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Pruebas pre-transfusionales y
administracin de la transfusin
Sumario
1. Introduccin
2. Objetivos
3. Solicitud transfusional y muestras de sangre
3.1 Criterios de aceptacin de la solicitud
transfusional
3.2 Muestras de sangre
4. Pruebas pre-transfusionales: componente y
receptor
4.1 Identificacin positiva del receptor y de la
muestra de sangre
4.2 Revisin de los registros del servicio de
transfusiones
4.3 Determinacin del grupo ABO y Rh (D)
4.4 Estudio de la discrepancia sero-hemtica
4.5 Resolucin de las discrepancias ABO
4.6 Resolucin de las discrepancias debidas a la
ausencia de antgenos esperados
4.7 Resolucin de discrepancias debidas a
reacciones inesperadas con anti-A y anti-B
4.8 Resolucin de las discrepancias por
reacciones sricas inesperadas
5 La prueba cruzada y la investigacin de anticuerpos
irregulares
5.1 Grupo ABO y Rh
5.2 Prueba cruzada
5.3 Escrutinio de anticuerpos
5.4 Identificacin anticuerpos irregulares
6 Reacciones de sensibilizacin, aglutinacin y prueba
de la antiglobulina humana
6.1 Reaccin antgeno-anticuerpo en
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inmunohematologa
6.2 Teora del potencial Zeta
6.3 Factores que influyen en la sensibilizacin
de los hemates
6.4 Factores que influyen sobre la aglutinacin
de los hemates
6.5 Utilidad de la prueba directa e indirecta de
la anti-globulina humana
7 Soluciones potenciadoras de la unin antgeno-
anticuerpo
8 Bibliografa
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1. Introduccin
2. Objetivos
Despus de revisar esta Unidad, el alumno tendra que ser capaz de llevar a cabo
las siguientes tareas:
Conocer las pruebas pre-transfusionales que se realizan para que la
transfusin de componentes sanguneos sea lo ms segura posible para
el receptor.
Definir las caractersticas, aplicacin y metodologa de los grupos
sanguneos.
Conocer las discrepancias que nos pueden aparecer a la hora de
determinar la tipificacin del grupo sanguneo de un paciente o
receptor.
Interpretar la prueba cruzada siendo sta la prueba bsica de
compatibilidad pre-transfusional.
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Solo deberan aceptarse las solicitudes transfusionales que fueran legibles y que
estuvieran correctamente cumplimentadas. Las solicitudes parcialmente o
defectuosamente cumplimentadas o con muestras insuficientes no sern
admitidas, excepto las que sean sin pruebas de compatibilidad (inmediatas).
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- C un mnimo de 7 das
despus de la transfusin.
Suero o plasma: tiempo no inferior a 10 das a una temperatura de - C
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El examen del grupo ABO debe incluir siempre una prueba sobre los
hemates que llamaremos parte o prueba globular, donde estn los
antgenos y otra sobre el suero que llamaremos parte o prueba srica en la
que se encuentran los anticuerpos. Estas dos partes son inseparables a la
hora de clasificar el grupo sanguneo. Si los resultados de ambas partes no
son los esperados el grupo queda invalidado, debern hacerse las
investigaciones oportunas para averiguar las causas de dichas discrepancias
hemtico/sricas que ampliaremos ms adelante.
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Ejemplo de la
aglutinacin de la
parte globular
con los reactivos
anti A, anti B i
anti AB
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Control Albmina
Reactivo anti D
Aglutinacin positiva
Grupo O
Grupo AB
Aglutinacin negativa
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est automatizado con mquinas que utilizan los mismos reactivos pero
adaptados a la forma de tarjeta con microtubos. Esto lo vemos en la
siguiente figura.
GRUPO B POSITIVO
Resultado Resultado
positivo negativo
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Errores tcnicos
Los problemas tcnicos pueden producir discrepancias en las
pruebas ABO bien por la obtencin de resultados negativos en lugar
de positivos o positivos en lugar de negativos. Los problemas
tcnicos que producen falsos negativos en las pruebas ABO
realizadas con hemates o suero son debidas a:
o No aadir suero o antisuero a una prueba.
o Identificar la hemlisis como negativa.
o Inadecuada relacin suero (o antisuero)/hemates.
o Centrifugado incorrecto.
o No incubar a temperatura de 20-25C o menos.
o Uso de reactivos que no funcionen adecuadamente.
o No interpretar o registrar los resultados correctamente.
Los problemas tcnicos que producen falsos positivos en la prueba
incluyen:
o Sobrecentrifugacin
o Uso de antisueros, hemates o solucin salina contaminados.
o Uso de utensilios de vidrio sucios.
o Interpretacin o registro incorrecto de los resultados.
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4.8.2. Anti A1
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4.8.5. Rouleaux
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Todas las pruebas pretransfusionales tienen como objetivo seleccionar para cada
receptor potencial los componentes sanguneos adecuados de forma que una
vez transfundidos tengan una supervivencia ptima. Estas pruebas tienen su
fundamento en que el organismo est dotado de un sistema inmunolgico que
reconoce los antgenos extraos y los distingue de los antgenos propios,
desencadenando una respuesta inmune especfica para dicho antgeno. Las
premisas generales y que nunca debemos de pasar por alto son las siguientes:
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generales sin embargo hay que hacer una secuencia de pasos para resolver la
identificacin de estos aloanticuerpos. Estas secuencias las describimos a
continuacin:
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En medio salino (NaCl al 0,85%), los iones positivos de sodio (Na+) son
atrados por las cargas negativas de los glbulos rojos, creando una nube de
cargas positivas, que genera una fuerte repulsin interglobular.
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Considerando la carga elctrica del glbulo rojo , la fuerza inica del medio
de la suspensin ( ) y la constante dielctrica del medio , Pollack desarroll la
siguiente expresin del potencial zeta (Z):
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6.3.3. Temperatura
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Anticuerpos fros
En una solucin salina normal, los iones Na+ y Cl- se agrupan alrededor de las
molculas de antgeno y anticuerpo, y neutralizan parcialmente sus cargas
opuestas.
Cuando los hemates estn en suspensin salina de bajo potencial inico, la nube
de cationes que rodea a los hemates es menos densa. La concentracin
disminuida de cationes alrededor de los glbulos rojos permite a las molculas
de anticuerpo tener ms fcil acceso a los lugares antignicos de la membrana
eritrocitaria, aumentando as la tasa de sensibilizacin.
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se incluyen las propiedades del medio utilizado para la suspensin globular y las
caractersticas del antgeno y del anticuerpo.
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Cualquier mecanismo que elimine las cargas negativas de los eritrocitos reducir
la distancia que los separa al disminuir el potencial zeta y as facilitar su
aglutinacin por parte de anticuerpos de la clase IgG. La disminucin de la carga
superficial de los glbulos rojos permite un mayor acercamiento de stos,
facilitando su aglutinacin por las molculas de anticuerpo. El tratamiento
enzimtico de los eritrocitos tambin incrementa la accesibilidad de algunos
antgenos cuando las glicoprotenas son eliminadas.
6.4.4. Temperatura
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Los potenciadores son las substancias que se utilizan para modificar el medio de
la prueba para promover la aglutinacin de hemates antgeno-positivos con los
anticuerpos correspondientes. Con esta finalidad se han desarrollado
potenciadores para la deteccin de anticuerpos irregulares en les pruebas de
rutina. Entre estas substancias potenciadoras, la albmina bovina, las soluciones
de baja fuerza inica y el polietilen glicol PEG), son las ms utilizadas.
Albmina bovina:
El uso de la albmina bovina se introdujo en 1945 y se utiliza para
potenciar la aglutinacin directa de los hemates por anticuerpos de la
clase IgG.
El 1965, Pollack y sus colaboradores investigaron el mecanismo de
accin de la albmina y concluyeron que reduca el potencial zeta y as
permita que los hemates se aproximasen los unos con los otros y as se
produjera la aglutinacin.
Posteriormente se demostr que el efecto de la albmina por s misma
en la primera fase de la reaccin es mnimo y que el aumento de la
captacin del anticuerpo puede ser debido a la fuerza inica del
diluyente de la albmina.
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Enzimas:
En 1946 Pickles describi por primera vez el uso de las enzimas. Algunas
enzimas proteolticas como la ficina, la papana, la tripsina y la bromelina
se utilizan para la potenciacin de reacciones serolgicas, sobre todo la
de los anticuerpos de los sistemas Rh y Kidd.
Pero hay algunas desventajas en el uso de las enzimas en les pruebas de
laboratorio. Los antgenos M, N, S, Fya y Fyb son destruidos si estn
tratados con enzimas, por lo tanto estos anticuerpos no podrn ser
detectados. Adems las enzimas potencian anticuerpos fros y eso hace
que algunos anticuerpos no significativos se puedan detectar y eso
interferira en las pruebas de laboratorio.
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