OBJETIVOS GENERALES:

Observar la actividad cataltica de algunas enzimas y compararla con la actividad

enzimtica de un catalizador inorgnico, a dems, conocer los diferentes inhibidores
enzimticos.

OBJETIVOS ESPECFICOS:

Comparar la accin cataltica de la catalasa con la de un catalizador inorgnico

como el MnO2 al descomponer el peroxido de hidrogeno a temperatura ambiente.

Observar el efecto de la temperatura sobre la accin cataltica de una enzima y

comparar al mismo tiempo el efecto de la temperatura sobre un catalizador
inorgnico.

Observar el efecto de un inhibidor sobre la accin cataltica enzimatica.

Las enzimas son catalizadores biolgicos de estructura proteica y producida por los
mismos organismos que la utilizan para realizar sus propios procesos metablicos.
La accin cataltica de una enzima esta sometida a la influencia de factores fiscos como
el calor, las radiaciones o de factores qumicos como cambios en el pH, concentracin
de las enzimas, sustratos y presencia de inhibidores. Los catalizadores inorgnicos no
son afectados por factores fsicos como el calor por lo que pueden catalizar una

Catalasa
2H2O 2H2O + O2

MnO2
2H2O 2H2O + O2

Las enzimas so catalizadores muy potentes y eficaces, qumicamente son protenas, las
enzimas son catalizadores que actan en pequeas cantidades y se recuperan
indefinidamente, no llevan a cabo reacciones que son energticamente desfavorables, no
modifican el sentido de los equilibrios qumicos sino que aceleran su consecucin.
Las enzimas son grandes protenas que aceleran las reacciones qumicas, en su
estructura globular se entrelazan y se pliegan una o ms cadenas polipeptdicas que
aportan un pequeo grupo de aminocidos para formar el sitio activo, o lugar donde se
adhiere al sustrato, y donde se realiza la reaccin, una enzima y un sustrato no llegan a
adherirse, si sus formas no encajan con exactitud.
La accin enzimtica se caracteriza por la formacin de un complejo que representa el
estado de transicin.

CLASIFICACION DE LAS ENZIMAS:

Las enzimas se clasifican en:

ENZIMAS HIDROLITICAS
Aceleran las reacciones en las que una sustancia se rompen en componentes mas
simples por reaccin con molculas de agua.

ENZIMAS OXIDATIVAS: conocidas como oxidasa, aceleran las reacciones de

oxidacin y las reductores de las reacciones en la que se libera el oxigeno.

LIASAS: son enzimas que producen rupturas en los enlaces separando las
molculas.

LIGASAS: son enzimas que producen uniones de enlace, formando compuestos

ISOMERAZAS: enzimas que catalizan reacciones de transferencia de grupos, pero

en el interior de molculas(reacciones de isomerizacin)

INHIBIDORES ENZIMATICOS
Algunos inhibidores enzimticos son:

LA TEMPERATURA: muchas enzimas tienen una temperatura en que la reaccin

alcanza su rapidez mxima, en las enzimas humanas es cercana a la temperatura
corporal, la preaccione enzimticos ocurren con lentitud o no lo hacen en lo absoluto
en temperaturas bajas, la actividad cataltica reaparece cuando la temperatura
 aumenta a lo normal, a temperaturas altas se desactivan con rapidez la mayora de
las enzimas

PH: la actividad enzimatica de una enzima puede cambiar mucho con variaciones de
ph que modifican las cargas de las enzimas y estos cambios de las cargas afectan los
enlaces inicos que contribuyen a las estructuras terciarias y cuaternarias, con lo que
alteran la conformacin de la protena y su actividad, muchas enzimas se desactivan
y se desnaturalizan de manera irreversible cuando un medio se torna o muy acido o
muy bsico.

AGENTES QUMICOS: algunas sustancias qumicas disminuyen la actividad de

muchas enzimas o incluso las destruyen esta inhibicin puede ser reversible o
irreversible

MATERIALES Y REACTIVOS

6 tubos de ensayo.
Gradilla.
Pinza para tubos de ensayo.
2 pipetas de 5 y 10 ml.
Gotero.
Estufa.
Beaker de 250 y 400 ml.
H2O2 al 3%
MNO2.
NaCN
Papas y sangre como fuente de catalasa
Hielo
Agua destilada
Gasa
Esptula
Cuchilla
Mortero con mano
Probeta de 100ml
Calentador

NORMAS DE SEGURIDAD PARA LOS REACTIVOS:

PEROXIDO DE HIDROGENO:
Corrosivo
Produce quemaduras
Destruccin de tejido cutneo
DIOXIDO DE MANGANESO
Nocivo
Evitar contacto con el aire
Utilizar en zonas bien ventiladas

CIANURO DE SODIO:
Txico
Muy toxico por inhalacin
Muy toxico por contacto con la piel
Emite gases en contacto con el aire
Puede inflamarse durante su uso

PROCEDIMIENTO

ROTULAR 3 tubos de ensayo

1.

TUVO 1: 1ml de sangre 10%

AGREGAR TUVO 2: 1ml de extracto de papa
TUBO 3: pequea porcin de MnO2

ADICIONAR A cada tubo 1ml de H2O2 al 3%

Intensidad de la reaccin a travs de la

OBSERVAR formacin de burbujas y la liberacin de
calor

Nivel alcanzado por las

COMPARAR burbujas en cada tubo

En orden creciente la actividad

REGISTRAR cataltica
2.

PREPARAR 3 tubos de ensayo

TUBO 1: 1ml de sangre 10%

AGREGAR TUBO 2: 1ml de extracto de papa
TUBO 3: pequea porcin de MnO2

LLEVAR A bao Maria por 10 minutos

DEJAR Reposar por 10 minutos

ADICIONAR A cada tubo 2ml de H2O2 al 3%

OBSERVAR Intensidad de la reaccin a travs de la formacin de

burbujas y la liberacin de calor

COMPARAR Nivel alcanzado por las burbujas en cada tubo

REGISTRAR En orden creciente la actividad cataltica

3.
PREPARAR 3 tubos de ensayo

TUBO 1: 1ml de sangre 10%

TUBO 2: 1ml de extracto de papa
TUBO 3: pequea porcin de MnO2
AGREGAR

A bao de hielo por 10minutos

LLEVAR

Reposar por 2 minutos

DEJAR

ADICIONAR A cada tubo 2ml de H2O2 al 3%

Intensidad de la reaccin a travs de la

OBSERVAR formacin de burbujas y la liberacin de
calor

Nivel alcanzado por las

COMPARAR burbujas en cada tubo

En orden creciente la actividad

REGISTRAR cataltica
 4. ROTULAR 3 tubos de ensayo

TUBO 1: 1ml de sangre 10%

TUBO 2: 1ml de extracto de papa
AGREGAR TUBO 3: pequea porcin de MnO2

ADICIONAR 5 gotas de cianuro de potasio a cada tubo

DEJAR Reposar por 5 minutos

A cada tubo 2ml de H2O2 al 3%

ADICIONAR

Nivel alcanzado por la

COMPARAR formacin de burbujas

En orden creciente la actividad enzimtica

REGISTRAR y la liberacin de calor

RESULTADOS

Procedimiento # 1:
Calor

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3

Procedimiento # 2:

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3

Procedimiento # 3:

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3

Procedimiento # 4:

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3

TABLA DE RESULTADOS

TUBO SUSTANCIA CARACTERISTICAS

1 Sangre al 10% Abundantes burbujas
+H2O2 hasta 3 minutos
2 Papa+ H2O2 Formacin de burbuja
TEMPERATURA intensa hasta 5 minutos
AMBIENTE 3 MnO2+ H2O2 Se formaron menos
burbujas fue rpido y
se produjo calor
1 Sangre al 10% No hubo formacin de
ALTAS +H2O2 burbujas
TEMPERATURAS 2 Papa+ H2O2 No hubo formacin de
burbujas
3 MnO2+ H2O2 Formacin de burbujas
y liberacin de calor
1 Sangre al 10% Se inhibi por un
BAJAS +H2O2 momento pero luego
TEMPERATURAS hubo formacin de
burbujas
2 Papa+ H2O2 Se inhibi por un
momento pero luego
hubo formacin de
burbujas
3 MnO2+ H2O2 Formacin de burbujas
y liberacin de calor
1 Sangre al 10% No hubo formacin de
CIANURO DE +H2O2 burbujas
SODIO 2 Papa+ H2O2 No hubo formacin de
burbujas
3 MnO2+ H2O2 No hubo formacin de
burbujas
DISCUSIN DE RESULTADOS

Con esta practica se pudo observar que los factores fsicos influyen de diferentes
maneras en las enzimas orgnicas y en los catalizadores inorgnicos ya que como se
pudo observar cuando se colocaron a altas temperaturas, la accin de la catalasa se
inhibi, y la del catalizador inorgnico no se vio inhibida; cuando se colocaron a bajas
temperaturas ( hielo ), la accin de la enzima se inhibido por un momento pero se dejo
reposar a temperatura ambiente cuando volvi a su temperatura normal reinici su
actividad, con el NaCN todas se vieron afectadas por el inhibidor, no hubo reaccin
enzimatica.

CUESTIONARIO

1. Explique porque el Captopril y el Enalopril son ejemplos de inhibidores competitivos

de la enzima conversora Angiotensina:

RTA/: El captopril; inhibe la enzima conversora de dipeptil dipeptidasa el cual hidroliza

la angiotensina I, a angiotensina II y bajo el nombre de cinasa del plasma produce
inactivacion de la biciclicina un vasodilatador potente a al actividad del captopril, se da
por una reaccin inhibidora que este ejerce sobre el sistema renina-angiotensina y una
accin estimulante sobre el sistema galiereina-gicina.
El Enalapril; acta como un inhibidor de la enzima conversora Enalaprilat, con efectos
similares a los del captopril. Los inhibidores de la angiotensina II, reducen la presin
arterial al disminuir la resistencia vascular perifrica.

2. Las granadas son fabricadas por la industria militar con un dispositivo especial de
seguridad para que no exploten en el sitio donde son fabricadas sino durante el combate.
Que tipos de enzimas son fabricadas por ciertos rganos que tienen un comportamiento
similar al de la granada? Ejemplos.

RTA/: las enzimas que contienen comportamientos similares a la de las granadas son
los zimogenos; los cuales se sintetizan como protenas precursoras sin una actividad
enzimtica, como por ejemplo las enzimas digestivas, las cuales se secretan en forma de
zimogenos y en la luz del tubo digestivo se convierten en forma activa ya que si fueran
sintetizados directamente en forma activa destruiran las celulas que las produce.

Otro ejemplo es la tripsina pancretica; la cual es sintetizada en forma zimogena

inactiva, cuando se activan dentro del propio pncreas, este sufre un proceso de
autodestruccin.

3. Por que carece de importancia la lipasa gstrica en los procesos digestivos del
estomago de los adultos y en cambio es importante en el estomago infantil.

RTA/: La lipasa gstrica (enzima) carece de importancia en el pncreas digestivo del

estomago en los adultos porque esta acta en un intervalo de PH (5 a 6) y el PH
estomacal esta alrededor de (2).
En los nios la lipasa pancretica presenta actividad, adems de la grasa de la leche
materna es un buen sustrato para que actu la lipasa gstrica ya que tiene ciertos acidos
grasos de cadena corta y mediana.

4. cual es la importancia clnica de las enzimas de ejemplos concretos.(por lo menos 1).

RTA/: las enzimas son muy importantes ya que al ser estudiadas se pueden diagnosticar
patologas de carcter metablico, a si mismo el conocimiento de los procesos que
liberan estas molculas hacia la sangre, permite entender la naturaleza de la enfermedad
padecida y presentar aplicaciones clnicas ejemplo:
Un ejemplo concreto es la enzima tripsina esta es muy importante en el tratamiento de
varios procesos patolgicos, la enzima purificada ha sido suministrada por va bucal e
intramuscular. En el tratamiento de la tromboflebitis aguda (coagul intramuscular
e inflamacin venosa); han sido beneficioso en muchos pacientes; por pequeas
inyecciones intramusculares repetidas, el efecto no es por disolucin enzimtica del
coagulo sino que parece estar relacionada con el alivio del proceso inflamatorio;
algunos tipos de ulcera han respondido bien al tratamiento con tripsina al igual que el
traumatismo.
Tambin se puede destacar una importancia mdica de las enzimas; ya que hay tres
enzimas plasmticas que se elevan cuando hay un infarto del miocardio y nos permiten
diagnosticar cuando hay un infarto, estas enzimas son:

CREATINFOSFOQUINASA: (Se eleva a las ocho horas despus de un infarto)

TRANSAMINASA GLUTAMICO OXALOACETICA: (se eleva de 12 a 24

horas Siendo la que ms tarde se eleva)

5. defina que son zimogenos, isozimas e inhibidores acompetitivos.

RTA/:
ZIMOGENOS: (Preenzimas) algunas enzimas no se sintetizan como tales, sino en
forma de protenas precursoras sin actividad enzimtica estas permanecen inactivas
y tienen un peso molecular mayor que las enzimas mayores activa.

ISOZIMAS: (Lisoenzimas) son las enzimas que presentan estructuras diferentes

aunque su funcin biolgica sea semejante ejemplo: la lactodeshidrogenasa; es una
enzima tetramerita (formada por cuatro subunidades); en el msculo esqueltico
predomina la subunidad M y en el corazn la subunidad H.

INHIBIDORE ACOMPETITIVOS: son aquellos inhibidores que se unen a un

complejo enzima-sustrato y no ala enzima sola o al sustrato solo.

RECOMENDACIONES:

Durante la practica para que el tiempo alcance los grupos se dividen el trabajo lo
cual ocasiona que unos no sepan los resultados y otros si, es decir solo entiende el
procedimiento que le toca y as es difcil entender en un futuro par un parcial o Quiz
CONCLUSINES:

Despus de haber realizado la prctica catlisis enzimtica e inorgnica se podemos

llegar a las siguientes conclusiones:

La actividad de una enzima puede inhibirse o variar deacuerdo a diferentes factores

fsicos como la temperatura, mientras que la de actividad cataltica de un catalizador
inorgnico no.
Al aplicar un inhibidor enzimtico qumico como el cianuro de potasio puede inhibir
la accin enzimtica y cataltica tanto de la enzima como la del catalizador
inorgnico.

BIBLIOGRAFIA
Macarulla, Jos, Bioqumica Humana Edit, reverte S.A segunda edicin Barcelona
1994
PLUMER DT, introduccin a la bioqumica practica, Mxico. Magraw-Hill
latinoamericana S.A
LOPEZ Y ANZOLA, c. guas del laboratorio de bioqumica, facultad universidad
nacional, santa fe de bogota.