UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA

NIVELES DE LABORATORIO

1. NIVEL 1

Se denominan prácticas de bioseguridad nivel 1 (BSL-1) al equipo e instalaciones

adecuadas para el adiestramiento de personal cursante de educación secundaria y/o
universitaria a nivel de pregrado, o sea con fines docentes.

El nivel BSL-1 representa un requisito básico de contención que se traduce en prácticas

microbiológicas estándar, con ausencia de barreras tanto primarias como secundarias
especiales, salvo la presencia de un lavamanos.

A. Virus o microorganismos manipulados a este nivel

El BSL-1 es el nivel indicado para la manipulación de microorganismos bien caracterizados

que no ocasionan enfermedad y que representan un mínimo riesgo o ninguno, tanto para el
personal de laboratorio como para el medio ambiente y la comunidad. Las tareas que se
llevan a cabo en este tipo de nivel suelen conducirse sobre mesones abiertos, empleando
procedimientos microbiológicos estándar; no se requiere para ello la utilización de equipos
de contención o diseño específico del área de trabajo. El personal que labora en estas
dependencias tiene entrenamiento específico en las tareas que conduce, siendo supervisados
por un profesional con experiencia general en Microbiología o área relacionada.

Suelen manipularse cepas de microorganismos viables que no causan enfermedad en

humanos adultos sanos, ejemplo: Bacillus subtilis, Naegleria gruberi, virus de la hepatitis
infecciosa canina, etc.

B. Estructura

Todo laboratorio debe estar provisto de un lavamanos. El mismo debe ser de construcción
sencilla, para su fácil limpieza; no deben emplearse alfombras en ninguna de sus
dependencias.
El tope de los mesones debe ser de material impermeable, resistente a los ácidos, álcalis,
solventes orgánicos y calor moderado.
El mobiliario del laboratorio debe ser el adecuado, con suficientes espacios entre los
mesones y los gabinetes, para facilitar la limpieza del lugar.
Si dicha dependencia posee ventanas que suelan abrirse, deben protegerse con tela metálica

C. Equipamiento

Por lo general, no se requieren implementos especiales de contención, como cabinas de

bioseguridad, para la manipulación de los agentes asignados al BBSL-1.

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 En dichas áreas se recomienda el empleo de batas de laboratorio, bien sea

cortas o largas, de acuerdo a la conveniencia del operador, para prevenir la
contaminación de su ropa personal; también es conveniente el uso de gorros.

 En caso de que la piel de las manos esté cortada, presente erupción o dermatitis
tópica, debe imponerse la utilización de guantes.

 Empleo de lentes de seguridad, para prevenir las salpicaduras o aerosoles de

material de riesgo.

D. Normas a seguir en el laboratorio de nivel 1

 El acceso al área de trabajo está limitado a la discrecionalidad del responsable de la

misma, cuando se encuentran experimentos en curso.

 El personal que opera a este nivel debe lavarse las manos al final de cada tarea, una
vez retirados los guantes, y también antes de salir del laboratorio.

 Actividades como comer, beber, fumar, colocarse lentes de contacto, maquillarse,

rasurarse, cepillarse los dientes, etc. no deben ser practicadas en ninguna de las
áreas de trabajo.

 El pipeteo bucal queda terminantemente prohibido, debiéndose utilizar cualquiera

de los dispositivos que pueden obtenerse en el comercio.
 Todos los cultivos, cepas u otros tipos de desechos contaminantes deben ser
preferiblemente desinfectados en autoclave antes de ser eliminados o enviados a
lavado.

2. NIVEL 2

Las prácticas de bioseguridad del nivel 2 son aplicables a laboratorios clínicos, de

diagnóstico, de docencia y en dependencias en las cuales se manipulan microorganismos de
amplio espectro, de moderado riesgo, presentes en la comunidad y asociados a
enfermedades humanas de diversa severidad.

A.-Virus o microorganismos manejados a este nivel.

El virus de la hepatitis B, las salmonellas y los toxoplasmas sp., son los microorganismos
representativos de este nivel de contención.

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Cuando el microorganismo infeccioso que se manipule en determinada dependencia

requiera de medidas especiales para su ingreso, como inmunizaciones, deberá colocarse en
su puerta, en tamaño adecuado, el símbolo de riesgo biológico, acompañado por el nombre
del agente infeccioso y de la persona responsable del laboratorio, con su respectivo número
telefónico.

Todo el personal que trabaje en este tipo de dependencias deberá recibir las respectivas
inmunizaciones y evaluaciones para los agentes que manipule o que pudieran estar
potencialmente presentes en el área (ej.: vacuna de la hepatitis B, prueba de la tuberculina,
etc,).

B. ESTRUCTURA:

 Todo laboratorio de este nivel deberá estar equipado obligatoriamente con una toma
de agua con su lavamanos.
 Su diseño deberá ser lo más funcional posible, a fin de poder ser limpiado
fácilmente. Debido al riesgo de derrames o salpicaduras con material infeccioso,
deberá evitarse el uso de alfombras en estas dependencias.
 Los topes de los mesones de trabajo deberán ser impermeables al agua y resistentes
a los ácidos, álcalis, solventes orgánicos y calor moderado.
 Los muebles del laboratorio deberán ser lo más sencillo posible, con suficientes
espacios entre ellos y las cabinas, a fin de facilitar su limpieza, evitando lugares
inaccesibles.
 Si el laboratorio está dotado de ventanas que puedan abrirse, deberán estar
equipadas de mallas, para evitar el ingreso de insectos al área.
 En el área adyacente a este tipo de laboratorio deberán existir las facilidades para la
descontaminación de desechos contaminados; por ej.: autoclave, desinfección
química, incinerador u otro tipo de dispositivo.
 Un equipo para lavado rápido de ojos deberá ser fácilmente accesible en este tipo de
dependencia.

C. EQUIPAMIENTO:

 En todas las áreas donde se practiquen tareas que conduzcan a la potencial

formación de aerosoles, deberán utilizarse cabinas de bioseguridad u otro tipo de
implemento de contención física (Ej.: respiradores, máscaras, etc.). Entre estos
procedimientos se incluirán las necropsias de animales infectados, cosecha de
tejidos y fluidos de huevos embrionados, inoculación intranasal y manipulación de
altas concentraciones y grandes volúmenes de material infeccioso.
 Toda persona que ingrese al área de animales deberá equiparse de protectores para
cara y ojos, así como para la respiración.
 En toda el área de animales el operador deberá utilizar batas largas y gorros, así
como guantes altamente resistentes; toda esa indumentaria deberá ser retirada al
abandonar el lugar de trabajo.

D. Normas a seguir en el laboratorio 2

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 Deberán emplearse cabinas de bioseguridad adecuadamente condicionadas,

preferiblemente de clase II o, en su ausencia, un equipo protectivo personal
adecuado, cuando se trata de las siguientes actividades:
 Procedimientos que puedan producir aerosoles infecciosos o salpicaduras; por ej.:
centrifugación, homogeneización, trituración de muestras, mezclado, ruptura por
ultrasonido, apertura de contenedores con material infeccioso con presión interna
diferente a la ambiental, inoculación intranasal de animales, cosecha de tejidos o
fluidos de animales o huevos infectados.
 Empleo o manipulación de altas concentraciones o grandes volúmenes de agentes
infecciosos. Dicho material sólo puede centrifugarse en laboratorios abiertos si se
dispone de rotores, cabezales y envases cerrados. En caso de ser abiertos, deben
procesarse en cabinas de bioseguridad.
 El empleo de dispositivos para la protección facial es de suma utilidad en los casos
de riesgo de salpicaduras o pulverizaciones de material infeccioso, cuando el mismo
es manipulado fuera de cabina.
 En este tipo de laboratorios será de uso obligatorio la bata larga, gorro y tapabocas.
Toda esta indumentaria deberá ser retirada y dejada en la dependencia laboral antes
de visitar otras áreas, como cafetería, biblioteca, oficinas administrativas, etc. Todo
este material, una vez utilizado, deberá ser enviado a la lavandería de la institución;
nunca llevado al hogar del operador.
 Para el manejo de animales infectados, material infeccioso y material o equipos
contaminados, es indispensable el uso de guantes. En caso de tareas de alto riesgo,
será recomendable el empleo de dos pares de guantes; así, al ocurrir una salpicadura
o rotura de algún envase, las manos quedarán protegidas al retirar el primer par de
guantes. Éstos deberán ser removidos en el área de trabajo y nunca sacarse de él;
tampoco deberán ser lavados ni reusados.

3. NIVEL 3

El nivel de bioseguridad 3 se aplica al laboratorio destinado a diagnóstico clínico,

enseñanza, investigación o producción, donde se trabaje con agentes que potencialmente
causan enfermedades serias o letales mediante la exposición vía inhalación. En este nivel es
importante el entrenamiento del personal para el manejo adecuado del agente patógeno en
cuestión.

A.-Virus o microorganismos manejados a este nivel.

El cuadro I presenta el listado de patógenos manejados en un BSL-3 de acuerdo al CDC.

Algunos de ellos pueden ser aislados y manipulados inicialmente en un nivel 2 de
bioseguridad; sin embargo, al momento de trabajarlos de manera pura y a gran escala el
riesgo se incrementa y requieren de instalaciones tipo BSL-3. Además de los incluidos en
esta lista, se encuentran las bacterias multirresistentes como Staphylococcus aureus

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resistente a meticilina (MRSA), Streptococcus pyogenes resistente a eritromicina

(SPRE), Escherichia coli entero-hemorrágica resistente a ampicilina, Pseudomonas
aeruginosa multirresistente (PAMR) y Mycobacterium tuberculosis multirresistente.

B.-Estructura:

El laboratorio del nivel de bioseguridad 3 debe estar separado físicamente de las áreas de
libre circulación del edificio. El paso a otras dependencias debe estar separado por
dobles puertas que se cierren solas, requisito indispensable para este tipo de área. En el
pasillo contiguo a esta dependencia debe haber un cuarto para realizar el cambio de ropa
del operador y, eventualmente, la posibilidad de una ducha.

Tanto las superficies interiores de las paredes como del piso del laboratorio deben ser
resistentes al lavado, para que puedan ser limpiadas con facilidad. Cualquier fisura en las
mismas debe ser prontamente sellada, para im pedir que se conviertan en fuente de
contaminación.

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El tope de todos los mesones debe ser impermeable al agua y resistente a diversos
agentes, tanto químicos como físicos (ácidos, álcalis, solventes orgánicos, calor moderado,
etc.).

Todas las ventanas del laboratorio deben permanecer cerradas y selladas.

C.-Equipamiento.

El mobiliario del laboratorio debe ser muy resistente, sobrio, sencillo y con suficientes
espacios entre los mesones, cabinas y equipos, para permitir una adecuada limpieza.

El laboratorio debe estar provisto de un equipo para descontaminar todos los desechos
biológicos y materiales (autoclave, desinfección química, incinerador o cualquier método
previamente evaluado por su personal); el mismo debe estar ubicado preferiblemente dentro
de su área.

Cada laboratorio de este nivel debe estar equipado con un lavamanos que pueda activarse
automáticamente sin tocarlo, bien sea de forma automática o mediante palanca de pie. El
mismo deberá estar ubicado cerca de la puerta de salida del laboratorio.

También debe estar equipado el laboratorio de un sistema de ductos, para retirar el aire
contaminado. Este sistema debe originar un flujo de aire que traiga el mismo desde las
áreas limpias hacia las zonas contaminadas. El aire usado no recircula por ninguna otra área
del laboratorio, siendo eliminado hacia el exterior a través de filtros u otro tipo de
tratamiento. Estas salidas de aire al medio ambiente, aunque se consideran
descontaminadas, deben estar lejos de las áreas pobladas o de tomas de aire. El personal de
laboratorio debe verificar con cierta regularidad la eficiencia y mantenimiento del flujo de
aire dentro del laboratorio.

El aire que salga de los filtros HEPA (High Efficiency Particulate Air), tanto de las cabinas
de clase II como de las de clase III, se debe desechar directamente al exterior, a través de
los ductos de aire del edificio.

Todo equipo que conduzca directa o indirectamente a la producción de aerosoles, como por
ejemplo centrifugas o ultracentrifugas, deben manejarse en dispositivos que puedan
adaptarse a filtros HEPA, para que la eventual contaminación no pase al laboratorio.

D.-Normas a seguir en el laboratorio 3

1. Deben emplearse las respectivas cabinas de bioseguridad (clase II o III) para todas las
manipulaciones de material infeccioso que se operan a este nivel.

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2. Además de la cabina de bioseguridad, debe emplearse una combinación de equipo

personal protector (batas largas, máscaras, guantes, respiradores, etc.) con equipo físico de
contención (envases de centrífuga provistos de tapas seguras, rotores sellados, contenedores
de jaulas para animales infectados, etc.).

3. Todo el equipo anteriormente descrito debe emplearse en la manipulación de cultivos,

material clínico o ambiental que puedan constituirse en fuentes de infección por aerosoles,
así como la cosecha de tejidos o fluidos provenientes de animales, huevos embrionados o
material proveniente de necropsias de animales infectados.

4. Cuando los aerosoles producidos por determinadas manipulaciones de material

infeccioso salgan del área de la cabina biológica, el operador debe usar protectores para la
cara (máscaras, tapabocas, gafas, gorros, etc.).

5. Ninguna indumentaria que se utilice dentro del área de laboratorio (bata de cualquier
tipo, gorros, tapabocas, etc.) debe ser utilizada para circular en otras áreas de la institución,
incluyendo corredores, baños, cafeterías, etc. Todo ese material, en caso de no ser
desechable, debe ser descontaminado antes de enviarse a la lavandería.

6. No se manejan objetos punzocortantes (agujas, navajas ni material de vidrio). En caso de

hacerlo, desecharlos en contenedores rígidos rojos de polipropileno.

7. Se debe contar con barreras secundarias de protección como acceso controlado del
personal, doble puerta, flujo controlado de aire y presión negativa para evitar la entrada o
salida de contaminación.

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4. NIVEL 4

El laboratorio de contención máxima – nivel de bioseguridad 4 está concebido para trabajar

con microorganismos del grupo de riesgo 4. Antes de construir y poner en funcionamiento
un laboratorio de contención máxima se requiere una labor intensiva de consulta con
instituciones que tengan experiencia en la utilización de instalaciones de este tipo. Este tipo
de laboratorios deben estar sometidos al control de las autoridades sanitarias nacionales, u
otras apropiadas.

A. Virus o microorganismos manipulados a este nivel

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B. Estructura

Debe estar dotado de dos cabinas para cambios de ropa, una interna y otra externa,
separadas por una ducha, a utilizarse tanto para el ingreso como al egreso del personal de
laboratorio que allí trabaja.

 Las paredes, los pisos y los cielos rasos son construidos de tal manera que puedan
facilitar su limpieza y fumigación, quedando adicionalmente a prueba de animales e
insectos.

 Todas las instalaciones y pertenencias internas del laboratorio (las conexiones de

luz, ductos de aire y demás tuberías) deben ser conectados de tal manera de
minimizar las superficies horizontales, donde el polvo pudiera almacenarse.

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 Cerca de la puerta del laboratorio debe haber un lavamanos operado bien sea
por pedal o mediante algún dispositivo mecánico, nunca debe tocarse con las
manos.

 Las puertas de acceso del laboratorio deben abrirse y cerrarse por sí mismas al
ingreso o egreso del operador; además deben poder cerrarse con llaves al terminar
las tareas en el mismo.

 Todas las ventanas deben ser irrompibles y herméticas.

 Este tipo de dependencia debe estar equipado de un autoclave de doble puerta para
descontaminar todo el material que sale del área. La puerta que abre hacia la parte
externa, está sellada a la pared externa y controlada de forma automática que
solamente pueda ser abierta después de completado el ciclo de esterilización del
autoclave.

 El laboratorio debe estar equipado por un tanque de paso, una cámara de fumigación
u otro método equivalente de descontaminación, para el tratamiento del material que
no se pueda esterilizar en autoclave.

C. Equipamiento:

 Todos los procedimientos que se han asignado

al nivel 4 de bioseguridad, deben ser llevados
a cabo en cabinas biológicas de clase III o en
su ausencia, en las de clase II conjuntamente
con una vestimenta personal de una sola
pieza, dotada de presión positiva y respirador,
para asegurar la supervivencia del operador.
 Todo el personal que tiene acceso a este tipo
de dependencia debe estar adecuadamente
equipado en su vestimenta: ropa interior,
pantalones, camisa (o mono), bata de mangas
largas, zapatos, guantes, etc. Todo este equipo
de protección personal debe ser retirado en el
cuarto de cambio antes de la ducha y la salida
del laboratorio.

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EN RESUMEN:

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REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

1. Mazzali de Ilja Rosandra. Nivel 1 de bioseguridad. Rev. Soc. Ven. Microbiol.

[revista en la Internet]. 2003 Ene [citado 2015 Ago 02]; 23(1): 98-98. Disponible
en: http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-
25562003000100021&lng=es.
2. Mazzali de Ilja Rosandra. Nivel 2 de Bioseguridad: Biosecurity Level-2. Rev. Soc.
Ven. Microbiol.  [revista en la Internet]. 2003  Jul [citado  2015  Ago  02] ;  23(2):
197-199.Disponible en: http://www.scielo.org.ve/scielo.php?
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3. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. Section III: Laboratory
biosafety level criteria, pp. 24-32. Section IV. Vertebrate animal biosafety level
criteria. pp. 52-59. CDC-NIH, 1999.

4. Mazzali de Ilja Rosandra. Nivel 4 de Bioseguridad (I). Rev. Soc. Ven. Microbiol. 
[revista en la Internet]. 2005 Ene [citado 2015  Ago  02] ;  25(1): 50-53. Disponible
en: http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-
25562005000100010&lng=es.
5. Lara, H. H., Ayala, N. V., & Rodríguez, C. (2007). Laboratorios de bioseguridad
nivel 3 y 4: investigación de patógenos peligrosos. Rev Mex Patol Clin, 54(4), 177-
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