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Universidad Técnica

Particular de Loja
Bioquímica y Farmacia
Bacteriología clínica

Identificación de Enterobacterias
Coprocultivo

Elaborado por: Mishelle Sarango


Enterobacterias
DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO DE LA ENFERMEDAD
DIARREICA AGUDA (EDA). COPROCULTIVO

DEFINICIONES:

• Diarrea Aguda. Incremento en el numero o volumen de las heces de 73


horas o menos de la duración

• Diarrea crónica. persistente. Incremento en el numero o volumen de las


heces de mas de 14 días de duración

• Disentería. Historia de moco o sangre en las heces con tenesmo o dolor


al defecar y la temperatura axilar de 38,5 °C

• Gastroenteritis. Diarrea liquida de color amarillo verdosa o no,


acompañada con vomito y fiebre en algunas oportunidades

• Fiebre entérica. Fiebre, cefalea, dolor abdominal, bradicardia,


esplenomegalia y leucopenia.
DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO
COPROCULTIVO

ETAPA PRE-ANALÍTICA ETAPA ANALÍTICA


Los antecedentes del paciente y los factores La validez de los resultados del diagnóstico
epidemiológicos son útiles para orientar el microbiológico depende entre otros factores:
diagnóstico etiológico. Entre éstos se deben
considerar los datos:
• NOMBRE/ EDAD • SEGUIR LAS NORMAS DE OBTENCIÓN Y
• OCUPACIÓN/ RESIDENCIA TRANSPORTE DE LA MUESTRA
• MANIFESTACIONES CLÍNICAS
• ESTADO INMUNOLÓGICO • LA SOLICITUD DEL ESTUDIO, SEA
• PROCEDENCIA (HOSPITALIZACIÓN O DE LA
ACOMPAÑADA DE UN BREVE INFORME
COMUNIDAD)
• TTO. PREVIOS CON ANTIMICROBIANOS CON LOS DATOS CLÍNICOS Y
• ENTRE OTROS EPIDEMIOLÓGICOS
ETAPA ANALÍTICA: OBTENCIÓN DE LA MUESTRA DE
HECES

La muestra de heces o Utilizar un envase de boca


hisopado rectal debe ser ancha, tapa hermética,
recolectada durante el preferiblemente estéril, en
Recomendaciones previas:
período agudo de la caso de muestras líquidas se
enfermedad, antes de iniciar recomienda recolectarla en
el tto. antimicrobiano. un envase para de orina.
ETAPA ANALÍTICA: OBTENCIÓN DE LA MUESTRA DE
HECES

El paciente debe orinar antes


Higienizar la zona perianal y de la defecación y proceder a
RECOLECCIÓN DE LA
de los genitales externos con la limpieza intima tras la
MUESTRA:
agua y jabón. micción y antes de proceder a
la defecación
ETAPA ANALÍTICA: OBTENCIÓN DE LA MUESTRA DE
HECES

Si la muestra no se cultiva de
Transporte de las heces debe inmediato, antes de las dos
TRANSPORTE: realizarse en el menor tiempo horas, se recomienda
posible colocarla en un medio de
transporte: Cary Blair.
PROCEDIMIENTO PARA EL CULTIVO DE HECES
• 5- 10 mL he ce s líquidas

• HECES (1 g) + 3 mL de APA: AGUA


solucion salina estétil PEPTONADA
ALCALINA
VIBRIO
EXÁMEN DIRECTO

1.- EXAMEN MACROSCÓPICO


• CONSISTENCIA
• VOLUMEN
• ASPECTO
• COLOR
• OLOR
• PRESENCIA O AUSENCIA DE MOCO Y SANGRE
EXÁMEN DIRECTO
2.- EXAMEN MICROSCÓPICO

A. Coproparasitario B. Técnica de Sudán III C. Sangre oculta en heces

• Huevos. • Grasas: gotas de color naranja. • Confirmar sangrado.


• Parásitos. • 60 a más: esteatorrea • Hemorroides, úlceras,
neoplasias.

D. Detección de leucocitos fecales:


1. Colocar una pequeña cantidad de moco o de heces en una lámina.
2. Mezclar con 2-3 gotas de azul de metileno al 1%.
3. Cubrir con una laminilla y esperar 2 a 3 minutos con la finalidad de obtener una buena
coloración nuclear.
4. Observar al microscopio con los objetivos (10X y 40X).
INTERPRETACIÓN DEL
EXÁMEN MICROSCÓPICO

1. Grasas, fibras, hidratos de carbono, leucocitos:

• 5 o más leucocitos por campo microscópico: sugiere


la presencia de un agente enteroinvasor.

2. Ausencia de células inflamatorias: sugiere la presencia


de un agente toxigénico
REVISIÓN DE LOS
CULTIVOS
CALDO SELENITO: MEDIO ENREQUECIMIENTO
ENTEROBACTERIAS

• Peptona: aporta los nutrientes


necesarios para el adecuado desarrollo
bacteriano.
• Lactosa: hidrato de carbono
fermentable
• Selenito de sodio: inhibe la flora
Grampositiva y la mayoría de la flora
entérica excepto Salmonella spp.
durante las primeras 8-12 horas de
incubación
REVISIÓN DE LOS
CULTIVOS
AGAR XLD (xilosa lisina desoxicolato): MEDIO
SELECTIVO

A
C

• Desoxicolato de sodio: inhibe los


microorganismos grampositivos.
• Aislamiento y diferenciación de
Salmonella y Shigella spp. de otros
bacilos entéricos gramnegativos
Capacidades diferenciales del agar xilosa-lisina-desoxicolato (XLD) para los
bacilos gramnegativos fermentadores de lactosa (p. Ej., E. coli, flecha A), no
fermentadores de lactosa (p. Ej., Shigella spp., Flecha B) y productores de H2S
(por ejemplo, Salmonella spp., flecha C).
REVISIÓN DE LOS
CULTIVOS
Agar Salmonella-Shigella (SS): MEDIO
SELECTIVO

• La lactosa es el hidrato de carbono


fermentable.
• El tiosulfato de sodio: permite la
formación de H2S que se evidencia por
la formación de sulfuro de hierro. Colonias incoloras: no fermentan lactosa
Colonias incoloras: no fermentan lactosa
H2S: + H2S: -
DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

ETAPA POST-ANALÍTICA • EXÁMEN DIRECTO: tinción Gram


El informe al médico tratante debe incluir: • CULTIVO: microorganismo aislado
• CULTIVOS NEGATIVOS: reportar “No hubo
• La identificación del paciente crecimiento bacteriano en 48 ( ó 72) horas de
• Tipo de muestra recolectada incubación”
• Estudio microbiológico realizado • REPORTE DE ANTIBIOGRAMA: en casos en los que
• Fecha de recepción de la muestra aplique.
• Emisión de los resultados • EN OBSERVACIONES: se debe se ñalar la lista de
• Cualquier otro dato que el bioanalista m/o investigados y otros datos de interés.
considere necesario. • FIRMA
BIBLIOGRAFÍA

• Bailey & Scott. (2014). General Principles in Clinical. Diagnostic Microbiology (13th ed.). Mosby Inc.

• Caroll, K., Morse, S., Mietzner, T., Butel, J. ;, & Brooks, G. (2011). Microbiología médica (McGrawHill). Mexico.

• Murray, Rosenthal, & Pfaller. (2017). MICROBIOLOGÍA MÉDICA. Elsevier (8th ed.).
https://doi.org/10.1017/CBO9781107415324.004

• Prats, G. (2006). Microbiología clínica. (Editorial Medica Panamericana, Ed.). Barcelona.

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