Importancia del mantenimiento en

cromatografa gaseosa.
Resolucin de problemas tpicos en GC
y GC/MSD
Jaume Santamaria
Especialista de producto GC-MS

Objetivo del cromatografista:

La Obtencin de Resultados Cromatogrficos Robustos.
Cmo?
Tener un buen mtodo cromatogrfico
Realizar un Mantenimiento adecuado
Tener un Excelente cromatgrafo

Cromatografa
Robusta

Buenas Prcticas para la Creacin de un Mtodo

Cromatogrfico Robusto:
1. Optimizacin del inyector S/SL
- El inyector es la fuente
de muchos problemas de
un sistema GC o GC-MS
-Requiere optimizacin
-Usar programa FlowCalc

Diagrama de flujo en modosplit:

Problema de Sobrecarga del liner
Si la muestra vaporizada no cabe
en el liner :
1.Prdida de repetibilidad
cuantitativa

(SEPTUM)
VALVULA DE PURGA
FLUJO TOTAL

2. Contaminacin (carryover).

= GAS PORTADOR

VALVULA DE SPLIT

= MOLECULAS DE MUESTRA
= MOLECULAS DE
DISOLVENTE

(ENTRADA)
VALVULA DE PURGA

Evitar la
sobrecarga del
inyector

Una inyeccin de disolvente de

gran expansin de volmen puede
provocar una sobrecarga del liner
del portal de inyeccin
Esto puede resultar en la prdida de
muestra por la VALVULA DE PURGA
as como contaminacin de la
lnea de gas portador entrante.
COLUMNA

Tabla de los Volmenes de Vaporizacin de los Disolventes

ms utilizados
Los volmenes de vapor son valores aproximados del volumen que ocupa 1 l del disolvente con el inyector a
1bar de presin y 250C:
Disolvente (1l)
Isooctano
Hexano
Ciclohexano
Tolueno
Acetato de Etilo
Cloroformo
Isopropanol
Acetona
Cloruro de Metileno
Acetonitrilo
Metanol
Agua

Volumen de Vapor (l)

131
165
200
203
221
268
284
294
337
413
535
1198

Clculo aproximado del volumen de vapor para otras condiciones de Presin y Temperatura:

VP,T,Y = YVol.Iny V(1bar, 250C, 1l) [2/(1+Pbars) ] [(273+TC) /523 ]

La muestra vaporizada NO debe ocupar ms del 80% del volumen del liner

Inlet Liners
Utilizar un tipo de liner
adecuado a las condiciones
de trabajo

Diagnsticos Tpicos por Mala

Instalacin Columna:
Columna mal instalada en inyector: dar
problemas con picos no retenidos o del
principio del cromatograma.
Columna mal instalada en detector:
suelen dar ms bien problemas los picos del
final del cromatograma.

Modo de Inyeccin SPLIT (con divisin)

Flow
limiting frit

Total flow
control
loop

Septum nut

Septum
purge
regulator

Pressure
sensor

SPR

PS

104 mL/min

FS

Proportional
valve 1

3 mL/min
Column head pressure control loop

Flow
sensor

Si no se emplean tcnicas de focalizacin de

Trap

muestra, la relacin de split deber ser lo

suficientemente grande como para proporcionar
una inyeccin puntual (tiempo de barrido del
liner despreciable con respecto al ancho del
pico).
Mnimo Split ratio recomendado:
0.18- 0.25mm : 1:10 1:20
0.32mm : 1:8 1:15
0.53mm : 1:2 1:5

Septum purge vent

Split vent
Purge
valve
(open)

100 mL/min

Proportional
valve 2

Con un volumen de liner de 300-900 L se

recomienda un split flow de al menos unos 20
ml/min para efectuar una inyeccin puntual.

1 mL/min

Las frrulas de grafito/vespel se deben de

reapretar despus de utilizarlas por primera vez
(las de grafito slo no lo requieren)

Modo de Inyeccin splitless (sin divisin)

Inlet pressure control loop
Septum
purge
regulator

Septum nut

Flow
limiting frit

SPR

PS

4 mL/min

FS

Proportional
valve 1

3 mL/min
Septum purge vent

Pressure
sensor

Flow
sensor

En splitless para focalizar la muestra (introducida

lentamente en la columna) se deber:
trabajar con una temperatura inicial de horno 10-20 C
por debajo del punto de ebullicin del disolvente de la
muestra (no utilizar mezclas de disolventes). Si la
temperatura es demasiado baja (30-60C por debajo del
p.eb.) pueden deformarse los picos ms voltiles.
y/o bien, los puntos de ebullicin de los analitos estn
ms de 150 C por encima de la temperatura inicial de la
columna.

Trap

Split vent
Purge
valve
(closed)

Proportional
valve 2

0 mL/min

El empleo de disolventes no muy voltiles (como el

isooctano con p.eb. de 99C), permite acortar los ciclos de

enfriamiento al no tener que empezar a temperaturas
prximas a la ambiente.
En splitless con el tiempo se requerir cortar de 0.51m de columna para restablecer sus prestaciones.
1 mL/min

Vlvula en posicin cerrada (CLOSED)

Todo el flujo, excepto el de la purga de septum, va a la columna

La optimizacin fina (en intevalos 0.1 min) del tiempo de

inicio de la purga puede permitir reducir el tamao del
pico del disolvente

pg.: 8

Inyectores : Inyeccin splitless (sin divisin)

Cuando se requiere
Mxima Sensibilidad
Trabajar en modo
Splitless

Un tiempo de splitless insuficiente afectar a la sensibilidad y reproducibilidad del mtodo

El tiempo de splitless deber ser tanto mayor cuanto menor sea el flujo por columna, mayor el volumen

que ocupe la muestra vaporizada en el liner y cuanto mayor sea el volumen de ste, por tanto tambin
depende del tipo de liner usado.

pg.: 9

Cmo Aumentar el Volumen de Inyeccin?

Ventajas de la Programacin de Pulsos de Presin durante la Inyeccin
Mejorar lmites deteccin (poder inyectar volmenes mayores)

V = nRT / P (1 ul hexano a 250C y 1 atm ocupa 329 l)

Volumen splitless liner clsico: 250 ul / tapered/split: 800-900 ul.
Volmenes iny. mx. splitless liner clsico: 1 ul / tapered/split: 2 ul.
1 ul hexano a 250C y 5 atm ocupa 66 ul=> poder inyectar con EPC p.e. hasta 5ul

Transferencia ms rpida de muestra de inyector a columna

Posibilidad de mejorar la resolucin cromatogrfica.

Disminucin de la degradacin trmica

Incrementa la vida media del liner

Disminucin de la discriminacin

200 Kpa.
0.3 min.

Reduce la posibilidad de prdida de voltiles por la purga de septum.

Facilita la transferencia a la columna de los compuestos ms pesados.

Reducir la necesidad de empleo de la tcnica splitless

Al poder trabajar con relaciones de split mucho ms pequeas

f. col.= 0.5 split vent = 10 ===> relacin split 1:20
Se inyecta 6 veces ms
f. col.= 2.5 split vent = 8 ===> relacin split 1:3
Poder "ensuciar" menos el "liner" inyectando volmenes ms pequeos.

50 Kpa.
t

pg.: 10

Beneficios de la Inyeccin en modo

Splitless con Pulso de Presin

% Recuperacin
(on column=100)

% Recuperacin de cada pesticida usando inyeccin en modo

Splitless y On - column
120
110
100
90
80
70
60
50
40
30
20

on column

Correccin por ISTD

1
2
3
4
5
6
7

70 psi
pulsed
splitless

22.5 psi
pulsed
splitless

Metamidofos
Acefato
Azobenceno
Ometoato
Diazinon
Dimetoato
Clorpirifos

5
7
1
6
2
4
3

splitless

Tipo de Inyeccin

pg.: 11

Inyectores - Inyeccin Split a Pulsos

Seleccionar el modo
"Pulsed Split"
Introducir todos los
parmetros

Cuanto mayor es la presin del pulso:

se puede inyectar un mayor volumen de muestra
se efecta una inyeccin ms puntual.
menor degradacin trmica
menor discriminacin
se puede trabajar con relaciones de split ms pequeas (mejor
sensibilidad)*

* SI al terminar el pulso el Total Flow se

reduce a menos de 15-20mL/min. activar el
Gas Saver justo cuando termine el pulso.
pg.: 12

Control del Inyector para una Inyeccin Reproducible: jeringa y lavados

La muestra vaporizada NO debe ocupar ms del 80% del volumen del liner

Establecer el volumen de
inyeccin y los lavados de
jeringa
Pulsar Configure para
fijar el tamao de jeringa
Pusar More para fijar
la velocidad de la jeringa

Lavados microjeringa

Subir a 2 - 3 segundos para

disolventes con una cierta
viscosidad

Solvent A (wetting solvent): Metanol, Tolueno, Isooctano, o mezcla miscible con disolvente inyeccin. Evitar
dry solvents tipo: Acetona, Diclorometano o Hexano. Acortan la vida de la jeringa
Solvent B : disolvente de la muestra utilizado en la inyeccin
pg.: 13

Reproducibilidad en los Tiempos de Retencin:

Retention Time Locking, RTL

La posibilidad de reproducir de manera muy precisa los tiempos de retencin de un sistema

Agilent 6850, 6890 o 7890 a otros cromatografos Agilent 6850, 6890 o 7890 con el mismo
tipo y dimensiones de columna e incluso con distintos detectores o inyectores.
Con la misma configuracin de instrumento las desviaciones entre distintos GCs sern de tan slo

unas pocas centsimas de minuto.

Permite utilizar bases de datos de tiempos de retencin: se dispone de bases de pesticidas (567HP5ms), PCBs (209-HP5ms), organo-estnnicos (15--HP5ms), aromas (409-HP5ms), toxicolgica
(277-DB-17MS.), cidos grasos (37-DB-Wax y DB-23), VOCs ,...., y propias.
Facilita muy considerablemente la operacin con muestras complejas:
Mantenimiento de programaciones en el tiempo (condiciones de Integracin / tablas
calibracin / SIM con MSD)
Envejecimiento / Recortes de columna.

pg.: 14

2. Mantenimiento Bsico en GC (S/SL-FID).

Problemas habituales

Mantenimiento Inyector de Capilares

Operacin en modo split

Mantenimiento Bsico Inyector:"

Cambiar Peridicamente Septum
Cambiar Peridicamente Liner
Cambiar Peridicamente los Filtros de Gases
Cambiar /limpiar Gold Seal (y arandela de cierre)
Cambiar trampa del inyector
Sensor de presin

Vlvula Propocional

Sensor de
flujo

Filtros Purificacin

Regulador de
Purga de septum

Septum
Liner
Gold Seal

Septum Vent
Gases
Fuente de gas

Iny. de
capilares

Trampa

Vlvula
on/off
ON

Split Vent

Vlvula Proporcional

Flujo bajo
Flujo alto

Columna

Al Detector

pg.: 16

Mantenimiento de detector de Ionizacin de Llama (FID)

Detector FID
aire
Extremo columna capilar
(1-2 mm desde la parte superior del jet)

Jet

H2+ gas auxiliar

Recomendaciones:

No encender Llama si T<150C (evitar condensacin

agua)

Si se cambia a menudo de columna, mejor usar

frulas vespel-grafito
que 100% grafito (no dejan residuos)
Al intercambiar los jets de packed y capilares
apretar sin forzar en exceso
(si se cambia con frecuencia con el tiempo se deber
renovar)

Extremo de salida de la
columna

Limpiar el jet slo cuando se requiera

pg.: 17

Flujos habituales del FID

Gas Type
Carrier Gases
(H2, He, N)

Detector
Gases

Packed columns

Flow Range
10 60 ml/min

Typical Flow
30 ml/min
(1/8 column)
1.5 ml/min

Capillary columns

0.5 5 ml/min

Hydrogen

24 60 ml/min

40 ml/min

200 600 ml/min

400 ml/min

10 60 ml/min

30 ml/min

Air
Column + Makeup

(0.32 mm column)

Problemas habituales del FID

La llama se apaga o no se enciende

Comprobar los valores de los parmetros del detector (teclado)

Flows (Flujos)
Flame ON (llama encendida)
Detector ON (detector encendido)
Comprobar el jet
Comprobar el encendedor (ignitor)
Comprobar las conexiones de la columna
Comprobar las presiones de suministro de los gases
Comprobar el disolvente y el volumen de inyeccin

Ruido
Poca sensibilidad
Deriva

Slide 19

Resolucin de problemas de ruido del FID

Cerrar H2 y aire

Sigue
haciendo
ruido?

No

Comprobar/limpiar/sustituir:

Comprobar/limpiar/sustituir:

Conexin de interconexin o del colector

Filtros, trampas y gases

Colector y aislantes

Jet del FID

Interconexin del detector

Columna y sus conexiones

Tarjeta del detector

Inyector y fungibles

Problema elctrnico

Problema de contaminacin
Slide 20

Mantenimiento rutinario del FID

Controlar la seal de fondo

Comprobar presiones y flujos
Limpiar o cambiar el jet
Inspeccionar el encendedor (ignitor)
Limpiar el colector
Retirar, cortar y volver a instalar la columna

Slide 21

3. Mantenimiento Bsico en GC/MS.

Problemas habituales

Consejos generales:
En la medida de lo posible, deberamos conocer los niveles de
concentracin de los analitos que queremos analizar y siempre inyectar la
menor cantidad posible. Si no es posible y disponemos de un sistema GCFID, analizarlo previamente en ste.
Evitar columnas de dimetro ancho
Evitar columnas de gran espesor de pelcula.
Usar patrones para evaluar el sistema
Realizar tareas de mantenimiento preventivo para minimizar los posibles
problemas.
Mantener un registro (logbook)

pg.: 23

Revisin y Mantenimiento MSD

Frequency

Part #

Remarks

Autotune

Weekly

PFTBA

Monthly check

05971-60571

Refill as necessary. DO NOT

overfill.

Mechanical Pump Oil

Weekly: check level and

appearance.

Litre: 6040-0834

Replace as scheduled

Semi-annually: change oil and

foreline trap.

Keep as record of system

performance

Gallon: 6040-0789
Foreline trap pellets: 9301-1104
(5971 & 5972 only)

Diffusion Pump Oil

Annually

6040-0809

Replace if needed

Ion Source

As needed

Electron Multiplier

As needed

05971-80103

Use lowest possible voltage

HED

As needed

G1099-80001

Replace if needed

Vent plug O-ring

As needed

0905-1217

Replace if needed

Filaments

As needed

05972-60053, G2590-60053

Use solvent delay to prolong

filament use

Clean as necessary. Keep under

vacuum.

pg.: 24

Sintonizado (Tuning) MS con PFTBA

Espectro Perfluorotributilamina (PFTBA: C12F27N PM:671)
Scan: 10.00 - 650.00 Samples: 16 Thresh: 500
117 peaks Base: 69.00 Abundance: 1974784
100

F3 C - F2C - F2C - F2 C

69

..
N

219

Vial/Electrovlvula
para introduccin vapores de
solucin de sintonizado:
PFBTA

CF2 - CF2 - CF2 - CF3

F3 C - F2C - F2C - F2 C

50
131

264

502

414 (GCD)

0
50

100

150

200

250

300

350

400

450

500

550

614
600

650

Mass Abund Rel Abund Iso Mass Iso Abund Iso Ratio

69.00 1974784 100.00

70.00

219.00 1161216 58.80

219.95 45968

502.00 56648

2.87

503.00

20344

1.03
3.96

5690 10.04

Peridicamente (y al poner en marcha) se

deber efectuar un sintonizado del MSD.
pg.: 25

Revisin del Informe Sintonizado Automtico (Atune)

Anchos de pico de masa consistentes
Perfiles simtricos de los picos de masa

Aspectos a
controlar
El chequeo automtico que se
obtiene despus del sintonizado
revisa todos estos aspectos a
controlar

Apropiado voltaje del EM

Adecuada abundancia absoluta

Bajo background
Bajo contenido en agua y aire (<20 / <10%)
Asignacin correcta de masas
Tpica abundancia relativa
Adecuada relacin de istopos
INFLUENCIA C13:
69/70 =C1 1.1%
219/270 =C4 4.4%
502/503 =C9 9.9%

pg.: 26

Evaluacin / Verificacin del Sintonizado

Early Maintenance Feedback (EMF)

Set limits and counters

Each time a method is run, the limits will
be checked
An alert box is displayed if the EMF check
indicates a limit has been reached
If the system is running a sequence, any
EMF alerts will be logged into the
sequence log

Problemas comunes en GC/MS

Problema

Causa Probable

Baja sensibilidad

GC conditions/problems
Nivel de ruido alto
Problemas de vaco
Tuning

Contaminacin

Muestra
Carrier gas
GC
MS

Problemas de vaco

Fugas de aire
Flujo de columna
Bombas

Usuario

Impaciente
No entrenado

Remember to use the MSD Hardware Manual's Troubleshooting section!

pg.: 29

Troubleshooting: Baja sensibilidad y contaminacin

Baja sensibilidad
GC: Septum, liner, gold seal, temperatura de la columa, parmetros de
split/splitless, jeringa, etc.
MS: Revisar tune reports, parmetros de data acquisition
(tune file, EM voltage), vaco.

Contaminacin

Conexin y estado de Inyector/columna- puntos activos!

Septum/column bleed
Disolventes de limpieza
Huellas dactilares (guantes!)
Determine source of contamination from spectra

Verify site of contamination by isolating MS from GC

pg.: 30

Troubleshooting: Problemas de Vaco

Cmo se mide el vaco? Qu vaco es normal?
Mediante un tubo de vaco y un medidor. La presin debe estar en el rango bajo de
10-5 torr. Debemos conocer el vaco de nuestro sistema en condiciones standard.

Con qu eficiencia funciona el sistema de vaco?

Velocidad de eliminacin PFTBA despus de un tune

Fugas
Examinar Standard Spectra Tune report (masa 28<10 %, por lo menos)
Localizar posibles fubas a travs de Manual Tune/Repeat Profile con algn gas como:
Argn - masa 40
CO2 - masa 44

pg.: 31

Troubleshooting: Prdida de sensibilidad y/o contaminacin.

Cmo identificar un fuente sucia?
Mala reproducibilidad
El equipo no sintoniza con Standard Spectra Tune (STUNE.U): STUNE es el
tune de control de calidad de nuestro espectrmetro de masas
STUNE.U presenta:

Low high-mass abundance (502)

Improper isotope ratios (M + 1)
High background
High EM voltage

Cunto tiempo hace que no se ha limpiado la fuente?

Cuntas muestras hemos analizado?

pg.: 32

Procedimiento de Limpieza de la Fuente de Iones

1.- Hacer una pasta slurry de MicroGrit
con agua
2.-Usando los bastoncillos suministrados con
el MS, aplicar la pasta y pulir cada parte
hasta eliminar de su superficie todo resto de
material y coloracin
(este tratamiento no rayar la superficie
metlica).
3.-Lavar minuciosa!!! y repetidamente!!! con
AGUA
USAR LOS VIDEOS DE MANTENIMIENTO!

Limpieza de la Fuente de Iones

Enjuagar con
Disolvente

NO EXPONER
a Disolvente

Limpieza de la Fuente de Iones

Agua

Sonicar
5 min
Elimina sales

Metanol

Acetona

Sonicar
5 min

Sonicar
5 min

Elimina compuestos polares

Hexano

Sonicar
5 min
Elimina compuestos apolares

Los disoventes deben estar muy limpios! Especiamente el hexano !!

pg.: 35

Iones tpicos procedentes de contaminacin y

background en GC/MS

15,

, 68, 69, 76, 77

94, 168, 170, 186, 262, 278, 354, 446

Diffusion Pump Oil

Para reducir background (H2O,N2,O2,..) es til empezar los brridos desde masa 29 o 33

GC Problem 1 - Tuning

Increasing no of peaks
Mass 207
Column bleed
Isolation !!

GC Problem 2 - Tuning
Vacuum down

Mass 502 low

Column flow ?

4. Instalacin, Cuidado y Mantenimiento de

Columnas Capilares para Cromatografa de Gases
o...
No es lo que tu columna pueda hacer
por t, sino lo que tu puedas hacer por
tu columna"

Mantenimiento Bsico de la Columna GC

Acondicionar la columna antes de usarla
Cortar cuando se requiera (p.e. por colas en picos) un trozo de
cabeza de columna (p.e. 50cm). Tpico en splitless. Uso de RTL!
Los cortes en los extremos de la columna deben ser adecuados
Limpiar trmicamente o con disolvente cuando se requiera

Corte de la Columna
Cortar con cuidado el recubrimiento de poliimida.
No intentar cortar el vidrio.
Herramientas recomendadas:
Lpiz con punta de diamante o de carburo, herramienta de zafiro para cortes
o cortador cermico
Proteccin ocular
No usar:
Tijeras, lima, etc.

Bien cortada

Instalacin de la Columna
Midiendo la distancia correcta

INYECTOR: la columna debe

sobresalir unos 4 o 5 mm del
extremo de la conexin

Marcar con Tipp-ex o

Septum (mejor)

GC/MS

Colocar la columna hasta que sobresalga 1 mm de la

punta de la interfase.

Comprobacin de Fugas y de la Instalacin de la Columna:

Inyectar un compuesto no retenido

Detector

Compuesto (para columnas apolares)

FID

Metano o Butano

ECD

CH2Cl2 (headspace o disuelto*)

NPD

CH3CN (headspace o disuelto*)

TCD

Aire

MS

Aire o Butano
El pico debe ser estrecho y simtrico
(sino se inyecta un exceso)
* Inyectar una baja concentracin

Formas de Picos No Retenidos

Buena Instalacin
Comprobar:

Instalacin no apropiada
o fuga en el inyector

Fuga en el inyector o en el septum

Una relacin de split demasiado baja
Problemas en el liner (roto, fugas, mal colocado)
Posicin de la columna en el inyector y en el detector

Acondicionado Diario de la Columna

Las impurezas del gas portador se preconcentran en la columna cuando sta se mantiene a bajas
temperaturas durante periodos de inactividad

1.- Si el cromatgrafo estaba parado: para eliminar el oxgeno de su interior, dejar

durante 10-20 minutos la columna a temperatura ambiente con el gas portador
abierto y asegurarse que ste fluye a travs de la columna.
2.- Abrir gases del detector y empezar a calentar inyector y detector.
3.- Incrementar la temperatura de la columna hasta 20-25 C por encima de la
temperatura mxima de trabajo (sin llegar a superar la temperatura mxima de la
columna) y mantenerla durante 15-30 min.

Despus de largos perodos de inactividad de la columna o si sta no est limpia

convendr aumentar considerablemente el tiempo de acondicionado.

Perfil Tpico de Sangrado de la Columna

Hacer un programa de temperaturas a la columna sin inyectar*
1

1.3e4

Si la columna est limpia y en buen estado, el perfil NO

debe contener picos y debera ser repetitivo

1.2e4
1.1e4
1.0e4

Tpico sangrado GC/MS de

columnas apolares

9000

Sangrado: seal de fondo normal generada por la elucin de los productos de

una degradacin normal de la fase estacionaria de la columna

8000

7000

1
6000

10

Tiempo (min.)

15

20

25

*DB-1 30m x .32mm I.D., .25m

Programa de Temperatura // 40C, esperar 1 min // 20/min a 320C, esperar 10 min.

pg.: 46

Evaluacin del Rendimiento de la Columna

COMPOUND

1225032
PART NO:
COLUMN I.D. NO.:
3303121
LIQUID PHASE:
DB-5
FILM THICKNESS:
0.25 m
COLUMN DIMENSIONS:
30
mX
0.252
mm
TEMPERATURE LIMITS:
-60 C TO 325 C ( 350 C PROGRAM)

Approximately 5-10 ng on column

1,6-HEXANEDIOL

MIN SPEC

PENTADECANE

3900

4389

90.0

95.5

MIN SPEC

MAX SPEC

ACTUAL

1-UNDECANOL

1371.04

1372.04

1371.43

ACENAPHTHYLENE

1459.34

1460.34

1459.53

RETENTION INDEX:

0.9

0.019

2.95

1.3

0.022

METHYL NONANOATE

3.21

1.5

0.022

4-PROPYLANILINE

3.81

1.9

0.026

TRIDECANE

4.20

2.2

0.027

1-UNDECANOL

5.52

3.3

0.036

ACENAPHTHYLENE

8.00

5.2

0.053

PENTADECANE

9.58

6.4

0.062

ACTUAL

COATING EFFICIENCY:
PENTADECANE

PARTITION
PEAK
RATIO (k) WIDTH (W 1/2)

2.51

4-CHLOROPHENOL

THEORETICAL PLATES/METER:

RETENTION
TIME

PEAK HEIGHT RATIO:

4-CHLOROPHENOL/
METHYL NONANOATE

0.83

4-PROPYLANILINE/
METHYL NONANOATE

1.14

Para usos especficos

evaluarlo con un patrn de
los compuestos analizados

To

1.29

Compuestos

Propsito

Hidrocarburos

Eficacia y Retencin

Alcoholes

Actividad

FAMEs, PAHs

Retencin

Acidos

Carcter cido

Bases

Carcter Bsico

Causas Comunes de la Degradacin del Rendimiento de

una Columna
Deterioro del recubrimiento de poliamida
Dao trmico
Oxidacin (deterioro por O2)
Dao qumico debido a muestras
Contaminacin

Dao Trmico
Dao Trmico: Degradacin rpida de la fase estacionaria debido a temperaturas

excesivamente elevadas

Cmo evitarlo?: no superar lmites de temperatura

Lmite isotrmico = se puede aplicar un tiempo indefinido

Lmite para programacin de temperaturas = mx. 5-10 min. /mta

Cmo intentar solucionarlo?

Desconectar la columna del detector
Acondicionar durante toda la noche en el lmite isotrmico
Cortar 10-15 cm del final de la columna (suele ser la zona de la columna sometida a mayor temperatura).

Dao debido al Oxgeno

Dao por Oxidacin: el oxgeno en el gas portador degrada rpidamente la fase
estacionaria. El dao se acelera a temperaturas elevadas.

Se puede solucionar?:
Dao rpido a la columna .
Normalmente se trata de un dao irreversible a la columna.

Cmo prevenirlo?:
Gas portador de elevada calidad (99.999 mnimo).
Trampas para impurezas de gases adecuadas.
Inyector, septum y lneas libres de fugas.
Purgar la lnea si ha entrado aire (p.e. durante cambio botellas)
Mantenimiento de la instalacin y de los reguladores de gas.

Dao Qumico debido a las muestras

Las columnas ligadas y entrecruzadas tienen una resistencia qumica excelente excepto
para cidos y bases inorgnicas:

HCl
NH3
KOH
H2SO4 H3PO4 HF

NaOH
etc.

Los no voltiles afectarn

mayoritariamente al liner

El dao qumico se hace evidente mediante un sangrado excesivo, prdida de su

capacidad inerte o prdida de resolucin/retencin

Cmo intentar solucionarlo?

Cortar 1/2 - 1 metro del inicio de la columna
Los casos severos es posible que requieran un corte de hasta 5 metros

Contaminacin de la Columna
Todas las muestras contienen residuos!

Sntomas de Contaminacin:
Colas en los picos
Prdida de separacin (resolucin)
Cambios en la retencin
Reduccin del tamao y ensanchamiento del pico
Distorsiones en la lnea de base (causadas por semivoltiles)

Cmo solucionar la contaminacin por Semivoltiles?:

Efectuar una limpieza del inyector, liner,
Limpiar trmicamente la columna.

Contaminacin por NO-Voltiles

Cmo intentar evitarla?
Utilizar liners con lana de vidrio silanizada.
Cambiar frecuentemente el liner

Cmo intentar solucionarla?

No acondicionar la columna
Efectuar mantenimiento:
limpiar o cambiar el liner del liner del inyector
limpiar el inyector
cortar 1/2 -1 metros de cabeza de columna
Dar la vuelta a la columna
Lavar la columna con disolvente
ltimo recurso: cortar la columna en dos y evaluar la parte
final de la columna.
pg.: 53

Troubleshooting Chromatograms 1
Pasa autotune
Concentracin de muestra inadecuada
No hay analitos presentes
Jeringa mal instalada, daada o no instalada en el inyector automtico

No hay picos

Inyeccin realizada accidentalmente en split mode en lugar de splitless

mode
Sin muestra o poca muestra en el vial
Inyector muy sucio
Inyector con fugas
Columna desonectada de inyector/rota

No pasa autotune

No hay muestra de calibracin (PFTBA)

Presin muy alta en el sistema de vaco

Troubleshooting Chromatograms 2

Puntos activos en el camino que recorre la muestra

(sample path)
Picos con colas

Volumen de inyeccin muy grande

Temperatura del inyector incorrecta

Flujo de columna inadecuado

Temperatura de la interfase GC/MSD muy baja

Temperatura de la fuente iones demasioda baja

Troubleshooting Chromatograms 3

Picos
frontales

Espesor de pelcula de la columna inadecuado a la concentracin

de los analitos (column overload)

Temperatura inicial de la columna demasiado baja

Puntos activos (Active sites in the sample path)

Volumen de inyeccin muy elevado

Presin GC inlet demasiado elevada

Insuficiente flujo de columna

Troubleshooting Chromatograms 4

Picos saturados

Picos dobles

Insuficiente solvent delay

Incorrecta escala

Inyeccin demasiado grande

Voltaje del multiplicador demasiado elevado

Mala tcnica de inyeccin

Inyeccin demasiado grande

Inyeccin lenta

Troubleshooting Chromatograms 5

Sangrado-Column bleed

Contaminacin diversa

Sangrado-Column bleed

Contaminacin diversa

Voltaje del multiplicador demasiado elevado

Linea de base con

deriva

Linea de base alta

Page 58

Troubleshooting Chromatograms 6
Indicativo de que la contaminacin est desapareciendo.
Esperar hasta que se estabilice.
Causas:

Linea de base con

deriva negativa
(drift)

Agua y aire residual (hace poco que el equipo se ha encendido despus de un

venting)
Column bleed
Septum bleed
Tiempo de inyeccin Splitless demasiado largo (el inyector no se ha purgado con gas
adecuadamente, transfirindose demasiado disolvente a la columna)

Presin baja (Insufficient carrier gas supply pressure)

Linea de base oscilante

(Baseline wander)

No funciona el control de presin o flujo adecuadamente

Fuga intermitente en el inyector

Troubleshooting Chromatograms 7

Los tiempos de
retencin de
todos los picos
se adelantan

Los tiempos de
retencin de
todos los picos
se atrasan

La columna se ha cortado

Cambio en la temperatura inicial del horno (aumento)

La columna ha envejecido

Mal funcionamiento del horno

Mal funcionamiento del control de presin

Obstruccin en la linea de split/liner sucio

El flujo ha cambiado (disminucin)

Cambio en la temperatura inicial del horno (disminucin)

Puntos activos en el sistema

Fugas en el inyector

Pgina Web MyGCColumns Un unico sitio donde encontrar todo

www.agilent.com/chem/myGCcolumns

Page 61

My brain is full. May I be excused please?

Muchas
Gracias