Extracción y caracterización de alcaloides de Brugmansia sp (solanáceae) y de C.

americana
Leidy Johanna Madroñero1 113870 Luz Adriana Pedraza Herrera1 113812 1 departamento de Biología- universidad Nacional de Colombia

Objetivos: y y Realizar extracción de alcaloides a partir de flores de Brugmansia sp y de Curatella americana Identificar los alcaloides extraídos mediante pruebas con reactivos de precipitación y por cromatografía de capa delgada.

Introducción: La palabra alcaloide proviene Etimológicamente del árabe alkaly y del griego eidos aspecto, (de aspecto alcalino), los alcaloides son compuestos nitrogenados derivados del metabolismo secundario de las plantas en estado libre, como sales y como N-óxidos, generalmente son sintetizados a partir de aminoácidos y reaccionan como bases frente a los ácidos. Los alcaloides se dividen en cuatro clases: Alcaloides verdaderos, Pseudoalcaloides, Alcaloides imperfectos. Protoalcaloides,

La función que cumplen los alcaloides en las plantas aún no es clara, sin embargo se piensa que úeden intervenir en procesos como de desecho o almacenamiento de nitrógeno sobrante o no metabolizado, también se los ha asociado con procesos de protección a la planta de depredadores debido a su sabor amargo (Arango G. 2008); por otra parte se ha demostrado que los alcaloides pueden servir como reguladores del crecimiento, se ha visto que los alcaloides derivados de la putrescina se incrementan notablemente durante la germinación de algunas plantas como la cebada, cuando se encuentran en suelos deficientes de potasio (Evans WC. 2000). El fundamento de la extracción se basa en el carácter básico de los alcaloides y en el hecho de su existencia en las plantas como sales de ácidos orgánicos o como combinaciones solubles de otras sustancias , entre los principales se encuentran: los ácidos tíglico, 3-metil butírico, benzoico, cinámico, hidroxifenil propiónico, trópico y tricarboxílicos, y además con otro tipo de sustancias como taninos y fenoles (París M. 1981). Para la extracción de alcaloides se debe tener en cuenta que debido a que los alcaloides son compuestos de carácter básico, su solubilidad en los diferentes solventes varía en función del pH, es decir según el estado en que se encuentre sí están en forma de base, son solubles en solventes orgánicos no polares como benceno, éter etílico, cloroformo, diclorometano, acetato de etilo. En forma de sales, son solubles en solventes polares agua, soluciones ácidas e hidroalcohólicas. Para la detección de alcaloides se utilizan reactivos como: la solución de yodo-yoduro de potasio (Reactivo de Wagner), mercurio tetrayoduro de potasio (reactivo de Mayer), tetrayodo bismuto

solución de ácido pícrico (reactivo de Hager). p-dimetilamino benzaldehido (reactivo de Ehrlich).de potasio (reactivo de Dragendorff). adicionar NH4OH extraer con H2SO4 tomar fase orgánica agregar CHCl3-éter etlílico transvasar el filtrado a un embudo de decantación deshidratar con sulfato de sodio-anhidro agitar y calentar filtrar distribuir en 5 tubos de ensayo más un vial concentrar y realizar las pruebas de identificación: reactivos de precipitado y cromatografía Resultados: Reactivos precipitado/extracto Reactivo de mayer Reactivo de hager Reactivo de valser Ácido tánico Reactivo de bouchardat Reactivo de dragendorff de Flores brugmansia (-) (-) (-) (-) (-) (-) de Curatella americana (-) (-) (-) (-) (-) (-) Observaciones Hojas de Brugmansia* No hubo formación de (+) precipitado No hubo formación de (+) precipitado No hubo formación de (+) precipitado No hubo formación de (+) precipitado No hubo formación de (+) precipitado No hubo formación de (+) precipitado Tabla 1. Pruebas de identificación de alcaloides *resultados del grupo que trabajó con hojas de brugmansia. ácido sílico túngtico (reactivo de Bertrand). . 2008) Metodología: pesar el material vegetal tomar la fase acuosa adicionar NH4OH extraer con CHCl3. nitración de alcaloides (reacción de Vitali-Morin se usa para alcaloides en estado base) (Arango G.

primero. estos precipitados. ahora en la fase acuosa. Debido a que los alcaloides en las plantas se encuentran en forma de sales de ácidos orgánicos o como combinaciones solubles de otras sustancias (Evans et al. Así como también se usaron pruebas con reactivos que generan . basadas en la capacidad que tienen sustancias nitrogenadas como los alcaloides. Cromatografía de capa delgada. después de la alcalinización y adición del solvente que. se realizaron pruebas de precipitación. La adición de ácido HCl. mercurio. Los resultados obtenidos para las siete pruebas de identificación realizadas fueron negativos. además de agitar. en soluciones acuosas. (Maldoni B. el siguiente paso fue. para su extracción fue necesario. se debe calentar la muestra. la capacidad que tienen los alcaloides de reaccionar como bases frente a la adición de un ácido y segundo. en estado de base. Muestra los resultados de la identificación de los alcaloides realizada para los extractos de C. agregando H2SO4.éter etílico. en un solvente orgánico. son sales complejas (Arango GJ. tugsteno y otros . esto ayuda a extraer los alcaloides presentes. teniendo en cuenta dos principios relacionados con los alcaloides. ya. alcalinizar con NH4OH. como primer paso. De esta manera nuestros alcaloides quedaron. Ya con los alcaloides en su estado base. no hubo formación de precipitado con ninguno de los reactivos usados. La tabla 1. tetrayodo bismuto de potasio (reactivo de Dragendorff). 2008). formando precipitados. y el reactivo de bouchardat. Discusión de resultados: En la práctica realizada se buscó obtener los alcaloides de Brugmansia sp y de Curatella americana mediante extracción ácido-base. 200). las diferencias en la solubilidad de los alcaloides en su estado de base. o en su estado de sal. Se usaron reactivos yodados en dónde los alcaloides froman complejos con los metales como: mercurio tetrayoduro de potasio (reactivo de Mayer). americana y de la muestra control Brugmansia sp.Imagen 1. Para un mejor rendimiento en la extracción se recomienda. pasarlos a sales. 1991). los alcaloides pueden solubilizarse en solventes orgánicos como el CHCl3. en estado de sal (extractos ácidos) para combinarse con el yodo y metales pesados como bismuto. tenía como objetivo disolver los alcaloides en una solución acuosa ácida (HCl 5%) para que con la adición de sales de metales pesados pudiera formarse los precipitados. reactivo de valser.

es que se haya cometido algún error durante el procedimiento. no calentamos la muestra patrón. Sin embargo. 1997) Para la extracción realizada con flores de Brugmansia sp. Lo reportado en la bibliografía contrasta totalmente con los resultados negativos obtenidos. el calentamiento de la muestra después de agregar la base y el solvente orgánico así como la separación de las fases. propanol y butanol y para la definición de bandas se usan la dietilamina o el amoniaco (MacCalley. Debido a que nuestra extracción no se produjo la extracción de alcaloides. no son específicas y pueden darse falsos positivos debido a la contaminación con proteínas. no fue posible tampoco observar la presencia de estas manchas para brugmansia sp. las flores son. 1991). El patrón nos indica que sí en nuestros extractos tenemos ese compuesto. este debería migrar a una distancia igual (RFs iguales) a la del patrón usado. . según (Arteaga et al. así como falsos negativos porque algunos alcaloides forman complejos que no precipitan (Martínez A. tabla 2. no se ha reportado la presencia de alcaloides de ningún tipo. para ajustar la polaridad pueden usarse alcoholes como metanol.40 y 0-45 (Grajales G. por qué. acetona. 2002). el patrón usado fue la atropina. acetato de etilo. pero que no fue eluída por la fase móvil. es necesario tener en cuenta que estas reacciones. y es también posible que hayamos descartado la fase acuosa. En relación a Curatella americana. principalmente de escopolamina y de atropina. así que nuestros resultados fueron congruentes con la bibliografía consultada. 2008) además de separación de otros alcaloides presentes. encontrándose también apoescopolamina y 6 hidroxi 3 tigloiloxitropano. y Reineckato de amonio para detectar presencia de de alcaloides de amonio cuaternario y N-óxido. Con respecto a la atropina se detectó la aparición de una mancha anaranjada. de nuestra extracción. por lo tanto lo más probable. camarinas. que se encuentran distribuidos en varios órganos de la planta en diferentes proporciones. Sin embargo Brugmansia es una planta que se caracteriza por su alto contenido de Alcaloides derivados del tropano. Para la fase móvile se usan solventes como el cloroformo. En nuestra extracción. 1993) (ver anexo1. orgánica y acuosa son dos pasos críticos y dónde se corre un alto riesgo de equivocarse (Maldoni B. esto pudo haber sido debido a que la fase móvil perdió sus propiedades al estar expuesta a una constante apertura de la cámara. debido a que en esta planta se han reportado por cromatografía la presencia de bandas a RFs correspondientes a escopolamina entre 0.precipitados cristalinos como la solución de ácido pícrico (reactivo de Hager) y otros reactivos como el ácido tánico. (Alexandre et al. Otra de las pruebas que se realiza para la identificación y separación de los alcaloides obtenidos es la cromatografía en capa delgada que una herramienta amplio uso para evaluar la presencia de estos compuestos. todos los resultados fueron negativos. esto implica que la cromatografía realizada no fue efectiva.) el órgano de la planta en donde hay un mayor contenido de alcaloides. 1980). alfa-benzopironas y otros compuestos nitrogenados que dan positivo con estos reactivos. no se logró una extracción exitosa. La fase estacionaria empleada para la separación de alcaloides más común es la gel de sílice G. cuando se hace el revelado con dragendorff. Esto explicaría. 1999 y El-azizi et al. nuestro extracto problema. en dónde deberían mostrarse la presencia de varias manchas. se determina como positivo para alcaloides cuando hay la presencia de manchas anaranjadas. después de la adición del ácido.

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Órgano de la planta Alcaloides totales expresados como % de atropina Hojas 0. 1993) . Distribución de los alcaloides en Órganos vegetales (Arteaga et al.34 Tallos 0.16 Semillas 0.Anexo 1.38 Tabla 2.24 Flores 0.15 Frutos (cápsulas) 0.

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