MICROCULTIVO

INTRODUCCIN
Los hongos son microorganismos eucariotas, que poseen paredes celulares, estructuras
filamentosas, producen esporas y carecen de clorofila. De entre las 100.000- 200.000
especies conocidas, unas 300 son patgenas humanas. Se identifican por criterios
morfolgicos y bioqumicos, incluyendo el aspecto de los cuerpos fructificantes.

El microcultivo es el procedimiento idneo para la identificacin de estructuras fngicas,

pues te permite visualizar al microscopio el micelio en su conjunto no solo una parte del
mismo, como ocurre con el mtodo de disociacin. Al tomar muestras de hongos
filamentosos para observarlos al microscopio, frecuentemente se fragmenta el micelio.
Sobre todo en el estudio de los dermatofitos, este inconveniente se obvia obteniendo
un microcultivo.
El hongo crece sobre un cubreobjetos que luego se coloca sobre un portaobjetos al que
aadimos el reactivo de azul de lactofenol para facilitar la identificacin de los hongos.

OBJETIVOS
Aprender a realizar la tcnica de microcultivos
Facilitar la identificacin morfolgica de los hongos
Reducir el tiempo de diagnstico e identificar su morfologa

MATERIALES
Muestra biolgica : Hongo (Aspergillus)
Placa de Petri con agar Saboreaud
Bistur
Portaobjetos y cubreobjetos
Asa de siembra estriles
Placa Petri para cmara hmeda (estril)
Colorante: azul de lactofenol
Microscopio

PROCEDIMIENTO
1. Desinfecte la superficie de trabajo y encienda el mechero
2. En una de las cajas de Petri estriles, colocar el papel filtro y encima poner la
V de vidrio paralelamente y sobre ellos colocamos una lmina portaobjetos
(recuerde que todo debe hacerse lo ms aspticamente posible)

3. Impregne una laminilla con alcohol y flamela con ayuda de la pinza

4. Ahora procedemos a realizar el corte del agar Sabouraud de 1cm cuadrado

5. Luego vamos
a transferir el agar Sabouraud a la lmina portaobjetos
 6. Con ayuda de la aguja de diseccin vamos a sembrar una muestra de Aspergillus
que es la muestra a estudiar al cuadrado de agar Sabouraud
7. Colocamos una laminilla estril sobre la muestra y colocar el agua destilada
estril dentro de la placa con cuidado procediendo a cerrar o tapar la placa petri.
8. Incubamos por 5 das a T ambiente sin invertir la caja
9. Pasado los 5 das de incubacin sacamos la lmina de la cmara hmeda,
retirando con cuidado la laminilla, la cual ser colocada en una nueva lamina la
cual se encontrara con una gota del colorante de azul de lactofenol para su
posterior observacin en el microscopio a 10x y 40x.
RESULTADOS:
Observacin de hifas y esporas