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Normas para recoleccion, conservacin y envio de las muestras de heces: a. Las muestras de heces diarreicas deben ser recogidas en cajas de material plstico o metlicas u otro recipiente apropiado y enviarlo rpidamente al Laboratorio. b. Solo cuando no sea posible recoger las muestras de heces, se recurrir al Hisopado rectal, aunque no se debe esperar con el mismo la recuperacin mxima de enteropatgenos (Salmonellas, Shigellas etc.). Tcnica del Hisopado Rectal: 1. Introducir un hisopo tamponado en el recto e imprimir movimientos de rotacin, recoger la mayor cantidad posible de material de las paredes de la ampolla rectal. 2. Introducir el hisopo en un medio de transporte de Cary-Blair romper la parte del aplicador que sobresale del borde del tubo y cerrar hermticamente. 3. Rotular el tubo y conservarlo a temperatura ambiente hasta el momento del envio al Laboratorio. La conservacin antes del envio no debe durar ms de 24 horas. Notas: Si no es posible el envio inmediato al Laboratorio de las heces diarreicas, deben ser refrigeradas, la refrigeracin no debe durar ms de 24 horas.
Hisopado Rectal 2. Examen directo: Macroscpico: color, aspecto, consistencia Microscpico: Leucocitos fecales (Azul de Metileno 1%) Descartar Parsitos. Heces Solucin Salina Tamponada
18 24 h. 37C Aerobiosis Medios selectivos Diferenciales: MK, SS, WB, CIN, MK (sorbitol)
Oxidasa + Purificar en AS o BHIA( aprox. 6 colonias) 0-F, Manitol, Ornitina Caldo NaCl 0% y 6% * MK Lac + Purificar en AS o BHIA(aprox. 6 colonias) 18 24 h OX- Kliger, citrato Compatible con 37C E.coli 18 24 h (tipificar)
Lac Purificar en AS (aprox. 6 colonias) Aerobiosis OX- Kliger, Urea, Mot. Compatible con Salmonella 18 24 horas o Shigella(complementar * SS Lac Purificar en AS(aprox. 6 con otras pruebas y/o tipi colonias) OX- Kliger, Urea, Mot. Ficar. * CIN Colonias rojas Purificar en AS o BHIA OX- Kliger, Urea, Mot. 37C 22C MK (sorbitol) Sorbitol Purificar en AS o BHIA OXTipificar *
Para buscar Mycobacterium criptosporidium o Isospora se preparan frotis para teir con coloraciones cido alcohol resistentes. Ejm. Ziehl-Neelsen
Heces
Cary-Blair Campy-Bap
42C 72 h
colonias compatibles
Oxidasa Catalasa
HEMOCULTIVO. I Pre-anlisis II Anlisis 1. Toma de Muestra 1.1 Asepsia del sitio de puncin 1.2 Antes del alza febril. 1.3 Puede tomarse con anticoagulante. 1.4 Ms o menos 10% de sangre en relacin con el Medio de Cultivo. 2. Cultivos: Investigar Aerobios y Anaerobios Tripticasa Soya. BHI Wilkins-Chalgrens Tioglicolato.
Subcultivos y frotis Incubacin: Anaerobiosis: WK 48 72 horas 37C Incubacin: Microaerofilia: AS y ACH Aerobiosis: MK 24 48 horas 37 C 1. Valorar la flora, reconocer las colonias, realizar pruebas bioqumicas y antibiograma de la bacteria involucrada. III Post-Anlisis........ Notas: Deben realizarse cultivos seriados. Tomar la muestra por duplicado de cada antebrazo Se recomienda mantener la muestra por lo menos cinco das. serolgicas y AS ACH MK WK
ABREVIATURAS Ssf: AS: MS: TP: TH: SS: TM: IF: CIN: GN: ox-: Ox+: solucin salina fisiolgica agar sangre agar manitol salado Telurito de potasio Todd-Hewitt agar salmonella shigella Thayer Martn Inmunofluorescencia Cefsulodin Ingasan Noviocina Caldo gramnegativo gramnegativos) Oxidasa negativa. Oxidasa positiva.