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Estructural - Metabolica y Clinica PDF
Estructural - Metabolica y Clinica PDF
Bioqumica
Bioqumica Metablica
Estructural, y Biologa Molecular
y Clnica
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INDICE
BIOQUMICA ESTRUCTURAL
Bioelementos.................................................................................................................................................... 5
Bioelementos primarios............................................................................................................................. 5
Bioelementos secundarios........................................................................................................................ 6
Oligoelementos o elementos traza .........................................................................................................12
Lpidos.................................................................................................................................................................45
Definicin y funcin..................................................................................................................................45
Clasificacin.............................................................................................................................................45
cidos grasos..........................................................................................................................................46
Lpidos saponificables.............................................................................................................................48
Lpidos insaponificables..........................................................................................................................54
Protenas..........................................................................................................................................................62
Definicin y funcin..................................................................................................................................62
Pptidos y enlace peptidico.....................................................................................................................68
Protenas: tipos y niveles estructurales...................................................................................................71
Tcnicas de anlisis de protenas...........................................................................................................79
Clasificacin.............................................................................................................................................82
Glucoprotenas........................................................................................................................................82
Cromoprotenas.......................................................................................................................................90
Hemoprotenas........................................................................................................................................93
Protenas de membrana plasmtica.......................................................................................................96
Protenas G....................................................................................................................................................100
enzimas ............................................................................................................................................................102
Caractersticas.......................................................................................................................................102
Clasificacin...........................................................................................................................................103
Mecanismo de accin enzimtico.........................................................................................................104
Cintica enzimtica................................................................................................................................106
Actividad enzimtica.............................................................................................................................. 112
Enzimas reguladoras............................................................................................................................. 113
Sern-proteasas..................................................................................................................................... 115
Enzimas de inters clnico..................................................................................................................... 115
Vitaminas..........................................................................................................................................................123
Vitaminas hidrosolubles.........................................................................................................................123
Vitaminas liposolubles...........................................................................................................................133
BIOQUMICA METABLICA
Bioenergtica y metabolismo................................................................................................................136
Bioenergtica.........................................................................................................................................137
Transferencia de grupos fosforilo y ATP................................................................................................138
Etapas en las rutas metablicas ...........................................................................................................140
Metabolismo de la glucosa....................................................................................................................141
Catabolismo de la glucosa: gluclisis....................................................................................................141
Destinos metablicos del piruvato.........................................................................................................147
Ruta alternativa de oxidacin de la glucosa..........................................................................................163
Anabolismo de la glucosa: gluconeognesis........................................................................................165
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BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA
Metabolismo lipdico.................................................................................................................................184
Metabolismo de las lipoprotenas..........................................................................................................184
Catabolismo de lpidos..........................................................................................................................191
Anabolismo de lpidos............................................................................................................................199
Metabolismo de aminocidos.................................................................................................................216
Catabolismo de aminocidos................................................................................................................216
Biosntesis de aminocidos.................................................................................................................. 222
Metabolismo de nucletidos................................................................................................................236
Biosntesis de nucletidos.....................................................................................................................236
Catabolismo de nucletidos..................................................................................................................242
BIOQUMICA CLNICA
Fase preanaltica........................................................................................................................................246
Sangre....................................................................................................................................................246
Orina......................................................................................................................................................247
Lquido cefalorraqudeo.........................................................................................................................249
Semen....................................................................................................................................................249
Fase analtica................................................................................................................................................250
Anlisis de sangre..................................................................................................................................250
Anlisis de heces...................................................................................................................................257
Anlisis de orina.....................................................................................................................................258
Anlisis de lquido cefalorraqudeo.......................................................................................................266
Anlisis de lquido sinovial.....................................................................................................................268
Anlisis de lquido seminal....................................................................................................................269
Anlisis de lquido amnitico.................................................................................................................271
Marcadores tumorales...........................................................................................................................272
Bibliografa....................................................................................................................................................275
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BIOQUMICA
ESTRUCTURAL
1. BIOELEMENTOS
Los bioelementos o elementos biogensicos son los elementos qumicos que forman parte de los seres
vivos. Atendiendo a la proporcin en la que se encuentran formando parte de la materia viva, podemos
clasificarlos en 3 tipos:
MICROMINERALES
<100 g/mL
Son los elementos ms abundantes de la materia viva, constituyendo ms del 99% de la misma. El C,
O, H y N representan ms del 95%. Estos bioelementos forman las biomolculas y gases estables.
CARBONO Forma enlaces covalentes estables con otros tomos de C, H, N y O. Gracias a sus 4
electrones de valencia tiene la capacidad de formar enlaces dobles y triples, lo que permite alcanzar una
alta complejidad estructural y originar molculas orgnicas diversas.
OXGENO Elemento de bajo peso molecular, pequeo y muy reactivo. Es soluble en agua, y por
tanto, est disponible para la mayor parte de los organismos vivos. Es uno de los gases ms importantes
de la atmsfera. Es el bioelemento primario ms electronegativo.
HIDRGENO Es el elemento ms abundante de los organismos vivos. Forma enlaces covalentes
al compartir el nico electrn que tiene en su capa de valencia. Es uno de los elementos ms importantes
en la estructura de las biomolculas.
NITRGENO Elemento constituyente de los aminocidos, unidades estructurales de las protenas.
FSFORO Los compuestos del fsforo intervienen en procesos esenciales para los seres vivos.
Podemos encontrarlo como fosfato, que es el anin intracelular ms abundante. Se distribuye por igual
entre los compartimentos intracelular y extracelular. Aproximadamente el 85% del fosfato del cuerpo
humano se encuentra en el esqueleto, el 15% en los tejidos blandos y el 0,1% en el plasma sanguneo.
En los tejidos blandos la mayor parte del fosfato es orgnico, formando parte de los cidos nucleicos,
fosfolpidos y fosfoprotenas. En el plasma sanguneo el 55% del fosfato est ionizado, el 10% unido a
protenas y el 35% restante se encuentra formando complejos. Su concentracin plasmtica se regula
principalmente mediante eliminacin renal.
- Funciones:
a) Transcripcin y traduccin celular.
b) Crecimiento celular.
c) Componente de algunas coenzimas, como el NADP, y de los fosfolpidos de las membranas celulares.
d) Constituyente de los nucletidos que componen el DNA y el RNA.
e) Soporte estructural del cuerpo al formar parte de la hidroxiapatita almacenada en el hueso.
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- Los fosfatos producen enlaces de alta energa, que al romperse la liberan. Forman parte del adenosn
trifosfato o ATP (molcula que almacena la energa obtenida durante el metabolismo de las biomolculas).
- El tampn fosfato constituye la solucin reguladora intracelular ms importante.
Recuerda La homeostasis del fosfato est regulada por la hormona paratiroidea (PTH) y el
calcitriol (forma activa de la vitamina D). La PTH inhibe la reabsorcin de fosfato en
los riones, aumentando su excrecin urinaria. El calcitriol promueve la absorcin
intestinal de fosfato.
Representan cerca del 1% restante de la materia viva. Son indispensables para casi todas las clulas,
aunque son requeridos en cantidades muy pequeas. Estos bioelementos, solos o combinados con otros
bioelementos, se encuentran en forma inica en disoluciones acuosas.
SODIO Es el principal catin del lquido extracelular, representando ms del 90% de los cationes
extracelulares. Es el responsable de casi la mitad de la osmolalidad plasmtica. Aproximadamente el 40%
del Na+ corporal est localizado en el hueso y el 60% restante se encuentra distribuido entre los espacios
intersticial e intravascular. El Na+ se filtra libremente en el glomrulo y se reabsorbe en un 65-70% en el
tbulo proximal junto con bicarbonato, en un 25-30% junto con cloruro y agua en el Asa de Henle, y en un
10-15% por efecto de la aldosterona en la porcin final del tbulo distal y tbulo colector.
- Funciones:
a) Mantenimiento de la presin osmtica del plasma.
b) Transmisin del impulso nervioso y contraccin muscular: generacin y conduccin de potenciales de
accin.
c) Equilibrio cido-base.
- Sus niveles extracelulares se mantienen gracias a la bomba ATPasa Na+-K+, que expulsa 3 Na+ de la
clula por cada 2 K+ que introduce, utilizando la hidrlisis del ATP.
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Recuerda Osmolalidad: Es el nmero total de partculas de soluto por unidad de peso de diso-
lucin. Osmolaridad: Es una medida del nmero total de partculas de soluto por
unidad de volumen de disolucin. En soluciones diluidas, como los lquidos corpora-
les se pueden utilizar como sinnimos porque las diferencias son muy pequeas.
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de la porcin final del tbulo distal y tbulo colector cortical favorece la reabsorcin de sodio (y agua por
smosis) y la secrecin de potasio.
2) La hormona antidiurtica (ADH): es una hormona de naturaleza peptdica liberada desde la
neurohipfisis y sintetizada en los ncleos supraptico (principalmente) y paraventricular del hipotlamo
en respuesta a un aumento de la osmolalidad plasmtica. Tiene como funcin aumentar la permeabilidad
al agua en las clulas principales de la porcin final del tbulo distal y tbulo colector cortical, mediante la
insercin de acuaporinas produciendo la reabsorcin de agua.
3) Barorreceptores: son receptores responsables de la respuesta a las variaciones de volumen y estn
localizados en las venas principales del trax y en la aurcula izquierda. Son sensibles al estiramiento de la
pared. Se activan por aumento de la presin arterial y aumento del volumen del lquido extracelular.
Ingesta de sal
Hipernatremia transitoria
Volumen extracelular
ADH
Retencin de agua
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9% Calcio en complejo
con aniones
9% (0,2 mmol/L)
- El 98-99% del calcio filtrado es reabsorbido. De esta cantidad, un 90% se reabsorbe en el tbulo proximal,
Asa de Henle y porcin inicial del tbulo distal. El 10% restante, por accin de la PTH, se reabsorbe en
la porcin final del tbulo distal y porcion inicial del tbulo colector.
Recuerda La PTH favorece la reabsorcin de calcio en el tbulo distal y porcin inicial del t-
bulo colector, a nivel intestinal favorece de manera indirecta (estimula la sntesis de
1,25 dihidroxivitamina D) la absorcin de Ca2+ y en el hueso favorece la resorcin
sea Hipercalcemiante. La CALCITONINA reduce las concentraciones plasm-
ticas de Ca2+ Hipocalcemiante.
CELULARES EXTRACELULARES
- Crecimiento y divisin celular - Mineralizacin
- Estabilizacin de membranas - Cofactor de factores de coagulacin VII, IX y X
- Excitabilidad y permeabilidad de la - Reconocimiento y adhesin entre clulas
membrana plasmtica
- Transporte de iones a travs de membranas
- Regulacin enzimtica
- Excitacin nerviosa
- Secrecin de hormonas
- Secrecin exocrina
- Neurotransmisin
- Contraccin muscular
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- Hipocalcemia Se aumenta la permeabilidad neuronal a los iones sodio. Produce excitacin del
sistema nervioso y tetania.
- Hipercalcemia Deprime la actividad del sistema nervioso y muscular.
- Funciones:
a) Cofactor de todas las reacciones que involucran ATP (Ej. Sntesis de protenas y cidos nucleicos).
b) Cofactor de ms de 300 enzimas.
c) Excitabilidad neuromuscular.
Niveles de magnesio en suero
HIPERMAGNESEMIA (>2,6
Figura 4. Distribucin del mg/dL)
calcio. HIPOMAGNESEMIA (<1,8 mg/dL)
Ingestin excesiva de magnesio Alteraciones gastrointestinales: malab-
Exceso de vitamina D sorcin, diarreas, ingestin inadecuada
Insuficiencia renal Prdidas renales:
Hipercalcemia hipocalcirica familiar - Alcoholismo
Ingestin de litio - Diuresis osmtica (diabetes mellitus)
Hipotiroidismo Frmacos: diurticos y aminoglucsidos
Acidosis metablica
- Insuficiencia renal avanzada
- Los riones aumentan la excrecin urinaria de magnesio cuando hay hipercalcemia, hipermagnesemia,
disminucin de PTH (la PTH produce un aumento de la reabsorcin tubular de magnesio) y acidosis.
- CLORURO Es el anin extracelular ms abundante. Participa en el mantenimiento de la distribucin
hdrica, de la presin osmtica y en el equilibrio entre aniones y cationes del lquido extracelular. Es el
anin ms abundante en las secreciones gstricas e intestinales. Se reabsorbe pasivamente junto
con el sodio en el tbulo proximal (por atraccin elctrica) y activamente en la rama ascendente del Asa
de Henle.
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Recuerda El cloro y el sodio van juntos en la misma direccin y el bicarbonato va en sentido
contrario al cloruro.
- Esenciales: F, Si, Cr, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Zn, Se, I y Mo.
- Posibles esenciales: V, As, B, Ba, Cd, Li, Pb y Sn.
- No esenciales: txicos (Ej. Hg) o no txicos.
Atendiendo a su metabolismo:
ELEMENTOS ESENCIALES
a) Cobre
El cobre es un nutriente esencial constituyente de las siguientes enzimas:
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Los requerimientos diarios de cobre son 2-3 mg. Del cobre procedente de la dieta, se absorbe un 32% a
nivel duodenal. En su absorcin participa una protena llamada metalotionena que tambin est implicada
en la absorcin de otros metales como el zinc, el cadmio y el mercurio.
Al entrar en la sangre el cobre es captado por la albmina del plasma y de aqu se distribuye a las
cuproprotenas del hgado y de otros tejidos. Una vez incorporado a la ceruloplasmina heptica se vierte
a la sangre.
Por tanto, el cobre plasmtico se presenta en 2 formas:
Dficit de cobre
Causas:
- Dficit de aporte: alimentacin parenteral prolongada o prematuros alimentados con leche de vaca
durante 2 3 meses.
- Dficit de absorcin: fibrosis qustica, enfermedad celiaca, esprue.
- Aumento de prdidas: enteropata con prdida de protenas, sndrome nefrtico,
- Trastornos hereditarios: enfermedad de Menkes, enfermedad de Wilson e hipoceruloplasminemia
familiar.
Sntomas del dficit de cobre Anemia, trastornos neurolgicos con dficit de mielina, trastornos seos
y de la pared de las arterias (debido al dficit en la sntesis de colgeno y elastina), y sntesis disminuida
de melanina.
Exceso de cobre
Se puede deber a intoxicacin por ingestin accidental o intencionada.
Las personas expuestas al cobre metlico en la industria pueden presentar manifestaciones pulmonares
pasajeras y fiebre por las emanaciones metlicas.
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desde las clulas al exterior. Afecta principalmente a la ATPasa del intestino, no pudiendo salir el cobre
a la sangre. Afecta tambin al sistema nervioso, tejido conectivo y vasculatura, y es mortal en la infancia.
Se caracteriza por hipocupremia y disminucin de la ceruloplasmina circulante.
Enfermedad de Wilson (o degeneracin hepatolenticular): enfermedad autosmica recesiva. Se
debe al dficit de la protena transportadora de cobre ATP7B (gen en el cromosoma 13) localizada en el
hgado; al no poder transportarse el cobre fuera del hepatocito para excretarse por va biliar, se acumula.
Cuando se ha sobrepasado la capacidad de los hepatocitos para almacenar cobre, se libera a la sangre,
circula unido a la albmina y se cede a otros tejidos, como el cerebro y el rin. El exceso de cobre inhibe la
formacin de ceruloplasmina. Se caracteriza tambin por hipocupremia y disminucin de la ceruloplasmina
circulante.
b) Zinc
Es el segundo oligoelemento ms abundante del ser humano (el primero es el hierro) y ejerce una
funcin importante como cofactor de mltiples enzimas del metabolismo intermediario.
El zinc desempea un papel fundamental en la sntesis proteica y en la expresin gnica.
La cantidad diaria de Zn recomendada es de unos 15 mg/da, cantidad que aumenta durante el embarazo
y la lactancia.
Se absorbe entre un 20-30% del zinc ingerido en el yeyuno y en el duodeno proximal. El zinc se transporta
en el plasma sanguneo unido a albmina (60-70%) y a la 2-macroglobulina (30-40%), con una pequea
cantidad asociada a la transferrina y a los aminocidos libres.
Los tejidos y lquidos ms ricos en Zn son: prstata, semen, hgado, rin, retina, hueso y msculo. El
contenido de Zn de los eritrocitos es 10 veces el del plasma debido a la presencia en los hemates de la
anhidrasa carbnica.
La va principal de excrecin del zinc son las heces. La secrecin pancretica es responsable de un 25%
de la excrecin total.
Dficit de zinc
Causas:
- Dficit de absorcin intestinal: por dietas ricas en cereales y pan no fermentado (los fitatos inhiben la
absorcin de Zn).
- Redistribucin desde el plasma a los tejidos: en la fase aguda del infarto de miocardio, hepatitis,
infecciones y neoplasias malignas.
- Aumento de prdidas gastrointestinales: diarrea y vmitos.
- Prdidas urinarias: ingestin de alcohol y sndrome nefrtico.
- Frmacos: corticosteroides y penicilina.
La deficiencia de Zn afecta a los tejidos con una alta tasa de recambio celular.
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Sntomas del dficit de Zn Espermatognesis defectuosa, retraso del crecimiento y de la maduracin
esqueltica, diarrea, alopecia y dermatitis, disfuncin inmunitaria con predisposicin a las infecciones,
retraso en la cicatrizacin y anomalas del gusto.
Exceso de zinc
Causas:
c) Hierro
Es el oligoelemento ms abundante del cuerpo humano. La importancia fundamental del hierro en
el organismo reside en su capacidad para fijar, transportar y ceder oxgeno, de ah su importancia en la
respiracin. Se encuentra formando parte de:
- Hemoglobina (protena constituyente del eritrocito).
- Mioglobina (forma de almacenamiento de oxgeno en el msculo).
- Citocromo oxidasa (cadena respiratoria).
- Peroxidasa.
- Catalasa.
- Xantina oxidasa (catabolismo de las purinas para producir cido rico).
Dentro de la clula el hierro se almacena en forma de ferritina, hemosiderina y mioglobina.
La cantidad total de hierro del organismo es de unos 4 g. En las mujeres esta cantidad es inferior.
El hierro de la dieta se encuentra como hierro inorgnico o hierro orgnico (hierro hemnico). La absorcin
se efecta por transporte activo. Se produce principalmente en la primera porcin del duodeno y en el
yeyuno proximal. El hierro se absorbe en estado ferroso. De esta forma, atraviesa la membrana de los
enterocitos y experimenta una oxidacin a su forma frrica por accin de la ceruloplasmina.
El hierro (en estado frrico), ya en el plasma, se combina con la apotransferrina para formar transferrina
(-globulina). La transferrina es la protena transportadora de hierro y lo distribuye por todo el organismo,
principalmente a los eritroblastos de la mdula sea, pero tambin a los hepatocitos y al sistema
reticuloendotelial.
El hierro penetra en los eritroblastos de membrana de la mdula sea por endocitosis, cuyas mitocondrias
lo incorporan a la protoporfirina III, en una reaccin catalizada por la ferroquelatasa, para la sntesis del
grupo hemo de la hemoglobina.
El exceso de hierro es almacenado en los hepatocitos y en menor medida, en el sistema reticuloendotelial
de la mdula sea. En el citoplasma celular el hierro frrico se combina con la apoferritina para formar
ferritina Reserva de hierro de primera lnea.
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El hierro inorgnico (insoluble) se almacena en forma de HEMOSIDERINA. Esta protena est
formada por la degradacin incompleta de la ferritina y la conglomeracin de hierro y otros componentes
subcelulares. Tiene una relacin hierro-protena mayor que la de la ferritina y desde el punto de vista
fisiolgico representa una forma de almacenamiento ms estable y menos disponible que la ferritina.
Dficit de hierro
Afecta con ms frecuencia a los recin nacidos, nios de corta edad, mujeres embarazadas y durante la
lactancia.
El dficit de hierro lleva al desarrollo de anemia ferropnica (anemia microctica hipocrmica) Escasez
de hierro, baja produccin de hemoglobina y produccin de eritrocitos de pequeo tamao (microcticos).
Manifestaciones ms frecuentes: debilidad, palidez, disnea de esfuerzo, apata y anorexia. En los casos
ms graves puede haber dilatacin cardiaca.
Exceso de hierro
La absorcin excesiva de hierro da lugar a un acmulo excesivo de ferritina y hemosiderina en los
tejidos. Este acmulo puede cursar con lesin tisular, especialmente del hgado, como ocurre en la
HEMOCROMATOSIS.
La hemocromatosis es una enfermedad autosmica recesiva, debida a la mutacin del gen HFE
localizado en el brazo corto del cromosoma 6. En consecuencia se produce un incremento en la
absorcin de hierro a nivel intestinal y un mayor depsito del mismo en los tejidos, especialmente en el
hgado, pncreas y corazn. La mutacin ms frecuente es la C282Y.
Los hallazgos de laboratorio ms frecuentes son: sideremia (concentracin srica de hierro elevada)
e ndice de saturacin de la transferrina aumentado por encima del 50% (en condiciones normales est
saturada del 20-50%); la ferritina est muy aumentada en proporcin al exceso de hierro.
El tratamiento ms frecuente en los estados de sobrecarga de hierro consiste en la realizacin de
sangras para eliminar el exceso de hierro del organismo.
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d) Flor
La ingesta diaria en los adultos vara entre 1,5 y 4 mg. En los jvenes se recomienda que no supere los
2,5 mg diarios.
El flor se absorbe a nivel intestinal fcilmente y se excreta mayoritariamente por la orina (se elimina un
98% del ingerido en los adultos y en los nios se elimina el 80%).
Los tejidos con mayor concentracin son los dientes y los huesos (en forma de fluoroapatita).
- Funciones:
a) Ayuda a prevenir la CARIES dental debido a que:
- Acta como inhibidor de la actividad enzimtica bacteriana.
- El flor es un componente esencial del esmalte dental; reacciona con la sustancia dental formando un
complejo menos soluble y menos susceptible a la accin disolvente de los cidos orales.
b) Combate los sntomas de la osteoporosis.
c) Incrementa la absorcin intestinal del hierro.
Exceso de flor
Complicaciones a largo plazo: calcificaciones de ligamentos y tendones. La ingestin crnica de flor
tambin produce FLUOROSIS, que se caracteriza por debilidad, prdida de peso, anemia, huesos
quebradizos y dientes moteados (cuando la ingestin tiene lugar durante la poca de formacin del
esmalte).
La ingestin aguda de cantidades txicas, como las que se encuentran en algunos insecticidas, produce:
dolor abdominal, nuseas, vmitos, diarrea e hipocalcemia.
a) Cromo
El cromo existe en los alimentos como cromo inorgnico y en la forma biolgicamente activa, unido a
GTF (Factor de tolerancia a la glucosa).
La levadura es la principal fuente de la dieta.
La ingesta media de cromo se estima en unos 52 g/da.
Existen 2 formas de cromo circulante en plasma: una parte unida a la transferrina y otra parte, como GTF.
- Funciones:
- Juega un papel en el metabolismo de los hidratos de carbonos y lpidos. El cromo aumenta los efectos
estimulantes de la insulina.
Dficit de cromo
Produce trastornos de la tolerancia a la glucosa, encefalopata y neuropata.
Exceso de cromo
El cromo se utiliza mucho en las industrias metlicas y de galvanizacin, y en la fabricacin de tintes,
esmaltes y pinturas.
La exposicin a cromatos produce un incremento de la frecuencia de cncer de pulmn y disfuncin
renal.
b) Manganeso
Los alimentos con la mayor cantidad de manganeso son: nueces, cereales y otros frutos secos. El t
proporciona una fuente muy importante de manganeso.
La ingesta diaria adecuada de manganeso es del orden de 2,5-5 mg/da.
El manganeso se absorbe en el intestino delgado y se transporta en plasma unido a una -globulina
llamada transmanganina.
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Un 25% del manganeso se localiza en el esqueleto y dentro de las clulas se localiza en las mitocondrias.
Hueso, hgado y pncreas presentan concentraciones mayores de manganeso.
La principal va de excrecin es la bilis.
Dficit de manganeso
Puede producir: defectos de la coagulacin, hipocolesterolemia, dermatitis, elevacin de las
concentraciones de calcio y fsforo y elevacin de la actividad fosfatasa alcalina en suero.
Los nios con trastornos convulsivos tienen bajas concentraciones de manganeso en sangre.
Los nios con fenilcetonuria o con enfermedad del olor a jarabe de arce presentan bajas concentraciones
de manganeso tisular.
Exceso de manganeso
Los principales derivados txicos del manganeso son los compuestos de xido de manganeso.
En la industria el manganeso se utiliza en la fabricacin de pilas y acumuladores elctricos, pinturas,
aleaciones, productos qumicos,
La afectacin pulmonar es rara y se manifiesta con enfisema pulmonar y bronquitis.
Su fijacin en el SNC da lugar a un sndrome neurolgico de tipo parkinsoniano.
c) Cobalto
Es esencial para el ser humano como parte integral de la vitamina B
(cobalto orgnico), necesaria
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para la sntesis de la hemoglobina. No se ha encontrado en la naturaleza ningn otro compuesto
orgnico que contenga cobalto.
Debe proporcionarse cobalto en la alimentacin en la forma funcionalmente activa de la vitamina B .
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Dficit de cobalto
Los efectos y sntomas de la deficiencia de cobalto se asocian a los que se producen por deficiencia de
vitamina B12.
Recuerda La vitamina B12 es una vitamina hidrosoluble que participa como coenzima en reac-
ciones de transferencia de grupos metilo y en reordenamientos intramoleculares.
Participa en la degradacin de los cidos grasos de nmero impar de tomos de
carbono. Su dficit origina anemia megaloblstica y alteraciones neurolgicas (dege-
neracin de la vaina de mielina por alteracin del metabolismo lipdico) Anemia
megaloblstica + alteracin neurolgica: anemia perniciosa.
Exceso de cobalto
La toxicidad por cobalto inorgnico se puede presentar en bebedores de cerveza y en enfermos renales
(reciben cloruro de cobalto como estimulador de la eritropoyesis).
La administracin crnica de cobalto puede bloquear la captacin de yodo por el tiroides,
favoreciendo la aparicin de bocio.
Otras manifestaciones ms raras: miocardiopata y fibrosis pulmonar.
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d) Selenio
Las formas dietticas principales del selenio son los selenoaminocidos: selenometionina (origen vegetal)
y selenocistena (origen animal).
La ingesta diaria adecuada es de 50 a 200 g/da.
La selenocistena es la forma biolgicamente activa del selenio. Est presente en protenas como:
glutatin peroxidasa, tiroxina-5-desyodasa y selenoprotena P.
- Funciones:
Constituyente de la enzima glutatin peroxidasa, cuya presencia en el hemate protege de lesiones
oxidativas producidas por el perxido de hidrgeno y otros perxidos.
Est implicado en el metabolismo de las hormonas tiroideas, como constituyente de la enzima tiroxina-
5-desyodasa.
Adems, forma parte de la protena del plasma selenoprotena P, que es una protena transportadora de
selenio y una enzima extracelular de defensa contra la oxidacin.
El selenio tambin participa en la sntesis de ubiquinona.
Es necesario para el crecimiento de los fibroblastos humanos y otras clulas en los cultivos de tejidos.
Dficit de selenio
Puede originar la enfermedad de Keshan Necrosis miocrdica mltiple y reduccin del contenido
srico de selenio.
En los pacientes con alimentacin parenteral se han visto cuadros de disfuncin muscular por dficit de
selenio.
Exceso de selenio
Un signo temprano de intoxicacin por selenio es un aliento a ajo causado por la inhalacin de
dimetilselenuro.
Prdida de pelo, dermatitis e irritabilidad.
e) Molibdeno
El contenido de molibdeno de los alimentos depende mucho del tipo de suelo en el que se han desarrollado
los productos alimenticios.
La ingestin diaria ptima se estima entre 0,15-0,5 mg/da.
Entre un 25-80% del molibdeno ingerido se absorbe en el estmago y en el intestino.
- Funciones:
- Es un constituyente fundamental de 3 enzimas:
XANTINA OXIDASA Enzima que participa en el catabolismo de las bases pricas hasta cido rico.
ALDEHDO OXIDASA Enzima que cataliza la oxidacin de los aldehdos.
SULFITO OXIDASA Cataliza la oxidacin de sulfitos a sulfatos.
f) Nquel
Los requerimientos diarios son de 150 ng/da.
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Se absorbe a travs del intestino por un proceso dependiente de energa.
El nquel est presente en cantidades nfimas en los tejidos humanos y se excreta por la orina.
- Funciones:
- Facilita la absorcin del in frrico.
- Activa la arginasa heptica.
- Participa en el mantenimiento de las membranas celulares.
g) Silicio
Los requerimientos diarios oscilan entre 5-20 mg/da.
- Funciones:
- Contribuye a la arquitectura y resistencia del tejido conjuntivo.
- Participa en la calcificacin del hueso (se localiza en la zona de crecimiento activo del hueso, asociado
con glucosaminoglucanos, y afecta a la composicin de la matriz del cartlago).
- Acta como agente entrecruzador de macromolculas como la glucoprotena fosforilada o la osteonectina.
Exceso de silicio
La inhalacin crnica de silicio en forma de slice produce neumopatas.
h) Vanadio
Los requerimientos diarios son inferiores a 10 ng/da.
La mayora del vanadio ingerido (85%) no se absorbe, se excreta en las heces.
- Funciones:
- Es posible que sea necesario para la actividad de la peroxidasa tiroidea.
- Presenta accin mimtica con algunos factores de crecimiento: factor de crecimiento epidrmico o factor
de crecimiento de fibroblastos.
- El vanadio estimula in vitro la proliferacin de clulas seas y la sntesis de colgeno y aumenta la
sntesis de proteoglucanos.
a) Arsnico
Es un elemento traza posiblemente esencial.
Los pescados y mariscos contienen cantidades altas de arsnico.
- Funciones:
- Afecta a la conversin de metionina en taurina y poliaminas.
- Est implicado en la metilacin de biomolculas como las histonas.
Efectos txicos:
La exposicin crnica incrementa la frecuencia de carcinoma pulmonar de clulas escamosas y de
cnceres cutneos.
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lipoico acta como coenzima de ciertas enzimas como la piruvato deshidrogenasa). Este mecanismo
es el que opera en el envenenamiento por arsnico.
c) Arsina: compuesto gaseoso.
b) Boro
Es un elemento traza posiblemente esencial.
- Funciones:
- Forma complejos con compuestos orgnicos que contienen grupos hidroxilo adyacentes y en cis, como
los fosfoinostidos y los glucolpidos de membrana. De este modo mantiene la estabilidad de la membrana
celular.
- Influye en la recepcin hormonal y en la transduccin de seales.
Dficit de boro
Una dieta deficiente puede disminuir las concentraciones sricas de 25-hidroxicolecalciferol, de
ceruloplasmina y de superxido dismutasa eritrocitaria.
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1. ESTRUCTURA MOLECULAR
La molcula de agua est formada por 2 tomos de hidrgeno y 1 de oxgeno.
Cada tomo de hidrgeno forma un enlace covalente con el tomo de oxgeno.
El agua tiene una geometra tetradrica debido a que los orbitales del tomo de oxgeno presentan
hibridacin sp3. El ngulo del enlace H-O-H es de 104,5.
El oxgeno es ms electronegativo que el hidrgeno; los electrones compartidos se sitan ms cerca del
tomo de oxgeno (atrae electrones ms fuertemente). Por tanto, aunque la molcula de agua presenta
carga total neutra, esta distribucin asimtrica de los electrones genera dipolos elctricos lo que hace que
el agua se comporte como una molcula polar.
La atraccin electrosttica entre el tomo de oxgeno de una molcula de agua y el tomo de hidrgeno
de otra es la responsable de la formacin de puentes de hidrgeno:
a) Enlace dbil.
b) Dinmico: lo que confiere gran cohesin interna Agrupaciones fluctuantes.
c) Se pueden establecer puentes de hidrgeno con otras estructuras qumicas (Ej. Protenas o cidos
nucleicos) lo que proporciona la base para la estabilidad estructural.
d) Cada molcula de agua forma hasta 4 enlaces de hidrgeno con otras cuatro molculas de agua.
Gran parte de las propiedades del agua derivan de su gran polaridad y de su capacidad para
formar puentes de hidrgeno.
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Recuerda Sustancia ANFTERA: Sustancia que se puede comportar como cido o como
base.
CALOR ESPECFICO: Calor necesario para elevar la temperatura de 1g de lqui-
do 1C.
CALOR DE VAPORIZACIN: Calor necesario para vaporizar 1g de agua en es-
tado lquido (=536 caloras).
CONSTANTE DIELCTRICA: Es una medida de la capacidad de un solvente
para mantener separadas las cargas opuestas.
Una molcula de agua puede transferir un protn a otra molcula de agua para formar un in hidronio y
un in hidroxilo: el agua es el donador y aceptor de protones al mismo tiempo.
Lasreacciones cido-base en disolucin acuosa son muy rpidas: los protones tienen mucha
movilidad y las cargas saltan de una molcula de agua a otra en 10-15 segundos.
El grado de ionizacin del agua viene expresado por la constante de equilibrio, Keq, que define la
composicin de la mezcla final en el equilibrio, independientemente de las cantidades iniciales de reactivos
y productos.
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El producto inico del agua es Kw = [H+] [OH-]. A 25C el Kw es 10-14 M2. Tanto la concentracin de H+
como la de OH es 10 .
- -7
A partir del producto inico del agua se defini el pH como el logaritmo negativo de la concentracin de H+.
pH = -log [H+]
Cuando las concentraciones de iones hidrogeniones y de iones hidroxilo son las mismas se dice que el
pH es neutro (=7).
En una disolucin:
- A mayor [H+], menor pH, DISOLUCIN MS CIDA.
- A menor [H+], mayor pH, DISOLUCIN MS BSICA.
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MONOSACRIDOS
Son los azcares ms simples.
Son slidos incoloros y cristalinos, solubles en agua e insolubles en disolventes no polares.
Sonpolihidroxialdehdos o polihidroxicetonas. Responden a la frmula emprica (CH2O)n , donde n
(nmero de tomos de carbono) = 3-7; por lo tanto, el monosacrido de menor tamao es una triosa.
Los monosacridos ms abundantes en la clula son las pentosas y las hexosas. El ms abundante
en la naturaleza es la D-glucosa, tambin llamado dextrosa.
Los monosacridos se clasifican atendiendo a la posicin de su grupo carbonilo:
-A
ldosas: grupo aldehdo.
- Cetosas: grupo cetona.
Aldosas
Nomenclatura: -OSAS: tetrosas, pentosas, hexosas y heptosas.
L o D.
La aldosa ms sencilla es el GLICERALDEHDO.
Cetosas
Nomenclatura: -OSAS: triosas, tetrosas, pentosas, hexosas y heptosas.
L o D.
La cetosa ms sencilla es la DIHIDROXIACETONA.
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1. PROPIEDADES PTICAS DE LOS MONOSACRIDOS
Los monosacridos presentan isomera y todos poseen al menos un carbono quiral, excepto la
dihidroxiacetona. El gliceraldehdo solo tiene un carbono quiral.
Recuerda Ismeros: Compuestos que, con igual frmula molecular, presentan estructuras
moleculares distintas.
Estereoismeros: Compuestos que tienen la misma frmula estructural pero di-
ferente configuracin espacial. La presencia de carbonos asimtricos determina la
presencia de estereoisomera. Tipos de estereismeros: enantimeros y diastere-
meros.
Carbono quiral o asimtrico: Es el carbono que est constituido por cuatro sus-
tituyentes distintos.
Actividad ptica: Es la capacidad de una sustancia quiral para rotar el plano de la
luz polarizada.
Los
esteroismeros que son imagnes especulares no superponibles el uno del otro se denominan
ENANTIMEROS, se designan como L o D.
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El nmero de estereoismeros para un monosacrido es igual a 2n, siendo n el nmero
de carbonos quirales. Ej. El gliceraldehdo tiene un carbono quiral por lo que tendr solamente 2
estereoismeros posibles: L-gliceraldehdo y D-gliceraldehdo.
Para monosacridos con ms de un carbono quiral, la nomenclatura L o D se establece atendiendo a
la orientacin del -OH del carbono quiral ms alejado del grupo carbonilo (esta denominacin no indica
la direccin de desviacin del plano de luz polarizada, D no es dextro ni L es levo).
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2. ESTRUCTURA CCLICA DE LOS MONOSACRIDOS
Todos los monosacridos de 5 o ms tomos de carbono (y las aldotetrosas, aunque rara vez), en
disolucin acuosa, forman un enlace covalente entre el grupo carbonilo y el oxgeno de un grupo hidroxilo
de su misma molcula (enlace hemiacetal o hemicetal), adoptando una estructura cclica o en anillo que
proporciona un carbono quiral adicional. Esto da lugar a 2 posibles configuraciones o ismeros.
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Formas cicladas:
- Las aldosas de 6 C: PIRANOSAS (ciclo de 6 vrtices): conformacin silla (ms estable) o bote
(menos estable).
- Las cetosas de 6 C y las aldosas de 5 C: FURANOSAS (ciclo de 5 vrtices).
Recuerda Los anillos saturados de 5 6 C no son planos y se pueden plegar fuera del plano
de formas diferentes originando ismeros conformacionales (molculas con la
misma configuracin estereoqumica y diferente conformacin tridimensional).
Conformaciones de la -D-glucopiranosa
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3. DERIVADOS DE LOS MONOSACRIDOS
Los monosacridos pueden sufrir modificaciones en sus grupos funcionales (grupos hidroxilo, ceto,
aldehdo, hemiacetal o hemicetal) y sto les proporciona nuevas funciones biolgicas.
Losgrupos carbonilos de los cidos aldnicos y urnicos pueden reaccionar con un grupo-OH de la
misma molcula originando un forma ciclada estrica conocida como LACTONA. Ej. Vitamina C o
cido ascrbico.
Ojo La capacidad de ser oxidados hace que los monosacridos tengan poder
reductor. Podrn ser oxidados por agentes oxidantes suaves como el in cprico
(Cu2+), que formar un cido aldnico Reaccin Fehling-Benedict.
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Cuando el sorbitol (D-glucitol) se acumula en el cristalino en personas diabticas puede dar lugar a la
formacin de cataratas.
Otra forma reducida de los monosacridos son los desoxiazcares, donde se ha sustituido un grupo
-OH por un -H. El ms importante es la -2-desoxirribosa, presente en los nucletidos.
d) Formacin de aminoazcares
Losaminoazcares se generan por sustitucin del grupo -OH del C-2 de un monosacrido por una
amina (-NH2).
Dos aminoazcares aparecen frecuentemente en los polisacridos: D-glucosamina y
D-galactosamina. Estas aminas se pueden acetilar para formar, por ejemplo, la N-acetilglucosamina.
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Nana
e) Isomerizacin aldosa-cetosa
La transformacin de aldosa en cetosa (Ej. D-glucosa en D-fructosa) implica un desplazamiento
intramolecular de un tomo de hidrgeno y una nueva disposicin de un doble enlace.
El intermediario formado durante esta reaccin de isomerizacin se denomina ENEDIOL.
f) Formacin de iminas
Consiste en la reaccin de un aldehdo o una cetona con una amina primaria (Ej. Un aminocido)
para formar una IMINA (CH=N).
La reaccin que tiene lugar es la reaccin de Maillard (glucosilacin no enzimtica de protenas):
se produce entre los grupos amino de las protenas y los azcares reductores al calentar los alimentos.
Tambin se conoce como oscurecimiento no enzimtico.
g) Formacin de furfurales
En medio cido y aplicando calor las pentosas y hexosas sufren deshidratacin, transformndose en
FURFURALES (anhidro-glcidos), que pueden condensarse con otras molculas dando compuestos
coloreados. Cuando se condensan con el naftol se forma un complejo rojo-violeta: reaccin de
Molish.
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PENTOSAS DE IMPORTANCIA FISIOLGICA
HOLSIDOS
Constituidos por unidades sucesivas de monosacridos.
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a) Enlace glucosdico
Losmonosacridos se unen entre s de forma covalente mediante un enlace O-glucosdico que se
forma entre un grupo hidroxilo de un azcar y el carbono anomrico del otro, eliminndose una molcula
de agua. Esta reaccin da lugar a la formacin de un enlace acetal.
Los enlaces glucosdicos se hidrolizan con facilidad en presencia de cidos pero son resistentes a la
hidrlisis bsica.
Losenlaces N-glucosdicos unen el carbono anomrico de un azcar con un tomo de nitrgeno,
como ocurre en los nucletidos y en las glucoprotenas.
Tambin existen enlaces S-glucosdicos en algunas glucoprotenas en las que hay aminocidos
azufrados.
b) Disacridos
Pueden ser reductores o no reductores. Cuando en la formacin del enlace O-glucosdico participan
los 2 carbonos anomricos, el disacrido pierde su poder reductor: sacarosa y trehalosa.
Cuando el disacrido tiene libre uno de los carbonos anomricos el azcar ser reductor.
Los disacridos ms comunes en la naturaleza son los que presentan en su composicin D-glucosa.
Lactosa
D-glucosa + D-galactosa. Enlace (14). Es un azcar reductor.
Es el azucar presente en la leche.
Estructura de la lactosa
La incapacidad para hidrolizar el enlace (14) debido al dficit de la enzima intestinal lactasa origina
la intolerancia a la lactosa, que se caracteriza por diarrea osmtica y flatulencias. La lactosa ingerida
no es hidrolizada en el intestino delgado y pasa al intestino grueso, donde las bacterias la metabolizan
generando productos txicos.
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La lactosa es sintetizada en la glndula mamaria por la enzima lactosa sintasa, que est constituida
por 2 subunidades:
- Sc o galactosil transferasa: presente en numerosos tejidos.
- Sm o -lactoalbmina: su sntesis es estimulada por la prolactina tras el parto. Solo est presente
en la glndula mamaria.
Sc
UDP-Gal + N-acetilglucosamina N-acetil lactosamina
Sm + Sc
UDP-Gal + Glu Lac + UDP
Maltosa
D-glucosa + D-glucosa. Enlace (14). Es un azcar reductor.
Es un intermediario de la hidrlisis del almidn.
Tambin conocido como azcar de malta.
Si la unin entre las molculas de D-glucosa es de tipo (14) el disacrido producido es la celobiosa,
que es un producto de degradacin del polisacrido celulosa.
Sacarosa
-D-glucosa + -D-fructosa. Enlace (12). Es un azcar no reductor.
Azcar de caa o azcar de remolacha.
Estructura de la sacarosa
La sacarosa se llama azcar invertido porque la hidrlisis de la sacarosa origina un fructosa con un
fuerte carcter levorrotatorio e invierte la propiedad dextrorrotatoria de la sacarosa.
a) Homopolisacridos
Pueden ser de reserva (utilizados como combustible biolgico) o estructurales.
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Homopolisacridos de reserva
Almidn
Se encuentra almacenado en las clulas vegetales constituyendo una fuente energtica. Est presente
en numerosos alimentos. Ej. Patata, arroz, maz y trigo.
Est constituido por dos tipos de polmeros de glucosa: AMILOSA Y AMILOPECTINA.
Amilosa (15-20%): largas cadenas sin ramificar de residuos de D-glucosa unidos por enlaces
glucosdicos (14), como en la maltosa. Presenta una estructura secundaria en forma de hlice.
Estructura de la amilosa
Amilopectina (80-85%): polmero de glucosa ramificado que tiene enlaces glucosdicos (14) y
en los puntos de ramificacin, enlaces de tipo (16). Existe un punto de ramificacin cada 24-30
residuos. En la amilopectina el nmero de residuos de glucosa puede variar desde unos miles hasta un
milln.
La digestin del almidn comienza en la boca con la accin de la -amilasa salival que empieza a
hidrolizar los enlaces glucosdicos. La digestin contina en el intestino delgado, donde la -amilasa
pancretica hidroliza todos los enlaces glucosdicos (14), excepto los cercanos al punto de
ramificacin. Los productos de la -amilasa son la maltosa, el trisacrido maltotriosa y las dextrinas
lmite (oligosacridos que contienen ocho unidades de glucosa con uno o ms puntos de ramificacin
(16)).
Glucgeno
Es el polisacrido de reserva ms importante en las clulas animales.
Presenta la misma estructura que la amilopectina pero en clulas animales: polmero de subunidades
de glucosa unidas por enlaces (14) y con ramificaciones de tipo (16).
Los puntos de ramificacin aparecen cada 8-12 residuos.
El glucgeno es ms compacto que el almidn.
Una molcula de glucgeno tiene un solo extremo reductor y n extremos no reductores (cada
rama acaba con un azcar no reductor). La presencia de muchos extremos no reductores facilita la
movilizacin rpida de la glucosa en respuesta a la demanda de energa.
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Dextranos
Son polisacridos de D-glucosa unidos por enlaces (16), presentes en bacterias y levaduras.
Todos tienen ramificaciones (13) y algunos presentan tambin ramificaciones (12) o (14).
Tienen importancia en la formacin de la placa dental por las bacterias.
Celulosa
Es el polmero ms abundante de la biosfera y el principal polisacrido de las plantas fibrosas y
leosas. Es insoluble en agua.
Es un polmero lineal de unidades de D-glucosa (como la amilosa) unidas por enlaces (14). Este
tipo de enlace distinto determina las caractersticas estructurales.
La celulosa se puede encontrar en forma de cadenas extendidas donde cada residuo de glucosa
presenta un giro de 180 con respecto al adyacente en la cadena; se forman puentes de hidrgeno inter
e intramoleculares.
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Estructura de la celulosa
Los animales carecen de enzimas capaces de hidrolizar los enlaces (14) de la celulosa, por lo que
el ser humano no podr utilizar la celulosa como fuente de energa.
Quitina
Es
un homopolisacrido lineal compuesto por residuos de N-acetilglucosamina unidos por enlaces
(14). Igual que la celulosa pero con sustitucin del grupo -OH del C-2 por un grupo amino acetilado.
quitina es el componente principal del exosqueleto de los artrpodos y es el segundo polisacrido
La
ms abundante de la naturaleza.
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El agar tambin se utiliza para formar una superficie adecuada para el crecimiento de colonias
bacterianas.
Alginatos. Son de carcter vegetal.
Son constituyentes de las algas marrones.
Son polmeros lineales de dos cidos urnicos: el manurnico y el gulurnico.
Se emplean como espesantes en cremas y detergentes, y en odontologa para obtener impresiones
de los dientes.
Peptidoglucano o murena. Son de origen bacteriano.
Forman parte de la estructura de las paredes celulares bacterianas.
un heteropolmero de unidades alternas de N-acetilglucosamina (NAG) y N-acetilmurmico
Es
(NAM) unidas por enlaces (14).
Las cadenas paralelas de NAG y NAM presentan entrecruzamientos formados por cadenas
tetrapeptdicas (L-Ala-D-Glu-L-Lys-D-Ala); estas cadenas tetrapeptdicas estn unidas al NAM.
Los entrecruzamientos peptdicos sueldan entre s las cadenas de polisacrido y forman una
envoltura resistente que rodea toda la clula, evitando que sta se hinche y se lise a causa de la
entrada de agua por smosis.
La LISOZIMA rompe la pared celular bacteriana mediante la hidrlisis del enlace glucosdico (1 4)
entre la NAG y el NAM. La lisozima se encuentra en las lgrimas del ojo, en la clara de huevo y en los
bacterifagos, donde permite que el fago se libere desde la bacteria husped.
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Glucosaminoglucanos (gag). Son de origen animal.
Son heteropolmeros que confieren una consistencia gelatinosa a la matriz extracelular (mantienen
unidas a las clulas y forman un medio poroso para la difusin de nutrientes y oxgeno).
os GAG son una familia de polmeros lineales compuestos por unidades repetitivas de disacridos.
L
Uno de los 2 monosacridos es siempre N-acetilglucosamina o N-acetilgalactosamina; el otro
monosacrido suele ser un cido urnico, generalmente cido D-glucurnico o L-idurnico.
Algunos glucosaminoglucanos contienen grupos sulfato esterificados Los GAG tienen elevada
densidad de carga negativa debido a los grupos sulfato o carboxilato. Poseen elevado carcter cido
y elevada tendencia a la hidratacin.
Los GAG sulfatados se unen a protenas extracelulares para formar PROTEOGLUCANOS.
Tipos de glucosaminoglucanos
La HEPARINA es una forma fraccionada del sulfato de heparn producido en los MASTOCITOS y
es un anticoagulante natural: se une a un inhibidor de proteasas, la antitrombina III, potenciando su
accin e inhibiendo la coagulacin. La heparina tiene la densidad de carga negativa ms elevada
entre todas las macromolculas biolgicas conocidas.
El cido hialurnico es el GAG de mayor peso molecular y es el nico GAG no sulfatado.
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Estructura de la heparina
Recuerda Todos los GAG estn formados por un cido urnico de 6 C (habitualmente
glucurnico), salvo el queratn sulfato que contiene galactosa.
Estructura de un proteoglucano
- Sindecn: protenas transmembranales que llevan unido heparn sulfato y en algunos casos,
condroitn sulfato.
- Glupicanos: anclados a la membrana a travs de un lpido de membrana fosfatidilinositol.
Contienen heparn sulfato.
Algunos proteoglucanos pueden formar agregados como el AGRECN: enormes agrupaciones de
muchas protenas ncleo unidas a una sola molcula de cido hialurnico. Las protenas ncleo, a su
vez, tienen unidas cadenas de queratn sulfato y condroitn sulfato.
El agrecn proporciona consistencia, resistencia y tensin a la matriz del tejido conjuntivo del
cartlago. Est ALTAMENTE HIDRATADO.
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2. GLUCOPROTENAS
Son protenas que estn unidas de forma covalente a hidratos de carbono (cadenas de
oligosacridos cortas) mediante enlaces de tipo N u O-glucosdico. La composicin de hidratos de
carbono vara del 1 al 70%.
Si la unin es de tipo N-glucosdico:
Recuerda Las secuencias donde se suelen establecer los enlaces O-glucosdicos son
ricas en Gly, Val y Pro.
Las lectinas son protenas presentes en todos los organismos que se unen a glcidos mediante
reconocimiento especfico de una porcin oligosacardica de una glucoprotena o un glucolpido de
membrana Actan en procesos de reconocimiento intracelular, sealizacin y adhesin celular.
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3. GLUCOLPIDOS
Son lpidos que contienen cadenas de oligosacridos covalentemente unidas.
Ej. GANGLISIDOS: Lpidos cuyo grupo de cabeza polar es un oligosacrido complejo que
contiene cido silico. LIPOPOLISACRIDOS: Son los componentes principales de la membrana
externa de las bacterias gram negativas.
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4. LPIDOS
DEFINICIN Y FUNCIN
Los lpidos son un grupo de biomolculas qumicamente diverso que se caracteriza por ser insolubles en
agua y solubles en disolventes apolares, como el ter, el cloroformo o la acetona.
Sus funciones biolgicas son variadas:
ComposiciN Funcin
Combustible Grasas (TG) y cidos grasos Almacenamiento y liberacin de energa
CLASIFICACIN
Se pueden clasificar atendiendo a su complejidad en:
b) Lpidos complejos: steres de cidos grasos que contienen otros grupos qumicos, adems de un
alcohol y del cido graso.
- Fosfolpidos: contienen un residuo de cido fosfrico. Un tipo son los esfingolpidos, que contienen como
alcohol, esfingosina.
- Glucolpidos (glucoesfingolpidos): contienen cido graso, esfingosina y carbohidratos.
- Otros lpidos complejos. Ej. Lipoprotenas.
c) Lpidos precursores y derivados. Incluyen cidos grasos, esteroides, glicerol, alcoholes, vitaminas
liposolubles y hormonas.
Se pueden clasificar segn su estructura en:
a) Lpidos saponificables: formados por steres de cidos grasos. En presencia de NaOH o KOH
forman jabones (saponificacin: hidrlisis en presencia de lcali).
- Acilglicridos (monoacilglicridos, diacilglicridos y triacilglicridos).
- Lpidos complejos (fosfoglicridos y esfingolpidos).
- Lipoprotenas.
- Ceras.
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b) Lpidos no saponificables: NO contienen cidos grasos, por lo que no pueden formar jabones.
- Terpenos
- Esteroides
- Eicosanoides
- Ismeros CIS: los grupos semejantes o idnticos se localizan en el mismo lado del doble enlace.
Presentes en la mayor parte de los cidos grasos naturales.
- Ismeros TRANS: los grupos semejantes o idnticos se encuentran en lados opuestos del doble enlace.
Se producen durante la fermentacin en el rmen de los animales productores de lcteos y carnes, y
durante la hidrogenacin de aceites de pescados y vegetales. Su ingesta est asociada con niveles
elevados de LDL y disminuidos de HDL.
- Longitud de la cadena hidrocarbonada: cuanto ms larga sea la cadena, menor ser la solubilidad en
agua y mayor el punto de fusin.
- Insaturacin: la presencia de insaturaciones tambin afecta al punto de fusin, tanto directamente como
por afectar al grado de empaquetamiento A menor nmero de dobles enlaces, menor solubilidad en
agua y mayor punto de fusin:
1) Los cidos grasos saturados presentan rotacin libre alrededor del enlace C-C, lo que les confiere gran
flexibilidad; sto les permite adoptar una conformacin ms estable cuando se empaquetan.
2) En los cidos grasos insaturados, la presencia de un doble enlace en cis provoca un doblamiento en la
cadena hidrocarbonada, por lo que el empaquetamiento es ms dbil y se necesita menos energa trmica
para desordenar las molculas.
As:a igual longitud de cadena, los cidos grasos insaturados tienen un punto de fusin menor
que los saturados. Por eso, a temperatura ambiente, los cidos grasos saturados tienen consistencia
slida (crea) mientras que los insaturados tienen consistencia lquida.
El empaquetamiento de los cidos grasos depende, por tanto, de las insaturaciones y tambin, de la
presencia de ramificaciones en las cadenas hidrocarbonadas.
Recuerda Las longitudes cortas, las ramificaciones y las insaturaciones < punto de fu-
sin, > solubilidad en agua y > fluidez de membrana (la fluidez est determina-
da en parte por el % de AG insaturados de los fosfolpidos).
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Los cidos grasos son cidos dbiles, con valores de pKa alrededor de 4,5.
RCOOH RCOO + H
- +
A pH fisiolgico se encuentran en forma aninica (RCOO-). La carga del grupo carboxlico aporta cierto
carcter hidroflico (cabeza polar) a la molcula mientras que las colas hidrocarbonadas son hidrfobas
(colas apolares). En consecuencia, los cidos grasos se comportan como sustancias anfipticas. En
presencia de agua forman MICELAS (las colas hidrocarbonadas se agrupan juntas hacia el interior y las
cabezas se localizan hacia el exterior en contacto con el agua).
Formacin de micelas
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El cido palmtico y el cido esterico son los cidos grasos saturados ms abundantes en el hombre.
En los cidos grasos la numeracin de los carbonos empieza por el carbono carboxlico.
Los cidos grasos insaturados ms abundantes en el hombre son el cido oleico y el cido linoleico.
Las
posiciones de los dobles enlaces se numeran en referencia al carbono carboxlico, al que se da el
nmero 1.
Losdobles enlaces de los cidos grasos poliinsaturados casi nunca son conjugados sino que estn
separados por un grupo metileno (estn en posicin malnica, es decir, siempre distantes 3 C).
LPIDOS SAPONIFICABLES
1. ACILGLICRIDOS
Son steres de glicerol y cidos grasos. Una molcula de glicerol puede esterificarse con hasta 3
molculas de cidos grasos puesto que tiene 3 grupos hidroxilo.
Segn el nmero de cidos grasos que reaccionan, los acilglicridos pueden ser de 3 tipos:
a) Monoacilglicridos. Cuando el glicerol se esterifica con 1 cido graso. Se libera una molcula de agua.
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b) Diacilglicridos. Cuando el glicerol se esterifica con 2 cidos grasos. Se liberan 2 molculas de
agua.
c) Triacilglicridos o triglicridos (TG). steres de una molcula de glicerol con 3 cidos grasos.
Tambin se denominan grasas neutras.
Lamayora de los triglicridos naturales son mixtos: contienen 2 o ms cidos grasos diferentes.
Los que contienen el mismo tipo de cido graso en las 3 posiciones se llaman triglicridos simples y se
nombran segn el cido graso que contienen. Ej. Tripalmitina, triestearina o triolena.
Los triglicridos son: APOLARES, HIDROFBICOS Y PRCTICAMENTE INSOLUBLES EN AGUA.
Se almacenan en los adipocitos en formas de gotas de grasa y constituyen una forma de almacenamiento
de energa ms eficaz que los hidratos de carbono: los tomos de carbono de los cidos grasos estn ms
reducidos que los de los azcares, por lo que la oxidacin de los TG proporciona ms del doble de energa
que la de los glcidos.
Recuerda Los aceites vegetales estn constituidos mayoritariamente por cidos grasos insa-
turados, de ah su consistencia lquida. El fenmeno de hidrogenacin parcial en
los aceites vegetales convierte gran parte de los enlaces cis en trans; la inges-
tin de cidos grasos trans favorece la aparicin de enfermedades cardiovascu-
lares, ya que aumenta la concentracin de TG y de colesterol ligado a LDL.
2. CERAS
Son steres de cidos grasos de cadena larga con alcoholes de cadena larga (16-30 C).
Sus puntos de fusin son ms elevados que los de los triglicridos.
Son completamente insolubles en agua (sustancias repelentes del agua).
Sirven como almacn de energa en algunos animales y como cubierta externa impermeable al agua.
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3. FOSFOGLICRIDOS (FOSFOACILGLICRIDOS, GLICEROFOSFOLPIDOS)
Son la principal clase de fosfolpidos. El fosfoglicrido ms sencillo es el cido fosfatdico (1,2-DAG
3-P) y todos los dems fosfoglicridos derivan de l.
Son lpidos de membrana formados por:
- 1 molcula de glicerol.
- 2 cidos grasos esterificando C-1 y C-2 del glicerol. Normalmente, el cido graso en C-1 es saturado y
en C-2, insaturado.
- 1 grupo de cabeza polar unido al C-3 del glicerol a travs de un fosfato mediante enlace fosfodister.
Los fosfoglicridos se nombran segn el alcohol presente en C-3.
Fosfoglicridos
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La fosfatidilcolina o lecitina es el fosfolpido ms abundante en las membranas celulares.
La dipalmitil-lecitina es el principal componente del surfactante pulmonar.
La cardiolipina o difosfatidilglicerol presenta 2 cidos fosfatdicos y 1 molcula de glicerol. Aparece
cuando el -OH del C-3 del glicerol esterifica otra molcula de cido fosfatdico. Es el principal lpido de
las membranas mitocondriales.
Algunos fosfoglicridos presentan una cadena de cido graso unida al glicerol mediante enlace ter
(en vez de ster), como ocurre en los PLASMALGENOS (poseen un enlace ter en el carbono sn-1).
La cadena unida por el enlace ter presenta un doble enlace. Se encuentra de manera abundante en el
msculo cardiaco (la mitad de los fosfolpidos cardiacos son plasmalgenos) y en el cerebro:
- Un tipo de plasmalgeno es el factor activador de plaquetas, que es liberado por los basfilos y estimula
la agregacin plaquetaria, la liberacin de serotonina y presenta un papel importante en la inflamacin y
en la respuesta alrgica.
Recuerda Adems de la carga negativa del residuo de fosfato, algunos fosfolpidos tienen otra
carga La fosfatidilcolina (lecitina) y la fosfatidiletanolamina (cefalina) tienen una
carga positiva en el tomo de nitrgeno del aminoalcohol por lo que la carga neta
es cero: son fosfolpidos neutros. La fosfatidilserina, el fosfatidilinositol y la cardio-
lipina tienen carga neta negativa.
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- Cuando un ligando se une a un receptor ligado a protena G en la membrana, se activa una fosfolipasa C
que hidroliza el fosfatidilinositol-4,5-bisfosfato localizado en el lado citoplsmico. Se generan 2 compuestos
que actan de mensajeros intracelulares: inositol-1,4,5-trifosfato (IP3) y diacilglicerol (DAG). El DAG
permanece asociado a la membrana plasmtica. El IP3 produce la liberacin de calcio desde la membrana
del retculo endoplsmico. La presencia del DAG junto con el aumento citoplasmtico de calcio activan la
protena quinasa C (PKC), que fosforila una serie de protenas desencadenando la respuesta intracelular.
- En esta cascada participa la calmodulina, que es una protena de unin a calcio (protena moduladora)
con cuatro lugares de unin. Cuando la concentracin intracelular de Ca2+ alcanza valores de 1 M, el
calcio se une a la calmodulina, provocando un cambio conformacional que hace que aumente la afinidad
de sta por diversas protenas reguladoras, modulando sus actividades.
Recuerda Existe un grupo de compuestos conocidos como promotores tumorales que son
los STERES DE FORBOL; estos compuestos mimetizan al DAG y activan de
forma potente la PKC, interfiriendo con la regulacin normal del crecimiento y la
divisin celular.
4. ESFINGOLPIDOS
Son lpidos que poseen un grupo de cabeza polar y dos colas apolares, pero NO TIENEN GLICEROL;
en su lugar tienen un aminoalcohol de cadena larga llamado ESFINGOSINA (18 C) que deriva de la Ser.
Componentes:
Estructura de un esfingolpido
a) Esfingomielinas
Contienen fosfocolina o fosfoetanolamina, por lo que tambin son fosfolpidos.
Se encuentran en las membranas plasmticas de las clulas animales y son especialmente abundantes
en la vaina de mielina.
b) Glucoesfingolpidos
Poseen uno o ms azcares conectados al -OH en C-1 de la porcin ceramida (siempre la unin del
grupo polar es igual en todos los esfingolpidos).
NO TIENEN FOSFATO.
Dentro de este grupo tenemos tres clases:
Cerebrsidos
Tienen un nico monosacrido unido a la ceramida. Los cerebrsidos que contienen galactosa se
encuentran en las membranas plasmticas del tejido nervioso, mientras que los que contienen glucosa
se hallan en las membranas plasmticas de tejidos no nerviosos.
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Loscerebrsidos se pueden sulfatar y entonces reciben el nombre de SULFTIDOS (a pH=7 estn
cargados negativamente).
Globsidos
Presentan en su cabeza polar 2 o ms azcares, generalmente D-glucosa, D-galactosa o
N-acetilgalactosamina.
Los cerebrsidos no sulfatados y los globsidos no tienen carga a pH=7 y se denominan
glucolpidos neutros.
Ganglisidos
Son los esfingolpidos ms complejos. Contienen grupos de cabeza polares formados por
oligosacridos y uno o varios residuos del cido silico NANA (que aportan carga neta negativa). Los
ganglisidos se concentran en la superficie exterior de las clulas. Se encuentran en elevada concentracin
en las clulas del tejido nervioso.
Algunas de sus funciones son actuar como receptores especficos para funciones fisiolgicas importantes,
o como receptores de determinadas toxinas proteicas de origen bacteriano, como la toxina colrica.
Adems, la porcin glucdica de ciertos esfingolpidos define los grupos sanguneos humanos.
Se nombran como M, D o T atendiendo a si tienen 1, 2 3 residuos de cido silico..
Lpidos de membrana
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LPIDOS INSAPONIFICABLES
NO poseen cidos grasos en su composicin.
1. ISOPRENOIDES
Son un grupo de biomolculas que contienen unidades estructurales de 5 C que se repiten: unidades
de isopreno (2-metil-1,3-butadieno). La ruta de biosntesis comienza con la formacin de isopentenil
pirofosfato a partir de acetil-CoA.
Isoprenoides
- La ruta del mevalonato (la mayoritaria): la enzima limitante es la hidroximetilglutaril-CoA reductasa (HMG-
CoA reductasa).
- La ruta de la desoxi-xilulosa-fosfato (GAP/Piruvato): minoritaria, en algunos terpenoides vegetales.
Existen dos grupos fundamentales de isoprenoides: terpenos y esteroides.
a) Terpenos
Estn constituidos por unidades de isopreno (de 2 a 8).
En su mayora son de origen vegetal, bacteriano o fngico. En los vegetales actan como pigmentos,
hormonas, feromonas y agentes defensivos. Se clasifican de acuerdo al nmero de unidades de isopreno
que contienen.
Tipos de terpenos
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b) Esteroides
Son derivados complejos de los triterpenos. Derivan de una estructura casi plana con cuatro anillos
fusionados: ciclopentanoperhidrofenantreno. Se diferencian entre ellos por el nmero y posicin de los
dobles enlaces y por los sustituyentes (Ej. Grupos hidroxilo, carbonilo y alquilo).
Tipos de esteroides
Esteroles
Son alcoholes esteroides. Presentan uno o ms grupos hidroxilo y carecen de grupos carbonilo y
carboxilo. El esterol ms importante es el COLESTEROL:
- Presenta un grupo -OH en el C-3; dos metilos esenciales, C-18 (en la posicin C-13) y C-19 (en la
posicin C-10), y una cadena lateral hidrocarbonada ramificada unida al C-17. Posee un doble enlace en
posicin 5-6. Tiene 27 C.
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cidos biliares
Hormonas esteroideas
Ojo Estos esteroides carecen de cadena lateral salvo el calcitriol (vitamina D).
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Glucocorticoides (21 C): CORTISOL
- Son sintetizados en un 95% por las clulas de Leydig de los testculos y el resto, en la zona reticular de la
corteza suprarrenal (predominan la dehidroepiandrosterona o DHEA y DHEAS).
- La testosterona se transforma por accin de la enzima 5-reductasa en dihidrotestosterona (DHT),
hormona con accin ms potente en los tejidos perifricos y encargada del desarrollo de los caracteres
sexuales secundarios en el varn.
- La testosterona tambin se puede aromatizar a estradiol por una aromatasa (Ej. Cerebro).
- Acciones de la DHT:
1. Desarrollo de los caracteres sexuales secundarios:
- Aparicin de vello facial, pubiano y en otras zonas corporales (trax o espalda).
- Recesin de la lnea del pelo en la regin temporal (aparicin de calvicie).
- Acta sobre el metabolismo lipdico incrementando la actividad de las glndulas sebceas:
taponamiento e infeccin Acn.
- Hipertrofia de la laringe y engrosamiento de las cuerdas vocales: la voz se hace grave.
Funciones de la Testosterona
Embriognesis: desarrollo de los conductos de Wolff y diferenciacin sexual cerebral
Estimulacin de la espermatognesis
Aumento de la sntesis proteica: incremento de la masa muscular
Aumento de la matriz sea y retencin de calcio
Incremento de la estatura: accin sobre los huesos largos. Aumento de GH y de IGF-1
Incremento de los glbulos rojos: aumento de los niveles de eritropoyetina
Aumento del volumen sanguneo: aumento de la reabsorcin de sodio en los tbulos renales
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Estrgenos (18 C): ESTRADIOL
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2) Aumenta la reabsorcin de Ca2+ y fosfato por los riones.
3) Estimula la liberacin de Ca2+ del hueso, aumentando su concentracin sangunea.
Estructura de la vitamina D
2. EICOSANOIDES
Son hormonas paracrinas producidas por la mayor parte de las clulas humanas salvo por los
ERITROCITOS. Se sintetizan solo cuando van a ser utilizadas: no se almacenan.
Comprenden: PROSTAGLANDINAS, LEUCOTRIENOS Y TROMBOXANOS.
a) Prostaglandinas (PG)
Contienen un anillo ciclopentano con un grupo hidroxilo en C-15. Las prostaglandinas que pertenecen
a la serie E tienen un grupo ceto en C-9 y las que forman parte de la serie F tienen un grupo -OH en la
misma posicin (C-9). El subndice en el nombre de la prostaglandina indica el nmero de dobles enlaces.
Las prostaglandinas de la serie 2 (que derivan del cido araquidnico) son las ms importantes en el ser
humano.
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Actan regulando la sntesis del mensajero intracelular AMPc.
Recuerda Las prostaglandinas de la serie 1 derivan del cido eicosatrienoico y las de la serie
3 derivan del cido eicosapentaenoico.
Tipos de prostaglandinas
Las prostaglandinas de la serie 2 se sintetizan por accin del complejo enzimtico PROSTAGLANDINA
SINTASA sobre el cido araquidnico:
a) Actividad ciclooxigenasa: forma el anillo ciclopentano transformando el cido araquidnico en PGG2.
Los AINEs inactivan la ciclooxigenasa.
b) Actividad hidroperoxidasa: genera PGH2 a partir de PGG2. La PGH2 es la precursora de las
prostaglandinas y de los tromboxanos.
La accin de las prostaglandinas puede diferir en funcin del tejido ya que sus receptores son especficos
de tejido.
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b) Tromboxanos (TX)
(funcin ter). En las plaquetas
Son molculas heterocclicas, donde el anillo est formado por 5 C y 1 O
y en las clulas pulmonares la TXA2 sintasa cataliza la transformacin de la PGH2 en TXA2, que es el
tromboxano biolgicamente activo. El TXA2 se hidroliza espontneamente a la molcula inactiva TXB2.
c) Leucotrienos (LT)
Proceden del cido araquidnico, pero a partir de una ruta independiente: el cido araquidnico se
transforma en 5-HPETE (hidroxiperoxieicosatetraenoico) por accin de la 5-lipooxigenasa; el 5-HPTE pasa
a LTA4 (posee un epxido), ste a LTC4 (reaccin en la que interviene el glutatin) y posteriormente a LTD4
(contiene glicina y cistena). Por eliminacin de la glicina se forma el LTE4 (contiene cistena).
Poseen 3 dobles enlaces conjugados.
El LTD induce la contraccin de las vas areas del pulmn. Se han identificado los LTC , LTD y LTE
4 4 4 4
como componentes de la sustancia de reaccin lenta de anafilaxia.
cido araquidnico
cido graso
ciclooxigenasa
PGG2
Peroxidasa
TXA2
Prostaglandina
endoperoxido
PGE2 reductasa
PGF2
TXB2
Sntesis de eicosanoides
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5. PROTENAS
DEFINICIN Y FUNCIN
Son molculas rganicas nitrogenadas complejas; son polmeros lineales de aminocidos. Se pliegan
dando lugar a diversas formas tridimensionales que determinan la funcin biolgica que realizan (la funcin
de una protena depende de su estructura).
Funciones:
AMINOCIDOS (AA)
Los aminocidos son cidos aminocarboxlicos que constituyen las unidades estructurales de las
protenas.
En general, todos los aminocidos presentes en las protenas son -aminocidos:
Los aminocidos que forman las protenas son enantimeros L. Como excepcin, existen formas D en
algunos pptidos que componen las paredes bacterianas.
Estructura de un -aminocido
Recuerda Todos los aminacidos, a pH=7, tienen el grupo amino y el grupo carboxilo ioniza-
dos.
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- Apolares: Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Trp, Met, Phe y Pro.
- Polares sin carga: Ser, Thr, Cys, Tyr, Asn y Gln.
- Polares con carga negativa (cidos): Glu, Asp.
- Polares con carga positiva (bsicos): Lys, Arg e His.
Todos poseen cadena lateral aliftica, excepto la Phe y el Trp que son aromticos.
La Ala es el aminocido ms frecuente en las protenas.
La Gly, aunque formalmente es apolar, presenta una cadena lateral muy pequea por lo que no tiene
contribucin real en las interacciones hidrofbicas (algunas clasificaciones lo incluyen como polar sin carga).
Val, Leu e Ile: son aminocidos de cadena lateral ramificada.
La Met tiene un grupo tioter apolar en su cadena lateral.
La Pro es un iminocido (grupo amino secundario) y por tanto, difiere de la estructura general de los
-aa. Tiene una estructura cclica porque la cadena lateral est enlazada de nuevo con el tomo de N
formando un anillo. sto le da una conformacin rgida que reduce la flexibilidad estructural de las regiones
polipeptdicas que contienen este aminocido.
ElTrp presenta un heterociclo aromtico: un anillo indlico. Es el aminocido menos frecuente en las
protenas.
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La Phe (anillo bencnico) y el Trp (anillo indlico) tienen la capacidad de absorber la luz ultravioleta a 280
nm debido a sus anillos aromticos.
La Tyr presenta un grupo fenol. Aunque se incluya dentro del grupo de los aminocidos polares sin carga,
es relativamente apolar (hidrofbico). Su grupo hidroxilo puede formar puentes de hidrgeno y constituye
un grupo funcional importante en algunas enzimas. Se sintetiza a partir de Phe.
La Ser y la Thr presentan en su cadena lateral un alcohol primario y un alcohol secundario, respectivamente.
La Asn y la Gln deben su carcter polar a sus grupos amida.
La Cys presenta un grupo sulfhidrilo, que es apolar, pero puede establecer puentes de hidrgeno dbiles
con nitrgeno e hidrgeno, lo que le da un carcter polar dbil (por lo tanto, est incluido dentro de los
aminocidos polares sin carga).
Aminocidos polares con carga negativa (cidos) y polares con carga positiva (bsicos).
Tienen cadena lateral ionizable.
Aminocidos cidos: son el cido asprtico y el cido glutmico. Presentan un cido carboxlico en su
cadena lateral. Tienen valores de pKa muy bajos. El aminocido ms cido es el cido asprtico.
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Aminocidos bsicos: llevan grupos bsicos en sus cadenas laterales Son la histidina (imidazol), la
lisina (amino primario) y la arginina (guanidinio).
- La His es el aminocido menos bsico de los 3: presenta una cadena lateral ionizable con un pKa prximo
a 6. Por lo tanto, a pH=7, la histidina puede tanto presentar carga positiva como no tener carga. Los
residuos de His facilitan muchas reacciones al comportarse como dadores/aceptores de protones.
- La Arg es el aminocido ms bsico.
Aquellos aminocidos que deben de obtenerse necesariamente a travs de la dieta se les denomina
esenciales. Son: Val, Leu, Ile, Thr, Met, Phe, Trp, Lys e His (la arginina se clasifica como esencial,
aunque solo en el periodo de lactancia).
b) Aminocidos no codificados
Se obtienen por modificaciones post-traduccionales.
2. AMINOCIDOS NO PROTEICOS
Estn presentes en las clulas en forma libre o combinada pero nunca formando parte de las
protenas.
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3. PROPIEDADES CIDO-BASE DE LOS AMINOCIDOS
Losaminocidos presentan un grupo amino, con carcter bsico (aceptor de protones), y un grupo
carboxilo, con carcter cido (dador de protones).
Todos los aminocidos con cadena lateral no ionizable presentan a pH fisiolgico su grupo amino
cargado positivamente y su grupo carboxilo cargado negativamente, es decir, el aminocido se encuentra
en forma de in dipolar elctricamente neutro (forma zwitterion). Son ANFTERAS (se pueden comportar
como cidos o bases).
Cuando los aminocidos presentan cadenas laterales ionizables, el grupo R puede presentar carga en
funcin del pH.
La forma zwitterion es la especie predominante en el punto isoelctrico (pI): valor de pH en el que la
carga neta es cero. El aminocido en este punto no se desplaza en el campo elctrico (no tiene por qu
ocurrir a pH=7).
Para estos aminocidos sin cadena lateral ionizable el pI es la media aritmtica de los 2 valores de pK
a
(pK1 y pK2).
El
pKa es una medida de la tendencia de un grupo a ceder un protn: a mayor pKa, menor tendencia a
ceder un protn.
Para definir los valores de pKa y el pI de un aminocido se realiza una curva de titulacin. En general,
sirve para determinar la cantidad de cido o base presentes en una disolucin y en este caso, permite definir
el comportamiento qumico del aminocido en funcin del pH. Es una herramienta til para determinar la
reactividad de las cadenas laterales de los aminocidos.
Parahacer la curva de titulacin de la glicina se parte de una disolucin del aminocido a la que se va
aadiendo de forma gradual una base fuerte, como el NaOH:
- A pH bajo predomina la forma protonada, cargada positivamente.
- Se sigue aadiendo base y el grupo carboxilo pierde su protn y la carga neta es cero.
- Si el pH sigue aumentando, el grupo amino pierde su protn, por lo que la forma predominante en el
medio presenta carga negativa.
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Los aminocidos con cadenas laterales con un grupos R ionizables presentan curvas de titulacin
ms complejas, con 3 valores de pKa.
pK bajo: AMINOCIDO CIDO.
a
pK alto: AMINOCIDO BSICO.
a
Si el pH es > que el pI: el aminocido tiene carga negativa Migra hacia el nodo (+).
Si el pH es < que el pI: el aminocido tiene carga positiva Migra hacia el ctodo (-).
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Ojo El grupo sulfhidrilo de la cistena y el grupo fenol de la tirosina solo se encuentran
ionizados en condiciones muy alcalinas.
El enlace peptdico tiene una estructura plana y rgida debido a la existencia de un fenmeno de
resonancia que hace que el enlace C-N tenga cierto carcter de doble enlace, ligeramente ms corto
que el de una amina simple y por tanto, no permite la rotacin sobre su eje.
Los enlaces peptdicos son hbridos de resonancia y los seis tomos implicados definen un plano
peptdico.
La limitacin de giro del enlace hace que existan 2 configuraciones posibles: cis y trans, aunque en la
mayor parte de las protenas la configuracin es trans (el hidrgeno del grupo amino y el oxgeno del
grupo carbonilo estn en lados opuestos del plano).
Ejemplo de configuracin cis: en la molcula de colgeno, en los enlaces peptdicos en los que participa
la Pro.
La conformacin de un pptido est definida principalmente por 2 ngulos diedros (ngulos de torsin)
entre residuos adyacentes a la cadena polipeptdica: (fi) y (psi).
- El ngulo (fi) describe la rotacin entre N-C.
- El ngulo (psi) describe la rotacin entre C-C.
En principio (fi) y (psi) pueden adoptar cualquier valor entre 180, pero no todas las conformaciones
estn permitidas debido a impedimentos estricos. Los valores permitidos de (fi) y (psi) pueden
visualizarse grficamente en la representacin de Ramachandran.
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Los pptidos tambin tienen capacidad de ionizacin por la presencia de los grupos amino y carboxilo
terminales y de las cadenas laterales de los aminocidos, ya que no participan en la formacin del enlace
peptdico. Por tanto, cada polipptido tiene una curva de titulacin caracterstica y un punto isoelctrico
determinado.
Las cadenas formadas por hasta 10 residuos de aminocidos se llaman OLIGOPPTIDOS.
Sicontienen entre 10 y 50 aminocidos se llaman POLIPPTIDOS (masas moleculares inferiores a
10.000) y por encima de 50 aminocidos se llaman PROTENAS.
Sntesis
Participan 2 enzimas:
-Glutamilcistena sintetasa
Glutatin sintetasa
En el proceso se consumen 2 molculas de ATP.
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Funciones:
Es muy abundante en la mayora de las clulas. Participa en procesos biolgicos importantes Sntesis
de protenas y de DNA, metabolismo de frmacos y transporte de aminocidos.
El glutatin en su forma reducida (GSH), a travs del grupo sulfhidrilo de la cistena, protege a las clulas
de los efectos de la oxidacin, eliminando los perxidos de hidrgeno y perxidos orgnicos generados. Ej.
En los hemates, el H2O2 oxida el hierro de la hemoglobina a su forma frrica generando metahemoglobina,
que es incapaz de unir oxgeno. El glutatin evita esta oxidacin reduciendo el H2O2. Esta reaccin est
catalizada por la GLUTATIN PEROXIDASA (enzima que contiene selenio).
2 GSH + H2O2 GSSG + 2 H2O
Participa en la sntesis de leucotrienos La adicin del glutatin mediante enlace tioter origina los
LTC4.
Se comporta como transportador de aminocidos mediante el ciclo del -glutamilo o ciclo de Meister
Este ciclo tiene lugar en el intestino, en los tbulos del rin y en el cerebro, principalmente. Permite el
transporte de aminocidos neutros (principalmente, Cys y Gln) entre clulas como derivados -glutamilo:
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b) Hormonas peptdicas
Neuropptido Y/
Peptdica Estimuladores del apetito
Galanina/Ghrelina
Colecistoquinina/
Peptdica Inhibidores del apetito
-MSH
a) Fibrosas
Presentan largas cadenas polipeptdicas dispuestas en hebras u hojas.
Constan de un nico tipo de estructura secundaria y presentan una estructura terciaria sencilla.
Son insolubles en agua.
Cumplen funcin estructural: confieren resistencia y flexibilidad a las estructuras de las que forman
parte.
b) Globulares
Tienen forma esfrica.
Presentan varios tipos de estructura secundaria en una misma molcula.
Son solubles en agua.
Cumplen una funcin dinmica (enzimas, protenas reguladoras).
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a) Estructura primaria
Se refiere a la secuencia de aminocidos en la cadena polipeptdica. La estructura tridimensional y la
funcionalidad de las protenas estn determinadas por su estructura primaria.
b) Estructura secundaria
Se refiere a la distribucin espacial de los tomos de un segmento especfico de la cadena polipeptdica,
consecuencia principalmente de las interacciones entre los residuos prximos en la secuencia de
aminocidos. Esta disposicin espacial viene determinada por los valores de los ngulos (fi) y
(psi). Existe un nmero limitado de estructuras secundarias, que son muy estables y que se encuentran
ampliamente distribuidas en las protenas. Son:
Hlice
Estructura helicoidal con enrollamiento dextrgiro.
Cada giro incluye 3,6 residuos/vuelta.
Distancia entre aminocidos consecutivos: 1,5 .
Paso de vuelta: 5,4 .
Longitud media: 11-13 residuos.
Seestabiliza por puentes de hidrgeno intracatenarios, que se forman entre un grupo carbonilo de
un enlace peptdico de un residuo n y el amino del enlace peptdico de un residuo de la posicin n+4
(puentes de hidrgeno paralelos al eje de la hlice).
Las cadenas laterales de los aminocidos se disponen hacia el exterior de la hlice.
Espacialmente, el aminocido ms prximo a otro es el situado a n+3 o n+4.
Aminocidos ms frecuentes: Ala, Glu, Leu y Met.
Aminocidos menos frecuentes: Pro y Gly.
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Otros factores que desestabilizan la hlice :
- Alternancia de aminocidos L y D.
- Presencia de aminocidos voluminosos de forma contigua o residuos sucesivos con la misma carga.
- Un aminocido cargado positivamente en el extremo aminoterminal.
- Un aminocido cargado negativamente en el extremo carboxiloterminal.
- Interacciones entre grupos R, distantes 3 4 residuos.
Se da tanto en protenas fibrosas (Ej. Queratina) como en globulares.
Lmina
Conformacin ms extendida de la cadena polipeptdica; el esqueleto de la cadena se encuentra en zig-
zag.
Se establecen puentes de hidrgeno intercatenarios.
Las hebras pueden pertenecer a cadenas polipeptdicas diferentes (lmina intermolecular) o pueden
ser partes diferentes de la misma cadena (lmina intramolecular).
Todos los residuos presentan una rotacin de 180 respecto al precedente.
Atendiendo a la orientacin de las hebras adyacentes, la lmina puede ser:
- Paralela Cuando las hebras se disponen con la misma orientacin de sus grupos amino y carboxilo
terminales.
- Antiparalela Orientacin amino-carboxilo opuesta. Los puentes de hidrgeno son perpendiculares a
las hebras y ms estables.
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Suelen estar constituidas por residuos de aminocidos con R relativamente pequeos.
Ej. -queratina, fibrona de la seda (alto contenido en Gly y Ala).
Giro
Son giros o bucles donde la cadena polipeptdica cambia de direccin 180 y estn implicados cuatro
residuos de aminocidos (frecuentemente, Gly y Pro).
Los giros suelen encontrarse conectando los extremos adyacentes de 2 segmentos de hojas
antiparalelas.
c) Estructura terciaria
Se define como la disposicin tridimensional global que adoptan todos los tomos de una protena
al plegarse sus estructuras nativas Interacciones entre aminocidos no adyacentes a la cadena
polipeptdica.
El plegamiento de las protenas est dirigido por unas protenas denominadas CHAPERONAS.
Evolutivamente, la estructura terciaria de las protenas est ms conservada que la primaria.
Est estabilizada por:
1. Interacciones hidrofbicas: son interacciones entre las cadenas laterales de aminocidos no polares,
como alanina o valina, que se colocan hacia el interior. Favorecen el plegamiento.
2. Interacciones de Van Der Waals.
3. Puentes de hidrgeno.
4. Enlace inico: puente salino Entre residuos cargados (cidos y bsicos) que quedan hacia el exterior
de la protena.
5. Enlace covalente: puentes disulfuro. Estabiliza la estructura despus del plegamiento. Protege de
los cambios adversos de pH o de concentracin salina.
Eltipo de interaccin que ms contribuye a la estabilizacin de la estructura terciaria es el de carcter
dbil o no covalente (al igual que en la secundaria).
Recuerda DOMINIO de una protena: regin compacta de la estructura terciaria plegada lo-
calmente. Los dominios mltiples son frecuentes en protenas globulares. Esta
regin de la cadena polipeptdica es estable de manera independiente. A menudo
los diferentes dominios tienen funciones distintas.
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d) Estructura cuaternaria
Est definida por interacciones no covalentes entre varias cadenas polipeptdicas; cada cadena
polipeptdica se denomina subunidad.
Una protena con mltiples subunidades se denomina MULTIMRICA; cuando al menos 2 de ellas son
idnticas se denomina OLIGOMRICA. Las subunidades idnticas se denominan PROTMEROS. Ej.
Estructura cuaternaria: hemoglobina.
- Consta de 3 cadenas polipeptdicas y, cada una de ellas de manera individual, es una hlice levgira
(con 3,3 aa/vuelta) denominada cadena . Las 3 hlices se enroscan entre s originando una superhlice
dextrgira. A su vez las molculas de tropocolgeno se empaquetan en haces paralelos cabeza con cola
formando una fibra de colgeno.
- Los aminocidos ms frecuentes son: Gly (35%), Pro (21%), 4-OH Pro (21%) y Ala (11%). Carece de Cys.
- Una secuencia frecuente es: Gly-X-Y (donde a menudo X es Pro e Y es 4-OH-Pro).
- La presencia de Gly cada 3 residuos permite que las tres cadenas se enrosquen muy estrechamente.
Se establecen puentes de hidrgeno intercatenarios, en los que participa la Gly.
La presencia de residuos hidroxilados como 4-OH-Pro y 5-OH-Lys contribuye a la estabilidad del
colgeno. Su sntesis est catalizada por la prolil-hidroxilasa y lisil-hidroxilasa respectivamente. Ambas
enzimas requieren vitamina C y hierro en forma ferrosa (Fe2+) como cofactor.
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La presencia de hidroxilisina permite la formacin de entrecruzamientos intramoleculares e
intermoleculares de las unidades de colgeno. Estos entrecruzamientos se forman por reaccin entre 2
restos de lisina o hidroxilisina. Algunos residuos de hidroxilisina unen de forma covalente ciertos azcares
(glucosa y galactosa). Estos enlaces contribuyen a la fortaleza del colgeno.
Procolgeno y colgeno
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Recuerda Los telopptidos son las zonas terminales del colgeno que carecen de estructura
de triple hlice y son esenciales para la formacin de fibrillas en algunos tejidos.
Sntesis de colgeno
b) Tipos de colgeno
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c) Patologas relacionadas con el colgeno
Escorbuto Enfermedad causada por deficiencia de vitamina C. El colgeno sintetizado no puede formar
fibras adecuadamente ya que la vitamina C es necesaria para la actividad de las enzimas prolil-hidroxilasa
y lisil-hidroxilasa. Se generan hlices inestables que son degradadas en el interior de las clulas. Se
caracteriza por lesiones cutneas, fragilidad de los vasos sanguneos y mala cicatrizacin de las heridas
(las alteraciones del colgeno pueden disminuir la adhesin plaquetar al subendotelio).
Latirismo Enfermedad causada por la ingestin de Lathyrus Odoratus (guisante dulce) que contiene
una toxina (-aminopropionitrilo) que inactiva la lisil oxidasa. No se producen los entrecruzamientos de las
molculas del colgeno, las fibras que forman son ms frgiles y se producen alteraciones seas y de los
grandes vasos.
Osteognesis imperfecta Grupo heterogneo de trastornos genticos caracterizados por mutacin
en genes que codifican principalmente para el colgeno tipo I (localizados en los cromosomas 7 y 17).
Se caracterizan por huesos frgiles, dentinognesis imperfecta, esclerticas azules, tendones dbiles y
prdida de audicin.
Enfermedad de Menkes Enfermedad recesiva ligada al cromosoma X, en la que existe un defecto en
el transporte y almacenamiento intracelular de cobre. Se debe a mutaciones en el gen que codifica para la
protena ATP7A, transportadora de cobre. El cobre es necesario para la actividad lisil-oxidasa. Se alteran
la integridad y la funcin del colgeno. Muestran anomalas en el cabello y en los vasos sanguneos.
Sndrome de Ehlers-Danlos Enfermedad hereditaria caracterizada por hiperelasticidad de la piel
e hipermovilidad articular. Se debe a mutaciones en genes que codifican para los diferentes tipos de
colgeno.
Sndrome de Goodspasture Enfermedad en la que aparecen anticuerpos antimembrana basal
glomerular (frente al colgeno tipo IV).
5. DESNATURALIZACIN DE PROTENAS
La prdida de la estructura tridimensional que provoca prdida de funcin se denomina
DESNATURALIZACIN (implica prdida de las estructuras secundaria y terciaria, pero no primaria).
No implica rotura de enlaces covalentes.
No supone necesariamente el desplegamiento completo de la protena y la prdida total de la
conformacin.
Se consigue aplicando temperaturas elevadas, valores extremos de pH, disolventes orgnicos miscibles
en agua (alcohol o acetona), solutos (SDS, urea, -mercaptoetanol, cloruro de guanidinio) o detergentes
(rompen las interacciones hidrofbicas).
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Desnaturalizacin y renaturalizacin
Recuerda La conformacin nativa de una protena es la que presenta la mnima energa libre
y la mxima estabilidad.
a) Hidrlisis de aminocidos
Hidrlisis cida: en cido clorhdrico 6M, a 105-110C, durante 24h Degrada Ser, Thr, Tyr y Trp y
convierte Asn y Gln en Asp y Glu.
Hidrlisis bsica: en NaOH o BaOH Destruye Cys, Ser, Thr y Arg.
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Carboxipeptidasa B: libera Arg y Lys.
Carboxipeptidasa C: libera Pro.
Tipos de endopeptidasas
TIPOS LOCALIZACIN
Tripsina (Sern-proteasa) Lys, Arg (C)
Quimiotripsina (Sern-proteasa) Phe,Trp y Tyr (C)
Pepsina Leu, Phe, Trp y Tyr (N)
Bromuro de ciangeno Met (C)
Hidroxilamina Asn, Gly
Aminocidos con cadena lateral pequea sin carga
Elastasa
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b) Centrifugacin / Ultracentrifugacin
Aplicacinde un campo centrfugo que permite separar las molculas atendiendo a su coeficiente de
sedimentacin (S), que depende de la masa de la partcula.
c) Dilisis
Utilizacin de membranas semipermeables con poros que permiten el paso libre de las molculas
pequeas pero que son una barrera para las protenas y otras macromolculas.
d) Cromatografa
Mtodo fsico de separacin de componentes de una mezcla basado en el principio de retencin selectiva,
permitiendo identificar dichos componentes y determinar las cantidades en las que estn presentes. Implica
el paso de una solucin (fase mvil) a travs de un medio (fase estacionaria).
Diferentes tipos:
- Cromatografa de intercambio inico: separa las molculas segn su carga elctrica. Utiliza resinas de
intercambio inico, que son polianiones o policationes.
- Cromatografa de afinidad: es ms especfica y permite aislar una o varias protenas de una mezcla
compleja. Requiere la fijacin de ligandos mediante unin covalente a la matriz inerte. Estos ligandos
interaccionan de forma especfica, pero no covalente, con las protenas de la disolucin.
- HPLC (Cromatografa lquida de alta resolucin): utiliza presiones elevadas para hacer que las soluciones
pasen rpidamente a travs de la columna.
e) Electroforesis
Consiste en la separacin de las protenas bajo la accin de un campo elctrico atendiendo a la carga y
al tamao. Permiten determinar el punto isoelctrico y su masa molecular.
Se puede utilizar:
- SDS (Dodecilsulfato sdico): proporciona condiciones desnaturalizantes y aporta carga negativa, lo que
hace que las protenas migren exclusivamente en funcin de su masa.
- Isoelectroenfoque: se utiliza para determinar el punto isoelctrico de una protena. Se establece un
gradiente de pH que se distribuye a travs del gel. Cada protena se desplaza, parndose en el punto en
el que el pH coincida con su pI.
- Electroforesis bidimensional: combinacin secuencial del isoelectroenfoque y la electroforesis en SDS.
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a) Por purificacin a partir del tejido: difcil, debido a la baja concentracin de algunos pptidos.
b) Mediante ingeniera gentica.
c) Por sntesis qumica directa El pptido se construye sobre un soporte slido, un polmero insoluble
(resina), adicionando aminocido a aminocido y utilizando un conjunto estndar de reacciones que
siguen un ciclo repetitivo. En cada paso sucesivo del ciclo hay grupos qumicos protectores que bloquean
las reacciones no deseadas (como es el caso del grupo 9-fluorenilmetoxicarbonilo o Fmoc) y son
eliminados posteriormente con piperidina.
CLASIFICACIN
1. SIMPLES U HOLOPROTENAS
Son aquellas que estn constituidas solamente por aminocidos:
- Albmina: protena ms abundante del plasma sanguneo. Su sntesis tiene lugar en el hgado. Es la
principal protena implicada en el mantenimiento de la presin onctica del plasma.
- Globulinas: -globulinas, -globulinas y -globulinas.
- Gluteninas y gliadinas: protenas de almacenamiento del contenido proteico en el grano de trigo maduro,
que se localizan en el endosperma y constituyen casi la mitad del contenido proteico. Las gliadinas y
las gluteninas, as como sus homlogos en cebada y centeno, se denominan PROLAMINAS (ricas en
glutamina y prolina). La gliadina est implicada en la patogenia de la enfermedad celiaca (anticuerpos
antigliadina).
- Protaminas: protenas de bajo peso molecular con alto contenido en arginina. No contienen ni tirosina ni
triptfano. Se unen a la heparina formando complejos que neutralizan su efecto y a los cidos nucleicos de
los espermatozoides. Se utilizan para obtener insulinas retardadas.
- Escleroprotenas: colgeno, elastina y -queratina (presente en el pelo, uas y gran parte de la capa
externa de la piel; es rica en residuos hidrofbicos).
- Histonas: son protenas pequeas de carcter bsico (elevado contenido en arginina y lisina) muy
conservadas evolutivamente, que estn asociadas al DNA contribuyendo a su empaquetamiento.
2. COMPUESTAS O HETEROPROTENAS
Estn constituidas por una parte proteica y una parte no proteica llamada grupo prosttico, que puede
ser orgnico o inorgnico. Segn la naturaleza del grupo prosttico se clasifican en:
- Nucleoprotenas: contienen cidos nucleicos.
- Lipoprotenas: contienen fosfolpidos, colesterol y triglicridos.
- Glucoprotenas: contienen hidratos de carbono.
- Fosfoprotenas: contienen fsforo en forma de cido ortofosfrico. Ej. Casena, lipovitelina y lipovitelinina
(contienen cistena).
- Cromoprotenas: son protenas conjugadas con un grupo cromforo (sustancia coloreada que contiene
un metal).
- Metaloprotenas.
- Hemoprotenas: su grupo prosttico es la ferroprotoporfirina.
- Flavoprotenas: su grupo prosttico es el flavin-nucletido.
GLUCOPROTENAS
Son conjugados de protena y glcidos en los que la parte glucdica es minoritaria, estn ramificados y
son estructuralmente ms diversos que los glucosaminoglucanos de los proteoglucanos.
La parte proteica est unida covalentemente a los hidratos de carbono mediante enlace O-glucosdico o
N-glucosdico.
La mitad de las protenas de mamferos estn glucosiladas y cerca del 1% de todos los genes codifican
enzimas que intervienen en la sntesis y unin de las cadenas oligosacardicas.
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La primera glucoprotena bien caracterizada fue la GLUCOFORINA A de la membrana de los
eritrocitos. Es una protena integral de membrana que tiene un 60% de glcidos en forma de 16 cadenas
oligosacardicas (15 unidas por enlace de tipo O- y una de tipo N-).
1. GLUCOSILACIN DE PROTENAS
Localizacin:
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Recuerda El antibitico tunicamicina inhibe el primer paso de la N-glucosilacin.
- Est catalizada por enzimas glucosiltransferasas que aaden los residuos de azcar a la protena en el
lmen del aparato de Golgi.
- Primero se aade N-acetilglucosamina y luego, otros monosacridos.
- Las protenas O-glucosiladas no contienen ni glucosa ni manosa.
GLUCOPROTENAS O-GLUCOSILADAS
Mucina
Colgeno (OH-Pro e OH-Lys)
Glucoprotenas de los poros nucleares y algunas citoslicas
Glucosaminoglucanos
Las glucoprotenas constituyen un grupo diverso de molculas que se encuentran en las clulas en forma
soluble, unidas a la membrana y en los lquidos extracelulares:
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2. UNA GLUCOPROTENA ESPECIAL LA FIBRONECTINA
Est formada por 2 cadenas idnticas unidas por puentes disulfuro cerca del extremo C-terminal.
Presenta sitios de unin para integrinas, colgeno, heparn sulfato y fibrina.
2 tipos:
- Fibronectina celular: es la principal molcula de adhesin de la matriz extracelular del tejido conjuntivo y
es producida por los fibroblastos. Es esencial en la migracin y diferenciacin celular.
- Fibronectina plasmtica: es sintetizada por los hepatocitos. Participa en la coagulacin sangunea, la
cicatrizacin y la fagocitosis.
3. GLUCOPROTENAS PLASMTICAS
La concentracin de protenas plasmticas oscila entre 6-8 g/dL.
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que tienen la carga ms positiva son las inmunoglobulinas, por lo que migran ms lentamente. Las bandas
se tien posteriormente con un colorante como negro Amido o rojo Ponceau.
La electroforesis en gel ha sido sustituida por la electroforesis capilar Se hace pasar la muestra
por un capilar y las protenas se separan debido a un fuerte voltaje electroosmtico que transporta las
molculas hacia el ctodo independientemente de su carga. Las bandas se estiman por espectroscopa
de absorcin molecular en la regin del UV.
a) Prealbmina (o transtirretina)
Esta fraccin se desplaza hacia el nodo de forma ms rpida que la albmina. La prealbmina srica
generalmente est por debajo del nivel de deteccin de la electroforesis, por lo que se suele cuantificar por
otros mtodos como la nefelometra.
Transporta tiroxina (aunque la mayor parte de la tiroxina es transportada por la globulina fijadora de
hormonas tiroideas) y vitamina A. Para que la prealbmina transporte la vitamina A es necesario la unin
de la protena ligadora de retinol (RBP).
Tiene una vida media muy corta y su velocidad de sntesis depende del estado nutricional y de la funcin
heptica. Su principal aplicacin clnica es como marcador del estado nutricional.
Adems, debido a su naturaleza compacta, la prealbmina pasa al LCR ms fcilmente que otras
protenas; la presencia de la banda de prealbmina se utiliza para confirmar la procedencia del lquido.
Es un reactante de fase aguda negativo.
Recuerda Los reactantes de fase aguda (RFA) son un grupo de protenas estructural y funcio-
nalmente diferentes, sintetizadas en su mayora por el hepatocito en respuesta a
las citoquinas producidas por el sistema inmunitario especfico. Tienen como fina-
lidad preservar la integridad de los tejidos, limitando el dao tisular. Sus niveles se
modifican en procesos inflamatorios, infecciosos, tumorales, lesiones tisulares cau-
sadas por agentes qumicos y fsicos, Su concentracin srica puede aumen-
tar (positivos) o disminuir (negativos).
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Sus principales funciones son: mantenimiento de la presin onctica del plasma, reserva nitrogenada y
transporte de ligandos (hormonas, cidos grasos y bilirrubina).
c) 1-Globulinas (2,5-5%)
1- Antitripsina (AAT)
Es el componente principal de la fraccin -globulinas.
1
Es un inhibidor de proteasas (miembro de las serpinas): inhibe la elastasa leucocitaria de los pulmones
y otras proteasas, como la tripsina.
El dficit hereditario de AAT es recesivo (cromosoma 14) y se asocia a enfisema pulmonar y cirrosis
heptica (por acumulacin de la protena anmala en el hgado). La mutacin Z (cambio de glutmico por
lisina) es la ms frecuente y la ms grave.
Es un reactante de fase aguda positivo.
-Fetoprotena (AFP)
Es sintetizada por el saco vitelino al comienzo del embarazo y posteriormente por el hgado fetal. Es una
glucoprotena escasa en el suero de los adultos sanos.
Aumenta de forma fisiolgica en el embarazo, aunque elevaciones muy marcadas sugieren defectos
del tubo neural (anencefalia, espina bfida). Sus niveles estn disminuidos (para la correspondiente
edad gestacional) en el sndrome de Down.
Esun marcador tumoral, se eleva en: hepatocarcinomas y tumores de clulas germinales. Se eleva
tambin de forma moderada en hepatopatas crnicas y en algunas enfermedades metablicas.
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d) 2-Globulinas (7-13%)
Ceruloplasmina
Es la principal protena fijadora y transportadora de cobre (contiene alrededor del 90% del cobre srico).
Cada molcula de ceruloplasmina puede fijar de 6 a 7 tomos de cobre.
Posee actividad enzimtica oxidorreductasa Oxida el hierro ferroso a frrico para fijarlo a la transferrina.
La concentracin plasmtica de ceruloplasmina es muy sensible a los estrgenos y aumenta durante el
embarazo y en respuesta a los estrgenos orales.
Sus niveles estn disminuidos en la enfermedad de Wilson (acumulacin de cobre en el hgado), en
la enfermedad de Menkes, cirrosis heptica, sndrome nefrtico,
Es un reactante positivo de fase aguda.
Haptoglobina
Une la hemoglobina liberada tras la hemlisis intravascular. Los complejos hemoglobina-haptoglobina
se metabolizan en el sistema reticuloendotelial y la concentracin de haptoglobina disminuye
proporcionalmente. De esta forma se evita que la hemoglobina se elimine por el rin y se preserva el
hierro corporal.
Sus niveles estn disminuidos en la hemlisis intravascular: anemia hemoltica autoinmune, esferocitosis
hereditaria, dficit de piruvato quinasa,
Es un reactante de fase aguda positivo.
2-Macroglobulina
Es la protena no inmunolgica ms grande del plasma.
Es un inhibidor de proteasas (Ej. Inhibe la plasmina).
Su concentracin aumenta en el sndrome nefrtico, ya que al perderse la albmina es la encargada
de mantener la presin onctica del plasma. Debido a su elevado peso molecular no se filtra por el rin.
Tambin se eleva al inicio de la nefropata diabtica.
e) 1-Globulinas
Transferrina
Transporta el hierro en forma frrica desde los tejidos (depsitos de hierro en forma de ferritina) hasta la
mdula sea, donde se sintetiza la hemoglobina.
En condiciones normales el ndice de saturacin de la transferrina es del 30%, aumentando hasta el
100% en condiciones de sobrecarga frrica, como en la hemocromatosis.
La transferrina aumenta en la anemia ferropnica (en respuesta al dficit frrico) y en el embarazo.
Es un reactante de fase aguda negativo.
Hemopexina
Fija el grupo hemo liberado tras la degradacin de la hemoglobina, preservando el hierro corporal.
Disminuye de forma muy marcada en las hemlisis intravasculares.
f) 2-Globulinas
2-Microglobulina
Se sintetiza en la mayor parte de los tejidos y forma parte del MHC-I.
Se filtra libremente en el glomrulo y se reabsorbe casi en su totalidad en los tbulos Su reabsorcin
est disminuida cuando la funcin tubular est daada. Marcador de funcin tubular.
Aumenta en algunas enfermedades inmunitarias: tumores linfoides, artritis reumatoide, sndrome de
Sjgren, ...
Es un marcador srico til para controlar la evolucin en el mieloma mltiple.
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Componente C3 del complemento
Disminuye en patologas de consumo de complemento: enfermedades autoinmunes. Ej. Artritis
reumatoide, lupus eritematoso.
g) -Globulinas
Inmunoglobulinas
Son sintetizadas por las clulas plasmticas diferenciadas procedentes de los linfocitos B.
Actan como anticuerpos, reconociendo y unindose a los antgenos extraos al organismo.
Cada molcula de inmunoglobulina est constituida por 2 cadenas pesadas unidas a 2 cadenas ligeras
( o ) por puentes disulfuro. Atendiendo al tipo de cadena pesada existen 5 tipos de inmunoglobulinas.
- Mieloma mltiple:
Es una neoplasia maligna que se caracteriza por la proliferacin de un clon de clulas plasmticas en
la mdula sea, principalmente productor de IgG (paraprotena) o un clon productor de cadenas ligeras
(mieloma de Bence-Jones).
El clon prolifera, invadiendo la mdula sea e interfiriendo con las clulas progenitoras de las distintas
lneas celulares hematolgicas Trombocitopenia, leucopenia y anemia.
Disminuye la sntesis del resto de inmunoglobulinas, lo que conlleva mayor susceptibilidad a infecciones.
Cursa con: prdida de hueso, fracturas, hipercalcemia, alteraciones renales (debido a la precipitacin de
las cadenas ligeras) e hiperproteinemia (a expensas del componente monoclonal).
Los pacientes con mieloma mltiple pueden eliminar cadenas ligeras por la orina protena de Bence-
Jones.
En el frotis sanguneo los hemates aparecen apilados unos sobre otros en ROULEAUX debido al aumento
de la hiperviscosidad sangunea.
En la electroforesis en suero se detecta una banda estrecha localizada en la fraccin Componente o
protena M.
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- Macroglobulinemia de Waldestrm (Linfoma linfoplasmoctico):
Proliferacin maligna de un clon de clulas plasmticas productoras de IgM. Se presenta en mayores
de 50-60 aos.
Los pacientes tambin pueden eliminar cadenas ligeras por la orina (Bence-Jones).
Es caracterstico el aumento de la hiperviscosidad sangunea debido a que la IgM es pentamrica y
contribuye al aumento de viscosidad de la sangre Hemates en ROULEAUX.
CROMOPROTENAS
Son protenas conjugadas con un grupo cromforo (sustancia coloreada que contiene un metal):
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1. SNTESIS DE PORFIRINAS (fundamentalmente, en mdula sea e hgado)
Las porfirinas son un grupo de molculas complejas que aparecen como intermediarias en la sntesis del
grupo hemo.
Fases de la sntesis:
1) La primera reaccin tiene lugar en la matriz mitocondrial. El succinil-CoA y la glicina se condensan para
dar cido delta-aminolevulnico o ALA, en una reaccin catalizada por la enzima -aminolevulnico sintasa
o ALA sintetasa (requiere piridoxal fosfato como cofactor); sta es la enzima limitante de la ruta.
2) En el citosol, 2 molculas de ALA se condensan para dar porfobilingeno, en una reaccin catalizada por
la ALA deshidratasa o porfobilingeno sintasa (enzima que contiene zinc y es sensible a la inhibicin
por plomo).
3) A continuacin se combinan 4 molculas de porfobilingeno en una reaccin de desaminacin para
dar el primer compuesto tetrapirrlico, el uroporfiringeno III. Intervienen 2 enzimas: uroporfiringeno I
sintasa y uroporfiringeno III cosintasa.
4) Despus tiene lugar una reaccin de descarboxilacin y el compuesto tetrapirrlico se convierte en
coproporfiringeno III. Reaccin catalizada por la uroporfiringeno descarboxilasa.
5) Este compuesto entra de nuevo en la mitocondria y, por descarboxilacin, se convierte en
protoporfiringeno IX. Reaccin catalizada por la enzima coproporfiringeno oxidasa, localizada en la
membrana mitocondrial interna.
6) En la matriz mitocondrial, el protoporfiringeno IX sufre una oxidacin y se genera la protoporfirina IX.
Reaccin catalizada por la protoporfiringeno oxidasa.
7) El Fe2+ se incorpora a la protoporfirina y se sintetiza el grupo hemo. Reaccin catalizada por la
ferroquelatasa, que se localiza en la membrana mitocondrial interna.
8) El hemo se combina con polipptidos para dar hemoprotenas como la mioglobina y la hemoglobina.
Adems acta como retroinhibidor de los primeros pasos de la ruta de biosntesis.
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Los defectos genticos en la biosntesis del grupo hemo pueden provocar la acumulacin de intermediarios
de la ruta que provocan diversas enfermedades, conocidas genricamente como PORFIRIAS.
Uroporfiringeno
Porfiria cutnea tarda Fotosensibilidad cutnea
descarboxilasa
Porfiria
ALA y PBG NORMAL
eritropoytica U
P, CP y PP ELEVADOS
UP y CP ELEVADOS
congnita
Porfiria cutnea
ALA y PBG NORMAL U
P, CP y PP NORMAL
tarda (+ frecuente
UP y CP ELEVADOS
en paises europeos)
ALA, PBG y CP
Coproporfiria
ELEVADOS P, CP y PP NORMAL
U
hereditaria
UP NORMAL
ALA y PBG ELEVADOS
Porfiria variegata UP y CP NORMAL UP, CP y PP NORMAL
O ELEVADO
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HEMOPROTENAS
Su grupo prosttico es la ferroprotoporfirina.
1. HEMOGLOBINA
Es una protena globular de forma esfrica. Forma parte de los eritrocitos, donde su funcin principal es
transportar oxgeno desde los pulmones a los tejidos del cuerpo.
Es una protena tetramrica en la que cada una de las cadenas polipeptdicas presenta un grupo
prosttico HEMO 4 lugares de unin al O2.
El grupo hemo consta de 4 ferroprotoporfirinas idnticas constituidas por:
El tomo de Fe2+ est en el centro, combinado con 4 anillos pirrlicos (de la protoporfirina IX) a travs de
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Tipos de hemoglobinas presentes en el ser humano
HEMOGLOBINAS CARACTERSTICAS
H
b Portland (2 2)
Hb Gower I (2 2) Hemoglobinas embrionarias (tres primeros meses)
Hb Gower II (2 2)
Curvas de disociacin de la Hb y de la Mb
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Existen factores que disminuyen la afinidad de la Hb por el O :
2
- Elevacin de la temperatura.
- Disminucin del pH del medio (efecto Bohr).
- Aumento de la concentracin de CO2 del medio.
- Presencia del 2,3 BPG (2,3-bisfosfoglicerato, intermediario de la gluclisis). Es un efector alostrico de
la hemoglobina.
Ojo El CO se une a la hemoglobina con una afinidad unas 250 veces superior a la del
oxgeno.
a) Hemoglobinopatas
Hemoglobinopatas estructurales
Se deben a mutaciones puntuales en los genes que codifican para las cadenas de la globina. Ej.
Hemoglobina S o anemia falciforme Mutacin puntual en el gen que codifica para la cadena de la
globina (cromosoma 11), con cambio de glutmico por valina. Es autosmica recesiva.
Talasemias
Defectos genticos que originan una disminucin en la sntesis de alguna de las cadenas de la globina.
2. MIOGLOBINA
Esuna protena de unin a oxgeno ms simple, que est presente sobre todo en el tejido muscular
(msculo esqueltico y cardiaco) de la mayor parte de los mamferos.
Est constituida por una nica cadena polipeptdica de 153 aminocidos unida a un grupo hemo. Consta
de ocho segmentos en hlice .
Estructura de la mioglobina
Lamioglobina presenta una curva de disociacin de TIPO HIPERBLICO y su afinidad por el oxgeno
no se ve afectada ni por la variacin del pH ni del CO2 dentro de los lmites fisiolgicos.
La mioglobina presenta una P muy baja (2,8 mm Hg), lo que implica que tiene una afinidad elevada por
50
el oxgeno; sta es una caracterstica adecuada para una protena que debe extraer oxgeno de la sangre.
La mioglobina tiene una afinidad por el oxgeno superior a la hemoglobina.
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La mioglobina tiene como funcin principal facilitar la difusin de oxgeno en el msculo, extrayendo el
oxgeno de la circulacin sangunea para almacenarlo en las clulas musculares.
Es un indicador muy sensible de dao muscular precoz. Se eleva rpidamente tras una lesin miocrdica
pudindose detectar en sangre a las 2-3 horas del infarto agudo de miocardio. Es el marcador ms precoz
de necrosis miocrdica.
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Los movimientos que determinan la fluidez de la membrana varan en funcin de determinados factores:
b) Asimetra
La composicin lipdica a cada lado de la bicapa es diferente puesto que cada lado de la membrana est
expuesto a un entorno diferente.
c) Permeabilidad selectiva
d) Capacidad para rehacerse
Cuando las bicapas lipdicas se rompen espontneamente se vuelven a recomponer.
- Protenas integrales: estn firmemente unidas a la bicapa lipdica y la atraviesan. Solo se pueden liberar
por accin de agentes que interfieran con las interacciones hidrofbicas, como detergentes, disolventes
orgnicos o agentes desnaturalizantes.
- Protenas perifricas: se encuentran dbilmente unidas a la cara externa o interna de la membrana, sin
atravesarla. A travs de interacciones electrostticas y puentes de hidrgeno se asocian con los dominios
hidroflicos de las protenas integrales y con los grupos de las cabezas polares de los lpidos de membrana.
Se pueden liberar mediante tratamientos suaves, como un cambio de pH o exposiciones a soluciones
salinas concentradas.
- Protenas anfitrpicas: se encuentran tanto en el citosol como asociadas a la membrana. Su afinidad
por las membranas deriva de sus interacciones no covalentes con una protena o lpido de membrana, o a
la presencia de uno o ms lpidos unidos covalentemente a la protena anfitrpica. Esta asociacin con la
membrana es reversible y est regulada (Ej. La fosforilacin o la unin de un ligando pueden producir un
cambio conformacional en la protena que da lugar a la exposicin de un sitio de unin a membrana que
previamente era inaccesible).
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TIPOS DE TRANSPORTE
1. TRANSPORTE PASIVO
Las molculas atraviesan la membrana a favor de gradiente de concentracin o de carga elctrica por lo
que no requieren un aporte energtico extra.
a) Tipos de transporte pasivo
Difusin simple
Se basa en el desplazamiento de los solutos a travs de la membrana, de la zona ms concentrada a la
ms diluida hasta equiparar las concentraciones a ambos lados.
Los gases, como el O y el CO y las molculas apolares y polares sin carga de pequeo tamao, como
2 2,
el agua o el glicerol, atraviesan las membranas por difusin simple.
Difusin facilitada
Se basa en el desplazamiento de los solutos a travs de las membranas a favor de gradiente por medio
de un transportador (une el sustrato de forma no covalente y reversible).
Se diferencia de la difusin simple en que la velocidad de difusin no est limitada por la concentracin del
soluto a ambos lados de la membrana sino por los cambios de conformacin de la protena transportadora.
Ej. Glucosa y aminocidos.
b) Tipos de transportadores
Protenas transportadoras o carrier:
- Alta estereoespecificidad.
- Saturables.
- Sufren un cambio conformacional cuando el sustrato se une.
- Disminuyen la energa de activacin necesaria para que se produzca el transporte del soluto de un lado
a otro de la membrana.
- Ej. Transportador de glucosa de los hepatocitos o del eritrocito.
Canales:
Recuerda Un tipo especial de canal inico son los IONFOROS: son compuestos liposolubles que
pueden difundir a travs de la membrana formando un poro que permite el transporte del in,
o bien, son mviles y se desplazan a travs de la membrana. Muchos son antibiticos. Ej.
Gramicidina A, polipptido que se disuelve en la membrana y adopta una estructura helicoi-
dal abierta permitiendo el paso de iones K+ y Na+, o valinomicina, pptido cclico que trans-
porta el in K+ difundiendo a travs de la membrana, sintetizado por Streptomyces.
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2. TRANSPORTE ACTIVO
Transporte que se realiza en contra de gradiente y requiere aporte energtico.
Se produce solo cuando est acoplado directa o indirectamente a una reaccin exergnica.
Es especfico y saturable.
Participan transportadores.
Tipos:
- Transporte activo primario: acoplado directamente a la hidrlisis del ATP (reaccin exergnica).
- Transporte activo secundario: el transportador acopla una reaccin no favorable (endergnica) a otra
reaccin espontnea o a favor de gradiente. Ej. Cotransporte antiporte Na+-H+ en los tbulos renales
proximales; cotransporte simporte Na+-glucosa en los enterocitos (el gradiente de Na+ necesario para esta
entrada conjunta se mantiene gracias a la ATPasa Na+-K+).
ATPasas tipo P
Son transportadores de cationes que se fosforilan reversiblemente por accin del ATP.
Esta fosforilacin induce un cambio conformacional que permite el transporte del catin.
Se conocen ms de 70 ATPasas de tipo P y todas son protenas integrales de membrana.
Se inhiben con el anlogo del fosfato vanadato.
Ej. Ca2+-ATPasa (retculo sarcoplsmico, transportador simple), Na+-K+-ATPasa (membrana plasmtica,
cotransporte antiparalelo, expulsa 3 Na+ y introduce 2 K+), H+-K+-ATPasa (clulas parietales del estmago,
antiporte).
ATPasas tipo F
Permiten el paso de protones en contra de gradiente impulsado por la hidrlisis del ATP.
Lareaccin en la que participan es reversible de forma que un gradiente de protones tambin puede
suministrar la energa para impulsar la sntesis de ATP (ATP sintasas).
ATPasas tipo V
Son transportadoras de protones y se asocian a las membranas de las vesculas responsables de la
acidificacin de los compartimentos intracelulares (lisosomas, endosomas, )
Transportadores ABC
Son transportadores dependientes de ATP que bombean aminocidos, pptidos, protenas, iones
metlicos, lpidos y sales biliares fuera de la clula.
Ej. Transportadores multifrmacos (MDR1), bombean ciertos frmacos fuera de la clula y son
responsables de la resistencia de algunos tumores a determinados agentes quimioterpicos.
Recuerda Todos los transportadores ABC tienen dos dominios de unin de nucletidos (NBD)
y dos dominios transmembrana.
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7. PROTENAS G
Pertenecen a la superfamilia de protenas con actividad de GTPasa. Son protenas de unin a nucletidos
de guanosina y participan en procesos de sealizacin, crecimiento y diferenciacin celular.
Su estructura es heterotrimrica (, y ) y se asocian a la cara citoslica de la membrana.
Subunidades:
- G Presenta actividad GTPasa. Tras su unin al GTP, lo hidroliza y lo transforma en GDP (estado
inactivo). Presenta un residuo de cido mirstico asociado al extremo carboxilo terminal. Puede transmitir
seales excitadoras o inhibidoras. Elevada especificidad.
- G Interaccionan con la subunidad G y permiten la interaccin con el receptor activado. Presentan un
lpido isoprenoide unido covalentemente al extremo carboxilo terminal de la protena. Este dmero es ms
inespecfico y puede interaccionar con muchos tipos de subunidad .
Recuerda Los defectos en las protenas G son causa de enfermedades el 25% de los
cnceres humanos presentan mutacin en la protena Ras, protena con actividad
GTPasa.
1. TIPOS
G Activa la adenilato ciclasa y sta transforma el ATP en AMPc (2ndo mensajero).
s
G Inhibe la adenilato ciclasa, disminuyendo las concentraciones de AMPc. Ej. Adrenalina, a travs de
i
la unin a receptores 2-adrenrgicos; somatostatina, por su unin al receptor que origina la activacin de
la protena Gi.
G Activa la va de sealizacin de los fosfosinostidos.
o
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8. ENZIMAS
Son biocatalizadores, aumentan la velocidad de una reaccin qumica sin alterar el equilibrio de la
misma.
CARACTERSTICAS
Todas las enzimas son protenas (salvo un grupo de molculas de RNA cataltico: RIBOZIMAS).
Actan disminuyendo la energa libre de activacin.
Pueden llegar a acelerar la velocidad de una reaccin entre 5 y 17 rdenes de magnitud.
Presentan especificidad de reaccin y de sustrato y son muy eficientes.
No se alteran de forma permanente durante la reaccin enzimtica.
La actividad cataltica de una enzima depende de su estado conformacional: si una enzima se
desnaturaliza o se disocia en sus subunidades, su actividad cataltica suele desaparecer Las estructuras
primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria de una protena son esenciales para su actividad cataltica.
Algunas enzimas requieren para su actividad un componente qumico adicional llamado COFACTOR, si
es uno o varios iones inorgnicos, o COENZIMA, si es una molcula orgnica (actan como transportadores
transitorios de grupos funcionales especficos, la mayora son derivados de vitaminas). Si stos se unen
covalentemente a la enzima se denominan GRUPO PROSTTICO.
La enzima completa, junto con la coenzima y/o iones metlicos, recibe el nombre de HOLOENZIMA. La
parte proteica de la enzima se denomina APOPROTENA O APOENZIMA.
Activacin de la enzima
COFACTOR ENZIMA
Cu 2+ Citocromo oxidasa, lisil-oxidasa
Fe2+ o Fe3+ Citocromo oxidasa, catalasa y peroxidasa
K + Piruvato quinasa
Mg2+ Hexoquinasa, glucosa 6-fosfatasa, piruvato quinasa
Mn2+ Arginasa, ribonucletido reductasa, SOD
Mo Dinitrogenasa, xantina oxidasa
Ni2+ Ureasa
Se Glutatin peroxidasa
Calcio Calmodulina
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Ojo Cualquier enzima que cataliza reacciones en las que se transfieren fosfatos (qui-
nasas o fosfatasas) es dependiente de Mg2+, las deshidrogenasas NAD dependien-
tes utilizan el Zn2+ como cofactor y las hidrolasas son dependientes de Mn2+.
icotinamida adenina
N cido nicotnico
In hidruro (H-)
dinucletido (NAD) (Niacina)
Piridoxina
P
iridoxal fosfato Grupos amino
(Vitamina B6)
T
etrahidrofolato Grupos monocarbonados Folato
Tiamina
T
iamina pirofosfato Aldehdos
(Vitamina B1)
CLASIFICACIN
Existe un sistema internacional para la nomenclatura y clasificacin de las enzimas creado por la Enzyme
Commission (EC) de la IUBMB (International Union of Biochemistry and Molecular Biology). Este sistema
las clasifica en funcin del tipo de reaccin catalizada:
TIPO 1: OXIDORREDUCTASAS
Transferencia de electrones: catalizan reacciones de oxidacin y reduccin. El principal agente oxidante
es el O2. En los sistemas biolgicos, el FAD+ y el NAD+, participan en numerosas reacciones de xido-
reduccin.
Oxidasas: catalizan la oxidacin de un sustrato sin incorporar oxgeno al producto.
Oxigenasas: catalizan reacciones en las que los tomos de oxgeno se incorporan directamente a la
molcula de sustrato. Las monoxigenasas catalizan reacciones en las que solo 1 de los 2 tomos de
O2 se incorpora al sustrato orgnico, mientras que el otro es reducido a H2O (tambin se denominan
oxigenasas de funcin mixta); las monoxigenasas microsomales requieren NADPH o NADH.
TIPO 2: TRANSFERASAS
Transfieren un grupo qumico de una molcula a otra. Las quinasas son un grupo de transferasas que
catalizan la transferencia de un grupo fosfato desde un nuclesido trifosfato a otra molcula.
TIPO 3: HIDROLASAS
Catalizan reacciones de hidrlisis Transferencia de grupos funcionales al agua.
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TIPO 4: LIASAS
Catalizan la adicin de grupos a dobles enlaces o la formacin de dobles enlaces por eliminacin de
grupos.
Aldolasas: catalizan la escisin reversible de enlaces C-C.
Sintasas: catalizan reacciones de condensacin, sin requerir la energa del ATP o de otros nuclesidos
trifosfato.
TIPO 5: ISOMERASAS
Catalizanla transferencia de grupos o dobles enlaces dentro de una misma molcula dando lugar a
formas isomricas. Si se cambia la posicin de un grupo fosfato la enzima se llama mutasa.
CLASE SUBCLASE
O
xidorreductasas Deshidrogenasas, reductasas, oxidasas, peroxidasas,
catalasa, oxigenasas e hidroxilasas
Transaldolasas, transcetolasas, fosforiltransferasas,
T
ransferasas
quinasas y fosfomutasas
Esterasas, glucosidasas, peptidasas, fosfatasas, tiolasas,
H
idrolasas
fosfolipasas, amidasas, desaminasas y ribonucleasas
Descarboxilasas, aldolasas, hidratasas, deshidratasas,
L
iasas
sintasas y liasas
L
igasas Sintetasas y carboxilasas
En una reaccin qumica espontnea (exergnica) la energa basal del sustrato es mayor que la del
producto, por lo que G es menor que cero.
La presencia de una enzima no modifica la G y no altera el equilibrio entre productos y sustratos, pero
consigue que se alcance el equilibrio antes.
Las enzimas presentan un sitio de unin al sustrato denominado centro o sitio activo con el que
interacciona el sustrato y forma un complejo binario estabilizado por interacciones no covalentes: complejo
enzima-sustrato (ES). Esta unin enzima-sustrato es altamente especfica.
E+S ES EP E +P
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Las caractersticas del centro activo estn determinadas por la naturaleza de los aminocidos que
lo forman y la distribucin espacial que adoptan (contiene las cadenas laterales de los aminocidos
involucrados en la catlisis de la reaccin).
Para que se produzca la transformacin de sustrato en producto es necesario pasar por una situacin
intermedia de nivel energtico superior, que supone la distorsin de enlaces y la orientacin de grupos
funcionales: el estado de transicin. Este estado es inestable y transitorio.
Aunque la reaccin sea espontnea se ha de superar una barrera energtica conocida como energa
de activacin, que es la energa necesaria para alcanzar el estado de transicin y marca la velocidad de
la reaccin:
- Energa de activacin elevada Reaccin ms lenta.
- Energa de activacin baja Reaccin ms rpida.
Las enzimas aceleran la velocidad de reaccin porque disminuyen la energa de activacin.
Laenergia de activacin viene definida como la cantidad de energa que se requiere para convertir
un mol de molculas de sustrato desde el estado basal (forma estable de baja energa de la molcula) al
estado de transicin.
Recuerda Cuando en una reaccin existen varios pasos, la velocidad global viene determina-
da por el paso (o pasos) cuya energa de activacin es ms elevada; este paso se
denomina paso limitante de la velocidad.
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1. MODELOS DE INTERACCIN ENZIMA-SUSTRATO
CINTICA ENZIMTICA
La cintica enzimtica estudia la velocidad de una reaccin y el modo en que sta cambia en respuesta
a parmetros experimentales.
La velocidad de una reaccin se define como el cambio de la concentracin de un reactivo o producto
por unidad de tiempo.
Las reacciones qumicas se pueden clasificar segn su comportamiento cintico en reacciones de primer
orden, de segundo orden y de orden cero:
- Reacciones de primer orden: son reacciones del tipo A B en las que la velocidad depende nicamente
de un sustrato y por lo tanto, la velocidad es directamente proporcional a la concentracin del
sustrato.
V= k [A]
k = Constante de velocidad. Expresada en unidades de tiempo-1 (s-1).
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- Reacciones de segundo orden: son reacciones en las que intervienen 2 sustratos para dar un producto:
A + B C. La velocidad de formacin del producto depende de la concentracin de los sustratos. Si hay
un nico sustrato, la velocidad de la reaccin es proporcional al cuadrado de la concentracin de sustrato.
V = k [A] [B]
- Reacciones de orden cero: la velocidad es independiente de la concentracin de sustrato. Puede
depender de otros factores. Ej. Concentracin de enzima.
1. Primera etapa: lineal A bajas concentraciones de sustrato la reaccin se comporta como si fuera de
primer orden. La velocidad solo depende de la concentracin de sustrato.
2. Segunda etapa: curvilnea A concentraciones de sustrato intermedias, los aumentos de la
concentracin de sustrato conducen a menores aumentos en la velocidad de la reaccin.
3. Tercera etapa A partir de determinadas concentraciones de sustrato, aunque se sigan aumentando
esas concentraciones, la velocidad no vara (se alcanza una velocidad constante). La reaccin sigue una
cintica de orden cero.
1. CINTICA DE MICHAELIS-MENTEN
La representacin grfica del transcurso de reaccin enzimtica monosustrato muestra una curva
hiperblica (descrita por Michaelis y Menten).
K1 K2
E+ S ES E + P
K -1 K -1
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Km se define como la constante de Michaelis-Menten.
Vmax [S]
V0 = ECUACIN DE MICHAELIS-MENTEN
Km + [S]
Efecto de la concentracin de sustrato sobre la V0 de una reaccin catalizada por una enzima
1 Km 1
= +
Vo Vmax [S] Vmax
Pendiente = K /Vmax.
m
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Punto de corte con el eje de ordenadas = 1/V .
max
Punto de corte con el eje de abcisas = -1/K .
m
Esta transformacin permite determinar K y V con mayor facilidad y permite analizar los efectos de
m max
los inhibidores con mayor exactitud.
b) Ecuacin de Eadie-Hofstee
Pendiente = -K .
m
Punto de corte con el eje de ordenadas = V
max.
Punto de corte con el eje de abcisas = V /Km.
max
c) Ecuacin de Hanes-Woolf
Pendiente = 1/V .
max
Punto de corte con el eje de ordenadas = K /Vmax.
m
Punto de corte con el eje de abcisas = -K .
m
3. REACCIONES MULTISUSTRATO
La mayora de las reacciones bioqumicas catalizadas por enzimas comportan la reaccin de dos o ms
sustratos, a menudo con la formacin de mltiples productos.
Las reacciones multisustrato se dividen en:
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4. INHIBICIN ENZIMTICA
Los inhibidores enzimticos son molculas que interfieren en las reacciones enzimticas hacindolas
ms lentas o detenindolas.
Existen 2 tipos de inhibicin.
a) Inhibicin reversible
Son molculas que se unen a la enzima mediante interacciones no covalentes.
Alteran los parmetros cinticos.
Clases:
Inhibicin competitiva (Km , Vmax =) El sustrato y el inhibidor compiten por unirse al sitio activo de la
enzima. Mientras el inhibidor ocupe el sitio activo impide la fijacin del sustrato a la enzima. Normalmente
este tipo de inhibidores presentan estructuras similares al sustrato. La inhibicin puede revertirse
aumentando la concentracin de sustrato.
Inhibicin acompetitiva (Vmax, Km ) El inhibidor se fija a un sitio distinto del que se fija el sustrato en
el sitio activo y se une exclusivamente al complejo ES.
Inhibicin no competitiva (Vmax , Km =) El inhibidor se fija a un sitio distinto al centro activo y se une
tanto a la E como al complejo ES.
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Inhibicin mixta (Vmax , Km , puede o ) Combina la inhibicin competitiva y acompetitiva.
b) Inhibicin irreversible
Los inhibidores irreversibles se unen de manera covalente modificando grupos funcionales de la enzima
esenciales para su actividad, o bien forman una asociacin no covalente muy estable.
Este tipo de inhibidores no tienen un comportamiento cintico de Michaelis-Menten.
Su principal utilidad es el diseo de frmacos, pero tambin se usan para conocer el mecanismo de
reaccin de las enzimas inhibidas.
Inactivadores suicidas Compuestos poco reactivos hasta que se unen al sitio activo de una
Ej.
enzima especfica, convirtiendo el centro activo en afuncional.
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ACTIVIDAD ENZIMTICA
Actividad enzimtica: Es la cantidad de enzima capaz de transformar un 1mol de sustrato por minuto
a 25C en condiciones ptimas. Se mide en Unidades Internacionales (UI).
Actividad especfica: Es el nmero de unidades enzimticas por mg de protena purificada. Constituye
una medida de la pureza del preparado.
Factores que afectan a la actividad enzimtica:
- Concentracin de enzima: cuando la enzima est saturada por el sustrato, la velocidad es directamente
proporcional a la concentracin de enzima e independiente de la concentracin de sustrato.
- Concentracin de sustrato: la V0 de una reaccin es directamente proporcional a la [S] (a [E] cte) hasta
alcanzar la Vmax. En bioqumica las reacciones enzimticas se estudian bajo condiciones de saturacin
de sustrato. El agotamiento de sustrato puede dar resultados falsamente bajos en sueros con elevada
actividad enzimtica.
- Temperatura: el aumento de la temperatura conduce a un aumento de la velocidad de la reaccin dentro
de un intervalo determinado. Fuera de ese intervalo, la enzima pierde actividad. Existe una temperatura
ptima caracterstica de cada enzima.
- pH: las enzimas tienen un pH ptimo o un intervalo de pH en el que su actividad es mxima; a valores
superiores o inferiores la actividad disminuye, ya que los cambios en el pH alteran el estado de ionizacin
de las cadenas laterales de los aminocidos, afectando as a la afinidad de la enzima por el sustrato.
Tambin se puede alterar la etapa de transformacin del sustrato en producto si se modifican los residuos
catalticos.
a) Control gentico
Induccin enzimtica: sntesis de enzimas como respuesta a las necesidades metablicas.
Represin enzimtica: inhibicin de la sntesis enzimtica por el producto final (retroinhibicin).
b) Compartimentalizacin
La separacin fsica de enzimas, sustratos y molculas reguladoras en diferentes regiones o
compartimentos celulares permite a las clulas utilizar eficazmente los recursos energticos disponibles.
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Adenilacin.
Ubiquitinizacin: marca que destina a la degradacin proteoltica.
Miristilacin.
ADP-ribosilacin.
b) Mtodos cinticos
Implican la medida continua del cambio de concentracin en funcin del tiempo.
Permiten comprobar la cintica de orden cero.
Sonms rpidos y menos sensibles a las interferencias externas (como el color o la turbidez) que los
mtodos de punto final.
ENZIMAS REGULADORAS
Son enzimas oligomricas, suelen presentar varias subunidades y en algunos casos, el sitio o los sitios
reguladores y el sitio activo se encuentran en diferentes subunidades.
A menudo son las que catalizan la primera reaccin de la ruta metablica.
Las enzimas reguladoras tienen sitios especficos de unin para dos clases de ligandos:
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a) Un sitio cataltico por el que se unen al sustrato especfico.
b) Uno o varios sitios reguladores por el que se unen a diversos efectores.
La unin de un efector al sitio regulador cambia la conformacin de la enzima alterando las propiedades
cinticas del sitio cataltico.
1. ENZIMAS ALOSTRICAS
Presentan otras conformaciones inducidas por la unin de moduladores (pueden ser moduladores
activadores o inhibidores):
1. Interacciones homotrpicas: cuando el sustrato y el modulador son idnticos (la misma molcula).
2. Interacciones heterotrpicas: cuando el modulador es una molcula diferente del sustrato.
La cintica de las enzimas alostricas presenta un modelo de CURVA SIGMOIDEA Pequeos cambios
en la concentracin de un modulador pueden producir grandes cambios en la actividad enzimtica.
Presentan efecto COOPERATIVO: la unin del modulador a una de las subunidades produce un cambio
de conformacin que se transmite a las otras subunidades. Existen 2 modelos que explican el efecto
cooperativo de las enzimas alostricas:
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conformacin T. Las conformaciones de todos los protmeros de la enzima cambian simultneamente
cuando se une el primer efector. Solo explica la cooperatividad positiva y no permite conformaciones
intermedias. Este es el modelo ms aceptado.
SERN-PROTEASAS
Estas enzimas se diferencian entre s porque cada una corta preferentemente una cadena polipeptdica
en el lado carboxilo de aminocidos especficos.
Todas las sern-proteasas poseen alrededor del centro activo un residuo de aspartato, uno de histidina y
otro de serina (trada cataltica).
Adems todas poseen un bolsillo hidrofbico cerca del residuo de Ser del centro activo (en la sern-
proteasa tripsina este bolsillo es profundo y estrecho).
1. QUIMIOTRIPSINA
Es una sern-proteasa que cataliza la rotura hidroltica de enlaces peptdicos formando un intermediario
acil-covalente transitorio.
Acta especficamente sobre los enlaces peptdicos adyacentes a residuos de aminocidos aromticos
(Trp, Phe, Tyr).
Trada cataltica: Asp102, His57 y Ser195.
Elbolsillo hidrofbico es ancho y el centro activo es hidrofbico, capaz de acomodar cadenas laterales
de aminocidos aromticos.
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1. PRINCIPALES ENZIMAS CON INTERS CLNICO
a) Fosfatasa alcalina
Cataliza la hidrlisis de steres fosfato a pH alcalino (9-10).
Se localiza en la membrana plasmtica.
Presenta diferentes isoenzimas en: hgado, hueso, intestino, placenta (durante el embarazo) y
leucocitos.
Aumentos fisiolgicos de la fosfatasa alcalina:
La elevacin de la isoenzima placentaria fuera del embarazo es signo de enfermedad neoplsica intestinal
Isoenzima Regan o carcinoplacentaria.
b) Fosfatasa cida
Cataliza la hidrlisis de steres fosfato a pH cido.
Est localizada en los lisosomas.
Seencuentra en numerosos tejidos: hgado, glbulos rojos, mdula sea y plaquetas, pero los niveles
ms elevados se encuentran en la prstata.
Existe una isoforma resistente al tartrato que es muy til en el diagnstico de tricoleucemia y
ocasionalmente, en otras enfermedades linfoproliferativas.
Se eleva en en el carcinoma prosttico (aunque el PSA se considera ms preciso como marcador de
enfermedad prosttica), en el mieloma mltiple, en crisis drepanocticas, en osteopatas primarias y en
trombocitosis.
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c) Gamma-glutamil transpeptidasa, GGT
Regula el transporte de aminocidos a travs de la membrana celular, catalizando la transferencia de un
grupo glutamilo desde el glutatin a aminocidos libres.
Est localizada en microsomas y en la membrana del retculo endoplsmico liso principalmente.
Se encuentra fundamentalmente en: hgado, pncreas, bazo, pulmn y riones.
Es
la enzima heptica ms sensible en la deteccin de la OBSTRUCCIN BILIAR, COLANGITIS y
COLECISTITIS.
Adems permite detectar el consumo crnico de alcohol; es muy til en la deteccin sistemtica
y evaluacin de los pacientes alcohlicos. Los niveles estn elevados en el 75% de los pacientes que
consumen alcohol de forma crnica.
Recuerda La AST se encuentra unas 40 veces ms elevada en el interior del eritrocito que
fuera por lo que la hemlisis aumentar los niveles de AST.
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Hepatopatas
H epatopatas agudas: aumentan tanto la AST como la ALT (aumento menor de la AST
que de la ALT)
Viral: Una de las causas que produce mayores aumentos. VEB, CMV, VIH
Otros agentes infecciosos: aumentos ms moderados. Brucelosis, tuberculosis,
fiebre tifoidea, hongos, parsitos,
Txico- farmacolgica: aumentos muy marcados en la intoxicacin con paracetamol
y tetracloruro de carbono
H epatopata alcohlica: aumentos moderados. La AST aumenta ms que la ALT. Un
cociente AST/ALT>2 sugiere enfermedad heptica alcohlica
H epatopata autoinmune
C irrosis hepatica: aumentos moderados
C olestasis: aumentos moderados, junto con fosfatasa alcalina aumentada el triple de su
valor normal
N eoplasias primarias hepticas y metastsis
Pancreatitis aguda
f) Lactato deshidrogenasa
Cataliza la oxidacin reversible de lactato a piruvato.
Est localizada en el citosol.
Es un indicador de destruccin celular sensible pero poco especfico.
Existen cinco isoenzimas con distribucin tisular diferentes, constituidas por 4 subunidades de 2 tipos: H y M.
- LDH-1 (H4): procede en un 60% del msculo cardiaco y en menor proporcin de los eritrocitos.
- LDH-2 (H3M1): msculo cardiaco, eritrocitos y sistema reticuloendotelial.
- LDH-3 (H2M2): pulmones.
- LDH-4 (H1M3): riones, placenta y pncreas.
- LDH-5 (M4): hgado y msculo esqueltico.
En el suero de personas sanas la isoenzima predominante es la LDH-2.
Lasisoenzimas presentan distinta movilidad electrofortica, siendo la LDH-1 la de mayor migracin
andica y la LDH-5 la de menor migracin andica.
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Los hemates presentan una concentracin 60 veces superior a la del suero por lo que la hemlisis
produce un aumento significativo de los niveles sanguneos de LDH.
g) Creatina quinasa, CK
Cataliza la fosforilacin reversible de la creatina utilizando el fosfato del ATP, para poder almacenar
energa en forma de fosfato de creatina.
Se encuentra en el citosol y en la mitocondria.
Es un dmero compuesto por 2 subunidades, M y B, cuya proporcin vara segn el tejido, dando lugar
a 3 isoenzimas:
a) BB o rpida (CK-1) Localizacin mayoritaria en el cerebro.
b) MB o intermedia (CK-2) Se encuentra en msculo cardiaco y en msculo esqueltico.
c) MM o lenta (CK-3) Msculo esqueltico. Es la isoenzima mayoritaria en suero.
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AUMENTOS PATOLGICOS DE LA CK
Enfermedad muscular:
Miopatas congnitas: distrofia muscular, distrofia miotnica
Miopatas adquiridas: dermatomiositis o polimiositis. Elevaciones ms de 20 veces el
valor normal
Rabdomiolisis: elevacin de ms de 4 veces el valor normal
E
nfermedades cardiovasculares:
I nfarto agudo de miocardio:
- La CK total se eleva a las 5-6 horas del IAM. Alcanza el pico mximo a las 18 horas.
Se normaliza a los 3 das
- CK-MB aumenta a las 3-6 horas del IAM, alcanza el pico mximo a las 12-24 horas y
se normaliza a las 48-72 horas depus del infarto. No es una iosenzima especfica
- Cociente CK-MB/CK total: >5% Lesin miocrdica
- % de CK-MB >6% con respecto a la CK total Indicativo de IAM
E
nfermedades cerebrales: accidente cerebrovascular; a expensas de la fraccin CK-BB
h) Amilasa
Es una enzima que hidroliza los enlaces glucosdicos (14) del almidn originando maltosa y
maltotriosa. Es una metaloenzima que necesita calcio para su actividad No se puede determinar en
plasma con anticoagulantes quelantes de calcio.
Existen 2 isoenzimas principales: pncreas y glndulas salivales.
i) Lipasa
Es una enzima que cataliza la hidrlisis de los triglicridos y steres de glicerol en cidos grasos.
Es producida principalmente por el pncreas y segregada al interior del duodeno para ejercer su accin.
Tambin es sintetizada en menor proporcin por el intestino, la faringe, el rin y el bazo.
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2. OTRAS ENZIMAS DE INTERS CLNICO
b) Aldolasa
La aldolasa es una enzima glucoltica que cataliza la escisin de fructosa 1,6-bisfosfato en
gliceraldehdo-P y dihidroxiacetona-P.
Se localiza en el citosol.
Presenta especial importancia en aquellos tejidos en los que la gluclisis es una va principal de obtencin
de energa (msculo esqueltico, msculo cardiaco, eritrocitos e hgado).
Tiene inters su elevacin en las enfermedades musculares esquelticas:
c) Acetilcolinesterasa o colinesterasa
Es una enzima que hidroliza la acetilcolina a acetato + colina.
Su origen en la sangre son los hemates y en el tejido se encuentra en SNC.
Resulta inhibida por los pesticidas organofosforados.
b) Mioglobina
Lamioglobina es una protena de pequeo tamao presente en las clulas musculares esquelticas
y cardiacas.
Se libera rpidamente tras la lesin miocrdica Marcador ms precoz de lesin miocrdica.
Se libera a las 2-3 horas de la lesin, alcanza el pico mximo a las 6 horas del dao miocrdico (unas
6 veces el lmite superior de normalidad) y retorna a sus valores normales a las 24 horas.
Muy sensible, pero poco especfico.
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9. VITAMINAS
Son molculas orgnicas, presentes en los alimentos naturales, que el ser humano no puede sintetizar en
cantidades suficientes o en su totalidad y que se requieren en pequeas cantidades para el mantenimiento
de las funciones metablicas de la mayor parte de las clulas.
VITAMINAS HIDROSOLUBLES
Son solubles en agua.
No se almacenan, salvo la cobalamina, y se excretan por la orina Rara vez hay toxicidad.
Se deben ingerir con regularidad.
Son precursores esenciales de coenzimas y todas, excepto el cido ascrbico y la biotina, deben ser
metablicamente convertidas en formas activas.
Casi todas son miembros del complejo B.
Los alimentos con mayor contenido en tiamina son: los cereales, la levadura, la carne de cerdo magra,
el corazn y el rin.
Su forma activa es el difosfato de tiamina, tambin llamado pirofosfato de tiamina (TPP), que acta de
coenzima.
El TPP acta como transportador de grupos aldehdo activados en reacciones de:
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Las principales fuentes son: levadura, leche, clara de huevo, hgado y rin.
Las coenzimas flavnicas son el monocletido de flavina (FMN) y el dinuclotido de flavina y adenina
(FAD). El FMN se forma por fosforilacin dependiente de ATP a partir de la rivoflavina. El FAD se forma por
una reaccin de fosforilacin adicional a partir del FMN.
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Deficiencia:
Arrivoflavinosis: muy poco frecuente. En personas desnutridas o alcohlicos y asociado con una baja
ingesta de leche, huevos o carne. Sntomas poco especficos, que afectan principalmente al sistema
ocular: hipersensibilidad a la luz, lagrimeo, prdida de agudeza visual, opacidad corneal, Tambin
puede haber afectacin mucocutnea en forma de dermatitis seborreica y a debilidad muscular.
El organismo puede sintetizar niacina a partir del aminocido esencial triptfano, aunque solo se lleva a
cabo esta sntesis cuando se han satisfecho todas las necesidades corporales de triptfano. Por lo tanto,
la mayora de los individuos requieren fuentes dietticas tanto de triptfano como de niacina.
Las principales fuentes alimentarias de niacina son: hgado, carne roja, cereales y pescado.
Las coenzimas activas del cido nicotnico y la nicotinamida son: el dinucletido de nicotinamida y adenina
(NAD) y el dinucletido de nicotinamida y adenina fosfato (NADP).
Actan como transportadores transitorios de iones hidruro en reacciones de oxido-reduccin.
Son coenzimas de enzimas deshidrogenasas (en gluclisis, ciclo de Krebs y oxidacin de cidos
grasos) Ej. Lactato deshidrogenasa, malato deshidrogenasa, gliceraldehdo 3-P deshidrogenasa, isocitrato
deshidrogenasa, ...
Deficiencia:
- Pelagra: dficit nutricional de niacina. Enfermedad de las 3 D: dermatitis, diarrea y demencia.
- Otras patologas asociadas al dficit de niacina son:
La enfermedad de Hartnup: trastorno en el transporte intestinal y renal del triptfano.
Sndrome carcinoide: aumento del metabolismo del triptfano a partir de la serotonina.
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La sntesis de la forma activa del cido pantotnico ocurre de la siguiente manera:
Estructura de la CoA
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El piridoxal y la piridoxamina son las formas principales halladas en los tejidos animales mientras que la
piridoxina se halla predominantemente en los vegetales. Las fuentes de vitamina B6 son: levadura, germen
de trigo, legumbres, avena y patata.
Las 3 formas fosforiladas son: piridoxina 5-P, piridoxamina 5-P y piridoxal 5-P o fosfato de piridoxal
(PLP), que es la forma fisiolgicamente activa de la vitamina, la que predomina en plasma y acta como
coenzima en las reacciones metablicas.
El cido 4-piridxico es el principal catabolito excretado por la orina.
Acta como transportador de grupos aminos. Participa como coenzima en diferentes reacciones del
metabolismo de aminocidos (transaminacin, descarboxilacin, desaminacin, racemizacin, escisin
aldlica, ...). Interviene en la sntesis del grupo hemo, de neurotransmisores y de esfingosina. Es coenzima
de la glucgeno fosforilasa.
Recuerda El PLP forma bases de Schiff Formacin de un intermediario entre el grupo al-
dehdo del PLP y el grupo -amino de un residuo especfico de lisina en el centro
activo de la enzima Reacciones de transaminacin y descarboxilacin de ami-
nocidos.
Las principales fuentes nutricionales son: hgado, yema de huevo, levaduras y leche. Adems existe una
produccin endgena de biotina llevada a cabo por microorganismos de la flora intestinal humana: E.Coli,
Proteus vulgaris, Streptococcus faecalis, ...
La BIOTINA acta como coenzima (grupo prosttico) en reacciones de transferencia de CO2
catalizadas por carboxilasas. Existen cuatro carboxilasas biotina-dependientes.
Metilcrotonil-CoA
3-Metilcrotonil-CoA carboxilasa Catabolismo de la leucina
3-Metilglutaconil-CoA
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Deficiencia: la deficiencia de biotina es rara. Puede producirse como resultado de una absorcin
intestinal defectuosa o por el consumo de huevos crudos, ya que la clara de huevo tiene una protena
denominada avidina que se combina con la biotina impidiendo su absorcin.
Estructura de la cobalamina
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Recuerda La cobalamina se absorbe en el leon y para ello necesita unirse al factor intrnseco (secreta-
do por las clulas parietales de la mucosa gstrica). Para su transporte a los tejidos debe
unirse a la transcobalamina II.
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La forma de coenzima activa es el tetrahidrofolato que acta como transportador de fragmentos
monocarbonados.
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La vitamina C est presente en frutas (ctricos, meln, fresas, pia y pltano) y en vegetales.
Es un potente agente reductor que participa en numerosas reacciones de hidroxilacin en el organismo.
Participa, por tanto, como donador de electrones y antioxidante.
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Deficiencia:
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VITAMINAS LIPOSOLUBLES
Son molculas hidrfobas apolares que derivan del ISOPRENO.
Setransportan en sangre en forma de lipoprotenas o unidas a protenas fijadoras especficas y su
absorcin intestinal requiere la presencia de cidos biliares.
No se excretan por la orina y tienden a almacenarse en el organismo (lo que puede originar toxicidad).
1. VITAMINA A (RETINOL)
La vitamina A es un compuesto poliisoprenoide que contiene un anillo ciclohexenilo.
Retinol (vitamina A)
La vitamina A se encuentra en forma de provitamina en las plantas, como -caroteno (constituido por 2
molculas de retinal unidas en el extremo aldehdo de sus cadenas de carbonato).
Sus principales fuentes son: hgado, queso, leche, huevos, pescado y frutas. Un 90% de la vitamina A de
la dieta se encuentra en forma de steres de retinol.
Son transportados en sangre a travs de la protena ligadora de retinol y se almacenan en el hgado
tambin en forma de steres de retinol.
Las formas derivadas ms importantes de la vitamina A son: retinal y cido retinoico.
Funciones:
a) Ciclo visual:
- La vitamina A, en su forma 11-cis-retinal, se asocia reversiblemente con la protena visual opsina para
formar la rodopsina Pigmento visual localizado en los bastones que participan en la visin nocturna.
- Cuando la rodopsina se expone a la luz se disocia en retinal todo-trans (reaccin de isomerizacin) y
opsina. Esto viene acompaado de una disminucin de la conductancia a los iones sodio en la membrana
del bastn, la membrana se hiperpolariza y disminuye la liberacin de glutamato (neurotransmisor
inhibidor), lo que provoca que el bastn se excite. De esta manera la retina se adapta a la luz en oscuridad.
Ciclo visual
b) El cido retinoico participa en la promocin del crecimiento y en la diferenciacin de los tejidos. Tambin
es intermediario en la sntesis de glucoprotenas.
Deficiencia:
- Ceguera nocturna, queratinizacin de tejido epitelial, reduccin de la secrecin mucosa,
2. VITAMINA D
Es una prohormona esteroide (secoesteroide).
La provitamina D se encuentra en 2 formas:
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Estructura de la vitamina D
El colecalciferol se produce en la piel por radiacin UV del 7-dehidrocolesterol, un metabolito normal del
colesterol. Tambin pueden obtenerse las formas D2 y D3 a travs de la dieta.
Las mejores fuentes de vitamina D son: la leche y la mantequilla.
2
Lasmejores fuentes de vitamina D3 son: el pescado de agua salada (salmn, sardinas y arenques), el
hgado y la yema de huevo.
La vitamina D se absorbe en el intestino delgado y circula en sangre unida a una globulina especfica. En
el hgado es hidroxilada en el C-25 pasando a 25-(OH)-vitamina D3, 25-hidroxicolecalciferol o calcidiol.
En los tbulos renales proximales se produce la hidroxilacin del calcidiol en el C-1 para dar lugar a la
vitamina D activa 1,25-(OH)2-vitamina D3, 1,25-dihidroxicolecalciferol o calcitriol (reaccin catalizada
por 1--hidroxilasa mitocondrial).
Funciones:
a) Favorece la absorcin intestinal de calcio y fosfato: aumenta la expresin de una protena fijadora de
calcio en las clulas epiteliales intestinales, la calbindina.
b) Favorece la resorcin sea.
c) Aumenta la reabsorcin de calcio y fosfato por el rin.
Deficiencia:
- Osteomalacia: en adultos. Desmineralizacin de los huesos haciendo que sean ms blandos y
susceptibles a las fracturas.
- Raquitismo: en nios. Formacin continua de matriz y de cartlago, que se mineralizan de forma
inadecuada dando lugar a huesos blandos y flexibles.
3. VITAMINA E (TOCOFEROL)
Es un isoprenoide sustituido de 6-hidroxicromanos.
El -D-tocoferol es el ms abundante y el de mayor actividad biolgica.
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Las fuentes ms importantes de vitamina E son los aceites vegetales.
La cantidad de -tocoferol est relacionada con la cantidad de cido linolico presente.
El tocoferol en el torrente circulatorio se asocia a quilomicrones y VLDL.
El tejido adiposo es el tejido que mayor cantidad de vitamina E almacena.
Funciones:
a) Protege frente a la peroxidacin de los cidos grasos poliinsaturados de las membranas plasmticas.
b) La vitamina E es un antioxidante natural (relevante para la membrana del eritrocito).
Deficiencia:
4. VITAMINA K
Son NAFTOQUINONAS con poliisoprenoides sustituidos.
Existen varias formas de vitamina K:
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BIOQUMICA METABLICA
1. BIOENERGTICA Y METABOLISMO
Elmetabolismo es la suma de todas las transformaciones qumicas que se producen en una clula u
organismo. Est formado por una serie de reacciones catalizadas enzimticamente que constituyen las
rutas metablicas.
Metabolismo intermediario Es el conjunto de vas metablicas centrales que sirven para la sntesis,
degradacin y conversin de metabolitos de bajo peso molecular. No incluye la biosntesis de los cidos
nucleicos y protenas a partir de sus precursores monomricos.
El metabolismo puede subdividirse en 2 categoras importantes:
a) Catabolismo Fase degradativa en la que los nutrientes orgnicos (glcidos, lpidos y protenas)
se convierten en productos ms pequeos y sencillos (cido lctico, CO2 y NH3). Las rutas catablicas
liberan energa, parte de la cual se conserva mediante la formacin de ATP y transportadores electrnicos
reducidos (NADH, NADPH y FADH2). El resto se pierde en forma de calor. Son rutas convergentes
(formacin de un producto comn, CO2 y H2O).
b) Anabolismo Fase biosinttica en la que precursores pequeos y sencillos se transforman en
molculas ms complejas como lpidos, polisacridos, protenas y cidos nucleicos. Las reacciones
anablicas requieren aporte de energa, generalmente en forma de ATP, y poder reductor, en forma de
NADH, NADPH y FADH2. Las rutas anablicas son divergentes.
La energa liberada en los procesos catablicos es utilizada en los procesos anablicos.
Las rutas del catabolismo y del anabolismo no son exactamente una la inversa de la otra, es decir,
presentan enzimas comunes y alguna de las enzimas diferente. stas representan los sitios de regulacin
especfica independiente. Adems transcurren en compartimentos celulares diferentes. Ej. Catabolismo
de cidos grasos en la mitocondria y sntesis de cidos grasos en el citoplasma.
Regulacin de las rutas metablicas:
- Control cintico segn disponibilidad de sustrato: cuando la concentracin intracelular de sustrato est
prxima o por debajo de la Km, la velocidad de la reaccin depende fuertemente de la concentracin de
sustrato.
- Regulacin alostrica: por un intermediario metablico o coenzima que refleja el estado metablico
interno de la clula. Ej. El exceso de ATP inhibe alostricamente las rutas catablicas.
- Regulacin hormonal o por factores de crecimiento.
- Compartimentalizacin celular.
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BIOENERGTICA
Es el estudio de las variaciones de energa que acompaan a las reacciones bioqumicas. Las
transformaciones biolgicas de la energa obedecen a las leyes de la termodinmica.
a) Primera ley: Principio de conservacin de la energa
En cualquier cambio qumico o fsico, la cantidad total de energa de un sistema permanece constante;
la energa puede cambiar de forma o ser transportada de una regin a otra, pero no puede ser creada ni
destruida.
b) Segunda ley
En todos los procesos naturales aumenta la entropa del Universo; o lo que es lo mismo, si un proceso se
produce espontneamente la entropa total de un sistema (grado de desorden) debe aumentar.
c) Tercera ley
Solo las sustancias puras, cristalinas y perfectamente ordenadas tienen entropa nula en el cero absoluto
de temperatura; o lo que es lo mismo, ningn sistema puede enfriarse hasta el cero absoluto.
En los sistemas biolgicos, en condiciones de presin y temperatura constantes, hay una ecuacin que
combina las 2 primeras leyes y describe los cambios de energa que tienen lugar en una reaccin qumica:
G = H TS
Parmetros
G: Variacin de la energa libre de Gibbs, G. Expresa la cantidad de energa disponible para realizar
un trabajo a presin y temperatura constantes. Es la energa que utilizan las clulas.
- G < 0 Reaccin exergnica: ocurre de manera espontnea, con prdida de energa libre.
- G > 0 Reaccin endergnica: no ocurre espontneamente. El sistema gana energa libre.
H: Variacin de la entalpa, H. Es el contenido calrico del sistema de reaccin. Refleja el nmero y la
clase de enlaces qumicos en los reactivos y en los productos.
- H < 0 Reaccin exotrmica: libera calor (el contenido calrico de los productos es menor que el de
los reactivos).
- H > 0 Reaccin endotrmica: absorben calor del entorno. Al aumentar la temperatura se favorece la
aparicin de productos.
S: Variacin de la entropa, S. Es una expresin cuantitativa del grado de desorden o libertad de un
sistema. Los sistemas desordenados tienen una entropa elevada. La vaporizacin aumenta la entropa
de un sistema.
T: Temperatura absoluta.
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Recuerda Durante el crecimiento y divisin de las clulas, el orden interno celular se compensa con el
desorden que se genera en su entorno. Los organismos vivos conservan su orden interno
tomando de su entorno energa libre en forma de nutrientes y devolviendo a su entorno una
cantidad igual de energa en forma de calor y entropa.
La composicin de un sistema de reaccin tiende a cambiar hasta que se alcanza el equlibrio. Las
concentraciones de reactivos y productos en el equilibrio definen la constante de equilibrio, Keq Relacin
entre las concentraciones molares (mol/L) de reactivos y de productos.
[Productos]eq
Keq =
[Reactivos]eq
Variacin de energa libre de Gibbs estndar (G): Es la fuerza propulsora del sistema hacia el
equilibrio en condiciones estndar (T=25C, P=1 atm, pH=7 y concentraciones iniciales de reactivos y
productos=1M). Indica en qu direccin y hasta qu punto transcurre una determinada reaccin para
alcanzar el equilibrio en las condiciones ya mencionadas.
G = G + RT ln Keq
Cuando G = 0 se alcanza el equilibrio. Sustituyendo en la ecuacin anterior:
G = - RT ln Keq
Por tanto, la G de una reaccin qumica es una forma matemtica alternativa de expresar su constante
de equilibrio.
Ojo Los valores de G en las reacciones qumicas secuenciales son aditivos. Esto
explica por qu una reaccin termodinmicamente desfavorable (endergnica)
puede ser impulsada en el sentido favorable acoplndole una reaccin muy exer-
gnica a travs de un intermediario comn.
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GO (kJ/mol) GO (Kcal/mol)
Fosfoenolpiruvato (PEP) - 61,9 - 14,8
1,3 Bisfosfoglicerato
- 49,3 - 11,8
( fosfoglicerato + Pi)
Fosfocreatina - 43,0 - 10,3
ADP ( AMP+ Pi) - 32,8 - 7,8
ATP ( ADP + Pi) - 30,5 - 7,3
ATP ( AMP + PPi) - 45,6 - 10,9
AMP (adenosina + Pi) - 14,2 - 3,4
PPi ( 2 Pi) - 19,2 - 4,0
Glucosa 1-P - 20,9 - 5,0
Fructosa 6-P - 15,9 - 3,8
Glucosa 6-P - 13,8 - 3,3
Glicerol 1-P - 9,2 - 2,2
Acetil-CoA - 31,4 - 7,5
En la escala de potencial de transferencia de grupo, debido a esta posicin intermedia, el ATP puede
transportar energa desde compuestos fosfato de alta energa producidos por el catabolismo a compuestos
tales como la glucosa, convirtindolas en especies ms reactivas.
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Recuerda En las reacciones de hidrlisis con variaciones de energa libre muy negativas, los pro-
ductos son ms estables que los reactivos por varias razones:
a) En los reactivos, la tensin de enlace debida a la repulsin electrosttica queda
liberada por la separacin de carga.
b) Los productos estn estabilizados por ionizacin (ATP, acilfosfatos y tiosteres), por
isomerizacin (tautomerizacin) o por resonancia Ej. La creatina liberada a partir de la
fosfocreatina.
2. ANABOLISMO
a) Etapa 1. Implica tambin al ciclo de Krebs, que suministra molculas para las reacciones biosintticas
(el ciclo de Krebs es un nexo de unin entre el catabolismo y el anabolismo).
b) Etapa 2. Supone la transformacin de los metabolitos del ciclo de Krebs en monmeros.
c) Etapa 3. Comprende la biosntesis de macromolculas a partir de sus monmeros.
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2. METABOLISMO DE LA GLUCOSA
CATABOLISMO DE LA GLUCOSA: GLUCLISIS
Tambin denominada Ruta de Embden-Meyerhof-Parnas.
1. FASES DE LA GLUCLISIS
FASE PREPARATORIA
a) Fosforilacin de la glucosa a glucosa 6-P. HEXOQUINASA
Reaccin IRREVERSIBLE con consumo de ATP.
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La HEXOQUINASA:
- No solo cataliza la fosforilacin de la glucosa sino tambin de otras hexosas. Requiere Mg2+ para su
actividad.
- Presenta diferentes isoenzimas, una de ellas es la GLUCOQUINASA, que est localizada exclusivamente
en el hepatocito y solo fosforila glucosa.
Recuerda Fosforilacin a nivel de sustrato: Proceso que implica la formacin de ATP por
transferencia de un grupo fosforilo desde otro compuesto. Implica enzimas solu-
bles e intermediarios qumicos. Fosforilacin ligada a la respiracin: Implica
enzimas de membrana y un gradiente de protones para generar ATP.
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e) Desfosforilacin del PEP a piruvato. PIRUVATO QUINASA
2 Fosforilacin a nivel de sustrato.
Reaccin IRREVERSIBLE.
La piruvato quinasa requiere K+ y Mg2+.
3. REGULACIN DE LA GLUCLISIS
Se realiza principalmente sobre las enzimas reguladoras de la gluclisis, que son las que catalizan las
reacciones irreversibles:
- Hexoquinasa.
- Fosfofructoquinasa-1.
- Piruvato quinasa.
a) Hexoquinasa
Enzima que cataliza la fosforilacin de hexosas, normalmente de la D-glucosa. Requiere Mg2+ para su
actividad. Existen 4 isoenzimas.
Las hexoquinasas I, II y III Localizadas en las clulas musculares:
b) Fosfofructoquinasa-1 (PFK-1)
Control primario de la gluclisis.
Etapa que compromete el paso de la glucosa a travs de la gluclisis.
Sometida a regulacin alostrica:
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Recuerda En la gluconeognesis la reaccin equivalente a sta pero en sentido inverso (con-
versin de fructosa 1,6-bisfosfato en fructosa 6-P) es la catalizada por la fructosa
bisfosfatasa-1 (FBPasa-1). Es inhibida alostricamente por el AMP. La fructosa
2,6-bisfosfato tiene el efecto contrario sobre la FBPasa-1: reduce la afinidad por
sus sustratos disminuyendo as la gluconeognesis.
Regulacin de la gluclisis
- Se libera la hormona insulina Activacin de una protena fosfatasa Aumento de la PFK-2 Aumento
de las concentraciones de fructosa 2,6-bisfosfato Inhibicin de la gluconeognesis y estimulacin de la
gluclisis.
c) Piruvato quinasa
Existen, al menos, 3 isoenzimas. Presentan diferente distribucin tisular y responden a distintos
moduladores.
Sometida a regulacin alostrica:
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baja concentracin de glucosa sangunea se libera glucagn, se activa una protena quinasa que fosforila
la piruvato quinasa, inhibindola. De este modo disminuye la utilizacin de glucosa por el hgado
preservndola para su exportacin al cerebro y a otros rganos.
Ciclo de Rapoport-Luebering
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5. ENTRADA DE OTROS MONOSACRIDOS EN LA RUTA GLUCOLTICA
La gluclisis tambin sirve para catabolizar otros monosacridos despus de transformarlos en derivados
fosforilados.
a) Fructosa
Est presente como azcar libre en muchas frutas y se obtiene tambin de la hidrlisis de la sacarosa.
En el msculo y en el rin, la fructosa se fosforila a fructosa 6-P por accin de la hexoquinasa y se
incorpora a la gluclisis.
En el hgado, la fructosa se fosforila originando fructosa 1-P por accin de la fructoquinasa.
Posteriormente, una aldolasa escinde la fructosa 1-P en DHAP y gliceraldehdo.
b) Galactosa
Procede principalmente de la hidrlisis del disacrido lactosa.
En el hgado se fosforila a galactosa 1-P, por accin de la galactoquinasa.
La
galactosa 1-P se transforma en glucosa 1-P en una reaccin de epimerizacin en la que participa el
UDP. Finalmente se genera glucosa 6-P, que se incorpora a la gluclisis.
c) Manosa
Procede de la digestin de diversos polisacridos y glucoprotenas presentes en los alimentos.
Se fosforila a manosa 6-P por accin de la hexoquinasa; posteriormente, en una reaccin de isomerizacin,
se transforma en fructosa 6-P para incorporarse a la gluclisis.
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6. TRANSPORTADORES DE MONOSACRIDOS
El metabolismo de la glucosa y otros monosacridos est limitado por su velocidad de captacin por las
clulas y su fosforilacin por la hexoquinasa.
Membrana plasmtica de
GLUT 3 Captacin basal de glucosa
las neuronas cerebrales
Captacin de glucosa
Vesculas intracelulares
estimulada por insulina. Las
en clulas del msculo
GLUT 4 vesculas se desplazan a la
esqueltico, msculo cardiaco
membrana plasmtica en
y tejido adiposo
respuesta a la insulina
*Los transportadores GLUT transportan por mecanismo de difusin facilitada; los SGLT por transporte activo secundario.
a) Fermentacin lctica
Tiene lugar en el CITOSOL celular.
Se da en condiciones de hipoxia: msculo esqueltico en ejercicio, plantas sumergidas o en las bacterias
del cido lctico.
Tambin se puede dar en presencia de oxgeno en clulas que carecen de mitocondrias y no pueden
oxidar el piruvato a CO2: eritrocitos.
Esta ruta permite la regeneracin del NAD+ necesario para el mantenimiento de gluclisis.
Consiste en la reduccin reversible del piruvato a lactato, catalizada por la lactato deshidrogenasa. El
piruvato es el aceptor electrnico terminal.
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b) Fermentacin alcohlica
Se da en levaduras y otros microorganismos.
Fermentan la glucosa a etanol y CO . Se lleva a cabo en 2 pasos:
2
La enzima alcohol deshidrogenasa en los mamferos cataliza la metabolizacin del etanol, la reaccin en
este caso transcurre en sentido opuesto.
Recuerda Fermentacin Rutas catablicas productoras de energa (en forma de ATP) que
se producen sin un cambio neto del estado de oxidacin de los productos en com-
paracin con los sustratos.
2. EN CONDICIONES AEROBIAS
Elpiruvato se oxida a acetato (acetil-CoA), ste entra en el ciclo del cido ctrico o ciclo de Krebs y
se oxida a CO2 y H2O. El NADH formado por la deshidrogenacin del gliceraldehdo 3-P en la gluclisis se
reoxida finalmente a NAD+ mediante el paso final de sus electrones al O2 en el proceso de la respiracin
mitocondrial.
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El complejo piruvato deshidrogenasa est formado por 3 enzimas y 5 coenzimas o grupos prostticos
distintos.
Regeneracin de la forma
E3. Dihidrolipoil dh FAD
oxidada del lipoato
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Regulacin del complejo piruvato deshidrogenasa
Regulacin alostrica:
b) Ciclo de Krebs, ciclo de los cidos tricarboxlicos o ciclo del cido ctrico
Es una ruta metablica que forma parte del proceso de respiracin celular de los organismos aerobios.
En el ciclo de Krebs tiene lugar la oxidacin de acetil-CoA procedente de los monosacridos, cidos
grasos y aminocidos hasta producir CO2 y energa qumica en forma de poder reductor. Este poder
reductor pasa a la cadena de transporte electrnico y a la fosforilacin oxidativa para generar ATP.
Tiene lugar en la MATRIZ MITOCONDRIAL de las clulas eucariotas. Todas las enzimas estn localizadas
en la matriz mitocondrial, salvo la succinato deshidrogenasa que est fuertemente unida a la membrana
mitocondrial interna.
Participan molculas de 2 a 6 C (pero no participan molculas de 3 C).
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- El grupo acetilo de 2 C del acetil-CoA entra en el ciclo al reaccionar con el compuesto de 4 C, oxalacetato
(OAA).
- El OAA luego se regenera de forma que pueda reaccionar con otra molcula de acetil-CoA.
Acetil-CoA + 3 NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2 H2O 2 CO2 + 3 NADH + 3 H+ + FADH2 + GTP + CoA-SH
ElNADH + H+ y el FADH2 se reoxidan a travs de la cadena de transporte electrnico y la fosforilacin
oxidativa, siendo el O2 el aceptor final de los electrones con generacin de ATP.
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ElGTP representa energticamente lo mismo que el ATP y se puede transformar en ATP mediante la
siguiente reaccin catalizada por la nuclesido difosfato quinasa:
GTP + ADP GDP + ATP
Teniendo en cuenta la reaccin de la piruvato deshidrogenasa y que cada molcula de glucosa genera 2
de piruvato, la ecuacin para el catabolismo de la glucosa a travs de la gluclisis y del ciclo de Krebs
es la siguiente:
A medida que los intermediarios del ciclo de Krebs son retirados para servir como precursores
biosintticos se reponen mediante reacciones anaplerticas. De esta manera las concentraciones de
los intermediarios del ciclo de Krebs permanecen prcticamente constantes.
Principales reacciones anaplerticas
PEP Corazn,
PEP + CO2 + GDP OAA + GTP
carboxiquinasa msculo esqueltico
Plantas superiores,
PEP + HCO3- OAA + Pi PEP carboxilasa
levaduras y bacterias
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1. Disponibilidad de sustratos.
2. Inhibicin por los productos acumulados.
3. Retroinhibicin alostrica.
Disponibilidad de sustratos
El aumento de OAA y acetil-CoA estimula fuertemente la formacin de citrato y por consiguiente, el ciclo
de Krebs.
La disponibilidad de acetil-CoA depende de la accin del complejo piruvato deshidrogenasa, mientras que
la disponibilidad de OAA depende de la piruvato carboxilasa.
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Isocitrato deshidrogenasa:
En condiciones normales, la velocidad de la gluclisis y del ciclo de Krebs estn relacionadas de manera
que solo se metaboliza a piruvato la glucosa necesaria para suministrar al ciclo de Krebs los grupos acetilo
del acetil-CoA.
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Esuna ruta cclica que convierte 2 unidades acetilo en forma de acetil-CoA en succinato (4 C). Utiliza
alguna de las enzimas del ciclo de Krebs pero evita las reacciones en las que se produce prdida de
carbonos.
Tiene lugar en los glioxisomas, donde tambin ocurre la -oxidacin de los cidos grasos.
En este ciclo participan 5 enzimas, 2 de las cuales son especficas del ciclo del glioxilato:
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Estructura de la mitocondria
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3. Protenas ferrosulfuradas El hierro no se encuentra formando parte del hemo sino en asociacin
con tomos de azufre inorgnico o de residuos Cys de la protena. Las protenas ferrosulfuradas participan
en transferencias de 1 electrn en las que se oxida o reduce 1 de los tomos de hierro de la agrupacin
ferrosulfurada. Las protenas ferrosulfuradas de Rieske son una variante de las anteriores en las que un
tomo de hierro est coordinado con 2 residuos de Hys (en vez de Cys).
Recuerda El citocromo c es una protena mvil y soluble del espacio intermembrana. Despus
de que su grupo hemo acepte un electrn del complejo III, el citocromo c se
desplaza hacia el complejo IV para cederle su electrn.
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4. Complejo IV: Citocromo oxidasa.
- A travs de este complejo son transferidos 4 electrones desde el citocromo c al O2, reducindolo a H2O.
Por cada par de electrones se bombean 2 H+ al espacio intermembrana. Contiene dos citocromos,
a y a3, unidos cada uno de ellos a cobre.
- Por tanto, por cada par de electrones donados por el NADH a cada tomo de O2 se tranfieren un total
de 10 H+ al espacio intermembrana.
43 1 FMN
I: NADH-Ubiquinona oxidorreductasa
6 centros Fe-S
1 FAD
II: Succinato deshidrogenasa 4 3 centros Fe-S
1 citocromo b
Dmero con 11 2 citocromos b
III: Ubiquinona-citocromo c oxidorreductasa subunidades 2 centros Fe-S
diferentes 1 citocromo c1
2 iones cobre
IV: Citocromo oxidasa 13 1 citocromo a
1 citocromo a3
Fosforilacin oxidativa
Es el proceso por el cual la energa generada por la cadena de transporte electrnico impulsa la
sntesis de ATP mediante la fosforilacin del ADP, catalizado por la ATP sintasa (Complejo V) Teora
quimiosmtica del acoplamiento .
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Esta teora tiene las siguientes caractersticas principales:
- Al pasar los electrones a travs de la cadena respiratoria se transportan H+ desde la matriz (en contra de
gradiente) y se liberan en el espacio intermembrana. Como consecuencia se crea un potencial elctrico
y un gradiente de H+ a travs de la membrana interna. Este gradiente electroqumico de H+ se denomina
fuerza protn-motriz.
- Los H+ que se encuentran en exceso en el espacio intermembrana pueden volver a la matriz a favor de
gradiente de concentracin mediante la ATP sintasa. De esta forma se produce la sntesis de ATP.
Modelo quimiosmtico
El transporte electrnico provoca que los complejos I, III y IV muevan H+ a travs de la membrana
mitocondrial interna desde la matriz al espacio intermembrana. Por tanto, el NADH + H+ da lugar a una
mayor transferencia de H+ que el FADH2, lo que conduce a una mayor obtencin de ATP.
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La ATP sintasa tiene 2 componentes distintos:
- F1: protena perifrica de membrana, soluble en agua. Tiene 9 subunidades de 5 tipos distintos
(33). Cada una de las 3 subunidades tiene un sitio cataltico para la sntesis del ATP a partir de ADP
+ Pi. La fraccin F1 aislada cataliza la hidrlisis del ATP (reaccin inversa).
- Fo: protena integral de membrana, insoluble en agua. Est compuesto por 3 subunidades, a, b y c.
Contiene un canal para los protones. Es sensible a oligomicina.
- Tallo Fo-F1: constituido por las subunidades y de F1 que actan de eje central. Se sujetan al anillo que
forman las subunidades c de Fo.
La entrada de 3 H+ desde el espacio intermembrana impulsa un movimiento rotatorio de 120 de Fo. Este
giro es aprovechado por F1 para sintetizar una molcula de ATP a partir de ADP + Pi. Se necesita otro H+
ms para la entrada del Pi en la matriz mitocondrial.
Por tanto:
- Por cada par de e- que es transportado desde el NADH a travs de la cadena respiratoria hasta el O2 se
bombean 10 H+ desde la matriz al espacio intermembrana. Se necesitan 4 H+ para impulsar la sntesis de
ATP 10/4 = 2,5. Este valor se denomina razn P/O: nmero de molculas de ATP sintetizadas por cada
par de electrones transportados a travs de la cadena respiratoria.
- Por cada par de e- que es transportado desde el FADH2 a travs de la cadena respiratoria hasta el O2 se
bombean 6 H+ desde la matriz al espacio intermembrana (ya que el FADH2 se incorpora a la cadena en el
complejo II) y se necesitan 4H+ para impulsar la sntesis de ATP. Razn P/O= 6/4 = 1,5 molculas de ATP.
La fuerza protn-motriz tambin sirve para impulsar otros procesos celulares. La membrana mitocondrial
interna es impermeable a las especies cargadas pero hay 2 sistemas especficos que transportan el ADP
+ Pi citoslico a la matriz y el ATP generado al citosol:
1. Nucletido de adenina translocasa Translocasa integral de la membrana interna. Une ADP en el
espacio intermembrana y lo intercambia con una molcula de ATP, que es transportada simultneamente
hacia el exterior. Es un cotransportador antiparalelo. Es inhibida especficamente por atractilsido
(glucsido txico).
2. Fosfato translocasa Cataliza el cotransporte paralelo de H2PO4- y un H+ al interior de la matriz. Es
inhibido por mersalilo.
Lanzaderas de NADH + H+
ElNADH generado por la gluclisis en el citosol debe regenerarse a NAD+ en la cadena respiratoria
mitocondrial para que la gluclisis pueda seguir funcionando.
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Para ello, dado que la membrana mitocondrial interna es impermeable al NADH + H+, se utilizan
lanzaderas que transporten los equivalentes de reduccin a la mitocondria.
Una vez dentro de la mitocondria, los electrones son transferidos a la cadena transportadora de electrones
permitiendo as la sntesis de ATP.
Existen 2 tipos de lanzaderas: la lanzadera del aspartato-malato y la lanzadera del glicerol 3-P.
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Inhibidores del transporte electrnico y la fosforilacin oxidativa
Varias molculas inhiben de forma especfica el proceso de transporte electrnico. El estudio de la cadena
con estos inhibidores, junto con la medida del potencial de reduccin, ha permitido determinar el orden
correcto de cada uno de los componentes de la cadena.
Aurovertina: inhibe F1
Inhibicin de la ATPsintasa
Oligomicina: inhibe Fo
2,4-dinitrofenol (2,4 DNP): transportador de H+
D
esacoplamiento
hidrofbico. Difunde a travs de la membrana
de la fosforilacin y
mitocondrial interna y tansporta los H+, disipando el
el transporte electrnico
gradiente de protones
Valinomicina: ionforo de K+. Sustancia liposoluble
que une y transporta K+ a travs de la membrana
mitocondrial interna. La mitocondria utiliza la energa
generada en el transporte electrnico para acumular
los cationes monovalentes en vez de producir ATP
Termogenina: forma poros conductores de H+ en la
membrana mitocondrial interna del tejido adiposo marrn
- El NADH citoslico ha de ser transportado a la mitocondria para la regeneracin del NAD+. Atendiendo
al tipo de lanzadera implicada se obtiene en su transporte 1,5 ATP 2,5 ATP. Por lo tanto, el rendimiento
aerbico total en la oxidacin de 1 mol de glucosa a 6 CO2 rinde:
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Rendimiento global de la oxidacin de la glucosa
- Generacin de poder reductor en el citosol en forma de NADPH + H+, que es utilizado en rutas
biosintticas o para prevenir lesiones oxidativas en algunas clulas. Ej. Eritrocitos.
- Obtencin de monosacridos intermediarios con una longitud entre 3-7 C. Ej. La ribosa 5-P, necesaria
para la sntesis de nucletidos, cidos nucleicos y cofactores enzimticos; la eritrosa 4-P, importante para
la sntesis de aminocidos aromticos.
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Consta de 3 reacciones:
Fase no oxidativa
Enotros tejidos tiene lugar primero una reaccin de epimerizacin a partir de la ribulosa 5-fosfato para
generar xilulosa 5-P, catalizada por la ribosa 5-P epimerasa.
Despus tienen lugar una serie de reorganizaciones moleculares entre los diferentes monosacridos:
isomerizaciones, epimerizaciones y transferencias de fragmentos de 2 3 C mediante enzimas
TRANSALDOLASAS Y TRANSCETOLASAS:
- Transcetolasas: catalizan la transferencia de fragmentos de 2 C desde una cetosa a una aldosa.
Siempre utiliza la misma cetosa, xilulosa 5-P, y siempre uno de sus productos es el G3P. Es una enzima
dependiente de TPP.
- Transaldolasas: catalizan la transferencia de 3 C desde una cetosa a una aldosa. Utiliza la cadena lateral
de una Lys para formar una base de Schiff con el grupo carbonilo de la cetosa. El aldehdo aceptor se
convierte en alcohol.
Las reacciones de la fase no oxidativa de la ruta son fcilmente reversibles, permitiendo la interconversin
de los monosacridos.
En la fase no oxidativa seis pentosas fosfato se convierten en cinco hexosas fosfato.
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Losciclos sucesivos dan lugar a la oxidacin completa de la glucosa 6-P a CO2 y agua, con la mxima
generacin de equivalentes reductores.
Recuerda 2 molculas de G3P pueden convertirse en una molcula de fructosa 1,6 bisfosfato
(gluconeognesis) y la fructosa 1,6 bisfosfato se puede transformar en glucosa 6-P por
accin de la FBPasa-1 y la fosfoglucosa isomerasa.
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La gluconeognesis y la gluclisis no son rutas idnticas, aunque comparten varios pasos 7 de las
10 reacciones enzimticas de la gluconeognesis son la inversa de las reacciones glucolticas. Hay 3
reacciones gluconeognicas irreversibles.
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3. Hidrlisis de glucosa 6-P a glucosa. Glucosa 6-fosfatasa
- Es la ltima reaccin de la gluconeognesis.
- Esta enzima se encuentra localizada en la cara luminal del retculo endoplsmico de los hepatocitos,
clulas renales y epiteliales del intestino delgado (muy poco). Es dependiente de Mg2+.
- Dado que muchos tejidos como el cerebro y el msculo esqueltico carecen de esta enzima, no son
capaces de suministrar glucosa a la sangre.
2. REGULACIN DE LA GLUCONEOGNESIS
Las 3 enzimas reguladoras de la gluconeognesis estn sometidas a modulacin alostrica:
- Piruvato carboxilasa:
Activada por: acetil-CoA (indica disponibilidad de cidos grasos como combustible).
Inhibida por: ADP.
- Fructosa 1,6-bisfosfatasa:
Activada por: citrato.
Inhibida por: AMP y fructosa 2,6-bisfosfato.
- Glucosa 6-fosfatasa:
Activada por: glucosa 6-P.
3. SUSTRATOS GLUCONEOGNICOS
a) Lactato
Precursor gluconeognico cuantitativamente ms importante.
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Se genera en las clulas que no poseen mitocondrias, como los eritrocitos, y en tejidos con baja
concentracin de oxgeno, como el msculo esqueltico en ejercicio intenso.
Ciclo de Cori:
- El lactato generado en el msculo es liberado al torrente circulatorio y transportado al hgado donde
se reoxida a piruvato. El piruvato se utiliza para generar nuevas molculas de glucosa. La glucosa es
vertida de nuevo a la sangre donde se transporta al msculo esqueltico para regenerar las reservas de
glucgeno. Este proceso consume 4 molculas de ATP.
Ciclo de Cori
b) Glicerol
El catabolismo lipdico produce cidos grasos y glicerol. Los cidos grasos se degradan a acetil-CoA y el
acetil-CoA en los animales no se puede utilizar para sintetizar hidratos de carbono. El glicerol es transportado
al hgado donde se transforma primero en glicerol 3-P por la glicerol quinasa y posteriormente, en DHAP
por la glicerol fosfato deshidrogenasa, incorporndose a la gluconeognesis.
c) Aminocidos
Durante el catabolismo la mayora de aminocidos se convierten en piruvato o en intermediarios del
ciclo de Krebs que se oxidan dando OAA. Los aminocidos que pueden experimentar una conversin
neta en glucosa se denominan glucognicos (los ms importantes: alanina y glutamina). Los nicos
aminocidos que no generan precursores glucognicos son leucina y lisina.
Aminocidos glucognicos
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Recuerda Ciclo de la glucosa-alanina: el msculo en ejercicio produce piruvato y ste, por transami-
nacin, se convierte en alanina. La alanina es transportada al hgado donde se convierte por
transaminacin en piruvato. El ciclo de la glucosa alanina tiene varios objetivos:
- Reciclado de -cetocidos entre el msculo y el hgado.
- Mecanismo de transporte de NH4+ al hgado para ser eliminado en el ciclo de la urea.
Ciclo de la glucosa-alanina
d) Propionato
El propionil-CoA se genera a partir de la degradacin de algunos aminocidos o de la oxidacin de cidos
grasos de nmero impar de tomos de carbono. Entra en la gluconeognesis a travs de su conversin en
succinil-CoA y, ste a su vez, en OAA.
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- Fosforolisis: ruptura secuencial de unidades de glucosa de los extremos no reductores del polisacrido.
Es llevada a cabo por la glucgeno fosforilasa que, utilizando fsforo inorgnico, rompe los enlaces
(14) y elimina el residuo de glucosa terminal en forma de glucosa 1-P. La glucgeno fosforilasa se
detiene cuando quedan cuatro residuos de glucosa para llegar al punto de ramificacin (aqu la molcula
ya no se denomina glucgeno sino dextrina lmite).
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La glucosa 1-P se convierte en glucosa 6-P por accin de la fosfoglucomutasa en una reaccin
reversible.
La glucosa 6-P tiene 2 destinos diferentes atendiendo al tipo de tejido:
1. REGULACIN DE LA GLUCOGENOLISIS
a) Regulacin de la glucgeno fosforilasa
En el msculo esqueltico y en el hgado, la enzima es un dmero que se encuentra en 2 formas
interconvertibles:
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- Forma activa Glucgeno fosforilasa a: fosforilada
- Forma inactiva Glucgeno fosforilasa b: desfosforilada.
Regulacin alostrica
Msculo:
- El Ca2+ (seal de contraccin muscular) se une a la fosforilasa b quinasa a travs de su subunidad (la
calmodulina) y la activa Se transforma la glucgeno fosforilasa b en glucgeno fosforilasa a y se activa
la glucogenolisis.
- El AMP se une tambin a la fosforilasa b quinasa y la activa.
- El ATP inactiva la fosforilasa b quinasa Se inhibe la glucogenolisis.
Hgado:
- La glucosa inhibe la glucgeno fosforilasa a y activa la fosfoprotena fosfatasa 1 (PP1) Ocurre cuando
los niveles de glucosa sangunea vuelven a la normalidad.
- La insulina tambin activa la PP1 e inhibe la glucogenolisis.
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Ojo Esta reaccin se considera reversible, aunque en trminos globales est
desplazada hacia la derecha, ya que el pirofosfato se hidroliza inmediatamente y
de forma irreversible a fosfato inorgnico.
Fosfo/desfosforilacin
Se encuentra en el hgado y en el msculo esqueltico bajo 2 formas:
Modulacin alostrica
La glucgeno sintasa tambin est sometida a regulacin alostrica tanto en el hgado como en el
msculo: la glucosa 6-P es un activador alostrico de la glucgeno sintasa.
Recuerda La PP1 tambin est sometida a regulacin por modificacin covalente y alostrica. Se
inactiva por la PKA (a su vez activada por el AMPc, que se comporta por tanto, como inhibidor
alostrico de PP1) y se activa alostricamente por la glucosa 6-P. La actividad de la PP1 se
controla a su vez por una protena llamada inhibidor de la fosfoprotena fosfatasa-1 (PI-1),
que cuando est fosforilada es activa e inhibe a PP1.
AMPc + PKA + PI-1 - PP1 - Glucgeno sintasa
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RESUMEN DE LA GLUCOGENOLISIS/GLUCOGENOGNESIS
1. GLUCAGN
Hormona sintetizada por las clulas de los islotes de Langerhans del pncreas. Es hiperglucemiante.
Activa la gluconeognesis a partir de lactato y aminocidos y activa la glucogenolisis. Presenta receptores
en el hgado y no presenta receptores en el msculo esqueltico.
Activa la glucogenolisis heptica e inhibe la glucogenognesis heptica:
2. ADRENALINA
Hormona liberada por la mdula suprarrenal. Posee receptores principalmente en el msculo aunque
tambin en el hgado. Uno de los estmulos para su liberacin es el ejercicio intenso.
Activa la glucogenolisis muscular e inhibe la glucogenognesis muscular:
3. INSULINA
Hormona proteica liberada por las clulas de los islotes de Langerhans pancreticos. Es hipoglucemiante.
Activa la gluclisis y la glucogenognesis e inhibe la gluconeognesis y la glucogenolisis:
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2. SNDROME DE WERNICKE-KORSAKOFF
Est causado por un dficit grave de tiamina o vitamina B .
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Se presenta especialmente en personas alcohlicas ya que el alcohol disminuye la absorcin intestinal
de tiamina.
Las mutaciones en el gen que codifica para la transcetolasa originan una enzima con una afinidad muy
disminuida por el pirofosfato de tiamina (TPP), lo que agrava el dficit de tiamina Disminucin de la
velocidad de la ruta de las pentosas fosfato.
Sntomas: confusin mental, prdida de memoria y parlisis parcial, entre otros.
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Los pacientes presentan elevadas concentraciones de galactosa en sangre y en orina (galactosuria).
Debido a este dficit enzimtico, la galactosa sigue una de las rutas alternativas transformndose en
galactitol en tejidos como el cristalino. Esto conlleva el acmulo de lquido en el interior del cristalino debido
al alto potencial osmtico del galactitol CATARATAS.
Adems, la generacin de galactitol implica la oxidacin del NADPH necesario para mantener el glutatin,
y otras protenas del cristalino, en estado reducido; este fenmeno potencia an ms la aparicin de
cataratas.
Metabolismo de la galactosa
- Benigna: solo se ve afectada la epimerasa de los eritrocitos y leucocitos, siendo normal la actividad en el
hgado.
- Severa: ms grave y similar en sintomatologa al dficit de galactosa 1-P uridil transferasa.
Metabolismo de la fructosa
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a) Fructosuria esencial
Es un error congnito del metabolismo de naturaleza benigna.
Se debe a un dficit de la enzima fructoquinasa heptica.
b) Intolerancia a la fructosa
Alteracin autosmica recesiva.
Se produce como consecuencia del dficit de aldolasa B. Los pacientes son asintomticos si no ingieren
fructosa o sacarosa.
El acmulo de fructosa 1-P conduce a hipoglucemia ya que la fructosa 1-P inhibe la gluconeognesis y
la glucogenolisis.
Adems, se produce una deficiencia de ATP y secuestro de fosfato inorgnico. Se produce hiperamonemia
debido a que no existe ATP que inhiba la enzima AMP desaminasa.
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Tipos de glucogenosis
*Recientemente se ha descrito la glucogenosis tipo 0 Se debe al dficit de glucgeno sintasa y afecta al hgado
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Clasificacin de mucopolisacaridosis
METABOLITO URINARIO
ENFERMEDAD ENZIMA AFECTADA
Y SNTOMAS
- Metabolitos:
Dermatn sulfato y heparn sulfato
I: Sndrome - Sntomas:
de Hurler -L-iduronidasa Opacidad corneal
(la ms grave) Cifosis lumbar
Retraso en el crecimiento
Retraso mental
Muerte en la adolescencia
- Metabolitos:
Dermatn sulfato y heparn sulfato
- Sntomas:
II: S
ndrome Prdida de audicin
Iduronato sulfatasa
de Hunter Retraso mental y del crecimiento
Facies tosca
Muerte en la adolescencia
Tipo A: Sulfaminidasa o heparn
- Metabolitos:
sulfato N-sulfatasa
III: Sndrome Heparn sulfato
Tipo B: N-acetil--D-glucosaminidasa
de San Filippo - Sntomas:
Tipo C: Acetiltransferasa
(la + frecuente) Deterioro mental progresivo
Tipo D: N-Acetilglucosamina-6-
Muerte en la edad adulta
sulfato-sulfatasa
- Metabolitos:
IV: S
ndrome Tipo A: Galactosamina-6-sulfatasa Queratn sulfato
de Morquio Tipo B: -Galactosidasa - Sntomas:
Alteraciones esquelticas
- Metabolitos:
Dermatn sulfato
VI: S
ndrome de - Sntomas:
Marouteaux-Lamy Arilsulfatasa B Corta estatura
Facies tosca
Opacidad corneal
Alteracin cardiaca
- Metabolitos:
Dermatn sulfato y heparn sulfato
- Sntomas:
VII: Sndrome de Sly -Glucuronidasa Hepatoesplenomegalia
Alteraciones esquelticas
Anomalas cardiacas
Muerte en infancia y adolescencia
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Se deben a la deficiencia congnita de una o varias enzimas lisosomales implicadas en su degradacin.
Debido a este dficit el mucopolisacrido se acumula en diversos tejidos causando la enfermedad.
Se heredan de forma autosmica recesiva, excepto la enfermedad de Hunter que presenta herencia
ligada al cromosoma X.
Los individuos afectados presentan alteraciones esquelticas, cardiovasculares, hepatoesplenomegalia,
defectos visuales, retraso mental y facies tosca.
Presentan un patrn diferente de excrecin urinaria del mucopolisacrido atendiendo al defecto
enzimtico.
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7. METABOLISMO LIPDICO
METABOLISMO DE LAS LIPOPROTENAS
Los lpidos se caracterizan por ser molculas insolubles en agua y solubles en disolventes no polares.
Elcatabolismo lipdico supone una fuente de energa muy importante para muchos tejidos ya que la
oxidacin de los cidos grasos genera casi el doble de energa que la oxidacin de los hidratos de carbono.
Adems,algunos lpidos como los fosfolpidos cumplen una funcin estructural ya que forman parte de
la membrana plasmtica.
Fuentes principales de cidos grasos:
1. TIPOS DE LIPOPROTENAS
Existen diferentes tipos de lipoprotenas, cada una de las cuales desempea funciones concretas en el
transporte de lpidos.
Dado que los lpidos tiene una densidad mucho menor que las protenas, el contenido lipdico de una
clase determinada de lipoprotena est inversamente relacionado con su densidad.
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Composicin y caractersticas fisico-qumicas de las lipoprotenas plasmticas
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Los quilomicrones pasan desde la mucosa intestinal al sistema linftico y de ah son transportados a la
sangre. Una vez en la sangre captan otras apolipoprotenas adicionales de las HDL (apo C-II y apo E).
Por accin de la lipoprotena lipasa (activada por la apo C-II de los QM) los quilomicrones son retirados
de la circulacin para entrar principalmente en el msculo y en el tejido adiposo. Esta lipoprotena lipasa
(LPL) hidroliza los triglicridos a cidos grasos y monoglicridos en la superficie interna del capilar de los
tejidos diana.
Al ser hidrolizados por la LPL se pierde la apo C-II, con lo que disminuye la afinidad de los QM por la LPL,
y sta se inactiva.
Los quilomicrones que han perdido los triglicridos pero que tienen todava colesterol y apolipoprotenas
se denominan QUILOMICRONES REMANENTES Son captados por el hgado con ayuda de su
receptor en el hepatocito, la apo E, e introducidos por endocitosis.
Recuerda Los quilomicrones tienen origen intestinal y transportan los triglicridos de origen
exgeno. Son las lipoprotenas de menor densidad y mayor tamao.
- Ser eliminadas directamente del plasma al ser reconocida la apo E por receptores hepticos.
- Evolucionar a LDL por prdida de triglicridos y de apo E que se transfieren a las HDL.
Lasclulas de los tejidos perifricos que poseen receptores para la apo B-100 y las del hgado que
poseen receptores de apo E y apo B-100, endocitan las LDL y las degradan en los macrfagos.
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Aproximadamente el 30% de las LDL es degradado en los tejidos extrahepticos y el 70%, en el
hgado.
Las LDL constituyen el sistema de transporte de colesterol desde el hgado a los tejidos
perifricos.
Recuerda Las VLDL son las lipoprotenas encargadas de transportar los triglicridos de origen
endgeno y se sintetizan en el hgado. Las LDL se sintetizan en el plasma.
- Inhibe la HMG-CoA sintetasa (enzima limitante en la sntesis de colesterol) y suprime la transcripcin del
gen de esta enzima.
- Inhibe la sntesis de receptores de LDL.
- Activa la acil-CoA-colesterol-aciltransferasa (ACAT) Enzima intracelular que cataliza la sntesis de
steres de colesterol a partir de colesterol y un acil-CoA de cadena larga.
Finalmente el colesterol es eliminado por va biliar, incorporado a las membranas celulares o se emplea
en la sntesis de hormonas. Por esta va se degradan las 2/3 partes de las LDL circulantes.
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Estas LDL modificadas son reconocidas por los macrfagos de la ntima arterial. Los macrfagos poseen
unos receptores de eliminacin o receptores scavenger (este receptor no est sometido a regulacin
por los niveles intracelulares de colesterol) que internalizan las LDL oxidadas Dan lugar a clulas
espumosas.
Estas clulas espumosas tienen un efecto quimiotctico, hacen que migren ms leucocitos a esta zona
y acumulan ms colesterol, contribuyendo a la formacin de la placa de ateroma.
Por lo tanto, elevadas concentraciones de LDL se asocian con un mayor riesgo aterognico.
Recuerda Las LDL son las lipoprotenas que presentan mayor contenido de colesterol.
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LasHDL, por tanto, transportan el colesterol de los tejidos extrahepticos al hgado Transporte
inverso o retrgrado del colesterol.
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Recuerda La lipoprotena lipasa (LPL) es una acilglicerol ster hidrolasa que se ancla a la
superficie vascular a travs de interacciones electrostticas con molculas de he-
parn sulfato. Se encuentra en tejido adiposo, msculo esqueltico, cardiaco y
glndula mamaria. Est ausente en hgado, aunque se ha encontrado actividad
en este rgano durante la etapa perinatal.
5. OTRAS LIPOPROTENAS
Lipoprotena X: es una lipoprotena anormal de composicin variable. Presenta una parte proteica con
albmina y varias apolipoprotenas (A, C y E), y una parte lipdica que puede contener cidos biliares. Su
aparicin es un signo especfico de colestasis.
Lipoprotena (a): presenta una homologa estructural con el plasmingeno, por lo que compite con l por
su unin al endotelio e inhibe la fibrinolisis. Su elevacin (>30 mg/dL) se asocia con riesgo gentico de
cardiopata isqumica.
6. LIPLISIS
Los lpidos neutros se almacenan en los adipocitos (y en clulas sintetizadoras de hormonas esteroideas
en la corteza suprarrenal, ovario y testculos) en forma de gotitas lipdicas.
La liplisis es el mecanismo de movilizacin de los lpidos que se encuentran almacenados como
reservorio de energa en forma de triglicridos (principal sustrato energtico en el organismo).
Cuando existe una necesidad de aporte energtico, estas grasas se movilizan y se transportan a otros
tejidos, como msculo esqueltico o corazn.
El estmulo para la liplisis son el glucagn y la adrenalina: activacin de la adenilato ciclasa + AMPc
+ PKA Activacin por fosforilacin de la triglicrido lipasa o lipasa sensible a la accin hormonal
Hidrlisis de los triglicridos a cidos grasos y glicerol.
Los cidos grasos liberados salen de los adipocitos y son transportados en el torrente circulatorio unidos
a la albmina (hasta 10 cidos grasos por molcula de protena) Transporte al interior de los tejidos.
El glicerol liberado es fosforilado por la glicerol quinasa y el glicerol 3-P resultante se oxida a DHAP, que
sigue 2 vas: gluconeognesis (a nivel heptico) o gluclisis.
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Aproximadamente el 95% de la energa procedente de la oxidacin de los triglicridos procede de los
cidos grasos y solo un 5% procede del glicerol.
CATABOLISMO DE LPIDOS
La oxidacin de los cidos grasos hasta acetil-CoA es un mecanismo de produccin de energa que cubre
el 80% de las necesidades energticas en el hgado y el corazn en circunstancias fisiolgicas.
El acetil-CoA generado en este proceso catablico entra en el ciclo de Krebs y se oxida por completo a
CO2 suministrando una carga energtica mayor.
- Formacin de un enlace tioster entre el grupo carboxilo del cido graso y el grupo tiol de la coenzima A
para generar un acil graso-CoA.
- Esta reaccin lleva acoplada la hidrlisis del ATP.
- La enzima est localizada en la membrana mitocondrial externa.
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Los steres de acil graso-CoA formados en el lado citoslico de la membrana mitocondrial externa son
transportados al interior de la mitocondria y sufren -oxidacin para producir ATP. Para su transporte se
unen a una molcula denominada CARNITINA:
- Los cidos grasos se unen transitoriamente al grupo hidroxilo de la carnitina para formar acil-carnitina
mediante la accin de la enzima carnitina acil-transferasa I de la membrana externa.
- Este derivado acil-carnitina puede atravesar la membrana mitocondrial externa y penetrar en la matriz
mediante difusin facilitada por el transportador de acil-carnitina/carnitina de la membrana interna.
- Posteriormente, la carnitina acil-transferasa II localizada en la cara interna de la membrana mitocondrial
interna regenera el acil graso-CoA y libera la carnitina libre en el interior de la matriz.
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1) Deshidrogenacin de acil-CoA en trans-2-enoil-CoA. Acil-CoA deshidrogenasa
- Se genera un doble enlace entre C-2 y C-3 y se produce FADH2.
- Existen 3 isoenzimas de la acil-CoA deshidrogenasa atendiendo a la longitud de las cadenas de los cidos
grasos a oxidar:
a) Acil-CoA-dh de cadena muy larga (VLCAD) 12 a 18 C.
b) Acil-CoA-dh de cadena media (MCAD) 4 a 14 C.
c) Acil-CoA-dh de cadena corta (SCAD) 4 a 8 C.
2) Hidratacin de trans-2-enoil-CoA a L-- hidroxiacil-CoA. Enoil-CoA hidratasa
3) Deshidrogenacin de L--hidroxiacil-CoA a -cetoacil-CoA. L--hidroxiacil-CoA deshidrogenasa
- Se genera NADH + H+.
- Esta enzima es especfica para el esteroismero L.
4) Ruptura tioltica de -cetoacil-CoA. Tiolasa o -cetotiolasa
- Se libera una molcula de acetil-CoA y un acil-CoA que tiene 2 C menos que la cadena de partida.
8 molculas de acetil-CoA.
N de vueltas = (n/2)-1
N acetil-CoA = n/2
Los 8 acetil-CoA generados entran en el ciclo de Krebs y se obtienen equivalentes de reduccin que van
a la cadena respiratoria y generan ATP.
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Rendimiento en ATP de la oxidacin de una molcula de palmitoil-CoA a CO2 y H2O
Ojo Si se parte directamente del cido palmtico y no del palmitoil-CoA se obtienen 106
ATPs, ya que se consumen 2 ATPs en la activacin del cido graso.
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Ruta del propionil-CoA
Ojo Los cidos grasos de nmero impar de tomos de carbono son parcialmente
gluconeognicos porque de succinil-CoA OAA Glucosa.
e) -Oxidacin peroxisomal
Tiene lugar en los peroxisomas (orgnulos similares a los glioxisomas de las clulas vegetales).
La enzima acil-CoA deshidrogenasa no transfiere los electrones a la cadena respiratoria sino que los
transfiere directamente al O2, que se reduce a H2O2.
Mediante esta ruta se pueden oxidar los primeros carbonos de los cidos grasos de cadena muy larga o
ramificados, y el resto de grupos acilo ser transferidos a la mitocondria para la -oxidacin.
Esta ruta no lleva acoplada la generacin de energa en forma de ATP pero produce calor.
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2. -OXIDACIN DE LOS CIDOS GRASOS
Es una ruta minoritaria en la que la oxidacin inicial se produce en el carbono en vez de en el carbono .
Mediante esta ruta se oxida el cido fitnico, un cido graso de 20 C (producto de la oxidacin del fitol,
un diterpeno componente de la clorofila), porque no se puede oxidar en su carbono debido al grupo metilo
presente en su C-3.
La oxidacin en el carbono origina el cido pristnico que se puede catabolizar mediante la -oxidacin.
La capacidad de oxidar este cido es muy importante ya que hay grandes cantidades de este cido en la
alimentacin. Ej. Legumbres.
Fases:
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- La descarboxilacin del acetoacetato de forma espontnea o por accin de la acetoacetato
descarboxilasa origina el ltimo cuerpo cetnico, la acetona.
En tejidos extrahepticos:
Ojo El higado no puede utilizar los cuerpos cetnicos debido a la ausencia de la enzima
tioforasa.
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ANABOLISMO DE LPIDOS
1. BIOSNTESIS DE CIDOS GRASOS
Los lpidos constituyen la principal forma de energa almacenada en el organismo. La glucosa ingerida
en exceso se convierte en cidos grasos y stos, a su vez, en triglicridos que se almacenan en el tejido
adiposo.
La sntesis de cidos grasos tiene lugar en el citosol.
Participa una molcula de acetil-CoA iniciadora y un intermediario de 3 C, el malonil-CoA.
Para que tenga lugar la sntesis de cidos grasos es necesario:
1) Poder reductor en el citosol celular (NADPH). Este poder reductor en los hepatocitos y los adipocitos
procede de la ruta de las pentosas fosfato y de la enzima mlica.
Produccin de NADPH
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2) Cantidades elevadas de acetil-CoA en el citosol, procedente principalmente del piruvato y del esqueleto
carbonado de los aminocidos. Como se encuentra en la matriz mitocondrial ha de ser transportado
al citosol. La membrana mitocondrial interna es impermeable al acetil-CoA, por lo que ste sale de la
mitocondria en forma de citrato a travs de un transportador.
- El citrato se sintetiza a partir de acetil-CoA y OAA por accin de la citrato sintasa. Una vez transportado
al citosol se regenera de nuevo el acetil-CoA por accin de la citrato liasa.
Sntesis de malonil-CoA
Tiene lugar de forma irreversible a partir del acetil-CoA por la acetil-CoA carboxilasa, que presenta
como grupo prosttico biotina. La reaccin consume ATP y transcurre a travs de un intermediario de
N-carboxibiotina que se une covalentemente.
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Recuerda Los C-15 y C-16 del palmitato proceden del acetil-CoA y el resto de carbonos de la
cadena proceden del malonil-CoA.
Dentro de los dominios de la cido graso sintasa cabe destacar la presencia de la protena transportadora
de grupos acilo (ACP), que presenta un grupo -SH y un grupo prosttico 4-fosfopantetena. Este
dominio acta como brazo flexible que une la cadena de cido graso creciente al complejo cido graso
sintasa y tambin transfiere los intermediarios de un sitio activo al siguiente. Adems es el sitio de entrada
de los grupos malonilo.
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b) Reduccin del grupo carbonilo para generar D--hidroxibutiril-ACP. -Cetoacil-ACP reductasa (KR).
Se consume NADPH.
c) Deshidratacin para generar trans-2-butenoil-ACP. -Hidroxiacil-ACP deshidratasa (DH). Se elimina
una molcula de H2O al formarse un doble enlace.
d) Reduccin del doble enlace para generar butiril-ACP. Enoil-ACP-reductasa (ER). Se consume NADPH.
El grupo butirilo se transfiere desde el grupo -SH de la ACP al grupo -SH de la -cetoacil sintasa.
Para empezar otro ciclo se une otro grupo malonilo al grupo -SH de la ACP, ahora desocupado.
Cuando se ha sintetizado el cido palmtico se libera del complejo multienzimtico por accin de una
tioesterasa.
La sntesis del resto de cidos grasos tiene lugar posteriormente por accin de otras 2 enzimas:
Recuerda El ser humano carece de desaturasas que introduzcan dobles enlaces ms all del
C-9.
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Reaccin global para la sntesis de cidos grasos
Actuacin de la cido
graso sintasa Acetil-CoA + 7 Malonil-CoA + 14 NADPH + 14 H+ Palmitato + 7 CO2 + 8 CoA + 14 NADP+ + 6 H2O
(7 ciclos)
Balance global 8 Acetil-CoA + 7 ATP + 14 NADPH + 14 H+ Palmitato + 8 CoA + 7 ADP + 7 Pi + 14 NADP+ + 6 H2O
Adems, en el transporte del acetil-CoA de la mitocondria al citosol se consumen 2 ATPs por molcula
de acetil-CoA transportada:
- Un ATP en la hidrlisis del citrato en el citosol para dar de nuevo acetil-CoA + OAA: enzima citrato liasa.
- Otro ATP en la regeneracin del OAA a partir de piruvato en la matriz mitocondrial: enzima piruvato
carboxilasa.
Por lo tanto, en la sntesis de cidos grasos, por unidad de 2 C transportada se consumen 3 molculas
de ATP.
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2. BIOSNTESIS DE TRIGLICRIDOS
Tiene lugar en el retculo endoplsmico de las clulas adiposas y hepticas.
El 75% de los cidos grasos liberados en la liplisis se reesterifican para formar triglicridos.
Se originan mediante la esterificacin secuencial de una molcula de glicerol 3-P con 3 molculas de
acil-CoA:
- El glicerol 3-P procede de la DHAP en el tejido adiposo y de la fosforilacin del glicerol por accin de la
glicerol 3-quinasa en el hgado y en el rin.
- Los acil-CoA se forman a partir de las acil-CoA sintetasas.
Glicerol 3-P + 2 acil graso-CoA = CIDO FOSFATDICO O DIACILGLICEROL 3-P Precursor de los
triglicridos y de los fosfoglicridos.
La ruta hacia los triglicridos implica la eliminacin hidroltica del fosfato por accin de la cido fosfatdico
fosfatasa, seguida de una transferencia de otro grupo acilo procedente de un acil-CoA.
cido fosfatdico + H2O 1,2-Diacilglicerol + Pi
1,2-Diacilglicerol + Acil-CoA Triacilglicerol + CoA-SH
3. BIOSNTESIS DE FOSFOGLICRIDOS
Son los fosfolpidos ms abundantes. Su sntesis tiene lugar en el retculo endoplsmico liso.
Los primeros pasos son idnticos a la sntesis de triglicridos: 2 grupos acilo graso se esterifican con el
C-1 y C-2 del glicerol 3-P para dar cido fosfatdico.
A continuacin, el cido fosfatdico se activa utilizando CDP (nucletido difosfato) CDP-diacilglicerol.
Otra estrategia es la unin del CDP al hidroxilo del grupo de cabeza sin formar previamente CDP-
diacilglicerol.
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a) Sntesis de fosfatidilserina, fosfatidiletanolamina y fosfatidilcolina
Bacterias y levaduras:
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c) Sntesis de plasmalgenos
Tiene lugar en los peroxisomas.
Se forman a partir de la 1-acildihidroxiacetona 3-P con posterior entrada de un cido graso esterificado y
un alcohol de cadena larga con formacin de un enlace ter. El doble enlace es introducido por una oxidasa
de funcin mixta.
4. BIOSNTESIS DE ESFINGOLPIDOS
Las primeras reacciones ocurren en el retculo endoplsmico y la unin de los grupos de cabeza polar
en el aparato de Golgi.
Biosntesis de esfingolpidos
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Fases:
5. BIOSNTESIS DE COLESTEROL
El colesterol es un lpido constituido por 27 C, procedentes del acetato. Las 2 fuentes principales son: la
alimentacin y la sntesis endgena de novo.
Es un constituyente imprescindible de las membranas celulares y es precursor de diferentes metabolitos.
Una va importante de eliminacin es su conversin en cidos biliares.
La sntesis de colesterol tiene lugar en el citosol y en el retculo endoplsmico liso, principalmente del
hgado (aunque numerosos tejidos pueden sintetizar colesterol).
Fases:
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- Niveles altos de colesterol intracelular Inhiben la transcripcin del RNAm que codifica para la HMG-
CoA reductasa.
- Control hormonal Modificacin covalente:
La HMG-CoA fosforilada Inactiva. Ej. Glucagn.
La HMG-CoA desfosforilada Activa. Ej. Insulina.
- Las estatinas son similares al mevalonato y son inhibidores competitivos de la HMG-CoA reductasa.
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6. FORMACIN DE OTROS COMPUESTOS A PARTIR DEL COLESTEROL
a) Hormonas esteroideas
b) cidos biliares
Son derivados esteroideos con propiedades detergentes que emulsionan los lpidos en el intestino
facilitando la absorcin de las grasas.
Se sintetizan en el hgado, se almacenan en la vescula biliar formando la bilis (contienen sales biliares,
colesterol, fosfolpidos y pigmentos biliares como bilirrubina o biliverdina) y se transportan al intestino a
travs del conducto biliar.
Los cidos biliares primarios ms importantes son el clico y el quenodesoxiclico y se conjugan con
glicina o taurina para originar las sales biliares.
La sntesis de cidos biliares implica una serie de hidroxilaciones catalizadas por oxidasas de funcin
mixta P450 microsomales. La etapa limitante del proceso es la primera reaccin, que implica la conversin
del colesterol en 7--hidrocolesterol, catalizada por la enzima 7--hidroxilasa.
Las sales biliares se segregan al intestino delgado superior donde ejercen su accin y posteriormente se
reabsorben en el leon mediante cotransporte con Na+. Vuelven de nuevo al hgado (98-99%) a travs de
la vena porta para reutilizarse (circulacin enteroheptica).
Lasmolculas de sales biliares se reciclan unas 18 veces antes de ser finalmente eliminadas con las
heces.
El mecanismo ms importante para degradar y eliminar el colesterol es su conversin en cidos biliares.
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Enfermedad Caractersticas
acumulada
Lipoprotena Defecto
Alteracin en la sntesis de
Tipo III apo E (generalmente est
presente en 3 isoformas: E2,
Disbetalipoproteinemia familiar Hipercolesterolemia E3 y E4)
Xantomas QM,VLDL y IDL
Enfermedad de la beta ancha Solo tienen apo E-2, y sta no
Muy aterognica (-VLDL)
Deficiencia en apo E interacciona con el receptor E
Herencia autosmica
recesiva
Hipertrigliceridemia
Tipo IV Aumento de colesterol a Sobreproduccin de VLDL
Hipertrigliceridemia familiar expensas de las VLDL.
Riesgo moderado de VLDL Herencia autosmica
ES LA + FRECUENTE coroniopata. Se relaciona con dominante
obesidad y diabetes tipo II
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2. HIPOLIPOPROTEINEMIAS: Dficit de una o varias lipoprotenas
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Se produce un acmulo de estos cidos grasos en la fraccin ganglisida de la sustancia blanca cerebral
y corteza suprarrenal.
Cursa con alteraciones neurolgicas e insuficiencia suprarrenal.
a) Enfermedad de Refsum
Enfermedad autosmica recesiva.
Se debe al dficit de una -hidroxilasa que cataliza la -oxidacin de los cidos grasos metilados como
el cido fitnico.
Se acumulan grandes cantidades de cido fitnico en los tejidos causando: retinitis pigmentaria,
neuropata perifrica, ataxia cerebelosa y sordera de tipo nervioso.
2. SNDROME DE ZELLWEGER
Enfermedad autosmica recesiva.
Se debe a mutaciones en genes que codifican protenas encargadas del ensamblaje de los peroxisomas
y protenas de membrana.
Presenta elevaciones de cidos grasos de cadena muy larga en plasma y deficiencia de plasmalgenos.
Es una enfermedad que suele ser letal en el primer ao de vida: hipotona, debilidad, caractersticas
faciales dismrficas, hepatomegalia, alteraciones renales, convulsiones y muerte.
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Tipos de esfingolipidosis
Enfermedad de Farber o
Ceramidasa Ceramida
lipogranulomatosis
Leucodistrofia metacromtica
Arilsulfatasa A 3-Sulfogalactosilceramida
o enfermedad de Scholtz
OBESIDAD
Aumento en la cantidad de grasa corporal que condiciona un aumento del peso. Se considera que existe
obesidad si el peso real supera al ideal en un 30% o si el IMC 30 kg/m2.
Tipos de obesidad segn la clasificacin de la OMS:
- Obesidad grado I: IMC 30-34,9 kg/m2
- Obesidad grado II: IMC 35-39,9 kg/m2
- Obesidad grado III (obesidad extrema): IMC 40 kg/m2
Aparece cuando existe un desequilibrio entre la ingesta y el consumo de caloras y supone un riesgo para
la vida, ya que incrementa las probabilidades de padecer diabetes tipo II, infartos o embolias derivadas de
la hipertensin, la hipercolesterolemia y la resistencia a la insulina.
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La obesidad se puede deber a factores orgnicos con alteracin estructural o metablica de los centros
hipotlamicos del apetito. Las alteraciones estructurales son poco frecuentes y de causas muy diversas
(traumatismos, tumores o enfermedades inflamatorias). Entre las alteraciones metablicas est el
sndrome de Cushing, el hipotiroidismo o el hiperinsulinismo. Tambin se han descrito alteraciones del
sistema de la leptina (hormona proteica liberada por los adipocitos, que acta sobre los receptores del
hipotlamo localizados en el ncleo arcuato, promoviendo la disminucin de la ingesta). Sin embargo,
la mayor parte de los casos de obesidad se deben a factores funcionales (factores sociales, culturales y
psicolgicos que conllevan a un aumento de la ingesta calrica).
Hormonas que regulan el apetito:
- Insulina: acta sobre sus receptores hipotalmicos para inhibir el apetito. La leptina hace que las clulas
del hgado y del msculo sean ms sensibles a la accin de la insulina.
- Adiponectina: hormona peptdica (224 aminocidos) producida por el tejido adiposo que acta sobre sus
receptores en el hipotlamo, estimulando la ingesta y reduciendo el gasto calrico.
- Grelina: hormona peptdica (28 aminocidos) sintetizada en el estmago que estimula el apetito actuando
sobre sus receptores localizados en hipfisis, hipotlamo, msculo cardiaco y tejido adiposo.
Uno de los tratamientos para la obesidad es el ORLISTAT Es un derivado hidrogenado de la
lipostatina producida por Streptomyces toxitrycine. Acta como un inhibidor potente y especfico de las
lipasas enteropancreticas responsables de la hidrlisis de los triglicridos. El mecanismo de inhibicin
consiste en la acilacin irreversible de la lipasa por reaccin entre el centro activo de la enzima y un
grupo betalactona presente en el frmaco. El orlistat reduce la absorcin de las grasas procedentes de
la dieta hasta en un 30%.
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9. METABOLISMO DE AMINOCIDOS
CATABOLISMO DE AMINOCIDOS
Los aminocidos experimentan degradacin oxidativa en las siguientes circunstancias:
a) Recambio proteico Sntesis y degradacin normal de las protenas celulares. Si los aminocidos
liberados durante este proceso de recambio no son necesarios para la sntesis de nuevas protenas
experimentan un proceso degradativo. Puede tener lugar en:
- Lisosomas Orgnulos que contienen un pH=5,5 y diversas enzimas hidrolticas y proteolticas
especializadas. En los lisosomas este catabolismo sucede mediante:
- Autofagia Pequeas reas del citosol se rodean de membrana procedente del retculo endoplsmico
y capturan las protenas intracelulares. Ej. Protenas de membrana o ribosomales.
- Heterofagia Degradacin de protenas extracelulares capturadas por endocitosis. Ej. LDL.
- Citosol Se produce a travs de protenas dependientes de calcio como la calpana, o a travs de
un complejo multienzimtico denominado proteasoma, con actividad proteasa que reconoce protenas
marcadas para su degradacin. Este marcaje depende de la protena ubiquitina y requiere energa en
forma de ATP. Esta degradacin la sufren las protenas citoslicas y nucleares.
b) Dieta rica en protenas que exceda las necesidades corporales El excedente se cataboliza, los
aminocidos no se pueden almacenar.
c) Inanicin o diabetes mellitus No hay disponibilidad de glcidos, se degradan aminocidos para
obtener energa.
El proceso de degradacin de los aminocidos implica:
1. Eliminacin del grupo amino Los aminocidos se metabolizan en el hgado El grupo amino se
transforma en amoniaco, que es muy txico, especialmente para el cerebro:
- Una parte del amoniaco se recicla y se utiliza para la sntesis de aminocidos, nucletidos u otras aminas.
- El exceso se convierte en urea para su excrecin.
2. Eliminacin del esqueleto carbonado Puede procesarse hasta la oxidacin total en el ciclo de Krebs o
puede utilizarse para la sntesis de hidratos de carbono dependiendo de los 7 productos metablicos que
se originen en su degradacin. Segn el metabolito que generan, los aminocidos pueden ser:
- Si generan acetil-CoA o acetoacetil-CoA Aminocidos cetognicos.
- Si generan piruvato, -cetoglutarato, succinil-CoA, fumarato u OAA Aminocidos gluconeognicos.
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1. DEGRADACIN DEL GRUPO AMINO
Reaccin de transaminacin
b) Desaminacin oxidativa
El glutamato generado en las reacciones de transaminacin es transportado desde el citosol a la matriz
mitocondrial, donde se elimina el grupo amino en forma de in amonio mediante desaminacin oxidativa.
Est catalizada por la enzima L-glutamato deshidrogenasa. Es la nica enzima que puede utilizar tanto
NAD+ como NADP+.
Glutamato + H2O + NAD(P)+ -cetoglutarato + NAD(P)H + H+ + NH4+
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b) Accin de las serina y treonina deshidratasas: la Ser y la Thr son aminocidos que no son sustratos
de transaminacin. Sufren la accin de la Ser y Thr deshidratasas hepticas, dependientes de piridoxal
fosfato. Los esqueletos carbonados obtenidos en estas reacciones son el piruvato y el -cetobutirato,
respectivamente.
c) Accin de la ureasa bacteriana: es una fuente importante de amoniaco del hgado. Est presente en las
bacterias intestinales y cataliza la conversin de urea en NH4+ + CO2.
d) Reaccin de transaminacin entre el glutamato y el OAA para dar aspartato por accin de la enzima
aspartasa que origina fumarato + NH4+.
Glutamina
La glutamina posee 2 tomos de nitrgeno en vez de 1, lo que le convierte en una molcula idnea para
el transporte de nitrgeno por el organismo. Constituye la forma no txica de transportar el amoniaco en
sangre.
Se forma por combinacin con glutamato (por accin de la glutamina sintetasa, que requiere ATP).
Es transportada al hgado, rin e intestino, donde libera el nitrgeno amdico en forma de in amonio por
accin de la glutaminasa mitocondrial.
El NH +
del intestino y del rin se transporta al hgado donde se elimina en forma de urea.
4
Ciclo de la glucosa-alanina
La alanina tambin juega un papel importante en el transporte de los grupos amino al hgado de forma no
txica. Se produce en el msculo y otros tejidos, como la mucosa intestinal, donde el glutamato generado
por transaminacin transfiere su grupo -amino al piruvato por accin de la enzima ALT. La alanina
sintetizada pasa a la sangre y es transportada al hgado. Una vez all, se da la reaccin inversa y se forma
glutamato y piruvato:
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- Glutamato:
1. Entra en las mitocondrias y sufre desaminacin oxidativa para generar amonio.
2. Experimenta una reaccin de transaminacin con OAA para dar aspartato que, por accin de la
aspartasa, origina fumarato + NH4+.
- Piruvato: se utiliza para producir glucosa, que vuelve de nuevo al msculo.
Este ciclo proporciona al msculo esqueltico en ejercicio glucosa sangunea elaborada por el hgado a
partir del esqueleto carbonado de la alanina.
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Pasos:
Ojo La arginasa es una enzima exclusivamente heptica por lo que el ciclo de la urea
se da de forma completa solo en el tejido heptico para rendir urea. En otros tejidos,
como rin e intestino, este ciclo se puede utilizar para la sntesis del aminocido
arginina.
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Ciclo de la urea
- Dietas ricas en protenas: el esqueleto carbonado de los aminocidos es utilizado como combustible y el
grupo amino se cataboliza hacia la produccin de urea.
- Inanicin: la degradacin proteica muscular suministra gran parte de la energa metablica.
Regulacin enzimtica
La carbamil-P sintetasa I est sometida a regulacin alostrica:
- Glucognicos: producen piruvato o compuestos intermediarios del ciclo de Krebs. Todos terminan
transformndose en OAA y llevando a la sntesis de glucosa Alanina, valina, glicina, metionina, cistena,
serina, asprtico, asparagina, arginina, glutamina, histidina y prolina.
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- Cetognicos: se convierten en acetil-CoA o acetoacetil-CoA, que se dirigen hacia la sntesis de cuerpos
cetnicos Leucina y lisina.
- Glucocetognicos: algunos aminocidos pueden ser degradados de ambas formas. Parte de su
esqueleto carbonado origina glucosa Triptfano, fenilalanina, tirosina, treonina e isoleucina.
El catabolismo de los aminocidos se da en el hgado salvo para los aminocidos de cadena lateral
ramificada (Ile, Leu y Val), que se degradan principalmente en msculo, tejido adiposo, rin y cerebro por
el complejo -cetocido de cadena ramificada deshidrogenasa, mediante descarboxilacin oxidativa.
BIOSNTESIS DE AMINOCIDOS
Todos los aminocidos se sintetizan a partir de intermediarios de la gluclisis, del ciclo de Krebs o de la
ruta de las pentosas fosfato.
Aminocidos no esenciales: no necesitan ser aportados con la dieta porque el ser humano es capaz de
sintetizarlos de forma endgena.
Aminocidos esenciales: deben obtenerse necesariamente con la dieta ya que el ser humano es incapaz
de sintetizarlos.
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AMINOCIDOS AMINOCIDOS
ESENCIALES NO ESENCIALES
Fenilalanina Alanina
Histidina Asparagina
Isoleucina Aspartato
Leucina Glutamato
Lisina Serina
Metionina Cisteina
Treonina Glicina
Triptfano Glutamina
Valina Prolina
Arginina* Tirosina
Recuerda CALIDAD PROTEICA: capacidad que tienen los aminocidos de una protena de
la dieta para satisfacer los requerimientos nutricionales del organismo.
1. FAMILIAS DE AMINOCIDOS
Glutamato
En los animales se sintetiza por:
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Glutamina
Se genera a partir del glutamato por accin de la glutamina sintetasa. Cataliza la reaccin del glutamato
con el NH4+ para dar glutamina y consume ATP. El intermediario es el -glutamil-P. Esta enzima est
constituida por 12 subunidades idnticas y en algunos organismos, como en ciertas bacterias, su regulacin
es muy compleja Regulacin alostrica y por modificacin covalente:
- La enzima se inhibe por alanina, glicina y por, al menos, 6 productos finales del metabolismo de la
glutamina. Los efectos de cada uno de los inhibidores son aditivos, de modo que la totalidad de los
inhibidores en su conjunto inactivan la enzima.
- La adenililacin (incorporacin de AMP) del centro activo de la enzima hace que se incremente la
sensibilidad a los inhibidores alostricos. Esta adenililacin est cataliza por la adenililtransferasa.
Funciones de la glutamina:
- Donador de grupos amino en diversas reacciones de biosntesis Dador de nitrgeno para la sntesis
de histidina, triptfano y asparagina, sntesis de aminoazcares, nucletidos y glucoprotenas.
- Transporte del NH4+ a travs del torrente circulatorio de forma no txica.
- Fuente de energa importante en algunos tejidos como hgado y rin En el intestino delgado el 55%
del carbono de la glutamina se oxida a CO2.
Prolina
Es un derivado cclico del glutamato que para su sntesis consume 1 ATP y 2 NAD(P)H. Se forma primero
un intermediario -glutamil-P, que se reduce a glutamato -semialdehdo y se cicla espontneamente para
dar prolina.
La prolina tambin se puede sintetizar a partir de la arginina obtenida de la dieta o de las protenas
tisulares La arginasa convierte la arginina en ornitina y urea La ornitina se convierte en glutamato
-semialdehdo Sntesis de prolina.
El derivado hidroxilado de la prolina es la hidroxiprolina, componente estructural del colgeno.
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Arginina
Se sintetiza a partir de glutamina Glu Ornitina Citrulina (este proceso ocurre solo en la mucosa
intestinal). La citrulina es transportada al rin donde se transforma en arginina.
Es precursora de:
- xido ntrico Gas que acta como neurotransmisor y segundo mensajero. Presenta accin
vasodilatadora en clulas vasculares endoteliales y msculo liso, reduce la presin sangunea e inhibe la
agregacin plaquetaria. Se sintetiza por accin de la xido ntrico sintasa (hemoprotena), dependiente de
NADPH, que tambin produce citrulina.
- Espermina y espermidina Poliaminas que participan en el empaquetamiento del DNA. Proceden de
la metionina y de la ornitina (precursor de la arginina).
Serina
Es un aminocido de 3 C que se sintetiza a partir del 3-fosfoglicerato en una ruta que incluye
deshidrogenacin (utiliza NAD+), transaminacin e hidrlisis por una fosfatasa (paso irreversible de la ruta).
Es precursora de:
- Glicina y cistena.
- Etanolamina, esfingosina y colina.
- Betana (trimetilglicina): compuesto donador de grupos metilo. La colina tambin es precursora en su ruta
de sntesis.
Glicina
Es un aminocido de 2 C que se sintetiza principalmente a partir de la serina por accin de la serina
hidroximetiltransferasa (cofactores: tetrahidrofolato y piridoxal fosfato).
La glicina acta como neurotransmisor inhibitorio en el SNC.
Es precursora de:
- Creatina (Gly + Arg + Met).
- Glutatin.
- Purinas y porfirinas (glicina + succinil-CoA).
- Sales biliares.
- cido hiprico o hipurato Benzoilglicina.
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Cistena
En los mamferos se sintetiza a partir de 2 aminocidos: metionina y serina. La Met aporta el tomo de
azufre y la Ser, el esqueleto carbonado.
La metionina se convierte en S-adenosilmetionina, que cede su grupo metilo para dar
S-adenosilhomocistena. sta se hidroliza dando homocistena libre, la cual reacciona con la serina.
Participan 2 enzimas: cistationina -sintasa y cistationina--liasa, dependientes de piridoxal fosfato.
Es precursora de:
- Glutatin.
- Taurina.
- Cistina (dos cistenas oxidadas unidas a travs de un puente disulfuro).
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Aspartato
Se forma a partir de oxalacetato en una reaccin de transaminacin catalizada por la AST o GOT. La
reaccin es reversible.
Es precursor de:
Isoleucina y valina
La isoleucina se sintetiza a partir de treonina y piruvato a travs del intermediario -cetobutirato que
deriva de la treonina. Las rutas de biosntesis de isoleucina y valina son paralelas, comparten 4 enzimas y
comienzan con la condensacin de 2 molculas de piruvato.
Leucina
Se sintetiza a partir de un intermediario de la ruta de la valina, el -cetoisovalerato.
Alanina
Se sintetiza mediante una reaccin de transaminacin con el glutamato a partir de piruvato, catalizada
por la ALT o GPT.
Recuerda La alanina es liberada a la sangre desde la mucosa intestinal Los enterocitos
transforman la mayora del aspartato y glutamato de la dieta en alanina.
El anillo bencnico de los aminocidos aromticos se forma por la ruta del shiquimato (7 C). Esta ruta
sintetiza corismato, compuesto precursor comn. A partir del corismato se generan 2 ramas: una para la
sntesis de triptfano y otra que conduce a la fenilalanina y a la tirosina.
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Triptfano
Es sintetizado a partir de corismato, que se convierte en antranilato (participa la glutamina). El anillo
indlico se forma por accin de la triptfano sintasa, que requiere serina y piridoxal fosfato.
Es precursor de:
Fenilalanina y tirosina
En bacterias se sintetizan a partir de un intermediario comn, el prefenato.
En los animales, la tirosina se produce a partir de la fenilalanina por accin de la enzima fenilalanina
hidroxilasa que requiere como cofactor tetrahidrobiopterina.
La tirosina es precursora de:
Sntesis de histidina
Histidina
Requiere 3 precursores:
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1. CISTINURIA
Es una enfermedad autosmica recesiva, causada por una alteracin en el transporte de aminocidos
dibsicos. Se caracteriza por el aumento de la excrecin renal de cistina, arginina, lisina u ornitina. Puede
ocasionar litiasis renal debido a la formacin de cristales hexagonales de cistina en las vas urinarias.
2. IMINOGLICINURIA
Se origina por una alteracin en el transporte de glicina, prolina e hidroxiprolina.
Es asintomtica (error congnito benigno).
3. ENFERMEDAD DE HARTNUP
Es un trastorno autosmico recesivo causado por una alteracin en el transporte de aminocidos
neutros en el tracto intestinal y renal.
La sintomatologa se debe al dficit de triptfano, que es retenido en el interior del intestino y
transformado en derivados indlicos txicos para el SNC (ataxia cerebelosa).
Los sntomas son similares a la pelagra, ya que la falta de triptfano limita la produccin de niacina:
picores, dermatitis y fotosensibilidad.
Cuando el deficit afecta solo al transporte de Trp se desarrolla el sndrome del paal azul Presencia
en orina de un compuesto, el indicn, que le confiere este color caracterstico.
En orina aparecen aminocidos como el triptfano y la alanina.
El tratamiento incluye dietas ricas en protenas y suplementos de niacina.
- La fenilalanina acumulada se transforma por otras vas secundarias en metabolitos como el cido
fenilpirvico y otros compuestos txicos para el cerebro; adems, la propia Phe en sangre interfiere en el
transporte de otros aminocidos al cerebro Retraso mental grave en los nios.
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La fenilalanina, el cido fenilpirvico, el fenilactato o el fenilacetato se eliminan por la orina. El fenilacetato
confiere un olor caracterstico a la orina.
Dficit de Tyr:
- Dficit de melanina: pelo rubio y ojos azules. Dficit de pigmentacin en la sustancia gris del encfalo.
- Dficit de neurotransmisores.
Lafenilcetonuria es una enfermedad incluida dentro de los programas de deteccin precoz o cribado
neonatal con el fin de poder instaurar un tratamiento temprano y evitar el dao cerebral.
Diagnstico:
- Diettico: restringir el aporte de Phe con la dieta. Preferentemente, dietas pobres en protenas y
suplementos de Tyr.
2. TIROSINEMIA
Se debe al dficit de alguna de las enzimas implicadas en el metabolismo de la tirosina.
a) Tirosinemia tipo I
Enfermedad autosmica recesiva. Se debe al dficit de la fumarilacetoacetasa o fumarilacetoacetato
hidrolasa, cuyo gen est localizado en el cromosoma 15.
Sntomas: dao heptico grave con cirrosis y afectacin renal.
3. ALCAPTONURIA
Enfermedad autosmica recesiva cuyo gen est localizado en el cromosoma 3.
Seorigina por un bloqueo en la descomposicin del cido homogentsico, un metabolito de la tirosina,
debido a la deficiencia de la enzima homogentsico oxidasa.
Se acumulan grandes cantidades de cido homogentsico, que se excreta por la orina, confirindole
un color oscuro. Adems, el cido homogentsico se puede depositar en el cartlago y en las articulaciones
ocasionando artritis.
4. ALBINISMO OCULOCUTNEO
Trastorno autosmico recesivo debido al dficit de la enzima tirosinasa, necesaria para la formacin de
melanina a partir de tirosina.
Falta de pigmentacin en piel, pelo, iris y fondo de ojo disminucin de la agudeza visual y nistagmo.
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- Alteraciones esquelticas debido a la falta de puentes disulfuro entre las protenas: osteoporosis,
escoliosis, pectus excavatum y aracnodactilia Similar al sndrome de Marfan.
- Luxacin del cristalino.
- Alteraciones neurolgicas: retraso mental y ataques epilpticos.
Diagnstico:
- Dietas pobres en metionina con suplementos de cistena. Algunos pacientes responden a suplementos
de piridoxina.
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Recuerda La homocistinuria tambin se puede deber al dficit de vitB12, y en este caso cursa
tambin con aciduria metilmalnica, o al dficit de enzimas implicadas en el
metabolismo del tetrahidrofolato.
2. ACIDEMIA METILMALNICA
Es una enfermedad autosmica recesiva que se debe al dficit de metilmalonil-CoA mutasa que
cataliza el paso de metilmalonil-CoA a succinil-CoA. Es dependiente de vitB12.
El metilmalonil-CoA es un producto comn de la degradacin de Ile, Val, Met y Thr.
Sntomas: severos en pacientes sin restriccin de la dieta proteica Retraso del desarrollo, hipotona
muscular y coma.
3. ACIDEMIA PROPINICA
Enfermedad autosmica recesiva que se debe al dficit de propionil-CoA carboxilasa, que cataliza el
paso de propionil-CoA a metilmalonil-CoA en el catabolismo de los aminocidos Ile, Val, Thr y Met.
Esto causa la acumulacin de cido propinico y otros compuestos txicos derivados de ste.
Sntomas: : acidosis metablica severa e hiperamonemia con dao neurolgico severo y coma, en
ausencia de tratamiento.
Tratamiento: restriccin proteica en la dieta y suplementos de L-carnitina.
4. ACIDEMIA ISOVALRICA
Es una enfermedad autosmica recesiva que se debe al dficit de la enzima isovaleril-CoA
deshidrogenasa, implicada en el metabolismo de la leucina.
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Sntomas: hipotermia, hipotona, vmitos y encefalopata aguda neonatal. Es caracterstico el olor de la
orina a pies sudados debido a la acumulacin de cido isovalrico.
Recuerda La diabetes y sus complicaciones pueden cursar con cetoacidosis pero no con
hiperamonemia.
2. HISTIDINEMIA
Alteracin benigna caracterizada por el dficit de la enzima histidasa, implicada en el catabolismo de la
histidina, que convierte la histidina en urocanato (ste origina N-formininoglutamato o FIGLU, que en una
reaccin dependiente de tetrahidrofolato produce glutamato). Aparecen niveles elevados de histidina en
plasma y orina.
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BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA
ResUmen aminocidos y compuestos que sintetizan
FAMILIA
AMINOCIDO A LA QUE PERTENECE PRECURSOR DE
xido ntrico
Arginina -cetoglutarato Espermina y espermidina
Creatina
Neurotransmisores: serotonina
Triptfano Fosfoenolpiruvato NAD+ y NADP+
cido nicotnico
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BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA
Resumen de las principales alteraciones del metabolismo de aminocidos
* Todas son autosmicas recesivas salvo el dficit de ornitina transcarbamilasa que est ligado al cromosoma X
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1. VA DE SNTESIS DE NOVO
Ruta de sntesis de nucletidos a partir de los precursores metablicos: aminocidos, ribosa 5-P, CO y NH3.
2
Las bases libres no son intermediarios en la va de sntesis de novo.
Precursor comn en la sntesis de purinas y pirimidinas: fosforribosil pirofosfato (PRPP).
Precursores aminoacdicos:
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La sntesis de novo consta de 2 partes:
- Una parte comn, donde a partir del PRPP se forma el ribonucletido intermediario IMP.
- Una parte ramificada, en la que a partir del IMP se obtienen los nucletidos AMP y GMP.
Parte comn:
2) A continuacin se suceden 10 reacciones enzimticas en las que se incorporan distintos tomos hasta
originar el primer intermediario con un anillo purnico completo: IMP. Participan:
- N-formil-THF: donador de tomos de carbono.
- Glicina (primer aminocido precursor), glutamina y aspartato.
- Se necesitan 6 molculas de ATP.
Durante este conjunto de reacciones tiene lugar una reaccin especial: una carboxilacin en la formacin
del segundo anillo de purina, que tiene como particularidad que es independiente de biotina.
3) El IMP es el precursor del AMP y del GMP en 2 rutas diferentes:
- IMP AMP (adenilato o adenosina 5-monofosfato). IMP deshidrogenasa y GMP sintetasa.
- IMP GMP (guanilato o guanosina 5-monofosfato). Adenilosuccinato sintetasa y adenilosuccinato
liasa.
Recuerda Lo derivados di y tri fosfato se generan con posterioridad mediante la accin de
quinasas especficas.
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b) Sntesis de novo de ribonucletidos de pirimidina
Contienen las bases nitrogenadas citosina y uracilo.
Primero se sintetiza el anillo de pirimidina en forma de cido ortico u oroato y sobre ste se aade el
azcar ribosa-5-P.
Las bases pirimidnicas constan de un nico anillo de 6 C Se requiere para su formacin PRPP,
aspartato y carbamil-P.
Ojo Para la sntesis de carbamil-P en el citosol se requiere de otra enzima citoslica denominada
carbamil-P sintetasa II (no confundir con la forma mitocondrial de la enzima que participa en
el ciclo de la urea).
El paso limitante de la ruta biosinttica es la primera reaccin catalizada por la aspartato transcarbamilasa
donde el aspartato reacciona con el carbamil-P para originar el N-carbamil aspartato.
Despus se forma el oroato y se aade la ribosa 5-P para formar el orotidilato (OMP), que por
descarboxilacin forma UMP (complejo UMP sintasa). A partir del UMP se sintetiza el UTP por fosforilacin.
El UTP se transforma en CTP por accin de la citidilato sintetasa que consume ATP.
Las 3 primeras reacciones de la va estn catalizadas por 3 enzimas que forman parte de un complejo
multienzimtico denominado CAD.
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Enzima responsable: ribonucletido reductasa, que utiliza como sustratos los ribonuclesidos
difosfato. Es una protena tetramrica 22 Su lugar cataltico contiene residuos de cistena.
Esta enzima presenta 2 mecanismos de accin utilizando los cofactores proteicos tiorredoxina o
glutarredoxina:
- Tiorredoxina: los electrones para la reduccin de los ribonucletidos proceden del NADPH; stos
son transportados a la ribonucletido reductasa por la tiorredoxina, cuyos grupos sulfhidrilo se oxidan
a puentes disulfuro. La tiorredoxina se vuelve a reducir con NADPH por la tiorredoxina reductasa. La
tiorredoxina reducida es utilizada por la ribonucletido reductasa para reducir los ribonuclosidos difosfato
a desoxirribonuclesidos difosfato.
- Glutarredoxina: el glutatin tiene la capacidad de reducir la glutarredoxina, la cual transfiere el poder
reductor a la ribonucletido reductasa.
Todos los desoxirribonucletidos se originan as excepto el dTMP, que se origina a partir del dUMP.
La reaccin de conversin de dUMP a dTMP est catalizada por la TIMIDILATO SINTASA, que utiliza
el N5,N10-metilentetrahidrofolato como donador de una unidad de carbono y un par de electrones para
metilar el dUMP. En esta reaccin el tetrahidrofolato se oxida a dihidrofolato.
La regeneracin del N5, N10- metilentetrahidrofolato tiene lugar por accin de las enzimas dihidrofolato
reductasa y serina hidroximetiltransferasa.
El dTMP se convierte en dTTP mediante fosforilaciones sucesivas.
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Biosntesis de dTMP
2. VAS DE RECUPERACIN
Son rutas ms sencillas que las de novo que permiten reciclar bases nitrogenadas originadas en
el catabolismo de los cidos nucleicos y sintetizar nucletidos. Estas bases nitrogenadas pueden
catabolizarse a cido rico tambin.
Algunas clulas como los linfocitos utilizan estas vas de recuperacin como fuente principal de
nucletidos.
Se regeneran los ribonuclesidos monofosfato a partir de la base nitrogenada y el PRPP en reacciones
catalizadas por fosforribosiltransferasas.
Ejemplo de recuperacin de bases pricas:
Algunos parsitos como los tripanosomas africanos carecen de ruta para la biosntesis de novo de
nucletidos y son sensibles a agentes que interfieran con las rutas de recuperacin.
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Primera enzima de la reaccin a partir de PRPP. Glutamina-PRPP-amidotransferasa
Enzima alostrica que cataliza el paso de PRPP a 5-fosforribosilamina.
Inhibida por producto final: IMP, AMP y GMP (tambin por ADP y GDP).
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c) Biosntesis de novo de desoxirribonucletidos
Regulacin de la ribonucletido reductasa
La regulacin es llevada a cabo sobre su actividad y su especificidad de sustrato.
Estaregulacin se lleva a cabo mediante la unin de las molculas efectoras a 2 tipos de sitios en la
subunidad R1:
- Lugares de actividad: Se activan por ATP y se inhiben por dATP.
- Lugares de especificidad de sustrato: Ej.
1. dTTP Activa la reduccin del GDP e inhibe la de UDP o CDP
2. dGTP Activa la reduccin de ADP e inhibe la de UDP o CDP
CATABOLISMO DE NUCLETIDOS
Los cidos nucleicos degradados proceden de 2 fuentes:
- Intracelular Recambio de RNAm inestables, rutas de reparacin del DNA o muerte celular.
- Extracelular Digestin de los cidos nucleicos ingeridos con la dieta. Va principal.
Los cidos nucleicos ingeridos:
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1. CATABOLISMO DE BASES PRICAS
El catabolismo del AMP y del GMP rinde cido rico como producto final, que se excreta por la orina.
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2. GOTA
Esuna enfermedad debida al depsito de urato monosdico y cristales de cido rico en los tejidos,
especialmente en las articulaciones, originando la artritis gotosa aguda. La gota se puede deber a un
exceso de purinas con la alimentacin o a alteraciones genticas.
Recuerda La gota se trata con el frmaco alopurinol, anlogo estructural de la hipoxantina que inhibe
la enzima xantina oxidasa, inhibiendo la transformacin de las purinas en cido rico. El
alopurinol es transformado por la xantina oxidasa en oxipurinol (aloxantina) que permanece
fuertemente unido al sitio activo de la enzima, inactivndola.
3. XANTINURIA HEREDITARIA
Es una enfermedad autosmica recesiva que se debe al dficit hereditario de la xantina oxidasa o
xantina deshidrogenasa. Esta enzima cataliza la degradacin de la hipoxantina y la xantina a cido rico.
Se caracteriza por una concentracin muy baja o indetectable de cido rico en sangre y en orina y por
un exceso de xantina en orina, lo que provoca urolitiasis.
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Se produce un fallo en el catabolismo de estos nuclesidos o desoxinuclesidos y por tanto, se
acumulan en los lquidos corporales provocando una disminucin intensa en la produccin de linfocitos
T favoreciendo la aparicin de infecciones. La enfermedad no afecta a la produccin de linfocitos B e
inmunoglobulinas.
Se asocia con una disminucin de cido rico en plasma.
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BIOQUMICA CLNICA
1. FASE PREANALTICA
SANGRE
La obtencin de sangre para su anlisis se puede llevar a cabo mediante su extraccin de venas, arterias
y capilares. Para la mayor parte de las determinaciones en el laboratorio se extrae sangre venosa ya que
es ms fcil su obtencin.
Algunas determinaciones analticas presentan variaciones segn se trate de sangre venosa o arterial. En
algunos casos interesa extraer sangre arterial. Ej. Gasometra.
a) Plasma y suero
El plasma sanguneo es una sustancia intercelular lquida que contiene electrolitos, nutrientes, protenas,
vitaminas, ...
El suero es el plasma sin fibringeno y otras protenas de la coagulacin. Se obtiene dejando coagular
la sangre con posterior retraccin del cogulo formado.
b) Anticoagulantes
Cuando la muestra a analizar es plasma o sangre total, se utilizan los siguientes anticoagulantes:
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b) Orden de extraccin de los tubos
Tubos estriles para cultivos Tubos sin anticoagulante Tubos de citrato para coagulacin Tubos
con gel separador/Tubos con heparina Tubos con EDTA.
c) Tipos de puncin
Puncin venosa
Se suele llevar a cabo en la vena mediana cubital debido a su grosor, y tambin en la vena ceflica.
Puncin arterial
Son ms complicadas que las venosas debido a la mayor presin sangunea de las arterias.
Se suele llevar a cabo en la arteria radial del brazo o en la femoral principalmente.
Se realizan con jeringas de vidrio heparinizadas. La heparina de litio es el anticoagulante utilizado.
Puncin cutnea
Es especialmente importante en nios, ancianos, pacientes obesos y diabticos.
En los nios se realiza en el taln y en los adultos en el dedo pulgar.
La eleccin de sangre capilar frente a la venosa no suele presentar diferencias clnicas relevantes,
aunque es un aspecto a tener en cuenta en la interpretacin del resultado. Ej. La concentracin capilar de
glucosa es del 10-30% superior a la venosa.
b) Determinacin de pH y gases
Colocar en hielo y llevar rpidamente al laboratorio.
ORINA
1. OBTENCIN DE LAS MUESTRAS
Esimportante que la recogida de la orina se efecte adecuadamente, ya que condiciona los resultados
obtenidos.
a) Contenedores
Limpios y secos (y en determinados casos, han de ser estriles).
Loscontenedores para el anlisis sistemtico presentan tapn de rosca, boca ancha y redonda y una
capacidad entre 50-100 mL.
Estn elaborados con material transparente que permita ver el interior (excepto para la determinacin de
sustancias fotosensibles en cuyo caso deben ser opacos). Ej. Bilirrubina, urobilingeno, catecolaminas,
porfirinas.
Para la recogida de orina de 24 horas el volumen de los recipientes ha de ser entre 2-5 L.
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Orina fraccionada Utilidad en pacientes diabticos. En 3 muestras/da se determina la glucosuria y la
cetonuria.
Orina de 24 horas Se desecha la orina de primera hora de la maana y se recoge toda la orina durante
24 horas. Se utiliza para determinaciones cuantitativas metablicas como el aclaramiento de creatinina.
Orina de media miccin para cultivo microbiolgico Se desechan la primera y ltima porcin de la
miccin. Precisa condiciones de recogida ms higinicas que las anteriores.
CONSERVANTE CARACTERSTICAS
Disolvente orgnico que forma una capa sobre la
Tolueno muestra que la protege del aire e inhibe el crecimiento
bacteriano
Fija los elementos formes del sedimento urinario,
Formaldehdo o formol conservndolos
Interfiere en la determinacin de glucosa
Impide el crecimiento bacteriano
Timol
Produce falsos positivos en algunas determinaciones
Forma una pelcula que evita la prdida de CO2 en las
Aceite de parafina
pruebas de acidificacin
d) Extraccin de la muestra
Miccin espontnea.
Cateterismo vesical (sondaje) Personas que presentan dificultades en la miccin.
Puncin suprapbica En nios, cuando se sospecha de la presencia de microorganismos extraos o
cuando la muestra disponible no rene las condiciones ptimas para ser analizada.
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LQUIDO CEFALORRAQUIDEO
1. OBTENCIN DE LAS MUESTRAS
Se obtiene mediante puncin lumbar entre la 3 y la 4 o entre la 4 y la 5 vrtebra lumbar.
El paciente se debe colocar en posicin fetal girado hacia un lado.
Durante la extraccin se comprueba la presin de salida del lquido cefalorraqudeo 70-200 mm de
H2O.
Volumen normal obtenido 7-15 mL, que se recogen en 3 tubos estriles (1-3 mL /tubo).
En caso de puncin hemorrgica solo el primer recipiente presenta una coloracin rojiza, pero en caso
de que ya existiera una hemorragia antigua los 3 recipientes estarn hemticos.
SEMEN
1. OBTENCIN DE LA MUESTRA
Es necesario guardar abstinencia sexual entre 2-7 das antes de la obtencin de la muestra.
Se obtiene por masturbacin y se recoge en un recipiente limpio de plstico con boca ancha, que no
contenga ninguna sustancia que pueda tener efectos txicos sobre los espermatozoides.
No debe utilizarse preservativo para recoger la muestra ya que contiene espermicidas.
Es importante no perder la primera porcin del eyaculado, que es la que mayor concentracin
espermtica tiene.
El semen debe ser llevado rpidamente al laboratorio tras su obtencin y ser analizado al cabo de una
hora.
- Fsico: observacin del aspecto macroscpico y medicin del volumen con un tubo graduado.
- Microscpico: se determina la concentracin y motilidad espermtica por observacin microscpica con
la cmara de Makler. Tambin se realiza el test de vitalidad de los espermatozoides inmviles tindolos
con eosina (si estn muertos la eosina atraviesa la membrana plasmtica daada del espermatozoide y
se tien de color rosa).
- Bioqumico: fosfatasa cida, cido ctrico, fructosa,
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2. FASE ANALTICA
ANLISIS DE SANGRE
1. PRUEBAS BIOQUMICAS EN SANGRE
MTODO CARACTERSTICAS
Mtodo qumico colorimtrico que se basa en la
formacin de un complejo coloreado en presencia de
Biuret cobre y sales, en medio bsico
La intensidad del color es proporcional al nmero de
enlaces peptdicos
Automatizacin. Es el ms utilizado
Mtodo colorimtrico
Lowry Poco utilizado (ms en orina)
Gran sensibilidad, pero poca especificidad
Determinacin del ndice de refraccin de una muestra
que vara con la concentracin proteica
Mtodos refractomtricos Bastante utilizado
Gran sensibilidad y exactitud, aunque sujeto a
interferencias (hemlisis)
Los enlaces peptdicos absorben a 280 nm
Absorcin en el UV
Sensible y preciso
Kjeldahl Determinacin del nitrgeno proteico
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Sus niveles se ven influidos por:
Otro mtodo de determinacin de la urea tanto en sangre como en orina es el mtodo de Berthelot-
Searcy: mtodo colorimtrico basado tambin en la accin de la ureasa.
MTODO CARACTERSTICAS
Oxidacin del cido rico en medio alcalino por el cido
cido fosfotngstico
fosfotngstico, que se reduce a azul de tungsteno. Colorim-
trico a 700nm
Mtodo colorimtrico que implica la oxidacin del cido rico
Uricasa a alantona por la enzima peroxidasa
Medida de la absorbancia a 570 nm
Muy utilizado
HPLC
Determinacin de creatinina
La creatinina es el anhdrido de la creatina.
Proceso de sntesis: la creatina da fosfocreatina por accin de la creatina quinasa muscular. La
fosfocreatina se transforma en creatinina en una reaccin espontnea e irreversible.
El ritmo de sntesis de creatinina es constante.
Losniveles de creatinina estn directamente relacionados con la masa muscular y no se modifican ni
con el ejercicio, ni con las variaciones del catabolismo y es independiente del aporte diettico.
La creatinina excretada es filtrada en su mayora en el glomrulo y solo una pequea porcin es secretada
en los tbulos. Se elimina mayoritariamente por va renal y en una pequea cantidad con las heces Buen
indicador de funcin renal, especialmente de funcin glomerular.
Aclaramiento de creatinina Es el volumen de plasma liberado de una sustancia determinada por el
rin por unidad de tiempo (en este caso, la creatinina).
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Mtodo de determinacin: reaccin de Jaff Reaccin de la creatinina en medio alcalino con el
cido pcrico, formando un complejo coloreado (color rojo). Puede ser un mtodo cintico o a punto final.
Se mide la absorbancia a 505 nm.
Determinacin de glucosa
Las pruebas ms importantes en el diagnstico de la diabetes son:
Otras determinaciones
Hemoglobina glucosilada
Es la fraccin denominada A1c (unida de forma irreversible, mediante enlaces covalentes a la glucosa).
Su presencia es proporcional a los niveles de glucosa en sangre y nos permite conocer los valores de
glucemia de un paciente durante los tres meses previos a la determinacin (ya que la vida media de la Hb
son 120 das). Control del paciente diabtico.
Utilidad clnica: seguimiento de la diabetes (no es til para el diagnstico).
Se determina mediante HPLC (Cromatografa Lquida de Alta Resolucin).
MTODO CARACTERSTICAS
Mtodo de la orto-toluidina Es un mtodo colorimtrico
(Basado en el poder reductor En desuso
de la glucosa)
Mtodo de reduccin del cobre/Benedict La glucosa en medio bsico se oxida a cido glucnico y
(Basado en el poder reductor de la reduce el in cprico a cuproso
glucosa) Se forma un complejo de color rojo
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d) Mtodos de determinacin de lpidos y lipoprotenas
LPIDO/LIPOPROTENA MTODO
Bilirrubina
La bilirrubina procede, en su mayor parte, de la degradacin del grupo hemo de la hemoglobina de los
eritrocitos que tiene lugar en las clulas del sistema reticuloendotelial (bazo, hgado y ganglios linfticos).
La parte restante procede del catabolismo de otras hemoprotenas (citocromos, catalasa, mioglobina, ).
- La degradacin del grupo hemo forma biliverdina, que se transforma en bilirrubina Bilirrubina no
conjugada (indirecta).
- En el hgado, la bilirrubina no conjugada se conjuga con cido glucurnico para dar lugar a la bilirrubina
conjugada (directa).
- La concentracin normal de bilirrubina en plasma vara entre 0,3-1 mg/dL. Por encima de 2,5 mg/dL
aparece ictericia.
- La ictericia es la coloracin amarillenta de los tejidos corporales debido a la elevacin anormal de los
niveles de bilirrubina en sangre. En el recin nacido existe una ictericia fisiolgica debido a que, por la
inmadurez del hgado, no es capaz de conjugarla.
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Clases de ictericia
Recuerda Existe un tipo de bilirrubina que se llama bilirrubina (delta), que consiste en la
unin de la bilirrubina mediante enlace covalente con la albmina.
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El resto de parmetros sanguneos del estado cido-base no son medibles, pero se pueden calcular. Ej.
HCO3-, CO2 total, saturacin de oxgeno, exceso de base,
En la muestra de gases sanguneos se puede determinar el ANIN GAP o HIATO ANINICO Se
basa en el principio de electroneutralidad mediante el cual el nmero de cationes debe ser igual al nmero
de aniones. Se calcula mediante la siguiente frmula:
GAP = [Na+] ([Cl-] + [ HCO3-])
En condiciones normales la concentracin de los cationes (sodio y potasio) es mayor que la de aniones
(representado por el cloruro y bicarbonato).
Estadiferencia se debe a una serie de sustancias con carga negativa en la sangre como protenas
plasmticas, sulfatos, fosfatos y lactato, que habitualmente no se miden.
Al conjunto de estas sustancias aninicas que equilibran las cargas positivas y las negativas y que no se
determinan de manera directa se les denomina ANIN GAP.
En determinadas circunstancias patolgicas el anin GAP:
- Aumenta: acidosis metablica, cetoacidosis diabtica (pH <7,25 o bicarbonato plasmtico <16 mEq/L).
- Disminuye: mieloma mltiple (por aumento de las gammaglobulinas que tienen carga positiva).
3. PRUEBAS DE HEMATIMETRA
Consiste en el anlisis de las clulas sanguneas y permite detectar alteraciones cuantitativas y
cualitativas en estas clulas:
a) Eritrocitos
Son las clulas ms abundantes de la sangre. Son discos bicncavos con una vida media de 120 das.
Carecen de ncleo y de orgnulos citoplasmticos. Su principal funcin es transportar la hemoglobina (con
el oxgeno que contiene) desde los pulmones a las clulas de los tejidos. El precursor inmediato de los
eritrocitos es el reticulocito, que ya carece de ncleo.
Principales ndices eritrocitarios y reticulocitarios
b) Leucocitos
Tienen ncleo y orgnulos citoplasmticos. Presentan funciones inmunitarias.
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Tipos:
c) Plaquetas
Son discos finos de 2-4 m que carecen de ncleo. Son fragmentos de megacarocitos. Sus valores
normales oscilan entre 130-400 x 109/L.
a) Tincin de perls
Pone de manifiesto la presencia de hemosiderina en el citosol de las clulas. Se utiliza generalmente
sobre frotis de mdula sea.
c) Tincin de la peroxidasa
Esta enzima est presente en el citoplasma de casi todos los leucocitos. Solo los linfocitos carecen de ella.
g) Tincin de la -glucuronidasa
Esta enzima es una hidrolasa lisosomal.
Positiva: macrfagos, clulas plasmticas y linfocitos T.
Positividad dbil o negativa: monocitos y neutrfilos.
h) Tincin de esterasas
-Naftil-Acetato o -Naftil-Butirato Negativa para neutrfilos.
Naftol AS-D cloroacetato esterasa Positiva para neutrfilos.
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5. PRUEBAS DE COAGULACIN: HEMOSTASIA
Mtodo de Quick Se
utiliza para evaluar el
Mide el tiempo que tarda en aparecer el funcionamiento de las vas
cogulo de fibrina aadiendo al plasma comn y extrnseca
Tiempo de tromboplastina y calcio Mide
la capacidad coagulante
protrombina En la actualidad se recomienda utlizar el de los factores I, II,V,VII y X
(TP) INR (cociente normalizado internacional) Se
utiliza para el control de la
INR=(TP del paciente/TP control) ISI* terapia con anticoagulantes
*ISI: ndice de sensibilidad internacional orales dicumarnicos
Mide
el tiempo que tarda en formarse la
Se
utiliza para evaluar las
Tiempo de vas intrnseca y comn de la
fibrina cuando se aade cefalina y calcio
tromboplastina coagulacin
a un plasma sin plaquetas. Se inicia
parcial activada la reaccin aadiendo al plasma una Permite
detectar hemofilias A y
sustancia cargada negativamente B APTT prolongado
(APTT)
(slice, caoln) Se
utiliza para controlar el
tratamiento con heparina
Factor de coagulacin y
reactante de fase aguda por lo que
Medida del tiempo de coagulacin en estar aumentado en:
Fibringeno presencia de grandes cantidades de
trombina Reacciones inflamatorias
Traumatismos
Infecciones
E
s un producto de degradacin
Se detecta por tcnicas cuantitativas: de la fibrina
ELISA o turbidimetra Est
aumentado en la
Dmero D Por tcnicas semicuantitativas: coagulacin intravascular
Aglutinacin por partculas de ltex diseminada (CID) y en procesos
tromboemblicos como la
trombosis venosa profunda
ANLISIS DE HECES
El anlisis de las heces permite detectar alteraciones del proceso digestivo por:
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BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA
b) Anlisis microscpico de las heces: estudio de la digestin
La preparacin se puede observar:
- Sin teir Para cualquier tipo de resto de digestin, aunque encaminada al estudio de protenas.
- Tincin con Sudn III Se destacan los restos de grasas en las heces.
- Tincin con lugol doble Se destacan los hidratos de carbono.
ANLISIS DE ORINA
1. EXAMEN MACROSCPICO
a) Color
El color normal de la orina es amarillo claro/mbar por la presencia de un pigmento denominado
urocromo.
El color de la orina puede variar desde incoloro a casi negro atendiendo a las diferentes patologas
responsables de dicha coloracin y a la ingesta diettica o de frmacos.
258
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BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA
Diferentes colores de la orina y sus causas
COLOR CAUSA
Consumo reciente de lquido, poliuria, diabetes
Incoloro/Amarillo claro
inspida o diabetes mellitus
Amarillo oscuro Muestra concentrada
Anaranjado Presencia de bilirrubina y ciertos antibiticos
(fenazopiridina, nitrofurantona, ...)
Amarillo verdoso/Amarillo-marrn Ictericia; bilirrubina oxidada a biliverdina
Verde Infeccin por Pseudomonas
Rosa Eritrocitos
Hemoglobina/Mioglobina/Porfirinas; hemlisis
Roja
intravascular, dao muscular o porfiria
Marrn Eritrocitos oxidados a metahemoglobina
Metahemoglobina, cido homogentsico
Negra (alcaptonuria), melanina (melanoma maligno),
derivados del fenol, metildopa o levodopa
b) Olor
La orina recin emitida tiene un olor suave y caracterstico debido a la presencia de cidos voltiles.
A medida que va transcurriendo el tiempo, el olor de la orina se torna amoniacal debido a la descomposicin
de la urea.
Olores patolgicos:
- Poliuria (eliminacin de un volumen de orina superior al normal, >3.000 mL/24h) Diabetes mellitus o
diabetes inspida.
- Oliguria (eliminacin de un volumen de orina inferior al normal, <400mL/24h) Deshidratacin, isquemia
renal, insuficiencia renal crnica.
- Anuria (falta de eliminacin de la orina) Insuficiencia renal aguda o crnica.
e) Densidad
Hace referencia a la capacidad de los riones para concentrar la orina.
Densidad normal 1,010-1,030 g/L.
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BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA
- Aumentada: procesos febriles, diabetes mellitus (presencia de glucosa en la orina), insuficiencia
suprarrenal, enfermedades hepticas e insuficiencia cardiaca.
- Disminuida: diabetes inspida (dficit de ADH), glomerulonefritis o pielonefritis.
2. EXAMEN BIOQUMICO
Glucosuria
Diabetes mellitus
Acromegalia
GLUCOSA Glucosa oxidasa
NO HAY Sndrome de Cushing
Hipertiroidismo
Embarazo
Nitroprusiato Cetonuria
CUERPOS NO HAY (No detecta Diabetes mellitus
CETNICOS -hidroxibutirato) Ayuno prolongado
Hemoglobinuria
Anemia hemoltica
Ortotoluidina
HEMOGLOBINA NO HAY Traumatismo
y perxido orgnico
Enfermedad renal
Infecciones
Piuria
LEUCOCITOS NO HAY Esterasa leucocitaria
Infecciones
Bilirrubinuria
BILIRRUBINA NO HAY Diazorreaccin Enfermedad heptica
Enfermedad obstructiva biliar
Positivo en:
NITRITOS Amina aromtica Infecciones bacterianas por bacterias
NO HAY con diazonio capaces de reducir los nitratos a nitritos.
Ej. Enterobacterias
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BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA
b) Determinacin cuantitativa de protenas totales en orina
Se denomina proteinuria a la excrecin de protenas en orina >150 mg/da.
Un tercio de la cantidad de protena eliminada por la orina es albmina.
La presencia de protenas en orina es un indicador del estado del rin y puede reflejar cierta lesin a
nivel renal (enfermedad glomerular).
La determinacin es ms compleja que en las muestras sanguneas debido a la cantidad de sustancias
no proteicas que pueden interferir en la determinacin.
Mtodos de determinacin de protenas totales en orina
MTODO CARACTERSTICAS
Escasa sensibilidad
Biuret
Sujeto a interferencias
Lowry Bastante utilizado
Mtodos que fijan colorantes Se utiliza el colorante azul de Coomasie que se une a
los grupos amino de las protenas
c) Deteccin de la microalbuminuria
Excrecinde pequeas cantidades de albmina en orina por encima de los valores normales pero que
no son detectadas con las pruebas rutinarias de determinacin de protenas en orina.
Utilidad clnica: indicador ms precoz de complicaciones en el paciente diabtico.
La determinacin se lleva a cabo con una tira reactiva semicuantitativa y la cuantificacin por nefelometra
o turbidimetra.
Recuerda Se recomienda evitar el caf, el cacao, el t, la vainilla, los ctricos y el alcohol antes
de llevar a cabo la determinacin, ya que pueden elevar los niveles urinarios de
cido vanililmandlico.
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BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA
mtodo ms utilizado actualmente para determinar el 5-Hidroxiindolactico es el HPLC en una
El
muestra de orina 24 horas.
Utilidad clnica: su excrecin urinaria est elevada en el tumor carcinoide.
f) Deteccin de porfirinas
Deteccin cualitativa:
- Test de Hoesch: reactivo de Ehrlichs Detecta la presencia de porfobilingeno. Pigmento rojo que
absorbe a 552 nm.
HPLC con detector de fluorescencia.
Utilidad clnica: diagnstico de porfirias.
a) Tipos de clulas
Hemates
Son clulas de forma bicncava y con un tamao que oscila entre 4 y 7 m.
Se encuentran en cantidad muy reducida en la orina normal (1-2/campo).
Utilidad clnica:
Hematuria renal
- Hematuria glomerular: glomerulonefritis. Es frecuente la aparicin de hemates dismrficos (proceden
de la sangre que circula por el glomrulo: hemates deformados, con muescas).
- Hematuria parenquimatosa no glomerular: tumores malignos y quistes renales, infarto renal, nefropata
poliqustica, tuberculosis o diabetes mellitus.
Hematuria extrarrenal
- Nefrolitiasis, cistitis hemorrgicas, hipertensin arterial, trombopenias.
Ojo Los hemates al microscopio se pueden confundir con levaduras o con cristales de oxalato
clcico monohidratado.
Leucocitos
Son clulas redondeadas, de tamao algo mayor que los hemates (8-15 m) y con un ncleo variable
en tamao y forma.
No se suelen encontrar en el sedimento de una persona sana; lo normal es 0-5 leucocitos/campo.
El tipo de leucocito predominante en la orina es el leucocito polimorfonuclear neutrfilo.
Utilidad clnica: la presencia de piuria en la orina puede indicar:
Clulas epiteliales
Clulas de epitelio plano o escamoso
Son clulas de gran tamao, de aspecto irregular, con abundante citoplasma y ncleo pequeo y
centrado.
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Proceden de los genitales externos o de la porcin inferior de la uretra. Con frecuencia indican
contaminacin vaginal o perineal.
Aparecen en el sedimento normal no patolgico, aunque pueden aparecer en casos de uretritis.
Cilindros
Se originan a partir de las protenas (la matriz es la mucoproteina Tamm-Horsfall, segregada a la
orina por las clulas epiteliales de la rama ascendente del asa de Henle) de los tbulos de las nefronas;
representan moldes de las nefronas.
Los cilindros se originan por el espesamiento de las protenas y su precipitacin. Se clasifican en funcin
de:
1. El lugar de la nefrona en que se forman:
- Cilindros estrechos Proceden de los tbulos distales.
- Cilindros anchos Proceden de los tbulos colectores (se observan en la insuficiencia renal crnica).
2. El material del que estn formados.
- La acidificacin de la orina y el aumento de la concentracin de solutos favorece la aparicin de cilindros.
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BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA
TIPOS DE
CILINDROS CARACTERSTICAS SIGNIFICACIN CLNICA
Cristales
Son productos finales del metabolismo que se excretan a nivel urinario.
La deteccin de cristales en orina posee significacin diagnstica en muy pocos casos.
El tipo y el nmero de cristales dependen del pH y de la temperatura de la orina:
1. Uratos amorfos
- Orinas cidas.
- Precipitado rojo-pardusco en forma de polvo de ladrillo.
- Aparecen en episodios febriles y en la gota.
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BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA
2. Urato diamnico
- Orinas ligeramente alcalinas.
- Esferas de color amarillo-pardusco. Raramente cristalizan en forma de bizcocho o ramillete de agujas.
- Se pueden confundir con cristales de leucina.
- No tienen significacin clnica aunque se asocian con infecciones urinarias por bacterias productoras de
ureasa.
3. cido rico
- Orinas cidas.
- Son birrefringentes y adoptan diferentes formas: cuadros romboidales y roseta son los ms frecuentes.
- Son frecuentes en la orina muy concentrada, como en la fiebre, y en la gota.
4. Oxalato clcico monohidratado
- Orina cida o dbilmente alcalina.
- Es incoloro y birrefringente; aparecen en forma de sobre de carta y con menos frecuencia, en forma
de reloj de arena.
- Se asocia a dieta ricas en oxalato (legumbres, mandarinas) y tambin aparecen en la oxalosis primaria,
una enfermedad hereditaria.
5. Fosfato amnico-magnsico (fosfato triple)
- Orinas alcalinas.
- Su forma ms caracterstica es en tapa de atad.
- Se disuelven fcilmente en cido actico.
- No tienen significacin clnica importante aunque pueden aparecer asociados a los fosfatos amorfos en
una bacteriuria marcada.
6. Fosfato diclcico
- Poco frecuentes. Aparecen en orinas alcalinas o ligeramente cidas.
- Son cristales brillantes, incoloros y cuneiformes que se disponen en abanico.
- No tienen significacin clnica, aunque su aparicin puede aparecer ligada a hipertrofia de prstata o
infecciones urinarias crnicas.
7. Fosfatos amorfos
- Orinas alcalinas.
- Adoptan forma de pequeos granos de color blanquecino o gris.
8. Carbonato clcico
- Poco frecuentes. Aparecen en orinas alcalinas o ligeramente cidas.
- Adoptan forma de pequeos lazos y, ms raramente, de pequeas esferas incoloras.
- No tienen significacin clnica.
9. Cistina
- Orinas cidas.
- Aparecen en forma de placas hexagonales.
- Significado patolgico Cistinuria.
10. Colesterol
- Aparecen como cuadrados incoloros.
- Significado patolgico Quiluria (obstruccin del flujo linftico en el abdomen), como en algunos tumores
o en la filariasis tropical.
11. Leucina y tirosina
- Leucina Esferas de color amarillo pardusco con estriacin radial de aspecto oleoso.
- Tirosina Aparecen formando manojos de agujas brillantes y finas.
- Significado patolgico Suelen aparecer juntos en enfermedades graves del parnquima heptico.
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12. Cristales de medicamentos
- Se eliminan con mltiples formas de cristalizacin y colores, y precipitan tras enfriar la muestra de la orina.
- Unos de los ms caractersticos son los cristales de sulfamidas.
1. EXAMEN MACROSCPICO
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2. EXAMEN BIOQUMICO
b) Lactato
La concentracin de lactato en LCR es independiente de su concentracin plasmtica y refleja el
metabolismo cerebral anaerobio debido a hipoxia.
Utilidad clnica: aumenta en infarto cerebral, edema, traumatismos o meningitis.
e) Transferrina desializada
Procede de la transferrina plasmtica, que en el SNC pierde sus residuos de cido silico, presentando
una migracin electrofortica diferente (banda Tau).
Tiene la misma utilidad que la prealbmina.
3. EXAMEN MICROSCPICO
El LCR tiene un escaso nmero de clulas que son, fundamentalmente, leucocitos mononucleares.
En neonatos es normal la aparicin de hasta 20-30 clulas/L. En el adulto, hasta 5-10 clulas/L.
a) Hemates
La cifra de hemates tiene escaso valor y se suele utilizar para corregir la cifra de leucocitos (1 leucocito/700
hemates) y para corregir la concentracin de protena (restar 1 mg de protena por cada 1.000 hemates).
b) Leucocitos
Predominio de linfocitos: meningitis vrica, tuberculosa, mictica, por Listeria, y tambin en esclerosis
mltiple y neurosfilis.
Predominio de neutrfilos: meningitis bacterianas, durante el comienzo de las meningitis virales o en las
hemorragias cerebrales.
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BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA
Aumento del nmero de eosinfilos: infecciones parasitarias o asociado a alergias.
1. EXAMEN MACROSCPICO
Viscosidad: el lquido sinovial, en condiciones normales, presenta una elevada viscosidad. Refleja el
grado de polimerizacin del cido hialurnico.
- Utilidad clnica: disminuye en procesos inflamatorios (artritis sptica, reumatoide y gotosa) y derrame por
traumatismo; se produce una destruccin del cido hialurnico que disminuye la viscosidad.
Color/Aspecto: en condiciones normales es transparente, amarillo claro.
COLOR/ASPECTO PATOLOGA
Sobrenadante claro tras centrifugacin: PUNCIN
TRAUMTICA
Pardo-rojizo Si no vara el color tras centrifugacin:
(Sangre en la muestra) HEMARTROSIS
Capa cremosa en el sobrenadante: FRACTURAS
SUBCONDRALES O NECROSIS GRASA
2. EXAMEN BIOQUMICO
a) Glucosa
Valores bajos Procesos inflamatorios.
Valores muy bajos Artritis sptica.
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b) Protenas
En procesos inflamatorios y spticos, sus niveles se elevan, reflejo del aumento de la permeabilidad
vascular.
c) 2-Microglobulina
Aumentada Artritis reumatoide y sndrome de Sjogren.
Normal Artritis inflamatorias y no inflamatorias.
3. EXAMEN MICROSCPICO
a) Tipos de clulas
Un lquido sinovial normal contiene de 10-200 clulas/L, siendo leucocitos prcticamente su totalidad,
con predominio de linfocitos.
Clasificacin patolgica de los lquidos sinoviales atendiendo al tipo celular
>100.000 leucocitos/L
Spticos Turbio Artritis infecciosa
>75% PMN
d) Anlisis de cristales
Su estudio se realiza con microscopio de luz polarizada y permite realizar el diagnstico de artropatas
por microcristales.
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Es una mezcla de secreciones producida por:
1. EXAMEN MACROSCPICO
2. EXAMEN BIOQUMICO
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3. EXAMEN MICROSCPICO
- Se obtiene por puncin abdominal mediante una tcnica llamada amniocentesis. Se extraen unos 10-20
mL.
La
amniocentesis se realiza habitualmente entre las semanas 14-16 de gestacin. Para estudios de
madurez fetal es recomendable realizarla en la semana 35.
a) Madurez fetal
Cociente lecitina/esfingomielina
Es una medida de la madurez pulmonar fetal establecida mediante la determinacin de los fosfolpidos
del lquido amnitico. La lecitina es el principal componente del surfactante pulmonar; si no existe suficiente
surfactante los alveolos se colapsan durante la espiracin. Esto puede producir en los pulmones inmaduros
el sndrome del distrs respiratorio (RDS), que es una complicacin frecuente en los recin nacidos
prematuros. En los pulmones fetales inmaduros la concentracin de esfingomielina es mayor que la de
lecitina. Un cociente L/E >2 indica madurez fetal.
Fosfatidilglicerol
Es un buen indicador de la madurez pulmonar ya que se sintetiza casi por completo en las clulas
alveolares del pulmn maduro. Representa el 10% de los fosfolpidos del surfactante pulmonar.
b) Determinacin del sexo fetal. Realizacin del cariotipo.
c) Deteccin de alteraciones genticas y cromosmicas. Ej. Trisoma 21.
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d) Eritroblastosis fetal: isoinmunizacin Rh
La cantidad de bilirrubina se usa para valorar la gravedad de la hemlisis en los embarazos sensibles a Rh.
f) Alteraciones anatmicas
Defectos del cierre del tubo neural: anencefalia y espina bfida.
Estos defectos cursan con elevacin de alfafetoprotena (AFP) y acetilcolinesterasa en suero materno y
lquido amnitico.
MARCADORES TUMORALES
Definicin: amplio espectro de molculas de caractersticas muy variables, producidas o inducidas por
la clula neoplsica, que reflejan su crecimiento y/o actividad, y permiten conocer la presencia, evolucin
o respuesta teraputica de un tumor maligno.
Esta definicin no implica que los marcadores tumorales sean especficos de cncer ya que la mayora
de ellos son sintetizados tambin por las clulas sanas, de ah que se establezcan valores normales.
La especificidad de los marcadores tumorales, por tanto, no est en su presencia sino en la concentracin
detectada en los tumores malignos.
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c) Antgeno carbohidrato CA-125
Es una glucoprotena presente en las estructuras derivadas de los conductos de Mller (trompa de
Falopio, endocrvix y fondo vaginal) y mesotelios (pleura, pericardio y peritoneo).
Utilidad clnica: carcinomas ovricos, aunque tambin aumenta en el carcinoma de endometrio o en las
neoplasias pulmonares.
- Tambin pueden aumentar sus niveles en hepatopatas, insuficiencia renal y en los derrames serosos.
Es un marcador de sensibilidad y especificidad variable: en los estadios iniciales del tumor sus niveles
sricos son indistinguibles de los de pacientes sanos: sin embargo, en los estadios avanzados de la
enfermedad las concentraciones de este marcador permiten asegurar que se trata de un tumor maligno.
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El porcentaje de PSA libre vara en funcin de la patologa prosttica, siendo menor en los pacientes con
cncer de prstata que en los pacientes normales o con patologa benigna.
Utilidad clnica: se considera un marcador especfico de cncer de prstata.
k) HER 2/NEU
Es un oncogn localizado en el cromosoma 17, que codifica una protena transmembrana perteneciente
a la familia del receptor de crecimiento epidrmico.
Este gen est sobreexpresado en el 15-30% de los carcinomas mamarios.
Utilidad clnica: ayuda al diagnstico, seguimiento y como factor predictivo de respuesta al tratamiento
de los carcinomas mamarios.
l) Calcitonina
Es un polipptido sintetizado dentro de las clulas C parafoliculares del tiroides.
Utilidad clnica: diagnstico y seguimiento del cncer medular de tiroides. Tambin aumentan sus
niveles de forma discreta en algunos tumores neuroendrocrinos (cncer de pulmn de clulas pequeas).
Es un marcador tumoral de alta sensibilidad y especificidad.
m) Tiroglobulina
Es una glucoprotena dimrica. Es la protena predominante en el tiroides y almacena el 80% del yodo
del organismo.
Utilidad clnica: seguimiento del cncer diferenciado de tiroides. Utilidad para la deteccin de masa
tumoral residual despus de una ciruga.
Tambin pueden aumentar sus niveles de forma moderada en la tiroiditis subaguda y en el adenoma
txico tiroideo.
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BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA BIOQUMICA
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