Espectrofotometra

RESUMEN
Antecedentes: La absortividad molar es la caracterstica de una sustancia que nos
dice cuanta luz absorbe a una longitud de onda determinada. La ley de Beer se
cumple mejor cuando la absorbancia es casi constante a lo largo de la banda
escogida de longitudes de onda.
Objetivo: Se pretende determinar con un espectrofotmetro, la longitud de onda a la
cual una sustancia posee su absorbancia mxima, y determinar la concentracin de
una solucin con concentracin desconocida por medio de la Ley de Beer.
Diseo: se determin la longitud de onda a la cual la absorbancia del KMnO 4 1x10-4 M
es mxima, y a esa longitud se midi la absorbancia de soluciones de KMnO 4 a
diferentes concentraciones, utilizando agua destilada como blanco. Con los
resultados obtenidos se cre una curva de calibracin Absorbancia vrs.
Concentracin (M), y se determin la ecuacin de la recta de la curva de
calibracin. Por ltimo se midi la absorbancia de una muestra con concentracin
desconocida.
Resultados: Se determin que la absorbancia mxima del KMnO4 1x10-4 M se
encontraba a una longitud de onda de 520 nm. Y con esta misma longitud de onda
se midi que la absorbancia del KMnO4 5x10-4 M es 1.312, KMnO4 2x10-4 M es 0.426,
KMnO4 1x10-4 M es 0.160, KMnO4 5x10-5 M es 0.071, KMnO4 2x10-5 M es 0.147, y KMnO4
1x10-5 M es 0.045. Y la absorbancia de la solucin problema fue de 0.109, su
concentracin de 4.94x10-5 M con 64.84% de error.
Conclusiones: Se puede concluir que la concentracin de la solucin problema,
segn las absorbancias determinadas, se encuentra entre 2x10-5 M y 5x10-5 M, y
efectivamente fue 4.94x10-5 M con 64.84% de error. Que la absorbancia mxima del
KMnO4 1x10-4 M se encuentra en una longitud de onda muy cercana a 520 nm, pues
como se midi de cada 20nm, no se puede asegurar que sea 520 nm exactos.

PALABRAS CLAVE
Espectrofotometra, ley de Beer-Lambert, absorbancia, transmitancia.

INTRODUCCIN relaciona la absorcin de luz con las

La Ley de Beer declara que la
cantidad de luz absorbida por un
cuerpo depende de la concentracin
en la solucin. (1)
En la Ley de Lambert se dice que la
cantidad de luz absorbida por un
objeto depende de la distancia
recorrida por la luz. (1)
La absorbancia de una especie en
solucin homognea es directamente
proporcional a su actividad ptica,
longitud del paso ptico y su
concentracin. La ley de Beer-Lambert
propiedades del material atravesado.
(1)
A = abc
La transmitancia es la cantidad de
energa que atraviesa un cuerpo en
determinada cantidad de tiempo. (1)
La espectrofotometra es el mtodo de
anlisis ptico ms usado en las
investigaciones qumicas y biolgicas.
El espectrofotmetro es un instrumento
que permite comparar la radiacin
absorbida o transmitida por una
solucin que contiene una cantidad
desconocida de soluto, y una que
contiene una cantidad conocida de la
misma sustancia. (2)
La espectrofotometra es utilizada para
determinar la cantidad de
concentracin en una solucin de
algn compuesto, determinar las
estructuras de diversas molculas,
identificar unidades estructurales
especficas ya que estas tienen distintos
tipos de absorbancia. (2)
Se denomina espectro
electromagntico a la distribucin
energtica del conjunto de las ondas
electromagnticas. Referido a un
objeto se denomina espectro
electromagntico o simplemente
espectro a la radiacin
electromagntica que emite (espectro
de emisin) o absorbe (espectro de
absorcin) una sustancia. La longitud
de una onda es el perodo espacial de
la misma, es decir, la distancia a la que
se repite la forma de la onda. (2)
El objetivo de la prctica fue
determinar con un espectrofotmetro,
la longitud de onda a la cual una
sustancia posee su absorbancia
mxima, y determinar la concentracin
de una solucin con concentracin
desconocida por medio de la Ley de
Beer. (3)
MATERIALES Y MTODOS
1. Determinacin del espectro de
absorcin
Se midi la absorbancia del
KMnO4 1x10-4 M cada 20 nm
desde 400 hasta 600 nm. As se
determin la longitud de onda
en la que su absorbancia era
mxima.
2. Obtencin de la curva de
calibracin
Se midi la absorbancia de las
soluciones de KMnO4 5x10-4 M,
2x10-4 M, 1x10-4 M, 2x10-5 M, 5x10-5
M y 1x10-5 M, utilizando como
blanco el agua destilada. as se
cre una curva de calibracin
Absorbancia vrs. Concentracin
(M), y se determin la ecuacin
de la recta.
3. Medicin de la muestra con
concentracin desconocida
Se midi la absorbancia de la
muestra problema, y se calcul
su concentracin utilizando la
ecuacin de la recta y
mediante la interpolacin del
valor de absorbancia.
CLCULOS
1. Porcentaje de error
Se calcul el porcentaje de
error de longitud de onda para
la mxima absorbancia de la
solucin de KMnO4 1x10-4 M.
%E = 525 520 *100
525
%E = 0.95 %
2. Concentracin de la solucin
problema
Se calcul la concentracin a la
cual se encontraba la solucin
problema mediante la
ecuacin de la recta obtenida
en la curva de calibracin.
y = 2584.2x 0.0188
x = 0.109nm + 0.0188
2584.2
x = 4.94x10-5 M
3. Porcentaje de error
Se calcul el porcentaje de
error de la concentracin
obtenida para la solucin
problema.
%E= 3x105 4.94x10-5 *100
3x10-5
%E = 64.84 %
 RESULTADOS DISCUSIN

Cuadro No. 1 Longitud de onda de la El objetivo de la prctica fue

absorbancia mxima del KMnO4 1x10-4 determinar con un espectrofotmetro,
M. Se midi la absorbancia de la la longitud de onda a la cual una
solucin indicada a la cual la sustancia posee su absorbancia
absorbancia era mxima, mxima, y determinar la concentracin
comparndola con el valor terico y de una solucin con concentracin
encontrando su porcentaje de error. desconocida por medio de la Ley de
Longitud de Longitud de Beer.
% de
onda onda
Error
Experimental Terica Al medir las absorbancias de una
520 525 0.95 solucin de KMnO4 1x10-4 M, se
determin que la absorbancia mxima
Cuadro No. 2 Absorbancia y sucede a una longitud de onda de 520
concentracin de la solucin nm. Pero al comparar esta
problema. Se midi la absorbancia a absorbancia con la terica, 525 nm, se
la cual se encontraba una solucin de puede decir que es una aproximacin
KMnO4 con concentracin muy cercana. Pues las absorbancias se
desconocida, y por medio de la midieron cada 20 nm desde 400 hasta
ecuacin de la recta se obtuvo su 600 nm, y por lo mismo no se pudo
concentracin. El valor terico de la haber medido a una longitud de onda
concentracin de la solucin problema entre los 520 y los 540 nm. Por esto se
es de 3x10-5 M. considera que fue una medicin muy
Concentracin % de acertada, como se puede apreciar en
Absorbancia el cuadro No. 1.
(M) Error
0.109 4.94x10-5 64.84
A la longitud de onda de 520 nm, se
Grfica No. 1 Absorbancia vrs. midi la absorbancia de las soluciones
Concentracin de las soluciones a de KMnO4 a diferentes
diferentes concentraciones de concentraciones. As se obtuvo que la
KmNO4. Se grafic la curva de absorbancia del KMnO4 5x10-4 M es
calibracin se las soluciones a diversas 1.312, KMnO4 2x10-4 M es 0.426, KMnO4
concentracin, con su absorbancia 1x10-4 M es 0.160, KMnO4 5x10-5 M es
respectiva. 0.071, KMnO4 2x10-5 M es 0.147, y KMnO4
1x10-5 M es 0.045. En la grfica No. 1 se
Curva de Calibracin del KmNO4 puede observar que la curva de
titulacin es congruente, ya que a
1.4 mayor concentracin, mayor
1.2
y = 2584.2x - 0.0188 absorbancia.
R2 = 0.9854
1
Absorbancia

Para la identificacin de la
0.8 absorbancia de la muestra problema,
0.6 sta se midi a una longitud de onda
0.4 de 520 nm, como para las mediciones
anteriores. Su absorbancia fue de
0.2
0.109, por lo que se concluy una
0 hiptesis que indicaba que su
0.E+00 1.E-04 2.E-04 3.E-04 4.E-04 5.E-04 6.E-04 concentracin deba permanecer
Concentracin (M) dentro del rango de 2x10 M y 5x10-5 M.
-5
Luego, por medio de la ecuacin de la cada medicin, y no haber preparado
recta se obtuvo la concentracin de las soluciones a las concentraciones
dicha solucin, la cual fue 4.94x10-5M, adecuadas.
con un porcentaje de error del 64.84%,
como se muestra en el cuadro No. 2. Por ello, se puede concluir que la
longitud de onda ms adecuada para
Al terminar la prctica, se indic que la medir las absorbancias es de 520 nm,
concentracin de dicha solucin siempre y cuando se deba utilizar un
problema era de 3x10-5 M, por lo que se mltiplo de 20. Que la absorbancia
valid la hiptesis realizada determinada para la solucin
previamente. problema coincide con su
concentracin. Y que curva de
Las fuentes de error producidas a lo calibracin tiene congruencia entre las
largo del experimento fueron el hecho absorbancias medidas y las
de no haber calibrado correctamente concentraciones de dichas soluciones.
el equipo de espectrofotometra, no
haber utilizado el blanco antes de

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. McKee, T. 2003. Bioqumica: la base molecular de la vida, 1era edicin.
McGraw-Hill.
2. Lehninger. 2008. Principios de la Bioqumica, 4ta ed. W.H. Freeman and Co, New
York.
3. Skoog, D.A.; West, D.; Holler, F.; Crouch, S. 2005. Fundamentos de la Qumica
Analtica, 8ta edicin. Mc Graw-Hill, Mxico.