil ftalato.
Descripcin Lquido oleoso, lmpido, incoloro o ligera-
mente colorido.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: 340
C. Densidad: 1,043 a 1,048.
Miscibilidad Muy poco soluble en agua, muy soluble en
acetona, benceno, etanol y ter etlico.
Ftalazina
CAS [253-52-1]
Frmula y masa molecular C8H6N2 130,15
Descripcin Cristales amarillos plidos.
Caracterstica fsica Banda de fusin: entre 90 C y 91
C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y soluble en eta-
nol anhidro, en acetato de etilo y en metanol.
Fucsina bsica (CI 42510)
CAS [632-99-5]
Sinonimia Magenta I, Clorhidrato de rosalina. Frmula y
masa molecular C20H20ClN3 337,85
Descripcin Cristales brillantes de color verde metlico.
Caracterstica fsica Se descompone en temperaturas
arriba de 200 C.
Solubilidad Soluble en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 463

Categora Colorante. Antifngico. Sinonimia Glicerina.

Frmula y masa molecular C3H8O3 92,09
Fucsina decolorada SR
Especificacin Contiene, como mnimo, 97,0% (p/p).
Sinonimia Reactivo de Schiff.
Descripcin Lquido viscoso, lmpido, incoloro, inodoro,
Preparacin Disolver 1 g de fucsina bsica en 600 ml
higroscpico, de sabor dulce.
de agua, aadir 100 ml de sulfito de sodio anhidro a 10%
(p/v). Enfriar externamente con hielo, bajo agitacin. Aa- Caractersticas fsicas Densidad: 1,255 a 1,263. ndice
dir, lentamente, 10 ml de cido clorhdrico, diluir con agua de refraccin (20 C): 1,470 a 1,474.
para 1000 ml y filtrar. Si la solucin oscurece, agitar con
Miscibilidad Miscible en agua y en etanol, poco
0,2 a 0,3 g de carbn activado hasta decoloracin, filtrando
inmediatamente. Si adems permanece la coloracin rosa,
aadir de 2 a 3 ml de cido clorhdrico y agitar.
soluble en acetona y prcticamente insoluble en aceites
grasos y aceites esenciales. 14
Conservacin Dejar en reposo durante 1 hora antes de la Conservacin En recipientes hermticos.
utilizacin, mantener al abrigo de la luz.
Almacenamiento Proteger de oxidantes.
Glactosa
Glicina
CAS [59-23-4]
CAS [56-40-6]
Frmula y masa molecular C6H12O6 180,16
Frmula y masa molecular C2H5NO2 75,07
Descripcin Polvo blanco cristalino.
Descripcin Polvo cristalino blanco y inodoro.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 167 C.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 232 C a 236 C,
Solubilidad Fcilmente soluble en agua. con descomposicin.
Conservacin En recipientes bien cerrados. Solubilidad Fcilmente soluble en agua, poco soluble en
etanol y muy poco soluble en ter etlico.
Glactosa a 0,1% (p/v) en piridina
Glucosa
Especificacin Contiene 0,1 g en piridina a 100 ml.
CAS [50-99-7]
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Sinonimia Dextrosa.
Almacenamiento Proteger del calor.
Frmula y masa molecular C6H12O6 180,16
Seguridad Txico.
Descripcin Polvo cristalino blanco, inodoro, sabor dul-
Gelatina ce.

CAS [9000-70-8] Caracterstica fsica Poder rotatorio especfico (20 C):

+ 52,5 a + 53,0 (disolver 10 g de glucosa en 100 ml de
Especificacin Es mezcla de protenas hidrosolubles ob-
agua y aadir 0,2 ml de amonaco).
tenidas por extraccin de material que contiene colgeno.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y ligeramente
Descripcin Polvo, grnulos, escamas u hojas transpa-
soluble en etanol.
rentes, brillantes, incoloras o levemente amarillentas. Hi-
groscpico, de olor caracterstico y sabor poco pronuncia- Conservacin En recipientes bien cerrados.
do.
Glucosa a 0,1% (p/v) en piridina
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Especificacin Contiene 0,1 g en piridina a 100 ml.
Almacenamiento Proteger del calor y humedad.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Gelatina glicerinada
Almacenamiento Proteger del calor.
Preparacin Disolver 1 g de gelatina en 100 ml de agua
Seguridad Txico.
calentada a una temperatura no superior a 30 C. Aadir 1
ml de salicilato de sodio a 2% (p/v) y 15 ml de glicerina;
Glutaraldehdo
agitar bien y filtrar la mezcla calentada en lana de vidrio.
CAS [111-30-8]
Gelatina SR Frmula de masa molecular C5H8O2 100,12
Preparacin Disolver 2,5 g de gelatina en 100 ml de agua Descripcin Lquido oleoso.
caliente. Utilizar despus de enfriamiento hasta temperatu-
ra ambiente. Caractersticas fsicas ndice de refraccin (25 C): cer-
ca de 1,434. Temperatura de ebullicin: cerca de 188 C.
Glicerol Miscibilidad Miscible en agua.
CAS [56-81-5]

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 464 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Guayacol
CAS [95-05-1]
Sinonimia 2-metoxifenol, metilcatecol.
Frmula y masa molecular C7H8O2 124,14
Descripcin Cristales blancos o levemente amarillentos,
o lquido incoloro o levemente amarillento. Higroscpico.
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin: cerca de
28 C. Temperatura de ebullicin: cerca de 205 C. Poco
soluble en agua, muy soluble en cloruro de metileno y f-
14
cilmente soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Guanina
CAS [73-40-5]
Frmula y masa molecular C5H5N5O 151,13
Descripcin Polvo blanco o casi blanco, amorfo.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, poco solu-
ble en etanol. Se disuelve en soluciones hidrxido-alcali-
nas diluidas.
Heparina sdica
CAS [9041-08-1]
Descripcin Consiste en mezcla de principios activos,
que poseen la propiedad de prolongar el tiempo de coa-
gulacin de la sangre. Obtenida, normalmente, de mucosa
intestinal, pulmones u otro tejido adecuado de mamferos
domsticos usados para alimento del hombre.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua.
Conservacin En recipientes hermticos. Etiquetado El
etiquetado debe indicar el rgano y la especie de origen. La
potencia debe ser indicada en UI.
Categora Anticoagulante.
Heptano
Especificacin Contiene usualmente mezcla de hidrocar-
buros fraccin de petrleo con predominio de n -hep-
tano.
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, voltil, altamen-
te inflamable, de olor caracterstico.
Caractersticas fsicas Banda de ebullicin: 95 a 99 C.
Densidad: aproximadamente 0,69.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua y soluble
en etanol absoluto. Miscible en ter etlico, en cloroformo,
en benceno y en la mayora de los aceites voltiles y no
voltiles.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger del calor. Mantener distante de
llama/chispa.
Seguridad Irritante del trato respiratorio. Inflamable.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
n-Heptano
CAS [142-82-5]
Frmula y masa molecular C7H16 100,20
Especificacin Principal componente de heptano.
Descripcin Lquido lmpido e inflamable.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: 98,4
C. Densidad: 0,684. ndice de refraccin (20 C): 1,3855.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua y miscible
en etanol anhidro.
Heptanosulfonato de sodio
CAS [22767-50-6]
Frmula y masa molecular C7H15NaO3S 202,25
Descripcin Masa cristalina blanca o casi blanca.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y soluble en me-
tanol.
Conservacin En recipientes hermticos.
Hexano
Especificacin Contiene usualmente mezcla de ismeros
de C6H14, predominantemente n-hexano y metilciclopenta-
no (C6H12).
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, voltil, altamen-
te inflamable, de olor caracterstico.
Caractersticas fsicas Banda de ebullicin: 67 a 70 C .
Densidad: 0,66.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger del calor. Mantener distante de
llama/chispa.
Seguridad Irritante del trato respiratorio. Inflamable.
n-Hexano
CAS [110-54-3]
Frmula y masa molecular C6H14 86,18
Especificacin Principal componente de ter de petrleo
y de hexano.
Descripcin Lquido lmpido, voltil, de olor semejante
al del petrleo.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: 69 C.
Densidad: 0,66. ndice de refraccin (20 C): 1,375.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua y miscible
en etanol anhidro.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger del calor. Mantener distante de
llama/chispa.
Seguridad Inflamable.
1-Hexanosulfonato de sodio
CAS [2832-45-3]
Frmula y masa molecular C6H13NaO3S 188,22

Descripcin Polvo blanco o casi blanco.
Hexilamina
CAS [111-26-2]
Sinonimia Hexanamina.
Frmula y masa molar C6H15N 101,19
Descripcin Lquido incoloro.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,766.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,418. Temperatura
de ebullicin: 127 C a 131 C.
Miscibilidad Poco soluble en agua y soluble en etanol.
Hidrato de cloral
CAS [302-17-0]
Sinonimia Cloral hidratado.
Frmula y masa molecular C2H3Cl3O2 165,40
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,5% (p/p).
Descripcin Cristales transparentes, incoloros, de olor
penetrante caracterstico y de sabor picante y levemente
amargo. Delicuescente.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 57 C.
Solubilidad Muy soluble en agua y fcilmente soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz y del calor.
Seguridad Irritante a la piel.
Categora Sedativo, hipntico.
Hidracina, hidrato
CAS [7803-57-8]
Frmula y masa molecular N2H4.H2O 50,06
Descripcin Lquido incoloro y lmpido.
Miscibilidad Miscible en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Hidrxido de amonio
Usar amonaco, solucin concentrada.
Hidrxido de bario
CAS [12230-71-6]
Frmula y masa molecular Ba(OH)2.8H2O 315,46.
Descripcin Cristales incoloros.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 78 C.
Solubilidad Soluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Hidrxido de calcio
CAS [1305-62-0]
Frmula y masa molecular Ca (OH)2 74,09
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 465
Especificacin Contiene, como mnimo, 93,0% (p/p).
Descripcin Polvo o grnulos blancos blandos, inodoros.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del dixido de carbono.
Hidrxido de calcio, solucin saturada
Usar hidrxido de calcio SR.
Hidrxido de calcio SR
Especificacin Contiene 0,15 g en agua exenta de dixi-
14
do de carbono a 100 ml (solucin saturada).
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Estabilidad Preparar en el momento de uso.
Almacenamiento Proteger del dixido de carbono.
Categora Astringente.
Hidrxido de litio
CAS [1310-66-3]
Frmula y masa molecular LiOH.H2O 41,96
Descripcin Polvo granulado blanco, o casi blanco.
Solubilidad Soluble en agua, formando una solucin
fuertemente alcalina. Ligeramente soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Corrosivo.
Hidrxido de potasio
CAS [1310-58-3]
Frmula y masa molecular KOH 56,11
Especificacin Contiene, como mnimo, 85,0% (p/p),
calculado como KOH, y, como mximo, 3,5% de K2CO3.
Descripcin Masa blanca, dura, seca, de estructura cris-
talina, inodora, muy higroscpica y vida por CO2. Se lica
al aire. Presentado en las formas de lentejas, cilindros o
escamas.
Solubilidad Muy soluble en agua y fcilmente soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes hermticos, inertes.
Almacenamiento Proteger de la humedad y del dixido
de carbono.
Seguridad Muy custico.
Hidrxido de potasio etanlico SR (aproximadamente
0,5 M)
Preparacin Disolver 34,04 g de hidrxido de potasio en
20 ml de agua; completar a 1000 ml con etanol (exento de
aldehdo). Reposo de 24 horas En recipientes hermticos.
Decantar. Usar el sobrenadante lmpido.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la luz.
 466 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Hidrxido de potasio etanlico 2 M Frmula y masa molecular C4H13NO 91,15

Preparacin Disolver 6,6 g de hidrxido de potasio en Descripcin Es una base ms fuerte que el amonaco y
5 ml de agua, enfriar y completar el volumen para 50 ml absorve rpidamente dixido de carbono del aire. Una pre-
con etanol. Decantar por 24 horas y utilizar el sobrenadante paracin en medio acuoso a 25% (p/v), es lmpida e inco-
lmpido. lora.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 63 C.
Hidrxido de sodio
Conservacin En recipientes bien cerrados.
CAS [1310-73-2]
Sinonimia Soda custica. D -4-hidroxifenilglicina

14 Frmula y masa molecular NaOH 40,00

Especificacin Contiene, como mnimo, 95,0% (p/p) de
lcali total, calculado como NaOH, y, como mximo, 3,0%
CAS [22818-40-2]
Frmula y masa molecular C8H9NO3 167,16
Descripcin Folhetos brillantes.
(p/p) de Na2CO3.
Caracterstica fsica Banda de descomposicin: entre
Descripcin Masa dura, de estructura cristalina, blanca
220 C y 247 C.
bajo la forma de pedazos, lentejas y bastones. Delicuescen-
te y absorve dixido de carbono. Solubilidad Ligeramente soluble en agua, en etanol, ter
etlico y acetona. Soluble en minerales alcalinos y cidos.
Solubilidad Muy soluble en agua y fcilmente soluble
en etanol.
Hidroxiquinolena
Conservacin En recipientes hermticos.
CAS [148-24-3]
Almacenamiento Proteger de la humedad y del dixido Sinonimia 8-hidroxiquinolena
de carbono.
Frmula y masa molecular C9H7NO 145,16
Seguridad Custico, corrosivo.
Descripcin Polvo cristalino blanco, o levemente ama-
Hidrxido de sodio SR rillento.

Especificacin Contiene 8% (p/v) de NaOH en agua. Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
75 C.
Conservacin Ver hidrxido de sodio M.
Solubilidad Poco soluble en agua, fcilmente soluble en
Hidrxido de sodio M acetona, en etanol y en soluciones diluidas de cidos mi-
nerales.
Especificacin Contiene 40 g en agua exenta de dixido
de carbono a 1000 ml. Hidroxitolueno butilado
Conservacin En recipientes de vidrio lcali resistentes CAS [128-37-0]
o de polietileno.
Sinonimia BHT.
Almacenamiento Proteger de la humedad y del dixido
Frmula y masa molecular C15H24O 220,34
de carbono.
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Hidrxido de sodio, solucin concentrada SR
Descripcin Polvo cristalino blanco o blanco amarillen-
(aproximadamente 10 M)
to.
Especificacin Contiene 20 g de hidrxido de sodio en
Caractersticas fsicas Temperatura de congelamiento:
agua a 50 ml.
no menos del que 69,2 C. Temperatura de ebullicin: 265
Conservacin En recipientes bien cerrados. C. Densidad: 1,048.
Almacenamiento Proteger del dixido de carbono. Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, muy solu-
ble en acetona, fcilmente soluble en etanol y en aceites
Seguridad Custico.
vegetales.
Hidrxido de tetrabutilamonio Seguridad Puede causar dermatitis por contacto.
CAS [2052-49-5]
Hipersido
Frmula y masa molecular (C4H9)4NOH 259,47
CAS [482-36-0]
Descripcin Cristales blancos o casi blancos.
Frmula y masa molecular C21H20O12 464,38
Solubilidad Soluble en agua.
Descripcin Agujas amarillas plidas.
Hidrxido de tetrametilamonio Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 240
C, con descomposicin.
CAS [75-59-2]

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Solubilidad Soluble en metanol.
Hipoclorito de sodio
CAS [7681-52-9]
Frmula y masa molecular NaClO 74,44
Descripcin Cristales blancos. Normalmente es obtenido
en la forma pentahidratada, siendo que su forma anhidra
es explosiva.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 18 C (for-
ma pentahidratada)
Solubilidad Muy soluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Irritante!
Hipoclorito de sodio SR
Ver monografa Hipoclorito de sodio solucin diluida.
Hipofosfito de sodio
CAS [10039-56-2]
Frmula y masa molecular NaH2PO2 H2O 105,99
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Polvo granulado o cristalino blanco o crista-
les incoloros, inodoros, de sabor salino. Higroscpico.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y soluble en eta-
nol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del calor.
Hipofosfito de sodio SR
Especificacin Contiene 5 g de hipofosfito de sodio en 10
ml de agua, aumentados a 50 ml con cido clorhdrico. Se-
parar eventuales cristales formados. La solucin debe ser
lmpida e incolora.
Imidazol
CAS [288-32-4]
Sinonimia Glioxalina.
Frmula y masa molecular C3H4N2 68,08
Descripcin Polvo cristalino blanco.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 90 a 91 C.
Solubilidad Soluble en agua y en etanol.
Iminodibencilo
CAS [494-19-9]
Frmula y masa molecular C14H13N 195,26
Descripcin Polvo cristalino amarillo plido.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 106
C.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y fcilmen-
te soluble en acetona.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 467
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Yodato de potasio botar em orden alfabtico
CAS [7758-05-6]
Frmula y masa molecular KIO3 214,00
Descripcin Cristales blancos, inodoros, o polvo crista-
lino.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
560 C, con descomposicin parcial.
Solubilidad Soluble en agua, insoluble en etanol.
Categora Agente oxidante.
14
Yoduro de mercurio(II)
CAS [7774-29-0]
Sinonimia Bi-yoduro de mercurio, yoduro de mercurio
rojo.
Frmula y masa molecular HgI2 454,40
Descripcin Polvo cristalino, rojo escarlata, denso, ino-
doro y casi inspido.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 259 C.
Solubilidad Poco soluble en agua, ligeramente soluble
en acetona y en etanol, soluble en solucin de yoduro de
potasio en exceso.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Categora Veneno!
Yoduro de potasio
CAS [7681-11-0]
Frmula y masa molecular KI 166,00
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales incoloros, o polvo cristalino blan-
co, inodoro, de sabor salado y amargo. Levemente deli-
cuescente.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 680 C.
Solubilidad Muy soluble en agua, fcilmente soluble en
glicerol, soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz y humedad.
Yoduro de potasio aproximadamente M
Usar yoduro de potasio SR.
Yoduro de potasio SR
Especificacin Contiene 16,5 g de yoduro de potasio en
agua a 100 ml.
Conservacin En recipientes opacos bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
 468 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Yoduro de potasio mercrico alcalino SR
Sinonimia Reactivo de Nessler, solucin alcalina de te-
trayodomercurato (II) de potasio, yoduro de potasio- clo-
ruro de mercurio SR.
Preparacin Disolver 5 g de yoduro de potasio en 5 ml
de agua, aadir poco a poco solucin de cloruro de mercu-
rio (II) a 25% (p/v), controlndose la adicin, para que el
precipitado formado en el inicio no quede completamente
disuelto. Dejar enfriar. En seguida, aadir solucin de hi-
drxido de potasio a 50% (p/v), diluir con agua hasta com-
14 pletar el volumen de 100 ml y aadir 0,5 ml de la solucin
de cloruro de mercurio (II) a 25% (p/v). Dejar decantar y
usar el sobrenadante.
Yoduro de potasio mercrico alcalino SR1
Nombre alternativo Tetrayodomercurato de potasio al-
calino SR.
Preparacin Disolver en agua, 11 g de yoduro de potasio
y 15 g de yoduro de mercurio (II) y completar el volumen
para 100 ml con el mismo solvente. Inmediatamente antes
del uso, mezclar la solucin anterior con igual volumen de
hidrxido de sodio a 25% (p/v).
Yoduro de potasio mercurio SR
Sinonimia Reactivo de Mayer.
Solucin A Disolver 13,5 g de cloruro de mercurio (II) en
600 ml de agua.
Solucin B Disolver 50 g de yoduro de potasio en 100
ml de agua.
Preparacin Mezclar las Soluciones A y B y completar el
volumen para 1000 ml con agua.
Yoduro de sodio
CAS [7681-82-5]
Frmula y masa molecular NaI 149,89
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p),
calculado con relacin a la sustancia desecada.
Descripcin Polvo cristalino blanco o cristales incoloros,
higroscpicos, inodoros.
Solubilidad Muy soluble en agua y fcilmente soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes hermticos.
Yoduro de sodio en cido actico
Especificacin Contiene 10 g en cido actico glacial a
50 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Yoduro de tetrabutilamonio
CAS [311-28-4]
Sinonimia Yoduro de tetra-n-butilamonio.
Frmula y masa molecular C16H36IN 369,38
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Descripcin Cristales o polvo cristalino blanco o poco
colorido.
Solubilidad Poco soluble en agua y soluble en etanol.
Carmn de ndigo botar no alfabeto
CAS [860-22-0]
Frmula y masa molecular C16H8N2NaO8S2 466,36
Descripcin Grnulos azules con brillo de cobre, o polvo
azul o azul-violeta.
Solubilidad Ligeramente soluble en agua, prcticamente
soluble en etanol. Precipita en soluciones acuosas de clo-
ruro de sodio.
Carmn de ndigo SR botar no alfabeto
Preparacin En una mezcla de 10 ml de cido clorhdri-
co y 990 ml de cido sulfrico a 20% (p/v), aadir 0,2 g de
ndigo carmn.
Yodo
CAS [7553-56-2]
Frmula y masa molecular I2 253,80
Descripcin Escamas, placas o cristales pequeos, ne-
gro azulados o violeta grisceos; brillo metlico, de olor
irritante.
Caractersticas fsicas Sublima lentamente a temperatura
ambiente; calentado, libera vapores violetas. Temperatura
de fusin: 113,6 C
Solubilidad Muy poco soluble en agua, soluble en etanol
y poco soluble en glicerol.
Conservacin En recipientes hermticos de vidrio.
Seguridad Vapores corrosivos!
Yodo SR
Sinonimia Solucin acuosa de yodo yodada, reactivo
de lugol.
Especificacin Contiene 1 g de yodo y 2 g de yoduro de
potasio en agua a 100 ml.
Preparacin Disolver 1 g de yodo en 100 ml de agua,
aadir 2 g de yoduro de potasio, agitar, dejar en reposo por
algunas horas y filtrar en lana de vidrio.
Conservacin En recipientes de vidrio mbar bien ce-
rrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Yodo 0,05 M
Preparacin Disolver 20 g de yoduro de potasio en la
mnima cantidad de agua, aadir 13 g de yodo, en seguida,
aadir agua para producir 1000 ml.
Yodo 0,5 % (p/v) en cloroformo
Especificacin Contiene 0,5 g de yodo en cloroformo a
100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.

Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Txico.
Yodo 1 % (p/v) en etanol
Sinonimia Solucin alcohlica de yodo, solucin etan-
lica de yodo.
Especificacin Contiene 1% (p/v) de yodo en etanol.
Conservacin En recipientes de vidrio bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Inflamable.
Yodobismutato de potasio
Usar yodobismutato de potasio acuo actico.
Yodobismutato de potasio acuo-actico
Preparacin Mezclar 58 ml de agua, 1,21 g de subnitrato
de bismuto, 14 ml de cido actico glacial y 28 ml de solu-
cin de yoduro de potasio a 40% (p/v).
Yodobismutato de potasio diluido SR
Preparacin Disolver 100 g de cido tartrico en 500 ml
de agua. Separadamente, disolver 100 g de cido tartrico
en 400 ml de agua y aadir 8,5 g de subnitrato de bismuto.
Agitar por una hora, aadir 200 ml de solucin de yoduro
de potasio a 40% (p/v) y agitar bien. Dejar en reposo por
24 horas y filtrar. Mezclar la primera solucin con 50 ml
de la segunda.
Yoduro de potasio y subnitrato de bismuto SR
Sinonimia Reactivo de Dragendorff
Preparacin Mezclar volmenes iguales de solucin de
yoduro de potasio a 40% (p/v) en agua y de solucin prepa-
rada disolviendo 0,85 g de subnitrato de bismuto en mezcla
de 10 ml de cido actico glacial y 40 ml de agua. Diluir 1
volumen de esa mezcla con 2 volmenes de cido actico
glacial y 10 volmenes de agua inmediatamente antes del
uso.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Yodobismutato de potasio SR
Preparacin Disolver 16,6 g de cido tartrico en 67 ml
de agua y juntar 1,41 g de subnitrato de bismuto. Agitar
durante una hora, aadir 33 ml de solucin de yoduro de
potasio a 40% (p/v). Agitar durante una hora ms. Dejar en
reposo por 24 horas. Filtrar.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Yodobismutato de potasio SR1
Preparacin Disolver 10 g de cido tartrico en 40 ml
de agua y aadir 0,85 g de subnitrato de bismuto. Agitar
durante una hora. Aadir 20 ml de solucin de yoduro de
potasio a 40% (p/v) y homogeneizar. Dejar en reposo du-
rante 24 horas y filtrar.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 469
Yodobismutato de potasio SR2
Preparacin Suspender 1,7 g de subnitrato de bismuto
y 20 g de cido tartrico en 40 ml de agua. Aadir, a la
suspensin, 40 ml de solucin de yoduro de potasio a 40%
(p/v). Agitar por una hora y filtrar. Proteger la solucin de
la exposicin a la luz. Inmediatamente antes de usar, mez-
clar 5 ml de la solucin anterior con 15 ml de agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz.
14
Yodo sulfuroso SR
Preparacin Utilizar baln redondo de 3000 ml a 4000
ml, con tres tubuladuras, provisto de un agitador, un ter-
mmetro y un tubo de secado. El baln deber estar seco y
cerrado durante la preparacin. Mezclar 700 ml de piridina
anhidra con 700 ml de metoxietanol; juntar, con agitacin,
220 g de yodo, finamente pulverizado y seco anteriormen-
te, bajo pentxido de fsforo. La agitacin debe ser mante-
nida hasta completa disolucin (por cerca de 30 minutos.).
Enfriar a -10 C y, en agitacin, introducir rpidamente
190 g de dixido de azufre lquido. La temperatura no debe
pasar los 30 C. Enfriar. Dosificacin Determinar el ttulo
en el momento de la utilizacin, trabajando siempre al abri-
go de la humedad. Introducir en un matraz cerca de 20 ml
de metanol anhidro y proceder a Determinacin del agua
por el mtodo semi-micro (5.2.20.3), con la muestra, hasta
al punto final de la titulacin. Introducir en el matraz una
cantidad de agua exactamente medida y efectuar una nueva
titulacin. Calcular el equivalente en agua de la muestra,
en miligramos por mililitro. Cada mililitro de yodo sulfu-
roso SR corresponde, como mnimo, a 3,5 mg de H2O.
Conservacin En recipiente seco.
Irganox 1010
CAS [6683-19-8]
Frmula y masa molecular C73H108O12 1177,81
Descripcin Polvo blanco a ligeramente amarillento.
Inodoro, inspido.
Caractersticas fsicas Banda de fusin: 110 C a 125 C.
Cristaliza en dos formas: forma alfa, banda de fusin 120
C a 125 C; y forma beta, banda de fusin 110 C a 115
C La banda de fusin vara de acuerdo con la proporcin
de las formas cristalinas en la mezcla; esta proporcin no
influye en la eficiencia del producto.
Informacin adicional Estabilizador para sustancias or-
gnicas, tales como polietileno y polipropileno, protegin-
dolas contra degradacin trmino-oxidante.
Irganox 1076
CAS [2082-79-3]
Frmula y masa molecular C35H62O3- 530,97
Descripcin Polvo blanco a ligeramente amarillento.
Inodoro, estable a la luz.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 49 C a 54 C In-
formacin adicional Antioxidante para sustratos orgni-
 470 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
cos, tales como polietileno y polipropileno, protegindolos
de degradacin trmino-oxidante.
Irganox PS 800
CAS [123-28-4]
Frmula y masa molecular C30H58O4S 514,94
Descripcin Cristales blancos.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 38 C a 40 C In-
formacin adicional Estabilizador de poliolefinas, espe-
14 cialmente polipropileno y polietileno de alta densidad.
Isooctano
CAS [540-84-1]
Sinonimia 2,2,4-Trimetilpentano. Frmula y masa mole-
cular C8H18 114,23
Descripcin Lquido incoloro e inflamable.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): 0,691 a 0,696.
ndice de refraccin (20 C): 1,391 a 1,393.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua y soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes cerrados.
Isotiocianato de fluorescena
CAS [27072-45-3]
Frmula y masa molecular C21H11NO5S 389,38
Especificacin Mezcla de ismeros: 5-isotiocianato y
6-isotiocianato.
Descripcin Slido anaranjado, se descompone con ca-
lentamiento.
Lactosa
CAS [5989-81-1]
Sinonimia Lactosa monohidratada.
Frmula y masa molecular C12H22O11.H2O 360,31
Descripcin Polvo cristalino o grnulos blancos. Inodo-
ro, de suave sabor dulce.
Caractersticas fsicas Rotacin ptica especfica (20
C): +52,2 a + 52,8 (determinar en solucin de lactosa
anhidra a 0,1 g/ml). Temperatura de fusin: 202 C
Conservacin En recipientes bien cerrados. Informacin
adicional Adsorbe olores extraos.
Lactosa a 0,1% (p/v) en piridina
Especificacin Contiene 0,1% (p/v) en piridina.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Txico
Laurato de metilo
CAS [111-82-0]
Frmula y masa molecular C13H26O2 214,40
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% (p/v).
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Descripcin Lquido incoloro o amarillento.
Caractersticas fsicas Densidad: aproximadamente
0,870. ndice de refraccin (20 C): aproximadamente
1,431. Temperatura de fusin: aproximadamente 5 C
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Laurilsulfato de sodio
CAS [151-21-3]
Sinonimia Sulfato dodecil sdico, dodecilsulfato de so-
dio.
Frmula y masa molecular C12H25NaO4S 288,38
Especificacin Mezcla de, como mnimo, 85,0% (p/p),
de alquilsulfatos de sodio, que consiste principalmente de
laurilsulfato de sodio [CH3(CH2)10,H2SO4,Na]. El conteni-
do combinado de NaCl y Na2SO4 es, como mximo, de
8,0% (p/p).
Descripcin Polvo, escamas o cristales blancos o amari-
llo claro; olor suave y caracterstico.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, y parcialmente
soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Laurilsulfato de sodio SR
Descripcin Contiene 1 g en 100 ml de agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Lecitina
Especificacin Mezcla de diglicridos, principalmente
de los cidos esterico, palmtico y oleico, ligados al ster
fosfrico de la colina. Estructura y composicin variables
de acuerdo con la fuente de obtencin.
Descripcin Masa grasosa amarilla amarronada a ma-
rrn, de olor suave caracterstico.
Conservacin En recipientes bien cerrados. Etiquetado
Especificar origen.
Aleacin de nquel aluminio botar em alfabeto
Descripcin Polvo fino gris.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, soluble en
cidos minerales con formacin de sal.
Linalol
CAS [78-70-6]
Frmula y masa molecular C10H18O 154,25
Descripcin Lquido. Mezcla de dos estereoismeros (li-
careol y coriandrol).
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,860.
Temperatura de ebullicin: cerca de 200 C. ndice de re-
fraccin (20 C): cerca de 1,462.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua.

Litio
CAS [7439-93-2]
Elemento y masa atmica Li 6,94
Solubilidad Reacciona violentamente con el agua. Solu-
ble en metanol, formando metxido de litio. Prcticamente
insoluble en ter de petrleo.
Litio SRA 2 mg/ml
Especificacin Contiene 1,064 g de carbonato de litio en
5 ml de cido clorhdrico. Completar con agua a 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados, inertes (tipo
polietileno).
Macrogol 300
CAS [25322-68-3]
Sinonimia PEG 300, polietilenglicol 300. Frmula y
masa molecular H(OCH2CH2)nOH Masa molecular no
inferior a 95% del valor nominal rotulado. Presenta el n-
mero medio de grupos oxietileno: n = 6 o 7.
Especificacin Mezcla de productos de policondensacin
de xido de etileno y agua.
Descripcin Lquido viscoso, lmpido, incoloro o casi, de
olor suave y caracterstico, higroscpico.
Caractersticas fsicas Densidad: aproximadamente
1,125. ndice de refraccin (20 C): aproximadamente
1,465. Viscosidad: aproximadamente 80 cP.
Conservacin En recipientes hermticos. Etiquetado
Debe contener la masa molecular promedio.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Macrogol 1000
CAS [25322-68-3]
Sinonimia PEG 1000, polietilenglicol 1000. Frmula y
masa molecular H(OCH2CH2)nOH Masa molecular no
inferior a 95% del valor nominal rotulado.
Descripcin Slido blanco o casi blanco con apariencia
de cera. Higroscpico.
Caractersticas fsicas Densidad: aproximadamente
1,080. Banda de congelamiento: entre 35 C y 40 C.
Solubilidad Muy soluble en agua, fcilmente soluble en
etanol y en cloruro de metileno. Prcticamente insoluble en
aceites grasos y en aceites minerales.
Conservacin En recipientes hermticos. Etiquetado
Debe contener la masa molecular promedio.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Magnesio SRA 1 mg/ml
Especificacin Contiene 9 g de cloruro de magnesio en
agua a 500 ml.
Estandarizacin En 25 ml de esta solucin, aadir 25 ml
de agua, 10 ml de tampn cloruro de amonaco pH 10,7 y
0,1 g del indicador negro de eriocromo T. Titular con ede-
tato disdico 0,05 M SV Cada ml del titulante corresponde
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 471
a 0,001215 g de Mg. Para uso diluir a la concentracin de
1 mg/ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados, inertes (tipo
polietileno).
Magneson
CAS [74-39-5]
Frmula y masa molecular C12H9N3O4 259,22
Descripcin Polvo castao-rojizo.
14
Categora Indicador para magnesio y molibdeno.
Melamina
CAS [108-78-1]
Frmula y masa molecular C3H6N6 126,12
Descripcin Polvo amorfo, blanco o casi blanco.
Solubilidad Muy poco soluble en agua y en etanol.
2-Mercaptoetanol
CAS [60-24-2]
Frmula y masa molecular C2H6OS 78,14
Descripcin Lquido lmpido e incoloro.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 1,116.
Temperatura de ebullicin: cerca de 157 C.
Miscibilidad Miscible en agua.
Mercurio
CAS [7439-97-6]
Elemento y masa atmica Hg 200,59
Especificacin Metal lquido, mvil, denso, plateado, de
superficie espejada.
Caractersticas fsicas Densidad: aproximadamente 13,5.
Temperatura de ebullicin: aproximadamente 357 C.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Veneno! Voltil a la temperatura ambiente.
Mercurio SRA 1 mg/ml
Especificacin Contiene 1,080 g de xido de mercrico
disuelto en el menor volumen posible de cido clorhdrico
2 M. Completar con agua a 1000 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados, inertes (tipo
polietileno).
Metabisulfito sdico
CAS [7681-57-4]
Sinonimia Disulfito de sodio, pirosulfito de sodio. Fr-
mula y masa molecular Na2S2O5 190,10
Especificacin Contiene, como mnimo, 95% (p/p). Con-
tiene cantidad de metabisulfito sdico equivalente a, como
mnimo, 65,0% y, como mximo, 67,4% de SO2.
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blanco
o blanco-crema, de olor sulfuroso y de sabor cido y salino.
 472 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y poco soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados, bien llenos.
Almacenamiento Proteger del calor excesivo, del aire y
de la humedad.
Estabilidad Oxida lentamente a sulfato, por exposicin
al aire y, a la humedad, con desintegracin de los cristales.
Metanol
14 CAS [67-56-1]
Sinonimia Alcohol metlico.
Frmula y masa molecular CH4O 32,04
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,5% (p/v).
Descripcin Lquido lmpido, incoloro, inflamable, de
olor caracterstico.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: 64 C
a 65 C. Densidad: 0,790 a 0,793. ndice de refraccin (20
C): 1,328 a 1,330.
Conservacin En recipientes hermticos.
Seguridad Txico. Inflamable.
Metenamina
CAS [100-97-0]
Sinonimia Hexametilentetramina.
Frmula y masa molecular C6H12N4 140,19
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p),
despus de desecacin bajo pentxido de fsforo durante
4 horas.
Descripcin Polvo cristalino incoloro.
Caractersticas fsicas Sublima sin fundir y con parcial
descomposicin a aproximadamente 263 C. El pH de la
solucin a 0,2 M: 8,4.
Solubilidad Muy soluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Categora Antisptico urinario.
Metilcelulosa 450
CAS [9004-67-5]
Especificacin Celulosa parcialmente O-metilada con
viscosidad de 450 mPa/segundo.
Descripcin Grnulo o polvo blanco, o blanco amarillen-
to, o blanco grisceo. Higroscpico.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua caliente, en
acetona, etanol absoluto y tolueno.
4,4-Metilenobis-N,N-dimetilanilina
CAS [101-61-1]
Sinonimia Tetrametildiaminodifenilmetano.
Frmula y masa molecular C17H22N2 254,37
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Descripcin Cristales o folhetos blancos, o blanco- azu-
lados.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 90 C a 91 C.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, poco solu-
ble en etanol y soluble en cidos minerales.
Conservacin En recipientes cerrados.
Metilenbisacrilamida
CAS [110-26-9]
Sinonimia N,N-metilenbisacrilamida, metilenobispro-
penamida.
Frmula y masa molecular C7H10N2O2 154,19
Descripcin Polvo fino blanco o casi blanco.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: arriba de
300 C, con descomposicin.
Metil Etil Cetona
CAS [78-93-3]
Sinonimia Etil metil cetona; 2-butanona.
Frmula y masa molecular C4H8O- 72,11
Descripcin Lquido lmpido e incoloro. Olor caracters-
tico de acetona.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,81.
Temperatura de ebullicin: 79,6 C.
Conservacin En recipientes hermticos.
Seguridad Txico. Inflamable.
Metil Isobutil Cetona
CAS [108-10-1]
Sinonimia 4-Metil-2-pentanona, isopropilacetona.
Frmula y masa molecular C6H12O 100,16
Descripcin Lquido incoloro, de olor cetnico y alcan-
forado.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: en tor-
no de 115 C
Metilparabeno
CAS [99-76-3]
Nombre qumico ster metlico del cido 4-hidroxiben-
zoico Frmula y masa molecular C8H8O3 152,15
Descripcin Cristales blancos, poco solubles en agua,
fcilmente solubles en acetona, en etanol y en ter etlico.
Solubilidad Muy poco soluble en agua y fcilmente solu-
ble en etanol y en metanol.
Categora Conservante.
4-Metilpentan-2-ol
CAS [108-11-2]
Frmula y masa molecular C6H14O 102,17
Descripcin Lquido incoloro, lmpido y voltil.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 473

Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,802. Conservacin En recipientes bien cerrados.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,411. Temperatura
Seguridad Venenoso! Usar en ambientes con ventilacin
de ebullicin: cerca de 132 C.
adecuada.
3-Metil-2-pentanona
Miristato de metilo
CAS [565-61-7]
CAS [124-10-7]
Frmula y masa molecular C6H12O 100,16
Frmula y masa molecular C15H30O2 242,40
Descripcin Lquido incoloro e inflamable.
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% (p/v).
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: cerca
Descripcin Lquido incoloro o levemente amarillento.
de 118 C. Densidad (20 C): cerca de 0,815. ndice de
Refraccin (20 C): cerca de 1,400.
Conservacin En recipientes cerrados.
Caractersticas fsicas Densidad: aproximadamente
0,868. ndice de refraccin (20 C): aproximadamente
14
1,437. Temperatura de fusin: aproximadamente 20 C.
Metoxiazobenceno Miscibilidad Miscible en etanol y ter de petrleo.
CAS [2396-60-3] Conservacin En recipientes bien cerrados.
Frmula y masa molecular C13H12N2O 212,3
Mezcla de negro de eriocromo T
Descripcin Lminas anaranjadas.
Preparacin Mezclar 0,2 partes de negro de eriocromo T
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, soluble en con 100 partes de cloruro de sodio.
etanol, en ter de petrleo y otros solventes orgnicos. Cro-
matografa en camada delgada Aplicar, en placa de gel Conservacin En recipientes bien cerrados.
de slice G, solucin de 5 mg de metoxiazobenceno en ben- Categora Indicador para calcio y magnesio.
ceno y desarrollar cromatograma con el mismo solvente.
Aparece una nica mancha con Rf en torno de 0,6. Mezcla reductora

Metoxiazobenceno SR Preparacin Pulverizar las sustancias, aadidas en el si-

guiente orden, para obtener una mezcla homognea: 20 mg
Especificacin Solucin a 0,2% (p/v) en mezcla de 1 vo- de bromuro de potasio, 0,5 g de sulfato de hidracina y 5 g
lumen de benceno y 4 volmenes de ter de petrleo. de cloruro de sodio.

Metxido de potasio Mezcla sulfocrmica

CAS [865-33-8] Preparacin Disolver 50 g de dicromato de potasio en
Frmula y masa molecular CH3OK 70,13 Uso Prepa- cerca de 50 ml de agua y aadir 1000 ml de cido sulfrico.
racin extempornea.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Metxido de sodio
Molibdato de amonio
CAS [124-41-4]
CAS [12054-85-2]
Frmula y masa molecular CH3ONa 54,02
Frmula y masa molecular (NH4)6Mo7O24.4H2O
Descripcin Polvo blanco fino. Reacciona violentamente 1235,86
con el agua con formacin de calor. Sensible al aire. Pue-
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
de presentarse en la forma de: CH3ONa. 2CH3OH, polvo
blanco. En solucin puede ser preparado in situ. Descripcin Cristales incoloros hasta levemente amari-
llos o verde azulados, brillantes.
Solubilidad Soluble en etanol y en metanol.
Solubilidad Soluble en agua y prcticamente insoluble
Conservacin En recipientes hermticos.
en etanol.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Caractersticas fsicas Por el calentamiento pierde agua
y amonaco.
Metoxietanol
Conservacin En recipientes bien cerrados.
CAS [109-86-4]
Sinonimia 2-Metoxietanol, ter etilenglicol monoetil. Molibdato de amonio SR
Frmula y masa molecular C3H8O2 76,09
Especificacin Contiene 10 g de molibdato de amonio en
Descripcin Lquido incoloro y lmpido. agua para 100 ml.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,9663. Conservacin En recipientes bien cerrados.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,4028. Temperatura
de ebullicin: cerca de 125 C.
Miscibilidad Miscible en agua, en acetona y en etanol.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 474 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Molibdato de amonio SR1
Preparacin Disolver 6,5 g de cido molibdnico, fina-
mente molido, en mezcla de 14 ml de agua y 14,5 ml de
hidrxido de amonio. Enfriar la solucin y aadirla, lenta-
mente y con agitacin, a una mezcla enfriada de 32 ml de
cido ntrico y 40 ml de agua. Dejar en reposo por 48 horas
y filtrar a travs de crisol con fondo sinterizado de porosi-
dad fina. Esta solucin se deteriora bajo almacenamiento y
es inadecuada para el uso si, despus de adicin de 2 ml de
fosfato de sodio dibsico dodecahidratado SR para 5 ml de
14
solucin, un precipitado amarillo abundante no se forma
inmediatamente o despus de leve calentamiento. Si hu-
biese formacin de precipitado durante el almacenamiento,
emplear solamente la solucin sobrenadante lmpida.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Molibdato de amonio, solucin cida
Preparacin Diluir 25 ml de molibdato de amonio a 7%
(p/v) para 200 ml con agua. Aadir, lentamente, 25 ml de
cido sulfrico 3,75 M y homogeneizar.
Molibdato de amonio a 1% (p/v) en cido sulfrico M
Preparacin Pesar 1 g de molibdato de amonio R y di-
solver con 50 ml de solucin de cido sulfrico M. Diluir a
100 ml con el mismo solvente.
Molibdato de sodio
CAS [10102-40-6]
Frmula y masa molecular Na2MoO4.2H2O 241,95
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blanco
o casi blanco.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua.
Molibdovanadato SR
Sinonimia Reactivo molibdatovanadato, reactivo molib-
dovanadato.
Preparacin Usando sustancias finamente pulverizadas,
preparar suspensin de 4 g de molibdato de amonio y 0,1 g
de vanadato de amonio en 70 ml de agua. Juntar 20 ml de
cido ntrico. Completar el volumen de 100 ml con agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Morfolina
CAS [110-91-8]
Sinonimia Tetraidro-2H-1,4-oxazina; dietileno oximida
Frmula y masa molecular C4H9NO 87,12
Descripcin Lquido incoloro. Higroscpico.
Caracterstica fsica Temperatura de ebullicin: en torno
de 128 C.
Miscibilidad Miscible en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes hermticos.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Morina
CAS [6472-38-4]
Frmula y masa molecular C15H10O7.2H2O 338,27
Naftaleno
CAS [91-20-3]
Frmula y masa molecular C10H8 128,17
Descripcin Cristales blancos o casi blancos.
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin: cerca de
80 C. Banda de ebullicin: entre 217 C y 219 C.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, soluble en
etanol y fcilmente soluble en benceno y cloroformo.
Conservacin Recipiente bien cerrados.
1,3-Naftalendiol
CAS [132-86-5]
Frmula y masa molecular C10H8O2 160,17
Descripcin Polvo cristalino, generalmente, violeta-
amarronado.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 125
C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y en etanol.
2,7-Naftalendiol
CAS [582-17-2]
Frmula y masa molecular C10H8O2 160,17
Descripcin Polvo o slido cristalino amarillo a casi
blanco.
Caractersticas fsicas Banda de fusin: 187 C y 191 C.
Solubilidad Soluble en agua y en etanol.
Naftalendiol, reactivo
Preparacin Disolver 20 mg de 1,3-Naftalendiol en 10
ml de etanol conteniendo 0,2 ml de cido sulfrico.
1-Naftilamina
CAS [134-32-7]
Sinonimia -Naftilamina.
Frmula y masa molecular C10H9N 143,12
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blan-
co. Por la exposicin al aire y a la luz, se torna rojizo. Olor
desagradable.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 49 C a 51 C.
Solubilidad Poco soluble en agua y fcilmente soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz y del aire.
Seguridad Vapor y polvo nocivos.

1-Naftol
CAS [90-15-3]
Sinonimia Alfanaftol, -naftol.
Frmula y masa molecular C10H8O 144,17
Descripcin Cristales incoloros, o blancos o casi blan-
cos; o polvo cristalino blanco o casi blanco. Oscurece con
la exposicin a la luz.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 95
C.
Solubilidad Poco soluble en agua y fcilmente soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Naftol SR
Especificacin Contiene 20% (p/v) en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados. Estabilidad
Preparar para uso inmediato.
Almacenamiento Proteger de la luz.
2-Naftol
CAS [135-19-3]
Sinonimia Betanaftol, -naftol
Frmula y masa molecular C10H8O 144,17
Descripcin Polvo cristalino blanco a levemente rosa, de
olor fenlico suave.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 122 C
Solubilidad Muy poco soluble en agua y muy soluble en
etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
2-Naftol SR
Sinonimia Betanaftol SR, -naftol SR.
Especificacin Contiene 1 g en 100 ml de hidrxido de
sodio a 1% (p/v).
Conservacin En recipientes bien cerrados. Estabilidad
Preparar para uso inmediato.
Almacenamiento Proteger de la luz.
2-Naftol SR1
Sinonimia Betanaftol SR1, -naftol SR1 Preparacin
Disolver 5 g de 2-naftol, recientemente recristalizado, en
40 ml de hidrxido de sodio 2 M y completar para 100 ml
con agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados. Estabilidad
Preparar para uso inmediato.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 475
Naringina
CAS [10236-47-2]
Frmula y masa molecular C27H32O14 580,54
Descripcin Polvo cristalino blanco o casi blanco.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 171
C.
Solubilidad Poco soluble en agua, soluble en metanol y
en dimetilformamida.
Negro de almidn 10B
CAS [1064-48-8]
14
Frmula y masa molecular C22H14N6Na2O9S2 616,50
Descripcin Polvo castao oscuro a negro.
Solubilidad Ligeramente soluble en la agua, soluble en
etanol.
Negro de almidn 10B SR
Especificacin Solucin de negro de almidn 10B a 0,5%
(p/v) en una mezcla de cido actico y metanol (10:90).
Ninhidrina
CAS [485-47-2]
Sinonimia Ninhidrina.
Frmula y masa molecular C9H4O3.H2O 178,14
Especificacin Contiene, como mnimo, 96,0% (p/p).
Descripcin Polvo cristalino blanco a amarillo levemen-
te plido.
Solubilidad Soluble en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Ninhidrina etanlica actica SR
Preparacin Disolver 1 g de ninhidrina en 50 ml de eta-
nol y aadir 10 ml de cido actico glacial.
Ninhidrina SR
Sinonimia Ninhidrina SR.
Especificacin Contiene 0,2% (p/v) en mezcla de 1-buta-
nol y cido actico 2 M (95:5).
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Inflamable.
Nitrato crico amoniacal
CAS [16774-21-3]
Frmula y masa molecular (NH4)2[Ce(NO3)6] 548,22
Descripcin Polvo cristalino amarillo-anaranjado o cris-
tales anaranjados transparentes.
Solubilidad Soluble en agua.
 476 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Nitrato de aluminio, nonahidratado Frmula y masa molecular Pb(NO3)2 331,21

CAS [7784-27-2] Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Frmula y masa molecular Al(NO3)3.9H2O 375,14 Descripcin Cristales incoloros, translcidos o polvo
Descripcin Cristales delicuescentes. cristalino blanco.

Solubilidad Muy soluble en agua y etanol, muy poco so- Solubilidad Fcilmente soluble en agua.
luble en acetona. Conservacin En recipientes bien cerrados.
Conservacin En recipientes hermticamente cerrados Seguridad Veneno!

Nitrato de amonio

14
Nitrato de cobalto (II)
CAS [6484-52-2] CAS [10026-22-9]
Frmula y masa molecular NH4NO3- 80,04 Sinonimia Nitrato cobaltoso.
Descripcin Cristales incoloros, delicuescentes, o polvo Frmula y masa molecular CoN2O6.6H2O 291,03
blanco, de sabor salado.
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin:
Descripcin Cristales pequeos, rojos, higroscpicos.
aproximadamente 155 C, se descompone alrededor de
210 C en agua y xidos de nitrgeno. Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 55C.
Solubilidad Muy soluble en agua, fcilmente soluble en
metanol y soluble en etanol. Solubilidad Soluble en agua.

Conservacin En recipientes bien cerrados. Conservacin En recipientes bien cerrados.

Almacenamiento Proteger del calor.
Nitrato de amonio SR
Especificacin Contiene 5 g de nitrato de amonio en agua Nitrato de cobalto (II) SR
para 100 ml. Descripcin Contiene 1,0% (p/v) en metanol.

Nitrato de amonio, solucin saturada Conservacin En recipientes bien cerrados.

Especificacin Contiene 20,1 g en 10 ml de agua. Seguridad Inflamable. Txico.

Conservacin En recipientes bien cerrados. Nitrato de lantano

Nitrato de bario CAS [10277-43-7]

Frmula y masa molecular LaN3O9.6H2O 433,01
CAS [10022-31-8]
Frmula y masa molecular BaN2O6- 261,34 Descripcin Cristales incoloros, delicuescentes.

Descripcin Cristales o polvo cristalino. Solubilidad Fcilmente soluble en agua.

Caracterstica fsica Temperatura de fusin: Conservacin En recipientes bien cerrados.

aproximadamente 590 C. Nitrato de lantano SR

Solubilidad Fcilmente soluble en agua, muy poco solu- Especificacin Contiene 5% (p/v) en agua.
ble en etanol y en acetona.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Veneno! Nitrato de magnesio
CAS [13446-18-9]
Nitrato de cadmio
Frmula y masa molecular Mg (NO3)2.6H2O 256,41
CAS [10022-68-1]
Descripcin Cristales incoloros y delicuescentes.
Frmula y masa molecular Cd(NO3)2.4H2O 308,47
Solubilidad Muy soluble en agua y fcilmente soluble
Descripcin Cristales incoloros. Higroscpicos. en etanol.
Solubilidad Muy soluble en agua y soluble en acetona y Conservacin En recipientes bien cerrados.
en etanol.
Nitrato de mercurio (I)
Nitrato de plomo
CAS [14836-60-3]
CAS [10099-74-8]
Sinonimia Nitrato mercuroso.
Sinonimia Nitrato de plomo (II).
Frmula y masa molecular Hg2N2O6.2H2O 561,22

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Descripcin Cristales incoloros, normalmente con suave
olor de cido ntrico.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 70 C, con descomposicin.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Veneno!
Nitrato de mercurio(I) SR
Sinonimia Nitrato mercuroso SR.
Especificacin Contiene 15 g en mezcla de 90 ml de agua
y 10 ml de cido ntrico a 10% (v/v)
Conservacin En recipientes cerrados de vidrio mbar.
Estabilidad Aadir un pequeo glbulo de mercurio me-
tlico.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Nitrato de mercurio(II)
CAS [7783-34-8]
Sinonimia Nitrato mercrico.
Frmula y masa molecular HgN2O6.H2O 342,62
Descripcin Cristales incoloros o levemente coloridos.
Higroscpico.
Solubilidad Soluble en agua en presencia de pequea
cantidad de cido ntrico.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la luz y de la humedad.
Seguridad Veneno!
Nitrato de potasio
CAS [7757-79-1]
Frmula y masa molecular KNO3 101,10
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,5% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros y transparentes, o polvo
blanco, cristalino o granulado.
Solubilidad Muy soluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Nitrato de plata
CAS [7761-88-8]
Frmula y masa molecular AgNO3 169,87
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros transparentes, o polvo
cristalino blanco. Inodoro
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 212 C.
Solubilidad Muy soluble en agua y soluble en etanol.
Conservacin En recipientes no metlicos cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 477
Seguridad Custico. Veneno!
Nitrato de plata 0,1 M
Especificacin Contiene 17 g en agua para 1000 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Nitrato de plata SR
Especificacin Contiene 4,25 % (p/v) en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
14
Nitrato de plata SR1
Nombre alternativo Reactivo de nitrato de plata.
Preparacin Mezclar 3 ml de solucin concentrada de
amonaco y 40 ml de hidrxido de sodio M, aadir, gota a
gota, con agitacin, 8 ml de solucin de nitrato de plata a
20% (p/v). Diluir para 200 ml con agua.
Nitrato de sodio
CAS [7631-99-4]
Frmula y masa molecular NaNO3 84,99
Descripcin Cristales incoloros y transparentes o, grnu-
lo o polvo blanco o casi blanco. Delicuescente.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 308 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y poco soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Nitrato de sodio SR
Especificacin Contiene 10 g en agua para 100 ml. Esta-
bilidad Preparar inmediatamente antes del uso.
Nitrato de torio
CAS [13470-07-0]
Frmula y masa molecular ThN4O12.4H2O 552,12
Descripcin Cristales o polvo cristalino blanco, leve-
mente delicuescente.
Solubilidad Muy soluble en agua y etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Nitrato de zirconilo
CAS [14985-18-3] Sinonimia Nitrato de zirconio.
Frmula molecular aproximadamente, ZrO(NO3)2.xH2O
Descripcin Cristales, o polvo blanco, o casi blanco.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Nitrato de zirconilo SR
Preparacin Disolver 0,1 g de nitrato de zirconilo en una
mezcla de 60 ml de cido clorhdrico y 40 ml de agua.
 478 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Nitrato fenilmercrico
CAS [55-68-5]
Sinonimia Nitrato bsico de fenilmercurio y nitrato de
fenilmercurio.
Frmula y masa molecular C6H5HgNO3 339,70
Especificacin Consiste en mezcla de nitrato y hidrxido
de in fenilmercurio (C6H5Hg+). Contiene, como mnimo,
14 87,9% de in fenilmercrico (p/p) y, no menos, de 62,75%
de mercurio (Hg) (p/p).
Descripcin Polvo cristalino blanco, o escamas blancas
lustrosas. Inodoro.
Caracterstica fsica Banda de fusin: entre 175 C y 190
C, con descomposicin.
Solubilidad Muy soluble en agua y en etanol, poco solu-
ble en agua caliente. Disuelve en glicerol y aceites grasos.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Nitrazepam
CAS [146-22-5]
Frmula y masa molecular C15H11N3O3 281,27
Descripcin Polvo cristalino amarillo.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 226 C a 230 C.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, y poco so-
luble en etanol.
Conservacin En recipientes cerrados.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz.
Nitrito de sodio
CAS [7632-00-0]
Frmula y masa molecular NaNO2 69,00
Especificacin Contiene, como mnimo, 97,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros, o polvo granulado blan-
co, o levemente amarillento. Higroscpico.
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin: 271C. Se
descompone arriba de 320 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados. Estabilidad
Se oxida al aire muy lentamente a nitrato.
Nitrito de Sodio SR
Especificacin Contiene 10 g de nitrito de sodio en agua
para 100 ml.
Conservacin Preparar para consumo inmediato.
p-Nitroanilina
CAS [100-01-6]
Frmula y masa molecular C6H6N2O2- 138,12
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Descripcin Polvo cristalino claro.
Caracterstica fsica Banda de fusin: de 146 C a 148
C.
Solubilidad Insoluble en agua y soluble en etanol y ter
etlico. Forma una sal soluble en solucin acuosa con cido
mineral fuerte.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
p-Nitroanilina y nitrito de sodio SR
Solucin A Disolver 0,3 g de p-nitroanilina en 100 ml
de cido clorhdrico 10 M. Solucin B Disolver 2,5 g de
nitrito de sodio en 50 ml de agua.
Preparacin Mezclar 90 ml de la Solucin A y 10 ml de
la Solucin B en el momento del uso.
2-Nitrobenzaldehido
CAS [552-89-6]
Frmula y masa molecular C7H5NO3 151,12
Descripcin Cristales amarillos, de olor semejante al de
aceite de almendra.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
42 C.
Solubilidad Poco soluble en agua y fcilmente soluble
en etanol.
Nitrobenceno
CAS [98-95-3] Sinonimia Nitrobenzol.
Frmula y masa molecular C6H5NO2 123,11
Descripcin Lquido incoloro a amarillo plido, de olor
semejante al de aceite de almendra.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: apro-
ximadamente 211C. Densidad: aproximadamente 1,20.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua y miscible
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Veneno!
Nitrometano
CAS [75-52-5]
Frmula y masa molecular CH3NO2 61,04
Descripcin Lquido oleoso incoloro, de olor caracters-
tico.
Caracterstica fsica Temperatura de ebullicin: en torno
de 102 C.
Miscibilidad Poco miscible en agua y miscible en etanol.
Nitroprusiato de sodio
CAS [13755-38-9\
Sinonimia Pentacianonitrosilferrato (III) disdico dihi-
dratado, nitroprusiato de sodio, nitroferrocianuro de sodio.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 479

Frmula y masa molecular Na2[Fe(CN)5(NO)].2H2O Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 212 C.

297,95
Solubilidad Soluble en agua.
Descripcin Polvo o cristales transparentes, rojos oscu-
Conservacin En recipientes bien cerrados.
ros.
Seguridad Custico. Corrosivo. Veneno!
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y poco soluble
en etanol.
Oxalato de amonio SR
Nitroprusiato de sodio y piperazina SR Usar oxalato de amonio SI.
Especificacin Contiene 0,1 g de nitroprusiato de sodio y
Oxalato de potasio

14
0,25 g de piperazina en 5 ml de agua.
CAS [6487-48-5]
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Frmula y masa molecular K2C2O4.H2O 184,23, se an-
1-Octanosulfonato de sodio hidro 166,22

CAS [5324-84-5] Descripcin Cristales incoloros, inodoros, eflorescentes

al aire seco y caliente.
Frmula molecular y masa C8H17NaO3S 216,27
Caracterstica fsica Pierde su agua a aproximadamente
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% de C8H-
160 C
17
NaO3S.
Conservacin En recipientes hermticos.
Descripcin copos o polvos cristalinos blancos o casi
blancos. Almacenamiento Proteger de la humedad.
Seguridad Veneno!
Octilsulfato de sodio
CAS [142-31-4] Oxalato de sodio
Frmula y masa molecular C8H17NaO4S 232,27 CAS [62-76-0]
Descripcin Copos o polvo cristalino blanco o casi blan- Frmula y masa molecular Na2C2O4 134,00
co.
Descripcin Polvo cristalino blanco o casi blanco.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y soluble en me-
Solubilidad Soluble en agua y prcticamente insoluble
tanol.
en etanol.
Octoxinol 10
Oxalato de verde de malaquita
CAS [9002-93-1]
CAS [633-03-4]
Frmula y masa molecular (C2H4O)10C14H22O 647,00
Sinonimia Verde brillante
Descripcin Lquido viscoso, lmpido, amarillo claro.
Frmula y masa molecular C27H34N2O4S 428,64
Miscibilidad Miscible en agua, en acetona y en etanol.
Descripcin Cristales brillantes amarillos dorados.
Soluble en tolueno.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Conservacin En recipiente bien cerrado.
xido de aluminio
Aceite de oliva
CAS [1344-28-1]
CAS [8001-25-0]
Sinonimia Almina.
Especificacin Aceite fijo obtenido del fruto maduro de
Olea europaea L. Oleaceae. Frmula y masa molecular Al2O3 101,96
Descripcin Aceite amarillo plido o amarillo verdoso. Descripcin Polvo granulado fino, blanco.
Caracterstica fsica Densidad: 0,910 a 0,915. Caracterstica fsica El pH de la suspensin a 10,0%
(p/v): entre 9,0 y 10,0.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en etanol, miscible
en cloroformo, ter etlico y ter de petrleo. Conservacin En recipientes hermticos.

Oxalato de amonio xido de holmio

CAS [6009-70-7]
Frmula y masa molecular C2H8N2O4.H2O 142,11
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros transparentes o polvo
cristalino blanco. Inodoro.
CAS [12055-62-8]
Frmula y masa molecular Ho2O3 377,85
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,9% (p/p).
Descripcin Polvo amarillento.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 480 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Conservacin En recipientes bien cerrados.
xido de magnesio
CAS [1309-48-4]
Sinonimia xido de magnesio leve o pesado. Frmula y
masa molecular MgO 40,30
Especificacin Contiene, como mnimo, 95,0% (p/p).
Descripcin Polvo amorfo fino, blanco, inodoro, de sa-
bor alcalino suave.
14 Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del contacto con el aire y con
la humedad.
xido de plata
CAS [20667-12-3]
Frmula y masa molecular Ag2O 231,74
Descripcin Polvo gris oscuro.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y en etanol,
fcilmente soluble en cido ntrico diluido y en hidrxido
de amonio.
Conservacin En recipientes cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
xido mercrico
CAS [21908-53-2]
Sinonimia xido amarillo de mercurio, xido de mercu-
rio (II).
Frmula y masa molecular HgO 216,59
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,5% (p/p).
Descripcin Polvo amarillo anaranjado, denso, inodoro.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y en etanol.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Veneno!
Paladio SRA 1 mg/ml
Especificacin Contiene l,67 g de cloruro de paladio en
200 ml de cido clorhdrico a 50% (v/v). Calentar hasta
disolucin completa. Enfriar y completar con agua a 1000
ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados, inertes (tipo
polietileno).
Palmitato de metilo
CAS [112-39-0]
Frmula y masa molecular C17H34O2 270,50
Descripcin Masa cristalina blanca o amarilla.
Caractersticas fsicas Densidad (30 C): aproximada-
mente 0,86. Temperatura de fusin: cerca de 30 C.
Solubilidad Soluble en etanol y en ter de petrleo.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Papel de plata-manganeso
Preparacin A la mezcla de volmenes iguales de nitrato
de plata 0,1 M y de sulfato de manganeso (1,5% (p/v) adi-
cionarle, gota a gota, hidrxido de sodio 0,1 M hasta que
se forme precipitado persistente. Filtrar. A continuacin,
sumergir tiras de papel de filtro (por ejemplo, Whatman
No. 1) en la solucin, durante 15 minutos. Secar a tempe-
ratura ambiente, al abrigo de la luz y de vapores cidos o
alcalinos. El papel de plata-manganeso debe ser incoloro.
Ensayo de sensibilidad En probeta de aproximadamente
40 ml de capacidad introducir 1 ml de cloruro de amonio a
1% (p/v). Aadir 9 ml de agua y 1 g de xido de magnesio.
Cerrar inmediatamente el recipiente con tapa de polietile-
no, bajo la cual se coloca el papel de plata- manganeso.
Agitar la solucin, teniendo cuidado para que las partculas
de magnesio no entren en contacto con el papel. Mantener
la probeta a 50 C a 60 C durante 1 hora. Aparece color
gris en el papel reactivo.
Parafina lquida
Especificacin Mezcla purificada de hidrocarburos satu-
rados lquidos obtenidos del petrleo.
Descripcin Lquido oleoso incoloro y transparente.
Caractersticas fsicas Densidad relativa: 0,827 a 0,890.
Viscosidad: 110 mPa a 230 mPa.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua y poco so-
luble en etanol. Miscible en hidrocarburos.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
1-Pentanosulfonato de sodio, monohidratado
CAS [207605-40-1]
Frmula y masa molecular C5H11NaO3S.H2O 192,21
Descripcin Slido cristalino blanco o casi blanco.
Solubilidad Soluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Pentxido de fsforo
CAS [1314-56-3]
Sinonimia Anhdrido fosfrico.
Frmula y masa molecular P2O5 141,94
Descripcin Polvo blanco, amorfo, muy delicuescente.
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin: 340 C
Temperatura de sublimacin: 360 C.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Seguridad Irritante. Corrosivo a la piel, mucosa y ojos.
Pentxido de vanadio
CAS [1314-62-1]
Frmula y masa molecular V2O5 181,88

Especificacin Contiene, como mnimo, 99,5% (p/p).
Descripcin Polvo fino amarillo a amarillo anaranjado.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 690 C.
Solubilidad Poco soluble en agua y soluble en cidos mi-
nerales fuertes y soluciones hidrxido-alcalinas con forma-
cin de sales.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Pepsina purificada
Especificacin Derivada de la mucosa estomacal del
puerco, con actividad de 800 a 2500 unidades/mg de pro-
tena.
Descripcin Polvo cristalino o amorfo, blanco o poco
amarillo. Higroscopio.
Solubilidad Soluble en agua, prcticamente insoluble en
etanol. La solucin en agua puede quedar un poco opales-
cente con una pequea cantidad de cido.
Conservacin En recipiente cerrado.
Almacenamiento Protegido de la luz y en temperatura de
2 C a 8C.
Etiquetado Debe expresar la actividad de la pepsina.
Peptona
Especificacin Mezcla de productos de naturaleza poli-
peptdica oriundos de protenas animales (carne, casena).
El origen determina las caractersticas fsicas, composicin
y proceso de produccin.
Descripcin Polvo amarillo claro a marrn. Olor y sabor
caractersticos. Tenor mnimo en nitrgeno: 12,0% (p/p) de
casena y 14,2% (p/p) de carne.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Etiquetado Debe expresar origen y tenor en nitrgeno.
Perclorato de sodio
CAS [7791-07-3]
Nombre qumico Sal sdica monohidratada del cido per-
clrico
Frmula y masa molecular NaClO4.H2O 140,46
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros, delicuescentes.
Solubilidad Muy soluble en agua, soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Peryodato de potasio
CAS [7790-21-8]
Sinonimia Metaperyodato de potasio Frmula y masa
molecular KIO4 230,00
Descripcin Polvo blanco cristalino o cristales incoloros.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 582 C.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 481
Seguridad Altamente irritante a la piel, ojos y mucosas.
Peryodato frrico de potasio SR
Preparacin Disolver 1 g de peryodato de potasio en 5
ml de solucin de hidrxido de potasio 12% (p/v), reciente-
mente preparada. Aadir 20 ml de agua y 1,5 ml de cloruro
frrico SR. Diluir a 50 ml con solucin de hidrxido de
potasio 12% (p/v) recientemente preparada.
Peryodato de sodio
CAS [7790-28-5]
Sinonimia Metaperyodato de sodio. 14
Frmula y masa molecular NaIO4 213,89
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% de per-
yodato de sodio.
Descripcin Cristales blancos tetragonales.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin:
aproximadamente 300 C, con descomposicin.
Solubilidad Soluble en agua, cido actico, cido
ntrico y cido sulfrico.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento En locales ventilados.
Seguridad Oxidante fuerte.
Permanganato de potasio
CAS [7722-64-7]
Frmula y masa molecular KmnO4 158,03
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales violeta oscuros, con brillo metli-
co, inodoros, de sabor dulce, astringente.
Solubilidad Soluble en agua fra y fcilmente soluble en
agua hirviendo.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad La sustancia y sus soluciones presentan riesgo
de explosin, cuando en contacto con materiales oxidables.
Categora Oxidante enrgico.
Permanganato de potasio SR (aproximadamente 0,2
M)
Especificacin Contiene 3% (p/v) en agua. Estabilidad
Preparar para consumo inmediato.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Irritante. Custico.
Perxido de carbamida
CAS [124-43-6]
 482 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Sinonimia Perxido de hidrgeno y urea.
Frmula y masa molecular CH6N2O3 94,07
Descripcin Cristales o polvo cristalino blanco. Se des-
compone al contacto con el aire en urea, oxgeno y agua.
Solubilidad Soluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Informacin adicional Agente oxidante.
14
Perxido de hidrgeno concentrado
CAS [7722-84-1]
Sinonimia perhidrol.
Frmula y masa molecular H2O2 34,01
Especificacin Contiene, como mnimo, 29,0% (p/p) de
H2O2. Corresponde a aproximadamente 100 partes en vo-
lumen. Puede contener estabilizante.
Descripcin Lquido incoloro, irritante, de suave olor.
Caracterstica fsica Densidad: 1,11.
Conservacin En recipientes llenos parcialmente, provis-
tos de cierre de alivio.
Almacenamiento Proteger de la luz y del calor.
Seguridad Oxidante fuerte.
Perxido de hidrgeno, 30 volmenes, SR
Frmula y masa molecular H2O2 34,01.
Especificacin Contiene, como mnimo, 9,7% (p/v) y,
como mximo, 10,7% (p/v) de H2O2, correspondiendo a
aproximadamente 30 partes en volumen. Puede contener
estabilizante.
Descripcin Diluir el perxido de hidrgeno, concentra-
do.
Conservacin En recipientes cerrados. Estabilidad Evi-
tar perodos largos de almacenamiento.
Almacenamiento Proteger de la luz y del calor.
Perxido de hidrgeno a 3% (p/v)
Frmula y masa molecular H2O2 34,01
Especificacin Contiene, como mnimo, 2,5% (p/v) y,
como mximo, 3,5% (p/v) de H2O2, correspondiendo a
aproximadamente 10 partes en volumen. Puede contener
estabilizante.
Descripcin Lquido lmpido, incoloro.
Conservacin En recipientes cerrados. Evitar perodos
largos de almacenamiento.
Almacenamiento Proteger de la luz y del calor.
Perxido de hidrgeno metanlico
Preparacin En el da del uso, diluir 2 ml de perxido de
hidrgeno concentrado para 100 ml con metanol y almace-
nar en refrigerador. Inmediatamente antes del uso, diluir 2
ml de esta solucin para 100 ml con metanol.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Perxido de sodio
CAS [1313-60-6]
Frmula y masa molecular Na2O2 77,98
Descripcin Polvo granulado blanco-amarillento.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, formando hi-
drxido de sodio y perxido de hidrgeno, que se descom-
pone a gas oxgeno y agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados, protegidos
de compuestos orgnicos y sustancias oxidables.
Persulfato de amonio
CAS [7727-54-0]
Sinonimia -Peroxidisulfato de amonio. Frmula y masa
molecular H8N2O8S2 228,10
Especificacin Contiene, como mnimo, 95,0% (p/p).
Descripcin Cristales o polvo granulado blanco. Inodo-
ro. Estable durante meses cuando puro y seco; se descom-
pone en presencia de humedad.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la humedad, del calor y de
materia orgnica.
Informacin adicional Agente fuertemente oxidante.
Persulfato de potasio
CAS [7727-21-1]
Frmula y masa molecular K2S2O8 270,32
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blanco
o casi blanco.
Solubilidad Ligeramente soluble en agua, prcticamente
insoluble en etanol. En solucin acuosa se descompone a
la temperatura ambiente, y aumenta velocidad de descom-
posicin con el aumento de la temperatura.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento En local ventilado.
Persulfato de sodio
CAS [7775-27-1]
Frmula y masa molecular Na2O8S2 238,13
Descripcin Polvo cristalino blanco. Se descompone len-
tamente con humedad y por el calor.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la humedad y del calor.
Seguridad Irritante.
Picrato de sodio alcalino SR
Preparacin Mezclar 20 ml de cido pcrico a 1% (p/v)
con 10 ml de hidrxido de sodio a 5% (p/v) y diluir para
100 ml con agua.
Estabilidad Utilizar dentro de, como mximo, dos das.

Piperazina
CAS [110-85-0]
Frmula y masa molecular C3H10N2 86,14
Descripcin Grumos o copos blancos o casi blancos.
Olor amoniacal.
Solubilidad Soluble en agua y en etanol, insoluble en ter
etlico.
Piridina
CAS [110-86-1]
Frmula y masa molecular C5H5N 79,10
Descripcin Lquido incoloro, de olor caracterstico y
desagradable.
Caractersticas fsicas Banda de ebullicin: 115 C a 116
C Densidad (25 C): aproximadamente 0,980. ndice de
refraccin (20 C): 1,5092.
Miscibilidad Miscible en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Seguridad Inflamable. Txico.
Piridina anhidra
Especificacin Contiene, como mximo, 0,01% (p/p) de
agua.
Preparacin Secar la piridina con carbonato de sodio an-
hidro. Filtrar y destilar.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Seguridad Inflamable. Txico.
Pirofosfato de sodio
CAS [13472-36-1]
Frmula y masa molecular Na4P2O7.10H2O 265,90
Descripcin Cristales incoloros poco eflorescentes.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 79,5 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Pirogalol
CAS [87-66-1]
Frmula y masa molecular C6H6O3 126,11
Descripcin Cristales blancos o casi blancos. Tornndose
marrn en exposicin al aire y a la luz.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 131
C.
Solubilidad Muy soluble en agua y en etanol. Soluciones
acuosas se tornan marrones en exposicin al aire.
Conservacin En recipientes cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 483
Poliacrilamida
CAS [9003-05-8]
Sinonimia Polmero de acrilamida.
Frmula y masa molecular (C3H5NO)n; monmero
71,08.
Especificacin Polmero de varias formas, solubles e in-
solubles en agua, obtenidos por el calentamiento con va-
rios catalizadores de polimerizacin.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Altamente txico e irritante. Causa parlisis
del sistema nervioso central. Puede ser absorbido por la
14
piel ntegra.
Polisorbato 20
Ver monografa Polisorbato 20.
Polisorbato 80
Especificacin Mezcla de oleatos del sorbitol y sus an-
hdridos copolimerizados con aproximadamente 20 M de
xido de etileno para cada mol de sorbitol anhidro y an-
hdrido.
Descripcin Lquido claro, amarillento o amarillo oscu-
ro. Oleoso. Suave olor caracterstico.
Caractersticas fsicas Densidad: en torno de 1,08. Vis-
cosidad: aproximadamente 400 cP.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Categora Tensoactivo.
Potasio SRA 600 g/ml
Especificacin Contiene 1,144 g de cloruro de potasio en
agua a 1000 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados, inertes (tipo
polietileno).
Prednisolona
CAS [50-24-8]
Frmula y masa molecular C21H28O5 360,45
Especificacin Contiene, como mnimo, 97,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Polvo cristalino blanco o casi blanco. Hi-
groscpico. Presentado en la forma anhidra o conteniendo
una o media molcula de agua de hidratacin.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 240-241 C,
con descomposicin.
Solubilidad Muy poco soluble en agua, soluble en etanol
y en metanol, ligeramente soluble en acetona y poco solu-
ble en cloruro de metileno.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Categora Corticoide.
Prednisona
CAS [53-03-2]
 484 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Frmula y masa molecular C21H26O5 358,43.
Especificacin Contiene, como mnimo, 97,0% (p/p),
C21H26O5, calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Polvo cristalino blanco o casi blanco.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 233C, con descomposicin.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y poco solu-
ble en etanol y en cloruro de metileno.
14
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Categora Corticoide.
Negro brillante BN ordenar por alfabeto
CAS [2519-30-4]
Frmula y masa molecular C28H17N5Na4O14 S4 867,69
Descripcin Cristales finos, polvo azul violceo o negro
grisceo. Indicador de xido-reduccin. Forma oxidada:
azul violcea. Forma reducida: amarillo-marrn.
Caracterstica fsica A (1%, 1 cm) es mayor que 0,390
en 570 nm.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Propilenglicol
CAS [57-55-6]
Sinonimia 1,2-Propanodiol.
Frmula y masa molecular C3H8O2- 76,09
Descripcin Lquido incoloro, viscoso, higroscpico.
Caractersticas fsicas Densidad (25 C): 1,035 a 1,037.
Banda de ebullicin: 187 C a 189 C.
Miscibilidad Miscible en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Propilparabeno
CAS [94-13-3]
Nombre qumico ster proplico del cido 4-hidroxiben-
zoico
Frmula y masa molecular C10H12O3 180,20
Descripcin Cristales blancos.
Solubilidad Muy poco solubles en agua, fcilmente solu-
ble en etanol y en ter etlico.
Categora Conservante.
Prpura de ftalena
CAS [2411-89-4]
Sinonimia Metalftalena.
Frmula y masa molecular C32H32N2O12 636,61
Descripcin Polvo amarillo claro a marrn. Puede ser
encontrado en la forma de sal sdica: polvo amarillo claro
a rosa.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y soluble
en etanol. En la forma de sal sdica es soluble en agua y
prcticamente insoluble en etanol.
Ensayo de sensibilidad Disolver 10 mg en 1 ml de so-
lucin concentrada de amonaco y diluir para 100 ml con
agua. A 5 ml de la solucin, aadir 95 ml de agua, 4 ml
de solucin concentrada de amonaco, 50 ml de etanol y
0,1 ml de cloruro de bario 0,1 M SV. La solucin presenta
coloracin azul violeta. Aadir 0,15 ml de edetato disdico
0,1 M SV. La solucin quedar incolora.
Quinalizarina (CI 58500)
CAS [81-61-8]
Sinonimia Mordiente violeta 26
Frmula y masa molecular C14H8O6 272,20.
Descripcin Polvo rojo oscuro.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Quinidina
CAS [56-54-2]
Frmula y masa molecular C20H24N2O2 324,42
Descripcin Cristales blancos, o casi blancos.
Caractersticas fsicas Poder rotatorio especfico (20 C):
cerca de +260, determinado y una solucin a 1% (p/v) en
etanol. Temperatura de fusin: cerca de 172 C.
Solubilidad Muy poco soluble en agua, ligeramente solu-
ble en etanol y poco soluble en metanol.
Conservacin En recipientes cerrados.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz
Quinhidrona
CAS [106-34-3]
Frmula y masa molecular C12H10O4 218,21
Descripcin Cristales lustrosos o polvo cristalino verde
oscuro.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 170 C, pue-
de sublimar y descomponerse parcialmente.
Solubilidad Poco soluble en agua fra, soluble en
agua caliente, amonaco y ter etlico.
Conservacin En recipientes cerrados.
Quinina
CAS [130-95-0]
Frmula y masa molecular C20H24N2O2 324,42
Descripcin Polvo microcristalino blanco, o casi blanco.
Caractersticas fsicas Poder rotatorio especfico (20 C):
cerca de -167, determinado y una solucin a 1% (p/v) en
etanol. Temperatura de fusin: cerca de 175 C.
Solubilidad Muy poco soluble en agua, poco soluble en
agua hirviendo y muy soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.

Almacenamiento Proteger de la luz.
Raponticina
CAS [155-58-8]
Frmula y masa molecular C21H24O9 420,41
Descripcin Polvo cristalino gris amarillento.
Solubilidad Soluble en etanol y en metanol.
Reactivo de aluminn
Solucin A Disolver 250 g de acetato de amonio en 500
ml de agua bidestilada. Aadir 40 ml de cido actico gla-
cial, 0,5 g de aluminn disuelto en 50 ml de agua bidesti-
lada, 1 g de cido benzoico disuelto en 150 ml de alcohol
isoproplico y 225 ml de alcohol isoproplico. Completar
el volumen para 1000 ml con agua bidestilada. Solucin
B Disolver 5 g de gelatina en 125 ml de agua bidestilada
caliente y mezclar con 250 ml de agua bidestilada fra. Fil-
trar y completar a 500 ml con agua bidestilada.
Preparacin Mezclar con agitacin las Soluciones A y
B. La mezcla debe estar completamente lmpida cuando
est fra. Almacenar en frasco de polietileno, protegida de
la luz.
Reactivo de coloracin
Preparacin Mezclar 50 ml de cido actico glacial y 50
ml de cido sulfrico. Dejar en reposo de 2 horas antes del
uso. Estocar en heladera por, como mximo, 24 horas.
Reactivo de Erlich modificado
Preparacin Disolver 0,1 g de p-Dimetilaminobenzalde-
hdo en 1 ml de cido clorhdrico y diluir con etanol para
100 ml.
Reactivo de Folin-Denis
Preparacin A 75 ml de agua aadir 10 g de tungstato de
sodio, 2 g de cido fosfomolbdico y 5 ml de cido fosf-
rico. Mantener la mezcla en reflujo por 2 horas, enfriar y
diluir a 100 ml con agua. La solucin presenta coloracin
verdosa.
Reactivo de Hantzach
Preparacin Disolver 150 g de acetato de amonio en 500
ml de agua destilada conteniendo 3 ml de cido actico y 2
ml de acetilacetona. Completar el volumen para 1000 ml.
Conservacin En recipiente cerrado de vidrio mbar.
Reactivo de Jones
Preparacin A 40 ml de agua aadir 5,3 g de trixido de
cromo y 24 ml de mezcla de agua y cido sulfrico (1:1).
Reactivo de Marquis
Preparacin Mezclar 4 ml de solucin de formaldehdo
con 100 ml de cido sulfrico.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 485
Reactivo de xantidrol
Preparacin Disolver 0,125 g de xantidrol en 100 ml de
cido actico glacial. Aadir 1 ml de cido clorhdrico an-
tes de usar.
Reactivo fosfomolibdotngstico
Preparacin Disolver 100 g de tungstato de sodio y 25 g
molibdato de sodio en 700 ml de agua. Aadir 100 ml de
cido clorhdrico y 50 ml de cido fosfrico. Calentar la
mezcla bajo reflujo en aparatos de vidrio, durante 10 horas.
Aadir 150 g de sulfato de litio, 50 ml de agua y algunas
gotas de bromo. Hervir para retirar el exceso de bromo (por
cerca de 15 minutos), dejar enfriar y diluir para 1000 ml
14
con agua. Filtrar. El reactivo presenta coloracin amarilla.
Si la solucin presentase coloracin verdosa, no debe ser
utilizada, debiendo ser regenerada con la adicin de algu-
nas gotas de bromo al reactivo en ebullicin. Posterior-
mente hervir el reactivo para eliminar el exceso de bromo.
Almacenamiento Mantener en temperatura de 2 C a 8
C.
Reactivo yodoplatinado
Preparacin Mezclar volmenes iguales de cido cloro-
platnico a 0,3% (p/v) y de yoduro de potasio a 6% (p/v).
Reactivo sulfomolbdico
Preparacin Disolver, con calentamiento, 2,5 g de mo-
libdato de amonio en 20 ml de agua. Diluir 28 ml de cido
sulfrico en 50 ml de agua y enfriar. Mezclar las dos solu-
ciones y diluir para 100 ml con agua.
Reineckato de amonio
CAS [13573-16-5]
Sinonimia Tetratiocianatodiaminocromato de amonio.
Frmula y masa molecular C4H10CrN7S4.H2O 354,45
Descripcin Cristales rojos oscuros o polvo rojo crista-
lino.
Solubilidad Ligeramente soluble en agua helada, solu-
ble en agua caliente y etanol. Se descompone lentamente
y solucin.
Reineckato de amonio SR
Preparacin Agitar, constantemente, cerca de 0,5 g de
reineckato de amonio en 20 ml de agua durante una hora
y filtrar.
Estabilidad Usar en, como mximo, dos das.
Resazurina
CAS [550-82-3]
Sinonimia Diazorresorcinol
Frmula y masa molecular C12H7NO4 229,18.
Descripcin Cristales, o polvo cristalino rojo oscuro.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
 486 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Resorcinol
CAS [108-46-3]
Sinonimia Resorcina.
Frmula y masa molecular C6H6O2 110,11
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Descripcin Cristales, o polvo cristalino incoloro o ama-
rillo plido. Expuesto a la luz y al aire, adquiere coloracin
rosa.
14
Caracterstica fsica Banda de fusin: 109 C a 111 C.
Solubilidad Soluble en agua y etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz y del aire.
Ristocetina
CAS [1404-55-3]
Sinonimia Ristocetina A.
Frmula y masa molecular C94H108N8O44 2053,89
Descripcin Slido blanco. Encontrado, tambin, como
ristocetina sulfatada.
Rodamina B
CAS [81-88-9]
Sinonimia Tetraetilrodamina, Violeta bsico 10. Frmula
y masa molecular C28H31ClN2O3 479,01
Descripcin Cristales verdes, o polvo rojizo.
Solubilidad Muy soluble en agua y en etanol.
Conservacin Recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz y del
calor.
Seguridad Irritante
Rutina
CAS [153-18-4]
Frmula y masa molecular C27H30O16 610,52
Descripcin Cristales en forma de agujas amarillos pli-
dos. Oscurece en la presencia de la luz.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 210
C, con descomposicin.
Solubilidad Muy poco soluble en agua y soluble en pi-
ridina.
Conservacin En recipientes cerrados.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz.
Sacarosa
CAS [57-50-1]
Frmula y masa molecular C12H22O11 342,30
Especificacin Es obtenida de la Saccharum officinarum
Linn (Familia Gramineae), Beta vulgares Linn (Familia
Chenopodiaceae) y otras fuentes.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Descripcin Cristales blancos o incoloros; polvo crista-
lino o masa cristalina o bloques blancos. Inodoro. Sabor
dulce. Estable al aire. Finamente dividido es higroscpico
y absorve hasta 1 % de humedad. No contiene aditivos.
Caracterstica fsica Descomposicin: entre 160 C y
186 C.
Solubilidad Muy soluble en agua, poco soluble en etanol
y prcticamente insoluble en etanol anhidro.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Sacarosa 0,1% (p/v) en piridina
Especificacin Contiene 0,1 g de sacarosa en piridina a
100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Txico.
Safranina O
CAS [477-73-6]
Descripcin Polvo rojo oscuro. Consiste de mezcla de
cloruro de 3,7-diamino-2,8-dimetil-5-fenilfenaznio (C20H-
19
ClN4 350,85) y cloruro de 3,7-diamino-2,8- dime-
til-5,o-tolilfenaznio (C21H21ClN4 364,88). Indicador de
xido-reduccin. Forma oxidada: pH cido, violeta azula-
do; pH alcalino, parda Forma reducida: incoloro tanto en la
acidez cuanto en la alcalinidad.
Caracterstica fsica Absorcin mxima: 530-533 nm.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Salicilato de sodio
CAS [54-21-7]
Frmula y masa molecular C7H5NaO3 160,10
Descripcin Cristales incoloros pequeos o polvo crista-
lino blanco o copos brillantes.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 440 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y ligeramente
soluble en etanol.
Conservacin En recipientes cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Santonina
CAS [481-06-1]
Frmula y masa molecular C15H18O3 246,30
Descripcin Cristales incoloros. Si expuestos a la luz,
pueden adquirir coloracin amarilla.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 174 C a 176 C.
Solubilidad Muy poco soluble en agua, fcilmente solu-
ble en etanol caliente y ligeramente soluble en etanol.
Saponinas
CAS [8047-15-2]
Descripcin Polvo amarillo claro.

Solubilidad Soluble en agua, y bajo agitacin, forma es-
puma.
Conservacin En recipientes cerrados.
Slice, seca
CAS [7631-86-9]
Frmula y masa molecular SiO2 60,08
Especificacin cido silcico coloidal, polimerizado,
previamente deshidratado; contiene cloruro de cobalto
como indicador.
Descripcin Grnulos vtreos, amorfos, de granulometra
variable, con grnulos impregnados con indicador de capa-
cidad de adsorcin por el color azul a rosa.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Categora Desecante.
Gel de slice G
CAS [112926-00-8]
Sinonimia Gel de slice G.
Especificacin Contiene aproximadamente 13,0% (p/p)
de sulfato de calcio hemihidratado.
Descripcin Polvo fino blanco de granulometra variable
entre 10 y 40 m, homogneo.
Caracterstica fsica El pH de la suspensin a 10% (p/v)
en agua exenta de dixido de carbono, obtenida por agita-
cin durante 15 minutos; determinacin potenciomtrica:
aproximadamente 7,0.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Categora Soporte para cromatografa.
Gel de slice GF254
Sinonimia Gel de slice GF254.
Especificacin Contiene aproximadamente 13,0% (p/p)
de sulfato de calcio hemihidratado y aproximadamente
1,5% (p/p) de indicador de fluorescencia de intensidad
mxima a 254 nm.
Descripcin Polvo fino blanco de granulometra variable
entre 10 y 40 m, homogneo.
Caracterstica fsica Ver gel de slice G.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Categora Soporte para cromatografa.
Gel de slice H
Sinonimia Gel de slice H.
Descripcin Polvo fino blanco, de granulometra variable
entre 10 y 40 ^m, homogneo.
Caracterstica fsica Ver gel de slice G.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Categora Soporte para cromatografa.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 487
Gel de slice HF254
Sinonimia Gel de slice HF254.
Especificacin Contiene aproximadamente 1,5% (p/v) de
indicador de fluorescencia de intensidad mxima a 254 nm.
Descripcin Polvo fino blanco de granulometra variable
entre 10 y 40 m, homogneo.
Caracterstica fsica Ver gel de slice G.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Categora Soporte para cromatografa.
Slice kieselguhr
14
Descripcin Polvo blanco o amarillo claro.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua, soluciones
cidas diluidas y solventes orgnicos.
Slice kieselguhr G
Especificacin Slice kieselguhr tratada con cido clorh-
drico y calcinada, en que adicionase cerca de 15% (p/p) de
sulfato de calcio hemihidratado.
Descripcin Polvo fino blanco grisceo. Con tamao me-
dio de partculas de 10 m a 40 m.
Sodio SRA 200 ml
Especificacin Contiene 0,5084 g de cloruro de sodio en
agua a 1000 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados, inertes (tipo
polietileno).
Solucin de cloruro de estao y ninhidrina
Preparacin Disolver 0,2 g de ninhidrina en 4 ml de agua
caliente. Aadir 5 ml de cloruro de estao a 0,16% (p/v) y
dejar en reposo por 30 minutos. Filtrar y estocar en refri-
gerador. En el momento del uso, diluir 2,5 ml con 5 ml de
agua y 45 ml de alcohol isoproplico.
Solucin de Jeffrey
Preparacin Mezclar partes iguales de cido ntrico a
10% (p/v) y cido crmico a 10% (p/v).
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Solucin de Karl Fischer
Sinonimia Reactivo yodo sulfurado.
Especificacin Constituido de dos soluciones. Solucin
1: a mezcla de 70 ml de metanol y 35 ml de piridina, exenta
de agua, aadir, bajo refrigeracin y ausencia de humedad,
dixido de azufre seco hasta obtener aumento en peso de
9 g. Mezclar. Solucin 2: Contiene 12,6 g de yodo en me-
tanol a 100 ml.
Conservacin En recipientes hermticos.
Estabilidad Se descompone continuamente.
Almacenamiento Proteger de la humedad y de la luz.
Mantener bajo refrigeracin.
 488 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Seguridad Txico. Inflamable.
Informacin adicional Para determinacin del tenor de
agua.
Solucin de limpieza de cido crmico
Preparacin A 100 ml de cido sulfrico aadir, gradual-
mente y bajo agitacin constante, 3 g de dicromato de po-
tasio. Agitando hasta solubilizacin del sal y dejar enfriar
hasta 40 C y almacenar en recipiente de vidrio.
14 Solucin estndar etanlica de calcio (100 ppm Ca)
Preparacin Disolver 2,5 g de carbonato de calcio, pre-
viamente desecado, en 12 ml de cido actico 5 M diluir
con agua para 1000 ml. Diluir 1 volumen de esa solucin
en 10 volmenes de etanol, inmediatamente, antes del uso.
Solucin estndar de acetaldehdo (100 ppm C2H4O)
Preparacin Disolver 1 g de acetaldehdo en alcohol iso-
proplico y completar para 100 ml. Para uso diluir 1:100,
con el mismo solvente. Informacin Preparacin extem-
pornea.
Solucin estndar de amonio (1 ppm NH4)
Preparacin Disolver 0,4444 g de nitrato de amonio en
1000 ml de agua destilada, corresponde a 100 mg/ml de
amonio. Para uso diluir 1:100.
Solucin estndar de bario (10 ppm Ba)
Especificacin Contiene 1,779 g de BaCl2.2H2O en agua
1000 ml. Para uso, diluir 1:100.
Conservacin En recipientes bien cerrados e inertes (tipo
polietileno).
Solucin estndar de cadmio (0,1% Cd)
Preparacin Disolver cantidad de nitrato de cadmio con-
teniendo 0,1 g de cadmio en cantidad mnima de mezcla
de agua y cido clorhdrico (1:1) y diluir para 100 ml con
cido clorhdrico a 1% (v/v).
Solucin estndar de cadmio (5 ppm Cd)
Especificacin Contiene 0,229 g de sulfato de cadmio en
agua a 100 ml, corresponde a 1000 g/ml de cadmio. Para
uso, diluir 1:200.
Conservacin En recipientes bien cerrados e inertes (tipo
polietileno).
Solucin estndar de calcio (10 ppm Ca)
Preparacin Disolver 0,624 g de carbonato de calcio pre-
viamente desecado en agua destilada conteniendo 3 ml de
cido actico 5 M. Diluir para 250 ml con agua. Diluir 1
volumen de esta solucin en 100 volmenes de agua desti-
lada inmediatamente antes del uso.
Solucin estndar de plomo (0,1% Pb)
Preparacin Disolver 0,4 g de nitrato de plomo (II) en
agua y diluir para 250 ml con el mismo solvente.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Solucin estndar de cobre (10 ppm Cu)
Preparacin Disolver 392,9 mg de sulfato cprico penta-
hidratado en 100 ml de agua. Diluir 1 ml de esta solucin
con agua para 100 ml en el momento del uso.
Solucin estndar de cloruro (8 ppm Cl)
Especificacin Contiene 1,318 g de cloruro de sodio en
agua a 1000ml Para uso diluir 1:100.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Solucin estndar de cloruro (5 ppm Cl)
Especificacin Contiene 0,824 g de cloruro de sodio en
agua a 1000 ml. Para uso diluir 1:100.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Solucin estndar de ditizona
Preparacin Disolver 10 mg de ditizona en cloroformo y
completar el volumen para 1000 ml con cloroformo.
Conservacin Acondicionar en recipiente exento de plo-
mo, provisto de tapa de vidrio y, adecuadamente, embalado
para proteger de la luz.
Almacenamiento En refrigerador.
Solucin estndar de estao (5 ppm Sn)
Especificacin Contiene 1,225 g de acetato de estao he-
mihidratado en 25 ml de cido clorhdrico en agua a 1000
ml. Para uso, diluir 1:100 en cido clorhdrico 2,5% (p/v).
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Solucin estndar de magnesio (10 ppm Mg)
Preparacin Disolver 1,010 g de sulfato de magnesio
heptahidratado en agua y completar el volumen para 100
ml con el mismo solvente. Diluir 10 ml de esta solucin
para 1000 ml con agua.
Solucin estndar de nitrato (100 ppm NO3)
Preparacin Disolver 163,1 mg de nitrato de potasio en
100 ml de agua. Diluir 10 ml de esta solucin con agua
para 100 ml en el momento del uso.
Solucin estndar de nitrato (2 ppm NO3)
Preparacin Disolver 1,2903 g de nitrato de amonio en
1000 ml de agua, corresponde a 1000 mg/ml de nitrato.
Para uso, diluir 1:500.
Solucin estndar de plata (5 ppm Ag)
Preparacin Disolver 79 mg de nitrato de plata en 100 ml
de agua. Diluir 1 ml de esta solucin con agua para 100 ml
en el momento del uso.
Solucin estndar de selenio (100 ppm Se)
Preparacin Disolver 0,1 g de selenio en cido ntrico,
evaporar hasta sequedad, disolver el residuo en 2 ml de
agua y evaporar hasta sequedad. Repetir el procedimiento
por tres veces. Disolver el residuo con cido clorhdrico

2 M y completar el volumen para 1000 ml con el mismo
solvente.
Solucin estndar de sodio (200 ppm En la)
Preparacin Disolver 0,509 g de cloruro de sodio en 100
ml de agua. En el momento del uso, diluir 1:10.
Solucin estndar de sulfato (10 ppm SO4)
Preparacin Disolver 0,182 g de sulfato de potasio en
100 ml de agua. Diluir 1 ml de esta solucin en 100 ml de
agua en el momento del uso.
Solucin estndar de zinc (100 ppm Zn)
Preparacin Disolver 0,440 g de sulfato de zinc en agua
conteniendo 1 ml de cido actico 5 M y diluir para 100 ml
con agua. Inmediatamente antes del uso, diluir 1 volumen
para 10 volmenes con agua.
Solucin estndar de zinc (10 ppm Zn)
Preparacin Diluir 1 volumen de la solucin estndar de
zinc (100 ppm Zn) para 10 volmenes con agua inmediata-
mente antes del uso.
Solucin estndar marrn
Preparacin Hacer una solucin compuesta por 30 ml de
Solucin base de cloruro frrico (5.2.12), 30 ml de Solu-
cin base de cloruro cobaltoso (5.2.12), 24 ml de Solucin
base de sulfato cprico (5.2.12) y 16 ml de cido clorhdri-
co a 1% (p/v).
Solucin reductora
Preparacin Disolver 5 g de tetrahidroborato de sodio en
500 ml de hidrxido de sodio a 1% (p/v).
Subnitrato de bismuto
CAS [1304-85-4]
Sinonimia Oxinitrato de bismuto.
Frmula y masa molecular Bi5O(OH)9(NO3)4 1461,99.
Especificacin Es sal bsico que contiene, en el mni-
mo, el equivalente a 79,0% de trixido de bismuto (Bi2O3)
(p/p).
Descripcin Polvo blanco, denso, higroscpico, inodoro
y sin gusto. Presenta reaccin alcalina frente al papel de
tornasol.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Categora Anticido.
Sustituto de plaquetas
Preparacin A una cantidad entre 0,5 g y 1 g de fosfol-
pidos, aadir 20 ml de acetona, y agite la mezcla, frecuen-
temente, durante 2 horas. Centrifugue durante 2 minutos y
elimine el lquido sobrenadante. Seque el residuo con auxi-
lio de una trompa de agua, adicione 20 ml de cloroformo y
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 489
agite durante 2 horas. Filtre a presin reducida y suspenda
el residuo obtenido en 5 ml a 10 ml de solucin de cloruro
de sodio a 0,9% (p/v). Determinacin de la actividad del
Factor IX Prepare una diluicin en solucin de cloruro de
sodio a 0,9% (p/v), tal que la diferencia entre los tiempos
de coagulacin de las diluiciones sucesivas de la prepara-
cin de referencia sea cerca de 10 segundos.
Conservacin Las suspensiones diluidas pueden ser usa-
das durante las 6 semanas que siguen a la preparacin, si
conservadas a -30 C.
Sustrato de plasma
Preparacin Separar el plasma de la sangre humana, o
14
bovina recolectada en 1/9 de su volumen de solucin de
citrato de sodio a 3,8% (p/v), o en 2/7 de su volumen de
una solucin conteniendo 2% (p/v) de citrato cido de so-
dio y 2,5% (p/v) de glucosa. En el primer caso, el sustrato
es preparado en el da de la recoleccin de la sangre; en el
ltimo caso, el sustrato de plasma puede ser preparado en
los 2 das que siguen a la recoleccin.
Conservacin En tubos plsticos, en pequeas cantida-
des, a una temperatura igual o inferior a -20 C.
Sustrato de plasma1
Preparacin Utilizar equipo hidrfobo fabricado en ma-
terial plstico apropiado o vidrio siliconado para recolec-
cin y manipulacin de la sangre. De un nmero adecuado
(cinco por lo menos) de corderos, vivos o en el momento
del sacrificio, recolecte un volumen de sangre apropiado
de cada uno (es considerado como apropiado un volumen
de 285 ml de sangre recolectada sobre 15 ml de solucin
anticoagulante). La recoleccin est hecha por medio de
una aguja adaptada a una cnula con un largo suficiente
para alcanzar el fondo del recipiente colector. Descarte los
primeros mililitros y recolecte, nicamente, la sangre que
drena libremente. Mezcle la sangre con una cantidad su-
ficiente de solucin anticoagulante conteniendo 8,7 g de
citrato de sodio y 4 mg de aprotinina en 100 ml de agua
para obtener una proporcin final de 19 volmenes de san-
gre para 1 volumen de solucin anticoagulante. Durante
e inmediatamente despus de la recoleccin dele al reci-
piente un movimiento rotatorio a fin de que la mezcla se
haga sin formacin de espuma. Luego que termine la reco-
leccin cierre el baln y deje enfriar a 10-15 C. Despus
del enfriamiento rena el contenido de todos los frascos, a
excepcin de aquellos que presenten seales de evidente
hemlisis o coagulacin, y mantenga la sangre recolecta-
da a 10-15 C. Lo ms temprano posible y dentro de las
4 horas siguientes a la recoleccin, centrifugue la sangre
recolectada a 1000-2000 g a 10-15 C, durante 30 minutos.
Separe el lquido sobrenadante y centrifguelo a 5000 g,
durante 30 minutos. Si necesario, haga una centrifugacin
ms rpida, por ejemplo, a 20 000 g, durante 30 minutos,
para clarificar el plasma (no utilice procesos de filtracin).
Separe los lquidos sobrenadantes e, inmediatamente, mez-
cle, cuidadosamente, y distribuya el sustrato de plasma por
pequeos recipientes, que son cerrados al fin de la ope-
racin, en cantidades suficientes que permitan una titula-
cin completa de la heparina (por ejemplo, 10 ml a 30 ml).
Inmediatamente congele, rpidamente, a una temperatura
 490 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
inferior a -70 C (por ejemplo, sumergiendo los recipientes
en nitrgeno lquido) y conserve a una temperatura inferior
a -30 C. El plasma preparado en esas condiciones puede
ser utilizado como sustrato de plasma en la titulacin de la
heparina si en las condiciones de la titulacin se obtiene un
tiempo de coagulacin apropiado al mtodo de deteccin
utilizado y si se obtienen curvas dosis-respuesta/ log repro-
ducibles y con gran inclinacin. En el momento del uso,
descongele una cierta cantidad de sustrato de plasma en un
bao mara a 37 C, mezclando, lentamente, hasta licuefac-
cin completa. Una vez licuado, el plasma es mantenido a
14 10-20 C y utilizado inmediatamente. El sustrato de plas-
ma descongelado puede ser, ligeramente, centrifugado, si
necesario (no utilice procesos de filtracin).
Sustrato de plasma2
Preparacin Preparar a partir de la sangre humana que
tenga un tenor en Factor IX inferior a 1 % del tenor normal.
Recolecte la sangre en 1/9 de su volumen de una solucin
de citrato de sodio a 3,8% (p/v).
Conservacin En tubos plsticos, en pequeas cantida-
des, a una temperatura igual o inferior a -30 C.
Sustrato de plasma deficiente en Factor V
Especificacin Utilizar, de preferencia, un plasma cong-
nitamente deficiente o preparado del siguiente modo: sepa-
rar el plasma de la sangre humana que haya sido recolec-
tada en 1:10 de su volumen de una solucin de oxalato de
sodio a 1,34% (p/v). Incubar a 37 C durante 24-36 horas.
El plasma presenta un tiempo de coagulacin de 70-100
segundos. Si el tiempo de coagulacin es inferior a 70 se-
gundos, incube el plasma de nuevo durante 12-24 horas.
Conservacin: en pequeas cantidades, a temperatura
igual o inferior a -20 C.
Sudn III
CAS [85-86-9]
Frmula y masa molecular C22H16N4O 352,40
Descripcin Polvo rojo marrn.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Sudn III SR
Preparacin Disolver 0,5 g de Sudn III en 100 ml de
etanol a 80% (v/v), calentado a 60 C, enfriar y filtrar.
Sudn IV
CAS [85-83-6]
Frmula y masa molecular C24H20N4O 380,44
Descripcin Polvo marrn o marrn rojizo.
Caractersticas fsicas Banda de fusin: 181 C a 188 C.
Se descompone completamente a 260 C.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua. Poco so-
luble en acetona, etanol y benceno. Soluble en parafina y
fenol
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Sudn IV SR
Preparacin Disolver 2 g de Sudn IV en 100 ml de eta-
nol a 92% (v/v), calentado a 60 C, enfriar, filtrar y aadir
5 ml de glicerina.
Sulfamato de amonio
CAS [7773-06-0]
Frmula y masa molecular NH4SO3NH2 114,13
Descripcin Polvo cristalino blanco, o cristales incolo-
ros.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
131 C.
Solubilidad Muy soluble en agua y poco soluble en eta-
nol.
Conservacin En recipientes perfectamente cerrados.
Sulfanilamida
CAS [63-74-1]
Sinonimia 4-Aminobencenosulfonamida.
Frmula y masa molecular C6H8N2O2S 172,20
Descripcin Cristales o polvo fino blanco o blanco ama-
rillentos.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 165 C.
Solubilidad Soluble en glicerol y prcticamente insoluble
en cloroformo, ter etlico y benceno.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Categora Antibacteriano.
Sulfato crico
CAS [13590-82-4]
Sinonimia Disulfato crico.
Frmula y masa molecular Ce (SO4)2 332,24
Descripcin Cristal o polvo amarillo anaranjado.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin:
aproximadamente 350 C.
Conservacin Proteger de la luz, calor y humedad.
Seguridad Txico y oxidante.
Sulfato crico amoniacal
CAS [10378-47-9]
Frmula y masa molecular (NH4)4Ce(SO4)4.2H2O
632,58
Descripcin Cristales amarillo anaranjados.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
130 C.
Solubilidad Soluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Categora Estndar para volumetra de oxireduccin.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 491

Sulfato cprico, pentahidratado Conservacin En recipientes bien cerrados.

CAS [7758-99-8]
Sulfato de bario
Sinonimia Sulfato de cobre pentahidratado.
CAS [7727-43-7]
Frmula y masa molecular CuSO4.5H2O 249,68
Frmula y masa molecular BaSO4, 233,39
Especificacin Contiene como mnimo, 98,5% (p/p) cal-
Especificacin Contiene, como mnimo, 97,5% (p/p).
culado sobre la sustancia desecada a 250 C.
Descripcin Polvo blanco, fino y denso. Inodoro e ins-
Descripcin Cristales, polvo o grnulos azules. En con-
pido.
tacto con el aire efloresce lentamente.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y solventes

Caracterstica fsica Calentado a 250 C hasta peso cons-
tante, pierde entre 33,0 a 36,5% de su peso.
Solubilidad Muy soluble en agua y poco soluble en eta-
nol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del aire.
Seguridad Irritante.
Sulfato cprico SR
Especificacin Contiene 12,5 g sulfato cprico pentahi-
dratado en agua a 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Sulfato cprico amoniacal SR
Sinonimia Sulfato de cobre amoniacal SR y reactivo de
Schweitzer.
Preparacin Disolver 10 g de sulfato cprico en 100 ml
de agua, aadir cantidad suficiente de solucin de hidrxi-
do de sodio (1:5) para precipitar el hidrxido de cobre. Fil-
trar y recolectar el precipitado. Lavar con agua fra. Disol-
ver el precipitado, que debe ser mantenido hmedo durante
el proceso, en la menor cantidad de amonaco SR necesaria
para completar la solucin.
Sulfato de aluminio y potasio, dodecahidratado
CAS [7784-24-9]
Sinonimia Alumen de potasio
14
orgnicos, muy poco soluble en cidos y en soluciones hi-
drxido-alcalinas.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Categora Contraste radiolgico para el trato gastroin-
testinal.
Sulfato de cadmio
CAS [7790-84-3]
Frmula y masa molecular 3CdSO4.8H2O 769,49
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Descripcin Polvo cristalino, incoloro e inodoro.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Sulfato de calcio, hemihidratado
CAS [10034-76-1]
Frmula y masa molecular CaSO4.1/2H2O 145,14
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0 % (p/p),
calculado sobre base seca.
Descripcin Polvo blanco, fino; contiene aproximada-
mente 7,0% de agua.
Solubilidad Muy poco soluble en agua, prcticamente in-
soluble en etanol. Cuando mezclado con mitad de su masa
en agua, es rpidamente solidificado en una masa porosa
y dura.
Conservacin En recipientes bien cerrados.

Frmula y masa molecular AlK(SO4)2.12H2O 474,38 Sulfato de calcio SR

Descripcin Polvo granulado, o masa incoloro, trans-
parente.
Solubilidad Muy soluble en agua hirviendo, soluble en
glicerina, prcticamente insoluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados
Sulfato de amonio
CAS [7783-20-2]
Frmula y masa molecular (NH4)2SO4 132,13
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros, inodoros.
Caracterstica fsica Se descompone en temperaturas
arriba de 280 C.
Solubilidad Muy soluble en agua, prcticamente insolu-
ble en acetona y en etanol.
Preparacin Agitar 5 g de sulfato de calcio hemihidra-
tado con 100 ml de agua, durante una hora. Filtrar antes
del uso.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Sulfato de N,N-dimetil-p-fenilendiamina
CAS [536-47-0]
Sinonimia Sulfato de N,N-dimetil-1,4-bencenodiamina.
Frmula y masa molecular C8H12N2.H2SO4 234,28
Caracterstica fsica Banda de fusin: 200 C a 205 C,
con descomposicin.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Seguridad Txico.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 492 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Sulfato de dimetilo
CAS [77-78-1]
Sinonimia Dimetil sulfato, DMS.
Frmula y masa molecular (CH3)2SO4 126,13
Descripcin Lquido incoloro.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: cerca
de 188 C, con descomposicin. ndice de refraccin (20
C): 1,3874.
14
Miscibilidad Miscible en agua (con hidrlisis) y en ter
etlico y acetona.
Conservacin En recipientes cerrados.
Seguridad Corrosivo! Venenoso!
Sulfato de hidracina
CAS [10034-93-2]
Frmula y masa molecular H6N2O4S 130,12
Descripcin Cristales incoloros.
Solubilidad Ligeramente soluble en agua fra, soluble en
agua caliente (50 C) y fcilmente soluble en agua hirvien-
do. Prcticamente insoluble en etanol.
Sulfato de litio
CAS [10102-25-7]
Frmula y masa molecular LiSO4.H2O 127,95
Descripcin Cristales incoloros.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y prcticamente
insoluble en etanol.
Sulfato de magnesio, heptahidratado
CAS [10034-99-8]
Frmula y masa molecular MgSO4.7H2O 246,48
Descripcin Polvo blanco cristalino o cristales incoloros
brillantes, de sabor salino, soluble en agua, muy soluble en
agua hirviendo, prcticamente insoluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Sulfato de manganeso
CAS [10101-68-5]
Frmula y masa molecular MnSO4.4H2O 223,14
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% (p/p) de
MnSO4, calculado sobre la sustancia desecada a 450 C
500 C
Descripcin Cristales o polvo cristalino de color rosa.
Inodoro. Efloresce lentamente.
Caracterstica fsica Pierde agua a aproximadamente
450 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, muy soluble en
agua hirviendo y prcticamente insoluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados. Informacin
adicional El producto comercial normalmente es mezcla
de sulfato de manganeso tetra y pentahidratado.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Sulfato de 4-metilaminofenol
CAS [55-55-0]
Frmula y masa molecular C14H20N2O6S 344,38
Descripcin Cristales incoloros.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 260
C, con descomposicin.
Solubilidad Muy soluble en agua y poco soluble en eta-
nol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Sulfato de 4-metilaminofenol SR
Preparacin Disolver 0,35 g de sulfato de 4-metilamin-
ofenol en 50 ml de agua. Aadir 20 g de bisulfito de sodio
y mezclar. Diluir para 100 ml con agua.
Sulfato de potasio
CAS [7778-80-5]
Frmula y masa molecular K2SO4 174,25
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blan-
co, de sabor amargo.
Caractersticas fsicas Solucin acuosa con carcter neu-
tro. Temperatura de fusin: 1067 C.
Conservacin En recipientes cerrados.
Sulfato de protamina
CAS [9009-65-8]
Especificacin Consiste en mezcla de protenas simples,
obtenidas de esperma y testculos de especies adecuadas de
peces. Posee la propiedad de neutralizar la heparina.
Descripcin Polvo cristalino fino, blanco o amorfo leve-
mente colorido.
Conservacin En recipientes bien cerrados, bajo refri-
geracin.
Almacenamiento Proteger del calor.
Sulfato de sodio, anhidro
CAS [7757-82-6]
Masa y formula molecular Na2SO4 142.0
Especificacin Preparado a partir del Na2SO4.10H2O por
calentamiento a aproximadamente 100 C. Contiene, como
mnimo, 99,0% (p/p), calculado sobre la sustancia deseca-
da.
Descripcin Polvo fino, blanco, inodoro, de sabor salado
levemente amargo. Higroscpico.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin:
aproximadamente 800 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua.

Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Sulfato de sodio, decahidratado
CAS [7727-73-3]
Sinonimia Sal de Glauber.
Frmula y masa molecular Na2SO4.10H2O 322,19
Especificacin Contiene como mnimo 99,0 % (p/p) de
Na2SO4, calculado con relacin a la sustancia desecada.
Descripcin Cristales incoloros transparentes o polvo
cristalino blanco, eflorescente, inodoro, de sabor salado
levemente amargo.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 32,5 C. Se
disuelve en su propia agua de cristalizacin, a temperatura
de aproximadamente 33 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, prcticamente
insoluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados
Almacenamiento Proteger del calor.
Sulfato de tetrabutilamonio
CAS [32503-27-8]
Nombre qumico Sulfato de N,N,N-tributilo-1-butanam-
nio, hidrogenosulfato de tetrabutilamonio
Frmula y masa molecular C16H36N.HSO4 339,53
Descripcin Polvo cristalino blanco.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 169 C a 173 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y en metanol.
Sulfato de zinc, heptahidratado
CAS [7446-20-0]
Frmula y masa molecular ZnSO4.7H2O 287,58
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p) de
ZnSO4.7H2O, o como mnimo, 55,6 % (p/p) de ZnSO4.
Descripcin Polvo cristalino blanco o cristales incoloros
transparentes. Inodoro, de gusto astringente. Eflorescente.
Caracterstica fsica A temperatura de 280 C, se torna
anhidro.
Solubilidad Muy soluble en agua y prcticamente inso-
luble en etanol.
Conservacin En recipientes no metlicos bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Sulfato de zinc 0,1 M
Descripcin Contiene 28,75 g de sulfato de zinc heptahi-
dratado en agua a 1000 ml.
Conservacin En recipientes no metlicos bien cerrados.
Sulfato frrico
CAS [10028-22-5]
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 493
Sinonimia Persulfato frrico.
Frmula y masa molecular Fe2(SO4)3.xH2O
Especificacin El producto comercial contiene normal-
mente cerca de 20% (p/p) de agua.
Descripcin Polvo blanco a amarillo, muy higroscpico;
se descompone en presencia del aire.
Solubilidad Poco soluble en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz y del aire.
Sulfato frrico amoniacal
14
CAS [7783-83-7]
Frmula y masa molecular FeNH4(SO4)2.12H2O 482,18
Descripcin Cristales transparentes incoloros a violeta
plido. Inodoro. Eflorescente.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 37 C.
Solubilidad Muy soluble en agua y prcticamente inso-
luble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Sulfato frrico amoniacal cido SR
Preparacin Disolver 20 g de sulfato frrico amoniacal
en 70 ml de agua, aadir 10 ml de cido sulfrico 0,05 M y
completar el volumen con agua para 100 ml.
Sulfato frrico amoniacal SR
Especificacin Contiene 10 g en agua a 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Sulfato frrico amoniacal SR1
Preparacin Disolver 30 g de sulfato frrico amoniacal
en 40 ml de cido ntrico y completar el volumen de 100
ml con agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Sulfato frrico amoniacal SR2
Preparacin Disolver 0,2 g de sulfato frrico amoniacal
en 50 ml de agua, aadir 5 ml de cido ntrico y diluir a
100 ml con agua.
Sulfato frrico-ferricianuro de potasio SR
Preparacin Mezclar volmenes iguales de la solucin
de sulfato frrico a 0,5% (p/v) en cido sulfrico 0,5 M
y de la solucin de ferricianuro de potasio a 0,2% (p/v).
Estabilidad Preparar en el momento de uso.
Sulfato ferroso acidificado SR
Preparacin Disolver 0,45 g de sulfato ferroso heptahi-
dratado en 50 ml de cido clorhdrico 0,1 M y completar el
volumen para 100 ml con agua libre de dixido de carbono.
 494 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Sulfato ferroso amoniacal
CAS [7783-85-9]
Frmula y masa molecular Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O -392,14
Descripcin Polvo cristalino o cristales verde azulados
plidos. Se oxida lentamente al aire, tornndose eflores-
cente.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
100 C, con descomposicin.
Solubilidad Soluble en agua, prcticamente insoluble en
14
etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz y del aire.
Sulfato ferroso, heptahidratado
CAS [7782-63-0]
Sinonimia Sulfato de hierro, heptahidratado. Frmula y
masa molecular FeSO4.7H2O 278,01
Especificacin Contiene, como mnimo, 98,0% (p/p) de
FeSO4.7H2O.
Descripcin Cristales azules verdosos; o grnulos, o pol-
vo cristalino verde. Inodoro. Eflorescente. Se oxida por la
humedad y luminosidad a sulfato bsico de hierro (III) de
color marrn.
Caracterstica fsica A partir de la temperatura de 65 C,
se transforma en monohidratado.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, muy soluble en
agua hirviendo y prcticamente insoluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger del aire y de la humedad. In-
formacin adicional No usar cuando tenga color marrn.
Sulfato ferroso SR
Especificacin Contiene 8 g de sulfato ferroso heptahi-
dratado en agua fra, recientemente hervida, a 100 ml. Pre-
parar en el momento de uso.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz, del aire y del calor.
Sulfuro de amonio SR
Preparacin Saturar 60 ml de amonaco SR con sulfuro
de hidrgeno y juntar 40 ml de amonaco SR. Usar solu-
cin de preparado reciente.
Conservacin En recipiente pequeo, bien lleno y ce-
rrado.
Almacenamiento Proteger de la luz y del calor. Estabili-
dad Frente a precipitacin abundante de azufre, descartar
la solucin.
Sulfuro de hidrgeno
CAS [7783-06-4]
Sinonimia cido sulfhdrico
Frmula y masa molecular H2S 34,08
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Especificacin Producido por el tratamiento de sulfuro
ferroso (u otros sulfuros) con cidos sulfrico o clorhdrico
diluidos.
Descripcin Gas incoloro de olor caracterstico y sabor
dulce; ms denso del que el aire.
Caractersticas fsicas Densidad relativa al aire: 1,19.
Temperatura de ignicin: 260 C.
Seguridad Txico. Veneno. Inflamable.
Sulfuro de hidrgeno SR
Especificacin La solucin acuosa saturada a 20 C, con-
tiene en torno de 0,4 a 0,5% (p/v). Preparada por el paso de
H2S en agua fra.
Caracterstica fsica El pH de la solucin acuosa recin
preparada: 4,5.
Estabilidad Preparar para uso inmediato.
Seguridad Txico. Veneno. Inflamable.
Sulfuro de sodio
CAS [1313-84-4]
Frmula y masa molecular Na2S.9H2O 240,18
Descripcin Cristales incoloros delicuescentes, que se
Ponen amarillos por la exposicin al aire, o por la accin
de la luz. Olor semejante al del sulfuro de hidrgeno.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin:
aproximadamente 50 C.
Conservacin Recipiente bien cerrado, en fro.
Almacenamiento Proteger del aire, de la luz y del calor.
Sulfuro de sodio SR
Especificacin Contiene 1 g en agua a 10 ml. Estabilidad
Preparar para consumo inmediato.
Sulfuro de sodio SR1
Preparacin Disolver, con calentamiento, 12 g de sulfuro
de sodio en 45 ml de mezcla de agua y glicerol a 85% (v/v)
(10:29). Enfriar y diluir para baln volumtrico de 100 ml
con el mismo solvente. La solucin debe ser incolora. Pre-
parar para consumo inmediato.
Sulfito de sodio
CAS [7757-83-7]
Frmula y masa molecular Na2SO3 126,04
Descripcin Polvo blanco, o casi blanco, inodoro.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y muy poco so-
luble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Tanino
CAS [1401-55-4]
Sinonimia cido tnico.

Especificacin Obtenido de cascaras de diversas plantas,
consistiendo, especialmente, de mezcla de sustancias poli-
fenlicas.
Descripcin Polvo amarillo a marrn. Olor levemente
caracterstico y sabor astringente.
Solubilidad Muy soluble en agua, fcilmente soluble en
etanol y soluble en acetona.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Etiquetado La etiqueta debe indicar la fuente botnica.
Tartrato cido de epinefrina
CAS [51-42-3]
Sinonimia Bitartrato de epinefrina.
Frmula y masa molecular C13H19NO9 333,29
Especificacin Contiene, como mnimo, 97,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales, o polvo cristalino blanco, o gris
claro. Inodoro.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 150 C, con descomposicin.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y poco soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger del aire y de la luz. Estabilidad
Oscurece lentamente por la exposicin al aire y a la luz.
Categora Adrenrgico.
Tartrato cprico alcalino SR
Sinonimia Solucin de Fehling
Solucin A Disolver 34,6 g de sulfato cprico pentahidra-
tado en 500 ml de agua.
Solucin B Disolver 173 g de tartrato de sodio y potasio
y 50 g de hidrxido de sodio en 400 ml de agua y calentar
hasta ebullicin. Enfriar y completar el volumen para 500
ml con agua exenta de dixido de carbono. Preparacin
Mezclar volmenes iguales de las Soluciones A y B inme-
diatamente antes del uso.
Tartrato de antimonio y potasio
CAS [28300-74-5]
Sinonimia Sal de antimonio y potasio.
Frmula y masa molecular C8H4K2O12Sb2.3H2O 667,85.
Descripcin Cristales incoloros o polvo blanco.
Caracterstica fsica Banda de fusin: 332 C a 335 C.
Conservacin Recipientes bien cerrados.
Seguridad Txico.
Tartrato de sodio
CAS [6106-24-7]
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 495
Frmula y masa molecular C4H4O6Na2.2H2O 230,08
Especificacin Contiene 84,34% de C4H4O6Na2 y 15,66%
de H2O. Calentado a 150 C, pierde, como mnimo, 15,6%
y, como mximo, 15,7% de su peso.
Descripcin Cristales blancos o casi blancos.
Solubilidad Muy soluble en agua y prcticamente soluble
en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Tartrato de sodio y potasio
CAS [6381-59-5]
Sinonimia Sal de Rochelle o de Seignette, tartrato doble
de potasio y sodio, trtaro emtico.
Frmula y masa molecular C4H4KNaO6.4H2O 282,22;
anhidro 210,16
Especificacin Contienen, como mnimo, 99,0% (p/p), A
calculado en base seca de C4H4KNaO6.
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blan-
co, inodoro, de sabor salado. Eflorescente al aire caliente.
Solubilidad Muy soluble en agua y prcticamente inso-
luble en etanol.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger del calor.
Tartrato de sodio y potasio SR
Especificacin Contiene 20% (p/v).
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Tartrato ferroso SR
Preparacin Disolver 1 g de sulfato ferroso heptahidra-
tado, 2 g de tartrato de sodio y potasio y 0,1 g de bisulfito
de sodio en agua. Completar el volumen para 100 ml con
agua. Preparar en el momento del uso.
Tetraborato sdico
CAS [1303-96-4]
Sinonimia Borato sdico, borato de sodio, brax. Frmu-
la y masa molecular Na2B4O7.10H2O 381,37
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blan-
co, inodoro, de sabor custico. Eflorescente.
Solubilidad Soluble en agua, muy soluble en agua hir-
viendo y fcilmente soluble en glicerol.
Conservacin En recipientes bien cerrados; efloresce al
aire seco.
Almacenamiento Proteger del aire.
Tetracloruro de carbono
CAS [56-23-5]
Frmula y masa molecular CCl4 153,82
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
 496 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Descripcin Lquido incoloro, lmpido, denso y de olor
caracterstico.
Caractersticas fsicas Banda de ebullicin: 76 C a 77
C. Densidad: 1,588 a 1,590. ndice de refraccin (20 C):
1,4607.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua y miscible
en etanol.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la luz y del calor.
Seguridad Veneno (en las formas lquida y gaseosa)!
Informacin adicional No es inflamable, sin embargo li-
bera fosgeno (txico) en presencia de llama.
Tetradecano
A CAS [629-59-4]
Frmula y masa molecular C14H30 198,39
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,5% (p/p).
Descripcin Lquido lmpido e incoloro.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,76.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,429. Temperatura
de fusin: cerca de -5 C. Temperatura de ebullicin: cerca
de 252 C.
Conservacin En recipientes cerrados.
Tetrafenilborato de sodio
CAS [143-66-8]
Frmula y masa molecular NaB(C6H5)4 342,22
Descripcin Polvo o cristales blancos o casi blancos.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y en acetona.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Tetrahidroborato de sodio
CAS [16940-66-2]
Frmula y masa molecular NaBH4 37,83
Descripcin Cristales incoloros y higroscpicos.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, soluble en eta-
nol absoluto.
Almacenamiento En recipientes bien cerrados.
3,3-Tetrahidrocloruro de diaminobenzidina
CAS [7411-49-6]
Frmula y masa molecular C12H18Cl4N4 360,12
Descripcin Cristales blancos o amarillentos, ocasional-
mente prpura.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 280
C, con descomposicin.
Solubilidad Soluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados, bajo
refrigeracin.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Seguridad Irritante.
3,3-Tetrahidrocloruro de diaminobenzidina SR
Especificacin Contiene 1 g de 3,3-tetrahidrocloruro de
diaminobenzidina en 200 ml de agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados, bajo refri-
geracin.
Seguridad Irritante.
Tetrahidrofurano
CAS [109-99-9]
Frmula y masa molecular C4H8O 72,11
Especificacin Al producto le son aadidos estabilizantes
(p-cresol, hidroquinona) en la proporcin 0,05 % a 0,1 %
(p/v), para evitar la formacin excesiva de perxidos.
Descripcin Lquido incoloro. Olor intenso y semejante
al del ter etlico.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin: 65 C
a 66 C. Densidad: aproximadamente 0,889. ndice de re-
fraccin (20 C): 1,4070.
Miscibilidad Miscible en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados: pequeos y
repletos.
Almacenamiento Proteger del contacto con la luz.
Seguridad Irritante a la piel, ojos y mucosas.
1,1,3,3-Tetrametilbutilamina
CAS [107-45-9]
Frmula y masa molecular C8H19N 129,24
Descripcin Lquido incoloro y lmpido.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 0,805.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,424. Temperatura
de ebullicin: cerca de 140 C.
Tetrametiletilendiamina
CAS [110-18-9]
Sinonimia N,N,N,N-Tetrametiletilendiamina, TEMED.
Frmula y masa molecular C6H16N2. -116,21
Especificacin Calidad apropiada para electroforesis.
Descripcin Lquido incoloro.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): aproximada-
mente 1,418. Temperatura de ebullicin: aproximadamente
121 C.
Miscibilidad Miscible con agua, con etanol y con ter
etlico.
Tetraoxalato de potasio
CAS [6100-20-5]
Frmula y masa molecular C4H3KO8.2H2O 254,20
Descripcin Polvo cristalino blanco o cristales incoloros
o blancos.

Solubilidad Ligeramente soluble en agua y soluble en
agua hirviendo, poco soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Tetrxido de osmio
CAS [20816-12-0]
Frmula y masa molecular OsO4 254,20
Descripcin Masa cristalina amarilla, o agujas amarillas
claras, higroscpicas, sensibles a la luz.
Solubilidad Soluble en agua, etanol y ter etlico.
Conservacin En recipientes hermticos.
Seguridad Vapores venenosos.
Tetrxido de osmio SR
Especificacin Contiene 0,25 g de tetrxido de osmio en
cido sulfrico 0,05 M para hacer 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Timerosal
CAS [54-64-8]
Frmula y masa molecular C9H9HgNaO2S 404,81
Descripcin Polvo cristalino amarillo claro.
Solubilidad Muy soluble en agua y fcilmente soluble
en etanol.
Timidina
CAS [50-89-5]
Sinonimia 1-(2-Desoxi--D-ribofuranosil)-5-metiluraci-
la.
Frmula y masa molecular C10H14N2O5 242,23
Descripcin Cristales en forma de agujas, o polvo blan-
co.
Solubilidad Soluble en agua, en etanol a caliente y en
cido actico glacial.
Timina
CAS [65-71-4]
Sinonimia 5-Metil-2,4-(1H,3H)-pirimidinodiona.
Frmula y masa molecular C5H6N2O2 126,11
Descripcin Placas o cristales en forma de agujas pe-
queas.
Solubilidad Poco soluble en agua fra, soluble en agua
caliente. Disuelve en soluciones diluidas de hidrxido- al-
calinos.
Timol
CAS [89-83-8]
Sinonimia 5-Metil-2-(1-metiletil)fenol Frmula y masa
molecular C10H14O 150,22
Descripcin Cristales incoloros, de olor aromtico.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 497
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: en torno de
50 C.
Solubilidad Muy poco soluble en agua, muy soluble en
etanol, fcilmente soluble en aceites esenciales y en aceites
grasos, ligeramente soluble en glicerol. Disuelve en solu-
ciones hidrxido-alcalinas.
Tioacetamida
CAS [62-55-5]
Frmula y masa molecular C2H5NS -75,13.
Descripcin Cristales o polvo cristalino blanco, o casi
blanco. Suave olor de mercaptana.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: 113 C a
114 C.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados. A
Tioacetamida SR
Preparacin Mezclar 0,2 ml de la solucin de tioaceta-
mida a 4% (p/v) y 1 ml de la siguiente mezcla: 1,5 ml de
hidrxido de sodio M, 0,5 ml de agua y 2 ml de glicerol a
85% (p/v). Calentar en bao mara durante 20 segundos
Estabilidad Preparar en el momento de uso.
Tiocianato de amonio
CAS [1762-95-4]
Sinonimia Sulfocianuro de amonio.
Frmula y masa molecular NH4SCN 76,12
Descripcin Cristales incoloros y delicuescentes.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin:
aproximadamente 149 C.
Solubilidad Muy soluble en agua y soluble en etanol.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Tiocianato de amonio SR
Especificacin Contiene 8 g en agua a 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Tiocianato de mercurio
CAS [592-85-5]
Frmula y masa molecular Hg(SCN)2 316,76
Descripcin Polvo cristalino blanco o casi blanco.
Solubilidad Muy soluble en agua, poco soluble en etanol,
soluble en soluciones de cloruro de sodio.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
 498 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Tiocianato de mercurio SR
Preparacin Disolver 0,3 g de tiocianato de mercurio en
etanol. Completar el volumen para 100 ml con el mismo
solvente.
Conservacin En recipientes bien cerrados. Estabilidad
Limitada en una semana.
Tiocianato de potasio
CAS [333-20-0]
Sinonimia Sulfocianuro de potasio. Frmula y masa mo-
lecular KSCN -97,18
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p).
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 173 C.
A Solubilidad Muy soluble en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Puede causar erupciones cutneas!
Tioglicolato de sodio
CAS [367-51-1]
Frmula y masa molecular C2H3NaO2S 114,09
Especificacin Contiene, como mnimo, 95,0% (p/p).
Descripcin Polvo cristalino blanco, higroscpico, de
olor suave caracterstico. Se oxida en contacto con el aire.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua y en metanol,
poco soluble en etanol.
Conservacin En recipientes hermticos.
Almacenamiento Proteger de la luz y del aire.
Tionina (CI 52000)
CAS [135-59-1]
Frmula y masa molecular C12H10ClN3S 263,75
Descripcin Agujas verdes oscuras, con brillo.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua caliente.
Tionina SR
Preparacin Aadir 1 g de tionina a 2,5 g de fenol y com-
pletar el volumen de 100 ml con agua.
Conservacin En recipientes cerrados.
Tiosulfato de sodio
CAS [10102-17-7]
Sinonimia Hiposulfito de sodio R.
Frmula y masa molecular Na2S2O3.5H2O 248,17
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0% (p/p),
calculado sobre la sustancia desecada.
Descripcin Cristales incoloros, o polvo cristalino blan-
co, fcilmente eflorescentes, de sabor levemente amargo.
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin:
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
aproximadamente 48 C. Se disuelve en su propia agua de
cristalizacin a temperatura aproximadamente 49 C.
Solubilidad Muy soluble en agua, prcticamente insolu-
ble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Tiosulfato de sodio 0,1 M
Preparacin Disolver 2,5 g de tiosulfato de sodio y 0,02
g de carbonato de sodio en agua exenta de dixido de car-
bono a 100 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Tiourea
CAS [62-56-6]
Frmula y masa molecular CH4N2S 76,12
Descripcin Cristales, o polvo cristalino blanco, o casi
blanco.
Caracterstica fsica Banda de fusin: de 176 C a 178
C.
Solubilidad Soluble en agua y en etanol.
Conservacin En recipientes cerrados.
Torina
CAS [3688-92-4]
Sinonimia Naftarson. Frmula y masa molecular -576,30
Descripcin Polvo rojo.
Solubilidad Soluble en agua.
Tirosina
CAS [60-18-4]
Frmula y masa molecular C9H11NO3 181,19
Descripcin Cristales incoloros, o blancos, o casi blan-
cos, o polvo cristalino blanco, o casi blanco.
Solubilidad Poco soluble en agua, prcticamente inso-
luble en acetona y en etanol, soluble en cido clorhdrico
diluido y soluciones hidrxido-alcalinas.
p-Tolualdehdo
CAS [104-87-0]
Frmula y masa molecular C8H8O 120,15
Descripcin Lquido lmpido, incoloro o amarillento.
Caracterstica fsica ndice de refraccin (20 C): entre
1,544 y 1,546.
Tolueno
CAS [108-88-3]
Sinonimia Metilbenceno, toluol.
Frmula y masa molecular C7H8 92,14
Descripcin Lquido incoloro de olor caracterstico.
Caractersticas fsicas Temperatura de ebullicin:110 C

a 111 C. Densidad de aproximadamente 0,87. ndice de
refraccin (20 C): 1,4967.
Miscibilidad Muy poco soluble en agua, miscible en eta-
nol.
Seguridad Txico! Inflamable!
p-Toluidina
CAS [106-49-0]
Sinonimia 4-Metilanilina.
Frmula y masa molecular C7H9N 107,15
Descripcin Cristales o copos blancos o levemente ama-
rillentos.
Caractersticas fsicas Temperatura de fusin: cerca de
44 C. Densidad (20 C): 1,046.
Solubilidad Fcilmente soluble en etanol, metanol, ace-
tona y en cidos diluidos, y poco soluble en agua.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Torina SR
Preparacin Disolver 0,2 g de torina en agua para 100
ml.
Conservacin En recipiente cerrado.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Estabilidad Utilizar en como mximo una semana des-
pus de la preparacin.
Tricina
CAS [5704-04-1]
Frmula y masa molecular C6H13NO5 179,17
Especificacin Calidad apropiada para electroforesis.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: cerca de 183
C.
1,1,1-Tricloroetano
CAS [71-55-6]
Frmula y masa molecular C2H3Cl3 133,40
Descripcin Lquido no inflamable.
Caractersticas fsicas Densidad (20 C): cerca de 1,34.
Temperatura de ebullicin: cerca de 74 C.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua, soluble en
acetona y en metanol.
Tricloroetileno
CAS [79-01-6]
Sinonimia Tricloroeteno.
Frmula y masa molecular C2HCl3 131,39
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,5 % (p/p).
Descripcin Lquido incoloro, olor caracterstico.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 499
Caractersticas fsicas Densidad (20C): cerca de 1,46.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,477. Temperatura
de ebullicin: aproximadamente 87 C.
Miscibilidad Prcticamente insoluble en agua, soluble en
acetona y en metanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Txico.
Trietanolamina
CAS [102-71-6]
Sinonimia 2,2,2-nitrilotrietanol
Frmula y masa molecular C6H15NO3 149,19
Descripcin Lquido incoloro, viscoso, muy higroscpi-
co,
se torna marrn por la exposicin al aire.
Caracterstica fsica Densidad: aproximadamente 1,13.
A
Miscibilidad Miscible con agua, acetona, etanol y me-
tanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados al abrigo de
la luz.
Trietilamina
CAS [121-44-8]
Frmula y masa molecular C6H15N 101,20
Descripcin Lquido incoloro, de olor fuertemente amo-
niacal.
Caractersticas fsicas Densidad: cerca de 0,726. Banda
de ebullicin: 89 C a 90 C.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Seguridad Irritante. Inflamable.
Trifenilmetano
CAS [76-84-6]
Frmula y masa molecular C19H16O 260,33
Descripcin Cristales incoloros, o polvo blanco, o casi
blanco.
Solubilidad Prcticamente insoluble en agua y fcilmen-
te soluble en etanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados
Trifluoreto de boro
CAS [7637-07-2]
Frmula y masa molecular BF3 67,81
Descripcin Gas incoloro, de olor penetrante y sofocante.
Trifluoreto de boro, solucin metanlica
Especificacin Solucin comercial conteniendo cerca de
14% (p/v) de BF3 en metanol.
 500 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Trinitrofenol SR Sinonimia Factor III (coagulacin sangunea).

Usar cido pcrico SR1. Especificacin Preparado biolgico de origen animal,
obtenido por extraccin de determinados rganos: cerebro,
Trixido de arsnico pulmn.
CAS [1327-53-3] Descripcin Polvo o suspensin de color amarillenta, de
Sinonimia xido arsenioso. olor caracterstico.
Frmula y masa molecular As2O3 197,84 Caracterstica fsica En la presencia de concentraciones
apropiadas de iones calcio, presenta actividad tromboqui-
Descripcin Polvo cristalino blanco o transparente, o nasa en la coagulacin sangunea.
masa amorfa.
Conservacin En recipientes hermticos.
Solubilidad Poco soluble en agua y soluble en agua hir-
viendo. Etiquetado Especificar en la composicin: iones y agen-
tes antimicrobianos, sus concentraciones, as como origen,
Conservacin En recipientes bien cerrados. fecha de preparacin, actividad.
Seguridad Veneno! Almacenamiento Proteger del calor y humedad. Mante-

A
ner bajo refrigeracin.
Trixido de cromo
Categora Preparacin con actividad enzimtica. He-
CAS [1333-82-0] mosttico local.
Sinonimia Anhdrido crmico.
Frmula y masa molecular CrO3 99,99 Tromboplastina, reactivo

Descripcin Cristales o polvo granulado o escamas ma-
rrones rojizas, delicuescentes.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 197 C.
Solubilidad Muy soluble en agua.
Conservacin En recipientes de vidrio hermticos.
Almacenamiento Evitar proximidad con inflamables.
Seguridad Oxidante enrgico. Irritante.
Trombina bovina
CAS [9002-04-4]
Especificacin Preparado biolgico obtenido de plasma
bovino, conteniendo enzima que convierte fibringeno en
fibrina.
Preparacin Agitar 1,5 g de polvo de cerebro de buey,
seco con acetona, con 60 ml de agua a 50 C, durante 10 a
15 minutos. Centrifugar a 1500 rpm, durante 2 minutos y
decantar el lquido sobrenadante.
Conservacin El extracto, almacenado en temperaturas
menores que 0 C, conserva la actividad durante varios
das. Puede ser adicionado cresol, en la cantidad de 3 g/L,
como antimicrobiano.
Trometamina
CAS [77-86-1]
Frmula y masa molecular C4H11NO3 121,14
Sinonimia -Trometamol, tris(hidroximetil)aminometano.
Especificacin Contiene, como mnimo, 99,0%, calcula-
do sobre la sustancia desecada.

Descripcin Polvo blanco-amarillento. Descripcin Cristales o polvo cristalino blanco o casi

blanco.
Conservacin En recipientes cerrados.
Caractersticas fsicas Banda de fusin: 168 C a 172 C.
Almacenamiento En temperaturas abajo de 0 C. El pH de la solucin 0,1 M: 10,4.

Trombina humana Solubilidad Fcilmente soluble en agua, ligeramente so-

CAS [9002-04-4]
Especificacin Preparado biolgico obtenido de plasma
humano, por tcnicas de fraccionamiento apropiadas.
Descripcin Polvo amorfo de color crema.
Conservacin En recipientes bien cerrados, bajo refrige-
racin, especificando fecha de preparacin y potencia.
Almacenamiento Proteger de la luz, de la humedad y del
oxgeno.
Categora Enzima. Hemosttico local.
luble en etanol y muy poco soluble en acetato de etilo.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Tungstato de sodio
CAS [10213-10-2]
Frmula y masa molecular Na2WO4.2H2O 329,87
Descripcin Cristales incoloros o polvo cristalino blanco
o casi blanco.
Solubilidad Fcilmente soluble en agua, formando una
solucin lmpida, y prcticamente insoluble en etanol.

Tromboplastina Urea
CAS [9035-58-9] CAS [57-13-6]

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Sinonimia Carbamida.
Frmula y masa molecular (NH2)2CO 60,06
Descripcin Cristales o polvo blanco, olor fuerte.
Caracterstica fsica Temperatura de fusin: aproxima-
damente 132,7 C.
Solubilidad Muy soluble en agua, soluble en etanol y
prcticamente insoluble en cloruro de metileno.
Conservacin En recipientes bien cerrados, en locales
ventilados.
Seguridad Puede causar dao si aspirado o inhalado.
Vanadato de amonio
CAS [7803-55-6]
Frmula y masa molecular NH4VO3 116,98
Descripcin Polvo cristalino blanco o amarillo claro.
Solubilidad Poco soluble en agua.
Vanilina
CAS [121-33-5]
Frmula y masa molecular C8H8O3 152,15
Descripcin Cristales en forma de agujas, o polvo crista-
lino blanco, o amarillento.
Caracterstica fsica Banda de fusin: entre 81 C y 84
C.
Solubilidad Poco soluble en agua, fcilmente soluble en
etanol y metanol.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Vanilina SR
Preparacin Disolver 1 g de vanilina en etanol y comple-
tar el volumen para 100 ml con el mismo solvente. Aadir,
cuidadosamente, 2 ml de cido sulfrico y homogeneizar.
Utilizar la solucin en 48 horas.
Vanilina sulfrica SR
Preparacin Disolver 1 g de vanilina en 100 ml de me-
tanol. Aadir 4 ml de cido clorhdrico y 5 ml de cido
sulfrico.
Warfarina sdica
CAS [129-06-6]
Frmula y masa molecular C19H15NaO4 330,31
Especificacin Contiene, como mnimo, 97,0% (p/p),
calculado con relacin a la sustancia desecada.
Descripcin Polvo cristalino o amorfo, de sabor leve-
mente amargo.
Solubilidad Muy soluble en agua y en etanol, soluble en
acetona, muy soluble en cloruro de metileno.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Categora Anticoagulante.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 501
Verde de bromocresol SR
Solucin A Disolver 0,2 g de verde de bromocresol en 30
ml de agua y 6,5 ml de hidrxido de sodio 0,1 M. Solucin
B Disolver 38 g de fosfato de sodio monobsico y 2 g de
fosfato de sodio dibsico anhidro en agua y completar el
volumen para 1000 ml con el mismo solvente. Preparacin
Diluir la Solucin A para 500 ml utilizando la Solucin B
como diluyente y homogeneizar. Si necesario, ajustar el pH
en 4,6 0,1 con cido clorhdrico 0,1 M.
Rojo de fenol SR
Solucin A Disolver 33 mg de rojo de fenol en 1,5 ml de
hidrxido de sodio 2 M y diluir para 100 ml con agua.
Solucin B Disolver 25 mg de sulfato de amonio en 235
ml de agua. Aadir 105 ml de hidrxido de sodio 2 M y 135
ml de cido actico 2 M.
Preparacin Aadir 25 ml de la Solucin A en la Solu-
cin B.
A
Si necesario, ajustar el pH en 4,7.
Conservacin En recipientes pequeos y resistentes a
lcalis.
Vitexina
CAS [3681-93-4]
Frmula y masa molecular C21H20O10 448,41
Descripcin Polvo amarillo.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la exposicin a la luz.
Xantidrol
CAS [90-46-0]
Frmula y masa molecular C13H10O2 198,22
Especificacin Contiene, como mnimo, 90% de
C13H10O2.
Descripcin Polvo blanco o amarillo claro.
Solubilidad Muy soluble en agua, soluble en etanol y m
cido actico glacial.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Xileno
CAS [1330-20-7]
Sinonimia Xilol.
Frmula y masa molecular C8H10 106,17
Especificacin Mezcla de ismeros: o-, p- y m-xileno,
con el predominio de m-xileno.
Descripcin Lquido lmpido e incoloro.
Caractersticas fsicas Densidad (20C): cerca de 0,867.
ndice de refraccin (20 C): cerca de 1,497. Temperatura
de ebullicin: cerca de 138C.
Conservacin En recipientes hermticos.
Seguridad Txico. Inflamable.
 502 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Zinc, activado
Preparacin Cubrir una cantidad de zinc granulado con
solucin de cido cloroplatnico a 50 g/ml. Dejar en repo-
so durante 10 minutos. Despus de lavar, escurrir y secar
inmediatamente.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Zinc, granulado
CAS [7440-66-6]
Elemento y masa atmica Zn 65,38
Descripcin Metal lustroso blanco azulado. Estable al
aire seco. Se convierte en carbonato bsico cuando expues-
to a la humedad.
Caractersticas fsicas Se torna maleable entre 100 C
y 150 C. Quema en presencia del aire presentando llama
A verde azulada.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la humedad.
Seguridad Txico!
Zinc SRA 5 mg/ml
Especificacin Contiene 2,5 g de zinc granulado en 20
ml de cido clorhdrico 5 M. Completar con agua a 500 ml.
Conservacin En recipientes bien cerrados, inertes (tipo
polietileno).
14.3 SOLUCIONES
VOLUMTRICAS
Las soluciones volumtricas (SV) estn acompaadas de
mtodo de estandarizacin, a pesar de que puedan existir
otros que conduzcan al mismo grado de exactitud.
Los valores obtenidos en la estandarizacin son vlidos
para todos los usos farmacopeicos.
Los reactivos empleados deben poseer grado qumicamen-
te puro y, cuando necesario, ser sometidos a la desecacin.
Las soluciones volumtricas son estandarizadas y usadas
a temperaturas alrededor de 25 C. Frente a variaciones
significativas de temperatura, la solucin volumtrica debe
tener ttulo confirmado en la misma temperatura o ser me-
dida mediante factor de correccin.
cido clorhdrico M SV
Especificacin Contiene 85 ml de cido clorhdrico en
agua a 1000 ml.
Estandarizacin Pesar exactamente cerca de 1,5 g de car-
bonato de sodio anhidro. Juntar 100 ml de agua y dos gotas
de rojo de metilo SI. Aadir el cido lentamente, a partir
de bureta, hasta coloracin rosa suave. Calentar la solucin
hasta ebullicin; enfriar y continuar la titulacin. Repetir
esta secuencia de operaciones hasta que el calentamiento
no afecte la coloracin rosa. Calcular la molaridad. Cada
52,99 mg de carbonato de sodio anhidro equivale a 1 ml de
cido clorhdrico M.
Conservacin Recipientes hermticos.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Almacenamiento Proteger del calor.
cido oxlico 0,05 M SV
Especificacin Contiene 6,45 g de cido oxlico en agua
a 1000 ml.
Estandarizacin Transferir 15 ml de la muestra para ma-
traz de 250 ml. Aadir 100 ml de agua y 7 ml de cido
sulfrico. Calentar a cerca de 70 C y titular con perman-
ganato de potasio 0,02 M SV recientemente estandarizado,
aadido lentamente, con agitacin constante, hasta apare-
cimiento de color rosa plido que persista por 15 segundos.
La temperatura al final de la titulacin no debe ser inferior
a 60 C.
Conservacin Recipientes de vidrio bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
cido perclrico 0,1 M SV
Especificacin Contiene 10 g de cido perclrico en ci-
do actico a 1000 ml.
Estandarizacin Disolver, bajo agitacin, 8,5 ml de cido
perclrico en 200 a 300 ml de cido actico glacial. Aadir
20 ml de anhdrido actico, diluir la mezcla a 1000,0 ml
con cido actico glacial y dejar en reposo por 24 horas.
Determinar el tenor de agua, que debe situarse entre 0,02%
y 0,05%. Pesar exactamente cerca de 700 mg de biftalato
de potasio previamente pulverizado y desecado a 120 C
por 2 horas y disolverlo en 50 ml de cido actico glacial
en frasco de matraz de 250 ml de capacidad. Aadir 2 gotas
de cloruro de metilrosanilina y titular con la solucin de
cido. perclrico hasta que coloracin violeta cambie para
verde esmeralda. Cada 20,422 mg de biftalato de potasio
equivale a 1 ml de cido perclrico 0,1 M.
cido sulfrico M SV
Especificacin Contiene 98,07 g de cido sulfrico en
agua a 1000 ml.
Estandarizacin Aadir lentamente, bajo agitacin, 60
ml de cido sulfrico sobre 1020 ml de agua. Enfriar a tem-
peratura ambiente. Determinar la molaridad por titulacin
con carbonato de sodio, conforme descrito para cido clor-
hdrico M, sin embargo pesando exactamente cerca de 3 g
de carbonato de sodio anhidro. Cada 105,98 mg de carbo-
nato de sodio anhidro equivale a 1 ml de cido sulfrico M.
Bromato de potasio 0,1 M SV
Especificacin Contiene 16,704 g de bromato de potasio
en agua a 1000 ml.
Estandarizacin Medir exactamente volumen en torno
de 40 ml de la solucin de bromato de potasio a 1,67%
(p/v). Juntar 3 g de yoduro de potasio y 3 ml de cido clor-
hdrico SR. Aguardar 5 minutos y titular el yodo liberado
con tiosulfato de sodio 0,1 M SV, usando 3 ml de almidn
SI como indicador. Preparar un blanco. Corregir y calcular
la molaridad. Cada ml de bromato de potasio corresponde
a 6 ml de tiosulfato de sodio 0,1 M SV.
Conservacin Recipientes bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.

Bromo 0,05 M SV
Preparacin Disolver 3 g de bromato de potasio y 15 g
de bromato de potasio en agua y completar para 1000 ml
con el mismo solvente.
Estandarizacin Transferir 25 ml de la solucin para ma-
traz de 500 ml con tapa y aadir 120 ml de agua. Aadir 5
ml de cido clorhdrico, tapar y agitar suavemente. Aadir
5 ml de yoduro de potasio SR, tapar nuevamente, agitar y
dejar en reposo por 5 minutos al abrigo de la luz. Titular el
yodo liberado con tiosulfato de sodio 0,1 M SV, aadien-
do 3 ml de almidn SI prximo al punto final. Calcular a
molaridad. Cada ml bromo 0,05 M SV equivale a 1 ml de
tiosulfato de sodio 0,1 M SV.
Conservacin Recipientes de vidrio mbar bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Cloruro de bario 0,1 M SV
Preparacin Disolver 24,4 g de cloruro de bario en agua
y diluir para 1000 ml con el mismo solvente. Estandariza-
cin En 10 ml de la solucin de cloruro de bario, aadir
60 ml de agua, 3 ml de solucin concentrada de amonaco
y 1 mg de prpura de ftalena. Titular con edetato disdico
0,1 M SV. Cuando la solucin se destia, aadir 50 ml de
etanol y continuar la titulacin hasta que la coloracin azul
violeta desaparezca.
Cloruro de bencetonio 0,004 M SV
Preparacin Despus de desecar a 100 105C hasta
masa constante, disolver 1,792 g de cloruro de bencetonio
en agua y completar a 1000 ml con el mismo solvente. Es-
tandarizacin Disolver 0,350 g de cloruro de bencetonio,
despus de seco a 100-105C hasta masa constante, en 30
ml de cido actico anhidro y aadir 6 ml de solucin de
acetato de mercurio SR. Titular con cido perclrico 0,1 M
SV en presencia de 0,05 ml cloruro de metilrosanilina SI.
Realizar ensayo en blanco. Cada ml de cido perclrico 0,1
M SV corresponde a 44,81 mg de C27H42ClNO2.
Diclorofenol indofenol, solucin estndar
Preparacin Disolver 50 mg de 2,6-dicloroindofenol s-
dico en 50 ml de agua con 42 mg de bicarbonato de sodio.
Agitar vigorosamente. Despus de disolucin, completar
con agua a 200 ml. Filtrar.
Estandarizacin Pesar exactamente 50 mg de cido as-
crbico y diluir con cido metafosfrico-actico SR a 50
ml. Para baln de 50 ml, transferir inmediatamente 2 ml de
la solucin de cido ascrbico y aadir 5 ml de cido meta-
fosfrico-actico SR. Titular rpidamente con la solucin
de diclorofenol-indofenol hasta persistir color rosa por lo
menos, por 5 segundos. Hacer determinacin en blanco,
titulando 7 ml de cido metafosfrico-actico SR, aadida
de cantidad de agua igual a la de la solucin de diclorofe-
nol-indofenol usada en la titulacin del cido ascrbico.
Expresar la concentracin de la solucin estndar en trmi-
nos de su equivalente en mg de cido ascrbico.
Conservacin Recipientes de vidrio mbar, bien cerra-
dos. Estabilidad Usar como mximo en 3 das y estanda-
rizar inmediatamente antes del uso.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 503
Edetato disdico 0,05 M SV
Sinonimia EDTA disdico 0,05 M, etilendiaminotetraa-
cetato disdico 0,05 M.
Especificacin Contiene 18,6 g de edetato disdico dihi-
dratado en agua a 1000 ml.
Estandarizacin Pesar exactamente cerca de 200 mg de
carbonato de calcio. Transferir para vaso de precipitados
de 400 ml y aadir 10 ml de agua. Agitar y cubrir el vaso
con vidrio de reloj. Juntar 2 ml de cido clorhdrico diluido
y agitar hasta disolucin del carbonato de calcio. Lavar las
paredes del vaso de precipitados y el vidrio de reloj con
agua hasta cerca de 100 ml. Continuar agitando, magnti-
camente. Aadir 30 ml de la solucin de edetato disdico
a partir de bureta de 50,0 ml. Juntar 15 ml de hidrxido
de sodio SR y 300 mg del indicador azul de hidroxinaftol.
Continuar la titulacin de la solucin de edetato disdico
hasta color azul. Calcular la molaridad.
Conservacin Recipientes bien cerrados.
A
Edetato disdico 0,1 M SV
Preparacin Disolver 37,5 g en 500 ml de agua, aadir
100 ml de hidrxido de sodio M y completar para 1000 ml
con agua.
Estandarizacin Disolver 0,12 g de zinc en polvo (con
grado de pureza de 99,9%) en 10 ml de cido clorhdrico
M. Juntar 0,1 ml de agua de bromo SR. Eliminar el ex-
ceso de bromo hirviendo la solucin. Aadir solucin de
hidrxido de sodio a 8,5% (p/v) hasta reaccin levemente
cida o neutra, y proceder conforme descrito en Titulacio-
nes complejomtricas (5.3.3.4) para Zinc. Cada ml de ede-
tato disdico 0,1 M SV equivale a 6,536 mg de zinc.
Conservacin Recipientes bien cerrados.
Hidrxido de potasio etanlico 0,5 M SV
Nombre alternativo Hidrxido de potasio alcohlico 0,5
M SV
Preparacin Disolver 3 g de hidrxido de potasio en 5
ml de agua y aadir etanol para 100 ml. Dejar la solucin
en reposo durante aproximadamente 24 horas. Decantar el
lquido lmpido, y transferir para recipientes de material
inerte y protegidos de la luz. Estandarizacin Titular 20
ml de la solucin con cido clorhdrico 0,5 M SV usando
0,5 ml de fenolftalena SI como indicador. Cada ml de ci-
do clorhdrico 0,5 M SV equivale a 28,060 mg de hidrxi-
do de potasio.
Hidrxido de potasio M SV
Preparacin Disolver 60 g de hidrxido de potasio en
agua a 1000 ml. Aadir solucin saturada de hidrxido de
bario, recientemente preparada, hasta que no se forme ms
precipitado. Agitar y dejar en reposo durante aproximada-
mente 12 horas. Decantar el lquido lmpido, o filtrar, y
transferir para recipientes de material inerte (tipo polieti-
leno).
Estandarizacin Usar el mismo procedimiento adoptado
para el hidrxido de sodio M SV.
 504 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Conservacin En recipientes bien cerrados, inertes (tipo
polietileno).
Seguridad Custico.
Hidrxido de sodio M SV
Preparacin Preparar solucin de hidrxido de sodio a
50% (p/v) con agua exenta de dixido de carbono. Enfriar
a temperatura ambiente y dejar sedimentar. Retirar 82 ml
del sobrenadante y diluir con agua a 1000 ml. Estandari-
zacin Pesar exactamente cerca de 5 g de biftalato de
potasio desecado y disolver en 75 ml de agua exenta
de dixido de carbono. Juntar dos gotas de fenolftalena SI
y titular con la solucin de hidrxido de sodio hasta forma-
cin permanente de color rosa. Cada ml de hidrxido de
sodio M SV equivale a 204,220 mg de biftalato de potasio.
A
Conservacin Recipientes bien cerrados, inertes (tipo po-
lietileno). Tapones provistos de tubo conteniendo la mez-
cla hidrxido de sodio y xido de calcio.
Almacenamiento Proteger del dixido de carbono.
Seguridad Custico.
Informacin adicional Verificar el ttulo con frecuencia.
Hidrxido de sodio etanlico 0,1 M SV
Preparacin Preparar solucin de hidrxido de sodio a
50% (p/v) en agua exenta de dixido de carbono. Enfriar
a temperatura ambiente y dejar sedimentar. Transferir 2 ml
del sobrenadante para baln volumtrico de 250 ml y com-
pletar el volumen con etanol.
Estandarizacin Pesar, exactamente, cerca de 0,2 g de
cido benzoico y disolver en mezcla de 10 ml de etanol y
2 ml de agua. Aadir dos gotas de fenolftalena SI y titular
con la solucin de hidrxido de sodio etanlico hasta colo-
racin rosa permanente. Cada ml de hidrxido de sodio 0,1
M SV equivale a 122,120 mg de cido benzoico.
Conservacin En recipientes bien cerrados, inertes (tipo
polietileno).
Almacenamiento Proteger de la exposicin al dixido de
carbono.
Seguridad Custico.
Hidrxido de tetrabutilamonio 0,1 M SV
Preparacin Disolver 40 g de yoduro de tetrabutilamo-
nio en 900 ml de metanol anhidro, en frasco de matraz pro-
visto de tapn esmerilado. Colocar en bao de hielo, aadir
20 g de xido de plata pulverizado, tapar el frasco y agitar
vigorosamente por 60 minutos. Retirar algunos ml y centri-
fugar. Verificar presencia de yoduro en el lquido sobrena-
dante. Si la prueba es positiva, aadir 2 g ms de xido de
plata y dejar en reposo por 30 minutos, agitando ocasional-
mente. Filtrar a travs de embudo de placa porosa, lavar el
matraz y el embudo con tres porciones de 50 ml de tolueno
y juntar el tolueno de lavado al filtrado. Completar el volu-
men a 1000 ml con la mezcla de tres volmenes de tolueno
anhidro y un volumen de metanol anhidro. Pasar sobre la
solucin, por 10 minutos, corriente de nitrgeno exento de
dixido de carbono. Guardar en recipiente protegido del
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
dixido de carbono y de la humedad. Consumir en 60 das.
Determinar la molaridad en el da de uso, disolviendo cerca
de 400 mg de cido benzoico exactamente pesados, en 80
ml de dimetilformamida. Aadir a esta solucin tres gotas
de solucin de azul de timol a 1% (p/v) en dimetilformami-
da y titular con solucin de hidrxido de tetrabutilamonio
hasta coloracin azul. Proteger la solucin del contacto con
el aire durante la titulacin. Utilizar bureta provista de tubo
de absorcin de dixido de carbono. Efectuar ensayo en
blanco. Cada ml de hidrxido de tetrabutilamonio equivale
a 12,212 mg de cido benzoico.
Carmn de ndigo SV
Preparacin Triturar 4 g de carmn de ndigo con su-
cesivas porciones de agua hasta disolucin, sin pasar 900
ml. Transferir para baln volumtrico de 1000 ml, aadir
2 ml de cido sulfrico y completar el volumen con agua.
Estandarizacin A 10 ml de solucin estndar de nitrato
(100 ppm NO3) aadir 10 ml de agua, 0,05 ml de carmn
de ndigo SV y, cuidadosamente, 30 ml de cido sulfri-
co. Titular inmediatamente con carmn de ndigo SV hasta
cambiar para una coloracin azul estable. El volumen total,
en ml, de carmn de ndigo SV requerido es equivalente a
1 mg de NO3.
Yodato de potasio 0,02 M SV
Especificacin Contiene 4,28 g de yodato de potasio en
agua a 1000 ml.
Estandarizacin Diluir 50 ml de la solucin para 100 ml
con agua. A 25 ml de esta solucin, aadir 2 g de yoduro
de potasio y 10 ml de cido sulfrico M. Titular con tiosul-
fato de sodio 0,1 M SV utilizando almidn SI, adicionado
prximo al punto final, como indicador. Cada ml de tiosul-
fato de sodio 0,1 M SV equivale a 3,566 mg de KIO3.
Yodato de potasio 0,1 M SV
Preparacin Pesar exactamente, 21,4 g de yodato de po-
tasio previamente desecado a 110 C, hasta peso constante,
y disolver en agua y completar el volumen para 1000 ml
con el mismo solvente. No es necesaria la estandarizacin,
pues este reactivo es estndar primario.
Yodo 0,05 M SV
Preparacin Disolver 13 g de yodo en 100 ml de solu-
cin de yoduro de potasio a 20% (p/v). Aadir tres gotas
de cido clorhdrico y diluir para 1000 ml con agua. Es-
tandarizacin Disolver, exactamente, cerca de 0,15 g de
trixido de arsnico en 20 ml de hidrxido de sodio M.
Calentar si necesario. Aadir 40 ml de agua y dos gotas de
anaranjado de metilo y cido clorhdrico hasta color rosa.
Aadir 50 ml de carbonato de sodio a 4% (p/v), 3 ml de
almidn SI y titular con yodo 0,05 M SV hasta color azul
permanente. Cada ml de yodo 0,05 M SV equivale a 4,946
mg de trixido de arsnico.
Conservacin En recipiente de vidrio bien cerrado y al
abrigo de la luz.

Yodo 0,1 M SV
Preparacin Disolver cerca de 13 g de yodo en 100 ml de
yoduro de potasio a 3,6% (p/v). Juntar tres gotas de cido
clorhdrico y completar con agua a 1000 ml. Estandari-
zacin Pesar exactamente cerca de 150 mg de trixido
de arsnico. Disolver en 20 ml de hidrxido de sodio M,
calentando si necesario. Aadir 40 ml de agua, dos gotas de
anaranjado de metilo S1 y cido clorhdrico diluido hasta
color rosa. Juntar 50 ml de carbonato de sodio a 4% (p/v) y
3 ml de almidn SI. Titular con la solucin de yodo, a partir
de bureta, hasta color azul permanente.
Calcular la molaridad. Cada 4,946 mg de trixido de ars-
nico equivale a 1 ml de yodo 0,1 M.
Conservacin Recipientes de vidrio bien cerrados.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Metxido de litio 0,1 M SV
Preparacin Disolver, cuidadosamente, en baln volu-
mtrico de 1000 ml, 0,694 g de litio en 150 ml de metanol
anhidro y completar el volumen con tolueno. Estandari-
zacin Estandarizar siempre antes del uso. A 10 ml de
dimetilformamida aadir 0,05 ml de azul de timol a 0,3%
(p/v) en metanol y titular con metxido de litio 0,1 M SV
hasta coloracin azul. Inmediatamente, aadir 0,2 g de ci-
do benzoico, agitar y titular con metxido de litio 0,1 M
SV hasta coloracin azul. Evitar la absorcin de dixido
de carbono atmosfrico. El volumen de titulante gastado
en la segunda titulacin representa la cantidad de metxido
de litio requerido. Cada ml de metxido de litio 0,1 M SV
equivale a 12,212 mg de C7H6O2.
Metxido de sodio 0,1 M SV
Especificacin Contiene 5,402 g en solucin tolueno me-
tanol a 1000 ml.
Preparacin Enfriar en bao de hielo 150 ml de metanol,
contenido en baln volumtrico de 1000 ml. Aadir, en pe-
queas porciones, cerca de 2,5 g de sodio metlico recin
fragmentado. Despus de la disolucin del metal, aadir
tolueno hasta completar 1000 ml y mezclar. Mantener esta
solucin en recipiente al abrigo del dixido de carbono.
Estandarizacin Pesar exactamente cerca de 400 mg de
cido benzoico, disolver en 80 ml de dimetilformamida,
aadir tres gotas de solucin de azul de timol a 1% (p/v)
en dimetilformamida y titular por la solucin de metxido
de sodio hasta el aparecimiento de coloracin azul. Cada
12,212 mg de cido benzoico equivale a 1 ml de metxido
de sodio 0,1 M.
Nitrato crico amoniacal 0,01 M SV
Preparacin A 100 ml de nitrato crico amoniacal 0,1
M SV aadir, cuidadosamente, con enfriamiento, 30 ml de
cido sulfrico y diluir para 1000 ml con agua.
Nitrato crico amoniacal 0,1 M SV
Preparacin Agitar solucin conteniendo 56 ml de cido
sulfrico y 54,82 g de nitrato crico amoniacal por 2 minu-
tos y, cuidadosamente, aadir cinco porciones sucesivas de
100 ml de agua, agitando despus de cada adicin. Diluir
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 505
la solucin lmpida para 1000 ml con agua. Estandarizar 10
das despus del preparado.
Estandarizacin Aadir a 25 ml de la solucin 2 g de yo-
duro de potasio y 150 ml de agua. Titular inmediatamente
con tiosulfato de sodio 0,1 M SV, utilizando almidn SI
como indicador. Cada ml de tiosulfato de sodio 0,1 M SV
equivale a 54,822 mg de (NH4)2[Ce(NO3)6].
Almacenamiento Proteger de la luz.
Nitrato de bario 0,01 M SV
Especificacin Contiene 2,614 g de nitrato de bario en
1000 ml de agua.
Estandarizacin Aadir 10 ml de solucin de cido sul-
frico 0,01 M en un frasco y diluir con agua. Aadir dos
gotas de torina a 0,2% (p/v) y dos gotas de cloruro de me-
A
tiltioninio 0,02% (p/v) y titular lentamente con solucin
de nitrato de bario hasta cambio de color de amarillo para
rosa.
Nitrato de plomo 0,1 M SV
Preparacin Transferir, exactamente, cerca de 8,28 g de
nitrato de plomo para baln volumtrico de 250 ml, diluir
en agua y completar el volumen con el mismo solvente.
Homogeneizar.
Estandarizacin Transferir, exactamente, 5 ml de nitrato
de plomo 0,1 M, para matraz de 125 ml, aadir 50 ml de
agua y, bajo agitacin magntica, aadir 5 gotas de anaran-
jado de xilenol a 0,1% (p/v) en agua y 5 g de metenamina,
hasta coloracin violeta. Titular con edetato disdico 0,05
M SV hasta coloracin amarilla. Cada ml de edetato dis-
dico 0,05 M SV equivale a 16,560 mg de Pb (NO3)2.
Nitrato de mercurio (II) 0,1 M SV
Sinonimia Nitrato mercrico 0,1 M SV.
Preparacin Disolver cerca de 35 g de nitrato de mercu-
rio (II) en 5 ml de cido ntrico y 500 ml de agua. Comple-
tar con agua a 1000 ml.
Estandarizacin A 20 ml de esta solucin, aadir 2 ml de
cido ntrico SR y 2 ml de sulfato frrico amoniacal SR.
Enfriar a temperatura inferior a 20 C y titular con tiocia-
nato de amonio 0,1 M hasta aparecimiento permanente de
la coloracin marrn. Calcular la molaridad.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Nitrato de plata 0,1 M SV
Preparacin Disolver cerca de 17,5 g de nitrato de plata
en agua a 1000 ml.
Estandarizacin Pesar exactamente cerca de 100 mg de
cloruro de sodio, desecado; transferir para vaso de precipi-
tados de 150 ml y disolver en 5 ml de agua. Juntar 5 ml de
cido actico SR, 50 ml de metanol y tres gotas de eosina Y
SI. Agitar, de preferencia con agitador magntico, y titular
con la solucin de nitrato de plata. Calcular la molaridad.
Cada ml de nitrato de plata 0,1 M SV corresponde a 5,844
mg de cloruro de sodio.
Conservacin Recipientes bien cerrados.
 506 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Almacenamiento Proteger de la luz.
Nitrato de torio 0,005 M SV
Especificacin Contiene 2,401 g de nitrato de torio anhi-
dro en 1000 ml de agua.
Estandarizacin Transferir, exactamente, cerca de 0,05
g de fluoruro de sodio, previamente desecado, para baln
volumtrico de 250 ml y completar con agua. En 20 ml
de esa solucin, aadir 0,6 ml de alizarina SI y entonces,
titular con hidrxido de sodio 0,1 M SV hasta el cambio de
color de rosa para amarillo. Aadir 5 ml de tampn acetato
pH 3,0 y titular con solucin de nitrato de torio 0,005 M
hasta el cambio de color de amarillo para rosa amarillento.
Cada 0,8398 mg de fluoruro de sodio es equivalente a 1 ml
de nitrato de torio 0,005 M SV.
A
Nitrito de sodio 0,1 M SV
Especificacin Contiene 6,9 g de nitrito de sodio en agua
a 1000 ml.
Estandarizacin Disolver 7,5 g de nitrito de sodio en
agua y completar el volumen a 1000 ml. Pesar exactamen-
te cerca de 500 mg de sulfanilamida previamente desecada
por 3 horas a 105 C. Transferir para vaso de precipitados.
Aadir 20 ml de cido clorhdrico y 50 ml de agua. Agitar
hasta disolucin y enfriar a 15 C. Manteniendo la tempe-
ratura en torno de 15 C, titular lentamente con solucin
de nitrito de sodio usando como indicador externo almidn
yodado SI, hasta cambio: Cada 17,220 mg de sulfanilami-
da equivalen a 1 ml de nitrito de sodio 0,1 M.
Permanganato de potasio 0,02 M SV
Especificacin Contiene 3,161 g de permanganato de po-
tasio en agua a 1000 ml.
Preparacin Disolver cerca de 3,2 g de permanganato
de potasio en 1000 ml de agua, calentar a ebullicin por
15 minutos. Dejar en reposo en frasco mbar con tapa de
vidrio, al abrigo de la luz, por dos das, y filtrar a travs de
embudo de vidrio sinterizado.
Estandarizacin Disolver, exactamente, cerca de 0,2 g
de oxalato de sodio, previamente desecado a 110 C hasta
peso constante, en 250 ml de agua. Aadir 7 ml de cido
sulfrico, calentar a cerca de 70 C, y titular lentamente
con la solucin de permanganato de potasio, con agitacin
constante, hasta coloracin rosa plida, que persista por 15
segundos. La temperatura al final de la titulacin no debe
ser inferior a 60 C. Cada ml de permanganato de potasio
0,02 M SV equivale a 6,700 mg de oxalato de sodio.
Conservacin Recipientes de vidrio mbar bien cerrados,
con tapa de vidrio.
Almacenamiento Proteger de la luz.
Informacin adicional Verificar el ttulo con frecuencia.
Sulfato crico 0,05 M SV
Especificacin Contiene 33,22 g de sulfato crico en
1000 ml de agua.
Estandarizacin Pesar, exactamente, cerca de 0,2 g de
oxalato de sodio, desecado previamente, y disolver en 75
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
ml de agua. Aadir, con agitacin, 2 ml de cido sulfrico
previamente mezclado con 5 ml de agua, homogeneizar.
Aadir 10 ml de cido clorhdrico, y calentar hasta cerca de
75 C. Titular con sulfato crico 0,05 M hasta color amari-
llo claro permanente. Cada 6,700 mg de oxalato de sodio es
equivalente a 1 ml de sulfato crico 0,05 M SV.
Sulfato crico amoniacal 0,1 M SV
Preparacin Disolver 65 g de sulfato crico amoniacal
en mezcla de 30 ml de cido sulfrico y 500 ml de agua.
Enfriar y completar el volumen con agua para 1000 ml. Es-
tandarizacin Disolver 80 mg de trixido de arsnico en
15 ml de hidrxido de sodio 0,2 M, calentando si necesario.
Aadir 50 ml de cido sulfrico M, 0,15 ml de tetrxido de
osmio a 0,25% (p/v) y 0,1 ml de ferrona SI. Titular con
sulfato crico amoniacal 0,1 M hasta cambio de coloracin.
Cada ml de sulfato crico amoniacal 0,1 M es equivalente a
4,496 mg de trixido de arsnico.
Sulfato de zinc 0,1 M SV
Especificacin Contiene 16,144 g de sulfato de zinc hep-
tahidratado en agua a 1000 ml. Preparacin Disolver
28,8 g de sulfato de zinc en agua y completar el volumen a
1000 ml. Pipetear 20 ml de la solucin de edetato disdico
0,05 M para un matraz de 250 ml y aadir, en este orden,
20 ml de solucin tampn cido actico-acetato de amo-
nio, 100 ml de etanol y 2 ml de ditizona SR. Titular por la
solucin de sulfato de zinc hasta la coloracin rosa clara.
Calcular la molaridad.
Tetrafenilborato de sodio 0,02 M SV
Preparacin Disolver 6,845 g de tetrafenilborato de so-
dio en agua a 1000 ml.
Estandarizacin Pipetear dos porciones de 75 ml en dos
vasos de precipitados. A cada uno de ellos, aadir 1 ml de
cido actico SR, 25 ml de agua y, lentamente, bajo agi-
tacin, 25 ml de biftalato de potasio a 5% (p/v). Dejar en
reposo por dos horas. Filtrar una de las mezclas en crisol
filtrante, de vidrio sinterizado (porosidad 100-160 micr-
metros) y lavar el precipitado con agua fra. Transferir el
precipitado con 50 ml de agua y agitar intermitentemente
por 30 minutos. Filtrar y usar el filtrado como solucin sa-
turada de tetrafenilborato de potasio en el siguiente proce-
dimiento de estandarizacin. Filtrar la segunda mezcla en
crisol filtrante, de vidrio sinterizado, tarado, y lavar con
tres porciones de 5 ml de la solucin saturada de tetrafe-
nilborato de potasio. Secar el precipitado a 105 C durante
una hora. Cada g de tetrafenilborato de potasio equivale a
955,1 mg de tetrafenilborato de sodio. A partir del peso del
tetrafenilborato de sodio obtenido, calcular la molaridad de
la solucin.
Conservacin Recipientes bien cerrados. Estabilidad
Usar soluciones recientes.
Tiocianato de amonio 0,1 M SV
Preparacin Disolver cerca de 8 g de tiocianato de amo-
nio en agua a 1000 ml.
Estandarizacin Mezclar exactamente 30 ml de nitrato
de plata 0,1 M con 50 ml de agua, 2 ml de cido ntrico SR

y 2 ml de sulfato frrico amoniacal SR. Titular con la solu-
cin de tiocianato de amonio hasta aparecimiento del color
castao rojiza. Cada ml de nitrato de plata 0,1 M equiva-
lente a 7,612 mg de tiocianato de amonio.
Conservacin Recipientes bien cerrados.
Tiosulfato de sodio 0,1 M SV
Preparacin Disolver cerca de 25 g de tiosulfato de sodio
pentahidratado y 200 mg de carbonato de sodio en agua,
recientemente hervida y enfriada, a 1000 ml. Estandariza-
cin Pesar exactamente cerca de 210 mg de dicromato de
potasio, pulverizado y desecado, y disolver en 100 ml de
agua. Transferir para baln de 500 ml y aadir 3 g de yodu-
ro de potasio, 2 g de bicarbonato de sodio y 5 ml de cido
clorhdrico SR. Agitar y dejar en reposo por 10 minutos en
oscuro. Titular el yodo liberado con la solucin de tiosul-
fato de sodio hasta color verde amarillento. Aadir 3 ml de
almidn SI y continuar la titulacin hasta desaparicin de
la color azul. Calcular la molaridad. Cada ml de tiosulfato
de sodio 0,1 M SV corresponde a 4,903 mg de dicromato
de potasio.
Conservacin Recipientes bien cerrados. Informacin
adicional Verificar el titulo con frecuencia.
14.4 TAMPONES
Ciertos ensayos farmacopeicos exigen el ajuste o el man-
tenimiento de pH. Para ello, se emplean soluciones deno-
minadas tampones, capaces de soportar variaciones en la
actividad de iones hidrgeno. Los componentes requeridos
estn descritos en el tem Reactivos. Los de naturaleza cris-
talina deben ser previamente desecados a 110 120 C por
una hora; utilizar agua exenta de dixido de carbono. El
almacenamiento debe ser hecho en recipientes hermticos
y apropiados. Considerar la estabilidad en el preparado de
las cantidades para consumo. A continuacin, se relacionan
las soluciones en orden creciente de valores de pH. Otros
tampones con caractersticas particulares son descritos en
los textos de los respectivos ensayos.
Tampn cido clorhdrico pH 2,0
Preparacin Mezclar 50 ml de solucin acuosa de cloru-
ro de potasio 0,2 M con 13 ml de solucin acuosa de cido
clorhdrico 0,2 M. Completar el volumen para 200 ml con
agua y ajustar el pH si necesario.
Tampn fosfato pH 2,2
Preparacin Disolver 1,38 g de fosfato de sodio mono-
bsico en 800 ml de agua. Ajustar el pH con cido fosfri-
co y diluir para 1000 ml con agua.
Tampn acetato pH 3,0
Preparacin Disolver 12 g de acetato de sodio en agua,
aadir 6 ml de cido actico glacial y diluir con agua para
completar 100 ml. Ajustar el pH si necesario.
Tampn acetato pH 3,5
Preparacin Disolver 25 g de acetato de amonio en 35
ml de agua, aadir 38 ml de cido clorhdrico 7 M, ajustar
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 507
el pH para 3,5 con cido clorhdrico SR o hidrxido de
amonio 6 M y completar el volumen para 100 ml con agua.
Tampn acetato pH 4,0
Preparacin Transferir 900 ml de agua para baln volu-
mtrico de 1000 ml, aadir 2,86 ml de cido actico glacial
y 1 ml de hidrxido de sodio a 50% (p/v), completar el
volumen con agua y homogeneizar. Si es necesario, ajustar
el pH en 4,0 con cido actico glacial o hidrxido de sodio
a 50% (p/v).
Tampn acetato pH 4,4
Preparacin Disolver 136 g de acetato de sodio y 77 g de
acetato de amonio en agua y diluir a 1000 ml. Aadir 250
ml de cido actico glacial y homogeneizar.
A
Tampn biftalato pH 4,4
Preparacin Disolver 2,042 g de biftalato de potasio en
50 ml de agua, aadir 7,5 ml de hidrxido de hidrgeno 0,2
M y diluir para 200 ml en agua. Ajustar el pH si necesario.
Tampn acetato 0,05 M pH 4,5
Preparacin Transferir 2,99 g de acetato de sodio tri-
hidratado y 1,66 ml de cido actico glacial para baln
volumtrico de 1000 ml. Disolver en agua y completar el
volumen con el mismo solvente. Ajustar el pH si necesario.
Tampn acetato de sodio pH 4,5
Preparacin Diluir 2,8 ml de cido actico glacial con
agua para 1000 ml. Ajustar el pH en 4,5 0,05 con hidrxi-
do de sodio a 50% (p/v).
Tampn acetato de sodio 0,1 M pH 5,0
Preparacin Transferir 13,61 g de acetato de sodio tri-
hidratado para baln volumtrico de 1000 ml, disolver en
cantidad suficiente de agua y completar el volumen con el
mismo solvente. Homogeneizar. Ajustar el pH en 5,0 con
cido actico 0,1 M.
Tampn citrato-fosfato pH 5,0
Solucin A Disolver 0,8 g de fosfato de sodio dibsico
heptahidratado en 500 ml de agua.
Solucin B Disolver 3,5 g de cido ctrico monohidratado
en 500 ml de agua.
Preparacin Mezclar, con agitacin, las Soluciones A y
B hasta ajustar el pH para 5,0. Distribuir en recipientes con
50 ml cada. Autoclavar a 121 C, presin de 1 atm, por 20
minutos. Almacenar a 4 C.
Tampn fosfato pH 5,5
Solucin A Disolver 13,61 g de fosfato de potasio mo-
nobsico en agua y completar para 1000 ml con el mismo
solvente.
Solucin B Disolver 35,81 g de fosfato de sodio dibsico
dodecahidratado en agua y completar para 1000 ml con el
mismo solvente.
 508 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Preparacin Mezclar 96,4 ml de la Solucin A y 3,6 ml
de la Solucin B. Ajustar el pH si necesario.
Tampn fosfato pH 5,8
Preparacin En baln volumtrico de 200 ml, aadir 3,6
ml de hidrxido de sodio 0,2 M a 50 ml de fosfato de po-
tasio monobsico 0,2 M y completar el volumen con agua.
Ajustar el pH si necesario.
Tampn fosfato pH 6,0
Preparacin Mezclar 50 ml de fosfato de potasio mo-
nobsico 0,2 M y 5,7 ml de hidrxido de sodio 0,2 M.
Completar el volumen a 200 ml con agua. Ajustar el pH
si necesario.
Tampn acetato pH 6,0
A Preparacin Disolver 100 g de acetato de amonaco en
300 ml de agua, aadir 4,1 ml de cido actico glacial, si
necesario ajustar el pH, utilizando hidrxido de amonio 10
M o cido actico glacial 5 M y completar a 500 ml con
agua.
Tampn citrofosfato pH 6,0
Nombre alternativo Tampn fosfato de sodio pH 6,0 Pre-
paracin Mezclar 36,8 ml de cido ctrico a 2,1% (p/v)
con 63,2 ml de fosfato de sodio dibsico a 7,15% (p/v).
Ajustar el pH si necesario.
Tampn fosfato pH 6,5
Preparacin Disolver 2,75 g de fosfato de sodio dibsico
di-hidratado y 4,5 g de cloruro de sodio en 500 ml de agua.
Ajustar el pH en 6,5 con tampn fosfato pH 8,5.
Tampn fosfato pH 6,8
Preparacin Disolver 28,8 g de fosfato de sodio dibsico
y 11,45 g de fosfato de potasio tribsico en agua y comple-
tar el volumen a 1000 ml.
Tampn fosfato-laurilsulfato de sodio pH 6,8
Preparacin Mezclar 19 partes de cido clorhdrico 0,1
M con 17 partes de tampn fosfato-laurilsulfato de sodio
pH 11,0. Si necesario, ajustar el pH para 6,8 con cido fos-
frico a 20% (v/v) o hidrxido de sodio a 40% (p/v).
Tampn de tris-clorhidrato M de pH 6,8
Preparacin Disolver 60,6 g de trometamina en 400 ml
agua. Ajustar el pH para 6,8 con cido clorhdrico y com-
pletar para 500 ml con agua. Ajustar el pH si necesario.
Tampn fosfato 0,025 M pH 6,86
Preparacin Disolver 3,53 g de fosfato de sodio dibsico
y 3,39 g de fosfato de potasio monobsico en agua para
completar el volumen a 1000 ml. Ajustar el pH si necesa-
rio.
Tampn acetato pH 7,0
Preparacin Disolver 2,73 g de acetato de sodio en apro-
ximadamente 70 ml de agua. Ajustar el pH a 7,0 con cido
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
actico 0,5 M. Completar con agua a 100 ml. Ajustar el pH
si necesario.
Conservacin En recipientes bien cerrados.
Tampn citrofosfato pH 7,0
Nombre alternativo Tampn fosfato de sodio pH 7,0 Pre-
paracin Mezclar 82,4 ml de fosfato de sodio dibsico
dodecahidratado a 7,15% (p/v) con 17,6 ml de cido ctrico
a 2,1% (p/v). Ajustar el pH si necesario.
Tampn fosfato pH 7,0
Solucin A Hidrxido de sodio M
Solucin B Disolver 13,6 g de fosfato de potasio mono-
bsico en agua y completar el volumen para 100 ml con el
mismo solvente.
Preparacin Mezclar 29,5 ml de la Solucin A y 50 ml
de la Solucin B. Ajustar el pH en 7,0 0,1 utilizando las
Soluciones A y B y completar el volumen para 100 ml con
agua.
Tampn fosfato M/l5 pH 7,0
Preparacin Disolver 0,908 g de fosfato de potasio mo-
nobsico en agua y diluir a 100 ml. Separadamente, disol-
ver 2,38 g de fosfato de sodio dibsico en agua y diluir
a 100 ml. Mezclar 38,9 ml de la solucin de fosfato de
potasio monobsico con 61,1 ml de solucin de fosfato de
sodio dibsico. Ajustar el pH si necesario.
Tampn fosfato pH 7,1
Preparacin Transferir 1 g de fosfato de potasio monob-
sico y 1,8 g de fosfato de sodio dibsico anhidro para baln
volumtrico de 1000 ml, aadir 900 ml en agua y ajustar el
pH para 7,1 0,1 con cido fosfrico o hidrxido de sodio
10 M. Completar el volumen con el mismo solvente.
Tampn fosfato pH 7,2
Preparacin Juntar 250 ml de fosfato de potasio mono-
bsico 0,2 M y 175 ml de hidrxido de sodio 0,2 M. Com-
pletar el volumen a 1000 ml. Ajustar el pH si necesario.
Tampn albmina-fosfato pH 7,2
Preparacin Disolver 4,26 g de fosfato de sodio dibsico
anhidro, 7,6 g de cloruro de sodio y 10 g de albmina bo-
vina en agua. Completar el volumen a 1000 ml y antes de
usar ajustar el pH con hidrxido de sodio 2 M o con cido
fosfrico.
Tampn fosfato pH 7,3
Preparacin Disolver 20,8 g de fosfato de sodio dibsico
heptahidratado y 3,08 g de fosfato de sodio monobsico
monohidratado en 900 ml de agua, ajustar el pH en 7,3
0,1 con cido fosfrico SR o hidrxido de sodio SR y diluir
para 1000 ml con el mismo solvente.
Tampn barbital de pH 7,4
Preparacin Mezclar 50 ml de una solucin conteniendo
1,94% (p/v) de acetato de sodio y 2,95% (p/v) de barbital

sdico en agua con 50,5 ml de cido clorhdrico 0,1 M.
Juntar 20 ml de solucin a 8,5% (p/v) de cloruro de sodio y
completar a 250 ml con agua.
Tampn fosfato de potasio pH 7,4 con polisorbato 80 a
2% (v/v)
Preparacin Disolver 27,22 g de fosfato de potasio mo-
nobsico en 1000 ml de agua. Transferir 250 ml de la so-
lucin anterior para baln volumtrico de 1000 ml, aadir
195,5 ml de hidrxido de sodio 0,2 M y 450 ml de agua.
Ajustar el pH para 7,4 con cido fosfrico o hidrxido de
sodio y completar el volumen con agua. El polisorbato 80
debe ser adicionado despus, debido a la difcil
Solubilidad del mismo.
Tampn imidazol pH 7,4
Preparacin Disolver 3,4 g de imidazol y 5,84 g de clo-
ruro de sodio en agua. Aadir 18,6 ml de cido clorhdrico
M y completar con agua a 1000 ml. si necesario, ajustar el
pH para 7,4 0,1.
Tampn de trometamina-cloruro de sodio de pH 7,4.
Preparacin Disolver 6,08 g de trometamina y 8,77 g de
cloruro de sodio en 500 ml de agua destilada. Junte 10 g
de albmina bovina. Ajustar el pH con cido clorhdrico y
complete 1000 ml con agua destilada.
Tampn tris-cloruro de sodio pH 7,5
Preparacin Disolver 7,27 g de trometamina y 5,27 g de
cloruro de sodio en 950 ml de agua. Ajustar el pH en 7,5
con cido clorhdrico 2 M y completar con agua a 1000 ml.
Tampn borato pH 8,0
Preparacin Mezclar 0,619 g de cido brico y 0,746
g cloruro de potasio en 50 ml de agua. Aadir 3,97 ml de
hidrxido de sodio 0,2 M y diluir para 200 ml de agua.
Ajustar el pH si necesario.
Tampn de barbital de pH 8,4
Preparacin Disolver 8,25 g de barbital sdico en agua
y completar a 1000 ml con el mismo solvente. Ajustar el
pH si necesario.
Tampn de trometamina-EDTA de pH 8,4.
Preparacin Disolver 5,12 g de cloruro de sodio, 3,03
g de trometamina y 1,40 g de yoduro de sodio en 250 ml
agua destilada. Ajuste el pH con cido clorhdrico y com-
plete 500 ml con agua destilada.
Tampn de tris-EDTA ASB de pH 8,4
Preparacin Disolver 6,1 g de trometamina, 2,8 g de yo-
duro de sodio, 10,2 g de cloruro de sodio y 10 g de albmi-
na bovina en agua, ajustar el pH con cido clorhdrico M y
completar para 1000 ml con agua.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 509
Tampn acetato de amonio pH 8,5
Preparacin Disolver 50 g de acetato de amonio en 1000
ml de etanol a 20% (v/v). Ajustar el pH en 8,5 con hidrxi-
do de amonio 6 M.
Tampn fosfato pH 8,5
Preparacin Disolver 3,5 g de fosfato de potasio dibsi-
co anhidro y 4,5 g de cloruro de sodio en 500 ml de agua.
Ajustar el pH en 8,5 con una mezcla de agua y cido fos-
frico (1:1).
Tampn barbital pH 8,6
Preparacin Mezclar 129 ml de cido clorhdrico 0,1 M
aadir volumen suficiente de barbital sdico 0,1 M para
completar 1000 ml. Ajustar el pH si necesario.
Tampn fosfato pH 8,6
Preparacin Mezclar 2,3 volmenes de hidrxido de so-
A
dio 0,2 M, con 2,5 volmenes de fosfato de potasio mono-
bsico 0,2 M y 2 volmenes de metanol. Enfriar y mezclar
con agua para obtener 10 volmenes de solucin. Ajustar,
si necesario, el pH para 8,60 0,05 con hidrxido de sodio.
Tampn de tris-clorhidrato 1,5 M pH 8,8
Preparacin Disolver 90,8 g de trometamina en 400 ml
de agua. Ajustar el pH para 8,8 con cido clorhdrico y di-
luir para 500 ml con agua.
Tampn borato pH 9,0
Preparacin Disolver 12,37 g de cido brico y 14,91
g de cloruro de potasio en agua y completar el volumen
para 1000 ml con el mismo solvente. Transferir 50 ml de la
solucin obtenida para baln volumtrico de 200 ml, aa-
dir 20 ml de hidrxido de sodio 0,2 M y 120 ml de agua.
Ajustar el pH en 9,0 con hidrxido de sodio SR o cido
clorhdrico SR y completar el volumen con agua.
Tampn tris 0,05 M pH 9,0
Preparacin Transferir 6,05 g de trometamina para baln
volumtrico de 1000 ml. Disolver en agua y completar el
volumen con el mismo solvente. Ajustar el pH en 9,0
0,05 utilizando cido fosfrico. Disolver 10 g de laurilsul-
fato de sodio en cerca de 600 ml del tampn. Mezclar la
solucin obtenida con lo restante del tampn.
Tampn borato pH 9,6
Preparacin Transferir 3,093 g de cido brico y 3,728 g
de cloruro de potasio para baln volumtrico de 1000 ml,
aadir 250 ml de agua y agitar hasta disolucin. Aadir 182
ml de hidrxido de sodio 0,2 M y completar el volumen
con agua. Ajustar el pH si necesario.
Tampn carbonato-bicarbonato de sodio pH 9,6
Preparacin Disolver 0,75 g de carbonato de sodio y 1,5
g de bicarbonato de sodio en 500 ml de agua. Distribuir en
recipientes con 50 ml cada uno. Autoclavar a 121 C, pre-
sin de 1 atm, por 20 minutos. Almacenar a 4 C.
 510 Farmacopea Brasilea, 5 edicin
Tampn cloruro de amonio pH 10,0
Preparacin Disolver 5,4 g de cloruro de amonio en 70
ml de hidrxido de amonio 5 M y diluir con agua a 100 ml.
Tampn cloruro de amonio pH 10,7
Preparacin Disolver 67,5 g de cloruro de amonio en
agua, aadir 570 ml de solucin concentrada de amonaco
y diluir para 1000 ml con agua. Ajustar el pH si necesario.
Tampn fosfato-laurilsulfato de sodio pH 11,0
Preparacin Disolver en agua 16,35 g de fosfato de sodio
monobsico, 7,05 g de hidrxido de sodio y 3 g de lauril-
sulfato de sodio y diluir con agua para 1000 ml. Ajustar el
pH si necesario.
Tampn cido actico-acetato de amonio
A Preparacin Disolver 77,1 g de acetato de amonio en
agua, aadir 57,0 ml de cido actico glacial y completar
con agua a 1000 ml. Ajustar el pH si necesario.
Tampn de electroforesis DSS-EGPA
Preparacin Disolver 151,4 g de trometamina, 721 g de
glicina y 50 g laurilsulfato de sodio en agua y completar
5000 ml con el mismo solvente. Diluir a 1:10 con agua,
inmediatamente antes del uso. El pH de la solucin diluida
debe estar comprendido entre 8,1 y 8,8.
Tampn concentrado para muestras DSS-EGPA.
Preparacin Disolver 1,89 g de trometamina, 5 g de
laurilsulfato de sodio y 50 mg de azul de bromofenol en
agua; juntar 25 ml de glicerina y completar para 100 ml
con agua. Ajustar el pH para 6,8 con cido clorhdrico y
completar para 125 ml con agua.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Tampn concentrado para muestras DSS-EGPA en
condiciones reductoras
Preparacin Disolver 3,78 g de trometamina, 10 g de
laurilsulfato de sodio, 100 mg de azul de bromofenol y 50
ml de glicerina en 200 ml de agua. Juntar 25 ml de 2-mer-
captoetanol. Ajustar el pH para 6,8 con cido clorhdrico y
completar para 250 ml con agua. En vez del 2-mercaptoe-
tanol, puede ser usado el ditiotreitol como agente reductor.
En ese caso, proceda como indicado: disuelva 3,78 g de
trometamina, 10 g de laurilsulfato de sodio, 100 mg de azul
de bromofenol y 50 ml de glicerina en 200 ml de agua.
Ajustar el pH para 6,8 con cido clorhdrico y completar
para 250 ml con agua. Inmediatamente antes del empleo,
aadir el ditiotreitol, para obtener una concentracin final
de 0,1 M.
Tampn fosfato-salino (PBS)
Preparacin Disolver, con agitacin, 24 g de cloruro de
sodio, 0,6 g de cloruro de potasio, 4,3 g de fosfato de sodio
dibsico dodecahidratado y 0,6 g de fosfato de potasio mo-
nobsico en 4 L de agua. Autoclavar a 121 C, presin de 1
atm, por 20 minutos. Almacenar a 4 C.
Tampn sulfato cprico
Solucin A Disolver 15,22 g de fosfato de sodio dibsi-
co anhidro en cantidad suficiente de agua. Aadir 9,75 g
de cido ctrico monohidratado y diluir para 1000 ml con
agua. Ajustar el pH a 5,2 con ayuda de hidrxido de sodio
o cido ctrico.
Solucin B Disolver 0,313 g de sulfato cprico pentahi-
dratado en agua y diluir para 100 ml con el mismo solvente.
Preparacin En el momento del uso mezclar 15 ml de la
Solucin B con 985 ml de la Solucin A.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 511

ANEXO A TABLA PERIDICA DE LOS

ELEMENTOS QUMICOS NOMBRES,
SMBOLOS Y MASAS ATMICAS
La Tabla A.1 es recomendada por la International Union of Pure and Applied Chemistry IUPAC de 2007. Las masas
atmicas se basan en la masa del 12C = 12.

Tabela A.1 Elementos qumicos nomes, smbolos e massas atmicas.

1 2
H He
1,0079 4,0026

A
Tabla Peridica de los Elementos Qumicos
3 4 5 6 7 8 9 10
Li Be B C N O F Ne
6,941 9,0122 10,811 12,011 14,007 15,999 18,998 20,180

11 12 13 14 15 16 17 18
Na Mg Al Si P S Cl Ar
22,990 24,305 26,982 28,086 30,974 32,065 35,453 39,948
3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36
K Ca Sc Ti V Cr Mn Fe Co Ni Cu Zn Ga Ge As Se Br Kr
39,098 40,078 44,956 47,867 50,942 51,996 54,938 55,845 58,933 58,693 63,546 65,38 69,723 72,64 74,922 78,96 79,904 83,798

37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54
Rb Sr Y Zr Nb Mo Tc Ru Rh Pd Ag Cd In Sn Sb Te I Xe
85,468 87,62 88,906 91,224 92,906 95,96 - 101,07 102,91 106,42 107,87 112,41 114,82 118,71 121,76 127,60 126,90 131,29

55 56 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86
Cs Ba 57-71 Hf Ta W Re Os Ir Pt Au Hg Tl Pb Bi Po At Rn
132,91 137,33 178,49 180,95 183,84 186,21 190,23 192,22 195,08 196,97 200,59 204,38 207,2 208,98 - - -

87 88 104 105 106 107 108 109 110 111

Fr Ra 89-103 Rf Db Sg Bh Hs Mt Ds Rg
- - - - - - - - - -

57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71
La Ce Pr Nd Pm Sm Eu Gd Tb Dy Ho Er Tm Yb Lu
138,91 140,12 140,91 144,24 - 150,36 151,96 157,25 158,93 162,50 164,93 167,26 168,93 173,05 174,97

89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103

Ac Th Pa U Np Pu Am Cm Bk Cf Es Fm Md No Lr
- 232,04 231,04 238,03 - - - - - - - - - - -

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 A
Tabla A.2 Elementos qumicos ordenados por el nmero atmico.
512

Nmero Densidad a Punto de Punto de Ao de la

Nombre Smbolo Masa atmica (A) Descubridor(es)
atmico (Z) 20C fusin (C) ebullicin (C) descubrimiento
1 Hidrgeno H 1,00794 g/mol 0,084 g/l -259.1 C -252,9 C 1766 Cavendish
2 Helio He 4,002602 g/mol 0,17 g/l -272,2 C -268,9 C 1895 Ramsay y Cleve
3 Litio Li 6,941 g/mol 0,53 g/cm3 180,5 C 1317 C 1817 Arfvedson
4 Berilio Be 9,012182 g/mol 1,85 g/cm3 1278 C 2970 C 1797 Vauquelin
5 Boro B 10,811 g/mol 2,46 g/cm3 2300 C 2550 C 1808 Davy y Gay-Lussac
6 Carbono C 12,011 g/mol 3.51 g/cm3 3550 C 4827 C Pre-historia Desconocido
7 Nitrgeno / (Azoto) N 14,00674 g/mol L17 g/l -209.9 C -195,8 C 1772 Rutherford
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

8 Oxgeno 0 15,9994 g/mol 1,33 g/l -218.4 C -182,9 C 1774 Priestley y Scheele
9 Flor F 18,9984032 g/mol 1,58 g/l -219.6 C -188,1 C 1886 Moissan
10 Nen Ne 20,1797 g/mol 0,84 g/l -248.7 C -246,1 C 1898 Ramsay y Travers
11 Sodio En la 22,989768 g/mol 0,97 g/cm3 97,8 C 892 C 1807 Davy
12 Magnesio Mg 24,305 g/mol 1,74 g/cm3 648,8 C 1107C 1755 Black
13 Aluminio Al 26,981539 g/mol 2,70 g/cm3 660,5 C 2467 C 1825 Oersted
14 Silicio Si 28,0855 g/mol 2,33 g/cm3 1410C 2355 C 1824 Berzelius
15 Fsforo P 30,973762 g/mol 1.82 g/cm3 44 (P4) C 280 (P4) C 1669 Brandt
16 Azufre S 32,066 g/mol 2.06 g/cm3 113 C 444,7 C Pre-historia Desconocido
17 Cloro Cl 35,4527 g/mol 2,95 g/l -34.6 C -101 C 1774 Scheele
18 Argn Aire 39,948 g/mol 1,66 g/l -189.4 C -185,9 C 1894 Ramsay y Rayleigh
19 Potasio K 39,0983 g/mol 0,86 g/cm3 63,7 C 774 C 1807 Davy
20 Calcio Ca 40,078 g/mol 1,54 g/cm3 839 C 1487 C 1808 Davy
21 Escandio Sc 44,95591 g/mol 2,99 g/cm3 1539C 2832 C 1879 Nilson
22 Titanio Ti 47,88 g/mol 4,51 g/cm3 1660 C 3260 C 1791 Gregor y Klaproth

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

23 Vanadio V 50,9415 g/mol 6,09 g/cm3 1890 C 3380 C 1801 Del Ro
24 Cromio / Cromo Cr 51,9961 g/mol 7.14 g/cm3 1857C 2482 C 1797 Vauquelin
25 Manganeso Mn 54.93805 g/mol 7.44 g/cm3 1244 C 2097 C 1774 Galin
26 Hierro Fe 55,847 g/mol 7,87 g/cm3 1535 C 2750 C Pre-historia Desconocido
27 Cobalto Co 58,9332 g/mol 8,89 g/cm3 1495 C 2870 C 1735 Brandt
28 Nquel Ni 58,69 g/mol 8,91 g/cm3 1453 C 2732 C 1751 Cronstedt
29 Cobre Cu 63,546 g/mol 8,92 g/cm3 1083.5 C 2595 C Pre-historia Desconocido
30 Zinc Zn 65,39 g/mol 7,14 g/cm3 419,6 C 907 C Pre-historia Desconocido
31 Galio Ga 69,723 g/mol 5,91 g/cm3 29,8 C 2403 C 1875 Lecoq de Boiskaudran
32 Germanio Ge 72,61 g/mol 5,32 g/cm3 937,4 C 2830 C 1886 Winkler
33 Arsnico Las 74,92159 g/mol 5,72 g/cm3 613 C 613 (sublimiert) C ca. 1250 Albertus Magnus
34 Selenio Se 78.96 g/mol 4.82 g/cm3 217 C 685 C 1817 Berzelius
 Nmero Densidad a Punto de Punto de Ao de la
Nombre Smbolo Masa atmica (A) Descubridor(es)
atmico (Z) 20C fusin (C) ebullicin (C) descubrimiento
35 Bromo Br 79.904 g/mol 3,14 g/cm3 -7,3 C 58.8 C 1826 Balard
36 Criptn Kr 83.8 g/mol 3,48 g/l -156,6 C -152,3 C 1898 Ramsay y Travers
37 Rubidio Rb 85.4678 g/mol 1,53 g/cm3 39 C 688 C 1861 Bunsen y Kirchhoff
38 Estroncio Sr 87.62 g/mol 2,63 g/cm3 769 C 1384 C 1790 Crawford
39 itrio Y 88.90585 g/mol 4,47 g/cm3 1523 C 3337 C 1794 Gadolin
40 Zirconio Zr 91.224 g/mol 6,51 g/cm3 1852 C 4377 C 1789 Klaproth
41 Niobio Nb 92.90638 g/mol 8.58 g/cm3 2468 C 4927 C 1801 Hatchet
42 Molibdeno Mo 95.94 g/mol 10.28 g/cm3 2617C 5560 C 1778 Scheele
43 Tecnecio Tc 98.9063 g/mol 11.49 g/cm3 2172C 5030 C 1937 Perrier y Segr
44 Rutenio Ru 101.07 g/mol 12,45 g/cm3 2310C 3900 C 1844 Claus
45 Rodio Rh 102,9055 g/mol 12,41 g/cm3 1966 C 3727 C 1803 Wollaston
46 Paladio Pd 106.42 g/mol 12,02 g/cm3 1552 C 3140 C 1803 Wollaston
47 Plata Ag 107.8682 g/mol 10,49 g/cm3 961,9 C 2212 C Pre-historia Desconocido
48 Cadmio Cd 112.411 g/mol 8,64 g/cm3 321 C 765 C 1817 Stromeyer y Hermann
49 indio In 114.82 g/mol 7,31 g/cm3 156,2 C 2080 C 1863 Reich y Richter
50 Estao Sn 118.71 g/mol 7.29 g/cm3 232 C 2270 C Pre-historia Desconocido
51 Antimonio Sb 121.75 g/mol 6.69 g/cm3 630,7 C 1750 C Pre-historia Desconocido
52 Telurio Te 127.6 g/mol 6,25 g/cm3 449,6 C 990 C 1782 Von Reichenstein
53 Yodo I 128,90447 g/mol 4,94 g/cm3 113.5 C 184,4 C 1811 Courtois
54 Xenn Xe 131,29 g/mol 4,49 g/l -111,9 C -107 C 1898 Ramsay y Travers
55 Cesio Cs 132.90543 g/mol 1,90 g/cm3 28,4 C 690 C 1860 Kirchhoff y Bunsen

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

56 Bario Ba 137.327 g/mol 3,65 g/cm3 725 C 1640 C 1808 Davy
57 Lantano La 138.9055 g/mol 6,16 g/cm3 920 C 3454 C 1839 Mosander
58 Cerio Ce 140.115 g/mol 6.77 g/cm3 798 C 3257 C 1803 Von Hisinger y Berzelius
59 Praseodimio Pr 140.90765 g/mol 6.48 g/cm3 931 C 3212 C 1895 Von Welsbach
60 Neodimio Nd 144.24 g/mol 7.00 g/cm3 1010C 3127 C 1895 Von Welsbach
61 Promecio Pm 146.9151 g/mol 7,22 g/cm3 1080 C 2730 C 1945 Marinsky y Glendenin
62 Samario Sm 150,36 g/mol 7,54 g/cm3 1072 C 1778 C 1879 Lecoq de Boisbaudran
63 Europio Eu 151,965 g/mol 5,25 g/cm3 822 C 1597 C 1901 Demaay
64 Gadolinio Gd 157.25 g/mol 7,89 g/cm3 1311C 3233 C 1880 De Marignac
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

65 Terbio Tb 158.92534 g/mol 8,25 g/cm3 1360 C 3041C 1843 Mosander

66 Disprosio Dy 162.5 g/mol 8,56 g/cm3 1409 C 2335 C 1886 Lecoq de Boisbaudran
67 Holmio Ho 164.93032 g/mol 8.78 g/cm3 1470C 2720 C 1878 Soret
513

A
 A
Nmero Densidad a Punto de Punto de Ao de la
514

Nombre Smbolo Masa atmica (A) Descubridor(es)

atmico (Z) 20C fusin (C) ebullicin (C) descubrimiento
68 Erbio Er 167,26 g/mol 9,05 g/cm3 1522 C 2510 C 1842 Mosander
69 Tulio Tm 168,93421 g/mol 9,32 g/cm3 1545 C 1727 C 1879 Cleve
70 Iterbio Yb 173,04 g/mol 6,97 g/cm3 824 C 1193 C 1878 De Marignac
71 Lutecio Lu 174,967 g/mol 9.84 g/cm3 1656 C 3315 C 1907 Urbain
72 Hafnio Hf 178,49 g/mol 13,31 g/cm3 2150C 5400 C 1923 Coster y vn Hevesy
73 Tntalo Ta 180,9479 g/mol 16.68 g/cm3 2996 C 5425 C 1802 Ekeberg
74 Tungsteno W 183,85 g/mol 19.26 g/cm3 3407 C 5927 C 1783 Gebrder de Elhuyar
75 Renio Re 186,207 g/mol 21,03 g/cm3 3180C 5627 C 1925 Noddack. Tacke y Berg
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

76 Osino Los 190,2 g/mol 22.61 g/cm3 3045 C 5027 C 1803 Tenant
77 Iridio Ir 192,22 g/mol 22.65 g/cm3 2410 C 4130 C 1803 Tenant y andere
78 Platino Pt 195,08 g/mol 21,45 g/cm3 1772 C 3827 C 1557 Scaliger
79 Oro Au 196,96654 g/mol 19,32 g/cm3 1064.4 C 2940 C Pre-historia Desconocido
80 Mercurio Hg 200,59 g/mol 13,55 g/cm3 -38,9 C 356,6 C Pre-historia Desconocido
81 Talio Tl 204,3833 g/mol 11,85 g/cm3 303,6 C 1457 C 1861 Crookes
82 Plomo Pb 207,2 g/mol 11.34 g/cm3 327,5 C 1740 C Pre-historia Desconocido
83 Bismuto Bi 208,98037 g/mol 9.80 g/cm3 271.4 C 1560 C 1540 Agrcola
84 Polonio Po 208,9824 g/mol 9,20 g/cm3 254 C 962 C 1898 Marie y Pierre Curie
85 Astato At 209,9871 g/mol 302 C 337 C 1940 Corson y MacKenzie
86 Radn Rn 222,0176 g/mol 9,23 g/l -71 C -61,8 C 1900 Dom
87 Francio Fr 223,0197 g/mol 27 C 677 C 1939 Perey
88 Radio Ra 226,0254 g/mol 5,50 g/cm3 700 C 1140 C 1898 Marie y Pierre Curie
89 Actinio Ac 227,0278 g/mol 10,07 g/cm3 1047 C 3197 C 1899 Debierne
90 Torio Th 232,0381 g/mol 11,72 g/cm3 1750 C 4787 C 1829 Berzelius
91 Protactinio Pa 231,0359 g/mol 15.37 g/cm3 1554C 4030 C 1917 Soddy, Cranston y Halin

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

92 Uranio U 238,0289 g/mol 18,97 g/cm3 1132.4 C 3818 C 1789 Klaproth
93 Neptunio Np 237,0482 g/mol 20,48 g/cm3 640 C 3902 C 1940 McMillan y Abelson
94 Plutonio Pu 244,0642 g/mol 19,74 g/cm3 641 C 3327 C 1940 Seaborg
95 Americio Am 243,0614 g/mol 13.67 g/cm3 994 C 2607 C 1944 Seaborg
96 Curio Cm 247,0703 g/mol 13,51 g/cm3 1340 C 3110C 1944 Seaborg
97 Berquelio Bk 247.0703 g/mol 13,25 g/cm3 986 C 1949 Seaborg
98 Californio Cf 251,0796 g/mol 15,1 g/cm3 900 C 1950 Seaborg
99 Einstenio Es 252,0829 g/mol 860 C 1952 Seaborg
100 Fermio Fm 257.0951 g/mol 1527C 1952 Seaborg
101 Mendelevio Md 258.0986 g/mol 1955 Seaborg
102 Nobelio En el 259.1009 g/mol 1958 Seaborg
 Nmero Densidad a Punto de Punto de Ao de la
Nombre Smbolo Masa atmica (A) Descubridor(es)
atmico (Z) 20C fusin (C) ebullicin (C) descubrimiento
103 Laurencio Lr 260.1053 g/mol 1961 Ghiorso
104 Rutherfordio Rf 261.1087 g/mol 1964/69 Flerow oder Ghiorso
105 Dubnio Db 262.1138 g/mol 1967/70 Flerow oder Ghiorso
106 Seaborgio Sg 263.1182 g/mol 1974 Oganessian
107 Bohrio Bh 262.1229 g/mol 1976 Oganessian
108 Hassio Hs 265 g/mol 1984 Sociedad para Descubrimiento de iones
Pesados
109 Meitnerio Mt 266 g/mol 1982 Sociedad para Descubrimiento de iones
Pesados
110 Darmstadio Ds 269 g/mol 1994 Sociedad para Descubrimiento de iones
Pesados
111 Roentgenio Rg 272 g/mol 1994 Sociedad para Descubrimiento de iones
Pesados
112 Ununbio Uub 277 g/mol 1996 Sociedad para Descubrimiento de iones
Pesados
113 Ununtrio Uut
114 Ununquadio Uuq
115 Ununpentio Uup
116 Ununhexio Uuh
117 Ununseptio Uus
118 Ununoctio Uuo

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Farmacopea Brasilea, 5 edicin
515

A
Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 517

ANEXO B UNIDADES DEL SISTEMA

INTERNACIONAL (SI) USADAS EN LA
FARMACOPEA Y LAS EQUIVALENCIAS CON
OTRAS UNIDADES

El sistema internacional posee siete unidades de base, utilizadas como referencia en todas las mediciones y relacionadas
en la Tabla B.1

Tabla B.1 Las siete unidades de base del SI

Magnitud Unidad Smbolo Definicin de la unidad
Largo l, h, r, x Metro m El metro es el largo del trayecto recorrido por la luz en el vaco
durante un intervalo de tiempo de 1/299792458 del segundo. As, la
velocidad de la luz en el vaco, c0, es exactamente igual a 299792458
m/s.
Masa kilogramo kg Es igual a la masa del prototipo internacional del kilogramo, m(K),
M
Tiempo
T
segundo s
que es exactamente igual a 1 kg
El segundo es la duracin de 9.192.631.770 perodos de la radiacin,
correspondiente a la transicin entre los dos niveles hiperfinos del
B
estado fundamental del tomo de csio133 y se refiere al tomo de
cesio en reposo, a una temperatura de 0K.
Corriente elctrica ampere A El ampere es la intensidad de una corriente elctrica constante que,
I, i mantenida en dos conductores paralelos, rectilneos, de largo infinito,
de seccin circular insignificante, y situados a la distancia de 1 metro
entre s, en el vaco, producira entre estos conductores una fuerza
igual a 2 x 10-7 newton por metro de largo
Temperatura kelvin k El kelvin, unidad de temperatura termodinmica, es la fraccin
termodinmica 1/273,16 de la temperatura termodinmica en el punto trplice
T del agua. As, la temperatura del punto trplice del agua, Tpta, es
exactamente igual a273,16 K.
Cantidad de mol mol 1 1.El mol es la cantidad de materia de un sistema conteniendo tantas
sustancia N entidades elementares como tomos existen en 0,012 quilogramos de
carbono 122.
2.Cuando se utiliza el mol, las entidades elementares deben ser
especificadas, pudiendo ser tomos, molculas, iones, electrones,
as como otras partculas, o agrupamientos especificados de esas
partculas.
3.As, la masa molar del carbono 12, M(12C), es exactamente igual
a 12 g/mol. Se refiere a los tomos de carbono 12 libres, en reposo y
en su estado fundamental.
Intensidad candela cd La candela es la intensidad luminosa, en una dada direccin de una
luminosa Iv fuente que emite una radiacin monocromtica de frecuencia 540 x
1012 hertz y cuya intensidad energtica en esa direccin es 1/683
watt por estereorradin.
As, la eficacia luminosa espectral, K, de la radiacin monocromtica
de frecuencia 540 x 1012 Hz es exactamente igual a 683 lm/W

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 518 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Todas las otras magnitudes son descritas como magnitudes derivadas y medidas como unidades derivadas. En la Tabla
B.2 estn listadas algunas magnitudes derivadas.

Tabla B.2 Algunas magnitudes derivadas.

Magnitud derivada Representacin Unidad derivada Smbolo
rea A metro cuadrado m2
volumen metro cbico m3
velocidad metro por segundo m/s
aceleracin a metro por segundo al cuadrado m/s2
nmero de ondas , inverso del metro m-1
masa especfica p kilogramo por metro cbico kg/m3
densidad superficial A kilogramo por metro cuadrado kg/m2
volumen especfico metro cbico por kilogramo m3/kg
densidad de corriente j ampere por metro cuadrado A/m2
campo magntico H ampere por metro A/m
concentracin c mol por metro cbico mol/m3
densidad de masa , kilogramo por metro cbico kg/m3
luminancia Lv candela por metro cuadrado cd/m2
ndice de refraccin n un 1
permeabilidad relativa r un 1

B Note que el ndice de refraccin y la permeabilidad relativa son ejemplos de magnitudes adimensionales, para las cuales
la unidad del SI es el nmero uno (1), a pesar de que esta unidad no sea escrita.

Algunas unidades derivadas reciben nombre especial, siendo ese simplemente una forma compacta de expresin de
combinaciones de unidades de base que son usadas frecuentemente. Entonces, por ejemplo, el joule, smbolo J, es por
definicin, igual a m2 kg s-2. Existen actualmente 22 nombres especiales para unidades aprobados para uso en el SI, que
estn listados en la Tabla B.3.

Tabla B.3 Unidades derivadas con nombres especiales en el SI.

Expresin en trminos
Nombre de la Smbolo de
Magnitud derivada de otras
unidad derivada la unidad
unidades
ngulo plano Radin rad m/m = 1
ngulo slido estereorradin sr m2/m2 = 1
Frecuencia Hertz Hz s-1
Fuerza newton N m kg s-2
presin, tensin pascal Pa N/m2 = m-1 kg s-2
energa, trabajo, cantidad de calor Joule J N m = m2 kg s-2
potencia, flujo de energa Watt W J/s = m2 kg s-3
carga elctrica, cantidad de electricidad coulomb C sA
diferencia de potencial elctrico Volt V W/A = m2 kg s-3 A-1
Capacitancia Farad F C/V = m-2 kg-1 s4 A2
resistencia elctrica Ohm V/A = m2 kg s-3 A-2
conductancia elctrica siemens S A/V = m-2 kg-1 s3 A2
flujo de induccin magntica weber Wb V s = m2 kg s-2 A-1
induccin magntica Tesla T Wb/m2 = kg s-2 A-1
Inductancia Henry H Wb/A = m2 kg s-2 A-2
temperatura Celsius grado Celsius C K
flujo luminoso lumen lm cd sr = cd
Iluminancia Lux lx lm/m2 = m-2 cd
actividad de un radionclido becquerel Bq s-1
dosis absorbida, energa especfica (comunicada), Gray Gy J/kg = m2 s-2
kerma
equivalente de dosis, equivalente de dosis ambiente sievert Sv J/kg = m2 s-2
actividad cataltica Katal kat s-1 mol

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 519

A pesar de que el Hertz y el becquerel sean iguales al inver- para especificar la magnitud. Esto se aplica tanto a los tex-
so del segundo, el Hertz es usado solamente para fenme- tos cientficos como a los instrumentos de medicin (esto
nos cclicos, y el becquerel, para procesos estocsticos en es, la lectura de salida de un instrumento debe indicar la
el decaimiento radioactivo. magnitud medida y la unidad).

La unidad de temperatura Celsius es el grado Celsius, oC,
que es igual en magnitud al kelvin, K, la unidad de tempe-
ratura termodinmica. La magnitud temperatura Celsius t
est relacionada con la temperatura termodinmica T por la
ecuacin t/oC = T/K 273,15.
El sievert, tambin, es usado para las magnitudes: equiva-
lentes de dosis direccional y equivalente de dosis individual.
Los cuatro ltimos nombres especiales de las unidades de
la Tabla B.3 fueron adoptados especficamente para res-
guardar mediciones relacionadas a la salud humana.
Para cada magnitud, existe solamente una unidad SI (a pe-
sar de que pueda estar expresada frecuentemente de dife-
rentes modos, por el uso de nombres especiales). Sin em-
bargo, la misma unidad SI puede ser usada para expresar
los valores de diversas magnitudes diferentes (por ejemplo,
la unidad SI para la relacin J/K puede ser usada para ex-
presar tanto el valor de la capacidad calorfica como de la
entropa). Por tanto, es importante no usar la unidad sola
Tabla B.4 Mltiplos y submltiplos del SI Prefijos y smbolos.
Las magnitudes adimensionales, tambin llamadas de
magnitudes de dimensin uno, son usualmente definidas
como la razn entre dos magnitudes de la misma natura-
leza (por ejemplo, el ndice de refraccin es la razn entre
dos velocidades, y la permeabilidad relativa es la razn
entre la permeabilidad de un medio dielctrico y la del
vaco). Entonces la unidad de una magnitud adimensional
es la razn entre dos unidades idnticas del SI, por tanto
es siempre igual a uno (1). Sin embargo, al expresarse los
valores de magnitudes adimensionales, la unidad uno (1)
no es escrita.
MLTIPLOS Y SUBMLTIPLOS DE LAS UNIDADES
DEL SI
Un conjunto de prefijos fue adoptado para uso con las uni-
dades del SI, a fin de expresar los valores de magnitudes
que son mucho mayores o mucho menores que la unidad SI
usada sin un prefijo. Los prefijos SI estn listados en la Ta-
bla B.4. Ellos pueden ser usados con cualquier unidad de
base y con las unidades derivadas con nombres especiales.
B

Factor Nombre Smbolo Factor Nombre Smbolo

10 1
Deca Da 10 -1
deci d
102 hecto H 10-2 centi c
103 Kilo K 10- 3 mili m
106 mega M 10-6 micro
109 Giga G 10-9 nano n
101 2 Tera T 10-12 pico p
101 5 Peta P 10-15 femto f
101 8 Exa E 10-18 atto a
102 1 Zetta Z 10-21 zepto z
1024 Yotta Y 10-24 yocto y

Cuando los prefijos son usados, el nombre del prefijo y el
de la unidad son combinados para formar una palabra ni-
ca y, similarmente, el smbolo del prefijo y el smbolo de
la unidad son escritos sin espacios, para formar un smbo-
lo nico que puede ser elevado a cualquier potencia. Por
ejemplo, se puede escribir: quilmetro, km; microvolt, V;
femtosegundo, fs; 50 V/cm = 50 V(10-2 m)-1 = 5000 V/m.
Cuando las unidades de base y las unidades derivadas son
usadas sin cualquier prefijo, el conjunto de unidades re-
sultante es considerado coherente. El uso de un conjunto
de unidades coherentes tiene ventajas tcnicas. Sin embar-
go, el uso de los prefijos es conveniente porque l evita la
necesidad de emplear factores de 10n, para expresar los
valores de magnitudes muy grandes o muy pequeas. Por
ejemplo, el largo de una conexin qumica es ms conve-
nientemente expresado en nanmetros, nm, que en metros,
m, y la distancia entre Londres y Paris es ms convenien-
temente expresada en quilmetros, km, que en metros, m.
El kilogramo, kg, es una excepcin, porque a pesar de que
l sea una unidad de base el nombre ya incluye un prefijo,
por razones histricas. Los mltiplos y los submltiplos
del kilogramo son escritos combinndose los prefijos con
el gramo: luego, se escribe miligramo, mg, y no microki-
logramo, kg.
UNIDADES FUERA DEL SI
El SI es el nico sistema de unidades que es reconocido
universalmente, de modo que l tiene una ventaja distinta
cuando se establece un dilogo internacional. Otras unida-
des, es decir, unidades no SI, son generalmente definidas
en trminos de unidades SI. El uso del SI, tambin, sim-
plifica la enseanza de la ciencia. Por todas esas razones
el empleo de las unidades SI es recomendado en todos los
campos de la ciencia y de la tecnologa.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 520 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

A pesar de que algunas unidades no SI sean todava am-
pliamente usadas, otras, a ejemplo del minuto, de la hora
y del da, como unidades de tiempo, sern siempre usadas
porque ellas estn arraigadas profundamente en la nuestra
cultura. Otras son usadas, por razones histricas, para aten-
der a las necesidades de grupos con intereses especiales, o
porque no existe alternativa SI conveniente.
Los cientficos deben tener la libertad para utilizar unida-
des no SI si ellos las consideran ms adecuadas a su prop-
sito. Sin embargo, cuando unidades no SI son utilizadas, el
factor de conversin para el SI debe ser siempre incluido.
Algunas unidades no SI estn listadas en la Tabla B.5, con
su factor de conversin para el SI.

Tabla B.5 Algunas unidades no SI.

Magnitud Unidad Smbolo Relacin con el SI

Tiempo Minuto min 1 min = 60 s
Hora h 1 h= 3600 s
Da d 1 d = 86400 s
Volumen Litro L 1 L = 1 dm3
Masa Tonelada t 1 t = 1000 kg
Energa Electronvolt eV 1 eV ~ 1,602 x 10-19 J
Presin Bar bar 1 bar = 100 kPa = 750,064 mm Hg = 0,987 atm
milmetro de mercurio mm Hg 1 mm Hg = 133,322 Pa = 10-3 bar = 10-3 atm 760 mm
Hg = 1 atm = 1, 013 bar = 101,324 kPa
Largo Angstrom1 1 = 10-2m

B Fuerza
milla nutica
Dina
M
dyn
1 M = 1852 m
1 dyn = 10-5 N
Energa Erg erg 1 erg = 10-7 J
__________________________

1El Diccionario Houaiss de la Lengua Portuguesa admite esa palabra escrita sin el smbolo sobre la a.

Los smbolos de las unidades comienzan con letra mays-
cula cuando se trata de nombre propio (por ejemplo, ampe-
re, A; kelvin, K; hertz, Hz; coulomb, C). En los otros casos
ellos siempre comienzan con letra minscula (por ejem-
plo, metro, m; segundo, s; mol, mol). El smbolo del litro
es una excepcin: la letra mayscula es usada para evitar
confusin entre a letra minscula l y el nmero uno (1). El
smbolo de la milla nutica es presentado aqu como M; sin
embargo no hay un acuerdo general sobre ningn smbolo
para la milla nutica.
En la Tabla B.6 estn listados otros ejemplos de unidades
fuera del SI y de uso, adems corriente, pero, que deben ser
evitadas. Cuando mencionadas en un documento conviene
indicar su equivalencia con la unidad SI.

Tabla B.6 Otros ejemplos de unidades fuera del SI.

Nombre Smbolo Valor en unidad SI Descripcin
Curie Ci 1 Ci=3,7x1010Bq Expresa la actividad de
radionuclidos
Roentgen R 1 R=2,58x10-4 C/Kg Espresa la exposicin a las
radiaciones X o y
Rad Rad o rd 1 rad= 1cGy=10-2Gy Expresa la dosis absorbida de las
radiaciones ionizantes
Rem Rem 1 rem=1cSv=10-2Sv Expresa equivalente de dosis en
radioproteccin
Torr Torr 1 Torr=(101 325/760) Pa Espresa presin, actualmente est en
desuso
Atmosfera normal Atm 1 Atm=760mm Hg=1, 063bar = 101,324kPa Espresa la presin atmosfrica
estndar, actualmente est en desuso
cal Cal 1 Cal= 4,18 J Expresa la cantidad de calor (energa)
necesaria para elevar de 14,50C a
15,50C la temperatura de 1 gramo de
agua. actualmente por convencin 1
Cal =1000Cal = 1Kcal

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.


Los smbolos de las unidades son impresos en tipo romano
(vertical), independientemente del tipo usado en lo restante
del texto. Ellos son entidades matemticas y no abreviatu-
ras. Ellos nunca son seguidos por un punto (excepto en el
final de una oracin) ni por una s para formar el plural. Es
obligatorio el uso de la forma correcta para los smbolos
de las unidades, conforme ilustrado por los ejemplos pre-
sentados en la publicacin completa del SI. Algunas veces
los smbolos de las unidades pueden tener ms de una le-
tra. Ellos son escritos en letras minsculas, excepto que
la primera letra es mayscula cuando el nombre es de una
persona. Sin embargo, cuando el nombre de una unidad
es escrito por extenso, debe comenzar con letra minscu-
la (excepto en el inicio de una oracin), para distinguir el
nombre de la unidad del nombre de la persona.
Al escribirse el valor de una magnitud, como el producto
de un valor numrico y una unidad, ambos, el nmero y
la unidad deben ser tratados por las reglas ordinarias del
lgebra. Por ejemplo, la ecuacin T = 293 K puede ser es-
crita igualmente T/K = 293. Ese procedimiento es descri-
to como el uso del clculo de magnitudes, o el lgebra de
magnitudes. A veces esa notacin es til para identificar el
encabezamiento de columnas de tablas, o la denominacin
de los ejes de grficos, de modo que las entradas en la tabla
o la identificacin de los puntos sobre los ejes son simples
nmeros.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
Farmacopea Brasilea, 5 edicin 521
En la formacin de productos o cocientes de unidades, se
aplican las reglas normales del lgebra. En la formacin
de productos de unidades, se debe dejar un espacio entre
las unidades (alternativamente se puede colocar un punto
en el medio de la altura de la lnea, como smbolo de mul-
tiplicacin).
En la formacin de nmeros el marcador decimal puede ser
o un punto o una coma, de acuerdo con las circunstancias
apropiadas. Para documentos en la lengua inglesa es usual
el punto, pero en Brasil y para muchas lenguas de Europa
continental y en otros pases, la coma es de uso ms comn.
Cuando un nmero tiene muchos dgitos es usual agrupar
las cifras en bloques de tres, antes y despus de la coma,
para facilitar la lectura. Eso no es esencial, pero se hace
frecuentemente, y generalmente es muy til. Cuando esto
se hace, los grupos de tres dgitos deben ser separados por
apenas un espacio pequeo; no se debe usar ni un punto y
ni una coma entre ellos. La inseguridad del valor numrico
de una magnitud puede ser convenientemente expresada,
explicitndose la inseguridad de los ltimos dgitos signi-
ficativos, entre parntesis, despus del nmero. Ejemplo:
123 456,789 0
Para informaciones adicionales, ver la pgina web del
B
BIPM http:// www.bipm.org o la Publicacin completa del
SI, 8a edicin, que est disponible en la pgina http://www.
bipm.org/en/si.
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
 Tabla C. 1 Solventes para cromatografa y sus propiedades.

Masa ndice de Presin de

ndice Punto Constante Momento
Solvente Frmula Molecular refraccin vapor (mbar
de Polaridad ebullicin CO Dielctrica Dipolo
(g/mol) n 20 d 20C)
n-Heptano - C7H16 100,21 1,388 98,4 48
w-Hexano 0,0 C6H14 86,18 1,375 68,9 160 1,9 0
Ciclohexano 0,0 C6H12 84,16 1,427 80,7 104 2,0 0
Isooctano 0,4 C8H18 114,23 1,392 99,2 1,9
Tetracloruro de carbono 1,7 CC14 153,82 1,460 76,5 120 2,2 0
Tolueno 2,3 c6h5ch3 92,14 1,496 110,6 29 2,4 0,36
Cloroformo 4,4 CHC13 119,38 1,446 61,7 210 4,8 1,01
Dicloruro de etileno 3,7 cich2ch2ci 98,96 1,445 83,5 87 10,6
Cloruro de metileno 3,4 ch2ci2 84,93 1,424 40,0 453 9,1 1,60
1-Butanol 3,9 CH3(CH2)30H 74,12 1,399 117,2 17,8 1,66
Acetonitrilo 6,2 CH3CN 41,05 1,344 81,6 37,5 3,92
Alcohol isoproplico 4,3 CH3CH(OH)CH3 60,11 1,378 82,4 43 18,3 1,66
Acetato de etilo 4,3 ch3cooc2h5 88,12 1,372 77,1 97 6,0 1,78
Acetona 5,4 CH3COCH3 58,08 1,359 56,2 233 20,7 2,88
Etanol 5,2 c2h5oh 46,07 1,361 78,5 59 24,3 1,70
Dioxano 4,8 c4h8o2 88,11 1,422 101,0 41 2,2
Tetrahidrofurano 4,2 c4h8o 72,11 1,405 67,0 200 7,4 1,63
Metanol 6,6 CH3OH 32,04 1,329 65,0 128 32,6 1,70

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

CROMATOGRAFIA

Agua 9,0 h2o 18,01 1,333 100,0 23 80,2 1,85

ANEXO C- PARA SOLVENTES
Farmacopea Brasilea, 5 edicin
523

C
Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.
 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 525

ANEXO D ALCOHOLIMETRA

Tabla D.1 Tabla Alcoholimetra (20 C)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

0,0 0,0 998,20 0,999997
0,1 0,08 998,05 0,999846
0,2 0,16 997,90 0,999696
0,3 0,24 997,75 0,999546
0,4 0,32 997,59 0,999386
0,5 0,40 997,44 0,999235
0,6 0,47 997,29 0,999085
0,7 0,55 997,14 0,998935
0,8 0,63 996,99 0,998785
0,9 0,71 996,85 0,998644

1,0 0,79 996,70 0,998494

1,1 0,87 996,55 0,998344
1,2 0,95 996,40 0,998194
1,3 1,03 996,25 0,998043
1,4 1,11 996,11 0,997903
1,5 1,19 995,96 0,997753
1,6 1,27 995,81 0,997602
1,7 1,35 995,67 0,997462
1,8 1,43 995,52 0,997312
1,9 1,51 995,38 0,997172

2,0 1,59 995,23 0,997021

2,1 1,67 995,09 0,996881
2,2 1,75 994,94 0,996731

D
2,3 1,82 994,80 0,996591
2,4 1,90 994,66 0,996450
2,5 1,98 994,51 0,996300
2,6 2,06 994,37 0,996160
2,7 2,14 994,23 0,996020
2,8 2,22 994,09 0,995879
2,9 2,30 993,95 0,995739

3,0 2,38 993,81 0,995599

3,1 2,46 993,66 0,995449
3,2 2,54 993,52 0,995308
3,3 2,62 993,38 0,995168
3,4 2,70 993,24 0,995028
3,5 2,78 993,11 0,994898
3,6 2,86 992,97 0,994757
3,7 2,94 992,83 0,994617
3,8 3,02 992,69 0,994477
3,9 3,10 992,55 0,994337

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 526 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

4,0 3,18 992,41 0,994196
4,1 3,26 992,28 0,994066
4,2 3,34 992,14 0,993926
4,3 3,42 992,00 0,993786
4,4 3,50 991,87 0,993655
4,5 3,58 991,73 0,993515
4,6 3,66 991,59 0,993375
4,7 3,74 991,46 0,993245
4,8 3,82 991,32 0,993104
4,9 3,90 991,19 0,992974

5,0 3,98 991,06 0,992844

5,1 4,06 990,92 0,992704
5,2 4,14 990,79 0,992573
5,3 4,22 990,65 0,992433
5,4 4,30 990,52 0,992303
5,5 4,38 990,39 0,992173
5,6 4,46 990,26 0,992042
5,7 4,54 990,12 0,991902
5,8 4,62 989,99 0,991772
5,9 4,70 989,86 0,991642

6,0 4,78 989,73 0,991512

6,1 4,87 989,60 0,991381
6,2 4,95 989,47 0,991251
6,3 5,03 989,34 0,991121
6,4 5,11 989,21 0,990991
6,5 5,19 989,08 0,990860
6,6 5,27 988,95 0,990730
6,7 5,35 988,82 0,990600
6,8 5,43 988,69 0,990470

D 6,9

7,0
5,51

5,59
988,56

988,43
0,990339

0,990209
7,1 5,67 988,30 0,990079
7,2 5,75 988,18 0,989959
7,3 5,83 988,05 0,989828
7,4 5,91 987,92 0,989698
7,5 5,99 987,79 0,989568
7,6 6,07 987,67 0,989448
7,7 6,15 987,54 0,989318
7,8 6,23 987,42 0,989197
7,9 6,32 987,29 0,989067

8,0 6,40 987,16 0,988937

8,1 6,48 987,04 0,988817
8,2 6,56 986,91 0,988686
8,3 6,64 986,79 0,988566
8,4 6,72 986,66 0,988436
8,5 6,80 986,54 0,988316
8,6 6,88 986,42 0,988196
8,7 6,96 986,29 0,988065
8,8 7,04 986,17 0,987945
8,9 7,12 986,05 0,987825

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 527

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

9,0 7,20 985,92 0,987695
9,1 7,29 985,80 0,987574
9,2 7,37 985,68 0,987454
9,3 7,45 985,56 0,987334
9,4 7,53 985,44 0,987214
9,5 7,61 985,31 0,987084
9,6 7,69 985,19 0,986963
9,7 7,77 985,07 0,986843
9,8 7,85 984,95 0,986723
9,9 7,93 984,83 0,986603

10,0 8,01 984,71 0,986482

10,1 8,10 984,59 0,986362
10,2 8,18 984,47 0,986242
10,3 8,26 984,35 0,986122
10,4 8,34 984,23 0,986002
10,5 8,42 984,11 0,985881
10,6 8,50 983,99 0,985761
10,7 8,58 983,88 0,985651
10,8 8,66 983,76 0,985531
10,9 8,75 983,64 0,985411

11,0 8,83 983,52 0,985290

11,1 8,91 983,40 0,985170
11,2 8,99 983,29 0,985060
11,3 9,07 983,17 0,984940
11,4 9,15 983,05 0,984819
11,5 9,23 982,94 0,984709
11,6 9,32 982,82 0,984589
11,7 9,40 982,70 0,984469
11,8 9,48 982,59 0,984359
11,9

12,0
9,56

9,64
982,47

982,35
0,984238

0,984118
D
12,1 9,72 982,24 0,984008
12,2 9,80 982,12 0,983888
12,3 9,89 982,01 0,983778
12,4 9,97 981,89 0,983657
12,5 10,05 981,78 0,983547
12,6 10,13 981,67 0,983437
12,7 10,21 981,55 0,983317
12,8 10,29 981,44 0,983207
12,9 10,37 981,32 0,983086

13,0 10,46 981,21 0,982976

13,1 10,54 981,10 0,982866
13,2 10,62 980,98 0,982746
13,3 10,70 980,87 0,982636
13,4 10,78 980,76 0,982525
13,5 10,87 980,64 0,982405
13,6 10,95 980,53 0,982295
13,7 11,03 980,42 0,982185
13,8 11,11 980,31 0,982075
13,9 11,19 980,19 0,981954

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 528 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

14,0 11,27 980,08 0,981844
14,1 11,36 979,97 0,981734
14,2 11,44 979,86 0,981624
14,3 11,52 979,75 0,981514
14,4 11,60 979,64 0,981403
14,5 11,68 979,52 0,981283
14,6 11,77 979,41 0,981173
14,7 11,85 979,30 0,981063
14,8 11,93 979,19 0,980953
14,9 12,01 979,08 0,980842

15,0 12,09 978,97 0,980732

15,1 12,17 978,86 0,980622
15,2 12,26 978,75 0,980512
15,3 12,34 978,64 0,980402
15,4 12,42 978,53 0,980291
15,5 12,50 978,42 0,980181
15,6 12,59 978,31 0,980071
15,7 12,67 978,20 0,979961
15,8 12,75 978,09 0,979851
15,9 12,83 977,98 0,979740

16,0 12,91 977,87 0,979630

16,1 13,00 977,76 0,979520
16,2 13,08 977,65 0,979410
16,3 13,16 977,55 0,979310
16,4 13,24 977,44 0,979199
16,5 13,32 977,33 0,979089
16,6 13,41 977,22 0,978979
16,7 13,49 977,11 0,978869
16,8 13,57 977,00 0,978759

D 16,9

17,0
13,65

13,74
976,89

976,79
0,978648

0,978548
17,1 13,82 976,68 0,978438
17,2 13,90 976,57 0,978328
17,3 13,98 976,46 0,978218
17,4 14,07 976,35 0,978107
17,5 14,15 976,25 0,978007
17,6 14,23 976,14 0,977897
17,7 14,31 976,03 0,977787
17,8 14,40 975,92 0,977677
17,9 14,48 975,81 0,977566

18,0 14,56 975,71 0,977466

18,1 14,64 975,60 0,977356
18,2 14,73 975,49 0,977246
18,3 14,81 975,38 0,977136
18,4 14,89 975,28 0,977036
18,5 14,97 975,17 0,976925
18,6 15,06 975,06 0,976815
18,7 15,14 974,95 0,976705
18,8 15,22 974,85 0,976605
18,9 15,30 974,74 0,976495

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 529

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

19,0 15,39 974,63 0,976384
19,1 15,47 974,52 0,976274
19,2 15,55 974,42 0,976174
19,3 15,63 974,31 0,976064
19,4 15,72 974,20 0,975954
19,5 15,80 974,09 0,975843
19,6 15,88 973,99 0,975743
19,7 15,97 973,88 0,975633
19,8 16,05 973,77 0,975523
19,9 16,13 973,66 0,975413

20,0 16,21 973,56 0,975312

20,1 16,30 973,45 0,975202
20,2 16,38 973,34 0,975092
20,3 16,46 973,24 0,974992
20,4 16,55 973,13 0,974882
20,5 16,63 973,02 0,974771
20,6 16,71 972,91 0,974661
20,7 16,79 972,80 0,974551
20,8 16,88 972,70 0,974451
20,9 16,96 972,59 0,974341

21,0 17,04 972,48 0,974230

21,1 17,13 972,37 0,974120
21,2 17,21 972,26 0,974010
21,3 17,29 972,16 0,973910
21,4 17,38 972,05 0,973800
21,5 17,46 971,94 0,973689
21,6 17,54 971,83 0,973579
21,7 17,63 971,73 0,973479
21,8 17,71 971,62 0,973369
21,9

22,0
17,79

17,87
971,51

971,40
0,973259

0,973149
D
22,1 17,96 971,29 0,973038
22,2 18,04 971,18 0,972928
22,3 18,12 971,08 0,972828
22,4 18,21 970,97 0,972718
22,5 18,29 970,86 0,972608
22,6 18,37 970,75 0,972497
22,7 18,46 970,64 0,972387
22,8 18,54 970,53 0,972277
22,9 18,62 970,42 0,972167

23,0 18,71 970,31 0,972057

23,1 18,79 970,20 0,971946
23,2 18,87 970,09 0,971836
23,3 18,96 969,98 0,971726
23,4 19,04 969,87 0,971616
23,5 19,13 969,76 0,971506
23,6 19,21 969,65 0,971395
23,7 19,29 969,54 0,971285
23,8 19,38 969,43 0,971175
23,9 19,46 969,32 0,971065

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 530 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

24,0 19,54 969,21 0,970955
24,1 19,63 969,10 0,970844
24,2 19,71 968,99 0,970734
24,3 19,79 968,88 0,970624
24,4 19,88 968,77 0,970514
24,5 19,96 968,66 0,970404
24,6 20,05 968,55 0,970293
24,7 20,13 968,43 0,970173
24,8 20,21 968,32 0,970063
24,9 20,30 968,21 0,969953

25,0 20,38 968,10 0,969843

25,1 20,47 967,99 0,969732
25,2 20,55 967,87 0,969612
25,3 20,63 967,76 0,969502
25,4 20,72 967,65 0,969392
25,5 20,80 967,53 0,969272
25,6 20,89 967,42 0,969161
25,7 20,97 967,31 0,969051
25,8 21,05 967,19 0,968931
25,9 21,14 967,08 0,968821

26,0 21,22 966,97 0,968711

26,1 21,31 966,85 0,968590
26,2 21,39 966,74 0,968480
26,3 21,47 966,62 0,968360
26,4 21,56 966,51 0,968250
26,5 21,64 966,39 0,968130
26,6 21,73 966,28 0,968019
26,7 21,81 966,16 0,967899
26,8 21,90 966,05 0,967789

D 26,9

27,0
21,98

22,06
965,93

965,81
0,967669

0,967548
27,1 22,15 965,70 0,967438
27,2 22,23 965,58 0,967318
27,3 22,32 965,46 0,967198
27,4 22,40 965,35 0,967088
27,5 22,49 965,23 0,966967
27,6 22,57 965,11 0,966847
27,7 22,65 964,99 0,966727
27,8 22,74 964,88 0,966617
27,9 22,82 964,76 0,966497

28,0 22,91 964,64 0,966376

28,1 22,99 964,52 0,966256
28,2 23,08 964,40 0,966136
28,3 23,16 964,28 0,966016
28,4 23,25 964,16 0,965895
28,5 23,33 964,04 0,965775
28,6 23,42 963,92 0,965655
28,7 23,50 963,80 0,965535
28,8 23,59 963,68 0,965415
28,9 23,67 963,56 0,965294

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 531

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

29,0 23,76 963,44 0,965174
29,1 23,84 963,32 0,965054
29,2 23,93 963,20 0,964934
29,3 24,01 963,07 0,964804
29,4 24,10 962,95 0,964683
29,5 24,18 962,83 0,964563
29,6 24,27 962,71 0,964443
29,7 24,35 962,58 0,964313
29,8 24,44 962,46 0,964192
29,9 24,52 962,33 0,964062

30,0 24,61 962,21 0,963942

30,1 24,69 962,09 0,963822
30,2 24,78 961,96 0,963692
30,3 24,86 961,84 0,963571
30,4 24,95 961,71 0,963441
30,5 25,03 961,59 0,963321
30,6 25,12 961,46 0,963191
30,7 25,20 961,33 0,963060
30,8 25,29 961,21 0,962940
30,9 25,38 961,08 0,962810

31,0 25,46 960,95 0,962680

31,1 25,55 960,82 0,962549
31,2 25,63 960,70 0,962429
31,3 25,72 960,57 0,962299
31,4 25,80 960,44 0,962169
31,5 25,89 960,31 0,962039
31,6 25,97 960,18 0,961908
31,7 26,06 960,05 0,961778
31,8 26,15 959,92 0,961648
31,9

32,0
26,23

26,32
959,79

959,66
0,961518

0,961387
D
32,1 26,40 959,53 0,961257
32,2 26,49 959,40 0,961127
32,3 26,57 959,27 0,960997
32,4 26,66 959,14 0,960866
32,5 26,75 959,01 0,960736
32,6 26,83 958,87 0,960596
32,7 26,92 958,74 0,960466
32,8 27,00 958,61 0,960335
32,9 27,09 958,47 0,960195

33,0 27,18 958,34 0,960065

33,1 27,26 958,20 0,959925
33,2 27,35 958,07 0,959795
33,3 27,44 957,94 0,959664
33,4 27,52 957,80 0,959524
33,5 27,61 957,66 0,959384
33,6 27,69 957,53 0,959254
33,7 27,78 957,39 0,959113
33,8 27,87 957,26 0,958983
33,9 27,95 957,12 0,958843

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 532 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

34,0 28,04 956,98 0,958703
34,1 28,13 956,84 0,958562
34,2 28,21 956,70 0,958422
34,3 28,30 956,57 0,958292
34,4 28,39 956,43 0,958152
34,5 28,47 956,29 0,958011
34,6 28,56 956,15 0,957871
34,7 28,65 956,01 0,957731
34,8 28,73 955,87 0,957591
34,9 28,82 955,73 0,957450

35,0 28,91 955,59 0,957310

35,1 28,99 955,45 0,957170
35,2 29,08 955,30 0,957020
35,3 29,17 955,16 0,956879
35,4 29,26 955,02 0,956739
35,5 29,34 954,88 0,956599
35,6 29,43 954,73 0,956449
35,7 29,52 954,59 0,956308
35,8 29,60 954,44 0,956158
35,9 29,69 954,30 0,956018

36,0 29,78 954,15 0,955867

36,1 29,87 954,01 0,955727
36,2 29,95 953,86 0,955577
36,3 30,04 953,72 0,955437
36,4 30,13 953,57 0,955286
36,5 30,22 953,42 0,955136
36,6 30,30 953,28 0,954996
36,7 30,39 953,13 0,954846
36,8 30,48 952,98 0,954695

D 36,9

37,0
30,56

30,65
952,83

952,69
0,954545

0,954405
37,1 30,74 952,54 0,954255
37,2 30,83 952,39 0,954104
37,3 30,92 952,24 0,953954
37,4 31,00 952,09 0,953804
37,5 31,09 951,94 0,953653
37,6 31,18 951,79 0,953503
37,7 31,27 951,63 0,953343
37,8 31,35 951,48 0,953193
37,9 31,44 951,33 0,953042

38,0 31,53 951,18 0,952892

38,1 31,62 951,02 0,952732
38,2 31,71 950,87 0,952582
38,3 31,79 950,72 0,952431
38,4 31,88 950,56 0,952271
38,5 31,97 950,41 0,952121
38,6 32,06 950,25 0,951960
38,7 32,15 950,10 0,951810
38,8 32,24 949,94 0,951650
38,9 32,32 949,79 0,951500

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 533

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

39,0 32,41 949,63 0,951339
39,1 32,50 949,47 0,951179
39,2 32,59 949,32 0,951029
39,3 32,68 949,16 0,950868
39,4 32,77 949,00 0,950708
39,5 32,86 948,84 0,950548
39,6 32,94 948,68 0,950388
39,7 33,03 948,52 0,950227
39,8 33,12 948,37 0,950077
39,9 33,21 948,21 0,949917

40,0 33,30 948,05 0,949756

40,1 33,39 947,88 0,949586
40,2 33,48 947,72 0,949426
40,3 33,57 947,56 0,949266
40,4 33,66 947,40 0,949105
40,5 33,74 947,24 0,948945
40,6 33,83 947,08 0,948785
40,7 33,92 946,91 0,948614
40,8 34,01 946,75 0,948454
40,9 34,10 946,58 0,948284

41,0 34,19 946,42 0,948124

41,1 34,28 946,26 0,947963
41,2 34,37 946,09 0,947793
41,3 34,46 945,93 0,947633
41,4 34,55 945,76 0,947462
41,5 34,64 945,59 0,947292
41,6 34,73 945,43 0,947132
41,7 34,82 945,26 0,946961
41,8 34,91 945,09 0,946791
41,9

42,0
35,00

35,09
944,93

944,76
0,946631

0,946461
D
42,1 35,18 944,59 0,946290
42,2 35,27 944,42 0,946120
42,3 35,36 944,25 0,945950
42,4 35,45 944,08 0,945779
42,5 35,54 943,91 0,945609
42,6 35,63 943,74 0,945439
42,7 35,72 943,57 0,945268
42,8 35,81 943,40 0,945098
42,9 35,90 943,23 0,944928

43,0 35,99 943,06 0,944758

43,1 36,08 942,88 0,944577
43,2 36,17 942,71 0,944407
43,3 36,26 942,54 0,944237
43,4 36,35 942,37 0,944066
43,5 36,44 942,19 0,943886
43,6 36,53 942,02 0,943716
43,7 36,62 941,84 0,943535
43,8 36,71 941,67 0,943365
43,9 36,80 941,49 0,943185

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 534 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

44,0 36,89 941,32 0,943014
44,1 36,98 941,14 0,942834
44,2 37,07 940,97 0,942664
44,3 37,16 940,79 0,942483
44,4 37,25 940,61 0,942303
44,5 37,35 940,43 0,942123
44,6 37,44 940,26 0,941952
44,7 37,53 940,08 0,941772
44,8 37,62 939,90 0,941592
44,9 37,71 939,72 0,941411

45,0 37,80 939,54 0,941231

45,1 37,89 939,36 0,941051
45,2 37,98 939,18 0,940871
45,3 38,08 939,00 0,940690
45,4 38,17 938,82 0,940510
45,5 38,26 938,64 0,940330
45,6 38,35 938,46 0,940149
45,7 38,44 938,28 0,939969
45,8 38,53 938,10 0,939789
45,9 38,62 937,91 0,939598

46,0 38,72 937,73 0,939418

46,1 38,81 937,55 0,939238
46,2 38,90 937,36 0,939047
46,3 38,99 937,18 0,938867
46,4 39,08 937,00 0,938687
46,5 39,18 936,81 0,938496
46,6 39,27 936,63 0,938316
46,7 39,36 936,44 0,938126
46,8 39,45 936,26 0,937945

D 46,9

47,0
39,54

39,64
936,07

935,88
0,937755

0,937565
47,1 39,73 935,70 0,937384
47,2 39,82 935,51 0,937194
47,3 39,91 935,32 0,937004
47,4 40,00 935,14 0,936823
47,5 40,10 934,95 0,936633
47,6 40,19 934,76 0,936443
47,7 40,28 934,57 0,936252
47,8 40,37 934,38 0,936062
47,9 40,47 934,19 0,935872

48,0 40,56 934,00 0,935681

48,1 40,65 933,81 0,935491
48,2 40,75 933,62 0,935301
48,3 40,84 933,43 0,935110
48,4 40,93 933,24 0,934920
48,5 41,02 933,05 0,934729
48,6 41,12 932,86 0,934539
48,7 41,21 932,67 0,934349
48,8 41,30 932,47 0,934148
48,9 41,40 932,28 0,933958

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 535

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

49,0 41,49 932,09 0,933768
49,1 41,58 931,90 0,933577
49,2 41,68 931,70 0,933377
49,3 41,77 931,51 0,933187
49,4 41,86 931,32 0,932996
49,5 41,96 931,13 0,932806
49,6 42,05 930,92 0,932596
49,7 42,14 930,73 0,932405
49,8 42,24 930,53 0,932205
49,9 42,33 930,34 0,932015

50,0 42,43 930,14 0,931814

50,1 42,52 929,95 0,931624
50,2 42,61 929,75 0,931424
50,3 42,71 929,55 0,931223
50,4 42,80 929,35 0,931023
50,5 42,90 929,16 0,930832
50,6 42,99 928,96 0,930632
50,7 43,08 928,76 0,930432
50,8 43,18 928,56 0,930231
50,9 43,27 928,36 0,930031

51,0 43,37 928,16 0,929831

51,1 43,46 927,96 0,929630
51,2 43,56 927,77 0,929440
51,3 43,65 927,57 0,929240
51,4 43,74 927,36 0,929029
51,5 43,84 927,16 0,928829
51,6 43,93 926,96 0,928629
51,7 44,03 926,76 0,928428
51,8 44,12 926,56 0,928228
51,9

52,0
44,22

44,31
926,36

926,16
0,928027

0,927827
D
52,1 44,41 925,95 0,927617
52,2 44,50 925,75 0,927416
52,3 44,60 925,55 0,927216
52,4 44,69 925,35 0,927016
52,5 44,79 925,14 0,926805
52,6 44,88 924,94 0,926605
52,7 44,98 924,73 0,926395
52,8 45,07 924,53 0,926194
52,9 45,17 924,32 0,925984

53,0 45,26 924,12 0,925783

53,1 45,36 923,91 0,925573
53,2 45,46 923,71 0,925373
53,3 45,55 923,50 0,925162
53,4 45,65 923,30 0,924962
53,5 45,74 923,09 0,924752
53,6 45,84 922,88 0,924541
53,7 45,93 922,68 0,924341
53,8 46,03 922,47 0,924130
53,9 46,13 922,26 0,923920

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 536 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

54,0 46,22 922,06 0,923720
54,1 46,32 921,85 0,923509
54,2 46,41 921,64 0,923299
54,3 46,51 921,43 0,923089
54,4 46,61 921,22 0,922878
54,5 46,70 921,01 0,922668
54,6 46,80 920,80 0,922457
54,7 46,90 920,59 0,922247
54,8 46,99 920,38 0,922037
54,9 47,09 920,17 0,921826

55,0 47,18 919,96 0,921616

55,1 47,28 919,75 0,921406
55,2 47,38 919,54 0,921195
55,3 47,47 919,33 0,920985
55,4 47,57 919,12 0,920774
55,5 47,67 918,91 0,920564
55,6 47,77 918,69 0,920344
55,7 47,86 918,48 0,920133
55,8 47,96 918,27 0,919923
55,9 48,06 918,06 0,919713

56,0 48,15 917,84 0,919492

56,1 48,25 917,63 0,919282
56,2 48,35 917,42 0,919071
56,3 48,45 917,22 0,918871
56,4 48,54 916,99 0,918641
56,5 48,64 916,77 0,918420
56,6 48,74 916,56 0,918210
56,7 48,84 916,35 0,917999
56,8 48,94 916,13 0,917779

D 56,9

57,0
49,03

49,13
915,91

915,70
0,917559

0,917348
57,1 49,23 915,48 0,917128
57,2 49,32 915,27 0,916917
57,3 49,42 915,05 0,916697
57,4 49,52 914,83 0,916477
57,5 49,62 914,62 0,916266
57,6 49,72 914,40 0,916046
57,7 49,81 914,18 0,915826
57,8 49,91 913,97 0,915615
57,9 50,01 913,75 0,915395

58,0 50,11 913,53 0,915174

58,1 50,21 913,31 0,914954
58,2 50,31 913,09 0,914734
58,3 50,40 912,87 0,914513
58,4 50,50 912,65 0,914293
58,5 50,60 912,43 0,914072
58,6 50,70 912,22 0,913862
58,7 50,80 912,00 0,913642
58,8 50,90 911,78 0,913421
58,9 51,00 911,55 0,913191

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 537

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

59,0 51,10 911,33 0,912970
59,1 51,19 911,11 0,912750
59,2 51,29 910,89 0,912530
59,3 51,39 910,67 0,912309
59,4 51,49 910,45 0,912089
59,5 51,59 910,23 0,911868
59,6 51,69 910,01 0,911648
59,7 51,79 909,78 0,911418
59,8 51,89 909,56 0,911197
59,9 51,99 909,34 0,910977

60,0 52,09 909,11 0,910746

60,1 52,19 908,89 0,910526
60,2 52,29 908,67 0,910306
60,3 52,39 908,44 0,910075
60,4 52,49 908,22 0,909855
60,5 52,59 908,00 0,909634
60,6 52,69 907,77 0,909404
60,7 52,79 907,55 0,909184
60,8 52,89 907,32 0,908953
60,9 52,99 907,10 0,908733

61,0 53,09 906,87 0,908502

61,1 53,19 906,64 0,908272
61,2 53,29 906,42 0,908052
61,3 53,39 906,19 0,907821
61,4 53,49 905,97 0,907601
61,5 53,59 905,74 0,907370
61,6 53,69 905,51 0,907140
61,7 53,79 905,29 0,906920
61,8 53,89 905,06 0,906689
61,9

62,0
53,99

54,09
904,83

904,60
0,906459

0,906228
D
62,1 54,19 904,37 0,905998
62,2 54,30 904,15 0,905777
62,3 54,40 903,92 0,905547
62,4 54,50 903,69 0,905317
62,5 54,60 903,46 0,905086
62,6 54,70 903,23 0,904856
62,7 54,80 903,00 0,904625
62,8 54,90 902,77 0,904395
62,9 55,00 902,54 0,904165

63,0 55,11 902,31 0,903934

63,1 55,21 902,08 0,903704
63,2 55,31 901,85 0,903473
63,3 55,41 901,62 0,903243
63,4 55,51 901,39 0,903013
63,5 55,61 901,15 0,902772
63,6 55,72 900,92 0,902542
63,7 55,82 900,69 0,902311
63,8 55,92 900,46 0,902081
63,9 56,02 900,23 0,901850

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 538 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

64,0 56,12 899,99 0,901610
64,1 56,23 899,76 0,901380
64,2 56,33 899,53 0,901149
64,3 56,43 899,29 0,900909
64,4 56,53 899,06 0,900678
64,5 56,64 898,83 0,900448
64,6 56,74 898,59 0,900207
64,7 56,84 898,36 0,899977
64,8 56,94 898,12 0,899737
64,9 57,05 897,89 0,899506

65,0 57,15 897,65 0,899266

65,1 57,25 897,42 0,899035
65,2 57,36 897,18 0,898795
65,3 57,46 896,94 0,898554
65,4 57,56 896,71 0,898324
65,5 57,67 896,47 0,898084
65,6 57,77 896,23 0,897843
65,7 57,87 896,00 0,897613
65,8 57,98 895,76 0,897372
65,9 58,08 895,52 0,897132

66,0 58,18 895,28 0,896892

66,1 58,29 895,05 0,896661
66,2 58,39 894,81 0,896421
66,3 58,49 894,57 0,896180
66,4 58,60 894,33 0,895940
66,5 58,70 894,09 0,895699
66,6 58,81 893,85 0,895459
66,7 58,91 893,61 0,895218
66,8 59,01 893,37 0,894978

D 66,9

67,0
59,12

59,22
893,13

892,89
0,894738

0,894497
67,1 59,33 892,65 0,894257
67,2 59,43 892,41 0,894016
67,3 59,54 892,17 0,893776
67,4 59,64 891,93 0,893535
67,5 59,74 891,69 0,893295
67,6 59,85 891,45 0,893055
67,7 59,95 891,20 0,892804
67,8 60,06 890,96 0,892564
67,9 60,16 890,72 0,892323

68,0 60,27 890,48 0,892083

68,1 60,37 890,23 0,891832
68,2 60,48 889,99 0,891592
68,3 60,58 889,75 0,891352
68,4 60,69 889,50 0,891101
68,5 60,80 889,26 0,890861
68,6 60,90 889,01 0,890610
68,7 61,01 888,77 0,890370
68,8 61,11 888,52 0,890119
68,9 61,22 888,28 0,889879

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 539

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

69,0 61,32 888,03 0,889628
69,1 61,43 887,79 0,889388
69,2 61,54 887,54 0,889138
69,3 61,64 887,29 0,888887
69,4 61,75 887,05 0,888647
69,5 61,85 886,80 0,888396
69,6 61,96 886,55 0,888146
69,7 62,07 886,31 0,887905
69,8 62,17 886,06 0,887655
69,9 62,28 885,81 0,887404

70,0 62,39 885,56 0,887154

70,1 62,49 885,31 0,886904
70,2 62,60 885,06 0,886653
70,3 62,71 884,82 0,886413
70,4 62,81 884,57 0,886162
70,5 62,92 884,32 0,885912
70,6 63,03 884,07 0,885661
70,7 63,13 883,82 0,885411
70,8 63,24 883,57 0,885160
70,9 63,35 883,32 0,884910

71,0 63,46 883,06 0,884650

71,1 63,56 882,81 0,884399
71,2 63,67 882,56 0,884149
71,3 63,78 882,31 0,883898
71,4 63,89 882,06 0,883648
71,5 63,99 881,81 0,883397
71,6 64,10 881,55 0,883137
71,7 64,21 881,30 0,882886
71,8 64,32 881,05 0,882636
71,9

72,0
64,43

64,53
880,79

880,54
0,882375

0,882125
D
72,1 64,64 880,29 0,881875
72,2 64,75 880,03 0,881614
72,3 64,86 879,78 0,881364
72,4 64,97 879,52 0,881103
72,5 65,08 879,27 0,880853
72,6 65,19 879,01 0,880592
72,7 65,29 878,75 0,880332
72,8 65,40 878,50 0,880081
72,9 65,51 878,24 0,879821

73,0 65,62 877,99 0,879570

73,1 65,73 877,73 0,879310
73,2 65,84 877,47 0,879049
73,3 65,95 877,21 0,878789
73,4 66,06 876,96 0,878539
73,5 66,17 876,70 0,878278
73,6 66,28 876,44 0,878018
73,7 66,39 876,18 0,877757
73,8 66,50 875,92 0,877497
73,9 66,61 875,66 0,877236

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 540 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

74,0 66,72 875,40 0,876976
74,1 66,83 875,14 0,876715
74,2 66,94 874,88 0,876455
74,3 67,05 874,62 0,876194
74,4 67,16 874,36 0,875934
74,5 67,27 874,10 0,875673
74,6 67,38 873,84 0,875413
74,7 67,49 873,58 0,875152
74,8 67,60 873,32 0,874892
74,9 67,71 873,06 0,874632

75,0 67,82 872,79 0,874361

75,1 67,93 872,53 0,874101
75,2 68,04 872,27 0,873840
75,3 68,15 872,00 0,873570
75,4 68,26 871,74 0,873309
75,5 68,38 871,48 0,873049
75,6 68,49 871,21 0,872778
75,7 68,60 870,95 0,872518
75,8 68,71 870,68 0,872247
75,9 68,82 870,42 0,871987

76,0 68,93 870,15 0,871716

76,1 69,04 869,89 0,871456
76,2 69,16 869,62 0,871185
76,3 69,27 869,35 0,870915
76,4 69,38 869,09 0,870654
76,5 69,49 868,82 0,870384
76,6 69,61 868,55 0,870113
76,7 69,72 868,28 0,869843
76,8 69,83 868,02 0,869582

D 76,9

77,0
69,94

70,06
867,75

867,48
0,869312

0,869041
77,1 70,17 867,21 0,868771
77,2 70,28 866,94 0,868500
77,3 70,39 866,67 0,868230
77,4 70,51 866,40 0,867960
77,5 70,62 866,13 0,867689
77,6 70,73 865,86 0,867419
77,7 70,85 865,59 0,867148
77,8 70,96 865,32 0,866878
77,9 71,07 865,05 0,866607

78,0 71,19 864,78 0,866337

78,1 71,30 864,50 0,866056
78,2 71,41 864,23 0,865786
78,3 71,53 863,96 0,865515
78,4 71,64 863,69 0,865245
78,5 71,76 863,41 0,864964
78,6 71,87 863,14 0,864694
78,7 71,98 862,86 0,864413
78,8 72,10 862,59 0,864143
78,9 72,21 862,31 0,863862

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 541

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

79,0 72,33 862,04 0,863592
79,1 72,44 861,76 0,863311
79,2 72,56 861,49 0,863041
79,3 72,67 861,21 0,862760
79,4 72,79 860,94 0,862490
79,5 72,90 860,66 0,862209
79,6 73,02 860,38 0,861929
79,7 73,13 860,10 0,861648
79,8 73,25 859,83 0,861378
79,9 73,36 859,55 0,861097

80,0 73,48 859,27 0,860817

80,1 73,60 858,99 0,860536
80,2 73,71 858,71 0,860256
80,3 73,83 858,43 0,859975
80,4 73,94 858,15 0,859695
80,5 74,06 857,87 0,859414
80,6 74,18 857,59 0,859134
80,7 74,29 857,31 0,858853
80,8 74,41 857,03 0,858573
80,9 74,53 856,75 0,858292

81,0 74,64 856,46 0,858002

81,1 74,76 856,18 0,857721
81,2 74,88 855,90 0,857441
81,3 74,99 855,62 0,857160
81,4 75,11 855,33 0,856870
81,5 75,23 855,05 0,856589
81,6 75,34 854,76 0,856299
81,7 75,46 854,48 0,856018
81,8 75,58 854,19 0,855728
81,9

82,0
75,70

75,82
853,91

853,62
0,855447

0,855157
D
82,1 75,93 853,34 0,854876
82,2 76,05 853,05 0,854585
82,3 76,17 852,76 0,854295
82,4 76,29 852,48 0,854014
82,5 76,41 852,19 0,853724
82,6 76,52 851,90 0,853433
82,7 76,64 851,61 0,853143
82,8 76,76 851,32 0,852852
82,9 76,88 851,03 0,852562

83,0 77,00 850,74 0,852271

83,1 77,12 850,45 0,851981
83,2 77,24 850,16 0,851690
83,3 77,36 849,87 0,851400
83,4 77,48 849,58 0,851109
83,5 77,60 849,29 0,850819
83,6 77,72 848,99 0,850518
83,7 77,84 848,70 0,850228
83,8 77,96 848,41 0,849937
83,9 78,08 848,11 0,849637

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 542 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

84,0 78,20 847,82 0,849346
84,1 78,32 847,53 0,849056
84,2 78,44 847,23 0,848755
84,3 78,56 846,93 0,848454
84,4 78,68 846,64 0,848164
84,5 78,80 846,34 0,847863
84,6 78,92 846,05 0,847573
84,7 79,04 845,75 0,847272
84,8 79,16 845,45 0,846972
84,9 79,28 845,15 0,846671

85,0 79,40 844,85 0,846371

85,1 79,53 844,55 0,846070
85,2 79,65 844,25 0,845770
85,3 79,77 843,95 0,845469
85,4 79,89 843,65 0,845169
85,5 80,01 843,35 0,844868
85,6 80,14 843,05 0,844567
85,7 80,26 842,75 0,844267
85,8 80,38 842,44 0,843956
85,9 80,50 842,14 0,843656

86,0 80,63 841,84 0,843355

86,1 80,75 841,53 0,843045
86,2 80,87 841,23 0,842744
86,3 81,00 840,92 0,842434
86,4 81,12 840,62 0,842133
86,5 81,24 840,31 0,841823
86,6 81,37 840,00 0,841512
86,7 81,49 839,70 0,841211
86,8 81,61 839,39 0,840901

D 86,9

87,0
81,74

81,86
839,08

838,77
0,840590

0,840280
87,1 81,99 838,46 0,839969
87,2 82,11 838,15 0,839659
87,3 82,24 837,84 0,839348
87,4 82,36 837,52 0,839028
87,5 82,49 837,21 0,838717
87,6 82,61 836,90 0,838406
87,7 82,74 836,59 0,838096
87,8 82,86 836,27 0,837775
87,9 82,99 835,96 0,837465

88,0 83,11 835,64 0,837144

88,1 83,24 835,32 0,836824
88,2 83,37 835,01 0,836513
88,3 83,49 834,69 0,836192
88,4 83,62 834,37 0,835872
88,5 83,74 834,05 0,835551
88,6 83,87 833,73 0,835231
88,7 84,00 833,41 0,834910
88,8 84,13 833,09 0,834590
88,9 84,25 832,77 0,834269

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 543

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

89,0 84,38 832,45 0,833948
89,1 84,51 832,12 0,833618
89,2 84,64 831,80 0,833297
89,3 84,76 831,48 0,832977
89,4 84,89 831,15 0,832646
89,5 85,02 830,82 0,832315
89,6 85,15 830,50 0,831995
89,7 85,28 830,17 0,831664
89,8 85,41 829,84 0,831334
89,9 85,54 829,51 0,831003

90,0 85,66 829,18 0,830673

90,1 85,79 828,85 0,830342
90,2 85,92 828,52 0,830011
90,3 86,05 828,19 0,829681
90,4 86,18 827,85 0,829340
90,5 86,31 827,52 0,829010
90,6 86,44 827,18 0,828669
90,7 86,57 826,85 0,828338
90,8 86,71 826,51 0,827998
90,9 86,84 826,17 0,827657

91,0 86,97 825,83 0,827316

91,1 87,10 825,49 0,826976
91,2 87,23 825,15 0,826635
91,3 87,36 824,81 0,826295
91,4 87,49 824,47 0,825954
91,5 87,63 824,13 0,825613
91,6 87,76 823,78 0,825263
91,7 87,90 823,44 0,824922
91,8 88,02 823,09 0,824572
91,9

92,0
88,16

88,29
822,74

822,39
0,824221

0,823870
D
92,1 88,42 822,04 0,823520
92,2 88,56 821,69 0,823169
92,3 88,69 821,34 0,822818
92,4 88,83 820,99 0,822468
92,5 88,96 820,63 0,822107
92,6 89,10 820,28 0,821757
92,7 89,23 819,92 0,821396
92,8 89,37 819,57 0,821045
92,9 89,50 819,21 0,820685

93,0 89,64 818,85 0,820324

93,1 89,77 818,49 0,819963
93,2 89,91 818,12 0,819593
93,3 90,05 817,76 0,819232
93,4 90,18 817,40 0,818871
93,5 90,32 817,03 0,818501
93,6 90,46 816,66 0,818130
93,7 90,59 816,30 0,817769
93,8 90,73 815,93 0,817399
93,9 90,87 815,55 0,817018

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 544 Farmacopea Brasilea, 5 edicin

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

94,0 91,01 815,18 0,816647
94,1 91,15 814,81 0,816277
94,2 91,29 814,43 0,815896
94,3 91,43 814,06 0,815525
94,4 91,56 813,68 0,815145
94,5 91,70 813,30 0,814764
94,6 91,84 812,92 0,814383
94,7 91,98 812,54 0,814003
94,8 92,13 812,15 0,813612
94,9 92,27 811,77 0,813231

95,0 92,41 811,38 0,812840

95,1 92,55 810,99 0,812450
95,2 92,69 810,60 0,812059
95,3 92,83 810,21 0,811668
95,4 92,98 809,82 0,811278
95,5 93,12 809,42 0,810877
95,6 93,26 809,02 0,810476
95,7 93,41 808,63 0,810086
95,8 93,55 808,23 0,809685
95,9 93,69 807,82 0,809274

96,0 93,84 807,42 0,808873

96,1 93,98 807,01 0,808463
96,2 94,13 806,61 0,808062
96,3 94,27 806,20 0,807651
96,4 94,42 805,78 0,807230
96,5 94,57 805,37 0,806820
96,6 94,71 804,96 0,806409
96,7 94,86 804,54 0,805988
96,8 95,01 804,12 0,805567

D 96,9

97,0
95,16

95,31
803,70

803,27
0,805147

0,804716
97,1 95,45 802,85 0,804295
97,2 95,60 802,42 0,803864
97,3 95,75 801,99 0,803434
97,4 95,90 801,55 0,802993
97,5 96,05 801,12 0,802562
97,6 96,21 800,68 0,802121
97,7 96,36 800,24 0,801680
97,8 96,51 799,80 0,801240
97,9 96,66 799,35 0,800789

98,0 96,81 798,90 0,800338

98,1 96,97 798,45 0,799887
98,2 97,12 798,00 0,799436
98,3 97,28 797,54 0,798976
98,4 97,43 797,08 0,798515
98,5 97,59 796,62 0,798054
98,6 97,74 796,15 0,797583
98,7 97,90 795,68 0,797112
98,8 98,06 795,21 0,796641
98,9 98,22 794,73 0,796161

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

 Farmacopea Brasilea, 5 edicin 545

Tabla D.l (continuacin)

% v/v % m/m 20 (Kg/m3) d (g/cm)

99,0 98,38 794,25 0,795680
99,1 98,53 793,77 0,795199
99,2 98,69 793,28 0,794708
99,3 98,86 792,79 0,794217
99,4 99,02 792,30 0,793726
99,5 99,18 791,80 0,793225
99,6 99,34 791,29 0,792714
99,7 99,50 790,79 0,792213
99,8 99,67 790,28 0,791703
99,9 99,83 789,76 0,791182
100,0 100,00 789,24 0,790661

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.

Esta traduccin no sustituye la versin en portugus.