Un fago filamentoso M13

M13 es un ejemplo de un fago filamentoso y es completamente diferente en

estructura de lambda. Adems, la molcula de ADN M13 es mucho ms
pequeo que el genoma de lambda, siendo slo 6704 nucletidos de longitud.
Es circular y es inusual en que consiste enteramente de ADN de una sola
hebra. El menor tamao de la molcula de ADN M13 significa que la habitacin
se dispone de un menor nmero de genes que el genoma de lambda. Esto es
posible porque la cpside M13 se construye a partir de mltiples copias de slo
tres protenas (que requieren slo tres genes), mientras que la sntesis de la
cabeza-y-cola estructura lambda implica ms de 15 protenas diferentes.
Adems, M13 sigue un ciclo de infeccin simple que lambda, y no necesita
genes para la insercin en el genoma husped.
La inyeccin de una molcula de ADN M13 en una clula de E. coli se produce a
travs de la pilus, la estructura que conecta dos clulas durante la conjugacin
sexual. Una vez dentro de la clula de la molcula de una sola cadena acta
como molde para la sntesis de una cadena complementaria, lo que resulta en
el ADN de doble cadena normal. Esta molcula no se ha insertado en el
genoma bacteriano, sino que se replica hasta ms de 100 copias estn
presentes en la clula. Cuando la bacteria se divide, cada clula hija recibe
copias del genoma del fago, gnrale contina replicndose, manteniendo as
su nmero total por clula. Como se muestra en la figura 2.11c, fagos
partculas se ensamblan de forma continua y en libertad, alrededor de 1000
nuevos fagos que se producen en cada generacin de una clula infectada.
Varias caractersticas de este fago M13 hacen atractivo como un vector de
clonacin. El genoma es de menos de 10 kb de tamao, bien dentro del
intervalo deseable para un vector potencial. Adems, la forma replicativa de
doble hebra (R1) del genoma de M13 se comporta muy parecido a un plsmido,
y se puede tratar como tal para fines experimentales. Se prepara fcilmente a
partir de un cultivo de clulas de E. coli infectada y puede ser presentada de
nuevo por transfeccin. Lo ms importante, los genes clonados con un vector
basado en M13 se pueden obtener en la forma de ADN de una sola hebra.
Versiones de una sola cadena de genes clonados son tiles para varias
tcnicas, en particular en la secuenciacin del ADN y mutagnesis vito. La
clonacin en un vector de M13 tambin se utilizan de presentacin de fagos,
una tcnica para identificar pares de genes cuyos productos proteicos
interactuar uno con el otro.
virus como vectores de clonacin para otros organismos
La mayora de los organismos vivos estn infectadas por virus y no es
sorprendente que ha habido un gran inters en la posibilidad de que los virus
podran usarse como vectores de clonacin para los organismos superiores.

Esto es especialmente importante cuando se recuerda que los plsmidos no se

encuentran comnmente en los organismos distintos de bacterias y levaduras.
Varios virus eucariotas se han empleado como vectores de clonacin para la
aplicacin especializada: por ejemplo adenovirus humanos se utilizan en la
terapia gnica, los baculovirus se usan para sintetizar importantes protenas
farmacuticas en clula de insecto, y caulimovirus y geminivirus se han
utilizado para la clonacin en las plantas. Estos vectores se discuten con ms
detalle en el Captulo 7.