VIII Encuentro Nacional de Investigación en Enfermedades Infecciosas, Armenia 2012
mg dl (rango, 1,27 a 1,6); promedio del BUN al ingreso, 11,7; hipopo-
tasemia luego del inicio del tratamiento, 33,3%; leve; 22,3%, mode-
rada, 11%; hipomagnesemia; 55% de los pacientes con promedio de
1,38 mg/dl; bacteriemia asociada a catéter, 10%; dolor torácico, 10%;
hemotórax, neumotórax y muerte, ningún paciente; promedio de días
de hospitalización, 29 (rango, 20 a 64); promedio de aumento con
respecto a la basal, 0,44 mg/dl.
Conclusiones. El deoxicolato de anfotericina B se constituye en la ter-
cera línea de tratamiento para la leishmaniasis en nuestro país, y es
de vital importancia conocer su perfil de seguridad en Colombia dada
la alta frecuencia con que se requiere su uso. Se encontró elevación
significativa de creatinina en 55 % de los pacientes. Se verificaron las
alteraciones hidroelectrolíticas, entre las cuales llama la atención la
hipomagnesemia en nuestro grupo de pacientes, dato interesante
puesto que se esperaba que fuera más frecuente la hipopotasemia.
No encontraron, hasta ahora, complicaciones mecánicas asociadas al
uso del catéter venoso central aunque sí ha habido complicaciones
infecciosas. El estudio se encuentra en curso, se espera obtener el 80
% de los registros completos para dentro de 60 días.
195. Determinación de mutaciones puntuales en el gen pfdhps de
Plasmodium falciparum asociadas a la resistencia a sulfadoxina, a
partir de los casos de malaria del departamento de Bolívar
Luis Acuña Cantillo, Fernándo De la Cruz López, Lourdes Va-
rela Prieto, Alfredo Lagares Guzmán, Dary Luz Mendoza.
Grupo de Inmunología y Biología Molecular, Universidad del
Atlántico, Grupo de Investigaciones Biomédicas, Universidad del
Magdalena. Barranquilla, Colombia. dary_mendoza@yahoo.com
Introducción y objetivo. En Plasmodium falciparum la resistencia a
la sulfadoxina está asociada con la acumulación de mutaciones en el
gen de la sintetasa de dihidropteroato del parásito (pfdhps). La vigilan-
cia molecular de las mutaciones permite generar criterios de evaluación
ante los esquemas de tratamiento actual en una región determinada. El
objetivo principal de esta investigación fue determinar las mutaciones
puntuales en el gen pfdhps de P. falciparum asociadas a la resistencia a la
sulfadoxina, a partir de los casos de malaria del departamento de Bolívar.
Materiales y métodos. El ADN del parásito se extrajo mediante resina
Chelex-100, desde extendidos sanguíneos fijados sobre láminas diag-
nósticas de 55 individuos infectados con P. falciparum. Se amplificó
por PCR un fragmento de 438 pb del gen pfdhps y se identificó la
mutación A437G por RFLP usando la endonucleasa Ava II. La mutación
se confirmó por secuenciación del fragmento de 438 pb de pfdhps.
También se identificaron las mutaciones S436A/F y K540E.
Resultados. Diecisiete muestras amplificaron el fragmento de 438 pb.
Se identificaron alelos mutantes, silvestres y mixtos en el codón 437.
La frecuencia del alelo mutante (G-437) fue de 65 % (11/17), del alelo
mixto (A/G-437) fue de 29 % (5/17) y del alelo silvestre (A-437) fue de
6 % (1/17). Los alelos mutantes G-437/F-436 y el alelo silvestre K-540
se identificaronen todas las muestras secuenciadas.
Conclusiones. Se reporta una frecuencia elevada del alelo mutante
G-437 en la población de estudio. Un porcentaje significativo de las
muestras analizadas por RFLP presentaron alelos mixtos A/G-437. En
las muestras secuenciadas procedentes de los municipios de Achí y
Rioviejo se identificó el haplotipo FGK de pfdhps. Esta investigación
constituye el primer reporte de mutaciones asociadas a resistencia an-
tipalúdica en el departamento de Bolívar.
196. Detección de infección natural por Plasmodium spp. en Ano-
pheles triannulatus s.l. de Colombia
Doris A. Rosero, Natalí Álvarez, Luz M. Jaramillo, Nelson J.
Naranjo, Giovan F. Gómez, Margarita M. Correa.
Grupo de Microbiología Molecular, Escuela de Microbiología,
Universidad de Antioquia. Medellín, Colombia. roserodoris@
hotmail.com
84 ASOCIACIÓN COLOMBIANA DE INFECTOLOGÍA REVISTA INFECTIO
Introducción. Anopheles triannulatus s.l. se ha reportado infectado
con Plasmodium falciparum y Plasmodium vivax en Brasil y Venezuela.
En Colombia, se desconoce su papel en la transmisión de la malaria;
por lo tanto, en el presente trabajo se investigó la infección natural
con Plasmodium spp. en especímenes An. triannulatus s.l. como una
aproximación a su incriminación como vector del parásito.
Materiales y métodos. Los especímenes se recolectaron en seis loca-
lidades de tres departamentos de Colombia: El Bagre y San Pedro de
Urabá (Antioquia), El Bagre (Córdoba), Leticia, Puerto Nariño y Tarapacá
(Amazonas). Los especímenes se identificaron por morfología como An.
triannulatus s.l. y se confirmó la especie por PCR-RFLP-ITS2. Se determinó
la infección por Plasmodium spp. en todos los especímenes utilizando
ELISA y PCR anidada, y aquellos positivos fueron evaluados por PCR-Cytb.
Resultados. De los 510 especímenes evaluados, se encontraron dos
An. triannulatus s.l. infectados; uno de El Bagre con P. vivax variante
VK247, para una tasa de infección de 1,163 (1/85; IC95% 0,029-6,309)
y uno de El Bagre con P. falciparum, tasa de infección de 1,205 (1/83;
IC95% 0,030-6,531).
Conclusiones. Los resultados de infección natural en An. triannulatus
s.l, constituyen los primeros reportes para esta especie en el país y
demuestran la necesidad de evaluar su papel en la transmisión en las
regiones endémicas del país.
197. Efecto del compostaje sobre la viabilidad de protozoos y
helmintos de importancia médica presentes en los biosólidos ge-
nerados en la planta de tratamiento de aguas residuales de San
Fernando, Itagüí
Katherine Bedoya Urrego, Sonia del Pilar Agudelo, Carlos Al-
berto Peláez, José Miguel Acevedo.
Universidad de Antioquia. Medellín Colombia. kathebedoya@
yahoo.com
Introducción y objetivo. Los biosólidos son un residuo generado en
el tratamiento de las aguas residuales. Se ha promovido su uso como
abono orgánico, no obstante, existen riesgos potenciales para la salud
debido a la presencia de microorganismos patógenos. El compostaje
es un método efectivo para estabilizar el biosólido. Nos propusimos
realizar la caracterización microbiológica, parasitológica y fisicoquímica
en dos protocolos de compostaje a partir del biosólido generado en
la planta de tratamiento de aguas residuales de San Fernando, Itagüí.
Materiales y métodos. Se realizó el compostaje por 30 días con formula-
ciones 50:50 y 75:25, y un control de 100% biosólido. A las muestras se les
realizó un análisis fisicoquímico y microbiológico según la NTC 5167. Para
la detección de huevos de helmintos se siguió el protocolo de la norma
oficial mexicana 004, modificada. Los protozoos se detectaron utilizando
el kit Merifluor y los colorantes vitales 4’,6-diamidino-2-phenil-indol y yo-
duro de propidio. Se realizó un análisis descriptivo univariado, análisis de
varianza, coeficiente de correlación y t de Student.
Resultados. En el biosólido se encontraron 6 huevos viables de As-
caris lumbricoides en 2 g de ST, con 43 % de viabilidad y 13 quistes
viables de Giardia intestinalis con un porcentaje de viabilidad de 40,6
%. La pila con la formulación 50:50 alcanzó una temperatura cercana
a los 50 °C entre la semana uno y dos. Al final del proceso no se en-
contraron protozoos ni helmintos viables, Salmonella spp. ausente y
enterobacterias en una concentración de 200 UFC/g. En la formulación
75:25, se encontró 1 huevo A. lumbricoides en 2g de ST viable y 1 quis-
te de G. intestinalis en 2 g de ST viable. En el control se encontraron 6
quistes de G. intestinalis en 2 g de ST viables.
Conclusiones. El biosólido generado en la planta de San Fernando
debe ser sometido a procesos de eliminación de patógenos antes de
ser usado como abono. Se recomienda el compostaje usando aserrín
como material de soporte en una concentración 50:50. Financiado por
Colciencias y Empresas Públicas de Medellín
 Determinación de mutaciones puntuales en el gen pfdhps de 195
Plasmodium falciparum asociadas a resistencia a Sulfadoxina
a partir de casos de malaria del departamento de Bolívar
Luis Acuña-Cantillo1, Fernando De la Cruz-López1, Lourdes Varela-Prieto1, Alfredo Lagares-Guzmán 1, Dary Luz Mendoza-Meza 2
1. Grupo de Investigación Inmunología y Biología Molecular. Universidad del Atlántico. 2. Grupo de Investigaciones Biomédicas. Universidad del Magdalena. Correspondencia: dary_mendoza@yahoo.com

INTRODUCCIÓN
La malaria es una enfermedad causada por parásitos del género Plasmodium, y se desarrolla principalmente en regiones intertropicales (1).
El incremento de casos de malaria en los últimos años, se debe entre otras cosas a la resistencia de los parásitos a los antimaláricos
empleados para el control de formas asexuales responsables de los síntomas de la enfermedad (2). En P.falciparum la resistencia a
Sulfadoxina está asociada con la acumulación de mutaciones en el gen de la dihidropteroato sintetasa – pfdhps (3,4). El objetivo de esta
investigación fue determinar las mutaciones puntuales en el gen pfdhps de P.falciparum asociadas a resistencia a Sulfadoxina, a partir de
casos de malaria del departamento de Bolívar.

MATERIALES Y MÉTODOS
Extracción de ADN (5) PCR
50 µl Solución de Lisis Reactivo Vol. Análisis de secuencias
SDS 0,01% Buffer Taq 1.25 µl
Iniciador K 1.25 µl
Secuenciación Blastn
Brij-97 1%
Iniciador K/ 1 µl ChromasPro 1.5
Tween-20 1% Mega 5.05
MgCl2 4 µl
Chelex-100 5%
dNTP's 14 µl
Alelo mutante 437G: 404–34 pb Base de datos epidemiológica
Taq Polimerasa 0.5 µl RFLP (7)
90°C por 45 minutos
Alelo silvestre A437: 438 pb y Análisis de frecuencias
Agua 18 µl

13000 rpm x 20 min. ADN 10 µl Epi Info V.6

13000 rpm x 10 min
Excel Office 2007®
Vol. reacción 50 µl 438 pb Electroforesis en Agarosa 2%
n=55
Controles 3D7, HB3, 7G8, Dd2 (6)

RESULTADOS

M: marcador de peso molecular 100 pb, HB3: cepa
silvestre A437 (GCT): 438 pb, Dd2 cepa mutante
437G (GGT): 404-34 pb, Muestra 1-2: Alelo
silvestre/mutante A437/437G, Muestra 3-4: Alelo
mutante 437G; - : Control negativo
Alineamiento múltiple de secuencias aminoacídicas de la Dihidropteroato sintetasa. Los codones 436, 437 Frecuencia de Alelos del codón 437 de DHPS en las
y 540 donde ocurren los cambios están resaltados en colores gris, azul y rojo. Los alelos identificados en muestras amplificadas
las muestras secuenciadas se resaltan en color amarillo

Diecisiete muestras amplificaron el fragmento de 438 pb. Se identificaron alelos mutantes, silvestres y mixtos en el codón 437. La frecuencia
del alelo mutante (G-437) fue del 65% (11/17), del alelo mixto (A/G-437) fue 29% (5/17) y del alelo silvestre (A-437) fue 6% (1/17). Los
alelos mutantes G-437/F-436 y el alelo silvestre K-540, fueron identificados en todas las muestras secuenciadas.

CONCLUSIONES
Se reporta una frecuencia elevada del alelo mutante G-437 en la población de estudio. Un porcentaje de las muestras analizadas por RFLP
presentaron alelos mixtos A/G-437. En las muestras secuenciadas procedentes de los municipios de Achí y Rioviejo se identificó el haplotipo
FGK de pfdhps. Esta investigación constituye el primer reporte de mutaciones asociadas a resistencia antimalárica en el departamento de
Bolívar.
AGRADECIMIENTOS LITERATURA CITADA
Al laboratorio de Salud Pública del departamento de Bolívar por la donación de las 1. WHO. 2011. World Malaria Report 2011. 278 pp.
muestras, al Instituto Nacional de Salud de Colombia por la donación de las cepas 2. WHO. 2010. Guidelines for the treatment of Malaria. 2nd edition. 193 pp.
control de P.falciparum 3. Brooks et al., 1994. Eur. J. Biochem. 244 (2):397-405.
4. Triglia & Cowman. 1999. Drug Resist Updat. 2(1): 15-19.
5. Domínguez et al., 2010. Salud Uninorte 26(10): 77-84.
6. Happi et al., 2005 . Acta Trop. 95(3):183-93.
7. Duraisingh et al., 1998. Exp Parasitol. 89(1): 1-8.