Resumen: M-022

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDEST E

Comunicaciones Cientficas y Tecnolgicas 2004

Enterococcus faecalis y Enterococcus faecium resistentes a ampicilina (AMP)

gentamicina (GEN), estreptomicina (EST) y vancomicina (VAN)
aislados de materia fecal de pacientes peditricos hospitalizados.
Ronconi, Mara C. - Merino, Luis A.
Instituto de Medicina Regional
Las Heras 727 - 3500 Resistencia - Argentina
E-mail: mcronconi@bib.unne.edu.ar
TE: 03722 - 428213

ANTECEDENTES
Los enterococos forman parte de la flora normal del tracto gastrointestinal humano y del tracto genital de la mujer.
Pueden tambin ser encontrados en suelo, comida, agua, plantas, animales, pjaros e insectos.(1 - 6).
La frecuencia de aislamiento de las distintas especies vara de acuerdo con el husped, su edad, dieta y otros aspectos
relacionados con sus condiciones fisiolgicas. E faecalis y E faecium son las especies dominantes en el tracto
gastrointestinal humano, ya que entre las dos comprenden el 95%, y las otras especies el 5% restante. Esta frecuencia a
menudo se repite en los aislamientos a partir de materiales clnicos de casos de infecciones producidas por estos
microorganismos. (7)
Sin embargo el estudio de los componentes bacterianos habituales u oportunistas tiene una gran importancia porque los
pacientes que en el momento de ser hospitalizados se encuentren colonizados o portan grmenes resistentes a varios
antibiticos, presentan un riesgo mayor de desarrollar infeccin a partir de su propia flora. Estos pacientes adems
llevan dentro del hospital a estas bacterias resistentes, que pueden ser diseminadas a otros pacientes por las manos del
personal sanitario, instrumental u otros fomites.
De lo anteriormente mencionado se puede deducir que patgenos oportunistas como enterococos adquieren importancia
como causa de infecciones nosocomiales. De all la necesidad de detectar la presencia de enterococos con un perfil de
resistencia antibitica caracterstico del mbito hospitalario.
La resistencia a la ampicilina definida segn criterios de la NCCLS como CIM > 16mg/L, se relaciona con una
alteracin de las protenas fijadoras de penicilina, principalmente las PBP5 que poseen una baja afinidad con los lactmicos. (8) (9) Recientemente se ha descripto la transferencia simultnea de la resistencia a la ampicilina y
vancomicina dentro del transposn Tn5382, un elemento cromosmico que posee los genes VanB y pbp5 (10)
La resistencia de alto nivel a los aminoglucsidos est mediada por enzimas que modifican las estructuras de los
aminoglucsidos transformndolos en elementos inactivos frente a la clula bacteriana. Las enzimas ms
frecuentemente identificadas son: la Enzima bifuncional (2 fosfotransferasa 6 acetil transferasa) que inactiva a todos
los aminoglucsidos, excepto a la estreptomicina; la 3 fosfotransferasa que inactiva a la kanamicina y a la amicacina y
la 6 adeniltransferasa que inactiva la estreptomicina. La produccin de estas enzimas modificadoras de los
aminoglucsidos est codificada por plsmidos transmisibles por lo cual es previsible un aumento en la incidencia de
enterococos refractarios al tratamiento con la asociacin beta lactmico/aminoglucsido. (11)
Otro tipo de resistencia mediada por plsmidos transmisibles es la que se refiere a los glicopptidos como la
vancomicina y la teicoplanina. Estos antibiticos son activos para un amplio rango de grmenes Gram positivos,
interactan con el Grupo C terminal D-ala-D-ala de los precursores del peptidoglicano impidiendo la sntesis de la
pared celular, por inhibicin estrica y por bloqueo del sitio de accin de las reacciones de transglicosilacin y
transpeptidacin, respectivamente. En cepas resistentes a glicopptidos, los precursores del peptidoglicano terminan en
D-ala-D-lac o D-ala-D-ser en lugar de D-ala-D- ala.
La resistencia a glicopptidos en enterococos es fenotpica y genotpicamente heterognea. Se han detectado cuatro
fenotipos: VAN A con alto niveles de resistencia inducible a vancomicina (64->1000 g/ml) y teicoplanina (16512 g
/ml), VAN B, que corresponden a cepas resistentes a vancomicina (4 1000g/ml) pero sensibles a teicoplanina (0,5
1g /ml), VAN C que presenta bajos niveles de resistencia a vancomicina (2 32g /ml) y sensibilidad a teicoplanina
(0,5 1 g /ml) y VAN D, que expresa una resistencia de nivel medio a vancomicina (16 - 256g /ml) y teicoplanina (232g /ml). (12)
En este trabajo se presentan los resultados obtenidos en una evaluacin de la prevalencia de cepas de enterococos
resistentes presentes en materia fecal de nios hospitalizados internados en un hospital de la ciudad de Resistencia.
MATERIALES Y METODOS
En el perodo comprendido entre junio del 2002 y octubre del 2003 se estudiaron bacteriolgicamente 160 muestras de
materia fecal de pacientes internados en las salas 1, 4 y 5 del Hospital peditrico Dr. Avelino Casteln de la ciudad

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de Resistencia (Chaco), seleccionando solo los pacientes que tenan como mnimo tres das de internacin en la
institucin.
Las muestras fueron obtenidas mediante hisopado rectal y remitidas al laboratorio en medio de transporte.
Se sembraron en tres placas de Agar Bilis Esculina (Difco), suplementadas con 6 g de vancomicina, 500 g de
gantamicina y 2000 g de estreptomicina respectivamente, e incubadas en aerobiosis a 35C durante 24 a 48 hs.
Adems se sembr otra placa de agar Bilis Esculina libre de antibiticos. Los medios de cultivo fueron controlados
mediante el uso de cepas control como: E faecalis ATCC 29212 susceptible y E faecalis ATCC 51299 resistente. La
identificacin se realiz por medio de la observacin macroscpica de las colonias, observacin microscpica con la
coloracin de Gram, ausencia de catalasa, prueba de la L-Pirrolodonil-beta-naftilamina positiva, pigmento, movilidad,
la fermentacin de lactosa, sorbitol, arabinosa, sacarosa, ribosa y la decarboxilacin de la L-arginina. (4)
La determinacin de la resistencia a la ampicilina se realiz mediante el mtodo de difusin en placa de Kirby y Bauer
con monodiscos de ampicilina de 10 g segn normas del National Committee for Clinical Laboratory Standars. (5)
RESULTADOS
Los resultados obtenidos presentan una prevalencia de ms del 80% de Enterococcus faecium y Enterococcus
faecalis.
Se detect un nmero importante de cepas de Enterococcus faecium resistentes a la ampicilina, mientras que
Enterococcus faecalis present una prevalencia mayor en la resistencia de alto nivel de aminoglucsidos.
No se encontraron cepas resistentes a la vancomicina.

GERMEN
Enterococcus faecium
Enterococcus faecalis
Enterococcus raffinosus
Enterococcus gallinarum
Enterococcus casseliflavus
Enterococcus avium
Total

N
227
107
25
5
2
1
367

%
45,5
38,4
9,0
1,8
0,7
0,4
100

Tabla 1: frecuencia de especies aisladas

Especie
Enterococcus faecium
Enterococcus faecalis

AMP
78
18

%
34,4
16,8

GEN
39
20

%
17,1
18,7

EST
27
22

%
11,8
20,6

VAN
0
0

%
0
0

Tabla 2: Prevalencia de cepas resistentes

DISCUSIN
La prevalencia de E faecium resistentes a distintos antibiticos es variable. En general es ms alta que en E faecalis
sobre todo en lo que respecta a la ampicilina. En un estudio realizado por Suppola y col. en Finlandia se detect una
prevalencia de E faecium resistentes a ampicilina de 41%, mientras que la resistencia a alto nivel de gentamicina fue
del 4% y a vancomicina del 2%. (13)
En E.E.U.U. Coque y col. encontraron en materia fecal de pacientes internados un 41% y 15% de enterococos con un
alto nivel de resistencia a estreptomicina y gentamicina respectivamente.(14 )
En nuestro estudio se observa una notoria diferencia en la frecuencia de cepas resistentes a la ampicilina entre
Enterococcus faecium y Enterococcus faecalis, no ocurriendo lo mismo con los otros antibiticos.
CONCLUSIONES
Se concluye que la prevalencia de enterococos resistentes encontrados en la materia fecal de los pacientes internados y
teniendo en cuenta que esta podra actuar como reservorio, hace imperiosa la necesidad de una correcta identificacin
de las cepas aisladas de muestras clnicas y, de los estudios de susceptibilidad a los antibiticos usados con mayor
frecuencia. Si bien hasta el momento no se encontraron cepas resistentes a glicopptidos, se debera continuar con la
vigilancia epidemiolgica

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