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23 febrero 2013
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Cada semana, la revista BBC Focus resuelve algunas dudas de sus
lectores. A continuacin, una seleccin de respuestas para curiosos.
Respuestas
Mejor respuesta: El poder de resolucin del ojo humanoe s de 0,2 mm es decir que para ver dos
objetos separados estos deben estar como mnimo a esa distancia. El microscopio ptico aumenta
la imagen hasta el nivel de la retina, para captar la informacin.
En cuanto al microscopio elctrnico, depende del tipo que sea aunque el ms usual es de
tarnsmisiin (MET) Este tipo tiene un limite de resolucin de cerca de 2 nm. Esto es debido a
limitaciones de la lente usado para enfocar electrones hacia la muestra. Un MET mira a replicas de
clulas muertas , despus de haber sido fijadas y teidas con ones de metales pesados. Los
electrones se ven dispersados cuando pasan a travs de una fina seccin del espcimen, y luego
detectados y proyectados hacia una imagen sobre una pantalla fluorescente.
Papaver hace 6 aos
Tamao y biologa
el ojo humano puede ver sin ayuda. En realidad el ojo humano tiene una
resolucin de cerca de 100 m. En el cuadro de abajo note que de todas las
estructuras nombradas, solamente la clula vegetal est escasamente dentro
de nuestra resolucin.
El Microscopio ptico
El microscopio ptico tiene un
limite resolucin de cerca de 200
nm (0.2 m ). Este limite se
debe a la longitud de onda de la
luz (0.4-0.7 m ). Las clulas
observadas bajo el microscopio
ptico pueden estar vivas o
fijadas y teidas.
Imagen cortesa de WebPath
(wwwmedlib.med.utah.edu/WebPath/webpath
.html)
El microscopio elctrnico de
barrido (MEB) tambin tiene un
limite de 2nm. Al igual que el
MET, el MEB permite mirar a
clulas muertas, despus de
haber sido fijadas y teidas con
ones de metales pesados. Con
esta tcnica los electrones son
reflectados sobre la superficie del
espcimen.
El Proyecto Biolgico
University of Arizona
El 28 de Octubre, 1998
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http://www.biologia.arizona.edu
All contents copyright 1998. All rights reserved.
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El microscopio
Enviado por Cliffor Jerry Herrera Castrillo
Partes: 1, 2
1.
Introduccin
2.
3.
Propiedades de la luz
4.
5.
6.
1.- INTRODUCCION
La luz es un fenmeno complejo que clsico se explica con un modelo simple basado en rayos y
frentes de onda. La cartilla molecular de la microscopia de las expresiones explora muchos de
los aspectos de la luz visible comenzando con una introduccin a la radiacin electromgnetica
y la continuacin a travs a la visin humana y a la opinin del color. . Un grupo de los
cientficos, que suscribieron a la teora de la onda, centr sus discusiones en los
descubrimientos del remiendo Christiaan Huygens.
El campo de oposicin cit experimentos del prisma de sir Isaac Newton's como prueba que la
luz viaj como ducha de partculas, cada procedimiento en una lnea recta hasta que fue
refractada, absorbida, reflejada, difractada o disturbada de una cierta otra manera. Cerca de
200 aos ms tarde, los mecnicos del quntum nacieron de la investigacin de Einstein,
Planck, de Broglie, Neils Bohr, Erwin Schrdinger, y otros que procuraron explicar cmo la
radiacin electromgnetica puede exhibir lo que ahora se ha llamado dualidad , o ambos
partcula como y comportamiento ondulado. La luz se comporta ocasionalmente como
partcula, y en otras veces como onda. Este, o dblese, papel complementario del
comportamiento de la luz se puede emplear para describir todas las caractersticas sabidas que
se han observado experimental, extendindose de la refraccin, de la reflexin, de
interferencia, y de la difraccin, a los resultados con la luz polarizada y el efecto fotoelctrico.
Los microscopios son instrumentos diseados para producir imgenes visuales o fotogrficas
magnificadas de objetos pequeos. El microscopio debe lograr tres tareas: produzca
una imagen magnificada del espcimen, separe los detalles en la imagen, y haga los detalles
visibles al ojo o a la cmara fotogrfica humano. Este grupo de instrumentos incluye no
solamente diseos de la mltiple- lente con objetivos y condensadores, pero tambin los solos
dispositivos muy simples de la lente que son a menudo hand-held, por ejemplo una lupa.
Microscopio de fluorescencia
Se define fluorescencia como la capacidad de ciertas sustancias de emitir, cuando son
iluminadas por una radiacin corta, una radiacin mas larga. El microscopio de fluorescencia
consta de una fuente de luz potente que emite una radiacin que bien incide en la muestra, tras
atravesar un condensador de campo oscuro (iluminacin transmitida) o penetrar en el tubo del
microscopio formando un ngulo recto con l, para posteriormente incidir en la muestra
(iluminacin incidente o epi-iluminacin)
Microscopio petrogrfico o de polarizacin microscopio de luz ultravioleta
Microscopio de campo cercano
2.2.2.- MICROSCOPIO ELECTRNICO
Los principios bsicos de los microscopios electrnicos son similares a los microscopios
pticos, las diferencias estn dadas en la fuente de luz (electrones ) y en el tipo de lente, ya que
los electrnicos emplean lentes electromagnticas. La gran diferencia de los dos tipos de
microscopios es lapotencia que tiene cada cual, ya que el microscopio ptico es capaz de
aumentar unas 2000 veces y una resolucin de 0,2 micrones ( 0,0001 mm. ) mientras que el
electrnico aumenta hasta un 1000000 de veces con una resolucin de 0.1 nanmetros
( 0,0000001 mm.).
Todos los microscopios electrnicos cuentan con varios elemento bsicos, disponen de un
can de electrones que emite los electrones que chocan contra la muestra, creando una
imagen aumentado. Se utilizan lentes electromagnticas para crear campos que dirigen y
enfocan el haz de electrones, junto con un sistema de vaco al interior del microscopio, para que
las molculas de aire no desven los electrones
Microscopio electrnico de transmisin (TEM), se utiliza para ver secciones o cortes de tejidos,
dirige un haz de electrones hacia el objeto que se desea aumentar; una parte de los electrones
rebotan o son absorbidos por el objeto y otros lo atraviesan formando una imagen aumentada
de la muestra.
Para utilizar un TEM debe cortarse la muestra en capas finas con un grosor entre 50 a 200
nanmetros. Dicha muestra se coloca en una redecilla que se untroduce en el tubo con una
pieza alagargada que se introduce por un lateral Para el funcionamiento de este microscopio se
utiliza un haz de electrones, obtenido desde una lmpara especial de tungsteno. El tubo tiene
vaco en su interior, para impedir que nada dificulte el paso de los electrones. Un fallo en este
vaco ocasiona la aparicin de cuerpos extraos en el visor. Luego de ser enfocados por las
lentes electromagnticas, los electrones inciden sobre la muestra, formando la imagen que se
obtiene en blanco y negro, la cual puede proyectarse sobre una pantalla especial o pelcula
fotogrfica. El TEM examina partes grandes de la muestra. ste microscopio obtiene imgenes
en dos dimensiones, que luego pueden ser plasmadas en fotografas si interesa. ste es el tipo
de microscopio electrnico ms utilizado en investigacin, ya que obtiene muy buenos
resultados y tiene gran potencia.
Microscopio electrnico de barrido (SEM), este permite la observacin de superficies sin la
necesidad de realizar cortes microscpicos, explorando la superficie de la imagen punto por
punto. Su funcionamiento se basa en recorrer la muestra con un haz muy concentrado de
electrones, de forma parecida al barrido de un haz de electrones por la pantalla de
una televisin.
Los electrones del haz pueden dispersarse de la muestra o provocar la aparicin de electrones
secundarios, ambos son recogidos y contados por un dispositivo electrnico situado a los lados
de la muestra. Cada punto ledo de la muestra corresponde a un pxel en
un monitor de televisin. Cuanto mayor sea el numero de electrones contados por el
dispositivo, mayor ser el brillo del pxel en la pantalla. Como consecuencia del barrido
electrnico se genera una imagen con apariencia tridimensional, que permite estimar
parmetros celulares como tamao y forma, dndole ventajas en este sentido sobre el TEM. Las
desventajas del SEM es su menor capacidad de aumento ya que slo puede a unas 100000
veces y tambin tiene una resolucin 1000 veces menor que el TEM. Eso y que slo permite ver
el exterior de la muestra.
Microscopio sonda de barrido Microscopio de tnel de barrido Microscopio de fuerza atmica
resto de los materiales transparentes excede el valor de 1,0, y se puede medir por un nmero
de tcnicas.
3.3.- DIFRACCION
Varios de los experimentos clsicos y de la mayora fundamentales que ayudan a explicar la
difraccin de la luz primero fueron conducidos entre los ltimos decimosptimos y temprano
diecinueveavo siglos por el cientfico Francesco Grimaldi italian, el cientfico francs Augustin
Fresnel, los jvenes ingleses de Thomas del fsico, y varios otros investigadores. Estos
experimentos implican la propagacin de ondas ligeras aunque una raja muy pequea
abertura, y demuestran que cuando la luz pasa a travs de la raja, el tamao fsico de la
abertura se determina cmo la abertura obra recprocamente con la luz.
Si la longitud de onda de la luz es mucho ms pequea que la anchura de la abertura o de la
raja, una onda ligera viaja simplemente hacia adelante en una lnea recta despus de pasar a
travs, como si no hay abertura presente cuadro. Sin embargo, cuando la longitud de onda
excede el tamao de la abertura, la difraccin de la luz ocurre, causando la formacin de un
patrn de difraccin que consiste en una porcin central brillante ( el mximo primario ),
limitada de cualquier lado por una serie de mximos secundarios separados por las regiones
oscuras ( mnimos ). Los mximos y los mnimos son creados por la interferencia de ondas
ligeras difractadas. Cada venda brillante sucesiva se convierte en procedimiento menos intenso
hacia fuera, lejos del mximo central. La anchura de la porcin brillante central, y el
espaciamiento de las bandas laterales de acompaamiento, depende del tamao de la abertura
y de la longitud de onda de la luz.
3.4.- POLARIZACION
El ojo humano carece la capacidad de distinguir entre la luz aleatoriamente orientada y
polarizada, y la luz plano-polarizada se puede detectar solamente con un efecto de la intensidad
o del color, por ejemplo, por fulgor reducido al usar los cristales polarizados del sol. En efecto,
los seres humanos no pueden distinguir entre las imgenes verdaderas del alto contraste
observadas en un microscopio ligero polarizado y las imgenes idnticas de los mismos
especmenes capturados digital (o en la pelcula), y despus proyectados sobre una pantalla con
la luz que no se polariza.
3.5.- BIRREFRINGENCIA
La birrefringencia se define formalmente como la refraccin doble de la luz en un material
transparente, molecular pedido, que es una manifestacin de la existencia de diferencias
orientacin- dependientes en el ndice de refraccin. Muchos slidos transparentes son
pticamente isotrpicos, significando que ndice de refraccin es igual en todas las direcciones
a travs del enrejado cristalino. Los ejemplos de slidos isotrpicos son sal de cristal, de la
tabla, muchos polmeros, y una variedad amplia de compuestos orgnicos e inorgnicos.
que pasan a travs de la lente se intersecarn y se unen fsicamente en el plano focal, mientras
que las extensiones de los rayos que entran en la lente se intersecarn en el plano principal con
las extensiones de los rayos que emergen de la lente. La longitud focal de una lente se define
como la distancia entre el plano principal y el plano focal, y cada lente tiene un sistema de estos
planos en cada lado (delantero y posterior).
El objeto (o el espcimen) que es reflejado por la lente se coloca en el plano del objeto , situado
en el lado izquierdo de la lente por la convencin, y es representado por una flecha roja que
viaje hacia arriba de la lnea central o del eje ptico , que pasa a travs del centro de la lente,
perpendicular a los planos principales. Irradie los rastros a travs de la lente (flechas amarillas)
emanan del objeto y proceden de izquierda a derecha a travs de la lente a formar una imagen
verdadera magnificada (flecha roja invertida) en el plano de imagen en el lado derecho de la
lente. La distancia entre el plano principal delantero de la lente y del espcimen se conoce
como la distancia del objeto , y es representada por la variable "a". De una manera similar, la
distancia del plano principal posterior a la imagen variable "b" se llama la distancia de la
imagen . Estos parmetros son los elementos fundamentales que definen la ptica geomtrica
de una lente simple y se pueden utilizar calcular las caractersticas importantes de la lente,
incluyendo factor focal de la longitud y de la ampliacin.
Las lentes pueden ser el depender positivo o negativo sobre si causan los rayos ligeros que
pasan a travs para converger en un solo punto focal, o divergen hacia fuera del eje ptico y en
espacio. Lentes positivas convergen los rayos ligeros del incidente que son paralelos al eje
ptico y los enfocan en el plano focal para formar una imagen verdadera. Segn lo demostrado
las lentes positivas tienen una o dos superficies convexas y son ms gruesas en el centro que en
los bordes. Una caracterstica comn de lentes positivas es que magnifican objetos cuando se
colocan entre el objeto y el ojo humano. En contraste, las lentes negativas divergen los rayos
ligeros del incidente paralelo y forman una imagen virtual extendiendo los rastros de los rayos
ligeros que pasan a travs de la lente a un punto focal detrs de la lente. Las lentes negativas
tienen por lo menos una superficie cncava y son ms finas en el centro que en los bordes
Cuando una lente negativa se coloca entre un objeto y el ojo, no forma una imagen verdadera,
sino reduce (o desmagnifica ) el tamao evidente del objeto formando una imagen virtual.
Un artefacto potencialmente serio que puede tener consecuencias serias en las imgenes
producidas por el microscopio, aberracin esfrica es el resultado de usar las lentes que tienen
superficies esfricas, que es actualmente el nico acercamiento prctico al diseo de la lente. La
aberracin esfrica ocurre cuando las ondas ligeras que pasan con la periferia de una lente no
se traen en foco exacto con sos que pasan a travs del centro El resultado es que no existe un
plano de imagen bien definido, y el espcimen no puede ser enfocado correctamente. Como
ejemplo, una fuente del punto de la luz aparece como punto rodeado por un halo o una serie
brillante de anillos de la difraccin cuando el microscopio se trae en su "mejor" foco.
4.2.2.4.- ASTIGMATISMO
La aberracin del astigmatismo es similar al coma; sin embargo, este artefacto no est como
sensible al tamao de la abertura y no depende ms fuertemente del ngulo oblicuo del rayo de
luz. La aberracin es manifestada por la imagen del apagado-eje de un punto del espcimen
que aparece como una lnea o elipse en vez de un punto discreto. Dependiendo del ngulo de
los rayos ligeros del apagado-eje que entran en la lente, la imagen de la lnea se puede orientar
en de dos diversas direcciones, tangencial ( meridional ) o sagital ( ecuatorial ). El cociente de
la intensidad de la imagen de la unidad disminuir, con la definicin, el detalle, y el contraste
siendo perdido como la distancia del centro se aumenta.
Mientras que los valores numricos de la abertura aumentan para una serie de objetivos de la
misma ampliacin, observamos una mayor capacidad de luz-acopio y aumentamos
generalmente de la resolucin.
Adems, los objetivos acromticos se corrigen para la aberracin esfrica en el verde del tabla.
La correccin limitada de objetivos acromticos puede conducir a los artefactos substanciales
cuando los especmenes son examinados y reflejados con microscopia y fotomicrografa del
color.
Si el foco se elige en la regin verde del espectro, las imgenes tendrn un halo rojizo-magenta
(a menudo llamado color residual).Los objetivos acromticos rinden sus mejores resultados
con la luz pasada con un filtro verde (a menudo un filtro de interferencia ) y usar la pelcula
negra y blanca cuando estos objetivos se emplean para la fotomicrografa. La carencia de la
correccin para la llanura del campo (o de la curvatura del campo ) obstaculiza ms lejos
objetivos del achromat.
El nivel ms alto siguiente de la correccin y del coste se encuentra en los objetivos llamados
las fluoritas o los semi- apochromats, nombrado para la fluorita mineral, que fue utilizada
originalmente en su construccin. El cuadro representa las tres clases principales de objetivos:
Los achromats con la menos cantidad de correccin, segn lo discutido arriba; las fluoritas (o
semi- apochromats) que tienen correcciones esfricas adicionales; y, los apochromats que son
los objetivos lo ms altamente posible corregidos disponibles
4.3.1.- ABERTURA NUMRICA Y RESOLUCIN
La abertura numrica de un objetivo del microscopio es una medida de su capacidad de
recolectar la luz y de resolver el detalle fino del espcimen en una distancia fija del objeto.
Imagen-formando las ondas ligeras pasan a travs del espcimen e incorporan el objetivo a un
cono invertido. Una rebanada longitudinal de este cono de la luz demuestra la abertura
angular, un valor que sea determinado por la longitud focal del objetivo.
El ngulo ? es una mitad de la abertura angular (a) y se relaciona con la abertura numrica
con la ecuacin siguiente :
Abertura numrica ( NA ) = n(sin m)
Donde est el ndice de refraccin n del medio de la proyeccin de imagen entre la lente
delantera del objetivo y del cristal de la cubierta del espcimen, un valor que se extiende a
partir de 1,00 para el aire a 1,51 para la inmersin especializada engrasa. Muchos autores
substituyen la variable a ? para ? ? en la ecuacin numrica de la abertura. De esta ecuacin es
obvio que cuando el medio de la proyeccin de imagen es aire (con un ndice de refraccin,una
n = 1,0), despus la abertura numrica es dependiente solamente sobre el ngulo ?? que valor
mximo es el 90.
Examinando la ecuacin numrica de la abertura, es evidente que el ndice de refraccin es el
factor limitador en las aberturas numricas de realizacin mayor de 1,0. Por lo tanto, para
obtener aberturas numricas de un funcionamiento ms alto, el ndice de refraccin del medio
entre la lente delantera del objetivo y el espcimen deben ser aumentados. Los objetivos del
microscopio estn disponibles ahora que permiten proyeccin de imagen
en mediosalternativos tales como agua (ndice de refraccin = 1,511,33), glicerina (ndice de
refraccin = 1,47), y aceite de la inmersin (ndice de refraccin = 1,51).
4.3.2.- FORMACIN DE LA IMAGEN
En el microscopio ptico, cuando la luz de la lmpara del microscopio pasa a travs del
condensador y entonces a travs del espcimen (si se asume que el espcimen es un espcimen
absorbente ligero), algo de la luz pasa alrededor y a travs del espcimen imperturbado en su
trayectoria. Tal luz se llama luz directa o desvio de la luz. Tal luz desviada (a que usted
aprender posteriormente, llamada luz difractada) se rinde una mitad longitud de onda o 180
grados fuera de paso (ms comunmente, fuera de fase). La longitud de onda fuera de la fase
causada por el espcimen s mismo de una mitad permite a esta luz causar interferencia
destructiva con la luz directa cuando ambas llegan el plano de imagen intermedio el diafragma
del ocular. Puesto que nuestros ojos son sensibles a las variaciones en brillo, la imagen
entonces se convierte en reconstitucin ms o menos fiel del espcimen original.
Segn lo presentado en la figura , un incidente del frente de onda sobre una superficie plana
que separa dos medios se refracta sobre incorporar el segundo medio si la onda del incidente es
oblicua a la superficie. El ngulo del incidente ( n? (1) ) es relacionado con el ngulo de la
refraccin ( n? (2) ) por la relacin simple conocida como ley de Snell. Cuando n (1) es
mayor de n(2) , el ngulo de la refraccin es siempre ms pequeo que el ngulo de la
incidencia.
Leer ms:http://www.monografias.com/trabajos-pdf5/partes-microscopio-tipos/partes-microscopio-tipos.shtml
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