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ESTERILIZACION FISICA

Los agentes físicos que consiguen la esterilización de materiales son el calor ,


las radiaciones y la Filtración

1. Esterilización por calor

El calor desnaturaliza estructuras y macromoléculas (membranas, proteínas, etc.).


Todos los microorganismos son susceptibles a la acción del calor. Su
sensibilidad varía con la especie y con el estado en que se encuentren

En general las formas vegetativas bacterianas mueren por calentamiento a 50-


70ºC. Las endosporas, (las formas de vida más termo resistentes), requieren
mayores temperaturas y tiempo de exposición. El calor puede utilizarse de dos
formas en presencia (esterilización por calor húmedo) o ausencia de
humedad (esterilización por calor seco).

1.1. Calor húmedo

Los materiales húmedos conducen mejor el calor que los secos: el agua tiene
mayor coeficiente de transferencia de calor que el aire. Por eso el vapor de agua es
más eficaz que el calor seco matando a los microorganismos. Así la esterilización
en presencia de vapor de agua requiere menos temperatura y tiempo que sin agua.
La autoclave de vapor utiliza calor húmedo para la esterilización.

1.1.1. Autoclave a vapor

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Trabaja a presión superior a la atmosférica. El agua a presión atmosférica hierve a
100ºC. A presiones superiores, la temperatura de ebullición aumenta por lo que se
pueden calentar soluciones acuosas (como los medios de cultivo) a temperaturas
superiores a 100ºC. La autoclave permite elevar la presión de una a dos atmósferas
sobre la presión atmosférica

El dispositivo trabaja aislado del exterior. En un sistema aislado del exterior, cada
elevación de temperatura provoca un aumento de presión. La relación entre
temperatura y presión depende de la composición de la atmósfera incluida en el
sistema

Cuando en el autoclave el aire es reemplazado por vapor de agua purgado del


autoclave), La relación entre temperatura y presión en atmósfera saturada de agua
es la indicada en la siguiente tabla

Presión (atm) en Temperatura


el interior °C

0.5 112

1 121

2 133

Si quedan restos de aire son necesarias temperaturas mayores para provocar la


misma presión en el interior

Empleo de la autoclave:

El autoclave de vapor es el aparato más utilizado para la esterilización de medios


de cultivo, soluciones, ropa de laboratorio, y emulsiones que no se desnaturalicen
a temperaturas superiores a 100ºC.. En general la esterilización de estos materiales
se realiza a (112-121ºC) durante 30-20 minutos. Estas condiciones pueden variar
en función del tipo de material, carga microbiana y volúmenes a esterilizar.

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Ventajas

Rápido calentamiento y penetración del calor, destrucción de bacterias y


endosporas en corto tiempo, no deja residuos tóxicos, poco deterioro del material
expuesto, es económico.

Desventajas

Corrosivo sobre ciertos materiales metálicos, no útil para material termo sensible.

1.1.2. Tindalización

o esterilización fraccionada a vapor fluente, El material se calienta a 80-100º durante


30 minutos, en días sucesivos, con periodos de incubación entre ellos. De esta
manera se destruyen las células vegetativas, pero no las endosporas termo
resistentes.

Las endosporas que sobrevivieron pueden germinar en el periodo de incubación.


desdiferenciadas como células vegetativas son destruidas en el calentamiento
posterior.
Esta técnica se puede emplear para esterilizar medios de cultivo que no se pueden
calentar a temperaturas superiores a 100º sin alterar sus propiedades. El principal
inconveniente de esta técnica es el consumo de tiempo. Actualmente tiene muy
poco uso

1.1.3. Pasteurización:

Es un método que reduce la cantidad de microorganismos viables. No es un método


de esterilización pues no destruye esporas bacterianas. Es utilizada en la industria
alimentaria. Hay dos tipos de tratamiento: la pasteurización a baja temperatura y
mayor tiempo (63ºC/30 minutos) y la pasteurización a alta temperatura y corto
tiempo (72ºC/15 segundos).

1.1.4. Uperización.

Variante de la pasteurización (ultrarrápida) en la que la temperatura se eleva por


encima de 150°C durante unos segundos

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1.2. Calor Seco

Su acción letal se debe a la oxidación de componentes celulares. El aire es mal


conductor del calor y el aire caliente entra más lentamente que el vapor en los
materiales. Por ello se requiere más temperatura y tiempo de exposición que en la
esterilización con calor húmedo. Puede utilizarse mediante flameado (incineración)
o con hornos de aire caliente.

1.3. Flameado

Se aplica directamente la llama de un mechero. Se utiliza para la esterilización de


asas e hilos de siembra, pinzas, así como las bocas de tubos y matraces antes y
después de utilizarlos. La incineración se emplea para destruir materiales de
desecho contaminados.

1.4. Hornos de aire caliente

Alcanzan temperaturas mayores a 150ºC. Las condiciones usuales de esterilización


son de 160-180ºC durante 1-2 horas. Las ventajas son que penetra en materiales
insolubles en agua (aceites, grasas) y es menos corrosivo sobre metales que el
calor húmedo. Se utiliza para la esterilización de materiales secos, grasas, aceites
y material de vidrio y metales termoresistentes.

1.5. Radiaciones Ultravioleta

Radiación con longitudes de onda entre 100 y 400 nm. Las de mayor actividad
microbicida son las comprendidas entre 260-270 nm. Son absorbidas por lo ácidos
nucleicos y aminoácidos aromáticos. Afectan a los ácidos nucleicos provocando
errores en la duplicación y pérdida de viabilidad. Tienen bajo poder de penetración:
solo se utilizan para la esterilización de superficies, (quirófanos, salas de envasado
de medicamentos). Producen daños en ojos y piel.

1.6. Radiaciones Ionizantes

Tienen mayor energía que las ultravioleta y por tanto mayor poder de penetración.
Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los ácidos nucléicos,
proteínas y otros componentes celulares. Se utilizan para la esterilización de
materiales termosensibles como jeringas, sondas, suturas, guantes, etc. No se
utilizan para medios de cultivo o soluciones porque producen alteraciones de los
componentes. Solo se utiliza a escala industrial por el alto costo .

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1.7. Filtración:

Consiste en el paso de un líquido o gas a través de filtros con poros lo


suficientemente pequeños para retener a los microorganismos por el tamaño. Es un
método que no mata a los microorganismos.

Utilizados para esterilizar soluciones termosensibles. Retienen a los


microorganismos en la superficie. Pueden ser de diversos materiales (acetato de
celulosa, nitrato de celulosa, policarbonato o teflón) en función del fluido a filtrar.
Varían de tamaño de poro (0.22 µm - 0.45 µm) usualmente se utilizan los de 0.22
µm. Hay que tener en cuenta que este filtro usado en el laboratorio no retiene virus
ni Micoplasma. La filtración también se utiliza para el recuento de
microorganismos cuando están presentes en baja concentración. Una aplicación es
el análisis bacteriológico de aguas.

Nota:

Es muy importante tener en cuenta que cada método se utiliza según los
recursos disponibles tanto en la institución hospitalaria como en la zona
geográfica, así pues hay métodos de los aquí mencionados que se encuentran
en desuso en gran parte del territorio Colombiano, sin embargo en algunas
zonas donde existe intermitencia en la prestación del servicio eléctrico, están
pueden estar aún vigentes.

Webgrafía: www.ugr.es

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