Prcticas de Fisiologa Vegetal

Medida del potencial Hdrico por el Mtodo de

Chardakov
Mtodo de Chardakov nos ilustra los principios que estamos
consideramos en las concentraciones de las soluciones que
son colocadas en tubos de ensayo y se les colorea un poco
disolviendo en ellas pequeos cristales de colorante, como
azul de metileno (la adicin del colorante no cambia
significativamente el potencial osmtico).

Se toma dos rangos de series de soluciones de sacarosa

(C12H22O11) (alineados en rango entre 0,15 a 0,50 molal en
incrementos de 0,05 de moralidad) son colocados en tubos de
ensayo. Se colocan las muestras de tejidos en los tubos de
ensayo que contienen las soluciones de concentraciones a las
series anteriores, pero sin colorante. Se dejan as el tiempo
suficiente para permitir que haya intercambio de cierta
cantidad de agua, aunque no es indispensable que el tejido
llegue al equilibrio con relacin a la concentracin de la
solucin. Despus que el tejido ha sido incubado durante 15 a
30 minutos, el tejido es retirado y se agrega al tubo de ensayo
una gota de azul metileno con el objetivo de colorear la
solucin.

Si est gota coloreada asciende, lo cual indica que el tejido

absorbido agua; en este caso, el tejido tena un potencial
osmtico hdrico menor (ms negativo) que la solucin
original. Si la gota se hunde la solucin se ha vuelto menos
densa por haber absorbido agua del tejido; la solucin,
entonces tena menor potencial hdrico que el tejido original.
Si la gota se difunde de manera uniforme en la solucin, sin
hundirse o ascender, entonces no ha ocurrido un cambio
significado en la concentracin y el potencial hdrico de la
solucin es igual al tejido.
Si, recordamos que el potencial hdrico = potencial de solutos
+ potencial de presin. En una disolucin que est a una
presin atmosfrica, como el caso de una disolucin contenida
en un tubo de ensayo destapado, el potencial de presin = 0 y
por lo tanto, el potencial hdrico = al potencial de solutos.

Cmo se calcula el potencial de solutos:

s= - CiRT Donde C= Concentracin molal (N o de moles/Kgr.
De agua).
i=Constante que para solutos no ionizable es igual a1.
R=Constante de los gases. Su valor es 0.00831Kgr. MPa/mol
K.
T=T en grados Kelvin. En clase es de 294K.

Materiales
Vegetal
Tubos de ensayo (grados de solucin ms el
tejido.Test).
Tubos de ensayo (grados de solucin con una gota
de azul de metileno. Control).
Una gradilla.
Pipetas de 5 y 25 ml.
Pipeta Pasteur.
Sacabocados.
Pinzas.
Azul de metileno.
Sacarosa.
Mtodo
Se prepara dos series de tubos de ensayo con
diferentes concentraciones de sacarosa de modo que
tengan distinto potencial hdrico.
Una serie de tubos de ensayo a cada uno se le
adiciona a la solucin de sacarosa (15 ml) sin teir
(test).
La otra serie de tubos de ensayo se le adiciona el azul
de metileno (3 ml) a las diferentes concentraciones de
la solucin.
Con la ayuda de un sacabocado se obtiene las
muestras homogneas para todo el experimento.
Despus de lavar y secar con cuidado las muestras se
distribuyen en la serie de tubos de ensayo no titulados
con azul de metileno.
En transcurso entre 15 a 30 minutos se retiran las
muestras de los respetivos tubos de ensayo y se
procede aadir 2 a 3 gotas de azul de metileno en
cada una de las disoluciones y se va observar su
movimiento ascendente o descendente. Aquella gota
en la solucin ni sube ni se baja tendr un potencial
osmtico (y un potencial hdrico equivalente al
potencial del tejido).
Resultados.