ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
MICROBIOLOGÍA BÁSICA
Profesor: Ing. Verónica Caballero Serrano PhD
TERCERO “C”
PRÁCTICA 4: Uso del microscopio óptico.
1. DATOS GENERALES:
NOMBRE(S): CÓDIGO(S):
Castillo Proaño Michael Yandry 3257
LUGAR DE REALIZACIÓN: LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
FECHA DE REALIZACIÓN: FECHA DE ENTREGA:
2018/05/24 2018/05/31
Riobamba – Ecuador
2. INTRODUCCIÓN.
El microscopio es un instrumento óptico que amplifica la imagen de un objeto
pequeño, siendo el instrumento más utilizado en los laboratorios donde se
estudian microorganismos. Si bien las lentes de aumento han sido conocidas
desde muy temprano en la historia, sólo se le utilizó en biología con el
advenimiento del microscopio de luz moderno. Desde su invención, el
microscopio ha sido una herramienta valiosa en el desarrollo de la teoría
científica (Heidcamp, 1995).
(Suárez, 2010)
En general, un microscopio está compuesto de dos elementos, los cuales
constituyen un sistema similar a un telescopio: a) lentes primarias amplificadoras
y b) lentes secundarias. Estos sistemas se denominan objetivo y ocular,
respectivamente, y están montados en los extremos opuestos de un tubo
cerrado, de forma que el primero se encuentra en el punto focal del segundo.
Entonces, la luz que pasa por un objeto es focalizada por ambos sistemas de
lentes (Heidcamp, 1995), de manera que cuando se mira a través del ocular se
ve una imagen virtual aumentada de la imagen real.
Partes del microscopio óptico
Sistema óptico
• Ocular: Lente situada cerca del ojo del observador.
Amplía la imagen del objetivo.
• Objetivo: Lente situada cerca de la preparación.
Amplía la imagen de ésta.
• Condensador: Lente que concentra los rayos
luminosos sobre la preparación.
• Diafragma: Regula la cantidad de luz que entra en el
condensador.
• Foco: Dirige los rayos luminosos hacia el
condensador.
Sistema mecánico
• Soporte: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el
pie o base y el brazo.
• Platina: Lugar donde se deposita la preparación.
• Cabezal: Contiene los sistemas de lentes oculares.
Puede ser monocular, binocular, entre otros.
• Revólver: Contiene los sistemas de lentes objetivos.
Permite, al girar, cambiar los objetivos.
• Tornillos de enfoque: Macrométrico que aproxima el
enfoque y micrométrico que consigue el enfoque
correcto.
(Montalvo, 2013)
3. OBJETIVO(S):
A. OBJETIVO GENERAL
Estudiar el microscopio óptico
B. OBJETIVO ESPECÍFÍCO
➢ Conocer las partes del microscopio óptico y su función.
➢ Describir el uso correcto y cuidado del microscopio óptico.
➢ Observar los microorganismos existentes en una muestra de agua
empozada.
4. EQUIPOS Y MATERIALES
➢ 4 placas portaobjetos.
➢ 4 placas cubreobjetos.
➢ Alcohol.
➢ Agua destilada.
➢ Aceite de inmersión.
➢ Microscopio óptico.
➢ Muestra de agua empozada.
5. METODOLOGÍA
Instrucciones
Elegir un microscopio Describir el Explicar la Explicar el poder
principio de Describir las función de de magnificación
óptico para el estudio
funcionamiento partes básicas y resolución del
de sus partes y cada una de
del microscopio
funcionamiento. del microscopio sus partes microscopio.
óptico.
Actividades a desarrollar por los estudiantes.
Asegurarse de que el objetivo Comprobar el Si el condensador es ajustable, Subir la
de menor aumento o lupa sonido metálico asegurarse de que esté arriba intensidad de
Encender el
esté en el eje óptico del que indica que (cercano a 2 mm de la platina) y con la luz si ésta es
microscopio
microscopio. Si no es así, está en su lugar. el filtro azul puesto (el filtro azul es regulable y
colocarlo en su sitio. un dispositivo que selecciona los abrir el
rayos de luz más cercanos al azul). diafragma.
Utilizar el tornillo macrométrico para
acercar la platina hasta casi tocar la Desplazarla por la platina y sujetarla con Colocar una gota de agua
preparación (respetando al menos unos la pinza. Si la placa está sucia, limpiarla empozada sobre el
3mm) o bien hasta que la platina llegue a Centrar la portaobjetos y una placa
antes de ponerla. Asegurarse de
su tope. Mirar a través del ocular o los muestra
colocar la muestra con el cubreobjetos cubreobjetos sobre la
oculares. Si es un microscopio binocular y
hacia arriba (lámina de vidrio delgada). muestra. Situar la placa
es la primera vez que se observa por él,
ajuste la distancia interpupilar (que cada sobre la platina.
ocular quede alineado con tu pupila),
cuando lo hayas hecho observará un
único campo centrado, de lo contrario
observará dos.
Con movimientos finos del micrométrico ajustar el Para pasar a un aumento mayor, girar el
Con el tornillo macrométrico
foco a sus ojos. Utilizar para su observación la parte revólver, hasta colocar el siguiente
alejar lentamente la platina del central del campo visual. Centrar el espécimen si es objetivo en el eje óptico. Realizar
objetivo. En una determinada necesario y ajustar el diafragma (o mover el nuevamente el enfoque fino con el
posición, el espécimen condensador) de forma que obtenga una iluminación micrométrico. No utilizar el tornillo
aparecerá en foco. adecuada (campo claro con iluminación macrométrico con los objetivos de 10x y
homogénea, si es una muestra al fresco obtener el 40x, para evitar romper la muestra o
mayor contraste posible). dañar los lentes.
Al finalizar las observaciones, apagar la luz del microscopio
Procurar no pasar al objetivo de 100x a
(baja la potencia) y dejar el microscopio en posición de
menos que lo indique su tutor. El uso
reposo: a. Con el objetivo de menor aumento en el eje óptico.
de este objetivo necesita la colocación
b. Con el condensador en la posición más alta. c. La platina
de una gota de aceite de inmersión y
en su posición más baja. d. El carro atrás centrado y apegado
una manipulación extremadamente
al brazo del microscopio. e. Si es oportuno, dejar el
cuidadosa para evitar romper la
microscopio en el centro de la mesa (cuida levantarlo y evitar
muestra y dañar el lente.
los golpes o vibraciones, pues descalibran el instrumento).
6. RESULTADOS
A continuación, se describen las partes del microscopio óptico y se dan a
conocer los microorgismos observados en la muestra de agua empozada.
El microscopio binocular con el que se trabajó en la práctica “Uso del microscopio
óptico” consta de las siguientes partes:
Parte mecánica.
Brazo Es la estructura que sujeta el tubo, la platina y los tornillos
de enfoque asociados al tubo o a la platina. Además, sirve
para trasladar el microscopio de un lugar a otro.
Base o pie Es una pieza que proporciona estabilidad y sirve de soporte
a todas las partes del microscopio. Además, sirve para
trasladar al microscopio junto con el brazo.
Platina Es una pieza metálica, cuadrada, que tiene en su centro una
abertura circular por la que pasará la luz del sistema de
iluminación. Aquí se coloca el portaobjetos con la muestra a
observar
Pinzas de sujeción Parte mecánica que sirve para sujetar la preparación. La
mayoría de los microscopios modernos tienen las pinzas
adosadas a un carro con dos tornillos, que permiten un
avance longitudinal y transversal de la preparación.
Revólver Es el sistema que porta los objetivos de diferentes
aumentos, y que rota para poder utilizar uno u otro,
alineándolos con el ocular.
Tornillo macrométrico Permite hacer un movimiento rápido hacia arriba o hacia
abajo del tubo o la platina, y se utiliza para localizar la
imagen a observar.
Tornillo micrométrico -Parte mecánica de movimiento giratorio que nos permite
colocar en posición cualquiera de los objetivos que se
encuentran en él. El micrométrico permite desplazamientos
muy cortos, para el enfoque más preciso
Tubo ocular Parte mecánica que proporciona sostén a los oculares y
objetivos.
Parte óptica
Ocular Se localiza en la parte superior del tubo ocular y son las lentes
que Capta y amplia la imagen formada en los objetivos. Los
primeros microscopios eran monoculares, es decir, poseían
una sola lente. Los microscopios actuales poseen dos
oculares, uno para cada ojo y se les llama binoculares.
Objetivos Se encuentran incrustados en el revolver Son unos pequeños
cilindros colocados en el revolver que proporciona el poder de
resolución del microscopio y determinan la cantidad total de
aumento.
Existen 4 tipos entre los que se encuentran:
1.- La lupa (4 X) que sirve para hacer observaciones a bajo
aumento.
2.- El objetivo seco débil (10 X) que se utiliza para localizar la
imagen que se va a observar.
3.- El objetivo seco fuerte (40 X) aumenta la imagen anterior,
para poder observar se necesita primero acercar el objetivo al
portaobjetos y posteriormente, enfocar el objetivo hasta que
aparezca la imagen.
4.- El objetivo de inmersión (100 X) es un lente especial para
observar imágenes tan pequeñas como las bacterias. Y se
requiere del aceite de inmersión para lograr una buena
observación.
La parte óptica del microscopio es la que determina el número de aumentos que
presenta la imagen observada. El aumento total que permite un microscopio óptico se
calcula multiplicando la magnificación que producen el objetivo por la que producen los
oculares.
Num. del objetivo X núm. de ocular = núm. de aumentos
Ejemplo, si estamos usando un objetivo de 40x (aumenta 40 veces) y un ocular de 10x
(aumenta 10 veces), el resultado final será de 400x, es decir, vemos la muestra
aumentada 400 veces.
Seco fuerte (40 x) x ocular (10 x) = 400 aumentos
Sistema de iluminación
Condensador Es una lente de gran abertura que permite dirigir o
condensar la mayor parte de los rayos luminosos en
la preparación. En nuestro microscopio está
integrado en la platina y tiene un diafragma unido en
la parte inferior.
Diafragma Existe un diafragma en el condensador, que elimina
el exceso de luminosidad para tener una buena
iluminación del objeto a observar
Fuente de luz Para observar la muestra microscópica es
necesario que ésta se ilumine con algún tipo de luz
y nuestros microscopios cuentan con un foco que
da energía eléctrica que dirige sus rayos luminosos
hacia el sistema condensador.
(IQB, 2017)
Microorganismos observados en la muestra de agua empozada
(Únicamente se muestran los microorganismos que fueron observados en el
microscopio asignado para el mesón 1)
Gráfico N°1 Gráfico N°2 Gráfico N°1
Ameba observada con el lente de Algas observadas con el lente de Volvox muertos observados con el
40X en una muestra de agua 40x en una muestra de agua lente de 40x en una muestra de
empozada empozada agua empozada
Si se logró trabajar con el lente de 100x el cual emplea aceite de inmersión, pero
debido a fallas del microscopio, no fue posible divisar microorganismos de
manera clara.
DISCUSIÓN DE RESULTADOS.
➢ El microscopio resultó fundamental para la observación de microorganismos
en la muestra de agua empozada, ya que este aparato esencial en un
laboratorio permite divisar estructuras que no se pueden ver a simple vista,
lo cual concuerda con lo establecido por Andrea Ríos en su reporte sobre
microscopía “El microscopio es sin duda el elemento más importante en
cualquier laboratorio. Nos permite, por ejemplo, ver células, microorganismos
y bacterias, lo cual es imposible de observar a simple vista”
(Ríos, 2013)
➢ La muestra de agua empozada resultó fundamental para el desarrollo de la
práctica, dado que esta albergaba ciertos microorganismos que pudieron ser
observados con ayuda del microscopio, lo cual coincide con lo dicho por
Paula Vizcaíno en su obra llamada la vida oculta en una gota de agua,
estableciendo lo siguiente “Nematodos, amebas, paramecios… son
organismos microscópicos pueden habitar en una sola gota de agua. Siendo
charcas, lagunas, zanjas y donde haya agua empozada o no, hogar de una
increíble biodiversidad que a simple vista es invisible”
(Vizcaíno, 2015)
➢ En la muestra de agua empozada se lograron observar gran cantidad de
amebas, pero en los resultados se muestra una ameba de manera clara, la
misma que no presentaba una forma definida y al parecer a manera interna
presentaba un núcleo, lo cual concuerda con lo dicho por Ramírez Sebastián
en su informe sobre protozoarios, estableciendo lo siguiente “Las amebas
habitan en los estanques y pequeños lagos se caracterizan por su forma
cambiante, puesto que carece de pared celular. Los elementos más
reconocibles en la ameba son el núcleo y la vacuola contráctil que emplea
para mantener la presión osmótica”
(Ramírez, 2015)
➢ Se observaron algas en la muestra de agua empozada, las cuales
presentaban cloroplastos, al igual que volvox (géneros de algas), los cuales
se encontraban muertos en la muestra ya que en otras muestras estos vovox
se encontraban en movimiento, lo cual coincide con lo dicho por Romero
Daniela en su reporte que lleva por nombre microorganismos en una gota de
agua, estableciendo lo siguiente “ Las algas son diversos organismos
unicelulares o multicelulares que habitan en el agua o ambientes muy
húmedos, presentan cloroplastos al igual que distintos tipos como los volvox
los cuales presentan una forma ovalada y hueca, forman colonias muy
abundantes , presentan movimiento por los flagelos y habitan en aguas ricas
en oxígeno”
(Romero, 2015)
7. CONCLUSIONES
➢ Con ayuda de la docente Verónica Caballero y la previa revisión bibliográfica, se
logró conocer cada parte del microscopio óptico binocular al igual que la función que
cada una de estas partes desempeñan con lo cual este aparato nos permite observar
microorganismos, células, bacterias o bien estructuras que no son visibles al ojo
humano. (las partes del microscopio con su debida función se detallan en la sección
de “RESULTADOS”)
➢ Mediante la práctica se logró conocer el uso correcto del microscopio, teniendo así
los siguientes aspectos:
✓ Se le quita el forro al microscopio para posterior conectarlo y proceder a su
encendido.
✓ Se coloca el objetivo de menor poder de aumento en posición de trabajo, se
baja la platina hasta el tope inferior, todo lo que se pueda.
✓ Se coloca la preparación sobre la platina de forma que la muestra quede
centrada en el orificio por el que pasará la luz. El portaobjetos debe quedar
firmemente sujeto por las pinzas metálicas que en la platina.
✓ Se da inicio a la observación. Se empieza con el objetivo de menor poder de
aumento, este normalmente es el de 4x. Se puede pasar directamente al
objetivo de 10x en caso de preparaciones de bacterias o células de tamaño
similar.
Para realizar el enfoque Empleo del objetivo de inmersión
➢ Acercar al máximo la lente del objetivo a la
preparación, empleando el tornillo macrométrico. ➢ Bajar totalmente la platina.
Esto debe hacerse mirando directamente y no a ➢ Subir totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que
través del ocular, ya que se corre el riesgo de nos indica la zona que se va a visualizar y donde habrá que echar el
incrustar el objetivo en la preparación pudiéndose aceite.
dañar alguno de ellos o ambos. ➢ Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino
➢ Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir entre éste y el de x40.
separando lentamente el objetivo de la preparación ➢ Colocar una gota mínima de aceite de inmersión sobre el círculo de luz.
con el macrométrico y, cuando se observe algo ➢ Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo
nítida la muestra, girar el micrométrico hasta de inmersión.
obtener un enfoque fino. ➢ Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la
➢ Pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar lente toca la gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota
ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover ascendiera y se adosara a la lente.
un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. ➢ Enfocar cuidadosamente con el micrométrico. La distancia de trabajo
Si al cambiar de objetivo se perdió por completo la entre el objetivo de inmersión y la preparación es mínima, aun menor que
imagen, es preferible volver a enfocar con el con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande.
objetivo anterior y repetir la operación desde el paso ➢ Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no
3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia se puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se mancharía
de la preparación y por ello es fácil que ocurran dos de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina
tipos de percances: incrustarlo en la preparación si y repetir la operación desde el paso 3.
se descuidan las precauciones anteriores y ➢ Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y
mancharlo con aceite de inmersión si se observa se coloca el objetivo de menor aumento girando el revólver. En este
una preparación que ya se enfocó con el objetivo de momento ya se puede retirar la preparación de la platina. Nunca se debe
inmersión. retirar con el objetivo de inmersión en posición de observación.
➢ Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel
especial para óptica. Comprobar también que el objetivo 40x está
perfectamente limpio.
Mantenimiento y precauciones
1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición de
observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de
esta y dejarlo cubierto con su funda.
2. Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para
evitar que se ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe
guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo.
3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente
con un papel de filtro o, mejor, con un papel de óptica.
4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el microscopio.
5. Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo
con pañuelos especiales para óptica o con papel de filtro (menos recomendable). En
cualquier caso, se pasará el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite
ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-
acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos
disolventes en exceso se pueden dañar las lentes y su sujeción.
6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico, micrométrico, platina,
revólver y condensador).
7. El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la
preparación para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo
agarrándolo por el tubo de este ni hacerlo mientras se está observando a través del ocular.
8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algún líquido,
secarlo con un paño. Si se mancha de aceite, limpiarla con un paño humedecido en xilol.
9. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesión práctica y, al
acabar el curso, encargar a un técnico un ajuste y revisión general de los mismos.
(RENA, 2014)
➢ Claro que con ayuda de la muestra de agua empozada y del microscopio fue posible
la observación de ciertos microorganismos que en dicha muestra se encontraban,
teniendo así que fue posible divisar amebas, volvox y algas, aunque en una sola
muestra de otro mesón fue posible la observación de una euglena. (los
microorganismos observados se aprecian y describen de mejor manera en los
resultados y discusión)
RECOMENDACIONES
➢ Es indispensable el uso del mandil, guantes, mascarilla y cofia para cada práctica
➢ Leer la guía de la práctica con anticipación para tener conocimientos de cómo se
desarrollará y no cometer errores en el transcurso de esta.
➢ Manejar los equipos bajo la supervisión de la persona encargado del laboratorio,
con el fin de evitar el daño de algunos de los materiales y equipos.
➢ Dejar limpia el área en la que se ha trabajado y claro dejar cada material en el
estado que fue entregado.
8. CUESTIONARIO
1. Describa las principales características de los microorganismos
observados.
Amebas Es un protozoo caracterizado por su forma
cambiante (carece de pared celular),
habita en estanques y pequeños lagos,
por su movimiento ameboide a base de
pseudópodos, que también usa para
capturar alimentos a través del proceso
llamado fagocitosis.
Los elementos más reconocibles en la
ameba son el núcleo y la vacuola contráctil
que emplea para mantener la presión
osmótica.
Algas Se encontraron algas con cloroplastos, se
trata de prosistas que en general viven en
ambientes muy húmedos o en el agua. La
coloración de las algas es muy variada y
depende de los pigmentos presentes en
los plastos. Así pues, la clorofila es de
color verde, la ficoeritrina roja, la
fucoxantina parda, el caroteno naranja, la
ficocianina azul y la zeaxantina amarilla.
Volvox Se trata de un género de algas, que suele
formar colonias o cenobios de forma
esférica y hueca, rodeados por células
superficiales biflageladas y unidas entre sí
por conexiones citoplasmáticas. En el
interior de la colonia existen múltiples
oosporas. Habita en aguas ricas en
oxígeno.
(EcuRed, 2016)
2. ¿Cuáles son los fundamentos teóricos del microscopio electrónico de
transmisión y el microscopio óptico de barrido?, compárelos con los
fundamentos del microscopio óptico.
Microscopio Electrónico de Transmisión (MEET) Microscopio Electrónico de Barrido (MEB)
permite la observación de muestra en cortes ultrafinos. Un TEM Crea una imagen ampliada de la superficie de un objeto. No es
dirige el haz de electrones hacia el objeto que se desea necesario cortar el objeto en capas para observarlo con un SEM,
aumentar. Una parte de los electrones rebotan o son absorbidos sino que puede colocarse en el microscopio con muy pocos
por el objeto y otros lo atraviesan formando una imagen preparativos. El SEM explora la superficie de la imagen punto
aumentada del espécimen. Para utilizar un TEM debe cortarse por punto, al contrario que el TEM, que examina una gran parte
la muestra en capas finas, no mayores de un par de miles de de la muestra cada vez. Su funcionamiento se basa en recorrer
ángstroms. Se coloca una placa fotográfica o una pantalla la muestra con un haz muy concentrado de electrones, de forma
fluorescente detrás del objeto para registrar la imagen parecida al barrido de un haz de electrones por la pantalla de
una televisión. Los electrones del haz pueden dispersarse de la
aumentada. Los microscopios electrónicos de transmisión muestra o provocar la aparición de electrones secundarios. Los
pueden aumentar un objeto hasta un millón de veces. electrones perdidos y los secundarios son recogidos y contados
por un dispositivo electrónico situado a los lados del espécimen.
Cada punto leído de la muestra corresponde a un píxel en un
monitor de televisión. Cuanto mayor sea el número de
electrones contados por el dispositivo, mayor será el brillo del
píxel en la pantalla. A medida que el haz de electrones barre la
muestra, se presenta toda la imagen de la misma en el monitor.
Los microscopios electrónicos de barrido pueden ampliar los
objetos 200.000 veces o más. Este tipo de microscopio es muy
útil porque, al contrario que los TEM o los microscopios ópticos,
produce imágenes tridimensionales realistas de la superficie del
objeto.
Microscopio óptico
(Ojeda, 2013)
9. ANEXOS
Posible euglena observada
con el lente de 40x en la
muestra de agua empozada
de otro mesón
10. BIBLIOGRAFÍA
➢ EcuRed. (4 de Julio de 2016). EcuRed. Obtenido de Microorganismos en
agua estancada:
[Link]
➢ IQB. (2017). USO ADECUADO DEL MICROSCOPIO . IQB, 12-14.
➢ Montalvo. (20 de Junio de 2013). Slideshare. Obtenido de Guía para el
uso del microscopio óptico: [Link]
para-el-uso-del-microscopio-optico
➢ Ojeda. (5 de Agosto de 2013). Hipertextos del área de Biología . Obtenido
de Microscopía electrónica :
[Link]
➢ Ramírez. (12 de Marzo de 2015). El universo bajo el microscopio .
Obtenido de La Ameba:
[Link]
[Link]
➢ RENA. (14 de Julio de 2014). Ecured. Obtenido de Microscopio óptico:
[Link]
➢ Ríos. (20 de Junio de 2013). Microscopía. Obtenido de El Microscopio :
[Link]
➢ Romero. (9 de Noviembre de 2015). Scribd. Obtenido de Algas del agua
estancada: [Link]
Estancada
➢ Suárez. (23 de Marzo de 2010). Blogspot. Obtenido de PRACTICAS DE
LABORATORIO DE FITOPATOLOGIA: [Link]
[Link]/2010/03/[Link]
➢ Vizcaíno. (13 de Septiembre de 2015). Taringa. Obtenido de La vida
oculta en un agota de agua : [Link]
educacion/15465902/[Link]
