FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y AMBIENTAL

MICROBIOLOGA

DOCENTE: ZAIDA R. CONTRERAS VELASQUEZ

GUA No 1: NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA

1. INTRODUCCIN

Un laboratorio de microbiologa es un lugar convenientemente habilitado donde se pueden

manejar y examinar microorganismos. Este tipo de trabajo debe ser llevado a cabo con
una buena tcnica asptica y por tanto se requiere de un ambiente limpio y ordenado y es
por ello que se debe trabajar en condiciones adecuadas de esterilidad.

2. OBJETIVOS
Dar a conocer a los estudiantes de microbiologa las normas de bioseguridad que
se deben tener en cuenta, para una correcta manipulacin de microorganismos en
el laboratorio.

Minimizar los riesgos relacionados con una infeccin debido a mala manipulacin
en el laboratorio de microbiologa

3. FUNDAMENTO

Todos los microorganismos que sean manipulados deben considerarse patgenos

aunque no lo sean y por ello todos los cultivos deben ser manejados con precaucin. Es
importante tener en cuenta dos de los siguientes requisitos:

Se debe restringir la presencia de microorganismos en estudio a los recipientes,

materiales de laboratorio, cuadernos, lapiceros y medios de cultivos estriles con
el fin de evitar el riesgo por contaminacin.

Evitar que los microorganismos ambientales presentes en la piel, pelo, aire, ropa,
etc., contaminen las muestras obtenidas durante los procedimientos.

3.1 BUENAS PRCTICAS EN EL LABORATORIO

a. TODO EL PERSONAL QUE INGRESE AL LABORATORIO DE MICROBIOLOGA

DEBE CONOCER Y ESTAR EN CAPACIDAD DE ACTUAR DE ACUERDO A
CADA UNA DE LAS NORMAS DE BIOSEGURIDAD EXIGIDAS PARA EL
LABORATORIO DE MICROBIOLOGA.

b. Es indispensable el uso de bata (se recomienda manga larga y en tela antifluidos),

guantes, tapabocas y gafas protectoras.

c. Al inicio y al final del laboratorio, lavarse las manos con agua y jabn antibacterial
preferiblemente.
d. Antes de comenzar es conveniente desinfectar la superficie de trabajo teniendo en
cuenta las concentraciones de los desinfectantes y detergentes.

e. El lugar de trabajo debe estar siempre limpio y organizado. Cualquier material que
no se utilice en la realizacin de la prctica (lpices, cuadernos, bolsos, etc), debe
estar apartado del lugar del trabajo.

f. Trabajar con calma y concentracin y teniendo en cuenta todas las

recomendaciones de manejo dadas por el docente.

g. Est terminantemente prohibido comer, beber, fumar y maquillarse. Cuando se

manipulan microorganismos hay que evitar llevarse las manos a la boca nariz, ojos
u odos. Si es necesario hacerlo se deben lavar los guantes y descartarlos y
posteriormente lavarse las manos.

h. Se deben retirar objetos que se tengan en las manos tales como anillos, relojes,
pulseras, etc.

i. No se debe pipetear con la boca, utilizar siempre pipeteadores manuales o pipetas

automticas.

j. El asa debe ser esterilizada en llama (hasta que est roja) antes del iniciar el
trabajo, entre repique y repique y al terminar el trabajo.

k. Los microorganismos SIEMPRE deben manejarse siempre alrededor de la llama

del mechero o en una campana de seguridad.

l. Teniendo en cuenta que uno de los mayores riesgos en el laboratorio de

microbiologa es la generacin de aerosoles pues en stos pueden ir
microorganismos o esporas de stos, por lo tanto, se deben evitar las operaciones
bruscas en las que se manejan lquidos y que puedan generar aerosoles:
centrifugaciones, vertidos rpidos (pipeteos y trasvases, etc).
m. Es conveniente evitar movimientos bruscos, desplazamientos innecesarios en el
laboratorio o trabajar con ventanas abiertas que generen corrientes de aire que
originen contaminaciones o produzcan accidentes.

n. El transporte y almacenamiento de placas y recipientes que contienen cultivos

representan un riesgo evidente; por lo tanto, al sacar el material de la incubadora o
al introducirlo en ella se debe realizar en una sola operacin.

o. Cuando el material se coloque en la incubadora se debe tener especial cuidado de

que este se ubique de manera segura para que no se caiga y se produzcan
derrames.

p. No se debe sacar ninguna muestra contaminada del laboratorio.

q. El material contaminado NO se debe descartar en la fregadera, papelera o basura

comn. Todo material contaminado se debe esterilizar en el laboratorio antes de
procesarlos como residuos.
 Por ejemplo: el material contaminado contenido en cajas de Petri se debe
autoclavar antes de tirarlo a la basura, el material de vidrio contaminado
(portaobjetos, tubos, etc) se debe autoclavar para luego lavar, secar y volverse a
emplear.

El material cortopunzante (agujas, lancetas, etc) se debe descartar en

contenedores especficos para tal fin.

r. En un laboratorio de microbiologa debe estar disponible un botiqun bsico de

primeros auxilios.

s. En caso de accidente (rotura o derrame del contenido de un tubo o recipiente que

contenga microorganismos) se debe avisar inmediatamente al auxiliar o asistente
del laboratorio, dejando una persona responsable que vigile para evitar que otros
se contaminen. El derrame debe cubrirse con un lquido desinfectante.

t. El suministro de gas para los mecheros de Bunsen requiere tomar las

precauciones propias de estas instalaciones.

Los escapes de gas son muy peligrosos, por lo tanto, hay que asegurarse de
cerrar todas las llaves de paso de gas al finalizar el trabajo, evitar la presencia de
sustancias inflamables y revisar peridicamente las conducciones. Cuando se
maneja ste tipo de mecheros, se deben tener detectores de humo, extintores y
mantas ignfugas fcilmente visibles desde cualquier lugar del laboratorio. Los
extintores se emplean sobre objetos pero, por su potencia pueden derribar los
recipientes con disolventes, por lo que conviene cerrar el gas de la zona. Las
mantas se usarn sobre el persona cuya ropa se haya incendiado o sobre el que
haya cado un disolvente inflamado.

u. Normalmente los mecheros de Bunsen tienen un regulador de entrada de la

cantidad de aire con el que hay que obtener una mezcla de aire-gas, de forma que
la llama tenga la temperatura suficiente. Las llamas fras son anaranjadas y se
ven bien, pero no esterilizan; las llamas muy calientes son de un azul
prcticamente invisible, lo cual supone un riesgo si no se trabaja con cuidado, pero
esterilizan.

v. En un laboratorio de microbiologa es frecuente el empleo de disolventes

inflamables (alcohol, acetona, xylol, etc). Es conveniente tener los recipientes con
este tipo de disolventes sobre una pequea bandeja, de forma que si se incendia y
se derrama, el disolvente no se extienda por el laboratorio.

En el caso de que se provoque algn pequeo fuego no se deber soplar nunca

sobre el disolvente ni emplear un extintor si no es estrictamente necesario, ya que
un chorro fuerte de aire extendera el disolvente ardiendo por toda la zona. Se
deber emplear una manta ignfuga (o una toalla empapada en agua) para cubrir
el recipiente, bandeja o zona incendiada.

Si el fuego se extiende, usar el extintor dirigindolo a la base de las llamas.

w. Cuando se trabaje con luz ultravioleta debe tenerse en cuenta que la exposicin a
este tipo de radiacin es peligrosa, puede producir graves quemaduras e incluso
 tiene poder mutagnico. Por lo tanto, nunca se debe mirar al foco emisor. Debern
protegerse los ojos con gafas y cualquier zona de la piel expuesta a la radiacin
con guantes, mascaras, etc.

3.2 CLASIFICACION DE LOS MICROORGANISMOS INFECCIOSOS POR GRUPOS DE

RIESGO

Grupo de Riesgo 1: Riesgo individual o poblacional escaso o nulo.

Tienen pocas probabilidades de provocar enfermedades en el ser humano o los
animales.
Grupo de Riesgo 2: Riesgo individual moderado, riesgo poblacional bajo.
Agentes patgenos que pueden provocar enfermedades humanas o animales pero
tienen pocas probabilidades de entraar un riesgo grave para el personal de
laboratorio, la poblacin el ganado o el medio ambiente. La exposicin en el
laboratorio puede provocar una infeccin grave pero existen medidas preventivas y
teraputicas eficaces y el riesgo de propagacin es limitado.

Grupo de Riesgo 3: Riesgo individual elevado, riesgo poblacional bajo

Agentes patgenos que suelen provocar enfermedades humanas animales graves,
pero que de ordinario no se propagan de un individuo a otro. Existen medidas
preventivas y teraputicas eficaces.

Grupo de Riesgo 4: Riesgo individual y poblacional elevado.

Agentes patgenos que suelen provocar enfermedades graves en el ser humano o
los animales y que se transmiten fcilmente de un individuo a otro, directa o
indirectamente. Normalmente no existen medidas preventivas y teraputicas
eficaces.

3.3 RELACIN DE LOS GRUPOS DE RIESGO CON LOS NIVELES DE

BIOSEGURIDAD, LAS PRCTICAS Y EL EQUIPO

Los laboratorios se clasifican de acuerdo al nivel de bioseguridad basado en una

combinacin de las caractersticas de diseo, medios de contencin, equipo, prcticas y
procedimientos de operacin necesarios para trabajar con agentes patgenos de los
distintos grupos de riesgo. En el siguiente cuadro se relacionan, no se equiparan, los
grupos de riesgo con el nivel de bioseguridad de los laboratorios destinados al trabajo con
microorganismos de cada uno de esos grupos.
4. CUESTIONARIO

Teniendo en cuenta la informacin presentada en la gua No 1, realice un anlisis

sobre el laboratorio de microbiologa, determine los riesgos que se presentan y la
forma de prevenirlos.
Establezca en qu nivel de riesgo y en qu nivel de bioseguridad se encuentra el
laboratorio de microbiologa.
Investigue la diferencia entre desinfeccin y esterilizacin.
Que mtodos de tipo fsico y qumicos se utilizan para realizar una correcta
desinfeccin.
El hipoclorito de sodio o cloro es el desinfectante universal y se presenta en la
forma comercial en una concentracin entre el 4% y el 6%. Si usted desea realizar
la desinfeccin de mesones del laboratorio y limpieza de equipos, se requiere una
concentracin entre 0,05% y 0,1% o sea entre 500 y 1000 ppm. Explique cmo
realizara la dilucin para preparar 1 lt de hipoclorito de concentracin 0,05% o 500
ppm

Tenga en cuenta que esta es la solucin que se va a preparar para todos los
laboratorios que se realicen de microbiologa.

Explique los siguientes mtodos de esterilizacin utilizados en el laboratorio de

microbiologa:
o Esterilizacin por calor hmedo
o Esterilizacin por calor seco
 Qu tcnicas de las anteriores se utilizan para esterilizar: vidriera, medios de
cultivo, material de pasta, etc.

5. BIBLIOGRAFA

GAMAZO, LOPEZ GOI y DAZ. Carlos, Ignacio y Ramn. Manual Prctico de

Microbiologa. Masson. Tercera edicin. Barcelona Espaa 2005. [En Lnea]
http://books.google.com.co/books?id=MfW3TuHLa4gC&pg=PR4&lpg=PP1&hl=es#v=onep
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MINISTERIO DE SALUD. Conductas Bsicas en bioseguridad : Manejo Integral. Santa Fe

de Bogot, D.C. Abril de 1997. [En Lnea] http://www.ecocapitalinternacional-
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ORGANIZACIN MUNDIAL DE LA SALUD. Manual de Bioseguridad en el Laboratorio.

Tercera Edicin. Ginebra. 2005. [En Lnea]
http://www.who.int/csr/resources/publications/biosafety/CDS_CSR_LYO_2004_11SP.pdf