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Prof. Encargado.
Licdo. Pedro Lpez
Asistente tcnico
Presentado por:
Br. Ana Karina Rojas
C.I: 22-998-942
MARCO TERICO.
Aislamiento de bacterias: separacin de un determinado microorganismo del
resto que le acompaan.
Agar XLD: agar ms nutrientes, usado para cultivar microorganismos o pequeas
plantas como la briofita Physcomitrella patens.
Cultivos puros: contienen un solo tipo de microorganismo, obtenidas de colonias
aisladas por resiembras (pase de un medio de cultivo a otro).
Pipeta: instrumento de laboratorio que se utiliza para medir o transvasar
pequeas cantidades de lquido. (Suelen ser de vidrio).
Placa de Petri: recipiente redondo de cristal o plstico con una cubierta de la
misma forma pero algo ms grande de dimetro, para poder cerrar el recipiente.
Siembra para aislamiento: se utiliza parar obtener cultivos puros en placas de
petri, que contienen medios de cultivos slidos.
Siembra para inoculacin: consiste en tomar una pequea porcin de la muestra
y diluirla para dispersarla y que crezca con ms facilidad en el medio de cultivo
(lquido o solido).
Aislar Bacterias puras del tracto bucal, utilizando caldos y agar lactobacilos.
Identificar
bioqumicamente
las
bacterias
puras
producto
de
las
MATERIALES Y MTODOS
Practica 1.- Aislamiento de bacterias puras del tracto bucal, utilizando caldos y
agar lactobacilo.
Se realiz un cepillado bucal y se introdujo el cepillo en una suspensin de
buffer fosfato salino, agitando por aproximadamente de 2 a 4 minutos inoculando
un mililitro, usando una pipeta de 2 ml en medios de cultivo con caldo lactobacilo y
se encub a 37C por 24 horas.
Posteriormente, se realiz un estriado en placas de Petri con agar lactobacilo y
encubados a 37 C por 24 horas, luego de ello se seleccionaron tres colonias las
cuales fueron sembradas con un aza metlica estril en tubos de ensayos con
caldo lactobacilos e encubados a 37 C por 24 horas, este procedimiento se
realiz varias veces hasta obtener colonias puras.
Finalmente estos fueron sembrados por puncin y estriado utilizando una aguja
metlica estril en tubos de ensayo con agar inclinado TSI (hierro tres fosfato) e
encubado a 37 C. Identificando bioqumicamente las colonias sembradas y
comparadas con la bibliografa correspondiente (Ver figura 1).
Se agito en Buffer
fosfato salino 2 a 4 min
2 ml en Caldo
Lactobacilos
37C X 24 horas
Cepillado de la
boca
37C X 24 horas
.
C1
C2
C3
Caldo lactobacilos
37C X 24 horas
Agar lactobacilos
37C X 24 horas
Caldo lactobacilos
37C X 24 horas
37C X 24 horas
Se vierte 1 ml
de H2O
residual
Caldo Lauril
Sulfato
37C X 24 horas
C1
37C X 24 horas
C2
C3
37C X 24 horas
37C X 24 horas
37C X 24 horas
37C X 24 horas
Se vierte 5 ml
de H2O
residual
Caldo enriquecido
selenito cistina
37C X 24
horas
Agar XLD
C1
37C X 24
horas
C2
37C X 24
horas
Efluente de
Aguas tratadas
Pipeta de 10 ml
1 ml
10 ml
1 ml
Buffer fosfato
salino
9 ml
1 ml
Encuban a
37C x 24 h.
10 ml
10 ml
10 ml
10 ml
10 ml
10 ml
Encuban a
44C x 24 h.
RESULTADOS Y DISCUSIN
pueden
ser
Lactobacilos
casei,
Lactobacilos
leichmannii,
Figura 7.- Tubos de ensayo con crecimiento de bacterias en caldo Lauril sulfato.
C1
C2
C3
Figura 9.- Prueba bioqumica en agar inclinado TSI con muestras de agar
Lactobacilo y agar Lauril sulfato.
C1
C2
Figura 10.- Prueba bioqumica en agar inclinado TSI, con muestras de agar XLD.
NMP/100
Coliformes
10 ml
1 ml
0.1 ml
ml
37C
3/3
3/3
3/3
>1100
Totales
44C
3/3
3/3
3/3
>1100
Fecales
CONCLUSIN.
En conclusin puedo agregar que en el tracto bucal las placas de agar lactobacilo
obtuvo presencia de bacterias que posiblemente sean Lactobacilos casei,
Lactobacilos leichmannii, Lactobacilos plantarum o Enterococcus faecalis segn
The Himedia manual (1998).
En las bacterias puras de aguas tratadas, utilizando caldos y agar lauril sulfato
crecimiento de colonias de una variedad de bacterias .Tubos de ensayo con
crecimiento de bacterias en caldo Lauril sulfato se observ presencia de gas, lo
cual indico digestin bacteriana, con depsitos de sedimento en el fondo
comparando estos resultados con The Himedia manual (1998), que posiblemente
podran ser Enterobacter aerogenes, Escherichia Coli, Salmonella Typhimuriun,
Staphylococcus aureus o Enterococcus faecalis.
En las placas de agar XLD resultado la observacin del crecimiento de colonias de
color amarillo las cuales son posibles Proteus vulgaris, Proteus mirabilis
y la
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS.
http://www.pomif.com/pages/.../
aislamientos.
Consulta
ANEXOS.